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XII CONGRESO NACIONAL DE CIENCIA

Divisin Ciencias de la Vida Y TECNOLOGIA DE ALIMENTOS


Campus Irapuato-Salamanca
Jueves 27 y Viernes 28 de Mayo de 2010
Guanajuato, Gto.

CONTROL BIOLOGICO DE JITOMATE CON LA CEPA MEXICANA Bacillus


subtilis No 21

Basurto-Cadena M.G. a*, Salcedo-Hernndez R. a, Vzquez-Arista M. a, Romero-Valdez


M.E. b, Daz-Serrano F.R. b, Bucio-Villalobos C.M. b, Martnez-Jaime O.A. b
a
Departamento de Alimentos, Divisin de Ciencias de la Vida, Campus Irapuato-
Salamanca, Universidad de Guanajuato, Irapuato, Guanajuato, Mxico.
b
Departamento de Agronoma, Divisin de Ciencias de la Vida, Campus Irapuato-
Salamanca, Universidad de Guanajuato, Irapuato, Guanajuato, Mxico.
* cadenag@ducinea.ugto.mx

RESUMEN
Mxico se encuentra entre los diez primeros productores de jitomate en el mundo y su importancia
radica en su utilizacin para consumo en fresco y procesado. Desafortunadamente los principales
problemas que limita la productividad del cultivo de jitomate son las plagas y las enfermedades, los
cuales han sido controlados con el uso indiscriminado de agroqumicos. Estos productos qumicos
han incidido de manera importante en la salud humana provocando enfermedades como el cncer,
malformaciones, problemas neurolgicos, afecciones respiratorias y alergias; as como en la salud
ambiental. Una alternativa para controlar las plagas y enfermedades de los productos agrcolas es
el uso del control biolgico. En este trabajo se evalu el efecto de la cepa de Bacillus subtilis No.
21, aislada de plantas sanas de cultivos de fresa, en un cultivo de jitomate bajo condiciones de
invernadero. Los resultados mostraron que tratando las plantas de jitomate con B. subtilis No. 21
en la raz y asperjndolo en el follaje se obtuvo, por planta, mayor nmero de frutos con ms peso
y tamao. Con lo anterior, la aplicacin de B. subtilis No. 21 en el cultivo de jitomate parece ser una
opcin viable para el control de enfermedades y como regulador de crecimiento.

ABSTRACT
Mexico is one of the ten main tomato producers in the world and its importance is due to its
extensive consumption as a fresh vegetable and processing product. Unfortunately, productivity of
this agricultural product is limited by the presences of pests and diseases which are controlled with
the excessive use of chemical products. These chemical products produced, in time, problems with
human health such as cancer, malformations, neurological and respiratory affections, and allergies;
as well as environmental health. Biological control is an option to control pest and diseases
problems during the agricultural products production. In this work and under greenhouse conditions,
the effect of a Bacillus subtilis No. 21 strain, which was isolated from healthy strawberry plants, was
evaluated in the tomato production. Results showed that tomato plants treated with the Bacillus
subtilis No. 21 strain on roots and leaves produced more tomato per plant with bigger weigh and
size. With the above, the application of the Bacillus subtilis No. 21 strain seems to be a very good
option to control tomato diseases and as a growth regulator.

Palabras clave: Bacillus subtilis, control biolgico, regulador de crecimiento.

INTRODUCCION

Si bien el jitomate se cultiva en ms de cien pases, tanto para consumo en fresco


como para su industrializacin, los diez principales productores concentran ms del
80% del total mundial: China, Estados Unidos, Turqua, Italia, India, Egipto, Espaa,
Irn, Brasil, y Mxico, siendo los tres primeros los que marcan las tendencias de
precios y consumo mundiales (FAO, 2008). En Mxico el cultivo de tomate es uno

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de los ms importantes en cuanto a generacin de empleo y su demanda aumenta


continuamente y con ella su cultivo, produccin y comercio. (SECOFI, 1993).
En Mxico el jitomate se produce en diez estados, entre ellos destacan Sinaloa,
Baja California, San Luis Potos y Nayarit, que producen el 75%; a su vez, son las
entidades con mejores rendimientos. El jitomate mexicano es un producto
competitivo que cuenta con un mercado slido, tanto en el interior como en el
exterior y con posibilidades de expansin. Debido a que el sector agrcola en el
Estado de Guanajuato en su mayora se dedica al cultivo de cereales, la produccin
de otros cultivos se ve reducida como la de jitomate donde Len, San Luis de la
Paz, Cortzar y Celaya son los municipios con mayor produccin (SIAP SAGARPA,
2008).

Las enfermedades constituyen el factor limitante en la produccin de jitomate en


muchas partes del mundo cuando no se utilizan cultivares con resistencia a varias
de ellas. Existen cerca de 200 enfermedades en el jitomate con diversas causas y
etiologas (Crisantes y col., 1992); sin embargo, el marchitamiento vascular del
jitomate, causado por el hongo Fusarium oxysporum, es la enfermedad causante de
grandes prdidas en este cultivo y esta ampliamente distribuida en todo el mundo.
Este hongo sobrevive en restos de cultivo de una temporada a otra y posee
estructuras de resistencia que le permiten perdurar en el suelo por espacio de 6
aos, le favorecen la temperatura clida (20C) y alta humedad (Valiela, 1979).

El Control biolgico es una de las herramientas de un conjunto de tcnicas de


control eficaces desde el punto de vista biolgico, ecolgico y econmico. En el
control biolgico se utilizan organismos que son enemigos naturales de una plaga o
patgeno, con el fin de reducir o eliminar sus efectos dainos en las plantas o sus
productos. (Fuchs y col., 1999). Basurto-Cadena (2006) utiliz, a nivel de
invernadero, la cepa Bacillus subtilis No. 21 para el control de Fusarium
verticillioides y Rhizoctonia solani, hongos causantes de la enfermedad de la
secadera en el cultivo de la fresa.

MATERIALES Y METODOS

Material vegetal. Se trabaj con 72 plantas de jitomate de la variedad Gabriela, de


las cuales 12 se usaron como testigo. Los ensayos se realizaron en el invernadero
de la Divisin de Ciencias de la Vida de la Universidad de Guanajuato.

Bacteria antagonista. Se trabajo con la cepa de Bacillus subtilis No. 21, la cual fue
aislada de plantas sanas de cultivos de fresa e identificada en el laboratorio de
Microbiologa del Departamento de Alimentos de la Divisin de Ciencias de la Vida
(Basurto-Cadena, 2006).

Hongos patgenos. Se aislaron de plantas de jitomate que presentaron sistemas


de alguna enfermedad, siguiendo la metodologa sugerida por Basurto-Cadena

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(2006) y la identificacin se realiz en el laboratorio de Microbiologa del


Departamento de Alimentos.

Antagonismo in vitro de hongos patgenos y la cepa de Bacillus subtilis No.


21. El enfrentamiento de los hongos aislados e identificados con B. subtilis No. 21se
llev a cabo de acuerdo al protocolo sugerido por Basurto-Cadena (2006).

Preparacin de inoculo de B. Subtilis No. 21. Se preparan tubos de ensaye con


10 mL de caldo nutritivo y se les sembr una azada de la cepa Bacillus subtilis
N21, sembrada con anterioridad en agar nutritivo (caja petri), y se incubaron a
352C por 24 hr con agitacin constante.

Preparacin de la solucin concentrada de B. Subtilis No. 21. Del inoculo se


tom 1mL y se adicion a un matraz erlenmeyer con 500 ml con caldo nutritivo y
se incub a 352C por 5 das en agitacin constante. Se tomaron 150 mL de esta
solucin y se llevaron a un volumen de 1,500 mL con agua destilada para obtener
una concentracin final de 1 x 10 -7 clulas por mL.

Tratamientos en invernadero. Los tratamientos que se realizaron en el


invernadero fueron cuatro: T1. Aplicacin de solucin concentrada de B. subtilis No.
21en races; T2. Aplicacin de solucin concentrada de B. subtilis No. 21en races y
follaje; T3. Aplicacin de solucin concentrada de B. subtilis No. 21en follaje; y T4.
Testigo. En cada tratamiento se utilizaron 20 plantas ms cuatro testigos por
tratamiento (72 plantas en total).

Anlisis estadstico. Se realiz un diseo completamente al azar, aplicando la


prueba mltiple de Duncan para los datos de distribucin normal y la prueba de
Kruskal-Wallis para aquellos que no presentaron distribucin normal (Montgomery,
1991). Los parmetros evaluados fueron: peso, dimetro polar y dimetro ecuatorial
de los frutos. Se realizaron 6 recolecciones de los frutos cada 15 das.

RESULTADOS

Hongos patgenos. Los gneros de los hongos identificados del cultivo de


jitomate segn sus caractersticas morfolgicas macroscpicas y microscpicas
fueron: Fusarium sp, Rhizopus sp, Rhizoctonia sp, Alternaria sp. (Barnett y Hunter,
1897 y Nelson et al., 1983).

Antagonismo in vitro de hongos patgenos y la cepa de Bacillus subtilis No.


21. Ejemplos del antagonismo in vitro presentado por los hongos aislados de las
plantas de jitomate se puede apreciar en las Figuras 1 y 2.

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B. s. B. s.

Hongo

B. s. B. s.

Hongo Fig. 1. Alternaria sp (Hongo) vs B. subtilis N21 (B.s.)

B. s.

B. s.

B. s.
Hongo
B. s.

B. s.

B. s.

Fig. 2. Fusarium sp (Hongo) vs B. subtilis N21 (B.s.)

Tratamientos en invernadero. Las Figuras 3, 4 y 5 muestran los resultados obtenidos


durante el experimento despus de las 6 colectas de frutos.

RECOLECCIN N6 PROM EDIO PESO


.
60

a a
50

b
40
b
PESO(gr)

30

20

10

0
1 2 3 4
TRATAM IENTOS

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Fig. 3. Peso de jitomates


Nota: 1. B. subtilis No. 21 en races; 2. B. subtilis No. 21 en races y follaje;
3. B. subtilis No. 21 en follaje; y 4. Testigo.
Las letras iguales no presentan diferencia significativa (= 0.05%)

RECOLECCIN N6 PROMEDIO DIMETRO


ECUATORIAL

5 a
4.5
4
3.5 a
3 b
De (cm)

2.5 b
2
1.5
1
0.5
0
1 2 3 4
TRATAMIENTOS

Fig. 4. Dimetro ecuatorial (De) de jitomates


Nota: 1. B. subtilis No. 21 en races; 2. B. subtilis No. 21 en races y follaje;
3. B. subtilis No. 21 en follaje; 4. Testigo.
Las letras iguales no presentan diferencia significativa (= 0.05%)

RECOLECCIN N6 PROMEDIO POLAR

4.5
a
4
3.5
3 a
b
Dp (cm)

2.5 b
2
1.5
1
0.5
0
1 2 3 4
TRATAMIENTOS

Fig. 5. Dimetro polar (Dp) de jitomates


Nota: T1. B. subtilis No. 21 en races; T2. B. subtilis No. 21 en races y follaje;
T3. B. subtilis No. 21 en follaje; T4. Testigo.
Las letras iguales no presentan diferencia significativa (= 0.05%)

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DISCUSION Y CONCLUSIONES

Estudios de antagonismos realizados a nivel de laboratorio e invernadero con la


cepa mexicana Bacillus subtilis N 21 mostraron la posibilidad para controlar
hongos fitopatgenos en fresa (Basurto, 1993; Basurto-Cadena, 2006), y estos
estudios nos sirvieron de base para realizar nuestro trabajo. Los hongos
patgenos aislados e identificados fueron Alternaria sp, Fusarium sp, Rhizopus sp
y Rhizoctonia sp, los cuales presentaron antagonismo in vitro frente a la cepa de
B.subtilis N 21.

Los resultados del anlisis estadstico realizado, considerando cuatro tratamientos


en plantas de jitomate en su estado de maduracin (presencia de coloracin roja
en el fruto), mostraron que los tratamientos T1 y T2, donde se aplic la solucin
concentrada de B.subtilis N 21 en la raz y en la raz y follaje respectivamente,
fueron mejores que los tratamientos T3 y T4, en cuanto a peso, dimetro polar y
dimetro ecuatorial y no mostraron diferencias significativas entre ellos al final del
experimento; sin embargo, el tratamiento T2 present mayores valores numricos
que el tratamiento T1 cuando se midieron los parmetros de dimetro polar y
ecuatorial. Por otro lado, el tratamiento T3, donde se aplic la solucin de
concentrada de B.subtilis N 21 en el follaje nicamente y el testigo T4, sin
B.subtilis N 21, no presentaron diferencia significativa entre ellos al final del
periodo de experimentacin.

En general, se puede decir que los resultados de control biolgico en los


tratamientos T1 y T2 donde se aplic la cepa de B.subtillis N21 presentaron
mejores resultados de peso, dimetros polar y ecuatorial; adems, se observ que
la maduracin de los frutos en estos tratamientos fue ms rpida en comparacin
con los frutos de los tratamiento T3 yT4, lo que sugiere que posiblemente
B.subtilis N 21 tambin actu como agente promotor de crecimiento.

Finalmente, otro aspecto importante que se debe enfatizar es que los problemas
de plagas y enfermedades deberan manejarse de una manera sostenida a travs
de un programa de control integrado, con el cual la aplicacin de varios mtodos
de control, incluido el biolgico, podra llegarse a establecer un equilibrio, de tal
forma que las poblaciones de plagas y enfermedades puedan mantenerse en un
nivel tal que su impacto econmico y social en los cultivos sea mnimo para evitar
el deterioro de la salud humana y ambiental.

BIBLIOGRAFIA

Barnett H.L. y Hunter B.B. 1897. Illustrated genera of imperfect fungi. Fourth Edit.
Mcmillan Publishing Co. USA. 218 pp.

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Basurto, C.M. 1993. Alternativas de control biolgico de hongos fitopatgenos que


atacan a la fresa. Acta Universitaria 3:3-10.

Basurto-Cadena M.G.L. 2006. Control biolgico de hongos fitopatgenos en fresn con


bacterias antagonistas en Mxico. Tesis Doctoral. Universidad Politcnica de Valencia.
Valencia, Espaa.

Crisantes Enciso Theojari, A. Lorence, H. Rojas, y L. S. Santilln. 1992. Estudio de la


factibilidad de la produccin y venta de semillas de jitomate resistente a lepidpteros.
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Montgomery D.C. 1991. Diseo y anlisis de experimentos. Ed. Iberoamericana. Pp 112-
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