Monografia

UNIDAD EDUCATIVA EXPERIMENTAL FAE N1
TRABAJO REALIZADO PREVIO A LA OBTENCION DEL TITULO DE

BACHILLER ESPECIALIDAD QUIMICO BIOLOGO.
TEMA: ACCION DEL DETERGENTE EN LA BACTERIA
AUTORES:
ANDREA CASTILLO
TUTOR:
DRA. SARA ACOSTA
Quito, Mayo 2012

Unidad Educativa Experimental FAE N1
PRODUCCION DEL VINAGRE DE MANZANA
APROBACIN DEL TUTOR DEL PROYECTO
En mi calidad de Tutor del Trabajo de Investigacin presentado por la

estudiante Andrea Castillo del Tercer Ao de bachillerato, especializacin
Qumico - Bilogo con el tema ACCION DE DETERGENTE SOBRE LA
BACTERIA, considerado que el trabajo rene los requisitos y mritos
suficientes para ser sometido a la presentacin pblica y evaluacin por parte
del tribunal examinador que se designe.
CALIFICACIN ..../10../DIEZ
NMERO/LETRAS
En la ciudad de Quito a los.das del mes de..de 2012

FIRMA TUTOR 1703891620
N CEDULA
3
DEDICATORIA
En primer lugar a Dios por estar conmigo y bendecirme cada da.
A mi madre que me ha apoyado en todo y me ha sabido dar lo necesario de

manera espiritual fortaleciendo mi carcter logrando hacer de m una buena
persona.
A mis profesores que me han sabido guiar por el camino de la sabidura y el

conocimiento, ya que gracias a ellos y en conjunto con mi familia no hubiese
podido lograr mis perspectivas.
ANDREA CASTILLO
4
AGRADECIMIENTO
A mi familia, por el apoyo brindado, su constancia, esfuerzo y virtudes que me

han permitido culminar con xito este nivel de educacin.
A nuestros maestros y compaeros por la dedicacin que me supieron brindar y

la sabidura entregada para obtener conocimientos que me servirn en el
futuro.
ANDREA CASTILLO
5
INDICE DE CONTENIDOS
PAGINA PRELIMINARES
Portada.....I
Constancia de aprobacin del Tutor.........II
Dedicatoria.III
Agradecimiento......IV
ndice general......V
Resumen.....VI
SummaryVII
CAPITULO I: EL PROBLEMA
1.1Introduccin.....9
1.2 Justificacion..10
1.2 Objetivos de la investigacin.....11
Objetivo General.....................11
Objetivo Especifico.11
CAPITULO II: MARCO TEORICO

2.1Antecedentes..12
2.2 Fundamento teorico..13
2.3 Morfologia.13
2.4 Estructura...14
2.4.1 Pared celular..14
2.4.2 Membrana plasmtica15
2.4.3 Citoplasma.15
2.4.4 Nucleoide...15
2.5 Reproduccion bacteriana..16
2.5.1.Gemacion16
2.5.2 Esporulacion...16
2.5.3 Biparticion..16
2.5.4 Conjugacion...16
2.6 Nutricion de la bacteria.17
2.7.Respiracion ..18
2.8 Coloracion de gram...19
2.9 Cultivo de bacterias..19
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2.9.1 Cultivos puros20

2.9.2 Cultivo segn cualidad fsica.20
2.9.3 Cultivo segn su composicin21
2.10 Caracteristicas de la bacteria E.Coli para el medio de cultivo21
2.11 Detergentes.22
2.12 Propiedades del jabon antisptico...23
2.13 Composicion del jabon anticeptico.24
2.14 Elaboracion del jabon.24
2.15 pH...25
2.15.1 pH del jabon26
2.16 Efectos emulsionantes del jabon26
2.17 Jabon anticeptico triclosan..27
2.18 Jabon anticeptico sobre la bacteria.27
2.18.1 Membrana externa27
2.18.2 Membrana citoplasmatica.28
CAPITULO III: MARCO METODOLOGICO:
3.1 Materia prima..29

3.2 Diagrama de flujo30
3.3 Descripcion del proceso...31
CAPITULO IV: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:
Recomendaciones.33
Conclusiones 34
GLOSARIO.35
BIBLIOGRAFIA.37
ANEXOS..38
CAPITULO I
7
1.1 INTRODUCCIN
La bacteria escherichia coli representa una amenaza bacteriana en el ser humano segn
estudios de microbiologia para lo que se ha realizado varias investigaciones continuas
de como combatir a esta bacteria.
Escherichia coli es la bacteria mas constantemente encontrada en las materias fecales

del hombre y de muchas especies animales. Su nicho ecolgico natural es el intestino
delgado y grueso, forma parte de la flora nativa intestinal y se encuentra en calidad de
saprobio sin causa dao. Por el contrario, muchas cepas de E. coli producen substancias
que son tiles al hospedero, como son las colicinas, que tienen efecto inhibitorio sobre
otras cepas potencialmente patgenas, por lo que la colonizacin del intestino es
benfica para el hospedero.
Escherichia coli es la especia predominante de la flora anaerbica facultativa del colon

humano. Las infecciones producidas por cepas de E. coli patgenas pueden estar
limitadas a mucosas o bien diseminarse.
En este trabajo se pretende conocer a profundidad dicha bacteria, as como sus

caractersticas y su reproduccin para lograr obtener conocimientos de la accin del
jabn antisptico sobre la bacteria E. Coli.
Un sector de la poblacin especialmente sensible a esta bacteria son los nios menores
de 5 aos y los ancianos. La infeccin puede afectar a los glbulos rojos y a los riones.
No es frecuente; 1 de cada 50 casos. Pero cuando ocurre, reviste mucha gravedad,
pudiendo ocasionar la muerte en aquellos pacientes que no sean atendidos en un
hospital.
Hace ya unos aos haba tomado gran relevancia periodstica el impacto sanitario
producido por la contaminacin de cierto grupo de alimentos por el agente Escherichia
coli, un de los agentes productores de las patologas conocidas como Enfermedades
Transmitidas por Alimentos (ETA), que forman parte de uno de los componentes de la
Inseguridad Alimentaria que vive la comunidad al ingerir alimentos, o a manipular los
mismos.
La bacteria E. Coli est presente en todo el pas, pero la frecuencia es mayor en las
provincias del centro y norte durante los meses clidos, aunque se registran casos
durante todo el ao.
Es por eso que es necesario conocer el efecto que causa el jabon antiseptico sobre esta
bacteria para que asi fomentar el uso del mismo anteponiendo que es necesario para la
salud o medida preventiva de enfermedades a causa de la E. Coli.
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1.2JUSTIFICACIN
9
1.3 OBJETIVOS DE LA INVESTIGACION:
OBJETIVO GENERAL
Determinar la accin del jabn antisptico en bacteria
OBJETIVOS ESPECFICOS
Demostrar el efecto del jabn sobre la membrana citoplasmtica de la bacteria

Escherichia Coli
Comprobar la emulsin del jabn sobre las bacterias escherichia coli
Obtener muestras de la bacteria Escherichia Coli mediante un cultivo e
identificndola mediante tincin de gram
10
1.4 RESUMEN:
11
CAPITULO II
MARCO TEORICO
2.1ANTECEDENTES:
Mientras que el jabn antisptico en 1846, Ignas Semmelweis observ una importante
disminucin en la mortalidad como la fiebre puerperal, al realizar higiene de manos con
una solucin clorada alrededor de 1860, Joseph Lister promovi la anti sepsis, es decir
el jabn antisptico, de manos como una medida para reducir las infecciones.
La bacteria Escherichia coli fue descrita por vez primera en 1885 por el bacterilogo
alemn Theodore von Escherich, llamndola en primera instancia Bacterium coli. Con
posterioridad, y en honor a su descubridor, recibira el nombre que hoy conocemos de
Escherichia coli.
En realidad existen muchas cepas de la bacteria E. coli, siendo la mayora de ellas

inofensivas para el ser humano. No obstante hay una variedad, conocida como E. coli,
capaz de producir una sustancia txica muy potente y que, por lo tanto, entraa un serio
peligro para la salud humana. No sera hasta el ao 1982 que la bacteria E. coli sera
reconocida como causa de enfermedad. El motivo sera un brote de diarrea con sangre.
La propagacin se produce, en la mayora de casos, cuando la bacteria E. coli llega a la

cadena alimentaria. Puede mezclarse accidentalmente con cualquier clase de alimento si
este no ha sido lo suficientemente lavado o cocido.
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2.2. FUNDAMENTO TEORICO:
La especie Escherichia coli es la ms frecuente entero bacteria presente en la flora

colnica. El 99% de la flora colnica corresponde a distintas bacterias. E. coli tambin
est tambin presente en el aparato genital de la especie humana y animal, desde la
regin perianal hasta la va respiratoria alta.
La bacteria coloniza el intestino, y comienza a producir la toxina Shiga que pasa a la

circulacin y se une a su receptor especfico (globotriaosil ceramide, Gb3) presente
fundamentalmente en el endotelio del glomrulo renal y el epitelio tubular, donde es
internalizada y produce la muerte celular por inhibicin de la sntesis proteica. Si bien la
Shiga es el factor patognico esencial para el desarrollo de la enfermedad, hay
importantes evidencias de que los factores de virulencia de la bacteria que le permiten
colonizar el epitelio intestinal y desencadenar una fuerte reaccin inflamatoria son
absolutamente necesarios, para el desarrollo de la forma completa de SUH.
TAXONOMIA
CUADRO CIENTIFICO:
REIN Bacteria
O
Filo Proteo bacteria
Clase Gamma proteo bacteria
Orden Enterobacteriales
Famili Enterobacteriaceae
a
Genero Escherichia
Especie E. Coli
2.3. MORFOLOGIA:
Son organismos unicelulares esferas (cocos), barras (bacilos) y hlices

(espirilos).
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Son seres procariontes es decir carentes de ncleo definido, no rodeado por

una membrana y conformado por una sola molcula de ADN cuya divisin es
no-mittica.
La bacteria es el ms abundante de los organismos y su hbitat puede ser en
tierra, agua, aire, materia orgnica o en plantas y animales extarna o
internamente. Importantes en medicina (utilizando la fermentacin) para
produccin de antibiticos.
Generalmente poseen una pared celular compuesta de peptidoglicano, pueden
presentarse desnudas o con una cpsula gelatinosa, aisladas o en grupos y
pueden tener cilios o flagelos pertricos (rodean su cuerpo en los intestinos).
Del estudio de las bacterias se encarga la bacteriologa, una rama de la
microbiologa.
La bacteria Escherichia coli fue descrita en 1885 por Theodore von Escherich,
denominada como Bacterium coli luego cambiada a Escherichia coli. Procariota
de la familia Enterobacteriaceae una de las ms estudiadas en el mundo, parte
de nuestra flora normal y utilizada frecuentemente en experimentos de gentica
y biologa molecular.
Son Inofensivas en los intestinos, daninas para el resto del sistema, presentan
un bacilo corto, mtil, con flagelos. Fermetadora de lactosa, glucosa y
sacarosa. Coloniza el tracto gastrointestinal de un neonato adhirindose a las
mucosidades del intestino grueso en el plazo de 48 horas despus de la
primera comida.
Se encuentra generalmente en: Intestinos de animales incluidos el hombre.
2.4. ESTRUCTURA DE LA BACTERIA
Es una masa ameboide incolora, de 15 a 50 micras, con citoplasma viscoso en

el que es difcil diferenciar el ectoplasma del endoplasma, y el nucleoide no se
observa con facilidad. El movimiento es por seudpodos cortos y anchos, y de
escaso avance lo que su desplazamiento es lento. (Ver anexo 1).
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La clula bacteriana consta de:
2.4.1. Pared celular.- es una capa rgida que se localiza en el exterior de la

membrana plasmtica, tambin protege los contenidos de la clula, da
rigidez a la estructura celular, funciona como mediadora en todas las
relaciones de la clula con el entorno y acta como compartimiento
celular.
2.4.2. Membrana plasmtica.- es una estructura laminar formada por

fosfolpidos (moleculas anfiflicas con cabeza hidroflica y cola
hidrofbica) y protenas que engloban a las clulas. La delimita, le da
forma y contribuye a mantener el equilibrio entre su interior (medio
intracelular) y el exterior (medio extracelular). Presenta invaginaciones,
que son los mesosomas, donde se encuentran enzimas que intervienen
en la sntesis de ATP, y pigmentos fotosintticos en el caso de bacterias
fotosintticas.
2.4.3. Citoplasma.- (todas son citoplasmticas), contiene inclusiones de

reserva. Presenta un aspecto viscoso, y en su zona central aparece un
nucleoide que contiene la mayor parte del ADN bacteriano, y en algunas
bacterias aparecen fragmentos circulares de ADN con informacin
gentica, dispersos por el citoplasma: son los plsmidos.
Muchas bacterias pueden presentar flagelos generalmente rgidos,
implantados en la membrana mediante un corpsculo basal.
Pueden poseer tambin fimbrias o Pili muy numerosos y cortos,
que pueden servir como pelos sexuales para el paso de ADN de una
clula a otra. Poseen ARN y ribosomas caractersticos, para la
sntesis de protenas.
Los ribosomas son elementos granulosos que se hallan contenidos
en el citoplasma bacteriano; esencialmente compuestos por cido
ribonucleico, desempean un papel principal en la sntesis proteica.
2.4.4. El nucleoide.- lleva el material gentico de la bacteria; est formado

por un nico filamento de cido desoxirribonucleico (ADN) apelotonado y
15
que mide cerca de 1 mm de longitud (1000 veces el tamao de la

bacteria), esparcido en el citoplasma celular.
- Esta estructura bacteriana esta definida en todo microorganismo

patgeno (Escherichia Coli).
2.5. REPRODUCCION DE LA BACTERIA
Es mayormente asexual y puede realizarse por procesos de:
2.5.1 Gemacin: Inicia formndose una invaginacin de la pared celular, a

partir del mesosoma en la clula madre; luego, se distribuye
equitativamente el material citoplasmtico, incluido el ADN; finalmente,
se separa la nueva clula, y se regenera la membrana.
2.5.2 Esporulacin: al interior de la clula madre, se originan varias esporas

con carcter reproductor, originando a un nuevo individuo.
La reproduccin asexual de la bacteria E.Coli mediante proceso de biparticin:
2.5.3 Biparticin.- La reproduccin ms tpica en las bacterias es la asexual,

multiplicndose por simple escisin o biparticin.
Algunos autores han descrito en la Escherichia coli, bacteria del

intestino del hombre, una especie de reproduccin sexual, en la cual,
una clula donadora, al unirse con una clula receptora, le
transmitira su material gentico, que al fusionarse con la clula
receptora se conformara toda la estructura gentica, que sera
transmitida a la descendencia a travs de sus mltiples divisiones.
Hoy es bien conocida e incluso, la existencia de un factor de
fertilidad, llamado F +, que sera el encargado de regular y
proporcionar la energa necesaria para la transmisin del material
gentico. Tambin se conoce que la posibilidad de unin de dos
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clulas bacteriana se debe q que en su superficie existan

macromolculas de estructura qumica complementaria que les
permite reconocerse y fusionarse. Una ves unidas, el gen F+
determina la conformacin de unos pelos llamados puentes de
conjugacin, a travs de los cuales pasara le material gentico de la
clula donadora, dentro de la cual, previamente, se habra producido
primero un proceso de duplicacin del ADN. La frecuencia con la que
se dividen las bacterias es muy grande. Cuando las condiciones del
medio lo permiten, algunas pueden hacerlo cada veinte minutos. (Ver
anexo 2 ).
Reproduccin sexual de la bacteria E.Coli mediante proceso de conjugacin:

2.5.4 Conjugacion.- ocurre en algunas bacterias Gram. Negativas, las cuales
forman un tubo proteico a travs del que se distribuye el material
gentico, entre una bacteria donante y una receptora.(Ver anexo 3)
Transduccin
Es la transferencia de material gentico de una bacteria a otra
mediante un virus que infecta bacterias (bacterifago). Este virus
puede integrarse en el genoma bacteriano y al transferirse a otra
clula puede llevar parte del genoma de esta bacteria y as trasferir
genes, entre ellos genes de resistencia antimicrobiana.
Transformacin
Es la captura de ADN extracelular del medio, que puede integrarse
en el genoma y expresarse.
2.6. NUTRICION DE LA BACTERIA
Se da segn la fuente de energa, los organismos o seres vivos pueden ser

fottrofos, cuya principal fuente de energa es la luz, y quimitrofos, cuya fuente
de energa es un compuesto qumico que se oxida.
Las bacterias fotoauttrofas, utilizan la luz como fuente de energa y el

CO2 como fuente de carbono. Bacterias purpreas.
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Las bacterias fotohetertrofas, utilizan la luz como fuente de energa y

biomolculas como fuente de carbono.
Las bacterias quimioauttrofas, utilizan compuestos inorgnicos

reducidos como fuente de energa y el CO2 como fuente de carbono.
Las bacterias quimiohetertrofas, utilizan un compuesto qumico

como fuente de carbono, y a su vez, este mismo compuesto es la fuente
de energa. La mayor parte de las bacterias cultivadas en laboratorios y
las bacterias patgenas son de este grupo.
La bacteria E.Coli pertenece a este grupo ya que sus requisitos

nutricionales y de crecimiento: Es verstil y se adapta muy bien a su
ambiente, crece en medio con glucosa, toma fuentes de Carbono
basicamente carbohidratos y aminocidos.
2.7. RESPIRACION DE LA BACTERIA
La mayora de las bacterias pueden clasificarse en tres categoras de acuerdo

a su respuesta al oxgeno gaseoso.
Bacteria aerobia crece en la presencia de oxgeno y lo requiere para su

continuo crecimiento y existencia.
Anaerobias, y no pueden tolerar el oxgeno gaseoso.
Anaerobia facultativa, en esta clasificacin se encuentra la bacteria
escherichia coli la cual prefiere crecer en presencia de oxgeno, aunque
puede hacerlo sin l. Estas carecen de la enzima citocromo oxidasa por
lo tanto no van a proliferar al mximo en un medio con O 2 aunque en su
presencia realiza la respiracin aerobia, por ser anaerobias facultativas
se las considera una excepcin, pueden apenas crecer en medios con
O2, pero proliferan mucho mejor en medios anaerobios (se basan
principalmente en la fermentacin de lactosa y glucosa). Anaerobio
facultativo que crece a un pH ptimo (6.0-7.0) y a una temperatura de
37C (mesoflico).
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2.8. COLORACION DE GRAM

La tincin de Gram o coloracin de Gram es un tipo de tincin
diferencial empleado en microbiologa para la visualizacin de bacterias.
Se utiliza tanto para poder referirse a la morfologa celular bacteriana
como para poder realizar una primera aproximacin a la diferenciacin
bacteriana, considerndose Bacteria Gram positiva a las bacterias que
se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que se
visualizan de color rosa o rojo o grosella.
2.9. CULTIVO DE BACTERIAS

En biologa, y especficamente en microbiologa, un cultivo es un mtodo
para la multiplicacin de microorganismos, tales como bacterias, hongos
y parsitos, en el que se prepara un medio ptimo para favorecer el
proceso deseado. Un cultivo es empleado como un mtodo fundamental
para el estudio de las bacterias y otros microorganismos que causan
enfermedades en medicina humana y veterinaria.
Un microorganismo se puede sembrar en un medio lquido o en la
superficie de un medio slido de agar. Los medios de cultivo contienen
distintos nutrientes que van, desde azcares simples hasta sustancias
complejas como la sangre o el extracto de caldo de carne. Para aislar o
purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por
muchos tipos de bacterias, se siembra en un medio de cultivo slido
donde las clulas que se multiplican no cambian de localizacin; tras
muchos ciclos reproductivos, cada bacteria individual genera por
escisin binaria una colonia macroscpica compuesta por decenas de
millones de clulas similares a la original. Si esta colonia individual se
siembra a su vez en un nuevo medio crecer como cultivo puro de un
solo tipo de bacteria.
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2.9.1. CULTIVOS PUROS: MEDIOS DE OBTENCIN
Los microorganismos en estado natural crecen de forma heterognea

o mixta. Cuando queremos estudiar un microorganismo dado,
debemos aislarlo.
Un cultivo puro es aquel que contiene un solo tipo de
microorganismo. El modo de obtener estos cultivos consiste en
obtener colonias aisladas, que provienen de una sola clula (son
clones).
2.9.2. CULTIVOS SEGN LA CUALIDAD FISICA
Los medios de cultivo pueden ser:
MEDIOS LQUIDOS.- Se preparan todos los constituyentes en una

disolucin acuosa (agua destilada). Una vez disueltos, se reparten en
matraces o tubos de ensayo que tapamos y esterilizamos con calor.
MEDIOS SEMISLIDOS.- Su apariencia es de gel. Slo llevan 5 g/l de

agar. Este es el medio de cultivo por utilizar.
MEDIOS SLIDOS.- Hacemos lo mismo que para los medios lquidos,

pero, al disolver en agua destilada, aadimos de 15 a 20 g/l de agar. Lo
esterilizamos y lo depositamos en placas petri cuando est a unos 60.
Cuando alcance los 50, ya ser slido. En donde el agar es un elemento
solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se
lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al
enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el
crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l.
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2.9.3. CULTIVO SEGN SU COMPOSICION
distinguimos dos grupos de medios de cultivo, un poco mas detallado el

medio complejo o indefinido por ser el que se va a utilizar.
Medios sintticos o definidos Son aquellos que contienen

cantidades precisas de sustancias orgnicas e inorgnicas puras
disueltas en agua destilada.
Medios complejos o indefinidos: Contienen sustancias altamente

nutritivas, pero de composicin indefinida. Suelen llevar sustancias
como extractos de carne, peptona, extractos de levadura. La ventaja
de este medio de cultivo es que contiene muchos factores de
crecimiento, por lo que podemos cultivar en l gran nmero de
microorganismos. El inconveniente es que no conocemos lo que el
microorganismo est consumiendo.
Ejemplos:
Caldo nutritivo: extracto de carne + peptona + agua

Agar nutritivo: extracto de carne + peptona + agua + agar
2.10. CARACTERISTICAS DE LA BACTERIA ESCHERICHIA COLI PARA

SU MEDIO DE CULTIVO.
- Es un bacilo que reacciona negativamente a la tincin de Gram

(gramnegativo)
- Es anaerobio facultativo.
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- Mvil por flagelos perifricos (que rodean su cuerpo)
- No forma esporas
- Son fcilmente cultivables en medios nutritivos sencillos.
- Catabolizan glucosa, lactosa y otros azcares, mientras que no pueden

utilizar urea ni citratos. No se forma hidrgeno sulfrico.
Un medio de cultivo consiste en un gel o una solucin que cuenta con los
nutrientes necesarios para permitir (bajo condiciones favorables de pH y
temperatura) el crecimiento del microorganismo, bacteria. Segn qu se quiera
hacer crecer, el medio requerir unas u otras condiciones.
Para el cultivo de la bacteria E.Coli segn su cualidad fsica debe ser un medio
salido y segn la composicin va hacer complejo e indefinido, es decir,
empleare un medio agar nutritivo.
Agar nutritivo: extracto de carne + peptona + agua + agar
2.11. DETERGENTE
DEFINICION
El Jabn es un agente limpiador o detergente que se fabrica utilizando grasas
vegetales, animales y aceites. Qumicamente, es la sal de sodio o potasio de un
cido graso que se forma por la reaccin de grasas y aceites con lcali.
Son productos de limpieza no jabonosa. Las formas de presentacin pueden ser
lquida, granular o en spray. Contienen surfactantes, los cules disminuyen la
tensin superficial y permiten una mayor penetracin en la superficie. Suelen
contener sales inorgnicas como constituyentes, para mantener un pH y
combinarse con calcio y otros minerales en aguas duras que interfieren con
la limpieza.
El detergente est formado por molculas con una cabeza afn al agua
(hidroflica) y una larga cadena que huye del agua (hidrofbica).
22
Para que una sustancia sea considerada un detergente debe actuar de

manera efectiva en la eliminacin de las grasas y la suciedad de los tejidos,
sin afectar apreciablemente el tejido mismo.
Los detergentes son productos (mezclas) que pueden estar formados
bsicamente por:
Sales sulfonadas que actuan como agente tensoactivo modificando la
tensin superficial del agua de lavado disminuyendo con ello la fuerza de
adhesin de las partculas (mugre) al tejido.
Por fosfatos que tienen un efecto ablandador del agua y floculan y
emulsionan a las partculas de mugre.
Algn otro componente como el carbonato de sodio que acta como
solubilizante adicional de grasas.
Enzimas, las que son capaces de hidrolozar las manchas debidas a
protenas.
Blanqueadores.
Bactericidas.
Perfumes.
Abrillantadores pticos (tinturas que dan a la ropa el aspecto de
limpieza).
La mayora de los detergentes sintticos son contaminantes debido a que no
son descompuestos fcilmente por la accin bacteriana despus de
desechadas las aguas de lavado. A los detergentes que no son biodegradables
se les llama detergentes duros y a los degradables, detergentes blandos.
Las grasas y aceites son steres cuya hidrlisis en medio alcalino produce
mezclas de sales sdicas de cidos grasos que se conocen con el nombre de
jabones.
Esta reaccin se conoce con el nombre de saponificacin. Si el lcali utilizado
es hidrxido de sodio se obtiene un jabn duro o slido, en cambio con
hidrxido de potasio el jabn es blando o lquido.
2.12. PROPIEDADES DEL JABON ANTISEPTICO

Humectacin: Se entiende como la capacidad de mojar ms, es decir
una misma gota de agua es capaz de abarcar una mayor superficie de
contacto.
23
Penetracin: Como la palabra lo indica, es la capacidad de introducirse

en las superficies porosas sucias o en la suciedad.
Emulsin: Es la dispersin o suspensin de finas partculas de uno o
ms lquidos en otro lquido. Por ejemplo el aceite o grasa en agua.
Suspensin: Consiste en dejar la suciedad o partculas de suciedad en
solucin, evitando que estas se vuelvan a redepositar.
Segn su formulacin, los detergentes adems pueden contener
Compuestos cido base (que le dan el pH, hacindolos cidos, neutros o
alcalinos), Estabilizantes, Quelantes, Enzimas,
Blanqueadores, Colorantes, Perfumes, Solventes, Secuestrantes,
Desinfectantes, Espesantes.
2.13. COMPOSICIN DEL JABON ANTISEPTICO
El jabn generalmente es el resultado de la reaccin qumica entre un lcali

(generalmente hidrxido de sodio o de potasio) y algn cido graso; esta
reaccin se denomina saponificacin. (Ver el anexo 4)
Tradicionalmente es un material slido, lo que hace un contraste entre ellos

aunque tambin es habitual observarlo en forma lquida o en polvo. En realidad
la forma slida es el compuesto "seco" o sin el agua que est involucrada
durante la reaccin mediante la cual se obtiene el jabn, y la forma lquida es el
jabn "disuelto" en agua, en este caso su consistencia puede ser muy viscosa
o muy fluida. El jabn est hecho con las grasas de distintos animales y
plantas.
2.14. ELABORACION DE JABON
En esencia el proceso de obtencin del jabn, sea industrial o artesano,

consta de tres fases:
saponificacin
24
sangrado
moldeado.
1. Se hierve la grasa en grandes calderas, se aade lentamente sosa

custica (NaOH) y se agita continuamente la mezcla hasta que
comienza a ponerse pastosa. La reaccin que ha tenido lugar recibe el
nombre de saponificacin y los productos son el jabn y la leja residual
que contiene glicerina: grasa + sosa jabn + glicerina.
2. El jabn obtenido se deposita en la superficie en forma de grnulos.

Para que cuaje de una manera completa se le aade sal comn(NaCl).
Esta operacin recibe el nombre de sangrado o salado; con ella se
consigue la separacin total del jabn (que flotar sobre la disolucin
de glicerina), de sosa (que no ha reaccionado) y de agua.
3. Ya habiendo realizado el sangrado, el jabn se pasa a otro recipiente o

vasija donde se le pueden aadir perfumes, colorantes, productos
medicinales, etc. Entonces, todava caliente, se vierte en moldes, se
deja enfriar y se corta en pedazos.
2.15. pH
El pH (potencial de hidrgeno) es una medida de la acidez o alcalinidad de

una disolucin. En donde el 7 es una medida neutra la nica sustancia
como ejemplo es el agua.
Un pH que va desde el 0 al 7 indica una tendencia hacia la acidez, se

caracteriza por ser agrio y neutralizar a las bases; mientras que un valor
mayor de 7 hasta 14 muestra una tendencia hacia lo alcalino, estos se
caracterizan por ser amargos, tienen tacto jabonoso, neutralizan a los
cidos. (Ver el anexo 5)
25
2.15.1. PH DEL JABON

En cuanto a las sustancias jabonosas que se emplea para la higiene, cuanto
ms cercano sea su pH al de la piel, menos daa a sta: un pH inferior a 6
cido o superior a 8alcalino. El pH de la piel, por ejemplo oscila entre 7
denominado pH neutro- al nacer y entre 5.5 y 6 en la edad adulta, si el jabn
germicida no est en el rango de 5.6 a 6.5 causa irritacin y resequedad,
agrede los tejidos, la sencilla aplicacin del producto permite que el pH de la
piel ascienda a 7 y 7.5. Debido a esto es recomendable aplicar un producto
que contenga un pH de nivel ms bajo.
2.16. EFECTO EMULSIONANTE DEL JABONES

El Jabn y el Detergente estn compuestos por molculas que poseen una
parte hidroflica que es atrada por las molculas de agua al mismo tiempo que
repelen las molculas de hidrocarburos, aceites y grasas, y la otra parte
hidrofbica que es repelida por el agua pero es atrada por las molculas del
mismo tipo que repelen el agua. A medida de que se agregan el jabon o el
detergente se forman micelas en donde la porcin hidrocarbonada se sita en
el interior para protegerse de las repulsiones de las molculas de agua, a la vez
que las cabezas hidroflicas forman la superficie de la micela, quedando
expuestas a las fuertes interacciones de las molculas de agua, las cargas
negativas de la superficie son las responsables de las repulsiones que estn
experimentan entre s. Al ponerse en contacto con el aceite, las micelas se
rompen, y las porciones hidrofbicas de las molculas de jabn o detergente
que ocupaban el interior de las micelas se entremezclan con las molculas
compatibles del aceite mientras que la parte hidrfila permanece en contacto
con el agua mediante la agitacin adecuada las micelas se vuelven a formar
encapsulando el aceite, formando as una emulsin. Al trabajar con el jabn
estas micelas desaparecen ya que la parte hidrosoluble del jabn se disolvi en
26
el agua mientras que la parte liposoluble del jabn se disolvi en el aceite,

mientras que por su parte el detergente necesitan del lavado para eliminar la
emulsin.
2.17. JABON ANTISEPTICO TRICLOSAN

El triclosn (2,4,4 tricloro 2 hidroxi-difenil ter) es un antisptico no inico que
se ha incorporado a los jabones de uso domstico y hospitalario. Es un
antisptico bacteriosttico que ingresa al interior bacteriano donde afecta la
sntesis de la membrana citoplasmtica, el ARN los cidos grasos y la
protenas. Tiene una mejor actividad antimicrobiana contra bacilos Gram
negativos. El triclosn no es afectado por la materia orgnica y tiene actividad
residual.
2.18. JABON ANTISEPTICO SOBRE LA BACTERIA

El jabn contribuyen a la antisepsia de la piel por lavado y
arrastremecnico de los microorganismos; las bacterias de la piel (residentes),
generalmente no patgenas, son difcilmente eliminadas, mientras que los
microorganismos accidentales, patgenos, son removidos por el jabn en
cuanto al mecanismo de accin de esos detergentes aninicos, es semejante al
de los detergentes cannicos, actuando sobre la membrana
celular bacteriana, donde se concentran y a la que lesionan, pero las bacterias
que no son susceptibles a la accin del jabn poseen en dicha membrana un
fosfolpido que se combina con ellos y anula sus efectos.
La actuacin de las sustancias qumicas con accin desinfectante, se centra
por lo general en algn punto concreto de la estructura de los microorganismos
o ejercen su accin sobre algn mecanismo vital. Entre las principales
principales:
2.18.1. Membrana externa: La membrana externa protege la integridad
de la bacteria y es por lo tanto esencial para su supervivencia. En su
composicin se incluyen fosfolpidos y lipopolisacridos estabilizados
27
mediante cationes de Mg++ y Ca++.De este modo, segn que las

molculas del desinfectante ionizado sean absorbidas o repelidas por la
carga elctrica en el contacto inicial, puede suceder:
Que las molculas no polares penetren en el interior y disuelvan la fase
lpida de la bacteria escherichia coli.
Caso de que, como consecuencia de la carga elctrica sean repelidos,
pueden actuar sistemas de transporte especfico que conducen y
transportan el desinfectante a travs de la membrana.
Otros casos estn representados por molculas capaces de perturbar
la organizacin de la membrana mediante el establecimiento de
puentes con determinados puntos de la estructura.
La pared bacteriana, compuesta de peptidoglicano o de peptidoglicano
ms LPS, es importante pues confiere rigidez y forma, siendo causa de
la diferencia fundamental entre microorganismos gram positivos y gram
negativos. Esta diversidad conduce a una gran variacin en las
afinidades de los desinfectantes hidroflicos
2.18.2. Membrana citoplasmtica. Una molcula activa, como puede ser
por ejemplo un nutriente, puede penetrar a travs de la membrana
citoplasmtica bien mediante difusin pasiva (que es una forma
inespecfica y lenta) o mediante transporte activo (que es un
procedimiento especfico, capaz de permitir la acumulacin de productos
en la bacteria o el traslado se produce con el producto transformado o
unido a una protena de membrana). El jabon antisptico produce fisuras
a nivel de compuestos de bajo peso molecular, siendo causa de
desnaturalizacin proteica y lisis celular. Los derivados de amonio
cuaternario interaccionan con los fosfolpidos de la membrana y
producen dao celular generalizado.
28
CAPITULO III
Marco Metodolgico
En el presente trabajo investigativo se ha utilizado el mtodo demostrativo debido a que
se ha descrito las caractersticas y medios de cultivo de la bacteria E.Coli, asi como
tambin la composicin del jabn antisptico para demostrar la accin del mismo en la
bacteria E.Coli.
3.1 MATERIA PRIMA
Orina (+ E.Coli)
Jabn antisptico triclosn
SUSTANCIAS Y REACTIVOS
- Violeta genciana
- Lugol
- Azul de metileno
- Acetona
- Aceite de inversin
- Agar
- Peptona
- agua
INSTUMENTOS Y EQUIPOS
- Microscopio
- Caja petri
29
- Matraz elenmeyer
- Esptula
- Tubo de ensayo
- Porta y cubre objetos
- Gotero
- Mechero
- piseta
3.2. DIAGRAMA DE FLUJO PARA CULTIVO DE BACTERIA E.COLI Y

ACCION DEL JABON ANTISEPTICO
ORINA
TOMAR MUESTRAS
AGAR NUTRITIVO
SOLIDIFICACION
DETERMIMAR UNA
COLONIA
30
VISUALIZACION DE
COLONIAS
PLACAS
TINCION DE GRAM
RECONOCIMIENTO
DETERGENTE
3.3. DESCRIPCIN DEL PROCESO:
31
ORINA.- se busco en diferentes laboratorios clnicos que nos faciliten con una muestra
de orina con resultados positivos de tener la bacteria escherichia coli o que sirva para el
cultivo de la bacteria escherichia coli; se logro obtener 10 ml de muestra de orina.
TOMAR MUESTRAS.- para este procedimiento necesite cajas Petri en las cuales
ayudndome con una esptula coloque pequeas muestras de orina en las cajas Petri
esterilizadas.
AGAR NUTRITIVO.- colocar de 15 a 20 g/L en el matraz, calentarlo breve y

ligeramente para luego con ayuda de la piseta aplicar sobre las bacterias puestas en la
caja Petri de manera que cubra toda la base.
SOLIDIFICACION.- una vez que la base este cubierta por el agar sellar la caja Petri y
mantener en una incubadora a 37 C durante 24 horas.
DETERMINAR LAS COLONIAS.- el cultivo ya solidificado, es decir, despus de 24

horas con la ayuda una esptula caliente limitar las colonias de las bacterias; de una
manera recta y paralela en 3 de los bordes, en el centro de forma curvilnea.
PLACAS.- sacamos muestras del cultivo ya preparado, colocamos en el porta objetos

y con la ayuda de una esptula hacerlo de manera que quede una capa muy fina y casi
transparente de la muestra tomada. Esperar que se seque.
TINCION DE GRAM.- a la muestra ya seca de las bacterias aplicamos el

procedimiento de gram que consiste en:
La muestra extendido en espiral
Dejar secar a temperatura ambiente.
Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces
aproximadamente.)
Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 min.
Todas las clulas gram positivas y gram negativas se tien de color azul-purpura.
Enjuagar con agua.
Agregar lugol y esperar entre 1 minuto.
Enjuagar con agua.
32
Agregar acetona y/o alcohol y esperar 4 segundos (parte critica de la coloracion)

Enjuagar con agua.
Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica y esperar 1-2 min Este
tinte dejar de color rosado-rojizo las bacterias Gram negativas y las positivas se
quedaran de color azul violeta.
RECONOCIMIENTO.- una vez terminada la coloracin dejamos secar y observamos

en el microscopio las bacterias ya identificadas por colores en gram positivas y
negativas. El motivo de esto es lograr visualizar mejor la bacteria escherichia coli
tinturada como gram negativa.
CAPITULO IV
4.1 RECOMENDACIONES:
RECOMENDACIONES
33
Mediante el estudio demostrativo de la bacteria escherichia coli podemos determinar que es una
bacteria demasiado peligrasa para el ser humano para lo cual como recomendacin principal
esta la higiene personal.
1. Cuando haga sus compras de alimentos, compre la carne al final. Colquela en bolsas
plsticas para que no gotee en otros productos. Cuando llegue a casa, refrigrela o pngala en
el congelador inmediatamente.
2. Lave las frutas y los vegetales, restriegue los melones con un cepillo bajo el chorro de agua
fra antes de cortarlos.
3. Lave sus manos con jabn bajo la llave con agua tibia despus de usar el bao, cambiar algn
paal de un beb y antes de preparar los alimentos.
4. Lave los utensilios de cocina, tablas de cortar y sus manos despus de haber estado en
contacto con carne cruda.
5. No tome leche que no est pasteurizada o agua que no sea potable. Antes de tomar sidra
que no est pasteurizada, hirvala a 160 grados.
6. Observe a los trabajadores de cuidado infantil si se lavan las manos despus de cambiar un
paal y asegrese que afiches alusivos a lo mismo estn puestos; controle que el rea de
cambiar paales est separada de las reas donde se come. Asimismo, si la entidad es
inspeccionada por oficiales de salud.
4.2CONCLUSIONES:
34
GLOSARIO:
Peptidoglicano.-
O murena es un copolmero formado por una secuencia alternante de N-acetil-
glucosamina y el cido N-acetilmurmico unidos mediante enlaces -1,4. La
cadena es recta y no ramificada. Constituye la estructura bsica de la pared
celular de las bacterias.
35
Copomero.-
Es una macromolcula compuesta por dos o ms unidades repetitivas distintas,
que se pueden unir de diferentes formas por medio de enlaces qumicos.
Los monmeros pueden distribuirse de forma aleatoria o peridica. Si se
alternan largas secuencias de uno y otro monmero, se denomina copolmero
en bloque.
Plsmido.-
Son molculas de ADN extra cromosmico circular o lineal que se replican y
transcriben independientes del ADN cromosmico.
Acido murmico.-
Es un azcar cido. Procede de unin mediante un enlace ter entre el cido
lctico y la glucosamina. Se sintetiza de forma natural como un derivado del
cido N-Acetilmurmico en el peptidoglicano que conforma la pared celular de
las bacterias
Fimbria.-
Es un apndice protenico presente en muchas bacterias, ms delgado y corto
que un flagelo. Estos apndices oscilan entre 4-7 nm de dimetro y hasta
varios m de largo y corresponden a evaginaciones de la membrana
citoplasmtica que asoman al exterior a travs de los poros de la pared celular
y la cpsula. Las fimbrias son utilizadas por las bacterias para adherirse a las
superficies, unas a otras.
Lipoprotenas .-
Son complejos macromoleculares compuestos por protenas y lpidos que
transportan masivamente las grasas por todo el organismo. Son esfricas,
hidrosolubles, formados por un ncleo de lpidos apolares (colesterol
esterificado y triglicridos) cubiertos con una capa externa polar de 2 nm
formada por apoprotenas, fosfolpidos y colesterol libre. Muchas enzimas,
antgenos y toxinas son lipoprotenas.
36
BIBLIOGRAFIA
http://upcommons.upc.edu/revistes/bitstream/2099/6024/1/Article03.pdf
http://www.sabelotodo.org/productos/detergentes.html
37
http://www.monografias.com/trabajos16/agentes-anti-infecciosos/agentes-anti-
infecciosos.shtml#DETERG
www.wikipedia.com
http://europa.eu/legislation_summaries/consumers/product_labelling_and_pack
aging/l32025_es.htm
http://www.utim.edu.mx/~navarrof/Docencia/Quimica/UT2/acidobase.htm
http://detergents.alconox.com/detergentes.htm
http://www.firp.ula.ve/archivos/cuadernos/S332A_Detergentes.pdf
http://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/Bacteria.htm
http://www.monografias.com/trabajos/bacterias/bacterias.shtml
http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria
http://www.slideshare.net/Prymer/gram-positivos-y-negativos
http://www.solociencia.com/biologia/08060906.htm
http://www.solociencia.com/biologia/08060906.htm
http://www.alimentacion-sana.com.ar/informaciones/novedades/coli.htm
http://www.biologia.edu.ar/bacterias/micro3.htm
http://www.slideshare.net/wao2008/escherichia-coli-presentation
http://es.scribd.com/doc/16567052/JABONES-GERMICIDASFINAL1
http://usuarios.multimania.es/bazericol/DESINFECC.htm
38
ANEXOS
ANEXO 1
39
ANEXO 2
40
ANEXO 3
41
ANEXO 4
ANEXO 5
42

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UNIDAD EDUCATIVA EXPERIMENTAL FAE N1

TRABAJO REALIZADO PREVIO A LA OBTENCION DEL TITULO DE

TEMA: ACCION DEL DETERGENTE EN LA BACTERIA

DRA. SARA ACOSTA

Quito, Mayo 2012

APROBACIN DEL TUTOR DEL PROYECTO

En mi calidad de Tutor del Trabajo de Investigacin presentado por la

En la ciudad de Quito a los.das del mes de..de 2012

En primer lugar a Dios por estar conmigo y bendecirme cada da.

A mi madre que me ha apoyado en todo y me ha sabido dar lo necesario de

A mis profesores que me han sabido guiar por el camino de la sabidura y el

A mi familia, por el apoyo brindado, su constancia, esfuerzo y virtudes que me

A nuestros maestros y compaeros por la dedicacin que me supieron brindar y

CAPITULO II: MARCO TEORICO

2.9.1 Cultivos puros20

CAPITULO III: MARCO METODOLOGICO:

3.1 Materia prima..29

CAPITULO IV: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:

Escherichia coli es la bacteria mas constantemente encontrada en las materias fecales

Escherichia coli es la especia predominante de la flora anaerbica facultativa del colon

En este trabajo se pretende conocer a profundidad dicha bacteria, as como sus

1.3 OBJETIVOS DE LA INVESTIGACION:

Determinar la accin del jabn antisptico en bacteria

Demostrar el efecto del jabn sobre la membrana citoplasmtica de la bacteria

En realidad existen muchas cepas de la bacteria E. coli, siendo la mayora de ellas

La propagacin se produce, en la mayora de casos, cuando la bacteria E. coli llega a la

2.2. FUNDAMENTO TEORICO:

La especie Escherichia coli es la ms frecuente entero bacteria presente en la flora

La bacteria coloniza el intestino, y comienza a producir la toxina Shiga que pasa a la

Filo Proteo bacteria

Clase Gamma proteo bacteria

Son organismos unicelulares esferas (cocos), barras (bacilos) y hlices

Son seres procariontes es decir carentes de ncleo definido, no rodeado por

2.4. ESTRUCTURA DE LA BACTERIA

Es una masa ameboide incolora, de 15 a 50 micras, con citoplasma viscoso en

La clula bacteriana consta de:

2.4.1. Pared celular.- es una capa rgida que se localiza en el exterior de la

2.4.2. Membrana plasmtica.- es una estructura laminar formada por

2.4.3. Citoplasma.- (todas son citoplasmticas), contiene inclusiones de

2.4.4. El nucleoide.- lleva el material gentico de la bacteria; est formado

que mide cerca de 1 mm de longitud (1000 veces el tamao de la

- Esta estructura bacteriana esta definida en todo microorganismo

2.5. REPRODUCCION DE LA BACTERIA

Es mayormente asexual y puede realizarse por procesos de:

2.5.1 Gemacin: Inicia formndose una invaginacin de la pared celular, a

2.5.2 Esporulacin: al interior de la clula madre, se originan varias esporas

La reproduccin asexual de la bacteria E.Coli mediante proceso de biparticin:

2.5.3 Biparticin.- La reproduccin ms tpica en las bacterias es la asexual,

Algunos autores han descrito en la Escherichia coli, bacteria del

clulas bacteriana se debe q que en su superficie existan

Reproduccin sexual de la bacteria E.Coli mediante proceso de conjugacin:

2.6. NUTRICION DE LA BACTERIA

Se da segn la fuente de energa, los organismos o seres vivos pueden ser

Las bacterias fotoauttrofas, utilizan la luz como fuente de energa y el

Las bacterias fotohetertrofas, utilizan la luz como fuente de energa y

Las bacterias quimioauttrofas, utilizan compuestos inorgnicos

Las bacterias quimiohetertrofas, utilizan un compuesto qumico

La bacteria E.Coli pertenece a este grupo ya que sus requisitos

2.7. RESPIRACION DE LA BACTERIA

La mayora de las bacterias pueden clasificarse en tres categoras de acuerdo

Bacteria aerobia crece en la presencia de oxgeno y lo requiere para su

2.8. COLORACION DE GRAM

2.9. CULTIVO DE BACTERIAS