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de biologa
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
UNIVERSIDAD DE LOS ANDES COLECCIN
Autoridades Universitarias Textos Universitarios
Rector Publicaciones
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Vicerrector Acadmico
Acadmico
Manuel Dagert Manual de laboratorio de biologa
Vicerrector Administrativo Primera edicin, 2009
Manuel Aranguren Universidad de Los Andes
Secretaria Vicerrectorado Acadmico
Jos Mara Anderez CODEPRE
Bernardo Chataing / Elsa Nieves
PUBLICACIONES
VICERRECTORADO Concepto de coleccin
y diseo grfico
ACADMICO
Katali Alava
Director
Correccin
Manuel Dagert
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Coordinacin editorial
Impresin
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Centro Editorial Litorama, C.A.
Produccin editorial
HECHO EL DEPSITO DE LEY
Yelliza A. Garca A.
Depsito Legal: LF 23720085741415
ISBN: 978-980-11-1151
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total o parcial de esta obra
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sin la autorizacin escrita
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del autor y el editor
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Universidad de Los Andes
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Av. 3 Independencia
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Mrida, Venezuela
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publicacionesva@ula.ve
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http://viceacademico.ula.ve/
Jos Villalobos
publicacionesva
Impreso en Venezuela
Printed in Venezuela
UNIVERSIDAD DE LOS ANDES
Autoridades Universitarias
Bernardo Chataing
Elsa Nieves
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 7
1
Objetivo
Instrucciones generales
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 9
1 Objetivo e instrucciones
Temas
Autoevaluacin
Glosario
10 M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A
1
Introduccin al mtodo cientfico prctica
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Ejercicios y autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 11
PRCTICA1 Introduccin al mtodo cientfico
Experimental
3 Hay diferentes formas mediante las cuales pueden ser clasificadas las propie-
dades de un objeto. Una de ellas es en estructuras y funciones.
Diga si las siguientes propiedades son estructurales o funcionales:
a) pelota de goma
b) misil cilndrico
c) catalizador
d) computador
e) termmetro
f) tomo de hidrgeno.
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1 Bernardo Chataing Elsa Nieves
B
A A B C A C B
C
Observacin # 1: Las plantas que crecieron en terreno que contena cloruro, pero sin mag-
nesio y suficiente luz, se pusieron verdes.
Observacin # 2: Las plantas que crecieron en un terreno que contena cloruro, pero sin
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PRCTICA1 Introduccin al mtodo cientfico
Conclusin:
El (los) factor(es) que inciden en el desarrollo de la clorofila, como puede juz-
garse de los experimentos anteriores es (son)...
Roche M. Nueva tendencia de la investigacin cientfica venezolana. En: Pfaur J, Fuenmayor F, editores. Deambular por la cien-
cia. Mrida: Publicaciones Facultad de Ciencias. Universidad de Los Andes; 1999. p. 137-138.
Ejercicios y autoevaluacin
14 M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A
1 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Bibliografa
Baker JJ, Allen GE. Biologa e investigacin cientfica. Mxico: Fondo Educativo Interamericano S.A;
1970.
Polit DF, Hungler BP. Investigacin Cientfica. En: Ciencias de la Salud. Mxico: Mc Graw-Hill Inter-
americana; 1997.
Tamayo-Tamayo M. El proceso de la investigacin cientfica. Mxico: Editorial Limusa; 1999.
Chataing B. Introduccin a la bioqumica celular, Vol. 1. Mrida: Consejo de Publicaciones de la Uni-
versidad de Los Andes; 1995.
Roche M. Nueva tendencia de la investigacin cientfica venezolana. En Pfaur J, Fuenmayor F, edi-
tores. Deambular por la ciencia. Mrida: Publicaciones Facultad de Ciencias. Universidad de Los
Andes; 1999. p. 137-138.
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Macromolculas y preparacin de soluciones prctica
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Ejercicios y autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
Como todo en nuestro planeta, los seres vivos estn compuestos por tomos y
molculas. En los seres vivos estos elementos bsicos estn organizados de una manera
muy especfica formando polmeros o agregados de alto peso molecular, como son los
polisacridos, las protenas, los cidos nucleicos y los lpidos que aun cuando no for-
man polmeros se asocian entre s. Los tomos y las molculas tambin interactan unos
con otros, en una forma muy precisa de manera que mantienen el flujo de energa nece-
sario para la vida. Gran parte de la biologa moderna se enfoca en la biologa molecular:
esto es, la qumica y fsica de las molculas que constituyen a los seres vivos. Para en-
tender los procesos que rigen la vida es necesario conocer algunos principios bsicos de
la fisicoqumica.
Objetivos
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PRCTICA2 Macromolculas y preparacin de soluciones
Conocimientos necesarios
Macromolculas biolgicas.
Preparacin de soluciones.
Bioseguridad en el laboratorio.
Experimental
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2 Bernardo Chataing Elsa Nieves
1.2 REACTIVOS
a) Los reactivos del laboratorio deben permanecer en su lugar respectivo.
Si necesita de un reactivo tome la cantidad que necesite del envase SIN
INTRODUCIR SUSTANCIAS O UTILIZAR LAS ESPTULAS, QUE NO
HAYAN SIDO PREVIAMENTE LIMPIADAS, DENTRO DEL MISMO. Al
finalizar coloque el envase en su sitio respectivo. NO DEVUELVA MA-
TERIAL QUE HA SIDO SACADO DEL ENVASE AL MISMO, SI NO ES-
T SEGURO DE QUE NO SE ENCUENTRA CONTAMINADO O MEZ-
CLADO CON OTRAS SUSTANCIAS.
b) En el caso de que se acabe un reactivo, reprtelo inmediatamente para
solicitarlo.
c) Los reactivos en la cava deben ser sacados, utilizados inmediatamente y
retornados a la misma en el menor tiempo posible. En el caso de los re-
activos almacenados a -20 oC, espere que el frasco alcance la temperatu-
ra ambiente antes de abrir y pesar la cantidad requerida.
d) No guarde reactivos ni soluciones en matraces aforados u otro material
de vidrio de uso cotidiano en el laboratorio como es el caso de cilin-
dros, fiolas, etc. Guarde sus reactivos en botellas.
1.3 EQUIPOS
a) Los equipos deben ser mantenidos completamente limpios despus de
haber sido utilizados
b) Si no sabe como opera un equipo, solicite el catlogo de funcionamien-
to o que se le ensee a operarlo.
La balanza:
Esta debe estar completamente limpia antes de pesar cualquier sustancia y una
vez utilizada debe tener cuidado de mantenerla en condiciones excelentes de limpieza.
NUNCA QUITE DE LA BALANZA LA SUSTANCIA PESADA SI ANTES LA BALANZA
NO HA SIDO APAGADA. No deje derramar lquidos o sustancias corrosivas sobre la ba-
lanza.
Las centrfugas:
- Es recomendable secar las centrfugas refrigeradas despus de una hora de ha-
ber sido utilizadas.
- Los rotores y tubos de centrfuga deben ser lavados con agua destilada des-
pus de su uso. No utilice solventes orgnicos en los tubos de centrfuga para lavarlos
o realizar centrifugaciones si antes no ha consultado la resistencia del tipo de tubo a di-
cho solvente.
- Chequee la velocidad mxima permitida para el rotor que va a utilizar. As
mismo, chequee el modelo de centrfuga en el cual es posible utilizar el rotor.
El espectrmetro:
- Estos equipos son muy delicados por lo cual es conveniente leer las instruc-
ciones de uso antes de ser utilizados.
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PRCTICA2 Macromolculas y preparacin de soluciones
C) Preparacin de soluciones
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2 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Disolver la sal en un cierto volumen de agua y llevar luego a volumen final con
el resto del agua. Ajustar el pH requerido, autoclavar.
Ejercicios y autoevaluacin
Bibliografa
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A N O TA C I O N E S
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3
El microscopio y sus caractersticas prctica
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Autoevaluacin
Fotografas
Bibliografa
Introduccin
Objetivos
El estudiante debe ser capaz de identificar las partes del microscopio ptico
y usarlo adecuadamente.
Reconocer la importancia del microscopio en el trabajo del bilogo y recono-
Conocimientos necesarios
Sistema ptico
Sistema de iluminacin
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PRCTICA3 El microscopio y sus caractersticas
Como todo instrumento, debe tratarse con cuidado para que se conserve en
buen estado. En el caso de la manipulacin del microscopio ten siempre presente las si-
guientes precauciones:
1. Debe trasladarlo agarrndolo por el asa con una mano y apoyando el pie del
microscopio sobre la palma de la otra mano. As evitar que las lentes, tubo y
espejo puedan salirse de su sitio.
2. Evite por todos los medios la cada de cualquiera de las lentes, porque esto las
inutiliza.
3. Bajo ninguna circunstancia debe sacar los objetivos del revlver.
4. Todas las partes movibles del microscopio funcionan suave y fcilmente. Si es-
to no ocurre comunqueselo de inmediato a su profesor.
5. Nunca debes tocar con los dedos la superficie de las lentes.
6. La limpieza de las lentes slo debe hacerse con papel especial para lentes;
cualquier otro material puede dejarle pelusas o producir rayas en los vidrios.
7. Si las lentes tienen grasa, use el papel para lentes ligeramente humedecido con
xilol e inmediatamente seque con otro papel del mismo tipo. Jams use alco-
hol, ni xilol en exceso, pues disuelven el cemento que pega las lentes.
8. Si involuntariamente se mojan las lentes, lmpielas inmediatamente con papel
para lentes.
9. La platina tambin debe mantenerse seca y limpia. Si por cualquier circunstan-
cia se moja, squela de inmediato con un pao limpio y suave.
10. Retire el porta-objetos al finalizar el trabajo y guarde el microscopio en su caja
o cbrelo con su funda.
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3 Bernardo Chataing Elsa Nieves
8. Para utilizar el objetivo de 100X, debe girar el revlver y dejar despejada la pre-
paracin sin objetivo, colocar una gota de aceite de inmersin, girar el revlver
de nuevo y colocar el objetivo de 100X.
9. Focalice la imagen, utilizando el tornillo micromtrico.
10. Gire el revlver, retire la preparacin.
11. Limpie el objetivo de 100X con papel especial.
12. Guarde el microscopio o colquele la funda.
Experimental
a. Siguiendo las instrucciones del profesor, y con la ayuda de los libros, estudiar
y reconocer las diferentes partes del microscopio ptico (mecnica y ptica) y sus fun-
ciones. Discutir los siguientes aspectos: cuidados y limpieza del microscopio ptico,
monocular, binocular, trionocular, lmite de resolucin (LR), enfoque, tipos de objetivos,
objetivo de inmersin, revlver, condensador, tornillo macromtrico, tornillo microm-
trico, platina, aumento, abertura numrica (AN), ndice de refraccin.
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PRCTICA3 El microscopio y sus caractersticas
b.
a.
c.
e.
a) Clulas endoteliales de la arteria pulmonar; b) clulas epiteliales Hep-2; c) clulas epiteliales Hep2;
d) hgado de rata; e) cromosomas; f) clulas proliferantes.
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3 Bernardo Chataing Elsa Nieves
b) Siguiendo las instrucciones del profesor y el manual del manejo del microsco-
pio, observe las diferentes muestras (fresca in vivo con y sin colorantes, mues-
tras fijadas y coloreadas), enfquelas a diferentes aumentos (10X, 40X y 100X)
y describa las diferencias.
c) Procedimientos de tincin y su aplicacin como tcnicas microscpicas. Si-
guiendo las instrucciones del profesor: prepare un colorante vital (azul de me-
tileno: 1 parte del colorante por 10.000 partes de alcohol absoluto) y utilcelo
para colorear las muestras.
Lmites de resolucin
Autoevaluacin
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PRCTICA3 El microscopio y sus caractersticas
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3 Bernardo Chataing Elsa Nieves
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PRCTICA3 El microscopio y sus caractersticas
Bibliografa
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4
La clula prctica
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
La idea de que las clulas son las unidades fundamentales de los organismos
vivos es parte de la teora celular. La mayor parte de las clulas son microscpicas, pe-
ro su tamao y forma varan en un rango muy amplio, lo cual se relaciona con las fun-
ciones que stas realizan.
Los organismos pueden clasificarse en dos grupos fundamentalmente diferen-
tes, segn la estructura y complejidad de sus clulas en eucariotes y procariotes. Aun-
que las plantas y animales son eucariotes, las clulas vegetales difieren de las clulas
animales en varios aspectos.
Objetivos
Conocimientos necesarios
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PRCTICA4 La clula
a. Elodea
b. Euglena
c. Sangre
d. Eritrocitos
e. Eritrocitos y linfocitos
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4 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Experimental
1 Clulas procariticas:
a) Tome una muestra con un hisopo estril de la mucosa bucal o de los o-
dos o nariz.
b) Realice un frotis en una lmina portaobjeto limpia.
c) Deje secar, fije la muestra cubriendo la lmina con varias gotas de meta-
nol durante 1 minuto.
d) Coloree la muestra utilizando el mtodo de GRAM.
e) Una vez coloreada y seca la muestra, observe al microscopio, primero a
bajo aumento, luego a mediano aumento y posteriormente con aumento
de 100X (inmersin).
Mtodo de GRAM
Mtodo de Wright
El mtodo permite apreciar con bastante claridad las clulas sanguneas. Para
ello se procede de la siguiente manera:
a) Coloque una muestra de sangre en un portaobjeto y extindala utilizan-
do otro portaobjeto.
b) Caliente la muestra sobre un mechero para fijarla
c) Coloque la lmina en solucin de Wright durante 1 minuto.
d) Agregue agua destilada a la lmina y deje en sta durante 1,5 minutos.
e) Lave la placa con abundante agua.
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PRCTICA4 La clula
2 Clulas eucariticas:
a) Coloque una o dos gotas de agua estancada (acuario) en cada una de las
lminas limpias y djelas secar.
b) Fjelas con varias gotas de metanol hasta cubrir la muestra. Deje duran-
te 1 min.
c) Coloree una lmina con azul de metileno por 10 min. y la otra con
Giemsa por 20 min.
d) Observe las lminas secas con bajo y alto aumento.
3 Organismos unicelulares:
a) Observar las lminas coloreadas entregadas por el profesor de: bacteria
(procariota), Leishmania (eucariota) u otro organismo unicelular.
1 Clula vegetal:
a) Coloque una gota de agua destilada en una lmina porta objeto y monte
una hoja de elodea o de musgo cubrindola con una laminilla cubre
objeto.
b) Observe al microscopio con el ocular de 10X y 40X.
c) Observe la estructura vegetal, particularmente los cloroplastos caracte-
rsticos de las clulas vegetales.
d) Realice pequeos cortes finos de material vegetal: races, hojas, grama,
raspado de papa, cebolla, plantas de jardn, etc.
e) Mntelos en unas gotas de solucin fisiolgica y cbralos con una lami-
nilla.
f) Observe al microscopio las estructuras vegetales: cloroplasto, la pared
celular y la membrana celular.
1 Clula animal:
a) Realice la diseccin de un insecto: grillo, cucaracha, etc. o lombriz de
tierra, larva, etc. y extraiga el tubo digestivo.
b) Prepare cortes finos y mntelos en unas gotas de solucin fisiolgica y
cbralos con una laminilla.
c) Observe al microscopio las clulas animales.
d) Observar las lminas coloreadas entregadas por el profesor de cortes
coloreados de hgado y bazo.
e) Con la ayuda de los libros identifique las estructuras.
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4 Bernardo Chataing Elsa Nieves
2 Tipos sanguneos:
a) Limpie el dedo anular con algodn empapado en alcohol.
b) Voluntariamente se tomarn muestras de sangre con la ayuda de unas
lancetas desechables. Pinche el dedo y coloque la gota de sangre en un
extremo de los porta objetos limpios.
c) Se prepararn frotis finos: extienda la gota de sangre con el borde de
otro porta objeto formando un ngulo de 45, deslice suavemente hasta
el otro extremo de la lmina y deje secar el frotis.
d) Fije el frotis con metanol por 1 minuto.
e) Coloree con reactivo de Giemsa al 10% por 20 min.
f) Observe con inmersin los diferentes tipos celulares.
Mtodo de Giemsa
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PRCTICA4 La clula
Autoevaluacin
1. Qu es un colorante vital?
2. Por qu utiliza aceite de inmersin al observar una lmina con el objetivo de
100X?
3. Cules son los aceites de inmersin comnmente utilizados?
4. Diga 6 diferencias fundamentales entre la clula eucariota y procariota?
5. Cules seran las diferencias entre una clula vegetal y una clula animal?
Bibliografa
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5
Las reacciones qumicas en biologa y los prctica
procesos de transferencia de energa
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Ejercicios y autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
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PRCTICA5 Las reacciones qumicas en biologa...
La energa interna del sistema es una propiedad que depende del volumen y
la temperatura y puede describirse matemticamente como:
E= CvdT+
H= E + (PV)
H= Qp
G= Go + RT ln
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5 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Go= RT ln Kequilibrio
Objetivos
Conceptos necesarios
Experimental
A) Tipos de reacciones
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PRCTICA5 Las reacciones qumicas en biologa...
B) Tipos de procesos
a) Coloque hielo en un vaso de precipitado y mida su temperatura. Deter-
mine la temperatura cada media hora y deje en reposo. Mida nueva-
mente la temperatura final.
b) Coloque 100 ml de agua en un vaso de precipitado. Mida su temperatu-
ra. Caliente el agua y mida su temperatura cada 5 minutos. Deje reposar
media hora y mida nuevamente la temperatura.
2 Para el equilibrio:
3 Dado el equilibrio:
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5 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Autoevaluacin
Bibliografa
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Las enzimas: propiedades de -amilasa prctica
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
Las enzimas son protenas que aceleran las velocidades de las reacciones den-
tro de la clula. Las enzimas se caracterizan por ser altamente especficas, tanto en la re-
accin catalizada como en sus sustratos. Las enzimas poseen un centro activo en el cual
se introduce el sustrato. Se considera que entre las posibles propiedades de las enzimas
que le permiten su inmenso poder cataltico, se encuentra el hecho de que stas acele-
ran las velocidades de las reacciones, debido a la estabilizacin del estado de transicin.
La -amilasa cataliza la hidrlisis de los enlaces -1,4 del almidn, glucgeno y amilo-
pectina, pero no los enlaces de la celulosa ni los enlaces 1,6 del glucgeno o el al-
midn, produciendo azcares reductores, principalmente maltosa con un poco de glu-
cosa y maltotriosa:
Figura 1. Almidn
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PRCTICA6 Las enzimas: propiedades de -amilasa
Figura 2. Maltosa
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6 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
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PRCTICA6 Las enzimas: propiedades de -amilasa
C) Procedimientos experimentales
1 Curva de calibracin de la glucosa:
a) Prepare 10 tubos de ensayo y agrgueles glucosa (1 mg/ml) en las si-
guientes cantidades: 0,0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 y 1.0 ml.
Complete a un volumen de 2,5 ml con buffer fosfato. Incube 5 minutos
y agregue a cada tubo 1 ml de DNS. Ebulla las muestras durante 5 mi-
nutos. Deje enfriar y mida la absorbancia a 546 nm.
b) Grafique Absorbancia versus mg de glucosa.
46 M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A
6 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Nota: el blanco de las reacciones y ensayos es el sistema completo con almidn sin enzima.
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PRCTICA6 Las enzimas: propiedades de -amilasa
Nota: Las mismas experiencias pueden realizarse en forma cualitativa (o cuantitativa) utilizando re-
activo de Lugol en vez del cido dinitrosaliclico y se detiene la reaccin incubando los tubos 5 mi-
nutos en agua hirviendo.
Tabla 1
CONTENIDO VOLUMEN (ML)
Autoevaluacin
1. Qu es un azcar reductor?
2. Cul es la reaccin que cataliza la -amilasa?, y la -amilasa?
3. Cul es la estructura del almidn? Cul es la estructura de la maltosa?
4. Qu es un enlace glicosdico ? y un enlace glicosdico ?
5. Cules son las caractersticas esenciales de una enzima?
6. Por qu la actividad enzimtica vara con el pH?
7. Qu se entiende por desnaturalizacin de una protena?
8. Para qu realiza una curva de calibracin con glucosa?
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6 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Bibliografa
Philip N. Fsica biolgica, energa, informacin y vida. Espaa: Editorial Reverte; 2005.
Solomon EP, Berg LR, Martin DW. Biologa. Mxico: McGraw-Hill Internacional Editores; 2001.
Plummer DT. Introduccin a la bioqumica prctica. 2 ed. Colombia: McGraw Hill Latinoamericana
S.A.; 1981.
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La fotosntesis prctica
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Ejercicios y autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 51
PRCTICA7 La fotosntesis
1 x 104 1x107 1x108 1x109 1x1012 4x1014 8x1014 1x1016 1x1019 1x1024
RADIO TV RADAR MICRO INFRA VISIBLE ULTRA RAYOS RAYOS
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7 Bernardo Chataing Elsa Nieves
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 53
PRCTICA7 La fotosntesis
Las clulas fotosintticas tambin pueden contener otros pigmentos como los
carotenoides y las pficobilinas, que sirven como receptores suplementarios de luz para
aquellas porciones del espectro visible que no son cubiertas por las clorofilas. Cada mo-
lcula diferente de clorofila absorbe en una regin determinada del espectro (Figura 1).
La clorofila a absorbe alrededor de 663 nm, pero dentro del cloroplasto absorbe a 678
nm, mientras que la clorofila b absorbe alrededor de 635 nm.
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
54 M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A
7 Bernardo Chataing Elsa Nieves
a. Lave con agua las hojas de espinaca o elodea, djelas escurrir y pese unos 5 g
de hojas.
b. Corte las hojas en pequeos trozos y agregue 5 ml de metanol. Triture las ho-
jas en un mortero para extraer el jugo. Filtre, usando papel Whatman N 1, y recoja la
solucin obtenida en un vaso de precipitado. Agrguele a las hojas 5 ml de una solucin
de acetona en agua 80% v/v. Enjuague la solucin con 5 ml de solucin acuosa de ace-
tona y mida la absorbancia de la muestra en un espectrofotmetro, desde 340 a 700 nm
con intervalos de 10 nm. Utilice la solucin acuosa de acetona como blanco.
B) Aislamiento de clorofilas a y b
[Diehls-Jones SM. The chlorophylls. J. Chem. Educ. 1984; 61: 454-455]
a. Tome hojas de espinaca o elodea y cubra la mitad de cada una con papel alu-
minio. Exponga la hoja (con la mitad descubierta y la otra mitad tapada) a un bombillo
de 100 w por 1 hora.
b. Corte la hoja en pequeos pedazos y una porcin de hojas en la oscuridad y
otra en hojas iluminadas con el bombillo colquelas en cpsulas de Petri que contienen
yodo o reactivo de Lugol. Compare la forma en la cual se han coloreado las hojas.
c. Otra porcin de las hojas, tanto las que estuvieron en la oscuridad como las que
fueron irradiadas por un bombillo, colquelas en un beaker con alcohol caliente sobre
una plancha de calentamiento. Lave nuevamente con alcohol y saque las hojas. Coloque
las hojas en una cpsula de Petri con yodo y observe los cambios.
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 55
PRCTICA7 La fotosntesis
Autoevaluacin
Bibliografa
Plummer DT. Introduccin a la bioqumica prctica. Bogot: McGraw Hill Interamericana S.A.; 1981.
Chataing B. Introduccin a la bioqumica celular. Vol. II. Mrida: Consejo de Publicaciones ULA;
1998.
Diehls-Jones SM. The chlorophylls. J. Chem. Educ. 1984; 61: 454-455.
Izco J. Botnica. 2 Ed. Espaa: Editorial Mc GrawHill; 2004.
Solomon EP, Berg LR, Martn DW. Biologa. Mxico: McGraw-Hill Internacional Editores; 2001.
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Fermentacin y respiracin prctica
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 57
PRCTICA8 Fermentacin y respiracin
B) La fermentacin y la respiracin
58 M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A
8 Bernardo Chataing Elsa Nieves
As, la levadura fermenta una hexosa, como la glucosa o fructosa, dando ori-
gen a dos molculas de etanol y dos molculas de CO2 (fermentacin alcohlica); el
msculo en presencia de bajas concentraciones de oxgeno puede transformar el piru-
vato en lactato (fermentacin lctica).
La bacteria Clostridium acetobutylicum produce butanol y acetona. Una lista
de productos industriales obtenidos de microorganismos y de clulas cultivadas de ma-
mferos es mostrada en la Tabla 3.
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 59
PRCTICA8 Fermentacin y respiracin
* En bacteria metanognica
Adaptado de Smith C, Wood EJ. Energy in biological systems Hong Kong: Chapman & Hall; 1991.
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8 Bernardo Chataing Elsa Nieves
C) Indicadores cido-base
si [In-]
= 0,1 Solucin roja
[HIn]
[In-]
= 1,0 Solucin anaranjada
[HIn]
[In-]
= 10 Solucin amarilla
[HIn]
Objetivos
Conocimientos necesarios
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PRCTICA8 Fermentacin y respiracin
Experimental
Ejercicio:
Escriba la ecuacin qumica mediante la cual se puede determinar
CO2 con el rojo de fenol.
Procedimiento
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8 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Plumier DT. Introduccin a la bioqumica prctica. 2 ed. Colombia: Mc Graw Hill Interamericana S. A.; 1981).
APROPIADAS EN EL LABORATORIO).
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 63
PRCTICA8 Fermentacin y respiracin
Determinacin de acetaldehdo
En dos tubos marcados C y D, pipetee 5 ml de la solucin de glucosa (5 g/ 1
ml.), agregue a ambos tubos 5 ml de la suspensin de levadura en agua (20 g/100 ml de
Autoevaluacin
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Bibliografa
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Divisin celular y regulacin trmica prctica
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Ejercicios y autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
A) La reproduccin celular
La idea de que los hijos se parecen a los padres es tan antigua como la propia
humanidad. La herencia biolgica ha sido quizs el factor ms relevante en moldear la
evolucin social de la humanidad. Qu entendemos realmente por herencia? Cul es
la fuente de este gran poder? Qu es lo que se transfiere de generacin en generacin?
La manera como la vida se perpeta de generacin en generacin, y cmo el macho y la
hembra contribuyen en las caractersticas de su descendencia, son preguntas fundamen-
tales de las ciencias biolgicas. Nuestra historia empieza con algo, al parecer simple, la
reproduccin de una clula. Las clulas se reproducen mediante un proceso de dupli-
cacin de sus contenidos, conocido como divisin celular. Este ciclo de divisin celu-
lar es fundamental para que todos los seres vivos sean reproducibles. En organismos
unicelulares, tales como bacterias, levaduras, protozoarios, cada divisin celular produ-
ce un organismo adicional. En especies pluricelulares, son necesarios diversos ciclos de
divisin celular. La divisin celular es necesaria, inclusive en el individuo adulto para
sustituir las clulas que son daadas.
La duracin del ciclo celular vara grandemente de un tipo de clula a otra.
As, los embriones de la mosca tienen los ciclos celulares ms cortos, cada uno de 8 mi-
nutos, mientras que la clula heptica de mamferos puede tener ciclos celulares supe-
riores a los 12 meses. El ciclo celular es tradicionalmente dividido en fases distintas
(profase, metafase, anafase, telofase). Los procesos fcilmente visibles de divisin nucle-
ar (mitosis), que son llamados de fase M, tpicamente ocupan una pequea fraccin del
ciclo celular. La otra parte ms larga del ciclo es llamada de interfase. Una clula crece
tomando materiales de su ambiente y utiliza estos materiales en la sntesis de nuevas
molculas estructurales y funcionales. Las nuevas clulas hijas son estructuralmente y
funcionalmente casi idnticas entre s como lo son de su clula progenitora.
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PRCTICA9 Divisin celular y regulacin trmica
Ciclo celular
Mitosis Meiosis
Meiosis
Cromosoma
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9 Bernardo Chataing Elsa Nieves
B) La regulacin trmica
Objetivos
duccin sexual.
Explicar el mecanismo de termorregulacin del cuerpo humano.
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 69
PRCTICA9 Divisin celular y regulacin trmica
Conocimientos necesarios
Experimental
A) La divisin celular
Material:
Levadura en polvo
Glucosa o melaza
Fiolas de 300 ml
H2O tibia
Procedimiento:
1. Prepare dos fiolas. Disuelva en cada una 1 gr. de melaza en 100 ml. de agua
tibia. Aada 1 gr. de la levadura en polvo en cada una, agite y tape el recipiente.
2. Coloque un cultivo a 37 oC por 48 horas, y el otro cultivo durante 1 hora de
incubacin.
3. Al cabo de ese tiempo saque una pequea muestra (gota) del cultivo y col-
quela sobre una lmina portaobjetos, extienda bien el lquido, de manera que forme una
pelcula fina.
4. Coloque encima un cubre objeto y observe al microscopio con bajo y media-
no aumento.
5. Repita la operacin con el otro cultivo, observe, compare y discuta.
Observacin:
Ver unas clulas, que son levaduras, muchas de las cuales presentan una es-
pecie de gemas que salen de ellas y que crecern mientras dura su observacin. Las
levaduras son hongos que estn formados por una sola clula, cuando encuentran sufi-
ciente alimento crecen, entonces nuevas levaduras se formarn brotando como unas
gemas de las clulas ya desarrolladas, permaneciendo unidas en muchos casos a las
clulas madres (gemacin).
B) Fases de la mitosis
Material:
Bulbos de cebollas, de ajo, semillas con raicillas recin formadas (material
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9 Bernardo Chataing Elsa Nieves
ro frrico al 29% por cada 100 ml de solucin al momento de utilizar (hervir 0,5 g de
Carmn en 100 ml de 45% cido actico durante 3 minutos, deje enfriar y filtre. Para te-
ir cromosomas se diluye una parte de la solucin con 2 partes de cido actico al 45%
y se aaden 2 gotas de cloruro frrico al 29%).
Procedimiento:
1. Con un bistur haga cortes transversales finos de las races seleccionadas a
diferentes tiempos (48, 4 y 1 hora). Cuide que el corte quede lo ms fino posible.
2. Coloque el corte en el portaobjeto y aada una gota de solucin de cido ac-
tico al 45% por 10 min (permite fijar la muestra: la estructura celular con todo sus ele-
mentos dispuestos en la forma que estaban en condiciones naturales).
3. Retire el lquido y aada una gota de HCl 1 N por 1 1/2 min (ayuda a disol-
ver sustancias ppticas de la laminilla media). Maceracin.
4. Retire el lquido y lvelas con una gota de agua destilada.
5. Coloca una gota de Carnoy por 3 min.
6. Retire el lquido y aada una gota de colorante acetocarmn por 5 min.
7. Retire el lquido y coloque un cubre objeto, presione con suavidad y seque
el exceso de colorante con papel absorbente.
8. Presione nuevamente con cuidado.
9. Observe la preparaciones al microscopio, primero con pequeo aumento y
luego con aumento mediano. Observe los diferentes aspectos de las clulas (ncleo con
aspecto granular o con los cromosomas teidos, que pueden verse con nitidez) y trate
de identificar las diferentes fases de la mitosis.
10. Para preservar las preparaciones, seque los bordes del cubreobjeto y con un
pincel fino coloque parafina, esperma o esmalte de uas. Tambin puede sellar con otro
sellador disponible.
Material:
Hojas de helechos, flores de jardn.
Procedimiento:
Hojas de helechos:
1. Observe las hojas de los helechos por su parte interior, envs, observe los pe-
queos abultamiento de color oscuro llamadas soros.
2. Obsrvela bajo la lupa.
3. Con ayuda de bistur corte la estructura y observe las esporas producida por
la planta de helecho.
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 71
PRCTICA9 Divisin celular y regulacin trmica
Flores de jardn:
1. Observe las partes de la flor y estudie con ayuda del libro los rganos que se
encuentran.
2. Identifique los estambres que en su extremo llevan una parte engrosada, de-
nominada antena.
3. Corte el extremo de los estambres que contienen la antena, realice otro corte
a nivel de la antena, en cuyo interior existen unos granulillos que constituyen el polen.
4. Coloque los granos de polen en un porta objeto con una gota de glicerina.
Observe los granos de polen de la flor que est estudiando.
5. Discuta la importancia de la meiosis en el proceso de formacin del polen.
D) Regulacin trmica
1. Termostato natural
Material:
Termmetro clnico, alcohol y algodn
Agua fra, chocolate.
Procedimiento:
1. Un estudiante voluntario debe permanecer en reposo, sentado. Un compae-
ro le tomar la temperatura del cuerpo con un termmetro oral y colocar un termme-
tro en cada mano. A los 3 min, registre la temperatura.
2. El compaero empapa un trozo de algodn en agua helada y frota la parte in-
terna de la mueca izquierda. El estudiante voluntario describe lo que siente, mientras
el agua se va evaporando.
3. El compaero registra la temperatura ambiente, la del cuerpo y las manos.
4. Inmediatamente despus, empapa otro algodn con alcohol y moja la parte
interna de la mueca derecha.
5. Toma la temperatura ambiente, la del cuerpo y manos.
6. Observa y vers que el alcohol se ha secado mucho ms rpido que el agua.
Tu mueca izquierda se enfra mientras el agua se evapora, pero sentirs mas fra la mu-
eca derecha.
7. Explique lo sucedido.
8. Tome agua bien fra, describa lo que siente e inmediatamente el compaero
registrar la temperatura ambiente as como tambin la temperatura de su cuerpo.
9. Compare y discuta los resultados con sus compaeros y saque conclusiones
pertinentes.
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9 Bernardo Chataing Elsa Nieves
E) Control de temperatura
Material:
Dependiendo de la disponibilidad del laboratorio y tiempo, realice la siguien-
te experiencia,
Sapo, tortuga, hmster, ratn.
Hielo
Agua tibia 45 oC
Procedimiento:
1. Prepare un dispositivo con dos vasos de precipitado, uno dentro del otro,
dependiendo del tamao y tipo de animal a utilizar.
2. Dentro del vaso mayor coloque hielo.
3. Mida la temperatura del animal.
4. Coloque el animal dentro del vaso menor y djelo por 10 min.
5. Retire el animal e inmediatamente mida la temperatura.
6. Repita el procedimiento sustituyendo el hielo por agua caliente.
7. Discuta sus resultados.
Autoevaluacin
Bibliografa
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Ecosistemas prctica
Introduccin
Objetivos
Conocimientos necesarios
Experimental
Autoevaluacin
Bibliografa
Introduccin
Objetivos
Estudiar algunas relaciones que se producen entre los organismos y entre stos
y el ambiente.
Determinar el flujo de energa como factor importante en la organizacin de los
ecosistemas.
Observar los diferentes niveles trficos.
Conocimientos necesarios
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P R C T I C A 10 Ecosistemas
Experimental
B) Pequeos ecosistemas:
1. Trate de establecer pequeos ecosistemas:
Acuticos, tronco de rbol podrido, debajo de piedra grande, etc.
2. Determine las relaciones que pueden establecerse entre los organismos
y entre stos y los factores abiticos:
76 M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A
10 Bernardo Chataing Elsa Nieves
Vertebrados:
Peces
Anfibios
Reptiles
Aves
Mamferos
c. Relaciones
La vegetacin es uniforme o variada
La fauna es muy variada, dnde se refugian, qu comen, horas en las cua-
les permanecen activos
Planta herbcea.
Grillo.
Pjaro.
D) Impacto ecolgico
a. Formule una hiptesis que explique lo que sucedera en la comunidad estu-
diada si cambiara un determinado factor ambiental abitico: luz, temperatura, hume-
dad, viento.
b. Imagine un medio ambiente diferente al que estudi: Lagunillas, El Valle, y
formule la hiptesis de lo que le sucedera a alguno de los integrantes de la comunidad
estudiada.
c. Discuta un proyecto de posible explotacin racional de los recursos.
d. La vegetacin contribuye a evitar la erosin.
Autoevaluacin
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P R C T I C A 10 Ecosistemas
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Bernardo Chataing Elsa Nieves
Cristalera: Equipos:
30 pipetas PHmetro
10 cilindros graduados 100ml Balanza
10 vasos precipitados 500ml Agitadores magnticos
10 vasos precipitados 100 ml Plato de calentamiento y agitacin
30 erlenmeyer 250 ml Destilador
10 frascos 500 ml Autoclave
5 botellas mbar 250 ml Campana extractora
Material: Reactivos:
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Materiales necesarios para las prcticas
Prctica 4 La clula
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Bernardo Chataing Elsa Nieves
Prctica 7 La fotosntesis
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Materiales necesarios para las prcticas
Reactivos:
Levaduras HCl
Glucosa Sulfato de amonio
Rojo de fenol Nitroprusiato de sodio
Na2HPO4 2,4 dinitrofenil hidrazina
NaOH Sulfito de sodio
KH2PO4 Piperidina
Prctica 10 Ecosistemas
Actividad:
Visita a un bosque nublado o cualquier
otro lugar con un ecosistema caractersti-
co, dependiendo del sitio, se puede reque-
rir transporte.
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Bernardo Chataing Elsa Nieves
Glosario
cido. Sustancia capaz de ceder protones a una sustancia aceptora de los mismos.
Almidn. Polmero de glucosa con enlaces (1 4 ) ramificaciones (1 6)
que es la principal reserva de carbohidratos en las plantas.
Aminocido. Unidad monomrica de las protenas que consta de un tomo de car-
bono unido a un grupo -carboxlico, a un grupo -amino, a un tomo de hidrge-
no, y a una cadena lateral especfica que determina sus caractersticas.
Anafase. Fase de la mitosis durante la cual las cromtidas hermanas se separan y mi-
gran a polos opuestos del huso.
Aparato de Golgi. Organela citoplasmtico implicado en el procesamiento y distri-
bucin de protenas y lpidos.
Auttrofo. Organismo que sintetiza compuestos orgnicos complejos a partir de ma-
terias primas inorgnicas simples. Tambin llamado productor o productor primario.
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Glosario
Fermentacin. Proceso anaerobio por medio de cual se produce ATP en una serie de
reacciones redox en las que compuestos orgnicos actan como donadores y acep-
tores de electrones.
Flagelo. Estructura filamentosa que se encuentra en los eucariotas y se utiliza en la
locomocin y la alimentacin, tiene una estructura interna de 9 pares de microtbu-
los que rodean a dos microtbulos centrales.
Fotosntesis. Proceso mediante el cual las clulas aprovechan la energa de la luz so-
lar y sintetizan glucosa a partir de CO2 y agua.
Hbitat. Lugar en el que pueden encontrase habitualmente los individuos de una es-
pecie determinada.
Hetertrofo. Organismo que debe alimentarse de sustancias orgnicas sintetizadas
por otros organismos para obtener energa.
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Bernardo Chataing Elsa Nieves
Neurona. Clula nerviosa, clula conductora del sistema nervioso que tpicamente
consta de cuerpo celular, dendritas y un axn.
Nivel trfico. Cada organismo en un ecosistema se asigna a un nivel trfico con ba-
se en su fuente primaria de nutricin.
Ncleo. Es un organelo de las clulas eucariotas que contiene el material gentico.
Oxidacin. Proceso mediante el cual una sustancia cede electrones a otra sustancia
aceptora de los mismos.
Pared celular. Estructura producida por la clula que rodea la membrana celular de
las plantas, algas, hongos y procariotas.
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Glosario
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Bernardo Chataing Elsa Nieves
Temperatura. Energa cintica promedio de las partculas en una muestra de una sustan-
cia. El concepto de temperatura se introdujo inicialmente como un resultado de la obser-
vacin de que todos los cuerpos tienden gradualmente a un estado de equilibrio trmico.
Teora. Principio ampliamente aceptado y apoyado por un gran cuerpo de observaciones
y experimentos. Una buena teora relaciona hechos que parecen no estar relacionados, pre-
dice nuevos hechos y sugiere nuevas relaciones.
Termodinmica. Estudio de las transformaciones de la energa.
Trabajo. Es una manera de transferir energa. El trabajo aparece nicamente durante un
cambio de estado y se manifiesta por un efecto en el ambiente (levantar o bajar un peso).
El trabajo implica un movimiento organizado
Vacuola. Organela limitada por una membrana llena de lquido, situada en el citoplasma
de una clula.
Virus. Partcula compuesta de cido nucleico y cubierta proteica, capaz de infectar clulas
vivas.
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Bibliografa general
Ackoff R. con la colaboracin de Gupta SK y Sayer Minas J. Scientific method; optimizing applied
research decisions. New York: John Wiley & Sons; 1962.
Acua RA, Boscn JP, Franco, JR. Tcnicas de documentacin e investigacin. 6 ed. Caracas: Uni-
versidad Nacional Abierta; 1984.
Alberts B, Bray D, Lewis J, Raff M, Roberts K, Watson JD. Molecular Biology of the cell. 3 ed. New
York: Garland Publishing Inc.;1994.
Audesirk T. Biologa 1. 4 ed. Mxico: Prentice Hall; 1997.
Baker JJ, Allen GE. Biologa e investigacin cientfica. Mxico: Fondo Educativo Interamericano S.A.;
1970.
Bergmeyer HU. Methods of enzymatic Analysis. Volumen 2. 2 ed. New York: Academic Press; 1996.
Bertrand, R. El conocimiento humano. Mxico: Editorial Orbis; 1983.
Bollag DM, Edelstein SJ. Protein Methods. New York: Wiley-Liss; 1991.
Chataing B. Introduccin a la bioqumica celular. Vol. I. Mrida: Consejo de Publicaciones ULA;
1995.
Chataing B. Introduccin a la bioqumica celular. VOL. II. Mrida: Consejo de Publicaciones, ULA;
1998.
Coopers GM. La clula. Espaa: Marban Libros; 2004.
Curtis H, Barnes NS. Biologa. 6 ed. Espaa: Editorial Mdica Panamericana; 2001.
Curtis H, Barnes NS. Invitacin a la biologa. 5 ed. Espaa: Editorial Mdica Panamericana; 1999.
Diehls-Jones SM. The chlorophylls. J. Chem. Educ. 1984; 61:454-455
Dieter H, Hergt N. Atlas de ecologa. Espaa: Alianza Editorial; 2000.
Donald V. Bioqumica. Manual de soluciones. Espaa: Ediciones Omega; 1993.
Gardner EJ, Simmons MJ, Snustad DP. Principios de gentica. 4 Elements of General and Biological
Chemistry.
Holum JR. Elements of General and Biological Chemistry. 4 ed. New York: John Wiley & Sons; 1975.
Izco J. Botnica. 2 ed. Espaa: Editorial Mc GrawHill; 2004
Karp G. Biologa celular. Espaa: Editorial Mc GrawHill;1999.
Kimball JW. Biologa. Mxico: Adisson-Wesley Iberoamericana; 1986.
Lodish H, Berk A, Matsudaria P, Kaiser C, Krieger M, Scott M, Zipurky L, Darnell J. 5 ed. Biologa
molecular de la clula. Espaa: Editorial Panamericana; 2006.
Lpez Cano JL. Mtodo e hiptesis cientficos. 4 ed. Mxico: Edit.Trillas; 1978.
Mahan B. University chemistry. New York: Mc Graw Hill; 1987.
Morris JG. Fisicoqumica para bilogos. 2 ed. Mxico: Editorial Revert; 1974.
Nash LK. Stoichiometry. Reading (NY): Addison-Wesley Pub. Company; 1972.
Nelson DL, Cox MM. Lehninger AL. Principios de bioqumica. Espaa: Ediciones Omega; 2001.
Ouellette RJ. Introductory Chemistry. 2 ed. New York: Harper & Row Pub.; 1975.
Pavia DL, Lampman GM, Kriz Jr GS. Introduction to Organic laboratory techniques. A contemporary
approach. Philadelphia: W.B. Saunders Company; 1976.
Philip N. Fsica biolgica, energa, informacin y vida. Espaa: Editorial Revert; 2005.
88 M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A
Plummer DT. Introduccin a la bioqumica prctica. 2 ed. Bogot: Mc Graw Hill Interamericana S.
A.; 1981.
Polit DF, Hungler BP. Investigacin cientfica. En: Ciencias de la salud. Mxico: McGraw-Hill Inter-
americana; 1997.
Resh HM. Cultivos hidropnicos. Madrid (Espaa): Edit. Mundi-Prensa; 1982.
Riveros HG. El mtodo cientfico aplicado a las ciencias experimentales. Mxico: Edit. Trillas; 1982.
Roche M. Nueva tendencia de la investigacin cientfica venezolana. En: Pfaur J, Fuenmayor F, edi-
tores. Deambular por la ciencia. Mrida: Publicaciones Facultad de Ciencias. Universidad de Los
Andes; 1999: p. 137-138.
Sabino CA. Los caminos de la ciencia. Bogot: Panamericana Editorial Ltda.; 1996.
Segel IH. Biochemical calculations. New York: John, Wiley & Sons; 1976.
Smith CA, Wood EJ .Energy in biological systems. New York: Chapman & Hall; 1991.
Smith CA, Wood EJ. Molculas biolgicas. Mxico: Addison Wesley Longman; 1998.
Solomon EP, Berg LR, Martn DW, Villee C. Biologa De Ville. 4 ed. Mxico: Mc Graw-Hill Interame-
ricana; 1998.
Solomon EP, Berg LR, Martn DW. Biologa. Mxico: McGraw-Hill Internacional Editores; 2001.
Soto TS, Durn FT. Parasitologa: manual de trabajos prcticos. Venezuela: Editorial de la Universi-
dad del Zulia; 1996
Tamayo-Tamayo M. El proceso de la investigacin cientfica. Mxico: Editorial Limusa; 1999.
The Open University (UK). La ciencia: sus orgenes, escalas y limitaciones. Mxico: Mc Graw Hill;
1975.
En Internet
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 89
ndice
7 Prefacio
9 Objetivo
9 Instrucciones generales
1 prctica
11 Introduccin al mtodo cientfico
2 prctica
17 Macromolculas y preparacin de soluciones
3 prctica
23 El microscopio y sus caractersticas
4 prctica
31 La clula
5 prctica
37 Las reacciones qumicas en biologa y los
procesos de transferencia de energa
6 prctica
43 Las enzimas: propiedades de -amilasa
7 prctica
51 La fotosntesis
8 prctica
57 Fermentacin y respiracin
9 prctica
67 Divisin celular y regulacin trmica
10 prctica
75 Ecosistemas
M A N U A L D E L A B O R AT O R I O D E B I O L O G A 91
La presente edicin de 500 ejemplares
se termin de imprimir
el mes de abril de 2009
en el Centro Editorial Litorama C.A
Mrida-Venezuela
Informacin tcnica:
Programas: QuarkXpress Passport 7.0 y Adobe Ilustrator CS3
Impresin: papel Saima antique y cartulina Sulfato
Fuentes tipogrficas: Melior, Arial Rounded Bold y Helvticas