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Ensayos de germinacin y anlisis de viabilidad

y vigor en semillas

Technical Report January 2008

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Isabel Rodriguez-Quilon Gilles Adam

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nuevo agric 2 NOV 25/11/08 12:19
[Tecnologa]
[ SEMILLAS HORTCOLAS ]
Ensayos de germinacin y anlisis
de viabilidad y vigor en semillas
Isabel Rodrguez
Guilles Adam
Jose Mara Durn
Departamento de Produccin
Vegetal: Fitotecnia. Escuela
Tcnica Superior de Ingenieros
Agrnomos. Universidad
Politcnica de Madrid
La eleccin de la semilla
constituye una de las
primeras decisiones que ha
de adoptar el agricultor
cada ao, a la hora de
decidir qu variedad debe
sembrar y la calidad de
semilla a utilizar. En los
ltimos cincuenta aos se
han producido importantes
avances en el mundo de las
semillas que han
contribuido a la evolucin
hacia una agricultura cada
vez ms tecnificada, con una
reduccin sustancial de la
mano de obra, unida a un
empleo cada vez ms
importante de maquinaria,
abonos, fitosanitarios y
nuevas variedades.
836 Agricultura I Noviembre 08
Pgina 836
as semillas de los cultivos hort-
L colas en particular suelen tener
un coste elevado, por lo que el
agricultor se debe asegurar de que la
germinacin, nascencia y evolucin de
la plntula sean correctas.
Los ensayos de germinacin permiten
evaluar el poder germinativo de las se-
millas y estimar su valor potencial para
la siembra en campo.
El ensayo topogrfico al tetrazolio,
que tambin explicamos en este artcu-
lo, es un test bioqumico, rpido de rea-
lizar, que permite estimar la viabilidad
de las semillas con independencia de
otros factores externos. Este test facilita
datos muy interesantes, sobre todo
cuando se combina con un ensayo de
germinacin.
[ Concepto de germinacin
Desde el punto de vista agronmico, se
considera que una semilla ha germina-
do cuando a partir de ella se origina una
planta adulta capaz de alcanzar la fase
reproductora; es decir, capaz de produ-
cir nuevas semillas (Durn y Prez,
1984). La International Seed Testing
Foto 1. Caja de plstico transparente para ensayos de germinacin en laboratorio con
semillas de lechuga (Lactuca sativa L.) en su interior. Las semillas se colocan,
utilizando unas pinzas, sobre papel de filtro con una cuadrcula numerada, que
permite identificar cada semilla.
Asociation (ISTA), asociacin interna-
cional de entidades relacionadas con el
anlisis de semillas cuya actividad prin-
cipal consiste en desarrollar mtodos y
servicios para dicho fin, considera el
proceso de germinacin de una semilla
como el establecimiento de un estado
metablicamente activo, manifestado fi-
siolgicamente por la divisin celular y
por la diferenciacin (ISTA, 2003). La
primera expresin de este proceso es la
emergencia de la radcula.
[ Ensayos de germinacin
En los ltimos cincuenta aos se han
producido importantes avances en el
mundo de las semillas que han contri-
buido a la evolucin hacia una agricul-
tura cada vez ms tecnificada, con una
reduccin sustancial de la mano de
obra, unida a un empleo cada vez ms
importante de maquinaria, abonos, fito-
sanitarios y nuevas variedades. Las se-
millas de los cultivos hortcolas en parti-
cular suelen tener un coste elevado, por
lo que el agricultor se debe asegurar de
que la germinacin, nascencia y evolu-
cin de la plntula sean correctas.
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Desde el punto de vista agronmico, se
considera que una semilla ha germina-
do cuando a partir de ella se origina una
planta adulta capaz de alcanzar la fase
reproductora; es decir, capaz de produ-
cir nuevas semillas (Durn y Prez,
1984). La International Seed Testing
Asociation (ISTA), asociacin interna-
cional de entidades relacionadas con el
anlisis de semillas cuya actividad prin-
cipal consiste en desarrollar mtodos y
servicios para dicho fin, considera el
proceso de germinacin de una semilla
como el establecimiento de un estado
metablicamente activo, manifestado fi-
siolgicamente por la divisin celular y
por la diferenciacin (ISTA, 2003). La
primera expresin de este proceso es la
emergencia de la radcula.
Los test o ensayos de germinacin
permiten determinar el potencial
de germinacin mximo de un lote
de semillas (ISTA, 2005) y estimar su
valor potencial para la siembra en
campo. Estos test de germinacin
realizados en laboratorio ofrecen
una primera informacin respecto
a la calidad de las semillas. Sin em-
bargo, hay que sealar que, en mu-
chos casos, los resultados que se
obtienen en condiciones controla-
das de laboratorio difieren de los
obtenidos en el campo.
Preparacin del ensayo
El test de germinacin estndar reco-
ge el porcentaje de plntulas normales
obtenido tras un anlisis germinacin.
Es una prueba que informa sobre las
semillas que ms rpidamente han rea-
nudado la actividad metablica y el cre-
cimiento propios de la germinacin
(Peretti, 1994).
Consiste bsicamente en colocar las
semillas sobre un sustrato adecuado,
humedecerlas, y controlar las condi-
ciones de incubacin durante un cier-
to perodo de tiempo, durante el cual
se realizan conteos de germinacin,
observando el nmero de semillas que
han germinado. Se pueden evaluar
tambin las plntulas obtenidas, iden-
tificando el nmero de plntulas nor-
males y anormales.
Los ensayos de germinacin pueden
realizarse utilizando innumerables
mtodos y condiciones. Uno de los
procedimientos ms habituales a la
hora de realizar un ensayo de germi-
nacin es colocar las semillas en el in-
Foto 2. Semillas y plntulas de lechuga (Lactuca sativa L.) durante un ensayo de
germinacin: a, semillas colocadas sobre papel de filtro el da de la siembra; b,
plntulas tres das despus de la siembra; c, cinco das despus de la siembra y d,
siete das despus de la siembra.
terior de una caja de vidrio o plstico
transparente, sobre un soporte que
permita una rpida y abundante re-
tencin de agua, como por ejemplo
papel de filtro, arena o medios gelifi-
cados a base de agar, (ver Foto 1).
Se suele considerar que una semilla
ha germinado cuando la radcula al-
canza una longitud mayor de 3 mm
(ISTA, 2005). Para controlar las con-
diciones de humedad, temperatura e
iluminacin durante la incubacin,
las cajas de germinacin se introdu-
cen en germinadores termostatizados,
que permiten regular estos parme-
tros segn las exigencias especficas
de cada especie.
Las temperaturas ms corrientemen-
te utilizadas oscilan entre 10 y 35 C.
Cuando se utilizan temperaturas alter-
nas dentro del ciclo diario, se recomien-
da que la oscilacin trmica no sea infe-
rior a 10 C, coincidiendo la temperatu-
ra ms elevada con el perodo de luz en
el caso de utilizar cmaras con ilumina-
cin. La ISTA establece una serie de re-
comendaciones para cada especie sobre
el sustrato a utilizar, la temperatura de
germinacin, los das de conteo y, en al-
gunos casos, otras recomendaciones de
tratamientos especficos para favorecer
la germinacin, (ver Foto 2).
Curvas e ndices de germinacin
Frente a la sencillez que supone colo-
car a germinar un lote de semillas, la
expresin de los resultados que se ob-
tienen es mucho ms complicada. Tras
[Tecnologa]
un ensayo de germinacin, el analista
puede encontrar semillas que germinan
perfectamente, dando lugar a plntulas
normales, otras que al desarrollarse
presentan alguna anomala y aquellas
que al finalizar el ensayo no han sido
capaces de germinar.
La representacin del nmero total o
ms frecuentemente del porcentaje de
semillas germinadas, frente al tiempo
transcurrido desde la siembra, consti-
tuye una curva de germinacin. Estas
proporcionan toda la informacin que
es posible solicitar una vez realizado un
ensayo de germinacin, (ver Figura 1).
Sin embargo, para expresar los re-
sultados obtenidos lo ms frecuente
es recurrir al clculo de ndices de
germinacin, que nos permiten esti-
mar la calidad del lote y comparar
cuantitativamente diferentes lotes de
semillas o muestras sometidas a dife-
rentes tratamientos.
A continuacin se describen algunos
de los ndices ms comnmente emple-
ados para la expresin de los resultados
de los ensayos de germinacin:
Poder germinativo: es el porcentaje
de semillas que germina en las con-
diciones ms favorables (Cme,
1970). Se dice que una semilla ha
perdido su poder germinativo cuan-
do es incapaz de germinar, cualquie-
ra que sean las condiciones de germi-
nacin y los tratamientos realizados.
Por lo tanto, se trata del porcentaje
de semillas vivas. Este concepto es
sumamente importante en la prcti-
Noviembre 08 I Agricultura 837
nuevo agric 2 NOV 25/11/08 12:19 Pgina 838

[Tecnologa]

Figura 1: El ndice de Timpson (It) queda

Curvas de germinacin de tres lotes de semillas (A, B y C). El lote definido mediante la frmula
de mejor calidad es el lote A, ya que presenta el menor perodo de (DURN y PREZ, 1984):
latencia y una capacidad de germinacin prxima al 100%.

considerando:
J=D-1
donde N i y D i tienen el mismo
significado que para Vg.
T = ltimo da de conteo de ger-
minacin (segn especies, ver Ta-
bla 1).
El coeficiente de uniformidad
(Cu) queda definido por la ecua-
cin (DURN y PREZ, 1984):

donde:
N i = Nmero de semillas germi-
nadas el da Di.
D i = Nmero de das transcurri-
ca, especialmente cuando se trata de Coeficiente de velocidad de germina- dos desde la siembra.
determinar el valor comercial de un cin (Vg): Queda definido por la integra- D = Nmero de das despus de
lote de semillas. No obstante, el po- cin de los tiempos de germinacin de ca- la siembra elegido para calcular
der germinativo resulta muchas ve- da semilla y se calcula mediante la siguien- la uniformidad de germinacin.
ces muy difcil de determinar con ab- te frmula:
soluta precisin, ya que las mejores La velocidad de germinacin y el
condiciones de germinacin, adems T50 son los ndices ms utilizados.
de poder variar de un lote a otro, ja- La interpretacin de un ensayo de
ms pueden ser conocidas a priori. germinacin es la principal tarea
Precisamente por este motivo se pre- del analista de semillas. Un ensayo
fiere muchas veces hablar de capaci- Ni = Nmero de semillas germina- de germinacin no es solo concluir
dad de germinacin. das el da Di. un porcentaje de germinacin al
Capacidad de germinacin: es el D i = Tiempo transcurrido desde la final del ensayo. Hoy en da, las
porcentaje de germinacin mximo siembra, en das. formulas e ndices descritos per-
que se obtiene en unas condiciones La velocidad de germinacin co- miten describir de forma muy pre-
previamente definidas (Durn y rresponde al inverso del tiempo me- cisa la dinmica de germinacin,
Prez, 1984). dio de germinacin multiplicado por permitiendo conocer de una mues-
Velocidad de germinacin: Cme 100. tra de semillas.
(1970) define la velocidad de germi-
nacin como el tiempo que necesi-
Tabla 1:
tan las semillas para germinar. De
Mtodos de germinacin recomendados por la ISTA (2005) para
acuerdo con diversos autores, la ve-
las especies hortcolas de mayor importancia econmica en Espaa.
locidad de germinacin puede ex-
Sustrato: A, arena; EP, entre papel; PP, papel plisado y SP, sobre
presarse con diferentes ndices:
papel
- Porcentaje de germinacin: Por-
centaje de semillas germinadas has-
ta un momento determinado. NOMBRE RECOMENDACIONES ISTA
- Perodo de latencia: Tiempo nece- FAMILIA
BOTNICA
sario para que se produzca la ger- CONTEOS TRATAMIENTOS
COMN CIENTFICO C SUSTRATO
minacin de la primera semilla des- (DAS) ESPECFICOS
de la siembra.
- Tiempo de germinacin: Tiempo Cebolla Allium cepa L. Asteraceae 20; 15 SP, EP y A 6 y 12 Preenfriamiento
necesario para conseguir un porcen- Lechuga Lactuca sativa L. Asteraceae 20 SP, EP 4y7 Preenfriamiento
taje de germinacin determinado.
Meln Cucumis melo L. Cucurbitaceae 20-30; 15 PP, EP y A 4y8 -
Por ejemplo, el tiempo necesario pa-
Capsicum KNO3
ra alcanzar el 50 % (T 50 ) 25 % Pimiento Solanaceae 20-30 PP, EP y A 7 y 14
annuum L.
(T25) de la capacidad germinativa.
Lycopersicum KNO3
- Tiempo medio de germinacin Tomate Solanaceae 20-30 SP, EP y A 5 y 14
lycopersicum L.

838 Agricultura I Noviembre 08

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El test del Tetrazolio,
anlisis de viabilidad y
vigor
El hecho de que una semilla no ger-
mine no siempre quiere decir que se
trate de una semilla muerta. A me-
nudo, en semillas hortcolas, se re-
curre a ensayos de germinacin para
determinar la viabilidad de un lote
de semillas, pero, en realidad, los re-
sultados de estos ensayos pueden
conducirnos a conclusiones equvo-
cas cuando lo que queremos averi-
guar es si la semilla es viable o no.
Esto se debe a que existen semillas
viables que pueden estar afectadas
por algn tipo de dormicin que im-
pida su germinacin
Qu es?
En 1949, Lakon sugiri por primera
vez un ensayo directo para determi-
nar la viabilidad de las semillas de
maz. se trataba del ensayo topogrfi-
co al tetrazolio, comnmente llamado
ensayo del TZ o TZ test. Un ao ms
tarde, el mismo autor extenda esta
tcnica a la determinacin del vigor
en semillas de cereales como el trigo,
el arroz, la cebada o la avena.
El ensayo topogrfico al tetrazolio
es un anlisis bioqumico basado en
las reacciones de oxidacin-reduc-
cin que se producen en las clulas
vivas del embrin u otros tejidos de
la semilla al entrar en contacto con
la sal de tetrazolio. Las clulas vivas
poseen unas enzimas, denominadas
hidrogenasas, que estn implicadas
en la respiracin celular, y son capa-
ces de reaccionar con la solucin de
tetrazolio, formando un compuesto
insoluble de color rojo (formazn)
que permite identificarlas, diferen-
cindolas de las clulas muertas que
pueden encontrarse en la semilla
(ISTA, 2004).
Se trata de un mtodo rpido que, en
menos de 48 h, permite obtener resul-
tados sobre la viabilidad de las semi-
llas, pudindose obtener un avance de
tales resultados en menos tiempo (24
h) si las semillas se incuban a mayor
temperatura (ISTA, 1993).
Vigor y viabilidad
Semillas viables son aquellas que
tienen la capacidad de de transfor-
marse en plntulas aceptables, inclu-
[Tecnologa]
so bajo condiciones no favorables. El cha o al transporte, por fro o ata-
vigor se puede definir como el poten- ques de insectos, entre otros).
cial o capacidad de la semilla durante
la germinacin y emergencia de la Fundamento
plntula. Las semillas de alto vigor se
conservan ms tiempo, germinan ms Para llevar a cabo la prueba de viabi-
rpido y resisten condiciones adver- lidad, las semillas se tratan con una
sas de germinacin. disolucin de cloruro o bromuro de
El ensayo del TZ es til para deter- 2,3,5-trifeniltetrazolio, de modo que
minar, tras haber realizado una penetre en las clulas y reaccione con
prueba de germinacin, la causa que las enzimas hidrogenasas implicadas
explica por qu una muestra presen- en la respiracin celular que tiene lu-
ta un alto porcentaje de semillas que gar en los tejidos vivos. Como conse-
no son capaces de germinar. Permite cuencia de la reaccin, el tetrazolio se
conocer si las semillas presentan transforma en un compuesto de color
dormicin, si estn inhibidas o si es- rojo, el formazn, insoluble en agua,
tn deterioradas y no van a ser capa- estable y no difusible, de modo que
ces de germinar. Para analizar el vi- aquellas zonas donde ha habido reac-
gor de un lote mediante el TZ, se re- cin permanecern teidas de color
quiere disponer de un patrn de tin- rojo; por lo tanto la tincin con tetra-
cin de las estructuras vitales de la zolio permite diferenciar las clulas
semilla por el tetrazolio. vivas por su actividad respiratoria.
Las aplicaciones del ensayo del TZ Aquellas clulas que quedan dbil-
han sido ampliadas recientemente mente coloreadas (tonalidad rosada),
ms all de la determinacin de la son clulas que tienen disminuida su
viabilidad o vigor de las semillas. actividad respiratoria y por consi-
Ayala et al. (2002) extendieron este guiente menor actividad hidrogenasa.
mtodo para estimar la contamina-
cin de semillas de arroz por semi- Metodologa
llas transgnicas. Se utiliza tambin
en leguminosas para diagnosticar la El ensayo del tetrazolio requiere
causa del deterioro de las semillas seguir varios pasos, imprescindibles
(daos mecnicos debidos a la cose- para todos los ensayos de viabilidad,
Figura 2:
Esquema de los cortes realizados para preparar las semillas de
cebolla (Allium cepa L.) para la tincin al tetrazolio (TZ): 1, corte
longitudinal, en su totalidad y casi completamente en las proximida-
des de la superficie plana; 2, corte de los extremos de la semilla, sin
daar la radcula o los cotiledones y 3, corte lateral, en toda su pro-
fundidad desde el centro de la semilla hacia afuera, hasta la zona
situada entre la radcula y los cotiledones.
Noviembre 08 I Agricultura 839
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[Tecnologa]
Foto 3. Anatoma de una semilla de cebolla (Allium cepa L.) en un test de viabilidad.
El color rojo se debe a la transformacin del tetrazolio en formazn en los tejidos
vivos. A la hora de analizar la viabilidad y el vigor de la semilla cada una de las
estructuras tiene su funcin y su importancia.
independientemente de la especie
analizada. Esas etapas son:
1. Preacondicionamiento. Su objeti-
vo es promover una tincin fiable y
aumentar la calidad de la evalua-
cin de los resultados mediante
una prehumidificacin, que facili-
tar los cortes posteriores y la eli-
minacin de las estructuras inne-
cesarias de la semilla, permitiendo
de esta forma la adecuada penetra-
cin de la disolucin de TZ.
2. Preparacin para la tincin. La
cubierta de la semilla puede ser
una barrera para la difusin de la
disolucin de tetrazolio. El princi-
pal objetivo de esta etapa es preci-
samente asegurar la oportuna y
adecuada penetracin del tetrazo-
lio en los tejidos vitales de la semi-
lla mediante perforaciones y cortes
superficiales. Una buena prepara-
cin permite acelerar la tincin y
facilita la evaluacin de los resulta-
dos. Para las semillas de cada espe-
cie, el mtodo de preparacin ms
adecuado depende del tamao y la
forma de la semilla, de la textura
de la cubierta seminal, la localiza-
cin, tamao y forma del embrin
y otras caractersticas de la semilla
(Figura 2).
840 Agricultura I Noviembre 08
3. Tincin. Consiste en poner en con-
tacto la sal de tetrazolio con los te-
jidos de la semilla, para que pene-
tre y se difunda a travs de los mis-
mos. En los tejidos vivos se produ-
ce la reaccin que hace que estos se
tian de color rojo. La tincin posi-
bilita el reconocimiento y la situa-
cin precisa de tejidos normales,
dbiles pero vivos, crticamente
dbiles o muertos, en funcin de la
tincin. Los embriones y los tejidos
nutritivos vivos, en caso de existir,
se tien de rojo intenso.
4. Preparacin para la evaluacin.
Depende siempre de las tcnicas de
preparacin seguidas en las etapas
anteriores. La forma de realizar un
corte o incisin inicial en la cubierta
seminal a menudo puede modificar-
se fcilmente, reduciendo en etapas
posteriores del ensayo tanto el tiem-
po de preparacin como el tiempo
necesario para la evaluacin.
5. Evaluacin. Su rigor depende en
gran parte de las precauciones que
se tomen durante las primeras fa-
ses del ensayo. Hay que evitar da-
ar la semilla en todo momento, ya
que puede que estos daos no se
distingan de los originales de la se-
milla. La capacidad del analista en
la observacin de los detalles y en
el anlisis cuidadoso de la grave-
dad de las alteraciones del tejido
es, asimismo, un factor muy im-
portante para lograr una evalua-
cin fiable.
Evaluar las semillas
mediante el test
Antes de realizar la evaluacin, es
necesario conocer la anatoma y la
funcin de cada estructura en la se-
milla. En este sentido, la integridad
del embrin es primordial. Cual-
quier dao que pueda sufrir el em-
brin conlleva normalmente a la fal-
ta de germinacin o a la formacin
de plntulas anormales poco viables
y vigorosas. El endospermo (tejido
que contiene las sustancias de re-
serva de algunas semillas) tambin
interviene sustancialmente en el
proceso de germinacin, as como
en la formacin de la plntula (Fo-
tos 3 y 4).
La evaluacin de cada semilla se
basa en mltiples factores, a saber:
turgencia y aspecto general de los
tejidos, fracturas, tejidos sin em-
brin, daos causados por insectos,
anormalidades y otras causas que
puedan debilitar la semilla o hacer-
la no viable. El tamao, localizacin
y naturaleza de los daos y otros de-
fectos en o entre las estructuras son
factores decisivos para determinar
el nivel de viabilidad.
Cundo realizar el
ensayo del tetrazolio?
Los test o ensayos de germinacin
en laboratorio nos ofrecen una pri-
mera informacin respecto a la cali-
dad de las semillas. Sin embargo,
puede ocurrir que las semillas de un
lote presenten un porcentaje de ger-
minacin muy reducido durante el
ensayo. Pero esto no significa que
las semillas estn muertas o que no
vayan a germinar en campo. A me-
nudo, estas semillas que no germi-
nan estn en estado de dormicin,
es decir, a pesar de encontrarse bajo
condiciones ptimas para su germi-
nacin, no son capaces germinar.
Existen varias causas de dormicin
o latencia. Este fenmeno es comn
en especies hortcolas, aunque la do-
mesticacin y la seleccin de las es-
pecies cultivadas han hecho que mu-
chas de ellas perdieran esta capaci-
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[Tecnologa]

dad, que tena originalmente una

funcin ecolgica muy importante.
La relacin entre viabilidad, germi-
nacin y latencia puede entenderse
del siguiente modo:

Semillas viables =
Semillas germinadas +
Semillas latentes

En especies hortcolas es frecuente

que existan problemas de latencia,
por lo que un ensayo de germinacin
convencional no nos proporciona
una informacin fiable sobre viabili-
dad. En estos casos se necesita com-
binar el ensayo de germinacin con
el test del tetrazolio. Los datos que
nos proporcionan los resultados per-
miten entonces definir la cantidad
de semillas viables no latentes (que
germinan), semillas viables pero la-
tentes y semillas no viables.
El ensayo del tetrazolio, cuando no
se combina con un ensayo de germi-
nacin, solo permite definir el por-
centaje de semillas viables, es decir,
la tasa mxima de germinacin que
se puede obtener, sin tener en cuen-
ta las semillas dbiles o latentes que
no germinarn en condiciones de Foto 4. Semillas de cebolla (Allium cepa L.) interpretadas en el test del
campo. tetrazolio: 1, semilla de tincin roja viable y de alto vigor; 2, Semilla de tincin
rosa viable y de bajo vigor; 3 semilla sin teir no viable y 4, semilla inviable
cuyo embrin est inmaduro.
Ventajas y desventajas del
ensayo del tetrazolio
Permite examinar caractersti- determinar la proporcin de semi-
Una de las ventajas fundamentales cas del vigor de las semillas tales llas latentes en un lote. Adems este
de este ensayo es la rapidez en la ob- como la integridad fsica de la se- anlisis no permite detectar la pre-
tencin de resultados. En menos de milla y de las membranas y la ac- sencia de hongos.
24 h se puede conocer la viabilidad tividad de enzimas claves. Generalmente se recurre al test del
de un lote de semillas. Adems es un tetrazolio cuando se trabaja con se-
ensayo que no precisa mucho mate- Su principal desventaja es que se millas grandes, cuando se sospecha
rial para su realizacin. El ensayo trata de un ensayo muy laborioso, que existen problemas de dormicin
est normalizado para un gran n- que precisa ser realizado por analis- y/o cuando el ensayo de germina-
mero de especies y, como hemos di- tas cualificados para que los resulta- cin requiere un largo periodo para
cho anteriormente su utilidad se dos obtenidos sean fiables. Adems, completarse. De lo contrario, gene-
puede extender al anlisis del vigor la determinacin e interpretacin de ralmente se recurre al ensayo de
con mucha facilidad, ya que slo re- los resultados pueden resultar sub- germinacin, aunque no proporcio-
quiere dividir las semillas viables en jetivas en algunos casos. Es un ensa- ne de forma directa datos sobre via-
categoras de alto y bajo vigor. El yo muy difcil de realizar cuando se bilidad. El test topogrfico del tetra-
ensayo del tetrazolio, adems de trabaja con semillas pequeas, como zolio facilita datos muy interesan-
procurar la tasa de semillas invia- es el caso de muchas especies hort- tes, sobre todo cuando se combina
bles, permite conocer las causas del colas. No debemos olvidar que cada con un ensayo de germinacin.
deterioro de las semillas muertas. una de las semillas debe prepararse

La ISTA (ISTA, 2003b) establece

como principales ventajas del
ensayo de vigor al tetrazolio
que:
Es aplicable a todo tipo de se-
millas.
No depende de factores externos.
y ser evaluada individualmente por
el analista. Por eso, para el ensayo
del tetrazolio se emplean general-
mente muestras ms pequeas de
semillas que en ensayos convencio-
nales de germinacin, menos labo-
riosos. Realizado solo, el ensayo del
topogrfico al tetrazolio no permite
[ Bibliografa
Queda a disposicin del lector en
las siguientes direcciones de correo
electrnico: redaccion@editoriala-
gricola.com, josem.duran@upm.es y
Isabel.rodriguez.agronomos@upm.
es

842 Agricultura I Noviembre 08

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