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FACULTAD DE MEDICINA

LABORATORIO DE FISIOLOGIA HUMANA

CURSO : FISIOLOGIA HUMANA


DOCENTE : Dr. ALCANTARA

ALUMNOS

IZAGA LOAYZA BRAYAN JOSHUA MARIN CAMILOAGA JOSELYN INGRID


JACOBE ALARCON MONICA MATOS GUERRA JOS LUIS
JAMANCA CORSINO JUNIOR MEDRANO AGAMA, MELANIE
JIMNEZ MERCADO DIEGO MEJA GUTIERREZ GUILLERMO
JUAREZ MONTERO DANIEL IAN-LU MELENDES ARAOZ, MANUEL ANDRES
KUROKI TUPAYACHI, KENO MARTIN MELGAREJO HUERTA ALEMBERT
LLANOS CHVEZ, KARIN NAVARRO FLORES ALBA MILAGROS
LPEZ DIESTRA JEFFERSON PORTILLO TEJADA DANTE
LOZANO MOLLO ANGELICA QUISPE MARTINEZ HOWARD LARRY
MAGNO CAMAC TESSY QUISPE PALACIOS NICOLE

AO : SEGUNDO

2014
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INDICE

INTRODUCCION (3)

IMPORTANCIA (4)

OBEJTIVO GENERAL (5)

OBJETIVOS ESPECFICOS .....(5)

MARCO TEORICO ..(6)

MATERIALES ...(10)

PROCEDIMIENTO (11)

COMENTARIOS Y RECOMENDACIONES..(13)

CONCLUSIONES(14)

BIBLIOGRAFIA ...(15)
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INTRODUCCIN

La presente prctica de laboratorio busca describir los procedimientos involucrados


en la prueba de embarazo desarrollada por Galli Mainini, partiendo desde su
importancia en el mbito nacional, explicando el fundamento terico de la misma, y
reportando los resultados obtenidos.
El diagnstico del embarazo pone a prueba los conocimientos, la experiencia y los
recursos con los que cuenta el mdico. Su seguridad se precisa por razones
personales, mdicas y legales.
Una prueba de embarazo es toda aquella tcnica usada para la bsqueda de los
signos hipotticos que permiten confirmar un embarazo. Consiste en detectar la
presencia de la hormona gonadotropina corinica humana (hCG) en el plasma
materno o en la orina, y es el procedimiento que aporta quiz el mayor nivel de
probabilidad de diagnstico confiable.
El diagnstico puede ser fcil despus del tercer mes, pero antes puede haber duda
porque el tero es un rgano intraplvico. El diagnstico se basa en signos y
sntomas, resultados de laboratorio y en el uso de mtodos auxiliares.
Otras tcnicas, como el ultrasonido obsttrico, tambin confirman el embarazo, pero
el trmino prueba de embarazo suele implicar pruebas bioqumicas, aplicadas a partir
de los 4 das de la concepcin, aproximadamente.
La prueba de Galli Mainini es un mtodo biolgico desarrollado por un mdico
argentino del cual hereda su nombre. Se utilizaba, antes del desarrollo de las pruebas
modernas, para el diagnstico del embarazo. Se basa en los efectos que las
hormonas gonadotrficas presentes en la orina de las embarazadas producen en el
sapo macho: a los 40 minutos de la inyeccin de orina en los sacos linfticos dorsales
aparecan espermatozoides en la orina del sapo.
As, representa un test de fcil accesibilidad basado en fundamentos fisiolgicos y de
ah deviene la importancia de su manejo.
Aparte de los mtodos bioqumicos de diagnstico de embarazo, se desarrollaron
otras tcnicas como la fonocardiografa que consiste en la deteccin del latido
cardaco fetal mediante un micrfono sensible aplicado a la pared abdominal de la
madre, una vez captado, puede ser trasformado en ondas elctricas que pueden
hacerse sonoras, visibles o incritas en papel.
Tambin se desarrollaron otras tcnicas como la radiografa simple, el
electrocardiograma fetal y algunos mtodos endoscpicos que permitan la
visualizacin del embrin y del feto.
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IMPORTANCIA

En el Per los embarazos precoces se han incrementado, segn la encuesta de


Demografa y Salud del INEI publicada en el 2014. Es un problema de gran magnitud.
Hoy en da podemos ver el aumento en nuestro pas de este tipo de embarazo. Las
carencias de estas madres jvenes las cuales no tienen las posibilidades econmicas
de acceder a una ecografa debido al poco presupuesto de dinero y tecnologa que
en muchas partes del pas estn presentes. Sobre todo en la sierra central y en la
costa norte donde la disminucin de los programas de prevencin es cada vez ms
austero. Segn el estudio Estilos de vida de los adolescentes peruano (Universidad
de Piura, Universidad de Navarra, Intermedia Consulting, 2010) el 19,5% de los
adolescentes con edades entre 13 y 18 aos declaran haber tenido relaciones
sexuales alguna vez. Con estos datos vemos que el inicio de la sexualidad en el Per
es precoz y el promedio de jvenes embarazadas ha aumentado. Existe una relacin
directamente proporcional entre la pobreza, la falta de educacin y los embarazos.
Por esta razn es importante conocer como procede el test de Galli Mainini, ya que
entre las ventajas de este test tenemos el bajo costo y la simplicidad,
El test de Galli Mainini obtiene una alta tasa de exactitud, es bastante eficaz y simple.
Esta reaccin usa un animal fcil de manipular y de bajo costo por lo que desplaza a
las pruebas anteriores. Los resultados estn listos en 2 horas, es rpida y con la
exactitud del 98%.
Algunas respuestas positivas se obtienen dentro de la primera hora de la inyeccin,
el 80 por 100 a la segunda hora y casi la totalidad dentro de las tres horas, aunque
es factible ver, reacciones positivas hasta las 24 horas caso sumamente raro, cuando
se tienen los animales a temperatura conveniente. A los 8 das de inyectado el animal
se ha negativizado totalmente.
Basado en los efectos de las hormonas gonadotrofinas que estn presentes en la
orina de las embarazadas, producen en un sapo macho luego 2-3 horas de la
inyeccin de la orina en los sacos linfticos dorsales aparecern espermatozoides en
la orina del sapo. Debido a la estimulacin de las gonadotrofinas hipofisarias,
haciendo liberar las Clulas de Sertoli; estas sufren una serie de transformaciones,
cuyo resultado es el desprendimiento de espermatozoides quedando libres en la luz
de las ampollas seminferas, desde donde inicien su migracin al exterior.
Gracias a este tipo de test el cual es sencillo y econmico muchas mujeres de bajos
recursos podrn conocer si son posibles madres o no.
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OBJETIVOS GENERALES

Poder evidenciar la presencia de la hormona gonadotropina corinico humana


(GCH), el cual estar contenido en la muestra de orina de una mujer
embarazada.

Reafirmar la prueba realizada a fin de obtener un resultado positivo

OBJETIVOS ESPECFICOS

Determinar si el TEST DE GALLI MAININI es una de las ms sencillas y rpidas


pruebas de laboratorio.

Conocer la dosis mnima capaz de producir respuesta biolgica positiva, en el


sapo macho.

Comprobar el efecto biolgico que tiene la gonadotropina corinica humana


(GCH) sobre el tracto genital del batracio.
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MARCO TEORICO

El test o prueba de la rana era una prueba de


embarazo que se us intensivamente hasta los
aos 60 del siglo XX, cuando se desarrollaron
los mtodos inmunolgicos, pero que contina
usndose en zonas rurales de muchos pases
latinoamericanos por su simplicidad y bajo
costo (vase Corres Caldern). Consiste en
inyectar a una rana o sapo hembra, bajo la piel,
la orina de la paciente. La orina de una mujer
embarazada contiene la hormona GCH que
estimula la ovulacin del animal. Si la rana
desovaba en 24 horas, el test se consideraba
positivo. El animal sobreviva y poda ser utilizado para otro test, aunque con demoras
de unos 40 das.

Este test se desarroll en Sudfrica en los aos 30 del siglo XX por los investigadores
Lancelot Hogben, Zwarenstein y Shapiro. Para los experimentos se utiliz la especie
de sapo Xenopus laevis, que luego se export a todo el mundo, lo que lo ha convertido
en una plaga que amenaza la fauna local en algunos pases en donde logr escapar
a los ambientes naturales.

Un mtodo que lleva el mismo nombre, pero basado


en un fenmeno biolgico diferente que requiere
machos en vez de hembras, fue desarrollado por
Galli Mainini en Argentina (1947), con el sapo
Rhinella arenarum. La inyeccin en el saco linftico
dorsal del sapo provoca la eyaculacin del animal
dentro de las tres horas siguientes. Este mtodo fue
luego extendido a otras especies por investigadores
como Ramrez Olivilla, Benach y Martell en Cuba
(1948), con la rana toro; Wiltberger y Miller en
EE.UU. (1948), con la rana pipians.

La reaccin de Galli Mainini efectuada en batracios machos para el diagnstico precoz


del embarazo, se deriva del conjunto de trabajos realizados por Houssay y su escuela,
quienes desde el ao de 1922 venan trabajando en forma intensa e ininterrumpida,
sobre anatoma histologa y fisiologa gonadales, obsevando las .relaciones entre
stas y las gonadotrofinas en diversos batracios.
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En el ao de 1929 hallaron la liberacin de los espermatozoides en el testculo del


Bufo arenarum Hensel, por la estimulacin de las gonadotrofinas hipofisiarias y
aunque numerosos trabajos se publicaron al respecto en los aos posteriores, slo
en marzo de 1947 Carlos Galli Mainini public su primer trabajo, realizado sobre 19
casos, marcando el primer eslabn en esta reaccin que ha sustitudo a cuantas se
han aplicado para el diagnstico precoz del embarazo, por su exactitud y rapidez.

El fundamento de la reaccin reposa en la


especificidad que tiene la gonadotrofina corinica,
presente en la orina de mujer embarazada, sobre
el testculo del sapo, haciendo liberar las clulas
de Sertoli : stas sufren una serie de'
transformaciones, cuyo resultado es el
desprendimiento de los espermatozoides
quedando libres en la luz de las ampollas
seminferas, desde donde inician su migracin al
exterior.
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Puede haber HCG en la orina aun sin embarazo, pero esto es muy improbable. De
todos los mtodos disponibles hoy, los basados en esta hormona son los que
permiten la deteccin ms temprana y ella es la base de los rpidos y sencillos tests
de embarazo actuales. Estos no habran podido desarrollarse sin la gran comprensin
de los fenmenos biolgicos y bioqumicos que han alcanzado las Ciencias Mdicas.

El test de la "rana" es slo un ejemplo, entre muchos, que pone claramente en


evidencia el imprescindible basamento cientfico de la Medicina que, con la
Electrnica, son prototipos de tecno-ciencias, tecnologas basadas en saberes
cientficos.

La disponibilidad y facilidad de acceso a las tecnologas mdicas han sido, son y


sern siempre cruciales para proteger el ms importante de todos los bienes,
aunque no el ms preciado desde el punto de vista econmico: la vida humana.

Con lo anteriormente mencionado podemos aseverar que las hormonas que permiten
el funcionamiento de este test son las gonadotropinas, la corinica humana en el caso
de la mujer y la hipofisaria en el caso del sapo.

Gonadotropina corinica humana: una hormona glicoproteica producida durante el


embarazo por el embrin en desarrollo despus de la fecundacin y posteriormente
por el sincitiotrofoblasto (parte de la placenta). La hCG tambin es producida en la
glndula pituitaria de los hombres y mujeres de todas las edades; cuya funcin es
interactuar con el receptor LHCG y promueve el mantenimiento del cuerpo lteo
durante el inicio del embarazo, causando que este secrete la hormona progesterona.
La progesterona enriquece el tero con un revestimiento grueso de vasos sanguneos
y capilares de modo que este pueda sostener el crecimiento del feto. Debido a su
carga altamente negativa, la hCG podra repeler las clulas del sistema inmune de la
madre, as protegiendo el feto durante el primer trimestre. Tambin se ha propuesto
la hiptesis de que la hCG podra ser un enlace placentario para el desarrollo de la
inmunotolerancia maternal local. Por ejemplo, las clulas endometriales tratadas con
hCG inducen un incremento en la apoptosis de las clulas T (una disolucin de las
clulas T). Estos resultados sugieren que la hCG podra ser un enlace en el desarrollo
de la tolerancia inmunolgica peritrofoblastica, y podra facilitar la invasin del
trofoblasto, que es conocido por acelerar el desarrollo del feto en el endometrio.
Tambin se ha sugerido que los niveles de hCG estn vinculados con la gravedad de
las nuseas del embarazo en mujeres embarazadas.
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Debido a su semejanza a la LH, la hCG tambin puede ser usada clnicamente para
inducir la ovulacin en los ovarios como tambin la produccin de testosterona en los
testculos. Debido a que las mujeres embarazadas son la fuente biolgica ms
abundante de hCG, algunas organizaciones recolectan la orina de mujeres
embarazadas para extraer la hCH para el uso en tratamientos de fertilidad.

La gonadotropina corinica humana tambin juega un papel en la diferenciacin


celular/proliferacin y podra activar la apoptosis.

Gonadotropina hipofisiaria: El gene para la subunidad a de la gonadotropina es


expresado tanto en la hipfisis como en la placenta. La subunidad a de la HCG es
expresada en la placenta pero no en la hipfisis y la subunidad b de la LH se
encuentra en la hipfisis pero no en la placenta.

Ambas gonadotropinas son secretadas en la misma clula, el gonadotropo, localizada


especialmente en las porciones laterales de la glndula hipfisis. La poblacin de
gonadotropos a nivel hipofisiario es heterognea, teniendo una produccin de FSH,
otros de LH y otros de ambas gonadotropinas.

La GnRH acta sobre receptores especficos en los gonadotropos hipofisiarios.


Inicialmente los receptores estn distribuidos en forma regular sobre la superficie
celular. La unin de la GnRH con su receptor induce la formacin de nuevos
receptores que luego son internalizados. El complejo hormona-receptor es
degradado en el interior de la clula y gran nmero de receptores regresa a la
superficie celular. Este fenmeno es conocido como regulacin hacia arriba. Si la
exposicin a la GnRH es continua, los receptores internalizados no retornan a la
superficie, produciendo la regulacin hacia abajo. Los receptores de GnRH son
regulados por muchas sustancias, entre ellas incluidas la misma GnRH, la inhibina, la
activina y los esteroides sexuales.
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MATERIALES

Sapo macho de peso mayor de 100 gr.

Orina de supuesta gestante fresca.

Jeringa de 10 cc. Con aguja N 21

Lamina para objetos.

Pipeta Pasteur.

Microscopio.

PROCEDIMIENTO
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Cogemos al sapo, luego extraemos con la ayuda de un


pipeta Pasteur la orina de su cloaca (prueba basal).
Para esto el sapo debi estar en reposo. Por lo que no
debemos encontrar espermatozoides cuando lo
llevemos a observar al microscopio.
Una vez extrada la orina del sapo, en reposo, lo
llevamos en una lmina portaobjetos y lo observamos
en el microscopio.
Como se esperaba cuando se observ no se encontr
espermatozoides.

Luego con la ayuda de una jeringa le inyectamos al sapo 2-3 cc la orina de prueba
(orina de muestra o de supuesta gestante) por la regin dorsal debajo de la piel (saco
linftico dorsal) y esperamos 30 minutos.

Luego de esperar 30 minutos, con la ayuda de una pipeta Pasteur extraemos la orina
del sapo de su cloaca, luego de haber inyectado la orina de prueba.
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Extrada esta orina la llevamos la microscopio y observamos que si exista presencia


de espermatozoides lo que indicaba que en efecto la prueba de embarazo dio positivo.

OBSERVACION EN MICROSCOPIO

COMENTARIOS Y RECOMENDACIONES
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La tcnica de Galli Mainini es una sencilla y rpida prueba de laboratorio, que


proporciona un modo eficaz y econmico de diagnstico precoz del embarazo. Por su
simplicidad y bajo costo, con resultados exactos y precisos, se us masivamente en
toda Amrica Latina durante varias dcadas, y ahora este test es realizado en los
laboratorios de fisiologa para observar los efectos de la hormona gonadotropina
corinica humana (HCG)

Se recomienda estar seguros que el sapo con el que se trabaja es macho.

La mujer con cuya orina se efectuar la reaccin, no necesita someterse a


ningn rgimen especial ni tampoco se requiere que suspenda ningn tipo de
medicacin a la cual est sometida, aun en casos de teraputica hormonal con
estrgenos, progesterona o gonadotrofinas. Referente a stas ltimas si se
consideran las dosis comnmente empleadas y aun suponiendo que toda la
cantidad inyectada se elimine en las 24 horas por va urinaria, el contenido de
10 cm3 ser siempre insuficiente para provocar respuesta positiva en el animal.

La recoleccin de la orina puede hacerse en cualquier momento, aunque es


preferida la orina de la primera miccin matinal.

La observacin microscpica de la orina del sapo, puede hacerse en cualquier


momento a partir de los 30 minutos de inyectados, que es el tiempo mnimo en
el que se han obtenido resultados positivos.

CONCLUSIONES
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El dosaje de Ganadotrofinas Corinicas, siguiendo la tcnica de GALLI


MAININI, es una sencilla y rpida prueba de laboratorio, cuya importancia
clnica est dems recalcar.
Por su exactitud rebasa los lmites de las otras pruebas biolgicas en
tiempos pasados, dando un porcentaje muy alto de hallazgos positivos.,
siendo asimismo exacta en sus resultados negativos.
Por el gasto que impende cada prueba, resultaba una de las ms
econmicas, a menos por el uso del microscopio.
Por el tiempo que se necesitaba en verificarla, era tan rpida para informar sus
resultados. Algunas respuestas que dan como resultado positivo se pueden
obtener en la primera hora de la inyeccin, pero casi la totalidad de todos los
resultados se obtienen a lo sumo en la tercera hora de la inyeccin.
Al ser un elemento esencial para determinar la positividad de la prueba, la
aparicin de los espermatozoides del sapo nos dan un resultado libre de
cualquier subjetividad, falsa apreciacin o error.
El examen posee una especificad completa, por lo que la orina de las mujeres
no embarazadas normales, ovariotomizadas, en menopausia, prepberes o
con alguna afeccin dan negativo a este examen, as mismo las orinas de nios
y varones adultos no dan positivo.
Solo se ha observado que la prueba puede fallar al dar positiva en varones
con tumores testiculares (carcinoma, seminomas) ya que produce sustancias
parecidas a las de las gestantes.

BIBLIOGRAFIA
15

Ariel Ivn Ruiz Parra. HISTORIA DE LA GINECOLOGA Y OBSTETRICIA (en


espaol). Revista Colombiana de Obstetricia y Ginecologa Vol. 55 No.2;
2004, (pg. 167-173)
Phillips, Pat (2007). Early Pregnancy Tests. Pregnancy Test FAQ.
http://quo.mx/10-cosas-que/2013/01/30/9-historicas-pruebas-de-embarazo
http://www.taringa.net/posts/femme/16486479/Historicas-pruebas-de-
embarazo.html
http://es.recuweb.com/test-de-la-rana
http://www.natalben.com/guia-embarazo/embarazo-primer-mes/prueba-
embarazo-test
http://pequelia.es/68451/la-prueba-de-la-rana/
http://www.gonadotropina.com/gonadotropina_corinica_humana_hcg
http://www.biocancer.com/journal/204/fisiologia-reproductiva-femenina-
hormonas-sexuales-y-sus-ciclos
http://novella.mhhe.com/sites/dl/free/8448606477/559775/Cap79.pdf

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