PROCEDIMIENTO DE ASO

CONTENIDO.

INTRODUCCIN ........................................................................................................................ 2
APLICACIN PROPUESTA ................................................................................................. 2
MATERIAL NECESARIO ...................................................................................................... 2
FUNDAMENTO DEL MTODO ........................................................................................... 2
CONTENIDO ........................................................................................................................... 2
CALIBRACIN ........................................................................................................................ 2
PREPARACIN Y ESTABILIDAD ....................................................................................... 3
MUESTRA ............................................................................................................................... 4
TCNICA ................................................................................................................................. 4
INTERPRETACIN ............................................................................................................... 5
CLCULOS ............................................................................................................................. 5
CONTROL DE CALIDAD ...................................................................................................... 5
VALORES DE REFERENCIA .............................................................................................. 5
CARACTERSTICAS DEL MTODO .................................................................................. 6
LIMITACIONES DEL MTODO ........................................................................................... 6
RECOMENDACIONES.......................................................................................................... 6
BIBLIOGRAFA ....................................................................................................................... 7

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INTRODUCCIN
La estreptolisina O es un factor hemoltico producido por la mayora de las cepas
de los estreptococos beta-hemolticos del grupo A. La antiestreptolisina O (ASO)
es un anticuerpo neutralizante especfico producido despus de la infeccin con
estos microorganismos. La ASO aparece en el suero de una semana a un mes
despus de una infeccin por estreptococos. El ensayo de ASO es til para el
diagnstico de fiebre reumtica y gromerulonefritis.

APLICACIN PROPUESTA
Se emplea para la determinacin de ASO en suero humano.

MATERIAL NECESARIO
Micropipetas.

FUNDAMENTO DEL MTODO

El mtodo se fundamenta en una reaccin de aglutinacin de una suspensin de
partculas de ltex de poliestireno sensibilizadas con estreptolisina O
estabilizada.

La aglutinacin es visible en una concentracin de ASO en suero igual o superior

a 200 UI/mL.

CONTENIDO

CALIBRACIN
La sensibilidad del reactivo de ltex est estandarizada frente al 1er Patrn
Internacional de ASO de la OMS [Anti-Streptolysin (O, Human ref: 97/662).

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PREPARACIN Y ESTABILIDAD
1. El R1 Ltex es una suspensin de partculas de ltex, debe
homogeneizarse, con una suave agitacin, antes de ser utilizado.
2. Los goteadores dispensan una gota de volumen aproximado de 50 L,
que es el idneo para una buena sensibilidad.
3. Los reactivos se deben conservar de 2 a 8 C, no deben congelarse. En
estas condiciones los componentes mantendrn su funcionalidad hasta la
fecha de vencimiento sealada en la etiqueta.

PROCEDIMIENTO IMAGEN
1. Se realiz la preparacin de
los materiales que se
requirieron para realizar la
practica

2. Iniciamos tomando una

muestra de sangre para la
muestra de tres personas

3. Colocamos la muestra en la
centrifuga hasta obtener el
suero

4. Se toma una gota de cada

suero y se coloca en la
lmina de muestra

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5. Colocamos en cada gota el

reactivo de arginina

6. Se realiza la difusin
durante 8 minutos

7. Observamos el resultado de
la muestra

MUESTRA
Utilizar suero. Los sueros, conservados de 2 a 8 C, mantienen su actividad
durante 7 das. Para perodos de tiempo ms largos se recomienda congelarlos
a 20 C. No utilizar sueros hemolizados.

No utilizar sueros altamente lipmicos pues podran dar una aglutinacin no

especfica.

TCNICA
Mtodo cualitativo

1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La

sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas.

2. Depositar 50 L de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los

controles positivo y negativo, sobre crculos distintos de una porta.

3. Homogenizar suavemente el R1 Ltex antes de usar. Depositar una gota (50

L) junto a cada una de las gotas anteriores.

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4.- Mezclar las dos gotas con un palillo y extenderlas por todo el crculo. Emplear
palillos distintos para cada muestra y usarlos por ambos extremos.

5.-Colocar el porta en el agitador rotatorio (80-100 RPM) y observar la aparicin

o ausencia de aglutinacin exactamente al cabo de 2 minutos. El exceso del
tiempo de reaccin podra dar lugar a resultados falsos positivos. En caso de no
tener el agitador rotatorio la agitacin se puede hacer manual en forma rotatoria
y lentamente.

INTERPRETACIN
Examinar macroscpicamente la presencia o ausencia de aglutinacin
inmediatamente despus de retirar el porta. La presencia de aglutinacin indica
un nivel de ASO igual o superior a 200 UI/ mL en la muestra.

-La ausencia de aglutinacin indica un nivel de ASO inferior a 200 UI/mL en la

muestra. Mtodo semicuantitativo

1. Realizar diluciones dobles de la muestra en solucin salina 9g/L.

2. Proceder para cada dilucin como en la prueba cualitativa.

CLCULOS
La concentracin aproximada de ASO en la muestra del paciente se obtiene
aplicando la siguiente frmula:

200 x Ttulo de ASO = UI/mL

En el mtodo semicuantitativo se define el ttulo como la dilucin mayor que da

resultado positivo.

CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la
funcionalidad del reactivo de ltex, as como modelo de comparacin para la
interpretacin de los resultados.

VALORES DE REFERENCIA
Hasta 200 UI/mL

Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de

referencia.

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CARACTERSTICAS DEL MTODO

1. Lmite de deteccin: 200 UI/mL.
2. Valor de prozona: negativo hasta 1500 UI/mL.
3. Sensibilidad 98 %.
4. Especificidad 97 %.
5. No interfieren:

Bilirrubina hasta 342 mol/L.

Hemoglobina desde 0,63 hasta 10 g/L.

Lpidos desde 0,63 hasta 10 g/L.

Factor reumatoide desde 37,5 hasta 300 UI/mL.

LIMITACIONES DEL MTODO

1. La artritis reumatoide, escarlatina, amigdalitis, infecciones estreptoccicas
diversas y algunos portadores sanos pueden dar resultados falsamente
positivos.
2. Infecciones recientes y nios con edades comprendidas entre 6 meses y
dos aos, pueden dar lugar a resultados falsamente negativos.
3. Una determinacin aislada no da informacin suficiente acerca del estado
actual de la enfermedad.
4. En casos dudosos y con el propsito de seguir la enfermedad, se
recomienda repetir la prueba a intervalos quincenales durante 4 6
semanas.
5. El diagnstico clnico no debe realizarse nicamente con los resultados
de un nico ensayo, sino que debe considerarse al mismo tiempo los
datos clnicos del, paciente.

RECOMENDACIONES
1. El control positivo es un suero humano. Aunque no se ha detectado la
presencia de antgeno HBs, VHC, ni anticuerpos anti-HIV, deben ser
manipulados con la misma precaucin que un suero muestra, como
potencialmente infeccioso.
2. Contiene pequeas cantidades de azida sdica. Evtese el contacto con
la piel daada y las mucosas.
3. No congelar.

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BIBLIOGRAFA
1. Haffejee. Quarterly Journal of Medicine 1992. New series 84; 305: 641-658.

2. Ahmed Samir et al. Pediatric Annals 1992; 21: 835-842.

3. Spaun J et al. Bull Wld Hlth Org 1961; 24: 271-279.

4. The association of Clinical Pathologists 1961. Broadsheet 34.

5. Picard B et al. La Presse Medicale 1983; 23: 2-6.

6. Klein GC. Applied Microbiology 1971; 21: 999-1001.

7. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press.

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