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LABORATORIO MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS 1

INTRODUCCION

Es necesario que antes de comenzar cualquier trabajo


experimental, el alumno conozca el material que se utiliza.
Cada uno de los materiales tiene una funcin y su uso debe
ser acorde con la tarea a realizar. La utilizacin inadecuada de
este material da lugar a errores en las experiencias realizadas
y aumenta el riesgo en el laboratorio

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RECONOCIMIENTO DE
MATERIALES DE LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA

I. OBJETIVO
Que el alumno aprenda a manejar el material utilizado en un laboratorio
de microbiologa y parasitologa.
Que el alumno conozca parte del material necesario en un laboratorio de
microbiologa y parasitologa.

II. FUNDAMENTO TERICO


Algunos de los instrumentos ms utilizados en los laboratorios, son elaborados de vidrio
resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dixido de silicio, bajo lcali,
xido brico y vestigios de otros xidos, lo que condiciona su escaso
coeficientede dilatacin, teniendo una gran aplicacin en la fabricacin de materiales de
laboratorio, uno de los ms conocidos es .el vidrio PYREX. As como los elaborados de
distintos metales pesados como platino,' mercurio, aluminio, cobre que les otorgan
caractersticas como buenos conductores del calor o porque al medio ambiente son muy
manejables sin alterar su composicin.
Instrumentos de vidrio como la probeta, la pipeta o el tubo de ensayo, y otros como
el mechero Bunsen, son de los ms comunes en la mayora de los laboratorioscientficos
.

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Materiales de laboratorio DESCRIPCION
Balones de
vidrio de Es un recipiente que se utiliza para contener
sustancias es una variacin del matraz baln
200 ,250 ml

Es de vidrio, tiene forma cnica con la boquilla


Matraces alargada, graduacin en mililitros, con una pequea
Erlenmeyer base plana y se utiliza para medir lquidos.

Tiene forma cilndrica y alargada con una pequea


Probeta base plana, es de vidrio y permite medir lquidos con
un ligero grado de inexactitud.

Se utiliza para medir pequeas cantidades de lquido.


Pipetas de 1 , 2,5 Tiene forma cilndrica y alargada con extremo en
y 10 ml forma de punta, es de vidrio y su graduacin es en
mililitros.

Tubos de ensayo Es de forma cilndrica alargada y delgada, uno de sus


extremos es redondeado, est hecho de vidrio y se
de 1 ,5 ,10 ml usa principalmente para transportar muestras
pequeas y para medios de cultivo slidos y
semislidos.

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MATERIALES DE LABORATORIO DESCRIPCION
Utensilio que sirve para colocar tubos de ensayo.
Gradilla Este utensilio facilita el manejo de los tubos de
ensayo

Tiene forma circular aplanada con una tapa que no


Placas Petri cierra hermticamente, est fabricada de vidrio y se
de 100 cm2 utiliza para medios de cultivo slidos

Se emplea para transportar o arrastrar o


Asas de trasvasar inculos (pequeo volumen que
col contiene microorganismos en suspensin) desde la
solucin de trabajo tambin llamada solucin
madre al medio de cultivo (slido o lquido) o de un
medio a otro (resiembra). Tambin sirve para la
realizacin de frotis.

Es de vidrio, tiene forma cilndrica, esta graduado en


Vasos mililitros y se utiliza principalmente para medir
precipitados lquidos, hacer mezclas y calentar los reactivos.

Un 'portaobjetos es una fina placa de plstico sobre


el cual se disponen objetos para su
Porta objetos examen microscpico. Sus dimensiones tpicas son
de 75 mm x 25 mm. El objeto a observar suele
disponerse sobre este artefacto para despus situarse
en el microscopio y ser observado. En ocasiones
puede cubrirse la muestra con un cubreobjetos, una
hoja de cristal.

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EQUIPOS DE LABORATORIO
LABORATORIO DESCRIPCION
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Es uno de los equipos ms importantes. Su funcin consiste en


Refrigerador mantener, en un ambiente controlado (espacio
refrigerado) diversos fluidos y sustancias, para que los mismos
se conserven en buenas condiciones (mientras ms baja sea
la temperatura, menor actividad qumica y biolgica

Bao mara Utilizado en el secado, condensacin, destilacin y facilita la


reaccin de los reactivos qumicos, mdicos y productos
biolgicos. Usado tambin para el calentamiento y dems
experimentos relacionados a la temperatura.
* Interior hecho de acero inoxidable resistente a la corrosin.
* Control de temperatura de suma precisin, visualizacin
digital y control automtica de temperatura

Cocina elctrica Aquel en que se produce calor por medio de la energa


elctrica. Puede ser de resistencia, de arco y de induccin.
Horno manual de barro refractario o metal, que toma gralte. el
nombre del combustible que se consume

La palabra incubadora proviene de la palabra


Incubadora latina incubare que significa empollar. Es un equipo
diseado para mantener una cmara a temperatura, atmsfera
y humedad controladas, con el fin de conservar organismos
vivos en un entorno que resulte adecuado para su crecimiento.
Entre las aplicaciones ms comunes, se citan las siguientes:
incubacin de cultivos bacteriolgicos, virales, micolgicos,
celulares, determinacin de la demanda biolgica de oxgeno
(DBO) y conservacin de biolgicos. Las incubadoras varan
en complejidad y diseo. Algunas nicamente controlan la
temperatura, mientras que otras, adems, controlan la
composicin atmosfrica.

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Estufa horno En el laboratorio se puede encontrar material muy diverso y es


estabilizadoras importante conocer su funcin puesto que de su correcto uso
depende la calidad de los resultados obtenidos.
1. Material para la medida de volmenes aproximados
2. Material volumtrico, para la medida de volmenes con gran
precisin.

EQUIPOS DE LABORATORIO DESCRIPCION


3. Otro material de uso frecuente

Cuenta colonias Est diseado para el conteo rpido y preciso de las colonias de
bacterias y moho en placas de cultivo. Permite el conteo de las
colonias de bacterias por cada pulsacin del contador quedando
grabado en la pantalla digital de tres (3) dgitos hasta un total de
999 colonias. Provisto de luz blanca que ilumina directamente
desde abajo, lo cual permite una ptima visualizacin de las
cajas Petri con cultivos o colonias de bacterias de colores
diferentes.

Pequea Es la centrfuga prctica para un nmero de muestras reducido:


centrifuga la EBA 200 de Hettich. La centrfuga pequea est equipada de
serie con un rotor angular de 8 posiciones para la recepcin de
tubos de ensayo con un volumen de hasta 15 ml.

Auto cable a 21C Es el equipo ms utilizado. Es un procedimiento de


esterilizacin mediante calor hmedo. Se realiza en autoclave
durante 15 20 minutos, segn el volumen, a 115C 121C,
segn la naturaleza del material que se desee esterilizar

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CABINA DE BIOSEGURIDAD

Para qu se usa la Cabina de Seguridad Biolgica?


La cabina de seguridad biolgica se utiliza con estos fines:

1. Proteger al trabajador de los riesgos asociados al manejo de material biolgico


potencialmente infeccioso.
2. Proteger la muestra que se est analizando para que no se contamine.
3. Proteger el medio ambiente.
Las cabinas se utilizan para el trabajo rutinario relacionado con patgenos parsitos, bacterias,
virus, hongos, el cultivo de clulas y, bajo condiciones muy precisas, el manejo de los agentes
txicos.

Principios de Operacin

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La cabina de seguridad biolgica es una cmara construida generalmente en acero, que


dispone de una ventana frontal en vidrio, de altura variable que posee un sistema de ventilacin
conformado por un motor elctrico, un ventilador y un conjunto de ductos que, al estar
funcionando, generan una condicin de presin negativa en el interior de la cabina comparada
con la presin del ambiente en el laboratorio, condicin que produce que el aire fluya dentro de
la cabina a travs de la abertura frontal, generando una cortina de aire que protege al operador.
Internamente, el aire es conducido a travs de una serie de rejillas y ductos, para finalmente ser
tratado mediante filtros HEPA1.
Dependiendo del diseo de la cabina, el aire es reciclado dentro del laboratorio o extrado y
renovado en diversas proporciones. El aire que en las cabinas Clase II fluye desde el filtro hacia
la superficie de trabajo es de tipo laminar.

A continuacin, se presenta un resumen del tipo de cabinas existentes:

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MICROSCOPIOS

A) MICROSCOPIO PTICO

El microscopio ptico es el primero que se invent Se emplea para aumentar


o ampliar las imgenes de objetos y organismos no visibles a simple vista.
Se trata de un instrumento ptico que contiene una o varias lentes que
permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por
refraccin. El microscopio ptico puede ser monocular, y consta de un solo
tubo. La observacin en estos casos se hace con un solo ojo. Es binocular
cuando posee dos tubos. La observacin se hace con los dos ojos. Esto

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presenta ventajas tales como mejor percepcin de la imagen, ms cmoda la


observacin y se perciben con mayor nitidez los detalles. Est conformado
por tres sistemas:

a) El sistema mecnico est constituido por una serie de piezas en las que
van instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque.

b) El sistema ptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal


manera que produce el aumento de las imgenes que se observan a travs de
ellas

c) El sistema de iluminacin comprende las partes del microscopio que


reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la
observacin a travs del microscopio.

B) EL SISTEMA MECNICO LO CONFORMAN:

BRAZO.- Es la parte de donde se debe sujetar, las pinzas el carro el tubo del
microscopio y el revolver. Adems sirve para trasladar el microscopio de un
lugar a otro.

BASE O PIE.- Es una pieza que proporciona estabilidad y sirve de soporte a


todas las partes del microscopio.

PLATINA.- Es una pieza metlica, cuadrada, que tiene en su centro una


abertura circular por la que pasar la luz del sistema de iluminacin. Aqu se
coloca el portaobjetos con la muestra a observar

PINZAS DE SUJECION.- Parte mecnica que sirve para sujetar la


preparacin. La mayora de los microscopios modernos tienen las pinzas
adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un avance longitudinal y
transversal de la preparacin.

TORNILLO MACROMETRICO: Permite hacer un movimiento rpido hacia


arriba o hacia abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la
imagen a observar.

TORNILLO MICROMETRICO O DE ENFOQUE SUAVEREVOLVER.-


Parte mecnica de movimiento giratorio que nos permite colocar en posicin
cualquiera de los objetivos que se encuentran en l.

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TUBO.- Parte mecnica que proporciona sostn a los oculares y objetivos.

CREMALLERA.- Permite que el movimiento de los tornillos macro y


micromtrico sea de mayor o de menor amplitud.

C) EL SISTEMA PTICO;

OCULAR.- Se localiza en la parte superior del tubo ocular y son las lentes
que Capta y ampla la imagen formada en los objetivos. Los primeros
microscopios eran monoculares, es decir, posean una sola lente. Los
microscopios actuales poseen dos oculares, uno para cada ojo y se les llama
binoculares.

OBJETIVOS: Se encuentran incrustados en el revolver Son unos pequeos


cilindros colocados en el revolver que proporciona el poder de resolucin
del microscopio y determinan la cantidad total de aumento.

Existen 4 tipos entre los que se encuentran:

1.- La lupa (4 X) que sirve para hacer observaciones a bajo aumento.


2.- El objetivo seco dbil (10 X) que se utiliza para localizar la imagen que
se va a observar.
3.- El objetivo seco fuerte (40 X) aumenta la imagen anterior, para poder
observar se necesita primero acercar el objetivo al portaobjetos y
posteriormente, enfocar el objetivo hasta que aparezca la imagen.
4.- El objetivo de inmersin (100 X) es un lente especial para observar
imgenes tan pequeas como las bacterias. Y se requiere del aceite de
inmersin para lograr una buena observacin.
La parte ptica del microscopio es la que determina el nmero de aumentos
que presenta la imagen observada .El aumento total que permite un
microscopio ptico se calcula multiplicando la magnificacin que producen
el objetivo por la que producen los oculares.

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Nm. del objetivo X nm. de ocular = nm. de aumentos

Ejemplo, si estamos usando un objetivo de 40x (aumenta 40 veces) y un


ocular de 10x (aumenta 10 veces), el resultado final ser de 400x, es decir,
vemos la muestra aumentada 400 veces.
Seco fuerte (40 x) x ocular (10 x) = 400 aumentos

Usando microscopios pticos avanzados se consiguen unos 1000-1500


aumentos (objetivo de 100x ms oculares de 10x o 15x). Algunos
microscopios pticos tienen lentes internas que producen aumentos
adicionales que tendremos que tener en cuenta para calcular la
magnificacin de la imagen que se observa.

D) EL SISTEMA ILUMINACIN:

La fuente luminosa consiste en un espejo o una fuente de luz elctrica que


dirige un haz de luz hacia el condensador.

CONDENSADOR.- Es una lente de gran abertura que permite dirigir o


condensar la mayor parte de los rayos luminosos en la preparacin. En
nuestro microscopio est integrado en la platina y tiene un diafragma unido
en la parte inferior.

DIAFRAGMA: Existe un diafragma en el condensador, que elimina el


exceso de luminosidad para tener una buena iluminacin del objeto a
observar

FUENTE DE LUZ.- Para observar la muestra microscpica es necesario que


sta se ilumine con algn tipo de luz y nuestros microscopios cuentan con
un foco que da energa elctrica que dirige sus rayos luminosos hacia el
sistema condensador.

E) LOS MICROSCOPIOS SIMPLES:

Son lentes de aumento de 8 a 20 aumentos, como las lupas que es un


instrumento ptico cuya parte principal es una lente cncava que se emplea
para ampliar la visin de un objeto

F) LOS MICROSCOPIOS COMPUESTOS:

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Llamados tambin pticos o fotnico, porque se utiliza una fuente de luz


que atraviesa la muestra, entre stos tenemos los microscopios que
utilizamos en nuestro laboratorio de biologa, Utilizan uno o ms lentes para
aumentar los objetos se utilizan para observar clulas vivas y organismos
pequeos, estos microscopios pueden agrandar la imagen hasta 1500 veces.

G) EL MICROSCOPIO ELECTRNICO.

Utiliza una fuente de electrones para observar la muestra y se clasifican en


dos:

1.-De Transmisin lineal porque los electrones atraviesan la muestra y la


reflejan en una pantalla fluorescente, aumentando la imagen a unas 200,000
veces ms que el ojo humano.
2.-De Barrido Superficial porque los electrones no atraviesan la muestra,
solamente recorren la superficie como si la barrieran, proyectndola en una
pantalla de televisin, aumentando la imagen hasta 1,000,000 de veces.

H) MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA

El microscopio de fluorescencia se utiliza para observar sustancia


fluorescentes denominadas fluorforos. Una molcula fluorescente es
aquella que es capaz de captar radiacin electromagntica con una longitud
de onda determinada y emitir otra radiacin electromagntica con otra
longitud de onda diferente, normalmente dentro del espectro de la luz
visible.

I) MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES

.- Realiza modificaciones en la trayectoria de los rayos de luz, los cuales


producen contrastes notables en la preparacin.

III. CONCLUSIN
Se reconoci cada uno de los materiales con su respectiva descripcin

IV. RECOMENDACIONES
NORMAS DE FUNCIONAMIENTO DEL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGA

Informacin General y sistema de evaluacin


1. La prctica tiene una duracin de 2 horas acadmicas por semana

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2. La prdida de alguna de las practicas requiere la justificacin de la inasistencia por


medio de la presentacin de un justificativo medico expedido o avalado por los
servicios mdicos de la universidad.
3. La puntualidad para la actividad es de importancia, el alumno que llegue diez (10)
minutos despus de la hora de inicio no podr entrar a la misma y una vez comenzada la
seccin practica el alumno no podr retirase de esta sin previa consulta sin permiso del
docente.
4. Al perder el 25% de las secciones prcticas trae como consecuencia la perdida de la
asignatura.
5. Las evaluaciones son continuas cada seccin practica tiene un pre-laboratorio
(examen) y post-laboratorio (reporte), con valor de 1,5% cada uno, al final de todas las
secciones practicas el alumno debe entregar y defender un informe final de practica con
valor de 5%.
6. Antes de cada seccin prctica lea la practica correspondiente y sobre el tpico a
estudiar antes de acudir al laboratorio.

MEDIDAS DE SEGURIDAD DENTRO DEL LABORATORIO

1. La existencia de contaminacin en un laboratorio de microbiologa obliga a realizar el


trabajo bajo las ms estrictas condiciones de asepsia, en completo orden, aunque los
microorganismos que se manipulan en el laboratorio son por lo general no patgenos el
alumno se debe ceir a al cumplimiento de las NORMAS DEL LABORATORIO. En
primer lugar evite contacto de las, manos, Cabello, ropas, o utensilios escolares con el
material procedente de los cultivos o material contaminado en el laboratorio.

2. Para esto el alumno debe poner entender y poner en prctica las tcnicas de asepsia
necesarias para la manipulacin del material para evitar la contaminacin del estudiante
o del material con el que se est trabajando

NORMAS PARA EL INGRESO Y TRABAJO EN EL


LABORATORIO DE MICROBIOLOGA AMBIENTAL.

1. Es necesario tener presente que el alumno en la seccin practica debe tomar nota
sobre los procesos, mtodos, datos e informacin en general suministrara el instructor
para cada seccin prctica, por lo que es necesario una libreta o cuaderno de
anotaciones, junto a un otros utensilios que permitan la toma de estos datos como: lpiz,
sacapuntas, borrador, bolgrafo, marcador, regla o escuadra entre otros.
TOME PRECAUCIONES para este caso y evite el prstamo de los mismos por razones
de seguridad dentro del laboratorio.
2. Para el ingreso y durante la permanencia del alumno dentro del laboratorio es de
carcter OBLIGATOIO el uso de la bata de laboratorio de color blanco, largas y con
mangas largas.
3. Antes de cada seccin apague o coloque funcin de vibracin el telfono celular. Esta
terminante mente PROHIBIDO en uso del celular dentro del laboratorio.
4. Reducir al mnimo la formacin de aerosoles durante la realizacin de cualquier
trabajo prctico.

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5. NUNCA deposite libros, carteras, bolsos, bultos, morrales y otros objetos similares
sobre los mesones destinados para realizar el trabajo prctico, SOLO SE PERMITE,
cuaderno de notas la gua de prctica y lo necesario para las anotaciones
correspondientes.
6. Para realizar el trabajo prctico se EXIGE: la gua prctica, utensilios para
anotaciones, lpiz graso o marcador y fsforos o encendedor.
7. El estudiante es RESPONSABLE del material que se le suministra por lo tanto, la
prdida por, dao, roturas o desaparicin, deber ser repuesto por el o los alumno(s)
responsable(s).
8. REPORTAR inmediatamente cualquier accidente al profesor (derrame de material
contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno ser catalogado como menor.
9. Al INICIAR y FINALIZAR la seccin de trabajo cada estudiante esta en la
obligacin de limpiar su sitio de trabajo, que ser supervisado por el personal
designado.
10. No DEVOLVER sustancias a sus envases originales.
11. EMPLEAR la propipeta al medir lquidos biopeligrosos.
12. REALIZE solamente aquellas actividades indicadas por el profesor, no llevar a cabo
experimentos no autorizados.
13. Durante las secciones prcticas adquiera y mantenga hbitos de higiene personal

a. Los cabellos largos deben estar RECOJIDOS sobre la nuca


b. No USAR joyas de ninguna especie durante la practica
c. Por ninguna causa se lleve OBJETOS a la boca como lpices, bolgrafos, o cualquier
otro material.
d. No TOCARSE los ojos, el pelo, las fosas nasales, odos, boca dentro del laboratorio.
e. Est PROHIBIDO comer o tomar cualquier tipo de alimento dentro del laboratorio.
f. No FUME en el laboratorio.
g. NUNCA humedezca con saliva alguna etiqueta, use agua.
h. NO use el material de laboratorio para beber.
i. EVITE hablar sobre el material de trabajo.
j. No HALE ni EMPUJE a personas, ni permita que lo hagan terceros cerca del rea de
trabajo por cuanto esto contraviene las normas de asepsia.
k. EVITE deambular por el laboratorio para evitar accidentes, y provoca corrientes de
aire y polvo que promueven contaminaciones.
l. DESCARTE los cultivos en los lugares destinados para tal fin.
m. Si tiene dudas sobre algn procedimiento, no DUDE en consultar al personal o
instructor esto puede evitar accidentes.
n. Est terminantemente PROHIBIDO sacar material, reactivo, o equipos del
laboratorio.
o. Antes de abandonar el laboratorio LAVE y DESINFECTE sus manos. Se recomienda
lavar su bata ese mismo da para evitar que esta se convierta en una superficie de
crecimiento de microorganismos.

V. Bibliografa

Biblioteca de consulta Encarta 2004

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http://enfenix.webcindario.com/profeweb/cieytec/imagenes.phtml(visita
02/02/2005)

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