Validacion Preliminar Del Proceso de Llenado Aseptico - Vicar - Tesis PDF

VALIDACION PRELIMINAR DEL PROCESO DE LLENADO ASPTICO EN EL REA
DE INYECTABLES DEL LABORATORIO VICAR FARMACEUTICA S.A.
JEAN PAUL RIOS AFANADOR
TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial
Para optar al titulo de
MICROBIOLOGO INDUSTRIAL
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
Bogota D.C.
Julio 6 de 2007
1
NOTA DE ADVERTENCIA
Artculo 23 de la Resolucin N 13 de Julio de 1946
La Universidad no se hace responsable por los conceptos emitidos por sus alumnos en
sus trabajos de tesis. Solo velar por que no se publique nada contrario al dogma y a la
moral catlica y por que las tesis no contengan ataques personales contra persona
alguna, antes bien se vea en ellas el anhelo de buscar la verdad y la justicia.
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VALIDACION PRELIMINAR DEL PROCESO DE LLENADO ASEPTICO POR
FILTRACION EN EL REA DE INYECTABLES DEL LABORATORIO VICAR
FARMACEUTICA S.A.
Jean Paul Rios Afanador
APROBADO
______________________ _____________________________
Nubia Castro, Microbiloga Cindy Fernndez, Microbiloga Ind.
Directora del Proyecto Codirectora del Proyecto
_______________________________ ________________________
Lorena Valencia, Microbiloga Industrial Janeth Arias, Bacteriloga Msc.
Jurado del Proyecto Jurado del Proyecto
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VALIDACION PRELIMINAR DEL PROCESO DE LLENADO ASEPTICO POR
FILTRACION EN EL REA DE INYECTABLES DEL LABORATORIO VICAR
FARMACEUTICA S.A.
Jean Paul Rios Afanador
APROBADO
__________________________ _______________________________
Angela Umaa Muoz, M. Phil David Gmez Mndez, Microbilogo
Decana Acadmica Director de Carrera
4
DEDICATORIA
Dedico este trabajo a mis padres Jos Alfredo Rios y Myriam Afanador que han sido un
apoyo incondicional y sin los cuales habra sido imposible llevar a feliz termino la
realizacin de mi proyecto de grado, por su dedicacin, esmero, sacrificio y apoyo moral
y econmico. Igualmente dedico este trabajo a mi novia y futura esposa Lizeth Barragn,
que siempre me ha acompaado y alentado en la realizacin de este proyecto.
5
AGRADECIMIENTOS
Primero que todo quiero dar gracias al Dios de toda la creacin, a su inmenso amor que
fue manifestado a nosotros a travs de su hijo Jesucristo, por que el siempre me ha
acompaado en cada situacin de mi vida.
Agradezco a VICAR FARMACEUTICA S.A. y sus colaboradores por haberme brindado la

oportunidad de realizar mi proyecto de grado dentro de sus instalaciones y haber
brindado todos los medios econmicos y recursos humanos de alta calidad para llevar a
buen trmino la realizacin de este proyecto de grado y la validacin para esta empresa
patrocinadora. En particular quiero agradecer dentro de la empresa a la Doctora Nubia
Castro, Jefe de Aseguramiento de Calidad y Directora de este proyecto de grado, a la
Doctora Ana Maria Gonzles, Jefe de Microbiologa y al Doctor Oscar Torres, Jefe de
Produccin, y a los operarios del rea de inyectables, por su inmensa colaboracin,
soporte tcnico y tiempo dedicado para lograr los objetivos propuestos.
Todo lo puedo en Cristo que me fortalece
6
TABLA DE CONTENIDO
RESUMEN ............................................................................................... 11
ABSTRACT ............................................................................................. 12
1. INTRODUCCION ................................................................................. 13
2. MARCO TEORICO .............................................................................. 14
2.1 Validacin de Procesos .......................................................................... 15
2.2 Esquema General de Validacin de procesos...................................... 16
2.3 Elementos de la Validacin de Procesos.............................................. 17
2.3.1 Calificacin Operacional.................................................................................. 17
2.3.2 Documentacin ............................................................................................... 17
2.3.3Exactitud........................................................................................................... 18
2.3.4 Precisin.......................................................................................................... 18
2.3.5 Robustez ......................................................................................................... 18
2.4 Tipos de Validacin................................................................................. 18
2.4.1 Validacin Prospectiva .................................................................................... 18
2.4.2 Validacin retrospectiva de procesos ............................................................ 19
2.5 Validacin del Proceso de Llenado Asptico en reas Estriles....... 21
2.5.1 Simulacin de Procesos.................................................................................. 21
2.5.2 Diseo de estudio............................................................................................ 21
2.5.3 Prerrequisitos para la corrida de las Pruebas ................................................. 22
2.5.4 Frecuencia y Nmero de Corridas de La Prueba............................................ 23
2.5.5 Duracin de las pruebas ................................................................................. 24
2.5.6 Tamao de Corridas de Prueba ...................................................................... 25
2.5.7 Llenado Manual............................................................................................... 26
2.5.8 Velocidad de la lnea ....................................................................................... 26
2.5.9 Condiciones ambientales ................................................................................ 26
2.5.10 Medios de Cultivo......................................................................................... 27
2.5.11 Incubacin y Anlisis de Unidades Envasadas con Medios de Crecimiento 28
2.5.12 Eficacia de filtracin ...................................................................................... 30
2.5.12 Esterilizacin de Equipo, Contenedores, y Cierres....................................... 34
2.6 rea de Fabricacin y Envase de Productos Estriles Inyectables de
VICAR FARMACEUTICA S.A. ....................................................................... 34
2.6.1 Suministro de Aire ........................................................................................... 34
2.6.2 Acceso de Personal ........................................................................................ 34
2.6.3 Esterilizacin de Material ................................................................................ 34
2.6.4 Control de Autoclave ....................................................................................... 35
2.6.5 Control Ambiental............................................................................................ 35
2.6.6 Control de Superficies Planas ........................................................................ 36
2.6.7 Envase de Soluciones Inyectables ................................................................. 36
2.6.8 Prueba de Esterilidad de Producto Terminado por Filtracin ......................... 37
2.6.9 Anlisis Material Estril de Envase ................................................................. 38
2.6.10 Especificaciones de los Parmetros de Anlisis Microbiolgicos:................ 38
2.6.11 Desinfectantes Empleados en el rea .......................................................... 39
3. FORMULACION DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACION..................... 40
3.1 Formulacin del Problema ..................................................................... 40
3.2 Justificacin de la Investigacin ........................................................... 40
4. OBJETIVOS ........................................................................................ 42
7
Objetivo General............................................................................................ 42
Objetivos Especficos ................................................................................... 42
5. MATERIALES Y METODOS ............................................................... 43
5.1 Diseo de Investigacin ......................................................................... 43
5.2 Poblacin de Estudio y Muestra ............................................................ 43
5.3 Variables de Estudio ............................................................................... 44
5.4 Mtodos.................................................................................................... 44
5.4.1 Implementacin del Diseo de Estudio........................................................... 44
5.4.2 Pruebas Preliminares ...................................................................................... 46
5.4.3 Proceso de Llenado Asptico (Media Fill)....................................................... 48
5.4.4 Tratamiento de los resultados de Controles Microbiolgicos del rea Estril 50
5.5 Recoleccin de la Informacin............................................................... 51
5.6 Anlisis de la Informacin ...................................................................... 51
5.6.1 Anlisis Estadsticos........................................................................................ 52
5.6.2 Estadstica Matemtica (Anlisis numrico) ................................................... 52
6. RESULTADOS .................................................................................... 56
6.1 Criterios de Crecimiento por turbidez (Biomasa apreciable).............. 56
6.2 Calificacin de las Instalaciones (IQ) (Anexo E) .................................. 57
6.2.1 Verificacin de las condiciones de Operacin por Equipo.............................. 57
6.2.2 Calificacin de la incubadora de la prueba de Llenado Asptico ................... 57
6.2.3 Calificacin de desinfectantes usados durante la prueba de Llenado Asptico
.................................................................................................................................. 58
6.2.4 Condiciones de Operacin de Medidores y Vlvulas ..................................... 59
6.3 Calificacin Operacional (OQ) (Anexo F):............................................. 59
6.3.1 Prueba No. 1 ................................................................................................... 59
6.3.2 Prueba No. 2 ................................................................................................... 62
6.3.3 Prueba No. 3 ................................................................................................... 64
6.3.4 Anlisis Estadstico por Puntos de Muestreo.................................................. 66
6.3.5 Reproducibilidad del Proceso de Esterilidad (Guantes y Uniformes) ............. 69
6.3.6 Repetibilidad del Proceso de Esterilidad (Guantes y Uniformes) ................... 69
6.4 Calificacin de Desempeo (PQ) (Anexo G) ......................................... 69
6.4.1 Porcentaje de Contaminacin prueba No. 1 ................................................... 70
6.5 Imgenes del Envase Manual del rea de Inyectables........................ 71
6.6 Discusin de Resultados........................................................................ 74
7. CONCLUSIONES ................................................................................ 81
8. RECOMENDACIONES........................................................................ 83
9. REFERENCIAS ................................................................................... 86
10. ANEXOS............................................................................................ 88
ANEXO A ........................................................................................................ 88
ANEXO B ........................................................................................................ 88
ANEXO C ........................................................................................................ 90
8
ANEXO D ........................................................................................................ 91
ANEXO E ........................................................................................................ 92
ANEXO F......................................................................................................... 97
ANEXO G ...................................................................................................... 103
ANEXO H ...................................................................................................... 107
9
LISTA DE TABLAS
TABLA NO. 1 PUNTOS DE MUESTREO DEL REA DE PREPARACIN Y ENVASE ESTRIL ______36
TABLA NO. 2 CLASIFICACIN DE LOS PRODUCTOS ENVASADOS EN EL REA ESTRIL ________37
TABLA NO. 3 CONTROLES MICROBIOLGICOS EN EL REA ESTRIL______________________38
TABLA NO. 4. MICROORGANISMOS DE ENSAYO PARA EL MEDIO TSB _____________________47
TABLA NO. 5 RESUMEN DE NDICES DE CAPACIDAD DEL PROCESO ______________________54
TABLA NO. 6 VALORES DE LOS NDICES SEGN LAS VARIABLES _________________________54
TABLA NO. 7 RESULTADO PROMOCIN DE CRECIMIENTO ______________________________56
TABLA NO. 8 CONDICIONES DE OPERACIN POR EQUIPO ______________________________57
TABLA NO. 9 CALIFICACIN DE LA INCUBADORA DE LAS PRUEBAS DE LLENADO ASPTICO ____58
TABLA NO. 10 CALIFICACIN DE DESINFECTANTES DE LA PRUEBA DE LLENADO ASEPTICO ____58
TABLA NO. 11 REVISIN DE MANMETROS Y VLVULAS DE LA LNEA DE ENVASE. __________59
TABLA NO. 12 ANLISIS MICROBIOLGICO DE AMBIENTES _____________________________60
TABLA NO. 13 ANLISIS MICROBIOLGICO DE SUPERFICIES ____________________________60
TABLA NO. 14 ANLISIS MICROBIOLGICO DE EQUIPOS _______________________________60
TABLA NO. 15 ANLISIS MICROBIOLGICOS DE ENVASES CONTENEDORES, MEDIO FILTRADO,
AGUA DE INYECCIN Y PRODUCTO TERMINADO _________________________________61
TABLA NO. 16 ANLISIS MICROBIOLGICO DE GUANTES Y UNIFORME OPERARIOS __________61
TABLA NO. 27 NDICE CAPACIDAD DE PROCESO _____________________________________66
TABLA NO. 28 AMBIENTES (BACTERIAS)____________________________________________67
TABLA NO. 29 SUPERFICIES (BACTERIAS) __________________________________________67
TABLA NO. 30 SUPERFICIES (MOHOS Y LEVADURAS) _________________________________68
TABLA NO. 31 EQUIPOS (BACTERIAS) _____________________________________________68
TABLA NO. 32 GUANTES DE OPERARIOS (BACTERIAS) ________________________________68
TABLA NO. 33 UNIFORMES DE OPERARIOS (BACTERIAS) ______________________________68
TABLA NO. 34 PRIMERA PRUEBA _________________________________________________69
TABLA NO. 35 SEGUNDA PRUEBA _________________________________________________69
TABLA NO. 36 TERCERA PRUEBA _________________________________________________70
TABLA NO. 37 FRASCOS ENVASADOS PRUEBA NO. 1 _________________________________71
TABLA NO. 38 FRASCOS ENVASADOS PRUEBA NO. 2__________________________________71
TABLA NO. 39 FRASCOS ENVASADOS PRUEBA NO. 3 _________________________________71
LISTA DE FIGURAS
FIGURA NO. 1 ESQUEMA DE LA VALIDACIN DE PROCESOS .........................................................16

FIGURA NO. 2 ESQUEMA GENERAL DEL PROCESO DE FILTRACIN..............................................33
FIGURA NO. 3 ESQUEMA DE UN MUESTREADOR DE AIRE RCS EN:..............................................35
FIGURA NO. 4 TRATAMIENTO DE LOS RESULTADOS DE ANLISIS MICROBIOLGICOS EN:...........50
FIGURA NO. 5 ENVASE MANUAL DE FRASCOS DE 10ML................................................................72
FIGURA NO. 6 TAPONADO FRASCO 10ML ......................................................................................72
FIGURA NO. 7 GRAFADO FRASCO DE 10ML ...................................................................................73
FIGURA NO. 8 TANQUE DE PREPARACIN DE 200L.......................................................................73
10
RESUMEN
A travs de este trabajo se realizo la validacin preliminar el proceso de Llenado

asptico en VICAR FARMACEUTICA S.A. Se llevo a cabo un estudio de diseo que fue
adaptado a las condiciones normales de produccin en el rea Estril de Inyectables de
la empresa. Este estudio se llevo a cabo incluyendo como parmetros de control de
calidad del proceso anlisis microbiolgicos de puntos de muestreo no comunes
previamente establecidos durante las tres pruebas, los cuales son indispensables para
reconocer si estos cumplen con los estndares de calidad exigidos por BPM en la
normatividad Colombiana con relacin al proceso asptico de manufactura en el rea de
envase estril. A partir de all, se determino cuales pueden ser los puntos crticos en este
proceso y que grado de confianza se obtiene en la esterilidad de los productos a partir de
los parmetros de Validacin cuantitativos y cualitativos que se obtuvieron, los cuales
son precisin, robustez, solidez y estabilidad del proceso. Se realizaron tres documentos
para la calificacin de instalaciones, operacional y de desempeo que estn anexados
en este trabajo. Las pruebas se disearon utilizando un medio de crecimiento
microbiolgico que simula un producto real de baja viscosidad, representando las
mismas condiciones del proceso real de envase de inyectables en esta rea y
analizando a travs de muestreo de puntos todas las posibles causas de contaminacin.
Posteriormente se incubaron los frascos por 14 das en las temperaturas de bacterias;
mohos y levaduras para evidenciar el crecimiento de microorganismos. Los resultados
mostraron la ausencia de contaminacin en los frascos indicando que el proceso cumple
las caractersticas de esterilidad para lo cual fue diseado y que los muestreos
microbiolgicos indican que el proceso se encuentra bajo control de esterilidad en un
94.1% para este estudio de Validacin preliminar.
11
ABSTRACT
Through this work the aseptic Filling process was preliminary validated in VICAR
FARMACEUTICA S.A. It was carried out a study design that was adapted to the normal
conditions of production in the Injectable Goods Sterile Area in the factory. This study
was carried out including as quality control parameters of the process, microbiological
analyses of sampling critical points previously established during the three tests, which
are indispensable to recognize if these fulfill the standards of quality demanded by GMP
(BPM in Spanish) in the Colombian norms in relation to the manufacture aseptic
processing in the sterile filling area. From there, determine if there are critical important
points in this singular process and how much confidence degree it is gotten in the
products sterility from the quantitative and qualitative Validation parameters which were
obtained, as they are precision, robustness, solidity and stability of the process. Three
documents for the qualification of facilities, operational qualification and performance
qualification were made and annexed in this work. The tests were designed using a
liquid media of microbiological growth that simulates a real product of low viscosity,
showing the same conditions of the real process of injectable products filling in this area
and analyzing through points sampling, all the possible causes of contamination. Later
containers were incubated by 14 days in bacteria and fungi temperature ranges to
evidence the microorganisms growth. The results showed the absence of contamination
in the containers indicating that the process fulfills the sterility characteristics from which
was designed and so the microbiological samplings indicates that the process is under
control of sterility in about 94.1% for this study of preliminary Validation.
12
1. INTRODUCCION
La Validacin del proceso de Llenado Asptico es fundamental en el mbito del control y

aseguramiento de Calidad de los productos farmacuticos estriles tales como productos
inyectables y soluciones oftlmicas de uso humano y veterinario con el fin de asegurar y
garantizar que este tipo de productos sean inocuos desde el punto de vista
microbiolgico para humanos y animales; adems que su funcin farmacolgica para la
cual fue diseada a travs del principio activo no se vea alterada por contaminacin en el
proceso de manufactura.
Por naturaleza se sabe que un proceso en que interviene directa o indirectamente la

mano del hombre siempre tiene variabilidades que son imposibles de eliminar, sin
embargo, s es posible controlarlas utilizando la estadstica como herramienta
indispensable para el control de estas variables, ya que mediante el Control Estadstico
de Procesos no slo es posible una inspeccin de rutina, sino que adems ayuda a
identificar errores y a tomar decisiones que permiten minimizarlos; en otras palabras, la
estadstica posee las herramientas que le dan la solidez cientfica a los procesos de
validacin.
Para asegurar la esterilidad de productos que pretenden ser estriles inyectables, se

debe validar la esterilizacin, el llenado asptico y las operaciones de cierre. Inclusive
el objetivo de los procesos de esterilizacin ms eficientes puede no cumplirse si los
elementos esterilizados de un producto (ej. la formulacin de medicina, el contenedor, y
el cierre) se juntan en condiciones que contaminan cualquiera de aquellos elementos.
Por lo tanto, en el presente trabajo se realiz un estudio de los requerimientos para

realizar la validacin preliminar prospectiva del proceso de Llenado Asptico en el rea
estril y su aplicacin en VICAR FARMACEUTICA S.A.
Consecuentemente, para implementar un plan de validacin es necesario un trabajo en

conjunto de las distintas reas de un laboratorio, tales como produccin, aseguramiento
y control de calidad y mantenimiento entre otras, en donde la direccin por parte de un
Microbilogo y un Qumico Farmacutico es fundamental.
Adems, la colaboracin y capacitacin del personal encargado de la fabricacin de los

medicamentos tambin es de suma importancia, ya que incide en forma directa en el
procedimiento realizado. Por esta razn, el personal debe estar debidamente entrenado
y conciente que tras su trabajo se esgrime una gran responsabilidad.
13
2. MARCO TEORICO
El concepto de validacin de procesos en la industria farmacutica se remonta a la

dcada del sesenta, en donde las prcticas de calidad se remitan al producto terminado,
dando como resultado productos que no cumplan con sus especificaciones de
uniformidad de contenido, contaminacin cruzada y otros aspectos de inters, situacin
que se mantuvo por mucho tiempo, causando importantes problemas de salud.
Aos ms tarde, Food and Drug Administration (FDA), centr sus esfuerzos hacia la
elaboracin de polticas destinadas al estudio del proceso, ms que al del producto. Esto
fue rpidamente asimilado por la industria farmacutica, que ante la necesidad de contar
con procesos de fabricacin estandarizados, comprobados y reproducibles, comenz a
apuntar en este sentido las actividades destinadas a la implementacin de la calidad. De
este modo naci el concepto de Validacin de Procesos.
El aseguramiento de la calidad de un producto se deriva de la atencin cuidadosa a un

nmero de factores incluyendo la seleccin de partes y materiales de calidad,
adecuacin del producto y diseo de proceso, control del proceso y pruebas del
producto terminado y en proceso. Debido a la complejidad de productos farmacutico de
hoy, por varias razones no es suficiente solamente llevar a cabo pruebas rutinarias al
producto terminado para asegurar la calidad de este. Algunas pruebas de producto
terminado tienen sensibilidad limitada. En algunos casos, se requiere una prueba
destructiva para demostrar que el proceso de fabricacin fue adecuado, y en otras
situaciones las pruebas de producto terminado no revelan todas las variaciones que
puedan ocurrir en el producto que puedan llegar a impactar la seguridad y eficiencia del
mismo. (CDER, 1994)
Los principios bsicos del aseguramiento de calidad tienen como meta la produccin de
artculos que sean creados para su uso previsto. Estos principios pueden ser indicados
como:
1. La calidad, seguridad, y eficacia se deben disear y construir en el producto
2. La calidad no se puede examinar o probar en el producto final
3. Cada paso del proceso de fabricacin se debe controlar para maximizar la

probabilidad que el producto final rena todas las especificaciones de calidad y diseo.
La validacin de procesos es un elemento dominante para asegurar que se renan estas

metas de garanta de calidad. (CDER, 1994)
14
A travs del diseo y la validacin cuidadosa del control de proceso y del procesamiento
un fabricante puede establecer un alto grado de confianza para que todas las unidades
manufacturadas de lotes sucesivos sean aceptables. Una validacin exitosa de un
proceso puede reducir la dependencia de pruebas intensas del producto terminado y en
proceso. Se debe destacar que en la mayora de los casos, las pruebas de producto
terminado juegan un papel importante en asegurar que se renan las metas de garanta
de calidad; es decir, la validacin y la prueba de producto terminado no son mutuamente
excluyentes. (Anastasio P, Bertolino A, 1990)
2.1 Validacin de Procesos
La FDA define la validacin de procesos de la siguiente manera:
La validacin de procesos consiste en establecer evidencia documentada que

proporcione un alto grado de aseguramiento sobre un proceso especfico en el cual
constantemente se elabore un producto que rena sus especificaciones y
caractersticas predeterminadas de calidad.
Tales procedimientos de control se deben establecer para monitorear la produccin y

validar el desempeo de aquellos procesos de fabricacin que puedan ser responsables
de causar variabilidad en las caractersticas del material en proceso y el producto
farmacutico. Se establecern y seguirn procedimientos escritos apropiados, diseados
para prevenir la contaminacin microbiolgica de productos farmacuticos que pretendan
ser estriles. Tales procedimientos incluirn la validacin de cualquier proceso de
esterilizacin. (Gonzles G, 2005)
El objetivo de la validacin de un proceso es demostrar la capacidad de proporcionar, de

forma continuada y reproducible, productos homogneos de acuerdo a unas
especificaciones de calidad. Para ello es imprescindible el conocimiento profundo del
proceso, a fin de realizar un anlisis de riesgos y detectar los puntos crticos que puedan
incidir en la calidad del producto. Dado que un proceso es la interaccin controlada de
componentes, equipos, entorno, procedimientos, software y personal, un requisito previo
es la Calificacin de las Instalaciones, Equipos y Sistemas informticos que intervienen
en el proceso. (Gonzles G, 2005)
La validacin de procesos es un requisito de las Buenas Prcticas de Manufactura para

los productos farmacuticos acabados. La validacin trata de establecer evidencia
documentada que proporcione un alto grado de aseguramiento de un proceso especfico
para que constantemente se obtenga un producto que rena las especificaciones y
cualidades predeterminadas de calidad. No es posible indicar en un documento todos los
15
elementos especficos de la validacin que sean aplicables al proceso, sin embargo,
amplios conceptos tienen aplicabilidad general que los fabricantes pueden utilizar con
xito como gua en la validacin de un proceso de fabricacin. Aunque los requisitos
particulares de la validacin de proceso variarn segn los factores tales como la
naturaleza del producto mdico (ej. estril contra no estril) y la complejidad del proceso,
los conceptos de validacin tienen aplicabilidad general y proporcionan un marco
aceptable para construir un acercamiento comprensivo a la validacin del proceso.
(Gonzles G, 2005)
2.2 Esquema General de Validacin de procesos
El siguiente esquema justifica como se debe desarrollar la Validacin de un proceso en

La Industria a travs de un Plan Maestro de Validacin. (Scoseria, 2006)
Figura No. 1 Esquema de la Validacin de Procesos
(www.infodynamics.com.uy/validacionp.asp)
16
2.3 Elementos de la Validacin de Procesos
2.3.1 Calificacin Operacional
El propsito de la calificacin del funcionamiento es proporcionar una prueba rigurosa

para demostrar la eficiencia y la reproducibilidad del proceso. Incorporando la fase de
calificacin del funcionamiento en la validacin, se entiende que se han establecido y
esencialmente probado aceptablemente las especificaciones del proceso a travs de un
laboratorio u otros mtodos de ensayo y que el equipo se ha juzgado como aceptable en
base a estudios convenientes de su instalacin. (Rodrguez R, 2004)
Cada proceso se debe definir y describir con suficiente especificidad de modo que los
empleados entiendan lo que se requiere. Las partes del proceso que puedan variar como
son aquellas que puedan afectar importantemente la calidad del producto deben ser
desafiadas. Para desafiar un proceso y determinar su suficiencia, es importante que las
condiciones del desafo simulen las mismas condiciones que se encuentren durante la
produccin real, incluyendo las condiciones ms negativas no comunes. Los desafos se
deben repetir bastantes veces para asegurar que los resultados sean significativos y
constantes. (Rodrguez R, 2004)
Cada proceso de fabricacin especfico debe ser calificado y ser validado

apropiadamente. Hay un peligro inherente en confiar en cuales semejanzas se perciben
entre los productos, los procesos, y el equipo sin un desafo apropiado. (Rodrguez R,
2004)
2.3.2 Documentacin
Es esencial que el programa de validacin este documentado y que la documentacin

sea mantenida correctamente. La aprobacin y el lanzamiento del proceso para el uso
en la fabricacin rutinaria se deben basar sobre una revisin de toda la documentacin
de la validacin, incluyendo datos de la calificacin del equipo, de la calificacin de
proceso del funcionamiento y del producto en prueba para asegurar compatibilidad con
el proceso. (Rodrguez R, 2004)
Para la produccin rutinaria, es importante registrar adecuadamente los detalles del

proceso (ej. tiempo, temperatura, equipo usados) y registrar los cambios que hayan
ocurrido. Un registro del mantenimiento puede ser til en la ejecucin de investigaciones
de fallas referentes a un lote especfico de fabricacin. Los datos de la validacin (junto
con datos de pruebas especficas) pueden tambin determinar la variacin prevista en
las caractersticas del producto o el equipo. (Rodrguez R, 2004)
17
2.3.3Exactitud
La exactitud, que es la cercana de un resultado al valor verdadero, se evala en la

validacin por comparacin con los valores de referencia de un material caracterizado
(material de referencia, MR). Los valores de referencia deberan ser trazables a las
normas internacionales; los materiales de referencia certificados (MRC) generalmente se
aceptan como trazables. Es ideal que el MR sea de matriz natural lo ms similar posible
a las muestras de inters. (Rodrguez R, 2004)
2.3.4 Precisin
Las dos medidas ms comunes de la precisin, que generalmente se define en trminos

de la desviacin estndar o el coeficiente de variacin (desviacin estndar relativa) son
la repetibilidad y la reproducibilidad. La repetibilidad, que es la precisin ms pequea
esperada, da una idea de la variabilidad que se espera cuando un proceso es aplicado
por un solo analista en un equipo durante un periodo corto (anlisis por duplicado). En el
otro extremo, la reproducibilidad, que representa la variabilidad que se obtiene cuando
un proceso es analizado por diferentes analistas, lo cual tiene un valor ms amplio. La
precisin intermedia y ms til en casos especficos se obtiene cuando se evala la
reproducibilidad entre analistas en un mismo laboratorio. (Rodrguez R, 2004)
A partir de las desviaciones estndar de repetibilidad (sr) y reproducibilidad (sR) se

pueden calcular los lmites de repetibilidad, r, y de reproducibilidad, R, que permiten al
analista saber si la diferencia entre anlisis duplicados es significativa, en las respectivas
condiciones. (Rodrguez R, 2004)
2.3.5 Robustez
Es una medida de qu tan bien responde un proceso ante una implementacin no tan
perfecta, ya que si ciertas etapas del proceso no se implementan con el suficiente
cuidado, tendrn un efecto severo sobre la efectividad del proceso. Generalmente este
parmetro aplica para procesos desarrollados por el laboratorio, en los cuales se realizan
variaciones deliberadas en el proceso y se cuantifica el efecto en el rendimiento, antes
de entrar en estudios de calibracin. (Rodrguez R, 2004)
2.4 Tipos de Validacin
2.4.1 Validacin Prospectiva

Este concepto se emplea usualmente cuando no existen datos histricos disponibles o
suficientes del proceso, y los anlisis de producto en proceso y producto terminado no
son adecuados para asegurar la reproducibilidad o un alto grado de confianza de las
18
cualidades atribuidas al producto. En algunos casos se requiere una validacin
prospectiva del proceso antes de empezar la produccin o liberar el lote del producto.
Por ejemplo una solucin estril envasada con una pieza nueva de equipo no debera
ser liberada sin una validacin prospectiva de Llenado asptico. Para este caso la falta
de datos histricos y las limitaciones de las pruebas de esterilidad, no pueden garantizar
la esterilidad del lote. La validacin prospectiva es usualmente la nica alternativa
cuando se ingresan nuevos equipos o partes de estos. De acuerdo a la PMA (Asociacin
de Fabricantes Farmacuticos, por sus siglas en ingles), este es el mtodo mas lgico
para la validacin de procesos estriles, y es el que se va a usar en este estudio para la
Validacin preliminar del proceso de Llenado Asptico de VICAR FARMACEUTICA S.A.
(Berry and Nash, 1993)
2.4.2 Validacin retrospectiva de procesos
La Validacin retrospectiva es aquella en donde se trabaja con los antecedentes

histricos del proceso, obtenidos a partir de los registros de produccin y control de
calidad. Se aplica para productos que ya se encuentran en el mercado y que no han sido
validados anteriormente. Para la Validacin Retrospectiva de Procesos se aplica el
mismo criterio, y esta ha tomado gran fuerza los ltimos aos, ya que es de fcil
realizacin y de gran conveniencia para los propsitos de la industria. (Berry and Nash,
1993)
En algunos casos un producto puede haber estado en el mercado sin una validacin
suficiente del proceso antes de la comercializacin. En estos casos, puede ser posible
validar, en cierta medida, la adecuacin del proceso examinando los datos de prueba
acumulados sobre el producto y los expedientes de los procedimientos de fabricacin
usados. (Berry and Nash, 1993)
La validacin retrospectiva puede ser til tambin para aumentar la validacin anticipada
inicial antes de introducir el producto al mercado para los productos nuevos o los
procesos cambiantes. En tales casos, la validacin anticipada preliminar debe haber sido
suficiente para autorizar la comercializacin de producto. Mientras que los datos
adicionales se recopilan en lotes de la produccin, tales datos se pueden utilizar para
construir la confianza en la suficiencia del proceso. Por otro lado, tales datos pueden
indicar un grado de confianza que declina en el proceso y una necesidad conmensurada
de cambios correctivos. (Berry and Nash, 1993)
Los datos de prueba pueden ser tiles solamente si los mtodos y los resultados son
adecuadamente especficos. Como sucede con la validacin anticipada, puede no ser
suficiente determinar el proceso solamente en base a especificaciones lote por lote si los
19
resultados de la prueba se expresan simplemente en trminos de Aprobado y No
aprobado. Los resultados especficos, por otra parte, pueden ser analizados
estadsticamente y se puede hacer una determinacin de las variaciones de datos que
se pueden esperar. Es importante mantener expedientes que describan las
caractersticas de funcionamiento del proceso, por ejemplo, tiempo, temperatura,
humedad y ajustes del equipo. Siempre que los datos de prueba se utilicen para
demostrar conformidad a las especificaciones, es importante que la metodologa de las
prueba estn calificadas para asegurar que los resultados de la prueba sean objetivos y
exactos. (Berry and Nash, 2005)
Como ya se mencion, la validacin retrospectiva de procesos se basa en la recopilacin

de datos histricos de un producto farmacutico, a partir de los cuales se obtiene
documentacin til para la determinacin de la reproducibilidad de dicho proceso. Por
otro lado en el caso de Validacin de llenado asptico es necesario aplicar ensayos
analticos, requiriendo de una supervisin del proceso en forma explcita. (Gonzles G,
2005)
En la industria farmacutica existen muchos procesos que han fabricado productos por
largo tiempo sin presentar problemas de manufactura, anlisis u otro. Sin embargo, en la
actualidad se exige que esa calidad demostrada en el tiempo sea documentada de
manera adecuada. Para estos procesos, la validacin retrospectiva ofrece una excelente
alternativa para asegurar la entrega de la misma calidad en el futuro si se mantienen
invariables las etapas del proceso validado. (Gonzles G, 2005)
Por otra parte, dentro de los aspectos desfavorables que pudiese encontrar esta
metodologa de trabajo estn los inconvenientes en la recoleccin de datos, puesto que
existen empresas que no cuentan con sistemas automatizados que permitan una rpida
recopilacin de stos, haciendo larga y engorrosa esta tarea. (Gonzles G, 2005)
El trabajar con datos acumulados en el tiempo que contienen el registro de mediciones

obtenidas por distintos operarios, da la posibilidad de que esos datos tengan un cierto
grado de error, sumado a la variabilidad intrnseca de las mediciones y a la veracidad de
estos registros, podran restarle veracidad de los resultados finales del estudio.
(Gonzles G, 2005)
A pesar de presentar algunos inconvenientes, esta metodologa de trabajo est siendo

considerada como una gran alternativa para la optimizacin de la calidad. (Gonzles G,
2005)
20
2.5 Validacin del Proceso de Llenado Asptico en reas Estriles
2.5.1 Simulacin de Procesos

Una operacin de procesamiento asptico debe ser validada usando un medio de
crecimiento microbiolgico en el lugar del producto. Esta simulacin de proceso,
tambin conocida como media fill (en ingles), normalmente incluye la exposicin del
medio de crecimiento microbiolgico a superficies de contacto del producto dentro del
equipo, sistemas de cierre del envase, ambientes crticos, y manipulaciones del proceso
para simular estrechamente la misma exposicin a la cual el producto es sometido. Los
envases sellados llenos con el medio son incubados entonces para encontrar una
posible contaminacin microbiana. Los resultados son interpretados entonces para
evaluar el potencial que existe de contaminacin durante un proceso actual de una
unidad del producto farmacutico (ej. arranque, adiciones de ingrediente estriles,
uniones aspticas, llenado, cierre). Los datos de monitoreo ambiental de la simulacin
del proceso tambin pueden proporcionar la informacin til para la evaluacin de la
lnea de procesamiento. (FDA, 2004)
2.5.2 Diseo de estudio

El programa Media Fill debe incorporar los factores de riesgo de contaminacin que
ocurren en una lnea de produccin, y evaluar exactamente el estado de control del
proceso de produccin. Los estudios Media Fill deben simular estrechamente todas las
operaciones incorporadas de fabricacin asptica, y las actividades de condiciones no
favorables y condiciones que proporcionan un desafo a las operaciones aspticas. La
FDA recomienda que el programa Media Fill incorpore problemas aplicables como:
Factores asociados con el proceso ms largo permitido en la lnea de

procesamiento que pueda plantear un riesgo de contaminacin (ej. fatiga de
operador)
Un nmero Representativo de intervenciones normales que ocurren con cada
puesta en marcha, as como intervenciones y acontecimientos no rutinarias (ej.
mantenimiento, parada, ajustes de equipo)
El proceso de Liofilizacin cuando es aplicable
Ensamble Asptico de equipo (ej. en arranque, durante procesamiento)
Nmero de personal y sus actividades regulares
Nmero Representativo de adiciones aspticas (ej. cargando envases y cierres
as como ingredientes estriles) o transferencias de estos.
Cambios de personal, pausas, y cambios de vestido (cuando es aplicable)
Manipulacin del equipo estril, conexiones y desconexiones.
21
Recolectar muestras Aspticas
Velocidad y configuracin de la lnea.
Controles de Peso
Sistemas de cierre de Envase (ej. tamaos, tipo, compatibilidad con equipo)
Provisiones Especficas en procedimientos escritos acerca del procesamiento
asptico (ej. condiciones permitidas antes de que la lnea sea autorizada para
comenzar )
Para cada Prueba Media Fill se debe llevar un registro escrito del lote, documentando
condiciones de produccin y actividades simuladas. La misma vigilancia debera ser
observada en la prueba Media Fill como en una corrida de produccin rutinaria. Se debe
definir claramente la razn fundamental de la Industria Farmacutica para las
condiciones y actividades simuladas durante la prueba Media Fill. Las pruebas Media
Fill no deben ser usadas para justificar prcticas que plantean riesgos de contaminacin
innecesarios. (FDA, 2004)
2.5.3 Prerrequisitos para la corrida de las Pruebas
2.5.3.1. Esterilizacin
Se requiere la esterilizacin de todos los componentes, procesos y equipos de envase,
herramientas, instalacin del cuarto estril, equipo de monitoreo ambiental, y todo los
tems necesarios en el rea de Procesamiento Asptico (APA) para su funcionamiento.
Una aproximacin til es identificar todos los tems en el APA, junto con los procesos de
esterilizacin de cada uno. La validacin del Proceso Media fill, debe incluir una auditoria
profunda de aquellos tems que son suplidos como estriles o esterilizables por
proveedores externos. Estos deben proveer los detalles de sus trabajos de validacin
estril para los tems que procesan. Cualquier tem que pueda soportar un proceso de
esterilizacin debe ser realizado en vez de ser sometido a un proceso de desinfeccin.
No es aceptable desinfectar un tem pueda ser esterilizado. (Carlenton, Agalloco, 1999)
2.5.3.2. Desinfeccin
Se debe tomar desde 2 diferentes contextos. Primero, la desinfeccin de muros, pisos,
equipos y otros tems que sean parte del APA o permanezcan un periodo de tiempo
extenso. Segundo, la desinfeccin de tems que son necesarios para la operacin del
APA, los cuales son desinfectados antes de la entrada y removidos despus de su uso.
(Carlenton, Agalloco, 1999)
22
2.5.3.3 Desinfeccin de APA y los equipos instalados
Se debe desinfectar el espacio de ambiente controlado en el cual el personal desarrolla
las operaciones aspticas con una frecuencia base que controle el numero de
microorganismos. Esto permitir a la empresa mantener un nivel mnimo consistente de
contaminacin. Un mtodo muy eficiente es el fogueo con gas desinfectante como el
formaldehdo a travs de los ductos. Algunas empresas usan este mtodo despus de
las actividades de procesamiento aspticas en un periodo diario. Otro mtodo eficiente
es la limpieza manual del APA con un desinfectante apropiado diariamente, con un
esquema de rotacin de desinfectantes usando generalmente los de tipo fenolicos,
amonios cuaternarios, aldehdos, perxidos y haluros. El mayor inconveniente de este
proceso consiste en la confianza de realizar un procedimiento adecuado por parte de los
operarios. (Carlenton, Agalloco, 1999)
En el caso de algunos equipos que no se pueden esterilizar por los diversos mtodos
como son equipos elctricos y electrnicos, balanzas, bateras, ect. La desinfeccin de
estos equipos debe ser ms rigurosa debido a su potencial de contaminacin con un
gran nmero de microorganismos. (Carlenton, Agalloco, 1999)
2.5.4 Frecuencia y Nmero de Corridas de La Prueba

Cuando una lnea de procesamiento es inicialmente calificada, se debe repetir
suficientes veces una serie de pruebas Media Fill para asegurar que los resultados son
consecuentes y significativos. Esta propuesta es importante porque una sola puesta en
marcha puede no ser concluyente, mientras que mltiples corridas del anlisis con
resultados divergentes visualizan un proceso que no est en control. Se recomienda que
al menos se realicen tres corridas exitosas separadas consecutivamente durante la
calificacin de lnea inicial. Posteriormente, la calificacin semestral rutinaria conducida
para cada lnea de procesamiento evaluar el estado de control del proceso asptico.
Las actividades y las intervenciones representativas de cada cambio, deben ser
incorporadas en el diseo del programa de calificacin semestral. Por ejemplo, la
evaluacin de un cambio de produccin debe dirigirse a las caractersticas operacionales
y las relacionadas con el tiempo. Todo el personal que este autorizado a entrar en el
cuarto de procesamiento asptico durante la fabricacin, incluso tcnicos y personal de
mantenimiento, deben participar en la prueba Media Fill al menos una vez al ao. La
participacin debe ser consecuente con la naturaleza de las ocupaciones de cada
operador durante la produccin rutinaria. (FDA, 2004)
Cada cambio en un producto o cambio de lnea debe ser evaluado usando un sistema de
control de cambios por escrito. Cualquier cambio o acontecimiento que tiene el potencial
de afectar la capacidad del proceso asptico para excluir la contaminacin del producto
23
esterilizado deber ser evaluado por Pruebas adicionales Media Fill. Por ejemplo, la
instalacin y las modificaciones de equipo, los cambios de configuracin de la lnea,
cambios significativos del personal, anomalas en resultados de pruebas ambientales,
cambios del sistema de cierre del envase, Inactividad prolongada, o pruebas de
esterilidad de producto terminado que muestren productos contaminados pueden ser
causa para la nueva validacin del sistema. (FDA, 2004)
Cuando los datos de la prueba Media Fill indican que el proceso puede no estar en
control, se debe conducir una investigacin para determinar el origen de la
contaminacin y el alcance del problema. Una vez que se hagan las correcciones, se
deben realizar corridas de simulacin del proceso para confirmar que las deficiencias
han sido corregidas y el proceso ha vuelto a un estado de control. Cuando una
investigacin falla en alcanzar conclusiones sustanciales bien apoyadas, como causa
del fracaso de la prueba Media Fill, se deben llevar a cabo tres corridas exitosas
consecutivas seguidas con un aumento en el escrutinio del proceso de
produccin. (FDA, 2004)
2.5.5 Duracin de las pruebas

La duracin de las operaciones de procesamiento asptico es una consideracin
principal en el diseo de la prueba Media Fill. Aunque el modelo de simulacin ms
exacto seria el tamao de lote y duracin completo porque esto es lo que simula ms
estrechamente las operaciones de produccin actuales, se pueden justificar otros
modelos apropiados. La duracin de la corrida de la prueba Media Fill debe ser
determinada por el tiempo que toma incorporar manipulaciones e intervenciones, as
como una consideracin apropiada de la duracin actual de la operacin de
procesamiento asptica. Las intervenciones que comnmente ocurren deben ser
simuladas rutinariamente, mientras aquellas que ocurren raramente pueden ser
simuladas peridicamente. (FDA, 2004)
A pesar de que las lneas de fabricacin convencionales son por lo general

automatizadas, funcionan relativamente a altas velocidades, y se disearon para limitar
la intervencin del operador, algunos procesos todava incluyen la participacin del
operador considerablemente. Cuando el procesamiento asptico emplea llenado o cierre
manual, o manipulaciones manuales extensas, la duracin de la simulacin del proceso
no debe ser menor que la del proceso de fabricacin actual para simular mejor los
riesgos de contaminacin planteados por el operadores. (FDA, 2004)
24
2.5.6 Tamao de Corridas de Prueba
Los tamaos de las corridas de simulacin debern ser adecuados para imitar las
condiciones de produccin comercial y exactamente evaluar el potencial de
contaminacin de un lote comercial. El nmero de unidades envasadas durante la
simulacin del proceso debe estar basado en el riesgo de contaminacin para un
proceso dado y suficiente para simular exactamente las actividades que son
representativas del proceso de fabricacin. Un punto de partida generalmente aceptable
para el tamao se encuentra dentro del rango de 5.000 a 10.000 unidades. Para
operaciones con tamaos de produccin por abajo de 5.000, el nmero de unidades
envasadas con medio deben igualar al menos el tamao mximo del lote en la lnea de
procesamiento. (FDA, 2004)
Cuando la posibilidad de contaminacin es ms alta basada en el diseo del proceso

(p.ej. lneas de llenado manual intensivas), se debe usar un nmero ms grande de
unidades, generalmente que se acerquen al tamao total del lote de produccin. (FDA,
2004)
El tamao de prueba de Media Fill es una consideracin importante sobretodo porque

algunos lotes son producidos sobre cambios mltiples o rinden un nmero
excepcionalmente grande de unidades. Estos factores deben ser evaluados
cuidadosamente cuando se disea la simulacin para aproximar adecuadamente las
condiciones y cualquier riesgo potencial asociado con la operacin ms larga. (FDA,
2004)
Con respecto al tamao apropiado de la prueba en relacin al tamao del lote de

produccin, se requiere una clasificacin diferente de acuerdo a cada rango de tamao
de lote (N es el tamao del lote producido) (Carlenton, Agalloco, 1999):
Lotes Grandes: N > 100.000 unidades producidas: para este tipo de procesos, para los
cuales es comn envase de alta velocidad, es necesario envasar ms de 3000 unidades
en menos de 5 minutos. (Carlenton, Agalloco, 1999)
Lotes Convencionales: 3000 < N < 100.000 unidades: para este tipo de lotes el numero
de de unidades con medio se puede aproximar al tamao de produccin actual. Muchas
empresas utilizan para este tipo de lotes un mnimo de 5000 o ms unidades envasadas
con medio. (Carlenton, Agalloco, 1999)
Lotes Pequeos: 1000 < N < 3000 unidades: para este tamao de lote, el tamao de
unidades con medio debe ser igual al mximo tamao del lote estndar. (Carlenton,
Agalloco, 1999)
25
Lotes muy pequeos: N< 1000: para este tipo de lotes, se debe utilizar el mximo
numero de unidades producidas por lote sin importar el volumen del contenedor.
2.5.7 Llenado Manual

Cuando el tamao del lote es pequeo, existe una gran prevaleca en el llenado manual
para la preparacin de insumos estriles. En la situacin que es menos automatizada, el
operador pone el contenedor bajo la aguja de llenado, aplica las cubiertas y
manualmente sella el contenedor. Hay muchas variaciones a este proceso en las cuales
algunas partes del mismo se llevan a cabo automtica o semi automticamente. Sin
embargo el grado de manipulacin de las superficies estriles es mayor en esta forma de
proceso de lo que ocurrira en una maquina envasadora. Es importante la validacin del
proceso manual de este tipo de actividades. Cada operador que desempee este tipo de
envase manual debe ser evaluado individualmente en mltiples ensayos para establecer
la aceptabilidad de su tcnica asptica. En esencia cada operador es tratado como un
sistema individual de envase estril, y por lo tanto requiere una evaluacin individual.
2.5.8 Velocidad de la lnea

La prueba Media Fill debe dirigir adecuadamente los rangos de velocidades de la lnea
empleadas durante la produccin. Cada corrida de la prueba Media Fill debe evaluar
una sola velocidad de lnea, y la velocidad elegida deber ser justificada. Por ejemplo,
el uso de una lnea de velocidad alta es a menudo ms apropiado en la evaluacin de
procesos e fabricacin caracterizados por intervenciones frecuentes o un grado
significativo de manipulacin manual. El uso de una lnea de velocidad lenta es
generalmente apropiado para evaluar procesos de fabricacin con exposicin
prolongada del producto farmacutico estril y los envases y cierres en el rea
asptica. (FDA, 2004)
2.5.9 Condiciones ambientales

Las pruebas de Media Fill deben ser suficientemente representativas de las condiciones
en las cuales las operaciones industriales actuales son llevadas a cabo. Una evaluacin
inexacta (haciendo el proceso aparecer ms asptico de lo realmente es) puede resultar
de conducir una prueba Media Fill bajo una calidad de aire extraordinario en cantidad de
partculas y calidad microbiana, o en controles de produccin y precauciones tomadas
en la preparacin para la prueba Media Fill. Hasta cierto punto los Procedimientos
Operativos Estndares permiten condiciones estresantes (p.ej. el nmero mximo de
personal presente y nivel de actividad elevado). Es importante que las pruebas Media Fill
incluyan desafos anlogos para apoyar la validez de estos estudios. Las condiciones
estresantes no incluyen ambientes extremos creados artificialmente, tales como la
26
reconfiguracin de sistema HVAC (Sistema de Ventilacin, Calentador y Aire
Acondicionado, por sus siglas en Ingles) para funcionar en lmites de las peores
condiciones. (Roganti F, Boeh R, 2004)
2.5.10 Medios de Cultivo

En general, se debe usar un medio de crecimiento microbiolgico, como el medio liquido
Tripticasa Soya. Tambin se debe considerar el uso de medios de crecimiento
anaerobio (p.ej. medio liquido tioglicolato) en circunstancias especiales. Los medios
seleccionados deberan ser evaluados para promover el crecimiento de bacterias Gram
positivas y Gram negativas, levaduras y mohos (p.ej organismos indicadores, USP). El
laboratorio de Control de Calidad debe determinar si los organismos indicadores de la
USP representan suficientemente los aislamientos relacionados con la produccin. Los
aislamientos de las pruebas de esterilidad y el monitoreo ambiental pueden ser
substituidos (como mejor sea apropiado) o aadidos al desafo de promocin de
crecimiento. Las unidades de promocin de crecimiento deben ser inoculadas con un
desafo de <100 CFU. Si las pruebas de promocin de crecimiento fallan, se debe sin
embargo investigar el origen de cualquier contaminacin encontrada durante la
simulacin y repetir puntualmente la prueba Media Fill. (Roganti F, Boeh R, 2004)
El proceso de produccin debe ser exactamente simulado usando medios y condiciones

que optimicen el descubrimiento de cualquier contaminacin microbiolgica. Cada
unidad debe estar envasada con una cantidad y tipo apropiado de medio de crecimiento
microbiano que pueda estar en contacto con las superficies interiores del envase
contenedor y del cierre (cuando el envase sea invertido) y permitir la deteccin visual del
crecimiento microbiano. (Roganti F, Boeh R, 2004)
Algunos fabricantes de frmacos han expresado preocupacin por la posible

contaminacin de la instalacin y equipos con medios nutritivos de la prueba Media Fill
durante la corrida de la prueba. Sin embargo, si el medio es manejado correctamente y
puntualmente es seguido de una limpieza, sanitizacin, y donde sea necesario, la
esterilizacin del equipo, los productos posteriormente fabricados probablemente no
sern comprometidos. (Roganti F, Boeh R, 2004)
2.5.10.1 Esterilizacin del Medio de Cultivo.

El medio seleccionado en las corridas debe ser esterilizado por uno de los dos mtodos
primarios, Filtracin o esterilizacin por vapor. La Esterilizacin por filtracin requiere que
el medio pase por un filtro de 0.2m a un contenedor previamente esterilizado. Este
mtodo presenta dificultad debido a que los medios de cultivo son mezclas de varios
27
materiales naturales y una cantidad considerable de estos son slidos no solubles que
se encuentran presentes en la mezcla acuosa. (Carlenton, Agalloco, 1999)
El proceso con vapor (autoclave) emplea la esterilizacin Terminal del medio en un

contenedor del cual ser dispensado para el envase. Este procedimiento Terminal
reduce la necesidad de manipulacin post-esterilizacin que puede comprometer la
esterilidad del medio. (Carlenton, Agalloco, 1999)
Despus de la esterilizacin del medio este debe ser manejado realizando las mismas
practicas usadas para las operaciones de produccin rutinarias. Algunas empresas
siguen algunos pasos adicionales como la preincubacin del medio antes de empezar la
corrida de la prueba para asegurarse de la esterilidad del medio antes del envase de
este. (Carlenton, Agalloco, 1999)
2.5.11 Incubacin y Anlisis de Unidades Envasadas con Medios de Crecimiento

Las unidades con medio se deben incubar en condiciones adecuadas de modo que se
puedan evidenciar los microorganismos que podran de otra manera ser difciles de
cultivar. Se deben establecer las condiciones de incubacin de acuerdo con las
siguientes pautas generales:
La temperatura de incubacin debe ser conveniente para la recuperacin de la carga

microbiana y los aislamientos ambientales en ningn momento deben estar fuera del
rango de 20-35oC. La temperatura de incubacin se debe mantener dentro de
2.5oC de la temperatura requerida. (Carlenton, Agalloco, 1999)
El tiempo de incubacin no debe ser menos de 14 das. Si se utilizan dos

temperaturas de incubacin para las unidades con medio, estas deberan ser
incubadas durante al menos 7 das en cada temperatura. Algunas empresas optan
por iniciar primero por la temperatura ms alta y posteriormente la temperatura de
hongos y levaduras mas baja, pero en general se recomienda iniciar el proceso con
la temperatura mas baja y posteriormente llevarla a incubacin de bacterias.
Algunas empresas optan por dividir el lote de envase del medio y dos partes, las
cuales sern incubadas en cada una de las temperaturas. Al escoger este mtodo el
numero de unidades incubadas debe superar las 3000 para que el resultado sea
significativo estadsticamente. En general este mtodo no se recomienda ya que no
toma en cuenta el posible crecimiento completo de bacterias, hongos y levaduras de
28
los primeros envases que son los mas importantes debido al barrido inicial de la
lnea. (Carlenton, Agalloco, 1999)
La contaminacin en cada unidad con medio debe ser evaluada por el personal con
educacin, formacin apropiada, y experiencia en la inspeccin de medios con
contaminacin microbiolgica. Para permitir el reconocimiento visual del crecimiento
microbiano, recomendamos sustituir contenedores mbar u opacos por unidades de
envase claros (con propiedades fsicas idnticas). De ser posible, tambin se pueden
considerar otros mtodos que aseguren la inspeccin visual. (FDA, 2004)
Cuando se inspeccione el producto terminado de unidades integrales con medio, se

debe proceder a su incubacin inmediatamente. Las unidades que tengan defectos no
relacionados con la integridad (p.ej. defecto cosmtico) pueden ser incubadas; las
unidades que carecen de integridad deben ser rechazadas. Las unidades errneamente
rechazadas deben ser devueltas puntualmente para la incubacin con el lote de envases
con medio. (FDA, 2004)
Despus de que la incubacin est en marcha, cualquier unidad que se encuentre

daada debe ser incluida en los datos de la corrida de la prueba, porque estas pueden
ser representativas del producto farmacutico liberado al mercado. Cualquier decisin
de excluir tales unidades incubadas (no integrales) de la cuenta de la corrida final deber
ser totalmente justificada y la desviacin del proceso explicada en los informes de la
prueba Media Fill. Si surge una correlacin entre el grado de dificultad de discernir entre
un posible dao y la contaminacin microbiana, se debe implementar una investigacin
cuidadosa para determinar su causa. (FDA, 2004)
Los procedimientos escritos en cuanto a intervenciones aspticas deben ser claros y

especficos (p.ej. tipo de intervencin, cantidad de unidades removidas), asegurando
prcticas de produccin consistentes y la evaluacin de estas prcticas durante la
prueba Media Fill. (FDA, 2004)
Los contenedores pueden ser examinados peridicamente hasta completar los 14 das.
Se deben registrar el nmero de unidades contaminadas. Estas unidades contaminadas
deben ser cuidadosamente examinadas para evidenciar daos y cada unidad daada no
debe ser considerada en la evaluacin de resultados. (Carlenton, Agalloco, 1999)
A mediados de los aos 70 la PDA (Parenteral Drug Association) publico la Monografa

tcnica No. 2: Validacin de Procesos de Llenado Asptico, en la cual sugera que el
limite mas apropiado para los envases de la prueba Media fill es de 0.1%. Antes de esta
29
publicacin las empresas tomaban como limite el valor establecido por la Organizacin
Mundial de la Salud de 0.3% lo cual era bastante permisible e inapropiado. El limite 0.1%
fue escogido por la PDA debido a que ha sido tomado como un criterio aceptable por
muchas entidades representativas de la FDA en muchas presentaciones. Sin embargo
algunas empresas que han tecnificado sus procesos de esterilidad a limites superiores
han escogido disminuir este limite hasta el 0.05% en casos excepcionales. (Carlenton,
Agalloco, 1999)
Siempre que haya contaminacin en la prueba Media fill, esto debe ser considerado
indicativo de un problema de aseguramiento de esterilidad potencial, sin tener en cuenta
el tamao de muestreo de la prueba. No es de esperarse que el nmero de unidades
contaminadas aumente en una manera directamente proporcional con el nmero de
frascos de cada corrida de la prueba. Los resultados de la prueba deben ser confiables
y reproducibles mostrando que las unidades producidas por una operacin de
procesamiento asptico son estriles. Las operaciones de procesamiento asptico
modernas en instalaciones apropiadamente diseadas han demostrado una capacidad
de niveles de contaminacin que se encuentran cerca a cero y normalmente no deben
producir unidades contaminadas en la prueba. (Carlenton, Agalloco, 1999)
La tasa de contaminacin para cada corrida se determina as:
No.unidadesco ncrecimiento
%Contaminacin = 100
No.unidadesen vasadas No.unidadesda adas
2.5.12 Eficacia de filtracin

La filtracin es un mtodo comn para esterilizar soluciones de productos
farmacuticos. Un filtro de grado de esterilizacin debe ser validado en cuanto a la
reproducibilidad de remover microorganismos viables de la corriente del proceso,
produciendo un efluente estril. Actualmente, tales filtros por lo general tienen un tamao
de poro calculado de 0.2 m o ms pequeo. En muchos casos se debe considerar el
uso de filtros de esterilizacin redundantes. Independientemente del uso del filtro o
combinacin de estos, la validacin debe incluir desafos microbiolgicos para simular
condiciones de produccin en casos extremos para el material a ser filtrado y
resultados de prueba de integridad de los filtros usados para el estudio. Se debe evaluar
la carga microbiolgica en el producto seleccionando un microorganismo conveniente el
cual represente desafi del peor caso al filtro. Un microorganismo de desafi comn
utilizados para evaluar los filtros es Brevundimonas diminuta (ATCC 19146) cuando este
es correctamente cultivado, cosechado y usado, gracias a su tamao (dimetro medio de
30
0.3 m). Los controles del proceso de produccin industrial deben ser diseados para
minimizar la carga microbiolgica del producto no filtrado. Se debe determinar la carga
microbiolgica de las soluciones a granel no esterilizadas para determinar las tendencias
caractersticas de organismos potencialmente contaminantes. (FDA, 2004)
En ciertos casos, puede ser apropiado conducir estudios de retencin bacteriales con un
aislamiento de la carga microbiolgica, cuando se justifica el uso de estos equivalente o
mejor que el uso de B. diminuta. El nmero de microorganismos en el desafo es
importante porque un filtro puede contener varios poros ms grandes que su rango
nominal, lo cual tiene el potencial de permitir el paso de microorganismos. Se considera
que la probabilidad de tal paso aumenta a medida que el nmero de organismos (Carga
microbiolgica) en la solucin a ser filtrada aumenta. Se debe usar una concentracin
desafo de al menos 107 organismos por cm2 del rea de filtracin eficaz, sin causar
ningn paso del microorganismo de desafo. Se requiere la concentracin de desafo
usada para la validacin para proporcionar un buen margen de seguridad ms all de lo
que se pueda esperar en la produccin. (FDA, 2004)
La inoculacin directa en la formulacin del producto farmacutico es el mtodo preferido

porque proporciona una evaluacin del efecto del producto farmacutico en la matriz
con filtro y en el organismo de desafo. Sin embargo, inocular directamente B. diminuta
en productos con actividad bactericida inherente contra esta bacteria, o en formulaciones
a base de petrleo, puede conducir a conclusiones errneas. Cuando es
suficientemente justificado, se puede evaluar los efectos de la formulacin de producto
en la integridad de la membrana usando un mtodo alterno apropiado. Por ejemplo, un
producto farmacutico podra ser filtrado en una manera en la cual se simule la
combinacin de el peor caso de especificaciones y condiciones del proceso. Este paso
se puede seguir a la filtracin del organismo de desafo durante un perodo significativo
de tiempo, en las mismas condiciones, usando un producto apropiadamente modificado
(p.ej, que carezca de un componente antimicrobiano) como vehculo. Cualquier
divergencia de una simulacin usando el producto actual y las condiciones del
procesamiento debe ser justificada. (FDA, 2004)
Los factores que pueden afectar del filtro generalmente incluyen:
Viscosidad y tensin superficial del material para ser filtrado

pH
Compatibilidad del material o componentes de formulacin con el filtro en s
mismo
Presiones
31
Rendimientos
Tiempo de uso mximo
Temperatura
osmosis
Efectos del choque hidrulico.
Cuando se disea el protocolo de validacin, es importante dirigir el efecto extremo de

los factores del proceso sobre la capacidad de los filtros de producir efluentes estriles.
La validacin con filtro debe ser conducida usando las condiciones ms desfavorables,
como son tiempo mximo de uso y presin del filtro. Los experimentos de validacin
con filtro, incluidos los desafos microbianos, no tienen que ser conducidos en las reas
industriales actuales. Sin embargo, es esencial que los experimentos de laboratorio
simulen las condiciones de produccin actuales. El tipo especfico del filtro de
membrana usado en la produccin comercial debe ser evaluado en estudios de
validacin con filtro. Hay ventajas en la utilizacin de filtros para produccin en estos
estudios de validacin de retencin bacteriales. Cuando las pruebas de validacin de
filtros son ms complejas y van ms all de las capacidades del usuario del filtro, a
menudo las pruebas son conducidas por laboratorios externos o por los fabricantes del
filtro. Sin embargo, es responsabilidad del usuario del filtro examinar los datos de
validacin en la eficacia del filtro en la produccin de efluentes estriles. Los datos
deben ser aplicables a productos del usuario y condiciones del uso porque la
interpretacin con filtro puede diferenciarse considerablemente para varias condiciones y
productos. (FDA, 2004)
Despus de que un proceso de filtracin es correctamente validado para un producto

dado, proceso, y filtro, es importante asegurar que se usen filtros idnticos (p.ej, de
construccin de polmero idntica rango de tamao de poro) en cada marcha de
produccin. Los filtros de esterilizacin deben ser rutinariamente desechados despus
de tratar de un lote. Sin embargo, en aquellos casos cuando se justifica el uso repetido,
la validacin con filtro estril debe incorporar el nmero mximo de lotes a ser
Procesados. Las pruebas de integridad del filtro o de los filtros pueden ser realizadas
antes del procesamiento, y deben ser rutinariamente realizadas despus del primer uso.
Es importante que las pruebas de integridad se realicen despus de la filtracin para
descubrir cualquier fuga en el filtro o perforaciones que podran haber ocurrido durante la
filtracin. Las pruebas de envi de flujo y de punto burbuja, cuando se emplean
apropiadamente, son dos pruebas de integridad que pueden ser usadas. La
especificacin de prueba de integridad del filtro de produccin debe ser consecuente con
datos generados durante estudios de validacin de retencin bacteriales. (FDA, 2004)
32
2.5.12.1 Sistema de Filtracin en el rea de Inyectables
El filtro que se ha utilizado en el proceso es en forma de Cartucho no liberador de fibras,
de 0.22m de tamaote poro, 10 pulgadas de longitud, marca SARTORIOUS modelo
Sartobran-P con dimetro de 6.9cm y un rea de Filtracin de 70cm2. El fabricante
recomienda utilizar el filtro mximo 5 veces, esterilizndolo en autoclave 30 minutos a
121C. (Vicar S.A. 2006)
El siguiente esquema resume el sistema de filtracin que se maneja en el rea:
Figura No. 2 Esquema General del Proceso de Filtracin.
2.5.12.2 Pruebas de Integridad microbiolgica para el filtro

Utilizando el mtodo de HIMA (Health Industry Manufacturers Association) y la gua
tcnica para la Evaluacin Microbiolgica de Filtros para esterilizacin de lquidos, el
proceso que se sigue para Validar estos Filtros de 0.22 m de tamao de poro se utiliza
el microorganismo Pseudomonas diminuta ATCC 19146 con una concentracin de 1 x
105 UFC/cm2, es decir 7 x 108 UFC/ cartucho con rea de filtracin de 0.7m2. (Sartorius
S.A. 2005)
El proceso de validacin inicia con un flujo de agua, el cual se hace pasar por un
cartucho con filtro esterilizante de 0.45m. El propsito de este filtro es retirar partculas
pequeas y bacterias para asegurarse que el filtro solo va a ser cargado con la carga de
bacterias indicadas en el desafi microbiolgico segn HIMA. La carga bacteriana usada
en el desafi es controlada dosificando una suspensin de bacterias conocida dentro de
la lnea de agua con una bomba peristltica. Despus de que la suspensin de bacterias
33
es aadida a la lnea de agua, el flujo se dirige a un tubo de mezcla, para asegurar una
adecuada mezcla de la suspensin de bacterias. Se utilizan manmetros Gauges para
monitorear las presiones diferenciales durante la prueba, ubicados en la entrada y salida
del flujo del filtro. El filtrado que pasa a travs del sistema de prueba, fluye hacia 2 filtros
analticos de retencin de 47mm con medio selectivo para Pseudomonas sp, donde se
verifica que no haya presencia en el efluente por crecimiento en los medios. (Sartorius
S.A., 2005)
2.5.12 Esterilizacin de Equipo, Contenedores, y Cierres

Las superficies de equipos que se ponen en contacto con el producto farmacutico
esterilizado o sus frascos esterilizados o cierres deben ser estriles y no deben alterar la
pureza farmacutica del producto. Donde exista potencial de contaminacin razonable,
las superficies que estn cercanas al producto estril tambin se deben encontrar sin
organismos viables. Es entonces importante en el procesamiento asptico validar los
procesos de esterilizacin de tales equipos crticos, as como validar los procesos
usados para esterilizar el producto farmacutico, su contenedor y cierre. El calor
hmedo y la esterilizacin por calor seco, son los ms usados extensamente. (NTC-
4543, 1998)
2.6 rea de Fabricacin y Envase de Productos Estriles Inyectables de VICAR

FARMACEUTICA S.A.
El proceso de fabricacin en esta rea exige una serie de cuidados que permiten obtener
un producto que cumpla con la condicin de estril.
2.6.1 Suministro de Aire

El rea estril cuenta con un sistema de filtros (FAR 30/30, HP 200, HEPA) que purifican
el aire que ingresa, inyectndolo a una presin superior a la de extraccin, lo que genera
una presin positiva con respecto al exterior de las salas, evitando el ingreso de
partculas extraas al rea, y un modulo de flujo Laminar Vertical Marca C-4 con siete
filtro HEPA. (POES Vicar S.A. 2006). La especificacin de calidad de aire es Clase 100
para la cabina de flujo laminar (Anexo H).
2.6.2 Acceso de Personal

El acceso a las salas estriles es restringido, slo puede ingresar el personal capacitado,
con vestimenta adecuada, en buenas condiciones de salud y sin tener ningn tipo de
heridas abiertas. (POES Vicar S.A. 2006)
2.6.3 Esterilizacin de Material

El material y algunas materias primas utilizadas durante la fabricacin, como bases
grasas de mantenimiento, piezas del equipo, recipientes, sistemas de cierre (tapones y
34
grafas), vestuario, guantes, etc., se esterilizan antes de ingresar al rea mediante calor
hmedo en autoclave (121 C, 15 psi por 30 minutos), o por calor seco en horno (180C),
segn corresponda. (POES Vicar S.A. 2006)
2.6.4 Control de Autoclave

Para verificar que el proceso de esterilizacin se realiza en forma adecuada, se realiza
un control mensual introduciendo un test de esterilidad (esporas de Bacillus
stearothermophilus) en la autoclave. (POES Vicar S.A. 2006)
Esta prueba consiste en introducir en la autoclave ampolletas del Bacillus
stearothermophilus en posiciones establecidas por un proceso de validacin, junto con el
material que se esta esterilizando en los mismos parmetros normales, cuando finaliza el
proceso se incuban y se determina el crecimiento o no por medio del cambio en el
indicador de pH que se encuentra en la ampolleta. (NTC-4543, 1998)
2.6.5 Control Ambiental

Como control ambiental del rea de esterilidad en los procesos de Preparacin y
Envase, se realizan controles microbiolgicos del rea mediante el uso del sistema de
muestreo de aire RCS (Reuter Centrifugal Sampler) con strips biotest de Agar TS y
Sabouraud, equipo porttil en el que la impactacin de las partculas ocurre potenciada
por la accin de la fuerza centrfuga que un ventilador confiere al aire aspirado en la
zona frontal del equipo. (Gonzles A, 2002)
Las partculas son recogidas en cintas flexibles (Strips) con pocillos que contienen medio
de cultivo. El caudal de aire de este equipo es de 40 L/min y dispone de un programador
de tiempo (entre 30 segundos y 8 minutos) que determina el volumen de aire
muestreado. La captacin ocurre en un nico nivel por lo que no se obtiene informacin
sobre la distribucin por tamao de partcula. Una de las limitaciones de este equipo es
que no se puede precisar con exactitud el caudal real de aire, ya que ste es aspirado
desde una distancia de 40cm y el aire expulsado lo hace rodeando la columna de aire de
aspiracin. (Hernandez A, 2004)
Figura No. 3 Esquema de un muestreador de aire RCS en:

www.mtas.es/insht/information/Ind_temntp.htm
35
2.6.6 Control de Superficies Planas
La limpieza de las salas y equipos es rigurosa y es realizada por los mismos operarios
con el fin de restringir el acceso a la menor cantidad de personas posibles. Por tratarse
de un rea extremadamente delicada, no se puede hacer ingreso a ella, pero s se pude
observar cada etapa desde el exterior. Para realizar el control de Desinfeccin en unas
reas y Esterilidad en otras se utiliza un sistema de muestreador de superficies de
Biomerieux con placas de contacto para detectar contaminaciones microbiolgicas. Las
placas de contacto se emplean para la deteccin de bacterias, levaduras y mohos
relacionados con contaminaciones en el proceso de produccin. Estas placas de
contacto son cajas de 55mm con agar Count-tact irradiado 3P referencia 43691
(Biomerieux) TS y Sabouraud, que poseen 4 neutralizadores de desinfectantes (Anexo
1). (Gonzles A, 2002)
2.6.6.1 Puntos de Muestreo en la Evaluacin de superficies de Equipos con

escobilln
Se utiliza TSB estril como reconstituyentes, humedeciendo el escobilln estril en este

y tomando un rea adecuada, posteriormente se realiza siembra en Agar TS y
Sabouraud. (Gonzles A, 2002)
Tabla No. 1 Puntos de Muestreo del rea de Preparacin y Envase Estril en:
(POES VICAR FARMACUTICA S.A., 2002)
EQUIPO SUPERFICIES
rea Preparacin
Tanques de Preparacin Salida producto, Vlvula, Mangueras
Bomba sanitaria Parte interna
rea Envase
Horno Parte interna
Tanques Pulmn Salida producto, vlvula envase, mangueras
Envase Ampolletas Salida producto
Envase Frascos Tanque intermedio, Mangueras
Envase Viales Salida, Horno
Carcasas Filtracin Punto entrada y salida del producto
2.6.7 Envase de Soluciones Inyectables
Las ampollas son lavadas con agua destilada y luego se esterilizan por calor seco
(Horno despirogenizador). El llenado se produce en una mquina dosificadora de
36
ampollas ubicada bajo una campana de flujo laminar vertical y se sellan mediante una
llama que funde el vidrio y permite darle la forma caracterstica. Se realizan los mismos
controles que en el caso anterior y adems, las ampollas son revisadas en su totalidad
para asegurar la ausencia de unidades quebradas o que contengan algn elemento
extrao. (POES Vicar S.A. 2006)
Al tratarse de procesos que ocupan la microfiltracin como tcnica para obtener un

producto estril, se debe asegurar que las membranas de filtracin estn en perfectas
condiciones, para lo cual se realiza un test (por validacin) de punto de burbuja
acompaado de un desafi microbiolgico, lo cual detecta cualquier imperfeccin.
(Gonzles G, 2005)
2.6.7.1 Productos Estriles fabricados en el rea de Inyectables
Tabla No. 2 Clasificacin de los Productos Envasados en el rea Estril en:

(POES VICAR FARMACUTICA S.A., 2002)
CLASIFICACION POR ACCION DEL NOMBRE COMERCIAL PRODUCTO
PRODUCTO
Analgsico Diuridem, Fadyne C, Fadyne A4
Antiparasitarios Estrongol, Levamisol 7.5 y 15%
Antibiticos Oxitetraciclina
Antimicrobianos Panamicina L.A., Sulfametazina, Unimast 20,
Vicarpen
Anablicos Strogen 50
Diluyentes Inyectables Unimast, Vicarpen, Diminazen
Estimulantes Anaplasmol, Arecolina, Cacodil, Cardioton
Ecto- Endoparasiticidas Vimec
Hemoparasiticidas Diminazen, Imicar
Oxitcicos Hormofisina
Vitaminas Vitamina A+E
Suplementos Novafos, Ferrex B-12, Gluconato
2.6.8 Prueba de Esterilidad de Producto Terminado por Filtracin
Se utiliza un sistema normal de filtracin con poro nominal de 0.45 y 47mm de

dimetro. Se filtran 300ml del producto, utilizando caldo de lavado Rinse fluido K. Para
desinfectar las puntas de los envases y tapones se utilizan paitos humedecidos con
glutarhaldehido. Si el producto es solid se disuelve en 300ml de agua destilada estril.
Si es lquido se filtra y posteriormente se enjuaga con caldo de lavado, y si el producto es
viscoso se diluye con caldo de lavado. La membrana se corta en 2 partes y se introduce
37
en los tubos de medios TSB y Tioglicolato preparados. Se utilizan 3 embudos de
filtracin simultneamente, de los cuales 1 corresponde al blanco con 300ml de caldo de
lavado, y los otros 2 a productos en anlisis.
Se llevan a incubacin el Tioglicolato por 14 das a 30-35C, y TSB por 14 das a 20-
25C .
Se observan los tubos a los 7 y los 14 dias para evidenciar posible turbidez del medio.
Un resultado positivo lleva a un reanalisis y cuarentena, y un resultado positivo de
reanalisis lleva al reproceso del lote del producto. (Gonzles A, 2002)
2.6.9 Anlisis Material Estril de Envase
Se realiza el mismo procedimiento que la prueba de producto terminado, utilizando como

diluyente el caldo de lavado Rinse fluido K, por enjuague directo en los frascos, viales y
ampollas, o por inmersin en el caso de jeringas y otros materiales. Se utilizan los
mismos parmetros anteriores y se lee igualmente por turbidez. (Gonzles A, 2002)
2.6.10 Especificaciones de los Parmetros de Anlisis Microbiolgicos:
La siguiente Tabla resume las caractersticas de los controles semanales por parte de
Microbiologa al rea Estril y los productos terminados del proceso. (Gonzles A, 2002)
Tabla No. 3 Controles Microbiolgicos en el rea Estril en:

(POES VICAR FARMACUTICA S.A, 2002)
Puntos
Periodicidad del
Tipo de Anlisis Tipo de control Muestreo Limites
Anlisis
Se hace control Una vez a la semana Dentro reas
con los medios por rea. 8 minutos cabina flujo Inyectables:
preparados por en rea Preparacin laminar Grado A, Clase
impactacin y 4 minutos en rea Dentro 10 partculas.
centrifuga RCS Envase Horno Cabina de flujo:
0 UFC
AMBIENTES
Fuera de
Cabina: <5 UFC
Preparacin:
<10 UFC
Vestier: <10
UFC
Se hace control Cada vez que se Cabina flujo rea Envase:
a cada lote con hace anlisis de Horno Interior Cabina
los medios ambientes semanal Superficies Flujo 0-1 UFC
preparados por fuera de la Fuera de
contacto cabina Cabina: < 5
SUPERFICIES UFC
Equipos pre-
filtracin: <10
Equipos post-
filtracin: 0-1
UFC
38
Se realiza, cada vez Manos
que se hace anlisis Guantes
de ambientes, a las Uniformes reas estriles:
Se realiza frotis
OPERARIOS personas que se Max: 3
con escobilln
encuentren UFC/operario
trabajando en el rea
correspondiente
Se hace anlisis
de esterilidad
por filtracin por
membrana y se
Cuantas veces al da
PRODUCTO utiliza un medio ----------------
se fabriquen Ausencia
TERMINADO blanco, y se
productos estriles
filtra en las
mismas
condiciones que
los productos *
Cada vez que llegue
un envase
Se realiza igual
esterilizado en otra
por filtracin por
parte: Agujas,
MATERIAL membrana, se
equipos de venoclisis, Ausencia
ESTRIL hace igual que
mangueras y los que
un producto
se esterilizan aqu, se ----------------
terminado. *
hace una anlisis una
vez al mes.
* Los medios que se emplean para los anlisis son medios que se compran ya
preparados por eso ellos vienen con certificado de calidad de su casa matriz y adems
cada vez que llega un lote nuevo se incuba una caja, un tubo o un strip, en las dos
incubadoras (hongos y mesfilos) para ver si hay crecimiento, a manera de control.
2.6.11 Desinfectantes Empleados en el rea
Se realiza una rotacin mensual de desinfectantes. En todo el ao se utilizan seis

desinfectantes que estn divididos en tres grupos segn su principio activo qumico en
Fenolicos, amonios cuaternarios y Clorhexidina. Durante los tres meses de la prueba se
utilizaron los siguientes desinfectantes de rotacin:
MAT 98: cuyo principio activo es Fenlico.

MAT 99: cuyo principio activo es amonio cuaternario. (Anexo A)
NOVAXIDIN: cuyo principio activo es la Clorhexidina. (Anexo B) (POES Vicar S.A, 2006)
39
3. FORMULACION DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACION
3.1 Formulacin del Problema
La implementacin de este proyecto surge de la necesidad de conocer a travs de la

validacin preliminar si el proceso de Llenado asptico en el rea estril de VICAR
FARMACUTICA S.A. se encuentra en un estado de control en cuanto a esterilidad se
refiere, e igualmente conocer si este cumple con los requerimientos y las
especificaciones industriales inherentes al proceso de fabricacin estril, con el fin de
Habilitar el rea estril de inyectables para la implementacin de la lnea de produccin
farmacutica humana.
Es importante resaltar que este tipo de estudios sobre Validacin del Proceso de Llenado
Asptico son muy recientes en la Industria Farmacutica del pas por lo cual han
obtenido gran acogida como una metodologa para realizar una autoevaluacin de los
procesos en cada Industria, pero su limitacin principal es adaptar esta metodologa a
cada proceso individual en los Laboratorios farmacuticos y por ello es importante
realizar un diseo de estudio que simule las condiciones rutinarias normales de
Produccin en el rea estril de VICAR FARMACUTICA S.A.
3.2 Justificacin de la Investigacin
La calidad de un producto farmacutico estril debe asegurarse completamente, esto

para cumplir con las exigencias de las autoridades sanitarias y sobretodo para brindar un
producto verdaderamente confiable a la poblacin; por ello, la industria farmacutica se
ha preocupado por implementar metodologas que garanticen la calidad de sus
productos. Es as, como la Validacin de procesos se hace indispensable para el
aseguramiento de la calidad de los insumos farmacuticos.
La validacin preliminar del proceso de llenado asptico es por tanto la herramienta mas
efectiva para evidenciar que se cumplan los parmetros de calidad para lo cuales se
diseo el rea y por lo tanto simula las condiciones reales de produccin (preparacin y
envase), que conllevan a obtener productos inyectables estriles para consumo humano
y veterinario, lo que aumenta la confianza de la empresa en sus procesos estriles y la
imagen corporativa de sus clientes.
El hecho de contar con los procesos validados no slo significa para una industria
farmacutica tener productos de calidad que le permitan garantizar su efectividad para
40
entrar y mantenerse en el exigente mercado farmacutico, sino tambin significa un
valioso ahorro en tiempo y dinero, ya que se minimizan los riesgos de perder lotes de
produccin por errores generados durante el transcurso de la fabricacin.
Las regulaciones Nacionales a travs del INVIMA y el ICA son los organismos
encargados de certificar que se cumplan estos procesos de forma adecuada en la
Industria Farmacutica por medio del sistema de Gestin de Calidad BPM (Buenas
Practicas de Manufactura) con un estudio de la validacin preliminar del proceso y todos
lo parmetros y requisitos tcnicos que este implica. Para Laboratorios VICAR
FARMACEUTICA S.A. es importante que estas normativas tcnicas sean gestionadas
por medio de un proceso de Validacin documentado en el que se cumplan con los
requisitos establecidos por el sistema de Gestin de Calidad BPM y garantizando los
lineamientos de la USP26 que rigen a la Empresa.
41
4. OBJETIVOS
Objetivo General
Realizar una Validacin preliminar del proceso de llenado asptico en el rea estril de
inyectables de VICAR FARMACEUTICA S.A. con el fin de evidenciar las condiciones de
esterilidad del rea garantizando los requerimientos de BPM y las especificaciones de la
FDA 2004.
Objetivos Especficos
1. Realizar la simulacin del proceso normal de Envase Asptico en el rea de

inyectables utilizando un medio de crecimiento nutritivo para bacterias, hongos y
levaduras
2. Realizar 3 corridas del proceso de llenado asptico para poder establecer los
parmetros de validacin sustentables experimental y estadsticamente. Tales
parmetros son Precisin, Repetibilidad, Reproducibilidad, Solidez, Robustez y
Estabilidad del proceso.
3. Llevar a cabo un control de calidad del medio de cultivo implementado en la prueba de

llenado asptico por medio de la tcnica de promocin de crecimiento, utilizando 6 cepas
de microorganismos patgenos viables de bacterias, hongos y levaduras.
4. Determinar si el proceso de Llenado Asptico en el rea estril DE VICAR

FARMACUTICA S.A. cumple con los parmetros de produccin de insumos inyectables
estriles de BPM, utilizando el anlisis microbiolgico de puntos de muestreo definidos
para ambientes, superficies, equipos y operarios a travs de un estudio estadstico de
Capacidad del Proceso.
5. Establecer a travs de cuatro Procedimientos Operativos Estndares (POES) que

especifiquen el plan maestro de Validacin, la Calificacin de las Instalaciones (IQ), La
Calificacin de la Operacin (OQ) y la Calificacin de Desempeo (PQ) si la validacin
es Preliminar o Total a nivel industrial.
42
5. MATERIALES Y METODOS
5.1 Diseo de Investigacin
El diseo estudio que se realizo es de tipo experimental descriptivo, prospectivo,

cualitativo y de corte longitudinal, realizando tres repeticiones de la prueba con tres (3)
envases diferentes, identificando por medio analtico ausencia o presencia de
contaminacin en el proceso, puntos crticos y manejo de la informacin de controles
estandarizados en el rea por parte de Control de Calidad.
Parmetros de Evaluacin en la Validacin Cualitativa preliminar de Llenado

Asptico
Precisin
Este criterio involucra los trminos de Reproducibilidad y Repetibilidad, y se enfocan en
trminos de desviacin estndar. La repetibilidad es la precisin mas pequea esperada
cuando un proceso es aplicado por un solo operario en un equipo durante un periodo
corto, y la reproducibilidad representa la variabilidad que se obtiene cuando un proceso
es llevado a cabo por diferentes operarios para un mismo proceso en un mismo da.
Robustez y Solides
Estos criterios los podemos obtener a partir de la confianza en el numero de repeticiones
que ser de 3 y en la variabilidad de los envases por repeticin que ser de 3 volmenes
diferentes, utilizando 3 das diferentes para cada volumen de envase, ampliando la
precisin de la prueba.
Estabilidad del proceso

Este criterio se obtendr a partir del anlisis estadstico de los controles microbiolgicos
y el resultado del porcentaje de contaminacin de los envases en la prueba.
5.2 Poblacin de Estudio y Muestra
La poblacin de estudio corresponde al proceso en si de Llenado Asptico determinando

las variables de Esterilidad ambiental, de superficies, de operarios en el rea de
Produccin Estril de inyectables de VICAR FARMACEUTICA S.A. ubicado en la ciudad
de Bogota, y el anlisis respectivo se va a realizar en el rea de Control de Calidad,
seccin de Microbiologa de dicha empresa farmacutica.
43
Para obtener la poblacin de muestra, se tomo como base las especificaciones tcnicas
del sistema de gestin de calidad BPM administrado por la FDA: Gua Industrial sobre
Productos Estriles Producidos por Procesos Aspticos (FDA, 2004), en donde se
plantea utilizar como Tamao de muestra el que mas se asemeje a las condiciones de
produccin reales del proceso en condiciones estndares, o para lotes pequeos entre
1000 y 3000 unidades, utilizar el mximo de 3000 unidades, y para lotes muy pequeos
menores a 1000 unidades, utilizar el mismo numero de unidades envasadas reales
(Carleton and Agalloco, 1999).
Se utilizaron tres grupos de muestreo correspondientes a tres volmenes de envase de

ampolletas de 2ml, frascos de 10ml y 500ml. El numero de unidades de 10ml y 2ml
analizados se ha obtenido por un promedio de la sumatoria total del No. unidades
envasadas por lote / semana y corresponde a un nmero entre 2800 - 3000 unidades,
utilizando el mximo de 3000 unidades con medio TSB de frascos de 10ml y ampolletas
de 2ml. El numero de frascos de 500ml correspondiente a 200 unidades que es el
volumen de produccin real promedio por lote semanal. Se obtuvieron simulando el
proceso de Envase que se realiza en esta rea desde la entrada del medio de cultivo,
pasando por el sistema de filtracin, hasta el envase final con sistema de cierre de los
frascos que fueron objeto del estudio de investigacin.
5.3 Variables de Estudio
Capacidad del proceso a travs de los limites de Operacin establecidos de los

Controles microbiolgicos de ambientes, superficies, equipos, agua como
materia prima, operarios y productos terminados en correlacin al proceso
asptico a travs de validacin preliminar prospectiva por recoleccin de
informacin.
Control de esterilidad del proceso a travs del nmero de unidades de envase
con ausencia de contaminacin por la tcnica de Llenado Asptico y el limite
especificado por la FDA, 1984 (Media fill).
La Reproducibilidad y Repetibilidad de los procesos estriles en el momento del
envase por parte de los operarios que influyen directamente en la esterilidad del
producto.
5.4 Mtodos
5.4.1 Implementacin del Diseo de Estudio

Se realizaron tres corridas de la prueba para este proceso con los dos volmenes de
frasco, y un volumen de ampolleta, involucrando las reas de Envase Estril y Control de
44
Calidad Microbiolgico, con lo cual se puede garantizar que se cumpla con los
parmetros de la Validacin. Se ha especificado un diagrama de flujo en Anexo C.
Se Llevo a cabo el proceso de simulacin bajo condiciones normales de produccin,

involucrando a los operarios encargados del rea para que realicen las actividades
regulares del proceso de envase asptico.
Se realizaron formatos tcnicos que incluyen los siguientes parmetros intrnsecos y

extrnsecos por cada corrida y son parte de los protocolos de calificacin de
instalaciones, operacional y de desempeo:
Temperaturas de esterilizacin
Lecturas de manmetros (presiones) e inspeccin de vlvulas
Temperatura de incubacin
Numero de frascos a envasar
Procedimientos fsicos y qumicos de desinfeccin y esterilizacin del rea
Control Microbiolgico de ambientes, superficies, equipos y operarios
Control microbiolgico de Producto estril terminado y Envase Estril
Anlisis estadstico de controles microbiolgicos
Numero de operarios
Procedimientos extraordinarios o irregulares
Frascos con crecimiento microbiolgico.
5.4.1.1 Valores de Precisin, Robustez y Solidez

Ya que contamos con dos (2) turnos con dos (2) operarios por turno, divididos entre 4 y 6
horas aproximadamente cada turno, se va a realizar una rotacin entre los dos operarios
de cada turno de la siguiente manera:
Actividad No. 1 para Ampolletas: alimentacin de la maquina envasadora de ampolletas.

Actividad No. 2 para Ampolletas: recepcin de ampolletas de la maquina envasadora.
Actividad No. 1 para Frascos: llenado manual de frascos con vlvula de dosificacin.
Actividad No. 2 para Frascos: cierre manual con tapn y grafado del envase.
Reproducibilidad para la primera prueba

Se realizo una rotacin entre dos operarios para los dos turnos. El primer turno se
encargo del envase de ampolletas rotando entre la actividad No.1 y No. 2, a la mitad del
45
envase de ampolletas, ajustando el cambio a la mitad aproximadamente del nmero total
de ampolletas.
El segundo turno se encargo del envase de frascos de 10ml y 500ml, rotando entre la
actividad No. 1 y No. 2, a la mitad del envase de los frascos, ajustando el cambio a la
mitad aproximadamente del nmero total de frascos que suman las presentaciones de
10ml y 500ml.
Se tomaron muestras de los guantes a ambos operarios antes de empezar el envase
manual, durante este y al final de la prueba, cuando se encontraban realizando la
actividad No. 1. El uniforme se les tomo al final de cada turno para cada operario. Al
obtener los resultados de contaminacin de envases y prueba de guantes se busco la
desviacin estndar de los resultados.
Repetibilidad para la segunda prueba

Se tuvo como constante un mismo operario por cada turno. Para el primer turno, se
mantuvo las actividades sin rotar en ningn momento, e igualmente para el segundo
turno. Se tomaron muestras de los guantes para el operario que se encontraba
realizando la actividad No. 1, antes de empezar el envase manual, durante este y al final
de la prueba. El uniforme se les tomo al final de cada turno para cada operario. Al
obtener los resultados de contaminacin de envases y prueba de guantes se busco la
desviacin estndar de los resultados.
Repetibilidad para la tercera prueba

Se cambiaron las funciones de los operarios de la segunda prueba, es decir el que
estaba realizando la actividad No. 1 en la segunda prueba paso a realizar la actividad
No. 2 y viceversa, y se tuvieron las mismas condiciones establecidas para la segunda
prueba.
Robustez y Solides
Estos criterios se obtuvo a partir de la confianza en el numero de repeticiones que fue de
tres (3) y en la variabilidad de las muestras obtenidas del proceso de envases por
repeticin que ser de tres (3) volmenes diferentes, utilizando tres (3) das diferentes
para el volumen total de envase, ampliando la precisin de la prueba.
5.4.2 Pruebas Preliminares
5.4.2.1 Calificacin Horno Despirogenizador

Se realizo la calificacin por parte de terceros del horno despirogenizador del rea de
inyectables, ya que este presentaba problemas con la transferencia del calor por
conduccin trmica y los resultados de las pruebas de esterilidad de los frascos
46
mostraban contaminacin en estos. Se utilizo el mtodo de LAL para comprobar la
validez de la calificacin realizada, utilizando 10.000 UE/ml de E. coli por vial (Anastasio
and Bertolino, 1990), los cuales fueron localizados en 12 puntos diferentes dentro del
horno. Despus del proceso de despirogenizacin en el horno, se reconstituyeron con
1ml de agua apirgena y se incluyeron 0.2ml de la endotoxina desactivada reconstituida
en tubos con 0.1ml de LAL con una sensibilidad de 0.5 UE/ml. Se utilizaron como control
positivo, una solucin con 100 UE/ml de E. coli y como control negativo 0.2ml de agua
apirgena. Posteriormente se incubaron las muestras por 1 hora a 37C 1C. Y se
leyeron los resultados.
5.4.2.2 Prueba de Promocin de Crecimiento del medio TSB (Caldo Tripticasa

Soya)
Se utilizaron las siguientes cepas de control para el medio TSB (Anexo D). (USP26,
2002)
Tabla No. 4. Microorganismos de ensayo para el Medio TSB en:

(USP26, 2002)
Cepa de Ensayo Crecimiento esperado por Turbidez
Medio TSB
Escherichia coli Bueno
Staphylococcus aureus Bueno
Pseudomonas aeruginosa Moderado
Streptococcus pneumoniae Bueno
Bacillus subtilis Bueno
Aspergillus flavus Moderado
Candida albicans Bueno (Incubacin hasta 48 horas)
Las cepas se obtuvieron de los Ceparios de Bacterias, Hongos y Levaduras de la

Facultad de Ciencias de la Universidad Javeriana.
A partir de pases de cada cepa en agar Casoy y su posterior incubacin de 48 horas de

30-35C para bacterias y de 5 das de 20-25C para hongos y levaduras, se procedi a
realizar un inoculo que corresponda a 10ml de agua peptonada de una concentracin de
102 a partir de una solucin A del microorganismo axnico en solucin salina 0.65%
ajustada al Patrn de Mcfarland No. 0.5 (107 bacterias/ml) (USP26, 2002)
Para realizar la concentracin del inoculo se toma 1l de la solucin A del

microorganismo axnico y se agrego a 100ml de agua peptonada estril en un
erlenmeyer de 200ml en condiciones de esterilidad realizando agitacin manual.
Posteriormente se llevo 10ml de esta solucin a 90ml del Caldo TSB en erlenmeyer de
47
100ml realizando agitacin manual por 1 minuto, obteniendo un inoculo correspondiente
al 10% del medio de crecimiento. Inmediatamente se llevaron a incubar las cepas
bacterianas por 48 horas a temperatura de incubacin de 32-35C, y las cepas de
levaduras y hongos por 5 das a temperatura de incubacin de 20-25C. Cada da se
observo el crecimiento por turbidez y se anotan los resultados. Estos procedimientos se
realizaron bajo cabina de flujo laminar para evitar la contaminacin ambiental (USP26,
2002)
5.4.3 Proceso de Llenado Asptico (Media Fill)

Se utilizaron 2 volmenes de frascos de 10ml y 500ml por repeticin, utilizando 3000 y
200 unidades de cada uno correspondientemente por 3 repeticiones y un volumen de
ampolletas de 2ml para 3000 unidades por 3 repeticiones igualmente. En cada repeticin
se preparo un volumen total de 143 Litros de TSB. Las especificaciones del medio se
encuentran en el Anexo D.
5.4.3.2 Preparacin del Medio de Cultivo para Llenado Asptico

Ambos procesos para los tres (3) volmenes de frascos se realizaron en un solo da.
Se preparo un volumen final de 143 Litros, para lo cual se peso 4200g (30g/L), lo que
es equivalente a 9 frascos de 500g cada uno del Medio Caldo TSB, utilizndolos de la
siguiente manera:
Se Agregaron los 8 frascos de 500g directamente al tanque de 200L con previa

esterilizacin que contena 143L de agua recin destilada WFI para aprovechar el calor
del proceso como esterilizacin trmica de la preparacin del medio TSB (El agua recin
destilada conserva una temperatura entre 70C a 75C aprox.). Se pesaron 200g en
balanza analtica para as completar 4200g de TSB. Se Realizo la agitacin mecnica
con el aspa previamente desinfectada. Se tapo el tanque de preparacin y se dejo en
agitacin por 5 minutos. Inmediatamente se procedi a realizar el proceso de llenado
asptico. Estamos utilizando tres Litros de margen de error, uno por cada volumen a
envasar.
El medio fue utilizado en lo posible el mismo da de su preparacin y se mantuvo tapado

adecuadamente el tanque de preparacin durante el proceso de filtracin y envase. Si
este proceso se extiende por un da mas, se debe cubrir totalmente el envase que
contiene el medio TSB filtrado y guardarlo en el rea de Envase bajo la cabina de flujo
laminar, y al da siguiente realizar un recalentamiento entre 60 y 80C por 10 minutos
antes de empezar nuevamente la filtracin y el envase.
48
Ampolletas de 2ml
Esta presentacin se envasa en primer lugar, utilizando la maquina envasadora de
ampolletas. El tipo de envase es semiautomtico. Se van a envasan 3000 unidades,
utilizando 100 unidades mas para muestreo microbiolgico y puesta en marcha de la
maquina envasadora.
Frascos de 10ml
Esta presentacin se envasa en segundo lugar. Envase manual, y cierre
semiautomtico. Se van a envasan 3000 unidades, utilizando 20 unidades mas para
muestreo microbiolgico y por prevencin.
Frascos de 500ml
Esta presentacin se envasa en tercer lugar. Envase manual y cierre semiautomtico. Se
envasan 200 unidades, utilizando 10 unidades mas para muestreo microbiolgico y por
prevencin.
5.4.3.3 Corrida de Llenado Asptico (Media fill)

Inmediatamente que el medio TSB presento homogeneidad se procedi a llevarlo a la
lnea de alimentacin de productos por medio de conductos especiales (mangueras) del
rea de Preparacin hasta el rea de envase.
Se instalo el sistema de Presin positiva inyectada de Nitrgeno gaseoso al medio de

cultivo para que este pase por el sistema de filtracin y realice el recorrido pertinente
hasta el Llenado en los frascos de 500ml y 10ml y en las ampolletas de 2ml. Se
observaron cada uno de los subprocesos y actividades de los operarios involucrados en
el envase anotando los procedimientos realizados y las fallas humanas. (Stockdale D,
2004)
Al final del proceso se cont el numero total de frascos envasados con el medio de
cultivo y los que fueron descartados por error del proceso por causa del operario o de la
maquina envasadora. Igualmente se tuvieron en cuenta los siguientes aspectos por
medio de observacin visual (Stockdale D, 2004)
La presencia de fugas de medio en los envases

Presencia de materiales extraos.
5.4.3.4 Periodos de Incubacin

Una vez realizado el conteo de frascos, se procedi a llevarlos a la incubadora,
ajustando la temperatura al rango de Hongos y Levaduras, entre 21-25C con rango de
49
fluctuacin de 2.5C por un periodo de 7 das. Al cabo de este periodo se realizo la
primera observacin visual de los frascos analizando los siguientes parmetros
Visualizacin de crecimiento por la turbidez del medio

Cambios desproporcionados de color del medio
Presencia de alguna fuga del medio
Posterior al anlisis, ya que se contaba con la misma incubadora para ambos rangos de
incubacin, se aumento la temperatura de los frascos entre 30-34C con rango de
fluctuacin de 2.5C por un periodo de 7 das. Al cabo de este periodo se realizo
nuevamente el anlisis visual que se hizo en la primera incubacin. (Stockdale D, 2004)
5.4.4 Tratamiento de los resultados de Controles Microbiolgicos del rea Estril

Para los anlisis de microbiologa se utilizaron medios slidos comerciales Biomerieux
de TSB y Saboraud preparados y pre-empacados en placas de petri, listos para su
utilizacin.
Con respecto al anlisis de los Resultados de los controles microbiolgicos del rea
obtenidos durante el proceso de Validacin, se sigui el siguiente esquema para
correlacionar estos datos con los resultados de las pruebas de llenado asptico con
medio de cultivo:
Figura No. 4 Tratamiento de los Resultados de Anlisis Microbiolgicos en:

Validacin retrospectiva y control estadstico de procesos en la industria farmacutica
(Gonzles G, 2005)
50
5.5 Recoleccin de la Informacin
Dentro de la documentacin tcnica del Proceso de Validacin se realizo: un protocolo
Plan Maestro de Validacin (PMV), un protocolo de Calificacin de Instalaciones (IQ), un
protocolo de Calificacin Operacional (OQ) y un protocolo de Calificacin de Desempeo
(PQ). Los 3 protocolos de Calificacin IQ (Anexo E), OQ (Anexo F) y PQ (Anexo G) se
anexan con modificaciones del documento oficial en este Trabajo de Grado como parte
de la metodologa de la Validacin y como parte de los Resultados obtenidos, ya que
uno de los objetivos planteados de la Validacin es la realizacin de los documentos
tcnicos de carcter oficial de VICAR FARMACEUTICA S.A. En cuanto al protocolo
PMV, no se anexa ya que corresponde al mismo procedimiento descriptivo de la
metodologa de este Trabajo de Grado.
En estos protocolos se describen detalladamente todas las variables cuantificables que
son parte de este estudio de Validacin del proceso de Llenado Asptico.
5.6 Anlisis de la Informacin

El criterio especfico recomendado para evaluar el estado de control de la lnea asptica
en el rea de Inyectables de VICAR FARMACEUTICA S.A. es:
Para cualquier tamao de lote y cada corrida individual de envase de Medio TSB,
el Lmite expresado en Porcentaje de Contaminacin no debe superar en ningn
caso el 0.1% del Total de Envases Incubados despreciando las unidades
defectuosas. (FDA, 1984, Carleton and Agalloco, 1999)
El porcentaje de la prueba se puede expresar en porcentaje de contaminacin y se

calcula mediante la siguiente formula:
A
100
BC
Donde A= unidades contaminadas, B= unidades llenadas y C= unidades defectuosas.

(Anastasio P, Bertolino A, 1990)
Para cualquier tamao de corrida, los incidentes intermitentes de contaminacin

microbiana en la corrida de la prueba pueden ser indicativos de un problema de
contaminacin persistente de nivel bajo el cual debe ser investigado. En consecuencia,
los incidentes que se repiten de unidades contaminadas en la prueba para una lnea
individual, sin tener en cuenta criterios de aceptacin, seran una seal de una tendencia
adversa en la lnea de procesamiento asptica que debera conducir a la identificacin
del problema, una correccin, y la revalidacin.
51
El uso de los criterios de aceptacin de la prueba por parte de un fabricante permite que
la contaminacin infrecuente no signifique que un lote del producto farmacutico que
pretenda ser estril pueda contener una unidad no estril. El objetivo de un proceso
asptico es prevenir cualquier contaminacin. Cabe notar que la FDA tambin reconoce
que podra haber algunas limitaciones cientficas y tcnicas en como la simulacin de
procesos puede caracterizar precisa y exactamente un sistema de controles cuyo
propsito sea excluir la contaminacin. (FDA, 2004)
En caso de presentarse un solo frasco con presencia de contaminacin, se debe llevar a

cabo un proceso de identificacin, primero por coloracin de Gram en medios selectivos
para identificar E. coli, Salmonella sp, Pseudomonas aeruginosa y S. aureus. Como
principales patgenos de riesgo, e igualmente se debe llevar la muestra a un laboratorio
externo para su identificacin bioqumica al grado de especie.
5.6.1 Anlisis Estadsticos

Para poder entender si un proceso se encuentra en control o no, es indispensable llevar
a cabo un anlisis estadstico de los resultados que se obtengan por lo cual este se
llevara a cabo en este estudio de Validacin de llenado asptico con relacin a los
anlisis microbiolgicos de Ambientes, Superficies, Equipos y Operarios durante las
corridas de la prueba Media fill, los cuales determinan los Procesos de control estril en
el rea que afectan intrnsecamente el producto envasado.
5.6.2 Estadstica Matemtica (Anlisis numrico)
5.6.2.1 Media ()
Se define como un valor representativo de una serie de mediciones de un parmetro
determinado. Estas mediciones deben ser tomadas bajo las mismas condiciones de
modo tal que el valor resultante represente en forma objetiva dicho parmetro. Este
concepto seala la tendencia de centralizacin de los datos con respecto al valor
nominal de la especificacin. Se va a utilizar para los resultados de la prueba de Llenado
Asptico y los controles microbiolgicos en las 3 corridas. (Montgomery D, 1991)
Numricamente se obtiene del cuociente entre la sumatoria de todos los valores de la

serie, y el nmero total de mediciones, es decir:
= x donde x = valor de cada medicin de la serie, y n = nmero de mediciones.
52
Existe una diferencia conceptual entre la Media de la Muestra (x) y la Media de la
Poblacin (), basada principalmente en la cantidad de mediciones realizadas, las cuales
en la prctica tienden a despreciarse. (Montgomery D, 1991)
5.6.2.2 Desviacin Estndar ()

Es una medida de la dispersin de una serie de mediciones de un determinado
parmetro, esto significa que nos da la idea de la variacin entre cada valor y la media.
Tanto este concepto como el concepto de media, se visualizan mejor cuando se
presentan los datos en forma de una Distribucin de Frecuencia, es decir, ordenados por
clase segn su magnitud. La representacin grfica de esta distribucin de frecuencia se
le llama Histograma. (Montgomery D, 1991)
Numricamente, la desviacin estndar se obtiene de la raz cuadrada de la sumatoria

de todos los N cuadrados de la diferencia entre cada valor de la serie y su media,
dividido por el nmero total de mediciones, es decir:
Tambin existe una diferencia conceptual entre la Desviacin Estndar de la Muestra (s)
y Desviacin Estndar de la Poblacin (). En el presente estudio se utilizar la
desviacin estndar para determinar la variabilidad del proceso con respecto a los
controles microbiolgicos y la prueba Media fill, adems de establecer los lmites de
control que evaluarn el proceso. (Montgomery D, 1991)
5.6.2.3 Estudio de Capacidad

Se realiza para determinar la reproducibilidad del proceso o anlisis en forma
consistente. Se basa en el clculo de distintos ndices los cuales ocupan la informacin
entregada por los valores de media y desviacin estndar. (Montgomery D, 1991)
Determinacin de los Lmites superior e inferior

Limite Superior (LS): + 3
Limite Inferior (LI): 3
ndice de Capacidad del Proceso (Cp): establece una relacin entre los lmites de
especificacin establecidos para ese proceso (LES y LEI) y la variabilidad del proceso,
sin embargo, no seala si el proceso cumple con esas especificaciones, ya que no se
refiere al valor medio de ste. . Para este estudio se estableci el ndice de Capacidad
53
del Proceso Superior (Cps), contando slo con un lmite de especificacin superior
establecido por la USP26, 2002, para casos en que se cuenta slo con un lmite de
especificacin; para estos casos, los criterios de aceptacin son distintos a los procesos
que cuentan con dos especificaciones. (Montgomery D, 1991)
Cp = (LES- LEI) / 6
Cps = (LES ) / 3
Cpi = ( LEI ) / 3
LES = Lmite de Especificacin Superior
LEI = Lmite de Especificacin Inferior
En trminos generales, se pueden mencionar los valores adecuados de estos ndices en

la tabla No. 5:
Tabla No. 5 Resumen de ndices de Capacidad del Proceso en:

(Gonzles G, 2004)
Cuando se cuenta con variables con una sola especificacin (superior o inferior) o
cuando existen variables de distinta categora, como estndar o crticas, se establecen
algunas diferencias en los valores exigidos de estos ndices. Esto queda de manifiesto
en la tabla No. 6:
Tabla No. 6 Valores de los ndices segn las variables en:

(Gonzles G, 2004)
54
* Se entiende por variable estndar aquella que a pesar de su importancia, no es
esencial para las caractersticas finales del proceso.
**Se entiende por variable crtica aquella que es fundamental para las caractersticas
finales del proceso. (Montgomery D, 1991)
Para los casos en que se cuenta con una sola especificacin, los valores de Cp
corresponden al ndice de Capacidad del Proceso Superior (Cps) e Inferior (Cpi), segn
corresponda. No es posible calcular Cpk y Cpm en estos casos, ya que la definicin de
estos ndices incluye ambas especificaciones. (Montgomery D, 1991)
Estos ndices ayudan a comprender mejor el comportamiento de las etapas estudiadas a
lo largo del proceso. (Montgomery D, 1991)
55
6. RESULTADOS
Las tres pruebas de simulacin de proceso de llenado asptico en el rea de inyectables

de VICAR FARMACUTICA S.A. fueron supervisadas siempre por las reas de Control
de Calidad, Mantenimiento y Produccin. Se realizo una grabacin por Video de
aproximadamente 15 minutos para cada prueba la cual fue til para identificar ciertas
falencias que pueden afectar negativamente el proceso asptico en las actividades de
los operarios de preparacin, envase y mantenimiento al igual que los analistas de
microbiologa.
Con respecto a la prueba de promocin de crecimiento del medio de cultivo TSB los
resultados fueron los siguientes:
6.1 Criterios de Crecimiento por turbidez (Biomasa apreciable)
Se realizaron pruebas de promocin de crecimiento de los 30 frascos de 500ml divididos

en dos lotes, uno por cada lote de la marca comercial Biomerieux. Esta prueba se realizo
una sola vez para toda la validacin.
Bueno: Turbidez en ms del 60% del medio liquido TSB

Moderado: Turbidez entre el 20 y 60% del medio liquido TSB
Pobre: Turbidez entre el 1 y 20% del medio liquido TSB
Negativo: Sin presencia de turbidez y/o cambios significativos en el medio liquido TSB.
Control Negativo del medio: medio TSB incubado 120 horas
La tabla No. 7 resume los resultados de la prueba de promocin de crecimiento del
medio TSB
Tabla No. 7 Resultado Promocin de Crecimiento

Cepa de Ensayo Aparicin de Turbidez Crecimiento por
(horas de Incubacin) Turbidez
Escherichia coli 24 horas Bueno
Staphylococcus aureus 24 horas Bueno
Streptococcus pneumoniae 24 horas Bueno
Pseudomonas aeruginosa 48 horas Moderado
Bacillus subtilis 24 horas Bueno
Aspergillus flavus 96 horas Moderado
Candida albicans 72 horas Bueno
Control Negativo (120 horas de --------- Negativo
incubacin)
56
Se realizaron cuatro documentos tcnicos oficiales de VICAR FARMACUTICA S.A
sobre este proceso de Validacin de Llenado Asptico en donde se aprecian los
protocolos utilizados para llevar a cabo las tres pruebas y de este modo obtener la
evidencia documentada. Los resultados de la Calificacin de la Instalacin (IQ),
Calificacin Operacional (OQ) y calificacin de Desempeo (PQ) se muestran a
continuacin:
6.2 Calificacin de las Instalaciones (IQ) (Anexo E)
6.2.1 Verificacin de las condiciones de Operacin por Equipo

La tabla No. 8 resume las condiciones tcnicas, inspeccin visual y parmetros
establecidos para los equipos involucrados en el rea de envase estril de inyectables.
Tabla No. 8 Condiciones de Operacin por Equipo
EQUIPO O PARTE DESCRIPCIN DE OPERACIN

Presin Interna Autoclave Se mantuvo la presin a 20 psi en 30 minutos de
(Registro por 30 minutos de la operacin.
temperatura) Registro temperatura:
Min. 0: 115C / Min. 5: 120C / Min. 10: 120C / Min.
15: 121C / Min. 20: 120C / Min. 25: 120C / Min. 30:
118C.
Horno despirogenizador (Temp Temperatura Mxima: 248C por 1 hora
mxima)
Inspeccin tcnica maquina No hay corrosin en la lnea del producto, ni en

envasadora las agujas, ni vlvulas de entrada.
Limpieza adecuada
Volumen calibrado: 2ml.
Velocidad de envase: 1000 unidades/hora aprox.
Condiciones de Operacin Pruebas de LAL: negativo
Sistema de Agua destilada para Pruebas de Esterilidad: Negativas
inyeccin WFI (Para las tres Ultimo mantenimiento preventivo: 10 de Enero
pruebas resultados de de 2007
microbiologa dos semanas antes
de cada una)
Condiciones Operacin Cabina de Condiciones de limpieza adecuadas.
Flujo Laminar Vertical Calificacin Operacional: 25 de Marzo de 2005
(Anexo H)
6.2.2 Calificacin de la incubadora de la prueba de Llenado Asptico

La tabla No. 9 tabula los resultados de temperatura de la Incubadora empleada para los
frascos durante los 14 das de incubacin, registrada por la maana y por la tarde en los
das laborales hbiles.
57
Tabla No. 9 Calificacin de la Incubadora de las pruebas de Llenado Asptico
INCUBADORA 30 35C INCUBADORA 22 25C
Fecha Temp. am Temp. pm Fecha Temp. am Temp. pm
24-05-07 32.2 33.4 16-05-07 23.2 23.7
25-05-07 33.6 33.0 17-05-07 22.0 22.2
26-05-07 33.8 33.7 18-05-07 22.5 23.4
28-05-07 35.1 35.4 21-05-07 23.0 23.6
29-05-07 33.7 33.9 22-05-07 23.9 23.8
30-05-07 33.5 33.1 23-05-07 23.2 23.5
24-05-07 23.0 23.6
Desviacin 0.922 0.878 Desviacin 0.596 0.545
Estndar Estndar
Limite 36.42C 36.38C Limite 24.76C 25.03C
Superior Superior
Limite 30.88C 31.12C Limite 21.18C 21.77C
Inferior Inferior
6.2.3 Calificacin de desinfectantes usados durante la prueba de Llenado Asptico
La Tabla No. 10 muestra los desinfectantes de rotacin que se utilizaron durante las tres
pruebas y su principio activo.
Tabla No. 10 Calificacin de desinfectantes de la prueba de Llenado Aseptico

Numero de
1 2 3
Prueba
DESCRIPCION DESINFECTANTE EN ROTACIN
-Tanques de
Acero
-Carcasas de
Acero
EQUIPOS PARA -Soportes de
MAT 98 MAT 99 Amonio Novaxidin
FABRICACION Y filtros
Fenolico Cuaternario Clorhexidina
ENVASE -Partes de
maquinas
-Agitadores
-Utensilios de
envase.
-Piso-pared
-Puertas-ventanas
SUPERFICIES REA MAT 98 MAT 99 Amonio Novaxidin
-Mesones acero
ENVASE Fenolico Cuaternario Clorhexidina
-Ductos
-Equipos fijos
-Operarios envase
Etanol
GUANTES Y MANOS -Personal
70% Etanol 70% Etanol 70%
OPERARIOS ENVASE mantenimiento
-Analistas
58
6.2.4 Condiciones de Operacin de Medidores y Vlvulas
La tabla No. 11 muestra las lecturas realizadas de los medidores de presiones y las
condiciones visuales de las vlvulas dentro del rea estril de envase.
Tabla No. 11 Revisin de Manmetros y Vlvulas de la lnea de Envase.

EQUIPO ESPECIFICACIN
Manmetros del Equipo de 22 psi
Filtracin
Manmetros de la lnea de 40 psi
Nitrgeno
Diferencial de presin del rea de 0.05 wc
envase
Sin corrosin
Vlvulas de entrada de nitrgeno Abre y cierra correctamente
Vlvulas de entrada maquina Sin corrosin
envasadora Abre y cierra correctamente
Sin corrosin
Vlvulas de dosificacin. Abre y cierra correctamente
6.3 Calificacin Operacional (OQ) (Anexo F):
Para la calificacin operacional se tiene en cuenta como objetivo principal el control de

esterilidad del proceso involucrando ambientes, superficies, operarios, medio TSB
filtrado y el agua destilada (WFI) de produccin. Los puntos de muestreo que se
incluyeron en los anlisis se obtuvieron en base a un estudio de puntos crticos en el
proceso de preparacin y envase estril y los resultados (UFC bacterias, UFC mohos y
levaduras) por cada prueba se presentan a continuacin desde la tabla No. 12 hasta la
tabla No. 26:
6.3.1 Prueba No. 1
Fecha: 16 de Marzo de 2007

Analistas: Jean Paul Rios A y Ana Maria Gonzales.
Los tres primeros puntos de la tabla No. 12, se tomaron por triplicado, uno para cada
tiempo de presentacin de envase iniciando en el siguiente orden: Ampolletas 2ml,
Frasco 10ml y Frasco 500ml
59
Tabla No. 12 Anlisis microbiolgico de Ambientes
PUNTO(S) DE MUESTREO RESULTADO
(UFC/ 1hora)
Bacterias MyL
Mesn dentro de la cabina de flujo laminar* 0,0,0 0,0,0
Piso cerca de la puerta de entrada al rea 0,0,0 0,0,0

envase*
Piso cerca de la puerta de la autoclave* 0,0,1 0,0,0
Piso Preparaciones 3 0
Mesn Preparaciones 0 0
Vestier cerca de puerta de Preparacin 4 0
Vestier cerca de espejo 0 0
Vestier sobre el lavamanos 1 0
* Puntos tomados por triplicado, uno por cada tiempo de presentacin.
Tabla No. 13 Anlisis microbiolgico de Superficies

(UFC/25cm2)
Bacterias MyL
Mesn dentro de la cabina 0 0
Piso fuera de la cabina 1 0
Piso dentro de la cabina 0 0
Pared fuera de la cabina 0 0
Ventana fuera de la cabina 0 0
Cortina parte interna de la cabina 0 0
Puerta de entrada rea 0 0
Puerta del horno despirogenizador 0 0
Puerta de la autoclave 0 0
Bandeja de alimentacin maquina envasadora 0 0
Tabla No. 14 Anlisis Microbiolgico de Equipos

PUNTO(S) DE MUESTREO RESULTADO (UFC/equipo)
Bacterias MyL
Interior tanque de preparacin de 200L 0 0
Aguja de la maquina envasadora 0 0
Entrada de producto a maquina envasadora 0 0
Manguera de entrada producto a la carcasa No. 1 (Carcasa 3 0
de prefiltracin de 0,65micras)
Entrada carcasa No. 1 13 0
Salida carcasa No. 2 (Carcasa de filtracin estril de 0,45 y 0 0
0,22 micras)
Manguera de salida a la vlvula dosificadora (conectada a 0 0
la carcasa No. 2)
Vlvula dosificadora de llenado (parte interna y borde 0 0
externo)
60
Tabla No. 15 Anlisis Microbiolgicos de Envases contenedores, Medio filtrado,
agua de Inyeccin y Producto terminado
ANLISIS PUNTO(S) DE MUESTREO RESULTADO
MICROBIOLGICO
Anlisis Producto Ausencia o Presencia de Microorganismos en Ausencia en 6
Terminado anlisis de productos estriles de la semana productos
anterior a la prueba. analizados
Anlisis Medio TSB Medio TSB el cual se recoge inmediatamente Ausencia
filtrado despus de la filtracin esterilizante
Anlisis Material de 10 Frascos de 10ml Ausencia
envase 10 Ampolletas de 2ml Ausencia
6 Frascos de 500ml Ausencia
Anlisis Agua de Agua tipo WFI que se recoge en tanque como Ausencia
Inyeccin materia prima para la preparacin del medio
TSB.
Actividades de Operarios:
*Actividad No. 1 Critica para Ampolletas: alimentacin de la maquina envasadora de

ampolletas.
*Actividad No. 2 para Ampolletas: recepcin de ampolletas de la maquina envasadora.
*Actividad No. 1 Critica para Frascos: llenado manual de frascos con vlvula de
dosificacin.
*Actividad No. 2 para Frascos: cierre manual con tapn y grafado del envase.
La tabla No. 16 muestra los resultados de los anlisis de guantes y uniformes para la
primera prueba, en donde se realizo la rotacin de las actividades de los operarios,
siendo la actividad No. 1 la actividad mas critica del proceso de envase estril.
Tabla No. 16 Anlisis Microbiolgico de Guantes y Uniforme Operarios

ANLISIS OPERARIOS (UFC/guantes, UFC/uniformes)
Antes Mitad Final Uniforme Envase en
Proceso
Actividad Nombre Guantes (Bacterias/MyL)
(Bacterias/MyL)
*Actividad No. Adriana 0/0 0/0 0/0 0/0 Ampolla 2ml
1 (1 turno)
*Actividad No. Elsa 0/0 0/0 0/0 0/0 Ampolla 2ml
1 (1 turno)
*Actividad No. Blanca 0/0 0/0 0/0 0/0 Frasco 10ml
1 (2 turno)
*Actividad No. Liliana 0/0 0/0 0/0 0/0 Frasco
1 (2 turno) 500ml
Analista(s) Jean 0/0 0/0
Paul
Ana 0/0 0/0
Maria
61
6.3.2 Prueba No. 2
Fecha: 13 de Abril de 2007

Analista: Jean Paul Rios A.
Tabla No. 17 Anlisis microbiolgico de Ambientes

(UFC/1 hora)
Bacterias MyL

envase*
Vestiersobre el lavamanos 3 0
Tabla No. 18 Anlisis Microbiolgico de Superficies

(UFC/25cm2)
Bacterias MyL
62
(UFC/equipo)
Bacterias MyL
Entrada del producto a maquina envasadora 0 0
Manguera de entrada producto a la carcasa No. 1 (Carcasa de 0 0
prefiltracin de 0,65micras)
Salida carcasa No. 2 (Carcasa de filtracin estril de 0,45 y 0,22 0 0
micras)
Manguera de salida a la vlvula dosificadora (conectada a la carcasa 0 0
No. 2)
Vlvula dosificadora de llenado (parte interna y borde externo) 0 0

MICROBIOLGICO
TSB.
Como se aprecia en la tabla No. 21, para la segunda prueba, No se realizo rotacin de
operarios, mantenindose en cada turno un operario para la actividad critica No. 1.

Antes Mitad Final Uniforme Envase en
Proceso
Actividad Nombre Guantes (Bacterias/MyL)
(Bacterias/MyL)
*Actividad No. 1 Elsa 0/0 1/0 0/0 0/0 Ampolla 2ml
(1 turno)
*Actividad No. 2 Adriana --- --- 0/0 7/0 Ampolla 2ml
(1 turno)
*Actividad No. 1 Blanca 0/0 0/0 0/0 0/0 Frascos 10ml/
(2 turno) 500ml
*Actividad No. 2 Liliana --- --- 0/0 0/0 Frascos 10ml/
(2 turno) 500ml
Analista(s) Jean P 0/0 0/0
63
6.3.3 Prueba No. 3
Fecha: 16 de Mayo de 2007

Analista: Jean Paul Rios A.
Tabla No. 22 Anlisis Microbiolgico de Ambientes

(UFC/10min/20L)
Bacterias MyL

envase*
Vestier sobre el lavamanos 0 0
Tabla No. 23 Anlisis Microbiolgico de Superficies

RESULTADO
PUNTO(S) DE MUESTREO (UFC/25cm2)
Bacterias MyL
64
(UFC/equipo)
Bacterias MyL
Entrada del producto maquina a envasadora 0 0
Manguera de entrada producto a la carcasa No. 1 0 0
(Carcasa de prefiltracin de 0,65micras)
Salida carcasa No. 2 (Carcasa de filtracin estril de 0 0
0,45 y 0,22 micras)
Manguera de salida a la vlvula dosificadora 0 0
(conectada a la carcasa No. 2)
Vlvula dosificadora de llenado (parte interna y 0 0
borde externo)

MICROBIOLGICO
TSB.
En la tabla No. 26 se puede evidenciar el cambio en el orden de las actividades de la

segunda prueba, mantenindose en cada turno un operario para la actividad No. 1.

Antes Mitad Final Uniforme Envase
en
Actividad Nombre Guantes (Bacterias/MyL) (Bacterias/MyL)
Proceso
*Actividad No. 1 Liliana 0/0 0/0 0/0 0/0 Ampolla
(1 turno) 2ml
*Actividad No. 2 Blanca --- --- 0/0 0/0 Ampolla
(1 turno) 2ml
*Actividad No. 1 Adriana 0/0 0/0 0/0 0/0 Frasco
(2 turno) 10ml
*Actividad No. 2 Elsa --- --- 0/0 0/0 Frasco
(2 turno) 500ml
Analista(s) Jean Paul 0/0 0/0
65
6.3.4 Anlisis Estadstico por Puntos de Muestreo
Para el anlisis estadstico se utilizaron los lmites de especificacin definidos por los
procedimientos estndares de microbiologa para el rea de inyectables de VICAR
FARMACUTICA S.A. como el lmite de especificacin superior. Se utiliza una
desviacin estndar poblacional, con un n muestral igual a tres (3) y nueve (9) en el caso
de los tres puntos de ambientes dentro del rea de envase. El ndice de Capacidad nos
muestra que tan adecuado o no se encuentra el control del proceso de esterilidad del
rea fsica y de los operarios involucrados en el proceso. Para este estudio se tomaron
los resultados de anlisis microbiolgicos en UFC (unidades formadoras de colonias)
como variable crtica en cada punto, por lo tanto el ndice de Capacidad de Proceso Cps
debe ser 1.45, lo cual denota que el proceso se encuentra en control adecuadamente.
Las limitaciones de este anlisis estadstico se relacionan con el valor cero (0) de la
variable en estudio (UFC por punto de muestreo), ya que si la desviacin estndar tiene
un valor de cero (0), el ndice de capacidad del proceso tendr el mismo valor, y la
apreciacin estadstica no tendra un valor significativo real, sino una apreciacin
cualitativa favorable como proceso adecuado. La tabla No. 27 presenta los ndices de
capacidad de proceso para una variable crtica y su condicin de control del mismo:
Tabla No. 27 ndice Capacidad de Proceso en:

(Gonzles G, 2004)
VALOR INDICE CONDICION

Cps 1.45 Adecuado
1.1 < Cps < 1.45 Adecuado pero requiere control estricto
0.73 < Cps < 1.1 No adecuado, requiere un anlisis del proceso
Cps < 0.73 No adecuado, requiere modificaciones
El lmite Cps se obtiene de la siguiente manera:
Cps =
(LES )
3
LES = LIMITE DE ESPECIFICACIN SUPERIOR EN UFC

() = Media Aritmtica
() = desviacin estndar.
Desde la tabla No. 28 hasta la tabla No. 33 se presentan los resultados tabulados con la
desviacin estndar para las cuatro categoras de Anlisis microbiolgico de las tres
66
pruebas y el ndice de capacidad de proceso (Cps de ser mayor de 1.45). Los asteriscos
muestran los puntos que se encuentran por debajo de este ndice Cps, los cuales sern
discutidos mas adelante. Por cada categora de anlisis microbiolgico se tienen
resultados de dos grupos los cuales son Bacterias y Hongos Levaduras, pero solo
aparecen si presentaron recuento en UFC mayor a cero (0).
Tabla No. 28 Ambientes (Bacterias)

PUNTO(S) DE MUESTREO Limite de Desviacin ndice de Capacidad
Especificacin Estndar () (Variable Critica)
(UFC) Cps 1.45
Mesn dentro de la cabina de flujo <1 0 0
laminar
Piso cerca de la puerta de entrada <5 0 0
al rea envase
Piso cerca de la puerta de la <5 0.099 16.465
autoclave
Piso Preparaciones <10 1.414 2.12
Mesn Preparaciones <10 0 0
Vestier cerca de puerta de <10 0.943 1.887
Preparacin
Vestier cerca de espejo <10 1.414 1.885
Vestier sobre el lavamanos <10 1.247 2.316
Tabla No. 29 Superficies (Bacterias)

(UFC) Cps 1.45
Mesn dentro de la cabina <1 0 0
Piso fuera de la cabina <5 1.247 0.98*
Piso dentro de la cabina <5 0.577 4.903
Pared fuera de la cabina <5 0 0
Ventana fuera de la cabina <5 0 0
Cortina parte interna de la cabina <1 0 0
Puerta de entrada rea <5 0 0
Puerta del horno despirogenizador <5 0 0
Puerta de la autoclave <5 0 0
Bandeja de alimentacin maquina <1 0 0
envasadora
67
Tabla No. 30 Superficies (Mohos y Levaduras)
Esp. (UFC) Estndar () (V. Critica) Cps 1.45
Piso fuera de la cabina <5 0.667 2.332
Tabla No. 31 Equipos (Bacterias)

(UFC) Cps 1.45
Interior tanque de preparacin de <100 0 0
200L
Aguja de la maquina envasadora <1 0 0
Entrada del producto a maquina <1 0 0
envasadora
Manguera de entrada producto a la <100 1.414 2.12
carcasa No. 1 (Carcasa de
prefiltracin de 0,65micras)
Entrada carcasa No. 1 <100 5.436 2.892
Salida carcasa No. 2 (Carcasa de <1 0 0
filtracin estril de 0,45 y 0,22
micras)
Manguera de salida a la vlvula <1 0 0
dosificadora (conectada a la
carcasa No. 2)
Vlvula dosificadora de llenado <1 0 0
(parte interna y borde externo)
Tabla No. 32 Guantes de Operarios (Bacterias)

Nombre de Limite de Desviacin ndice de Capacidad
Operario
(UFC) Cps 1.45
Adriana <3 0 0
Elsa <3 0.667 1.334*
Blanca <3 0 0
Liliana <3 0 0
Tabla No. 33 Uniformes de Operarios (Bacterias)

Nombre de Limite de Desviacin ndice de Capacidad
Operario
(UFC) Cps 1.45
Adriana <3 3.301 0.067*
Elsa <3 0 0
Blanca <3 0 0
Liliana <3 0 0
68
6.4 Calificacin de Desempeo (PQ) (Anexo G)
6.4.1 Reproducibilidad del Proceso de Esterilidad (Guantes y Uniformes)

La tabla No. 34 nos muestra la desviacin estndar de reproducibilidad que es la
variabilidad que se obtiene cuando se aplica el proceso el mismo da, con el mismo
equipo pero diferente operario, para los procesos de esterilidad en guantes y uniformes
de operarios, que se obtuvo en la primera prueba. Se estimo este parmetro a travs de
la suma de la media aritmtica y la desviacin estndar de cada proceso.
Tabla No. 34 Primera Prueba

Punto Limite de Desviacin Reproducibilidad
Muestreo
Especificacin Estndar () del Proceso
(UFC)
Guantes <3 0 Si
Uniformes <3 0 Si
6.4.2 Repetibilidad del Proceso de Esterilidad (Guantes y Uniformes)
La tabla No. 35 muestra la desviacin estndar de repetibilidad que es la variabilidad que

se obtiene cuando se aplica el proceso el mismo da, con el mismo equipo y el mismo
operario y el resultado se compara con las mismas condiciones en da diferente, para los
procesos de esterilidad en guantes y uniformes de operarios que se obtuvo de los
resultados de la segunda prueba, en la cual se aprecia que el proceso de uniformes no
cumple con este parmetro.
Tabla No. 35 Segunda Prueba

Punto de Limite de Media Aritmtica Desviacin Repetibilidad
Muestreo
(UFC)
Guantes <3 0.25 0.433 Si
Uniforme <3 1.75 3.031 No
La tabla No. 36 nos muestra la desviacin estndar de repetibilidad (diferente da, mismo
equipo, diferente operario) en comparacin con los resultados de la tabla No. 35, para el
proceso de esterilidad en guantes y uniformes de operarios que se obtuvo de los
resultados de la tercera prueba
69
Tabla No. 36 Tercera Prueba
Punto de Limite de Desviacin Repetibilidad
Muestreo
(UFC)
Guantes <3 0 Si
Uniforme <3 0 Si
6.4.3 Resultado Pruebas de Llenado Asptico

El nmero de envases que estaba estimado en la metodologa de la Validacin del
Proceso es el siguiente:
Ampolletas de 2ml: 3000 unidades
Frascos de 10ml: 3000 unidades
Frascos 500ml: 200 unidades
El nmero de frascos reales envasados se presenta a continuacin, especificado para

cada prueba. La diferencia entre el valor estimado y el valor real se debe a errores
asociados al proceso de envase como unidades de defectuosas, unidades que se caen
al suelo, entre otras.
Las unidades envasadas fueron inspeccionadas una a una despus de cumplir los 2
periodos de incubacin a los 7 das y a los 14 das.
El lmite de especificacin superior de contaminacin para los frascos envasados con
medio TSB corresponde al 0.1% y la manera en que se obtuvo es la siguiente:
A
100
BC

El nmero de unidades defectuosas despus del proceso de incubacin fue de cero para
las tres pruebas, por lo cual no se incluye este dato en las tablas de resultado
Las tablas No. 37, 38 y 39 muestran los resultados del crecimiento microbiolgico en los
frascos con medio de cultivo TSB incubados segn los parmetros establecidos en la
metodologa.
6.4.1 Porcentaje de Contaminacin prueba No. 1
70
Tabla No. 37 Frascos Envasados prueba No. 1
Volumen Fecha No. No. No. No. Porcentaje
Envase envase Unidades Unidades Unidades Unidades Contaminacin
(ml) envasadas con con con fuga (%)
reales turbidez cambio del
de color medio
Ampolletas 16 3046 0 0 0 0
2ml marzo/07
Frasco 16 2802 0 0 0 0
10ml marzo/
07
Frasco 16 193 0 0 0 0
500ml marzo/
07
Tabla No. 38 Frascos envasados prueba No. 2

de color medio
Ampolletas 13 abril 2861 0 0 0 0
2ml /07
Frasco 13 2980 0 0 0 0
10ml abril/
07
Frasco 13 199 0 0 0 0
500ml abril/
07
Tabla No. 39 Frascos envasados Prueba No. 3

de color medio
Ampolletas 16 2843 0 0 0 0
2ml mayo/07
Frasco 16 2918 0 0 0 0
10ml mayo/07
Frasco 16 204 0 0 0 0
500ml mayo/07
6.5 Imgenes del Envase Manual del rea de Inyectables
Las figuras 5, 6, 7 y 8 muestran el rea de envase donde se realizaron las 3 pruebas de

Validacin, y el tanque de acero de 200L con agitador elctrico que se utilizo siempre
71
para el proceso de preparacin del medio de cultivo TSB. Igualmente se puede detallar
como es el uniforme del rea, y las principales actividades que realizan las operarias
durante el envase de frasco de 10ml.
Figura No. 5 Envase Manual de Frascos de 10ml
Figura No. 6 Taponado Frasco 10ml
72
Figura No. 7 Grafado Frasco de 10ml
Figura no. 8 Tanque de Preparacin de 200L
73
6.6 Discusin de Resultados
El medio de cultivo nutritivo TSB es el ms adecuado para pruebas de llenado asptico

a nivel farmacutico, ya que permite un crecimiento eficiente de los microorganismos
aerobios mesofilos totales incluyendo bacterias, levaduras y Mohos patgenos que son
de difcil crecimiento en medios no selectivos. Este medio muestra un crecimiento rpido
de cepas como E. coli, S. aureus, B. subtilis e inclusive levaduras como Candida
albicans en comparacin con los ensayos de promocin de crecimiento. A pesar de las
condiciones de stress trmico, qumico y ambiental a las que se ven sometidos los
microorganismos en esta rea de esterilidad, este medio permite su recuperacin eficaz
de superficies, ambientes, equipos y operarios, gracias a su baja selectividad, debido a
que no posee inhibidores de ninguna clase y su formulacin incluye sustratos de fcil
asimilacin metablica para los microorganismos. Adems de esto, debido a la baja
viscosidad del medio, esto lo hace ideal para el proceso de filtracin esterilizante, ya que
simula perfectamente cualquier producto lquido de baja viscosidad que se envase en el
rea de inyectables. As mismo es muy eficaz para la deteccin visual de crecimiento por
turbidez gracias a la claridad que posee. Todo lo anterior es concordante con las
especificaciones tcnicas emitidas por la USP26 de 2002 acerca de este medio y por las
recomendaciones tcnicas de la FDA, septiembre de 2004.
La Calificacin de las Instalaciones es un aspecto vital en la Validacin de Llenado

Asptico ya que el mantenimiento preventivo y la calificacin de los equipos encargados
de la esterilizacin del material y los envases del proceso de llenado asptico son
fundamentales como documentacin tcnica histrica del buen funcionamiento de las
condiciones estriles del proceso. Por lo tanto, antes de empezar las pruebas se realizo
la calificacin tcnica del Horno Despirogenizador del rea de inyectables, ya que este
presentaba problemas de transferencia de calor en ciertos puntos. Una vez realizada
esta calificacin de funcionamiento, se realizaron pruebas de despirogenizacin con el
Horno, realizando inactivacin de endotoxinas de E. coli, analizadas mediante tcnica de
LAL, las cuales mostraron resultados satisfactorios de la validez de la calificacin del
horno, ya que todos lo viales dieron resultado negativo de presencia de endotoxinas para
LAL. Todos los autores citados en este trabajo como Anastasio and Bertolino, 1990,
Berry and Nash, 1993, Carleton and Agalloco, 1999, FDA 2004, CDER 1994 coinciden
en la importancia de realizar la calificacin completa y/o mantenimiento preventivo de las
instalaciones o verificar que esta se haya realizado en los limites de tiempo establecidos,
previamente a la realizacin de las pruebas de llenado asptico, en las que se incluyen
la calificacin del horno despirogenizador, la autoclave, el sistema de ventilacin por
ductos, el sistema de filtracin esterilizante, el sistema de obtencin de agua para
inyectables y la cabina de flujo laminar.
74
En general todos los resultados obtenidos de la calificacin de las instalaciones para las
tres pruebas se encontraban dentro de los parmetros mtricos establecidos. El horno
despirogenizador estaba alcanzando la temperatura esperada de 250C +/- 15C,
igualmente la autoclave se mantuvo a la presin de 20 psi y temperatura de 120C +/-
5C que es la adecuada. Todos los manmetros, vlvulas de la lnea de llenado, filtros
esterilizantes estaban indicando las presiones esperadas. Las temperaturas de
incubacin de los envases se mantuvieron dentro los lmites inferior y superior con
respecto a la media y la desviacin estndar. Por otro lado el agua destilada de
inyeccin se encuentra bajo las especificaciones de control microbiolgico y se le realizo
el ltimo mantenimiento preventivo en enero del 2007. En cuanto a la cabina de flujo
laminar del rea de envase esta tuvo su ltima calificacin en marzo de 2005 y se realiza
cada tres aos (Anexo H).
La Calificacin Operacional muestra diversos aspectos a partir del anlisis estadstico de

los resultados obtenidos en el muestreo microbiolgico de los puntos establecidos. El
primer aspecto importante es que esta calificacin nos muestra si el proceso se
encuentra o no bajo control de esterilidad por puntos. El segundo aspecto relacionado
con los resultados radica en que los puntos ms crticos del proceso se encuentran bajo
control operacional de esterilidad y tales puntos son aquellos involucrados en el envase
directamente como lo son: ambientes, guantes de operarios y los equipos post filtracin
ubicados dentro de la cabina de flujo laminar. Este tipo de anlisis estadsticos es
ampliamente usado para Validar los procesos aspticos, como lo seala Gonzles G,
2005 en el control estadstico en la industria farmacutica.
Otro aspecto importante para resaltar se trata de la ausencia en ambientes, equipos y

operarios de mohos y levaduras, microorganismos muy resistentes a las condiciones
ambientales tanto fsicas como qumicas dentro de estas reas de fabricacin de
inyectables, ya que son capaces de resistir Aw (Actividad acuosa) relativamente bajos en
comparacin con las bacterias ocasionados por el sistema de control ambiental, al igual
que pH extremos ocasionados por los desinfectantes utilizados en las superficies. El
nico punto donde se determino la presencia de mohos y levaduras fue el piso de
envase fuera de la cabina, muy probablemente debido a derrames del medio de cultivo
TSB en conjunto con la circulacin de personal involucrado en esta rea. En general la
ausencia de mohos y levaduras indica buenos procesos de esterilidad (Carleton and
Agalloco, 1999)
El ambiente es un punto critico dentro del rea de envase para este proceso ya que
existen flujos de aire ocasionados por el sistema de flujo laminar aislado, el sistema de
presin positiva al interior y la turbulencia causada por el movimiento de los operarios,
75
personal de mantenimiento y analistas dentro de esta rea segn Berry and Nash, 1993
y Hernadez, 2004; por esta razn se tomaron muestras del mismo punto en cada
presentacin de envase por cada prueba. Los resultados de ambientes dentro de esta
rea muestran que los sistemas mencionados son eficientes para impedir la presencia
de microorganismos suspendidos en el ambiente. En general los valores Cps (Capacidad
de proceso) se encuentran por encima del ndice 1.45 para todos los puntos
muestreados, lo que demuestra que a pesar que hubo un flujo de personal en las reas
durante las pruebas (operarios de preparacin, operarios de mantenimiento, analistas),
el sistema de ambientes mantiene el rea bajo control de esterilidad, muy por debajo de
las especificaciones establecidas, y esto constituye parmetros de validacin conocidos
como robustez y solidez del proceso segn Gonzales G, 2005.
Las superficies que no se encuentran en contacto directo con el producto no constituyen

un punto crtico del proceso de control de esterilidad segn Carleton and Agalloco, 1993,
sin embargo la ausencia de microorganismos se debe tratar de mantener durante el
proceso de envase asptico. En general los resultados fueron adecuados a excepcin
del piso dentro del rea de envase, por fuera de la cabina de flujo, ya que el ndice Cps
fue de 0.98. Ya que el piso dentro del rea es uno solo y no se encuentra dividido, el
proceso de esterilidad no es adecuado y requiere anlisis de la desinfeccin del mismo
antes del inicio del envase e igualmente del proceso de circulacin de personal y
desinfeccin de las partes del uniforme en contacto con el piso.
El anlisis microbiolgico de los equipos si corresponde a un punto crtico del control de

esterilidad para esta validacin de procesos, ya que influye directamente sobre la calidad
estril del producto envasado. Todos los equipos y las actividades de envase manual
que se encuentren despus de la lnea de filtracin esterilizante cumplen un papel
primordial para lograr que el proceso se mantenga bajo las condiciones para la cual fue
diseado y que estas condiciones no afecten negativamente la esterilidad del producto,
lo cual es constante con lo que establece la FDA, 2004. Los resultados muestran
condiciones de esterilidad adecuadas de los equipos inmediatamente despus de la
lnea de filtracin.
Para determinar el limite superior de especificacin de los puntos analizados antes de la

entrada del producto en el sistema de filtracin, se utilizo la especificacin de las
materias primas no antibiticas utilizadas para la fabricacin de productos estriles
inyectables, que corresponde a 100UFC/ml de materia prima (USP26, 2002). El punto de
entrada a la carcasa de prefiltracin de 0.65 micras no muestra un incremento por
encima del limite especificado para dicho punto y el ndice Cps es 2.982. De igual
manera este recuento de microorganismos es el mas alto de todos los anlisis realizados
76
lo que indica que existe un punto de contaminacin entre la lnea de preparacin y el
sistema de filtracin. Esta conexin es el punto de entrada de la manguera proveniente
del tanque de preparacin de 200L. Al analizar este punto podemos deducir varios
aspectos, dentro de los cuales encontramos que este se encuentra completamente
aislado al ambiente; que su manipulacin corresponde a los operarios de envase, en el
momento de la conexin al sistema de filtracin; adems que la temperatura inicial del
medio de cultivo TSB (simulacin de un producto a envasar) se encuentra entre 70 y 75
C y declina hasta 45 C dentro del tanque de preparacin, 10 horas despus de iniciado
el proceso de filtracin, y que el hecho de haber presentado un recuento de bacterias no
significa que su origen sea estrictamente el punto de muestreo, ya que el sistema es
lineal e inicia en el tanque de preparacin.
Ya que se tiene un factor trmico que como tal no es un proceso diseado para reducir la
carga microbiolgica de las materias primas en preparacin de inyectables, pero
indirectamente esta colaborando en la destruccin trmica de organismos mesofilos, los
cuales tienen una temperatura mxima de crecimiento entre 35-47C (USP 26, 2002), y
grupo del cual hacen parte mas del 90% de organismos patgenos, se puede afirmar
que los microorganismos que estn presentes en este punto son termfilos cuya
temperatura optima de crecimiento se encuentra entre 55-75C (bacterias no patgenas).
Asumiendo que el calor dentro del tanque de preparacin se mantiene a temperatura
constante entre 70-75C en un punto de tiempo 0 al inicio del proceso de filtracin, a
medida que el medio de cultivo avanza a travs de la lnea, hay prdida por la
transferencia de calor por conduccin trmica, lo que disminuye la temperatura entre un
15 y 20%, es decir entre 55-60C, 10 horas despus en el punto de muestreo de la
carcasa.
En cuanto al origen de esta contaminacin, existen dos posibilidades predominantes, la

primera que tiene que ver con los operarios del rea de preparacin en el momento de
conectar la lnea de alimentacin (manguera) desde el tanque hacia el sistema de
filtracin dentro del rea de envase y en el momento de manipular las materias primas, y
la segunda que es la sobre exposicin innecesaria del medio de cultivo (producto
simulado) al ambiente que no posee control de esterilidad en el rea de preparacin. Se
descartan los operarios del rea de envase, ya que las conexiones despus del sistema
de filtracin no presentaron recuento alguno, e igualmente se descarta el tanque de
preparacin excepto por la vlvula de salida del producto y algunos lugares de difcil
acceso en el muestreo ya que no se obtuvo recuento de estos puntos. El proceso de
preparacin que involucra el sistema de control ambiental, el pesaje y almacenamiento
del medio de cultivo, y la transferencia del agua WFI dentro del rea, es en si una fuente
77
de contaminacin la cual se puede reducir en forma controlada pero no se puede evitar
completamente.
Los guantes y uniformes de los operarios constituyen el punto ms crtico en el proceso

de control de esterilidad del envase de inyectables, ya que de las actividades y el
seguimiento de los procedimientos estndares de operacin por parte del personal a
cargo de este proceso depende la calidad desde el punto de vista de esterilidad del
producto en mas del 80% de los procesos del rea segn Anatasio and Bertolino, 1990.
Los resultados obtenidos nos muestran que los operarios cumplen satisfactoriamente la
mayora de los procesos que practican y esto se ve reflejado en el resultado de los
frascos de las tres pruebas. La reproducibilidad de este proceso recae principalmente
sobre los operarios y la actividad que se encuentren realizando (Barry and Nash, 1993).
Debido a esto se realizo una rotacin de las actividades entre operarios, utilizando la
actividad mas critica como punto de control microbiolgico. En la primera prueba se
cambio la actividad del operario en el mismo da de prueba, en la segunda se mantuvo la
actividad del operario en el mismo da de prueba, y en la tercera prueba se cambio el
orden de actividades de la segunda prueba. Ya que haban cuatro operarios divididos de
dos por turno, se obtuvo parmetros de reproducibilidad y repetibilidad para cada
operario de: cambio de la actividad entre operarios en el mismo da y cambio de la
actividad entre operarios en diferente da.
En cuanto a los guantes, la operaria Elsa que se encontraba dentro de la especificacin

muestra un resultado de ndice Cps de 1.334 que es Adecuado pero requiere un control
estricto del proceso de desinfeccin de guantes por parte de la operaria. Para las otras
tres operarias los resultados fueron satisfactorios.
En cuanto al uniforme, la operaria Adriana estuvo fuera de especificacin con un ndice

Cps de 0.067, lo cual representa un proceso de esterilidad No adecuado y requiere
modificaciones para esta operaria. Para las otras tres operarias los resultados fueron
satisfactorios. Este resultado se debe posiblemente al contacto de la operaria con la
superficie de la maquina envasadora y/o otras superficies fuera de la cabina, los cuales
no se somete a un proceso de esterilizacin, sino a un proceso de desinfeccin qumica
previo al envase, que no asegura la eliminacin total de microorganismos. Otra
posibilidad puede ser contactos innecesarios o excesivos con la superficie facial.
En total se efectuaron satisfactoriamente tres corridas de la prueba, analizando 34

puntos de muestreo microbiolgico por cada corrida en donde se incluyo ambientes,
superficies, equipos y operarios y se encontraron un total de dos (2) puntos fuera de
control del proceso, los cuales son, la esterilidad del piso que no es adecuada y requiere
78
anlisis del proceso y la esterilidad del uniforme que no es adecuada y requiere
modificaciones del proceso. El total de puntos fuera de control por ser No adecuados
dentro del proceso corresponden al 5.9% de puntos muestreados, porcentaje con una
baja significanca estadstica, es decir que se tiene un 94.1% de confianza estadstica y
es un resultado favorable segn Gonzles G, 2005, pero no es el mas optimo para la
validacin del proceso de llenado asptico en la industria farmacutica. Por esta razn la
calificacin operacional no se cumple totalmente y la Validacin del proceso debe ser
considerada Preliminar.
En cuanto a la precisin de los operarios con respecto al control microbiolgico de

guantes y uniformes, se establece que existe reproducibilidad (R), ya que la primera
prueba no tuvo recuento de microorganismos (UFC como analito) en ningn operario
realizando todos la misma actividad crtica en el proceso de envase, y por lo tanto, la
desviacin estndar es igual a cero (0).
En cuanto al parmetro de repetibilidad (r), este se cumple para el proceso de

esterilidad en guantes por parte de los operarios en la segunda y tercera prueba, pero
por el contrario la repetibilidad del proceso de esterilidad en uniforme no se cumple para
la segunda prueba debido a que la suma de la media aritmtica y la desviacin estndar
sobrepasa el limite superior de este punto.
El resultado de la Calificacin de Desempeo se basa en el crecimiento del medio de

cultivo TSB envasado en las presentaciones de Ampolletas de 2ml, Frasco de 10ml y
Frasco de 500ml, incubados y analizados bajo los parmetros descritos en los Mtodos y
Materiales el cual fue favorable, y en ninguna de las tres pruebas hubo crecimiento
microbiolgico en ninguna de las presentaciones, por lo tanto el resultado se encuentra
por debajo del lmite de contaminacin de 0.1% establecido por la FDA, 1984 (Carleton
and Agalloco, 1999) para este estudio de Validacin de Proceso en el rea de
inyectables. A partir de este resultado podemos decir que el Proceso de Llenado
Asptico en esta rea se ha Validado como Preliminar ya que la caracterstica de control
de esterilidad del proceso no se cumple totalmente desde el punto de vista estadstico
para lo cual quedan documentados los resultados en este Trabajo de Grado y en los
Protocolos de Validacin oficiales de VICAR FARMACEUTICA S.A.
A partir de la grabacin de video que se realizo en las tres pruebas durante el proceso de
envase y en algunas partes la preparacin, se pudo identificar ciertos errores en las
actividades del personal involucrado dentro del rea para la prueba, de ah su
importancia (Roganti and Boeh, 2004). Entre estos errores esta un flujo excesivo y
muchas veces innecesario de personal entre el rea de envase y las otras reas
79
adyacentes a esta como el vestier y el rea de preparacin. En general este
comportamiento puede alterar la calidad microbiolgica del aire, debido al cambio de
presin entre las reas divididas y la turbulencia que genera el movimiento del personal;
igualmente el contacto del uniforme del analista fuera del rea con superficies con
posible contaminacin puede ser un vector de contaminacin importante. Tambin se
noto en algunos momentos que el uniforme de una operaria que se encontraba en
taponado y grafado dentro de la cabina de flujo laminar no le quedaba ajustado y este
entraba en contacto con la parte superior de los envases. Todos estos errores y
actividades correctivas constituyen la simulacin bajo condiciones desfavorables (worts-
case) creadas por operarios involuntariamente las cuales aumentan el grado de
confianza cuando se tiene un diseo de la simulacin del proceso (Roganti and Boeh,
2004). En general los procedimientos que realizan los operarios estn dentro de lo
esperado, siguiendo los POES que establece VICAR FARMACEUTICA S.A. para esta
rea. Los operarios manejan la desinfeccin de guantes con Etanol al 70% cada 10
minutos y mantienen la comunicacin estrictamente necesaria dentro de la cabina de
flujo.
Los operarios realizan sus actividades como esta establecido, pero se presentaron
derrames del medio de cultivo durante el envase manual involuntariamente sobre
superficies estriles dentro de la cabina de flujo laminar, y en una ocasin se presento
este incidente por fallas de carcter tcnico en las conexiones entre el sistema de
filtracin y la maquina envasadora. En el momento de presentarse estos incidentes, se
siguieron los procedimientos que se les indicaron para este tipo de prueba. Esta serie de
errores involuntarios pero controlados constituyen parmetros de validacin que
aumenta la solidez y robustez de la prueba al no alterar los resultados.
El parmetro de Precisin del proceso de llenado asptico se estimo a travs del

resultado de crecimiento microbiolgico en los frascos envasados por los operarios con
medio de cultivo. Los resultados de crecimiento en cada prueba muestran que la
repetibilidad y reproducibilidad no tienen diferencia significativa entre las pruebas del
proceso realizadas por triplicado, ya que el valor de la desviacin estndar es cero (0) y
por lo tanto cumple con este parmetro.
80
7. CONCLUSIONES
El Proceso de fabricacin en el rea de inyectables de VICAR FARMACEUTICA

S.A. cumple con los parmetros de produccin de frmacos estriles inyectables y
ha sido Validado y Documentado como Validacin Preliminar a travs de este
Trabajo de Grado y la Documentacin Oficial editada para la empresa en forma de
POES (Procedimientos Operativos Estndares).
A travs de la calificacin operacional se analiza que el proceso en general se

encuentra en un 94.1% de control estril del proceso por lo cual se puede afirmar
que el proceso llenado asptico en el rea de inyectables de VICAR
FARMACEUTICA S.A. se encuentra en condiciones de operacin favorables pero
no cumple totalmente con el parmetro de Estabilidad del Proceso ya que la
confianza estadstica debe estar por encima del 98%.
Se estableci a travs de la Calificacin de Desempeo que la Validacin

Preliminar del proceso de Llenado asptico en el rea de inyectables cumple con el
parmetro de Precisin que involucra repetibilidad (r) y reproducibilidad (R) del
mismo.
Las pruebas cumplen con los parmetros de Robustez y solidez, ya que a pesar de
fallas humanas como derrames de medio de cultivo o exceso en el flujo de personal
entre las reas, los resultados de crecimiento en los frascos envasados no se
vieron afectados en ninguna de las tres pruebas.
Se demostr que el proceso de esterilidad en guantes para la realizacin de la

actividad crtica por parte de los operarios cumple con los parmetros de
reproducibilidad y repetibilidad.
No se pudo demostrar el parmetro de repetibilidad para el proceso unitario de

esterilidad de uniformes en la segunda prueba, para la actividad no critica, lo que
conlleva a formular que este es un punto critico fuera de control en el proceso de
esterilidad.
Por otra parte se comprob la reproducibilidad para el proceso de esterilidad de

uniformes en las pruebas, demostrando que este proceso singular es reproducible
pero no es repetible, es decir que existe una gran variabilidad cuando el proceso de
esterilidad de uniformes es aplicado por un solo operario para la misma actividad
81
del proceso de envase, que cuando la misma actividad es implementada por dos
operarios para el mismo da en el mismo equipo.
Se comprob la efectividad del medio de cultivo TSB para realizar este tipo de
Validaciones en la industria farmacutica debido a sus cualidades de baja
viscosidad, claridad visual, alta filtrabilidad y baja selectividad.
82
8. RECOMENDACIONES
Con el fin de aumentar el grado de confiabilidad de la validacin y como un mtodo

de control microbiolgico ms riguroso y con mayor robustez y solidez se
recomienda la implementacin para una Validacin a futuro de un medio para
crecimiento de microorganismos anaerobios o microaeroflicos como es el medio
Tioglicolato para el proceso de simulacin de envase asptico.
En la Calificacin de las Instalaciones, se debe tener en cuenta la importancia de la

incubadora con el fin de mantener constantemente la temperatura dentro de los
limites especificados, y preferiblemente usar dos incubadoras, cada una que sea la
adecuada para el rango de temperatura de incubacin, realizando previamente a
este proceso una calificacin de estos equipos.
Es de carcter Primordial y Prioritario aumentar el grado de Confianza Estadstica

para una revalidacin, ampliando el nmero de muestreos establecidos para cada
punto, con respecto a todas las categoras de muestreo, con el fin de obtener un
mayor grado de significanca en los resultados, aumentando el cuidado en la
esterilidad en los procedimientos que realizan los operarios y el analista de
microbiologa dentro de esta rea.
Se deben evitar siempre que sea posible, derrames del medio de cultivo dentro del
rea de la cabina de flujo laminar, especialmente en cantidades que superen 10ml
de este, y para esto se recomienda implementar medidas preventivas en el caso de
las conexiones del sistema de filtracin y conduccin por la lnea del medio de
cultivo, verificando que estas estn suficientemente firmes y fuertes, utilizando
ganchos de amarre.
Se recomienda disminuir el flujo cruzado de personal involucrado en las reas de

procesos de fabricacin y envase de inyectables, como lo son operarios de
fabricacin, de envase, de mantenimiento y analistas de control de calidad e
igualmente es importante que se mantenga una carga de personal de mximo tres
(3) personas dentro de la cabina de flujo laminar durante el envase. Esto con el fin
de evitar el aumento de contaminacin cruzada entre las reas, a travs del
uniforme del personal externo al rea de envase y a travs del cambio de presin
prolongado en los ingresos que aumenta la carga de partculas y microorganismos
dentro del rea estril, ya que el rea adyacente que corresponde al vestier no
posee control ambiental de ningn tipo.
83
Es muy importante mantener siempre la puerta de entrada al rea de envase
cerrada y evitar al mximo un flujo continuo de personal a este cuarto ya que esto
genera turbulencia y prdida de la presin positiva importante dentro del rea.
A pesar de que el piso no constituye un punto critico durante el proceso, este se

debe mantener con el mnimo de microorganismos durante el envase, y se debe
revisar las condiciones de porosidad del mismo.
Es importante la implementacin de un protocolo de desinfeccin correctiva del piso

in situ en el caso de derrames (producto real envasado) utilizando un agente
desinfectante diferente al Etanol al 70%, como por ejemplo un agente que contenga
glutaraldehido o isopropanol, o los mismos desinfectantes por rotacin que se
utilizan en la desinfeccin previa del rea y en general agentes que no presenten
riesgo para la salud de los operarios, que no generen espuma ni que puedan
difundirse por volatilizacin al producto, especialmente derrames de productos cuyo
principio activo o excipientes sean favorables para la multiplicacin de
microorganismos.
Como medida preventiva se recomienda agregar al protocolo de postura y

utilizacin del uniforme estril, la aspersin de Etanol al 70% en la suela de los
zapatones antes del ingreso al rea de envase para todo el personal involucrado
que ingrese al cuarto.
Se debe tratar de disminuir la contaminacin antes del sistema de filtracin ya que

esto evita la saturacin del mismo. Para esto se puede aumentar la limpieza y
desinfeccin del interior del tanque de preparacin, de las mangueras de entrada
de nitrgeno, de la manguera hacia el sistema de filtracin, de la vlvula de salida,
especialmente en las superficies de difcil acceso para la desinfeccin.
Se recomienda que los operarios de preparacin aumenten el periodo de

desinfeccin de los guantes en el momento de la preparacin de las materias
primas con el fin de no aumentar la carga microbiolgica insipiente a estas.
Sugerir a los operarios, que a pesar de que el proceso de desinfeccin de guantes

es adecuado, deben aumentar el control estricto del proceso, realizando aspersin
mas seguida en guantes e igualmente informarles que modifiquen el proceso de
mantener en esterilidad el uniforme durante el envase, evitando el roce de este con
las superficies externas a la cabina de flujo laminar, a equipos que no estn
estriles totalmente y siempre evitar el contacto de este con la superficie facial
84
descubierta. Igualmente se recomienda el uso correcto del mismo, que se
encuentre bien ajustado al cuerpo y que sea de la talla adecuada para evitar que
este entre en contacto con el interior de los frascos.
Realizar una capacitacin tcnica a futuro a partir de todas las recomendaciones

que surgieron de esta Validacin.
85
9. REFERENCIAS
Anastasio P, Bertolino A. Asociacin Espaola de Farmacuticos de la

Industria (AEFI). Validacin de Procesos de Produccin, Capitulo 8:
Validacin de Procesos de Produccin de productos estriles, 98-104, Madrid,
Mayo de 1990.
Berry I R, Nash R. Pharmaceutical Process Validation, Second Edition, Drugs

and the pharmaceutical sciences, Ed. Marcel Dekker Inc, Chapter 19: Recent
trends in process validation, 576-577, New York, 1993.
Carleton F J, Agalloco J P. Validation of Pharmaceutical Processes, Sterile

Products, Second Edition, Ed. Marcel Dekker Inc, Chapter 14: Validation of
aseptic processing, 689-699, New York, 1999.
Center for Drug Evaluation and Research (CDER). Center for Veterinary
Medicine (CVM). Guidance for Industry for the Submission Documentation for
Sterilization Process Validation in Applications for Human and Veterinary Drug
Products, Chapter 4, Information for aseptic fill manufacturing processes which
should be included in drug applications, United States, November 1994
FDA. Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processes,

Pharmaceutical Current Good Manufacturing Practices, U.S. Department of
Health and Human Services Food and Drug Administration Center for Drug
Evaluation and Research (CDER) Center for Biologics Evaluation and Research
(CBER), Chapter 9 Validation on Aseptic Processing and Sterilization, United
States, September 2004.
Gonzles A. M. POES Control de Calidad, rea Microbiologa, Laboratorios

Vicar Farmacutica S.A, Bogota 2002.
Gonzles G. Claudio. Validacin retrospectiva y control estadstico de procesos

en la industria farmacutica, Tesis de Grado, Universidad de Chile, Facultad de
Ciencias Qumicas y Farmacuticas, Santiago de Chile, 2005
Hernndez. A. Agentes Biolgicos: Equipos de muestreo de Aire y superficies,

Ministerios de Trabajo y Asuntos sociales, Madrid Espaa, 2004, en:
www.mtas.es/insht/information/Ind_temntp.htm (Agentes biolgicos 609)
86
ICONTEC. NTC 4543. Esterilizacin de productos para el cuidado de la salud,
requisitos para validacin y rutina de control, Esterilizacin por calor hmedo
industrial, Documento de referencia internacional: ISO 11134:94., Bogota,
Noviembre 1998.
Montgomery D. Introduccin al Control Estadstico de la Calidad, grupo

editorial Iberoamericana, 67-112, Mxico DF, 1991.
Rodrguez R. Validacin de Procesos, Taller de Validacin OMS, Experta

Nacional de Medicamentos FDA, Guatemala, Mayo de 2004 en:
www.paho.org/Spanish/AD/THS/EV/bpm-validacion-procesos-fda.ppt
Roganti F. and Boeh R. Design of an aseptic process simulation: the authors

suggest a design strategy for an aseptic process simulation that focuses on the
basic repeating unit of the process, establishing alert and action criteria for the
unit itself, and using worst-case simulations to establish routine operational
parameters for the manufacturing process, Pharmaceutical Technology, United
States, September 2004.
Sartorius S.A. Manual Tcnico: Productos Sartorius para industrias

Farmaceuticas, Symac Ltda., Capitulo 5. Pruebas Limites de Integridad para
Filtros Esterilizantes, Alemania, 2005.
Scoseria E. Validacin de Procesos Industriales, Mayo 2006 pagina web:

www.infodynamics.com.uy/validacionp.asp
Stockdale D. Overview of Aseptic Fill/Finish Manufacturing, American

Pharmaceutical Review, United States, October 2004
United States Pharmacopeia USP 26. Chapter Cleanrooms, pag. 1116, New
Yersey USA, November 2002.
87
10. ANEXOS
ANEXO A
MAT 99:
Es una combinacin qumica de limpiadores, desengrasantes y desinfectantes.
Composicin qumica:
N-Alkyl Dimetyl benzyl ammonium chlorides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 0.80%
N-Alkyl dimethyl ethylbenzyl Ammonium chlorides. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .0.80%
Descripcin: Se diluye una parte de MAT en 50 partes (2% concentracin volumen), es

transparente, con un pH entre 8.5-9.0, soluble en agua y estable por 24 meses de
almacenamiento en condiciones adecuadas.
ANEXO B
NOVAXIDIN
Solucin antisptica y desinfectante cuyo principio activo es Clorhexidina digluconato al
4%
Con registro ICA 4968 DB
Composicin Quimica: Cada 100 ml contienen:
Clorhexidina digluconato 20% ..............4 g
Estabilizante, humectante y excipiente ............................100 ml
Descripcin: es una solucin antisptica y desinfectante de potente actividad

antimicrobiana contra la mayora de las bacterias grampositivas y algunas
gramnegativas. Es germicida contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli y
Pseudomonas aeruginosa. Su principio activo, la clorhexidina por ser una bisbiguanida
posee una actividad bactericida muy potente, adems, posee una discreta accin
surfactante y detergente. La clorhexidina tiene un potencial reducido de toxicidad
sistmica o drmica.
Accin antisptica: La clorhexidina posee potentes acciones bactericidas y en pequea

concentracin bacteriostticas, sobre bacterias grampositivas; Streptococcus pyogenes,
Streptococcus pneumoniae, Streptococcus faecalis, Staphylococcus aureus, gnero
Clostridium, Corynebacterium diphteriae y gramnegativas, gnero Salmonella, Proteus,
Pseudomonas (grmenes, estos ltimos muy comunes y peligrosos), Aerobacter
88
aerogenes, Escherichia, as como el Mycobacterium tuberculosis, hongos, gneros
Microsporum, Trichophyton, Candida, con accin deletrea sobre virus y esporas.
La accin antisptica sobre la piel es muy rpida (15 segundos) y es persistente (aun
ms de tres horas), lo que se debe a que la clorhexidina se adhiere, se adsorbe a la piel
reteniendo su actividad. La accin antisptica se efecta contra los microorganismos
residentes y transentes.
Mecanismo de Accin: La clorhexidina acta sobre la membrana celular bacteriana,

cuya permeabilidad aumenta, con prdida al exterior de los elementos constituyentes de
la bacteria.
Dosis Recomendadas:
Desinfeccin de objetos e implementos: Preparar una solucin de 10 ml de Novaxidin por
cada litro de agua potable.
Desinfeccin de reas y establecimientos: Preparar una solucin de 3,5 a 4,0 ml de
Novaxidin por cada litro de agua potable.
Desinfeccin de manos de operarios: Preparar una solucin de 20 ml de NOVAXIDIN en
100 ml de agua. Lavarse con agua y jabn, y luego desinfectarse con 5 a 10 ml de la
solucin desinfectante, distribuyndola en forma uniforme en manos y brazos, usando un
cepillo para la limpieza de las uas. Dejarla actuar durante 2 a 4 minutos. Enjuagar.
La desinfeccin de utensilios se puede hacer sumergindolos en solucin desinfectante
por un tiempo mnimo de 10 minutos, por aspersin o por aplicacin directa.
89
ANEXO C
Diagrama de flujo validacin de llenado asptico
Para los Frascos de 10ml, 500ml y ampolletas de 2ml, por tres repeticiones
Control de Calidad del Medio TSB con 6 cepas
Preparacin del Medio TSB en rea Inyectables
Introduccin del Medio TSB en la Lnea de Envase del rea Inyectables
Recopilacin Resultados Anlisis

Microbiolgicos de ese da de
Ambientes, superficies, operarios,
Material estril de envase y
Producto terminado
Verificacin visual del proceso y sus condiciones de simulacin real
Documentar toda la informacin con respecto a:

Numero de unidades producidas
Tiempo Produccin
Volumen
Condiciones especificas del proceso
Proceso de Incubacin de los Frascos por 14 das segn metodologa descrita
Recopilacin Resultados de 2 semanas de

Anlisis Microbiolgicos Ambientes,
superficies, operarios, Material estril de
envase y Producto terminado
Unidades Positivas: Anlisis de los Resultados al

Investigacin puntos da 7 y 14 Unidades Negativas:
crticos Turbidez (Positivo) Descartar el medio
Identificacin de cepas Sin Turbidez (Negativo) adecuadamente y destruir
Considerar frascos.
Revalidacin Proceso
Autoclavar y descartar
medio TSB Conclusiones y Sugerencias
90
ANEXO D
Caldo TSB
Medio de Cultivo universal libre de inhibidores para un amplio espectro de aplicaciones y

con alto potencial de recuperacin de microorganismos. Cumple con las
recomendaciones de la United States Pharmacopeia XXIII (1995) y la European
Pharmacopeia II.
Composicin Tpica en g/L
Peptona de Casena 17.0; peptona de soya 3.0; D(+)glucosa 2.5; cloruro de Sodio 5.0;
fosfato hidrogeno di-potasio 2.5.
Preparacin
Suspender 30 g/litro (caldo), autoclavar (15 min a 121 C). pH: 7.3 0.2 at 25 C.
Despus de la preparacin el medio es claro y de color caf amarillento claro.
Incubacin: 30-35C 7 a 14 das para pruebas de esterilidad.
91
ANEXO E
PROTOCOLO DE CALIFICACIN DE LA INSTALACIN DEL PROCESO DE

LLENADO ASPTICO EN REA DE INYECTABLES
ELABORADO POR: Jean Paul Rios

FECHA DE ELABORACIN: 07 02 06
1. OBJETIVO:
Verificar que todos los aspectos claves de la instalacin del proceso de llenado asptico
en rea de inyectables estn de acuerdo con las especificaciones del diseo.
2. ALCANCE:
Procedimiento de libre circulacin. Aplicable a Jefe de Validaciones y Jefe de

Mantenimiento.
3. RESPONSABLES:
El Jefe de Validaciones debe planear y certificar el desarrollo del protocolo.
El Jefe de Aseguramiento de Calidad y el Jefe de Produccin deben colaborar en

la ejecucin de la calificacin de la instalacin del proceso de llenado asptico en
el rea de inyectables.
El Jefe de Mantenimiento debe colaborar en la recopilacin de las mediciones

implicadas en la calificacin de la instalacin del proceso de llenado aseptico.
4. DEFINICIONES:
Calificacin de la instalacin (IQ): Verificacin documentada de que todos los

aspectos claves de la instalacin estn de acuerdo con las recomendaciones del
fabricante y corresponden a las especificaciones aprobadas en el diseo.
5. DESCRIPCIN DEL PROTOCOLO:
Para el desarrollo de las pruebas concernientes a la verificacin de las ptimas

condiciones de instalacin, se deben ejecutar y documentar las actividades
enmarcadas en el procedimiento de calificacin de la instalacin de sistemas y
equipos (Ver procedimiento VI TD10 010).
Estas pruebas deben realizarse el mismo da en que se realizara el proceso de

Llenado asptico, la mayora antes del inicio del proceso de preparacin y la
temperatura de la incubadora despus de las pruebas.
Las pruebas que se recomiendan para la calificacin de la instalacin del proceso de

llenado asptico son:
92
1. REVISIN DE PRESIN Y TEMPERATURA DE LA AUTOCLAVE
Verificar los registros de la presin interna de la autoclave dentro de las

especificaciones establecidas de 20psi de presin y entre 121-125C de
temperaturas durante por lo menos 30 minutos de operacin en intervalos de
cinco minutos y sern registradas en el formato correspondiente (Anexo 1).
2. REVISIN DE LA TEMPERATURA DEL HORNO DESPIROGENIZADOR
Comprobar el registro de temperatura interior que debe estar a mnimo 245C

15C (Horno No. 3) y sern registradas en el formato correspondiente (Anexo 1)
3. REVISIN DE LAS PRESIONES DE LA LNEA DE FILTRACION
Verificar el buen funcionamiento de los manmetros y registrar las presiones del

nitrgeno en la lnea de filtracin estril, en las carcasas de filtracin durante el
proceso y sern registradas en el formato correspondiente (Anexo 4).
4. REVISIN DEL DIFERENCIAL DE PRESIN AMBIENTAL REA DE ENVASE
Identificar el funcionamiento correcto del sistema de presin positiva dentro del

rea de envase de inyectables, y registrar la presin indicada y sern registradas
en el formato correspondiente (Anexo 4)
5. REVISIN DE LA TEMPERATURA DE LAS INCUBADORAS
Tomar las temperaturas de incubacin correspondientes a la incubadora de

hongos y levaduras (22-25C), y a la incubadora de bacterias (30-35C), una
lectura en la maana y otra por la tarde, durante los 15 das del periodo de
incubacin de los envases en la primera prueba, y obtener desviacin estndar y
limites superiores e inferiores para ser consignadas en el formato
correspondiente (Anexo 2).
6. DESCRIPCIN Y VERIFICACIN DE LA ROTACIN DE DESINFECTANTES

DE SUPERFICIES
Especificar los desinfectantes e inactivantes utilizados en el rea de inyectables

para las superficies en el momento de iniciar el proceso, registrando el tipo o los
tipos de desinfectantes, los periodos de uso; as como los sanitizantes y
antispticos empleados para el lavado de manos y guantes de los operarios que
sern consignados en el formato correspondiente (Anexo 3).
7. DESCRIPCIN Y VERIFICACIN DE LOS DESINFECTANTES PARA LAVADO

DE EQUIPOS DEL REA.
Especificar los desinfectantes e inactivantes utilizados en el lavado de los

equipos a ser utilizados en el proceso, registrando el tipo o los tipos de
desinfectantes, los periodos de uso e inspeccin visual de residuos de producto,
agente desinfectante o suciedad, datos que sern consignados en el formato
8. LISTA DE CHEQUEO DE MATERIAL ESTERILIZADO POR AUTOCLAVE Y

HORNO DESPIROGENIZADOR
93
Llevar una lista de Chequeo del material esterilizado por Autoclave y el Material
esterilizado por Horno despirogenizador para el proceso y sern registradas en el
formato correspondiente (Anexo 1).
9. CONDICIONES DE OPERACIN DEL SISTEMA DE OBTENCION DE AGUA

PARA INYECCIN (WFI)
Verificar el buen funcionamiento del sistema de destilacin para agua de

inyeccin, y registrar los ltimos 2 anlisis de microbiologa de esta agua con su
respectiva especificacin y sern registradas en el formato correspondiente
(Anexo 1).
10. INSPECCIN VISUAL DEL FUNCIONAMIENTO DE LA MAQUINA

ENVASADORA DE AMPOLLETAS
Comprobar el buen funcionamiento de la envasadora al principio para evitar una

manipulacin excesiva por parte de los operarios y consignar en el formato
correspondiente (Anexo 1)
11. REVISIN DE VLVULAS Y CONDICIONES DE OPERACIN.
Verificar que las vlvulas de envase manual no presenten goteo, que abran y
cierren bien y fcil y sern registradas en el formato correspondiente (Anexo 4).
ANEXO 1: LISTA DE CHEQUEO INSTALACIN LLENADO ASPTICO VICAR

FARMACUTICA S.A.
CALIFICACIN DE LA INSTALACIN DE LLENADO ASEPTICO
PRUEBA:
VERIFICACIN CONDICIONES DE OPERACIN POR EQUIPO O POR PARTES DEL

EQUIPO.
EQUIPO O PARTE DESCRIPCIN DE OPERACIN CUMPLE
94
ANEXO 2: VERIFICACIN DE INCUBADORAS DE LA INSTALACIN DE LLENADO
ASPTICO VICAR FARMACUTICA S.A.
CALIFICACION INCUBADORAS DE LA INSTALACIN LLENADO ASEPTICO
INCUBADORA 30 35C INCUBADORA 22 25C

Fecha Temp. am Temp. pm Fecha Temp. am Temp. pm
Desviacin Desviacin
Estndar Estndar
Limite Limite
Superior Superior
Limite Limite
Inferior Inferior
CUMPLE CUMPLE
ANEXO 3: VERIFICACIN ROTACIN DE DESINFECTANTES INSTALACIN DE

LLENADO ASPETICO VICAR FARMACUTICA S.A.
CALIFICACIN DESINFECTANTES DE LA INSTALACIN LLENADO ASEPTICO
DESCRIPCION DESINFECTANTE TIEMPO CUMPLE

EN ROTACION DE USO
EQUIPOS PARA -Tanques de Acero
FABRICACION Y -Carcasas de
ENVASE Acero
-Soportes de filtros
-Partes de
maquinas
-Agitadores
-Utensilios de
envase.
SUPERFICIES -Piso-pared
REA ENVASE -Puertas-ventanas
-Mesones de
acero
-Ductos
-Equipos fijos
GUANTES Y -Operarios envase
MANOS -Personal
OPERARIOS mantenimiento
ENVASE -Analistas
95
ANEXO 4: VERIFICACIN DE PRESIONES DE INSTALACIN DE LLENADO
ASPTICO VICAR FARMACUTICA S.A
CALIFICACIN DE PRESIONES DE LA INSTALACIN DE LLENADO ASEPTICO
REVISIN DE MANOMETROS Y VLVULAS Y SUS CONDICIONES DE OPERACIN.
EQUIPO ESPECIFICACIN CUMPLE
Manmetros del Equipo de

Filtracin
Manmetros de la lnea de
Nitrgeno
Diferencial de presin del rea de

envase
Vlvulas de entrada de nitrgeno
Vlvulas de entrada maquina

envasadora
Vlvulas de dosificacin.
96
ANEXO F
PROTOCOLO DE CALIFICACIN DE LA OPERACIN DEL PROCESO DE LLENADO

ASPTICO EN REA INYECTABLES
ELABORADO POR: Jean Paul Rios Afanador

1. OBJETIVO:
Verificar que el proceso de llenado asptico en el rea de inyectables funciona en la

forma esperada y es capaz de operar satisfactoriamente sobre el rango de los
parmetros operacionales para los que fue diseado.
2. ALCANCE:
Procedimiento de libre circulacin. Aplicable a Jefe de Validaciones, Jefe de

Aseguramiento de Calidad y Jefe Produccin.
3. RESPONSABLES:
El Jefe de Validaciones debe planear y certificar el desarrollo de la calificacin

operacional del sistema de agua purificada.
El Jefe de Produccin, el Jefe de Aseguramiento de Calidad y Jefe de

Microbiologa deben colaborar en la ejecucin de la calificacin de la operacin
del sistema de agua purificada.
4. DEFINICIONES:
Calificacin Operacional (OQ): Verificacin documentada de que los equipos y

procesos funcionan en la forma esperada y son capaces de operar
satisfactoriamente sobre todo el rango de los parmetros operacionales para los que
han sido diseados.
Demuestre que el funcionamiento del proceso de llenado asptico es efectivo,

verificando el cumplimiento de las condiciones establecidas en el procedimiento de
calificacin de la operacin de sistemas y equipos (VITD10 011) y desarrollando el
siguiente tipo de pruebas por un lapso de tres das consecutivos, correspondientes a
los das en los que se realice las pruebas de llenado asptico de los 3 volmenes de
envase con medio de cultivo:
1. Prueba de Punto de Burbuja para filtro cartucho esterilizante de 0,22 micras
Tcnica especificada en el Documento VITP12 058 Prueba de Integridad de Filtros

de Superficie. Esta prueba se realizara para cada filtro utilizado en cada proceso
unitario de envase del medio de cultivo de la prueba de llenado asptico y los
resultados sern consignados en el formato correspondiente (Anexo 1).
Adicionalmente sern revisados y anexados a este procedimiento de validacin los
97
certificados del filtro de la prueba de eficacia microbiolgica por desafo expedidos
por el proveedor.
2. Pruebas Microbiolgicas de Control de Calidad del rea de inyectables:
Se realizaran estas pruebas durante el proceso de llenado asptico, cada uno de los
siguientes anlisis para cada da de envase y los resultados sern consignados en el
formato correspondiente (Anexo 1):
Anlisis Microbiolgico de superficies y equipos, documento VITC12 035:
Se realizaran los anlisis de superficies durante el proceso de llenado asptico, a la

mitad del tiempo total de envase.
Las superficies de muestreo son:
Mesn dentro de la cabina

Piso dentro de la cabina
Pared fuera de la cabina
Ventana fuera de la cabina
Cortina parte interna de la cabina
Puerta de entrada rea
Puerta del horno despirogenizador
Puerta de la autoclave
Bandeja de alimentacin maquina envasadora
Las partes de los equipos a muestrear son:
Interior tanque de preparacin de 200L

Aguja de la maquina envasadora.
Entrada producto maquina envasadora
Manguera de entrada producto a la carcasa No. 1 (Carcasa de prefiltracin de
0,65micras)
Entrada carcasa No. 1
Salida carcasa No. 2 (Carcasa de filtracin estril de 0,45 y 0,22 micras)
Manguera de salida a la vlvula dosificadora (conectada a la carcasa No. 2)
Vlvula dosificadora de llenado (parte interna y borde externo)
Anlisis Microbiolgico de Ambientes, documento VITC12 035:
Se deben tomar las muestras durante el proceso, despus de iniciado este, con el fin
de registrar el ambiente en operacin in situ. Se realizaran para cada una de las
presentaciones de envase, para un total de tres repeticiones por cada corrida de
envase, por el mtodo de exposicin ambiental con dos placas de TS y Sabouraud,
por un periodo de una hora. Los siguientes son los puntos de muestreo:
Sobre el mesn dentro de la cabina de flujo laminar

Piso cerca de la puerta de entrada al rea
Piso cerca de la puerta de la autoclave
Piso Preparaciones cerca al tanque
Mesn Preparaciones cerca al tanque
Puntos de muestreo adicional pasillo de rea estril (una sola vez): piso cerca puerta
de fabricacin, piso cerca espejo, sobre el lavamanos.
98
Anlisis Microbiolgico de Operarios (Guantes y Uniformes ), documento
VITC20 005:
Se deben tomar las muestras de guantes antes de empezar el proceso, a la

mitad de este y al finalizar, para los operarios que se encuentren realizando las
actividades de alimentacin de la maquina envasadora de ampolletas y el
llenado manual con vlvula de dosificacin. El uniforme se tomara una sola vez,
al finalizar el periodo total del envase de cada turno de dos operarios para cada
uno de ellos.
Anlisis Microbiolgico del Material de Envase, documento VITC33 000:
Se tomaran 10 frascos de 10ml, 10 ampolletas de 2ml y 6 frascos de 500ml del

horno despirogenizador una vez haya terminado el proceso de esterilizacin,
ubicados en posiciones superior, inferior y centro de los carros de envase, antes
de realizar el proceso de llenado asptico.
Anlisis Microbiolgico por Esterilidad de Producto Terminado, documento

VITC33 000:
Se adjuntaran los resultados de los anlisis de producto terminado en el rea de

inyectables de la semana en la que se realiza la prueba de llenado asptico, si
estos son llevados a cabo por el rea.
Anlisis Microbiolgico del agua de inyeccin VITC33 000:
Se realizara un anlisis del agua WFI de fabricacin como materia prima y agua de
lavado de envases; una por cada corrida, para un total de 3 anlisis.
Al final de las 3 corridas de llenado asptico se va a realizar un estudio estadstico de los

resultados de los anlisis microbiolgicos que sern consignados en el formato
El reporte de calificacin debe diligenciarse completamente verificando la correcta

ejecucin de las pruebas y certificando el correcto funcionamiento del proceso.
La conclusin debe ser puntual y en ella se determina si el proceso de llenado

asptico cumple o no la calificacin operacional o si queda pendiente aclarando en
las observaciones el porque.
Una vez diligenciado el reporte con las firmas respectivas y la conclusin, incorprelo
como evidencia de la calificacin de la operacin en la carpeta respectiva del
proceso de llenado asptico.
ANEXO 1: FORMATO DE PRUEBAS MICROBIOLOGICAS DE CALIFICACION DE LA

OPERACIN DE LLENADO ASPTICO POR CADA CORRIDA DE PRUEBA
FECHA ANALISTA (S) CORRIDA No.
ANLISIS PUNTO(S) DE MUESTREO RESULTADO CUMPLE

MICROBIOLGICO (UFC)
Anlisis Ambientes Sobre el mesn dentro de la cabina de
(UFC/hora flujo laminar
99
exposicin) Piso cerca de la puerta de entrada al
rea envase
Piso cerca de la puerta de la autoclave
Piso Preparaciones
Mesn Preparaciones
Vestier cerca de puerta de Preparacin
Vestier cerca de espejo
Vestier sobre el lavamanos.
Anlisis Mesn dentro de la cabina

Superficies Piso dentro de la cabina
(UFC/10cm2) Pared fuera de la cabina
Ventana fuera de la cabina
Cortina parte interna de la cabina
Puerta de entrada rea
Puerta del horno despirogenizador
Puerta de la autoclave
Bandeja de alimentacin maquina
envasadora.
Anlisis Equipos Interior tanque de preparacin de 200L

(UFC/equipo) Aguja de la maquina envasadora.
Entrada producto maquina envasadora
Manguera de entrada producto a la
carcasa No. 1 (Carcasa de prefiltracin
de 0,65micras)
Entrada carcasa No. 1
Salida carcasa No. 2 (Carcasa de
filtracin estril de 0,45 y 0,22 micras)
Manguera de salida a la vlvula
dosificadora (conectada a la carcasa
No. 2)
Vlvula dosificadora de llenado (parte
interna y borde externo)
ANEXO 1: FORMATO DE PRUEBAS MICROBIOLOGICAS DE CALIFICACION DE LA

OPERACIN DE LLENADO ASPTICO POR CORRIDA DE LA PRUEBA
FECHA ANALISTA (S) CORRIDA No.
ANLISIS PUNTO(S) DE MUESTREO RESULTADO CUMPLE

MICROBIOLGICO
Anlisis Producto
Terminado
Anlisis Material de 10 Frascos de 10ml
envase 10 Ampolletas de 2ml
6 Frascos de 500ml
Anlisis Agua de
Inyeccin
(UFC/10ml)
100
Anlisis Operarios (UFC/guantes, UFC/uniformes)
Antes Mitad Final Uniforme
Nombre Guantes
Operario en
*Actividad No. 1 (1
turno)
Operario en
*Actividad No. 1 (1
turno)
Operario en
*Actividad No. 1 (2
turno)
Operario en
*Actividad No. 1 (2
turno)
Analista
Prueba Punto de
Burbuja (psi)
*Actividad No. 1: Operario en Alimentacin de la maquina envasadora o en llenado
manual de envase con vlvula de dosificacin.
ANEXO 2: TRATAMIENTO ESTADSTICO DE ANLISIS MICROBIOLGICOS DE

TODAS LAS CORRIDAS DE LA PRUEBA.
NUMERO DE 1 2 3 Desviacin ndice de

CORRIDA Estndar Capacidad
Anlisis
Ambientes
(UFC/cm3)
Anlisis
Superficies
(UFC/10cm2)
Anlisis Equipos
(UFC/equipo)
101
ANEXO 3: TRATAMIENTO ESTADSTICO DE ANLISIS MICROBIOLGICOS DE
TODAS LAS CORRIDAS DE LA PRUEBA.
NUMERO DE 1 2 3 Desviacin ndice de

CORRIDA Estndar Capacidad
Anlisis Agua de
Inyeccin
WFI(UFC/10ml)
Guantes
operario en
Actividad No. 1
(UFC)
Uniforme
operario en
Llenado envases
(UFC)
Uniforme
operario en
Cierre envases
(UFC)
102
ANEXO G
PROTOCOLO DE CALIFICACIN DEL DESEMPEO DEL PROCESO DE LLENADO

ASPTICO EN EL REA DE INYECTABLES
ELABORADO POR: Jean Paul Rios Afanador

1. OBJETIVO:
Verificar que el proceso de llenado asptico en el rea de inyectables se desempee en

la forma esperada bajo condiciones normales de operacin y sea capaz de garantizar los
parmetros de calidad especficos para la fabricacin de productos estriles.
2. ALCANCE:
Procedimiento de libre circulacin. Aplicable a Jefe de Validaciones, Jefe de

Mantenimiento, Jefe de Produccin y Jefe de Aseguramiento de Calidad.
3. RESPONSABLES:
El Jefe de Validaciones y el Jefe de Produccin deben planear y certificar el

desarrollo de la calificacin del desempeo del proceso de llenado asptico.
El Jefe de Mantenimiento y el Jefe de Aseguramiento de Calidad, deben

colaborar en la ejecucin de la calificacin del desempeo del proceso de
llenado asptico.
4. DEFINICIONES:
Calificacin de Desempeo (PQ): Demostracin de la efectividad y reproducibilidad

del proceso, bajo condiciones normales de operacin y bajo condiciones lmites de
operacin.
Demuestre que el desempeo del proceso de llenado asptico en el rea de

inyectables es efectivo, verificando el cumplimiento de las condiciones establecidas
en el procedimiento de calificacin del desempeo de sistemas y equipos (VI TD10
012) y desarrollando de manera programada, el siguiente tipo de pruebas por un
lapso de 45 das aproximadamente, dividido en tres (3) repeticiones de la prueba:
1. VERIFICACIN DE CONDICIONES DE OPERACIN:
Finalidad: Establecer que todos los componentes del sistema como

envasadoras, vlvulas de llenado, manmetros, se encuentren dentro de los
parmetros de operacin ptimos.
Instrumentos: Verificacin visual.
Mtodo: Mantenimiento debe realizar una inspeccin rutinaria para la verificacin

del cumplimiento de las condiciones de operacin, corrigiendo las anormalidades
que se presenten y diligenciando el reporte respectivo que servir como
evidencia de la correcta operacin del sistema.
103
Criterios de aceptabilidad: Las maquinas envasadoras deben estar operando a la
velocidad y bajo las condiciones optimas para la cual fue diseada. Las vlvulas
deben estar en la posicin de operacin establecida y las lecturas de los
manmetros deben estar acordes con los rangos definidos como aceptables
(Formato de mantenimiento rutinario VI TM 20 003F1).
2. VERIFICACIN DE LAS ACTIVIDADES DE LOS OPERARIOS
Finalidad: Establecer que todos los operarios involucrados en el proceso de

llenado asptico cumplan con los parmetros de operacin ptimos de los
procedimientos operativos estndares para los cuales fueron capacitados y
entrenados.
Instrumentos: Verificacin visual, Filmacin de Video.
Mtodo: Produccin debe realizar una inspeccin rutinaria, ayudada por una
filmacin de por lo menos 2 horas por cada corrida de la prueba, para la
verificacin del cumplimiento de las condiciones de operacin por parte de los
operarios, teniendo como principal nfasis los procedimientos estriles como la
desinfeccin de guantes, el correcto uso del uniforme, evitar hablar durante el
envase y la correcta manipulacin del producto (medio de cultivo), los envases y
sistemas de cierre; corrigiendo las anormalidades que se presenten y
diligenciando el reporte respectivo que servir como evidencia de la correcta
operacin del sistema.
Criterios de aceptabilidad: Los estipulados por los procedimientos operativos

estndares para los operarios encargados del rea de envase estril de
productos inyectables.
VERIFICACIN VISUAL DE CRECIMIENTO MICROBIOLGICO EN LOS

ENVASES DE LA PRUEBA DE LLENADO ASEPTICO:
Finalidad: Certificar que los atributos del proceso de llenado asptico en el rea
de inyectables son acordes a los criterios establecidos para este, durante la
operacin normal del proceso.
Instrumentos: Todo el sistema completo del proceso de llenado asptico,

Incubadora con temperaturas establecidas, Revisin Visual de envases.
Mtodo: Una vez se obtenga el medio envasado en las tres (3) presentaciones
de envase diferente (corresponde a una corrida), se lleva a Incubar por un
periodo total de 14 das dividido en dos temperaturas de incubacin. La primera
temperatura tiene un rango entre 20-25C con una oscilacin de 2.5C, por un
periodo de 7 das, y la segunda temperatura tiene un rango de 30-35C con una
oscilacin de 2.5C por un periodo de 7 das igualmente. Ya que se va a utilizar
solo una incubadora, se le graduara la temperatura requerida y se controlara
esta diariamente. Al terminar el primer periodo de incubacin a los 7 das se
retiran los frascos para la inspeccin visual por parte de Microbiologa, buscando
turbidez en los frascos, y anotando los resultados en el formato pertinente
(Anexo 2).
Criterios de aceptabilidad: No se deben presentar en ninguno de los frascos en

periodo de incubacin y al finalizar este las siguientes caractersticas:
Visualizacin de crecimiento por la turbidez del medio
104
Cambios desproporcionados de color del medio
Presencia de alguna fuga del medio
El mximo porcentaje de Contaminacin por Lote de prueba Media Fill corresponde al

0.1% para cualquier tamao del lote.
El porcentaje de la prueba se puede expresar en porcentaje de contaminacin y se

calcula mediante la siguiente formula:
A
100
BC
IDENTIFICACION MICROBIOLOGICA A NIVEL DE ESPECIE DE LOS POSIBLES

FRASCOS CON CONTAMINACION
En caso de presentarse contaminacin en los frascos, y que esta supere el 0.1% del lote
total por prueba de cada presentacin de envase en particular, se debe realizar una
identificacin a nivel de especie del o de los microorganismos involucrados en el
crecimiento; escogiendo al azar uno o dos frascos del total de frascos contaminados.
Estos frascos contaminados se llevaran a terceros laboratorios de anlisis
especializados, para poder identificar el microorganismo y tratar de relacionarlo con el
vector de contaminacin. Se anotaran los resultados en el formato pertinente (Anexo 3).
Durante el desarrollo de la calificacin del desempeo, se deben ejecutar las

actividades programadas de mantenimiento preventivo as como la toma de
muestras y el anlisis de datos en condiciones lmite de operacin, como son las
originadas con cambios en las actividades de los operarios.
Los reportes de calificacin de desempeo del proceso de llenado asptico deben

ser revisados e incorporados como evidencia del adecuado desempeo del sistema.
En los casos en que alguno de los parmetros no sea acorde con las
especificaciones, debe corregirse y reevaluarse la validacin del proceso.
7. ANEXOS
7.2. ANEXO 2: FORMATO DE VERIFICACION VISUAL DE CRECIMIENTO

MICROBIOLOGICO
Volumen Lote Fecha No. No. No. No. Porcentaje CUMPLE

Envase No. envase Unidades Unidades Unidades Unidades Contaminacin
(ml) envasada con con con fuga (%)
s turbidez cambio de del medio
color
105
7.3. ANEXO 3: FORMATO DE IDENTIFICACION MICROBIOLOGICA A NIVEL DE
ESPECIE EN FRASCOS CONTAMINADOS
Volumen Fecha Lote No. Unidades No. Operario en Microorganismo (s)

Envase (ml) Deteccin No. contaminadas Unidades para llenado manual Identificado (s)
visual identificacin
106
ANEXO H
CALIFICACIN OPERACIONAL DEL SISTEMA DE CONTROL AMBIENTAL Y

VALIDACION DEL MODULO DE FLUJO LAMINAR VERTICAL
Esta Validacin fue realizada el 25 de Marzo de 2005 por Interpharm de Colombia Ltda
Descripcin de los procedimientos realizados
Prueba de desafi de integridad de filtros de alta eficiencia HEPA, por el mtodo de

aerosol de tamao de partcula de 0.3m, generadas en fri, de acuerdo a la norma
Federal Standard 209 B.
Verificacin de obtencin de aire limpio (clase 100) en rgimen laminar, a travs de
la medicin de velocidades de flujo de aire en todos los sectores de cada filtro, a
dos alturas diferentes, ajuste de velocidad de manera que se obtenga flujo laminar
de aire en todo el recorrido de acuerdo a la norma Federal Standard 209 B y
especificaciones internas de calidad.
Parmetros que Influencian el funcionamiento del flujo laminar
Externos:
o Limpieza del rea circundante
o Calidad del aire que alimenta el equipo
o POES de trabajo por operarios en el equipo.
Internos:
o Funcionamiento mecnico y elctrico
o Estado de filtros y prefiltro
o Variadores de velocidad
Resultados de la Prueba
La velocidad promedio en pies/minuto es de 72 fpm y segn la Federal Standard 209 B

se denomina flujo laminar a una corriente de aire previamente filtrada por filtros HEPA
cuya masa de desplazamiento es lnea paralela tiene una velocidad uniforme de 90 fpm
20%.
107
Conclusiones de las pruebas
El modulo cumple con la prueba de desafi frente al aerosol generado en fri, y entrega
aire hacia la zona de envase libre de partculas de tamao de 0.3m y mayores
Igualmente cumple con los requerimientos y funciones de uso, suministrando aire limpio
clase 100 (mximo de partculas) de rgimen laminar de acuerdo a la norma Federal
Standard 209 B.
Recomendaciones realizadas
1. Se recomienda mantener el modulo encendido para evitar que el aire aportado

por la rejilla ubicada internamente salga por los prefiltros del mismo.
2. Se recomienda limpiar los prefiltros con una periodicidad no mayor a tres meses
108

Validacion Preliminar Del Proceso de Llenado Aseptico - Vicar - Tesis PDF

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VALIDACION PRELIMINAR DEL PROCESO DE LLENADO ASPTICO EN EL REA

DE INYECTABLES DEL LABORATORIO VICAR FARMACEUTICA S.A.

JEAN PAUL RIOS AFANADOR

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

Artculo 23 de la Resolucin N 13 de Julio de 1946

Jean Paul Rios Afanador

Jean Paul Rios Afanador

Agradezco a VICAR FARMACEUTICA S.A. y sus colaboradores por haberme brindado la

Todo lo puedo en Cristo que me fortalece

FIGURA NO. 1 ESQUEMA DE LA VALIDACIN DE PROCESOS .........................................................16

A travs de este trabajo se realizo la validacin preliminar el proceso de Llenado

La Validacin del proceso de Llenado Asptico es fundamental en el mbito del control y

Por naturaleza se sabe que un proceso en que interviene directa o indirectamente la

Para asegurar la esterilidad de productos que pretenden ser estriles inyectables, se

Por lo tanto, en el presente trabajo se realiz un estudio de los requerimientos para

Consecuentemente, para implementar un plan de validacin es necesario un trabajo en

Adems, la colaboracin y capacitacin del personal encargado de la fabricacin de los

El concepto de validacin de procesos en la industria farmacutica se remonta a la

El aseguramiento de la calidad de un producto se deriva de la atencin cuidadosa a un

1. La calidad, seguridad, y eficacia se deben disear y construir en el producto

2. La calidad no se puede examinar o probar en el producto final

3. Cada paso del proceso de fabricacin se debe controlar para maximizar la

La validacin de procesos es un elemento dominante para asegurar que se renan estas

2.1 Validacin de Procesos

La FDA define la validacin de procesos de la siguiente manera:

La validacin de procesos consiste en establecer evidencia documentada que

Tales procedimientos de control se deben establecer para monitorear la produccin y

El objetivo de la validacin de un proceso es demostrar la capacidad de proporcionar, de

La validacin de procesos es un requisito de las Buenas Prcticas de Manufactura para

2.2 Esquema General de Validacin de procesos

El siguiente esquema justifica como se debe desarrollar la Validacin de un proceso en

Figura No. 1 Esquema de la Validacin de Procesos

2.3.1 Calificacin Operacional

El propsito de la calificacin del funcionamiento es proporcionar una prueba rigurosa

Cada proceso de fabricacin especfico debe ser calificado y ser validado

Es esencial que el programa de validacin este documentado y que la documentacin

Para la produccin rutinaria, es importante registrar adecuadamente los detalles del

La exactitud, que es la cercana de un resultado al valor verdadero, se evala en la

Las dos medidas ms comunes de la precisin, que generalmente se define en trminos

A partir de las desviaciones estndar de repetibilidad (sr) y reproducibilidad (sR) se

2.4 Tipos de Validacin

2.4.1 Validacin Prospectiva

2.4.2 Validacin retrospectiva de procesos

La Validacin retrospectiva es aquella en donde se trabaja con los antecedentes

Como ya se mencion, la validacin retrospectiva de procesos se basa en la recopilacin

El trabajar con datos acumulados en el tiempo que contienen el registro de mediciones

A pesar de presentar algunos inconvenientes, esta metodologa de trabajo est siendo

2.5.1 Simulacin de Procesos

2.5.2 Diseo de estudio

Factores asociados con el proceso ms largo permitido en la lnea de

2.5.3 Prerrequisitos para la corrida de las Pruebas

2.5.4 Frecuencia y Nmero de Corridas de La Prueba

2.5.5 Duracin de las pruebas

A pesar de que las lneas de fabricacin convencionales son por lo general

Cuando la posibilidad de contaminacin es ms alta basada en el diseo del proceso

El tamao de prueba de Media Fill es una consideracin importante sobretodo porque

Con respecto al tamao apropiado de la prueba en relacin al tamao del lote de

2.5.7 Llenado Manual

2.5.8 Velocidad de la lnea

2.5.9 Condiciones ambientales

2.5.10 Medios de Cultivo

El proceso de produccin debe ser exactamente simulado usando medios y condiciones

Algunos fabricantes de frmacos han expresado preocupacin por la posible