Alteraciones Morfologicas Jose Manuel Ornelas Aguirre

Hipertensin Arterial Pulmonar en Lupus
UNIVERSIDAD DE COLIMA
Tesis para obtener el grado de:
Presenta:
Asesores:
Colima, Col., a 30 de Julio del 2002
1
Guadalajara, Jalisco a 10 de Julio del 2002.
C. Dr. Benjamn Trujillo

Coordinador de Posgrado
Centro Universitario de Investigaciones Biomdicas Universidad de Colima
Por medio de la presente, le informo que el mdico especialista Jos Manuel

Ornelas Aguirre, alumno del programa de posgrado de la Maestra en Ciencias Mdicas de la
generacin 2000-2002 ha concluido la escritura de su tesis y otorgo mi autorizacin para su
presentacin y de defensa de la misma.
Sin otro asunto por el momento, me despido de usted y quedo a sus rdenes para
cualquier aclaracin al respecto.
Atentamente
Investigador asociado "D"
Unidad de Investigacin en Epidemiologa Clnica.IMSS
2
"ALTERACIONES MORFOLGICAS E INMUNOHISTOQUMICAS

EN HIPERTENSIN ARTERIAL PULMONAR EN AUTOPSIAS DE
PACIENTES CON LUPUS ERITEMATOSO SISTMICO"
Tesis para obtener el grado de:
Maestro en Ciencias Mdicas
Presenta:
Mdico Patlogo Jos Manuel Ornelas Aguirre.

Asesores:
M. en C. Jorge Ivn Gamez Nava (Clnico)

D. en C. Jos Clemente Vzquez Jimnez (Bsico)
Co-asesores:
Mdico Patlogo Gonzalo Vzquez Camacho.
Mdico Patlogo Teresita Plasencia.
M. en C. Laura del Carmen Gonzlez Lpez
Colima, Col. A 30 de Julio del 2002.
3
AGRADECIMIENTOS:
Con todo respeto a mis profesores y asesores a quien agradezco su apoyo incondicional e
invaluables enseanzas en los muchas veces difciles caminos de la investigacin
M. en C. Jorge Ivn Gamez Nava

D. en C. Jos Clemente Vsquez Jimnez
Muy especialmente a quienes viven entregados a la investigacin cientfica en el Instituto

Mexicano del Seguro Social
Dr. Jess Garca Prez, Dra. Ana Mara Contreras y M. en C. Mario Salazar Pramo
De manera muy especial a mis profesores en el departamento de Patologa del Hospital de

Especialidades en el Centro Mdico de Occidente (HECMNO) del IMSS:
Mdicos Patlogos Dr. Gonzalo Vzquez Camacho, Dra. Teresita J. Plasencia y Dra.
Claudia Velsquez Garca
Con mucho agradecimiento a quien apoy en el Hospital General Regional #110 del IMSS
y colabor con sus importantes consejos y observaciones estadsticas en la realizacin de esta
tesis:
M. en C. Laura del Carmen Gonzlez Lpez
Respetuosamente a mis profesores en el Centro Universitario de Investigaciones Biomdicas

de la Universidad de Colima:
D. en C. Benjamn Trujillo Hernndez, M. en C. Cuauhtmoc Acoltzin Vidal, M. en C.

Oscar Uribarren Berrueta y al mdico Hematlogo Dr. Ernesto Reynoso Zuiga
Un agradecimiento muy especial a quienes colaboraron de forma importante en la tcnica de

inmunohistoqumica en el laboratorio del departamento de Patologa del HECMNO:
Tec. Hist. Gabriela Blancas

Tec. Hist. Juan Manuel lvarez Prez
Tec. Hist. Brenda Eunice Martnez Romero
Por ltimo, la realizacin de ste trabajo hubiera sido imposible sin el apoyo econmico
proporcionado por el Fondo de Fomento a la Investigacin Cientfica (FOFOI) del IMSS,

en el programa de apoyo a Maestras y Doctorados (FP-0038-240)
4
NDICE
ndice de cuadros y figuras 6
Abreviaturas ..8
Resumen / Abstract9-10
Introduccin....................................................................................................................................................11
Antecedentes..................................................................................................................................................12
Justificacin................................................................................................................................................... 2 2
Pregunta de Investigacin e hiptesis.......................................................................................................23
Objetivo general y particulares .................................................................................................................. 23
Material y mtodos ......................................................................................................................................24
Resultados................................................................................................................................................ 3 0
Discusin....................................................................................................................................................... 4 8
Conclusiones .................................................................................................................................................54
Anexos..................................................................................................................................................... 5 5
Bibliografa................................................................................................................................................... 6 7
5
NDICE DE CUADROS Y FIGURAS:
Cuadro 1. Constituyentes de la matriz extracelular del parnquima pulmonar...13
Cuadro 2. Principales causas del desarrollo de la Hipertensin Arterial Pulmonar..14

Figuras 1-4. Diversos grados de Hipertensin Arterial Pulmonar.15
Cuadro 3. Principales Caractersticas Histopatolgicas en la HAP.17
Figura 5. Representacin de la tcnica inmunohistoqumica para la avidina-biotina.19
Tabla 1. Caractersticas de los pacientes estudiado30
Figura 6. Principales sntomas encontrados en los casos con LES estudiados31
Tabla 2. Principales caractersticas pulmonares en los pacientes estudiados...32
Figura 7. Principales caractersticas pulmonares en los casos de LES/HAP estudiados.. 33
Tabla 3. Grado de Hipertensin Arterial Pulmonar (HAP) en los pacientes con LES.34
Figura 8. Grado de Hipertensin Arterial Pulmonar segn Heat-Edwards.34
Tabla 4. Caractersticas de la inmunohistoqumica en el intersticio del tejido pulmonar

de los casos con y sin HAP.35
Figura 9. Positividad intersticial para los reactivos estudiado...36
Tabla 5. Comparacin del nivel de tincin en el intersticio del tejido pulmonar de los pacientes con
LES estudiados en relacin al desarrollo de HAP37
Figura 10. Grados de positividad intersticial en la inmunohistoqumica (a/b)38
Tabla 6. Comparacin del nivel de tincin en el intersticio del tejido pulmonar de los
pacientes con LES estudiados en relacin al desarrollo de HAP39
Figura 11. Grados de positividad intersticial en la inmunohistoqumica. (a/b)...40
Tabla 7. Caractersticas de la inmunohistoqumica en las arterias del tejido pulmonar de los casos
con y sin HAP 41
Figura 12. Positividad arterial para los reactivos estudiados.42
Tabla 8. Comparacin del nivel de tincin en el intersticio del tejido pulmonar de

los pacientes con LES estudiados en relacin al desarrollo de HAP43
6
Figura 13. Grados de positividad arterial en la inmunohistoqumica(a/b)44
Tabla 9. Comparacin del nivel de tincin en el intersticio del tejido pulmonar de los pacientes con
LES estudiados en relacin al desarrollo de HAP ...45
Figura 14. Grados de positividad arterial en la inmunohistoqumica.(a/b) 46
Tabla 10. Correlacin entre el grado de Hipertensin Arterial Pulmonar segn la gradificacin de
Heat-Edwards y el grado de la tincin intersticial de los diferentes reactivos entre los casos con LES
estudiados 47
Anexo I. Criterios revisados para la clasificacin de Lupus Eritematoso Sistmico...55
Anexo II. Clasificacin de Heat-Edwards para la arteriopata pulmonar plexognica..56
Anexo III. Hoja de recoleccin de datos57
Anexo IV. Fotografas microscpicas............................63
7
ABREVIATURAS:
APP; Arteriopata plexognica pulmonar
FCVE: Factor de Crecimiento Vascular Endotelial
HAP; Hipertensin arterial sistmica
HPP; Hipertensin arterial primaria
gr.; Peso en gr.
IgG; Inmunoglobulina-G
IgM; Inmunoglobulina-M
LES; Lupus eritematoso sistmico OR: Odds ratio (razn de momios)
(r); Prueba de correlacin de Sperman (rho)
X2; prueba de Ji cuadrada
8
RESUMEN:
INTRODUCCIN: Pocos estudios han evaluado las caractersticas inmunohistoqumicas de la

Hipertensin Arterial Pulmonar en el Lupus Eritematoso Sistmico (HAP-LES).
OBJETIVO: Evaluar las caractersticas inmunohistoqumicas de la HAP-LES.
MTODOS: En un estudio de casos y controles, seleccionamos de las autopsies de 1984 al

2001, 11 casos con HAP-LES, 7 controles con LES sin HAP y 9 controles sin enfermedad
pulmonar. Se realiz un anlisis morfolgico e inmunohistoqumico para Tenascina-C, Laminina,
Fibronectina, Inmunoglobulinas, Serotonina y CD-34.
RESULTADOS: Los casos con LES-HAP se diferenciaron de los controles sin LES en la
frecuencia e intensidad para la Tenascina-C (p=0.003) y Serotonina (p=0.035). La tincin para
Tenascina-C se increment en pacientes con HAP-LES en comparacin con casos de
LES sin HAP (p=0.025). Una correlacin positiva se observ entre el grado de HAP (Heat-
Edwards) con la intensidad para la Tenascina-C (rho=0.43, p=0.03) y Colgena IV (rho--0.47,
p=0.02) en la inmunohistoqumica arterial.
DISCUSIN: La Tenascina-C puede jugar un papel importante en la patognesis de la HAP

en LES. Se requieren otros estudios, para evaluar la consistencia de nuestros hallazgos.
PALABRAS CLAVE:
Hipertensin Arterial Pulmonar, Lupus Eritematoso Sistmico, Inmunohistoqumica, Tenascina-C.
9
ABSTRACT:
INTRODUCTION: Few studies have evaluated the immunohistochemical characteristics of the

Pulmonary Hypertension secondary to Systemic Lupus Erythematosus (PH-SLE).
OBJECTIVE: To evaluate the immunohistochemical characteristics of PH- SLE.
METHODS: In a case-control study, we selected from the autopsies of 1984 to 2001, 11 cases
with PH-SLE, 7 controls with SLE non-PH, and 9 controls without pulmonary disease.
Morphological and immunohistochemical studies were performed. We compared presence and
intensity of Tenascin-C, Colagen IV, Laminin, Fibronectin, Immunoglobulins, Serotonin, and
CD-34, among cases and controls.
RESULTS: PH-SLE differed from controls without SLE in the frequency and intensity of
Tenascin-C (p=0.003) and Serotonin (p=0.035). The stain for Tenascin-C was increased in
patients with PH associated to SLE in comparison with non-PH SLE (p=0.025). A positive
correlation was observed between the grade of PH in the Heat-Edwards scale with the grade of
Tenascin-C (rho=0.43, p=0.03) and Collagen IV (rho=0.47, p=0.02) in the arterial
immunohistochemical stain.
DISCUSSION: Tenascin-C and Collagen IV may play an important role in the pathogenesis of
PH-SLE. Further studies are required to evaluate the consistency of our findings.
KEY WORDS:
Arterial Pulmonary Hypertension, Systemic Lupus Erythematosus, Immunohistochemical stain,
Tenascin-C.
10
INTRODUCCIN:
El Lupus Eritematoso Sistmico (LES) es una enfermedad multisistmica del tejido

conectivo que en sus complicaciones frecuentemente engloba diversos sistemas y rganos
blanco1. A este respecto, la afeccin del sistema cardiovascular se asocia a desenlaces ms
graves y provoca una mayor morbi-mortalidad. Una de las complicaciones en estos pacientes es el
desarrollo de Hipertensin Arterial Pulmonar con desenlaces fatales a corto plazo.
La inquietud por la realizacin de esta tesis se dirigi a dilucidar las caractersticas

morfolgicas e inmunohistoqumicas relacionadas al desarrollo de la Hipertensin Arterial
Pulmonar en estos pacientes.
El presente estudio se realiz en tejidos procedentes de autopsias con diagnstico de

LES. Diversos fueron los factores en contra que tuvimos que afrontar en la realizacin de este
trabajo, siendo principalmente: 1) el trabajar con tejidos fijados en parafina por largo tiempo
que poda haber causado una prdida en la respuesta a los anticuerpos ensayados, y 2) prdida de
informacin en expedientes clnicos.
El primer factor se logr vencer con la bsqueda sistematizada de los casos, tratando
de contar con tejidos en el mejor estado de conservacin y lo ms reciente posible; adems
de una adecuada estandarizacin en la tcnica de inmunohistoqumica y el desenmascaramiento
por calor a presin que devolviera la antigenicidad perdida a los tejidos analizados, por ltimo, el
segundo factor en contra se solucion creando una hoja de recoleccin adecuada que nos
permitiera capturar de una manera sistemtica y eficiente la informacin requerida.
Es por lo tanto, la presente tesis el producto del esfuerzo conjunto del investigador
principal y colaboradores que contribuyeron en gran medida para el xito en su realizacin.
11
ANTECEDENTES:
1. Generalidades del Lupus Eritematoso Sistmico:
Dentro de las enfermedades difusas del tejido conectivo, el Lupus Eritematoso

Sistmico (LES) es el prototipo clsico de una enfermedad multisistmica de origen
autoinmunitario y crnica, de causa desconocida y que en su desarrollo involucra a
cualquier rgano vinculado a fenmenos de autoinmunidad 1.
El comienzo puede ser agudo, siendo generalmente una enfermedad crnica,

recidivante y a menudo febril. Se caracteriza principalmente por lesiones cutneas, articulares,
renales y serosas2. La expresin clnica de la enfermedad tiene un amplio rango de severidad
y una alta mortalidad, en esta ltima las infecciones oportunistas y la afeccin a rgano
mayor son los principales factores implicados3. Alrededor del 50-70% de los casos con
LES desarrollan manifestaciones pleuropulmonares durante el curso de su enfermedad las
cuales incluyen: pleuritis con o sin derrame, neumonitis intersticial y alveolitis fibrosante 4.
2. Hipertensin Arterial Pulmonar en Lupus Eritematoso Sistmico
Diversos estudios demuestran que la presencia de afeccin del sistema

cardiovascular y respiratorio en estos pacientes, juega un impacto negativo en la
sobrevida y se acompaa de forma frecuente de complicaciones severas a los pocos aos
de padecer la enfermedad dentro de las cuales, se encuentra el desarrollo de la Hipertensin
Arterial Pulmonar (HAP) cuya principal caracterstica es la resistencia al flujo de la
circulacin en el lecho pulmonar.
La HAP asociada a enfermedades autoinmunes ha sido ms frecuentemente descrita en

la enfermedad mixta del tejido conectivo y esclerodermia (CREST). Sin embargo; su
relacin con el LES ha sido considerada como rara 5. Algunos estudios transversales y de
5-7
cohorte han mostrado que la HAP se presenta del 9 al 25% de los pacientes con LES .
Alguna vez fue considerada como una entidad raramente diagnosticada en vida, debido a
que en fases iniciales los pacientes se muestran asintomticos y no es sospechada esta entidad
8-10
hasta que se presentan grados mayores de severidad durante el curso de su enfermedad .
12
Actualmente, la prevalencia de HAP se ha obtenido en estudios ms amplios usando

ecocardiograma Doppler como mtodo no invasivo, se considera que est en personas que sufren
la enfermedad, va desde el 9 al 43% 5,11.
2. El Pulmn en la Hipertensin Arterial Pulmonar:

El pulmn es un rgano clave en la gnesis de la hipertensin pulmonar de origen
secundario. El pulmn normal microscpicamente tiene una estructura caracterstica. Tanto el
intersticio, el epitelio bronquial, el endotelio vascular y la pleura tienen su principal funcin en
servir como medio de separacin y sustentacin de la estructura del pulmn, su principal
constituyente es el tejido conectivo. Los componentes normales del pulmn y las substancias que
son liberadas del mismo pueden verse modificadas durante los procesos inflamatorios. Estos
componentes y sustancias son mencionadas en el Cuadro 1: un desequilibrio de estos
componentes puede modificar algunos aspectos de la funcin normal pulmonar.
13
4. Etiologa de la Hipertensin Arterial Pulmonar:
Para entender la Hipertensin Arterial Pulmonar (HAP) en lupus eritematoso

sistmico, es primero necesario revisar los conceptos generales de la HAP y sus causas. La
HAP es un sndrome cuya caracterstica es el incremento sostenido de presin en las
arterias pulmonares que lleva a una resistencia al flujo de la circulacin del lecho
pulmonar 5 y que puede ocurrir como resultado de diversas enfermedades, las principales se
encuentran referidas en el cuadro 2. Resulta de una gran variedad de estmulos iniciadores,
histolgicamente se encuentra (1) muscularizacin de arteria perifricas, normalmente no
musculares y debido a la diferenciacin de pericitos, (2) hipertrfia de la tnica media y
formacin una neontima en arteria musculares, como consecuencia de la hipertrfia,
proliferacin y migracin de clulas musculares lisas residentes con un incremento en la
produccin de los componentes de la matriz extracelular (colgena, elastina, fibronectina y
12-13,
tenascina-C) . Todo lo anterior, conlleva a un incremento de los componentes normales
del vaso sanguneo, con una disminucin en su luz, as como lesiones plexiformes
(rugosidades y tortuosidades del vaso sanguneo con cambios angiomatoides-
neovascularizacin) las cuales estn constituidas primariamente por clulas endoteliales. (Ver
figuras 1-4).
14
En el caso de lupus eritematoso sistmico, la causa de la hipertensin arterial

pulmonar an no ha sido totalmente dilucidada. Son 4 las principales teoras acerca
de su patognesis: 1)La teora del fenmeno de inmunocomplejos, en la cual la
presencia de autoanticuerpos inicia una reaccin inflamatoria al depositarse en la luz
arterial; 2)La teora de la enfermedad trombtica arterial, en la cual anticuerpos como
el anticardiolipina y el anticoagulante lpico desarrollan fenmenos de microtrombos
que ocluyen la luz de arteriolas pulmonares, generando mayor resistencia al flujo.
3)La teora de la liberacin de substancias vasoconstrictoras y proliferativas del endotelio
15
vascular y la tnica media, que desencadena una respuesta proliferativa que gradualmente
ocluye las arteriolas y arterias pulmonares con fenmenos de neoformacin vascular e
incremento de la presin pulmonar. Por ltimo, 4)La teora de la respuesta proliferativa vascular
en respuesta a un aumento de la resistencia a nivel alveolar, en esta teora la fibrosis pulmonar
que desarrollan algunos pacientes lleva a un aumento en la resistencia al flujo vascular y al
desarrollo de hipertensin pulmonar secundaria. Ms que una sola teora estos aspectos
pueden ser complementarios y todos ellos constituyen una hiptesis de un proceso
autoinmune desconocido an, que lleva al desarrollo de la hipertensin.
5. Deteccin de Hipertensin Arterial Pulmonar en Clnica
Las manifestaciones clnicas de los pacientes con HAP en LES son similares a las
de los de otros tipos de Hipertensin Pulmonar, inicialmente pueden ser asintomticos, ser
detectados por estudios de gabinete especiales o de forma tarda por medio de la realizacin
de cateterismo cardaco, cuando ya se han desarrollado sntomas de una insuficiencia
cardiaca derecha(ICD)5,9,11. Entre los sntomas que sugieren HAP se encuentran la disnea,
ortopnea, sncope de esfuerzo, dolor torcico y de manera menos frecuente aparece tos,
hemoptisis y muerte sbita, que se pueden presentar sobre todo en aquellos pacientes con
HAP muy grave12. Uno de los graves problemas relacionados a la HAP en LES, es su
asociacin con una mayor mortalidad a corto plazo; sugirindose en la actualidad que, una
vez establecido el diagnstico de HAP el promedio de vida es de 2 aos 12-14.
6. Caractersticas Microscpicas de la HAP:
En estudios de microscopia de luz, la HAP de los pacientes con lupus eritematoso

sistmico es muy similar a la forma primaria de la HAP. La forma primaria ha sido clasificada en
3 tipos los cuales son descritos en el Cuadro nmero 3:
16
Dentro de las caractersticas microscpicas observadas en la HAP primaria se

incluye el dao vascular a pequeas y medianas arteriolas manifestada por una
Arteriopata Plexognica Pulmonar caracterizada por la presencia de necrosis fibrinoide
15-17
en la pared arterial . La Hipertensin Pulmonar Primaria (HPP) puede presentar una
elevada frecuencia de anticuerpos antinucleares y dirigidos a las colgenas tipos I, III y
18-19
IV . Las teoras actuales en relacin a la patognesis de la HPP han sido
enfocadas a las anormalidades de la interaccin entre las clulas endoteliales y
musculares de los vasos sanguneos pulmonares, con un desequilibrio de los mediadores
inflamatorios, favoreciendo la vasoconstriccin y otras alteraciones 20-22.
A este respecto, los estudios inmunohistoqumicos que han sido realizados a

nivel vascular pulmonar en la HPP sugieren, que tanto la expresin de la sntesis del xido
ntrico y la excrecin de metabolitos activos de la prostaciclina, se encuentra disminuida en
las arterias pulmonares de pacientes con HPP.
17
Otros estudios en cambio sealan, un incremento en la expresin de otras

23
substancias como la endotelina-1 , la cual puede producir un incremento en el tono
arterial, con el desarrollo de vasoconstriccin y proliferacin de clulas musculares lisas,
lo que ya ha sido demostrado por la presencia de endotelina-1 en clulas alveolares de
pacientes con fibrosis pulmonar. Otras sustancias como Serotonina, Fenfluramina,
Dexfenfluramina, Factor de Crecimiento Vascular Endotelial (FCVE), Mitgeno
Endotelial Celular Especfico, Citocinas y diversos factores de crecimiento celular han
sido tambin asociadas al desarrollo de HPP, debido a que pueden provocar
estimulacin en la emigracin y multiplicacin y elaboracin de la matriz extracelular de
las clulas musculares lisas en los vasos sanguneos1,14,24.
7. El diagnstico inmunohistoqumico:
Desde los inicios de la patologa, se ha reconocido la necesidad de una adecuada

validacin de los juicios morfolgicos, para lo cual diversos mtodos especiales han sido
desarrollados para facilitar el reconocimiento celular y establecer mejores diagnsticos.
Inicialmente se desarrolla la inmunofluorescencia por Conos y cols. (1941),
posteriormente fue utilizada por Fagraeus en 1948 y otros investigadores, cimentaron las
bases para el desarrollo de la inmunopatologa. En un principio, la inmunofluorescencia no
tuvo gran difusin debido a su baja resolucin morfolgica y a la imposibilidad de aplicarse
como mtodo de rutina en el estudio de tejidos fijados en parafina (Taylor y cols, 1983). Lo
anterior, oblig a la bsqueda de nuevas tcnicas que pudieran evitar los problemas
antes referidos y fue hasta el ao de 1974 cuando fue realizada la tcnica de
inmunohistoqumica por Taylor y Burns, que poda ser utilizada en tejidos fijados en
25
parafina . Estos mtodos inmunoenzimticos se basan en la unin entre una enzima
activa a un anticuerpo especfico (avidina), que posteriormente y mediante la utilizacin
de otra enzima (biotina) producen una reaccin colorimtrica visible en el substrato y en
los sitios de localizacin del complejo enzima-anticuerpo dentro del tejido de estudio. Las
enzimas ms utilizadas para este fin son la peroxidasa, la fosfatasa alcalina y la glucosa-
oxidasa 26 .
Las ventajas que ofrece la inmunohistoqumica son una sensibilidad y

especificidad de ms del 75% a pruebas de material de rutina y su compatibilidad con la
mayora de las sustancias de fijacin de tejidos26-27 .En teora, cualquier sustancia que sea
antignica y que dicha antigenicidad sea al menos parcialmente retenida en los cortes
18
de tejido puede ser determinada por inmunohistoqumica. Para la tincin de

inmunohistoqumica varios procedimientos son disponibles actualmente, los dos ms
comnmente utilizados son: 1)peroxidasa-antiperoxidasa y 2)avidina-biotina (Fig. 5).
La avidina es una glucoprotena bsica con un peso molecular de 68,000

daltons y cuatro sitios de alta afinidad para la biotina (vitamina de un peso molecular de
244,000), stas al unirse a la peroxidasa le confieren una reaccin de tincin ms intensa
debido a la actividad de la peroxidasa.
Figura 5. Representacin de la tcnica inmunohistoqumica para la avidina-biotina.
Modificado de: Shan-Rong S, Richard JC, Clive RT. The Journal of Histochemistry and Cytochemistry
1997;45: 327-344.
Un problema comn en la realizacin de estas tcnicas lo constituyen la
desnaturalizacin, la naturaleza y estructura tridimensional de los receptores antignicos
por los mtodos comunes de fijacin, procesamiento y conservacin del tejido en
27
parafina . En general, los antgenos que se encuentran presentes en una alta
concentracin dentro del citoplasma son mejor preservados durante la fijacin con
formol, en cambio los de superficie son ms comnmente enmascarados o
desnaturalizados y esto puede ir aumentando en relacin directamente proporcional al
tiempo de fijacin y de almacenamiento utilizados. Sumado a lo anterior, en los tejidos
de autopsia, la presencia de la anoxia terminal al momento de la muerte con disminucin
del pH intracelular provoca la desnaturalizacin de algunas protenas estructurales.
19
No todos los antgenos son susceptibles de esta desnaturalizacin por anoxia, lo

cual depende principalmente de: l) una adecuada difusin del fijador (4-6hrs) dentro del
tejido (a este respecto el pulmn tiene una adecuada capacidad de fijacin) y 2) el tipo
y tamao del tejido (mejores resultados se obtienen con fragmentos pequeos).
Para tratar de disminuir los efectos deletreos en los antgenos, se utilizan en

la actualidad diferentes mtodos para lograr una recuperacin antignica
(desenmascaramiento o restauracin) con un aumento de su expresin inmunolgica
mediante la incubacin con enzimas proteo-lticas (Tripsina), tratamiento con lcalis
fuertes (solucin de Hidrxido de sodio-NaOH y metanol) o la elevacin de la
temperatura de los tejidos mediante calor a presin (el mtodo ms efectivo) 28-29.
8. Inmunohistoqumica en la Hipertensin Arterial Pulmonar y Lupus eritematoso

Sistmico:
Poca informacin existe acerca de las caractersticas inmunohistoqumicas de los

pulmones y arterias pulmonares de pacientes con lupus eritematoso sistmico, menos
informacin existe acerca de estas caractersticas en pacientes con hipertensin pulmonar
en esta patologa. Esta falta de informacin se debe a que fue considerada una entidad
rara y pocos esfuerzos se han realizado para su estudio.
Los estudios de autopsias pulmonares hacen nfasis principalmente en

caractersticas histomorfolgicas y no en las caractersticas inmunohistoqumicas.
Quismorio y sus colaboradores reportaron en 3 pacientes con lupus e hipertensin arterial
pulmonar, el depsito de inmunocomplejos en el endotelio arterial pulmonar, lo que
constituye un apoyo a la hiptesis de autoinmunidad. Otros autores han encontrado el
inmunocomplejo DNA-antiDNA en estas paredes, en autopsias de pacientes con
hipertensin arterial pulmonar y lupus eritematoso sistmico. Aun en otras
enfermedades con hipertensin pulmonar, solo poca informacin existe de sus
caractersticas inmunohistoqumicas.
20
La substancia ms estudiada ha sido la endotelina-1, donde algunos datos sugieren

un incremento de la endotelina-1 en las clulas endoteliales de las arterias pulmonares de
pacientes con engrosamiento de la media y fibrosis de la ntima. Sin embargo, otras
substancias como la Tenascina-C, la cual es una glicoprotena de la matriz
extracelular que predomina en tejidos embrinicos y adultos en constante
remodelacin (Chiquet-Ehrismann et al, 1995), han sido relacionada a proliferacin,
30
diferenciacin, migracin celular y apoptsis , as como participacin en la
31-32
neoformacin vascular en tumores y otros procesos no ha sido estudiada por
inmunohistoqumica en la hipertensin pulmonar.
21
JUSTIFICACIN
El LES puede cursar con afectacin vascular pulmonar durante su evolucin, los
pacientes suelen cursar con diferentes manifestaciones clnicas que hacen diferente el
pronstico, destacando por su severidad la HAP, considerada de mal pronstico, con un
promedio de vida de 2 aos posterior al diagnstico. Recientes estudios denotan que
algunos pacientes pueden tener un pronstico medianamente ms favorable, si son
11,14
detectados en etapas tempranas de la enfermedad . Sin embargo, a pesar de que
cada vez se diagnostica con mayor frecuencia, no es conocido porque en algunos
pacientes con LES se encuentra el desarrollo de HAP mientras que en otros no 5.
Se han postulado diversas teoras para el desarrollo de HAP en lupus eritematoso

sistmico, dentro de los que se ha sugerido la intervencin de diferentes mecanismos
productores de la lesin vascular. Desde el punto de vista inmunohistoqumico
y morfolgico la comparacin entre pacientes que haban desarrollado HAP y los que no
la desarrollaron no se ha establecido claramente 33.
Este trabajo evala las caractersticas morfolgicas e inmunohistoqumicas en

tejido vascular y del parnquima pulmonar proveniente de autopsias de pacientes con lupus
eritematoso sistmico con HAP y las compara con pacientes con LES sin HAP y con controles sin
patologa autoinmune. El hallazgo de las diferencias inmunohistoqumicas en algunas
substancias potencialmente implicadas en la teora de formacin neovascular y
proliferacin de clulas endoteliales tales como; Tenascina-C y Endotelina-1, pueden
llevar a un mejor entendimiento de la patognesis de la hipertensin pulmonar y la lesin
parenquimatosa pulmonar en LES, que a futuro pueda brindar un soporte a tratamientos
ms tempranos, que puedan detener la progresin de la hipertensin pulmonar en estos
pacientes.
22
PREGUNTA DE INVESTIGACIN:
Cules son las caractersticas inmunohistoqumicas intersticiales y vasculares

del parnquima pulmonar que distinguen a pacientes con Lupus Eritematoso Sistmico
con Hipertensin Arterial Pulmonar de pacientes sin hipertensin arterial pulmonar?
HIPTESIS:
Existen alteraciones inmunohistoqumicas distintivas en los pacientes con lupus

eritematoso sistmico que tienen hipertensin arterial pulmonar de pacientes que no
presentaron esta entidad.
OBJETIVO GENERAL:
Comparar caractersticas morfolgicas e inmunohistoqumicas del parnquima y

tejido vascular pulmonar en pacientes con lupus eritematoso sistmico con hipertensin
pulmonar comparado a pacientes sin hipertensin pulmonar.
OBJETIVOS PARTICULARES:
1.- Evaluar las caractersticas morfolgicas del dao vascular pulmonar en

pacientes con LES asociados a HAP y compararlas con las encontradas en pulmones sanos.
2.- Evaluar las caractersticas inmunohistoqumicas del dao vascular pulmonar

en pacientes con LES, su asociacin al desarrollo de HAP y en comparacin con pulmones sanos.
3.- Analizar los cambios morfolgicos e inmunohistoqumicos en el parnquima pulmonar

(Neumonitis, Infecciones oportunistas, poliserostis, etc.) en LES asociado al desarrollo de
HAP y en comparacin con pulmones sanos.
23
MATERIAL Y MTODOS:
1. Tipo de estudio y seleccin de los sujetos de estudio:
En un estudio de casos y controles se seleccionaron para el grupo a estudiar a todas las

autopsias realizadas en un periodo de 17 aos (1984-2001) con diagnstico de LES con o
sin diagnstico previo de HAP segn los criterios del Colegio Americano de Reumatologa
de 1982 34. Lo anterior, debido a que la presencia del desarrollo de HAP en enfermos
con Lupus Eritematoso Sistmico es de alrededor del 1% y en la poblacin sana (HAP de origen
no autoinmune) es de alrededor del 0.0002%.
Para el grupo control sin enfermedad autoinmune se seleccionaron autopsias de

pacientes sin diagnstico de enfermedad autoinmune en el expediente clnico, donde la
causa de muerte hubiera sido algn proceso que no hubiera comprometido a pulmones o
algn proceso infeccioso agudo y cuyos tejidos se encontrarn en el archivo del servicio de
Anatoma Patolgica del Centro Mdico Nacional de Occidente del IMSS.
Requisitos fundamentales para su inclusin fueron que todos los estudios de autopsia
estuvieran debidamente concluidos y existiera la presencia de tejido pulmonar viable y
debidamente conservado en parafina para estudio morfolgico e inmunohistoqumico (no
fragmentado y con tamao suficiente para realizar varios cortes a 5 de espesor). Se
excluyeron aquellos estudios de autopsia no concluidos, con datos en expediente clnico
incompletos o no legibles y con existencia de tejido pulmonar no viable para estudio
morfolgico e inmunohistoqumico.
Definicin de Caso:
Se consider como caso, aquellos pacientes con lupus eritematoso sistmico con datos
histopatolgicos de HAP definidas segn los criterios de la clasificacin de Heat-Edwards
incluyendo los estadios 1 al VI (ver cuadro de clasificacin en la seccin de Anexos).
24
Definicin de Controles:
Para aumentar la validez del estudio, se seleccionaron 2 tipos de controles:
a) Control -1: Aquellas autopsias de pacientes con Lupus Eritematoso Sistmico

con ausencia de datos histopatolgicos para Hipertensin Arterial Pulmonar segn la
clasificacin de Heat-Edwards. Solo aquellos con estadio 0 (normal: ausencia de
neoformaciones vasculares, ausencia de lesiones plexiformes sin hipertrofia o hiperplasia
de la ntima y media de las arterias pulmonares) fueron incluidos como el primer grupo de
controles.
b) Control-2: Para el segundo grupo de comparacin, se seleccionaron autopsias

de pacientes que no fueran portadores de enfermedad de origen autoinmune (ausencia de
criterios diagnsticos para lupus eritematoso sistmico u otra colagenopata) y que en la
autopsia no se observ la presencia de hipertensin arterial pulmonar. En este grupo se
incluyeron tambin solamente aquellos pacientes con un grado de Heat-Edwards = 0
(normal).
2. Procedimiento:
Se formaron tres grupos de estudio:
a) El primer grupo constituido por 11 casos de autopsia con LES con alteraciones
histolgicas de Hipertensin Arterial Pulmonar (HAP).
b) El segundo grupo (control nmero 1) lo constituyeron 7 autopsias de pacientes

con LES con ausencia de alteraciones histolgicas de HAP.
c) El tercer grupo (control nmero 2) constituido por 9 casos de pacientes sin

enfermedad autoinmune con ausencia de alteraciones histolgicas de HAP.
Las variables independientes investigadas fueron los resultados de la tincin de

inmunohistoqumica para las siguientes substancias en el tejido pulmonar y en los vasos
25
arteriales pulmonares analizados: Colgena tipo IV, Laminina, Fibronectina, CD-34, IgG, IgM,
Tenascina-C y Serotonina. Se detect grado de tincin para cada una de los antgenos, el
grado fue categorizado de forma arbitraria en cruces siendo (-) = negativo, (+) positividad
leve, (++) positividad moderada, (+++) positividad alta.
Se revis tambin los cambios morfolgicos del parnquima pulmonar y las arterias
pulmonares utilizando la lectura en cortes de tejido pulmonar a 5 de espesor y teidos en
Hematoxilina y eosina, solo en caso necesario se solicitaron tinciones especiales de Masson,
Fibras elsticas y Acido Perydico de Schiff. As como la bsqueda de cambios agregados,
tales como el desarrollo de procesos infecciosos, trombosis, hemorragia pulmonar, infartos
pulmonares, etc.
La informacin obtenida se registr mediante un formato previamente estructurado

que inclua datos morfolgicos (hiperplasia e hipertrofia de los vasos sanguneos para la
gradificacin de Heat-Edwards, presencia de trombos vasculares, neumonitis, pleuritis e
infecciones oportunistas agregadas), as como la presencia de cambios plexognicos
pulmonares.
Revisin de expedientes clnicos
Se evaluaron los expedientes clnicos en busca de variables clnicas y demogrficas

que fueron registradas en un formato estructurado. Entre estas caractersticas se
identificaron la edad, sexo del paciente, diagnstico de enfermedad de base,
enfermedades asociadas, causa de la muerte, factores contribuyentes a la muerte. En caso
de sintomatologa cardiovascular, se consign la disnea, ortopnea, tos, hemoptisis, ataques
de angor, arritmias, edema y hepatomegalia, as como otros datos de insuficiencia cardiaca
derecha e izquierda.
Procedimiento para la deteccin de reactividad en Inmunohistoqumica:
Por ltimo, se evalu la reactividad a diversos anticuerpos presentes en el

parnquima pulmonar y las arterias pulmonares (Colgena tipo IV, Laminina,
Fibronectina, CD-34 IgG, IgM, Tenascina-C y Serotonina), por medio de la tcnica estndar de
inmunohistoqumica para peroxidasa anti-peroxidasa niveles 1 y 2 Dako utilizada, previo al
desenmascaramiento de la antigenicidad tisular de los anticuerpos mediante la siguiente tcnica:
26
1.-Realizacin de corte histolgico de tejido fijado e incluido en parafina a 3-5 de

espesor y colocacin en laminilla de cristal con adhesivo para tejidos de poli-L-lisina.
Posteriormente se dej secar por un periodo de 2-16 horas,
2.- Se procedi a la desparafinizacin del tejido mediante xilol y alcohol a diversas

ncentraciones (100, 96 y 75%),
3.- Se colocaron las laminillas en solucin buffer (Conteniendo 8.5 gr. de Cloruro de
sodio, 0.266 gr. de fosfato de potasio monobsico y 1.14 gr. de fosfato de sodio
dibsico en 1000 ml de agua bidestilada),
4.- Incubacin en cmara hmeda agregando 2 gotas del reactivo de perxido de

hidrgeno al 3% (Blocking reagent), dejando reposar por 20 minutos,
5.- lavado con solucin buffer,
6.- Incubacin en cmara hmeda agregando 2 gotas del reactivo de Suero normal
por 20 minutos,
7.- Incubacin en cmara hmeda agregando 2 gotas del anticuerpo primario durante
toda la noche en cmara hmeda obscura, prosiguiendo al da siguiente con un
lavado inicial en solucin buffer,
8.- Incubacin en cmara hmeda agregando 2 gotas del reactivo de tincin (Linking
reagent) por 20 minutos,
9.- Posterior a un nuevo lavado con solucin buffer, se coloc la laminilla nuevamente
en cmara hmeda agregando 2 gotas del revelador (Labelling reagent) dejando
reposar por 20 minutos ms y tiendo finalmente por hematoxilina de Harris durante 5
minutos.
27
La observacin al microscopio de la reaccin colorimtrica se calific por

dos patlogos observadores de acuerdo a negativo si no exista tincin alguna de color
magenta en el tejido analizado y/o positivo, si exista tincin presente en el tejido,
realizndose una subcategorizacin de acuerdo al porcentaje de intensidad de la
tincin: negativo (-), leve (+), moderado (++) y alto (+++).
Todas las laminillas fueron revisadas por el mismo investigador. El investigador

fue cegado al grupo del cual procedan las laminillas. Un segundo evaluador revis los
resultados de las observaciones de las laminillas. En caso de discrepancia en las
observaciones entre los dos evaluadores, se lleg a un acuerdo posterior a un anlisis de
las laminillas y de los criterios utilizados para calificar los cambios.
De la informacin obtenida se calific como variable dependiente a los cambios

morfolgicos de HAP (hiperplasia e hipertrofia de vasos sanguneos y cambios
plexognicos pulmonares) segn la gradificacin de Heat-Edwards y como variable
independiente al resultado de la tincin de inmunohistoqumica para el tejido pulmonar
y vasos arteriales pulmonares (Colgena tipo IV, Laminina, Fibronectina, CD-34 IgG,
IgM, Tenascina-C y Serotonina). Otras variables evaluadas fueron: cambios
morfolgicos agregados en el parnquima pulmonar, desarrollo de procesos infecciosos,
trombosis, hemorragia pulmonar, infartos pulmonares del parnquima y arterias
pulmonares.
3. Anlisis estadstico:
El anlisis de los resultados fue realizado mediante el programa SPSS 8.0
para Windows (SPSS Inc, 1997), las grficas se realizaron mediante el programa Harvard
Graphics 4.0.1 para Windows (Software Publishing Corporation 1991-1995).
Para la comparacin de las diferencias entre proporciones de los grupos se utiliz

la X 2 y prueba exacta de Fisher cuando fue necesario. La comparacin entre las
diferencias de los porcentajes de positividad para la inmunohistoqumica entre pacientes
con HAP los grupos de comparacin se realiz mediante la prueba de U de Mann-
Whitney. Se realiz un clculo de las prevalencias entre los diferentes auto-anticuerpos
determinados por la inmunohistoqumica. Un valor de p 0.05 fue considerado como
significativo para las diferencias observadas entre los grupos.
28
Se utiliz un coeficiente de correlacin de Spearman (rho) de una cola para

evaluar la correlacin entre el grado de Heat-Edwards y el grado de positividad para
inmunohistoqumica de cada uno de los antgenos evaluados. Una correlacin perfecta
es igual 1, excelente entre .8 a.99, buena de 0.7 a 0.79, regular 0.5 a 0.69, pobre 0.3 a 0.49 y
mala 0.0 a 0.29. Estos mismos valores fueron usados en su forma negativa para el
caso de correlacin negativa.
29
RESULTADOS:
En la tabla 1 y figura 7, se puede apreciar que del total de pacientes con LES
(n=18) predomin el sexo femenino 5:1, la edad promedio fue de 3614 aos (DE). Se
realiz el diagnstico de Hipertensin Arterial Pulmonar (HAP) por el clnico previo a la
muerte del paciente solo en 2 casos (18%), dentro de la sintomatologa referida en el
expediente clnico se encontr que las cuatro principales manifestaciones clnicas fueron
disnea en 9 casos (50%), seguido de la ortopnea, tos e insuficiencia cardiaca en 6 casos
(34%), respectivamente.
Por otra parte, el desarrollo de neumona se sospech por el clnico en el
50% de los casos con LES, donde se encontraron 4 procesos neumnicos por hongos
(22%). Los casos con LES + HAP fueron 11, de ellos los sntomas ms frecuentemente
encontrados fueron la disnea en 8 casos (73%), seguidos de la ortopnea e insuficiencia
cardiaca en 6 casos cada uno (55%).
Tabla 1.Caractersticas de los pacientes estudiados
30
En la Tabla 2 y figura 7, se aprecian las principales caractersticas del

tejido de autopsia en los casos analizados, donde se puede observar que los pulmones
de los casos con LES que desarrollaron HAP fueron relativamente ms ligeros (805
257 gr.) en comparacin de los casos con LES que no desarrollaron HAP (1026
592 gr.), pero no existi una diferencia estadsticamente significativa a este respecto.
31
En cuanto a las caractersticas macroscpicas de los pulmones, en los casos con

LES que desarrollaron HAP se encontr que la mayora eran rojizos (6 casos, 55%) y de
consistencia blanda (7 casos, 64%), microscpicamente se corrobor la presencia de algn
proceso infeccioso neumnico en 11 casos de 18 con LES, de los cuales 7 casos (64%)
correspondan a aquellos que desarrollaron HAP.
Tabla 2. Principales caractersticas pulmonares en los pacientes estudiados
32
En la Tabla 3 y figura 8, se aprecian los casos con LES que desarrollaron HAP,
segn la gradificacin de Heat-Edwards. De 11 casos con datos histolgicos de
HAP, 3 casos (27%) correspondan al grado I constituido por cambios mnimos de
hipertrofia media de las arterias y muscularizacin de arteriolas, 2 casos (18%) con
cambios de proliferacin de la ntima de arterias pulmonares (grado II), 3 casos (27%)
tenan cambios de proliferacin concntrica de la ntima de arterias y fibrosis laminar en
"hojas de cebolla" (grado III) y 3 casos (27%) tenan dilatacin de pequeas arterias con
lesiones plexiformes (grado IV), no hubo casos con lesiones angiomatoides o arteritis
Necrotizante (grados V-VI).
33
34
En la tabla 4 y figura 9, se aprecia el resultado de la aplicacin de la

inmunohistoqumica para el tejido pulmonar estudiado, donde se aprecia una mayor
positividad para colgena IV en aquellos casos de LES + HAP (11 casos, 100% ) y al
comparar los casos con HAP con los pulmones de los controles sin LES se encontr una
diferencia estadsticamente significativa (p=0.008), para el caso de la laminina no hubo
diferencias para la positividad entre los casos de LES con HAP y sin HAP, sin embargo; al
comparar los casos con LES + HAP contra pulmones de los controles sin LES se
encontr una diferencia estadsticamente significativa (p=0.012) y con un valor de razn
de momios (OR) protector de 0.06; por ltimo, aunque para los casos con LES + HAP se
encontr una alta positividad para Tenascina-C en 9 casos (82%), no existi una
diferencias estadsticamente significativa con los casos de LES sin HAP, sin embargo; al
comparar stos casos con los controles sin LES, se encontr una diferencia estadsticamente
significativa (p=0. 012) y con un valor de razn de momios (OR) no protector de 15.75.
35
Hipertensin Arterial Pulmona en Lupus
En la tabla 5 y figuras 10a/10b, se aprecia la comparacin en la reactividad

intersticial entre los casos de LES estudiados comparando los casos con HAP y aquellos que
no la desarrollaron, donde observamos que hubo una mayor positividad leve (+) y moderada
en los casos con HAP para Tenascina-C, Colgena IV, Fibronectina, CD-34, IgG e IgM.
Sin embargo, no existi una diferencia estadsticamente significativa en todos ellos.
36
37
38
En la tabla 6 y figuras 11a/11b, se aprecia la comparacin en la

reactividad intersticial entre los casos de LES con HAP y los controles sin LES, donde
observamos que para la Tenascina-C hubo una mayor positividad moderada (++)
y alta (+++) en los casos con HAP en comparacin con los controles sin LES
(p=0.001), para la Fibronectina hubo una mayor positividad leve (+) en los casos con
HAP en comparacin con los controles sanos (p=0.001), para la Colgena IV hubo una
mayor positividad moderada (++) y alta (+++) en los casos con HAP en comparacin
con los controles sanos (p=0.002), para la Serotonina hubo una mayor positividad leve
(+) en los casos con HAP en comparacin con los controles sin LES (p=0.038) y para la
Laminina de forma contraria existi una mayor positividad leve (+) y moderada (+) en los
controles sin LES (p=0. 042).
39
40
En la tabla 7 y figura 12, se aprecia el resultado de la aplicacin de la

inmunohistoqumica en las arterias del tejido pulmonar estudiado, donde se aprecia una
positividad en 1 caso para la Laminina en aquellos casos de LES con HAP (9%) y al
comparar los casos con los controles sin LES donde hubo una mayor positividad
(78%) se encontr una significancia estadstica (p=0.003) con un valor de razn de
momios (OR) protector de 0.03, para la Tenascina-C se encontr una positividad en 9
(82%) casos con HAP en comparacin de 1 caso ( 11% ) de los controles sin LES (p=0.003)
y con un valor de razn de momios (OR) no protector de 36.00 y para la Serotonina se
encontr una positividad en 8 casos (73%) con HAP en comparacin de 2 (22%) casos
de los controles sin LES (p=0.035) con valor de razn de momios (OR) no protector de 9.33.
41
Figura 12. Positividad arterial para los reactivos estudiados

(LES CON HAP, LES sin HAP y controles sin LES)
En la tabla 8 y figuras 13a/13b, se aprecia la comparacin en la reactividad en las

arterias pulmonares entre los casos de LES con HAP y los controles sanos, donde
observamos que para la Tenascina-C hubo una mayor positividad moderada (++) y alta
(+++) en los casos con HAP en comparacin con los controles sin LES (p=0.025). En el
resto de los reactantes no se encontr una diferencia estadsticamente significativa.
42
43
44
En la tabla 9 y figuras 14a/14b, se aprecia la comparacin en la reactividad

intersticial entre los casos de LES con HAP y los controles sin LES, donde observamos que
para la Tenascina-C hubo una mayor positividad moderada (++) y alta (+++) en los
casos con HAP en comparacin con los controles sin LES (p=0.001), para la Fibronectina
hubo una mayor positividad leve (+) y moderada (++) en los casos con HAP en
comparacin con los controles sin LES (p=0. 001), para la Colgena IV hubo una mayor
positividad leve (+) en los controles sin LES (p=0.002), para la Serotonina hubo una
mayor positividad leve (+) y moderada (++) en los casos con HAP en comparacin a los
controles sin LES (p=0.038) y para la Laminina de forma contraria existi una mayor
positividad leve (+), moderada (++) y alta (+++) en los controles sin LES en
comparacin de los casos de LES con HAP (p=0. 042).
45
46
En la tabla 10 se observa el ndice de correlacin de Spearman (rho) entre los

casos con LES, la positividad a los inmunoreactantes y el grado de Heat-Edwrads para los
casos que tenan HAP. Podemos observar como para la positividad de la colgena IV a nivel
arterial se encontr una significancia estadstica (p=0.02), as como a nivel intersticial donde
esta significancia fue limtrofe (p=0.06).Por otra parte, la Tenascina-C demostr tambin
una significancia estadstica (p=0. 03).
Tabla 10.- Correlacin entre el grado de Hipertensin Arterial Pulmonar segn la

gradificacin de Heat-Edwards y el grado de la tincin intersticial de los diferentes
reactivos entre los casos con Lupus Eritematoso Estudiado.
47
DISCUS I N:
En nuestro estudio, se observ que un 62% de las autopsias de pacientes con

Lupus Eritematoso Sistmico, presentaron datos histolgicos de Hipertensin Arterial
Pulmonar, los cuales eran de leves a moderados (grados I-IV de Heat-Edwards) (Anexo IV
Fig. 15). Lo anterior, contrasta con estudios previos donde la presencia de HAP en LES se
35,
sugiere como rara. As por ejemplo, Quismorio encontr slo 2 casos (0.5%) con HAP
en ms de 400 pacientes estudiados, en cambio; Perez y Kramer 28, observaron solo un 9% de
casos en un estudio de seguimiento a 3 aos. Cabe mencionar, que en estos estudios fue detectada
la presencia de HAP en pacientes vivos usando estudios clnicos invasivos, por el contrario;
nuestro estudio demostr que la prevalencia obtenida en autopsias puede ser mayor en base a
diferentes factores, que incluyen: a) una bsqueda intencionada de las lesiones de las arterias
pulmonares, b) una mayor sensibilidad de los estudios histopatolgicos y c) que los
pacientes de autopsias sufrieron una mayor severidad de la enfermedad de fondo, lo cual;
puede influir en una mayor frecuencia de involucramiento a diversos rganos.
De los 18 casos estudiados con LES un 28% presentaban solo cambios mnimos de
proliferacin de las capas ntima y media de las arterias, con una discreta reaccin linfocitaria
sin llegar a una vasculitis definida. Estos cambios en el endotelio, tnicas media e ntima
aparecen como normales en la histologa en los grados I-II de Heat-Edwards, excepto por un
ligero engrosamiento de la media en la histologa y su presencia ya ha sido descrita con
anterioridad36. En nuestros casos, hasta un 34% presentaron cambios de proliferacin
concntrica de la ntima acompaadas o no de lesiones plexiformes (Ver Anexo IV: Fig. 15 ).
Algunos autores han reportado, que la presencia de la reaccin inflamatoria observada

en las arterias pulmonares sugiere fuertemente que ciertas citocinas y factores de
crecimiento celulares liberados por las clulas inflamatorias influyen directamente en el
desarrollo de las lesiones plexiformes (Grado IV de Heat-Edwards) 37.
En los pacientes con LES + HAP se observaron diferencias estadsticamente

significativas en la frecuencia Colgena IV y Tenascina-C en el intersticio pulmonar en
comparacin con los controles sin LES, este aumento en Colgena IV y Tenascina-C puede
explicar algunas de las diferencias subyacentes en la patognesis de la afeccin pulmonar de
estos pacientes ya que la Tenascina-C se ha asociado con la proliferacin celular de
fibroblastos, colgena y otros componentes de la matriz extracelular. En las arterias
pulmonares de los pacientes con LES + HAP se observ una mayor frecuencia de positividad
48
para Tenascina-C y Serotonina que en los controles sin LES, alcanzando una
significancia estadstica. La Tenascina-C puede funcionar como un disparador de la
proliferacin endotelial en pacientes con enfermedad arterial pulmonar, mientras que la
Serotonina puede intervenir en algunos fenmenos de vasoconstriccin que son
frecuentemente observados en estos pacientes.
En el parnquima pulmonar nosotros observamos una mayor frecuencia de tincin de

inmunohistoqumica positiva para Tenascina-C en los casos de HAP asociada a LES en
comparacin con los controles con LES sin HAP. A pesar de esta mayor frecuencia no se
observ una diferencia estadstica, la cual puede ser explicada por el pequeo tamao de
muestra evaluado, que requerira grandes diferencias para ser reflejadas en el valor de p.
As mismo, la presencia de Tenascina-C en arterias pulmonares tambin fue observada

ms frecuentemente en los casos de HAP asociada a LES que en los controles de LES sin HAP,
pero tampoco fue observada una diferencia estadstica.
Aunque no se alcanz diferencia estadstica en la frecuencia de positividad para estos

inmunoreactantes, la intensidad de la inmunohistoqumica fue estadsticamente diferente
entre los pacientes con HAP asociada a LES y los pacientes con LES sin HAP. Hasta un
64% de los pacientes con LES + HAP tuvieron de moderada a alta positividad, para
Tenascina-C en las paredes de las arterias pulmonares, en tanto que solo el 14% de los
pacientes con LES sin HAP tuvieron esta intensidad de tincin (p=0.025). Esto sugiere que
ms que la presencia o ausencia de Tenascina-C, es el grado en la produccin de sta la que
podra propiciar los cambios histolgicos de HAP. En el anlisis de correlacin de Spearman,
los pacientes con mayor grado de HAP tuvieron un mayor grado de depsito de
Colgena IV (rho = 0.47, p=0.02) y Tenascina-C (rho=0.43, p=0.03) respectivamente en las
arterias.
La Colgena IV es un constituyente de la matriz extracelular de la mayora de los

13
rganos y ocupan entre un 15-20% del peso seco del pulmn . En los vasos sanguneos, la
colgena IV fundamentalmente se encuentra en membranas basales y puede ser producida
por algunos fibroblastos. A este respecto en nuestro estudio, encontramos una positividad
intersticial para la Colgena IV en el 94% de los casos con LES, en comparacin de un
89% de los controles sin LES (p<0.05), lo que sugiere una proliferacin de Colgena IV
49
intersticial pulmonar en pacientes con LES asociada a HAP ( Ver Anexo IV: Figura 16 ).
En el anlisis de correlacin de Spearman, los pacientes con mayor grado de HAP tuvieron
un mayor grado de depsito de Colgena IV representado por un valor limtrofe de la rho
de Spearman = 0.38, p=0.06.
En cuanto a otros componentes de la matriz extracelular en los pulmones, se

observ una positividad variable para Fibronectina y Laminina 36-37. Ambas substancias, son
importantes glicoprotenas constituyentes de las membranas basales, promueven el
desarrollo, diferenciacin y movilidad de una gran variedad de clulas incluyendo las
clulas endoteliales, constituyendo un estmulo para que dichas clulas formen luces
38-39
capilares . Tambin se ha demostrado que estas substancias promueven la invasin
39-41.
tisular y metstasis en tumores, as como la produccin de Colgena IV En nuestro
estudio, encontramos un aumento en la frecuencia de positividad en el intersticio pulmonar
y en las arterias pulmonares de los casos con LES + HAP, que puede hablar de un estmulo
para la produccin de esta substancia que lleva a la proliferacin vascular en pacientes con
LES (Ver Anexo IV: Fig. 17).
Para el caso de la fibronectina observamos una mayor positividad a nivel

intersticial en los casos de LES + HAP con significancia estadstica, en comparacin de los
controles sin LES (p<0.05). La fibronectina es una protena de importancia en la
formacin de fibrillas en el intersticio pulmonar, promueve la adhesin, migracin,
cito-diferenciacin, fagocitosis y crecimiento celular. Se encuentra principalmente en
membranas basales, alrededor de clulas de msculo liso y alvolos. Esto explica
nuestros hallazgos que indican positividad tanto en vasos sanguneos como en
intersticio pulmonar (Ver Anexo IV: Fig. 1 8 ).
En el caso de la Serotonina, esta fue observada principalmente en los casos de LES

con HAP en comparacin con los controles sin LES (73%, p=0.035). La Serotonina se asocia
a mecanismos de migracin celular y vasoconstriccin, es liberada por ciertas clulas
inflamatorias (macrfagos). En un estudio realizado en pacientes con Hipertensin Pulmonar
Primaria (HPP) se demostr una mayor frecuencia de la variedad LL del receptor para Serotonina
a nivel pulmonar, as como una mayor proliferacin de las clulas musculares lisas arteriales
en comparacin de los controles 42. Lo anterior puede compararse con nuestros hallazgos en
los casos de LES + HAP, pudiendo contribuir a explicar los cambios histopatolgicos arteriales
en estos pacientes (ver Anexo IV: Fig. 19).
50
El hallazgo ms interesante de nuestro estudio, es el incremento de la expresin de

Tenascina-C en pacientes con HAP asociada al LES. La Tenascina-C, es una
glicoprotena de la matriz extracelular asociada a la proliferacin celular durante la
embriognesis y algunos procesos patolgicos. En un estudio realizado en ratas se observ
una amplia distribucin de esta substancia en la tnica media y subendotelio de vasos
sanguneos que fueron sometidos a un estress hipertensivo continuo y la expresin de
43.
esta substancia fue asociada al desarrollo de cambios de hiperplasia e hipertrofia vascular
Esta Tenascina-C, podra estar implicada en la gnesis de la HAP en LES. Nosotros encontramos
que hasta un 82 % de los pacientes con LES + HAP tuvieron Tenascina-C positiva,
comparada con solo el 43% de pacientes con LES sin HAP. Cuando comparamos la
intensidad de la tincin para Tenascina-C en los pacientes con HAP asociada a LES
tuvieron una mayor intensidad en comparacin con el grupo de LES sin HAP. Esta
intensidad para Tenascina-C correlacion tambin con el grado de HAP por Heat-Edwartds
observndose que en aquellos pacientes con mayor grado de intensidad tenan un mayor grado
de HAP (ver Anexo IV: Fig. 20).
En un estudio realizado en ratas, la Tenascina-C fue relacionada a la remodelacin

44.
muscular cardiaca Otro estudio, tambin realizado en ratas demostr la induccin de la
sntesis de Tenascina-C por las arterias siguiendo a los cambios en el fenotipo de las clulas
musculares 45. En nios con defectos cardiacos congnitos quienes desarrollaron HAP, se ha
sugerido que la Tenascina-C a nivel de las arterias funciona como un modulador del
factor de crecimiento vascular epidrmico, ligado a la proliferacin de las clulas musculares
lisas de la ntima adems, en presencia de fibronectina se facilita un gradiente para la migracin
de las clulas musculares de la media a la ntima 46. Algunos autores han propuesto que la
Tenascina-C interviene en la activacin de los fibroblastos, generando stress mecnico sobre
la pared del vaso arterial, lo que originara una cascada de produccin de componentes de la
47
matriz extracelular . Mltiple evidencia existe de que la Tenascina-C se incrementa por
diversos factores entre los cuales destaca el stress mecnico 48-49.
51
Nosotros proponemos el siguiente esquema para explicar el papel de la Tenascina-C

en la HAP secundaria al LES:
El presente estudio tiene diversas limitaciones: resalta que los casos con LES fueron
ms jvenes (3614 aos) en comparacin de los controles sin LES (5415 aos). Esta
diferencia de edad podra incrementar la expresin de algunas substancias en los sujetos
ms viejos, lo cual podra disminuir las diferencias observadas en nuestro estudio,
desgraciadamente el pequeo tamao de muestra impide un ajuste estadstico por edad,
por lo que los resultados debern de ser considerados a la luz de esta limitacin.
Otra limitante es la posibilidad de que importantes antgenos se hubieran perdido

durante el procesamiento; sin embargo, esto no constituira un sesgo de evaluacin
diferencial ya que tanto en los pacientes con Lupus + HAP como los de Lupus sin HAP o
los controles sin enfermedad autoinmune, estos antgenos tendran la misma probabilidad de
perderse y los riesgos permaneceran siendo los mismos.
Por otro lado, el investigador que evalu la positividad de los reactantes de la

inmuhistoqumica se encontraba ciego a los valores de la clasificacin de Heat-Edwards,
esto disminuye los sesgos en la evaluacin de las variables independientes y es una
fortaleza de nuestro estudio.
52
Nuestro trabajo da algunas aportaciones importantes que deben de tomarse en

cuenta; 1) Pocos estudios han abordado las caractersticas inmunohistoqumicas de los
pacientes con LES que desarrollaron HAP, 2)En su mayora, los estudios adolecen de
controles y se limitan a series de casos, 3)Este estudio posibilita hacer comparaciones
con controles con LES sin hipertensin pulmonar y controles sin enfermedad
autoinmune, 4)El estudio sugiere que la Tenascina-C juega un papel importante en la
gnesis de la hipertensin arterial pulmonar en el Lupus Eritematoso Sistmico, 5)Nuevos
estudios incluyendo modelos experimentales podrn ser realizados en base a nuestros
resultados para investigar el papel de la Tenascina-C en la gnesis de la Hipertensin
Arterial Pulmonar en estos pacientes, 6)Nuevas aportaciones en otros centros hospitalarios
son requeridas para confirmar los datos observados en nuestro estudio.
Por ltimo cabe mencionar que, el presente estudio es el primero en su tipo que
evala en un diseo ms slido la presencia de reactantes de inmunohistoqumica en
pacientes con Lupus e Hipertensin Arterial Pulmonar comparado con controles. El
presente trabajo, permite considerar que la Tenascina-C, que no ha sido anteriormente
involucrada en la gnesis de la hipertensin pulmonar en LES, puede tener un papel
importante en el desarrollo y progresin de esta Hipertensin Arterial Pulmonar. Otros
estudios derivados de la medicin en vivo de esta sustancia con seguimiento de
pacientes, pueden ser tiles para evaluar la validez de nuestros hallazgos.
53
CONCLUSIONES:
1. Se observaron datos histolgicos de Hipertensin Arterial Pulmonar (HAP) en 62%

de las autopsias de pacientes con lupus eritematoso sistmico.
2. La presencia de Tenascina-C en el parnquima pulmonar fue ms frecuente en los casos

de LES + HAP que en LES sin HAP aunque sin alcanzar diferencia estadstica.
3. A nivel intersticial los pacientes con LES + HAP presentaron una mayor frecuencia de
positividad para Colgena IV y Tenascina-C que para los controles sin enfermedad
autoinmune.
4. En las arterias pulmonares los pacientes con LES + HAP, se observ una mayor
frecuencia de positividad que los controles sin enfermedad autoinmune en Serotonina
y Tenascina-C.
5. Se observ, una diferencia estadsticamente significativa en la intensidad de positividad

para Tenascina-C en las arterias pulmonares de pacientes con HAP, en comparacin
con aquellos sin HAP.
6. Hasta un 64% de los pacientes con LES + HAP tuvieron de moderada a alta
positividad, comparado contra solo el 14% de los pacientes con LES sin HAP
(p=0.025).
7. Una correlacin estadsticamente significativa fue observada entre el grado de

Hipertensin Arterial Pulmonar (Heat - Edwards) y el grado de depsito de
Tenascina-C (rho= 0.43, p= 0.03) y para la Colgena IV (rho= 0.47, p=0.02) a nivel
arterial.
54
ANEXOS:
55
56
57
58
59
60
61
62
ANEXO IV: FOTOGRAFAS MICROSCPICAS:
63
64
65
66
BIBLIOGRAFA
1. Ramzi, S.C., Vinay, K. y Stanley, L.R. (1995) Transtornos de la inmunidad. En Patologa

Estructural y Funcional (pp. 191-269). New York: McGraw-Hill.
2. Kalunian, K.C. (1997). Definition, classification, activity and damage indices. En Lupus
Erythematosus (pp. 19-29). New York: Mosby inc.
3. Ward, M.M., Pyun, E. y Studenski, S. (1995). Long-term survival in systemic lupus

erythematosus: patient characteristics associated with poorer outcomes. Arthritis Rheum,
38,274-283.
4. Turner-Stokes, L. y Turner-Warwick, M. (1982). Intrathoracic manifestations of SLE. Clin

Rheum Dis, 8, 229-242.
5. Simonson, J.S., Schiller, N.B., Petri, M. y Hellmann, D.B. (1989). Pulmonary hypertension
in systemic lupus erythematosus, J Rheumatol, 16, 918-925.
6. Rubin, L.A., Urowitz, M.B. y Gladman, D.D. (1985). Mortality in systemic lupus
erythematosus: the bimodal pattern revisited. Q J Med , 55, 87-98.
7. Asherson, R.A. y Cervera, R. (1995). Review: Antiphospholipid Antibodies and the Lung.
J Rheumatol, 22, 62-66.
8. Perez, D. y Kramer, N. (1981). Pulmonary hypertension in systemic lupus erythematosus:

Report of four cases and review of literature. Semin Arthritis Rheum, 11, 177-181.
9. Asherson, R.A. y Oakley, C.M. (1986). Pulmonary hypertension and systemic lupus erythematosus. J
Rheumatol, 13, 1-5.
67
10. Asherson, R.A., Hackett, D., Gharavi, A.E., Harris, E.N., Kennedy, H.G. y Hughes, GR.
(1986). Pulmonary Hypertension in systemic lupus erythematosus a report of three cases. J.
Rheumatol, 13, 416-420.
11. Winslow, T.M., Ossipov, M.A., Fazio, G.P., Simonson, J.S., Redberg, R.F. y Schiller, NB.
(1995). Five-year follow-up study of the prevalence and progression of pulmonary
hypertension in systemic lupus erythematosus. Am Heart J, 129, 510-515.
12. Alpert, S.F., Irwin, S.R. y Dalen, E.J. Pulmonary Hypertension. (1981) Curr Prob Cardiol,
10, 5-39.
13. Cowan, K.N., Jones, P.L. y Rabinovitch, M. (2000). Elastase and matriz metalloproteinase
inhibitors induce regression, and tenascin-C antisense prevents progression of vascular
disease. J Clin Invest, 105, 21-34.
14. Asherson, R.A., Higenbottam, T.W., Dinh-Xuan, A.T., Khamashta, M.A. y Hughes, GR.
(1990). Pulmonary hypertension in a lupus clinic: experience with twenty-four patients. J
Rheumatol, 17, 1292-1298.
15. Asherson, R.A. (1990). Pulmonary hypertension in systemic lupus erythematosus. J

Rheumatol, 17, 414-415.
16. Rubin, L.J. (1993). Primary pulmonary hypertension. Chest, 104, 236-250.
17. Morse, J.H., Barst, R.J. y Fotino, M. (1992). Familial pulmonary hypertension:
inmunogenetic findings in four caucasian kindreds. Am Rev Respir Dis, 145, 787792.
18. Barst, R.J. y Loyd, J.E. (1998). Genetics and immunogenetic aspects of primary pulmonary
hypertension. Chest, 114, 231S-236S.
68
19. Rich, S., Kieras, K., Groves, B.M., Stobo, J.D., Brundage, B.H. (1986). Antinuclear
antibodies in primary pulmonary hypertension. J Am Coll Cardiol, 8, 1307-1311.
20. Morse, J.H., Barst, R.J., Fotino, M., Zhang, Y., Flaster, E., Charavi, A.E., Fritzler, M.J.,
Dominguez, M. y Angles-Cano, E. (1997). Primary pulmonary hypertension, Tissue
plasminogen activator antibodies, and HLA-DQ7. Am J Respir Crit Care Med, 155, 274-
278.
21. Barst, R.J., Flaster, E.R., Menon, A., Fotino, M. y Morse, J.H. (1992). Evidence for the
association of unexplained pulmonary hypertension in children with the major
histocompatibility complex. Circulation, 85, 249-258.
22. Morse, J.H., Barst, R.J., Itescu, S., Flaster, E.R., Sinha, G., Zhang, Y. y Fotino, M. (1996).
Primary pulmonary hypertension in HIV infection: an outcome determined by particular
HLA class II alleles. Am J Resp Crit Care Med, 153, 1299-1301.
23. Adel, G., Yanagisawa, M., Langleben, D., Michel, R.P., Levy, R., Shennib, H., Kimura, S.,
Masaki, T., Duguid, W.P. y Stewart, D.J. (1993). Expression of endothelin-1 in the lungs of
patients with pulmonary hypertension. N Engl J Med, 328, 1732-1739.
24. Gaine, S.P. y Rubin, L.J. (1998). Primary pulmonary hypertension. Lancet, 29,719725.
25. Taylor, C.R. y Kledzik, G. (1981). Inmunohistologic techniques in surgical pathology

aspectrum of "new" special stains. Hum Pathol, 12, 590.
26. Taylor, C.R. y Tandon A. (1994). Theorical and Practical aspects of the different
immunoperoxidase techniques. En Taylor y Cote (Eds), Immumomicroscopy: A tool
for the Surgical Pathologist. (pp 1-69). Los Angeles: W.B. Saunders company.
69
27. Rosai, J. (1996). Special Techniques in Surgical pathology. En Rosai J. (Ed.), Ackerman's
Surgical Pathology.1996. (pp 29-62). St. Louis Missouri: Mosby-Year Book Inc.
28. Signet Laboratories. (1994). Introduction Level 1-2 Peroxidase Anti-peroxidase (PAP)
Detection System (Manual). Rustcraft, Rd: Signet Laboratories.
29. Shi, SR., Cote, R.J. y Taylor, CR. (1997). Antigen retrieval immunohistochemistry: Past,
Present and Future. J Histochem Cytochem, 45, 327-343.
30. Wallner, K., Li, C., Shah, P.K., Fishbein, M.C., Forrester, J.S., Kaul, S. y Sharifi, B.G.
(1999). Tenascin-C is expressed in macrophage-rich human coronary atheroescierotic
plaque. Circulation, 99, 1284-1289.
31. Kostianovsky, M., Greco, M.A., Cangiarella, J. y Zagzag, D. (1997). Tenascin-C expression
in ultrastructurally defined angiogenic and vasculogenic lesions. Ultrastruct Pathol, 21,
537-544.
32. Zagzag, D., Friedlander, D.R., Miller, D.C., Dosik, J., Cangiarella, J., Kostianovsky, M.,
Cohen, H., Grumet, M. y Greco, M.A. (1995). Tenascin expression in astrocytomas
correlates with angiogenesis. Cancer Res, 55, 907-914.
33. Gonzalez-Lopez, L., Gamez-Nava, J.I., Cardona-Munoz, E.G., Blanco-Turbay, R., Suarez-
Almazor, M.E. y Ramos-Remus, C. (1997). Impact of Pulmonary Hypertension(PH) on
patients with systemic lupus erithemathosus(SLE) compared with controls. Results of a 3.5
year prospective cohort. Arthritis Rheum, 40, S106.
34. Tan, E.M., Cohen, A.S., Fries, J.F., Masi, A.T., McShane, D.J., Rothfield, N.F., Schaller,
J.G., Talal, N. y Winchester, R.J. (1982). Special article: The 1982 revised criteria for
the classification of systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum, 25, 1271-1277.
70
35. Quismorio, F.P., Sharma, 0., Koss, M., Boylen, T., Edmiston, A.W. y Thornton, P.J.
(1984). Immunoppathologic and clinical studies in pulmonary hypertension associated
with systemic lupus erythematosus. Semin. Arthritis Rheum, 13, 349-359.
36. Kleinman, H.K., Cannon, F.B., Laurie, G.W., Hassell, J.R., Aumailley, M., Terranova, V.P.,
Martin, G.R. y DuBois-Dalcq, M. (1985). Biological activities of Laminin. J Cell
Biochem, 27, 317-325.
37. Kubota, Y., Kleiman, H.K., Martin, G.R. y Lawley, T.J. (1988). Role of laminin and
basement membrane in the differentiation of human endothelial cells into capillary-like
structures. J Cell Biol, 107, 1589-1598.
38. Fishman, A.P. (1998). Etiology and pathogenesis of primary pulmonary hypertension: a
perspective. Chest, 114, 242S-247S.
39. Tuder, R.M., Groves, B., Badesch, D.B. y Voelkel, N.F. (1998). Exuberant endotelial cell
growth and elements of inflamation are present in plexiform lesions of pulmonary
hipertension. Am J Pathol, 144, 275-285.
40. Terranova, V.P., Williams, J.E., Liotta, L.A. y Martin, G.R. (1984). Modulation of the
metastasic activity of melanoma cells by laminin and fibronectin. Science, 226, 982985.
41. Kanemoto, T., Reich, R. y Royce, L. (1990). Identification of an aminoacid sequence from
the laminin chain which stimulates metastasis formation and collagenase IV
production by melanoma cells. Proc Natl Acad Sci, 87, 2279-2283.
42. Rabinovitch, M. (2001). Linking a serotonin transporter polymorphism to vascular

smooth muscle proliferation in patients with primary pulmonary hipertension. J Clin
Invest, 108, 1109-1111.
71
43. Mackie, E.J., Scott-Burden, T., Hahn, A.W., Kern, F., Bernhardt, J., Regenass, S., Weller,
A., Bhler, F.R. (1992). Expresion of Tenascin by vascular smooth muscle cells. Ain J Paths
141,377-388.
44. Yamamoto, K., Dang, Q.N., Kennedy, S.P., Osathanondh, R., Kelly, R.A. y Lee, R.T.
(1999).Induction of Tenascin-C in Cardiac Myocytes by Mechanical Deformation. J Biol
Chem, 274, 21840-21846.
45. Hedin, U., Holm, J., Hansson, G.K. (1991). Induction of tenascin in rat arterial injury.
Relationship to altered smooth muscle cell phenotype. Am J Pathol, 139, 649-656.
46. Jones, P.L., Cowan, K.N. y Rabinovitch, M. (1997). Tenascin-C: Proliferation and
subendothelial fibronectin in progressive pulmonary vascular disease. Am J Pathol,
150,1349-1360.
47. Chiquet-Ehrismann, R., Tannheimer, M., Koch, M., Brunner, A., Spring, J., Martin, D.,
Baumgartner, S. y Chiquet, M. (1994). Tenascin-C expression by fibroblasts is
elevated in stressed collagen gels. J Cell Biol, 127, 2093-2101.
48. Mackie, E.J., Scott-Burden, T. y Hahn, F.K. (1992). Expression of Tenascin by vascular
smooth muscle cells. Am J Pathol, 141, 377-388.
49. Jones, P.L. y Rabinovitch, M. (1996). Tenascin-C is induced with progressive pulmonary
vascular disease in rats and is functionally related to increased smooth muscle cell
proliferation. Circ Res, 79, 1131-1142.
72

Alteraciones Morfologicas Jose Manuel Ornelas Aguirre

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Hipertensin Arterial Pulmonar en Lupus

Tesis para obtener el grado de:

Colima, Col., a 30 de Julio del 2002

Guadalajara, Jalisco a 10 de Julio del 2002.

C. Dr. Benjamn Trujillo

Por medio de la presente, le informo que el mdico especialista Jos Manuel

Investigador asociado "D"

Unidad de Investigacin en Epidemiologa Clnica.IMSS

"ALTERACIONES MORFOLGICAS E INMUNOHISTOQUMICAS

Tesis para obtener el grado de:

Maestro en Ciencias Mdicas

Mdico Patlogo Jos Manuel Ornelas Aguirre.

M. en C. Jorge Ivn Gamez Nava (Clnico)

Colima, Col. A 30 de Julio del 2002.

M. en C. Jorge Ivn Gamez Nava

Muy especialmente a quienes viven entregados a la investigacin cientfica en el Instituto

De manera muy especial a mis profesores en el departamento de Patologa del Hospital de

M. en C. Laura del Carmen Gonzlez Lpez

Respetuosamente a mis profesores en el Centro Universitario de Investigaciones Biomdicas

D. en C. Benjamn Trujillo Hernndez, M. en C. Cuauhtmoc Acoltzin Vidal, M. en C.

Un agradecimiento muy especial a quienes colaboraron de forma importante en la tcnica de

Tec. Hist. Gabriela Blancas

proporcionado por el Fondo de Fomento a la Investigacin Cientfica (FOFOI) del IMSS,

Pregunta de Investigacin e hiptesis.......................................................................................................23

Objetivo general y particulares .................................................................................................................. 23

Material y mtodos ......................................................................................................................................24

NDICE DE CUADROS Y FIGURAS:

Cuadro 1. Constituyentes de la matriz extracelular del parnquima pulmonar...13

Cuadro 2. Principales causas del desarrollo de la Hipertensin Arterial Pulmonar..14

Figura 7. Principales caractersticas pulmonares en los casos de LES/HAP estudiados.. 33

Figura 8. Grado de Hipertensin Arterial Pulmonar segn Heat-Edwards.34

Tabla 4. Caractersticas de la inmunohistoqumica en el intersticio del tejido pulmonar

Figura 9. Positividad intersticial para los reactivos estudiado...36

Figura 10. Grados de positividad intersticial en la inmunohistoqumica (a/b)38

Figura 11. Grados de positividad intersticial en la inmunohistoqumica. (a/b)...40

Figura 12. Positividad arterial para los reactivos estudiados.42

Tabla 8. Comparacin del nivel de tincin en el intersticio del tejido pulmonar de

Figura 13. Grados de positividad arterial en la inmunohistoqumica(a/b)44

Figura 14. Grados de positividad arterial en la inmunohistoqumica.(a/b) 46

Anexo I. Criterios revisados para la clasificacin de Lupus Eritematoso Sistmico...55

Anexo II. Clasificacin de Heat-Edwards para la arteriopata pulmonar plexognica..56

Anexo III. Hoja de recoleccin de datos57

Anexo IV. Fotografas microscpicas............................63

APP; Arteriopata plexognica pulmonar

FCVE: Factor de Crecimiento Vascular Endotelial

HAP; Hipertensin arterial sistmica

HPP; Hipertensin arterial primaria

gr.; Peso en gr.

LES; Lupus eritematoso sistmico OR: Odds ratio (razn de momios)

(r); Prueba de correlacin de Sperman (rho)

X2; prueba de Ji cuadrada

INTRODUCCIN: Pocos estudios han evaluado las caractersticas inmunohistoqumicas de la

OBJETIVO: Evaluar las caractersticas inmunohistoqumicas de la HAP-LES.

MTODOS: En un estudio de casos y controles, seleccionamos de las autopsies de 1984 al

DISCUSIN: La Tenascina-C puede jugar un papel importante en la patognesis de la HAP

INTRODUCTION: Few studies have evaluated the immunohistochemical characteristics of the

El Lupus Eritematoso Sistmico (LES) es una enfermedad multisistmica del tejido

La inquietud por la realizacin de esta tesis se dirigi a dilucidar las caractersticas

El presente estudio se realiz en tejidos procedentes de autopsias con diagnstico de

1. Generalidades del Lupus Eritematoso Sistmico:

Dentro de las enfermedades difusas del tejido conectivo, el Lupus Eritematoso

El comienzo puede ser agudo, siendo generalmente una enfermedad crnica,

2. Hipertensin Arterial Pulmonar en Lupus Eritematoso Sistmico

Diversos estudios demuestran que la presencia de afeccin del sistema