Crecimiento Microbiano PDF

GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ

UNIVERSIDAD PRIVADA CABEZA
ANTENOR / MICRO
ORREGO
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ
FACULTAD CABEZA
DE MEDICINA / MICROBIOLO
/ CIENCIAS
CTEDRA DE
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ MICROBIOLOGA
CABEZA / MICROBIOLOGA / G
CROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
IOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
TEMA: / GONZLEZ CABEZA / M
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA
CRECIMIENTO
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICRO
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
MICROBIANO
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
NZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA Dr./ GONZLEZ
Jos Gonzlez CABEZA
Cabeza / MICR
EZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIO
GONZLEZ CABEZA 1
ABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOG
ZLEZ CABEZACRECIMIENTO
/ MICROBIOLOGAMICROBIANO
/ GONZLEZ CABEZA / MICRO
El crecimiento de clulas, microorganismos, clulas vegetales y
A /animales,
MICROBIOLOGA
puede tener/ GONZLEZ CABEZA
dos acepciones, / MICROBIOLOGA
una referida al incremento de/ G
la masa celular/ GONZLEZ
CROBIOLOGA y la otra al incremento
CABEZA /del nmero de clulas;
MICROBIOLOGA esta
/ GONZ
ltima es/ la
IOLOGA vlida desdeCABEZA
GONZLEZ el puinto de vista microbiolgico./ A
/ MICROBIOLOGA la vez, ello C
GONZLEZ
puede mirarse bajo dos aspectos o tipos de crecimiento
GONZLEZ
reproductivo. CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
a.- Clulas
ZLEZ CABEZA individuales o poblacin
/ MICROBIOLOGA de clulas CABEZA
/ GONZLEZ en crecimiento
/ MICRO
sincronizado
CABEZA para estudio del/ GONZLEZ
/ MICROBIOLOGA ciclo de vidaCABEZA
celular. /Procesos en
MICROBIOLO
laboratorio.
A /b.-
MICROBIOLOGA / GONZLEZ
Divisin estocstica CABEZA
de la poblacin, / MICROBIOLOGA
o divisin al azar. /G
Por tanto, la divisin celular se efecta luego de un aumento en el
tamao de la clula, duplicacin del ncleo, divisin celular, divisin
NZLEZ CABEZA
citoplasmtica / MICROBIOLOGA
(salva / GONZLEZ
los organismos centicos) y deCABEZA
sta manera/ MICR
EZuna clula genera
CABEZA a dos clulas de
/ MICROBIOLOGA tamao similar,
/ GONZLEZ CABEZAconteniendo
/ MICROBIOlos
mismos elementos estructurales y potencialidades.
GONZLEZ CABEZA 2
DIVISIN
CELULAR
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA
El proceso / MICRO
general de
fisin
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA binaria en
/ MICROBIOLO
procariotas de forma
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZAbacilar.
/ MICROBIOLOGA
Por simplicidad / G
el nucleoide / GONZ
CROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA esta
representado como un
IOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ
simple crculo verde. C
NZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICR
GONZLEZ CABEZA 3
DIVISIN
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CELULAR
CABEZA / MICRO
IOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA
El anillo / FtsZ
GONZLEZ
y la C
divisin celular.
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ (a)
CABEZA /M
Cut-away view of a
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZAcell
rod-shaped / MICRO
showing / the
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA ring
MICROBIOLO
of FtsZ molecules
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA /around
MICROBIOLOGA the /G
division plane / GONZ
CROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA
GONZLEZ CABEZA 4
DIVISIN CELULAR
Sntesis
IOLOGA de Pared CABEZA
/ GONZLEZ Celular de / MICROBIOLOGA
una bacteria gram positiva. (a)
/ GONZLEZ C
localizacin de la sntesis de la nueva pared celular durante la dicin
NZLEZ CABEZA
celular. / MICROBIOLOGA
En cocos, la nueva sntesis de/ pared
GONZLEZ CABEZAen/ MICR
celular (mostrado
verde) esta
EZ CABEZA localizada con un slo
/ MICROBIOLOGA punto. El anillo
/ GONZLEZ CABEZAFtsZ define el
/ MICROBIO
plano de la divisn celular. GONZLEZ CABEZA 5
DIVISIN CELULAR
Crecimiento
CABEZA / MICROBIOLOGA de Pared
/ GONZLEZ
CABEZA / MICROBIOLO
Bactoprenol
NZLEZ CABEZA (undecaprenolphosphate),
/ MICROBIOLOGA the lipid carrier
/ GONZLEZ CABEZA / MICR
of the cell wall peptidoglycan building blocks.
GONZLEZ CABEZA 6
NZLEZ CABEZAsynthesis.
Peptidoglycan / MICROBIOLOGA / GONZLEZ
(a) Transport of peptidoglycanCABEZA
precursors/ MICR
across the
EZ CABEZA cytoplasmic membrane
/ MICROBIOLOGA to the growing
/ GONZLEZ point of the
CABEZA cell
/ MICROBIO
wall. GONZLEZ CABEZA 7
NZLEZ CABEZA
Peptidoglycan / MICROBIOLOGA
synthesis. / GONZLEZ
(b) The transpeptidation reactionCABEZA
that leads /toMICR
the final cross-linking
EZ CABEZA of two peptidoglycan
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ chains. Penicillin
CABEZA inhibits
/ MICROBIO
this reaction. GONZLEZ CABEZA 8
CURVA
GONZLEZ CABEZA DE CRECIMIENTO
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
MICROBIANO
GONZLEZ CABEZA 9
ZLEZ CABEZACURVAS DE CRECIMIENTO
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICRO
A /EsMICROBIOLOGA
la representacin grfica del logaritmo
/ GONZLEZ del nmero
CABEZA de clulas frente al
/ MICROBIOLOGA /G
tiempo.
La curva terica sera una recta pues los microorganismos estaran
IOLOGA
creciendo/ GONZLEZ
constantementeCABEZA / MICROBIOLOGA
pero en la / GONZLEZ
prctica la curva presenta distintas C
fases:
Fase de
ZLEZ Latencia/ (lag).-
CABEZA Perodo de adaptacin
MICROBIOLOGA de un microorganismo
/ GONZLEZ a las
CABEZA / MICRO
nuevas condiciones medio ambientales nuevas en un nuevo medio de
CABEZA
cultivo. / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
A /Fase
de Aceleracin.- Periodo donde las CABEZA / MICROBIOLOGA
clulas mejor /G
adaptadas empiezan a
dividirse, por tanto
CROBIOLOGA poblacionalmente
/ GONZLEZ lo hacen
CABEZA gradualmente.
/ MICROBIOLOGA / GONZ
Fase exponencial
IOLOGA o logartmica
/ GONZLEZ CABEZA (log).-/ MICROBIOLOGA
La poblacin se incrementa de modo C
/ GONZLEZ
regular, duplicndose a intervalos regulares de tiempo. Se considera que las
NZLEZ CABEZA
clulas son / MICROBIOLOGA
fisiolgicamente / GONZLEZ
iguales y el tiempo CABEZA
de generacin / MICR
es constante.
GONZLEZ CABEZA 10
ZLEZ
FaseCABEZA / MICROBIOLOGA
Estacionaria / GONZLEZ
o de Equilibrio.- Existe una merma CABEZA / MICRO
en el crecimiento
poblacional, esencialmente por agotamiento de nutrientes y acumulacin
de productos txicos. Se considera tericamente como constantes las
A / tasas
MICROBIOLOGA
de proliferacin y/la
GONZLEZ
de muerte. CABEZA / MICROBIOLOGA / G
Fase de Declinacin o Muerte.- El nmero de clulas que mueren es mayor
IOLOGA / GONZLEZ
que el nmero de clulasCABEZA / MICROBIOLOGA
que se dividen. / GONZLEZ
Se considera tericamente que la C
tasa de muerte es mucho mayor que la de proliferacin.
Las propiedades de un microorganismo dependern de la
CROBIOLOGA
fase de la /curva
GONZLEZ CABEZAen
de crecimiento / MICROBIOLOGA / GONZ
que se encuentren
GONZLEZ CABEZA 11
ZLEZ CABEZA /CRECIMIENTO MICROBIANO
MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICRO
La
IOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA tasa de
/ GONZLEZ C
crecimiento de un
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA /
cultivo microbiano M
GONZLEZ CABEZA 12
Mtodo para estimar el tiempo de
ZLEZ CABEZA
generacin (g) del /crecimiento
MICROBIOLOGA
poblacional / GONZLEZ CABEZA / MICRO
CRECIMIENTO
exponencial, con tiempos de generacin
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA
de (a) 6 h y (b) 2 h de datos ploteados
/ MICROBIOLO
MICROBIANO
A /sobre un grfico semilogartmico.
MICROBIOLOGA / GONZLEZ La CABEZA / MICROBIOLOGA / G
pendiente de cada lnea es igual a 0.301/g
CROBIOLOGA
and n igual al nmero/ GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
de generaciones
que han ocurrido en este tiempo, t. Todos
los nmeros son expresados en notacin
cientfica; esto
GONZLEZ es, 10000,000
CABEZA is 1 x 107,
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
60000,000 is 6 x 10 . 7
GONZLEZ CABEZA 13
ZLEZ CABEZA / CRECIMIENTO
MICROBIOLOGAMICROBIANO
CABEZA / MICROBIOLOGA
n
/ GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
i
rac
A/ g
MICROBIOLOGAle / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
La Ace
GONZLEZ CABEZA 14
ABEZA / Curva tpica de Crecimeinto
MICROBIOLOGA de una CABEZA
/ GONZLEZ Poblacin Bacteriana.
/ MICROBIOLOG
GONZLEZ CABEZA 15
CRECIMIENTO SINCRONICO
CABEZA
Informa / MICROBIOLOGA
sobre el tipo de/ GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
A /crecimiento
MICROBIOLOGA de las / distintas
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
bacterias.
Cultivos en los que todos los
IOLOGA
individuos/ GONZLEZ CABEZA
de una poblaci n / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
GONZLEZ
estn en laCABEZA / MICROBIOLOGA
misma etapa del / GONZLEZ CABEZA / M
ciclo CABEZA
ZLEZ celular. / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICRO
Para obtenerlo se puede
utilizar el mtodo de
A /Helmstetter
MICROBIOLOGA
-Cummings / GONZLEZ
. CABEZA / MICROBIOLOGA / G
CROBIOLOGA
Ciertas / GONZLEZseCABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
membranas
adhieren/ GONZLEZ
IOLOGA a las membranasCABEZAde / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
filtros de
NZLEZ nitrato /de
CABEZA celulosa
MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICR
con un tamao de poro inferior
a la de ellas. GONZLEZ CABEZA 16
CRECIMIENTO MICROBIANO Estimaciones
GONZLEZ CABEZA 17
CULTIVO CONTINUO
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ
Poblacin microbiana CABEZA / MICROBIOLOGA / G
fase exponencial.
Fermentaciones
IOLOGA / GONZLEZ industriales
CABEZA / actividad metablica /mGONZLEZ
MICROBIOLOGA xima. C
Pueden hacerse funcionar como quimiostatos o como
ZLEZ CABEZA /. MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICRO
turbidostatos
Quimiostato: velocidad
A / MICROBIOLOGA de flujoCABEZA
/ GONZLEZ de entrada y salida de / G
/ MICROBIOLOGA
nutrientes se mantiene.
IOLOGA / GONZLEZ
Velocidad CABEZA
de crecimiento del/ cultivo
queda ajustada a esa C
velocidad
NZLEZ de flujo.
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICR
GONZLEZ CABEZA 18
CRECIMIENTO
ZLEZ CABEZA MICROBIANO
/ MICROBIOLOGA Estimaciones
/ GONZLEZ CABEZA /MICRO
Schematic for a
CROBIOLOGA
continuous / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
culture
device (chemostat). In
such a device, the
GONZLEZ CABEZA
population density is / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
controlled by the
concentration of
limiting nutrient in the / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
A /reservoir,
MICROBIOLOGAand the
/ GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
growth rate is
CROBIOLOGA
controlled by the / GONZLEZ
flow CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
rate. Both parameters
can be set by the
experimenter.
GONZLEZ CABEZA 19
Relationship
CABEZA between nutrient concentration,
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ growth rate (green
CABEZA curve), and
/ MICROBIOLO
growth yield (red curve) in a batch culture (closed system). At low nutrient
A/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ
concentrations both growth CABEZA
rate and growth / MICROBIOLOGA
yield are affected. /G
GONZLEZ CABEZA 20
CRECIMIENTO
CABEZA MICROBIANO
/ GONZLEZ
CABEZA / MICROBIOLO
CROBIOLOGA
Steady-state/ relationships
in the chemostat. The dilution/ GONZ
rate
IOLOGA / GONZLEZ
is determined CABEZA
from the / MICROBIOLOGA
flow rate and the volume of/ GONZLEZ
the culture C
vessel. Thus,
GONZLEZ with a
CABEZA vessel of 1000 ml and
/ MICROBIOLOGA a flow rateCABEZA
/ GONZLEZ through / M
ZLEZtheCABEZA
vessel of/ 500 ml/h, the dilution
MICROBIOLOGA rate would be
/ GONZLEZ 0.5 h-1./ Note
CABEZA MICRO
that at high dilution rates, growth cannot balance dilution, and
the population washes out./ GONZLEZ
Note also CABEZA / MICROBIOLO
that although the
A / MICROBIOLOGA
population density/ remains
GONZLEZ CABEZA
constant / MICROBIOLOGA
during steady state, the / G
growth rate (doubling
CROBIOLOGA / GONZLEZ time)CABEZA
can vary/ MICROBIOLOGA
over a wide range. /Thus,
GONZ
the experimenter
IOLOGA / GONZLEZ can obtain populations
CABEZA with widely
/ MICROBIOLOGA varying C
/ GONZLEZ
growth rates without affecting population density.
GONZLEZ CABEZA 21
GONZLEZ CABEZA 22
DETERMINACIN
GONZLEZ DEL CRECIMIENTO
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
BACTERIANO
GONZLEZ CABEZA 23
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA
METODOS / GONZLEZ CABEZA / MICRO
METODOS
A / MICROBIOLOGA MTODOS DIRECTOS
Recuento en placa
CABEZA
IOLOGA / GONZLEZ / MICROBIOLOGA
Tcnica del n mas probable / GONZLEZ C
Mtodo de filtracin
Recuento en cmara
/ GONZLEZ CABEZA / M
Clitmetro de
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ
flujo CABEZA / MICRO
A / MICROBIOLOGA/ MTODOS
INDIRECTOS
Medicin de peso
IOLOGA / GONZLEZ CABEZA
Mtodo/ anal
MICROBIOLOGA
tico / GONZLEZ C
Turbidimetria/ GONZLEZ CABEZA / MICR
NZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA
Estudio de la actividad metablica
GONZLEZ CABEZA 24
METODOS DIRECTOS
RECUENTRO / GONZLEZ
EN PLACA.- Consiste CABEZA
en el plaqueo de /un
MICROBIOLO
volmen
conocido procedente
A / MICROBIOLOGA de la muestra
/ GONZLEZ que se /analiza.
CABEZA El resultado / G
MICROBIOLOGA
es funcin /de
CROBIOLOGA una serie de
GONZLEZ factores/ MICROBIOLOGA
CABEZA (como son el mtodo de
/ GONZ
muestreo) y los cultivos pueden hacerse tanto en superficie
como en profundidad. Los pasos a seguir son los siguientes:
Estima el nmero de clulas viables.
Se emplea placas Petri que contengan el medio de cultivo idneo para el
crecimiento bacteriano. / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
Se siembra un volmen CABEZA / MICROBIOLOGA / G
conocido de muestra.
CROBIOLOGA / GONZLEZ
Se procede a contar CABEZA
el nmero de colonias. / MICROBIOLOGA / GONZ
IOLOGA / GONZLEZ
Si la cantidad CABEZA
de bacterias / MICROBIOLOGA
es elevada se preparan diluciones. / GONZLEZ C
NZLEZ CABEZA
Se siembra / MICROBIOLOGA
un determinado / GONZLEZ
volumen en la placa CABEZA
Petri, para luego calcular/ el
MICR
nmero de/ bacterias
EZ CABEZA por mililitro (expresado
MICROBIOLOGA como UFC).
/ GONZLEZ CABEZA / MICROBIO
GONZLEZ CABEZA 25
VENTAJA:
La ventaja del mtodo de / GONZLEZ
recuento enCABEZA / MICROBIOLO
placa es su gran
sensibilidad. si se / GONZLEZ
A / MICROBIOLOGA utiliza un medio y unas
CABEZA condiciones de / G
/ MICROBIOLOGA
incubacin adecuadas, puede detectarse incluso una nica
clula viva.
GONZLEZ CABEZA
El recuento / MICROBIOLOGA
en placa / GONZLEZ
no requiere un equipo complicado.CABEZA / M
DESVENTAJA:
No mide el nmero CABEZA
total de clulas si /no
MICROBIOLOGA
nicamente las / G
CROBIOLOGA
viables. / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
Un inconveniente es que el recuento en placa es lento y
tedioso y no es preciso, porque la precisin depende del
EZ CABEZA / MICROBIOLOGA
recuento de un nmero elevado / de
GONZLEZ
colonia CABEZA / MICROBIO
GONZLEZ CABEZA 26
GONZLEZ CABEZA 27
CRECIMIENTO
CABEZA MICROBIANO
/ GONZLEZ
CABEZA / MICROBIOLO
Two methods of performing a viable count (plate count). In either
case the sample must CABEZA / MICROBIOLOGA
usually be diluted before plating. / GONZ
GONZLEZ CABEZA 28
CRECIMIENTO
MICROBIANO
Estimaciones
Procedure for viable counting
using serial dilutions of the
sample
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA and the CABEZA
/ GONZLEZ pour plate / M
method. The sterile liquid used
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA
for making dilutions can /simply
MICRO
be water, but a balanced salt
solution or growth medium may
yield /a MICROBIOLOGA
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA higher recovery. The / G
dilution factor is the reciprocal
of the dilution. For /spread GONZ
plating, further dilutions may be
necessary in order to spread
samples of 0.1 ml.
GONZLEZ CABEZA 29
ZLEZ T CNICA
CABEZA DEL NMERO
/ MICROBIOLOGA MS PROBABLE
Es un mtodo estdstico basado en series de diluciones y
A / MICROBIOLOGA
clculo estadstico /del
GONZLEZ
nmero deCABEZA
bacterias/ MICROBIOLOGA
`presentes en las / G
CROBIOLOGA
disoluciones /mas
GONZLEZ
altas. CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
IOLOGA / GONZLEZ CABEZA
Cuando mayor es la/ MICROBIOLOGA
dilucin necesaria / GONZLEZ C
Reducir/ MICROBIOLOGA
ZLEZ CABEZA a 0 el nmero de bacterias en una muestra
Mayor ser el nmero de bacterias en la misma.
Ventajas Tcnica
CROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA
fcil. / Idea general / MICROBIOLOGA
de la poblacin / GONZ
bacteriana. / Tambin se
usa para determinar el nmero de clulas de un cultivo mixto que pueden crecer
en un medio lquido. / Proporciona un 95% de posibilidades de que la poblacin
NZLEZ CABEZA
bacteriana / MICROBIOLOGA
este dentro / GONZLEZ CABEZA / MICR
de un determinado margen.
Desventajas Mtodo popular pero poco exacto.
GONZLEZ CABEZA 30
MTODO DE FILTACI
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA N.CABEZA / MICRO
/ GONZLEZ
CABEZA
Utilizados/ MICROBIOLOGA
cuando el nmero/ de GONZLEZ
bacterias esCABEZA
bajo, son / MICROBIOLO
filtros con
un poro de 0,45um que
A / MICROBIOLOGA retiene lasCABEZA
/ GONZLEZ bacterias,/ se filtra un volumen / G
MICROBIOLOGA
dado y se coloca
CROBIOLOGA el filtro sobre
/ GONZLEZ CABEZAuna /placa de medio de cultivo
MICROBIOLOGA / GONZ
apropiado, donde crecern tantas colonias como bacteria hayan
quedado adheridas al filtro.
ZLEZCuandoCABEZAla concentracin es baja y El
/ MICROBIOLOGA volumen de la
/ GONZLEZ muestra /es
CABEZA MICRO
grande La muestra se hace pasar por un filtro cuyo poro
retenga a la bacteria. Estas son transferidas a un medio de
A / MICROBIOLOGA
cultivo donde sern /contadas
las colonias.
VENTAJAS:
Nos permite poder separar las bacterias del medio acuoso.
DESVENTAJAS:
Hay la posibilidad
EZ CABEZA de que no todas
/ MICROBIOLOGA las bacterias
/ GONZLEZ se queden
CABEZA en el
/ MICROBIO
GONZLEZ CABEZA 31
filtro o sean transferidas.
MTODO/ GONZLEZ
CABEZA / MICROBIOLOGA DE FILTACICABEZA
N. / MICROBIOLO
GONZLEZ CABEZA 32
RECUENTO EN CMARA
Se puede utilizar diversos tipos de cmaras. En general se conoce
el volumen exacto CABEZA
del liquido / MICROBIOLOGA
que queda atrapado en el / lugar
GONZ
IOLOGA / GONZLEZ
donde se CABEZA
realiza el recuento, que/ se
MICROBIOLOGA
cuenta un nmero/ GONZLEZ
variable de C
estos cuadrados
GONZLEZ CABEZAy/ MICROBIOLOGA
se extrapola la /mediaGONZLEZal nmero
CABEZA de / M
microorganismo por mililitro.
VENTAJAS:
A / Cuando
se cuenta por CABEZA confundirnos.
cuadrados evitaremos / MICROBIOLOGA / G
CROBIOLOGA
DESVENTAJAS: / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
No puede
IOLOGA medir bacterias
/ GONZLEZ mviles.
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
No distingue
NZLEZ CABEZAlas clulas vivas de las muertas.
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICR
Es impreciso.
GONZLEZ CABEZA 33
CRECIMIENTO
CABEZA MICROBIANO
/ GONZLEZ
CABEZA / MICROBIOLO
Direct microscopic counting procedure using the Petroff-Hausser counting
CROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA chamber / MICROBIOLOGA / GONZ
GONZLEZ CABEZA 34
CITOMETRO DE
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA FLUJO. CABEZA / MICRO
/ GONZLEZ
Mtodo basado en hacer pasar una a una las clulas de una
A / MICROBIOLOGA
suspensin por un / sistema
GONZLEZ CABEZA /este
de deteccin, MICROBIOLOGA
sistema puede / G
contener un detector CABEZA
capaza / MICROBIOLOGA
de medir / GONZ
diferentes parmetros lo
que permite
IOLOGA identificar
/ GONZLEZ las bacterias
CABEZA durante su paso
/ MICROBIOLOGA por el C
/ GONZLEZ
detector.
ZLEZ CABEZAEs
VENTAJA.- / MICROBIOLOGA / GONZLEZ
un sistema automatizado y rpido. CABEZA / MICRO
DESVENTAJA.- Esta
A / MICROBIOLOGA tcnica sigue
/ GONZLEZ sin distinguir
CABEZA entre bacteria / G
/ MICROBIOLOGA
viables y no viables.
IOLOGA / GONZLEZ
Mediante un contadorCABEZA / MICROBIOLOGA
automtico / GONZLEZ C
de bacterias CONTADOR
COUNTER
NZLEZ CABEZA Mide la diferencia de conductividad
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ al pasar una
CABEZA / MICR
bacteria por
EZ CABEZA un orificio estrecho /conectado
/ MICROBIOLOGA GONZLEZa dos electrodos.
CABEZA / MICROBIO
GONZLEZ CABEZA 35
ZLEZ CABEZA / METODOS
INDIRECTOS
MEDICIN DE PESO
PESO HMEDO Utiliza una alcuota del medio
Centrifugndolo Pesando el sedimento. Mtodo inexacto. Es
IOLOGA
fcil de/ maniobrar.
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
PESO SECO
GONZLEZ CABEZA Liofilizaci n. Se deben / emplear
/ MICROBIOLOGA GONZLEZbalanzas muy / M
CABEZA
ZLEZexactas;
CABEZA un miligramo supone una/ GONZLEZ
/ MICROBIOLOGA desviacin enCABEZA
el nmero de
/ MICRO
bacterias
A / MICROBIOLOGA
MTODOS ANALTICOS / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
Componentes/ GONZLEZ
CROBIOLOGA Nitrgeno
de la bacteriaCABEZA total, protenas totales
o ADN.
IOLOGA Se consiguen
/ GONZLEZ medidas
CABEZA muy precisas. /Desventaja:
/ MICROBIOLOGA GONZLEZ C
Algunas bacterias presentan deficiencia en la conformacin las
NZLEZ CABEZA
molculas / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICR
de ADN.
GONZLEZ CABEZA 36
TURBIDIMETRIA
Estima la turbidez de una suspensin bacteriana mediante:
A) Fotmetro o Espectrofotmetro: Mide la luz transmitida = La
A /disminucin
MICROBIOLOGAde esta/ GONZLEZ CABEZAa / la
luz es proporcional MICROBIOLOGA
concentracin de/ G
microorganismos.
B) Nefelmetro:
IOLOGA / GONZLEZMide la luz dispersa.
CABEZA = A mayor dispersin
/ MICROBIOLOGA mayor C
/ GONZLEZ
concentracin microbiana.
VENTAJAS.- Es ms exacta y precisa, ya que se basa de aspectos
ZLEZ CABEZA
fsicos / MICROBIOLOGA
y qumicos de las bacterias./ GONZLEZ
/ Es un mtodoCABEZA / MICRO
de recuento
automatizado
CABEZA que da resultados
/ MICROBIOLOGA con clculosCABEZA
/ GONZLEZ matemticos.
/ MICROBIOLO
A /DESVENTAJAS:
MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
La presencia de precipitados u otras sustancias producidas por las
bacterias puede aumentar la turbidez. / El mtodo presenta el
IOLOGA
problema/ GONZLEZ CABEZA
de que no puede medir / MICROBIOLOGA
bacterias mviles. // No
GONZLEZ
distingue C
clulas CABEZA
NZLEZ vivas de/ MICROBIOLOGA
muertas. / Es impreciso
/ GONZLEZ si elCABEZA
nmero / MICR
de
EZmicroorganismo es escaso. / Es lento
CABEZA / MICROBIOLOGA y subjetivo.
/ GONZLEZ CABEZA / MICROBIO
GONZLEZ CABEZA 37
CRECIMIENTO
CABEZA MICROBIANO
/ GONZLEZ
CABEZA / MICROBIOLO
Turbidity measurements of microbial growth. (b) Typical
growth curve data obtained in Klett units or optical density
IOLOGA
(OD)/ for
GONZLEZ CABEZA
two organisms / MICROBIOLOGA
growing / GONZLEZ
at different growth rates. C
For practice,
GONZLEZ CABEZA calculate the generation
/ MICROBIOLOGA time (g) of the
/ GONZLEZ two / M
CABEZA
ZLEZcultures
CABEZA using the formula n = 3.3
/ MICROBIOLOGA (log N log
/ GONZLEZ N0) where
CABEZA N
/ MICRO
and N0 are two different Klett values taken between a time
interval t. Which organism is growing faster, A or B? (c)
Relationship between CABEZA
cell number or/ MICROBIOLOGA
dry weight and / G
turbidity / GONZLEZ
CROBIOLOGA readings. Note
CABEZA that the
/ MICROBIOLOGAone-to-one
/ GONZ
correspondence
IOLOGA / GONZLEZbetween
CABEZA these relationships breaks
/ MICROBIOLOGA down
/ GONZLEZ C
at high turbidities.
GONZLEZ CABEZA 38
CRECIMIENTO
ZLEZ CABEZA MICROBIANO
/ GONZLEZ CABEZA /MICRO
Turbidity measurements of microbial growth. (a) Measurements of turbidity
NZLEZ
are made CABEZA / MICROBIOLOGA
in a spectrophotometer / GONZLEZ
or photometer. CABEZA
The photocell / MICR
measures
EZincident
CABEZA light unscattered by cells /inGONZLEZ
/ MICROBIOLOGA suspension and gives readings
CABEZA / MICROBIOin
optical density or photometer units.
GONZLEZ CABEZA 39
GONZLEZ CABEZA 40
ESTUDIO
CABEZA DE LA ACTIVIDAD
/ MICROBIOLOGA METABLICA
A / MICROBIOLOGA
Puede realizarse de /diversas
GONZLEZ CABEZA
formas, entre las/ MICROBIOLOGA
que destacan: /G
Determinacin CABEZA
de un proceso / MICROBIOLOGA
metablico natural. / GONZ
Evaluacin
IOLOGA de una sustancia
/ GONZLEZ CABEZA catablica radioactiva/ aGONZLEZ
/ MICROBIOLOGA partir de C
un sustratoCABEZA
GONZLEZ marcado./ MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
Deteccin de la perdida de un compuesto persistente.
ZLEZ CABEZA /de
Asimilacin MICROBIOLOGA
un producto que/ GONZLEZ
por la accin CABEZA / MICRO
de enzimas
bacterianas / GONZLEZ
determina la aparicin CABEZA /cromgeno
de un compuesto MICROBIOLO
o fluorescente.
VENTAJA
IOLOGA / GONZLEZ
Tambin se empleaCABEZA / MICROBIOLOGA
para estudiar / GONZLEZ C
propiedades bioqumicas
bacterianas.
GONZLEZ CABEZA 41
FACTORES
GONZLEZ CABEZA QUE AFECTAN
/ MICROBIOLOGA EL CABEZA / M
/ GONZLEZ
ZLEZ CABEZACRECIMIENTO
/ MICROBIOLOGAMICROBIANO
GONZLEZ CABEZA 42
TEMPERATURA
Effect of
CABEZA
temperature/ MICROBIOLOGA
on / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
A /growth rate and
MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
the molecular
CROBIOLOGA
consequences for / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
the cell. The
IOLOGA three
/ GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
cardinal
temperatures
EZvary by organism.
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIO
GONZLEZ CABEZA 43
TEMPERATURA. Influye ms en el crecimiento de los
microorganismos. Cada microorganismo tiene una
temperatura / GONZLEZ
mnima, ptima (+ cercaCABEZA / MICROBIOLO
de la temperatura
A / MICROBIOLOGA
mxima) y mxima/ GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
de crecimiento.
Psicrfilos: Temperatura ptima baja (Pseudomonas,
Flavobacterium, Alcaligenes).
Mesfilos / GONZLEZ
: Temperatura ptima CABEZA
normal (la mayor / MICRO
parte de
CABEZAlos organismos).
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
Termfilos: Temperatura ptima alta (microorganismos
aislados de reas volcCABEZA
nicas). / MICROBIOLOGA / GONZ
Termfilos
NZLEZ CABEZA extremos: Temperatura
/ MICROBIOLOGA ptimaCABEZA
/ GONZLEZ muy alta
/ MICR
(Thermococcus celer 103 C)
GONZLEZ CABEZA 44
Relation of temperature to growth rates of a typical psychrophile, a
NZLEZ
typicalCABEZA / MICROBIOLOGA
mesophile, / GONZLEZ
a typical thermophile, and twoCABEZA
different/ MICR
hyperthermophiles.
EZ CABEZA The temperature
/ MICROBIOLOGA optima of the CABEZA
/ GONZLEZ example organisms
/ MICROBIO
are shown on the graph. GONZLEZ CABEZA 45
TEMPERATURA
Growth of
hyperthermophiles in CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
boiling / GONZLEZ
IOLOGA water. (a) CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
Boulder Spring, a
GONZLEZ
small boilingCABEZA
spring in / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
Yellowstone National
ZLEZPark.CABEZA
This spring / MICROBIOLOGA
is / GONZLEZ CABEZA / MICRO
superheated,
CABEZA having a
temperature 12C
A / MICROBIOLOGA
above the boiling / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
point. The mineral
CROBIOLOGA
deposits around/ GONZLEZ
the CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
spring consists
IOLOGA mainly
/ GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
of silica and sulfur.
GONZLEZ CABEZA 46
Growth of hyperthermophiles in boiling water. (b) Photomicrograph of
a microcolony / GONZLEZ
of prokaryotes that developed CABEZAslide
on a microscope / MICRO
immersed
CABEZA in a boiling spring such
/ MICROBIOLOGA as that shown
/ GONZLEZ in (a).
CABEZA / MICROBIOLO
GONZLEZ CABEZA 47
CABEZA / MICROBIOLOGA /pH
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
Microorganismos
CROBIOLOGA cambian
/ GONZLEZ el pH /
CABEZA al crecer se debe
MICROBIOLOGA / GONZ
aadir un tampn en el medio para mantener el pH
constante.
ZLEZ CABEZA
Para pH / neutros
MICROBIOLOGA
se utiliza el/ GONZLEZ CABEZA
tampn fosfato. / MICRO
pH de
ambientes
CABEZA naturales oscila
/ MICROBIOLOGA 5 y 9.
Acidfilos crecen a pH inferiores a 5 (Thiobacillus
pH: 0,5).
IOLOGA / Alcalin
GONZLEZfilos CABEZA
crecen a/ MICROBIOLOGA
pH superiores a 9 / (GONZLEZ
Bacillus C
pH: 11). / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICR
NZLEZ CABEZA
GONZLEZ CABEZA 48
CRECIMIENTO
MICROBIANO
Factores
The pH scale. Note
that although some
CROBIOLOGA
microorganisms/ GONZLEZ
can CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
live at very low or
very high pH, the
NZLEZ
cells CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICR
internal pH
remains near
neutrality GONZLEZ CABEZA 49
HALFILOS/: GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
A / MICROBIOLOGA
Microorganismos
CROBIOLOGA queCABEZA
/ GONZLEZ viven en/ altas concentraciones
MICROBIOLOGA de
/ GONZ
sales.
GONZLEZ CABEZA /: MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
OSMFILOS
Microorganismos
ZLEZ CABEZA que viven / en
/ MICROBIOLOGA altas concentraciones
GONZLEZ de
CABEZA / MICRO
CABEZA az cares.
XERFILOS:
Microorganismos queCABEZA / MICROBIOLOGA
viven en ambientes secos. / GONZ
GONZLEZ CABEZA 50
Effect of sodium
CRECIMIENTO MICROBIANO
ZLEZ
ion CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICRO
concentration on Factores
CABEZA
growth / MICROBIOLOGA
of / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
A microorganisms
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
of different salt
CROBIOLOGA
tolerances or / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
requirements.
IOLOGA
The / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
optimum
NaCl
concentration for
ZLEZ
marineCABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICRO
microorganisms
CABEZA
such as/ MICROBIOLOGA
V. / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
A fischeri
/3%; is about
MICROBIOLOGA
for extreme
CROBIOLOGA
halophiles, it is / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
between 15 and
30%, depending
on the organism
GONZLEZ CABEZA 51
Structures of some
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA
common / MICROBIOLO
compatible
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZAsolutes
/ MICROBIOLOGAin/ G
microorganisms. The
structures of glutamate
and
IOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA proline,
/ GONZLEZ other C
common solutes, were
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ
shown in Figure CABEZA
3.12. The/ M
formal CABEZA
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ name of ectoine
/ MICROis
1,4,5,6-tetrahydro-2-
methyl-4-pyrimidine
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZAcarboxylate. Note that all/ G
/ MICROBIOLOGA
the compounds shown
here are very polar / GONZ
(water
soluble) molecules.
GONZLEZ CABEZA 52
Structures of some common compatible solutes in microorganisms. The
ZLEZ CABEZA
structures / MICROBIOLOGA
of glutamate / GONZLEZ
and proline, other CABEZA
common solutes, / MICRO
were shown
in Figure 3.12. Note that all the compounds shown here are very polar
(water soluble) molecules
GONZLEZ CABEZA 53
OXIGENO
Aerobic, anaerobic, facultative, microaerophilic, and aerotolerant
A / MICROBIOLOGA
anaerobe growth, as/ GONZLEZ
revealed by the CABEZA
position /ofMICROBIOLOGA
microbial colonies / G
(depicted here/ as
CROBIOLOGA black dots) within
GONZLEZ CABEZA tubes/of thioglycolate broth culture
MICROBIOLOGA / GONZ
medium. A small amount of agar has been added to keep the liquid from
IOLOGA / GONZLEZ
becoming disturbed and CABEZA
the redox/ MICROBIOLOGA
dye, resazurin, which /isGONZLEZ
pink when C
oxidized and
GONZLEZ colorless
CABEZA when reduced, is added
/ MICROBIOLOGA as a redox indicator.
/ GONZLEZ CABEZA (a) / M
Oxygen penetrates only a short distance into the tube, so obligate
ZLEZ CABEZA
aerobes grow/ only
MICROBIOLOGA
at the surface. (b) / GONZLEZ CABEZA
Anaerobes, being / MICRO
sensitive to
oxygen,
CABEZA grow only away from /the
/ MICROBIOLOGA surface. (c) CABEZA
GONZLEZ Facultative /aerobes are
MICROBIOLO
able to grow in either the presence or the absence of oxygen and thus
A / MICROBIOLOGA
grow throughout the/ GONZLEZ
tube. However,CABEZA / MICROBIOLOGA
better growth occurs near the / G
surface because
CROBIOLOGA these organisms
/ GONZLEZ can respire.
CABEZA (d) Microaerophiles/grow
/ MICROBIOLOGA GONZ
away from the most oxic zone. (e) Aerotolerant anaerobes grow
IOLOGA / GONZLEZ
throughout CABEZAgrowth
the tube. However, / MICROBIOLOGA
is no better near/ GONZLEZ
the surface C
because
NZLEZ these organisms
CABEZA can only ferment.
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICR
GONZLEZ CABEZA 54
OXIGENO
(a) AEROBIOS
(b) ANAEROBIOS
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA(c) AEROBIOS
/ MICROBIOLOGA /G
FACULTATIVOS
(d) MICROAEROFILOS / GONZ
(e) ANAEROBIOS
AEROTOLERANTES
(Ver leyenda
NZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ anterior) / MICR
CABEZA
GONZLEZ CABEZA 55
OXIGENO
AEROBIOS
Obligados
CROBIOLOGA Requieren O2CABEZA
/ GONZLEZ para crecer (21%).
Facultativos No requieren pero crecen mejor en presencia
IOLOGA
de O/2.GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
ZLEZMICRAERFILOS
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICRO
Requieren
CABEZA pero a niveles ms
/ MICROBIOLOGA bajos que CABEZA
/ GONZLEZ los atmosfricos (1-
/ MICROBIOLO
15%).
CROBIOLOGA
ANAEROBIOS / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
Aerotolerantes
IOLOGA / GONZLEZ No requieren
CABEZA y crecen peor cuando
/ MICROBIOLOGA el O2
/ GONZLEZ C
est presente.
Obligados La presencia de O2 es letal.
GONZLEZ CABEZA 56
CRECIMIENTO
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZMICROBIANO
CABEZA / MICROBIOLO
Factores
ZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA /Incubation
GONZLEZ under
CABEZAanoxic
/ MICRO
conditions. (a) Anoxic jar. A
CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ
chemicalCABEZAreaction/ MICROBIOLO
in the
envelope in
A / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA the jar generates H2 / G
/ MICROBIOLOGA
+ CO2. The H2 reacts with O2 in
CROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA the / MICROBIOLOGA
jar on the surface /of GONZ
a
palladium catalyst to
IOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA yield H2O;
/ GONZLEZ C
the final atmosphere contains N2,
NZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA H2,/and
GONZLEZ
CO2. CABEZA / MICR
GONZLEZ CABEZA 57
POTENCIAL
CABEZA / MICROBIOLOGA DE AGUA
POTENCIAL DE AGUA (aw)
Requerimientos de/ GONZ
IOLOGAagua para realizar
/ GONZLEZ actividades
CABEZA metablicas.
/ MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
Valores de 0 a 1.
CABEZA /ElMICROBIOLOGA
aw del H2O pura es/ 1.
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
El aw de
CROBIOLOGA los frutos secos
/ GONZLEZ es 0,7./ MICROBIOLOGA / GONZ
CABEZA
IOLOGA /El
GONZLEZ CABEZA
aw de los campos / MICROBIOLOGA
de cultivo / GONZLEZ
se sita entre 0,9 y 1,0 C
GONZLEZ CABEZA 58
Four-electron
IOLOGA reduction
/ GONZLEZ CABEZAof O/2 MICROBIOLOGA
to water by stepwise addition
/ GONZLEZ C
of electrons. All the intermediates formed are reactive and
toxic to cells except for water, of course.
GONZLEZ CABEZA 59
Enzymes that destroy toxic
CABEZA
oxygen / MICROBIOLOGA
species. (a) / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
Catalases and (b)
A /peroxidases
MICROBIOLOGAare porphyrin- / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
containing
CROBIOLOGA / proteins,
GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / GONZ
although some flavoproteins
IOLOGA / GONZLEZ
may consume toxic oxygenCABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
species as well. (c)
GONZLEZ CABEZAare
Superoxide dismutases / MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / M
metal-containing
ZLEZ CABEZA / proteins,
the metals being copper and
zinc, manganese, or iron. (d) / GONZLEZ CABEZA / MICROBIOLO
Combined reaction of
A /superoxide
MICROBIOLOGA
dismutase andGONZLEZ CABEZA / MICROBIOLOGA / G
/
catalase. (e) Superoxide
reductase catalyzes the one
IOLOGA / GONZLEZ
electron reduction of O2- toCABEZA / MICROBIOLOGA / GONZLEZ C
H2O2 using reduced
NZLEZ
cytochromeCABEZAc as / MICROBIOLOGA
the / GONZLEZ CABEZA / MICR
EZelectron
CABEZA donor./ MICROBIOLOGA / GONZLEZ CABEZA / MICROBIO
GONZLEZ CABEZA 60

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