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UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA

UNIDAD ACADMICA DE CC. AGR.


ESCUELA DE INGENIERA AGRONMICA

PORTAFOLIO DE GENETICA

Estudiantes: Tinoco Azanza Victor Alfonso

Ciclo: Quinto A

Docente: Ing. Agr. Jos Nicasio Quevedo Guerrero Mg. Sc.

MACHALA - EL ORO - ECUADOR


INTRODUCCIN

Esta catedra se baja especficamente que el estudiante aprenda conocimientos sobre


la gentica, como ha revolucionado al mundo que hoy en da la Gentica es muy
importante para la agricultura moderna ya que por medio del estudio de la gentica
podemos clasificar especies de cultivo y mejorarlos aplicando mtodos investigativos.
La Gentica es una de las ramas ms modernas de las ciencias biolgicas, con apenas
un siglo de existencia, pero con un desarrollo vertiginoso que la ubica como la ciencia
ms destacada del siglo XX. Su objeto de estudio es la herencia y la variacin, es
decir, la forma en que se trasmiten las caractersticas de una generacin a otra y los
aspectos que intervienen en este proceso. Debe su nombre al vocablo gen,
proveniente ste de la palabra griega cuyo significado es "raza, generacin". La
Gentica se divide en varias ramas, entre las que se encuentran la Gentica Clsica
(tambin denominada mendeliana) que se dedica al estudio general de los genes y la
herencia; la Gentica Molecular, cuyo campo es el cido desoxirribonucleico (ADN)
y la funcin de los genes desde el punto de vista molecular; la Gentica Cuantitativa,
que evala el impacto a pequea escala de los genes sobre el fenotipo; la Gentica de
Poblaciones, que como su nombre lo indica, se encarga del comportamiento de los
genes a nivel de grupos y poblaciones, aspectos claves en el proceso evolutivo de los
organismos; as como la Ingeniera Gentica, dedicada a la manipulacin de los genes
mediante la aplicacin de la tecnologa.
El fenotipo o apariencia fsica de todos los organismos es producto de la conjuncin
entre su informacin gentica y los factores ambientales, lo que pone de manifiesto la
importancia del estudio de esta ciencia, para lo cual es corriente dividirla en tres
perodos: la poca clsica (primer tercio del siglo XX), la poca de los
descubrimientos moleculares (1940-1970) y la poca contempornea, denominada era
de la genmica.

Objetivos
Conocer los principios bsicos de la gentica aplicados a la agronoma.
Persuadir la importancia de la proteccin de la diversidad gentica,
Emplear los conocimientos genticos en la agricultura.
CLASE # 1
Fecha: martes 4 de Octubre del 2016

UNIDAD 1 GENERALIDADES DE LA GENTICA MENDELIANA


Generalidades de la gentica
Gentica es una ciencia relativamente joven, pues nace a
finales del siglo XIX con los trabajos de Johan Gregor
Mendel, como una rama de la biologa que se encarga de:
"Estudiar la transmisin y descendencia de los caracteres
hereditarios, ya sean fsicos, bioqumicos, de
comportamiento y de otro tipo".
"Estudiar las posibilidades, ya que trata de las leyes de la
herencia, o sea de los caracteres que se transmiten de padres
a hijos y de generacin en generacin".

Evolucin e historia.
Desde la antigedad y an hoy se seleccionan plantas y animales con ciertas
caractersticas para que las hereden sus descendientes (Seleccin artificial) y de esta
forma promover el mejoramiento de algunos caracteres en la poblacin obtenida: mayor
produccin, mejor calidad, ms resistencia al medio, plagas, enfermedades y otros. En la
poca antigua este proceso se hizo en forma intuitiva, sin llegar a entender que
mecanismos intervenan en l. (Octavo., 2009)
poca pre mendeliana y teora de la mezcla.
Los filsofos antiguos expresan su concepto sobre la herencia biolgica en la llamada
teora gentica de la mezcla: "Los descendientes presentan caractersticas intermedias
entre sus progenitores, al igual que la mezcla de pinturas de diferentes colores". (Octavo.,
2009)
A partir del siglo XVIII la gentica tom gran impulso. Entre los principales
investigadores se destacaron:
Kolreuter, investigador alemn, quin cruz especies diferentes de tabaco que se
diferenciaban en varios caracteres, obteniendo una descendencia hbrida, la cual tena
caractersticas de sus antecesores, siento total o parcialmente estriles. (Octavo., 2009)
Knight y Gross, en Inglaterra, cruzan guisantes con el objeto de obtener variedades ms
vigorosas y productivas. (Octavo., 2009)
Nadn, botnico Francs, realiz ensayos de hibridacin en plantas; cruz hbridos entre
s y encontr que en las nuevas plantas se regeneraban caractersticas de sus progenitores.
(Octavo., 2009)
Darwin, lanz la teora de la pan gnesis, la cual explica que partculas pequeas llamadas
pangenes producidas por cada rgano pasan por va sangunea a los gametos y al
realizarse la fecundacin , la pangene genera en el embrin el rgano del cual proviene.
(Octavo., 2009)
Galton, estudi los caracteres de diferentes familias como el genio, la estatura, el color de
ojos, las enfermedades y otros, estableciendo dos principios o leyes de la herencia:
Herencia ancestral: "los dos progenitores contribuyen a la herencia en la proporcin de
una mitad de la facultad heredada".
Segregacin filial: "llamada tendencia a la mediocridad", la cual considera que las
caractersticas de tipo extremo son menos acentuadas en los hijos.
CLASE # 2
Fecha: martes 11 de Octubre del 2016

Caracterizacin fenotpica y caracterizacin molecular

Caracterizacin Fenotpica
Un fenotipo es cualquier caracterstica o rasgo
observable de un organismo, como su
morfologa, desarrollo, propiedades
bioqumicas, fisiologa y comportamiento. Los
fenotipos resultan de la expresin de los genes
de un organismo, as como de la influencia de
los factores ambientales, y de las posibles
interacciones entre ambos.
El genotipo de un organismo es el conjunto de
instrucciones heredadas que lleva en su cdigo
gentico. No todos los organismos con el
mismo genotipo se parecen o actan de la
misma manera, porque la apariencia y el
comportamiento se modifican por condiciones
ambientales y de desarrollo. Del mismo modo, no todos los organismos que se parecen
tienen necesariamente el mismo genotipo. Esta distincin genotipo-fenotipo fue
propuesta por Wilhelm Johannsen en 1911, para dejar clara la diferencia entre la herencia
de un organismo y lo que esa herencia produce. La distincin es similar a la propuesta
por August Weismann, que distingue entre germoplasma (la herencia) y clulas somticas
(el cuerpo). Una versin ms moderna es el dogma central de la biologa molecular
propuesto por Francis Crick.
A pesar de que es una definicin simple en apariencia, el concepto de fenotipo tiene
algunas sutilezas ocultas. En primer lugar, la mayora de las molculas y estructuras
codificadas por el material gentico no son visibles en la apariencia de un organismo,
pero s son observables por algn procedimiento (por ejemplo, mediante una prueba
bioqumica), por lo que son parte del fenotipo. Los grupos sanguneos humanos son un
ejemplo. As que, por extensin, el trmino fenotipo debe incluir las caractersticas que
se pueden hacer visibles mediante procedimientos tcnicos.
Otra extensin del concepto aade al fenotipo el comportamiento del individuo, ya que
ste tambin se ve afectado tanto por el genotipo como por los factores ambientales.
El fenotipo no es simplemente un producto del genotipo, sino que se ve influido por el
medio ambiente en mayor o menor medida. Y, adems, si el genotipo se define en sentido
estricto, entonces hay que recordar que no toda la herencia est en el ncleo de la clula.
Por ejemplo, las mitocondrias transmiten su propio ADN directamente, no a travs del
ncleo, aunque se dividen al unsono con el ncleo.
Genotipo
El genotipo se refiere al conjunto real de genes que un organismo lleva dentro. Es toda la
informacin gentica que se encuentra en el ADN.
Bsicamente, el genotipo determina el tipo de rasgos que podrn observarse en el
fenotipo. Por ejemplo, los rasgos genotpicos de los organismos son los que determinan
su susceptibilidad ante determinada enfermedad.

Es la variacin genotpica entre los cromosomas XX y XY la que determina el sexo del


organismo. Es importante aclarar que aunque el genotipo determina ciertas
caractersticas, los factores ambientales tambin son importantes.
La condicin de una persona y los rasgos con los que nace estn determinados por su
genotipo. Las sucesivas generaciones de estos organismos, tambin incluirn estas
caractersticas. Cada organismo tiene una sola clase de genotipo. Slo se puede hablar de
excepciones en los casos de gemelos idnticos, pero incluso en estos casos pueden
presentarse caractersticas fenotpicas diferentes; aunque tengan similar genotipo.
CLASE # 3
Fecha: martes 18 de Octubre del 2016

Leyes de Mendel. Herencia mendeliana para uno, dos, tres o ms pares de genes

Las leyes de Mendel fueron desarrolladas por un cientfico


genetista, considerado como el padre de la gentica:
Gregor Mendel. De all su nombre. Este cientfico realizo
experimentos que permitieron dilucidar elementos
fundamentales de la herencia gentica, como con un
ejemplo de ley de Mendel, donde se explican los rasgos
descendientes que se pueden predecir a travs de las
caractersticas de los progenitores de una especie, desde
animales, plantas y hasta seres humanos. (Miarro, 2015)
Este cientfico fue quien acu algunos de los trminos ms conocidos de la gentica,
como son los trminos dominante y recesivo, que son factores de la herencia
presentes en las caractersticas y rasgos hereditarios en los organismos, todo esto a travs
de las tres Leyes de Mendel. (Miarro, 2015)
Fue decisivo el Ensayo Sobre Los Hbridos Vegetales que realiz en 1866, donde
finalmente se formulaban las 3 Leyes De Mendel que fueron nombradas ante su apellido.
Y que estaban compuestas por cruces inter-especies y experimentos que fueron llevados
a un anlisis estadstico. Sin embargo, estos estudios no fueron tomados en cuenta hasta
mucho despus de ser publicados, en el ao 1900. A continuacin te damos una
introduccin a las Leyes de Gregor Mendel:

Primera ley de Mendel


A esta ley se le llama tambin Ley de la uniformidad de los hbridos de la primera
generacin (F1), y dice que cuando se cruzan dos variedades individuos de raza pura,
ambos homocigotos, para un determinado carcter, todos los hbridos de la primera
generacin son iguales.
Los individuos de esta primera generacin filial (F1) son heterocigticos o hbridos, pues
sus genes alelos llevan informacin de las dos razas puras u homocigticas: la dominante,
que se manifiesta, y la recesiva, que no lo hace...
Mendel lleg a esta conclusin trabajando con una variedad pura de plantas de guisantes
que producan las semillas amarillas y con una variedad que produca las semillas verdes.
Al hacer un cruzamiento entre estas plantas, obtena siempre plantas con semillas
amarillas.
Otros casos para la primera ley. La primera ley de Mendel se cumple tambin para el
caso en que un determinado gen d lugar a una herencia intermedia y no dominante, como
es el caso del color de las flores del "dondiego de noche". Al cruzar las plantas de la
variedad de flor blanca con plantas de la variedad de flor roja, se obtienen plantas de
flores rosas, como se puede observar a continuacin:

Segunda ley de Mendel


A la segunda ley de Mendel tambin se le llama de la separacin o disyuncin de los
alelos.
Experimento de Mendel. Mendel tom plantas procedentes de las semillas de la primera
generacin (F1) del experimento anterior y las poliniz entre s. Del cruce obtuvo semillas
amarillas y verdes en la proporcin que se indica en la figura. As pues, aunque el alelo
que determina la coloracin verde de las semillas pareca haber desaparecido en la
primera generacin filial, vuelve a manifestarse en esta segunda generacin.
Los dos alelos distintos para el color de la semilla presentes en los individuos de la
primera generacin filial, no se han mezclado ni han desaparecido, simplemente ocurra
que se manifestaba slo uno de los dos. Cuando el individuo de fenotipo amarillo y
genotipo Aa, forme los gametos, se separan los alelos, de tal forma que en cada gameto
slo habr uno de los alelos y as puede explicarse los resultados obtenidos. (Miarro,
2015)
Otros casos para la segunda ley. En el caso de los genes que presentan herencia
intermedia, tambin se cumple el enunciado de la segunda ley. Si tomamos dos plantas
de flores rosas de la primera generacin filial (F1) y las cruzamos entre s, se obtienen
plantas con flores blancas, rosas y rojas. Tambin en este caso se manifiestan los alelos
para el color rojo y blanco, que permanecieron ocultos en la primera generacin filial.

Retro cruzamiento
Retrocruzamiento de prueba.- En el caso de los genes que manifiestan herencia
dominante, no existe ninguna diferencia aparente entre los individuos heterocigticos
(Aa) y los homocigticos (AA), pues ambos individuos presentaran un fenotipo amarillo.
La prueba del retrocruzamiento, o simplemente cruzamiento prueba, sirve para
diferenciar el individuo homo- del heterocigtico. Consiste en cruzar el fenotipo
dominante con la variedad homocigtica recesiva (aa).
- Si es homocigtico, toda la descendencia ser igual, en este caso se cumple la primera
Ley de Mendel.
- Si es heterocigtico, en la descendencia volver a aparecer el carcter recesivo en
una proporcin del 50%.
Tercera ley de Mendel.
Se conoce esta ley como la de la herencia independiente de caracteres, y hace referencia
al caso de que se contemplen dos caracteres distintos. Cada uno de ellos se transmite
siguiendo las leyes anteriores con independencia de la presencia del otro carcter.
Experimento de Mendel. Mendel cruz plantas de
guisantes de semilla amarilla y lisa con plantas de semilla
verde y rugosa (Homocigticas ambas para los dos
caracteres).
Las semillas obtenidas en este cruzamiento eran todas
amarillas y lisas, cumplindose as la primera ley para
cada uno de los caracteres considerados, y revelndonos
tambin que los alelos dominantes para esos caracteres
son los que determinan el color amarillo y la forma lisa.
Las plantas obtenidas y que constituyen la F1 son di
hbridas (AaBb).

Estas plantas de la F1 se cruzan entre s,


teniendo en cuenta los gametos que formarn
cada una de las plantas. Se puede apreciar que
los alelos de los distintos genes se transmiten
con independencia unos de otros, ya que en la
segunda generacin filial F2 aparecen
guisantes amarillos y rugosos y otros que son
verdes y lisos, combinaciones que no se haban
dado ni en la generacin parental (P), ni en la
filial primera (F1).
Asimismo, los resultados obtenidos para cada
uno de los caracteres considerados por
separado, responden a la segunda ley.
CLASE # 4
Fecha: martes 25 de Octubre del 2016

UNIDAD II ESTUDIO DEL CROMOSOMA

Mitosis, Meiosis, Gametognesis. Estructura del cromosoma.


Mitosis.
Mitosis es la divisin celular propiamente dicha, y produce dos clulas hijas
genticamente idnticas entre s. Puede ocurrir en las clulas de los individuos eucariontes
tanto haploides como diploides. (galindo, Avedao, & Angulo, 2009)
La mitosis propiamente dicha est compuesta de 4 etapas o fases: Profase, Metafase,
Anafase y Telofase. Frecuentemente se ha discutido si la Interfase est incluida en la
mitosis o no pero, tcnicamente, no es parte de la divisin celular sino del ciclo celular.
Meiosis.
La meiosis es la divisin celular que permite la reproduccin sexual. Comprende dos
divisiones sucesivas: una primera divisin meitica, que es una divisin reduccional, ya
que de una clula madre diploide (2n) se obtienen dos clulas hijas haploides (n); y una
segunda divisin meitica, que es una divisin ecuacional, ya que las clulas hijas tienen
el mismo nmero de cromosomas que la clula madre (como la divisin mittica). As,
dos clulas n de la primera divisin meitica se obtiene cuatro clulas n. Igual que en la
mitosis, antes de la primera divisin meitica hay un perodo de interfase en el que se
duplica el ADN. Sin embargo, en la interfase de la segunda divisin meitica no hay
duplicacin del ADN. (galindo, Avedao, & Angulo, 2009)

Interface.- La clula est ocupada en la actividad metablica


preparndose para la mitosis (las prximas cuatro fases que conducen e
incluyen la divisin nuclear). Los cromosomas no se disciernen
claramente en el ncleo, aunque una mancha oscura llamada nucleolo,
puede ser visible. La clula puede contener un par de centriolos ( o
centros de organizacin de microtubulos en los vegetales ) los cuales son sitios de
organizacin para los microtubulos.
Profase.- La cromatina en el ncleo comienza a condensarse y se
vuelve visible en el microscopio ptico como cromosomas. El ncleolo
desaparece. Los centrolos comienzan a moverse a polos opuestos de
la clula y fibras se extienden desde los centrmeros. Algunas fibras
cruzan la clula para formar el huso mittico.
Prometafase.- La membrana nuclear se disuelve, marcando el
comienzo de la prometafase. Las protenas de adhieren a los
centrmeros creando los cinetocoros. Los microtubulos se adhieren a
los cinetocoros y los cromosomas comienzan a moverse.

Metafase.- Fibras del huso alinean los cromosomas a lo largo del medio
del ncleo celular. Esta lnea es referida como, el plato de la metafase.
Esta organizacin ayuda a asegurar que en la prxima fase, cuando los
cromosomas se separan, cada nuevo ncleo recibir una copia de cada
cromosoma.
Anafase.- Los pares de cromosomas se separan en los cinetocoros y se
mueven a lados opuestos de la clula. El movimiento es el resultado de
una combinacin de: el movimiento del cinetocoro a lo largo de los
microtubulos del huso y la interaccin fsica de los microtubulos
polares.
Telofase.- Los cromatidos llegan a los polos opuestos de la clula, y
nuevas membranas se forman alrededor de los ncleos hijos. Los
cromosomas se dispersan y ya no son visibles bajo el microscopio
ptico. Las fibras del huso se dispersan, y la citocinesis o la particin
de la clula puede comenzar tambin durante esta etapa.
Citosinesis.- En clulas animales, la citocinesis ocurre cuando un anillo
fibroso compuesto de una protena llamada actna, alrededor del centro
de la clula se contrae pellizcando la clula en dos clulas hijas, cada
una con su ncleo. En clulas vegetales, la pared rgida requiere que un
placa celular sea sintetizada entre las dos clulas hijas.

Gametognesis.
Es la formacin de gametos por medio de la meiosis a partir de clulas germinales.
Mediante este proceso, el material gentico de cada clula se reduce a la mitad. As, el
nmero de cromosomas que existe en las clulas germinales se reduce de diploide:46
(doble) a haploide:23 (nico). (galindo, Avedao, & Angulo, 2009)
La espermatognesis. Este proceso se desarrolla en las testculos, aunque la maduracin
final de los espermatozoides se produce en el epiddimo. Tiene una duracin aproximada
de 64 a 75 das.
Las espermatogonias permanecen en mitosis durante 16 das, dando lugar a los
espermatocitos primarios. Estos invierten 24 das en completar la primera meiosis y dar
lugar a los espermatocitos secundarios que tardarn horas en convertirse en espermtides.
Las espermtides se diferencian, empleando otros 24 das en este proceso. (galindo,
Avedao, & Angulo, 2009)
Cuando termina todo el proceso, los espermatozoides presentan zonas bien diferenciadas:
la cabeza, el cuello y la cola. La cabeza, contiene los cromosomas de la herencia y lleva
en su parte anterior un pequeo saliente o acrosoma, cuya misin es perforar las
envolturas del vulo. En el cuello o segmento se localiza el centrosoma y las
mitocondrias, que garantizan el aporte energtico. La cola o flagelo es el filamento que
se encarga de generar la movilidad que le permite al espermatozoide moverse hasta el
vulo para poder fecundarlo. (galindo, Avedao, & Angulo, 2009)
La ovognesis es la gametognesis femenina, es decir, el desarrollo y diferenciacin del
gameto femenino u vulo mediante una divisin meitica y se lleva a cabo en los ovarios.
Este proceso se produce a partir de una clula diploide y se forman como productos una
clula haploide funcional (el vulo) y tres clulas haploides no funcionales (los cuerpos
polares). (galindo, Avedao, & Angulo, 2009)
Las clulas del organismo poseen una dotacin gentica compuesta por 46 cromosomas.
Las clulas germinales poseen slo 23. Al unirse tras la fecundacin un ovocito con 23
cromosomas y un espermatozoide con 23 cromosomas darn lugar a un EMBRIN con
clulas de 46 cromosomas. (galindo, Avedao, & Angulo, 2009)

Estructura del cromosoma.


Los cromosomas son las estructuras fsicas de la clula eucariota que portan los genes
(unidades de informacin hereditaria). Estos cromosomas slo son visibles durante la
divisin celular. Mostrando a plenitud sus caractersticas morfolgicas durante la
metafase.La dotacin cromosmica humana es de 23 pares, los cuales se clasifican en 22
pares de autosomas y un par de cromosomas sexuales o gonosomas (XX en la mujer y
XY en el hombre). Los miembros de cada par son semejantes y se denominan homlogos.
Desde el punto de vista de su composicin los cromosomas estn formados de DNA y
protenas, donde principalmente con las protenas bsicas llamadas histonas, se forma la
llamada fibra de cromatina. Esta cromatina se encuentra de manera descompactada
cuando la clula se encuentra en interfase, razn por la cual los cromosomas no estn
visibles; pero al momento del comienzo de la profase de la divisin celular esta fibra va
sufriendo un superenrrollamiento que va progresivamente estructurando las dos
cromtidas hermanas que forman un cromosoma mittico. (galindo, Avedao, & Angulo,
2009)
CLASE # 5
Fecha: martes 01 de Noviembre del 2016
Mapas Cromosmicos
Una mapa cromosmico es la representacin esquemtica de los genes conocidos en
los cromosomas en estado metafsico, esto es, la etapa en que el ADN se empaqueta
en forma de cromosomas alcanzado un grosor de hasta 200 veces, de tal forma que se
puede apreciar al microscopio ptico. Se utiliza para hallar la localizacin de estos
componentes tcnicos como la frecuencia de recombinacin de estos genes. Una alta
frecuencia de recombinacin quiere decir que ambos se segregan independientemente
y que por tanto si estn juntos en los padres (por ejemplo padre alto con ojos verdes
y madre baja con ojos azules) aparecen aleatoriamente en la descendencia (hijo bajo
con ojos verdes e hijo alto con ojos azules), por tanto estn muy lejos en el cromosoma
o en cromosomas diferentes. Cuando dos genes que estn juntos en los padres estn
juntos en el mismo cromosoma de los hijos, es que estn muy juntos en los
cromosomas. Un padre alto y ojos verdes y madre baja ojos azules tendran hijos bien
altos y ojos verdes o bien bajos y ojos azules. Tambin utilizan sondas como la FISH
(hibridacin in situ fluorescente) que se une directamente al gen que se observa por
microscopa ptica marcado con un color fluorescente. Esto se utiliza por ejemplo
para detectar genes mutantes. Es til para seleccionar fetos que estn libres de
mutaciones que presentan los padres y pueden ser letales.
Ligamento y recombinacin
Los genes que controlan diferentes caracteres son heredados de forma independiente
uno de otros es cierto solo cuando los genes existen en cromosomas diferentes.
El genetista Thomas Hunt Morgan y sus colaboradores demostraron en una serie
amplia de experimentos con moscas de la fruta, que los genes se disponen en el mismo
cromosoma, se heredan como una unidad aislada mientras que el cromosoma
permanezca intacto. A los genes heredados de esa manera se dice que estn ligado
Sin embargo, Morgan y su grupo observaron tambin que este ligamento rara vez es
completo. Las combinaciones de los alelos de cada progenitor pueden reorganizarse.
Durante la meiosis, una pareja de cromosomas homlogos pueden intercambiar
material durante que se denomina recombinacin o entrecruzamiento.
Basndose en la teora de la herencia enunciada por Sutton y cuyos aspectos
esenciales son:
Los genes estn ubicadas en los cromosomas.
La ordenacin de los mismos es lineal.
Al fenmeno gentico de la recombinacin le corresponde un fenmeno citolgico
de intercambio de segmentos cromosoma tico, Morgan propuso que existen
parejas genticas situadas sobre el mismo par de cromosomas homlogos,
llamando a este fenmeno ligamento.

Cuando dos o ms genes localizados en el mismo cromosoma se dice que estn


ligados, y pueden estarlo en autosomas o cromosomas sexuales.
Los genes que se encuentren en distintos cromosomas se distribuyen en los gametos
independientemente uno del otro. Sin embargo, los genes que se encuentran en el
mismo cromosoma tienen a permanecer juntos; es decir a no sufrir separaciones ni
combinaciones al azar durante la formacin de gametos.
Al analizar los resultados los resultados de una cruza de prueba a individuos di
hbridos se observaran resultados diferentes, en distintos cromosomas.
a) Los genes que se encuentran en distintos cromosomas se distribuyen
independientemente, por lo tanto del apareamiento AaBb x aabb se obtendr
una proporcin esperada en la cruza de prueba de 1:1:1:1.
b) Los genes ligados no se distribuyen independientemente sino que tienden a
permanecer juntos y en la misma combinacin encontrada en los progenitores.

Durante la meiosis cada cromosoma se duplica formando dos clemtides hermanas


idnticas, al par de cromosomas homlogos se aparea y se produce el
entrecruzamiento entre clemtides no hembras. Este ltimo proceso requiere del
rompimiento y la reunin de solo dos de las cuatro bandas en cualquier punto del
cromosoma.
La recombinacin, definida en relacin a la meiosis, es el proceso que genera un
producto haploide cuyo genotipo defiere de los dos genotipos progenitores que
forman la clula que inicio la meiosis. El producto asi generado se denomina
recombinante.
Hay dos tipos de recombinacin, las que producen recombinaciones por mtodos
absolutamente diferentes:
Intercromosmica
Intercromosmica

a) Recombinacin intercromosmica.

Es la que se produce mediante la distribucin independiente de Mendel. Las dos clases


recombinantes o nuevos fenotipos constituyen el 50% de los descendientes, 25% de
cada tipo. Si encontramos esta frecuencia podemos inferir que las parejas genticas
segregan independientemente.
b) Recombinacin intracromosmatica.

Se produce por entrecruzamiento. Esto ocurre entre cualquiera de dos clemtides no


hermanas. Esto sucede en todas las meiosis, otra mitad sern gametos tipo progenitor.
Las meiosis sin entrecruzamiento entre dos luc producirn solo genotipos parentales
para esas parejas gnicas.
La recombinacin intercromosmica se pone de manifiesto en la aparicin de una
frecuencias de recombinacin menor al 50% el ligamento fsico entre las
combinaciones gnicas parentales impide la libre distribucin de los genes, a la que
genera una frecuencia de recombinacin del 50%.
Deteccin De Ligamentos
En gentica se denomina ligamiento a la asociacin fsica entre dos luc (esto es, su
cercana en una misma hebra de ADN, lo que repercute en una baja frecuencia de
recombinacin entre ellos durante la meiosis, y, por tanto, a una mayor probabilidad
de herencia conjunta. Esto se debe a que los quiasmas, estructuras de
entrecruzamiento generadas durante la recombinacin, se producen al azar a lo largo
de un cromosoma; de este modo, a menor distancia entre dos luc, menor probabilidad
de que se d un quiasma y, por tanto, se generen variantes recombinantes.

La disposicin de dos luc con mxima frecuencia de recombinacin (esto es, de 0,5
o, lo que es lo mismo, del 50%) es sobre cromosomas separados, puesto que, as, si
slo se transmite las clulas germinales una copia del genoma y existen dos
cromosomas homlogos (el paterno y el materno) en la clula diploide de la lnea
germinal, su segregacin al azar dar lugar a la transmisin de uno de los dos, y 1/2
corresponde a la mencionada frecuencia de recombinacin de 0,5. Cuando los dos luc
se encuentran en cromosomas distintos se dice que no estn ligados: es una situacin
de no ligamiento.

Cmo se calcula la frecuencia en que se recombinan los genes ligados?

Contamos los recombinantes sobre el total y eso nos da p o la frecuencia de


recombinacin. A travs de la frecuencia se establece la distancia entre los genes ya
que un 1% de recombinacin equivale a un centiMorgan o una Unidad Mapa.

La mxima frecuencia de recombinacin es de 50% o 0,5 ya que ms all de ese valor


como p o r valen 0,5 observara riamos cuatro clases de gametas en 1/4 cada una, o
sea igual que en una trasmisin independiente. Esto ocurre porque cuando los genes
estn muy separados existen posibles dobles entrecruzamientos que llevaran a NO
recombinacin entre los dos genes en cuestin.

Por lo tanto la mxima distancia que podemos calcular es 50 UN o cM o un p: 0,5.

Por qu la frecuencia de recombinacin tiene un mximo de 0,5?

Cuando p alcanza un valor de O, 5 quiere decir que la mitad de las gametas son
parentales (1/2 de cada tipo parental) y mitad son recombinates (1/2 de cada una de
las recombinaciones). Esto es lo mismo que decir que tendramos 4 posibles clases de
gametas en igual probabilidad (1/4) de cada clase y eso sera igual que dos genes que
se transmiten independientemente, como lo predijo Mendel cada di hbrido da 4 clases
de gametas igualmente probables. Quiere decir entonces que si p: 0,5 no sabremos ya
con certeza si los genes estn ligados o en diferentes pares de cromosomas. Por ello a
su vez la mayor distancia que podemos calcular es 50Um o cM. La frecuencia de
recombinacin es un estimador de la distancia hasta ese punto, ya a mayores
distancias p seguira valiendo 0,5.

Por todo esto cuando la distancia entre dos genes es de 50 UM o ms es necesario


usar un tercer gen marcador en el medio y determinar las distancias parciales o prueba
de 3 puntos.
Este error en la extincin de grandes distancias es debido a que podran ocurrir dobles
entrecruzamientos entre ambos genes y no observar recombinacin entre ellos pero si
hubo entre otros en el medio y por lo tanto la estimacin de la distancia no es exacta.

El caso de dobles entrecruzamientos se ejemplifica abajo.

O sea los genes conservan la misma combinacin parental y no podramos ver


fenotipos recombinantes aun cuando hubo dobles entrecruzamientos. Para detectarlos
entonces se usa la prueba de 3 puntos.
CLASE # 6
Fecha: martes 08 de Noviembre del 2016

Numero bsico de cromosomas morfologa cromosmica.


Definicin:
Cada uno de los "paquetes" de genes y dems ADN en forma de hilo que se encuentran
en el ncleo de una clula. El nmero de cromosomas vara de un organismo a otro.
Los humanos tenemos 23 pares de cromosomas, 46 en total: 44 autosomas y dos
cromosomas sexuales. Cada uno de los padres contribuye con un cromosoma para
cada par, de manera que un nio obtiene la mitad de sus cromosomas de su madre y
la otra mitad de su padre.

Cromosoma
Un cromosoma es una estructura en la que el ADN est muy empaquetado y
protegido. Los cromosomas son un componente celular que solo se forman cuando la
clula est en divisin. Son los encargados de transportar el ADN (cido
desoxirribonucleico) y los genes durante la divisin celular.
Cromosoma
Vista general de las clulas en un pice de raz de cebolla (Allium cepa), observado
con 800 aumentos. (a) Clula sin dividirse, obsrvese la red de cromatina y el nuclolo
intensamente teido; (b) ncleos preparados para la divisin celular, puede observarse
que la cromatina se ha condensado; (c) Clulas en distintos estadios de divisin
mittica, se pueden observar que la cromatina se ha terminado de condensar y se han
formado los cromosomas.
En biologa, se denomina cromosoma (del griego , - chroma, color y ,
- soma, cuerpo o elemento) a cada uno de los pequeos cuerpos en forma de
bastoncillos en que se organiza la cromatina del ncleo celular durante las divisiones
celulares (mitosis y meiosis). La cromatina es un material microscpico que lleva la
informacin gentica de los organismos eucariotas y est constituida por ADN
asociado a protenas especiales llamadas histonas. Este material se encuentra en el
ncleo de las clulas eucariotas y se visualiza como una maraa de hilos delgados.
Cuando el ncleo celular comienza el proceso de divisin (cariocinesis), esa maraa
de hilos inicia un fenmeno de condensacin progresivo que finaliza en la formacin
de entidades discretas e independientes: los cromosomas. Por lo tanto, cromatina y
cromosoma son dos aspectos morfolgicamente distintos de una misma entidad
celular.
Cromosoma: Un cromosoma consiste de dos cromtides unidas por un centrmero
(Figura 1). El cromosoma se divide en dos brazos, el brazo corto denominado con la
letra p y el brazo largo denominado con la letra q.
Estructura externa de los cromosomas: nmero, forma y tamao
El estudio de la estructura externa de los cromosomas de cualquier especie eucaritica
consiste en analizar la forma, tamao y nmero de los cromosomas que posee. El
mejor momento para llevar a cabo dicho estudio suele ser aquel en el que los
cromosomas han alcanzado su mximo grado de contraccin y tienen sus bordes
perfectamente definidos. Dicho momento suele ser la metafase mittica. El estudio de
la estructura externa de los cromosomas culmina con la obtencin del cariotipo. Los
cromosomas se pueden estudiar en distintos momentos segn la especie y
dependiendo de los objetivos planteados. Algunas especies tienen cromosomas que
se pueden observar con gran detalle en interfase, tal es el caso de Drosophila
melanogaster, que posee cromosomas politnicos gigantes que se observan en las
glndulas salivales de dicho insecto, y el de Chironomus tentans, otro dptero. El
cariotipo se confecciona usualmente despus de un apropiado pre-tratamiento y
tincin de las clulas, para hacer ms visibles los cromosomas individuales. Al
diagrama simplificado de los cromosomas metafsicos del cariotipo se lo denomina
idiograma, que se construye con el nmero genmico. Para realizar el ordenamiento
de los cromosomas tanto en cariotipos como idiogramas se debe tener en cuenta el
tamao cromosmico (ubicados de mayor a menor, con el brazo corto bc o "p" hacia
arriba y el brazo largo bl o "q" hacia abajo); posicin del centrmero (generalmente
alineados) y presencia de constricciones secundarias y satlites.

Morfologa del cromosoma


Bajo el microscopio, los cromosomas se ven como estructuras delgadas y alargadas.
Tienen un brazo corto y otro largo separados por un estrechamiento o constriccin
primaria, llamada centrmero. El brazo corto se designa como p y el brazo largo como
q. El centrmero es el punto donde se une el huso mittico y es parte integral del
cromosoma. Es esencial para el movimiento y segregacin normales del cromosoma
durante la divisin celular. Los cromosomas metafsicos humanos presentan tres
formas bsicas y se pueden clasificar de acuerdo con la longitud de los brazos corto y
largo, as como por la posicin del centrmero. Los cromosomas metacntricos tienen
los brazos corto y largo de aproximadamente la misma longitud, con el centrmero
en el punto medio. Los cromosomas submetacntricos tienen los brazos corto y largo
de longitudes desiguales, con el centrmero ms prximo a uno de los extremos. Los
cromosomas acrocntricos tienen el centrmero muy cerca de un extremo, con un
brazo corto muy pequeo. Con frecuencia tienen constricciones secundarias en los
brazos cortos, que conectan trozos muy pequeos del DNA, llamados tallos y
satlites, con el centrmero. Los tallos contienen genes que codifican el RNA
ribosmico.

Clasificacin de los cromosomas: Los cromosomas se pueden clasificar de acuerdo


a la posicin del centrmero en:
Metacntricos: El centrmero est ubicado ms o menos en el centro, es decir los
brazos p y q son aproximadamente de la misma longitud.
Submetacntricos: El centrmero se encuentra desplazado claramente del centro.
(Los brazos difieren en longitud).
Acrocntricos: El centrmero est ubicado cerca a un extremo. (Un brazo
considerablemente grande comparado con el otro)
Telocntricos: Con el centrmero en un extremo, este cromosoma solo tiene el brazo
largo.
CLASE # 7
Fecha: martes 15 de Noviembre del 2016

UNIDAD III PROBALIDADES GENETICAS

Probabilidades y predicciones genticas.


La probabilidad
Mendel fue la primera persona que produjo y clasific miles de hbridos y aplic
anlisis matemtico a sus datos. Us la probabilidad en su razonamiento.
La probabilidad es el estudio de la forma en que operan las leyes del azar. El azar se
refiere a la posibilidad de que ocurra cierto evento.

En gentica se usan dos principios importantes de la probabilidad.


La regla de eventos independientes.- los eventos que ya ocurrieron, no afectan la
probabilidad de que pueda ocurrir uno de esos mismos eventos. Por ejemplo, si
tiras una moneda de 5 centavos al aire, la probabilidad de que caiga cara es no
importa cuntas veces se repita el evento, ni sus resultados.

La regla del producto.- la probabilidad de que ocurran a la vez eventos


independientes es el producto de las probabilidades de que esos eventos ocurran
por separado. Por ejemplo, si tiras al aire a la vez un centavo y una moneda de cinco
centavos, la posibilidad de que ambas monedas caigan en cara se obtiene
multiplicando las probabilidades de que cada una de las monedas caiga cara.
Los resultados de Mendel y la probabilidad
Las reglas de la probabilidad se pueden usar para ayudar a predecir los resultados de
cruces genticos simples.
Un mtodo para calcular probabilidades es construir un cuadrado o cuadro de Punnett.
El cuadrado de Punnett es una tabla que presenta las combinaciones posibles de genes
en la progenie, llamado as en honor al genetista ingls Reginald Crundall Punnett,
quien fue su creador.

Pasos para preparar un cuadrado de Punnett


En la parte de arriba de la tabla se escribe sobre las columnas las letras que representan
los gametos que produce un padre.
Las letras que representan los gametos que produce el otro padre se escriben al lado
de las filas, a la izquierda de la tabla.
Los cuadrados del interior de la tabla deben ilustrar qu genotipos pueden resultar al
combinarse los gametos en la fecundacin. En cada cuadrado, se escriben las letras
para los gametos que estn arriba y a la izquierda de ese cuadrado.

Los cuadrados interiores ayudan tambin a ilustrar la razn de fenotipos que se


obtendr al hacer un cruce.

El cuadrado de Punnett tambin puede mostrar las probabilidades de obtener ciertos


fenotipos y genotipos en la generacin F2.

La proporcin de los genotipos resultantes es tres plantas de flores rojas y una de


flores blancas.
El cruce que hizo Mendel del hbrido de la F1 con un homocigoto recesivo fue un
cruce de prueba.
Cruce de prueba.- es un cruce entre un ser vivo que muestra el fenotipo dominante,
pero de genotipo incierto, y un ser vivo que es homocigoto recesivo.

Un cuadrado de Punnett es utilizado para buscar los resultados probables de cruces


genticos. Sin embargo, los resultados que se obtienen pueden ser muy diferentes de
los que se esperaban. Los resultados obtenidos de un cruce gentico coincidirn con
los esperados solo cuando hay un gran nmero de cruces o si se obtiene una progenie
numerosa.
Mendel tambin estudi la herencia de dos caracterstica a la vez. Mediante la
polinizacin, obtuvo plantas puras en dos caractersticas. Ej. Desarroll plantas puras
para la forma redonda de la semilla como para el color amarillo de la semilla (RRYY)
y tambin desarroll plantas homocigticas recesivas para la semilla arrugada y para
el color verde de la semilla (rryy). El resultado de la primera generacin F1 fue el
100% de semillas redondas amarillas y de genotipo RrYy, las cuales eran hbridas
para ambas caractersticas y las llam dihbridas. A autopolinizarse estos dihbridos
se obtuvo una generacin F2.
Un cruce que comprende dos grupos diferentes de caractersticas se llama cruce
dihbrido. La razn de estos fenotipos es aproximadamente 9:3:3:1
Predicciones Genticas
La cantidad de mejoramiento o tasa de cambio gentico en una poblacin depende en
gran medida de la precisin de la prediccin o ms exactamente, en la precisin de
los valores de cra estimados.
La precisin puede ser incrementada hasta un cierto punto al aumentar la
heredabilidad de los caracteres. Manejar los animales de manera uniforme, tomando
minuciosas medidas, ajustando por efectos ambientales conocidos, utilizando grupos
contemporneos todo ayuda. Sin embargo, para aumentar la precisin an ms se
requiere el uso de tanta informacin como sea posible y ponderar cada una
apropiadamente. Se requiere el uso de la tecnologa de prediccin gentica.
Existen dos metodologas estrechamente relacionadas que se utilizan comnmente para
la prediccin gentica: el ndice de seleccin y la mejor prediccin linear insesgada
(BLUP). No se examinarn estas tecnologas en detalle, pues esto requerira
conocimientos de estadstica y lgebra matricial. El nfasis aqu no es como los ndices
de seleccin y la mejor prediccin linear insesgada trabajan, sino ms bien cuando
deberan ser usadas y en qu y para que podemos utilizarla. Se tratar tambin la
presentacin e interpretacin de las predicciones genticas producidas con estas
tecnologas.
CLASE # 8
Fecha: martes 22 de Noviembre del 2016

Genealoga Para Un Carcter


La obtencin de informacin sobre la historia familiar de una enfermedad gentica es
el primer paso y el ms importante para su estudio porque aporta datos esenciales
sobre su historia natural, las variaciones de expresin y el patrn de herencia del
desorden. (Brown, 2008)
El rbol genealgico es el diagrama que se confecciona con los miembros de una
familia indicando el sexo, la relacin con el propsito (caso que origina el estudio) y
si estn afectados o no. Para esto se utilizan smbolos convencionales que permiten
resumir esa informacin y presentarla en forma clara, y es especialmente til cuando
la familia es grande. La confeccin adecuada de un rbol genealgico, incorporando
todos los antecedentes y su posterior actualizacin en el tiempo con nuevos estudios,
resulta crtico para el asesoramiento gentico. El objeto de estudio de la gentica
mdica es el individuo y su familia, por lo que es de inters el registro tanto de los
individuos afectados como los sanos, vivos o muertos. (Brown, 2008)
Las enfermedades monognicas presentan patrones familiares caractersticos que
permiten definirlos en cuatro patrones de herencia clsicos, llamados tambin
mendelianos. Ellos son: autosmico dominante (AD), autosmico recesivo (AR),
ligado al X recesivo (XR) y ligado al X dominante (XD). Conociendo el patrn de
herencia de una enfermedad, u observando su comportamiento en la familia aunque
no se conozca el diagnstico, se pueden estimar los riesgos de afectacin de cada uno
de los miembros y su descendencia.
(Brown, 2008)
Smbolos
Patrn Autosmico Dominante
1- Hay varios individuos afectados en la familia y en varias generaciones. Un
individuo afectado tiene un progenitor afectado. Verticalidad en la lnea de
afectados. Excepciones: mutaciones frescas y penetrancia incompleta.
2- Hay similar proporcin de varones y mujeres afectados y se puede ver la
transmisin directa varn-varn.
3- El riesgo de transmitir el rasgo o enfermedad a la descendencia es del 50% para
ambos sexos (1 en 2).
4- El fenotipo se manifiesta en el heterocigota. La homocigosis en este patrn es
menos frecuente y en ese caso la afectacin puede ser ms grave. Los miembros
fenotpicamente normales no transmiten el rasgo o enfermedad a sus hijos.
Excepciones: falta de penetrancia y expresividad excepcionalmente leve.
5- Puede existir expresividad variable en una misma familia.

Conceptos de penetrancia y expresividad


La penetrancia se expresa como el porcentaje de individuos con un genotipo dado
exhiben el fenotipo asociado correspondiente. Esta penetrancia puede ser incompleta
cuando hay individuos que portando un genotipo patolgico no expresan el fenotipo pero
sin embargo son capaces de transmitir a su descendencia. En una genealoga aparecen
como saltos generacionales. (Brown, 2008)
La expresividad variable se refiere al grado o intensidad con que se expresa una
enfermedad. El grado de afectacin puede ser muy variable en una misma familia y un
grado leve en un individuo no hace predecir que en su descendencia se presente de la
misma manera. (Brown, 2008)

Patrn Autosmico Recesivo


1- Los individuos afectados aparecen en la hermandad del propsito y, por lo
general, no hay otros antecedentes familiares. Hay horizontalidad en la lnea de
afectados.
2- Ambos sexos pueden estar igualmente afectados.
3- El riesgo de recurrencia para cada embarazo es del 25% (1 en 4).
4- La consanguinidad predispone a su aparicin, especialmente cuando la
enfermedad es rara en la poblacin.
5- El fenotipo se manifiesta en el homocigota.

Chi Cuadrado
El chi cuadrado es una medida no paramtrica de dispersin aplicada a poblaciones
binomiales. Una poblacin binomial es aquella en la que medimos un carcter
cualitativo que se distribuye de acuerdo con la expresin del binomio. El chi cuadrado
es una herramienta estadstica que permite estimar la probabilidad de determinar
discrepancias entre proporciones fenotpicas observadas y aquellas esperadas para un
patrn determinado de herencia, y si estas discrepancias son significativas o si son tan
pequeas que se pueden adjudicar al azar.
Ejemplo: de un cruce entre dos cepas puras de moscas de Drosophila melanogaster,
se obtuvo en la F2 un total de 524 individuos distribuidos en las siguientes clases
fenotpicas: 290 moscas de ojos rojos y cuerpo negro, 90 moscas de ojos rojos y
cuerpo amarillo, 100 moscas de ojos blancos y cuerpo negro y 44 moscas de ojos
blancos y cuerpo amarillo. ( a ) Proponer una hiptesis que explique estos resultados.
( b ) basndose en ella, esquematizar el cruzamiento y comparar los resultados
observados con los esperados.

a. Ho : O = E ; hay concordancia.

Seleccin del nivel de probabilidad contra el cual se va a probar la hiptesis nula ( 5 % ).


Ha = O E; no hay concordancia.

Se rechaza Ho si:

X2 X2 ( gl )

calculada valor de la tabla

Se acepta Ho si:

X2 < X2 ( gl )

Calculada valor de la tabla.

b. Clculo de proporciones esperadas de la F2.

Para calcular las proporciones fenotpicas esperadas en la F2; nos basamos en los valores
y fenotipos obtenidos experimentalmente; por ello, se concluye que las caractersticas
dominantes son ojo rojo (AA) y cuerpo negro (BB) y los caracteres ojo blanco (aa) y
cuerpo amarillo (bb) son recesivos; por lo tanto el cruce es el siguiente:

AABB aabb

F1: Todos los individuos sern (AaBb); es decir de ojos rojos y cuerpo negro: al cruzarlos
entre s: tenemos:

AaBb AaBb

Que: 9/16 van a ser individuos A_B_ es decir de ojos rojos y cuerpo negro

3/16 van a ser individuos A_bb es decir de ojos rojos y cuerpo amarillo

3/16 van a ser individuos aaB_ es decir de ojos blancos y cuerpo negro

1/16 van a ser individuos aabb es decir de ojos blancos y cuerpo amarillo

De esta manera determinamos el nmero de individuos que se esperara para cada clase
fenotpica as:
9

---- x 524 = 295 moscas de ojos rojos y cuerpo negro

16

---- x 524 = 98 moscas de ojos rojos y cuerpo amarillo

16

---- x 524 = 98 moscas de ojos blancos y cuerpo negro

16

---- x 524 = 33 moscas de ojos blancos y cuerpo amarillo

16

Al organizar los datos en una tabla de chi cuadrado tenemos:

Fenotipos Valores Valores (O-E) (O-E)2 (O-E)2/E


observados esperados
(O) (E)

Ojos rojos 290 295 -5 25 0.08


cuerpo negro
Ojos rojos 90 98 -8 64 0.65
cuerpo amarillo
Ojos blancos 100 98 2 4 0.04
cuerpo negro
Ojos blancos 44 33 11 121 3.66
cuerpo blanco
Totales 524 524 / / 4.43

El valor de chi cuadrado corresponde a 4.43

Los grados de libertad para este caso corresponde a 3; ubicando el valor de chi cuadrado
obtenido en nuestro ejercicio para tres grados de libertad en una tabla de distribucin de
chi cuadrado; tenemos que este valor se encuentra entre el 20 y 30 por ciento de
probabilidad de ocurrencia; en otras palabras podemos decir que se acepta la hiptesis
nula.

27.1. Precauciones en el uso de chi cuadrado en gentica.


No debe usarse con porcentajes que se deriven de frecuencias para calcular las
proporciones esperadas ni las observadas.
Es importante para el estudio de frecuencias numricas en herencia cualitativa.
No debe usarse con muestras donde el total de individuos observados ( N ) sea menor
que el total de los individuos necesarios para obtener las proporciones fenotpicas
correctas.

Pedigr
Un pedigr (derivado del ingls pedigree, y ste a su vez del francs pied de grue)1 es un
documento que analiza las relaciones genealgicas de un ser vivo en el contexto de
determinar como una determinada caracterstica o fenotipo se hereda y manifiesta.
En un sentido ms coloquial, el trmino pedigr se refiere al documento emitido por
algunos organismos de acreditacin que certifican la pertenencia de un animal domstico
a una determinada raza.
El estudio del pedigr es un concepto utilizado desde tiempos remotos como mtodo de
seleccin y garanta de pureza de raza en la crianza de ciertas especies domsticas. Sin
embargo, desde comienzos del siglo XX el trmino tambin se aplica a cualquier
organismo cuya genealoga pueda ser estudiada. Un estudio genealgico o pedigr
constituye una herramienta de enorme valor en las ciencias biolgicas ya sean puras o
aplicadas. Entre estas ltimas destacan la medicina y la ingeniera gentica.
La palabra procede de la expresin pied de grue, pata de grulla, con la que los
franceses se referan a las marcas rectas con forma de pata de grulla que los primeros
criadores ingleses de caballos utilizaban a modo de rbol genealgico para
seleccionarlos.2 La pronunciacin inglesa de pied de grue acab convirtindola en
pedigree, castellanizndose luego a pedigr.
Un diagrama de pedigr es un grfico escrito en forma similar a un rbol genealgico, en
el cual se detalla por medio de una simbologa consensuada, la aparicin de un
determinado fenotipo a lo largo de la historia natural de una familia. Con frecuencia los
diagramas de pedigr comprenden tres o cuatro generaciones, pero un buen diagrama de
pedigr debera contener todas las que resultara posible rastrear.
Un diagrama de pedigr hace uso de cuatro smbolos bsicos dos cuadrados (uno vaco y
uno lleno) y dos crculos (uno vaco y uno lleno). Los crculos representan hembras, los
cuadrados machos, los smbolos llenos representan la aparicin fenotpica de la
caracterstica que se est rastreando, mientras que los smbolos vacos representan a
individuos que no la presentan.

Las sucesivas generaciones se representan en lneas horizontales diferentes, y


numerndolas con nmeros romanos a partir de la ms antigua generacin de la que se
tienen datos. Una doble lnea horizontal indica consanguinidad.
Las uniones con descendencia se representan por una lnea horizontal que vincula a los
individuos parentales, y los descendientes se derivan de esta unin por medio de lneas
en forma de rbol. En nmeros romanos se consigna el orden generacional; en nmeros
rabes, se detalla el orden de descendencia.
La funcin de un diagrama de pedigr es simplificar lo ms posible la ocurrencia de una
determinada caracterstica, para tratar de determinar cul es el mecanismo de herencia
que la caracteriza, con el fin de predecir su posible aparicin en futuros descendientes.
Por ello, facilita identificar sndromes genticos y establecer diagnsticos
presintomticos, as como el clculo del riesgo (recurrencia u ocurrencia) y los patrones
de herencia de una enfermedad. As, un diagrama de pedigr es tanto ms efectivo cuanto
menos informacin superflua presenta.
La ventaja principal del diagrama de pedigr es su interpretacin fcil y su formato
compacto. No obstante, el mayor inconveniente es la confusin a que puede dar lugar por
utilizar smbolos, que deben ser universalmente admitidos.
Este trmino es comnmente utilizado en gentica y en medicina como sinnimo de
diagrama de pedigr y en la crianza de algunos animales domsticos como sinnimo de
ascendencia certificada y pureza racial. Sin embargo, en el caso particular de los caballos
se utiliza generalmente el trmino pura sangre con esta ltima acepcin.-
Anlisis Del Pedigree
La definicin de inbreeding varia entre criadores y genetistas. Un genetista ve el
inbreeding como un coeficiente numero que sube cuando hay un ancestro comn en el
lado del padre y de la madre del pedigree, un criador considera el inbreeding como algo
cercano, como cruces entre padre e hija o hermanos. Un ancestro comn, aun en la octava
generacin, incrementara la cantidad medible de inbreeding en el pedigree. El Coeficiente
de Inbreeding ( coeficiente de Wright) es un estimado del porcentaje de todos los pares
de genes variables que son homoziguos debido a la heredabilidad de ancestros comunes.
Es tambin la probabilidad promedio de que algn par de genes sea homoziguo por la
heredabilidad del ancestro comn.
Para que este porcentaje de inbreeding sea acertado, debe estar basado en varias
generaciones. Casos de inbreeding en quinta o posteriores generaciones a menudo tienen
un profundo efecto en la gentica de la cra representada por ese pedigree.

En estudios conducidos en razas de CABALLOS, la diferencia en coeficientes de


inbreeding basados en cuatro generaciones versus ocho generaciones varia
inmensamente.
Un pedigree de cuatro generaciones conteniendo 28 nicos ancestros para 30 posiciones
podra generar un bajo coeficiente de inbreeding, mientras el mismo pedigree llevado a 8
generaciones,conteniendo 212 nicos ancestros para 510 posibles posiciones, tuvieron un
coeficiente considerablemente alto. Lo que podra parecer una cruza abierta con mezcla
de genes en un par de generaciones, aparecera como una concentracin en lnea de genes
de un ancestro de influencia si extendemos las generaciones del pedigree.
CLASE # 9
Fecha: martes 06 de Diciembre del 2016
UNIDAD IV EL ADN, NATURALEZA Y FUNCIN DEL
MATERIAL GENTICO

El Material Gentico

Qu es el material gentico?
El material genetico es toda la totalidad de ADN que presenta un ser vivo.
Cmo est formado?
Nuestro material gentico est formado por molculas de ADN. Estas molculas estn
hechas de dos largas cadenas complementarias unidas y retorcidas entre s. (Andrade,
2009)
Las cadenas estn formadas por bloques o subunidades. Estos componentes del ADN
(polmero) son los nucletidos (monmeros); cada nucletido est formado por un
grupo fosfato, una desoxirribosa y una base nitrogenada, y son precisamente las bases
nitrogenadas las que portan la informacin (Andrade, 2009)
Para qu se emplea?
El material gentico se emplea para guardar la informacin gentica de una forma de
vida orgnica. Para todos los organismos conocidos actualmente, el material gentico
es casi exclusivamente cido desoxirribonucleico (ADN o DNA). Algunos virus usan
cido ribonucleico (ARN o RNA) como su material gentico. (Andrade, 2009)
Qu es el adn?
Constituye el material gentico de los organismos. Es el componente qumico
primario de los cromosomas y el material del que los genes estn formados. En las
bacterias el ADN se encuentra en el citoplasma mientras que en organismos ms
complejos y evolucionados, tales como plantas, animales y otros organismos
multicelulares, la mayora del ADN reside en el ncleo celular. (Andrade, 2009)

Replicacin de ADN
Es la capacidad que tiene el ADN de hacer copias o rplicas de su molcula. Este
proceso es fundamental para la transferencia de la informacin gentica de generacin
en generacin. Las molculas se replican de un modo semiconservativo. La doble
hlice se separa y cada una de las cadenas sirve de molde para la sntesis de una nueva
cadena complementaria. El resultado final son dos molculas idnticas a la original.
(Andrade, 2009)
Replicacin semiconservativa
El proceso de replicacin segn el modelo semiconservativo se realiza de la siguiente
manera:

La helicasa separa la doble hlice, comenzando la replicacin de ambas cadenas.


Estas sirven como modelo para producir una nueva doble hlice.

Luego de separarse el grupo de fosfatos (trifosfastos), proporcionan energa a los


nucletidos para que puedan enlazarse en la nueva cadena que se construye.

Cuando las nuevas cadenas de ADN se unen en segmentos cortos, entra en accin
la protena ligasa, para juntarlos y formar las molculas hijas.

El resultado son dos nuevas molculas, cada una con una cadena original de la
madre y otra complementaria nueva. La informacin gentica de la cadena nueva es
idntica a la de la cadena madre.
Complementos en la rplica del ADN
Varias protenas especializadas denominadas enzimas actan como catalizadores
biolgicos, acelerando las reacciones de la replicacin del ADN: la helicasa, que se
encarga de abrir la doble hlice del ADN, la polimerasa sintetiza las nuevas hebras de
ADN en un solo sentido y la ligasa sella y une los fragmentos de ADN que se
sintetizaron. (Andrade, 2009)
CLASE # 10
Fecha: martes 13 de Diciembre del 2016
Genes y genoma
Son diversas las especies presentes en el mundo y cada una tiene un conjunto nico de
caractersticas hereditarias que las hacen diferentes de las otras. Estas caractersticas estn
codificadas en las molculas de ADN, presentes en las clulas. (Mazzotta, 2003)
Los genes y el genoma estn asociados con el ADN y se definen mediante las mismas
molculas. El ADN es la unidad bsica de la herencia que se encuentra principalmente en
los cromosomas presentes en el ncleo de las clulas de casi todos los organismos que
conocemos. Pero es importante que sepas que gen y genoma no es lo mismo, razn por
la cual a continuacin te explicamos en qu consiste la diferencia. (Mazzotta, 2003)
Gen
Un gen es una unidad molecular de la herencia en un organismo vivo. Los seres vivos
dependen de los genes y de las cadenas funcionales de ARN y protenas. (Mazzotta, 2003)
Los genes contienen la informacin para construir y mantener las clulas de un organismo
y pasar los rasgos genticos a la descendencia. Esto significa que son elementos que
determinan las caractersticas heredadas que se transmiten de los padres a su
descendencia en la reproduccin. (Mazzotta, 2003)

Se asocian con las molculas de ADN, que es el principal material gentico encontrado
en todos los organismos vivos. Los genes estn constituidos por segmentos o porciones
especficas del ADN. Estos segmentos especficos son capaces de controlar las
caractersticas especficas de la herencia. Esto se hace generalmente por la transcripcin
del ADN y procesos de traduccin del mismo. (Mazzotta, 2003)
Durante la reproduccin, la descendencia obtiene genes de ambos padres. Estas diferentes
formas de genes se denominan alelos. Un solo alelo o mltiples alelos son responsables
de controlar ciertas caractersticas y funciones de un organismo. (Mazzotta, 2003)
Genoma
En biologa molecular y gentica, el genoma es la totalidad de la informacin hereditaria
de un organismo. Est codificado en las molculas de ADN. El contenido total de ADN
en una clula nica se conoce como el genoma del organismo, pero algunos organismos
tienen slo ARN por lo que su genoma es la cantidad total de contenido de ARN.

De lo antes dicho se deduce que el genoma incluye tanto el ADN como el ARN. Por esta
razn, el genoma forma parte incluso de elementos genticos no cromosmicas como
virus, plsmidosEl contenido total de ADN en el ncleo de una clula se denomina
genoma nuclear y el contenido total de ADN en la mitocondria se llama genoma
mitocondrial.
El estudio del genoma y las caractersticas relacionadas con los organismos se llama
Genmica. La evolucin de los genomas puede ser estudiada e identificada por su
composicin, que incluye tamao, proporcin, ADN repetitivo y no repetitivo.

Si consideramos el genoma humano, ste contiene 23 cromosomas y de stos slo un


cromosoma determina el sexo, mientras que los restantes 22 son cromosomas
autosmicos. Hay aproximadamente entre 20.000 a 25.000 genes en el genoma humano.
Desde 1990 se llev a cabo el Proyecto Genoma Humano que buscaba identificar y
determinar las bases qumicas del ADN. (Mazzotta, 2003)
ADN no codificante
Las secuencias no codificantes de ADN no codifican para aminocidos. La mayor parte
del ADN no codificante se encuentra entre los genes en el cromosoma y no tiene funcin
conocida. Otras secuencias de ADN no codificantes, llamadas intrones, se encuentran
dentro de los genes. Parte del ADN no codificante desempea un papel en la regulacin
de la expresin gnica. (Mazzotta, 2003)
Transcripcin del ADN
Transcripcin del cido desoxirribonuclico.
Proceso mediante el cual los genes que se
encuentran en el ADN de los cromosomas
son selectivamente localizados, reconocidos
y transcritos, produciendo ARN mensajero,
ribosomal (estructural) y de transferencia
(adaptadores). Puede ser descrito como
mecanismo bsico de complementariedad de
bases, aadidas en forma gradual,
unidireccional y antiparalela, sin necesidad
de un iniciador y acoplada a la hidrlisis del
pirofosfato. (Ecuared, 2007)
CLASE # 11
Fecha: martes 20 de Diciembre del 2016

UNIDAD V MODIFICACIN ENZIMTICA DEL AND,


EXTRACCIN, CUANTIFICACIN Y AMPLIFICACIN

Enzimas que modifican el ADN


Nucleasas
El ADN es el depositario y transmisor de la informacin gentica organizada en genes
que codifican productos gnicos (protenas o ARNs). Las nucleasas son enzimas que
producen la rotura de los enlaces fosfodiester de la cadena polinucleotdica de los
cidos nucleicos. La vida media para el enlace fosfodiester en el ADN a pH 7 y 24 C
se ha estimado en 130.000 aos. En las mismas condiciones, la vida media del ARN
es de solamente 4 aos. (solari, 2004)
Las nucleasas son enzimas hidrolasa del tipo esterasa que degradan cidos nucleicos
[2]. Las fosfodiesterasas o nucleasas son enzimas hidrolasas que catalizan la ruptura
de los enlaces fosfodister, como por ejemplo los que se establecen en los cidos
nucleicos entre la pentosa de un nucletido y el grupo fosfato de otro. Su accin regula
la concentracin dentro de las clulas del AMP cclico y del GMP cclico. Estn
descriptas 5 isoenzimas. En la actualidad hay frmacos usados como inhibidores de
las fosfodiesterasas (cafena, aminofilina, sildenafilo, etc.). Se clasifican segn el tipo
de cido nucleico y el tipo de enlace que hidrolizan. (solari, 2004)
Las enzimas de restriccin son endonucleasas que reconocen, con una alta
especificidad, una secuencia, normalmente palindrmica corta (4-8 pb) de ADN de
doble hebra, produciendo la rotura hidroltica de cada hebra en secuencias concretas
del ADN denominados sitios de restriccin. En las enzimas de restriccin no naturales
se trata de aumentar la secuencia de reconocimiento hasta 15 pares de bases. (solari,
2004)
Tipos
Ribonucleasas: especficas del ARN, por lo que tambin se llaman ARNasas o
RNasas.
Desoxirribonucleasas: especficas del ADN, por lo que tambin se llaman ADNasas
o DNasa.
Exonucleasas: escinden el ltimo nucletido del extremo 5' o 3' de un
polinucletido. Pueden degradar por completo un cido nucleico lineal.
Endonucleasas: cortan los enlaces fosfodister situados en el interior de los
polinucletidos. Estos enzimas no requieren un extremo libre, por lo que pueden
cortar cidos nucleicos circulares. Algunas endonucleasas, como la ADNasa I y la
ADNasa II, son poco especficas por lo que se refiere a la secuencia de nucletidos
que hidrolizan.
Endonucleasas de restriccin: son endonucleasas que reconocen y cortan secuencias
de nucletidos muy especficas; este tipo de enzima se utiliza mucho en las tcnicas
de ADN recombinante.
Meganucleasas: son altamente especficas. Modifican las protenas y son capaces de
arreglar la mutacin que este perjudicndola y provocando una determinada
enfermedad. No debemos confundirlas con los llamados "dedos de zinc" nucleasas
que cortan al material gentico.

Ligasas
Las ligasas son una enzima capas de catalizar la unin de hebras del ADN rotas o
cortadas, en donde se da lugar a un nuevo enlace qumico, la ligasas son sumamente
importante a la hora de la duplicacin del ADN, ya que unen las hebras del ADN.
Topoisomerasas y helicasas

Las topoisomerasas son enzimas que a la vez actividad nucleasa y ligasa.


Algunas de estas protenas funcionan cortando las hlices del ADN permitiendo que
la misma rote para reducir el grado de superenrrollamiento. Despus de eso las
enzimas hacen que se unan de nuevo los fragmentos del ADN.
Las helicasas son protenas que pertenecen al grupo de los motores moleculares.
Es una enzima vital de los seres vivos ya que participa en los procesos de replicacin,
transcripcin, recombinacin y la reparacin de ADN, y tambin de la biogenesis.

Polimerasas

Las polimerasas son enzimas que sintetizan cadenas de nucletidos a partir


nuclesidos trifosfato y es capas de transcribir y duplicar cidos nucleicos.
CLASE # 12
Fecha: martes 03 de Enero del 2017

Mtodos de extraccin de ADN vegetal


La extraccin de ADN se realiza para obtener las molculas
aisladas con alto grado de pureza y poderlas utilizar en
investigacin cientfica, en medicina o para la ciencia forense.
La mayor parte de los mtodos que existen para extraer el
ADN consisten en lograr primero la lisis o ruptura de la clula,
para luego separar las molculas de ADN del resto de los
constituyentes de la clula. (Komsk, 2014)

A la hora de escoger que mtodo de extraccin de ADN utilizar se tienen en cuenta varios
factores:

La cantidad de muestra de la que se dispone para extraer el ADN.


El tipo de muestra o fuente de la que se quiere obtener el ADN.
La pureza con la que se quiere obtener el ADN extrado.
El tiempo que consume cada mtodo, su costo y el rendimiento esperado.
Uso que se le va a dar al ADN extrado.
Con la diversidad de mtodos conocidos actualmente se puede extraer ADN de muchos
sustratos como son la sangre, la saliva, la orina y otros fluidos corporales, tejidos vivos,
cultivos celulares, lquido amnitico, entre otros. En este trabajo se analizan las
diferencias, ventajas y desventajas de algunos de los mtodos existentes para la extraccin
del ADN.

Incubacin del lisado para su uso


Una posible forma de aislar el ADN genmico es incubar el lisado crudo a temperaturas
entre 90 100 C y luego usarlo directamente. Es evidente que mediante este mtodo el
ADN obtenido es de muy baja pureza y con aplicaciones muy reducidas. Otra desventaja
de este mtodo son las prdidas de ADN por accin de las nucleasas y otros componentes
de los orgnulos que estn en contacto con el ADN y pueden destruirlo, por lo que no es
til para almacenar el ADN pues los contaminantes pueden degradar las molculas de
ADN.

Lisis por ruptura mecnica y extraccin con disolventes orgnicos


Si se opta por realizar el lisado de las clulas mediante un proceso mecnico hay que tener
en cuenta la posibilidad de ruptura de las molculas de ADN que se intentan separar, por
lo que este debe bastar para lograr la lisis de las clulas pero no ser muy agresivo para
proteger el ADN. Este mtodo puede ser usado para extraer ADN de material crudo,
liofilizado o congelado, que puede romperse con un mortero, por congelacin-
descongelacin o usando ultrasonidos. El lisado de clulas se puede extraer con
cloroformo, alcohol isoamlico o fenol, siendo las protenas y otros componentes de la
clula solubles en el disolvente orgnico, por lo que de esta forma se logra la separacin
de los cidos nucleicos. Este mtodo se puede usar para molculas de ADN de alto peso
molecular, obteniendo buenos rendimientos de molculas relativamente puras, siempre
teniendo en cuenta que hay que controlar el pH de la fase acuosa y la concentracin de
sales, que son los factores que aseguran una buena separacin. Las desventajas de este
mtodo son el uso de disolventes orgnicos dainos para la salud humana y que pueden
quedar como trazas en la muestra de ADN y luego actuar como interferentes en tcnicas
como el PCR, que es largo, en ocasiones puede dar rendimientos poco reproducibles y
requiere de varios trasvases que aumentan la posibilidad de contaminacin de la muestra.

Lisado y purificacin con un detergente inico. Mtodo del CTAB


Este es un procedimiento bsico para extraer ADN de vegetales, donde un detergente
aninico puede romper la pared celular y as se produce la lisis de las clulas. El uso de
detergentes aninicos no solo se restringe a la extraccin de ADN vegetal, puede ser
usado para ADN genmico de bacterias y otros tipos de organismos. Un ejemplo de este
mtodo, quizs el ms conocido, es el uso de CTAB (bromuro de cetil trimetil amonio)
como detergente para lograr la lisis. El CTAB adems, en presencia de EDTA como
agente quelatante y TRIS-HCl como tampn, forma complejos insolubles con el ADN.
Luego se extraen los residuos orgnicos con cloroformo, para separar posteriormente el
ADN por precipitacin con etanol. Si se quiere evitar el uso de disolventes orgnicos se
puede llevar a cabo el mtodo del CTAB separando directamente los complejos insolubles
formados con el ADN del sobrenadante donde han quedado disueltos el resto de
componentes celulares. Estos complejos se resuspenden en disolucin salina y se adiciona
posteriormente alcohol y RNAsa, logrando que precipite el ADN con un grado de pureza
aceptable para muchas aplicaciones.

Mtodo de salting-out
A partir de un lisado celular se pueden separar las molculas de protenas y otros
contaminantes del ADN mediante la adicin de altas concentraciones de sal que hacen
que disminuya la solubilidad de las molculas orgnicas en la fase acuosa. En este mtodo
se utiliza frecuentemente la proteinasa K, el TRIS-HCl para regular el pH y
otros reactivos qumicos que aseguren la total inactivacin de las enzimas que pueden
actuar sobre las molculas de ADN. Para la extraccin se utilizan sales inorgnicas como
el perclorato de sodio y el cloruro de sodio en concentraciones muy altas que hacen
precipitar a las molculas orgnicas. El precipitado formado se separa por centrifugacn
y luego se puede extraer el ADN de la disolucin acuosa mediante la adicin de alcohol,
por precipitacin.
Este mtodo es sencillo, pero no siempre es eficaz, por lo que el ADN obtenido en muchas
ocasiones debe ser purificado antes de ser usado en posteriores aplicaciones. La ventaja
es que se elimina el uso de disolventes orgnicos.

Uso de la proteinasa K y el dodecilsulfato de sodio


El procedimiento conocido como PK-SDS por sus siglas en ingls proteinase K - sodium
dodecyl sulfate, es uno de los ms usados para la extraccin de ADN ya que la digestin
de la muestra se puede realizar con proteinasa K que es activada por el dodecil sulfato de
sodio. La proteinasa K inactiva las DNAsas presentes en el lisado celular usando
detergente aninico el SDS. La proteinasa K tambin es usada en otros de los mtodos
descritos en este artculo para la digestin de las protenas y otros contaminantes del
lisado celular.

Mtodo de extraccin de ADN con yoduro de sodio como agente caotrpico en un

nico tubo
La compaa Wako pone a disposicin de los investigadores y empresas varios kit de
ADN que usan yoduro de sodio como agente caotrpico, que tienen la ventaja de que la
extraccin se realiza en un nico micro tubo de centrifugado. El yoduro de sodio adems
de provocar la lisis celular rompe la capa de hidratacin que rodea el ADN y logra que
las cargas negativas de los grupos fosfatos del ADN queden ms expuestas. En estos kits
despus del tratamiento de la muestra con yoduro de sodio en el mismo tubo se adicionan
detergentes aninicos como es el caso del N-lauril sarcosinato de sodio, proteinasa K y/o
otros reactivos que permiten separar las protenas y lpidos contenidos en las muestras
biolgicas del ADN.

Entre los kits comercializados por Wako se encuentran:


Kit de extraccin de ADN (DNA Extractor Kit) para extraer ADN tanto de suero
sanguneo como de productos biofarmaceticos.
Kit de extraccin de ADN WB ( DNA Extractor WB Kit) para la extraccin de
ADN genmico de muestras de sangre entera
Kit de extraccin de ADN TIS (DNA Extractor TIS Kit) este kit puede ser usado
para la extraccin de ADN de tejido parenquimatoso humano y animal.
Kit de extraccin de ADN SP (DNA Extractor SP Kit) usando este kit se puede
extraer el ADN libre del suero y plasma sanguneo
Kit aislador de ADN PS (DNA Isolator PS Kit) permite aislar el ADN en muestras de
secciones de tejidos embebidas o incrustadas en parafina.
Kit de extraccin de ADN FM (DNA Extractor FM Kit) su principal uso es la
obtencin de ADN en muestras de medicina forense.

Extraccin con gradientes de cloruro de cesio bromuro de etidio


El ADN genmico puede ser purificado por centrifugacin selectiva a travs de la
generacin de gradientes de cloruro de cesio. Primeramente se lleva a cabo el lisado
celular por mtodos mecnicos o qumicos y la mezcla es centrifugada durante varias
horas en presencia de bromuro de etidio. Como hay bromuro de etidio en el medio, se
pueden visualizar las diferentes capas en las que se agrupan los cidos nucleicos segn su
densidad con luz ultravioleta. Se obtienen varias capas que pueden separarse y recuperar
el ADN purificado.

Este mtodo a pesar de dar como resultado un ADN de alta calidad tiene una serie de
desventajas: es largo, imposible de automatizar, caro, requiere una ultracentrfuga y usa
compuestos qumicos txicos.

Intercambio aninico para la extraccin de ADN del lisado celular


La cromatografa en fase slida de intercambio aninico se basa en la interaccin que se
establece entre los grupos fosfatos cargados negativamente del ADN y la matriz
molecular con que se compacta la columna. Esta interaccin hace que las molculas de
ADN queden retenidas en la fase estacionaria de la columna y puedan separarse de las
protenas y dems metabolitos presentes. Luego aadiendo una alta concentracin de
sales a la fase mvil se logra eludir el ADN, que si es necesario es precipitado con alcohol
para futuras aplicaciones, si no puede utilizarse directamente disuelto en el buffer con
sales en el que se elude. Este mtodo tiene la ventaja de evitar el uso de disolventes
orgnicos txicos y es ms simple que los que requieren precipitacin de otros
componentes para su separacin del ADN.

Uso de matrices celulsicas para la extraccin del ADN de muestras biolgicas


Un mtodo usado en investigaciones forenses consiste en impregnar una matriz de
celulosa con productos qumicos que permitan la lisis celular y posterior conservacin del
ADN. Para esto se unen tampones, agentes quelatantes, sales, detergentes y molculas
con gran absorbancia en el UV para proteger las muestras de los radicales libres que
pueden formarse por exposicin a la luz solar. Siguiendo este procedimiento las muestras
pueden ser conservadas por un largo perodo de tiempo, lo cual es muy til para la
resolucin de casos forenses y tambin tiene utilidad para la determinacin de especies
en un fluido corporal como puede ser un virus o una bacteria.

Uso de resinas de intercambio inico


Para la extraccin del ADN tambin se han diseado resinas que son capaces de formar
complejos con el ADN. El uso de resinas hidrocarbonadas con estructuras rgidas en tres
dimensiones permite que la superficie se encuentre cargada con alguna sustancia como el
dietilaminoetilo que puede protonarse en medio cido y quedar cargado positivamente
por lo que interacciona con los grupos fosfatos del ADN. Esto es un mtodo directo, que
puede realizarse en un solo tubo y relativamente rpido, pero tiene como inconveniente
que se aslan cadenas sencillas de ADN, y este no puede ser utilizado por ejemplo para el
anlisis de la variacin de polimorfismos en fragmentos de restriccin (RFLP)
CLASE # 13
Fecha: martes 10 de Enero del 2017

Reaccin En Cadena De La Polimerasa


La Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR) es una tcnica "in vitro" que imita la
habilidad natural de la clula de duplicar el ADN.
Se trata de una tcnica usada para crear un gran nmero de copias de un segmento de
ADN, que utiliza ciclos de desnaturalizacin, apareamiento con cebadores y extensin
por una ADN polimerasa termoresistente. (Gonzlez, 2012)
Hasta la dcada de 1980, el nico mtodo para obtener grandes cantidades de un
fragmento de ADN era clonndolo en vectores adecuados e introducindolo y
multiplicndolo en bacterias. En el ao 1985, un investigador norteamericano, Kary
Mullis (acreedor del Premio Nobel en Qumica 1993 por este aporte), desarroll un
mtodo que permite, a partir de una muestra muy pequea de ADN, obtener millones de
copias de ADN in vitro, en unas pocas horas y sin necesidad de usar clulas vivas. Esta
tcnica, llamada reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), requiere conocer la
secuencia de nucletidos de los extremos del fragmento que se quiere amplificar. Estas
secuencias se usan para disear dos oligonucletidos sintticos de ADN complementarios
a una porcin de cada una de las dos cadena de la doble hlice. (Gonzlez, 2012)
1. La mezcla de reaccin
contiene la secuencia de DNA
que se quiere amplificar, dos
oligonucletidos sintticos (P1
y P2) que servirn como
cebadores, una DNA
polimerasa termoestable (Taq)
y los cuatro
desoxirribonucletidos
trifosfato dATP, dGTP, dCTP
y dTTP.

2. Proceso:

La mezcla de reaccin se somete a ciclos sucesivos, cada uno correspondiente a una fase
de desnaturalizacin, una de hibridacin o alineacin y una de elongacin.
a) Durante la desnaturalizacin, que se
realiza por calentamiento de la mezcla a
95C, se separan las dos cadenas del
ADN molde.
b) Durante la hibridacin, la
temperatura de incubacin se reduce
para permitir el apareamiento de las
bases de ambos cebadores en el sitio
donde encuentran una secuencia
complementaria.
c) Durante la fase de elongacin, la mezcla se calienta a 72C y la enzima Taq ADN
polimerasa se usa para replicar las hebras de DNA. La Taq polimerasa comienza el
proceso de extensin de la cadena complementaria a partir del extremo 3 de los
cebadores. Al finalizar cada ciclo, la cantidad de ADN molde disponible para el ciclo
siguiente aumenta al doble. (Gonzlez, 2012)
Entre muchas de las aplicaciones que la PCR pone a disposicin se encuentran la
deteccin precoz o prenatal de enfermedades genticas, la deteccin de infecciones
virales latentes o la produccin de grandes cantidades de fragmentos de ADN humano a
una velocidad muy superior a la posible mediante otros mtodos. Esta tcnica tambin se
aplica para estudios de identidad y filiacin.
PCR a partir de ARN.
El genoma de muchos virus de importancia clnica est compuesto de ARN en lugar de
ADN, los ms sobresalientes son el Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH), el
Virus de la Hepatitis C (HCV) y la familia de Enterovirus (EV). (Gonzlez, 2012)
Transcripcin Reversa- PCR (RT-PCR).
Dado que el ARN usualmente es de una sola hebra y es sensible al calor, es necesario
hacer una transcripcin reversa (RT) antes de iniciar la amplificacin por PCR. La
transcripcin reversa genera una copia de la hebra de RNA, pero esta copia es ADN
complementario (cADN) el cual es estable al calor y puede resistir la metodologa PCR.
Los pasos de la RT-PCR son:
Transcripcin reversa: Unin del partidor a la secuencia de ARN objetivo.
Transcripcin reversa: La polimerasa rTth cataliza la extensin del partidor mediante la
incorporacin de nucletidos complementarios.
Fin de transcripcin reversa, se obtiene la hebra del cADN complementario al ARN.
PCR
CLASE # 14
Fecha: martes 17 de Enero del 2017
Cuantificacin de ADN y Electroforesis

La espectrofotometra UV/Visible nos permite confirmar que contamos con cantidad


suficiente de cidos nuclecos (DNA/RNA) de calidad adecuada antes de llevar a cabo
ensayos de PCR cuantitativa en tiempo real (QRTPCR), anlisis de SNPS (Polimorfismos
de nucletido nico) o la secuenciacin automtica de muestras de DNA de plsmidos,
csmidos, productos de PCR La principal ventaja de trabajar con el espectrofotmetro
NanoDrop ND1000 es que la medida se lleva a cabo a partir de 1 1,5 l de muestra sin
ayuda de ningn tipo de cubeta ya que la muestra se pipetea directamente sobre la
superficie de medida. El rango de medida para muestras de DNA es de 2-3700 ng/l y
para RNA de 2-3000 ng/l. El Servicio tambin cuanta con un fluormetro (Qubit) que
permite, mediante la utilizacin de sondas fluorescentes, cuantificar de forma altamente
especfica muestras de DNA, RNA o protenas. El Servicio dispone de diferentes kits en
funcin del tipo de muestra y su concentracin (Becerril, 2003)

Electroforesis

La electroforesis es una tcnica para la separacin de molculas segn la movilidad de


estas en un campo elctrico a travs de una matriz porosa, la cual finalmente las separa
por tamaos moleculares y carga elctrica, dependiendo de la tcnica que se use.
(Becerril, 2003)

La tcnica clsica utiliza una tira recubierta de una sustancia porosa impregnada de un
electrolito. Sus extremos se sumergen en dos depsitos independientes que contienen
ambos al electrolito y estn unidos a los electrodos del generador de corriente. La muestra
se deposita en forma de un pequeo trazo transversal en la tira. La distancia de migracin
se mide en relacin un marcador interno. Las placas son reveladas con sales de plata, azul
de Coomassie, o reactivos en particular. (Becerril, 2003)
CLASE # 15
Fecha: martes 24 de Enero del 2017

UNIDAD VI MUTACIONES: CROMOSMICAS, GENTICAS.


SOMTICAS

Mutaciones. Tipos de mutaciones segn el mecanismo casual. Agentes muta


gnica la mutacin en la obtencin de nuevos clon en agricultura

Tipos De Mutaciones
Las mutaciones pueden darse en tres niveles diferentes:
1.-molecular (gnicas o puntuales)
2.- cromosmico
3.- genmico

1.-Mutaciones Gnicas O Puntuales


Las mutaciones a nivel molecular son llamadas gnicas o puntuales y afectan la
constitucin qumica de los genes. Se originan por:
Sustitucin. Donde debera haber un nucletido se inserta otro. Por ejemplo, en
lugar de la citosina se instala una timina.
Inversin, mediante dos giros de 180 dos segmentos de nucletidos de hebras
complementarias se invierten y se intercambian.
Translocacin. Ocurre un traslape de pares de nucletidos complementarios de
una zona del ADN a otra
Desfasamiento. Al insertarse (insercin) o eliminarse (deleccin) uno o ms
nucletidos se produce un error de lectura durante la traduccin que conlleva a la
formacin de protenas no funcionales.
2.-Mutaciones cromosmicas
El cambio afecta a un segmento de cromosoma (mayor de un gen), por tanto a su
estructura. Estas mutaciones pueden ocurrir por:
Deleccin. Es la prdida de un segmento cromosmico, que puede ser terminal o
intercalar. Cuando ocurre en los dos extremos, la porcin que porta el centrmero une
sus extremos rotos y forma un cromosoma anular.

Inversin. Cuando un segmento cromosmico rota 180 sobre s mismo y se coloca


en forma invertida, por lo que se altera el orden de los genes en el cromosoma.
Duplicacin. Repeticin de un segmento cromosmico.
Translocacin. Intercambio de segmentos entre cromosomas no homlogos, que
puede ser o no recproca. Algunos tipos de translocaciones producen abortos
tempranos. Tambin se pueden formar portadores de trisomas como la del 21
(sndrome de Down); al translocarse todo el cromosoma 21 a otro cromosoma como
el 14 (14/21), los gametos de esa persona llevarn el cromosoma translocado ms uno
normal, por lo que al fecundarse con el gameto contrario, el producto resultante tendr
tres cromosomas 21.

Isocromosomas. Estos se forman cuando el centrmero, en lugar de dividirse


longitudinalmente, lo hace en forma transversal.
3.- Mutaciones genmicas
Euploida.
Afecta al conjunto del genoma, aumentando el nmero de juegos cromosmicos
(poliploida) o reducindolo a una sola serie (haploida o monoploida).
La poliploidia es ms frecuente en vegetales que en animales y la monoploida se da
en insectos sociales (znganos). Estas mutaciones son debidas a errores en la
separacin de los pares de cromosomas homlogos durante la meiosis, no separndose
ninguno de estos. Los organismos poliplodes generalmente son ms grandes y
vigorosos, y frecuentemente presentan gigantismo. En numerosas plantas cultivadas
esto se ha capitalizado, especialmente donde el tamao de hojas, semilla, fruto o flor
es econmicamente importante, por ejemplo en alfalfa, tabaco, caf, pltano,
manzana, pera, lila y crisantemo.
Aneuploida
Afecta al nmero de cromosomas individualmente (por defecto o por exceso). Se debe
al fenmeno de no disyuncin (que ocurre durante la meiosis cuando los cromosomas
homlogos no se separan y ambos se incorporan a un mismo gameto).
Cuando este gameto fecunda a otro se originar un cromosoma triplicado (trisoma);
de igual forma tambin habr gametos que tendrn un cromosoma menos y, por ello,
cuando fecunden a otro normal, el individuo tendr un cromosoma menos
(monosoma).
Trisomas.
La trisoma del cromosoma 21 produce el sndrome de Down (47, XX + 21 47, XY
+ 21). Los afectados tienen retardo mental en diferente grado, corazn defectuoso,
baja estatura, prpados rasgados, boca pequea, lengua salida, crneo ancho y marcha
lenta. Las mujeres son frtiles y los transmiten al 50% de su progenie; los hombres
son estriles.
Los cromosomas sexuales tambin pueden afectarse por una trisoma.
Los individuos afectados por el sndrome de Klinefelter (47, XXY) son varones
estriles con rasgos femeninos y retraso mental. Son frtiles, altos y de conducta
controversial. Sus clulas tienen un nmero anormal de cuerpos de Barr.
En el sndrome triequis o metahembras (47, XXX) son mujeres frtiles de apariencia
normal pero con tendencia al retardo mental.
En la polisoma XYY (47, XYY) Los afectados presentan estatura elevada, acn, un
tamao mayor de dientes, conducta agresiva y la espermatognesis puede o no estar
alterada.
Monosomas.
La falta de un cromosoma produce una monosoma conocida como el sndrome de
Turner (45, X) que ocurre en mujeres quines desarrollan baja estatura, dobleces
caractersticos en el cuello y retardo mental moderado. En la pubertad no menstran
ni desarrollan caracteres sexuales secundarios. No presentan cuerpo de Barr como las
mujeres normales, pues el nico cromosoma X que presentan est activado.
CLASE # 16
Fecha: martes 31 de Enero del 2017

Equilibrio de Hardy Weinberg. Calculo de las frecuencias genticas.


Ingenieria gentica

Concepto de poblacin.
En trminos genticos, una poblacin se define como un conjunto de individuos que
pertenecen a una especie dotada de reproduccin sexual que constituyen una unidad
reproductiva, es decir, que se reproducen mediante cruzamientos entre sus miembros. La
poblacin se puede describir en cada generacin y en cuanto a la transmisin de una a
otra generacin. La descripcin de los caracteres hereditarios variables slo adquiere
pleno sentido en un contexto poblacional. (biotecnologia, 2000)
Dobzhansky (1950) defini el concepto de poblacin mendeliana como un grupo de
individuos que comparten, en el tiempo y en el espacio, un acervo gentico comn. En
una poblacin se pueden describir varios acervos o patrimonios gentico, dependiendo
de cuales sean las unidades genticas que consideremos: alelos, gametos o genotipos; en
todos los casos, la descripcin del correspondiente acervo se realiza enumerando los
elementos que lo componen, y se hayan observado en la poblacin, y sus respectivas
frecuencias. (biotecnologia, 2000)
El acervo allico se define como el conjunto de los alelos presentes en cada uno
de los loci y sus respectivas frecuencias.
El acervo gamtico se define como el conjunto de los grupos de alelos, a razn
de un alelo por locus, observados en la poblacin y sus respectivas frecuencias.
El acervo cigtico se define como el conjunto de los grupos de parejas de alelos,
a razn de una pareja por locus, observados en la poblacin y sus respectivas
frecuencias.

Las poblaciones que consideraremos son prcticamente infinitas, y sus acervos no estn
sometidas a fuerzas de cambio estocsticas (deriva) ni a sistemticas (seleccin, mutacin
o migracin). (biotecnologia, 2000)
Plantas transgnicas
Cuyo genoma ha sido modificado mediante ingeniera gentica, bien para introducir uno
o varios genes nuevos o para modificar la funcin de un gen propio. Como consecuencia
de esta modificacin, la planta transgnica muestra una nueva caracterstica. Una vez
realizada la insercin o modificacin del gen, ste se comporta y se transmite a la
descendencia como uno ms de los genes de la planta. En las plantas transgnicas la
modificacin gentica se realiza de forma dirigida y afecta a un nmero reducido de genes
perfectamente conocidos. Como resultado, las variedades transgnicas no difieren mucho
de las variedades no transgnicas y presentan caractersticas predecibles. (biotecnologia,
2000)
Cmo se hace una planta transgnica?
La Produccin de una planta transgnica consta de dos etapas fundamentales
denominadas transformacin y regeneracin. Se denomina transformacin al proceso de
insercin del gen que se pretende introducir (tambin llamado transgn) en el genoma de
una clula de la planta a transformar. La regeneracin consiste en la obtencin de una
planta completa a partir de esa clula vegetal transformada. Para introducir el nuevo gen
en el genoma de la clula vegetal se utilizan fundamentalmente dos m- todos. El ms
comn utiliza una bacteria del suelo, Agrobacterium, que en condiciones naturales es
capaz de transferir genes a las clulas vegetales. (biotecnologia, 2000)
El mtodo alternativo consiste en la introduccin directa de los genes en el ncleo de la
clula vegetal. Para ello una de las tcnicas ms utilizadas es la de disparar a las clulas
con microproyectiles metlicos recubiertos del ADN que penetran en la clula e integran
el nuevo ADN en su genoma. Una vez que una clula vegetal ha sido transformada, es
necesario regenerar la planta entera a partir de ella.
Este proceso se realiza en el laboratorio, cultivando los fragmentos de tejido vegetal que
han sido inoculados con Agrobacterium o disparados con microproyectiles en medios de
cultivo que favorecen la regeneracin de nuevas plantas.
Es importante que en este paso slo se regeneren las clulas del tejido que han sido
transformadas. Esto se consigue introduciendo junto con el transgn un gen adicional que
confiera una caracterstica selectiva.
Por ejemplo, se han utilizado genes de resistencia a antibiticos para que slo las clulas
modificadas sean capaces de sobrevivir en presencia del antibitico. Estos genes
responsables de caracteres selectivos estarn presentes posteriormente en todas las clulas
de la planta transgnica regenerada o pueden ser eliminados por diversos procedimientos.
De dnde provienen los nuevos genes de una planta transgnica?
Los Genes Que se introducen en una planta transgnica pueden proceder de cualquier ser
vivo, del que se copian mediante tcnicas de biologa molecular. Su origen puede ser una
planta relacionada u organismos tan distantes como bacterias o animales. Tambin es
posible construir genes sintticos en el laboratorio e introducirlos en plantas transgnicas.
Es muy importante conocer la funcin de los genes para poderlos utilizar en el diseo de
una nueva planta transgnica, y por ello, su uso se limita a los genes de funcin conocida.
En la actualidad, proyectos de investigacin de la secuencia del genoma de diversos
organismos, como el proyecto del genoma humano, estn contribuyendo a la
identificacin de nuevos genes y al conocimiento de su funcin. (biotecnologia, 2000)
Cultivos Transgnicos
Uno de los temas de ms controversia en estos momentos son los cultivos transgnicos,
la polmica est abierta debido a que son cultivos manipulados genticamente al cual se
le han insertados elementos extraos y que en teora vuelven al organismo que lo posee
ms resistente a una peste, enfermedades etc. la controversia se centra en que no se han
hecho las suficientes investigaciones para poder ver el impacta a largo plazo que estos
cultivos pueden producir en el organismo humano o en el ambiente, de igual forma se
est incrementando el uso de herbicidas y en ultima hay detrs de esto hay un
conglomerado econmico interesado en crear verdaderos monopolios que controles los
bancos de semillas , as que veamos un poco la controversia. (biotecnologia, 2000)
Los alimentos sometidos a ingeniera gentica o alimentos transgnicos son aquellos que
fueron producidos a partir de un organismo modificado genticamente mediante
ingeniera gentica. Dicho de otra forma, es aquel alimento obtenido de un organismo al
cual le han incorporado genes de otro para producir una caracterstica deseada. En la
actualidad tienen mayor presencia alimentos procedentes de plantas transgnicas como el
maz, la cebada o la soja.
La ingeniera gentica o tecnologa del ADN recombinante es la ciencia que manipula
secuencias de ADN (que normalmente codifican genes) de forma directa, posibilitando
su extraccin de un taxn biolgico dado y su inclusin en otro, as como la modificacin
o eliminacin de estos genes. En esto se diferencia de la mejora clsica, que es la ciencia
que introduce fragmentos de ADN (conteniendo como en el caso anterior genes) de forma
indirecta, mediante cruzamientos dirigidos.La primera estrategia, la de la ingeniera
gentica, se circunscribe en la disciplina denominada biotecnologa vegetal. Cabe
destacar que la insercin de grupos de genes mediante obtencin de hbridos (incluso de
especies distintas) y otros procesos puede realizarse mediante tcnicas de biotecnologa
vegetal que no son consideradas ingeniera gentica, como puede ser la fusin de
protoplastos. (biotecnologia, 2000)

Los alimentos sometidos a ingeniera gentica o alimentos transgnicos son aquellos que
fueron producidos a partir de un organismo modificado genticamente mediante
ingeniera gentica. Dicho de otra forma, es aquel alimento obtenido de un organismo al
cual le han incorporado genes de otro para producir una caracterstica deseada. En la
actualidad tienen mayor presencia alimentos procedentes de plantas transgnicas como el
maz, la cebada o la soja.
La ingeniera gentica o tecnologa del ADN recombinante es la ciencia que manipula
secuencias de ADN (que normalmente codifican genes) de forma directa, posibilitando
su extraccin de un taxn biolgico dado y su inclusin en otro, as como la modificacin
o eliminacin de estos genes. En esto se diferencia de la mejora clsica, que es la ciencia
que introduce fragmentos de ADN (conteniendo como en el caso anterior genes) de forma
indirecta, mediante cruzamientos dirigidos.
La primera estrategia, la de la ingeniera gentica, se circunscribe en la disciplina
denominada biotecnologa vegetal. Cabe destacar que la insercin de grupos de genes
mediante obtencin de hbridos (incluso de especies distintas) y otros procesos pueden
realizarse mediante tcnicas de biotecnologa vegetal que no son consideradas ingeniera
gentica, como puede ser la fusin de protoplastos.
Un transgnico u Organismo Modificado Genticamente (OMG) es un organismo vivo
que ha sido creado artificialmente manipulando sus genes. La manipulacin gentica
consiste en aislar segmentos del ADN (el material gentico) de un ser vivo (virus,
bacteria, vegetal, animal e incluso humano) para introducirlos en el de otro. Por ejemplo,
el maz transgnico que se cultiva en Espaa lleva genes de bacterias, para producir una
sustancia insecticida. (biotecnologia, 2000)
La diferencia fundamental con las tcnicas tradicionales de mejora vegetal es que la
manipulacin gentica permite franquear las barreras entre especies para crear seres vivos
que no existan en la naturaleza. Se trata de un experimento a gran escala en que se nos
involucra a todos en contra de nuestra voluntad. Adems, la manipulacin gentica est
basada en un modelo cientfico obsoleto y que est en entredicho. El sistema de
evaluacin de riesgos de la UE est repleto de trampas e irregularidades.
UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADMICA DE CC. AGR.
ESCUELA DE INGENIERA AGRONMICA

GENETICA

RESUMEN DE LOS VIDEOS

Estudiantes: Tinoco Azanza Victor Alfonso

Ciclo: Quinto A

Fecha: 7 de Octubre del 2016

Docente: Ing. Jos Quevedo

MACHALA - EL ORO - ECUADOR


LA GENTICA: DOCUMENTAL COMPLETO
En este video de la gentica nos habla sobre los procesos que rige la herencia biolgica
que mandan las diferentes caractersticas a los descendientes ya que la gentica ha
tenido un desarrollo muy importante a lo largo de los aos, y que poco a poco se han
venido dando estudios. Sin embargo desde hace mucho tiempo atrs los hombres
hemos experimentado con las caractersticas hereditarias de los seres vivos tanto
como animales y plantas, claro siempre y cuando haciendo un buen selectivo.
Para comprender un poco ms comn la gentica es bueno tener en mente conceptos
como genotipo, fenotipo, caracteres dominantes, caracteres recesivos homocigoto y
heterocigoto.
Fenotipo: La clase de la que se es miembro segn las cualidades fsicas observables
en un organismo, incluyendo su morfologa, fisiologa y conducta a todos los niveles
de descripcin. Las propiedades observables de un organismo
Genotipo: La clase de la que se es miembro segn el estado de los factores hereditarios
internos de un organismo, sus genes y por extensin su genoma.
Carcter dominante: Es aquel que est determinado por un gen dominante. Por
ejemplo contemplamos el color de una flor, y resulta que el gen que le da el color rojo
es dominante, aunque la flor tenga otros genes que determinen otros colores, si el gen
ROJO est presente, la flor SIEMPRE ser roja.
Carcter recesivo: Es todo lo contrario. Los genes que determinan el carcter recesivo
necesitan estar 'SOLOS' para poder expresarse.
Homocigota: Es un individuo que solamente contiene un alelo del par. Ejemplo: DD
es una homocigota dominante; dd es una homocigota recesiva; las lneas puras son
homocigotas para el gen de inters.
Heterocigoto: Un individuo heterocigoto es aqul que contiene dos formas
alternativas de un par de genes. Ejemplo: Dd
En si tambin una breve explicacin de los experimentos de Gregor Johann Mendel y
sus experimentos con las plantas de arvejas de las cuales impusos unas leyes con sus
experimentos y las leyes fueron
Primera ley o principio de la uniformidad
Segunda ley o principio de la segregacin
Tercera ley o principio de la combinacin independiente

GREGOR MENDEL Y LA HISTORIA DE LA GENTICA: DOCUMENTAL


COMPLETO
En este video se aprecia la historia de Gregor Mendel que descubre los secretos de la
herencia (1822 -1884) Monje y botnico austriaco que formul las leyes de la herencia
biolgica que llevan su nombre. Sus rigurosos experimentos sobre los fenmenos de
la herencia en las plantas constituyen el punto de partida de la gentica, una de las
ramas fundamentales y emblemticas de la biologa moderna.
El ncleo de sus trabajos (que comenz en el ao 1856 a partir de experimentos de
cruzamientos con guisantes efectuados en el jardn del monasterio) le permiti
descubrir las tres leyes de la herencia o leyes de Mendel, gracias a las cuales es posible
describir los mecanismos de la herencia y que seran explicadas con posterioridad por
el padre de la gentica experimental moderna, el bilogo estadounidense Thomas
Hunt Morgan (1866-1945).
La primera ley de Mendel, tambin llamada: Ley de la uniformidad de los hbridos de
la primera generacin, o simplemente Ley de la Uniformidad. Esta ley dicta que, al
cruzar dos variedades de una especie de raza pura, cada uno de los hbridos de la
primera generacin tendr caracteres determinados similares en su fenotipo. Esto se
debe a que las razas puras tienen un gen dominante o un gen recesivo. El genotipo
dominante ser entonces el que determine la caracterstica o caractersticas principales
de la primera generacin del cruce, pero al mismo tiempo, tambin sern similares
fenotpicamente entre s, es decir, entre cada individuo de la primera generacin.
La segunda ley de Mendel, tambin conocida como la Ley de la Segregacin, Ley de
la Separacin Equitativa, o hasta Ley de Disyuncin de los Alelos. Esta dictamina que
para que exista la reproduccin de dos individuos de una especie, primero debe existir
la separacin del alelo de cada uno de los pares para que de esta manera se transfiera
la informacin gentica al hijo. Un alelo es, la variante gentica que permite
determinar un rasgo o carcter.
La tercera ley de Mendel, tambin llamada Ley de la Herencia Independiente de
Caracteres o Ley de la Asociacin Independiente. Segn Mendel, hay rasgos
heredados que se obtienen de forma independiente, sin relacin con el fenotipo, lo
cual no afecta al patrn de herencia de otros rasgos.
Para terminar con las Leyes De Mendel Resumidas, se puede decir que, la primera
Ley de Mendel dice que si se cruzan dos padres de raza pura con diferentes rasgos, la
primera generacin tendr similitudes entre s y guardar un carcter del padre con el
alelo dominante. La segunda ley dice que, los factores genticos se separan de cada
uno de los padres en alelos individuales que se juntarn para procrear una
descendencia con las caractersticas de la primera generacin, pero en la segunda
generacin, se manifiestan nuevos rasgos genticos observados en los padres pero
unidos de manera aleatoria en la descendencia de la primera generacin. Y la tercera
ley de Mendel dice que, adems existen rasgos generados de forma independiente, a
travs de cromosomas alejados que no intervienen entre s, y al igual que en la
segunda ley, esta tercera de las leyes de Mendel se manifiesta con ms claridad en la
segunda generacin de individuos.
"SEMILLAS ESCLAVAS" - INGENIERA GENTICA, BIOTECNOLOGA
EN LOS CULTIVOS (TRANSGNICOS)
En este video nos habla sobre las semillas del maz que han sufrido un cambio
biotecnolgico por medio de la gentica hacindola una semilla transgnica que hoy
en da es un medio ms seguro para el control de plagas y bajando el uso de los
qumicos, pero as como puede ser ms efectiva la cosecha puede perjudicar la salud
de los que consumimos y en si tambin a los Agricultores que no pueden obtener estas
semillas genticamente mejorada por su costo.
Los cultivos transgnicos son un gran experimento biolgico. Cuando introducimos
genes de medusa, insectos o bacterias en una semilla, estamos creando seres que
nunca hubiera alumbrado la naturaleza.
Las semillas transgnicas adquieren caractersticas nuevas para resistir a
determinadas plagas o agroqumicos. Algunas, podrn crecer casi sin agua y otras,
nos ayudarn a combatir enfermedades.
El problema es que esas semillas no son de todos, ya no estn en manos de los
agricultores. Ahora estn patentadas y pertenecen a las multinacionales.
Durante aos slo ha habido un cultivo modificado genticamente autorizado en
Europa. Es un maz insecticida: el MON 810, una patente de la multinacional
Monsanto. Espaa es el nico pas de la Unin Europea que lo cultiva a gran escala.
Este maz tiene incorporados genes de una bacteria del suelo que para que genere una
toxina que mata a los gusanos de la plaga del taladro.
Queramos o no, comemos transgnicos. Al menos, de forma indirecta, porque la
prctica totalidad de los piensos compuestos son transgnicos, y estos piensos son el
alimento de casi el cien por cien de las vacas, pollos y cerdos que se cran en las
granjas intensivas. Y tambin comemos su leche y sus huevos...Nuestra ganadera,
hoy por hoy, depende de los transgnicos que importamos de los pases que lo usan.
En nuestro pas esta total mente prohibido el uso de semillas transgnicas pero no
obstante si podemos consumirla en los productos que importamos de otros pases los
cuales si usan genticamente transgnicos.

INGENIERIA GENETICA - LA GRANJA DEL DR. FRANKENSTEIN


DOCUMENTAL COMPLETO EN ESPAOL
En este video documentado podemos apreciar de la gentica cmo ha evolucionado
en poco tiempo y ya introducindolo en los animales, puede ser la gentica la ciencia
del futuro ya que son genes modificados con otros genes dados los estudios al caso.
En los animales modificarlos genticamente lo llamaremos animales transgnicos
modificando el estado fsico de dicho animal.
Podemos llamar a mejorar la raza del animal con genes que dicho animal sea mucho
mejor y as alteramos el crecimiento normal del animal a un crecimiento anormal,
siendo as para la comercializacin mucho mejor.
Tambin se aprecia unos pollos que no tienen pelo. Para los pollos es difcil bajar su
temperatura corporal en gran parte debido a las plumas que tienen, por lo que un
cientfico les quit el gen que hace que les crezcan las plumas y quedan sin plumas y
les resulta ms fcil bajar su temperatura corporal aunque sean criados en climas
clidos.
Conejos que son verdes y brillan en la oscuridad. Estos animales han sido
manipulados genticamente, los cientficos consiguieron aislar la parte del ADN de
la medusa que les hace ser fosforescentes y se le introdujo a los conejos, y si se miran
los conejos con una luz ultravioleta y con unas gafas especiales se ven verdes.
Salmones enormes. Estos peces crecen mucho ms rpido durante el primer ao de
vida. Los salmones normales crecen cuando el agua est clida en el verano, pero
cuando el agua se enfra en invierno el gen encargado de su crecimiento hace que
dejen de crecer. El cientfico coge un gen de crecimiento de otro pez que tambin
crece en invierno en aguas fras y se lo introduce a los salmones, por lo tanto crecen
durante todo el primer ao, independientemente de la temperatura del agua.
Eco-cerdos. Se produce una gran cantidad de excremento de cerdos hoy en da, ya
que se comen muchos cerdos. Estos excrementos son muy contaminantes porque
contienen una gran cantidad de fsforo, los cerdos no lo pueden metabolizar, y no se
puede usar como abono. Lo que han conseguido es disear un gen para introducirles
a los cerdos que hace que stos metabolicen el fsforo y, por lo tanto, no sean
contaminantes sus excrementos y se puedan utilizar para abono.
La ciencia avanza y cada da se aprende algo nuevo, pues si la gentica es la ciencia
del futuro y estamos alterando la cadena trfica del mundo genticamente an no
sabemos qu tan malficos puede ocasionarnos los transgnicos solo lo vemos como
una comercializacin pero no estamos viendo de otro punto de vista en lo natural.
Estamos alterando la naturaleza pero no sabremos si eso es bueno o malo solo el tipo
lo descifrara.
UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADMICA DE CC. AGR.
ESCUELA DE INGENIERA AGRONMICA

GENETICA

NUMERO CROMOSMICO DE LAS PRINCIPALES


CULTIVOS ALIMENTICIOS

Estudiantes: Tinoco Azanza Victor Alfonso

Ciclo: Quinto A

Fecha: 11 de Octubre del 2016

Docente: Ing. Jos Quevedo

MACHALA - EL ORO - ECUADOR


NOMBRE NOMBRE VULGAR NUMERO DE
CIENTIFICO CROMOSOMAS
Capsicum annuum Pimiento 18
Malus domstica Manzana 34
Vicia Faba Haba 12
Saccharum officinarum Caa de azcar 80
Raphanus sativus Rbano 24
Lactuca sativa Lechuga 18
Lens culinaris Lenteja 14
Hordeum vulgare Cebada 14
Medicago sativa Alfalfa 16
Triticum aestivum Trigo 42
Brassica oleracea Col 18
Daucus carota Zanahoria 20
Salanum tuberosum Papa 48
Pisum sativum Arveja 14
Zea mays Maz 20
Persea Americana Aguacate 24
Cacumis sativus Pepino 14
Salanum lycopersicum Tomate 24
Allium cepa Cebolla 16
UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADMICA DE CC. AGR.
ESCUELA DE INGENIERA AGRONMICA

GENTICA

Bases cromosmicas de la herencia

Estudiantes: Tinoco Azanza Victor Alfonso

Ciclo: Quinto A

Fecha: 22 de Noviembre del 2016

Docente: Ing. Jos Quevedo

MACHALA - EL ORO - ECUADOR


BASES CROMOSMICAS DE LA HERENCIA
Mendel en 1865, public sus estudios sobre la transmisin de las caractersticas
hereditarias entre padres e hijos en las variedades vegetales (Pisum sativum), que se
resumen en los que hoy conocemos como la primera y la segunda ley de Mendel.
La primera es la Ley de la uniformidad de los hbridos, donde se enuncia que los
factores de un par de caracteres se segregan y se reparten sin mezclarse y la segunda
es la Ley de la segregacin de los caracteres, cuyo enunciado es que los factores de
dos pares de caracteres se separan independientemente entre ellos, distribuyndose al
azar en los descendientes.
Cada especie tiene un nmero caracterstico de cromosomas.
Clulas de humanos tienen un nmero diploide (2n), es decir, tienen dos copias de
cada uno de los 23 cromosomas.
Cada vez que la clula se divide, recibe las dos copias de los cromosomas (Mitosis).
Las clulas reproductoras solo tienen una copia de los cromosomas y se le denomina
haploide (n) y se obtienen por un proceso que llamamos Meiosis.

EL CROMOSOMA

El cinetocoro es un disco localizado en la parte externa de los cromosomas en los


centromeros.
Est compuesto por unas protenas que anclan a los microtubulos del huso mitotico
durante los procesos de divisin celular.
Permite que cada cromatida se mueva por separado y se distribuya adecuadamente
a los Cromosoma en metafase nuevos nucleos.

El cromosoma en metafase

TIPOS DE CROMOSOMAS
Un cromosoma es una estructura que se encuentra en el citoplasma del ncleo de las
clulas de todo ser vivo, la cual representa la mxima compactacin de la cromatina.
Los cromosomas estn formados por ADN y protenas. Son quienes contienen la
mayor cantidad de informacin gentica del individuo.
Cuando ocurren las divisiones celulares, llamadas meiosis y mitosis, el cromosoma
adquiere su forma ms conocida, la de una X, debido a la compactacin y la
duplicacin que sufren. Cada molcula de ADN es hasta 50 mil veces ms pequea y
corta que su forma extendida.

El nmero de cromosomas de cada especie es caracterstico de sta

CICLO CELULAR
El ciclo celular es un conjunto ordenado de sucesos que conducen al crecimiento de
la clula y la divisin en dos clulas hijas. Las etapas, son G1-S-G2 y M. El estado
G1 quiere decir GAP 1 (Intervalo 1). El estado S representa la sntesis, en el que
ocurre la replicacin del ADN. El estado G2 representa GAP 2 (Intervalo 2). El
estado M representa la fase M, y agrupa a la mitosis o meiosis (reparto de material
gentico nuclear) y la citocinesis (divisin del citoplasma). Las clulas que se
encuentran en el ciclo celular se denominan proliferantes y las que se encuentran
en fase G0 se llaman clulas quiescentes.1 Todas las clulas se originan nicamente
de otra existente con anterioridad.2 El ciclo celular se inicia en el instante en que
aparece una nueva clula, descendiente de otra que se divide, y termina en el momento
en que dicha clula, por divisin subsiguiente, origina dos nuevas clulas hijas.

MITOSIS
Proceso celular que consiste en la formacin de dos clulas a partir de una
conservando el mismo nmero de cromosomas.

Profase
La replicacin del DNA ha ocurrido. Hay condensacin gradual de los cromosomas.
Cromticas hermanas unidas. Desaparicin gradual del nuclolo. La membrana
nuclear inicia su desintegracin.
Prometafase
La envoltura nuclear se ha roto y el huso mittico se comienza a organizar. Los
cromosomas han sido alcanzados por fibras del huso (microtubulos).

Metafase
Los centrmeros de los cromosomas estn unidos a las fibras del huso mittico. Se
forma la placa metafsica.
Anafase
Etapa muy corta en la que cada centrmero se divide en dos, por lo que las cromtidas
se convierten en cromosomas y los centrmeros inician su movimiento hacia los
polos, llevando hacia cada polo uno de los 2 cromosomas (cromtidas hermanas).
Telofase
La dotacin de cromosomas se agrupa en los polos y stos se comienzan a
descondensar y adoptan la forma de cromosomas interfsicos. Se forma la membrana
nuclear, se reconstituyen los nuclolos.

Meiosis
La meiosis es la divisin celular que permite la reproduccin sexual. Comprende
dos divisiones sucesivas: una primera divisin meitica, que es una divisin
reduccional, ya que de una clula madre diploide (2n) se obtienen dos clulas hijas
haploides (n); y una segunda divisin meitica, que es una divisin ecuacional, ya que
las clulas hijas tienen el mismo nmero de cromosomas que la clula madre (como
la divisin mittica). As, dos clulas n de la primera divisin meitica se obtiene
cuatro clulas n. Igual que en la mitosis, antes de la primera divisin meitica hay un
perodo de interfase en el que se duplica el ADN. Sin embargo, en la interfase de la
segunda divisin meitica no hay duplicacin del ADN.
UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADMICA DE CC. AGR.
ESCUELA DE INGENIERA AGRONMICA

GENTICA

Ligamento y recombinacin

Estudiantes: Tinoco Azanza Victor Alfonso

Ciclo: Quinto A

Fecha: 25 de Noviembre del 2016

Docente: Ing. Jos Quevedo

MACHALA - EL ORO - ECUADOR


Ligamento y recombinacin
Los genes que controlan diferentes caracteres son heredados de forma independiente
uno de otros es cierto solo cuando los genes existen en cromosomas diferentes.
El genetista Thomas Hunt Morgan y sus colaboradores demostraron en una serie
amplia de experimentos con moscas de la fruta, que los genes se disponen en el mismo
cromosoma, se heredan como una unidad aislada mientras que el cromosoma
permanezca intacto. A los genes heredados de esa manera se dice que estn ligado
Sin embargo, Morgan y su grupo observaron tambin que este ligamento rara vez es
completo. Las combinaciones de los alelos de cada progenitor pueden reorganizarse.
Durante la meiosis, una pareja de cromosomas homlogos pueden intercambiar
material durante que se denomina recombinacin o entrecruzamiento.
Basndose en la teora de la herencia enunciada por Sutton y cuyos aspectos
esenciales son:
Los genes estn ubicadas en los cromosomas.
La ordenacin de los mismos es lineal.
Al fenmeno gentico de la recombinacin le corresponde un fenmeno citolgico
de intercambio de segmentos cromosoma tico, Morgan propuso que existen
parejas genticas situadas sobre el mismo par de cromosomas homlogos,
llamando a este fenmeno ligamento.

Cuando dos o ms genes localizados en el mismo cromosoma se dice que estn


ligados, y pueden estarlo en autosomas o cromosomas sexuales.
Los genes que se encuentren en distintos cromosomas se distribuyen en los gametos
independientemente uno del otro. Sin embargo, los genes que se encuentran en el
mismo cromosoma tienen a permanecer juntos; es decir a no sufrir separaciones ni
combinaciones al azar durante la formacin de gametos.
Al analizar los resultados los resultados de una cruza de prueba a individuos di
hbridos se observaran resultados diferentes, en distintos cromosomas.
c) Los genes que se encuentran en distintos cromosomas se distribuyen
independientemente, por lo tanto del apareamiento AaBb x aabb se obtendr
una proporcin esperada en la cruza de prueba de 1:1:1:1.
d) Los genes ligados no se distribuyen independientemente sino que tienden a
permanecer juntos y en la misma combinacin encontrada en los progenitores.

Durante la meiosis cada cromosoma se duplica formando dos clemtides hermanas


idnticas, al par de cromosomas homlogos se aparea y se produce el
entrecruzamiento entre clemtides no hembras. Este ltimo proceso requiere del
rompimiento y la reunin de solo dos de las cuatro bandas en cualquier punto del
cromosoma.
La recombinacin, definida en relacin a la meiosis, es el proceso que genera un
producto haploide cuyo genotipo defiere de los dos genotipos progenitores que
forman la clula que inicio la meiosis. El producto asi generado se denomina
recombinante.
Hay dos tipos de recombinacin, las que producen recombinaciones por mtodos
absolutamente diferentes:
Intercromosmica
Intercromosmica

c) Recombinacin intercromosmica.

Es la que se produce mediante la distribucin independiente de Mendel. Las dos clases


recombinantes o nuevos fenotipos constituyen el 50% de los descendientes, 25% de
cada tipo. Si encontramos esta frecuencia podemos inferir que las parejas genticas
segregan independientemente.
d) Recombinacin intracromosmatica.

Se produce por entrecruzamiento. Esto ocurre entre cualquiera de dos clemtides no


hermanas. Esto sucede en todas las meiosis, otra mitad sern gametos tipo progenitor.
Las meiosis sin entrecruzamiento entre dos luc producirn solo genotipos parentales
para esas parejas gnicas.
La recombinacin intercromosmica se pone de manifiesto en la aparicin de una
frecuencias de recombinacin menor al 50% el ligamento fsico entre las
combinaciones gnicas parentales impide la libre distribucin de los genes, a la que
genera una frecuencia de recombinacin del 50%.
DETECCIN DE LIGAMENTOS
En gentica se denomina ligamiento a la asociacin fsica entre dos luc (esto es, su
cercana en una misma hebra de ADN, lo que repercute en una baja frecuencia de
recombinacin entre ellos durante la meiosis, y, por tanto, a una mayor probabilidad
de herencia conjunta. Esto se debe a que los quiasmas, estructuras de
entrecruzamiento generadas durante la recombinacin, se producen al azar a lo largo
de un cromosoma; de este modo, a menor distancia entre dos luc, menor probabilidad
de que se d un quiasma y, por tanto, se generen variantes recombinantes.

La disposicin de dos luc con mxima frecuencia de recombinacin (esto es, de 0,5
o, lo que es lo mismo, del 50%) es sobre cromosomas separados, puesto que, as, si
slo se transmite las clulas germinales una copia del genoma y existen dos
cromosomas homlogos (el paterno y el materno) en la clula diploide de la lnea
germinal, su segregacin al azar dar lugar a la transmisin de uno de los dos, y 1/2
corresponde a la mencionada frecuencia de recombinacin de 0,5. Cuando los dos luc
se encuentran en cromosomas distintos se dice que no estn ligados: es una situacin
de no ligamiento.

Cmo se calcula la frecuencia en que se recombinan los genes ligados?

Contamos los recombinantes sobre el total y eso nos da p o la frecuencia de


recombinacin. A travs de la frecuencia se establece la distancia entre los genes ya
que un 1% de recombinacin equivale a un centiMorgan o una Unidad Mapa.

La mxima frecuencia de recombinacin es de 50% o 0,5 ya que ms all de ese valor


como p o r valen 0,5 observara riamos cuatro clases de gametas en 1/4 cada una, o
sea igual que en una trasmisin independiente. Esto ocurre porque cuando los genes
estn muy separados existen posibles dobles entrecruzamientos que llevaran a NO
recombinacin entre los dos genes en cuestin.

Por lo tanto la mxima distancia que podemos calcular es 50 UN o cM o un p:0,5.

Por qu la frecuencia de recombinacin tiene un mximo de 0,5?

Cuando p alcanza un valor de O,5 quiere decir que la mitad de las gametas son
parentales (1/2 de cada tipo parental) y mitad son recombinates (1/2 de cada una de
las recombinaciones). Esto es lo mismo que decir que tendramos 4 posibles clases de
gametas en igual probabilidad (1/4) de cada clase y eso sera igual que dos genes que
se transmiten independientemente, como lo predijo Mendel cada di hbrido da 4 clases
de gametas igualmente probables. Quiere decir entonces que si p: 0,5 no sabremos ya
con certeza si los genes estn ligados o en diferentes pares de cromosomas. Por ello a
su vez la mayor distancia que podemos calcular es 50Um o cM. La frecuencia de
recombinacin es un estimador de la distancia hasta ese punto, ya a mayores
distancias p seguira valiendo 0,5.

Por todo esto cuando la distancia entre dos genes es de 50 UM o ms es necesario


usar un tercer gen marcador en el medio y determinar las distancias parciales o prueba
de 3 puntos.
Este error en la extincin de grandes distancias es debido a que podran ocurrir dobles
entrecruzamientos entre ambos genes y no observar recombinacin entre ellos pero si
hubo entre otros en el medio y por lo tanto la estimacin de la distancia no es exacta.

El caso de dobles entrecruzamientos se ejemplifica abajo.

O sea los genes conservan la misma combinacin parental y no podramos ver


fenotipos recombinantes aun cuando hubo dobles entrecruzamientos. Para detectarlos
entonces se usa la prueba de 3 puntos.
UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADMICA DE CC. AGR.
ESCUELA DE INGENIERA AGRONMICA

GENTICA

QUE SON LAS DIOXINAS?; NMERO DE GENES DE


IMPORTANCIA EN LOS PRINCIPALES CULTIVOS DE LA
ALIMENTACIN, VEGETAL Y ANIMAL; QUE ES PUNTO
ISOELCTRICO DE LA PROTENA?; TCNICAS DEL ADN
RECOMBINANTE

Estudiantes: Tinoco Azanza Victor Alfonso

Ciclo: Quinto A

Fecha: 10 de Enero del 2017

Docente: Ing. Jos Quevedo

MACHALA - EL ORO - ECUADOR


QUE SON LAS DIOXINAS?
Son un grupo de sustancias qumicas d carcter orgnico que poseen una estructura
qumica similar una elevada capacidad de persistencia ambiental. Adems de las
dioxinas (PCDD) existe dos familias ms de productos como son los
policlorobifenilos (PCB) y los policlorodibenzofuranos (PCDF) que comparten
muchas propiedades con las dioxinas, y por ello el impacto de las tres familias a veces
se evala colectivamente. Las dioxinas pueden formarse en pequeas cantidades
durante ciertos procesos de incineracin o quema de materiales que contengas cloro
o derivados. Por ello pueden generarse, por ejemplo, en procesos de incineracin
incontrolada de basuras, plsticas o residuos industriales. Una vez liberadas, las
dioxinas presentan una gran capacidad de distribuirse por el aire y ser captadas por
los suelos y los seres vivos. Tienen una especial afinidad por las grasas de los animales
y los peces. Ello provoca que se encuentren aunque habitualmente en cantidades
mnimas, en numerosos componentes que son parte de nuestra alimentacin bsica.
(rodes, pique, & trilla, 2007)
NMERO DE GENES DE IMPORTANCIA EN LOS
PRINCIPALES CULTIVOS DE LA ALIMENTACIN HUMANA,
VEGETAL Y ANIMAL
QUE ES PUNTO ISOELCTRICO DE LA PROTENA?
Todas las macromolculas de la naturaleza adquieren una carga cuando se dispersan
en agua. Una caracterstica de las protenas y otros biopolmeros es que la carga total
que adquieren depende del pH del medio. (pea, arrollo, armandogomez, & Lopez,
2004)
As, todas las protenas tienen una carga neta dependiendo del pH del medio en el que
se encuentren y de los aminocidos que la componen, as como de las cargas de
cualquier ligando que se encuentre unido a la protena de forma covalente
(irreversible). (pea, arrollo, armandogomez, & Lopez, 2004)
Debido a la composicin en aminocidos de la protena, los radicales libres pueden
existir en tres formas dependiendo del pH del medio: catinicos, neutros y aninicos.
(pea, arrollo, armandogomez, & Lopez, 2004)
Cualquier protena tendra una carga neta positiva si se encuentra en un medio lo
suficientemente cido debido a que los grupos COOH de los aminocidos asprtico y
glutmico estaran en su forma neutra pero los grupos amino de Arginina y lysina
estaran protonados (-NH3 + ). (pea, arrollo, armandogomez, & Lopez, 2004)
De igual forma si la protena se encuentra en un medio con un pH muy alto estara
cargada negativamente ya que en este caso los grupos carboxilo estaran
desprotonados (COO - ) y los grupos amino estaran en su forma neutra (NH2). (pea,
arrollo, armandogomez, & Lopez, 2004)
De lo anterior se deduce que las protenas tienen un pH caracterstico al cual su carga
neta es cero. A este pH se le denomina punto isoelctrico (pI). (pea, arrollo,
armandogomez, & Lopez, 2004)
En el punto isoelctrico (pI), se encuentran en el equilibrio las cargas positivas y
negativas por lo que la protena presenta su mxima posibilidad para ser precipitada
al disminuir su solubilidad y facilitar su agregacin. (pea, arrollo, armandogomez,
& Lopez, 2004)
Si suponemos una protena formada nicamente por aminocidos sin grupos laterales
ionizables la carga neta de la protena dependera exclusivamente de la protonacin /
desprotonacin de los grupos amino y carboxilo terminal. En la realidad las protenas
estn formadas por multitud de aminocidos unidos mediante enlaces peptdicos y la
carga va a depender de los grupos ionizables que poseen los aminocidos que la
componen (anexo I) y del pH del medio. (pea, arrollo, armandogomez, & Lopez,
2004)
TCNICAS DEL ADN RECOMBINANTE
Enzimas de restriccin
La piedra angular de la tecnologa del DNA recombinante es un tipo de enzimas
denominadas endonucleasas de restriccin. Estas enzimas, aisladas en bacterias,
reciben este nombre debido a que limitan o previenen las infecciones vricas
degradando el cido nucleico invasor. Las enzimas de restriccin reconocen una
secuencia especfica de nucletidos (denominada sitio de restriccin) de una molcula
de DNA de doble cadena, y cortan el DNA por esa secuencia. El premio Nobel de
1978 se otorg a Werner Arber, Hamilton Smith y Daniel Nathans por su
investigacin sobre las enzimas de restriccin. Hasta la fecha, se han aislado y
caracterizado casi 200 tipos de enzimas de restriccin diferentes.

La enzima de restriccin EcoRI reconoce y se une a la secuencia palindrmica


GAATTC. El corte del DNA en este sitio produce colas de cadena sencilla
complementarias. La colas de cadena sencilla resultantes puedenunirse con colas
complementarias de otros fragmentos de DNA para formar molculas de DNA
recombinante.
Las enzimas de restriccin se denominan segn el organismo en el que se
descubrieron, utilizando un sistema alfanumrico. La enzima EcoRI proviene de
Escherichia coli; HindIII se descubri en Hemophilus influenzae. Hay dos tipos de
enzimas de restriccin:
Las enzimas de Tipo I cortan las dos cadenas del DNA en una posicin aleatoria a
cierta distancia del sitio de restriccin. No se utilizan normalmente en la investigacin
de DNA recombinante ya que el sitio de corte no es preciso.
Las enzimas de Tipo II reconocen una secuencia especfica y cortan las dos cadenas
de la molcula de DNA con absoluta precisin dentro de la secuencia reconocida. Se
usan ampliamente en investigacin de DNA recombinante puesto que cortan en sitios
especficos. Las secuencias reconocidas por las enzimas de Tipo II son simtricas
(palindrmicas), es decir, la secuencia de una de las cadenas leda en direccin 5'
3' es la misma que la secuencia de la cadena complementaria leda tambin en
direccin 5' 3'.
La enzima EcoRI corta las cadenas de manera escalonada dentro del sitio de
reconocimiento, dejando extremos de cadena sencilla. Estas colas, que tienen
secuencias nucleotdicas idnticas, son pegajosas (cohesivas), ya que pueden unirse
a colas complementarias de otros fragmentos de DNA mediante puentes de hidrgeno.
Si molculas de DNA de diferente origen comparten los mismos sitios de
reconocimiento palindrmicos, ambas tendrn colas complementarias de cadena
sencilla cuando se traten con una endonucleasa de restriccin. Si estos fragmentos se
ponen juntos bajo determinadas condiciones, los fragmentos de DNA de distinto
origen pueden formar molculas recombinantes estableciendo puentes de hidrgeno
entre los extremos cohesivos. Luego se utiliza la enzima DNA ligasa para unir
covalentemente los esqueletos azcar-fosfato de los dos fragmentos, producindose
as una molcula de DNA recombinante.

Para formar molculas de DNA recombinante, se corta DNA de distintas fuentes con
EcoRI y se mezcla para que se unan formando molculas recombinantes. Despus se
utiliza la enzima DNA ligasa para unirlos covalentemente en molculas de DNA
recombinante.
Algunas enzimas de restriccin comunes, con sus sitios de reconocimiento y de corte,
el patrn de corte y la fuente de origen
Otras enzimas de restriccin de Tipo II, como SmaI, cortan el DNA formando
fragmentos romos. Los fragmentos de DNA con extremos romos tambin pueden
unirse y formar molculas recombinantes, pero primero deben modificarse. La enzima
desoxinucleotidil transferasa terminal se utiliza para crear extremos de cadena sencilla
mediante la adicin de colas de nucletidos. Si a uno de los DNA se le aade una
cola de polidA, y al otro DNA se le aade una cola de poli-dT, se forman colas
complementarias, y los fragmentos pueden unirse mediante puentes de hidrgeno.
Entonces, por ligacin, pueden formarse molculas recombinantes.

Las molculas de DNA recombinante pueden formarse a partir DNA cortado con
enzimas que dejan extremos romos. En este mtodo se utiliza la enzima
desoxinucleotidil transferasa terminal para crear colas complementarias mediante la
adicin de fragmentos de poli-dA y de poli-dT. Estas colas sirven para unir el DNA
de diferentes fuentes y para crear molculas de DNA recombinante, que son unidas
covalentemente por tratamiento con la DNA ligasa.
ADN ligasa
Si ya conoces la replicacin del ADN, tal vez ya te hayas encontrado con la ADN
ligasa. En la replicacin del ADN, el trabajo de la ADN ligasa es unir fragmentos de
ADN recin sintetizados para formar una cadena continua. Las ligasas utilizadas en
la clonacin de ADN hacen bsicamente lo mismo. Si dos fragmentos de ADN tienen
extremos complementarios, la ADN ligasa puede unirlos para formar una molcula
sin interrupciones.

Vectores
Despus de unirse a un vector o vehculo de clonacin, un segmento de DNA puede
llegar a entrar en una clula husped y replicarse o clonarse. Los vectores son,
esencialmente, molculas de DNA transportadoras. Para servir de vector, una
molcula de DNA debe tener unas determinadas caractersticas:
1. Debe poder replicarse independientemente junto con el segmento de DNA que
transporta.
2. Debe contener algunos sitios de corte para enzimas de restriccin, presentes slo
una vez en el vector. Estos sitios de restriccin se cortan con una enzima de restriccin
y se utilizan para insertar segmentos de DNA cortados con la misma enzima.
3. Debe tener algn marcador de seleccin (normalmente genes de resistencia a
antibiticos o genes de enzimas que la clula husped no tiene) para poder distinguir
las clulas husped que transportan el vector de las que no lo contienen.
4. El vector de la clula husped debe ser fcil de recuperar. Actualmente se utilizan
tres tipos principales de vectores: los plsmidos, los bacterifagos y los csmidos.
Plsmidos
Los plsmidos son molculas de DNA de doble cadena extracromosmicas de origen
natural que tienen un origen de replicacin (ori+) y que se replican autnomamente
en las clulas bacterianas. Para poder utilizarlos en ingeniera gentica, se han
modificado o diseado muchos plsmidos de manera que contengan un nmero
limitado de sitios de restriccin y genes de resistencia a antibitico s especficos. El
vector pBR322 fue uno de los primeros plsmidos diseados que se utiliz en DNA
recombinante. Este plsmido tiene un origen de replicacin (ori+), dos genes de
seleccin (resistencia a los antibiticos ampicilina y tetraciclina), y algunos sitios de
restriccin nicos.

Mapa de restriccin del plsmido pBR322, que muestra las localizaciones de los sitios
de las enzimas de restriccin que cortan el plsmido por un solo sitio. Estos sitios
pueden utilizarse para insertar los fragmentos de DNA a clonar. Tambin se muestran
las localizaciones de los genes de resistencia a antibiticos.

Marcadores genticos
Un marcador gentico es una secuencia de ADN especfica cuya localizacin exacta
ha sido identificada en su correspondiente cromosoma y cuya herencia puede ser
rastreada. La secuencia de ADN que forma un marcador gentico puede ser un gen
completo o slo una secuencia sin funcin conocida o no codificante. Se utilizan
principalmente en el mapeo gentico como sealadores de regiones del genoma de un
determinado organismo.
Una de las caractersticas ms destacadas de los marcadores genticos es que ponen
de manifiesto el polimorfismo gentico dentro de una misma especie. Por ejemplo, el
marcador gentico de la zona que codifica para el tipo de sangre en el humano; todos
los humanos necesitan sangre pero la sangre puede ser muy diferente de un individuo
a otro debido a este polimorfismo.
Es muy frecuente que se utilice el trmino marcador molecular como sinnimo,
aunque este trmino se refiere especficamente a un tipo de marcador gentico.
PCR
La tcnica de amplificacin de ADN mediante la reaccin en cadena de la polimerasa
(PCR) es una tcnica que consiste en la amplificacin in vitro de un fragmento de
ADN especfico. Para llevar a cabo el experimento de amplificacin es necesario
conocer, al menos parcialmente, la secuencia del fragmento a amplificar (un gen, una
parte de un gen, una regin no codificadora,...). Bsicamente, se trata de replicar una
y otra vez un mismo fragmento de ADN y, para ello, debemos realizar in vitro lo que
hacen las clulas in vivo para replicar su ADN.
As, se trata de disponer en un tubo de ensayo el ADN de la especie objeto de estudio.
Adems debemos aadir en dicho tubo un par de oligonucletidos que acten como
cebadores para la ADN polimerasa. La eleccin de estos oligonucletidos (cebadores
o primers) es crucial dado que han de delimitar la regin a amplificar. En concreto,
deben ser complementarios a cada uno de los extremos 3 de la regin a amplificar:

En este esquema se dibuja en la parte superior una molcula de ADN y se delimita la


regin que ha de ser amplificada (flechas verticales). En la parte inferior se destacan
los sitios de apareamiento de los primers utilizados (flechas horizontales) y la
orientacin de stos
Adems del ADN y de los primers, es necesario aadir al tubo de reaccin los 4 tipos
de desoxirribonucletidos trifosfatos (dNTPs) que componen el ADN (dATP, dGTP,
dTTP y dCTP, en una mezcla equimolar de cada uno de ellos). Por supuesto,
aadiremos por ltimo tambin la ADN polimerasa que, en este caso, ha de ser una
polimerasa especial capaz de resistir las elevadas temperaturas a la que vamos a
someter a nuestro tubo de reaccin. Dicha ADN polimerasa es la llamada Taq-
polimerasa, aislada de la bacteria Thermus aquaticus.

Una vez tenemos todos los componentes en nuestro tubo de reaccin (Figura 1),
tenemos que favorecer de alguna forma que ocurra la sntesis de ADN. Para ello, lo
primero que debemos hacer es facilitar la desnaturalizacin del ADN. A continuacin,
permitir el alineamiento de los primers (apareamiento con su regin complementaria)
y, por ltimo, facilitar que la polimerasa lleve a cabo la sntesis de ADN utilizando
como cebadores los extremos 3 de los primers utilizados. As, nuestra reaccin
constara de 3 pasos:
1. Desnaturalizacin. Se conseguira elevando la temperatura del tubo de reaccin
hasta 94oC, durante, por ejemplo, un minuto (este tiempo puede variar entre
minuto y 2 minutos)
2. Alineamiento. Se desciende la temperatura hasta una temperatura que puede
oscilar entre 40 oC y 60 oC (dependiendo de diversos parmetros como la secuencia
de los primers, su especificidad,...). La duracin de este paso puede oscilar entre
minuto y 2 minutos.
3. Extensin. Se vuelve a aumentar la temperatura hasta los 72 oC y se deja actuar a
la Taq polimerasa durante 1 2 minutos.
Estos tres pasos constituyen un ciclo. La repeticin de este ciclo unas 40 veces, por
ejemplo, permite obtener, como resultado de un experimento de amplificacin,
millones de copias del fragmento de inters.
Todo esto, por supuesto, se realiza de forma automatizada. Para ello, los tubos de
reaccin se introducen en un termociclador que de forma automtica realiza los 40
ciclos de amplificacin.
ADNc
Se puede construir una biblioteca que represente los genes que se estn transcribiendo
en una clula eucaritica en un momento dado, utilizando el mRNA aislado de esa
clula. Casi todas las molculas de mRNA eucaritico tienen una cola de poli-A en
su extremo 3'. Primero, se hibrida la poblacin de molculas de mRNA que tienen
colas de poli-A 3' con oligo-dT (DNA corto de cadena sencilla formado slo por
desoxitimidina).
La secuencia de oligo-dT hibrida con la cola de poli-A, y sirve de cebador para la
sntesis de una cadena complementaria de DNA utilizando la enzima
retrotranscriptasa. Esta enzima es una DNA polimerasa dependiente de RNA que
copia un molde de RNA de cadena sencilla en un DNA de cadena sencilla. El
resultado es un dplex RNA DNA de doble cadena. La cadena de RNA se elimina
tratndola con la enzima ribonucleasa H. Entonces, la cadena sencilla de DNA se
utiliza como molde para sintetizar la cadena complementaria de DNA, utilizando la
DNA polimerasa I. El extremo 3' de la cadena sencilla de DNA se dobla sobre s
mismo formando una horquilla (un lazo), por lo que puede servir de cebador para
sintetizar la segunda cadena. El resultado es un DNA dplex con las cadenas unidas
por un extremo. La horquilla puede abrirse utilizando la enzima nucleasa S1
obtenindose una molcula de DNA de doble cadena (denominada DNA
complementario o cDNA), cuya secuencia nudeotdica deriva de una molcula de
RNA.
Si se aade un trozo corto de DNA con sitios de restriccin en cada uno de sus
extremos, el cDNA puede clonarse. Este sitio de clonacin puede cortarse con la
enzima de restriccin adecuada, produciendo extremos cohesivos, lo que permite que
el cDNA se inserte en el sitio de restriccin de un vector plasmdico o fgico.
Una biblioteca de cDNA es diferente a una biblioteca genmica ya que representa
slo un subconjunto de todos los genes del genoma, no contienen las secuencias
promotoras adyacentes al gen y tampoco contienen los intrones, ya que stos han sido
eliminados del pre-mRNA durante la maduracin del mismo. Las bibliotecas de
cDNA utilizan mRNA como punto de partida, de manera que slo representan a las
secuencias que se estn expresando en un tipo celular, en un tejido, o en un estadio
concreto del desarrollo embrionario. La decisin de construir una biblioteca genmica
o de cDNA depende del problema planteado. Si se est interesado en un gen
particular, podra ser ms fcil preparar una biblioteca de cDNA del tejido en el que
se expresa dicho gen. Por ejemplo, los glbulos rojos producen grandes cantidades de
hemoglobina, y la mayora del mRNA de estas clulas es mRNA de la -globina. Una
biblioteca de cDNA preparada utilizando mRNA aislado de glbulos rojos permite
aislar con facilidad un gen de la globina. Si nos interesasen las secuencias reguladoras
adyacentes al gen de la globina, necesitaramos construir una biblioteca genmica, ya
que estas secuencias reguladoras no se encuentran en el mRNA de la globina, y por
lo tanto no estaran representadas en la biblioteca de cDNA.
Produccin de cDNA a partir de mRNA. Puesto que muchos mRNA eucariticos
tienen una cola poliadenilada de longitud variable, en su extremo 3', un
oligonucletido poli-dT corto puede hibridarse a ella. El poli-dT acta de cebador de
la enzima retrotranscriptasa, que utiliza al mRNA como molde para sintetizar una
cadena de DNA complementaria. Se forma una horquilla caracterstica al terminarse
la sntesis de la cadena de DNA. Se elimina el mRNA por tratamiento alcalino del
complejo, y se utiliza la DNA polimerasa para sintetizar la segunda cadena de DNA.
La nucleasa S1 se utiliza para abrir la horquilla; el resultado es una molcula de cDNA
de doble cadena que puede clonarse en un vector adecuado, o utilizarse como sonda
para rastrear una biblioteca.
Sondas de ADN
Una sonda es un fragmento de ADN (o raramente ARN) de pequeo tamao
(normalmente entre 100 y 1000 bases) usado en biologa molecular como herramienta
para detectar la presencia de ADN o ARN de secuencia complementaria parecida o
igual.
En su uso, la sonda se une a la secuencia diana monocatenaria (ADN1c o ARN)
mediante un mecanismo de hibridacin que forma una estructura bicatenaria, una de
las hebras pertenece a la sonda, y la otra a la secuencia diana. Esta unin se establece
porque tanto la sonda como la diana tienen secuencias en parte o totalmente
complementarias, formndose pares de bases complementarias.
En definitiva una sonda de ADN es un mtodo molecular que consta de una secuencia
de ADN de un microorganismo de inters, que puede ser utilizada para detectar un
ADN homlogo o secuencias de ARN. El ADN de la sonda se hibrida con el ADN
del organismo que se quiere detectar, unin que como puedes suponer, se establece
porque ambas molculas tienen secuencias complementarias, formndose as pares de
bases complementarias. Para conocer si esto ha sucedido se utilizan marcadores
fciles de detectar en un equipo que mida el cambio. Estos marcadores pueden ser de
varios tipos. Los ms utilizados son los siguientes:
Radioistopos: para marcar radiactivamente la sonda se utilizan nucletidos que
contienen alguno de sus tomos un istopo radiactivo. Estos marcadores son muy
sensibles, pero entraan ciertos riesgos para la salud.
Anticuerpos: en este caso las sondas se marcan utilizando nucletidos que llevan
unida una molcula llamada digoxigenina. A esta molcula se unen anticuerpos
especficos que llevan asociados un compuesto luminiscente que permite conocer el
resultado del anlisis.
Una de las aplicaciones de las sondas de ADN es el anlisis de alimentos, ya que es
un mtodo rpido, especfico y sensible, que se puede utilizar por ejemplo para
detectar la presencia de patgenos y de organismos modificados genticamente.
Independientemente de la naturaleza de la sonda utilizada (ADN o ARN), las
hibridaciones efectuadas sobre cidos nucleicos inmovilizados en membranas o in
situ, sern de tipo Southern cuando se use ADN como diana a detectar y de tipo
northern cuando la diana a detectar sea mayoritariamente de ARN.
Southern blot, hibridacin Southern o, simplemente, Southern es un mtodo de
biologa molecular que permite detectar la presencia de una secuencia de ADN en una
mezcla compleja de este cido nucleico. Para ello, emplea la tcnica de electroforesis
en gel de agarosa con el fin de separar los fragmentos de ADN de acuerdo a su
longitud y, despus, una transferencia a una membrana en la cual se efecta la
hibridacin de la sonda. Su nombre procede del apellido de su inventor, un bilogo
ingls llamado Edwin Southern.
Northern blot es una tcnica de deteccin de molculas de cido ribonucleico (ARN)
de una secuencia dada dentro de una mezcla compleja (por ejemplo, un ARN
mensajero para un pptido dado en una extraccin de ARN total). Para ello, se toma
la mezcla de ARN y se somete a una electroforesis en gel a fin de separar los
fragmentos en base a su tamao. Tras esto, se transfiere el contenido del gel, ya
resuelto, a una membrana cargada positivamente en la cual se efecta la hibridacin
de una sonda molecular marcada radiactiva o qumicamente. El nombre de la tcnica
deriva de la tcnica anterior. El northern blot fue desarrollado en 1977 por James
Alwine, David Kemp y George Stark en la Universidad de Stanford.
Sntesis Gnica
El servicio de Sntesis de Genes de Biomedal est diseado para sintetizar genes de
novo a partir de la secuencia deseada. En contraste con la sntesis de oligonucletidos,
con la que solo se puede obtener ADN de cadena sencilla de hasta 140 pb
aproximadamente, con la Sntesis de Genes se pueden producir rutinariamente genes
sintticos de doble cadena de hasta 3.000 pb
Gel Electroforesis
La electroforesis en gel es un grupo de tcnicas empleadas por los cientficos para
separar molculas basndose en propiedades como el tamao, la forma o el punto
isoelctrico. La electroforesis en gel se utiliza generalmente con propsitos analticos,
pero puede ser una tcnica preparativa para purificar molculas parcialmente antes de
aplicar espectrometra de masas, PCR, clonacin o secuenciacin de ADN
Secuencia de ADN
En cierto sentido, la caracterizacin definitiva de un segmento de DNA clonado es la
determinacin de su secuencia de nucletidos. La capacidad de secuenciar DNA
clonado ha permitido grandes avances en el conocimiento de la estructura gnica y de
los mecanismos de regulacin. Aunque desde la dcada de los 40 hay tcnicas que
permiten determinar la composicin de bases del DNA, fue en la dcada de los 60
cuando se desarrollaron los mtodos para determinar la secuencia de los nucletidos.
En 1965, Robert Holley determin la secuencia de una molcula de tRNA que
contena 74 nucletidos. Se necesit un ao de esfuerzo para realizar este trabajo. En
la dcada de los 70 se desarrollaron mtodos ms eficientes de secuenciacin y,
actualmente, en un laboratorio de Biologa Molecular, es posible secuenciar ms de
1.000 bases en una semana.
Un mtodo de secuenciacin de DNA diseado por Alan Maxam y Walter Gilbert
utiliza productos qumicos para cortar el DNA. Este mtodo se utiliz para determinar
la secuencia de bases de los 4.362 nucletidos del plsmido pBR322. El segundo
mtodo, que es el que generalmente se utiliza, lo desarrollaron Frederick Sanger y sus
colaboradores. El mtodo de Sanger se basa en la elongacin 5' 3' de las molculas
de DNA por la DNA polimerasa. Ambas estrategias generan un conjunto de
molculas de DNA de cadena sencilla de diferentes longitudes. Para determinar la
secuencia de los nucletidos en un segmento de DNA, ambos mtodos utilizan una
serie de cuatro reacciones, realizadas en tubos separados. Estas secuencias, cuya
diferencia en tamao es de un solo nucletido, se separan por electroforesis en gel en
cuatro carriles adyacentes. El resultado es una serie de bandas que forman un patrn
parecido a una escalera. La secuencia puede leerse directamente del patrn de bandas
de los cuatro carriles. Los secuenciadores automticos de DNA utilizan colorantes
fluorescentes en vez de sondas radioactivas. Se utilizan cuatro colorantes,
produciendo un patrn de picos de colores que, al leerlos, proporcionan la secuencia
de DNA.

La secuenciacin de DNA proporciona informacin de la organizacin de los genes


y de los sucesos mutacionales que alteran a los genes y a los productos gnicos,
confirmando la conclusin de que los genes y las protenas son molculas colineares.
La secuenciacin tambin se ha utilizado para examinar la organizacin de las
regiones reguladoras que flanquean los genes procariticos y eucariticos, y para
deducir la secuencia de aminocidos de las protenas. El gen de la fibrosis qustica
(CF), una enfermedad gentica humana autosmica recesiva, se identific clonando
y secuenciando el DNA de una regin del brazo largo del cromosoma 7. Como no se
conoca el producto proteico de este gen, se utiliz la secuencia de DNA para
identificar una regin codificadora. Se utiliz la secuencia de DNA de esta regin
para generar una probable secuencia de 1.480 aminocidos.
Esta secuencia se utiliz para buscar secuencias aminoacdicas de protenas conocidas
en las bases de datos, lo que permiti inferir que la protena CF tiene caractersticas
similares a las protenas de membrana que desempean una funcin en el transporte
de iones. Nuevos experimentos confirmaron que el producto del locus de la fibrosis
qustica es una protena de membrana que regula el transporte de iones cloro por la
membrana plasmtica. En la mayora de casos de CF, el gen mutante tiene una
secuencia de DNA alterada que causa la produccin de una protena defectuosa.
Adems de identificar los defectos del DNA que causan los fenotipos mutantes, la
secuenciacin de DNA tambin se utiliza para examinar la organizacin de un gen (el
nmero de intrones y de exones y sus lmites), para proporcionar informacin de la
naturaleza y de la funcin de las protenas codificadas por los genes, como el tamao,
el nmero y tipo de dominios (regin transmembrana, de unin al DNA), y de la
relacin con protenas similares y con protenas de otros organismos.

BIBLIOGRAFA
pea, a., arrollo, a., armandogomez, & Lopez, r. (2004). Bioquimica. mexico.
rodes, J., pique, J., & trilla, n. (2007). libros de salud del hospital clinico de barcelona y
fndacion bbva. barcelona: ISBN.
UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADMICA DE CC. AGR.
ESCUELA DE INGENIERA AGRONMICA

GENTICA

CMO LOS VIRUS CAUSAN MUTACIONES EN LAS


PLANTAS?

Estudiantes: Tinoco Azanza Victor Alfonso

Ciclo: Quinto A

Fecha: 24 de Enero del 2017

Docente: Ing. Jos Quevedo


MACHALA - EL ORO - ECUADOR

CMO LOS VIRUS CAUSAN MUTACIONES EN LAS PLANTAS?


Los virus afectan a un gran nmero de organismos en el reino vegetal, se han descrito
en hongos, algas, helechos, y en todo tipo de plantas como semillas. Un virus en
partcula puede tener un rango de hospederos restringido o grande. En este ltimo
caso nos indicara que el virus ha estado asociado con las plantas huspedes
posiblemente por mucho tiempo coevolucionando con ellas. Esta hiptesis se
refuerza por el hecho de que en las comunidades vegetales naturales raramente se
encuentran plantas con sntomas de enfermedades virales lo cual no indica que no hay
virus presentes. Se ha observado que cuando se abren reas nuevas a la agricultura o
se tala u bosque para sembrar cultivos tradicionales las enfermedades virales pronto
aparecen. Una de las posibles explicaciones es que estas virosis se encuentran
infectando a plantas de la comunidad nativa, en las cuales se multiplican sin causarle
mayor dao, ya que de no ser as dichas plantas no podran competir y habran
desaparecido en el proceso de evolucin de la comunidad vegetal. En general los virus
conviven con sus hospederos originales sin causarle un dao apreciable; muchos de
los problemas virales graves en realidad son ocasionados por la manipulacin humana
del medio ambiente, por las prcticas culturales y por la alteracin gentica de las
especies vegetales que el hombre cultiva. (larios, 1987)
Los virus se encuentran en un proceso continuo de cambio, debido a mutaciones,
adaptacin selectiva, y pseudorecombinacion. Las tasas mutaciones generalmente son
ms altas en los virus que de otros organismos debido al gran nmero de partculas
virales que se encuentran en un planta infectada. Este nuero puede alcanzar billones
de partcula, en consecuencia es ms factible que ocurran un mayor nmero de
mutaciones que otros organismos. (larios, 1987)
Para poder manejar cualquier enfermedad es bsico conocer su agente causar. Esto es
aun crtico en el caso delos virus ya que virus diferentes puede causar sntomas
similares y el mismo virus inducir diferentes tipos de sntomas en plantas diferentes.
Otra consideracin que hay que tomar en cuenta es el nmero de cepas diferentes que
puede tener un virus. (larios, 1987)
BIBLIOGRAFIA
larios, j. (1987). fundamentes y componentes del manejo integado de plagas. el salbador.

UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA


UNIDAD ACADMICA DE CC. AGR.
ESCUELA DE INGENIERA AGRONMICA

GENTICA

APLICACIN DE LA MUTAGENESIS INDUCIDA PARA EL


MEJORAMIENTO GENETICO DE CULTIVOS

Estudiantes: Tinoco Azanza Victor Alfonso

Ciclo: Quinto A

Fecha: 24 de Enero del 2017

Docente: Ing. Jos Quevedo


MACHALA - EL ORO - ECUADOR

APLICACIN DE LA MUTAGENESIS INDUCIDA PARA EL


MEJORAMIENTO GENETICO DE CULTIVOS
Todas las formas de vida que hoy existen son el resultado de tres factores:
La mutacin, fuente fundamental de las variaciones hereditarias.
Los factores ambientales, que influyen en la seleccin de las mutaciones que
sobreviven y se reproducen.
El tiempo, durante el cual el genotipo y el medio ambiente estn en constante
interaccin y se produce el cambio evolutivo.
Las variaciones genticas presentes en la naturaleza no han sido originadas por
mutaciones espontneas, sino ms bien por la recombinacin de genotipos en
poblaciones y por su accin recproca constante con las fuerzas del medio ambiente.
Las plantas verdes son la fuente principal de recursos que utiliza el hombre para
satisfacer sus necesidades de alimento, ropa y energa. El hombre prehistrico, que
dependa de sus habilidades como cazador, recurri a la abundante vegetacin natural
para obtener frutas, semillas, tubrculos y otros alimentos nutritivos y no venenosos.
(novack & bruner)
En la medida en que aumentaron las poblaciones humanas fue necesario procurar
fuentes de alimentos mayores y ms seguras, y poco a poco se fueron desarrollando
sistemas de produccin basados en la domesticacin de las plantas. Histricamente,
la domesticacin de cultivos se ha visto influida por las condiciones ecolgicas y
agrcolas, as como por la preferencia por distintos alimentos. (novack & bruner)
Por lo general, se han seleccionado para el cultivo los genotipos que se han adaptado
a una amplia gama de condiciones climticas y edficas. La obtencin de cultivos con
mayor rendimiento facilit el crecimiento demogrfico, los asentamientos de
poblaciones sedentarias y su ulterior desarrollo. Para determinar los cultivos que
deban ser domesticados no slo se tena en cuenta el nmero de semillas o el tamao
de los frutos, sino tambin su sabor, palatabilidad y otros factores. (novack & bruner)
De las casi 200 000 especies de plantas que existen en el mundo slo una pequea
parte puede ser domesticada; el hombre ha empleado unas 3000 como alimentos,
fibras, especias y otros, para finalmente domesticar 200 como cultivos. De ellas slo
15 a 20 constituyen cultivos alimentarios de gran importancia.
El mtodo empleado para desarrollar nuevas variedades de plantas para su cultivo y
consumo humano se ha dado en llamar fitotecnia, mtodo que al principio se basaba
primordialmente en la seleccin, es decir, en ia seleccin entre plantas buenas y malas.
El hombre aprendi no slo a comer los "mejores frutos" sino tambin a sembrar las
semillas de algunos de ellos.
La gentica se convirti en una ciencia bsica de la fitotecnia despus que el monje
moravo J.G. Mendel descubri las leyes de la herencia a mediados del siglo XLX.
Posteriormente, con el desarrollo del mtodo de hibridacin, la fitotecnia evolucion
an ms. Su objetivo era combinar en una planta las mejores propiedades de varias
plantas en vez de slo hacer una seleccin entre plantas buenas y malas. Este mtodo,
que a menudo se complementa con el uso del plasma germinal obtenido por mutacin
inducida, ha llegado a ser el ms empleado para la multiplicacin de las plantas por
reproduccin sexual. (novack & bruner)
No obstante, algunos cultivos, entre ellos el banano, la manzana, la yuca y la caa de
azcar, se reproducen de forma vegetativa, sobre todo los que son totalmente estriles
sin semillas. Para este importante grupo ha sido preciso crear otros mtodos, a saber,
tcnicas de manipulacin con tejido somtico, fitotecnia por mutaciones y
biotecnologa.
Fitotecnia por mutaciones

Si bien la fitotecnia exige la variacin gentica de las caractersticas tiles para


mejorar los cultivos, a menudo no se logra la variacin deseada. En estos casos pueden
emplearse agentes mutgenos, como la radiacin y algunos productos qumicos, para
inducir mutaciones y generar variaciones genticas de las cuales puedan seleccionarse
los mutantes deseados. La induccin de mutaciones ha resultado ser un mtodo eficaz
para lograr variaciones dentro de un tipo de cultivo, ya que ofrece la posibilidad de
inducir caractersticas deseadas que no se pueden hallar en la naturaleza o se han
perdido durante el proceso evolutivo. (novack & bruner)
Cuando los fitogenetistas no encuentran en el banco de genes de que disponen, un
gen, o genes, resistente a una enfermedad en particular o tolerante a los cambios del
medio ambiente, no tienen otra opcin evidente sino tratar de inducir la mutacin. El
tratamiento con agentes mutgenos altera los genes o divide los cromosomas. La
mutacin de genes ocurre de forma natural como un error en la reproduccin del cido
desoxirribonucleico (ADN). Algunos de estos tipos de error pueden subsanarse, pero
otros pueden pasar a la prxima divisin de la clula y establecerse en el retoo de la
planta como mutaciones espontneas. Aunque no es frecuente observar mutaciones
en un gen en particular, una planta superior puede tener hasta 100 000 genes en una
clula. Ello significa que cada planta puede transmitir a la prxima generacin una o
ms mutaciones espontneas.
En general resulta difcil determinar las mutaciones de genes sin expresiones
fenotpicas (visibles). En consecuencia, la variacin gentica parece ser bastante
limitada y los cientficos tienen que recurrir a la induccin de mutaciones. No se
conoce otra forma econmica de alterar los genes, salvo esperar con paciencia que se
produzcan mutaciones espontneas. La induccin artificial de mutaciones por medio
de la radiacin ionizante data de principios del siglo XX, pero no fue hasta unos 30
aos despus que se demostr que estas transformaciones podan emplearse en la
fitotecnia. En los intentos iniciales parainducir mutaciones en las plantas se utiliz
fundamentalmente la tcnica de rayos X; ms tarde, en los comienzos de la "era
atmica", se emplearon las radiaciones gamma y de neutrones, ya que estos tipos de
radiacin ionizante podan obtenerse fcilmente en los centros de investigacin
nuclear recin creados. En esta fase inicial de induccin de mutaciones se realizaron
ingentes esfuerzos para determinar las condiciones ptimas en que podra lograrse la
reproductibilidad.
En las investigaciones se trat, sobre todo, de transformar la induccin de mutaciones
"aleatoria" en una mutagenesis ms especfica para obtener mutaciones ms
convenientes y tiles desde el punto de vista econmico. Aun as, no se lograron las
alteraciones deseadas en el espectro de mutantes. La dificultad estaba en que a medida
que aumentaba la dosis de radiacin, se incrementaba el deterioro de la planta y
disminua la frecuencia de mutaciones econmicamente tiles. Ello hizo que los
cientficos buscaran mutantes potencialmente superiores y que se hallaran nuevos
mtodos de tratamiento por radiaciones y agentes qumicos con propiedades
mutagnicas. (novack & bruner)
Biotecnologa de las plantas
La reproduccin de cultivares de plantas mejorados se basa en dos principios: la
variacin gentica y la seleccin. Este proceso es en extremo laborioso y lento y
requiere mucho trabajo intelectual y manual (Vase el recuadro). Sin embargo, el
desarrollo del cultivo de clulas tejidos y vegetales que ha tenido lugar en los ltimos
20 aos ha permitido transferir al laboratorio parte del trabajo de reproduccin que se
llevaba a cabo sobre el terreno. Como resultado de las amplias investigaciones
realizadas han surgido nuevas ramas de la fitotecnia, a saber, la "biotecnologa de las
plantas" y la "ingeniera gentica", ciencias que se basan en la totipotencia celular, o
sea, la capacidad para regenerar plantas totalmente desarrolladas a partir de rganos
aislados (meristemas), cortes de tejidos, clulas individuales y protoplastos.
Las partes aisladas de las plantas se cultivan aspticamente en tubos de ensayo con
medios artificiales de conocida composicin qumica (cultivo in vitro) y ms tarde,
bajo un estricto control, se transforman en plntulas que posteriormente son
transferidas al suelo hasta que alcanzan su madurez. El cultivo de tejidos se ha
explotado comercialmente para la micropropagacin de cepas de plantas hortcolas
libres de enfermedades (por ejemplo, fresas, patatas, y plantas ornamentales). Las
tcnicas in vitro resultan tambin de gran utilidad en diversas etapas del proceso de
reproduccin, como la conservacin del plasma germinal, la propagacin clonal y la
hibridacin a distancia. Las tcnicas isotpicas y de fitotecnia por mutaciones
radioinducidas combinadas con el cultivo de tejidos han hecho importantes aportes a
la fitotecnia e introducido nuevas tcnicas para inducir la variacin gentica al
mejorar la tecnologa de seleccin y acelerar el proceso de reproduccin. (Vase el
recuadro).
Otro mtodo conocido como antera, o cultivo de polen, permite regenerar plantas a
partir de gametos masculinos con la mitad de cromosomas (haploides). A diferencia
de las plantas que tienen todo su contenido cromosmico (diploides), el empleo de
haploides en la fitotecnia por mutaciones es ventajoso, ya que permite detectar las
mutaciones justo despus de ser inducidas. Se ha demostrado que los mtodos basados
en el uso de haploides aceleran considerablemente la reproduccin de nuevas
variedades de arroz, cebada y verduras, por ejemplo. Los procedimientos de
ingeniera gentica permiten transferir el material gentico (ADN) de la clula de una
especie a la de otro organismo no afn genticamente. Por ejemplo, una porcin de
ADN de una clula bacteriana no puede integrarse al genoma de una clula vegetal
para formar una planta transgnica.
El nuevo ADN (gen) se expresa en el fenotipo de la planta regenerado a partir de la
clula transgnica. En la ingeniera gentica se aplican tcnicas nucleares, en que se
utilizan bases de cido nucleico marcadas con istopos para identificar y aislar genes
apropiados para la transferencia; tambin se emplean como sistemas de vectores para
introducir genes en la clula receptora y detectar nuevos materiales genticos en el
organismo receptor. Gracias a la ingeniera gentica ya se han obtenido plantas con
otras caractersticas satisfactorias como, por ejemplo, resistencia a los insectos y a las
enfermedades vricas, y con mejores propiedades de maduracin. Empero, el
entusiasmo inicial se est viendo afectado por las discusiones cada vez ms acaloradas
en torno a los posibles peligros que entraa la propagacin de plantas transgnicas
para el medio ambiente. Otro aspecto que ha suscitado preocupacin es la
comercializacin de esta tecnologa y el acceso a ella de los pases en desarrollo. Los
ltimos descubrimientos en la biotecnologa de las plantas han originado grandes
inversiones de capital y la concentracin de recursos humanos altamente calificados
en el sector comercial de muchos pases industrializados. Mientras tanto, el
conocimiento cientfico y sus aplicaciones tecnolgicas estn siendo objeto cada vez
ms de legislaciones comerciales relacionadas con el registro de patentes, el secreto
industrial y la concesin de licencias. Como resultado de ello, a los pases en
desarrollo les ha sido difcil tener acceso a los resultados biotecnolgicos que
necesitan aplicar en sus programas nacionales. (novack & bruner)
En este contexto desempean una importante funcin los organismos especializados
de las Naciones Unidas, incluidos la Organizacin de las Naciones Unidas para la
Agricultura y la Alimentacin (FAO), la Organizacin de las Naciones Unidas para
la Educacin, la Ciencia y la Cultura (UNESCO), la Organizacin de las Naciones
Unidas para el Desarrollo Industrial (ONUDI) y el OIEA. Se han emprendido
programas en los pases en desarrollo con el principal objetivo de identificar y
transferir las biotecnologas adecuadas y capacitar al personal, fortalecindose as la
capacidad nacional de investigacin y desarrollo en esta esfera.
BIBLIOGRAFA
novack, & bruner. (s.f.). Fitotecnia: Tecnologa de mutacin inducida para el
mejoramiento de los cultivos. En novack, & bruner.
CONCLUSIN
La gentica para la agronoma es una de las bases fundamentales, por medio de esta muy
importante ctedra se pueden aprender muchos temas con respecto a la ciencia moderna
y ciencia del hoy, es muy trascendente, ya que nos da a conocer nuestra evolucin y
nacimiento, de por qu somos como somos, nos explica nuestras diferencias y semejanzas
morfolgicas, qumicas, y ms. Pero su uso conlleva como todo, cosas buenas y malas,
existiendo la manipulacin de los genes no se sabe en qu se puede llegar a acabar, las
investigacin a veces desbordan en el caos.

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