LEUCEMIAS AGUDAS,

CLASIFICACION, DIAGNOSTICO,
TRATAMIENTO Y APORTACION
DE LAS NUEVAS TECNICAS
DIAGNOSTICAS.

Ana Maria Gmez Garca

FIR 3 ao Anlisis Clnicos
CANCERES INFANTILES
MIELOBLASTICAS LINFOBLASTICAS

LEUCEMIAS

CRONICAS AGUDAS
Expansin de elementos Expansin clonal de
maduros de MO precursores hematopoyeticos

80% L.infantiles son LLA

15% son LMA
Restantes son indiferenciadas o cronicas
(LMC, LMMC JUVENIL)
LEUCEMIAS AGUDAS
EN LA INFANCIA
ANTECEDENTES HISTORICOS

Virchow, 1845

Ehrich, 1891 Citoquimica

Farber, 1948 empleo Aminopterina

 ESTRATEGIAS DE ESTUDIO DE
LAS L.A:
METODOS DE LABORATORIO PARA CARACTERIZAR BLASTOS LEUCEMICOS:

DATOS
LABORATORIO
CLINICA

MORFOLOGIA

L.A.

BIOLOGIA INMUNOFENOTIPO
MOLECULAR

FISH CITOGENETICA

Complejo diagnostico de las Leucemias en la Actualidad.

DEFINICION LEUCEMIA

Proliferacin neoplsica a partir de una clula
hematopoytica inmadura que ha perdido la
capacidad de diferenciarse.

Disminucin del tejido hematopoyetico normal en

MO y posterior invasin de sangre perifrica y
otros rganos.

Enfermedad oncolgica ms frecuente

diagnosticada en menores de 15 aos.
ETIOLOGIA

La mayora carecen de etiologa clara

Factores predisponentes:

Factores genticos

Anomalas cromosmicas

Inmunodeficiencias congnitas

Radiaciones ionizantes

Frmacos mielotxicos.

Enfermedades inmunolgicas

Virus
 CLINICA

SINTOMAS CONSTITUCIONALES: astenia,
debilidad, perdida peso, sudoracin nocturna.

SINTOMAS POR INFILTRACION DE LA MO:

- desplazamiento serie roja: Anemia ( palidez)

- desplazamiento serie blanca: Fiebre (50%),

infecciones 2 a neutropenia.

- desplazamiento serie plaquetar: ditesis

hemorrgicas
(petequias, sangrado) por la plaquetopenia.
 CLINICA

SINTOMAS POR INFILTRACION DE ALGUN
ORGANO O TEJIDO:
1. - 50-80% hepatoesplenomegalia
2. - linfoadenopatias
3. - 40% nios dolor seo o articular
4. - hipertrofia gingival
5. - infiltracin piel, mediastino y SNC (5-7% de
nios con L.A.)
DATOS DE LABORATORIO

95% Anemia normoctica, normocrmica y

arregenerativa ( ret )
El compromiso de 2 o mas
series hematopoyeticas

Neutropenia.
MIELOGRAMA

90% Trombocitopenia.

16% carecen de blastos en SP.

CARACTERISTICAS SERICAS

LDH elevada: Se correlaciona con la masa
tumoral y la gravedad de la enfermedad

Otras menos frecuentes

Hipercalcemia

Hiperuricemia

Aumento de transaminasas

Uremia
FROTIS SANGUINEO NORMAL

PLAQUETAS

MONOCITO
LINFOCITO

NEUTROFILO
AUTOANALIZADOR : ADVIA 120
SISTEMA AUTOMATIZADO PARA
ESTUDIO DEL HEMOGRAMA
ADVIA 120: AUTOANALIZADOR
HEMATOLOGICO

Autoanalizador por citometria de flujo.

Tres sistemas analticos:
1Citmetro de flujo con lmpara diodo laser para canales:
RBC/PLAQ
BASOLOBULARIDAD
RETICULOCITOS

2.Citometro de flujo con lmpara tungsteno para canal de

PEROXIDASA.

3.Colorimetro para medir HEMOGLOBINA.

 Autoanalizador hematologico:
Graficas serie blanca

tamao

mieloperoxidasa Complejidad nuclear

Serie plaquetar VOLUMEN
Graficas serie roja
DENSIDAD

CONCENTRACIO TAMAO
N DE Hb
HEMOGRAMA AUTOMATIZADO DE
SANGRE NORMAL
DIAGNOSTICO DIFERENCIAL

Reacciones leucemoides linfocitarias:
mononucleosis infecciosa, Bordetella Pertussis.

Hiperplasia linfoide madura en nios< 2 aos.

Otros: Anemia aplasica, linfoma, neuroblastoma,

sndromes hemorrgicos (purpura
trombocitopenica aguda), sndrome
mielodisplasico
 MONONUCLEOSIS INFECCIOSA
AUTOMATIZADO

MANUAL

Atipias linfocitarias

LEUCEMIA AGUDA VISTA AL
M.OPTICO

BLASTOS
LEUCEMIA AGUDA (SISTEMA
AUTOMATIZADO:
 LEUCEMIAS
AGUDAS.CLASIFICACION FAB
British Journal of Hematology, 1976 Aug ; 33(4): 451-8

Proposals for the Classification of the Acute Leukaemias

FRENCH-AMERICAN-BRITISH (FAB) CO-OPERATIVE GROUP

Bennett JM , Catovsky D, Daniel MT , Flandrin G, Galton DA, Gralnick HR, Sultan C,

Accepted for publication 26 January 1976

PROBLEMAS CON LA CLASIFICACION FAB:

No todas las L. Agudas tienen 30% blastos (traslocaciones especificas).
Excluye leucemias bifenotipicas.
No incluye L. multilnea u otras poco frecuentes
Excluye informacin esencial para tto y pronostico.
 CLASIFICACION MORFOLOGICA
FAB (1976)

MIELOBLSTICA

LINFOBLSTICA M0 minimamente diferenciada

M1 Sin maduracin
L1 Tamao celular M2 Con maduracin
L2 Morfologa Nuclear M3 promielocitica
L3 Nucleolos M4 mielomonocitica
Basofilia citoplasmtica M5 monoblstica
Vacuolas citoplasmticas M6 eritroleucemia
L1: cels pequeas
M7 megacarioblstica
L2: cels pequeas y grandes
L3: tipo Burkitt.
LEUCEMIA AGUDA
CLASIFICACION OMS ( 2001)

L.MIELOIDES AGUDAS

L.LINFOIDES AGUDAS De precursor de cel B

De precursor de cel T

De Burkit

L.MIELOIDE CRONICA

L.LINFATICA CRONICA
 LEUCEMIA AGUDA
CLASIFICACION OMS ( 2001)

L. AGUDA 20%
BLASTOS

CLASIFICACION OMS:
MORFOLOGIA
GENETICA
FENOTIPO
CLASIFICACION INMUNOFENOTIPICA

EGIL (1995)
Mas usada

LINFOBLASTICAS
MIELOBLASTICAS
AGUDAS
AGUDAS

BIFENOTIPICAS AGUDAS
SCORE INMUNOFENOTIPICO DE LAS LEUCEMIAS BIFENOTIPICAS
 ESTUDIO INICIAL DE LA LEUCEMIA.
CITOMETRIA DE FLUJO
Paneles de anticuerpos monoclonales empleados para el estudio inicial de las
LLA DE
LLA deFENOTIPO
fenotipo B B
cMPO/ cCD79a/ CD45/ cCD3
nTdT/ cIgM/ CD45/ CD34
CD45/ CD4/ CD8/ CD3/ CD19
CD10/ CD20/ CD45/ CD34/ CD19
CD38/ CD22/ CD45/ HLADR/ CD19
CD15/ CD13/ CD45/ CD33/ CD19
KOR-SA/ 7.1/ CD45/ CD24/ CD19
IP (DNA)/ pan-B
LAs (FITC/ PE/ ECD/ PC5/ PC7)
LLALLA
DE de
FENOTIPO
fenotipo T T
cMPO/ cCD79a/ CD45/ cCD3
nTdT/ cIgM/ CD45/ CD34
CD45/ CD4/CD8/ CD3/ CD19
CD7/ CD34/ CD3/ HLADR/ CD5
CD7/ CD1a/ CD45/ CD33/ CD56
CD7/ CD13/ CD45/ CD10/ CD2
CD38/ TCR/ CD45/ TCR/ CD3
INMUNOFENOTIPOS
LEUCMICOS
LMA
LMA
cMPO/ cCD79a/ CD45/ cCD3
nTdT/ cIgM/ CD45/ CD34
CD45/ CD4/ CD8/ CD3/ CD19
CD15/ CD13/ CD45/ CD33/ CD34
CD7/ CD117/ CD45/ CD34/ CD56
CD65/ CD135/ CD45/ CD2/ CD34
CD64/ CD11b/ CD45/ CD14/ CD16
HLADR/ CD235a/ CD45/ CD34/ CD41
LEUCEMIAS 2001-2005
MIELOIDES
MIELOIDES 25%

75%
LINFOIDES
LINFOIDES

LEUCEMIA T
LEUCEMIA B
 LEUCEMIAS NIO JESUS 2005

LINFOIDES LLA T PRO T MIELOIDE M0

LLA T MIELOIDES
CD56+
INTERMEDIA
MIELOIDE M0
LLA PROB

LLA B PROB- MIELOIDE M3

PREB

MIELOIDE M4

MIELOIDE M5

LMMJ

LMC
LLA B
COMUN
 LEUCEMIAS LINFOBLSTICAS
AGUDAS B (EGIL):
SUBTIPOS MARCADORES CD34+
FRECUENCIA
INMUNOLOGICOS
TdT + CD19+
LAL B1 o CD79a+ y/o CD 22+
pro-B y/o CD19+,CD34+ CD22+
5%
CD10++
LAL B2 o CD79a+ y/o CD 22+ CD34+/-
60% comun y/o CD19+,CD34 TdT+ CD19+
CD 10+
CD22+ CD20++
LAL B3 o CD79a+ y/o CD 22+
pre- B y/o CD19+,
15% IgM+ CD19+
Cad CD10 +d
intracitoplasmatica
CD10+/- CD22+
LAL B4 o CD79a+ y/o CD 22+ CD20++
maduros y/oCD19+, IgM+ CD19+
3%
Ig Sup+ CD22++

Ig super+
 LEUCEMIAS LINFOBLSTICAS
AGUDAS T (EGIL):

FRECUENCIA SUBTIPOS MARCADORES

TdT+ CD34 +
15% INMUNOLOGICOS
CD3+ CD7+

LAL T1 o + CD 7 Y CD3
pro-T citoplasmtico, CD34+
CD8+
LAL T2, A lo anterior aadir + TdT+
CD5+
pre-T CD 2 y/o CD 5 y/o CD2+ CD3+
CD8. CD7+

LAL T3, + CD1a CD4+ CD2

MAS
FRECUENTE tmico- CD8+
TdT +
CD5
cortical CD3+
CD1a+ CD7
LAL T4, Demostracin de la
madura existencia de CD 3 de
CD3+ CD2+
sup en ausencia de CD
1a. CD4 o CD5+
TdT+
CD8 CD7+
 LEUCEMIAS LINFOBLASTICAS T

Menos frecuentes ( 15% LAL peditricas).

Mas agresivas (30% recaen a los dos
aos).

Menos caracterizadas citogeneticamente
(25-50% presentan cariotipos alterados).

Menos informacin pronostica.

Ttos menos especficos.
 CLASIFICACION INMUNOLOGICA-
MORFOLOGICA
TIPO TdT HLA CD10 CD3 CD1 CD7 CD2 CD19 CIg SIg Tipo
inmunolog DR CALLA a CD5 FAB
CD8
proB + + - - - - - + - - L1L2

COMUN + + + - - - - + - - L1L2

PreB + + - - - - + + - L1L2

B NEG + - - - - + - + L3

ProT + - +cit - + - - - - L1L2

PreT + - +cit - + + - - - L1L2

TIMICO + - - +cit POS + + - - - L1L2

CORTICAL

TIMICO - - - +sup NEG + + - - - L1L2

MADURO
 LEUCEMIAS AGUDAS

1. DIAGNOSTICO

2. TRATAMIENTO

3. TRANSPLANTE

4. EMR
COMO SE REALIZA UN
DIAGNOSTICO?

ANALIZADORES AUTOMATICOS.

EXTENSION DE SANGRE PERIFERICA.

EXTENSIONES DE MEDULA OSEA

CITOQUIMICA DE EXTENSIONES MO.

CITOMETRIA DE FLUJO DEL ASPIRADO DE

MEDULA OSEA PARA TIPIFICAR LA LEUCEMIA

CITOGENETICA Y BIOLOGIA MOLECULAR

FROTIS NORMAL MO

megacariocito

eritroblastos
 MO PATOLOGICA

LEUCEMIA
LEUCEMIA LINFOIDE AGUDA
MIELOIDE AGUDA
CONTRIBUCION DE LA CITOQUIMICA
AL DIAGNOSTICO HEMATOLOGICO

La citoqumica estudia la composicin qca. de las
clulas y hace posible detectar y precisar la
localizacin de algunos principios inmediatos,
enzimas y sust.inorgnicas (metales pesados).

Compuestos:
 Carbohidratos: reaccin del c perydico de Shiff
o reaccin del PAS.
 Enzs oxidantes: reaccin de las peroxidasas.
 Enzs hidrolticas: fosfatasas alcalinas, cidas, -
glucuronidasa, muramidasa, N-acetil- -
glucosaminidasa, esterasas inespecficas.
 Componentes inorgnicos: hierroazul de Prusia
o de Perls.
 CITOQUIMICA
L1 L2 L3 MO M1 M2 M3 M4 M5 M6
Tipos FAB

PAS + + - +

GRANO GRANO

MPX - - - - + ++ +++ ++ -+ -

P acida +T +T -

Cloroacetato - - - - -+ ++ +++ -+ - -

esterasa

ANAE +T +T - - - - - + ++ -

(
naftol
acetato
estarasa)
FOTOS CITOQUIMICA
PAcida
ANAE

PAS

MPX
GRACIAS