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Mtodos de anlisis e

implementacin de Calidad
en el Laboratorio de Suelos
EDITORA
Kloster Nanci
EEA Anguil INTA

AUTORES
Azcrate Pamela Noellemeyer Elke
EEA Anguil INTA Facultad de Agronoma, UNLPam
Baglioni Micaela Ostinelli Miriam
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, UNLPam Instituto de Suelos, INTA
Brambilla Clara Prez Micaela
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, UNLPam EEA Anguil INTA
Brambilla Emilio Quiroga Alberto
INTA UI Balcarce EEA Anguil INTA
Fernndez Romina Savio Marianela
EEA Anguil INTA Facultad de Ciencias Exactas y Naturales,
Kloster Nanci UNLPam, INCITAP
EEA Anguil INTA

REVISORES
Carreira Daniel
Instituto de Suelos, INTA
Marban Liliana
CONICET, INGEIS
Varela Mara Florencia
Facultad de Agronoma, UNLPam

EEA Anguil Ing. Agr. Guillermo Covas


Instituto Nacional de Tecnologa Agropecuaria
Agradecimientos

A Alfredo Bono por generar la idea de esta publicacin y revisar los apuntes hasta su versin final.
Al personal de apoyo y tcnico del Laboratorio de Suelo y Agua, en la actualidad Valentn Colotti y
Roberto Maldonado.
Al personal de campo del Grupo de Suelos y Gestin del Agua, en la actualidad Ral Olgun, Roberto
Gmez y Eduardo Calabaza.
A los revisores del manuscrito, por las sugerencias y comentarios que ayudaron a mejorar la calidad de
la publicacin.

Diseo Grfico
Dis. Grf. Francisco Etchart

Impresin
Gustavo J. Moyano
Impreso en los talleres grficos de la EEA INTA Anguil
Ing. Agr. Guillermo Covas

Tirada de 500 ejemplares


Junio de 2017

EDICIONES INTA
Centro Regional La Pampa-San Luis
EEA INTA Anguil Ing. Agr. Guillermo Covas
RN N5 Km 580, CP 6326, Anguil, La Pampa, Argentina

2 EEA INTA Anguil


Resumen Abstract
El suelo es un recurso no renovable sobre el cual Soils are a finite resource on which practically all
se desarrolla prcticamente la totalidad de la pro- agricultural and livestock production takes place.
duccin agrcola y ganadera. Los suelos agrcolas Agricultural soils degradation is an ongoing process
generalmente presentan deficiencias fsicas y qumi- leading to reduced soil physical and chemical qua-
cas, y los anlisis de suelo son una herramienta lity. Soil analyze is an important tool in the diagno-
importante en el diagnstico de fertilidad y evalua- sis of fertility and evaluation the soil production. Soil
cin de uso de los mismos. La evaluacin de suelos evaluation is useful for defining crop strategy, moni-
es necesaria para definir las estrategias de un culti- toring grain quality over time, evaluating the effects
vo, controlar variaciones de calidad del cultivo en el of different crop sequences, correcting soil fertility
tiempo, evaluar los efectos de distintas secuencias and others, such as buying a field. Therefore, this
de cultivos, corregir la fertilidad del suelo y otros, publication is an example of the approach between
como la compra de un campo. En esta publicacin el the different scientific-technological and productive
lector encontrar resultados de investigacin referi- actors. This publication has research results corres-
dos a mtodos de anlisis de suelos y experiencias ponding to methods of soil analysis and experiences
de la implementacin de un Sistema de Gestin de of the Quality Management System adoption, follo-
Calidad siguiendo el lineamiento de la Norma IRAM wing the guidelines of IRAM 301:2005 (ISO/IEC
301:2005 (ISO/IEC 17025:2005). La publicacin est 17025:2005). This publication has ten chapters. The
dividida en diez captulos. En el primero de ellos se first one describes quality aspects applied to soil
describen aspectos de calidad aplicados al anlisis analysis. In the following chapters is given a brief
de suelos. En los captulos siguientes, se realiza una introduction of each soil analysis, are described
breve introduccin de cada determinacin y se des- some techniques used in the soil laboratories of the
criben algunas de las tcnicas utilizadas en los labo- Pampean Region including improvements, recom-
ratorios de suelos de la Regin Pampeana, con las mendations of use and bibliographical support.
mejoras, recomendaciones de uso y el soporte Therefore, this publication will undoubtedly be very
bibliogrfico correspondiente. Se realizan compara- useful for professionals and technicians of public
ciones entre distintos mtodos de anlisis de sue- and private laboratories. In addition, it is of special
los, en funcin de la variabilidad que existe sobre interest as a bibliographic contribution destined to
los mismos. Por lo expuesto, esta publicacin cons- advanced and postgraduate students, of chemistry,
tituye un claro ejemplo del acercamiento entre los agronomy and related thematic.
sectores cientfico-tecnolgico y productivo. La
misma indudablemente ser muy til para asesores
profesionales y tcnicos de laboratorios pblicos y
privados. Adems, resultar de especial inters
como aporte bibliogrfico para estudiantes universi-
tarios y de postgrado, de las reas de qumica, agro-
noma y carreras afines.

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4 EEA INTA Anguil
Objetivo
El objetivo de esta publicacin tcnica es presen-
tar las acciones de mejora en la calidad de los resul-
tados obtenidos por el Laboratorio de Suelo y Agua,
perteneciente al Grupo de Suelos y Gestin del Agua
de la EEA Anguil, INTA. Para ello se incluyen resulta-
dos de investigacin en mtodos y controles de cali-
dad realizados por el laboratorio en los ltimos 10
aos de trabajo. Gran parte de la informacin plas-
mada en los distintos captulos de este trabajo fue
presentada previamente en publicaciones tcnicas
de la EEA Anguil y en congresos de la especialidad,
publicada en revistas indexadas y/o fueron parte de
trabajos de tesis de grado y posgrado. Esta publica-
cin constituye un producto de los proyectos
PNSUELO-1134034 Desarrollo e implementacin de
mtodos analticos, instrumentales y de gestin de
la calidad en la Red de Laboratorios de Suelo, Agua
y Vegetal (RILSAV) y PAMSL-1282101 Contribucin
al desarrollo territorial del este de La Pampa.

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Contenidos
Captulo 1. Aspectos de calidad aplicados al anlisis de suelos 9
Captulo 2. Comparacin de mtodos de medicin de pH 31
Captulo 3. Conductividad elctrica: comparacin del mtodo depasta saturada 35
a campo (simulado) vs extracto de saturacin en el laboratorio
Captulo 4. Carbono total, orgnico e inorgnico 39
Captulo 5. Nitrgeno total 47
Captulo 6. Nitrgeno disponible-Nitratos 51
Captulo 7. Capacidad de intercambio catinico 57
Captulo 8. Cationes intercambiables 63
Captulo 9. Azufre disponible y azufre total 69
Captulo 10. Comparacin de mtodos de determinacin de textura en Ustoles 75
de la Regin Semirida Pampeana

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Miriam Ostinelli y Nanci Kloster

1.
Dentro de un esquema productivo sustentable,
Aspectos de calidad
aplicados al anlisis
de suelos
profesional, quien realizar la interpretacin del
el anlisis de suelo es una herramienta esencial e dato, el diagnstico y la recomendacin. El laborato-
indispensable para la toma de decisiones sobre rio puede entregar material orientativo sobre la
prcticas de manejo agrcola. El anlisis de suelo interpretacin de los resultados pero no es su obli-
puede realizarse con diferentes objetivos: gacin, a menos que incluya estos servicios (diag-
nstico y recomendacin) entre los ofrecidos al
para realizar una caracterizacin general de un cliente. Para esto necesitar contar con informacin
lote, que conlleva a una decisin de comercializa- adicional (historia del potrero, rotaciones, condicio-
cin; nes fsicas del lote, rendimiento objetivo, personal
para recomendar una fertilizacin, lo cual requie- facultado para el diagnstico y recomendacin res-
re considerar el nutriente y el tipo de cultivo; pectiva, etc.).
para evaluar problemticas especficas (acidez,
sodicidad, salinidad, contaminacin, etc). Una de las herramientas que permite responder
al requerimiento de los clientes es la implementa-
Un esquema de manejo sustentable requiere, cin de un Sistema de Gestin de Calidad (Compa
adems del anlisis de suelo, un muestreo adecua- Beltrn & Ros Castro, 2002). Esta herramienta de
do, la posterior interpretacin del dato emitido por gestin busca disminuir y en lo posible eliminar no
el laboratorio y el diagnstico para realizar la reco- conformidades. Adems permite controlar los facto-
mendacin. res que afectan la calidad del servicio, asegurar y
mejorar el mismo, proteger los intereses del labora-
En lneas generales el cliente requiere que los torio y primordialmente dar confianza al cliente. En
resultados emitidos por el laboratorio sean exactos, Argentina, la Norma IRAM 301:2005 (ISO/IEC
objetivos, rpidos y de bajo costo. Cuando se consi- 17025:2005) establece los requisitos generales que
dera la veracidad de los resultados emitidos por un debe cumplir un laboratorio, si desea demostrar
laboratorio, surge la idea general de que debe traba- competencia tcnica para la realizacin de ensayos
jarse siempre con el mismo laboratorio, dado que o calibraciones. Esta Norma incluye requisitos relati-
ello permite comparar resultados de anlisis a largo vos a la gestin y requisitos tcnicos que tiene que
plazo. Sin embargo esto se contradice con uno de cumplir el laboratorio para ser capaz de asegurar su
los principios ms importantes de la prctica analti- competencia y la calidad de sus resultados. Los
ca que postula que las mediciones analticas de un requisitos se mencionan en la Tabla 1.1.
laboratorio deberan ser concordantes a las realiza-
das en otro laboratorio. Los laboratorios de Suelo, Agua y Material
Vegetal de INTA, nucleados en la Red INTA de
Al mencionar que el resultado de un anlisis de Laboratorios de Suelo, Agua y Material Vegetal (RIL-
suelo debe ser objetivo, se est indicando que el SAV), trabajan desde el ao 2006 en la implementa-
informe de resultados emitido por el laboratorio se cin de la Norma IRAM 301 (ISO/IEC 17025:2005). El
limitar a expresar un dato de calidad analtica. El trabajo en red incluye mltiples aspectos, entre
informe debe ser posteriormente evaluado por un ellos:

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Tabla 1.1. Requisitos relativos a la gestin y tcnicos de la Norma IRAM 301.

redaccin de documentos del Sistema de del funcionamiento del laboratorio, indicados en la


Gestin de Calidad (procedimientos, instructi- Tabla 1.1, sobre los que se hace referencia ms ade-
vos), que luego son adaptados, en cuestiones lante.
puntuales, a las realidades de cada laboratorio
de la Red, Requisitos relativos a la gestin
evaluacin de la performance de metodologas
de anlisis no normalizadas, para definir su apti- 4.4 Revisin de los pedidos, ofertas y contratos
tud para el uso agropecuario (es decir que satis- En este aspecto, el laboratorio ha establecido las
faga las necesidades del cliente). Se evala la condiciones del servicio, es decir las condiciones en
respuesta del mtodo frente a distintos tipos de que se conducen los ensayos. Tanto en lo que se
suelo y el ajuste de sus resultados con los de los refiere a los mtodos como a las condiciones tcni-
mtodos usados previamente, cas empleadas, el tiempo de entrega de resultados y
realizacin de Ensayos de Comparacin los costos; y la comunicacin de esta informacin al
Interlaboratorio (ECI) de suelo, agua y material cliente. De este modo se establece un acuerdo sobre
vegetal, todas estas condiciones antes de iniciar el trabajo.
representacin en la Comisin Suelo para uso Se trabaja peridicamente en lo que se refiere a los
agropecuario del Convenio IRAM-SAGPyA, para aspectos tcnicos (mtodos, condiciones ambienta-
la normalizacin de metodologas de anlisis de les, equipamiento, capacitacin del personal, etc.)
suelo, de modo de mantenerlos actualizados y adecuados
capacitacin de recursos humanos que traba- para el propsito planteado.
jan en los laboratorios de la Red (Ostinelli et al.,
2012). El tiempo de entrega de los resultados de los
ensayos se calcula en funcin del tiempo empleado
El Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA Anguil en cada etapa del proceso, es decir desde que se
est trabajando, desde su participacin en la RIL- recibe la muestra hasta que se emite el informe de
SAV, en la implementacin de Sistemas de Gestin resultados del ensayo. Cuando la muestra ingresa al
de Calidad. Sus avances principales en la implemen- laboratorio se la identifica, se le asigna un nmero de
tacin se focalizaron sobre algunos puntos crticos laboratorio y se registran los datos aportados por el

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cliente. Luego de su ingreso, se realiza el pretrata- insumos y servicios que cumplan con los requisitos
miento de la muestra de suelo, etapa que incluye el especificados y en las condiciones (tiempo y forma)
secado, molienda y tamizado de la misma, la realiza- requeridas. Cuenta con varios registros asociados:
cin de los anlisis fsico-qumicos solicitados y la ela- solicitud interna de compra, solicitud de cotizacin,
boracin y envo del informe de resultados. Se prev orden de compra, solicitud de gastos, informe tcni-
que la etapa de anlisis (para la mayora de los ensa- co, recepcin de insumos y suministros. Algunos de
yos) no demore ms de una semana, plazo estipulado ellos tambin se muestran, a modo de ejemplo, en el
en las condiciones del servicio. Sin embargo, como Anexo.
esto puede verse influenciado por la demanda de
anlisis en el laboratorio, si, circunstancialmente, se El procedimiento de contratacin y compra de
previera un plazo mayor, se comunica al cliente al servicios y suministros se implement en el ao
momento de recibir la muestra, de modo de resolver 2012 y se mantiene vigente a la fecha, resultando de
cualquier diferencia antes de iniciar el trabajo. El suma utilidad en la organizacin y la gestin de
registro de la comunicacin al cliente es va correo compras del laboratorio.
electrnico, telefnico, o personal.
4.7 Servicios al cliente
Al definir el costo del anlisis de suelo, se han En el Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA
considerado los reactivos e instrumental adecuado Anguil se procesan muestras provenientes tanto de
para cada ensayo, los costos inherentes al control clientes internos (investigadores de la EEA) como
de la calidad de los resultados emitidos, tales como externos (investigadores de otras EEAs de INTA y de
la utilizacin de material de referencia, la calibracin otros organismos, productores, etc.). Cualquiera sea
y verificacin peridica de equipos, la participacin el caso, el laboratorio est dispuesto a cooperar con
en programas interlaboratorio, y el adecuado mane- ellos, aclarar cualquier duda que planteen respecto
jo de residuos. a la actividad y al desempeo del laboratorio y
garantizar la confidencialidad hacia otros clientes.
Dado que es fundamental contar con personal De igual modo, busca mantener a sus clientes infor-
idneo para cada tarea, adems de su formacin se mados, toda vez que lo requieran, sobre la marcha
tiene en cuenta la continua participacin en activi- de los ensayos solicitados o cualquier cambio o
dades de capacitacin, tanto las incluidas en la ruti- imprevisto que pueda surgir durante la ejecucin de
na (actividad diaria) como aquellas en las que el per- los mismos. Se encuentra pendiente de resolucin
sonal participa externamente al laboratorio (ofreci- un aspecto de importancia como es contar con regis-
das en el mbito de la RILSAV u otras). Estas activi- tro de informacin de retorno de los clientes (por
dades son tenidas en cuenta tanto en lo que hace al ejemplo encuesta de satisfaccin).
tiempo dedicado como a los costos involucrados
(traslados, matrculas, etc.). 4.10 al 4.12 Acciones de mejora, acciones
correctivas, acciones preventivas
4.6 Compras de servicios y suministros Estas acciones se abordan como parte de un pro-
La compra de servicios y suministros es un ceso pro-activo destinado a identificar oportunida-
aspecto crtico del funcionamiento del laboratorio. des de mejora, corregir y evitar no conformidades.
En una institucin como el INTA los recursos involu- En este sentido, el Laboratorio de Suelo y Agua de la
crados pueden provenir de diferentes fuentes, y por EEA Anguil analiza los resultados de los diagramas
lo tanto, la administracin de los mismos recae en de control obtenidos a partir del anlisis de mues-
distintas reas especficas externas al laboratorio, lo tras patrn interno, los resultados de calibraciones y
cual dificulta la realizacin de compras. Recono- verificaciones de equipos, el anlisis de los resulta-
ciendo este aspecto crtico, se elabor un procedi- dos de participacin en interlaboratorio. Adems se
miento de contratacin y compra de servicios y identifican posibilidades de mejora en las distintas
suministros del laboratorio que afectan la calidad de actividades y etapas analticas desarrolladas en el
los ensayos (Anexo 1). El mismo contempla los laboratorio.
aspectos principales que garantizan la provisin de

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 11


Requisitos tcnicos 5.4 Mtodos de ensayo y validacin de mtodos
El laboratorio debe utilizar mtodos de ensayo
5.2 Personal que satisfagan las necesidades del cliente, adoptan-
Como se mencion en relacin a este tem, la do preferentemente los mtodos publicados como
Alta Direccin del laboratorio asegura la competen- Normas. En la actualidad el organismo de normaliza-
cia tcnica de todo el personal que realiza ensayos o cin en Argentina, IRAM, cuenta con varias Normas
calibraciones, opera equipos especficos, evala aplicadas al anlisis de suelo. Las Normas son el
resultados y firma los informes de los ensayos. Para resultado de un trabajo colaborativo de distintos
ello se formulan los Perfiles de Puesto de Trabajo laboratorios de instituciones pblicas y privados,
(Anexo 6) que definen los requerimientos en cuanto donde el aporte de los laboratorios de la RILSAV,
a formacin, capacitacin y aptitudes del personal tanto en la redaccin, pruebas de laboratorios y con-
clave afectado a los ensayos o calibraciones, los troles de pre-validacin, es destacado. El trabajo
cuales se mantienen actualizados. Asimismo, el coordinado de estos laboratorios, a travs del
laboratorio identifica las necesidades de capacita- Programa de Comparacin Interlaboratorio de la
cin. El Programa de Capacitacin es pertinente a Red, es lo que permite la evaluacin estadstica de
las tareas presentes y futuras del laboratorio. la dispersin de dichos mtodos (base para la vali-
Cuando se requiere de la asistencia de personal tc- dacin de los mismos), la cual se incluye como
nico y de apoyo clave, ajeno al laboratorio, ya sea anexo en cada una de las Normas. Algunas de estas
bajo contrato o a ttulo suplementario, tal como el Normas han sido aprobadas y otras estn en vas de
caso de las prcticas profesionales, el laboratorio normalizacin. Se mencionan a continuacin:
asegura que dicho personal es supervisado, es com-
petente, y trabaja de acuerdo con el Sistema de Normas IRAM vigentes (publicadas)
Gestin del laboratorio. IRAM-SAGyP 29570-1:2010. Calidad ambiental.
Calidad del suelo. Determinacin de fsforo
5.3 Instalaciones y condiciones ambientales extrable en suelos. Parte 1: Mtodo de Bray
El Laboratorio cuenta con instalaciones adecua- Kurtz 1 modificado (Extraccin con solucin de
das para la recepcin y atencin del cliente, trata- fluoruro de amonio cido clorhdrico) (en revi-
miento de muestras y realizacin de los ensayos. El sin).
Director Tcnico asegura las condiciones de orden y IRAM-SAGyP 29570-2:2014. Calidad ambiental.
limpieza para evitar posibles impactos negativos Calidad del suelo. Determinacin de fsforo
sobre la calidad de los resultados de los ensayos. extrable en suelos. Parte 2: Olsen (Extraccin
con bicarbonato de sodio).
La utilizacin de elementos de proteccin perso- IRAM-SAGyP 29571-1:2008. Calidad ambiental.
nal es de carcter obligatorio y el tipo de proteccin Calidad del suelo. Determinacin de materia
(visual, respiratoria, manos, etc.) se indica en el pro- orgnica en suelo. Parte 1. Mtodo de prdida de
cedimiento de trabajo de cada ensayo. Se verifica el masa por calcinacin.
funcionamiento de equipos afectados a la seguridad IRAM-SAGyP 29571-2:2011. Calidad ambiental.
del personal, tales como campanas de extraccin de Calidad del suelo. Determinacin de materia
gases, ducha de seguridad y lavaojos, cilindros de orgnica en suelo. Parte 2 Determinacin de
gases y compresores. carbono orgnico oxidable por mezcla oxidante
fuerte, escala semi-micro.
Se procura disminuir la generacin de residuos IRAM-SAGyP 29571-3:2016. Calidad ambiental.
peligrosos a partir de la adopcin de tcnicas que Calidad del suelo. Determinacin de materia
requieran menor volumen de reactivos o bien a par- orgnica en suelo. Parte 3 Determinacin de
tir del empleo de equipos que no generan residuos carbono orgnico oxidable por mezcla oxidante
peligrosos. En caso de generacin de este tipo de fuerte, micro escala.
residuos, stos se recolectan en bidones, se clasifi- IRAM-SAGyP 29578-1:2009. Calidad ambiental.
can de acuerdo a su peligrosidad y se gestiona su Calidad del suelo. Pretratamiento de muestras
tratamiento o disposicin final por medio de un ser- de suelo para uso agropecuario para anlisis fsi-
vicio externo. cos y qumicos.

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Normas IRAM SAGyP en estudio ratorio especfico, en cambio, slo debe probar las
IRAM-SAGyP 29572. Calidad ambiental. condiciones de ejecucin del mtodo en el mencio-
Calidad del suelo. Determinacin de nitrgeno nado laboratorio, lo cual resulta una tarea mucho
en suelo por el mtodo Kjeldahl modificado. ms sencilla y con menor costo (tiempo, reactivos,
IRAM-SAGyP 29573. Calidad ambiental. personal, etc.).
Calidad del suelo. Extraccin de amonio, nitrito y
nitrato en muestras de suelo. El Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA Anguil
IRAM-SAGyP 29574. Calidad ambiental. ha trabajado en la validacin de algunos mtodos
Calidad del suelo. Determinacin de pH en suelo adoptados por el laboratorio. Entre ellos la determi-
para uso agropecuario. nacin de carbono y nitrgeno total por combustin
IRAM-SAGyP 29575. Calidad ambiental. seca (Prez, 2013), la determinacin de nitratos con
Calidad del suelo. Determinacin de azufre inor- el mtodo del cido cromotrpico (Brambilla et al.,
gnico (sulfato) extrable en suelos. 2013) y la determinacin de la capacidad de inter-
IRAM-SAGyP 29576-1. Calidad ambiental. cambio catinico del suelo empleando el mtodo de
Calidad del suelo. Determinacin de amonio, extraccin con acetato de amonio 1 mol L-1 a pH 7
nitrito y nitrato por destilacin. (Kloster et al., 2010). Algunos detalles de las valida-
IRAM-SAGyP 29576-2. Calidad ambiental. ciones de dichos mtodos se mencionan en los
Calidad del suelo. Determinacin de amonio, Captulos 4, 5, 6 y 7 respectivamente.
nitrito y nitrato por colorimetra. Parte 2:
Diazotacin con Snedd. 5.5 Equipos
IRAM-SAGyP 29577. Calidad ambiental. Las condiciones de los equipos crticos y los
Calidad del suelo. Capacidad de intercambio materiales de referencia afectados a su control son
catinico y cationes intercambiables. aspectos bsicos a tener en cuenta para asegurar la
IRAM-SAGyP 29579. Calidad ambiental. calidad de los resultados emitidos. Por ello es indis-
Calidad del suelo. Determinacin de la conducti- pensable disponer de una herramienta que permita
vidad elctrica en suelos de uso agropecuario. asegurar el adecuado control de los mismos. Los
IRAM-SAGyP 29590. Calidad ambiental. laboratorios integrantes de la RILSAV elaboraron un
Calidad del suelo. Determinacin de la humedad procedimiento de gestin de instrumentos de medi-
en suelo. da que incluye los controles necesarios (calibracio-
nes, verificaciones y mantenimiento) y su documen-
Los laboratorios de anlisis de suelo, agua y tacin en los registros correspondientes (Kloster et
material vegetal que forman parte de la RILSAV han al., 2011). Estos registros aportan evidencia que
implementado los mtodos normalizados, o en pro- garantiza la calidad y trazabilidad de las mediciones,
ceso de normalizacin, que se disponen para anli- segn lo establecido en este requisito de la Norma
sis de suelos. IRAM 301 (ISO/IEC 17025:2005). El Laboratorio de la
EEA Anguil implement este procedimiento para los
La Norma IRAM-SAGyP 29578:2009, de pretrata- equipos afectados al Sistema de Gestin de Calidad
miento de muestras de suelo para uso agropecuario, en el ao 2011. En el Anexo (7, 8, 9) se muestran a
propone el secado de muestra en estufa a 40C y su modo de ejemplo los registros derivados de este
aplicacin implica una reduccin del tiempo total de procedimiento.
anlisis respecto del tradicional secado al aire.
Algunos equipos crticos requieren de la elabora-
La validacin no es ms que la declaracin de cin de procedimientos para la verificacin.
aptitud de un mtodo para un uso especfico. En Azcrate et al. (2011) elaboraron una gua para la
este sentido, debe tenerse presente que para aque- verificacin de espectrofotmetros UV-visible utili-
llos ensayos que no cuentan con un mtodo norma- zados en el anlisis de suelo y agua trabajando a
lizado, el laboratorio debe realizar una validacin partir de las indicaciones del manual del equipo y
ms profunda, con el fin de evaluar los distintos bibliografa de la temtica. A partir de dicha gua
parmetros que garantizan su aptitud. La validacin surge un registro de verificacin del equipo (Anexo
de un mtodo normalizado para su uso en un labo- 10). Los valores de aceptabilidad de los parmetros

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 13


fueron tomados de bibliografa de la industria far- do el responsable del laboratorio debe evaluar la
macutica y de lineamientos de la farmacopea de concordancia de la informacin proveniente de los
diferentes pases. Sin embargo debera evaluarse la distintos ensayos realizados a la muestra y, si cuen-
posibilidad de modificar los rangos de aceptabilidad ta con informacin del lote, su correspondencia.
de los parmetros propuestos debido a que, al tra- Esto contribuye a investigar posibles desvos o deci-
tarse del anlisis de muestras de suelo para uso dir la repeticin o corroboracin de algn ensayo.
agropecuario, podra permitirse una mayor flexibili-
dad en los valores lmites exigidos para los espec- 5.9 Aseguramiento de la calidad de los resultados
trofotmetros utilizados en sta disciplina. Luego de de ensayo
cinco aos de verificaciones realizadas sobre un La Norma IRAM 301 (ISO/IEC 17025:2005) indica
espectrofotmetro marca Metrolab, modelo 1600, se que el laboratorio debe tener procedimientos de
observ que la inexactitud fotomtrica llegaba al 7,5 control de calidad para realizar el seguimiento de la
%, siendo el mximo permitido en la gua de verifica- validez de los ensayos y un registro de los datos
cin de 3 %. Dado que los resultados de los ensayos resultantes. El Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA
realizados con tal equipo arrojaron resultados satis- Anguil emplea como elementos principales para
factorios en el Ensayo de comparacin asegurar la calidad los siguientes controles:
Interlaboratorio (PROINSA), se resuelve aumentar el
lmite de inexactitud fotomtrica a un valor de 7,5 % 5.9.1 Control de calidad interno: para ello se
para los espectrofotmetros UV-visible utilizados en cuenta con una muestra patrn interno preparado
anlisis de suelos. en el laboratorio, cuyo valor medio y desvo se cal-
cul a partir de repeticiones (15 rplicas) realizadas
Otros equipos definidos como crticos en el labo- en diferentes das de ensayo (Vzquez, 2005). Una
ratorio son las balanzas analticas y de precisin, el vez que tal muestra se encuentra caracterizada, se
material volumtrico afectado a los ensayos, los ter- analiza, habitualmente, de forma conjunta en cada
mmetros, pHmetros y conductmetros. Estos equi- tanda de muestras a analizar y su resultado se regis-
pos se incluyen dentro del cronograma anual de cali- tra en un diagrama de control. Este ltimo se cons-
bracin, verificacin y mantenimiento. La calibracin truye a partir del valor medio y los desvos del
de las balanzas y material volumtrico (pipetas patrn interno. Con estos parmetros se trazan la
automticas, buretas, dispensadores) se realiza lnea correspondiente a la media, las lneas de aler-
internamente con un juego de pesas de clase E2, ta, en , y las lneas de accin, en ,
empleando las herramientas de calibracin de INTA donde X es el valor medio del patrn interno, DS es
(2015). Mientras que la calibracin de pHmetros y el desvo estndar y n es el nmero de rplicas en
conductimetros se realiza empleando las soluciones que ambos parmetros fueron obtenidos (Miller &
de calibracin recomendadas por el fabricante de Miller, 1993). En este diagrama se grafican rutinaria-
los equipos. mente los valores del patrn interno, en funcin del
tiempo. En el caso de que un valor caiga fuera de las
5.8 Manipulacin del tem de ensayo lneas de accin, se debe detener el proceso e inves-
Cuando la muestra ingresa al laboratorio se la tigar la causa de lo sucedido. Si un valor cae entre
identifica, se le asigna un nmero de laboratorio y se las lneas de alerta y las de accin, no se detiene el
registran datos aportados por el cliente (nombre del proceso, pero se investiga la causa y, de ser necesa-
productor y/o establecimiento, tipo de anlisis rio, se repiten algunas o todas las muestras de la
requerido, procedencia de las muestras, correo elec- tanda (en funcin de lo que surja de la investigacin y
trnico, telfono, N de CUIT y direccin postal). la coherencia de los resultados). Un diagrama de con-
Luego de su ingreso al laboratorio, todo el manejo trol para el anlisis de nitrgeno total en suelo por el
de la muestra se realiza empleando el nmero de mtodo de Kjeldahl se muestra en la Figura 1.1.
laboratorio asignado, lo cual contribuye a la objeti-
vidad de los resultados. De esta manera el analista 5.9.2 Participacin en comparaciones interlabo-
no tiene una referencia directa sobre el origen o la ratorio: el Laboratorio de Suelo y Agua participa en
procedencia de la muestra y esto slo se recupera al el Programa de Ensayos de Comparacin
momento de realizar el informe de resultados, cuan- Interlaboratorios de la RILSAV desde el ao 2006 y

14 EEA INTA Anguil


Figura 1.1. Diagrama de
control para la determina-
cin de nitrgeno total en
patrn interno N 2 por el
mtodo de Kjeldahl.
(X=0,136; DS=0,013)

en el Programa Nacional de Interlaboratorios de 5.10 Informe de los resultados


Suelos Agropecuarios (PROINSA) desde el ao El Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA Anguil ha
2009. adaptado sus formularios de informe para que resul-
ten exactos, objetivos, claros y no ambiguos, tal cual
En el Programa interlaboratorio de la RILSAV par- lo requerido por la Norma IRAM 301 (ISO/IEC
ticipan los laboratorios de INTA. Es un Programa 17025:2005). Cada informe incluye: ttulo, nombre y
colaborativo y por ello ha alentado desde sus inicios direccin del laboratorio, identificacin unvoca del
a la evaluacin de las nuevas metodologas consen- informe, nombre y direccin del cliente, identificacin
suadas, en vas de normalizacin y normalizadas. del mtodo utilizado, una descripcin e identificacin
Desde sus comienzos los objetivos fueron: evaluar del tem de ensayo (en particular toda informacin que
estadsticamente la dispersin de los resultados resulte indispensable para asegurar la trazabilidad de
obtenidos para un mismo ensayo en los distintos los resultados, como la identificacin de origen), fecha
laboratorios de la Red; evaluar el comportamiento de recepcin, los resultados de ensayo con sus unida-
de las metodologas que se hallan en proceso de des de medida, el nombre y funcin de la persona que
normalizacin; identificar las dificultades de su autoriza el informe de ensayo y una declaracin de
implementacin y permitir a los laboratorios partici- que los resultados slo estn relacionados con el tem
pantes tomar acciones correctivas cuando se identi- de ensayo en cuestin. Un modelo de informe emitido
fiquen desvos aleatorios y/o sistemticos en los se muestra en Anexo 11.
resultados (Ostinelli & Carreira, 2010).
A modo de sntesis, en este captulo menciona-
Por su parte el PROINSA provee ensayos de apti- mos que la obtencin de informacin analtica signi-
tud interlaboratorios para anlisis de suelo y tiene ficativa, que permita adoptar decisiones tcnica-
como objetivo propender a mejorar la calidad de los mente correctas para la resolucin de problemas en
resultados analticos de los ensayos que realizan los el mbito agronmico y medioambiental, requiere
laboratorios de suelos pblicos y privados de la de la implementacin de un Sistema de Gestin de
Repblica Argentina (MINAGRI, 2016). El PROINSA la Calidad en el laboratorio. Esto es, debe estable-
realiza la evaluacin del desempeo del laboratorio cerse claramente lo que hay que hacer para obtener
a partir del parmetro z (z<2 resultado satisfacto- la calidad requerida y hacer lo que se ha estableci-
rio, 2>z>3 resultado cuestionable, z>3 resultado do. El Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA Anguil,
no satisfactorio). Este mecanismo permite al labora- a partir de su trabajo conjunto con los laboratorios
torio verificar sus resultados y emprender acciones de INTA nucleados en la RILSAV, est trabajando con
correctivas en los casos de que stos resulten cues- el fin de propender a la implementacin de un
tionables o no satisfactorios. Sistema de Gestin de Calidad.

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 15


Bibliografa

Azcrate, MP; NS Kloster; M Ostinelli & D Carreira. 2011.


Gua para la verificacin de espectrofotmetros UV-visible
utilizados en el anlisis de suelo y agua. VI Iberolab.
Congreso virtual Iberoamericano.
Brambilla, E; N Kloster, A Bono & J Camia. 2013.
Evaluacin de mtodos para determinar nitrato en suelos.
Ciencia del Suelo. 31(2):245-252.
Compa Beltrn, R & A Ros Castro. 2002. Garanta de
Calidad en los laboratorios analticos. Ed. Sntesis.
INTA, Gerencia de Procesos y Calidad. 2015. https://cola-
boracion.inta.gob.ar/dnasicyc/gecal/metrologia. Fecha de
ltimo acceso: 2017.
Kloster, N; P Azcarate; M Ostinelli & D Carreira. 2010.
Validacin de mtodo de ensayo: determinacin de CIC
empleando Acetato de Amonio pH 7. XXII Congreso
Argentino de la Ciencia del Suelo. Rosario.
Kloster, NS; S Lpez; MP Azcrate; J Huidobro; BE Iwasita
& M Ostinelli. 2011. Gestin de instrumentos de medida en
la RILSAV. VI Iberolab. Congreso virtual Iberoamericano.
Miller, JC & JN Miller. 1993. Estadstica para qumica anal-
tica. 2 ed. Delaware: Addison-Wesley. pp 210.
MINAGRI. 2016. http://www.minagri.gob.ar/site/agricul-
tura/PROINSA/index.php. Fecha de ltimo acceso: 2017.
Ostinelli, M & D Carreira. 2010. Programa de control de
interlaboratorios. Experiencias de la RILSAV. XXII Congreso
Argentino de la Ciencia del Suelo. Rosario.
Ostinelli, M; D Carreira; MP Azcrate; S Lpez; E Otero
Estrada; A Sonsino; G Yocco & A Mansur. 2012. Experiencia
pedaggica colectiva en la construccin de conocimiento
para la mejora del desempeo de los laboratorios. XXIII
Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo. Mar del Plata.
Prez, MM. 2013. Anlisis de carbono y nitrgeno en
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da pampeana empleando el mtodo instrumental de oxida-
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Vzquez, ME. 2005. Captulo 1. Calidad. Controles inter-
nos y externos de calidad. In: Marbn L & S Ratto (edits).
Tecnologas en anlisis de suelos. Buenos Aires. AACS. pp
37-48.

16 EEA INTA Anguil


ANEXO.
Documentos del SGC del Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA Anguil

Anexo 1. Ejemplo
de Procedimiento
de compra de servi-
cios y suministro.

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 17


18 EEA INTA Anguil
Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 19
Anexo 2. Ejemplo
de registro de soli-
citud interna de
compras.

Anexo 3. Ejemplo
de registro de soli-
citud de cotizacin.

20 EEA INTA Anguil


Anexo 4. Ejemplo
de registro de
orden de compra
emitida por el labo-
ratorio.

Anexo 5. Ejemplo de registro de recepcin de insumos y suministros

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 21


Anexo 3. Ejemplo
de registro de soli-
citud de cotizacin.

22 EEA INTA Anguil


Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 23
24 EEA INTA Anguil
Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 25
26 EEA INTA Anguil
Anexo 7. Ejemplo de listado maestro de instrumentos de medida.

Anexo 8. Ejemplo de programa de calibracin (C), verificacin (V) y mantenimiento (M) de instrumentos de medida.

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 27


Anexo 9. Ejemplo
de registro de his-
torial del equipo.

28 EEA INTA Anguil


Anexo 10. Ejemplo
de registro de veri-
ficacin de espec-
trofotmetro UV-
visible en un labo-
ratorio de suelo.

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 29


Anexo 11. Modelo de informe de anlisis emitido por el laboratorio.

30 EEA INTA Anguil


Pamela Azcarate y Nanci Kloster

2.
El pH es una de las mediciones qumicas ms
Comparacin de mtodos
de medicin de pH
La Casa et al., 2003). La Red INTA de Laboratorios de
simple e importante que se puede hacer en un Suelo, Agua y Vegetales (RILSAV) propone realizar la
suelo. No solo indica si un suelo es cido, neutro o determinacin en relacin suelo:agua 1:2,5, emple-
alcalino, sino que aporta informacin bsica para ando agua destilada y realizando la medida luego de
conocer su potencial de uso agrcola, estimar la dis- 2 h de reposo de la suspensin.
ponibilidad de nutrientes esenciales y la toxicidad
de otros elementos (Miller & Kissel, 2010). Permite En el Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA
predecir los cationes dominantes en los coloides del Anguil se ha realizado histricamente la determina-
suelo y est involucrado en la retencin de plaguici- cin de pH en pasta saturada de suelo. Esto implica
das, factor importante al momento de evaluar conta- que los resultados de la mayor parte de los trabajos
minacin de suelos y aguas y/o persistencia de los de investigacin en el rea de influencia de la EEA
mismos (Porfiri et al., 2015). Anguil y los resultados informados a productores
que requieren el servicio de anlisis, han sido emiti-
En el laboratorio el pH puede medirse de distin- dos con esta metodologa. Desde el ao 2007, con el
tas maneras de acuerdo al objetivo deseado: pH avance de la utilizacin de la medida en relacin
actual, pH potencial y pH hidroltico. El pH actual es suelo:agua 1:2,5, fue prioritario para el laboratorio y
aquel que cuantifica los iones H+ presentes en la sus clientes determinar qu grado de concordancia
solucin del suelo y se considera un reflejo de lo que existe entre los dos mtodos de medida de pH
encontrara una planta en su ambiente radicular. El (Kloster et al., 2008). Se intent relacionar las dos
pH potencial cuantifica no solo los H+ en solucin, metodologas empleando un factor de conversin
sino tambin los intercambiables, permitiendo pero esto no fue posible debido a los numerosos
determinar la capacidad de acidificacin del suelo. factores que influyen la determinacin de pH (conte-
Finalmente, el pH hidroltico permite estimar si un nido de dixido de carbono, contenido de sales, si la
suelo est afectado por sodificacin debido a la pre- solucin se encuentra en reposo o agitacin, donde
sencia de carbonato de sodio (Vzquez, 2005). Un se ubica el electrodo, entre otros).
detalle de la determinacin en laboratorio de cada
uno de estos parmetros ha sido publicado previa- En la bibliografa internacional se menciona que
mente (Azcarate et al., 2012). la relacin de suelo a agua tiene un efecto neto de
incremento del pH con la disminucin de la relacin
En Argentina los trabajos de investigacin mues- suelo:agua (Miller & Kissel, 2010) (Minasny et al.,
tran que existe una gran variacin en la metodologa 2011). A su vez, las relaciones de pH empleando dife-
utilizada para la determinacin del pH. La mayora rentes mtodos no son lineales en todo el rango de
de las investigaciones emplean la medida de pH con pH del suelo. Esto se asocia a la participacin de
una relacin suelo:agua 1:2,5 (Galantini et al., diferentes especies con distinta capacidad buffer en
2005), aunque se encuentran otras en las que la el suelo tal como hidrxidos de aluminio y hierro a
determinacin se realiza en pasta de saturacin pH <5 y carbonatos a pH >7 (Henderson & Bui,
(Adema et al., 2003; Romano & Roberto, 2007) y en 2002).
menor medida con una relacin suelo:agua 1:1 (De

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 31


Tabla 2.1. Propiedades fsico-qumicas de las muestras bajo estudio.

En el presente captulo se presentan los resultados Anguil. Se coloc una cantidad de muestra de suelo
de la evaluacin de mtodos de medida de pH en equivalente a 2/3 del volumen del recipiente de 100
pasta y en relacin 1:2,5. Para este ltimo se utiliz un mL, se aadi agua destilada hasta formar una
tiempo de reposo de la suspensin de suelo de 2 h. pasta saturada y se dej en reposo durante 1 h.
Transcurrido el tiempo indicado, se agito la pasta
Materiales y Mtodos enrgicamente con una varilla de vidrio y se proce-
di a realizar la medida de pH sumergiendo el elec-
Se analizaron 98 muestras de suelo de la Regin trodo en la pasta. Para la medida de pH 1:2,5 se
Semirida Pampeana, tomadas cada 20 cm hasta sigui la tcnica recomendada por la RILSAV (2007),
100 cm o la presencia de tosca. Las muestras se para lo cual se pesaron 12 g de suelo, se aadieron
secaron al aire y se tamizaron con malla de 2 mm. En 30 mL de agua, se agit por 30 s y se dej la suspen-
la Tabla 2.1 se presentan los rangos de las propieda- sin en reposo durante 1 h. Se volvi a agitar y se
des fsico-qumicas de las muestras bajo estudio. dej en reposo nuevamente durante 1 h. Luego de
transcurrido el tiempo indicado se agito enrgica-
Se determin el valor de pH en pasta y pH 1:2,5. mente con varilla y se determin el pH introducien-
Se utiliz agua destilada y un pHmetro marca do el electrodo en la suspensin de suelo.
Altronix, modelo TPX-II. El sistema se ajust con
soluciones buffer comerciales de pH 4 y 7. La medi- Se realiz una prueba de normalidad de los
da de pH en pasta se realiz segn la tcnica emple- datos obtenidos empleando QQ Plot, y un anlisis
ada en el Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA de regresin lineal empleando el programa InfoStat
(Di Rienzo et al., 2015).

Resultados y discusin

La prueba de normalidad de los datos emplean-


do QQ plot indic la presencia de dos poblaciones,
con un punto de inflexin en un valor de pH cercano
a 7,6, medido en relacin suelo:agua 1:2,5 (Figura
2.1). En funcin de esto, el anlisis posterior de los
datos se realiz clasificndolos en dos grupos:
muestras con valores de pH 1:2,5<7,6 y muestras
con valores de pH 1:2,5>7,6. Este punto de separa-
cin se diferencia del obtenido en nuestro estudio
previo (Kloster et al., 2008), pH 1:2,5<6,6, lo cual se
explica por el mayor rango de datos de pH incorpo-
rado en este anlisis.

La Figura 2.2 muestra las relaciones entre los


mtodos de medida de pH en las dos poblaciones
Figura 2.1. Distribucin QQ plot de los datos obtenidos separadas por el valor de pH 1:2,5<7,6. Hay una
para la medida de pH 1:2,5 en todas las muestras. Se buena relacin entre los mtodos de medida para
observan dos poblaciones, con un punto de separacin muestras con valores de pH 1:2,5<7,6 (R2=0.94,
entre estas en pH cercano a 7,6 (---). p<0,05) (Figura 2.2.a). Se observa que los datos se

32 EEA INTA Anguil


Figura 2.2. Relacin entre la medida de pH en pasta de suelo y en relacin suelo:agua 1:2,5: a) muestras con pH
1:2,5<7,6; b) muestras con pH 1:2,5>7,6. La lnea punteada indica la recta 1:1.

ubican de modo aleatorio en torno a una recta de 1:2,5 es <7,6 con 2 h de equilibrio. No se obtuvo un
pendiente 1 y ordenada al origen = -0,45. Es decir coeficiente de relacin fijo para la conversin a pH
que hay una diferencia de pH=0,45 entre los mto- de un mtodo a otro para muestras con pH
dos. La relacin entre los mtodos de medida de pH 1:2,5>7,6.
para muestras con pH 1:2,5>7,6 es menor (R2=0,84,
p<0,05) (Figura 2.2.b). Adems, la pendiente de la Bibliografa
relacin disminuye a 0,84, respecto del valor obteni-
do para el primer grupo de muestras. Este hallazgo Adema, EO; DE Buschiazzo; FJ Babinec; T Rucci & V F
coincide con resultados mencionados en la biblio- Gmez Hermida. 2003. Balance de agua y productividad de
grafa, donde se observan relaciones curvilneas un pastizal rolado de Chacharramendi, La Pampa. Ediciones
entre mtodos de medida de pH. Tal es el caso de INTA. Publicacin Tcnica N 50.
Minasny et al. (2011) que obtienen un valor de pen- Azcarate, P; N Kloster & G Prez Habiaga. 2012. Reaccin
diente menor para muestras con valores de pH >7 del suelo: pH. In: anual de fertilidad y evaluacin de suelos.
asociado al sistema buffer del suelo dominado por Quiroga, A & A Bono (edits). Publicacin tcnica N89.
la presencia de carbonatos. En este grupo de mues- Ediciones INTA, pp. 19-25.
tras la diferencia de pH entre mtodos vari en un De La Casa, A; G Ovando; A Rodrguez; L Bressanini & E
rango desde 0,25 a 0,66 unidades de pH. A diferen- Buffa. 2003. Evaluacin espacial del nitrgeno disponible
cia de Minasny et al. (2011) y Miller & Kissel (2010) del suelo en un cultivo de papa cv. spunta en Crdoba,
en el presente estudio no se observ una relacin Argentina. Agric. Tcnica. 63(3).
directa entre el pH obtenido y la conductividad Di Rienzo, JA; F Casanoves; MG Balzarini; L Gonzalez; M
elctrica de las muestras bajo estudio (datos no Tablada & CW Robledo. 2015. Infostat. Grupo Infostat, FCA,
mostrados). UNC, Argentina.
Galantini, JA; L Suer & H Kruger. 2005. Dinmica de las
Conclusiones formas de fsforo en un Haplustol de la Regin Semirida
Pampeana durante 13 aos de trigo continuo. RIA. 34(2):13-
A partir de los resultados obtenidos y para mues- 31.
tras con propiedades semejantes a las analizadas de Henderson, BL & EN Bui. 2002. An improved calibration
la Regin Semirida Pampeana sera posible estimar curve between soil pH measured in water and CaCl2.
el valor de pH en pasta puede estimarse sustrayen- Australian Journal of Soil Research. 40:1399-1405.
do 0,45 unidades al valor de pH medido en relacin Kloster, NS; MP Azcarate; FJ Babinec & A Bono. 2008.
1:2,5, para aquellos casos en que el valor de pH Comparacin de tcnicas de medicin del pH del suelo: pH

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 33


en pasta de saturacin y en relacin suelo:agua 1:2,5. XXI
Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo. Potrero de los
Funes - San Luis.
Miller, RO & DE Kissel. 2010. Comparison of soil pH
methods on soils of North America. Nutrient Management &
Soil & Plant Analysis. 74(1):310-316.
Minasny, B; AB McBratney; DM Brough & D Jacquier. 2011.
Models relating soil pH measurements in water and calcium
chloride that incorporate electrolyte concentration.
European Journal of Soil Science. 62:728-732.
Porfiri, C; J Montoya; W Koskinen & M Azcarate. 2015.
Adsorption and transport of imazapyr through intact soil
columns taken from two soils under two tillage systems.
Geoderma. 251-252:1-9.
RILSAV. 2007. pH en suspensin en relacin 1:2,5 (m/V).
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Romano, N & Z Roberto. 2007. Contenido de fsforo
extractable, pH y materia orgnica en los suelos del este de
la provincia de La Pampa. Informaciones Agronmicas del
Cono Sur. 3:1-6.
SAMLA (Sistema de apoyo metodolgico a los laborato-
rios de anlisis de suelos, agua, vegetales y enmiendas
orgnicas). 2004. pH del suelo. SAGyP, AACS. Versin en
CD.
Vazquez, M. 2005. Acidez del suelo. In: Tecnologas en
anlisis de suelos. Marbn, L & S Ratto (edits). AACS.
Buenos Aires. pp 71-88.

34 EEA INTA Anguil


Micaela Prez y Nanci Kloster

Conductividad elctrica:
comparacin del mtodo de

3.
La salinidad de suelos es una seria limitacin
pasta saturada a campo
(simulado) vs extracto de
saturacin en el laboratorio
kitasatos y embudos Bchner. Es por esto que no es
para el desarrollo de los cultivos. Argentina es el ter- posible su determinacin a campo bajo estas condi-
cer pas en el mundo, luego de la Unin Sovitica y ciones. Varios mtodos han sido propuestos como
Australia en ocupar suelos afectados por sales alternativa para determinar la CE a campo, tal como
(Taboada & Lavado, 2009). El diagnstico, evalua- la medida directa en pasta saturada o con diferentes
cin y manejo de suelos salinos y la aceptabilidad de relaciones suelo:agua. Sin embargo, todas ellas
aguas para varios propsitos, entre ellos el riego de requieren de una calibracin en laboratorio e infor-
cultivos, son evaluados a partir de la informacin de macin detallada de la textura del suelo (Nijensohn,
salinidad de suelo y agua. 1988; Rhoades, 1996; Zalba et al., 2013).

La conductividad elctrica (CE) de un suelo es Rhoades (1996) indica que la salinidad del suelo,
proporcional al nmero de iones presentes en la en trminos de CEex, puede ser estimada desde
solucin del suelo y a su movilidad, por lo que per- medidas de la CE de la pasta (CEp) y estimacin del
mite estimar el contenido de sales que contiene. Un porcentaje de saturacin. Para ello propone la utiliza-
suelo salino se define como aquel con CE en extrac- cin de un recipiente de volumen y geometra conoci-
to de pasta saturada (CEex) de 4 dS m-1 o mayor dos, y una balanza porttil con precisin 0,5 g. Con
(FAO, 1988; USDA, 1993). Sin embargo existen algu- ello se logra estimar el porcentaje de saturacin de
nas especies vegetales que acusan efectos de salini- agua de un volumen de pasta de suelo. El mtodo se
dad con valores mayores a 2 dS m-1 (Katerji et al., considera aceptable para aplicaciones de campo por
2000; Bono et al., 2012). ser simple y robusto. Zalba et al. (2013) obtuvieron
una relacin entre la CEex y la CE estimada desde una
La salinidad del suelo es generalmente definida y pasta saturada con porcentaje de saturacin de agua
cuantificada sobre un extracto acuoso de una pasta conocido, en muestras de suelo de ambiente salino.
saturada de suelo (Rhoades, 1996). Para ello es nece- Se menciona que esta estimacin es ms til que el
sario formar la pasta saturada de suelo y luego filtrar- empleo de relaciones suelo agua 1:1, 1:2 o 1:5. Larrieu
la para obtener el extracto acuoso sobre el cual se et al. (2016) no evidenciaron una correlacin lineal
determinar la conductividad. El contenido de agua de entre la evaluacin de CEp y CEex sobre suelos de tex-
la pasta saturada no corresponde a una relacin fija tura franco arenosa a arcillosa de la Pampa Hmeda.
suelo:agua, sino que vara con la textura del suelo. Sin En este ltimo caso la ausencia de correlacin lineal
embargo este mtodo de medicin en el extracto de la se asocia a la falta de correccin por textura de suelo
pasta saturada es utilizado porque es el que mejor y/o saturacin de agua.
relaciona con el contenido mximo de agua del suelo
en condiciones de campo. Asimismo, la tolerancia de La medida de CEp en situacin de campo ha sido
los cultivos a la salinidad tambin es expresada en tr- informada por los clientes del Laboratorio de Suelo
minos de CEex (Katerji et al., 2000). y Agua de la EEA Anguil (Muguiro, comunicacin per-
sonal), especialmente en ensayos de invernadero
La medida de la CEex requiere equipamiento de con hortalizas. Esta medida se realiza sobre pasta
laboratorio especfico, tal como bomba de vaco, saturada de suelo sin incluir factores de correccin.

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 35


En este captulo se muestran los resultados del estu- muestras se secaron al aire y se tamizaron a 2 mm
dio de la relacin entre la determinacin de CEp, tal previo a la determinacin de CE.
como se realiza a campo y CEex, tal como se realiza
habitualmente en laboratorio. La CE se determin por medida directa en la
pasta saturada de suelo y sobre el extracto de la
Materiales y Mtodos pasta saturada de suelo. Para ello se realiz una
pasta saturada de suelo, considerando que la pasta
Para el estudio se utilizaron 91 muestras de est saturada cuando su superficie luce espejada,
suelo de la Regin Semirida Pampeana, de clase fluye ligeramente si se inclina el recipiente y se des-
textural arenoso a franco arenoso, con 63 a 93 % de liza fcilmente de la esptula. Se dej en reposo
arenas y 7 a 34 % de arcilla+limo. Dichas muestras durante 2 h y luego se midi la CEp sumergiendo la
tienen un porcentaje de saturacin de agua entre 10- celda de conductividad previamente calibrada en la
20 % (Fernndez, 2007; Quiroga et al., 2012). Las pasta. Luego se procedi a filtrar la pasta saturada

Figura 3.1. Relacin entre


la CE en pasta saturada
(CEp) y la CE en extracto
de pasta saturada (CEex),
a) muestras con CEex<1 dS
m-1, b) muestras con
CEex>1 dS m-1. La lnea
punteada indica la recta
1:1. Las Figuras reducidas
muestran una reduccin
de escala en el eje de
ordenadas.

36 EEA INTA Anguil


Tabla 3.1. Verificacin del
modelo propuesto para
muestras con CEex>1
dSm-1.

empleando un embudo buchner, papel de filtro tipo Larrieu et al. (2016) observaron que la relacin entre
Microclar CL-567 y kitasato con bomba de vaco. la medida de CEex y CEp se aparta de la linealidad y
Sobre el extracto se determin la CEex. por consiguiente no se adapta al uso de factores
fijos de conversin. Por su parte, Zalba et al. (2013)
Se utiliz el programa InfoStat (Di Rienzo et al., trabajando en suelos de la Regin Semirida
2015) para el anlisis de resultados. Se comprob la Argentina de amplio rango textural (7 a 90 % de are-
normalidad de los datos mediante QQ plot y test nas), y empleando una correccin segn la satura-
Shapiro Wilks. Se realiz la regresin lineal entre los cin de agua de cada suelo, obtuvieron una buena
mtodos. correlacin lineal. En este estudio realizado tambin
sobre muestras de la Regin Semirida Argentina,
Resultados y discusin no se emple una correccin por saturacin de agua
tal como mencionan Zalba et al. (2013). Sin embargo
Las relaciones de CEp y CEex sobre las muestras el menor rango textural en las muestras selecciona-
de suelo clasificadas segn CEex < o > a 1 dSm-1 se das (63 a 93 % de arenas) y por ende el rango estre-
muestran en la Figura 3.1. Se observa que la CE en la cho de saturacin de agua en estos suelos (10-20
pasta de saturacin arroj siempre valores por %), arroj una buena correlacin entre los mtodos
debajo de los obtenidos en el extracto. Esto coincide sin necesidad de correccin.
con resultados publicados en la literatura (Rhoades,
1996; Zalba et al., 2013; Larrieu et al., 2016). Se realiz la verificacin del modelo obtenido
para muestras con CEex >1 dSm-1 empleando 6
En la Figura 3.1.a se observa una relacin lineal muestras de suelo de textura arenosa a franco are-
entre los dos mtodos de medida cuando la CEex<1 nosa. Los resultados obtenidos se indican en la
dSm-1. Sin embargo el coeficiente de determinacin Tabla 3.1. Se obtuvo un error + 30% en la estimacin
entre ambos es bajo (R2=0,65, p<0,05) como para de la CEex a partir de la CEp. Sin embargo, el error en
establecer una ecuacin de estimacin del valor de el valor estimado de CEex no modific la interpreta-
CE de un mtodo a otro. En la Figura 3.1.b tambin cin de la aptitud de uso de dichos suelos (Bono et
se observa una relacin lineal entre los dos mtodos al., 2012).
cuando la CEex>1 dSm-1, siendo en este caso un
modelo de mayor capacidad predictiva (R2=0,94, Conclusin
p<0,05). Esto sugiere la posibilidad de emplear
dicha relacin lineal para la estimacin de la CEex a Es sabido que la determinacin de CEp arroj
partir de la medida directa de la CEp en suelos de la valores inferiores a los determinados mediante
Regin Semirida Pampeana de textura arenosa a CEex, por lo que su utilizacin indistinta podra cam-
franco arenosa. biar el diagnstico salino de los suelos. De acuerdo
a los resultados de este estudio, en suelos de textu-
Los resultados obtenidos se diferencian de los ra arenosa a franco arenosa de la Regin Semirida
publicados en el pas en los ltimos aos. Pampeana se puede utilizar el siguiente criterio:
Trabajando en suelos de la Pampa Hmeda, y sin Cuando la CEex es <1 dS m-1, los resultados de
correcciones texturales o de saturacin de agua, CEp sern en general < 0,3 dS m-1 y aunque no

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 37


existe una buena relacin lineal entre los mtodos, USDA, 1993. Diagnstico y rehabilitacin de suelos sali-
dicho suelo no presenta riesgos de salinidad. nos y sdicos. In: Richards L A (ed). Riverside. California.
Cuando la CEex es >1 dS m-1, la CEp arrojar valo- Zalba, P; M Garay; M Amiotti & A Ares. 2013. Improved
res > 0,3 dS m-1 y en este caso puede utilizarse field method for estimating soil salinity. Ciencia del Suelo.
una ecuacin de conversin (CEp=0,26CEex-0,07) 31(2):265-269.
para estimar la CEex a partir de la CEp con buenos
resultados del diagnstico salino de los suelos con
propsitos prcticos.

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38 EEA INTA Anguil


Micaela Prez, Clara Brambilla y
Nanci Kloster

4.
La materia orgnica de los suelos, en sentido
Carbono total,
orgnico e inorgnico
dado que este equipo cuantifica CT, es importante
amplio, est constituida por todas las sustancias determinar su efectividad para discriminar Corg y
orgnicas del mismo. El principal constituyente de la Cinorg en muestras que contengan ambas fracciones.
materia orgnica es el Carbono (C), que llega a
representar entre el 40 y el 60 % de su masa depen- Se describen a continuacin los estudios realiza-
diendo del grado de transformacin. El C orgnico dos en el Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA
(Corg) del suelo representa un componente signifi- Anguil, relacionados al anlisis de C en suelos.
cativo del pool de C global y sus transformaciones
regulan el contenido de dixido de carbono en la Accin de mejora en la determinacin de Corg
atmsfera (Alvarez, 2005). En suelos calcreos, tal W&B segn IRAM-SAGyP 29571-2:2011
como los suelos de la Regin Semirida Pampeana,
adems de Corg, es importante la presencia de C El mtodo ms ampliamente utilizado por los
inorgnico (Cinorg) en el pool de C total (CT) (INTA, laboratorios para analizar Corg W&B en suelos es el
1980). Es por esto que al momento de realizar estu- mtodo de oxidacin hmeda (Walkley & Black,
dios de dinmica del Corg del suelo, se requiere un 1934), normalizado bajo Norma IRAM 29571-2:2011
mtodo que permita cuantificarlo sin interferencias y 29571-3:2016 en dos escalas de trabajo, semi-
de la fraccin inorgnica (Ramnarine et al., 2011). micro y micro respectivamente. Un esquema del pro-
cedimiento de anlisis se muestra en la Figura 4.1.
En Argentina, el IRAM propone dos mtodos de Ambas partes de la norma proponen la utilizacin de
determinacin de materia orgnica bajo Normas. tres posibles indicadores a eleccin: cido N-feni-
Uno es a travs del cambio de masa de una muestra lantranlico, o-fenantrolina y cido difenilaminosul-
de suelo seco, el otro es evaluando el contenido de fnico 4-sal de bario.
C orgnico fcilmente oxidable (Corg W&B) que la
conforma a partir de oxidacin hmeda. La Norma El indicador cido difenilaminosulfnico 4-sal de
involucrada tiene 3 partes: bario se utiliz en el Laboratorio de Suelo y Agua de
IRAM-SAGyP 29571-1:2008. Parte 1 - Mtodo de la EEA Anguil durante ms de veinte aos. Sin
prdida de masa por calcinacin. embargo, fueron frecuentes los casos donde se difi-
IRAM-SAGyP 29571-2:2011. Parte 2 - Determina- cult la observacin del punto final de la titulacin
cin de Corg oxidable por mezcla oxidante fuer- del color azul al verde oscuro. Esto ocurre general-
te, escala semi-micro. mente en el anlisis de muestras con elevado conte-
IRAM-SAGyP 29571-3:2016. Parte 3 - Determina- nido de materia orgnica, que originan un color ms
cin de Corg oxidable por mezcla oxidante fuer- oscuro de la suspensin, o su inversa, muestras con
te, micro escala. bajos contenidos de materia orgnica que requieren
mayor masa de suelo y de esa forma, aumentan la
Adems de los mtodos normalizados para an- concentracin de slidos en la suspensin.
lisis de Corg, el mtodo de combustin seca basado
en el principio de Dumas (Bremner, 1996) se plantea A causa de esta dificultad, y dentro de la imple-
como alternativa en laboratorios pblicos y privados mentacin de Sistemas de Gestin de Calidad, se
que cuentan con el equipo apropiado. Sin embargo, tom la iniciativa de incorporar una accin de mejora

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 39


es el caso de la o-fenantrolina. El viraje de color del
mismo origina un punto final ntido, pasando del verde
brillante al marrn rojizo (Carreira, 2005).

Cuatro muestras de suelo se extrajeron de un


perfil de suelo tipo Haplustol Entico cada 20 cm
hasta la profundidad donde se encontraba la tosca.
De esta forma se asegur un contenido variable de
materia orgnica en las muestras bajo estudio. Cada
muestra se analiz por triplicado durante tres das
sucesivos, segn IRAM-SAGyP 29571-2:2011, utili-
zando dos indicadores, cido difenilaminosulfnico
4-sal de bario y o-fenantrolina.

Los resultados obtenidos se muestran en la


Figura 4.2. Puede observarse que no hubo diferen-
cia significativa por el uso de uno u otro indicador. A
partir de dicha accin de mejora y para facilitar la
observacin del punto final en la titulacin, se cam-
bi el indicador utilizado hasta el momento, por el
empleo de o-fenantrolina.

Evaluacin del mtodo de calcinacin segn


IRAM-SAGyP 29571-1:2008 para suelos de la
Regin Semirida

El mtodo de prdida de masa por calcinacin es


aplicable a muestras de todo tipo de suelos. Sin
embargo puede existir cierto margen de error debi-
do a la desnaturalizacin y prdida de agua de arci-
llas, prdida de dixido de carbono de carbonatos,
descomposicin de sales hidratadas y xidos (Rosell
et al., 2001). Este error puede ser ms acentuado en
muestras de suelo con bajos contenidos de materia
orgnica (<1,5%) resultando un mtodo no apto
para este tipo de suelos (Soon & Abboud, 1991). Los
suelos de la Regin Semirida Pampeana, tienen
contenidos de materia orgnica en los primeros 20
cm del suelo que pueden llegar a valores de 2% con
buenas prcticas de manejo (Quiroga et al., 2012). A
medida que aumenta la profundidad del perfil, el
contenido de materia orgnica disminuye hasta
Figura 4.1. Esquema del procedimiento de determinacin
valores de 0,5 % o an menores.
de C oxidable por mezcla oxidante fuerte. Adaptado de
Norma IRAM-SAGyP 29571-2:2011.
En el Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA
Anguil se realiz un estudio preliminar con el objeto
de evaluar el alcance del mtodo de calcinacin en
que permita evitar estas dificultades de observacin muestras de suelo de la Regin Semirida
del punto final. La misma consisti en evaluar otro Pampeana con bajos contenidos de materia orgni-
indicador, dentro de los propuestos por la Norma, tal ca. Para ello se analizaron por duplicado 34 mues-

40 EEA INTA Anguil


Figura.4.2. Contenido de
materia orgnica en mues-
tras de suelo mediante el
empleo de dos indicadores
propuestos en Norma
IRAM-SAGyP 29571-2:2011.
Las barras indican desvo
estndar de los replicados.

tras de suelos de la regin, empleando el mtodo de


calcinacin segn IRAM-SAGyP 29571-1:2008 y el
mtodo de oxidacin hmeda segn IRAM-SAGyP
29571-2:2011. La Figura 4.3 muestra un esquema del
procedimiento utilizado para la calcinacin.

Los resultados de comparacin del mtodo de


calcinacin con el mtodo de oxidacin hmeda se
muestran en la Figura 4.4. Se obtuvo un coeficiente
de determinacin alto (R2=0,84), lo cual indica que
hay una relacin significativa (p<0,05) entre los
resultados obtenidos por los dos mtodos. Sin
embargo se observ una marcada sobreestimacin
del contenido de materia orgnica empleando el
mtodo de calcinacin, llegando a valores de 300 %
para suelos con valores muy bajos de materia org-
nica (<0,5 %). A partir de este estudio, se recomien-
da evitar el uso del mtodo de determinacin de
materia orgnica por calcinacin en suelos con con-
tenidos menores a 1,5 %. Los resultados coinciden
con las conclusiones publicadas por Abella &
Zimmer (2007) para el anlisis de materia orgnica
por calcinacin en suelos con bajos contenidos de
materia orgnica de Arizona (USA).

Validacin del mtodo de combustin seca emple-


ando un equipo Truspec CNS (LECO) para el anli-
sis de C en suelo

Figura 4.3. Esquema del procedimiento de determinacin Los continuos avances en el diseo de los instru-
de materia orgnica por calcinacin. Adaptado de Norma mentos requieren la evaluacin de su utilidad sobre
IRAM-SAGyP 29571-1:2008. diferentes matrices. Prez (2013) realiz en el
Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA Anguil la vali-
dacin del mtodo de combustin seca para el an-

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 41


En la Tabla 4.1 se observan los valores obtenidos
para CT en el estudio de validacin y los criterios de
aceptacin definidos para cada parmetro. El coefi-
ciente de determinacin (R2) en ambos casos arroja
un buen ajuste lineal en el rango de masas de mues-
tra utilizada (0,05 a 0,20 g). La prueba t arroj dife-
rencias significativas (p<0,05) entre el valor medido
y el valor certificado. Sin embargo, la veracidad cal-
culada a partir del error relativo (ER%) estuvo por
debajo del criterio de aceptacin. El mtodo result
ser preciso para la determinacin de CT, aunque es
importante destacar que los resultados obtenidos
superan a los especificados por el fabricante del
equipo (CV% 0,5). El lmite de cuantificacin y la
incertidumbre estn por debajo de los criterios de
aceptacin definidos, lo que indica que el mtodo es
Figura 4.4. Relacin entre los mtodos de calcinacin y
apto para el anlisis de CT.
oxidacin hmeda para la cuantificacin de materia org-
nica. La lnea punteada indica la recta 1:1.
Anlisis de CT, Corg y Cinorg a partir de combus-
tin seca, oxidacin hmeda y titulacin simple
lisis de C en muestras de suelo de la Regin
Semirida Pampeana. Se resumen a continuacin A nivel internacional se han publicado algunos
los materiales y resultados de la validacin. trabajos que indican que los analizadores elementa-
les que utilizan combustin seca para el anlisis de
Se utiliz una muestra de suelo (C% 1,26 0,04) C cuantifican tanto el Corg como el Cinorg
como material de referencia certificado para la cali- (Yamamuro & Kayanne, 1995; Wright & Bailey, 2001;
bracin del equipo Truspec CNS (LECO) y las medi- Gazulla et al., 2012). En Argentina existen antece-
ciones involucradas en la validacin del mtodo de dentes de uso de equipos de combustin seca
combustin seca. El anlisis de muestras se llev a desde principios del siglo XXI (Lazzari et al., 2001;
cabo de acuerdo a los parmetros recomendados Daz-Zorita & Grove, 2002; Galantini et al., 2002;
por el fabricante (LECO Corporation, 2005). Los Bongiovanni & Lobartini, 2009; Eyherabide et al.,
parmetros estadsticos analizados en la validacin 2014), pero se desconoce su efectividad para la discri-
fueron: linealidad, exactitud, precisin, lmite de minacin de Corg y Cinorg en suelos calcreos
cuantificacin e incertidumbre (OAA, 2013). (Eyherabide et al., 2014). Para poder discriminar el

Tabla 4.1. Criterios de


aceptacin y valores obte-
nidos para los parmetros
estadsticos analizados.

42 EEA INTA Anguil


anlisis de Corg y Cinorg algunos autores proponen
incorporar modificaciones instrumentales como la
variacin de temperatura o la masa de suelo analiza-
da en el analizador elemental (Yamamuro & Kayanne,
1995; Wright & Bailey, 2001; Gazulla et al., 2012). Otra
alternativa propuesta es determinar el Cinorg emple-
ando un mtodo alternativo a la combustin seca, tal
como la titulacin simple (Bundy & Bremner, 1972), o
la determinacin de Cinorg sobre muestra previamen-
te calcinada en mufla para eliminacin de Corg, y pos-
terior estimacin del Corg por diferencia entre CT y
Cinorg (Byers et al., 1978; Wang et al., 2012)

Trabajando con suelos de la Regin Semirida


Pampeana, Prez (2013) hall una baja correlacin
(r=0,88) entre los resultados obtenidos en el anlisis
de C empleando los mtodos de oxidacin hmeda y
combustin seca. A partir de dicho trabajo se propuso
continuar con el desarrollo de mtodos que permitan
minimizar la recuperacin o eliminar el Cinorg, para
ser utilizados en estudios de dinmica de Corg en sue-
los de regiones semiridas con presencia de carbona-
tos. Se resumen a continuacin los resultados publica-
dos recientemente sobre la aptitud del mtodo instru-
mental de combustin seca empleando el equipo
Truspec CNS (LECO) para el anlisis de CT, Corg y
Cinorg y su comparacin con los resultados obtenidos
con el mtodo clsico de oxidacin hmeda para Corg
W&B y con el mtodo de titulacin simple para Cinorg
(Kloster et al., 2016).

Para realizar la comparacin de mtodos de an-


lisis de C se utilizaron 48 muestras extradas en
capas de 20 cm hasta los 100 cm o la presencia de
tosca, a partir de 12 perfiles de suelos de 10 sitios.
Los suelos ubicados en la Regin Semirida
Pampeana se clasificaron como Haplustol Entico y
Ustipsament Tpico. Las muestras de suelo se seca-
ron al aire y se tamizaron con tamiz de 0,5 mm.
Previo a su anlisis se clasificaron segn ausencia
(A) o presencia (P) de carbonatos por reaccin con
HCl 30% v/v (Azcarate et al., 2012)

El mtodo de combustin seca (Nelson &


Sommers, 1996) se utiliz para el anlisis de CT y de Figura 4.5. Esquema del procedimiento de determinacin
Cinorg, empleando un equipo Truspec CNS (LECO). de carbono inorgnico por titulacin simple.
El Cinorg se determin previa calcinacin de la
muestra en mufla a 430 C durante 2 hs para elimi- se realiz segn Norma IRAM-SAGyP 29571-2:2011
nar el Corg. El anlisis de Corg fcilmente oxidable siguiendo el esquema representado en la Figura 4.1.
Walkley & Black (Corg W&B) en muestras de suelo El anlisis de Cinorg por el mtodo de titulacin sim-

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 43


ple se realiz siguiendo el procedimiento descripto
por Loeppert & Suarez (1996). Un esquema del pro-
cedimiento se muestra en la Figura 4.5.

La comparacin de los mtodos para anlisis de


C de origen orgnico e inorgnico se realiz a partir
de grficos de dispersin. Se utiliz el programa
InfoStat (Di Rienzo et al., 2015) para el anlisis de
resultados. Se comprob la normalidad de los datos
mediante QQ plot y test Shapiro Wilks. La compara-
cin de los mtodos para anlisis de C se realiz a
partir de grficos de dispersin. Se evalu la regre-
sin (p<0,05) entre los siguientes mtodos:
Corg W&B vs. CT (LECO)
Corg W&B vs. Corg diferencia (CT LECO - Cinorg
LECO)
Cinorg titulacin vs. Cinorg LECO

La correlacin del mtodo de oxidacin hmeda


en funcin de la combustin seca para la cuantifica-
cin de C en muestras de suelo se observa en la
Figura 4.6. La Figura 4.6.a. representa la regresin
lineal obtenida para todas las muestras de suelo
estudiadas. El anlisis de regresin lineal arroj una
baja relacin (R2=0,62) entre el Corg W&B y el CT
analizado por el mtodo de combustin seca.

Para determinar si la dispersin de los datos se


debi a contenidos variables de Cinorg en las mues-
tras, se realiz la correlacin sobre 2 grupos de
muestras separadas segn reaccin a la adicin de
HCl 30% V/V. Uno de los grupos incluy muestras
con reaccin al HCl, denominado presencia (P), lo
que determina alguna presencia de Cinorg, mientras
que el otro incluy muestras sin reaccin al HCl,
ausencia (A), es decir con presencia no detectable
de Cinorg. En la Figura 4.6.b se muestra la regresin
obtenida entre el mtodo de oxidacin hmeda y de
combustin seca para muestras con reaccin al HCl
(P). Se observ una dispersin de los datos aun Figura 4.6. Relacin entre el mtodo de oxidacin hme-
mayor que al considerar todas las muestras da y el de combustin seca para la cuantificacin de C en
(R2=0.39). Los resultados corroboran que los mto- muestras de suelo: (a) todas las muestras, (b) muestras
dos cuantifican fracciones distintas de C. Mientras con reaccin al HCl (Muestras P), (c) muestras sin reac-
que la tcnica de combustin seca empleando el cin al HCl (Muestras A) (Kloster et al., 2016). La lnea
equipo Truspec CNS determina CT, es decir Corg y punteada indica la recta 1:1.
Cinorg, el mtodo de oxidacin hmeda determina
slo Corg, por lo que la correlacin entre ambos es En la Figura 4.6.c se observa la correlacin entre
escasa cuando las muestras de suelo contienen C de los mtodos de oxidacin hmeda y combustin
ambos orgenes. seca sobre muestras sin reaccin al HCl (A). El coefi-
ciente de determinacin en este caso mejor apre-

44 EEA INTA Anguil


ciablemente (R2=0,95) indicando que hubo una
buena relacin entre los mtodos estudiados cuan-
do se aplicaron sobre muestras libres de Cinorg.
Estos resultados coinciden con los obtenidos por
Eyherabide et al. (2014) en muestras de suelos
Molisoles con ausencia de carbonatos.

En suelos con presencia de carbonatos se utiliz


como alternativa la estimacin del Corg a partir de la
diferencia entre CT y Cinorg obtenidos por el mtodo
de combustin seca y se obtuvo una mejora en la
correlacin con Corg W&B (R2=0,92) (Figura 4.7).
Este mtodo de estimacin de Corg por diferencia
est documentado en la literatura para anlisis de
Figura 4.7. Relacin entre el mtodo de oxidacin hme-
sedimentos marinos (Byers et al., 1978) y se sugiere
da y el mtodo de obtencin de Corg por diferencia en
como alternativa para el anlisis de suelos con can-
muestras de suelo con presencia de carbonatos. La lnea
tidades variables de carbonato de calcio (Wright &
punteada indica la recta 1:1.
Bailey, 2001).

Se obtuvo una estrecha relacin entre el conteni-


do de Cinorg determinado por titulacin simple y por
el mtodo de combustin seca en muestras previa-
mente calcinadas en mufla a 430 C para elimina-
cin de Corg (r=0,99) (Figura 4.8). Si bien el mtodo
de titulacin simple ha sido documentado en la lite-
ratura (Bundy & Bremner, 1972; Loeppert & Suarez,
1996), su comparacin con el mtodo de combus-
tin seca no fue publicada hasta el momento. Se
sugiere que tanto el mtodo de titulacin simple
como el de combustin seca pueden ser utilizados
para el anlisis de Cinorg para muestras con reac-
cin al HCl, de acuerdo a la disponibilidad y recursos
de los laboratorios de anlisis. Figura 4.8. Relacin entre el contenido de Cinorg deter-
minado por titulacin simple y por combustin seca en
A partir de los resultados obtenidos se sugiere muestras de suelo con presencia de calcreo previamen-
que la eleccin del mtodo para determinar Corg en te calcinadas para eliminacin de Corg. La lnea puntea-
suelos de la Regin Semirida Pampeana depender da indica la recta 1:1.
de la presencia o no de Cinorg. Si la reaccin al HCl es
negativa, el mtodo de combustin seca es un mto- titulacin simple es una alternativa ms econmica,
do til para determinar Corg y sus resultados tienen arrojando resultados similares a los obtenidos por
una estrecha relacin con los obtenidos mediante el combustin seca.
mtodo de oxidacin hmeda. En suelos con reaccin
positiva al HCl, el mtodo de oxidacin hmeda es el Bibliografa
recomendado para el anlisis de Corg. Un mtodo
alternativo para determinar Corg en suelos con calc- Abella, SR & BW Zimmer. 2007. Estimating Organic Carbon
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46 EEA INTA Anguil


Micaela Prez y Nanci Kloster

5.
El nitrgeno (N) es uno de los elementos ms
Nitrgeno total
Mtodo de digestin hmeda
ampliamente distribuidos en la naturaleza. El princi-
pal reservorio de N es la atmsfera. En el suelo se El mtodo de digestin hmeda que emplea el
encuentra bajo la forma de N inorgnico y orgnico. principio Kjeldahl (Bremner, 1996) es ampliamente
Las formas de N inorgnico fcilmente disponibles adoptado para la determinacin de N total en suelo.
para las plantas son los iones nitrato y amonio. El mismo implica la conversin de N orgnico a N
Mientras que el N orgnico, que representa alrededor amoniacal por digestin de la muestra de suelo con
del 98 % del N total del suelo, se encuentra en la cido sulfrico en presencia de catalizador.
materia orgnica (Bono & Romano, 2012). En el suelo, Posteriormente se realiza la determinacin de amo-
el N orgnico est en una proporcin con el C orgni- nio en el digesto por transformacin del amonaco
co cercana a 10:1 (C:N) (Marbn & Ratto, 2005). (gaseoso), destilacin y recoleccin del destilado en
cido brico. Por ltimo se titula el borato generado
Por sus funciones en la fisiologa de las plantas, con una solucin de cido valorado.
el N es un elemento esencial para el crecimiento y
desarrollo de los cultivos. Los suelos de la Regin En Argentina, el comit de normalizacin IRAM
Semirida y Subhmeda Pampeana se caracterizan posee bajo estudio la norma para la determinacin
por su bajo contenido de N (Bono & Romano, 2012). de N en muestras de suelo: IRAM-SAGyP 29572.
Al igual que la materia orgnica, los niveles de N Determinacin de N en suelo por el mtodo Kjeldahl
estn muy relacionados con la textura del suelo. modificado. La Figura 5.1 muestra un ejemplo de
Suelos con textura gruesa, arenosos, tienen en esquema de determinacin de N empleando escala
general contenidos de N ms bajos. Para suelos del semi-micro.
este de La Pampa y oeste de Buenos Aires, hay un
rango de valores que permite orientar sobre la ferti- A partir del esquema pueden identificarse aspec-
lidad del suelo, considerando los primeros 20 cm del tos crticos en el anlisis de N por el mtodo de
perfil de suelo (Bono et al., 2012) (Tabla 5.1). Kjeldahl, tales como la digestin de la muestra, la des-
tilacin del N bajo la forma de amonio y la titulacin
El contenido de N en muestras de suelo se deter- del borato. En el laboratorio deben implementarse
mina comnmente a partir del empleo de una diges- controles para asegurar el correcto funcionamiento de
tin hmeda Kjeldahl o bien mediante combustin los equipos involucrados en estas etapas: digestor,
seca por el uso de un analizador elemental destilador y bureta. De acuerdo a los lineamientos de
(Bremner, 1996). la Norma IRAM 301:2005 (ISO/IEC 17025:2005) men-
cionados en el Captulo 1, estos equipos deberan

Tabla 5.1. Valores de N


total en suelos del este de
La Pampa y oeste de
Buenos Aires (Adaptado
de Bono et al., 2012).

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 47


Como anexo al esquema de la Norma IRAM-
SAGyP 29572 se menciona el empleo de sustancias
con contenido de N conocido para el control peridi-
co del mtodo completo. Entre ellas pueden utilizar-
se EDTA, triptofano; sulfato de amonio; lisina-cido
clorhdrico; glisina cido p-toluensulfnico y oxalato
de amonio. Se mencionan ms abajo, a modo de
ejemplo, dos procedimientos de verificacin utiliza-
dos en el Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA
Anguil para las etapas de digestin y destilacin.

Procedimiento de verificacin del sistema


digestor/destilador:
En la etapa de digestin, se realiza de forma con-
junta con el anlisis de muestras un ensayo de veri-
ficacin de digestor (Tecator, 1015). Para ello se eva-
la la recuperacin de N a partir de la digestin de
0,037 g de EDTA sal di-sdica (C10H14N2O8 Na2
2H2O) (0,0002 mol N). Por ejemplo, si se utiliza HCl
0,05 mol L-1 como valorante, tal como se indica en la
Figura 5.1, el volumen de cido requerido ser de 4
mL. El porcentaje de recuperacin de N en el ensayo
podra calcularse partir de la siguiente ecuacin,
considerando una pureza del EDTA del 100%:

Donde V HCl es el volumen gastado de cido en la


valoracin de la sal y V HCl terico es el volumen te-
rico de cido que debera gastarse (4 mL). La recupe-
racin aceptable estara en el rango de 95 a 105 %.

Procedimiento de verificacin del destilador:


En la etapa de destilacin, previo a la destilacin
de muestras se verifica la recuperacin de amonio
del destilador (Tecator Kjeltec 1002) con una solu-
cin de sulfato de amonio 0,80 g L-1 (0,012 mol L-1).
Para ello 10 mL de dicha solucin se someten al pro-
ceso de destilacin y titulacin. Si se utiliza HCl 0,05
mol L-1 como valorante, tal como se indica en la
Figura 5.1, el volumen de cido requerido ser de
Figura 5.1. Esquema de determinacin de N total por aproximadamente 2,4 mL.
Kjeldahl en escala semi-micro, adaptado de IRAM-SAGyP
29572.

La recuperacin de N se calcula como sigue, con-


estar registrados en el Listado Maestro de Equipos siderando que la concentracin de la solucin de sul-
afectados al Sistema de Gestin de Calidad del labora- fato de amonio es exactamente de 0,0024 mol L-1:
torio, y se debera contar con un procedimiento de
verificacin de la recuperacin en cada caso.

48 EEA INTA Anguil


Donde V HCl es el volumen gastado de cido en En la Tabla 5.2 se observan los valores obtenidos
la valoracin del amonio proveniente de la alcuota para N en el estudio de validacin y los criterios de
de solucin de sulfato de amonio colocada en el aceptacin definidos para cada parmetro. El coefi-
tubo de destilacin, y V HCl terico es el volumen ciente de determinacin (R2) arroj un buen ajuste
terico de cido que debera gastarse. La recupera- lineal en el rango de masas de muestra utilizada
cin aceptable es de 95 a 105 %. (0,05 a 0,20 g). El mtodo present adecuada vera-
cidad y precisin para la determinacin de N total,
Mtodo de combustin seca aunque es importante destacar que los desvos
obtenidos superan a los especificados por el fabri-
Tal como se mencion en el Captulo 4, el mto- cante del equipo (CV% 0,5). El lmite de cuantifica-
do de combustin seca basado en el principio de cin y la incertidumbre estn por debajo de los crite-
Dumas (Bremner, 1996) es una de las tcnicas ms rios de aceptacin, lo que indica que el mtodo es
importantes para determinar C y N en muestras de apto para el anlisis de N total en suelo.
suelo. El mtodo involucra una oxidacin seca de las
muestras en atmsfera de oxgeno y muy altas tem- Tal como se mencion para el mtodo de diges-
peraturas, que genera xidos de N gaseosos que tin hmeda, la verificacin de todas las etapas del
son colectados y detectados empleando una celda ensayo de determinacin de N por oxidacin seca se
de conductividad trmica. A diferencia del mtodo realiz empleando un diagrama de control elabora-
de Kjeldahl, ste es poco laborioso, no utiliza reacti- do a partir del anlisis de un patrn interno de con-
vos txicos y el volumen de residuos generados es centracin de N conocida.
mnimo. Sin embargo el capital involucrado al
momento de adquirir el equipo y su mayor costo Comparacin de mtodos de
funcional limita su amplia adopcin. Adems de vali- determinacin de N total: digestin
dar el mtodo de combustin seca empleando el hmeda y combustin seca
analizador elemental LECO para el anlisis de C
como se mencion en el captulo 4, Prez (2013) La comparacin de los mtodos de determina-
tambin realiz la validacin para el anlisis de N en cin de N total descriptos previamente fue realizada
muestras de suelo de la Regin Semirida por Prez (2013). Se resumen a continuacin los
Pampeana. Para ello se utiliz una muestra de suelo materiales y resultados de dicho trabajo. Se utiliza-
(N% 0,120 0,016) como material de referencia cer- ron 16 muestras de suelo de textura franco arenoso
tificado para la calibracin del equipo Truspec CNS de la Regin Semirida Pampeana, con contenidos
(LECO) y las mediciones involucradas en la valida- variables de N. Las muestras se secaron al aire y se
cin del mtodo. tamizaron con tamiz de 0,5 mm previo a su anlisis.
El anlisis se realiz segn el mtodo de digestin

Tabla 5.2. Criterios de


aceptacin y valores obte-
nidos para los parmetros
estadsticos analizados.

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 49


depender del equipamiento disponible y el balance
de costos de anlisis. A modo de ejemplo se mencio-
na que el costo de anlisis empleando un equipo
LECO es de 5:1 frente al mtodo Kjeldahl. Finalmente
se enfatiza en la importancia de definir controles
internos en las distintas etapas del procedimiento
para garantizar la calidad de los resultados emitidos.

Bibliografa

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hmeda descripto en la Figura 5.1 y segn el mtodo Bremner, JM. 1996. Nitrogen Total. In: Methods of Soil
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recomendados por el fabricante del analizador ele- pp 1149-1176.
mental (LECO, 2005). Calvo, C; E Gonzlez; A Andrade & J Atienza. 2005.
Comparacin de los resultados obtenidos para la determina-
En la Figura 5.2 se muestra la correlacin entre el cin de protena en material vegetal con el mtodo Kjeldahl
mtodo de digestin hmeda y el mtodo de com- y con el analizador LECO CSN 2000. Tercer Congreso Virtual
bustin seca para la determinacin de N en suelo. El Iberoamericano sobre Gestin de Calidad en Laboratorios.
coeficiente de determinacin indic una buena pp. 115-117.
correlacin entre los mtodos (R2=0,94; p<0,05). Dhaliwal, G; N Gupta; S Kukal & M Kaur. 2011.
Calvo et al. (2005) y Dhaliwal et al. (2011) quienes Standardization of automated Vario EL III CHNS Analyzer for
cuantificaron mayores contenidos de N con el anali- Total Carbon and Nitrogen Determination in Soils. Commun.
zador elemental. Asimismo, en el proyecto de Norma Soil Sci. & Plant Anal. 42(8):971-979.
IRAM-SAGyP 29572-2016 se menciona que una Kowalenko, CG. 2001. Assessment of LECO CNS-2000
pequea proporcin de compuestos orgnicos que analyzer for simultaneously measuring total carbon, nitro-
tienen enlaces N-N y N-O, y otros inorgnicos, como gen and sulphur in soil. Commun. Soil Sci. & Plant Anal.
nitritos y nitratos, se determinan parcialmente. Esto 32(13-14):2065-2078.
indica que hay una fraccin de N no detectada por LECO. 2005. www.leco.com. Fecha de ltimo acceso: 2013.
digestin hmeda que podra cuantificarse median- Marbn, L & S Ratto. 2005. Nitrgeno del suelo. In: Marbn
te combustin seca. Por su parte, Kowalenko (2001) L & S Ratto (edits). Tecnologas en anlisis de suelo. AACS.
demostr que la recuperacin de N en muestras de pp 117-122.
suelo empleando 2 equipos de combustin seca, Prez, MM. 2013. Anlisis de carbono y nitrgeno en mues-
CNS-2000 y FP-428, es de alrededor de 10 % menor tras de suelos y material vegetal de la regin semirida pam-
al obtenido por digestin hmeda. Sin embargo en peana empleando el mtodo instrumental de oxidacin
dicho trabajo el rango de N en las muestras de suelo seca. Tesis de grado UNLPam. pp 32.
(hasta 1,0 %) fue mucho ms amplio que el evalua-
do en este estudio (hasta 0,2 %), para suelos de la
Regin Semirida.
Se concluye que mediante la utilizacin de un
modelo de ajuste tanto el mtodo de Kjeldahl como el
mtodo de combustin seca dan resultados confia-
bles para suelos con baja proporcin de N, tal como
los suelos de la Regin Semirida Pampeana. La
adopcin de uno u otro mtodo en un laboratorio

50 EEA INTA Anguil


Micaela Prez, Clara Brambilla,
Emilio Brambilla y Nanci Kloster

6.
Tal como se mencion en el Captulo 5, el nitr-
Nitrgeno disponible -
Nitratos
2016). Dentro de las otras metodologas se
geno (N) es un elemento esencial para el crecimien- encuentra el mtodo del cido cromotrpico (ACr)
to y desarrollo de los cultivos. El ion nitrato (NO3-) (West & Ramachandran, 1966) utilizado en el
es la principal forma de N en el suelo fcilmente dis- Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA Anguil y labo-
ponible para las plantas. Su contenido en los suelos ratorios del rea de influencia de dicha
es variable y depende de varios factores como tem- Experimental.
peratura, humedad del suelo, estado vegetativo del
cultivo y manejo del suelo entre otros (Bono & Los resultados del Programa Nacional de
Romano, 2012). El anlisis del N disponible en el Interlaboratorios de Suelos Agropecuarios (PROIN-
suelo en forma de NO3- es muy importante para pla- SA) muestran una gran variabilidad en los resulta-
nificar el manejo y corregir deficiencias nutricionales dos de NO3- luego de 5 aos de la implementacin
a travs de fertilizaciones, a fin de optimizar el ren- del programa (desviacin estndar relativa de 23,8 a
dimiento (Videla & Echeverra, 1998). 61,5 %). Se supone que las numerosas tcnicas
empleadas generan esta alta dispersin de los
La determinacin de NO3- en suelos es complica- resultados (PROINSA, 2015).
da por las rpidas transformaciones biolgicas que
ocurren y que cambian su concentracin (Heredia, Con el objeto de asegurar si los mtodos usados
2005). Una correcta estimacin de los niveles de en el laboratorio son aptos para realizar un adecua-
NO3- requiere de la obtencin de muestras de suelo do diagnstico de NO3- en suelos, Brambilla et al.
representativas del rea a cultivar o cultivada, as (2013) realizaron la validacin del mtodo ACr y EIS.
como de una adecuada conservacin de dichas Adems, como respuesta a las consultas de los
muestras inmediatamente despus de extradas en clientes del Laboratorio respecto a la posibilidad de
condiciones tales que eviten la actividad microbiana utilizacin de mtodos rpidos para el anlisis de
que puede modificar los niveles de NO3-, ya sea por NO3-, los mencionados autores evaluaron tambin
mineralizacin de N orgnico (incrementos de NO3-) el funcionamiento de un kit de campo Nitrachek
o desnitrificacin (disminucin de NO3-) (Marbn, (NCH).
2005; Sheppard & Adison, 2007).
El mtodo ACr es un mtodo espectrofotomtrico
Numerosos mtodos para la determinacin de que se basa en la medicin de un complejo color
NO3- en suelo son citados en la literatura nacional e amarillo formado por el 1,8-dihidroxinaftaleno-3,6
internacional, e incluso algunos de ellos han sido cido disulfnico (cido cromotrpico) y el NO3-. La
validados (Kmecl et al., 2005; Lopez Pasquali et al., intensidad del color es proporcional a la concentra-
2010; Brambilla et al., 2013). Los mtodos ms utili- cin de NO3- presente en la solucin. El complejo
zados a nivel nacional por los laboratorios de anli- presenta un pico de absorcin de luz a 420 nm. Para
sis de suelo son en orden de aplicacin: colorimetra obtener la concentracin de NO3- de las muestras se
fenoldisulfnico > colorimetra SNEDD > microdes- realiza una curva de calibracin. Un esquema del
tilacin Bremner > mtodo potenciomtrico ion desarrollo del mtodo se puede ver en la Figura 6.1.
selectivo (EIS) > otras metodologas (PROINSA,

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 51


bandas reactivas, permite hacer test de NO3-. Los
iones NO3- son reducidos a NO2-, y en un medio
cido, reaccionan con una amina aromtica dando
una sal de diazonio. Esta ltima reacciona con N-(1-
naftil)-etilendiamina dando un azocolorante violeta
rojizo, cuya intensidad de color es funcin de la can-
tidad de NO3- en la solucin. Luego por reflectome-
tra se cuantifica la concentracin de analito en el
extracto.

Se resumen a continuacin los resultados princi-


pales de la validacin. Adems se describen otros
estudios, realizados en el Laboratorio de Suelo y
Agua de la EEA Anguil como acciones de mejora del
Sistema de Gestin de Calidad, que permitieron faci-
litar, agilizar y disminuir costos de los anlisis, sin
dejar de obtener resultados confiables.

Validacin de mtodos
Para realizar la validacin se evaluaron los
siguientes parmetros siguiendo los lineamientos
recomendados por el OAA (2013) y la gua Eurachem
(1998): linealidad, veracidad, precisin, lmite de
deteccin (LOD), lmite de cuantificacin (LOQ),
rango lineal e incertidumbre.

Se utilizaron 3 muestras de referencia provenien-


tes del Ensayo de Comparacin Interlaboratorio de
la Red INTA de Laboratorios de suelo, Agua y
Material Vegetal (RILSAV) para evaluar precisin,
veracidad e incertidumbre. Para determinar lineali-
Figura 6.1. Esquema del procedimiento de determinacin dad, LOD y LOQ se utilizaron soluciones patrn de
de NO3- mediante el mtodo del cido cromotrpico. NO3- (de concentracin conocida).

Los resultados se compararon con criterios de


El mtodo EIS incluye un electrodo de referencia, aceptacin establecidos en forma conjunta con el
de potencial conocido y constante (de plata-cloruro cliente del laboratorio (Tabla 6.1). El coeficiente de
de plata), un electrodo indicador o selectivo que determinacin (R2) indic un buen ajuste lineal para
corresponde al grupo de electrodos de membrana y los mtodos. A partir del estudio de la diferencia
un dispositivo para medir el cambio de potencial. relativa porcentual y la prueba t, tanto el mtodo
Cuando el electrodo entra en contacto con la disolu- ACr como el NCH alcanzaron un valor de veracidad
cin que posee NO3- en una composicin variable, dentro del criterio de aceptacin, mientras que la
se genera una diferencia de potencial a travs de la veracidad del mtodo EIS no fue estadsticamente
membrana, la cual depende de la diferencia en la aceptable. En el caso de la precisin, considerando
actividad del analito entre la solucin interna y la la repetibilidad y la precisin intermedia, ninguno de
muestra problema. los tres mtodos present valores superiores de
coeficientes de variacin al criterio de aceptacin
El mtodo de reflectometra se basa en el princi- preestablecido. Tanto el mtodo ACr como el EIS
pio de Snedd, utilizando un dispositivo de medicin cumplieron con los criterios de aceptacin para el
pequeo llamado Nitrachek, que mediante el uso de LOD y LOQ, mientras que no fue as para el NCH. Por

52 EEA INTA Anguil


Tabla 6.1. Parmetros esta-
dsticos analizados, crite-
rios de aceptacin y resul-
tados obtenidos para cada
mtodo (Brambilla et al.,
2013).

ltimo, el ACr y NCH presentaron una incertidumbre la masa de la muestra a 5 g manteniendo la relacin
expandida relativa inferior al criterio de aceptacin, suelo:extractante igual a 1:5.
mientras que fue mayor para el EIS.
Se realiz el anlisis por sextuplicado de 10
Evaluacin del efecto de diferentes muestras con un amplio rango de concentraciones
pretratamientos de la muestra de NO3-, utilizando el mtodo ACr. El contenido de
Para inhibir la actividad microbiana, que origina NO3- se determin sobre dos masas de muestra: 50
una variacin del contenido inicial de NO3- en una g y 5 g. Los resultados se evaluaron mediante una
muestra de suelo, pueden utilizarse distintas formas prueba t para muestras apareadas (=0,05) (Miller
de tratamiento de muestras. Se pueden congelar las & Miller, 1993).
muestras a -20C en freezer, lo que conlleva gasto
de energa y disponibilidad de espacio o bien secar- El valor medio de NO3- obtenido para cada
las durante corto tiempo (Zamolinski & Gentilini, muestra a partir de las dos masas de suelo y la dife-
1986; Griffin, 1995). rencia entre estos se indica en la Tabla 6.2. Se obtu-
vo un valor t=1,63 que resulta menor que el t crtico
Brambilla et al. (2013) analizaron 6 muestras de (2,23) de manera que la modificacin del peso de
suelos extradas del predio de la EEA Anguil INTA muestra para analizar NO3- no da resultados signifi-
con cuatro pretratamientos diferentes: sin trata- cativamente diferentes. Este resultado sugiere que
miento (se analiz inmediatamente luego de extra-
da), muestra en bolsa (se dej la fraccin por dos Tabla 6.2. Valor medio de NO3- obtenido a partir de dife-
semanas a temperatura ambiente), seca a 60C (en rente masa de muestra.
una capa fina durante 1h) y congelada (en freezer).
En dicho estudio se concluy que el secado a 60C
en estufa es el ms apropiado, prctico y econmico
para conservacin de muestras destinadas a la
determinacin de NO3-.

Modificacin de la masa de muestra requerida


Para cuantificar NO3- por la tcnica ACr se
requieren 50 g de muestra de suelo. La masa de
muestra en ocasiones hace que la cantidad de
muestra disponible en el laboratorio sea insuficien-
te o bien no permita repetir el anlisis de ser nece-
sario. Por esto se evalu la posibilidad de disminuir

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 53


Tabla 6.3. Resultados del contenido NO3- empleando (Microclar) por el papel tipo 0859 (S&S), el cual es
papel de filtro de diferente calidad. ms econmico. Se analizaron 26 muestras de suelo
utilizando ambos papeles de filtro en la etapa de
extraccin, es decir, se obtuvieron dos extractos de
la misma muestra, cada uno se analiz empleando
el mtodo del ACr. Los resultados se evaluaron
mediante una prueba t para muestras apareadas
(=0,05) (Miller & Miller, 1993).

En la Tabla 6.3 se observan los datos de NO3-


obtenidos en cada uno de los extractos de suelo y la
diferencia entre el valor obtenido con cada papel de
filtro. El valor t calculado (0,35) es menor que el t cr-
tico (2,06) por lo que no hubo diferencias en el
empleo de ambos papeles de filtro. A partir de este
estudio se implement el cambio de papel de filtro
en la etapa de extraccin como accin de mejora
para reducir el costo de anlisis asociado a la deter-
minacin de NO3-.

Resumen

El anlisis de NO3- en suelos es de gran impor-


tancia para un diagnstico preciso de los requeri-
mientos de nitrgeno para los cultivos y pasturas.
Sin embargo, a nivel de laboratorio, la determina-
cin de NO3- presenta mucha variabilidad, asociada
tanto al pretratamiento realizado sobre las muestras
de suelo una vez extradas como a los mltiples
mtodos de anlisis disponibles. Esto refuerza la
importancia del trabajo conjunto de los organismos
se podra realizar la extraccin del analito en tubos pblicos y privados para la normalizacin de un
de 50 ml con tapa a rosca, utilizando 5 g de muestra mtodo de anlisis de NO3-. Hasta tanto no se dis-
de suelo y 25 mL de extractante. Esto permitira ana- ponga de un mtodo aceptado como Norma para el
lizar un mayor nmero de muestras (debido al espa- anlisis, cada laboratorio debera garantizar que el
cio en agitador) y disponer de suficiente cantidad de mtodo que est utilizando es apto para el uso
muestra para rplicas de anlisis. Por otro lado, se requerido por el cliente. Ello requiere de la valida-
puede observar que en muestras con elevado conte- cin interna del mtodo asociada a la implementa-
nido de NO3- (>150 mg kg-1) la diferencia en valor cin de un Sistema de Gestin de Calidad. Como
absoluto entre las concentraciones obtenidas con parte de este Sistema en el Laboratorio de Suelo de
las dos masas aument, no siendo as en muestras la EEA Anguil se valid el mtodo del ACr. Adems se
que contenan concentraciones menores del analito. identificaron oportunidades de mejora ya sea para
Sin embargo al considerar la diferencia porcentual agilizar el proceso de anlisis, en lo que refiere a
no existe un patrn definido. pretratamiento de muestras y reduccin de masa de
muestra, como a reduccin de costos de anlisis, a
Cambio del papel de filtro partir de cambio del papel de filtro utilizado. Estas
Con el objeto de disminuir el impacto del uso de modificaciones apuntan a la mejora continua del
papel de filtro en el costo final del anlisis, se estu- Sistema.
di la posibilidad de cambiar el papel tipo CN-544

54 EEA INTA Anguil


Bibliografa

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Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 55


56 EEA INTA Anguil
Pamela Azcarate, Miriam Ostinelli
y Nanci Kloster

7.
La fraccin arcilla del suelo, comprende las part-
Capacidad de intercambio
catinico
La CIC puede variar en un amplio rango, dependiendo
culas de tamao menor a 2 m, que estn formadas de su textura y naturaleza de las partculas coloida-
por componentes inorgnicos, como minerales sili- les, tanto inorgnicas como orgnicas; siendo en la
catados y xidos, y orgnicos, como sustancias Regin Semirida Pampeana de 5 cmolc kg-1 en un
hmicas. Los componentes inorgnicos ms abun- suelo arenoso franco o mayor a ms de 15 cmolc kg-1
dantes en la fraccin arcilla de suelos de regiones en un suelo franco (Quiroga & Romano, 2012).
semiridas, tal como la Regin Semirida
Pampeana, son los minerales de la clase de los filo- El valor de la CIC que se obtiene al analizar un
silicatos y en menor proporcin los xidos e hidrxi- suelo depende del mtodo empleado para su deter-
dos de hierro, aluminio, titanio y manganeso minacin (Sumner & Miller, 1996). Dado que existen
(Buschiazzo et al., 1995; Porta Casanellas et al., varias metodologas propuestas para su cuantifica-
1999; Giuffr, 2005). cin, las condiciones de desplazamiento de los
iones adsorbidos y la saturacin de los sitios de
En lneas generales los minerales de arcilla y sus- intercambio, resultan crticas (Gillman, 1979;
tancias hmicas tienen cargas negativas, mientras Rhoades, 1982; Sumner & Miller, 1996). La satura-
que los xidos tienen carga negativa o positiva cin con acetato de amonio (NH4Ac) 1 mol L-1 a pH 7
variable en funcin del pH del suelo. En su conjunto es el mtodo estndar usado para la clasificacin de
constituyen la fraccin coloidal del suelo, partculas suelos neutros o ligeramente cidos (Sumner &
con gran superficie especfica y desarrollo de carga Miller, 1996; SAMLA, 2004). Sin embargo, cuando el
elctrica, por lo cual su determinacin reviste un pH del suelo es mayor a 7,5 se recomienda realizar
gran inters, dado que la mayora de los procesos la saturacin del suelo con acetato de sodio (NaAc)
qumicos del suelo ocurren en su superficie (Molina, a pH 8,2 (RILSAV, 2015). Ambos mtodos determi-
2014). Entre estos procesos son de fundamental nan la CIC a un valor de pH fijo, que permite inde-
importancia los equilibrios de adsorcin y desorcin pendizarse del pH real del suelo. Sin embargo el uso
de nutrientes y molculas contaminantes (Conti, del mtodo de saturacin que utiliza NH4Cl sin ajus-
2005; Porfiri et al., 2015), como as tambin los fen- te de pH (Sumner & Miller, 1996), actuara en condi-
menos de agregacin de partculas que contribuyen ciones cercanas al pH real del suelo analizado.
a la estructura del suelo (Kloster & Avena, 2015).
El Laboratorio de Suelo y Agua de la EEA Anguil
El intercambio inico determina la capacidad de comenz a brindar el servicio de anlisis de CIC con el
un suelo para retener iones de forma que estos pue- mtodo NH4Ac 1 mol L-1 a pH 7 a partir del ao 2010.
dan estar disponibles para su absorcin por las Hasta entonces la falta de un mtodo normalizado
plantas, y no se pierdan del perfil del suelo por lixi- para este anlisis, situacin que an persiste, requiri
viacin. Una medida de la carga neta negativa de un la validacin del mtodo en el laboratorio (Kloster et
suelo es la capacidad de intercambio catinico (CIC), al., 2010). Asimismo se estudi cual es la influencia de
que cuantifica el total de los cationes que pueden la utilizacin de una solucin de pH 7 sobre la determi-
ser intercambiados entre la superficie de los coloi- nacin de CIC, respecto del valor de CIC del suelo al
des y la solucin del suelo (Sumner & Miller, 1996). valor de pH del mismo (Azcarate & Kloster, 2010).

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 57


Figura 7.1. Esquema de las etapas involucradas en la
determinacin de CIC por ambos mtodos (Azcarate &
Validacin del mtodo de determinacin de CIC
Kloster, 2010).
con NH4Ac 1 mol L-1 a pH 7
Dado que el mtodo pertenece a la categora
Tanto para el estudio de validacin como para la componentes mayoritarios los parmetros evalua-
comparacin de mtodos se seleccionaron cuatro dos en la validacin fueron: Exactitud, Precisin
muestras de suelo (identificadas con los nmeros 1, (Repetibilidad, Precisin intermedia), Rango,
2, 4 y 5). La muestra N 1 es una muestra pertene- Robustez e Incertidumbre (OAA, 2008).
ciente al 2 Ensayo de Comparacin Interlaboratorio
(ECI) de la RILSAV (Ostinelli, 2008). El valor de esta Teniendo en cuenta criterios tcnicos y los
muestra surge del consenso obtenido a partir de los requerimientos de los usuarios de los resultados, se
resultados de los diferentes laboratorios participan- defini el lmite aceptable de Exactitud, E 8%. Se
tes. Las muestras N 2, 4 y 5 eran materiales de refe- comprob que no existan diferencias significativas
rencia internos del laboratorio y cumplan con las entre el valor de referencia y el obtenido en el labo-
propiedades solicitadas para stos materiales ratorio, por lo que el mtodo era exacto (Tabla 7.1).
(Eurachem, 1998).
El anlisis de la precisin mediante la utilizacin
Tanto las soluciones como el instrumental utiliza- del test F no arroj diferencias significativas en el
do fueron acordes al procedimiento descripto en la rango estudiado (valor p=0,441). Los criterios de
metodologa recomendada por el SAMLA (2004) para aceptabilidad del Laboratorio se fijaron en CV% 6
la determinacin de CIC con NH4Ac y por Summer & % en base a los resultados del 2 Ensayo de
Miller (1996) para la saturacin con NH4Cl. La Figura Comparacin Interlaboratorio (ECI) de la RILSAV
7.1 muestra un esquema del procedimiento realizado (Ostinelli, 2008) (Tabla 7.2).
para las metodologas evaluadas.
El rango estudiado durante la validacin del
Se resumen a continuacin los resultados obte- mtodo fue de 4,9 a 20,0 cmolc kg-1. Se obtuvo un
nidos de dichos estudios. valor de incertidumbre igual a 11,5 %.

Tabla 7.1. Exactitud del


mtodo obtenido sobre la
muestra N 1.

58 EEA INTA Anguil


Tabla 7.2. Estimacin de la
precisin.

Tabla 7.3. Evaluacin de la


Robustez del mtodo.

El ensayo de robustez del mtodo permiti La validacin de mtodos de anlisis de suelo es


detectar las variables que deben ser controladas y compleja, dado que muchas veces no se cuenta con
mostrar la fortaleza del mtodo a pequeos cambios el material de referencia necesario a nivel nacional.
en el procedimiento de anlisis, indicados como Ante la falta de muestras de referencia certificadas o
Condicin 1 y Condicin 2 en la Tabla 7.3. En el ensa- el elevado costo de las mismas es importante desta-
yo de robustez se observ que la velocidad de agita- car la importancia de los Ensayos Interlaboratorio. A
cin (200 rpm vs. 120 rpm), la posicin del tubo de travs de stos se obtienen valores de consenso
ensayo durante la extraccin (vertical vs. horizontal) para uno o varios parmetros fsico-qumicos que
y el nmero de extracciones ensayadas (3 vs. 4), no permiten la realizacin de validaciones internas y la
influyeron significativamente en el resultado obteni- implementacin de aquellas metodologas que no
do (valor p>0.05). Sin embargo cuando se vari el estn normalizadas.
mtodo de resuspensin (vortex vs. manual) y la
solucin de lavado (alcohol 96 vs 70%) se observa- Comparacin de mtodos para determinacin de
ron diferencias significativas en los resultados. El CIC: saturacin con NH4Ac o NH4Cl
primer punto podra explicarse considerando que es Los resultados obtenidos por ambos mtodos
necesario realizar una resuspensin lo suficiente- muestran diferencias significativas (Tabla 7.4). El
mente enrgica para lograr la dispersin completa valor medio de CIC que se obtuvo mediante la
de la muestra y el intercambio de iones en el equili- extraccin con NH4Ac fue significativamente mayor
brio. Jackson (1958) menciona que muestras muy que el obtenido con NH4Cl. Los mismos difieren en
resistentes pueden requerir trituracin. Esta varia- la etapa de extraccin, dado que el mtodo con
ble debe ser rigurosamente controlada e informada NH4Ac presenta un pH ajustado a 7, mientras que el
en la descripcin del mtodo. Respecto de la solu- mtodo con NH4Cl presenta un pH cido. Se consi-
cin de lavado, Bohn et al. (1993) mencionan que es dera que en un medio de pH ajustado a 7, las varia-
frecuente el empleo de soluciones de menor polari- ciones debidas al pH del suelo son eliminadas. En
dad que la del agua (alcohlicas) para mantener la cambio, si el pH de la solucin extractante es ms
muestra floculada y evitar prdidas del catin alto que el pH del suelo, probablemente se generen
durante la etapa de lavado, dado que el material cargas negativas sobre minerales de arcilla y la
coloidal tiende a dispersarse durante dicha etapa materia orgnica (por la ionizacin de cidos dbiles
(Jackson, 1958). Para evitarlo es recomendable el orgnicos). Por lo tanto, los resultados sern
uso de etanol 96 o con soluciones que contengan sobrestimados, en particular en suelos cidos con
una mnima cantidad de agua. cargas variable (Sumner & Miller, 1996; Pansu &
Gautheyrou, 2006). El estadstico F no arroj dife-
La validacin indica que el mtodo es exacto, rencias significativas en las varianzas, es decir,
preciso y robusto de acuerdo a las especificaciones ambos mtodos fueron comparables en cuanto a su
definidas en el rango estudiado. precisin.

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 59


Tabla 7.4. Resultados de
determinacin de CIC
empleando acetato de
amonio y cloruro de amo-
nio.

estimacin de los sitios con cargas variables del


suelo que se ionizan al elevar el pH de la solucin.

A partir de los resultados obtenidos se concluye


que los mtodos no son comparables, debido a que
sus resultados difieren significativamente, aunque
presentan la misma varianza. Considerando que en
suelos cidos, la solucin extractiva con pH 7 es
menos efectiva en el reemplazo de cationes, el
mtodo de extraccin con NH4Cl dara una mejor
estimacin de la CIC (Hendershot et al., 2008)
Figura 7.2. Representacin de CIC determinada por
extraccin con solucin de NH4Ac 1 mol L-1 a pH 7 y con Metodologa propuesta por la RILSAV
solucin de NH4Cl 0,2 mol L-1, en funcin del pH del En la bibliografa (Sumner & Miller, 1996) se
suelo. menciona que el mtodo empleado para la determi-
nacin de CIC debera idealmente reflejar el valor
Se evalu la influencia del pH del suelo sobre el que tendra al pH del suelo en condiciones natura-
valor de la CIC para ambos mtodos (Figura 7.2). Se les. En determinaciones de rutina y con propsitos
observ que los valores de CIC fueron inversamente de clasificacin de suelos, sin embargo, se propone
proporcionales al pH del suelo, y la diferencia entre el empleo de dos mtodos diferentes, basados en el
mtodos tenda a cero a medida que el pH se apro- valor de pH obtenido en suspensin, en relacin
xima a la neutralidad. Dicha diferencia dara una suelo:agua 1:2,5, y tomando como valor lmite 7,5

Figura 7.3. Diagrama para


la determinacin de CIC en
suelos en funcin del valor
de pH del mismo.
Adaptado de RILSAV
(2015).

60 EEA INTA Anguil


unidades de pH, as: Giuffr, L. 2005. Minerales. In: Conti, ME (ed). Principios
Si el pH 1:2,5 es <7,5 se realiza la determinacin de edafologa con nfasis en suelos argentinos. Buenos
de CIC por cuantificacin de ion amonio adsorbido. Aires. Editorial Facultad de Agronoma UBA. pp 27-42.
Si el pH 1:2,5 es >7,5 se realiza la determinacin Hendershot, WH; H Lalande & M Duquette. 2008. Chapter
de CIC por cuantificacin de ion sodio adsorbido. 18: Ion exchange and exchangeable cations. In: Carter MR &
EG Gregory (edits). Soil sampling and methods of analysis.
Este modo de seleccin de pH y catin saturante, Canadian Society of Soil Science. pp 197-206.
ampliamente utilizado para la taxonoma de suelos, Jackson, ML. 1958. Exchangeable metallic cation determi-
ha sido propuesto por la RILSAV como mtodo gene- nations for soils. In: Soil chemical analysis. Prentice-Hall. pp
ral para la extraccin de bases intercambiables y 82-110.
determinacin de CIC (RILSAV, 2015). En el Esquema Kloster, N & M Avena. 2015. Interaction of humic acids
A de la norma IRAM-SAGyP 29577 tambin se plan- with soil minerals. Adsorption and surface aggregation
tea que no es recomendable la aplicacin de dicha induced by Ca2+. Environmental Chemistry. 12(6):731-738.
norma (cuantificacin de ion amonio adsorbido) a Kloster, N; P Azcarate; M Ostinelli & D Carreira. 2010.
suelos de pH>7,5. A continuacin se muestra un Validacin de mtodo de ensayo: determinacin de CIC
diagrama de dicho procedimiento (Figura 7.3). empleando Acetato de Amonio pH 7. XXII Congreso
Argentino de la Ciencia del Suelo. Rosario.
A modo de sntesis, en este Captulo menciona- Molina, FV. 2014. Soil Colloids properties and ion binding.
mos que existen varios mtodos disponibles para la CRC Press. pp 545.
determinacin de CIC, y dado que los resultados OAA. 2008. Gua para validacin de mtodos de ensayo.
obtenidos con cada uno dependen del valor de pH http://www.oaa.org.ar. Fecha de ltimo acceso: 2017.
del suelo, resulta imprescindible avanzar en la ela- Ostinelli, M. 2008. Informe del segundo ensayo de compa-
boracin de un mtodo normalizado para este par- racin interlaboratorio de la RILSAV. Suelos. pp.74.
metro. La RILSAV recomienda dos procedimientos Pansu, MJ & J Gautheyrou. 2006. Cation exchange capa-
en funcin del valor de pH del suelo en relacin city. In: Handbook of soil analysis. Mineralogical, Organic
suelo:agua 1:2,5, con un lmite en 7,5 unidades pH. and Inorganic methods. Springer. pp 709-754.
Cada laboratorio debera validar la aptitud del mto- Porfiri, C; J Montoya; W Koskinen & M Azcarate. 2015.
do aplicado internamente. Adsorption and transport of imazapyr through intact soil
columns taken from two soils under two tillage systems.
Bibliografa Geoderma. 251-252:1-9.
Porta Casanellas, J; M Lopez-Acevedo Reguern & C
Azcarate, P & N Kloster. 2010. Comparacin de mtodos Roquero De Laburu. 1999. Edafologa para la agricultura y el
de ensayo para determinacin de CIC. XXII Congreso medio ambiente. Barcelona. Ediciones Mundi-Prensa. pp
Argentino de la Ciencia del Suelo. Rosario. 849.
Bohn, HL; BL McNeal & GA O'Connor. 1993. Captulo 6: Quiroga, A & N Romano. 2012. El sistema suelo y caracte-
Retencin catinica. In: Qumica del suelo. Mxico. Limusa. rsticas del intercambio de iones. In: Quiroga, A & A Bono
pp 175-205. (edits). Manual de fertilidad y evaluacin de suelos.
Buschiazzo, DE; SB Aimar & K Stahr. 1995. Factores que Ediciones INTA. pp. 11-18.
afectan la estabilidad estructural de suelos de la Regin Rhoades, JD. 1982. Chapter 8. Cation exchange capacity.
Semirida Pampeana Central (Argentina). Ciencia del Suelo. In: Page, A L (ed). Methods of soil analysis. Madison Wi.
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Conti, ME. 2005. Intercambio de iones. In: Principios de RILSAV. 2015. Procedimiento tcnico: extraccin de bases
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and related topics. http://www.fao.org/uploads/me- rios de anlisis de suelos, agua, vegetales y enmiendas
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Fecha de ltimo acceso: 2010. Sumner, ME & WP Miller. 1996. Cation exchange capacity
Gillman, GP. 1979. A proposed method for the measure- and exchange coefficients. In: Sparks, D L (ed). Methods of
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Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 61


62 EEA INTA Anguil
Nanci Kloster, Micaela Prez,
Clara Brambilla y Marianela Savio

8.
La evaluacin del estado de los nutrientes en el
Determinacin de cationes
intercambiables
La adsorcin de cationes intercambiables desde
suelo es importante por aspectos nutricionales, la solucin del suelo es un proceso reversible.
medioambientales y econmicos (Conti, 2005). Ms Tpicamente la reaccin de intercambio de iones
aun en los estudios de investigacin de la evolucin para su anlisis se realiza en el laboratorio emplean-
de nutrientes en ensayos de larga duracin. Un do una solucin de acetato de amonio 1 mol L-1 a pH
requerimiento clave para la investigacin a largo 7. Esto provee una referencia para comparacin
plazo es la repeticin exacta del mtodo de anlisis entre suelos (Soil Survey Laboratory staff, 1992).
original, o el desarrollo de modelos que comparen
los resultados de los mtodos originales con tcni- La seleccin del mtodo de anlisis para deter-
cas modernas (Kucera et al., 2014). minar la concentracin de cationes intercambiables
depender de la disponibilidad instrumental del
La mayora de las superficies coloidales del laboratorio. Pueden emplearse mtodos simples
suelo, representadas principalmente por minerales como la titulacin complejomtrica (Ca y Mg) y foto-
de arcilla y sustancias hmicas, poseen cargas elc- metra de llama (Na y K), o bien pueden utilizarse
tricas en algn grado. A fin de satisfacer la electro- tcnicas instrumentales ms sofisticadas como la
neutralidad del sistema, la carga superficial es com- espectrometra de absorcin y emisin atmica
pensada por adsorcin de iones intercambiables (Helmke & Sparks, 1996; Suarez, 1996; Pereira et al.,
(Molina, 2014). Los iones intercambiables son la 2011). En este captulo se presentan los resultados
porcin de iones del suelo retenidos electrosttica- obtenidos por el mtodo clsico de titulacin com-
mente a la superficie. La saturacin de la superficie plejomtrica y fotometra de llama y se comparan
de las partculas del suelo con cationes de metales con los obtenidos mediante el uso de espectrome-
alcalinos y alcalinotrreos es un indicador importan- tra de absorcin y emisin atmica.
te para evaluar la calidad de los suelos, dado que
define la fertilidad y la resistencia a la degradacin Materiales y Mtodos
qumica (Quiroga & Romano, 2012).
Muestras de suelo
Calcio (Ca), magnesio (Mg), potasio (K) y sodio Se utilizaron seis muestras de suelo que corres-
(Na) son usualmente los cationes principales dentro ponden al Programa Nacional de Interlaboratorios
de los iones intercambiables. Los elementos Ca, Mg y de Suelos Agropecuarios (PROINSA). Las mismas
K son esenciales para el crecimiento de las plantas podran considerarse muestras de referencia, a falta
(Suarez, 1996). El Na es abundante en la naturaleza y de materiales certificados, dado que tienen un valor
su rol en las plantas an se mantiene sin aclarar, aun- de concentracin de cationes asignado por consen-
que se ha considerado esencial para la mayora de las so (PROINSA, 2012) (PROINSA, 2013) (PROINSA,
plantas C4 (gramneas de verano, ej pasto llorn) 2014) (PROINSA, 2015) (Tabla 8.1). Sin embargo,
(Lastra Cabezas, 2010). Adems su importancia radi- para el elemento Na las muestras presentan gran
ca en que los contenidos de Na intercambiable y solu- dispersin en los valores asignados y slo fueron
ble son parmetros importantes en el manejo de sue- utilizadas a modo orientativo en este estudio.
los salinos y sdicos (Helmke & Sparks, 1996).

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 63


Tabla 8.1. Concentracin
de cationes intercambia-
bles y CIC en las muestras
de referencia (*)

Extraccin de cationes intercambiables Anlisis por absorcin y emisin atmica


Dos g de suelo seco y tamizado a 2 mm se coloca- Un espectrmetro de absorcin atmica modelo
ron en un tubo cnico de 50 mL con tapa a rosca. Se PinAAcle 900H (Perkin Elmer) equipado con softwa-
agregaron 10 mL de solucin extractiva de acetato de re Winlab para absorcin atmica, se utiliz para el
amonio 1 mol L-1 a pH 7. El tubo se agit en agitador anlisis de cationes. Para todos los elementos se
horizontal a 180 golpes por minuto durante 5 min y se utilizaron los parmetros de medida en el equipo
centrifug. El sobrenadante se filtr con papel tipo recomendados por el fabricante. Se realiz la lectu-
S&S N 859 recogiendo el filtrado en un matraz de 50 ra de soluciones patrn y extractos durante 3 seg,
mL. Este procedimiento de agitacin, centrifugado y por triplicado, empleando un mechero de 10 cm, con
filtrado se repiti tres veces y luego se llev a volu- llama aire acetileno. Se aadi cloruro de lantano
men de 50 mL con la solucin extractiva. 0,1 % como reactivo de liberacin para Ca y Mg y
como supresor de ionizacin para Na y K. El anlisis
Anlisis de Ca y Mg por titulacin de Ca y Mg se realiz en modo absorcin con lmpa-
El anlisis de Ca y Mg se realiz sobre una alcuo- ra de ctodo hueco, mientras que Na y K se analiza-
ta de 10 mL del extracto obtenido en la etapa de ron en modo emisin atmica, sin empleo de lmpa-
extraccin, a los cuales se aadieron 4 mL de buffer ra. En la Tabla 8.2 se indican las condiciones instru-
NH3/NH4Cl para lograr un pH 10, y una pizca de indi- mentales empleadas.
cador Negro de Eriocormo T. El anlisis de Ca se rea-
liz sobre otra alcuota de 10 mL de extracto, a los Se inform la estimacin de la cantidad medida
cuales se aadieron 10 ml de NaOH 1 mol L-1 para por cada mtodo a partir del valor medio y la estima-
lograr un pH 12, y una pizca de indicador Calcn. En cin de la precisin a partir del desvo estndar. Se
ambos casos se titul con EDTA 0,01 mol L-1 hasta compararon los resultados obtenidos por ambos
viraje del indicador de color rojo vinoso a azul mtodos y el valor medio asignado por interlabora-
(Laboratorio de Suelo y Agua, 2012a). torio empleando grficos de barra. Adems se calcu-
laron relaciones de elementos y los resultados se
Anlisis de Na y K por fotometra de llama analizaron empleando un test t (=0,05) mediante
El anlisis de Na y K se realiz sobre el extracto el software Infostat (Di Rienzo et al., 2015).
de suelo obtenido tal cual, o en una dilucin del
mismo cuando fue necesario. A partir de una solu- Resultados y discusin
cin de NaCl 0,5 mmol L-1 o KCl 0,5 mmol L-1, se rea-
liz la curva de calibrado para cada elemento: Na El anlisis de Ca intercambiable por absorcin
(0,05; 0,10; 0,13; 0,25; 0,38; 0,5 mmol L-1) y K (0,05; atmica y volumetra arroj diferencias significati-
0,10; 0,13; 0,15; 0,20 mmol L-1) (Laboratorio de vas que pueden observarse por la falta de superpo-
Suelo y Agua, 2012b). sicin de las barras de error (Figura 8.1). Esto se aso-

Tabla 8.2. Condiciones ins-


trumentales del espectr-
metro de absorcin y emi-
sin atmica

64 EEA INTA Anguil


Figura 8.1. Valor asignado
y concentraciones de Ca
medidas en muestras de
suelo por absorcin atmi-
ca y por volumetra. Las
barras indican el desvo
estndar de las rplicas.

cia, en principio, a la baja dispersin de las rplicas t al emplear el mtodo volumtrico, lo cual puede
para cada muestra en ambos mtodos. Se observ estar asociado a las interferencias del mismo
que los resultados obtenidos mediante absorcin (PROINSA, 2015). Adems el contenido de Mg inter-
atmica fueron en general ms bajos que los obteni- cambiable cuantificado por absorcin atmica fue
dos por volumetra. Aun cuando los resultados entre mayor que el obtenido por volumetra, a excepcin
mtodos difirieron, stos no mostraron diferencia de la muestra 2014 A. Esta diferencia en la cuantifi-
con el valor asignado a cada muestra. Cabe sealar cacin de Mg, junto a la mayor concentracin de Ca
que el valor medio asignado a las muestras en inter- determinada por volumetra, indicara una deficien-
laboratorio se obtiene a partir de la utilizacin de te separacin de ambos cationes previo a la titula-
ambos mtodos por los diferentes laboratorios par- cin de Ca. Dado que el mtodo de absorcin atmi-
ticipantes, lo que podra explicar la dispersin ca determina slo el elemento en cuestin a una lon-
observada. Por otro lado, considerando que valores gitud de onda especfica, el valor obtenido por este
de Ca intercambiable >7,0 cmolc kg-1 son considera- mtodo es el ms prximo al valor verdadero.
dos muy buenos, sin limitaciones a los cultivos Finalmente se observ que el valor de Mg determi-
(Ortega & Corvaln, 2001), la diferencia observada nado por cada mtodo no mostr diferencias con el
entre mtodos no afectara la interpretacin del valor asignado. Nuevamente cabe sealar, al igual
resultado en la mayora de las muestras analizadas. que para el Ca, que el valor medio asignado a las
muestras en interlaboratorio se obtiene a partir de
El anlisis de Mg intercambiable por absorcin la utilizacin de ambos mtodos por los diferentes
atmica y volumetra arroj diferencias significati- laboratorios participantes. Considerando que valo-
vas para las muestras 2013 A y B y 2014 B (Figura res de Mg > 1,0 cmolc Kg-1 son considerados buenos
8.2). Se observ que la dispersin obtenida aumen- (Ortega & Corvaln, 2001), la diferencia observada

Figura 8.2. Valor asignado


y concentraciones de Mg
medidas en muestras de
suelo por absorcin atmi-
ca y por volumetra. Las
barras indican el desvo
estndar de las rplicas.

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 65


Figura 8.3. Valor asignado
y concentraciones de K
medidas en muestras de
suelo por emisin atmica
y por fotometra. Las
barras indican el desvo
estndar de las rplicas.

entre mtodos no afectara la interpretacin del con escasa interferencia de otros elementos, al con-
resultado con fines de diagnstico de la fertilidad. trario de lo que ocurre con el mtodo volumtrico
para los elementos Ca y Mg. Al comparar los resulta-
El anlisis de K intercambiable por ambos mto- dos obtenidos con el valor asignado a dichas mues-
dos indica un estrecho desvo de los resultados tras, stos se encuentran por debajo para las mues-
(Figura 8.3). Es por esto que se observan diferencias tras 2012, 2013A, 2015A. Es de considerar que se ha
entre mtodos para las muestras 2013B, 2014B y informado un alto desvo estndar para la determi-
2015A. Sin embargo, todos los resultados estuvie- nacin de Na en los interlaboratorios, lo que ha
ron dentro de los desvos asignados para cada impedido evaluar el desempeo de los participantes
muestra en el interlaboratorio. Esto permite indicar en el anlisis de este elemento (PROINSA, 2015). La
que los mtodos fueron comparables para el anli- dispersin interlaboratorio se asocia a la baja con-
sis de K intercambiable. Niveles de K intercambiable centracin del analito en las muestras. En bibliogra-
en suelos > 0,5 cmolc kg-1 son considerados muy fa se menciona valores de Na intercambiable en
buenos (Ortega & Corvaln, 2001), por lo que la dife- suelos < 0,8 cmolc kg-1 como valores buenos, sin
rencia observada entre los mtodos no afectara la limitaciones para cultivos sensibles (Ortega &
interpretacin del resultado con fines de diagnsti- Corvaln, 2001). Es necesario profundizar el estudio
co de la fertilidad. del anlisis de Na intercambiable en suelos para dis-
minuir la variabilidad en el valor asignado a las
El valor de Na intercambiable no mostr diferen- muestras.
cias entre los mtodos de emisin atmica y fotome-
tra de llama, excepto para la muestra 2014B (Figura Se analiz la proporcin de cada catin intercam-
8.4). Estos resultados son esperables dado que biable respecto de la CIC en las muestras de suelo,
ambos mtodos determinan la emisin elemental, empleando los diferentes mtodos de anlisis

Figura 8.4. Valor asignado


y concentraciones de Na
medidas en muestras de
suelo por emisin atmica
y por fotometra. Las
barras indican el desvo
estndar de las rplicas.

66 EEA INTA Anguil


Tabla 8.3. Proporcin de
cationes intercambiables
obtenidos por los dos
mtodos de anlisis, res-
pecto de la CIC de cada
muestra de suelo.

(Tabla 8.3). Se observa una diferencia significativa Tabla 8.4. Relacin de cationes intercambiables en las
en la estimacin de la proporcin de Ca (p<0,05), muestras de suelo calculadas segn los dos mtodos de
mientras que para los cationes Mg, K y Na no hay anlisis.
diferencias (p>0,05) en la estimacin de su propor-
cin respecto de la CIC empleando el mtodo de
absorcin/emisin atmica o los mtodos clsicos
de volumetra y fotometra.

Tambin se analizaron las relaciones entre catio-


nes intercambiables, utilizadas habitualmente con
propsitos de estudiar el estado nutricional de los
suelos (Tabla 8.4). Se observ que existe una dife-
rencia significativa en la relacin Ca/Mg (p<0,05)
calculada por el mtodo de absorcin atmica o por
volumetra. Mientras que no hubo diferencia al cal- mtodos de fotometra de emisin y espectrometra
cular la relacin K/Mg (p>0,05). Se observ que la de emisin atmica, aunque si se presentaron dife-
diferencia estadstica del conjunto de las muestras rencias con el valor medio asignado a las muestras.
en la relacin Ca/Mg se correspondi con la diferen- Sin embargo, tal como se mencion previamente,
cia observada en algunas muestras en particular, las muestras utilizadas presentan gran dispersin
tales como 2012, 2013B y 2014B. Es necesario pro- en los valores asignados al elemento Na, y slo fue-
fundizar en el estudio de la determinacin de catio- ron utilizadas a modo orientativo en este estudio.
nes por diferentes mtodos para sacar conclusiones
al respecto de su aptitud de uso en laboratorios. Bibliografa

Conclusiones Conti, ME. 2005. Intercambio de iones. In: Principios de


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metra de absorcin atmica resultaron ser precisos Di Rienzo, J; F Casanoves; MG Balzarini; L Gonzalez; M
para la determinacin de Ca y Mg. Las diferencias en Tablada & CW Robledo. 2015. Infostat versin 2015. Grupo
el valor medio de estos cationes determinados por Infostat, FCA, UNC, Argentina.
diferentes mtodos, arrojan diferencias en la esti- Helmke, PA & DL Sparks. 1996. Chapter 19. Lithium,
macin de la relacin Ca/Mg. El mtodo de fotome- sodium, potassium, rubidium and cesium. In: Sparks D L
tra de emisin y la espectrometra de emisin at- (ed). Methods of soil analysis. Part 3. Chemical methods.
mica resultaron ser precisos y exactos para la deter- Madison. SSSA-ASA. pp 551-574.
minacin de K. Las relaciones K/Mg determinadas Kucera, A; J Sikl; F Oulehle; P Samonil, K Marosz; R Hleb; J
por ambos mtodos de anlisis arrojaron resultados Houska & J Hruska. 2014. Comparison of modern and tradi-
similares por lo que el mtodo de anlisis no afecta- tional methods of soil sorption complex measurement: the
ra la interpretacin de resultados en la mayora de basis of long-term studies and modelling. Ekolgia
las muestras analizadas. Es necesario profundizar (Bratislava). 33(1):48-59.
los estudios de anlisis de Na, ya que en este estu- Laboratorio de Suelo y Agua, 2012a. Procedimiento tcni-
dio no existieron diferencias significativas entre los co: Determinacin de calcio y magnesio. Complejometra.

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 67


Anguil. INTA.
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68 EEA INTA Anguil


Clara Brambilla, Micaela Baglioni, Micaela
Prez, Marianela Savio y Nanci Kloster

9.
El azufre (S) es reconocido como un elemento
Azufre disponible
y azufre total
muchos aspectos centrales an no han sido diluci-
esencial para el crecimiento de las plantas y su dis- dados. En la actualidad se presentan dificultades en
ponibilidad en los suelos es un factor limitante en la establecer relaciones significativas entre las res-
produccin de cultivos. La deficiencia de S en suelos puestas a la fertilizacin azufrada y el contenido de
ha sido observada en pases productores de granos S-SO42- en suelo a la siembra u otras variables tales
en todo el mundo, incluyendo Argentina (Hitsuda et como materia orgnica, textura y manejo (Pagani &
al., 2008). La frecuencia y magnitud de esta deficien- Echeverra, 2011; Ketterings et al., 2011; Gutirrez
cia se increment en los ltimos aos debido a la Boem, 2015). En funcin de ello, no existe un mto-
intensificacin de la agricultura y al escaso uso de do de diagnstico preciso para ser utilizado al
fertilizantes azufrados (Reussi Calvo et al., 2008). momento de decidir una fertilizacin con S. Sin
Generalmente, suelos arenosos con bajo contenido embargo se menciona que un nivel de 10 mg kg-1 de
de materia orgnica, han sido identificados por su S-SO42- en suelo permitira separar situaciones con
respuesta a la aplicacin de fertilizantes con S baja y alta probabilidad de respuesta (Romano,
(Romano, 2012). 2012; Carciochi et al., 2016). La necesidad de contar
con un mtodo preciso y exacto para el diagnstico
En la Regin Pampeana el S constituye el tercer de SO42- en suelos (Russi et al., 2012) es un aspecto
nutriente en importancia luego del nitrgeno y fs- crtico que requiere seguir siendo estudiado.
foro, para el desarrollo de los cultivos. Este nutrien-
te se encuentra en el suelo bajo diferentes formas El anlisis de SO42- en suelos tiene dos aspectos
qumicas, formando parte de compuestos orgnicos importantes a considerar dada su influencia sobre el
dentro de la materia orgnica del suelo o bien puede resultado final obtenido: la extraccin del anin a
hallarse como S inorgnico, bajo la forma de sulfa- partir del suelo y la cuantificacin del mismo. En la
tos (SO42-), la cual es asimilable por los cultivos. Del bibliografa se proponen varios mtodos para la
total de S del suelo, se estima que un 97 % est bajo extraccin de SO42-, siendo los ms comunes los
formas orgnicas (Tabatabai, 1996). Los cultivos que utilizan soluciones acuosas de cloruro de calcio,
pueden requerir de 4 a 18 kg de S por tonelada de el acetato de amonio y el fosfato de potasio y otros.
grano, las oleaginosas son las ms exigentes en S, Hay que considerar en este aspecto que diferentes
mientras, el trigo y el maz necesitan menores canti- soluciones de extraccin evalan diferentes formas
dades. Sin embargo, para maz, los requerimientos de SO42- disponible, tales como SO42- en solucin,
de S pueden llegar hasta 45 kg ha-1, cuando alcanza adsorbido o mineralizable (Nagendra Rao & Sharma,
altos rendimientos (12000 kg ha-1) (Romano, 2012). 1997; Ketterings et al., 2011; Cihacek et al., 2015).
De all la importancia de la adecuada dotacin de
materia orgnica en el suelo, o en su defecto el En Argentina la gran mayora de los laboratorios
suplemento de S a partir de fertilizantes (Torres de anlisis de suelos realizan la cuantificacin de
Duggan et al., 2011; Divito et al., 2013). SO42- mediante turbidimetra, utilizando diferentes
soluciones de extraccin (PROINSA, 2015). La turbi-
El diagnstico de la disponibilidad de S en suelos dimetra es simple pero tiene varios problemas que
es un tema que est en desarrollo, y para el cual reducen su precisin y exactitud, tal como la interfe-

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 69


Tabla 9.1. Clasificacin de suelo y propiedades fsico-qumicas de las muestras utilizadas para el estudio.

rencia por materia orgnica, el color del extracto y la Regin Semirida Pampeana, clasificados como
estabilidad de la suspensin (Russi et al., 2012). Haplustol Entico y Ustipsament Tpico y una muestra
Aunque existen otros mtodos para la cuantificacin correspondiente al interlaboratorio PROINSA (2015).
de SO42-, tales como la espectroscopia de emisin Las muestras se tomaron a una profundidad de 0-20
ptica con plasma acoplado inductivamente cm, se secaron al aire y se tamizaron por tamiz de 2
(Cihacek et al., 2015), estos exigen una alta inver- mm. Las propiedades fsico-qumicas de las mues-
sin instrumental, no accesible a la mayora de los tras se indican en la Tabla 9.1.
laboratorios de diagnstico de fertilidad de suelos.
Soluciones y reactivos
Algunos autores sugieren que ante la falta de Solucin extractora de Morgan modificada: Se
mtodos de diagnstico para el S inorgnico, el anli- disuelven 39 g de acetato de amonio en solucin de
sis de S total puede ser una herramienta de estima- cido actico 0,25 mol L-1 y se lleva a volumen final
cin del S disponible en suelos para los cultivos de 1 L.
(Noellemeyer, comunicacin personal). El analizador
de S Truspec CNS (LECO) es un instrumento promete- Solucin de fosfato dicido de potasio 500 mg P L-1.
dor para el anlisis de S total en suelos por combus-
tin seca, mayormente por su rapidez de anlisis Solucin de cloruro de calcio 0,01 mol L-1.
(aproximadamente 4 min) (Tabatabai, 1996).
Solucin de cloruro de potasio 0,25 mol L-1.
En este Captulo se muestran resultados prelimi-
nares del estudio de SO42- en suelo, cuantificados Solucin de referencia de S-SO42- 1000 mg L-1.
por turbidimetra, empleando 4 soluciones extracto-
ras mencionadas en la bibliografa: solucin extrac- Solucin patrn de S-SO42- 100 mg L-1.
tora de Morgan modificada (Bortolotti, 2014), solu-
cin de fosfato dicido de potasio (500 mg P L-1) Soluciones de calibracin de concentraciones de 0,
(Tabatabai, 1996), solucin de cloruro de calcio 0,01 2, 4, 6 y 8 mg L-1 de S-SO42-.
mol L-1 (Tabatabai, 1996) y solucin de cloruro de
potasio (Blair et al., 1991). Adems los resultados de Extraccin y cuantificacin de SO42- del suelo
SO42- son comparados con los de S total de dichos En la Figura 9.1 se indica un diagrama del proce-
suelos, determinados por combustin seca. dimiento de extraccin de SO42- en las muestras de
suelo. Cuando el extracto obtenido result con
Materiales y Mtodos color, se trasvas el sobrenadante a un tubo limpio
y se agregaron 0,10 g de carbn activado libre de
Muestras de suelo SO42-. Se agit y se filtr nuevamente.
Se utilizaron nueve muestras de suelo de la Paralelamente se realizaron dos blancos, uno con

70 EEA INTA Anguil


grado 5.0. Previo al anlisis de muestras incgnitas,
el equipo fue calibrado empleando un suelo de refe-
rencia certificado (LECO). De acuerdo con las reco-
mendaciones del fabricante, una regresin lineal fue
utilizada para el ajuste de la curva de calibracin.

Anlisis estadstico
Todas las muestras se analizaron por triplicado
con cada una de las soluciones de extraccin eva-
luadas. Los datos obtenidos se analizaron emplean-
do ANOVA y el mtodo de comparaciones mltiples
propuesto por Fisher (LSD Fisher), a partir del soft-
ware Infostat (Di Rienzo et al., 2015).

Resultados y discusin

La Figura 9.2 muestra las curvas de calibracin


obtenidas en la cuantificacin por turbidimetra
empleando las cuatro soluciones extractantes pro-
puestas. En todos los casos se obtuvo un coeficien-
te de determinacin apropiado para la cuantifica-
cin (R2>0,99).

La cantidad de S-SO42- extrados de suelos vari


entre las diferentes soluciones extractantes (Tabla
9.2). El contenido de S-SO42- extrado sigui el
siguiente orden: fosfato de potasio > solucin de
Morgan > cloruro de calcio > cloruro de potasio.
Dicho orden de extraccin coincide con los publica-
dos en la bibliografa para suelos de diferente clasi-
ficacin (Tabatabai, 1996; Ketterings et al., 2011;
Cihacek et al., 2015).

La mayor cantidad de S-SO42- determinada en el


extracto de fosfato de potasio reflejara la extraccin
Figura 9.1. Esquema del procedimiento de extraccin y de SO42- solubles y adsorbidos en suelos. Esto ocu-
cuantificacin de SO42- en muestras de suelo. rre por la mayor fuerza de adsorcin de iones fosfa-
to frente a los SO42-. Sin embargo la extraccin con
carbn activado y otro sin este reactivo, preparados fosfato de potasio present una baja repetibilidad.
de la misma forma que la muestra. La etapa de cuan- Esto se asocia a la turbidez del extracto obtenido, la
tificacin se aplic a extractos de muestras, blancos cual no pudo mejorarse an con el agregado de car-
y soluciones de calibracin. bn activado, e interfiri en la cuantificacin por tur-
bidimetra. De todas maneras dicho mtodo se reco-
Anlisis de S total por combustin seca mienda para suelos con pH<6, donde la cantidad de
El mtodo de combustin seca (Tabatabai, 1996) SO42- adsorbidos es significativa (Cihacek et al.,
se utiliz para el anlisis de S total, empleando un 2015), pero no sera apta para suelos de tipo
equipo Truspec CNS (LECO). El anlisis de muestras Haplustol Entico y Ustipsament Tpico como los uti-
por combustin seca se llev a cabo de acuerdo a lizados en este estudio.
los parmetros recomendados por el fabricante del
equipo (LECO, 2008), empleando oxgeno y helio de La menor cantidad de S-SO42- extrado con cloru-

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 71


Figura 9.2. Curvas de calibracin con diferentes extractantes: solucin de Morgan, fosfato de potasio, cloruro de calcio
y cloruro de potasio. Las barras indican el desvo estndar de las rplicas.

Tabla 9.2. Concentracin


de S-SO42- determinada en
suelos tratados con dife-
rentes extractantes. Letras
diferentes indican diferen-
cias significativas
(p<0,05).

ros, ya sea cloruro de calcio o cloruro de potasio, IRAM-SAGyP 29575. Se considera que el acetato
refleja la extraccin de SO42- en solucin. Los iones extrae una fraccin del SO42- adsorbido, dado que el
calcio facilitan la floculacin de compuestos coloida- anin acetato tiene una fuerza similar al SO42- para
les, principalmente orgnicos, favoreciendo la su adsorcin al suelo (Tabatabai, 1996). Esta solu-
obtencin de un extracto lmpido (Kloster et al., cin extrajo cantidad variable de S-SO42-, en un
2013). Igual efecto produce la alta concentracin de rango ms amplio (9.9-19.9 mg kg-1), respecto a las
potasio cuando se utiliza cloruro de potasio como soluciones de cloruro de calcio (2,9-5,7 mg kg-1) y
solucin extractora. cloruro de potasio (2.4-6,7 mg kg-1).
La solucin de Morgan modificada es el mtodo El contenido de S total de los suelos es variable,
propuesto por la asociacin de laboratorios agrope- pero el rango normal en suelos agrcolas en regiones
cuarios privados (ALAP) para la determinacin de S- hmedas y semi-hmedas es de 100 a 500 mg de S
SO42- soluble y adsorbido en suelos (Bortolotti, por kg de suelo (Romano, 2012). Las muestras de
2014). Actualmente se corresponde con la norma suelo analizadas arrojaron cantidades variables de

72 EEA INTA Anguil


Figura 9.3. Relacin de S-
SO42- extrados por dife-
rentes extractantes respec-
to de la cantidad de S total
del suelo. No se represen-
tan los datos obtenidos
con fosfato de potasio
debido a su alta variabili-
dad. Las barras indican el
desvo estndar de las
rplicas.

Figura 9.4. Relacin de S


total en funcin del conte-
nido de materia orgnica
en las muestras de suelo
(p>0,01).

S total determinado por el mtodo de combustin el carbono orgnico del suelo, se puede asociar al S.
seca (81,7 a 228,1 mg kg-1) (Tabla 9.3). En lneas En este estudio se observ que el contenido de S
generales la repetibilidad del mtodo fue aceptable total del suelo aument de forma lineal con el conte-
(desvo estndar + 10 mg kg-1). Sin embargo algunas nido de materia orgnica (Figura 9.4). La relacin
muestras (N 5, 7, 8) arrojaron mayores desvos y es C/S en suelos oscila alrededor de 100, aunque
necesario en dichos casos explorar las causas de puede ser de 500-600 en casos extremos de defi-
estos resultados. ciencia de este elemento (Sanzano, 2016). Los valo-
res de la relacin C/S obtenidos para las muestras
El contenido de S-SO42- extrado con la solucin de suelo analizadas indicaron una buena dotacin
de Morgan represent entre un 7,7 y un 13,5 % del S de S en los suelos (Tabla 9.3).
total del suelo. Se obtuvo una relacin lineal signifi-
cativa (R2=0,51) entre el contenido de S-SO42- extra- Conclusiones
dos del suelo con la solucin de Morgan y el conte-
nido de S total (p<0,05). (Figura 9.3). Esta relacin El contenido de S-SO42- extrado con la solucin
lineal no fue significativa para las extracciones reali- de Morgan y determinado por turbidimetra, parece
zadas con cloruro de calcio y cloruro de potasio. La ser el mtodo promisorio para la estimacin del con-
mayor pendiente en la relacin obtenida con la solu- tenido de S disponible en suelos dado que extrae
cin de Morgan se corresponde a que la misma concentraciones del analito en un rango apreciable
extrae el SO42- en solucin ms una fraccin de respecto de las extracciones realizadas con solucio-
SO42- adsorbido, que no es extrado con las solucio- nes de cloruro. El anlisis de S total por el mtodo
nes de cloruro (Ketterings, et al., 2011). de combustin seca indica una buena dotacin de S
en las muestras de suelo analizadas y surge como
Del mismo modo que se asocia al nitrgeno con alternativa a la estimacin de S disponible. Este es

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 73


Tabla 9.3. Concentracin de S total determinado en las Commun. Soil Sci. & Plant Anal. 44:1800-1813.
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74 EEA INTA Anguil


Romina Fernndez, Alberto Quiroga y
ElkeNoellemeyer

Comparacin de mtodos
de determinacin de

10.
El anlisis de la distribucin del tamao de part-
textura en Ustoles de
la Regin Semirida
Pampeana
Los mtodos ms empleados en la determina-
culas cuantifica las fracciones granulomtricas de cin de fracciones granulomtricas son el del hidr-
los componentes minerales del suelo. La importan- metro de Bouyoucos (Bouyoucos, 1936) y el de la
cia de conocer la distribucin porcentual de las dis- pipeta de Robinson (Gee & Bauder, 1986). Si bien
tintas fracciones est relacionada a la capacidad de algunos autores sugieren eliminar la materia orgni-
retencin e infiltracin de agua, y con ello al tamao ca cuando los contenidos de carbono superen al 1 o
de poros, a la capacidad de intercambio catinico y 2% (Steinhardt et al., 1980; USDA-NRSC, 2014), es
reguladora de pH, etc. Adems, estudios desarrolla- frecuente que en el mtodo de Bouyoucos la deter-
dos en la regin semirida pampeana por Quiroga et minacin se realice sin eliminar materia orgnica
al. (1996, 2016) y Fernndez et al. (2016) demostra- (Norambuena et al., 2002; Gabriels & Lobo, 2006;
ron que la relacin entre los contenidos de materia Manna, 2016). Diversos autores sealaron que si el
orgnica y de arcilla+limo (A+L) es un buen indicador suelo tiene un bajo contenido de materia orgnica y
de la calidad de suelos. Por tal motivo resulta rele- se encuentra libre de sales solubles, el mtodo de
vante la precisin en el anlisis granulomtrico, Bouyoucos tiene un bajo desvo con respecto al
sobre todo en la determinacin de las fracciones de mtodo de la pipeta (Day, 1965; Gee & Bauder,
tamao 50 m. 1986), teniendo la ventaja de dar resultados simila-
res sin necesidad de hacer un pretratamiento de las
Para separar las fracciones granulomtricas muestras ni de largos perodos de reposo. Sin
(arcilla, limo y arena), se emplean varios mtodos embargo, el mtodo de la pipeta resulta ms eficien-
basados en la ley de Stokes, y todos ellos contem- te porque requiere la destruccin de todos los agen-
plan la previa dispersin de las partculas individua- tes cementantes, incluida la materia orgnica, des-
les. Sin embargo, no siempre es sencillo dispersar truyendo los microagregados. En estudios de gne-
todas las partculas, debido a que algunas quedan sis, caracterizacin y clasificacin de suelos, en los
adheridas entre s por efecto de cementantes como que se requiere una estimacin precisa del conteni-
carbonatos, sales y materia orgnica entre otros, do de arcilla de los horizontes del suelo, se reco-
formando microagregados. Estos microagregados mienda el mtodo de la pipeta (Day, 1965).
se comportan como una partcula ms grande, lo
cual enmascara la granulometra verdadera del Relacionado a la produccin de los cultivos es
suelo. La dispersin generalmente se realiza por importante conocer el ndice MO/A+L del suelo el
medios mecnicos (agitacin mecnica) y qumicos. cual guarda cierta relacin con la toma de decisio-
El agregado de hexametafosfato de sodio, que com- nes relacionadas a la fertilidad nitrogenada. En cul-
pleja el calcio en solucin y lo reemplaza por el tivos como cebada (Quiroga et al., 2006) y girasol
sodio en el complejo de intercambio, dando como (Funaro et al., 2007) se han propuesto valores
resultado la dispersin de las partculas primarias umbrales del ndice a partir del cual es ms probable
(Gee & Bauder, 1986).El mtodo ms difundido para la respuesta a la fertilizacin. Si bien los anlisis gra-
eliminar materia orgnica es el tratamiento con agua nulomtricos estn ampliamente difundidos, distin-
oxigenada y calor, si bien otros reactivos como el tas metodologas que se emplean en la Regin
hipoclorito de sodio podran resultar ms eficaces Semirida Pampeana arrojan resultados y conclu-
(Mikutta et al., 2005). siones diferentes, y an no se ha comparado la

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 75


informacin brindada entre estos mtodos. En este tosca de la Regin Semirida Pampeana. Se eligie-
Captulo se presentan los resultados de la determi- ron 23 sitios de suelos bajo uso agrcola y en vege-
nacin de fracciones granulomtricas por los mto- tacin natural. De cada sitio se tomaron 3 submues-
dos de la pipeta y del hidrmetro de Bouyoucos, con tras compuestas a 0-20 cm de profundidad, las cua-
y sin destruccin de la materia orgnica, en suelos les se secaron al aire y se tamizaron a 2 mm. Se rea-
de la Regin Semirida Pampeana. liz la determinacin de arcilla, limo y arena,
mediante los mtodos de la pipeta de Robinson y
Materiales y Mtodos del hidrmetro de Bouyoucos (Norma ASTM D-422)
(Figura 10.1) con y sin destruccin de la materia
Se usaron muestras obtenidas de Paleustoles orgnica. La destruccin de la materia orgnica,
petroclcicos, ubicados en el sur de la planicie con cuando correspondiere en el mtodo del hidrme-

Figura 10.1. Esquema del


procedimiento de determi-
nacin de textura por los
mtodos del hidrmetro de
Bouyoucos y de la pipeta
de Robinson.

76 EEA INTA Anguil


Tabla 10.1. Contenido porcentual (promedio de 23 sitios con 3 repeticiones) de fracciones granulomtricas en 0-20 cm
de profundidad mediante distintos mtodos. MO: Materia orgnica, A+L: arcilla + limo, FA: Textura franco arenoso

tro, se realiz aadiendo a la muestra de suelo 50 mL nido de limo, tambin se evidenciaron diferencias
agua oxigenada (100 vol) y colocando a bao mara a significativas, el mtodo de la pipeta y el hidrmetro
100C, y agregando mayor cantidad de agua oxigena- con destruccin de la materia orgnica presentaron
da hasta la completa destruccin de la materia org- valores similares y fueron menores al encontrado
nica, que se evidencia por la falta de burbujeo al aa- con el hidrmetro de Bouyoucos sin destruccin de
dir agua oxigenada. Por otro lado, se determin el la materia orgnica. En cambio los contenidos de
contenido de materia orgnica mediante la tcnica de arcilla + limo (A+L) y arena no se diferenciaron en
Walkley & Black segn Norma IRAM-SAGyP 29571- funcin al mtodo empleado.
2:2011.
El mtodo del hidrmetro de Bouyoucos sin des-
Con el fin de explorar los resultados arrojados truir materia orgnica no fue capaz de detectar
por ambos mtodos de determinacin de textura en todas las partculas de arcillas, y gran parte de las
profundidad del perfil, se seleccionaron 4 suelos y mismas fueron consideradas como tamao limo, ya
se muestrearon 3 perfiles equidistantes 10 m cada que se hall 36 % menos de arcilla y 12 % ms de
uno. En cada perfil fueron considerados 3 profundi- limo con respecto al mtodo de la pipeta. Estos
dades de muestreo, 0-6, 17-22 y 40-45 cm a los cua- resultados podran deberse a la falta de destruccin
les se les determino la proporcin de arcilla, limo y completa de los agregados en la tcnica del hidr-
arena por mtodo de la pipeta y del hidrmetro con metro de Bouyoucos sin destruccin de la materia
y sin destruccin de la materia orgnica. orgnica, lo cual conlleva a la agregacin de las par-
tculas <2m a una escala mayor, aumentando as la
Los resultados se analizaron estadsticamente proporcin de partculas tamao limo.
mediante anlisis de regresin, ANOVA, y para
detectar las diferencias entre medias se utiliz el Al tener la materia orgnica un efecto de agente
test de Tukey (Di Rienzo et al., 2013). Se us un floculante sobre las partculas del suelo, y conside-
=0,05 para declarar la significancia estadstica. rando que distintos autores establecen un valor
umbral a partir del cual los contenidos del coloide
Resultados y Discusin orgnico interfieren en la composicin granulomtri-
ca, se consider oportuno el anlisis de arcilla, limo
Los valores obtenidos para las distintas fraccio- y arena en suelos con contenido de materia orgni-
nes granulomtricas variaron significativamente en ca mayor y menor a 2,8 % (Tabla 10.2).
funcin del mtodo de determinacin utilizado. En la
Tabla 10.1 se presentan los contenidos de fracciones Para los suelos con materia orgnica mayor o
granulomtricas en los primeros 20 cm del perfil de igual a 2,8 % se encontraron diferencias significati-
suelo. Tanto en el mtodo de la pipeta, como utili- vas en todas las fracciones granulomtricas. El con-
zando el hidrmetro con destruccin de la materia tenido de arcilla obtenido por medio de la pipeta fue
orgnica, se obtuvieron similares contenidos de levemente superior al obtenido mediante el hidr-
arcilla; en cambio, el contenido hallado con el hidr- metro de Bouyoucos con destruccin de la materia
metro sin destruccin de la materia orgnica fue orgnica, aunque no se diferenciaron significativa-
menor y present diferencias significativas con res- mente. Mientras, los contenidos de arcilla obtenidos
pecto a los otros dos mtodos. En relacin al conte- mediante el hidrmetro sin destruccin de la mate-

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 77


Tabla 10.2. Contenido porcentual de fracciones granulomtricas (promedio de 23 sitios con 3 repeticiones) en 0-20 cm
de profundidad mediante pipeta, e hidrmetro con y sin destruccin de la materia orgnica en suelos con MO o < a
2,8 %. MO: Materia orgnica, A+L: arcilla + limo, F: Textura franco, FA: Textura franco arenoso

ria orgnica fueron considerablemente menores. nuestros resultados, en los suelos con materia org-
Esta diferencia correspondi al 37 y 30 % menos con nica mayor o igual a 2,8 % no se recomendara utili-
respecto al mtodo de la pipeta y al hidrmetro con zar el mtodo del hidrmetro sin destruccin de la
destruccin de la materia orgnica respectivamente. materia orgnica para cuantificar las fracciones gra-
En relacin al limo, la pipeta y el hidrmetro con des- nulomtricas.
truccin de la materia orgnicano, no se diferencia-
ron significativamente, pero s lo hicieron con res- En suelos con materia orgnica menor a 2,8 %
pecto al mtodo del hidrmetro sin destruccin de la tambin se encontr subestimacin de arcilla, y
materia orgnica. Este ltimo mtodo tuvo entre un sobreestimacin de limo, pero los contenidos de A+L
2 y 5 % ms de limo que el hallado con pipeta e y arena fueron similares entre los 3 mtodos. Por lo
hidrmetro con destruccin de materia orgnica, tanto en suelos con bajos contenidos de materia
respectivamente. Los contenidos de A+L y de arena orgnica (< 2,8 %) el mtodo del hidrmetro sin des-
se diferenciaron entre pipeta y el hidrmetro sin truccin de la materia orgnica no sera apropiado
destruccin de la materia orgnica. Norambuena et para conocer el valor absoluto de arcilla y limo, pero
al. (2002), Beretta et al. (2014) y Manna et al. (2016) resultara correcto utilizar el contenido de A+L o
coinciden en que la sobrestimacin de la fraccin arena, especialmente cuando se utiliza para calcular
arena aplicando la tcnica del hidrmetro obedece el ndice que relaciona la materia orgnica total con el
al aporte de microagregados (pseudo arenas) que contenido de arcilla y limo (Quiroga et al., 2006).
no se dispersan con este mtodo.
En las Tablas 10.3, 10.4 y 10.5 se presentan los
Para los suelos con materia orgnica menor a 2,8 contenidos de las fracciones granulomtricas obte-
% tambin se encontraron diferencias significativas nidos con los 3 mtodos considerados, para 3 estra-
en arcilla y limo. Mediante el mtodo del hidrmetro tos del perfil: 0-6, 17-22 y 40-45 cm. Para los prime-
sin destruccin de la materia orgnica se determin ros 6 cm de profundidad (Tabla 10.3), el contenido
un 35 % menos de arcilla y 15 % ms de limo con res- de arcilla obtenido por medio de la pipeta fue simi-
pecto a los otros 2 mtodos. Los contenidos de A+L lar al obtenido mediante el hidrmetro con destruc-
y arena fueron similares entre los 3 mtodos. cin de la materia orgnica, mientras que el hidr-
metro sin destruccin de la materia orgnica result
En general se infiere que en suelos con mayor en un valor considerablemente menor (61%). En
contenido de materia orgnica el mtodo del hidr- relacin al limo, los valores fueron similares y no se
metro sin destruccin de la materia orgnica subes- hallaron diferencias estadsticas significativas. Con
tima arcillas debido a que no detecta la arcilla en respecto a los contenidos de A+L se registraron dife-
agregados de tamao limo, y en consecuencia rencias significativas, los mtodos de pipeta e hidr-
sobreestima el contenido de limos. De acuerdo a metro con destruccin de la materia orgnica pre-

78 EEA INTA Anguil


Tabla 10.3. Contenido porcentual de fracciones granulomtricas a 0-6 cm de profundidad mediante pipeta e hidrme-
tro con y sin destruccin de la materia orgnica. MO: Materia orgnica, A+L: arcilla + limo, F: Textura franco, FA:
Textura franco arenoso

Tabla 10.4. Contenido porcentual de fracciones granulomtricas a 17-22 cm de profundidad mediante pipeta e hidrmetro
con y sin destruccin de la materia orgnica. MO: Materia orgnica, A+L: arcilla + limo, FA: Textura franco arenoso

Tabla 10.5. Contenido porcentual de fracciones granulomtricas a 40-45 cm de profundidad mediante pipeta e hidrmetro
con y sin destruccin de la materia orgnica. MO: Materia orgnica, A+L: arcilla + limo, FA: Textura franco arenoso

sentaron similar valor, en cambio el contenido de metro sin destruccin de la materia orgnica para 0-
A+L hallado mediante Bouyoucos sin destruccin de 20 cm de profundidad con respecto a las distintas
la materia orgnica fue un 22 % menor con respecto fracciones granulomtricas, se puede apreciar que
a pipeta. La proporcin de arena fue significativa- en trminos generales, ambos mtodos mantuvie-
mente menor (20 %) mediante el mtodo de la pipe- ron una tendencia similar y los coeficientes de deter-
ta con respecto al hidrmetro sin destruccin de la minacin (R2) fueron aceptables (Figura 10.2). Todas
materia orgnica. las regresiones fueron significativas (=0,05).

A los 17 y a los 40 cm de profundidad (Tabla 10.4 Agrupando los suelos en relacin a los conteni-
y Tabla 10.5 respectivamente) tambin los conteni- dos de materia orgnica, tal cual se present en la
dos de arcilla que se obtuvieron por medio del hidr- Tabla 10.2, los resultados de nuestro estudio permi-
metro sin destruccin de la materia orgnica fueron tiran afirmar que para los suelos francos y franco-
significativamente menores con respecto a los otros arenosos de la Regin Semirida Pampeana con
mtodos. En cambio los datos de limo, A+L y arena valores inferiores a 2,8 % materia orgnica se reco-
fueron similares entre si y no presentaron diferen- mendara realizar el mtodo de la pipeta. Si no se
cias significativas entre mtodos. cuenta con el instrumental para el desarrollo de
dicho mtodo, se podra emplear el mtodo del
Al comparar los resultados de las regresiones hidrmetro sin destruccin de la materia orgnica,
entre el mtodo de la pipeta y el mtodo del hidr- pero ajustando para cada fraccin granulomtrica

Mtodos de anlisis e implementacin de Calidad en el Laboratorio de Suelos 79


Figura 10.2. Contenido de a) arcilla, b) limo, c) arena, d) arcilla+limo (A+L) obtenida mediante el mtodo de pipeta y
del hidrmetro sin destruccin de la materia orgnica a 0-20 cm de profundidad.

las ecuaciones que se detallan a continuacin: mayores a 2,8 %. Las siguientes ecuaciones ilustran
la relacin entre ambos mtodos:

Sin embargo, en los suelos con mayor contenido


de materia orgnica, las regresiones entre los mto- Ecuacin que ilustra la relacin entre pipeta e
dos de pipeta e hidrmetro sin destruccin de la hidrmetro sin destruccin de la materia orgnica
materia orgnica fueron bajas, (excepto para los para A+L:
contenidos de A+L), por lo tanto se procedi a rela-
cionar el mtodo de la pipeta con el mtodo del
hidrmetro con destruccin de la materia orgnica. En la Figura 10.3 se relacionan los contenidos de
Los resultados muestran que el ajuste, a pesar de A+L obtenidos mediante el mtodo de la pipeta y del
ser significativo, no tendra una adecuada precisin hidrmetro sin destruccin de la materia orgnica.
para estimar arcilla y limo, por lo que se recomienda En las tres profundidades evaluadas: a) 0-6, b) 17-22
utilizar el mtodo de la pipeta en suelos franco y y c) 40-45 cm las relaciones fueron significativas y
franco arenoso con contenidos de materia orgnica tuvieron un ajuste aceptable.

80 EEA INTA Anguil


Figura 10.3. Arcilla+ limo (A+L) obtenida con pipeta e hidrmetro sin destruccin de la materia orgnica. a) 0-6 cm de
profundidad, b) 17-22 cm de profundidad y c) 40-45 cm de profundidad.

Conclusiones Bibliografa

Los valores de las distintas fracciones granulo- Beretta, A; A Silbermann; L Paladino; D Torres; D
mtricas variaron en funcin del mtodo de determi- Bassahun; R Musselli & A Garca-Lamohte. 2014. Soil textu-
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