Acuaporinas:
los canales
de agua celulares
Las acuaporinas regulan el paso del agua a travs de la membrana celular.
Forman una familia de protenas muy diversa; se hallan presentes en todos los seres vivos.
Abundan sobre todo en plantas y en el sistema renal de animales
l agua, el compuesto ms abundante de nuestro
E cuerpo, es esencial para la vida. Todos los
iones, lpidos, azcares, protenas y otras ma-
cromolculas que forman parte de las clulas
y su entorno se encuentran disueltos en medio
acuoso. Para realizar las funciones que hacen
posible la vida, las clulas deben incorporar nutrientes,
hormonas, iones y gases. Y deben tambin expulsar sus-
tancias de desecho.
Ese intercambio de materia con el entorno se reali-
za a travs de la membrana. Opera un mecanismo de
difusin pasiva o se recurre a protenas transportadoras
especficas. La circulacin de iones y otras molculas
provoca una distribucin desigual de estas sustancias a
un lado y otro de la membrana celular.
El transporte genera un flujo de agua a travs de la
membrana. La entrada y salida de agua cambia el vo-
lumen de la clula, amn de modificar la composicin
del medio intracelular y extracelular. Entender cmo
el agua atraviesa las membranas celulares en nuestro
cuerpo ha constituido una de las cuestiones de mayor
inters en biologa.
60
Miriam Echevarra y Rafael Zardoya
Los primeros modelos tericos
Ya en 1895, Charles Overton public un extenso estudio
sobre las propiedades osmticas de las clulas, vegetales
y animales; analizaba all el efecto ejercido por ms de
500 compuestos qumicos en el flujo del agua a tra-
vs de la membrana celular. Desde entonces, y durante
muchos aos, se crey que el agua poda atravesar la
membrana celular por difusin pasiva entre los lpidos
que constituyen dicha estructura.
Pero la difusin pasiva no permita explicar la per-
meabilidad al agua que muestran los glbulos rojos y
las clulas del tbulo renal; aqu, el flujo de agua a
travs de la membrana en presencia de un gradiente de
concentracin era superior al flujo en ausencia de dicho
gradiente. Adems, la energa disipada por la interaccin
entre agua y membrana se acercaba a la del movimiento
del agua en solucin libre. Se descubri tambin que
el paso del agua a travs de estas membranas poda
bloquearse mediante frmacos derivados de compuestos
mercuriales.
Todas esas observaciones, sumadas a las realizadas
en membranas artificiales, permitieron comparar la per-
INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006
meabilidad al agua de membranas
lipdicas artificiales con la de mem-
branas biolgicas. De la comparacin
en cuestin se dedujo la existencia
de protenas especializadas en la for-
macin de poros acuosos.
Descubrimiento
de las acuaporinas
El descubrimiento del primer canal
de agua en la membrana celular, la
acuaporina-1 (AQP1), el estudio de su
distribucin en los tejidos y la inves-
tigacin de sus propiedades estructu-
rales y funcionales le valieron a Peter
Agre el premio Nobel de qumica de
2003. Agre y su equipo, de la Uni-
versidad Johns Hopkins, estudiaban Hasta 1992 no descifraron la fun-
en 1988 las protenas de la membrana cin de la protena. Denominada en
de los eritrocitos. Durante sus traba- un comienzo CHIP28, abreviacin El comportamiento reseado
jos de purificacin de la protena de de protena integral de 28 kilodalton corresponda al esperado para un
32 kilodalton que determina el grupo formadora de canales, recibira ms flujo de agua mediado por canales.
sanguneo Rh, encontraron un poli- tarde el nombre de AQP1. Se percataron entonces de que haban
pptido de peso molecular inferior En sus trabajos hallaron que los descubierto, por fin, la protena del
(28 kilodalton) que copurificaba con ovocitos de la rana Xenopus laevis canal de agua. La presencia de AQP1
su protena de inters. Pensaron que inyectados con cantidades exiguas de justificaba la elevada permeabilidad
corresponda a un subproducto de la ARN mensajero de AQP1 desarro- al agua de la membrana del hemate
hidrlisis de la protena Rh. Pero el llaban una permeabilidad al agua y del tbulo proximal renal. Pero,
anlisis estructural de la molcula de superior a la de un ovocito control cmo explicar la reabsorcin de
28 kilodalton, abundante en glbulos sin inyectar o inyectado con agua. agua dependiente de la hormona va-
rojos y en clulas del tbulo proxi- Se descubri tambin que la per- sopresina en el segmento ms distal
mal del rin, revel que se trataba meabilidad al agua dependiente de de la nefrona, el tbulo colector y
de una nueva protena integral de AQP1 se inhiba mediante cloruro de en otros tejidos que no poseen esta
membrana. Sin relacin alguna con mercurio y que tal efecto se reverta protena? La identificacin molecular
la protena Rh. con agentes reductores. de AQP1 fue el detonante de la bs-

INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006 61

 1. EL PRIMER MODELO que describa la cir-
HgCl2 culacin de agua a travs de la membrana
a b celular data de 1895. Segn ste, el agua
se escurra por difusin pasiva entre los
lpidos (amarillo) que constituyen la membra-
na (a). El estudio de la inuencia del gra-
diente, la energa disipada por la interaccin
del agua con la membrana, el bloqueo de
compuestos mercuriales y la comparacin
de membranas puramente lipdicas con
membranas biolgicas llev a proponer la
existencia de protenas (rojo) especializadas
en la formacin de poros hdricos (b).

mentario. El ADNc se utiliz como

queda que condujo al descubrimiento
de las trece acuaporinas que hoy se
conocen en humanos.
Lo primero que llam la atencin,
al comparar la secuencia de AQP1
con las almacenadas en el banco de
genes, fue su estrecha semejanza con
miembros de una familia de protenas
integrales de membrana (PIM); entre
ellas, la protena Big Brain de Dro-
sophila, la Nodulina26 de la semilla
del gnero Glycine, el transportador
de glicerol GLpF de Escherichia coli
y PIM, una protena de 26 kilodalton
que abunda en el cristalino bovino,
que da nombre a la familia. AQP1
comparte con ellas varios aminoci-
dos en determinadas posiciones de
la secuencia: todos los miembros de
la familia PIM mostraban el triplete
asparragina-prolina-alanina (NPA)
AQP1
repetido dos veces, adems de otros
aminocidos individuales a lo largo
de la secuencia, muy conservados.
AQP1 consta de dos grandes domi-
nios, imagen especular uno de otro,
con un triplete NPA presente en cada
mitad, el primero en un lazo intrace-
lular y el segundo en uno extracelu-
lar. Se procedi luego a la clonacin
sucesiva de otras acuaporinas que,
en conjunto, forman la familia de
protenas integrales de membrana res-
ponsables del transporte de agua. Se
nombraron desde AQP2 a AQP12; la
protena PIM se denomin AQP0.
Se sigui el mismo protocolo de
clonacin para todas ellas. De los teji-
dos donde se sospechaba la existencia
de un nuevo canal de agua se extrajo
ARN. A partir de ste se obtuvo, por
transcripcin inversa, el ADN comple-
molde en una reaccin en cadena de la
polimerasa, junto con cebadores que
reconoceran y se hibridaran a las
regiones NPA de cualquier miembro
de la familia PIM presente en la mues-
tra de ARN. El grupo de Agre clon
las protenas AQP1, AQP4, AQP5 y
AQP6; el de Sei Sasaki, de la Uni-
versidad de Medicina y Odontologa
de Tokio, identific las secuencias de
AQP2, AQP7, AQP8, AQP9, AQP10,
AQP11 y AQP12. En la identificacin
de AQP3 intervino uno de los autores
(Miriam Echevarra).
Un reloj de arena
El tamao de las acuaporinas suele
oscilar entre 250 y 300 aminocidos.
Muy hidrofbicas, se organizan en
seis segmentos de estructura -hlice
que atraviesan la membrana de lado
a lado, unidos por cinco lazos conec-
tores. Dos de los lazos (uno extrace-
lular y otro intracelular) se pliegan
hacia la membrana y se aproximan
para formar el poro. La estructura
resultante encierra una zona central
estrecha que se ensancha abrindose
hacia ambos lados de la membrana.

Este particular plegamiento, en forma

de reloj de arena, pone en contacto
los tripletes NPA para formar el sitio
ms estrecho del poro. Aunque cada
acuaporina constituye por s sola un
canal, en la membrana celular estas
MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA

protenas se ensamblan en grupos

CONTROL

de cuatro.

2. OVOCITOS DE LA RANA Xenopus laevis

inyectados con cantidades reducidas de
ARN mensajero de acuaporina-1 (0,1-10 ng).
Muestran una permeabilidad al agua supe-
0,5 1,5 2,5 3,5 rior a la de un ovocito control no inyectado
TIEMPO (minutos) o inyectado con agua.

62 INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

 Por fin, el grupo de Fujiyoshi Yo-
ACUAPORINAS DISTRIBUCION
shinori, de la Universidad de Kyoto,
Andreas Engel, de la Universidad de AQP0 Ojo (cristalino)
Basilea, y Agre, determinaron la es-
tructura molecular de AQP1 con una AQP1 Eritrocitos Urter y vejiga urinaria
resolucin de 3,8 angstrom. A partir Cerebro Pulmn
Rin Bronquios
de este anlisis tridimensional se de-
Trquea Conductos biliares
termin una correlacin directa entre Corazn Piel
aminocidos especficos y estructura Placenta Endotelio capilar (excepto cerebro)
proteica. Los seis segmentos -hli- Utero Ojo
ce transmembranales conforman una
suerte de ramo en el que los segmen- AQP2 Tbulo conector Urter y vejiga urinaria
tos se hallan levemente inclinados y colector renal
y girados hacia la derecha. La es- AQP3 Tbulo colector renal Ojo
tructura se mantiene estable merced Tracto gastrointestinal Glndula lacrimal y sudorpara
a los grandes ngulos de cruce de Hgado Pulmn
los segmentos transmembrana y a la Pncreas Clulas menngeas
interaccin en los sitios de cruce de Bazo Eritrocitos
glicinas altamente conservadas. Los Prstata Utero
lazos que conforman la zona central, Urter y vejiga urinaria
que tambin son -hlices cortas, se
AQP4 Cerebro Pulmn
proyectan hacia el centro del ramo en Tracto gastrointestinal Msculo esqueltico
ngulo de casi 90 grados para crear Tbulo colector renal Ojo (retina, iris, cuerpo ciliar)
la barrera de permeabilidad del canal. Mdula espinal Glndula lacrimal
Ambos lazos interaccionan a travs Odo
del triplete NPA y se mantienen en
contacto mediante fuerzas de van der AQP5 Glndula salival Tracto gastrointestinal
Waals entre sus prolinas. Dos as- Glndula lacrimal Crnea
Pulmn Ojo
parraginas convergen para delimitar
el sitio ms estrecho del canal, de AQP6 Rin
unos 3 angstrom de dimetro. El
dimetro de la molcula de agua es AQP7 Espermtidas tardas Tbulo proximal renal
ligeramente inferior: 2,8 angstrom. y espermas maduros Corazn
Otros aminocidos conforman el Testculo Msculo esqueltico
Tejido adiposo
centro del poro acuoso: una isoleu-
cina de la -hlice 2, una fenilala- AQP8 Hgado Glndula salival
nina de la -hlice 1, una leucina Pncreas Intestino delgado
de la -hlice 4 y una valina de la Testculo Colon
-hlice 5. Cerca de este sitio, por Placenta Corazn
el lado extracelular del poro, se en- Utero
cuentra la cistena responsable de la AQP9 Tejido adiposo Mdula sea
sensibilidad de AQP1 a compuestos Corazn Rin
mercuriales. Colon Intestino delgado
El resto de las paredes que for- Leucocitos Pulmn
man la superficie del canal acuoso Hgado Bazo
corresponden a aminocidos de los Cerebro Testculo
segmentos transmembrana 1, 2, 4 y
5. Los segmentos 3 y 6 constituyen AQP10 Intestino delgado
las hlices ms perifricas del canal;
3. DISTRIBUCION TISULAR de las acuaporinas de mamferos (y posiblemente vertebrados).
quedan encarados hacia los lpidos
de la membrana.
Para determinar la permeabilidad al extraccin del ARN mensajero de teji-
Funcin y selectividad
MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA

El estudio de la funcin de un canal
de agua entraa varias dificultades.
Al tratarse de una molcula neutra,
su flujo constituye un proceso silen-
te desde el punto de vista elctrico.
Ni puede medirse con las tcnicas
de electrofisiologa clsicas en la
investigacin de canales inicos, ni
se dispone de inhibidores especficos.
agua de clulas animales suele me-
dirse el cambio de volumen celular
que se produce cuando las clulas
pasan de un medio isosmtico a uno
hipo o hiperosmtico. La elevada per-
meabilidad al agua de las membra-
nas biolgicas explica la celeridad
extrema del flujo.
La identificacin molecular de los
canales de agua se inici mediante la
dos con alta permeabilidad al agua (el
rin, por ejemplo) y la inyeccin del
mismo en ovocitos de Xenopus laevis.
Se vena recurriendo a los ovocitos
de la rana para estudiar la expresin
de numerosas protenas. En el caso de
los canales de agua, ofrecan claras
ventajas: eran clulas grandes, con un
volumen fcil de medir y una baja
permeabilidad intrnseca al agua que

INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006 63

facilitaba la determinacin de los cam-
bios de permeabilidad inducidos por
la expresin de protenas exgenas.
Hoy la tcnica se emplea de forma
rutinaria en la caracterizacin funcio-
nal de todas las acuaporinas clonadas
para el estudio de las propiedades de
permeabilidad al agua, selectividad
a otros solutos, dependencia de la
temperatura y del pH, amn de otros
aspectos funcionales.
La AQP1 presenta una permeabi-
lidad elevada. De las trece acuapori-
nas de mamfero que hoy conocemos,
cuatro de ellas (AQP3, AQP7, AQP9
y AQP10) forman el subgrupo de las
acuagliceroporinas, que son permea-
ESTRUCTURA MOLECULAR DE LAS ACUAPORINAS
GLICOSILACION
C
A E
1 2 3 4
B
D nina NPA. Esta duplicacin del triple-
NPA
H2N
DOMINIO-1
EL RELOJ DE ARENA
El lazo B y E se pliegan hacia
la membrana para formar el poro
o canal acuoso de la protena.
La estructura resultante encierra
una zona central estrecha que
se ensancha abrindose hacia
ambos lados de la membrana. Se
denomin reloj de arena, por su
semejanza con ste. En el sitio ms
estrecho del poro acuoso se ponen
en contacto los tripletes NPA.
EXTRACELULAR
3 4
1 2
64
bles tambin a la urea, el glicerol y
a otros solutos de tamao reducido.
Excepto AQP6, tales acuaporinas se
muestran impermeables a solutos do-
tados de carga elctrica y iones.
La selectividad de las acuaglice-
roporinas no depende slo de la es-
trechez del poro. En algunas, como
AQP3, la permeabilidad al glicerol
es mucho mayor que a la urea, una
molcula de dimetro inferior. En
AQP1, los aminocidos dotados de
carga elctrica de los dos segmentos
-hlice que conforman el paso del
canal se orientan con sus polos po-
sitivos hacia el centro del poro. Esto
genera un importante campo electros-
DOMINIO-2 C189
HgCl2
A
NP
EXTRACELULAR
5 6
INTRACELULAR
HOOC
GLICOSILACION
A
H2N
HOOC
H2O
INTRACELULAR
ttico positivo que repele protones y
otros cationes, mientras que admite
el paso de solutos neutros.
La obstruccin de AQP1 al paso de
iones responde tambin al tamao de
los iones hidratados. En solucin, los
iones se encuentran rodeados de una
capa de agua que aumenta su di-
metro. En la acuaporina-1 no existe
ninguna estructura que se encargue
de liberar al ion de esta capa de
solvatacin; por tanto, es imposible
que pase a travs de su dimetro. La
estrechez del poro y la notable hi-
drofobicidad de la superficie interna
del canal explican la permeabilidad al
agua de AQP1 y su selectividad.
DOS TRIPLETES NPA
AQP1 se compone de dos grandes
dominios, imagen especular uno del
otro. Se organiza en seis segmen-
tos de estructura -hlice (1-6) que
atraviesan la membrana de lado a
lado; estn unidos por cinco lazos
conectores (A-E). El lazo intracelular
MEMBRANA B y el extracelular E son portadores
de un triplete asparragina-prolina-ala-
te NPA es caracterstica de todas las
acuaporinas.
H2O
C EXTRACELULAR
N A
APN MEMBRANA
B D
INTRACELULAR
MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA
DE CUATRO EN CUATRO
Aunque cada acuaporina forma por
s sola un canal, en la membrana
celular estas protenas se ensam-
blan en grupos de cuatro. Parece
que un arreglo tetramrico confiere
a la estructura una mayor estabi-
lidad en el entorno lipdico de la
membrana.
INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006
 El transporte de agua
paso a paso
Dentro del canal, las molculas de
agua tienden puentes de hidrgeno
entre s y con las paredes del canal.
Sin embargo, a medida que una mol-
cula de agua se acerca a la parte ms
estrecha del canal, proceda aqulla
del interior o del exterior celulares,
la intensa carga electrosttica positiva
de la zona, creada por los lazos que
forman el poro, provoca una reorien-
tacin de la molcula que obliga a su
tomo de oxgeno a tender puentes
de hidrgeno con las dos asparragi-
nas del poro. Primero la molcula de
agua se une slo a uno de esos ami-
nocidos, permaneciendo unida por
el otro puente de hidrgeno a la mo-
lcula de agua vecina; luego se une
a las dos asparraginas, rompiendo as
por completo la molcula de agua su
conexin con las otras molculas de
agua en el canal. La imposibilidad
de tender puentes de hidrgeno con
los aminocidos hidrofbicos que
forman la pared del canal favorece
la permeabilidad. Asimismo, en el
sitio de mayor constriccin del canal
se rompe la concatenacin de puen-
tes de hidrgeno entre las molculas
de agua que llenan el poro, lo que
impide el transporte de protones que
se establecera a travs de AQP1. La
acuaporina-1 es permeable al CO2.
De hecho, la protena forma un ca-
nal para el transporte del dixido
de carbono.
Distribucin
La mayora de las clulas de nuestro
cuerpo poseen acuaporinas. Las c-
lulas principales del tbulo colector
renal, por ejemplo, expresan AQP2,
AQP3 y AQP4; los astrocitos y c-
lulas gliales de determinadas zonas
cerebrales, en cambio, expresan slo
AQP4; se han hallado indicios de
la presencia de acuaporinas en las
neuronas. Desconocemos la razn de
tal diversidad.
En coherencia con su funcin de
MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA
OJO
RION AQP0, 1, 3, 4, 5
TUBULO PROXIMAL CEREBRO
AQP1 AQP1, 4, 9
AQP6
AQP7 PULMON
AQP1, 3, 4,
ASA DE HENLE
AQP1
TUBULO COLECTOR
AQP2
AQP3
AQP4
4. LAS ACUAPORINAS SE HALLAN PRESENTES en la mayora de las clulas de nuestro
cuerpo. Las clulas principales del tbulo colector renal expresan AQP2, AQP3 y AQP4.
Los astrocitos y clulas gliales de determinadas zonas cerebrales expresan slo AQP4. Los
rganos que, como el ojo, el rin, el pulmn, el tracto gastrointestinal o las glndulas se-
cretoras, se caracterizan por su alto trasiego de agua, presentan varias de estas protenas.
En el cerebro, donde escasea el ujo de agua a travs de la membrana celular, hay una
presencia y distribucin limitadas de AQP.
funcin neuronal) hay una presencia a receptores especficos provoca un
y distribucin limitadas de AQP. aumento del AMP cclico intracelu-
Con excepcin de AQP2 y AQP6, lar. Este mensajero molecular activa
las acuaporinas intervienen en la com- la protena quinasa A (PKA), que
posicin de la membrana celular. Tras se encarga de fosforilar a AQP2. La
su sntesis, AQP2 permanece como activacin de AQP2 causa entonces
una protena de membrana en vescu- la traslocacin y fusin de vesculas
las intracelulares; slo bajo la accin que contienen AQP2: se funden con
de la hormona antidiurtica (arginina- la cara apical de la clula renal.
vasopresina), las vesculas se fusio- Tambin AQP1, en el hgado,
nan con la cara apical de las clulas AQP5, en las glndulas salivales, y
principales del tbulo colector renal; AQP8, en el pncreas, se transportan
de ese modo las clulas exponen en desde vesculas intracelulares hasta
la membrana la protena responsable la membrana celular. En estos ca-
del aumento de la permeabilidad al sos, sin embargo, no se conoce el
agua en dicho tbulo. mecanismo de regulacin. AQP6,
La acuaporina-6 es tambin una presente en vesculas de las clulas
protena intracelular. Se aloja en ve- intercaladas del tbulo colector renal,
sculas que permanecen siempre en cambia su conformacin a pH < 5,5:
el interior de la clula. En la cara se hace permeable a agua y cloro. El
apical de otros epitelios encontramos pH regula tambin la actividad de
tambin AQP5. Las acuaporinas 3 y AQP0 y AQP3. Algunas acuaporinas
4 son principalmente de membrana cuentan con secuencias conservadas
basolateral. AQP1 presenta una dis- para la fosforilacin por interaccin
tribucin ubicua en toda la membra- con protenas quinasas A (AQP2,

canal hdrico, el ojo, el rin, el
pulmn, el tracto gastrointestinal o
las glndulas secretoras, rganos que
se caracterizan por un alto trasiego
de agua, presentan varias de estas
protenas. En el cerebro, en cam-
bio, donde escasea el flujo de agua a
travs de la membrana celular (para
minimizar las variaciones del medio
extracelular que pudieran afectar a la
na. AQP8 reside en vesculas intra-
celulares as como en la cara apical
de las clulas acinares del pncreas.
AQP9 parece preferir la parte baso-
lateral de la membrana.
Regulacin
Veamos cmo opera la regulacin de
la acuaporina-2 en el tbulo renal.
La unin de la hormona vasopresina
AQP5 y AQP9) o protenas quinasas
C (AQP4, AQP5 y AQP7). En algu-
nos casos, la regulacin se produce
por fosforilacin directa del canal. La
fosforilacin de la acuaporina-2 en la
Ser-256 resulta fundamental para el
incremento de permeabilidad al agua
dependiente de vasopresina.
En fecha reciente se ha propuesto
que la interaccin directa entre las

INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006 65

 SIP

Arabidopsis (BAB09487)
Arabidopsis (AAF26B04)
Zea (AAK26766) Zea (AAK26764)
Arabidopsis (CAB72165) Picea (CAA06335)
Nicotiana (CAA69353)
Oryza (P50156)
AQP8 Zea (AAC09245)
Arabidopsis (AAC62397)
Homo (BAA34223) Raphanus (BAA12711)
Mus (P56404) Brassica (AAD39372)
Caenorhabditis (CAA94903) Picea (CAB39758) TIP
Zea (AAC24569)
Solanum (AAB67881)
Lycopersicon (AAB53329)
Helianthus (CAA65186)
Vernicia (AAC39480)
Cicadella (CAA65799) Arabidopsis (AAC49992)
Haematobia (CAA65799) Brassica Arabidopsis (Q08733)
Bos (P47865) (AAB61378) Solanum (CAB46350)
Homo (P29972) Raphanus Nicotiana (CAA04750)
Brassica (AAD39374)
Mus (Q02013) (BAA32778) Glycine (AAA69490)
Rana (P50501) Oryza (AAC16545)
Homo (Q13520) Solanum (CAB46351) PIP
Rattus (AAD29856) Spinacia (AAA99274)
Mus (P56402) Arabidopsis (AAB65787)
Homo (P4L181) Nicotiana (AAL33586)
AQP Mus (ADD32491) Saccharomyces (AAD10058)
Homo (P55064) Saccharomyces (P53386)
Saccharomyces (AAC69713)
Bufo (AAC69694) Shigella (AAC12651)
Rana (Q06019) Escherichia (BAA35593)
Homo (P30301) Escherichia (BAA08441)
Mus (P51180) Plesiomonas (BAA85015)
Rattus (P09011) Brucella (AAL51252)
Bos (P06624) Brucella (AAF73105) AQP Bacterianas
Mus (AAC53155) Agrobacterium (AAK86288)
Homo (P55087) Agrobacterium (AAL46049)
Smorhizobium(NP_435575)
Methanothermobacter (AB055880) Pseudomonas (AAG07421)
Lactococcus (P22094) Pinus (AAL05942)
Clostridium (AAK78746) Oryza (S52003)
Thermus (BAB61772) Zea (AAK26750)
Bacillus (AAA22490) Medicago (AA132128) NIP
Thermotoga (AAD36499) Glycine (P08995)
Staphylococcus (BAB42394) Pisum (CAB45652)
Lotus (AAF82791)
Listeria (CAC99617) Arabidopsis (CAA16760)
Escherichia (P11244) Saccharomyces (BAA09187)
Homo (O14520) Toxocara (AAC32826)
Mus (BAA24537) Caenorhabditis (AAA83205)
Xenopus (CAA10517) Homo (O43315)
Mus (ADD20305) Rattus (AAC36020)
Homo (Q92482)

0,05 cambios
acuaporinas y otras protenas celula-
res constituira un mecanismo de se-
alizacin. En el extremo C-terminal
de la acuaporina-4 se han identificado
secuencias de reconocimiento para
el anclaje en protenas del citoes-
queleto que podran determinar la
distribucin espacial de AQP4 en la
membrana del astrocito. La regula-
cin crnica se realiza por diversos
mecanismos que alteran la transcrip-
cin de tales protenas.
El nmero de molculas de acua-
porina-2 aumenta con la vasopresina.
Tal regulacin se debe a la presencia,
en el promotor del gen de AQP2,
de regiones que unen AMP cclico
y, por tanto, activan la transcripcin
GLP
5. ARBOL DE LAS RELACIONES DE PARENTESCO DE LAS ACUAPORINAS: canales de agua
(verde), canales de glicerol y urea (azul) y nodulinas (rojo). Los puntos en las ramicaciones
indican la signicacin estadstica.
las acuaporinas en un rgano determi-
nado. Tambin la alteracin en la fun-
cin o regulacin de estas protenas
puede resultar patolgica. Determina-
das mutaciones en el gen de AQP2
se han relacionado con nefropatas.
En el laboratorio de Alan Verkman se
obtuvieron ratones knockout en los
que se haba silenciado la expresin
de cada una de las acuaporinas. Los
mridos transgnicos se utilizaron
para el estudio de las alteraciones
funcionales que acarrea la ausencia
de una de estas protenas. Se obser-
v que dos mutaciones gnicas de
es responsable de la reabsorcin de
casi el 80 por ciento del agua en
el tbulo renal. As, los ratones en
los que se ha eliminado esta prote-
na son incapaces de producir orina
concentrada. En el cerebro, AQP1
participa en la produccin del lquido
cefalorraqudeo. En el pulmn, la ex-
presin de AQP1 aumenta al nacer y
en presencia de corticosteroides; ello
sugiere que la protena interviene en
el aclaramiento del agua pulmonar
que requiere el recin nacido para
iniciar la respiracin.
La disfuncin de las cuatro acua-
MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA

del gen. La deshidratacin provoca
el aumento de AQP3 en el rin,
la vejiga urinaria y los urteres. Un
estrs hiperosmtico estimula la
expresin de AQP4 y AQP9 en la
corteza cerebral.
Patologas
Numerosos trastornos se han asocia-
do con una distribucin aberrante de
AQP0 provocan en ratones cataratas
congnitas.
Debido a su ubicuidad, la acuapori-
na-1 se halla implicada en numerosos
trastornos. La presencia de AQP1 en
el endotelio de la crnea y de AQP5
en el cristalino sugiere una funcin
de estas protenas en el mantenimien-
to de la transparencia de la crnea y
el cristalino, respectivamente. AQP1
porinas que se expresan en el tracto
respiratorio (AQP1, AQP3, AQP4 y
AQP5) podra guardar relacin con
el asma, edemas pulmonares u otras
patologas asociadas a la homeostasis
del agua pulmonar.
La disfuncin de la acuaporina-2
provoca trastornos graves. En 1994,
el equipo que dirige Peter Deen, de
la Universidad y el Hospital Univer-

66 INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006

 sitario de Nimega, public el primer
caso de diabetes inspida nefrognica
(NDI) hereditaria asociada a muta-
ciones del gen de AQP2. Los indi-
viduos que sufren esta enfermedad
eliminan grandes cantidades de orina
diluida debido a una insuficiencia
renal que impide la reabsorcin de
agua en respuesta a la vasopresi-
na. Un aumento en la expresin de
AQP2 se relaciona con un incre-
mento en la retencin de lquido:
as ocurre en la cirrosis heptica,
la insuficiencia cardaca congestiva
y el embarazo.
Las alteraciones en la expresin
de las acuaporinas provocan tam-
bin trastornos cerebrales. Las AQP4
aberrantes se asocian al desarrollo de
patologas relacionadas con desequi-
librios en la homeostasis inica. Una
disfuncin de la acuaporina-4 podra
provocar cambios en la concentracin
de iones potasio (K+) que lleven a
un aumento de la excitabilidad neu-
ronal. La relacin entre la AQP4 y
el edema cerebral se descubri me-
diante experimentos llevados a cabo
con ratones en los que la expresin
de AQP4 se haba silenciado. Se ha
observado tambin que el edema que
se produce tras un perodo isqumi-
co puede reducirse de forma notable
mediante la eliminacin de la AQP4
perivascular.
Evolucin por duplicacin gnica
Como hemos mencionado, las acua-
porinas pertenecen a la familia de
protenas integrales de membrana
(PIM). Esta familia agrupa a ms
de 200 miembros. Su evolucin
arranca de la duplicacin de un gen
originario, que supuso la aparicin
de dos protenas con funciones di-
ferenciadas: los canales de agua y
los canales de glicerol y urea. Esta
es la situacin que se observa hoy
en bacterias y hongos, que cuentan
slo con una copia de cada uno de
estos canales. Luego, ambos tipos
de canales se diversificaron mediante
MIRIAM ECHEVARRIA Y RAFAEL ZARDOYA
duplicaciones gnicas en animales
y plantas. En Arabidopsis se han
identificado hasta 35 protenas; ello
resalta la importancia del control del
flujo de agua en las plantas.
Las protenas transportadoras de
glicerol han experimentado nume-
rosas duplicaciones en el nemtodo
Caenorhabditis elegans. En mam-
feros, tres duplicaciones han dado
INVESTIGACIN Y CIENCIA, diciembre, 2006
lugar, de forma sucesiva, a AQP3, dio lugar a dos tipos bsicos de PIP:
AQP7, AQP9 y AQP10. Curiosamen- el tipo 1 y el tipo 2. Las protenas
te, no hay miembros de esta subfa- intrnsecas del tonoplasto resultan de
milia en plantas. al menos dos duplicaciones gnicas
En vertebrados encontramos seis sucesivas.
canales de agua resultantes de du- De todas las acuaporinas vegetales,
plicaciones gnicas consecutivas: las que revisten mayor inters desde
AQP0, AQP1, AQP2, AQP4, AQP5 el punto de vista evolutivo son las
y AQP6. El nmero de acuaporinas nodulinas. Se describieron en los n-
se desconoce en invertebrados; has- dulos simbiticos de las races de
ta la fecha, se ha descrito slo una leguminosas, pero se encuentran tam-
AQP en tres especies de insectos. La bin en plantas sin ndulos simbiti-
acuaporina-8 se encuentra en todos cos. Segn los anlisis de parentesco,
los animales. todas las nodulinas descenderan de
El mayor nmero de acuaporinas un mismo tipo de canales de agua
se encuentra en el reino vegetal. que fue adquirido por el ancestro
La caracterizacin de los canales comn de todas las plantas a partir
de agua en plantas se debe sobre de bacterias por transferencia gni-
todo a dos grupos de investigacin, ca horizontal. Luego, puesto que las
el de Maarten J. Chrispeels, de la plantas carecen de transportadores de
Universidad de San Diego en Ca- glicerol-urea, estos canales de agua
lifornia, y el de Per Kjellbom, de habran cambiado su funcin: una
la Universidad de Lund. La primera fuerte presin selectiva los trans-
acuaporina que se aisl en plantas se form en los actuales canales de
denomin ALFA-TIP. glicerol-urea.
De acuerdo con su origen evoluti- Dado que las nodulinas adquirieron
vo, se conocen cuatro grandes gru- su capacidad de transportar glicerol-
pos de canales de agua en plantas. urea de forma distinta al resto de
Cada grupo presenta una localizacin acuagliceroporinas (mediante conver-
celular diferencial: las protenas in- gencia funcional), los aminocidos
trnsecas de membrana plasmtica implicados en la selectividad por
(PIP), las protenas intrnsecas del glicerol-urea son tambin distintos.
tonoplasto o membrana vacuolar La secuencia de las nodulinas guarda
(TIP), las pequeas protenas bsi- semejanza con la secuencia tpica de
cas intrnsecas (SIP) y las nodulinas los canales de agua, pero presenta
(NIP). Las protenas intrnsecas de algunos cambios, necesarios para su
membrana plasmtica parecen derivar funcin, que recuerdan a las acua-
de una nica duplicacin gnica que gliceroporinas.
Los autores
Miriam Echevarra Irusta se doctor en biologa por la Universidad Simn Bolvar
de Caracas. Es profesora de la Universidad de Sevilla. Se dedica al estudio funcional
de las acuaporinas en el departamento de siologa mdica y biofsica del Laborato-
rio de Investigaciones Biomdicas del Hospital Virgen del Roco. Rafael Zardoya San
Sebastin se doctor en biologa por la Universidad Complutense de Madrid. Desarrolla
su investigacin sobre logenia y evolucin molecular en el Museo Nacional de Ciencias
Naturales del CSIC.
Bibliografa complementaria
APPEARANCE OF WATER CHANNELS IN XENOPUS OOCYTES EXPRESSING RED CELL CHIP28 PROTEIN.
G. M. Preston y otros en Science, vol. 256, pgs. 385-387, 1992.
CLONING AND EXPRESSION OF AQP3, A WATER CHANNEL FROM THE MEDULLARY COLLECTING DUCT
OF RAT KIDNEY. M. Echevarra y otros en Proceeding of National Academy of Sciences
USA. vol. 91, pgs. 10997-11001, 1994.
STRUCTURAL DETERMINANTS OF WATER PERMEATION THROUGH AQUAPORIN-1. K. Murata y otros
en Nature. vol. 407, pgs. 599-605, 2000.
ORIGIN OF PLANT GLYCEROL TRANSPORTERS BY HORIZONTAL GENE TRANSFER AND FUNCTIONAL
RECRUITMENT. R. Zardoya y otros en Proceeding National Academy of Sciences USA.
vol. 99, pgs. 14893-14896, 2002.
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