MANCHAS DE SANGRE PRUEBA DE LA PEROXIDASA

Introduccin
Entre los indicios que frecuentemente se producen durante la comisin de
diversos delitos, las manchas de sangre ocupan un lugar preponderante; de ah la
importancia de efectuar sobre esta evidencia fsica un estudio eficiente, que sea de
verdadera utilidad para el esclarecimiento de los hechos que se investigan
Las manchas encontradas en la escena del crimen se han constituido como
elemento esencial en la resolucin de investigaciones judiciales
El hallazgo de manchas obtenidas en las escenas de la investigacin forense juega
un papel muy fundamental en la resolucin de los casos criminales.
Adems de la identificacin de sangre proveniente de un ser humano se puede tipificar
un grupo sanguneo al que pertenece.

A menudo el aspecto de una mancha es muy demostrativo que est formada por
sangre; otras veces su apariencia es menos clara. Tanto en un caso como en el otro, la
prueba de conviccin debe ser confirmada en su naturaleza para que tenga valor.

Una mancha es toda perturbacin que modifica el color de una superficie o

deposita otra sustancia sobre ella. En el caso de las producidas por la sangre,
tcnicamente una mancha slo se produce sobre superficies absorbentes, aceptndose
el trmino costra para las que se forman en materiales no absorbentes. Las manchas
pueden ser color rojo negros, caf, amarillos hasta trasparentes segn el tiempo que
tengan y si han sido lavados.

Dentro de la Biologa forense tenemos a la Hematologa forense que tiene como

funcin estudiar fsica, bioqumicamente serolgicamente y cito histolgicamente
posibles manchas de sangre y muestras sanguneas a fin de determinar su origen humano
y ayudar en casos de filiacin, paternidad en cadveres y homologacin de muestras
incriminadas evaluadas en manchas de sangre recientes o antiguas. (Santos Lovaton.
2012)
 En las ciencias forenses, las manchas son evidencias comnmente evaluadas. Por
mancha se entiende toda modificacin de color, toda suciedad, toda adicin de una
materia extraa, visible o no, en la superficie del cuerpo humano, sobre instrumentos, o
sobre un objeto cualquiera, determinada por el depsito de un producto lquido, blando
y algunas veces slido, de cuyo estudio se pueden establecer relaciones de la
intervencin o participacin de una persona o cosa en un hecho delictivo 2

La sangre es la evidencia ms comn y conocida, quiz una de las ms importantes

en criminologa, su presencia en la mayora de los casos liga generalmente al sospechoso
o a la vctima a una u otra escena.

Se menciona la pruebas de orientacin o llamadas tambin presuntivas dentro de

las cuales tenemos la prueba del perxido o de catalasa, el test de Bencidina o de Adler,
el test de la Fenolftalena, Reaccin de Tevenon Ronald, el de luminol y el de Bluestar,
cuntas de estas pruebas daan las evidencias de sangre, sabiendo que pueden dar
resultados falsos positivos, si bien la importancia es que nos dirigen hacia un segundo
paso de la identificacin de las mismas, como son las pruebas de certeza tales como los
Cristales de Teischman y los cristales de Takayama entre otras o kits como HEXAGON
OBTI. (Manual de Criminalstica. 2010)

Las tcnicas consisten en mezclar el reactivo con la muestra que se quiere

identificar, y aadir a continuacin, perxido de hidrgeno. Las peroxidasas presentes en
la muestra catalizan la descomposicin del perxido, liberndose oxgeno, que a su vez
oxida al reactivo, provocando un cambio de color en la disolucin. Algunos autores llaman
a estas pruebas, mtodos catalticos.

La prctica tiene por objetivo familiarizar al estudiante en pruebas de

muestras desconocidas.
Material y mtodos

Se tuvo tres muestras problemas en tres laminas portaobjetos, donde la primera lamina
se coloc una pequea cantidad de plastilina roja simulando a una gota de sangre, en
otras laminas se coloc una gota de sangre humana y una gota de tempera roja, se
colocaron las tres laminas en forma paralela y con ayuda de un gotero se procedi a
colocar una gota de agua oxigenada sobre cada lamina y se observ la reaccin de cada
muestra ante la presencia del agua oxigenada.

Resultados y discusin

Al agregar el perxido a las tres muestras problemas se pudo observar que solo
en la lmina que contena la muestra de sangre presento un burbujeo, indicando que la
sangre reacciono ante el perxido.

Al agregar a la muestra de sangre previamente alcalinizada con potasa o

amoniaco, unas gotas de agua oxigenada. Inmediatamente aparecen burbujas que
ascienden hacia la superficie. Esta reaccin se produce ms dbilmente cuando se realiza
con sangre putrefacta, y tambin si la muestra ha sido sometida a altas temperaturas o
tratada con cidos minerales, ya que stos destruyen las catalasas. Por otra parte, es una
prueba poco especfica puesto que existen numerosos productos que poseen catalasas y
que por lo tanto daran positiva la reaccin.

Las peroxidasas son enzimas tpicos de los vegetales, aunque tambin se

encuentran en la leche y en la sangre, especficamente, en los glbulos rojos y blancos.
En los eritrocitos, la enzima glutation peroxidasa cataliza la reaccin implicada en la
destruccin del perxido de hidrgeno mediante la reduccin del glutation, lo que
protege a los lpidos de la membrana y a la hemoglobina contra la oxidacin. A diferencia
de las catalasas, las peroxidasas, para descomponer el perxido de hidrgeno, necesitan
la presencia de otro sustrato en el medio de reaccin, que a su vez es oxidado durante el
proceso. Es por esto que son enzimas ambivalentes, ya que actan descomponiendo el
perxido y obteniendo a la vez un metabolito, como resultado de la oxidacin del
sustrato. Podemos escribir la reaccin de la siguiente forma:
 Peroxidasa
H2O2 + RH 2 2H 2O + R

La presencia de peroxidasas vegetales es el grupo ms importante de compuestos

que pueden interferir en este tipo de pruebas . Se ha comprobado que muchos tejidos
vegetales dan una reaccin intensa con la bencidina que induce a error. Sin embargo se
debe tener en cuenta diversos factores; en primer lugar, se debe observar el color de la
mancha que se va a identificar. El color blanco y el verde son los que, generalmente, estn
asociados a productos vegetales. Por otra parte, hay que sealar que las peroxidasas
vegetales se encuentran en las clulas de los tejidos, por lo que el jugo que procede del
vegetal da una reaccin negativa o muy tenue. CULLIFORD y NICKOLS sealan, en un
estudio que analiza las posibles interferencias en la reaccin de la bencidina, que segn
afirma NICKOLS, para obtener una reaccin intensa, sera necesaria la presencia de
tejidos o fragmentos de tejidos. Estos fragmentos seran fcilmente identificables
examinando la mancha con un microscopio. Los trabajos experimentales que estudian el
resultado de la reaccin de la bencidina cuando se aplica a peroxidasas vegetales, se han
diseado obteniendo una huella del tejido vegetal que se va a analizar sobre papel de
filtro, o, en otros casos, se ha realizado la prueba directamente sobre el vegetal fresco.

Referencias bibliogrficas

H. J. Shine, H. Zmuda, K. H. Kwart, A. G. Horgan, C. Collins, B. E. Maxwell: Mechanism of the

benzidine rearrangement. Kinetic isotope effects and transition states. Evidence for concerted
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BAYONA MARTINEZ, R. (2007). Manual de normas jurdicas criminalstico Forense. Per. Edit LPG

CENTRO DE ALTOS ESTUDIOS E INVESTIGACIONES JURIDICAS. (2008). Criminalstica. Per, edit. CECAP

SANTOS LOVATON, J. (2011). Anlisis reconstructivo forense por patrones de manchas de sangre. Per. Edit.
Cromeo.
POLICIA NACIONAL DEL PER. (2010). Manual de Criminalstica. Per. A.F.A. Editores importadores S.A.