1

UNVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA-SEDE MEDELLN

ESCUELA DE QUIMICA
ASIGNATURA BIOQUMICA TALLER DE ENZIMAS

1. Para cada una de las siguientes enzimas, escriba con estructuras la reaccin que cataliza:

a. Treonina deshidratasa h. Tirosina fosfotransferasa

b. Asparagina hidrolasa i. Prolina recemasa
c. Aspartato amonioliasa j. Treonina epimerasa
d. Glutamato descarboxilasa k. Cistena, -KG-aminotransferasa
e. Glutamina sintetasa l. Glutamato deshidrogenasa
f. Ciclohexanol deshidrogenasa m. Glicerol quinasa
g. Benzoato de metilo hidrolasa n. Catalasa

2. Usando estructuras orgnicas sencillas escriba reacciones qumicas que podran ser catalizadas por las
siguientes enzimas (dos reacciones en cada literal):

a. Liasa y oxigenasa h. Deshidratas e hidrolasa

b. Glucosidasa y quinasa i. Sintetasa y sintasa

c. Pirofosfatasa y pirofosforilasa j. Aminotransferasa y transcetolasa

d. Lipasa y descarboxilasa k. Deshidrogenasa e hidroxilasa

e. Mutasa y oxidasa l. Carboxilasa y fosforilasa

f. Epimerasa y fosfatasa m. Peroxidasa y dioxigenasa

g. Desaminasa y reductasa n. Racemasa y ligasa

3. Escriba el nombre completo de cada una de las enzimas del punto anterior.

4. Considere las siguientes reacciones:

+
a. CH3CH2OH + NAD CH3CHO + NADH + H+

b. CH3 C COOH CH3 C H CO2

O O
 2
O
c. H2N CH C NH CH COOH H2O H2N CH COOH H2N CH COOH
CH3 CH CH2OH CH3 CH CH2OH
CH3 CH3

PO
O PO O
d.

O PO
O
e. ATP ADP

O O
- -
f. CH3 C COO CO2 OOC CH2 C COO-

ATP + H2O ADP + Pi

g. H2N CH COOH H2N CH COOH

H2O Pi
CH OP CH OH
CH3 CH3

4.1. Para cada reaccin identifique el nombre y el nmero de la CLASE de la enzima que la cataliza.
4.2. Escriba el nombre completo para cada enzima.

5. Qu fraccin de la VMAX es la velocidad de una reaccin enzimtica que sigue la cintica de M-M,
cuando:
a. [s] = KM c. [s] = 0.1KM RTAS: a. V = 0.5 VMAX
b. [s] = 0.5 KM d. [s] = 2 KM b. V= 0.33 VMAX
c. V = 0.09 VMAX

6. a. Por qu un inhibidor competitivo no altera la VMAX?

b. Por qu un inhibidor no competitivo simple no altera la K M?
c. Por qu un inhibidor incompetitivo disminuye tanto V MAX como KM?
d. En la inhibicin no competitiva mixta porqu la K M no permanece constante?

7. La catalasa descompone el H2O2 unas 107 veces ms rpidamente que la reaccin no catalizada. Si sta
ltima durara un ao, Cunto durara la reaccin catalizada?
Rta: 3.15 seg.
 3

8. Un experimento de cintica para la siguiente reaccin catalizada por la anhidrasa carbnica:

CO2 H2O HCO3- H+

report los siguientes datos:

[CO2] (mmoles/litro) Vo-1 (M-1 . seg.)

1.25 36 x 103
2.50 20 x 103
5.00 12 x 103
20.00 6 x 103

Determine KM y VMAX, a travs de los siguientes mtodos:

a. Usando la grfica de Michaelis - Menten

b. Usando la grfica de Lineweaver Burk Rtas: KM = 10 mM. VM = 2.5 10-4 M/seg.
c. Usando la grfica de Eadie - Hofstee

9. El estudio cintico de la hidrlisis de un pptido con quimotripsina, arroj los siguientes resultados:

[PEPTIDO] (M) Vo (M. min-1)

2.5 x 10-4 2.2 x 10-6

5.0 x 10-4 3.8 x 10-6
10.0 x 10-4 5.9 x 10-6
15.0 x 10-4 7.1 x 10-6

Calcule KM y VMAX de la reaccin por dos de los tres mtodos del problema 8.

Rtas: KM = 1.23 x 10-3 M

VMAX = 1.32 x 10-5 M min-1

10. El estudio cintico de la reaccin de desaminacin de -metilaspartato en presencia de la respectiva

enzima, con y sin inhibidor, produjo los siguientes datos:

[S] (M) Vo (sin I) (M/seg.) Vo (con I) (M/seg.)

1 x 10-4 0.026 0.010

5 x 10-4 0.092 0.040
1.5 x 10-3 0.136 0.086
2.5 x 10-3 0.150 0.120
5 x 10-3 0.165 0.142

a. Escriba con estructuras la reaccin catalizada y d el nombre de la enzima.

b. Disponga todos los datos en un grfico de Lineweaver-Burk.
c. Determine KM y VM para la reaccin sin I y con I.
d. Justifique el tipo de inhibicin que ocurri y sugiera una estructura para el inhibidor.

Rta: VM = 0.2 M/s KM = 6.5 x 10-4 M

 4

11. Calcule el nmero de recambio (Kcat) para la enzima (no inhibida) del problema anterior,
sabiendo que se us 1 x 10-4 mol de la misma. Rta: Kcat = 2 x 109 seg-1.

12. Se efecta un experimento de cintica enzimtica y se calcula una VMAX de 100 moles de producto por
minuto. En cada ensayo se us 0.1 ml de una solucin de enzima, con concentracin 0.2 mg/ml.
Determine la Kcat para la enzima, si su peso molecular es de 128.000 g/mol. Rta: 10.700 seg-1

13. Sabiendo de qu manera afecta la presencia de un inhibidor competitivo los valores de KM y VM de una
enzima, trace en un mismo grfico tres lneas que ilustren cmo se diagnostica la inhibicin competitiva
mediante el formato de Eadie-Hofstee. Use una lnea para la reaccin sin I, una segunda donde est
presente I1, y una tercera donde halla I2. [ I ]2 es mayor que [ I ]1.
14. Realice el problema 13 para la inhibicin no competitiva simple.
15. Realice el problema 13 pero en el formato de Lineweaver-Burk.
16. Realice el problema 13 para la inhibicin acompetitiva y en el formato de L-B.
17. La KM de la invertasa es 2.8 x 10-2 M. Qu fraccin de la VMAX se obtendr con las siguientes
concentraciones de sacarosa?

a. 2.8 x 10-4 M Rtas: b. V = 0.091 VMAX

b. 2.8 x 10-3 M d. V = 0.99 VMAX
c. 2.8 x 10-1 M
d. 2.8 M

18. Para una enzima con un inhibidor no competitivo mixto donde la KM disminuye, elabore un grfico de
Lineweaver-Burk y otro de Eadie-Hofstee, cada uno con dos lneas: una para la reaccin sin inhibidor y
otra para la reaccin con inhibidor. En cada grfico nombre los interceptos y la pendiente.

19. Repita el ejercicio 18 para una enzima con un inhibidor no competitivo mixto donde la KM aumente.

20. En una reaccin catalizada por una enzima, la presencia de 5 mM de un inhibidor reversible produce un
valor de velocidad mxima (VMAX) equivalente al 80% del valor en ausencia de I. K M no cambia. Determine
el valor de KI. Rta: 20mM

JACQ-UN