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Biomembranas

Biomembranas - Complejos supramoleculares de lípidos anfipáticos y proteínas - La estructura básica es una bicapa

- Complejos supramoleculares de lípidos anfipáticos y proteínas

- La estructura básica es una bicapa lipídica con proteínas

- Constituyen el límite exterior de las células y delimitan los compartimentos

intracelulares (organelas)

- Aunque parece un sistema muy ordenado, es fundamentalmente estabilizada por el componente entrópico (interacciones hidrofóbicas)

Principales funciones de las membranas

Principales funciones de las membranas 1. Límite 2. Transporte controlado de sustanci as 3. Recepción y

1. Límite

2. Transporte controlado de sustancias

3. Recepción y transmisión de señales

4. Catálisis 5. Contacto entre células 6. Anclaje del citoesqueleto

Composición lipídica de membranas de células hepáticas de rata (% en peso)

Membrana

Col

PC

PE

PS

PI

PG

CL

SM

Plasmática

30

18

11

9

4

0

0

14

Golgi

8

40

15

4

6

0

0

10

RE liso

10

50

21

0

7

0

2

12

RE rugoso

6

55

16

3

8

0

0

3

Nuclear

10

55

20

3

7

0

0

3

Lisosomal

14

25

13

0

7

0

5

24

Mit. interna

3

45

24

1

6

2

18

3

Mit. externa

5

45

23

2

13

3

4

5

Col = colesterol PS = fosfatidilserinas CL = cardiolipinas

PC = fosfatidilcolinas PI = fosfatidilinositoles SM = esfingomielinas

PE = fosfatidiletanolaminas PG = fosfatidilgliceroles

La interacción hidrofóbica impulsa la formación de agregados lipídicos

La interacción hidrofóbica impulsa la formación de agregados lipídicos
La interacción hidrofóbica impulsa la formación de agregados lipídicos
La interacción hidrofóbica impulsa la formación de agregados lipídicos

Distintos tipos de agregados lipídicos

La geometría molecular determina el tipo de agregado

Distintos tipos de agregados lipídicos La geometría molecular determina el tipo de agregado
Distintos tipos de agregados lipídicos La geometría molecular determina el tipo de agregado

Bicapa lipídica en burbujas de detergentes

Bicapa lipídica en burbujas de detergentes
Bicapa lipídica en burbujas de detergentes

FASES LIQUIDO-CRISTALINAS

FASES LIQUIDO-CRISTALINAS Compuestos con grupos polares voluminosos en rel ación a la región hidrofóbica prefieren la

Compuestos con grupos polares voluminosos en relación a la región hidrofóbica prefieren la fase H-I. (ácidos grasos y sus sales, lisofosfolípidos, gangliósidos, otros) Compuestos con grupos polares pequeños en relación a la región hidrofóbica prefieren la fase H-II. (fosfatidiletanolaminas insaturadas, diacilgliceroles, otros) Compuestos con tamaños comparables entre las regiones polares e hidrofóbicas prefieren la fase lamelar. (fosfatidilcolinas, esfingomielinas)

Al aumentar la temperatura se favorece la separación entre las cadenas hidrocarbonadas y se inducen transiciones: H-I Lamelar H-II.

Al aumentar el nivel de hidratación se favorece la separación entre los grupos polares y se inducen transiciones: H-II Lamelar H-I.

La composición y asimetría de las membranas determina su curvatura

La composición y asimetría de las membranas determina su curvatura

Distribución de fosfolípidos entre la cara externa e interna de la membrana de eritrocitos

Distribución de fosfolípidos entre la cara externa e interna de la membrana de eritrocitos

Transición de fase gel líquido-cristalino

Transición de fase gel líquido-cristalino Al aumentar la temperatura por encima de Tt ocurre: a) Aumento

Al aumentar la temperatura por encima de Tt ocurre:

a) Aumento del area ocupada por molécula de lípido (0,5 a 0,7 nm 2 ).

b) Disminución del espesor de la bicapa (5 a 4,3 nm).

c) Aumento de movilidad y disminución del ordenamiento

MOVILIDAD DE LOS LÍPIDOS EN LA BICAPA

MOVILIDAD DE LOS LÍPIDOS EN LA BICAPA Todos los modos de movilidad aumentan por encima de

Todos los modos de movilidad aumentan por encima de Tt. La difusión lateral aumenta unas 100 veces (de 10 -10 a 10 -8 cm 2 /seg).

MOVILIDAD SEGMENTAL DE LAS CADENAS HIDROCARBONADAS

En la fase líquido- cristalina, el interior hidrofóbico de la bica- pa se encuentra en un estado similar al líqui- do con alta movilidad segmental (y bajo or- denamiento) que au- menta hacia el centro de la bicapa. Se pro- ducen retorcimientos (kinks) con promedio de vida de unos 10 -9 seg.

menta hacia el centro de la bicapa. Se pro- ducen retorcimientos (kinks) con promedio de vida

En el rango de la transición de fase hay co- existencia de dominios sólidos y fluídos separados lateralmente.

En la interfase entre dominios se producen defectos de empa- quetamiento que aumentan la permeabilidad de la bicapa a iones y compuestos polares

En sistemas mixtos formados por más de un fosfolípido, la separación lateral de fase puede ocurrir en un rango muy amplio de temperatura.

Inmediatamente por debajo de Tt Fase contínua Inmediatamente por encima de Tt Fase contínua
Inmediatamente por debajo de Tt
Fase contínua
Inmediatamente por encima de Tt
Fase contínua

Influencia del grupo polar y de las cadenas hidrocarbonadas sobre la temperatura de transición de fase gel líquido-cristalino

Fosfolípido

Tt ( o C)

Fosfolípido

Tt ( o C)

DMPC (1,2 di 14:0)

24

DMPE (1,2 di 14:0)

51

DPPC (1,2 di 16:0)

42

DPPE (1,2 di 16:0)

63

DSPC (1,2 di 18:0)

55

DSPE (1,2 di 18:0)

82

DOPC (1,2 di 18:1, 9-cis)

-22

DOPE (1,2 di 18:1, 9-cis)

15

DEPC (1,2 di 18:1, 9-trans)

5

DEPE (1,2 di 18:1, 9-trans)

41

MPPC (1-14:0, 2-16:0)

35

DMPG (1,2 di 14:0)

23

PMPC (1-16:0, 2-14:0)

27

DPPG (1,2 di 16:0)

41

PSPC (1-16:0, 2-18:0)

47

DSPG (1,2 di 18:0)

54

SPPC (1-18:0, 2-16:0)

44

DPPA (1,2 di 16:0)

67

   

DOPA (1,2 di 18:1, 9-cis)

8

Influencia de la longitud de cadena: A > longitud aumenta la Tt. Influencia de las dobles ligaduras: La insaturación disminuye Tt por impedir que se adquiera la configuración “todos trans” que maximiza las interacciones de Van der Waals en el estado de gel. El máximo efecto es producido por un doble enlace “cis” cuando se encuentra en una posición intermedia en la cadena acílica (la movilidad segmental es relativamente restringida en la región del doble enlace pero es aumentada en las regiones alejadas de la misma). La presencia de más de un doble enlace en la misma cadena tiene un efecto cada vez menor sobre la Tt y la movilidad de los lípidos de la bicapa. Las posiciones sn-1 y sn-2 no son equivalentes. Los fosfolípidos de membranas naturales presentan en general un ácido saturado o monoinsaturado en sn-1 y una cadena mono- o poliinsaturada en sn-2. Influencia del tamaño del grupo polar: A > tamaño disminuye Tt por separar las cadenas hidrocarbonadas y desfavorecer las interacciones de Van der Waals entre ellas. Influencia de la carga del grupo polar: La repulsión de cargas favorece la separación y el aumento del area ocupada por molécula, y produce una disminución en Tt. Influencia del pH y fuerza iónica: Tienen poca influencia sobre bicapas de fosfolípidos zwiteriónicos (excepto pH extremos que afecten la ionización). En bicapas con fosfolípidos cargados negativamente, un aumento de pH favorece la ionización de grupo polar y la repulsión entre los mismos, aumentando el area molecular y disminuyendo Tt favoreciendo el estado fluído. Al aumentar la fuerza iónica se tiende a neutralizar la carga de superficie y eliminar la influencia de la carga. Influencia de cationes divalentes: Ca ++ y Mg ++ se unen estequiométricamente a 2 moléculas de fosfolípidos acídicos reduciendo su carga superficial y el area molecular favoreciendo el estado de gel. En bicapas mixtas, estos cationes conducen a la formación de clusters y a la separación lateral de los fosfolípidos acídicos.

INFLUENCIA DEL COLESTEROL SOBRE LA DINAMICA DE BICAPAS LIPIDICAS

DEL COLESTEROL SOBRE LA DINAMICA DE BICAPAS LIPIDICAS En bicapas en el estado líquido-cri stalino, el

En bicapas en el estado líquido-cristalino, el anillo esteroideo rígido interactúa con las cadenas acílicas inhibiendo la formación de “kinks”. Este efecto “condensante” reduce el area molecular de los fosfolípidos. La reducción de la movilidad segmental de las cadenas acílicas es máxima en la región de C7 al C9, pero es poco afectada (e incluso aumentada) en la región de los –CH 3 terminales. La formación de un puente de H con los carbonilos es esencial ya que un efecto mucho menor se observa sobre bicapas de análogos que carecen del grupo carbonilo (eter lípidos). Contrariamente al efecto “condensante” sobre el estado fluído, el colesterol presenta un efecto “fluidificante” sobre bicapas en el estado de gel, por impedir que las cadenas acilicas adopten la configuración “todos trans”. En concentraciones de 50% (en mol), el colesterol anula la transición de fase gel líquido-cristalino formando un nuevo estado denominado “líquido ordenado”.

Influencia de la composición lipídica sobre el espesor de la bicapa

Influencia de la composición lipídica sobre el espesor de la bicapa

El colesterol tiene una inter- acción preferencial con es- fingomielina y otros esfin- golípidos, lo que determina la separación lateral de do- minios ordenados (rafts) donde se concentran deter- minadas proteínas

lo que determina la separación lateral de do- minios ordenados (rafts) donde se concentran deter- minadas

Utilización de anticuerpos y toxina colérica fluorescentes para determinar colocalización de proteínas y gangliósidos en membranas

anticuerpos y toxi na colérica fluorescentes para determinar colocalización de proteí nas y gangliósidos en membranas