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MINISTERIO DE SALUD

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD


CENTRO DE INFORMACIN Y DOCUMENTACIN CIENTFICA

VARIANTES GENTICAS DE Aedes


aegypti Y SU ASOCIACIN CON EL
SEROTIPO DEL VIRUS DENGUE EN
UNA REA ENDMICA DEL PER

SERIE INFORMES TCNICOS N96

BLGO. OMAR ALBERTO CCERES REY

BLGO. WALTER LEN CUETO

2007
VARIANTES GENTICAS DE Aedes aegypti Y SU ASOCIACIN CON EL SEROTIPO DEL VIRUS DENGUE EN UNA
REA ENDMICA DEL PER

INFORME FINAL

VARIANTES GENTICAS DE Aedes aegypti Y SU ASOCIACIN


CON EL SEROTIPO DEL VIRUS DENGUE EN UNA REA
ENDMICA DEL PER

I. Autores

Blgo. Omar Alberto Cceres Rey


Investigador Principal
Laboratorio de Biotecnologa y Biologa Molecular
Av. Defensores Del Morro N 2268 Chorrillos
Telfono: 4674499 anexo 546
ocaceres@ins.gob.pe

Blgo. Walter Len Cueto


Co-Investigador
Laboratorio de Entomologa
Av. Defensores del Morro 2268 Chorrillos
Telfono: 4674499 anexo 548
wleon@ins.gob.pe

II. Resumen

Aedes aegypti es el principal vector de la enfermedad del Dengue. Las


epidemias pueden surgir en cualquier sitio en donde exista el vector y se introduzca el
virus. A esto se suma la falta de una vacuna eficaz disponible, al abandono de los
programas de control y vigilancia del mosquito, al transporte moderno y al rpido
crecimiento de la poblacin. Todo esto ha conllevado a la expansin del virus y su
mosquito vector. Por lo tanto el conocimiento de su variabilidad gentica y dispersin
gnica llevar a un mejor control de la enfermedad. Objetivo: Identificar mediante la
tcnica de AFLP, las variantes genticas de A. aegypti procedentes de algunas
localidades endmicas del Per. Materiales y Mtodos: Se muestrearon en 9
localidades (Zarumilla, Sullana, Chiclayo, el distrito de El Rimac, Jan, Tingo Mara,
Iquitos, Tarapoto, Pucallpa) del Per y se analiz 5 mosquitos por localidad (n = 45).
El anlisis se determin por AFLP, utilizando tres combinaciones de primers.
Resultados: Mediante AFLP se determin 111 marcadores, dando como resultado
dos variantes genticas; la variante Costera y la variante Sierra-Selva. Conclusin:
La primera variante revel un importante flujo gnico (Fst = 0.106) y la segunda, una
limitada dispersin gnica del mosquito (Fst = 0.160). AFLP result ser una
herramienta muy til para identificar variantes genticas; y apropiada cuando no se
cuenta con un nmero alto de muestras, debido a su alto poder de discriminacin.

III. Introduccin

El Dengue es una enfermedad viral transmitida por la picadura del mosquito


Aedes aegypti, hay cuatro serotipos del virus llamados Dengue 1 (DEN-1),
Dengue 2 (DEN-2), Dengue 3 (DEN-3) y Dengue 4 (DEN-4). Actualmente, est
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preocupando al mundo por estar categorizada como reemergente. Las


epidemias pueden surgir en cualquier sitio en donde existan los vectores y se
introduzca el virus, tanto en zonas urbanas como rurales, esto es
principalmente en pases ubicados en regiones tropicales y subtropicales
(Gubler y Trent, 1993). Adems de la enfermedad febril benigna auto limitante
conocida como Dengue Clsico (DC), existen formas severas de la
enfermedad como el Dengue Hemorrgico (DH) y el Sndrome de Shock por
Dengue (SSD); los cuales comprometen la vida del paciente (Henchal y
Putnak, 1990). A todo esto, se suma la evidencia de que pueden darse
coinfecciones con hasta tres serotipos del virus en un mismo paciente
(LorooPino y Col., 1999); probablemente esto se puede deber a que las
hembras de A. aegypti son capaces de llevar en su interior ms de un serotipo
(Cceres, 2003).

Hay cerca de 500,000 casos de fiebre hemorrgica por dengue/sndrome del


shock por dengue (DHF/DSS) de gravedad cada ao que requiere
hospitalizacin, con las proporciones de caso/fatalidad tan altas (5%), que
dependen de la disponibilidad del tratamiento (WHO, 2002). El reporte global
de DH ha aumentado cinco veces en promedio en los ltimos 20 aos. A
principios del siglo 21 se ha estimado entre 50 y 100 millones de casos de DC
y varios cientos de miles de casos de DH (Gubler, 2002).

Hasta el ao 1999, en el Per slo circulaban DEN-1 y DEN-2 americano (no


virulento). Casos de DH no se reportaron sino hasta los aos 2001 y 2002,
fecha de la introduccin de DEN-2 asitico (virulento), DEN-3 y DEN-4 en
donde se registraron 28815 casos de dengue con 251 casos dengue
hemorrgico (Montoya Y y col., 2003). Recientemente, en el ao 2005, surgi
un brote epidmico de DC autctono en el Distrito de Comas (Lima). La
tipificacin molecular determin que se trataba del genotipo III del serotipo
DEN-3 (Mamani y Col., 2005).

El abandono de los programas de control y vigilancia del mosquito, el


transporte moderno y el rpido crecimiento de la poblacin; ha conllevado a la
expansin del virus y su mosquito vector; haciendo que ste se adapte a
nuevos ambientes. Por lo tanto, el factor humano, ambiental y evolutivo; han
originado poblaciones polimrficas de A. aegypti a nivel gentico, que podran
influenciar su capacidad vectorial para los virus que trasmite. A principios de
los aos 70s, las isoenzimas eran usadas extensamente como marcador para
analizar la estructura gentica de poblaciones naturales, como el caso de A.
aegypti, donde se encontr una baja diferenciacin gentica entre poblaciones
del mosquito de todo el mundo (Tabachnick y Powell, 1979).

El Polimorfismo de Longitud de Fragmentos Amplificados (AFLP, del ingls


Amplified Fragment Length Polymorphism), desarrollada por Vos y Col., 1995;
es otra tcnica de fingerprinting basado en las tcnicas RFLP y PCR que
utiliza el genoma completo del organismo. Utilizada inicialmente para el
anlisis de diversidad gentica en plantas y bacterias, luego fue utilizada
satisfactoriamente en insectos. Su robustez, alta reproducibilidad, elevado

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poder discriminativo y facilidad de aplicacin lo hace una tcnica ideal para el


estudio de variabilidad gentica de organismos como Aedes aegypti.

El anlisis de AFLP ha dado informacin acerca de la variabilidad y


estructuracin poblacional de A. aegypti. Yan y Col. (1999), utilizaron y
compararon los marcadores AFLP y RFLP en poblaciones de A. aegypti en
Trinidad y Tobago. Similarmente, en Phnom Penh, Cambodia, se compararon
tres marcadores moleculares, AFLP, isoenzimas y microsatlites, para
determinar la variabilidad gentica del mosquito vector (Paupy y Col., 2004). A
nivel local, en el Noroeste de Mxico, se determin la diversidad gentica de
A. aegypti mediante AFLP y microsatlites, observndose un proceso de
reinvasin (Ravel y Col., 2001); resaltando el gran poder de discriminacin y
reproducibilidad de sta tcnica.

En el Per, estaran circulando dos variantes genticas de A. aegypti, la


primera pertenece a la zona de la Costa-Norte y la segunda a la del Nor-
Oriente (Leiva y Cceres, 2004). En dicho estudio se analizaron y compararon
el Segundo Espaciador Transcrito Interno (ITS 2) de mosquitos provenientes
de 7 localidades del Per (Jan, Tingo Mara, Iquitos, Lambayeque, el distrito
de El Rimac, Sullana y Zarumilla) y una de Ecuador (Huaquillas). En este
estudio, no se encontraron relacin entre las distancias genticas del mosquito
y las distancias geogrficas de las localidades analizadas, existiendo la
posibilidad de que la Cordillera de los Andes est actuando como una barrera
geogrfica.

A pesar que se ha realizado muchos estudios con respecto a la enfermedad


del Dengue, todava no existe ninguna vacuna disponible y se estima que
demorar de 5 a 10 aos disear una vacuna eficaz. Pues bien, la nica
alternativa es el control del vector. Para mantener efectivo dicho control, es
necesario conocer la gentica y el flujo gnico que hay entre las poblaciones
del mosquito, y entender como est formada su poblacin, es decir, si es una
poblacin monotpica o si presenta polimorfismo gentico. Dicha informacin
podra permitir la discriminacin entre subpoblaciones resistentes a
insecticidas y permitir analizar la dispersin de estas subpoblaciones.
Adems permitir establecer marcadores moleculares propios de A. aegypti
resistentes o sensibles a insecticidas. Tambin nos dara informacin acerca
de la diversidad gentica del vector y nos permitir determinar s la capacidad
vectorial para la transmisin del virus est correlacionada con el polimorfismo
gentico

Por lo tanto, en el presente trabajo se identific mediante AFLP las variantes


genticas de A. aegypti procedentes de alguna reas del Per y se confirmo la
existencia de las variantes genticas de este vector previamente reportadas.

IV. Antecedentes

El virus dengue pertenece a la familia Flaviviridae y esta constituido por una


cadena simple de ARN positivo, esta rodeado por una envoltura lipdica, su

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genoma tiene aproximadamente 11 kb de longitud, la cual se traduce a una


poliprotena que da origen a 3 protenas estructurales y 7 protenas no
estructurales (Henchal and Putnak, 1990).

Aedes aegypti es un mosquito que pertenece a la familia Culicidae y su ciclo


de vida comprende el huevo, cuatro estadios larvales, un estadio de pupa y el
de adulto. Es principalmente una especie domstica, cuyas hembras
hematfagas infestan recipientes naturales o artificiales que se encuentran en
casas o cerca de poblados humanos (Nelson, 1986). El abandono de los
programas de control y vigilancia del mosquito, el transporte moderno y el
rpido crecimiento de la poblacin humana ha conllevado a la expansin del
virus y su mosquito vector haciendo que ste se adapte a nuevos ambientes.

La fiebre por dengue es una enfermedad antigua que se ha distribuido


mundialmente en los trpicos durante los siglos XVIII y XIX. La epidemiologa
global y la dinmica de transmisin del virus dengue cambiaron drsticamente
en el sureste de Asia durante la segunda guerra mundial. La ruptura y el
cambio en la ecologa causada por la guerra tuvo como efecto la expansin
geogrfica y el incremento en la densidad de A. aegypti, haciendo que muchos
pases en sta regin sean altamente permisibles a la transmisin del virus
(Gubler, 1997).

Despus del abandono del exitoso programa de erradicacin de Ae. aegypti


en las Americas en 1970, A. aegypti reinvade muchos pases de la regin. En
los aos 80s y 90s, el virus y su mosquito vector continuaron su expansin
geogrfica causando procesos de reinvasin y aumentando la emergencia de
DH (Gubler, 2002).

En el Per, A. aegypti se detect por primera vez en el ao de 1852. Se cree


que el mosquito se introdujo por el lado norte del Per, a travs de la regin
vecina de Guayaquil (Ecuador). Luego se fue estableciendo progresivamente a
lo largo de la costa norte y central del Per (Griffitts, 1934). En 1905, Barton
report la presencia de A. aegypti en el puerto del Callao, departamento de
Lima. Estos resultados pusieron en movimiento la primera campaa de control
de A. aegypti en el Per (Roe, 1924).

Como resultado del programa de control de A. aegypti, en 1958, el Ministerio


Peruano de Salud, bajo la consideracin de la Organizacin Panamericana de
la Salud (PAHO), anunciaron que A. aegypti haba sido erradicado del pas
(Severo, 1958). Pero en 1984 personal del Ministerio de Salud reportaron la
captura de A. aegypti en el departamento de Loreto, y en 1986, se expandi
hacia los departamentos de San Martn y Hunuco. Ms adelante, se report
la presencia de A. aegypti en algunas provincias de los departamentos de
Junn, Pasco, Tumbes, Piura, Lambayeque, La Libertad, Amazonas,
Cajamarca y Madre de Dios. En Marzo del 2000, larvas y pupas fueron
colectadas de contenedores de agua en una casa, en el distrito del Rmac
(Lima). Hasta el 2001, A. aegypti ha sido colectado al menos en 15 de los 24
departamentos peruanos (Sevilla y Col., 2001).

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En la actualidad es casi inexistente estudios acerca de variabilidad gentica de


este vector en el pas, por lo que este trabajo constituye el segundo estudio de
este vector realizado por este mismo grupo de investigacin

V. Objetivos generales y especficos

Objetivo general.

Identificar mediante la tcnica molecular AFLP las variantes genticas de


Aedes aegypti procedentes de algunas localidades del Per.

Objetivos especficos.

1. Estandarizacin de la tcnica de extraccin y purificacin de ADN


genmico de A. aegypti.
2. Estandarizacin de la tcnica de AFLP.
3. Identificacin y anlisis de las variantes genticas de A. aegypti generados
por el AFLP fingerprinting
4. Establecer la relacin entre las poblaciones de A. aegypti analizados en el
presente estudio, mediante la construccin y anlisis de un dendograma de
similitud
5. Determinacin y anlisis de la variabilidad gentica y la estructura gentica
poblacional (Fst) de la poblacin de A. aegypti mediante el programa
RAPDFST y probar su significancia a travs del test estadstico AMOVA
(anlisis de varianza molecular)

VI. Metodologa

Material biolgico.

Se trabaj con individuos adultos hembras de A. aegypti; los cuales fueron


recolectados de diferentes localidades (con presencia del vector) del Per:
Zarumilla (Tumbes), Sullana (Piura), Chiclayo (Lambayeque), El Rmac (Lima),
Jan (Cajamarca), Tingo Mara (Hunuco), Iquitos (Loreto), Tarapoto (San
Martn) y Pucallpa (Ucayali). De los mosquitos recolectados se escogieron 5
mosquitos por localidad. Por lo tanto, en el presente estudio se analiz una
muestra total de 45 individuos de A. aegypti (n = 45).

Extraccin de ADN genmico de A. aegypti

La extraccin de ADN genmico se hizo mediante el Kit GenomicPrepTM Cells


and Tissue DNA Isolation (Amersham Pharmacia Biotech Inc). Brevemente,
cada mosquito se coloc en un tubo de 1.5 ml, el cual contena 100 l de PBS
1X (pH = 7), luego se adicion 200 l de buffer TE (pH = 8), 30 l SDS 10% y
15 l proteinasa K (20 mg/ml) y se dejo incubando a 55C toda la noche.
Despus de la incubacin, se aadi 3 l de RNAsa A (10 mg/ml) y se incub
a 37C por 30 minutos, rpidamente se adicion 200 l de acetato de amonio

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helado (7.5M) y se centrifug a 14,000 rpm por 10 minutos. Se extrajo el


sobrenadante y se llev a un tubo limpio, al cual se le aadi 600 l de
isopropanol absoluto, para luego centrifugar a 14,000 rpm por 5 minutos. Se
descart el sobrenadante, sin llevarse el pellet y se lav con 600 l etanol
helado (70%). Se centrifug a 14,000 rpm por 5 minutos y finalmente se
descart el sobrenadante, se dej secar a 37 C por 5 minutos y se hidrat con
70 l de buffer TE (pH = 8). El ADN fue cuantificado para obtener su
concentracin, mediante un espectrofotmetro de UV (Spectronic 21D) a la
longitud de onda de 260 nm.

AFLP.

Para el anlisis de AFLP se utiliz el kit AFLP Analysis System I (Invitrogen


Life Technologies), siguiendo las instrucciones del fabricante con algunas
modificaciones. Brevemente, se digiri el ADN genmico con las enzimas de
restriccin EcoRI y MseI, luego se aadieron los adaptadores, que se ligaron a
los extremos cohesivos generados por dichas enzimas. Se diluy la mezcla de
reaccin 1:10 con buffer TE. Luego se preamplific la mezcla diluida
realizando 20 ciclos de PCR usando dos primers (primers E y M) que
contienen un nucletido selectivo. Nuevamente se diluy 1:10 los productos
con buffer TE.

Posteriormente, los productos de PCR diluidos fueron sometidos a una


amplificacin selectiva, usando 3 combinaciones de primers (EcoRI/ACG y
MseI/CAA, EcoRI/ACG y MseI/CAG, EcoRI/ACG y MseI/CTT); los cuales
contienen 3 nucletidos selectivos (un PCR para cada combinacin de primer).
Los productos se cargaron en un gel de poliacrilamida denaturante al 8% y se
someti a electroforesis. El gel se ti mediante una solucin de nitrato de
plata con algunas modificaciones (Bassam, Caetano-Anolles y Gresshoff,
1991). Finalmente, el gel fue escaneado y luego colocado sobre papel filtro 3
MM, para llevarlo al secador de geles 583 Gel Dryer (BioRad) durante 30
minutos a 80C.

El PCR preselectivo se llevo a cabo en un termociclador (Amplitron II,


Thermolyne) con 20 ciclos de 94C por 30 seg, 56C por 60 seg y 72C por 60
seg. Mientras que el proceso de PCR selectivo fue de un ciclo a 94 C por 30
seg; 65 C por 30 seg y 72 C por 60 seg. Luego se bajo la temperatura de
alineamiento (0.7C) por cada ciclo durante los 12 ciclos siguientes.
Finalmente se realizo 23 ciclos de 94C por 30 seg; 56C por 30 seg y 72C
por 60 seg.

Determinacin de las variantes genticas de A. aegypti

Las bandas presentes en el gel fueron analizadas y procesadas utilizando el


software GeneProfiler versin 4.05 (Scanalytics, Inc., Fairfax, Va.). Solo se
analizaron las bandas polimrficas y que no sean ambiguas, para obtener una
matriz binaria de 0 (ausencia de banda) y 1 (presencia de banda). Luego se
procedi a la construccin de un dendograma utilizando el mtodo de

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agrupamiento UPGMA (unweighted pair-group method with arithmetic


average), mediante el software Treecon versin 1.3b (Van de Peer and De
Wachter, 1994). Esto permiti definir los clusters e identificar las variantes de
la poblacin de A. aegypti. Finalmente se determin el estadstico Fst (Wright,
1951) mediante el programa RAPDFST (Apostol y Col., 1996), para determinar
el grado de variabilidad de dicha poblacin. Dicho estadstico fue corroborado
por AMOVA (Anlisis Molecular de Varianza)

VII. Resultados

Los ADNs genmicos extrados (Fig. 1) tuvieron un rango de concentracin


entre 45 a 191 ng/ul. Para el proceso de AFLP se utiliz cerca de 300 ng por
muestra.

FIGURA 1. Gel de agarosa (1%) mostrando los ADNs genmicos extrados


(sealados por la flecha).

En el anlisis de AFLP (Fig. 2) se obtuvo un total de 42, 39 y 30 loci por cada


combinacin de primer. Es decir; se obtuvo 111 marcadores. Los criterios para
determinar un locus o marcador fueron: 1) Que las bandas del gel estuvieran
en un rango de peso molecular de 0.1 a 1 Kb; 2) Si una misma banda est
presente en todas las muestras analizadas, entonces no se considera
polimrfica. 3) Los geles que mostraron bandas ambiguas no fueron tomadas
en cuenta.

A partir de los 111 marcadores se procedi a realizar una matriz de 1 y 0,


indicando presencia o ausencia de la banda respectivamente. Se obtuvieron
varios score por cada peso molecular obtenido.
Con la matriz obtenida se obtuvo un dendrograma (Fig. 3) utilizando el mtodo
de agrupamiento UPGMA

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Score 0 0 1 1 0 1 1 0 1 0 1 0

FIGURA 2. Diagrama arrojado por el software GENEPROFILER de un gel teido con


plata y escaneado. La flecha marca un marcador polimrfico, encima de las bandas el
score generado.

A partir del dendograma generado se definieron los clusters de la poblacin de


A. aegypti, dando como resultado dos grandes clusters bien definidos: el
cluster Costero, el cual involucra principalmente especimenes de A. aegypti
del departamento de Tumbes, Piura, Lambayeque y Lima; y el cluster Sierra-
Selva, que involucra especimenes de Huancayo, Loreto, San Martn, Ucayali,
Cajamarca, Lambayeque y Lima.

Un individuo denominado Ucay05 (de Ucayali) estuvo fuera de todos los


patrones y se le consider como un outgroup. El dendrograma fue sometido a
100 bootstrap, es decir cada cluster del dendrograma fue evaluado 100 veces,
esto con la finalidad de analizar la consistencia a las ramas.

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VARIANTE
SIERRA-
SELVA

Fst: 0.160

VARIANTE
COSTERA

Fst: 0.106

FIGURA 3. Dendrograma mostrando valores Boostrap (>70) y las variantes genticas


con sus respectivos Fst.

Por otra parte, el estadstico Fst total (diferencia gentica) fue de 0.113, para
el cluster Costero fue de 0.106 y para el cluster Sierra-Selva fue de 0.160. El
AMOVA dio como resultado un valor de 14.99% (p<0.001) respaldando el Fst.

VIII. Discusin

La capacidad del mosquito a infectarse esta asociada a la picadura y su


capacidad gentica tiene una gran importancia epidemiolgica para explicar
algunas diferencias en los patrones de la distribucin geogrfica de las
poblaciones. Afortunadamente la aparicin de los marcadores moleculares
est ayudando a eliminar tanto los inconvenientes de una seleccin basada en
el anlisis exclusivo del fenotipo, como la identificacin de especies y
variedades de una forma ms rigurosa y repetitiva.

Leiva y Cceres (2004) encontraron las mismas variantes, pero no pudieron


determinar la variabilidad gentica dentro de ellas puesto que la tcnica
utilizada no permiti (por su naturaleza) un anlisis ms exhaustivo de los
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individuos. En el presente trabajo se utiliz la tcnica de AFLP como


herramienta para identificar las posibles variables genticas de A. aegypti por
ser una herramienta mucho mas fina y sensible comparada con el SSCP
utilizada en un trabajo anterior (Leiva y Cceres, 2004)

Se determino la variabilidad gentica de A. aegypti dando como resultado dos


variantes: la variante Costera y la variante Sierra-Selva. Dichas variantes
muestran a su vez diferencias a nivel gentico-estructural; ya que la variante
Costera (Fst=0.106) muestra que dichas zonas estn sujetas a un importante
flujo gnico y que por lo tanto no habra diferencia entre los especimenes de
dichas localidades (no hay subclusters), esto se puede deber al gran trfico
comercial que hay entre esas zonas.
Por otra parte, la variante Sierra-Selva (Fst=0.160) muestra subvariantes
diferenciadas por ejemplo Ucayali y Huanuco, probablemente por alguna
barrera geogrfica, la cual limita la dispersin gnica del mosquito. La
variabilidad gentica depende en gran parte a la cantidad de comercio y
transporte humano. Usando marcadores microsatlites Huber y Col., en el ao
2004, estimaron la diferencia gnica de A. aegypti en Cambodia, Tailandia y
en el Sur de Vietnam. Dichos anlisis (Fst = 0.117) han sugerido una
migracin pasiva del mosquito vector a travs de la ayuda humana la cual
explica los patrones de diferenciacin. El transporte humano de huevos, larvas
y adultos en contenedores a travs de rutas de comerciales podra originar
poblaciones geogrficamente distantes pero genticamente similares.

El anlisis de AFLP ha dado informacin acerca de la variabilidad y


estructuracin poblacional de A. aegypti. En Phnom Penh, Cambodia, se
compararon tres marcadores moleculares, AFLP, microsatlites y isoenzimas,
para determinar la variabilidad gentica del mosquito vector (Paupy y Col.,
2004), dando como resultado Fst = 0.122, 0.04 y 0.02, respectivamente.
Demostrando que AFLP es altamente discriminativo entre e
intrapoblacionalmente. Tambin se puede usar a nivel local, como en el
Noroeste de Mxico, donde se determin la diversidad gentica de Ae.
aegypti mediante AFLP y microsatlites, observndose un proceso de
reinvasin (Ravel y Col., 2001).

Algunos autores por el contrario han determinado que AFLP no es adecuado


para estudios de estructura poblacional, Yan y Col. (1999), determinaron que
AFLP no es una buena herramienta para variabilidad gentica
(heterocigosidad = 0.34) al compararlos con RFLP (heterocigosidad = 0.45).
Sin embargo en la actualidad la tcnica ha probado ser poderosa sin utilizar
muchas muestras

La capacidad vectorial puede expresarse de manera diferente entre cepas de


mosquitos o entre especies cercanamente relacionadas, ya que se sabe que
dicha capacidad se determina genticamente en poblaciones diferentes. Esta
caracterstica hace que A. aegypti sea una especie compleja en el sentido de
que presenta variaciones morfolgicas, fisiolgicas y de conducta mucho
mayores que la mayora de otros insectos (Tabachnick y Powell, 1979). Esto

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sugiere que en ausencia de seleccin local, los genes involucrados en la


susceptibilidad del Dengue o en la resistencia a insecticidas podran
permanecer uniformes en frecuencia gnica.

Por tanto, no se ha encontrado asociacin entre las variantes genticas de


Aedes aegypti analizados y el serotipo de virus Dengue esto significa que la
capacidad vectorial es la misma entre las dos variantes o esta caracterstica
no se ve afectada al momento de la segregacin de las poblaciones.

Finalmente, AFLP result ser una herramienta muy til para identificar
variantes genticas, y apropiada cuando no se cuenta con un nmero alto de
muestras; ya que su alto poder discriminatorio (multimarcador) lo hace muy
efectivo en estas situaciones. Segn nuestros resultados en Lima estn
circulando A. aegypti de las dos variantes y esto es congruente con elevado
comercio que sufre la capital donde recibe productos provenientes de la costa,
sierra y selva por tanto es lgico suponer que es posible encontrar las dos
variantes en Lima.

IX. Conclusiones

Se determinaron dos variantes genticas de Aedes aegypti en el Per:


Variante costera y Variante Sierra-Selva
Las poblaciones de la variante costera presenta un elevado flujo
gentico por tanto no existiran diferencias entre las poblaciones de los
diferentes departamentos costeros
Las poblaciones de la variante sierra-selva presentaran diferencias
entre las poblaciones de los departamentos analizados debido al poco
flujo gnico generado por barreras geogrficas o escaso comercio
entre ellas. Dichas diferencias se observan a nivel genotpico que
podran hacerse evidentes en el fenotipo con el paso del tiempo
no se ha encontrado asociacin entre las variantes genticas de
Aedes aegypti analizados y el serotipo de virus Dengue
La tcnica de AFLP ha demostrado ser muy sensible, poderosa y
reproducible para estudios de variabilidad gentica donde la
disponibilidad de muestras es una limitante
En Lima circulan las dos variantes genticas producto del elevado
comercio que existe entre la ciudad y las regiones del Peru.

X. Recomendaciones

Se recomienda analizar individuos de Aedes aegypti de los departamentos


faltantes donde se encuentra el vector para tener un panorama completo de la
variabilidad gentica de este vector

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Variantes genticas de Aedes aegypti y su asociacin con el serotipo del virus dengue en una
rea endmica del Per
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VARIANTES GENTICAS DE Aedes aegypti Y SU ASOCIACIN CON EL SEROTIPO DEL VIRUS DENGUE EN UNA
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