Objetivos

Que es un espectrofotmetro.

Conocer la funcin del espectrofotmetro.

Como se maneja el espectrofotmetro.

Cuidados del espectrofotmetro.

Trazado de curvas espectrales.

Que parmetro se usa en las curvas espectrales.

Que indica una curva espectral.

Para que sirve una curva espectral.

Fundamentos teo ricos

Mtodo Espectrofotomtrico.

Que es un espectrofotmetro.

Tipos de Espectrometra.

mtodos pticos espectroscpicos

Introduccin a los mtodos pticos espectroscpicos.

Espectrometra de absorcin molecular.

Fundamentos de la absorcin molecular.

Leyes cuantitativas de la absorcin molecular.

Clculos de absorbancia.

Trazado de curvas espectrales.

Aplicaciones analticas.
Introduccio n

Desde hace muchos aos se ha usado el color como ayuda para reconocer las
sustancias qumicas; al reemplazar el ojo humano por otros detectores de
radiacin se puede estudiar la absorcin de sustancias, no solamente en la
zona del espectro visible, sino tambin en ultravioleta e infrarrojo.

Se denomina espectrofotometra a la medicin de la cantidad de energa

radiante que absorbe un sistema qumico en funcin de la longitud de onda de
la radiacin, y a las mediciones a una determinada longitud de onda.

La teora ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo

de cuantos de energa llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda
est asociada con los fotones, cada uno de los cuales posee una cantidad
definida de energa
Espectrofotometra
La espectrofotometra es un mtodo analtico que utiliza los efectos de la
interaccin de las radiaciones electromagnticas con la materia (tomos y
molculas) para medir la absorcin o la transmisin de luz por las sustancias.

La espectrofotometra se refiere a los mtodos, cuantitativos, de anlisis

qumico que utilizan la luz para medir la concentracin de las sustancias
qumicas. Se conocen como mtodos espectrofotomtricos y, segn sea la
radiacin utilizada, como espectrofotometra de absorcin visible (colorimetra),
ultravioleta, infrarroja

En espectroscopia el trmino luz no slo se aplica a la forma visible de

radiacin electromagntica, sino tambin a las formas UV e IR, que son
invisibles. En espectrofotometra de absorbancia se utilizan las regiones del
ultravioleta (UV cercano, de 195-400 nm) y el visible (400-780 nm).

La regin UV se define como el rango de longitudes de onda de 195 a 400 nm.

Es una regin de energa muy alta. Provoca dao al ojo humano as como
quemadura comn. Los compuestos con dobles enlaces aislados, triples
enlaces, enlaces peptdicos, sistemas aromticos, grupos carbonilos y otros
heterotomos tienen su mxima absorbancia en la regin UV, por lo que sta
es muy importante para la determinacin cualitativa y cuantitativa de
compuestos orgnicos. Diversos factores -como pH, concentracin de sal y el
disolvente- que alteran la carga de las molculas, provocan desplazamientos
de los espectros UV.

La fuente de radiacin ultravioleta es una lmpara de deuterio.

En la regin visible apreciamos el color visible de una solucin y que

corresponde a las longitudes de onda de luz que transmite, no que absorbe. El
color que absorbe es el complementario del color que transmite.

Por tanto, para realizar mediciones de absorcin es necesario utilizar la

longitud de onda en la que absorbe luz la solucin coloreada.

La fuente de radiacin visible suele ser una lmpara de tungsteno y no

proporciona suficiente energa por debajo de 320 nm.

Qu es un espectrofotmetro?

Un espectrofotmetro es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un

haz de Radiacin Electromagntica (REM), comnmente denominado Luz,
separndolo en facilitar la identificacin, calificacin y cuantificacin de su
energa. Su eficiencia, resolucin, sensibilidad y rango espectral, dependern
de las variables de diseo y de la seleccin de los componentes pticos que lo
conforman.

Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida. El

color de las sustancias se debe a que estas absorben ciertas longitudes de
onda de la luz blanca que incide sobre ellas, y slo vemos aquellas longitudes
de onda que no fueron absorbidas.

El espectrofotmetro mide la absorbancia de una muestra en los espectros de

luz ultravioleta y visible (200 a 850 nm). El largo de onda es determinado por un
prisma que descompone el rayo de luz de acuerdo al largo de onda escogido.
Luego la luz pasa por una hendidura que determina la intensidad del haz. Este
haz atraviesa la muestra y llega a un tubo fotogrfico, donde es medido. La
cantidad de luz que atraviesa la muestra es el porcentaje (%) de transmitancia.
Podemos usar esta unidad o cambiarla a absorbancia usando la siguiente
ecuacin.
%T = - Log Abs.
El espectrofotmetro nos puede dar ambos valores a la misma vez, ahorrando
la necesidad de hacer los clculos. (Transmitancia= cantidad de luz que
atraviesa la mezcla).

Una caracterstica del instrumento es la necesidad de blanquear el aparato

antes de cada lectura. Esto se hace colocando una cubeta con una solucin
control que tenga todos los componentes de la reaccin menos la sustancia
que va a ser medida en el instrumento y ajustando la lectura a cero
absorbancia.

El propsito de esto es eliminar el registro de absorbancia (background) que

puedan presentar los dems componentes de la reaccin a ese largo de onda
particular. Todas las molculas presentan absorbancia porque todas interfieren
con el paso de la luz. Slo que la absorbancia ser ptima a un largo de onda
de luz especfico para cada tipo de sustancia.

Componentes de un espectrofotmetro

La medicin de absorbancia de la luz por las molculas se realiza en unos

aparatos llamados espectrofotmetros. Aunque pueden variar en diseo, en
especial con la incorporacin de ordenadores para el anlisis de datos, todos
los espectrofotmetros constan, segn se indica en la figura, de:

1. Una fuente de energa radiante: lmpara de deuterio y tungsteno.

2. Un monocromador para la seleccin de radiaciones de una

determinada longitud de onda: filtros, prismas, redes de difraccin.

3. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente

(cubetas o tubos) que contenga la muestra Pueden ser de vidrio,
cuarzo o plstico transparente. Para medir en UV se deben usar las
de cuarzo o slice fundido, porque el vidrio no transmite la radiacin
UV.

4. Un detector de luz y un amplificador convertidor de las seales

luminosas en seales elctricas.

5. Un registrador o sistema de lectura de datos.

Utilidad.

Los espectrofotmetros son tiles debido a la relacin de la intensidad del color

en una muestra y su relacin a la cantidad de solute dentro de la muestra. Por
ejemplo, si usted utiliza una solucin del colorante rojo del alimento en agua, y
mida la cantidad de luz azul absorbida cuando pasa a travs de la solucin,
una fluctuacin mensurable del voltaje puede ser inducido en una fotoclula en
el lado opuesto.

Si ahora la solucin del tinte rojo es diluida por la adicin del agua el color ser
menos intenso. As, hay una relacin entre el voltaje y la cantidad de tinte en la
muestra.

El espectrofotmetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz

monocromtica (de una longitud de onda particular) a travs de una muestra y
medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al
experimentador realizar dos funciones:

Nos da informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra. Esto

podemos lograrlo midiendo la absorbancia (Abs) a distintos largos de onda (l) y
graficar estos valores en funcin del largo de onda, formando un
espectrograma. Como cada sustancia tiene unas propiedades espectrales
nicas, distintas sustancias producen distintos espectrogramas. Esto se debe a
que cada sustancia tiene un arreglo de tomos tridimensional particular que
hace que cada sustancia tenga caractersticas nicas.

Tipos de Espectrometra

Hay tres grandes tipos de mtodos espectro-mtricos para identificar los

elementos presentes en la materia y determinar sus concentraciones: la
espectrometra ptica, la espectrometra de masas y la espectrometra de
rayos X.

En la espectrometra ptica, los elementos presentes en una muestra se

convierten en tomos o iones elementales en estado gaseoso por medio de un
proceso denominado atomizacin. De esta manera se mide la absorcin
ultravioleta/visible, la emisin o la fluorescencia de las especies atmicas en el
vapor. En la espectrometra de masas atmica, las muestras tambin se
atomizan, sin embargo, en este caso, los tomos en estado gaseoso se
convierten en iones positivos (generalmente con una nica carga) y se separan
en funcin de su relacin masa-carga. Los datos cuantitativos se obtienen por
el recuento de los iones separados. En la espectrometra de rayos X, se
necesita atomizar, ya que, para la mayora de los elementos, los espectros de
rayos X son independientes de cmo se encuentren dichos elementos
combinados qumicamente en una muestra.

Espectrometra de absorcin molecular

La espectroscopia de absorcin molecular se basa en la medida de la

transmitancia T o de la absorbancia A de disoluciones que se encuentranen
cubetas transparentes que tienen un camino ptico de b cm. Normalmente, la
concentracin c de un analito absorbente est relacionada linealmente con la
absorbancia como representa la ecuacin

P0
A=logT =log =bc
P

Todas las variables de esta ecuacin se definen en la Tabla 13-1. Esta

ecuacin es una representacin matemtica de la ley de Beer

Fundamentos de la absorcin molecular

 Transmitancia y Absorbancia

Cuando un rayo de luz de una determinada longitud de onda de intensidad Io

incide perpendicularmente sobre una disolucin de un compuesto qumico que
absorbe luz o cromforo, el compuesto absorber una parte de la radiacin
incidente (Ia) y dejar pasar el resto (It), de forma que se cumple: Io = Ia + It

La transmitancia (T) de una sustancia en solucin es la relacin entre la

cantidad de luz transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la
muestra, It, y la cantidad de luz que incidi sobre ella, Io, y se representa
normalmente en tanto por ciento:

% T = It/Io x 100

La transmitancia nos da una medida fsica de la relacin de intensidad

incidente y transmitida al pasar por la muestra. La relacin entre %T y la
concentracin no es lineal, pero asume una relacin logartmica inversa.

La absorbancia (A) es un concepto ms relacionado con la muestra puesto

que nos indica la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el
logaritmo de 1/T, en consecuencia:

A = log 1/T = -log T = -log It/ Io.

Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la

transmitancia es del 100% e indica que la muestra no absorbe a una
determinada longitud de onda, y entonces A vale log 1 = 0.

La cantidad de luz absorbida depender de la distancia que atraviesa la luz a

travs de la solucin del cromforo y de la concentracin de ste.

Ley de Lambert-Beer
Esta ley expresa la relacin entre absorbancia de luz monocromtica (de
longitud de onda fija) y concentracin de un cromforo en solucin:

A = log I/Io = cl

La absorbancia de una solucin es directamente proporcional a su

concentracin a mayor nmero de molculas mayor interaccin de la luz con
ellas; tambin depende de la distancia que recorre la luz por la solucin a igual
concentracin, cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra ms
molculas se encontrar-; y por ltimo, depende de , una constante de
proporcionalidad -denominada coeficiente de extincin- que es especfica de
cada cromforo. Como A es adimensional, las dimensiones de dependen de
las de c y l. La segunda magnitud (l) se expresa siempre en cm mientras que la
primera (c) se hace, siempre que sea posible, en M, con lo que las dimensiones
de resultan ser M-1cm-1. Este coeficiente as expresado, en trminos de
unidades de concentracin molar (o un submltiplo apropiado), se denomina
coeficiente de extincin molar (M). Cuando, por desconocerse el peso
molecular del soluto, la concentracin de la disolucin se expresa en otras
unidades distintas de M, por ejemplo gL-1, las dimensiones de resultan ser
distintas, por ejemplo g-1Lcm-1, y al coeficiente as expresado se denomina
coeficiente de extincin especfico (s).

La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de c

altos, vara con la concentracin, debido a fenmenos de dispersin de la luz,
agregacin de molculas, cambios del medio, etc.

Instrumentacin para la medicin de absorbancias de la

luz visible y ultravioleta: espectrofotmetro UV-visible

La medicin de absorbancia de la luz por las molculas se realiza en unos

aparatos llamados espectrofotmetros. Aunque pueden variar en diseo, en
especial con la incorporacin de ordenadores para el anlisis de datos, todos
los espectrofotmetros constan, segn se indica en la figura, de:

1. Una fuente de energa radiante: lmpara de deuterio y tungsteno.

2. Un monocromador para la seleccin de radiaciones de una determinada
longitud de onda: filtros, prismas, redes de difraccin.
3. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente (cubetas o
tubos) que contenga la muestra Pueden ser de vidrio, cuarzo o plstico
transparente. Para medir en UV se deben usar las de cuarzo o slice
fundido, porque el vidrio no transmite la radiacin UV.
4. Un detector de luz y un amplificador convertidor de las seales
luminosas en seales elctricas.
5. Un registrador o sistema de lectura de datos.

Desde el punto de vista operativo, el primer paso es seleccionar la fuente de

luz y longitud de onda a la que se va a realizar la medida. Hay
espectrofotmetros de un solo haz (con una sola celdilla para alojar la cubeta
con la muestra) y de doble haz (con dos celdillas para dos cubetas); en nuestro
caso se trabajar con los de un solo haz.

Se mide primero la absorbancia del disolvente (conocido como blanco) y al que

se le asigna el valor de cero mediante el ajuste del mando, de forma que la
intensidad incidente y transmitida sean iguales (Io = It), y por tanto la
absorbancia es cero. A continuacin se pone en la celdilla la cubeta con la
muestra y se lee la absorbancia de sta.

Obtencin de un espectro de absorcin

El espectro de absorcin es una representacin grfica que indica cantidad de

luz absorbida () a diferentes valores de .

A partir de una solucin diluida de un compuesto, cuya absorbancia mxima

entra dentro del rango de medida del espectrofotmetro, se ver el valor de
absorbancia a diferentes longitudes de onda frente a un blanco que contenga el
disolvente de la solucin de la muestra a caracterizar. A partir del espectro de
absorcin se obtendr el valor de al que el compuesto presenta la mayor
absorbancia (max). Dicho se utilizar a la hora de hacer determinaciones
cualitativas y cuantitativas del compuesto.

El espectro de absorcin de un cromforo depende, fundamentalmente, de la

estructura qumica de la molcula.
No obstante, hay una gran cantidad de factores que originan variaciones en los
valores de max y M, entre los que se incluye el pH, la polaridad del solvente
o molculas vecinas y la orientacin de los cromforos vecinos; y cada uno
afecta de forma particular. Por ejemplo, variaciones originadas por cambios de
pH son debidas al efecto de ste sobre la ionizacin del compuesto. A
continuacin se muestran como ejemplo los espectros de absorcin de HNTS
(un reactivo empleado para la determinacin de especies oxidantes) y
comprobndose que por espectrotometra se puede seguir el efecto que
ejercen

Clculos de absorbancia
Para obtener una curva de calibrado de un compuesto se preparan soluciones
de diferentes concentraciones del mismo, determinndose para cada una de
ellas el valor de absorbancia a max. Estos valores de absorbancia se
representan en el eje de abscisas (eje de x) y los de concentracin en el eje de
ordenadas (eje de y). Se observar que, a bajas concentraciones, el aumento
de concentracin se corresponde con un incremento lineal en la absorbancia
(zona de cumplimiento de la ley de Lambert-Beer). A concentraciones altas la
linealidad se pierde y se observa que la lnea se aplana, por lo que las medidas
son poco fiables.

La representacin de Lambert-Beer, A = cl, nos permitir calcular el valor del

coeficiente de extincin molar, que corresponde a la pendiente de la recta.

Trazado de la curva espectral (Espectro de absorcin del

compuesto).

Preparar a partir de una droga p.a. una solucin del componente que se
desea determinar en una concentracin estipulada y trazar la curva
espectral, realizando para ello una serie de medidas de absorbancia a
distintas longitudes de onda y [c] constante.
Sobre la curva espectral, seleccionar la longitud de onda de trabajo que
corresponda a un mximo de la curva. Se logra as mxima sensibilidad
y reproducibilidad.
Preparar una serie de soluciones patrones de concentraciones
crecientes y perfectamente conocidas en el componente a determinar.

Parte experimental
a) Instalacin y encendido del espectrofotmetro de absorcin:

Breve descripcin del equipo: durante la presente prctica se trabaj

con un espectrofotmetro de absorcin de un solo haz, el cual
presenta compartimientos para 4 celdas (las cuales contienen el
analito), un estabilizador de voltaje, entre otras caractersticas. Dicho
equipo nos permite determinar la transmitancia, absorbancia y la
concentracin del analito a distintas longitudes de onda, entre otras
funciones.

Al momento de encender el equipo se debe tomar las siguientes

consideraciones:

1. Enchufar el equipo y luego prender el estabilizador, esperar

unos minutos
2. Encender el espectrofotmetro y esperar a q el sistema
elctrico y de lmparas se caliente

b. Trabajo con el espectrofotmetro: determinacin de la transmitancia.

Al momento de trabajar con el espectrofotmetro, se debe tener

precaucin y precisin, debido a que el deterioro de algunas de
 las partes del equipo conlleva al error en la lectura de las
muestras, y en el peor de los casos inutilizacin del mismo.
Durante la experiencia con tres tipos diferentes de reactivos
(azosulfamida, azul de metileno, dicromato de potasio), se
siguieron los siguientes pasos:

1. Lavar la celdita (en la cual contendr el analito) con agua

destilada y limpiar con sumo cuidado debido a que la
ralladura de la celda o el ingreso de objetos extraos
(como pelos) afectarn las lecturas de la muestra a
analizar (se recomienda limpiarlas con papel fino)
2. Introducir las celdas, una de las cuales contiene el analito y
la otra; la sustancia blanco (sustancia en la cual se
encuentra disuelta mi analito), al espectrofotmetro para su
posterior anlisis.
3. Calibrar el equipo, analizando primero la muestra blanco,
para el posterior anlisis de la muestra problema.
4. Determinar la transmitancia del analito, estableciendo las
longitudes de onda con las que se desea irradiar la
muestra problema (como el equipo es de un solo haz se
deber jalar una palanca hasta permitir que la fuente de luz
irradie a la celdita en la posicin en la que se encuentra).
 Azosulfamida

(nm) %T A
450 60.7 0.2168113

460 57.7 0.2388242

470 52.7 0.2781894

480 46.7 0.3306831

490 41.5 0.3819519

500 36 0.4436975

510 33.7 0.4723701

520 31.9 0.4962093

530 31.7 0.4989407

540 33.4 0.4762535

550 37.6 0.4248122

560 44.1 0.3555614

570 51.9 0.2848326

580 63.7 0.1958606

590 68.4 0.1649439

600 74.6 0.1272612

610 79.4 0.1001795

620 83.1 0.080399

630 86.7 0.0619809

640 90.2 0.0447935

650 93.2 0.0305841

660 95.6 0.0195421

670 97.4 0.011441

680 98.5 0.0065638

690 99.4 0.0026136

 120

100

80

60
%T

%T

40

20

0
400 450 500 550 600 650 700 750

(nm)

0.6

0.5

0.4
Absorbancia

0.3

A
0.2

0.1

0
400 450 500 550 600 650 700 750

(nm)
 Azul de metileno

(nm) %T A

550 84.1 0.075204

560 77.5 0.1106983
570 70.3 0.1530447
580 61.2 0.2132486
590 51.4 0.2890369
600 42.6 0.3705904
610 37.3 0.4282912
620 35.7 0.4473318
630 33.5 0.4749552
640 28.6 0.543634
650 23.1 0.636388
660 20.8 0.6819367
670 25.3 0.5968795
680 47.2 0.326058
690 75.5 0.122053
700 92.6 0.033389
710 98.6 0.0061231
 120

100

80

60
%T

%
40 T

20

0
540 560 580 600 620 640 660 680 700 720

(nm)

0.8

0.7

0.6

0.5
Absorcin

0.4

0.3 A
0.2

0.1

0
540 560 580 600 620 640 660 680 700 720

(nm)
 Bicromato de Potasio

(nm) %T A

420 33.7 0.4723701

430 33.5 0.4749552

440 33.2 0.4788619

450 34.9 0.4571746

460 39.3 0.4056074

470 46.3 0.334419

480 55.3 0.2572749

490 65.1 0.186419

500 74.5 0.1278437

510 82.4 0.0840728

520 88.4 0.0535477

530 92.5 0.0338583

540 94.7 0.02365

550 95.7 0.0190881

560 95.9 0.0181814

 120

100

80

60
%T

%T
40

20

0
400 420 440 460 480 500 520 540 560 580
(nm)

0.6

0.5

0.4
Absorvancia

0.3

A
0.2

0.1

0
400 420 440 460 480 500 520 540 560 580
(nm)
Resultados

1. Espectrofotometra de absorcin molecular de

azosulfamida

Grfica estndar:

Pico:

a. (nm) = 525 nm A: 0.232 (Terico)

b. (nm) = 530 nm A: 0.4989 (Practico)
 2. Espectrofotometra de absorcin molecular de Azul de
metileno

En comparacin con el espectro obtenido experimentalmente, podemos

apreciar que, al igual que el espectro patrn, el mayor pico de absorbancia se
presenta en la longitud de onda aproximada de 660nm. Esto puede deberse a
los dobles enlaces presentes en la molcula de azul de metileno, los cuales
posiblemente originen grupos cromforos, como por ejemplo los enlaces
dobles conjugados de su sistema de anillos.

Pico: (nm) = 660 % T = 20.8 A = 0.6819367

3. Espectrofotometra de absorcin molecular de Dicromato

de potasio
En comparacin con el patrn de K 2Cr2O4, podemos apreciar similitudes en
ambos espectros, como por ejemplo el mayor pico de absorcin. Sin embargo,
no se dispone de la informacin suficiente, dado que el espectro patrn trabaja
un mayor rango de longitudes de onda que el espectro obtenido
experimentalmente. Podemos afirmar que el espectro posee sus caractersticas
gracias a los grupos cromforos que posee y a sus dobles enlaces.

Pico: (nm) = 440 % T = 33.2 A = 0.4788619

Discusio n
Si comparamos nuestra grfica de absorbancia con nuestra grfica estndar
nos daremos cuenta que en la grfica experimental el pico se encuentra en la
longitud de onda de 530 nm con una absorbancia de 0.4989 y en nuestra
grfica estndar se encuentra en la longitud de 525 nm con una absorbancia de
0.232. Nos damos cuenta que las longitudes difieren en pequeas cantidades
comprobando que exactamente se trataba de azosulfamida al coincidir los
picos. La diferencia en la absorbancia se debera ms a las concentraciones
con las que se ha trabajado notndose que nuestra muestra se encontraba
ms concentrada. Cabe recordar que hay una gran cantidad de factores que
originan variaciones en los valores de mx, entre los que se incluye el pH, la
polaridad del solvente o molculas vecinas y la rientacin de los cromforos
vecinos afectando cada uno de forma particular.

Cuestionario
 1. Cules son los errores que se cometen en un laboratorio
analtico?

Los errores cometidos a lo largo de la prctica en el laboratorio son explicados

de 2 formas; podemos verlos desde un punto de vista objetivo y clasificarlos
(sistemticos y aleatorios), de acuerdo a la bibliografa, a fin de manejar
conceptos esquematizados. Pero existe otra gama de errores a los cuales los
podemos denominar errores subjetivos ocasionados por el usuario -el
encargado de manejar la maquinaria. Los errores, generalmente, se presentan
en conjunto, con esto quiero decir que, tanto el usuario como los resultados
presentan un margen de equivocacin. Ciertos clculos y mediciones hacen
engorroso a un mtodo y a sus resultados- y por ende, acarrean una serie de
complicaciones hacia el ordenador lo cual se manifiesta como: error.
(a)Exacto y preciso
(b) Inexacto e preciso
(c) Exacto e impreciso
(d) Inexacto e
impreciso

Entonces podemos decir que la

exactitud depende de la comparacin
entre el valor verdadero y el valor
central de los resultados. Y la precisin
se visualiza como el grado de
concordancia de los resultados
(repetitividad). Los errores aparecen
cuando se pierde la exactitud (error
sistemtico) y cuando los valores del
resultado nos oscilan alrededor de su
valor central; dispersos (error aleatorio).

Distribucin de errores

Numerosos estudios indican que al repetir mediciones de un mismo parmetro,

la funcin de probabilidad obtenida sigue el modelo de distribucin Gaussiana o
normal. Estos estudios estadsticos afirman que la repetitividad de un
experimento generan una serie de resultados que, as como presentan un valor
medio, tambin poseen un grado de dispersin entre s mismos. Este grado es
medible gracias a un estadgrafo denominado desviacin estndar, as como
tambin la varianza o el coeficiente de variacin determina el grado de
dispersin entre los resultados.

Errores en el muestreo

Los errores ms importantes que pueden cometerse en todo el procesos de

toma de muestra, preparacin y anlisis, en especial para el anlisis de trazas,
son debidos a la contaminacin, prdida de analitos y variaciones de la
composicin y forma qumica de los mismos.

Contaminacin

La contaminacin durante el muestreo puede ser debida al medio ambiente, a

la operacin del muestreo en s (error objetivo) y/o al personal muestreador
(error subjetivo). La contaminacin por el medio ambiente puede provenir del
polvo y de contaminantes voltiles existentes en el aire. Por otra parte, si las
herramientas empleadas en el muestreo no son del material adecuado para las
diferentes muestras a tomar y elementos a analizar, tambin pueden contribuir
significativamente a la contaminacin de las muestras. En el muestreo de
muchos materiales se recomienda el empleo de material no metlico
(polietileno, polipropileno, tefln, cuarzo, gata) que a veces hay que recurrir a
fabricarlos en el laboratorio, pero aun as muchos de estos materiales son
potencialmente contaminantes de ciertos elementos.

2. Clasificacin y la forma de evitar y disminuir los errores

en el laboratorio de analtica instrumental.

Clasificacin

Los errores no siguen una ley determinada y su origen est en mltiples

causas. Atendiendo a las causas que los producen, los errores se pueden
clasificar en dos grandes grupos:

1. Errores indeterminados o aleatorios

Son errores de los que no se puede determinar el tamao o el signo. Este tipo
de errores lleva a que el resultado de la medicin tenga una cierta distribucin,
es decir que al repetir la medicin varias veces el valor medido flucte. Son
inevitables pero se pueden reducir repitiendo la medicin y tomando un
promedio.

Posibles causas:

interaccin del operador y el aparato de medicin

condiciones experimentales fluctuantes
variabilidad inherente en los instrumentos de medicin

2. Errores sistemticos o determinados

Son errores que se repiten constantemente a lo largo del experimento, siendo

su influencia de una nica forma ya sea por exceso o bien por defecto. Las
posibles causas de este tipo de errores son:

una calibracin incorrecta del instrumento de medicin

un error consistente en el uso del instrumento
el uso de frmulas incorrectas
condiciones experimentales inadecuadas

Este tipo de error no se puede reducir repitiendo la medicin. Para evitar

errores sistemticos causados por una tcnica de medicin especfica se
utilizan distintas tcnicas de medicin.

3. Cules son las caractersticas que deben presentar

una fuente de radiacin, un monocromador y un
detector espectrofotomtrico?

Las partes mencionadas deben cumplir con las siguientes caractersticas:

a. Fuentes: Una fuente de radiacin debe generar un haz de radiacin con

potencia suficiente para que se detecte y se mida con facilidad para
poderla utilizar en estudios espectroscpicos. Adems su potencia debe
ser estable durante perodos de tiempo razonables.

La potencia radiante de una fuente vara exponencialmente con la

tensin de su fuente de alimentacin. Por ello, para proporcionar la
estabilidad requerida se necesita a menudo una fuente e potencia
regulada.

b. Monocromador: Los monocromadores se disean para realizar barridos

espectrales (variar en forma continua y en un alto intervalo la longitud de
onda una radiacin. Son similares en cuanto a su construccin
mecnica, ya que todos poseen rendijas (de entrada y salida), espejos
(lente colimadora o espejo que produce un haz de luz paralelo de
radiacin), un prisma o red (dispersa la radiacin en sus longitudes de
onda individuales) y un focalizador.
 Para ser fiables, los materiales con los que se fabrican estos
componentes dependen de las regiones de longitud de onda a la que se
destine su uso.

c. Detectores: Se definen como dispositivos que convierten la energa

radiante en energa elctrica.

Un detector ideal debe tener una elevada sensibilidad, una elevada

relacin seal/ruido y una respuesta constante en un intervalo
considerable de longitudes de onda. Adems, debe de tener un tiempo
de respuesta rpido y una seal de salida igual a cero en ausencia de
iluminacin. En adicin, la seal elctrica producida por el transductor
debera ser directamente proporcional a la potencia radiante.

4. Qu diferencia hay entre calibrar un instrumento y

calificar un instrumento?

Un instrumento es calificado de acuerdo a las especificaciones del fabricante

para un instrumento dado: su modelo y serie as como las modificaciones
implementadas y puestas de manifiesto en el manual. La calibracin en cambio
es un procedimiento del analista quien modifica las lecturas del instrumento con
una sustancia patrn o estndar (generalmente el solvente en el cual se
encuentra el analito) para poder adaptar una lectura del instrumento a las
necesidades del analista para una muestra o un conjunto de ellas.

La forma de calibracin ms sencilla es la que utiliza un solo patrn. Este

modelo es til slo cuando el patrn es absolutamente confiable. Adems, se
supone que la seal cero del instrumento corresponde al cero de concentracin
de la especie que se quiere determinar. Entre el cero y valor obtenido para el
patrn se realiza una interpolacin lineal, pero la extrapolacin ms all de la
concentracin de patrn no es recomendada.

5. Por qu se utiliza celdas de cuarzo cuando se trabaja

con radiaciones ultravioleta?

Al igual que los elementos pticos de los monocromadores, las celdas o

cubetas que contienen las muestras se deben fabricar de un material que sea
transparente a la radiacin de la regin espectral de inters. Para trabajar en la
regin ultravioleta (por debajo de 350 nm), se considera uno de los materiales
ms adecuados las celdas de cuarzo, debido a que transmite las radiaciones
comprendidas entre 200 nm y 3300nm; es por esto que se puede afirmar que
este material es transparente a la regin UV y visible (algo que no ocurre con
las celdas de vidrio, que no son transparentes a la regin ultravioleta).

Sin embargo, dicho material es muy costoso, por lo que se debe trabajar con l
con sumo cuidado.
 6. Determinar la energa, la frecuencia y el nmero de
ondas de las longitudes de onda analtica obtenidos en
los espectros trazados

1
Nmero de ondas
(nm) Energa(Joules) Frecuencia( s )
(onda por metro)
450 4.4173792 10
21
6.666 10
12
2222222
460 4.3213492 1021 6.521 1012 2173913
470 4.2294056 10
21
6.382 10
12
2127659
480 4.1412930 1021 6.249 10 12
2083333
490 4.0567768 10
21
6.122 10
12
2040816
500 3.9756413 10
21
5.999 10
12
2000000
510 3.8976875 1021 5.882 1012 1960784
520 3.8227320 10
21
5.769 10
12
1923076
530 3.7506050 1021 5.660 1012 1886792
540 3.6811493 10
21
5.555 10
12
1851851
550 3.6142194 1021 5.454 1012 1818181
560 3.5496797 10
21
5.357 10
12
1785714
570 3.4874046 10
21
5.263 10
12
1754386
580 3.4272770 10
21
5.172 10
12
1724137
590 3.3691875 10
21
5.084 10
12
1694915
600 3.3130344 10
21
4.999 10
12
1666666
610 3.2587224 10
21
4.918 10
12
1639344
620 3.2061623 1021 4.838 10 12 1612903
630 3.1552709 1021 4.761 1012 1587301
640 3.1059697 10
21
4.687 10
12
1562500
650 3.0581856 10
21
4.615 10
12
1538461
660 3.0118495 10
21
4.545 10
12
1515151
670 2.9668965 10
21
4.477 10
12
1492537
680 2.9232656 10
21
4.411 10
12
1470588
690 2.8808995 10
21
4.347 10
12
1449275
700 2.8397438 1021 4.285 1012 1428571

(*) La longitud de onda subrayada representa a la longitud ptima, la de

mxima absorcin.

Anexos
 Clula fotoelctrica
Una clula fotoelctrica, tambin llamada clula, fotoclula o celda fotovoltaica,
es un dispositivo electrnico que permite transformar la energa luminosa
(fotones) en energa elctrica (electrones) mediante el efecto fotovoltaico.

Compuestos de un material que presenta efecto fotoelctrico: absorben fotones

de luz y emiten electrones. Cuando estos electrones libres son capturados, el
resultado es una corriente elctrica que puede ser utilizada como electricidad.

La eficiencia de conversin media obtenida por las clulas disponibles

comercialmente (producidas a partir de silicio monocristalino) est alrededor del
11-12%, pero segn la tecnologa utilizada vara desde el 6% de las clulas de
silicio amorfo hasta el 14-19% de las clulas de silicio monocristalino. Tambin
existen Las clulas multicapa, normalmente de Arseniuro de galio, que
alcanzan eficiencias del 30%. En laboratorio se ha superado el 42% con
nuevos paneles experimentales.[cita requerida]

La vida til media a mximo rendimiento se sita en torno a los 25 aos,

perodo a partir del cual la potencia entregada disminuye.

Al grupo de clulas fotoelctricas para energa solar se le conoce como panel

fotovoltaico. Los paneles fotovoltaicos consisten en una red de clulas solares
conectadas como circuito en serie para aumentar la tensin de salida hasta el
valor deseado (usualmente se utilizan 12V 24V) a la vez que se conectan
varias redes como circuito paralelo para aumentar la corriente elctrica que es
capaz de proporcionar el dispositivo.

El tipo de corriente elctrica que proporcionan es corriente continua, por lo que

si necesitamos corriente alterna o aumentar su tensin, tendremos que aadir
un inversor y/o un convertidor de potencia.

Principio de funcionamiento

En un semiconductor expuesto a la luz, un fotn de energa arranca un

electrn, creando al pasar un hueco. Normalmente, el electrn encuentra
rpidamente un hueco para volver a llenarlo, y la energa proporcionada por el
fotn, pues, se disipa. El principio de una clula fotovoltaica es obligar a los
electrones y a los huecos a avanzar hacia el lado opuesto del material en lugar
de simplemente recombinarse en l: as, se producir una diferencia de
potencial y por lo tanto tensin entre las dos partes del material, como ocurre
en

dfgsdfgdfsgdfgdfsgdfgdfgdfgdfg