Contenido La Célula Seceién I. Introduccién L._Visin global de la célula ¢ investigacién celular 3 ‘© ORIGEN Y EVOLUCION DE LAS CELULAS) 4 Tar primer esl 7 Evolucién del metabolismo Procariotas actuales 5 Células eucariotas 9 Desarrollo de organismos multicelulares iH © CELULAS COMO MODELOS EXPERIMENTALES, 15 E, colr Levaduras, Dictyostelium discoideum Drosophila melanogaster 8 Arabidopsis thaliana Is rebraslos Is # INSTRUMENTOS DE LA BIOLOGIA CELULAR 20 Microscopia optica Microscopia eleetsénica acin subeclalar 10 de las edlulas animales en eultivo Cultivo de eélulas vegetales Virus EXPERIMENTO CLAVE: Cultivo celular animal MeDicins MOLECULAR: Virus y eiincer 2. Quimica celular aT + COMPOSICION MOLECULAR DE_LAS CELULAS, au TabaRTTTOR ss Lipids ha Acids nucleons ‘8 Proteinase 50 = PAPEL CENTRAL DE LAS ENZIMAS COMO CATALIZADORES BIOLOGICOS. 56 Actividad eaalzara Te Tk THT ¢ Mecansmos de cailissencimstic 8 Coensimas ai Requlacin de la sotivida envimitiea 41 * ENERGIA METABOLICA, 63 Tera bre y ATT Ts Gencracd de ATP a p. 6 Prodcidn de enersia parr de oras molgeulas orginicas n Fotosinesis e = BIOSINTESIS DE LOS COMPONENTES CELULARES 7 DOTS Lipids 75 Protsinas 76 Actos nucleicos 7» = MEMBRANAS CELULARES iw Tipo de mena Proteins de membrana acontenido Transporte a través de membranas celulares ExpERIMENTO CLAVE: Plegamiento de las cadenas polipeptidicas MEDICINA MOLECULAR: Fenileelonucia 3. Fundamentos de biologia molecular Bo + HERENCIA, GENES V ADN %9 ‘Genes y cromosomas m0 Genes enzims “1 Identiicaciin del ADN como el material genético 93 Estructura del ADN 98 Replicaciin del ADN 95 '* EXPRESION DE LA INFORMACION GENETICA, 96 Colinealidad de genes y proteinas 77 Papel del ARN mensajro 9% Cdigo genético %9 Virus ARN y transcripsin invee 100 [+ ADN RECOMBINANTE 103] Endonucleasas de restriccian TOs Generaciin de molgeulas de ADN recombinante \07 Vectoces para el ADN recombinante 108 Seeuenciacién de ADN ut Expresion de genes clonados Te Amplificacion de ADN com la reac en cadena dela polimerasa us = DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS Y PROTEINAS, 7 TTradacrin de acidor micsicos 7 Deteccion de pequetias camtidades de ADN 0 ARN por PCR 19 Sons de aiouerpos para proteinas 19 Sond de busqueda en biblioteca de ADN recombinante 21 > EUNCION DE LOS GENES EN EUCARIOTAS Anilisis genético en levaduras Transferencia de genes en plantas y animales Mutagénesis de ADN clonados Introduccién de mutaciones en genes celulares 128, Exreeimento cLave: Hipdtesis de provirus de ADN 102 Mepieina mocecutar: VIH y sida 105 Seccion II. Flujo de la informacién genética +. Organizacion y secuenciacton de Tox genomas celulares + COMPLEJIDAD DE LOS GENOMAS DE EUCARIOTAS Trivanes y exones Secuencias de ADN repettivas éniea y pseudogenes Duplicacion Composicién del genoma en los eucariotas superiores = CROMOSOMASY CROMATING Toman Centrémeros Telémeros CUENCIAS DE LOS GENOMAS COMPL TENOHTAS FOCATIOTAS T El genoma de levaduras. locontenido Los zenomas de Caenorhabditis elegans y Drosophila melanogaster ‘Genomas de plantas. Genoma humane SNPERIMENTO CLAV Descubrimiento de los intrones, non 5. Replicacién, mantenimiento y reorganizacién del ADN gendmico 163 165 Is7 2 170 ‘* REPLICACION DEL ADN 19 ADN povimerasas 180 Horquila de replieacién 182 Fidelidad de replicacin 188 COrigenes ¢inicacin dela replicaciin 19 elomeros y telomeras: replicacion de los extremos de los cromosomus 191 ~ REPARACION DELADN TE Tnversion directa del ADN datado Tar Reparacidn por escsion 196 Reparaciin propensa al error 201 Reparacidn recombinatoria 202 [ RECOMBINACION ENTRE SECUENCIAS HOMOLOGAS DE ADN 208 Laas moléculas de ADN se recombinan mediante roturas y uniones 30 Modelos de recombinacién homloga 207 209 Enzimas implicadas en lp recombinscién homologs ‘+ REORGANIZACION DEL ADN Recombinacidn espectfiea de sitio ‘Transposicién via intermediarios de ADN Transposicion via intermediarios de ARN Amplificacién génica MEDICINA MOLECULAR: Cancer de colon y reparacién det ADN ExprRivENTO CLAVE: Reorganizacion de los genes de inmunoglok 6. Sintesis y maduracién del ARN # TRANSCRIPCION EN PROCARIOTAS, ARN polimerisr y WaTNCApCION Control negativo de la transeripeidn y represores Control positive de la transeripeién ARN POLIMPRASAS EUCARIOTICASY FACTORES DI TRANSCRIPCION GENERATES ARN polimienisis eucarioricas Factores de transcripeidn generales ¢ iniciacién de la transeripeién por la ARN polimerasa I Transcripcién por las ARN polimerasas I y IIL = REGULACION DE LA TRANSCRIPCION EN EUCARTOTAS: ulacion en cis: promorores y estimuladores Proteinas de regulacién transeripeional Estructura y funcién de los activadores de la transcripeion Represores eucaridticos Relacion entre Ia estructura cromatiniea y la transeripcidn Regulacion de la transcripcién por ARNS no codificantes Metilacion del ADN ‘= MADURACION Y RENOVACION DEL ARN Maduracidn de Tos ARNs ribosomieos y de transTerencia Maduracidn del ARNm en cucariot Mecanismos de corte y empalme o splicing, Corte y empalme alternative Correccidn del ARNcontenido Degradacién del ARN 24 EXPERIMENTO CLAVE: Aislamiento de un factor de transeripeién eu 251 EXPERIMENTO CLAVE: Descubrimignto del RNPsi 268 intesis de proteinas, procesamiento y regulacién # TRADUCCION DEL ARNM. 281 ARN de transferencia TT Ribosoma 283 ‘Organizacién de los ARNm mensajeros ¢ inicio de la traduccion, 289 Mecanismo de la traduceidn 201 Regulacidn de la traduccion 206 = PLEGAMIENTO ¥ PROCESAMIENTO DE PROTRINAS 298 ‘Chaperonas y plogamiento-de proveinas Enzimas y plegamiento de proteinas Escisidn de proteinas Glicosilacién, Anclaje de lipidos ‘> REGULACION DE LA FUNCION DE LAS PROTEINAS 307 Reegulacion por pequchas molecuTas Fostorilacién de proteinas Interaceiones proteinaeproteina = DEGRADACION DE PROTFINAS Ta de Te ubiquitina-proveasoma Protedlisis lisasémica EXPERIMENTO CLAVE: Papel catalitico del ARN ribos6mico MEDiciNs MOLECULAR: Antibidticos y sintesis de proteinas Seccién III. Estructura y funcién celulares 8. Micleo 323 # ENVUELTA NUCLEAR Y TRAFICO ENTRE EL NUCLEO Y EL CITOPLASMA..-- 323 Estructura do la cmvuctia nuclear Complejo del poro nuclear ‘Transporte selective de proteinas desde Regulacién del transporte de proteinas al nicleo Transporte de ARNS @ ORGANIZACION INTERNA DEL NUCLEO Tomosomas y estructura de OTGen superior de Ta CrOwaTna Dominios funcionales en el interior del nucleo. = NUCTEOLO, ‘Genes de ARN ribosomico y organizacion de Transeripeidn y procesamiento del ARNr Ensamblaje de ribosomas ‘* EL NUCLEO DURANTE LA MITOSIS ‘Disgregucion de la-envuelta nuclear Condensacién de los eromosomas nucleolo Reorganizacidn del nicleo interfasico Exprrimenro c1ave: Mentificacion de las sefiales de localizacién nuclear. Mrpicina MOLECULAR: Enfermedades de la limmina nuclearcontenido 9. Distribucién y transporte de proteinas: Reticulo endoplismico, aparato dé Golgi y lixosomas + RETICULO ENDOPLASMICO Reticulo endoplismico y seerecion de proteinas Mareaje de las proteinas para dirigirse al reticulo endoplismico Inserei6n de la proteinas en la membrana del RE Plegamiento y procesamiento de las proteinas en el RE RE liso y sintesis de lipidos Exportacion de proteinas y lipidas desde cl RE [APARATO DE GOLG Organizacion del Golet Glicosilacidn de proteinas en el Golgi Metabolismo de lipids y de polisacirides en el Golgi Distribueién y exportacién de proteinas desde el aparato de Golei [} MECANISMO DE TRANSPORTE DE LAS VESICULAS Aproximaciones experimentales al conocimiento del transporte de fas vesiculas ‘cin de la mereancia, proteinas de revestimiento y gemacién de vesiculas Fusian de las vesiculas = LISOSOMAS Hidrolasas lisosomicas acidas Endocitosis y formacién det lisosoma Fagocitosis ¥ autofagi Exren Mepicrns, IENTO CLAVE: Hipdtesis de la seal CULAR: Enfermedad de Gaucher 10. Bioenergética y metabolismo: Mitocondrias, cloroplastos y peroxisomas 399 + MITOCONDRIAS 309 ‘Onsanizacion y funcion de Tas mitocondrias 00 Sistema genético de las mitocondrias sol Internalizavién de proteinas y formacién de las mitocondrias 403 ‘+ MECANISMO DE LA FOSFORILACION OXIDATIVA 08 Cadena de transporte de electrones a8 Acoplamiento quimiosmético 410 Transporte de metabolitosa traves de la membrana interna 44 = CLOROPLASTOS V OTROS PLASTIDOS a5 Tstruetura y Tuncion de Tos coropTastos oT Genoma del cloroplasto 417 Interalizacion y distribucion de las proteinas del cloroplasto ag Otros plistidos 420 = FOTOSINTESIS cn Flujo de electrones Waves de Tos TorostsTeMaR TV TT 3 Flujo ciclion de eleetrones 425 Sintesis de ATP 426 = PEROXISOMAS, 6 Famnerones de Tos peroxtsomay IZ 229 Formacién del peroxisoma MEpicins MOLECULAR: Enfermedades de las mitocondrias: neuropatia Gptica hereditaria de Leber 406 Exrrnimeto ¢LavF: Teoria quimiosmotica 412 11. Citoesqueleto y movimiento celular BS ‘+ ESTRUCTURA Y ORGANIZACION DE LOS FILAMENTOS DE ACTINA 438 Tnsamblaje y desensamblaje de Tos Tlamentos de actina Th xicontenido nizacén de los filamentos de aetina 440 Asociacién de los filamentos de atina con la membrana plasmitica 4a Protuberancias de It superficie celle 45 [2XCTINA MIOSINA Y MOVIMIENTO CEEUTARE HT] Contraccin mise a7 Asociaciones contrctiles de actina y miosina en células no musculares 351 “Miosomas no convencionales 433 Migracion y arasire celular a4 = FILAMENTOS INTERMEDIOS 455 Proteinas de fos Mlamentorintermediow 35 Ensamblaje de los filaments intermedios 56 Onganizacion inracclular de Tos filamentosintermedios 437 Funciones de las queratinas y neutofiamientos: enfermedades de la piel y sistema nervioso 459 = MICROTUBULOS ar Taructura, ensamblaje e mestbiidad dinamica de Tos mictouabulos Tar Centrosoma, centiolosy orgaizacion de los microtibulos 464 Reorganizacin de los microtibulos durante fa mitosis 366 Estabilzaciin de los microtbuls y poaridad celular 467 [= MOTORES MICROTUBULARES ¥ MOVIMIENTOS 5] Tdentifcacion de las proteinas motores mierotubulares Tar Transporte de orginules y organizacinintacelular an Senaracidn de Tos eromosomas mitéicos a7 Cilios y Nagetos an Exprnivento cLavet La expresion de una gueratina mutante causa un desarrollo andmao de a piel 460 Expenivurvro craves Aislamiento de la quiesina 370 a 12. Superficie celular 483 “+ ESTRUCTURA DF LA MEMBRANA PLASMATICA 483. ‘Bicapa Tipiica aa Proteinas de membrana 486 Mowilidad de fas proteinas de Ia membrana 490 Giicocti an = TRANSPORTE DE MOLFECULAS PEOUFNAS, Ditusin paste pr Difusinfaciltada y proteinas transportadoras 494 496 Transporte activo dirigido por la hidrdtisis de ATP 503 Transporc ative driido por gradi 507 + ENDOCITOSIS 508 TFagocitosis. 7 tosis mediada por receptor sil Tritico de proteinas en la endocitosis 515 = PAREDES CELULARESY MATRIZ EXTRAC Paredes colulares acter Paredes celulares vegetales Matriz extracelular ‘= INTERACCIONES CRLULA-CELULA Proteinas de adhesion celular Unio Uniones de tipo gap. Adhesion de las eélulas vegetales y plasmodesmos Mrpicina MOLECULAR: Fibrosis quist Exrerimento cave: Receptor de las LDL TARcontenido Seccién IV. Regulacion celular ializacibn por Notch IZADORAS Y SUS RECEPTORES 541 alizacton eelala-eal 3 Hormonas esteroideas y superfamilia de receptores de esteroides 543 Oxido nitrico y mondxide de carbono 545 Neurotransmisores 546 Hormonas peptidicas y Factores de crecimiento 546 icosanoiies Sas Hormonas vegciales 9 FUNCIONES DF. LOS RECEPTORES DE LA SUPERFICIE CELULAR. 350 Receprores asociados a provers 331 Receptores proteina-titosina quinasa 553 Receptores dle citoquinas ¥ proteina-tirosina quinasas no reeeptoras 557 Receptores asociados a otras actividades enzimiticas 557 VIAS DE-TRANSDUCCION INTRACELULAR DE SENALES 558 Via del AMPc: segundos mensajeros y fosforlacion de profeinas 359 GMP ciclico 561 Fosfolipidos y Ca2¥ 502 Ras, Rat y via de las MAP quinasas 565 Via JAK/STAT 570 TRANSDUCCION DE SENALES ¥ CITOESQUELETO =] Tntcgrinas y transduvcein de sefales 377 Rogulacién del citoesqueleto de actina 574 SENALIZACION EN EL DESARROLLO ¥ EN LA DIFERENCIACION 35 Via del receptor tirosina quinasa/Ras/Rat ERK en Drosophila y en C. elezans 3S Hedgchog y W ee Se 578 14. Ciclo celular REGULACION DE LA MUERTE CELULAR PROGRAMADA, ‘Caspasas ¥ apoptosis 380 Receptores implicados en la muerte celular y la activacién de las easpasas 582 582 Sefalizacion de la supervivencia celular XPERIMENTO CLAVE: Proteina-tirosina quinasa Sre MEbicins MOLECULAR Cancer, transduccién de sefales y oncogenes ras ICLO CE so ses del cielo celular Sor Regulacin del ciclo celular por el crecimiento celular y por scfalesextracclulares sos Pantos de control del ciclo celui 506 Restrngir ba repicaciin del ADN a una ver por ciclo celular 598 = REGULADORES DE LA PROGRESION DEL CICLO CELULAR, 599 MPF: an dimero de Ce2y eclina So Familias de eicinas y quinasas dependientes de cicinas 03 Factores de erecimicntoy cielinas de tipo D «0s Inhbidores de ta progresién del ciclo cela 606 (=S0csos pra SE am] tapas de Tr mitosis am MPF y peogresin a a maf on Proteolisis einactivac telofase 613contenido Citocinesis an ‘© MEIOSIS ¥ FECUNDACION ots: Procesa de Ta cians ory Regulacisn de ka meiosis en los oocitos ols. Fecundacin 20 ‘+ CELULAS MADRE Y MANTENIMIENTO DE TEJIDOS ADULTOS et PROTTETRCTOW Ce Tas CTU THTETETCTAS Células madre Aplicaciones médicas de las células madre 624 EXPERIMENO CLAVE: Descubrimiento del MPF 600) MrpiciNa MOLECULAR: Cultivo de eélulas madre embrionarias 622 Tipos de cancer oT Desarrollo del céneer 633 ‘ausas del cdncer 634 Propiedades de las células cancerosas 636 Transformacién de las células en cultiva 640, ‘= VIRUS TUMORALES. a0. Virus de la hepatitis By C eal SV40 y poliomavirus, oa Papilomavirus 62 Adenovirus 683 Herpesvirus 643 Rotrovirus an ‘* ONCOGENES, at ‘Oncogencs retroviricos os Proto-oncogenes. 646 LLos oncogenes en el cdneer en el hombre 649 Funciones de los productos oncogénicos 633 * GENES SUPRESORES DE TUMORES 657 THRenUTIcacTon de Tos genes SUPICSOTES Ue TUMORS oS Funciones de los productos de los genes supresores de tumores 661 Papel de los oncogenes y de los genes supresores de tumores en el desarrollo del tumor 663 + APLICACIONES DE LA BIOLOGIA MOLECULAR PARA LA PREVENCION Y EL TRATAMIENTO DEL CANCER 664 Prevencion y deteccion precoz 6 Diagnéstico molecular 665 Tratamiento 6566 Experisteyro cLave: Descubrimiento de los proto- 648 MEDICIN\ MOLECULAR: STI-S71; Tratamiento del cincer dirigido contra el oncogén ber/abl 667 Respuestas a las cuestiones Glosario.Organizacion y caracteristicas de La Célula La Célla ha sido disefiado para ser un texto de ficil comprensién y ensefianza que puede set cubierto en un solo semestre, a la vez que permite a los estudiantes dominar el material de todo el libro. Damos por hecho que se poseen ciertos conocimientos generales de biologia y quimica aunque no supo- ica, bioquimica 0 biologia molecular. Muchos aspec~ 1s del libro nos ayudaran a acerearnos a la materia, Organizacion La Célula se divide en cuatro partes, cada una de ellas es independiente, por lo que el orden y los temas pueden variar ficilmente segin las necesidades de cada curso. La seceiéin / del libro aborda los origenes de la evolucién de tas cétulas, sus métodos de estudio, su composicién quimica y los findamentos de la biologia molecular moderna, Para aquellos estudiantes, que tengan una gran formacién en cursos de introduccién a la biologia 0 en cursos previos de biologia lat, pueden obviar varias partes de este libro o pueden usarlas de repaso, La seecidn Ise centra en la biologia molecular de las células asi como en la organi 6n de fragmentos de ADN, trascripeiin del ARN; y sintesis, procesos y regulacién de proteinas. Los capitulos estin ordenados siguiendo el mismo orden de wcidn y secuen- ccias del genoma; duplicacion, reparacién y combinak la informacién genética (ADN -» ARN ~* proteina) y proporciona un coneiso pero actual campo de vision de estas materias. La seccidn II analiza ta estructura y funcionamie icleo, organulos citoplasmiti~ 0s, citoesqueleto y superficie celular. Esta parte del libro comienza adaptando lo mencionado en la see cién II sobre biologia molecular a las eélulas eucaristicas y continiia a través de los orgiinulos del cito- plasma y citoesqueleto hasta la membrana plasmética, Sin embargo, estos capitulos son relativamente independientes y pueden textarse en distinto orden, sezan sean mas apropiados para un curso en concre to. Finalm nte, la seceidin IV comprende los mecanismos de regulacion de las actividades de la célu- la, tratando temas como los estimulos celulares, el ciclo de la eélula y la muerte controlada de células. Esta cuarta parte coneluye con un capitulo sobre el cai scuencias de los fallos de weer que sintetiza las los mecanismos bisicos de funcionamiento de las e¢lulOrganizacion y caracteristicas de La Célula Caracteristicas Para ayudar a los estudiantes a dominar ¢ integrar los contenido de La Célula, se han incorporado varias caracteristicas que se han organizado para guiar a los estudiantes en el trato eon este libro de la siguiente manera: Organizacién de capitulos, Cada capitulo se divide en cuatro o cinco secciones principales, las cua- les estin a su vez divididas en un niimero similar de apartados. Un esquema de las secciones principales al principio de cada capitulo muestra de modo rapido Ia organizacion de cada uno de ellos, Términos claves y glosario. Los términos claves aparecen en negrita a lo largo del capitulo, ademas dde enunciarse en el sumario y definirse en el glosario de final del libro. Iustraciones y microforografias. Se ha desarrollado cuidadosamente un completo programa de ilus- tracién a todo color y de microfotografias para complementar y reforzar visualmente el texto. Experimentos y ensayos de medicina molecular. Cada capitulo contiene dos Experimentos clave © ‘un Experimento clave y caracteristicas de Medi al lector en las bases experimentales de la eélula y la biologia molecular y sus aplicaciones a la medicina 1a molecular, Est practicas tienen por objeto el instruir moderna, Las pricticas también pueden utilizarse como bases itiles para discusiones de estudiantes, que pueden acompafiarse con una revisién del texto original sobre el que se basan los Experimentos clave, Resumen de capitulo. El sumario esta organizado a modo de esquema, que correspond a las suce- sivas div y apartados de cada capitulo. Este formato se acompafia de una lista con los jones en secciones ‘términos claves, proporcionando asi un conciso repaso del mater Preguntas y respuestas. Una extensa bateria de preguntas al final de cada capitulo (con las res puestas al Final del libro) tienen como propésito facilitar la revision del material de cada capitulo y animar aterial para predecir o interpretar los resultados experiments alos estudiantes a usar dicho n lo permiten el acceso rapido a las as bibliogrifieas del final de cada cay Bibliosgrafia ‘paginas correspondientes del libro, Para ayudar a identificar articulos de interés, las referencias estin orga nizadas de acuerdo con las secciones de los capitulos. Los articulos de interés y las paginas importantes se identifican con las iniciales [R] y [P] respectivamente. viLa CélulaSeccién I Introduccion 1 Visién global de la célula e investigacion celular 2 Quimica celular 3 Fundamentos de biologia molecularOrigen y evolucién de las células 4 Células como modelos experimentales 15, Instrumentos de la biologia celular 20, EXPEAIMENTO CLAVE: Cultvo celular animal 32 Mepicina mouccuLan: Vitus y cancer 35 cuyo entendimiento es fundamental para todas las ciencias biolégicas. Esto es cierto no sdlo desde el punto de partida de la ciencia basica, sino también respecto a un niimero creciente de aplicaciones practicas en agricultu- ra, biotecnologia y medicina. Especialmente tras haber completado la secuen: cia del genoma humano, el progreso de la biologia celular y molecular esta abriendo nuevos horizontes en la préctica médica. Ejemplos llamativos inoluyen 1 desarrollo de nuevos férmacos especialmente disefiados para interferir con el crecimiento de células cancerosas y con el uso potencial de células madre para sustituir tejidos dafiados y tratar pacientes que padecen condiciones como la diabetes, enfermedad de Parkinson, de Alzheimer, lesiones de la médula espi- nal y enfermedades cardiacas, Dado que la biologia celular y molecular es un campo de investigacién de rapido crecimiento, este capitulo se centrara en cémo se estudian las células, asi como serviré para revisar sus propiedades basicas. La apreciacion de las similitudes y diferencias entre las células resulta particularmente importante para entender la biologia celular. La primera seccién de este capitulo por lo tanto discutira la unidad y la diversidad de las células presentes hoy en dia en términos de su evolucién desde un ancestro comin. Por otra parte, todas las células comparten propiedades fundamentales que se han conservado a través de la evolucién. Por ejemplo, todas las células utiizan ADN como material ge- nético, estén rodeadas por una membrana piasmatica y usan los mismos meca- nismos basicos para el metabolismo energético. Por otro lado, las células ac- tuales han evolucionado en diferentes estilos de vida. Muchos organismos, como las bacterias, amebas y levaduras, se componen de céiulas Unicas capa- ces de autorreplicarse independientemente. Los organismos mas complejos estén compuestos por una coleccién de células que funcionan de manera coor dinada, con diferentes células especializadas para desartollar funciones part culares. El cuerpo humano, por ejemplo, esté compuesto de mas de 200 tipos diferentes de células, cada una de ellas especializada para cada funcién distint- va como la memoria, la vista, el movimiento, o la digestién. La diversidad exhibi- da por los diferentes tipos de células es sorprendente; por ejemplo, considere- mos las diferencias entre las bacterias y las células del cerebro humano. Las similtudes fundamentales entre los diferentes tipos de células proporcio- nan un marco comiin paral la biologia celular, permitiendo que los principios basi- cos aprendidos a partir de experimentos con un solo tipo de célula puedan ser extrapolados y generalizados a otros tipos de células. Diversos tipos de células y organismos son extensamente utlizados para estudiar los diferentes aspectos de la biologia celular y molecular; la segunda seccién de este capitulo ciscute algu- nas de las propiedades de estas oélulas que las hacen partcularmente valiosas 3 | BIOLOGIA MOLEGULAR DE LAS GELULAS es un area de investigacion activa4 @ Seccidn | * Introduccion como modelos experimentales. Finalmente, es importante reconocer que el pro- reso de la biologia celular depende también de los instrumentos experimentales que permiten a los cientificos hacer nuevas observaciones o desarrollar experi- mentos novedosos. Este capitulo de presentacién concluye por tanto con una discusién acerca de algunos experimentos utilizados para el estudio de las célu- las, a la vez que resume algunos de los descubrimientos hist6ricos que han lleva- do a nuestro conocimiento actual sobre la estructura de la célula y su funcion. Origen y evolucién de las células Las células se dividen en dos clases principales, inicialmente definidas segiin donde situaran al nucleo. Las eélulas procariotas (bacterias) carecen de en- voltura nuclear; las ¢élulas eucariotas presentan un niicleo donde el material genético esta separado del citoplasma. Las oélulas procariotas son general- mente mas pequefias y simples que las células eucariotas: ademas de la ausencia de nucleo, sus genomas son menos complejos y no contienen organu- los citoplasmaticos o citoesqueleto (Tabla 1.1), Al margen de estas diferencias, los mismos mecanismos moleculares basicos gobiernan las vidas de procario- tas y eucariotas, indicando que todas las células presentes hoy descienden de un ancestro primordial nico. ,Cémo se desarrollé la primera célula? g¥ como evolucionaron la complejidad y la diversidad que exhiben las células actuales? La primera célula Parece ser que la vida emergié hace, al menos, 3.800 millones de afios, aproxi- madamente 750 millones de afios después de que se formara La Tierra (Fig. 1.1). Como se origind la vida y cémo la primera célula se convirtié en un ser son cuestiones de especulacién, puesto que estos acontecimientos no pueden re- producirse en el laboratorio. No obstante, diferentes tipos de experimentos han proporcionado evidencias importantes sobre algunos pasos del proceso. En 1920 se sugirié por primera vez que moléculas orgénicas simples po- drian polimerizar espontaneamente y formar macromoléculas bajo las condicio- nes que se pensaba que existian en la atmésfera primitiva. En el momento en el que surgié la vida, la atmésfera de La Tierra se piensa que contenia poco 0 nada oxigeno libre, constando principalmente de CO. y N. ademas de peque- ‘tas cantidades de gases como H.,H,, y CO. Tal atmésfera proporciona condi ciones reductoras en las que las moléculas organicas, con una fuente de ener- {gia como la luz solar o descargas eléctricas, se pueden formar esponténeamente, La formacién espontanea de las moléculas organicas {ue demostrada por pri- mera vez experimentalmente en los afios 50, cuando Stanley Miller (un estu- diante graduado en aquel entonces) demostrd que la descarga de chispas eléc- tricas en una mezcla de H,, CH,, y NH,, en presencia de agua, conducia a la formacién de una variedad de moléculas organicas, incluyendo varios aminoa- cidos (Fig. 1.2). Aunque el experiment de Miller no reprodujo con precision las Caracteristicas Procariota Eucariota Nucloo Ausonto Presente Didmetro de una eélula pica 1 um 10-100 jm Gitoesqueleto| ‘Ausonte Presente Crgénulos ctoplasmétices ——_Ausentes Presentes Contenido de ADN (pares do 1 x 1085 x 108 15% 10725 x10? bases) (Cromosomas Una molécula de ADN Multiples motéculas de ADN ‘creulae linearCapitulo 1 * Visién global de la célula e investigacién celular @ 5 Pree ose S 100 ete = i t t Ciera é eo sae § 3.000 Fosintesis Pier cl 4.000 bec! 4.000 Foul dT 000 condiciones primitivas de La Tierra, claramente demostré la plausibilidad de la sintesis espontanea de las moléculas organicas, proporcionando los materiales basicos desde donde surgieron los primeros organismos vives. El siguiente paso en la evolucién fue la formacion de las macromoléculas, ‘Se ha demostrado que los bloques monomeéricos que constituyen las macromo- léculas se polimerizan espontaneamente bajo condiciones prebidticas plausi- bles. El calentamiento de mezclas secas de aminoacidos, por ejemplo, da como resultado su polimerizacién para formar polipéptidos. Pero la caracteristica fun- damental de la macromolécula de ia que surgio la vida debe tener la habilidad de replicarse por si misma. Solamente una macromolécula capaz de dirigir la sinte- sis de nuevas copias de si misma seria capaz de reproducirse y evolucionar. De las dos clases principales de macromoléculas que aportan informacion en las células actuales (acidos nucleicos y proteinas), solo los acidos nucleicos son capaces de dirigir su propia replicacién. Los acidos nucleicos pueden servir Figura 1.2 Formacién espontinea de las moléculas organicas. El vapor de agua se expulsaba a una atmésfera que consistia en CH,. NH, y H., en la que se descargaban chispas de ‘electricidad. El anilisis de los productos de la reaccion revelo ia formacion de varias molé~ culas organicas, incluyendo los aminodcidos alanina, acido aspartico, acido glutamico y glicina, Figura 1.4 Escala temporal de la evolucién. La escala indica e! momento aproximado en {1 que ocurrieron algunos de los acontec mientos més importantes en la evolucion de las células. fenirainto -— Motécuias orgsnicas arin Acido aspirico Acido gltémico lina Urea Acida\dctco — Acido acéteo ~Aeido térmico6 @ Seccidn | * Introduccion Figura 1.3 ‘Autorreplicacion propia del ARN. Las parejas complementarias entre los nu Cledtidos (adenina [A] con uracilo [U] y ‘quanina [G] con citosina {Cl} permiten ‘que una hebra de ARN sirva como molde para la sintesis de una nueva hebra con la Secuencia complementaria, Figura 1.4 Recubrimiento del ARN do cacién con una membrana de fosfoli dos. Se cree que la primera célula surgio dol recubrimiento del ARN autorreplicante y sus molaculas asociadas por una mem- brana compuesta de fosfolipidos. Cada rmolécula de fosfolipidos presenta dos lar- ‘92S Colas hidroldbieas unidas a un grupo hidrolfico, Las colas hidrofébicas estan ‘embebidas en la bicapa lipidica; las cabe- 22a8 hidrofilias estan expuestas al agua a ‘ambos lados de la membrana como molde para su propia sintesis como resultado del apareamiento de ba- ses especificas entre nuclestidos complementarios (Fig. 1.3). Uno de los pasos criticos en el aprendizaje de la evolucién molecular ocurris a principios de los afios 80, cuando se descubrié en los laboratorios de Sid Altman y Tom Cech que el ARN es capaz de catalizar numerosas reacciones quimicas, incluyendo la polimerizacién de nuclestidos. El ARN es, por tanto, el Unico capaz de servir como molde y catalizar su propia replicacién. Como consecuencia, se cree que el ARN ha sido el sistema genético inicial, y que una etapa temprana de la evolucién quimica estuvo basada en moléculas de ARN con replicacién propia —un periodo de la evolucién conocido como el mundo del ARN—. Las interao- ciones en orden entre el ARN y los aminodcidos evolucionaron a lo que hoy es el cédigo genético, y eventualmente el ADN reemplazé al ARN como el material genético La primera célula, se presupone, que surgié de la envoltura del ARN de replicaci6n propia en una membrana compuesta por fosfolipides (Fig. 1.4). Tal y como se discutira en detalle en el préximo capitulo, los fosfolipidos son los componentes basicos de todas las membranas bioligicas presentes hoy dia, incluyendo la membrana plasmatica de células procariotas y eucariotas. La ca- racteristica clave de los fosfolipidos que forman las membranas es que son moléculas anfipaticas, lo que quiere decir que una porcién de Ia molécula es soluble en agua y la otra porcién no. Los fosfolipidos presentan largas cadenas hidrocarbonadas insolubles en agua (hidrofébicas) unidas a grupos solubles Membrana de fostolipidosCapitulo 1 * Visién global de la célulae investigacion celular @ 7 en agua (hidrofilicos) que contienen fosfatos. En contacto con el agua, los {osfolipidos espontaneamente se agrupan en una bicapa con los grupos que contienen fosfatos en el exterior en contacto con el agua y sus colas hidrocarbo- nadas en el interior en contacto unas con otras. Esta bicapa fosfolipidica forma una barrera estable entre dos compartimentos acuosos —por ejemplo, sepa- rando el interior de la célula de su ambiente externo— La envoltura del ARN autorreplicantey las moléculas asociadas a una mem- bana lipidica se han mantenido, por tanto, como una unidad, capaz de reprodu- cirse a si misma y evolucionar. La sintesis de proteinas a partir del ARN pudo ya haber evolucionado, en cuyo caso la primera célula consistiria en un ARN de replicacién propia y sus proteinas codificadas. Evolucién del metabolismo Debido a que las células se originaron en un mar de moléculas organicas, éstas eran capaces de obtener alimentoy energia directamente de su ambiente. Pero Una situacién como ésta es limitada en si misma, por lo que las células necesi taron evolucionar sus propios mecanismos de creacién de energia y sintetizar las moléculas necesarias para su replicacion. La creacién y la utlizacién contro- lada de la energia metabélica es primordial para todas las actividades celulares, yy los procesos principales de metabolismo energético (discutidos en detalle en el Cap. 2) se han conservado practicamente intactos en las células actuales. Todas las células utilizan adenosina 5'-trifosfato (ATP) como fuente de ener- gia metabolica para llevar a cabo la sintesis de los constituyentes celulares y conducir otras actividades que requieren energia, como el movimiento (p. ej. la contraccién muscular). Los mecanismos utilizados por las células para generar ATP han evolucionado en tres etapas, correspondientes a la evolucién de la glicolisis, fotosintesis y metabolismo oxidativo (Fig. 1.5). El desarrollo de estos procesos metabélicos cambié la atméstera de la Tierra, en consecuencia alte- rando el curso de la evolucién. En la atmésfera anaerobia inicial de la Tierra, las primeras reacciones gene- radoras de energia presumiblemente implicaron la escision de moléculas orga- nicas en ausencia de oxigeno, Estas reacciones parecen ser una forma de la actual glicolisis —la rotura anaerobia de la glucosa a acido lactico, con la ga- nancia neta de energia de dos moléculas de ATP. Ademas de utilizar ATP como su fuente de energia quimica intracelular, todas las células actuales llevan a cabo la glicolisis, de acuerdo con la idea de que estas reacciones surgieron muy pronto en la evolucién, La glcolisis proporcioné un mecanismo mediante el cual la energia en molé- culas organicas ya formadas (p. ¢j., Ja glucosa) podia convertirse en ATP, que ar ea Ras * Figura 1.5 ee % Fe a de merle mele ns 660, + 6H,0 (GxBBY + co, Cosa en dcido lactico. La fotosintesis util dala energia del sol para conducla sin- fesis de la glucosa a partir del CO, y cl 110, liborando ©, coro producto. EI, ee eae, liberado por la fotosintesis !o utiliza el (BEY +00, ———r 600, + eno rd metabolsmo oxidative, en el que la gu- Cosa se rompe en CO. y H.0, liberanco ae mucha mas energia que la obtenida de la gledisie8 @ Seccidn | * Introduccion Figura 1.6 Microgratia electronica de E. coll. La ‘ceiula esta rodeada por una pared colviar dentro de la que se encuentra la membra- ‘na plasmatica. El ADN se encuentra en el rnucleoide. (Menge and. Wurtz/Biozen- trum, University of BaselScience Photo Library/Photo Researchers, Inc.) plastica Pare collar podia ser utilizado como fuente de energia para dirigir otras reacciones metabo: licas. El desarrollo de la fotosintesis fue el siguiente paso mas importante de la evolucién, que permitié a la oélula generar energia a partir de la luz solar y ser independientes de la utilizacién de las moléculas organicas ya existentes. La primera bacteria fotosintética, que evoluciond hace mas de 3 billones de aos, probablemente utilizaba H.S para convertir CO, en moléculas organicas —to- davia algunas bacterias utilizan un proceso de fotosintesis similar. La utilizacion de H,O como donante de electrones e hidrégeno para la conversion del CO, a compuestos organicos evolucioné mas tarde y tuvo la importante consecuencia de cambiarla atméstera de la Tierra. El uso de H,O en reacciones fotosintéticas produce O, libre; se cree que este mecanismo ha sido el responsable de hacer a la atmésfera de la Tierra tan abundante en O>. La liberacién de ©, como consecuencia de la fotosintesis cambio el medio en el que las células evolucionaron y se cree que determind el desarrollo de! metabolismo oxidativo. Altemativamente, ei metabolismo oxidative podria ha- ber evolucionado antes que la fotosintesis, y el aumento del O, atmosférico proporcionaria una importante ventaja selectiva a los organismos capaces de utilizar O, en las reacciones de generacion de energia. En cualquier caso, el O, es una molécula altamente reactiva, y e| metabolismo oxidativo, usando esta reactividad, ha proporcionado un mecanismo de generacidn de energia a partir de moléculas organicas mucho més eficiente que la glicolisis anaerobia. Por ejemplo, la rotura oxidativa completa de la glucosa en CO, y H,0 produce energia equivalente a 36 6 38 moléculas de ATP, en comparacién con las 2 moléculas de ATP que se forman en la glcolisis anaerobia. Con pocas excep: ciones, las células actuales utilizan reacciones oxidativas como fuente princi- pal de energ} Procariotas actuales Los procariotas actuales, que incluyen todos os tipos de bacterias, estan dividi- dos en dos grupos —las arquebacterias y las eubacterias— que se diferen- ciaron al principio de la evolucién. Algunas arquebacterias viven en condiciones extremas, que hoy en dia son inusuales pero que pudieron prevalecer en la primitiva Tierra. Por ejemplo, los termoacidsfilos viven en pozos calientes de sulfuro con temperaturas hasta de 80 ‘C y valores de pH de 2. Las eubacterias incluyenlas formas comunes que estan presentes en nuestros dias —un amplio grupo de organismos que viven en una gran variedad de ambientes, como la tierra, el agua, y otros organismos (p. e., los patogenos humanos). La mayoria de las células bacterianas son estéricas, en forma de bastén, 0 espiral, con diametros que oscilan de 1 a 10 um. Su contenido de ADN varia desde unos 0,6 millones a5 millones de pares de bases, cantidad suticiente para codificar unas 5.000 proteinas diferentes. Los procariotas mas grandes y com- plejos son las cianobacterias, bacterias en las que evolucioné la fotosintesis. La estructura de célula procariota tipica es la de Escherichia coli (E. coll), un habitante comin del tracto intestinal humano (Fig. 1.6). La célula tiene forma de bast6n, alrededor de 1 j1m de didmetro y cerca de 2 um de longitud. Como la mayoria de los otros procariotas, E. coli esta rodeada por una pared celular bacteriana rigida compuesta de polisacaridos y péptidos. Dentro de la pared celular se encuentra la membrana plasmatica, que es una bicapa de fosfolipi- dos y proteinas asociadas. Mientras que la pared celular es porosa y puede ser penetrada por una variedad de moléculas, la membrana plasmatica proporciona tuna separacién funcional entre el interior de la eélula y su medio externo. El ADN de E. coties una molécula circular Unica en el nucleoide, que, en compara- cidn con el nucleo de los eucariotas, no esta rodeado por una membrana que lo separe del citoplasma. El citoplasma contiene aproximadamente 30.000 ribo- ‘somas (ugar de la sintesis de proteinas), que destacan por su apatiencia gra- ular.Capitulo 1 * Vision global de la célula e investigacion celular @ 9 Células eucariotas Como las células procariotas, todas las células eucariotas estan rodeadas por ‘membranas plasméticas y contienen ribosomas. No obstante, las células euca- riotas son mucho mas complejas y contienen un nucleo, variedad de orgdnulos citoplasmaticos, y un citoesqueleto (Fig. 1.7). El organulo mas grande y promi- nente de las células eucariotas es el nticleo, con un diametro aproximado de 5 jum. El nticleo contiene la informacién genética de la célula, que en los eucario- tas se encuentra organizada de forma linear en lugar de moléculas de ADN Circular. El nucleo es el sitio de la replicacion del ADN y de la sintesis del ARN; Ia tradueci6n del ARN en proteinas tiene lugar en los ribosomas del citoplasma. ‘Ademas de un nlicleo, las células eucariotas contienen una variedad de or- ganulos delimitados por membranas dentro del citoplasma. Estos organulos proporcionan diferentes compartimentos en los que se localizan las distintas actividades metabdlicas. Las células eucarioticas son por lo general mas gran- des que as células procariotas, con frecuencia presentando un volumen celular cien veces mayor. La compartimentalizacion proporcionada por los organulos citoplasmaticos es lo que permite a las células eucariotas tuncionar con eficien- cia, Dos de estos orgénulos, las mitocondrias y los cloroplastos, juegan pa- peles imprescindibles en el metabolismo energético, Las mitocondrias, que se encuentran en casi todas las células eucariotas, son los centros del metabolis- mo oxidativo y son por tanto las responsables de generar la mayoria del ATP derivado de la rotura de moléculas orgdnicas. Los cloroplastos son los centros donde se lleva a cabo la fotosintesis y se encuentran exclusivamente en las células de las plantas y algas verdes. Los lisosomas y los peroxisomas tam- bien proporcionan compartimentos metabélicos especializados para la diges- tidn de macromoléculas y varias reacciones oxidativas, respectivamente. Ade- mas, la mayoria de las células de las plantas contienen grandes vacuolas que desarrollan variedad de funciones, incluyendo la digestion de macromoléculas y el almacenaje de productos de desecho y nutrientes. Debido al tamaho y complejidad de as células eucariotas, el transporte de protainas a sus destinos dentro de la célula es una labor formidable, Dos orga- rulos citoplasmaticos, el reticulo endoplasmitico y el aparato de Golgi, es- tan especificamente dedicados a la diferenciacién y transporte de las proteinas destinadas a la secrecin, a la incorporacién en la membrana plasmatica, y a la incorporacién en los lisosomas. El reticulo endoplasmatico es una red extensa de membranas intracelulares, que se extienden desde la membrana nuclear hasta atravesar todo el citoplasma. No solo acta en el proceso y transporte de proteinas, sino también en la sintesis de lipidos. Desde el reticulo endoplasma- tico, las proteinas son transportadas dentro de pequenias vesiculas al aparato de Golgi, donde siguen siendo procesadas y clasificadas para el transporte a sus destinos finales. Ademas de esta funcion de transporte de proteinas, el aparato de Golgi presenta sintesis de lipidos y (en células de las plantas) sinte- sis de algunos polisacciridos que componen la pared celular. Las células eucariotas tienen otro nivel de organizacién interna: el citoes- queleto, una red de filamentos proteinicos que se extienden por el citoplasma. El citoesqueleto proporciona el marco estructural de la célula, determinando la forma celular y la organizacion general del citoplasma, Ademas, el citoesquele- to es responsable de los movimientos de todas las células (por ej., la contrac cién de las células musculares), del transporte intracelular y la posicion de los organulos y otras estructuras, incluyendo los movimientos de los cromosomas durante la division celular. Los eucariotas se desarrollaron hace al menos 2.700 millones de afios, des- pués de 1.000 6 1.500 millones de aiios de la evolucién procariota. Los estudios de sus secuencias de ADN indican que las arquebacterias y eubacterias son tan diferentes entre si como lo son de los eucariotas actuales. Por lo tanto, parece ser que un acontecimiento en la primera etapa de la evolucién ha sido el motivo10 © Seccion| * Introduccion Figura 1.7 Estructuras de las células animales y vegetales. Las céiulas animales y vege- tales estan rodeadas por una membrana plasmatica y contienen un nucleo, un ci toesqueleto, y muchos orgénulos citoplas- maticos an comin. Las células vegetales también estan rodeadas por una pared celular y contianen cloroplastos y vacuo- las grandes. A i de la divergencia de tres lineas de descendencia a partir de un antepasado comin, dando lugar a las actuales arquebacterias, eubacterias, y eucariotas. Resulta interesante que muchos genes de las arquebacterias son mas simila- res @ los de los eucariotas que a los de las eubacterias, indicando que las arquebacterias y los eucariotas comparten una linea comun de descendencia evolutiva y que estan mas estrechamente relacionados entre ellos que con las eubacterias (Fig. 1.8). Un paso critico en la evolucion de las células eucariotas fue la adquisicion de la envoltura membranosa de los orgénulos subcelulares, permitiendo el desa- rrollo de la complejidad caracteristica de estas oélulas. Estos organulos se cree ‘que han sido adquiridos como resultado de la asociacién de células procariotas con el antepasado de los eucariotas. La hipétesis de que las células eucariotas evolucionaron a partir de una aso- ciacién simbiotica de las procariotas —endosimbiosis— se sustenta con los estudios de las mitocondrias y los cloroplastos, los cuales se cree que han evo- lucionado desde bacterias que vivian en células grandes. Las mitocondrias y los cloroplastos tienen un tamafio similar al de las bacterias, y como ellas, se repro- ducen mediante su escisién bipartita. Lo mas importante, es que las mitocon- Arias y los cloroplastos contienen su propio ADN, que codifica algunos de sus ‘componentes. El ADN de las mitocondrias y cloroplastos se replica cada vez que el organulo se divide, y los genes que contiene se transcriben dentro del orgainulo y se traducen en los ribosomas de este. Por lo tanto, las mitocondrias y los cloroplastos contienen sus propios sistemas genéticos, que son diferentesCapitulo 1 * Vision global de la célulae investigacion celular @ 11 F893 Oras CCancbacterias eubacteras ——Plantas n Wy Animales (levaduras) Protas Arquebactoras Cloroasios Figura 1.8 Evolucién de las células. Las oélulas actuales evolucionaron desde un antepa- ‘sado procariota comon a tres largas li- rneas de descendencia, dando lugar a las larqueobacterias, eubacterias, y eucano- tas. Las mitocondrias y los cloropiastos tuvieron su origen en la asociacion sim- bidtica entre las bacterias aerobias y las ianobactorias, respectivament, con los ancestros de las eucariotas. tocondias12 @ Seccién| * Introduccion TABLA 1.2. Contenido de ADN enlas células ‘Contenido de ADN. haploide (millones Organismo ‘de pares de bases) Bacterias ‘Mycoplasma 06 Ecol 48 Eucariotas unicelulares ‘Saccharomyces (lovaduras) Dictyastelum 7 ‘discoideum Euglena 3.000 Plantas Arabidopsis 125 thaliana Zea mais (maiz) 5.000 ‘Animales Cavnorhabettis 7 elegans (nomatodo) Drosophita 180 ‘melanogaster (mosca de la frst) Palio 1.200 Pez cobra 1,700 Raton 3.000 Humano 3.000 Figura 1.10 Microgratia éptica de Amoeba pro- teus. (M. |. Walker! Photo Researchers, Inc.) Figura 1.9 Microgratia electronica de barrido de Saccharomyces cerevisiae. Micogratia con color artificial. (Andrew Syed:Sciene Photo Library Photo Researchers, Inc dol genoma nuclear de la célula, Ademas, los ribosomas y los ARN ribosémicos de estos organulos estan mas relacionados con los bacterianos que aquellos codificados por los genomas nucleares de los eucariotas, En general, se ha aceptado un origen endosimbidtico de estos organulos, suponiendo que la mitocondria ha evolucionado a partir de las bacterias aero- bias y los cloroplastos de las bacterias fotosintéticas, como las cianobacterias. La adquisicién de bacterias aerobias podria provenir de una célula aerobia con la habilidad de llevar a cabo un metabolismo oxidativo, La adquisicién de bacte- rias fotosintéticas podria provenir de la independencia nutricional conseguida al desarrollar la fotosintesis. Por tanto, estas asociaciones endosimbicticas resulta- ron muy beneficiosas para sus asociados, que fueron seleccionados en el curso de la evolucién. A través del tiempo, la mayoria de los genes originalmente pre- sentes en estas bacterias en apariencia pasaron a incorporarse dentro del geno- ma nuclear de la célula, asi que solamente algunos componentes de las mitocon- Grias y cloroplastos siguen siendo codificados por los genomas de los organulos. anismos multicelulares Desarrollo de org Muchos eucariotas son organismos unicelulares que, como las bacterias, se ‘componen de células tnicas capaces de su propia replicacidn. Los eucariotas mas simples son las levaduras, Las levaduras son mas complejas que las bac terias, pero mucho mas pequenias y simples que las células animales o vegeta- les. Por ejemplo, la levadura hasta ahora mas estudiada Saccharomyces cere- visiae tiene un didmetro aproximado de 6 sim y contiene 12 millones de pares de bases de ADN (Fig. 1.9). Sin embargo, otros eucariotas unicelulares son células ‘mucho mas complejas, algunas contienen tanto ADN como el que contienen las células humanas (Tabla 1.2). Estos incluyen organismos especializados para de- sarrollar gran variedad de funciones, incluyendo la fotosintesis, el movimiento, y la captura e ingestién de otros organismos como alimento. La Amoaba proteus, por ejemplo, es una célula grande y compleja. Su volumen es 100.000 veces ‘mayor que el de E. coll, y su longitud puede sobrepasar 1 mm cuando la célula esta completamente extendida (Fig. 1.10). Las amebas son organismos muy méviles que utilizan extensiones citoplasmaticas, lamadas pseudopodia 0 pseudépodos, para moverse y envolver a otros organismos, incluyendo bacteCapitulo 1 © Vision global de la célula e investigacion celular @ 13 rias y levaduras, como alimento. Otros eucariotas unicelulares (las algas ver- des} contionen cloroplasios y son capaces de llevar a cabo la fotosintesis. ‘Los organismos multicelulares evolucionaron de los eucaritas unicelulares hace al menos 1.700 millones de afios. Algunos eucariotas unicelulares forman agregados multicelulares que parecen representar una transicién evolutiva des- de una tinica célula a un organismo multicelular. Por ejemplo, las células de muchas algas (por ej., el alga verde Volvox) se asocian unas con otras para formar colonias multicelulares (Fig. 1.11), las cuales se cree que son los precur- sores evolutivos de las plantas actuales. El aumento de la especializacion celu- lar determino la transicion de las colonias agregadas a los verdaderos organis- mos multicelulares. La continua especializacién y la division de las funciones entre las células de un organismo ha proporcionado la complejidad y diversidad observada en los muchos tipos de células que componen las plantas y animales de hoy, incluyendo a los seres humanos. Las plantas se componen de menos tipos de oélulas que los animales, pero cada tipo diferente de célula vegetal esta especializada para desarrollar funcio- nes especificas requeridas por el organismo en su conjunto (Fig. 1.12). Las células vegetales estan organizadas en tres sistemas de tejidos principales tejido basal, tide dérmico, y tejide vascular. El tejido basal contiene a las eélu- las del parénquima, que lleva a cabo la mayoria de las reacciones metabdlicas Figura 1.12 Microgratias épticas de células vegetales representativas. (A) Céluias del parénqui- rma, responsables de la fotosintesis y de otras reacciones metabolvas. (B) Células del co- lenquima, especializadas para dar soporte y endurecer las paredes celviares. (C) Células fepidermicas en la superficie de una hoja. (D) Los elementos de los vasos y las traqueidas ‘son células alargadas que se d'sponen entrentadas para formar los vasos del xilema. (A, Jack M, Bastsack/Visuals Uniimited: 8, A. J. KarpottVisuals Unimited; C, Alfred Owezarzak/ Biological Photo Service: D, Biophoto Associates/Scionce Source/Photo researchers Inc.) “ ® Figura 1.11 Alga verde colonial. Las células indi duales de Volvox forman colonias que consisten en esferas huecas en las que estan embebidas en una masa gelatinosa Cientos 0 miles de células. (Cabisco/Vi- ‘uals Unlimited.)14_@ Secciénl * Introduccién (Aj Boca Figura 1.13, IMicrogratias 6pticas de células anima- les representativas. (A) Células epitelia- ies dea boca (una lamina multstratiica- da gruesa), conducto bila, @intestno. (8) Los fibroblastos son células dal tejdo co- nectivo caracterizadas por su forma de huso alargado, (©) Erivocitas, granuloa tos, lnfoctos, y moneestos en sangre Mu= mana. ((A)y (Ali, G.W. Wilisiological Photo Service; (A)iii, Biophoto Associate- iPhoto Researchers, Inc: B, Don W. FawcetvVisvals Unlimited: G, G. W Wil Biological Photo Service | de la planta, incluyendo la fotosintesis. El tejido basal también contiene dos tipos de células especializadas (células del colénquima y células del escle- rénquima) que se caracterizan por paredes celulares gruesas y por proporcio- nar el soporte estructural de la planta. El tejido dérmico cubre la superficie de la planta y est compuesto por células epidérmicas, que forman un revestimien- to de proteccién y permiten la absorcidn de nutrientes. Finalmente, el sistema vascular (el xilema y floema) esta tormado por diversos tipos de células alarga- das, y es el responsable del transporte de agua y nutrientes a través de la planta, Las células presentes en animales son considerablemente mas diversas, que las de las plantas. El cuerpo humano, por ejemplo, esta compuesto por mas de 200 tipos de células diferentes, consideradas generalmente como compo- entes de los cinco tipos principales de tejidos: tejido epitelial, tejido conectivo, sangre, tejido nervioso, y tejido muscular (Fig. 1.13). Las células epiteliales forman laminas que cubren la superficie del cuerpo y delimitan los érganos in- (A) Conduct bar (A Intestino © nigCapitulo 1 * Visién global de la célulae investigacién celular @ 15 temos. Existen muchos tipos diferentes de células epiteliales, cada una espe- cializada para una funcién especifica, incluyendo proteccién (la piel), absorcion (por ¢j., las células del intestino delgado), y secrecién (por ej., células de la glandula salivar). El tejido conectivo incluye hueso, cartilago ¥ tejido adiposo, cada uno de los cuales esta formado por diferentes tipos de células (osteoblas- tos, condrocitos, y adipocitos, respectivamente). El tejido conestivo suelto que delimita con las capas epiteliales y rellena los espacios entre los drganos y tejidos del cuerpo esta formado por otra tipo de células, los fibroblastos. La sangre contiene diferentes tipos de células, que funcionan en el transporte del oxigeno (gl6bulos rojos, o eritrocitos), reacciones inflamatorias (granulocitos, monocitos, y macréfagos), y la respuesta inmune (linfocitos). El tejido ner- vioso esta formado por células nerviosas, 0 neuronas, que estan altamente especializadas en la trasmision de sefiales a través del cuerpo. Varios tipos de células sensoriales, como las células del ojo y el ofdo, estan atin mas especial: zadas en la recepcién de senales del ambiente. Finalmente, diferentes tipos de células musculares son responsables de la produccién de fuerza y movimiento. La evolucién de los animales claramente implica el desarrollo de una diversidad y especializacién considerable a nivel celular. Entender los mecanismos que controlan el crecimiento y diferenciacién de estas células tan complejas y espe- cializadas, desde la fertilizacién de un solo huevo, es uno de los mayores desa- fios de la biolog(a celular y molecular contemporanea Células como modelos experimentales La evolucién de las células actuales a partir de su antepasado comin tiene impor- tantes implicaciones para la biologia celular y molecular como ciencia experimen- tal. Debido a que las propiedades fundamentales de todas las células se han conservado durante la evolucién, los principios basicos obtenidos de los experi- mentos desarrollados con un solo tipo de oélula son generalmente aplicables a otras eélulas. Por otra parte, debido a la dversidad de las ceiulas actuales, muchos de los experimentos son mas faciles de llevar acabo con un tipo de células en lugar de otras. Se utizan diferentes tipos de cétuias y organismos como modelos experi- mentales para estudiar diversos aspectos de la biologia celular y molecular. Las caracteristicas de algunas de estas células que resultan particularmente venta- josas como modelos experimentales se discuten en las siguientes secciones, E, coli Debido a la simplicidad de su comparativa, las células procariotas (bacterias) son los modelos ideales para el estudio de los aspectos fundamentales de la biologia molecular y la bioquimica. La especie de bacterias mejor estudiada es E. coli, que ha sido el organismo por excelencia en la investigacién de los meca- nismos bésicos de la genética molecular. La mayoria de los conceptos actuales de la biologia molecular —incluyendo nuestra comprensién sobre la replicacién del ADN, el cédigo genético, la expresién génica y la sintesis de proteinas— derivan de los estudios sobre esta humilde bacteria. E. coli ha resultado especialmente itil para los biélogos moleculares debido a su rolativa simplicidad y la faclidad para propagarse y ser estudiada en el laborato- fio. El genoma de E. coli, por ejemplo, consiste en aproximadamente 4,6 millones de pares de bases y contiene aproximadamente unos 4.000 genes. El genoma humano es casi mil veces mayor (aproximadamente 3 billones de pares de bases) y/se cree que contiene 30-40,000 genes (véase Tabla 1.2). El tamafio pequefio del genoma de E. col (que se secuencié por completo en 1997) proporciona claras \entajas para el analisis genético. Los experimentos genéticos moleculares se ven facilitados por el répido creci- miento de E. colibajo condiciones de laboratorio predeterminadas. Bajo condicio- nes 6ptimas de cultivo, E, colise divide cada 20 minutos. Ademés, una poblacién16 @ Seccién| * Introduccién a Figura 1.14 Colonias de bacterias. Fotografia de Colonias de E. colicreciendo en ia superfi- ie de un medio de agar. (A. M. Siegel mar/Visuals Unlimited.) Figura 1.15 Microgratia electronica de Saccha- romyces cerevisiae. (David Schart/Pe- ter Amold, Inc.) clénica de E. coli, en la que todas las céluias se derivan de la division de una tinica célula original, se puede aislar facilmente como una colonia en crecimiento en un medio que contenga agar semisdlido (Fig. 1.14). Debido a que las colonias bacterianas que contienen mas de 10° células se pueden desarrollar en una no- che, la seleccion de variantes genéticas de una cepa de E. coli —por ejemplo, mutantes que son resistentes a un antibidtico, como la penicilina— es facil y rapida. La facilidad con la que estos mutantes pueden ser seleccionados y lizados result clave para el éxito de los experimentos que definen los principios basicos de la genética molecular, discutidos en el Capitulo 3, Las mezclas nuttitivas en las que E. colise divide mas rapidamente incluyen glucosa, sales, y varios compuestos organicos, tales como aminodcidos, vitami- nas, y precursores de dcidos nucleicos. No obstante, E. coii también puede crecer en un medio mucho mas simple que contenga solamente sales, una fuente de nitrégeno (como el amoniaco), y una fuente de carbén y energia (como la glucosa). En este medio, la bactoria crece un poco mas lenta (con un tiempo de divisién de unos 40 minutos) ya que tiene que sintetizar todos sus aminoacidos, nuclestidos, y otros compuestos organicos. La habilidad de E. coli para llevar a cabo estas reacciones biosintéticas en un medio simple ha hecho que sea extremadamente titi para el descubrimiento de los procesos bioquimi cos implicados. Por tanto, el rapido crecimiento y los simples requisitos nutricio- nales de E. coli han taciitado los experimentos fundamentales de la biologia molecular y la bioquimica. Levaduras ‘Aunque las bacterias han sido un modelo de valor incalculable para el estudio de muchas de las propiedades conservadas de las oélulas, éstas obviamente no pueden ser utilizadas para estudiar aspectos de la estructura y funcion celu- lares que son tinicos de eucariotas. Las levaduras, los eucariotas mas simples, aportan numerosas ventajas experimentales similares a las de E. coli. En con- secuencia, las levaduras han proporcionado un modelo crucial para el estudio de muchos de los aspectos fundamentales de la biologia celular eucariota. El genoma de la levadura que con mas frecuencia se ha estudiado, Saccha- romyces cerevisiae, consiste en 12 millones de pares de bases de ADN y con- tiene alrededor de 6.000 genes. Aunque el genoma de las levaduras es aproxi- madamente tres veces mayor que el de E. coli, resulta mas manejable que los genomas de eucariotas mas complejos, como el de los humanos. Incluso en su simplicidad, la célula de levadura exhibe las caracteristicas tipicas de las célu- las eucariotas (Fig. 1.15): Contiene un nicleo distinto rodeado por una membra- na nuclear, su ADN genémico esta organizado en 16 cromosomas lineales, y su citoplasma contiene un citoesqueleto y orgdnulos subcelulares. Las levaduras pueden crecer con facilidad en el laboratorio y pueden ser estudiadas bajo muchos de los mismos protocolos genéticos moleculares que han resultado satisfactorios con E. coli. Aunque las levaduras no se replican tan rapido como las bacterias, se dividen cada 2 horas y pueden crecer facilmente dando lugar a colonias a partir de una sola célula. Las levaduras se pueden utilizar en variedad de manipulaciones genéticas similares a aquellas que se pueden realizar utilizando bacterias. Estas caracteristicas han hecho a las levaduras las células eucariotas mas accesibles desde el punto de vista de la biologia molecular. Las levaduras mutan- tes han resultado importantes para la comprensién de muchos procesos funda~ mentales en eucariotas, incluyendo la replicacién del ADN, transcripcién, proce- samiento del ARN, ensamblaje de proteinas, y la regulacién de la division celular, tal y como discutiremos en capitulos siguientes. La unidad de la biologia celular molecular se presenta clara debido al hecho de que los principios generales de la estructura y funcion celulares revelados por los estudios de las levaduras se pueden aplicar a todas las células eucariotas,Capitulo 1 * Visién global de la célula e investigacion celular @ 17 Dictyostelium discoideum Dictyostelium discoideum es un moho celular del todo, el cual, como las levadu- ras, es un eucariota unicelular comparativamente simple. El genoma de Dictyoste- um es aproxmadamente diez veces mayor que el de E. coli—mas complejo que el genoma de las levaduras pero considerablemente mas simple que los genomas de los eucariotas superiores—. Ademés, Dictyostelium puede crecer con facilidad €n el aboratoro y resulta susceptible a una variedad de manipulaciones geneéticas. Bajo condiciones nutrtivas abundantes, Dictyostelium vive como una ame- ba de una nica célula, que se alimenta de bacterias y levaduras. Es una oélula movil, y esta propiedad ha hecho que Dictyostelium sea un modelo importante para el estudio de los mecanismos moleculares responsables de los movimien- tos de las células animales (Fig. 1.16). Por ejemplo, la introduccién de mutacio- nes apropiadas en Dictyostelium ha revelado las funciones de varios genes im- plicados en la movilidad celular. ‘tra de las caracteristicas interesantes de Dictyostelium es la habilidad de las células Unicas para agregarse formando estructuras multicelulares. Si el su- plemento adecuado de comida no esta disponible, las células se asocian para formar estructuras parecidas a lombrices llamadas babosas, cada una de ellas constituida por mas de 100.000 células que funcionan como una unidad. Dict- yostelium se siti por tanto en la frontera entre los organismos unicelulares y multicelulares, proporcionando un modelo importante para los estudios de se- jializacién celular e interacciones célula-célula. Caenorhabditis elegans Los eucariotas unicelulares Saccharomyces y Dictyostelium son modelos im- portantes para el estudio de las células eucariotas, pero entender el desarrollo de los organismos multicelulares requiere los andlisis experimentales de plan- tas y animales, organismos que son mucho mas complejos. El nematodo Cae- norhabditis elegans (Fig. 1.17) posee diversas caracteristicas notables que hacen que sea uno de los modelos mas utilizados en los estudios de desarrollo. animal y diferenciacion celular. Aunque el genoma de C. elegans (aproximadamente 100 millones de pares de bases) es mayor que los eucariotas unicelulares, es mas simple y més mane- jable que los genomas de la mayoria de los animales. Su secuencia ha sido de- terminada por completo, revelando que el genoma de C. elegans contiene aproxi madamente 19.000 genes —alrededor de tres veces mas que el niimero de genes de levaduras, y un quinto del ntimero de genes previsibles en humanos—. Biolbgicamente, C. elegans es también un organismo mulicelular relativamente simple: Las lombrices adultas solamente se componen de 959 células somati- ‘cas, y de 1.000 a 2.000 eélulas germinales. Ademés, C. elegans puede ser repro- ducida con facilidad y ser sometida a manipulaciones genéticas en el laboratorio. La simplicidad de C. elegans ha permitido que el curso de su desarrollo se haya estudiado en detalle mediante observacin microscépica. Estos analisis, Farge Hucws ‘va Reto Ano Tm Figura 1.16 Dyctiostelium discoideum. Estas {clo gratias muestran el movimiento de dos amebas durante 40 segundos. (Cortesia de David Knecht, University of Connect cut.) Figura 1.17 Caenorhabditis elegans. (De J. E. Suis- ton y H.R. Homvitz, 1977. Dev. Biol 56: 110.)18 @ Seccién| ¢ Introduccion Figura 1.18 Drosophila melanogaster. (Darwin Dale! Photo Researchers, Inc.) Figura 1.19 Arabidopsis thaliana. (Jeremy Burgess! Photo Researchers, Inc.) han trazado satistactoriamente el origen embrionario y el linaje de todas las células en la lombriz aduita. Los estudios genéticos también han identificado algunas de las mutaciones responsables de anormalidades del desarrollo, condu ciendo al aislamiento y descripcién de genes claves que controlan el desarrollo y diferenciacién del nematodo. Cabe destacar que se han encontrado similares genes que funcionan en animales complejos (incluyendo humanos), resultando C. elegans un importante modelo para los estudios del desarrollo animal. Drosophila melanogaster Al igual que C. elegans, la mosca de la fruta Drosophila melanogaster (Fig. 1.18) ha sido un modelo de organismo crucial en la biologia del desarrollo. El genoma de Drosophilaes similar al tamafio del genoma de C. elegans, pudiéndose man tener y reproducir facilmente en el laboratorio. Ademas, el corto ciclo de repro: duccién de Drosophila (unas 2 semanas) la convierte en un organismo muy iti para los experimentos genéticos. Muchos conceptos fundamentales de la gené- tica como la relacién entre genes y cromosomas— se derivaron de los estu- dios en Drosophila a principios del siglo veinte (véase el Cap. 3) Los exhaustivos analisis genéticos en Drosophila han descubierto muchos de los genes que controlan el desarrollo y la diferenciacidn, siendo los métodos actua- les de la biologia molecular los que han permitido el anaiisis en detalle de las fun- ciones de estos genes. Como consecuencia, los estudios de Drosophila han permi- tido avanzar en el entendimiento de los mecanismos moleculares que gobiernan el desarrollo animal, particularmente respecto a la formacién del cuerpo de organismos multicelulares complejos. Al igual que C. elegans, en vertebrados existen genes y mecanismos similares, validando el uso de Drosophila como uno de los mode: los experimentales mas importantes de la biologia contempordnea del desarrollo. Arabidopsis thaliana El estudio del desarrollo y la biologia molecular vegetal es un campo activo y en expansién de considerable importancia econémica al igual que de interés inte: lectual. Desde que los genomas de las plantas cubren una dimension de comple- jidad comparable a los genomas animales (véase la Tabla 1.2), un modelo optimo para el estudio del desarrollo vegetal seria un organismo relativamente simple Que poseyera alguna de las ventajas de C. elegans y Drosophila. La pequena planta con flor Arabidopsis thaliana (Fig. 1.19) recoge estos criterios, por lo que se utiliza como modelo para el estudio de la biologia molecular en plantas, Arabidopsis resulta notable por su genoma de tan s6lo unos 120 millones de pares de bases que contiene aproximadamente 15.000 genes diferentes —una complejidad similar a la de C. elegans y Drosophila. Ademés, la Arabidopsis es facil de cultivar en el laboratorio, y ya se han desarrollado métodos para su manipulacién genética molecular. Estos estudios han llevado a la identificacién de genes implicados en varios aspectos del desarrollo vegetal, como es el de. sarrollo de las flores. El analisis de estos genes indica la existencia de numero: sas similitudes, pero también diferencias notables, entre los mecanismos que controlan el desarrollo de vegetales y animales. Vertebrados Los animales mas complejos son los vertebrados, incluyendo a los humanos y otros mamiferos. El genoma humano se compone aproximadamente de 3 billones de pares de bases —alrededor de 30 veces mas que los genomas de C. elegans, Drosophila, 0 Arabidopsis— y contiene 30-40.000 genes. Ademés, el cuerpo hu- mano se compone de mas de 200 clases diferentes de tipos de células especializa- das. Esta complejidad hace que los vertebrados sean dificles de estudiar desde el punto de vista de la biologia celular y molecular, aunque la mayoria del interés de las ciencias biol6gicas nace del deseo de entender el organismo humano. Ademas, entender muchas de las cuestiones sobre la importancia de la prctica inmediataCapitulo 1 * Visién global de la célula e investigacién celular @ 19 (por ej., en medicina) deben estar basadas en estudios de células humanas (0 estrechamente relacionadas). Un avance importante en ol estudio de células humanas y de los mamiferos es el crecimiento de células aisladas en cultivo, don- de pueden ser manipuladas bajo condiciones de laboratorio contro- ladas. El uso de células cultivadas ha permitido realizar estudios sobre diversos aspectos de la biologia celular de los mamiferos, incluyendo experimentos que han iluminado los mecanismos de la replicacién del ADN, expresion génica, sintesis y procesamiento de proteinas, y divisién celular. Ademés, la habilidad de cultivar Células en un medio quimico definido ha permitido realizar estudios sobre los mecanismos de sefiales que normalmente controlan el crecimiento y la diferenciacién celular en el organismo intacto. Las propiedades especializadas de algunos tipos de células al- tamente diferenciadas han hecho de ellas importantes modelos para el estudio de aspectos detorminados de la biologia celular. Las células musculares, por ejemplo, estan altamente especializadas para realy pioura 1,20 zat la contracci6n, produciendo fuerza y movimiento. Debido a esta especializa- Huevos de la rana Xenopus laevis. cién, las células musculares son un modelo crucial para el estudio del movimiento _(Cortesia de Michael Danilchik y Kimberly celular @ nivel molecular. Otro ejemplo lo proporciona las células nerviosas Fay.) (neuronas), que estan especializadas en la conduccién de sefales electroqui- micas a larga distancia. En humanos, los axones de las células nerviosas pue- den tener mas de un metro de largo, y algunos invertebrados, como el calamar, tienen neuronas gigantes con axones de hasta 1mm de diametro. Debido a su estructura y funcidn tan especializadas, estas neuronas gigantes han sido im- portantes modelos en el estudio del transporte de iones a través de la membra- na, y del papel del citoesqueleto en el transporte de orgdnulos citoplasmaticos. La rana Xenopus laevis es un modelo importante para los estudios del de- sarrollo tomprano de los vertebrados. Los huevos de Xenopus son normalmen- te grandes células, con un diémetto aproximado de 1 mm (Fig. 1.20). Debido a {que estos huevos se desarrollan fuera de la madre, todas las etapas del desa- rrollo desde el huevo hasta el renacuajo se pueden estudiar con facilidad en el laboratorio. Ademas, los huevos de Xenopus se pueden obtener en grandes cantidades, facilitando e! analisis bioquimico. Gracias a estos avances técnicos, se ha utiizado Xenopus ampliamente en estudios sobre el desarrollo biologico y ha proporcionado importantes descubrimientos en los mecanismos que contro- lan el desarrollo, diferenciacion, y division celular del embrién. Elpez cebra (Fig, 1.21) posee numerosas ventajas para los estudios genéti- cos del desarrollo de los vertebrados. Este pequefio pez es facil de mantener en “ Figura 1.21 Pez cebra. (A) Embrion de 24 horas. (B) Pez adulto. (A, cortesia de Charles Kimmel, University of Oregon: B, cortesia de S. Kondo), ®20 © Seccién | * Introduccion Figura 1.22 EI ratén como modelo del desarrollo humano. Nifo y ratén muestran defectos similares en la pigmentacién (piebaldis- ‘mo) como resultado de mutaciones en un {gen necesario para la migracién normal de los melanocitos (células responsables de la pigmentacién de la piel) durante el desarrollo embrionario, (Cortesia de R.A. Fleischman, Markey cancer Center, Uni versity of Kentucky.) wd 1 laboratorio y se reproduce con rapidez. Ademés, los embriones se desarro llan fuera de la madre y son transparentes, por lo que las primeras etapas del desarrollo pueden ser observadas con clatidad. Se han desarrollado métodos poderosos para facilitar el aislamiento de las mutaciones que afectan al desa~ rrollo del pez cebra, consiguiendo la identificacién de varios cientos de estas mutaciones. Ya que el pez cebra es un vertebrado de facil estudio, promete ser el puente entre los humanos y los sistemas mas simples de invertebrados, como C. elegans y Drosophila Entre los mamiferos, el ratén es el mas manejable para los analisis genét: os, lo cual se faciltard con la reciente finalizacién de la secuenciacién del ge- noma del ratén. Aunque las dificultades técnicas de estudio de la genética del ratén (comparada, por ejemplo, a la genética de las levaduras 0 Drosophila) son inmensas, se han identificado varias mutaciones que afectan al desarrollo del rat6n, Mas importantes aun son, los recientes avances en la biologia molecular que han permitido la produccién de ratones transgénicos, en los que se han introducido genes mutantes especificos en la linea germinal del ratén, por lo que sus efectos en el desarrollo u otros aspectos de la funcién celular pueden ser estudiados en el contexto de! animal completo. La manejabilidad del ratén como modelo del desarrollo humano se corresponde con el hecho de que las mutaciones en genes homélogos dan lugar a defectos del desarrollo similares en ambas especies; el plebaldismo es un ejemplo claro (Fig. 1.22). Instrumentos de la biologia celular Como en todas las ciencias experimentales, la investigacién en biologia celular depende de los métodos de laboratorio que se puedan utilizar para estudiar la estructura y funcién celulares. Muchos avances importantes sobre el funciona- miento de las células han conducido directamente al desarrollo de nuevos mé- todos de investigacién. La apreciacién de los instrumentos experimentales dis- ponibles para el bidiogo celular resulta por tanto critica para entender el estado actual y futuro de las direcciones de este area de la ciencia que se mueve con tanta rapidez. Algunos de los métodos generales importantes de la biologia ce- lular estan descritos en secciones siguientes. Otros avances experimentales, que incluyen los métodos de la bioquimica y de la biologia molecular, se discuti- ran en capitulos posteriores.Capitulo 1 * Visién global de la célulae Microscopia éptica Debido a que la mayoria de las células son demasiado pequertas para ser ob- servadas a simple vista, el estudio de las células ha dependido primordialmente del uso del microscopio. Es mas, el descubrimiento real de las células surgio del desarrollo del microscopia: Robert Hooke fue el primero que acuno el termino de «célula» siguiendo sus observaciones de una pieza de corcho con un simple mmicroscopio dptico en 1665 (Fig. 1.23). Utiizando un microscopio que ampliaba los objetos hasta 300 veces su tamafo real, Antony van Leeuwenhoek, en 1670 ¥ afios posteriores, fue capaz de observar diferentes tipos de células, incluyen- do esperma, giébulos rojos, y bacterias. La propuesta de la teoria celular plan- teada por Matthias Schleiden y Theodor Schwann en 1838 debe tomarse como el nacimiento de la biologia celular contempordnea. Los estudios microscépicos de tejido vegetal por Schleiden y los de tejido animal por Schwann condujeron a la misma conclusién: Todos los organismos estén compuestos por células. Mas tarde, se reconocié que las células no se forman de novo sino que emergen Linicamente por la divisién de las células preexistentes. Por tanto, la célula con: siguid su actual reconocimiento como la unidad fundamental de todos los orga- riismos vives debido a las observaciones realizadas con el microscopio dptico E| microscopio optico continta siendo un instrumento basico para los bidlo- {0s celulares, que con mejoras técnicas permiten la visualizacién de los deta iles aumentados de la estructura celular. Los microscopios dpticos contemporé- ines son capaces de aumentar los objetos hasta unas mil veces. Dado que la imayoria de las células se encuentran entre 1 y 100 jm de didmetro, pueden ser observadas en el microscopio dptico, como pueden ser también algunos de los ‘orgénulos subcelulares, como el nticleo, los cloroplastos, y las mitocondiias. Sin embargo, el microscopio Optico no es lo suficientemente poderoso para ob- servar pequerios detalles de la estructura celular, cuya resolucién —ia capaci- dad de un microscopio para distinguir objetos separados por pequefas distar cias— es mucho més importante que el aumento. Las imagenes se pueden aumentar tanto como se desee (por ejemplo, mediante la proyeccion en una pantalla grande), pero tal aumento no incrementa el nivel de detalle que se puede observar. Ellimite de resolucién del microscopio dptico es aproximadamente de 0.2 jim; dos objetos separados por menos de esta distancia aparecen como una tinica imagen, en lugar de distinguirse una de otra. Esta limitacién tedrica de la mi- investigacion celular @ 21 Figura 1.23 Estructura celular del corcho. Una re- produccién de un dibujo de Robert Hooke de una Kimina de corcho examinada con tn microscopio dptico. Las «células» que Hooke obserus fueron en realidad las pa- redes celulares que quedan cuando las células han muerto hace tiempo. Figura 1.24 Apertura numérica. La luz se enfoca en la muestra mediante la lente condensado- ray se recoge en la lente del objetivo del micrascopio. La apertura numénca esta determinada por el angulo del cono de la luz-que entra en el objetivo de la lente (3) y por el indice de refraccién del medio (nor: malmente agua o aceite) entre a lente y a muestra,