INGENIERA EN MEDIO AMBIENTE

Microbiologa Ambiental

Producto Acadmico N4

MUESTREO MICROBIOLOGICO DEL AIRE, CULTIVO Y CONTEO DE BACTERIAS Y HONGOS

Integrantes: Kelly Chiluisa, Johan Pallo, Ronaldo Prez, Andrea Pilco y Judith Serrano

INFORMACIN DEL PRODUCTO RESUMEN

Fecha de entrega: El propsito de este estudio fue determinar los diferentes tipos y la concentracin de los agentes
Jueves 13 de Julio del 2017 aerobiolgicos presentes en dos lugares de la Universidad Tcnica de Cotopaxi, en el establo y en la
copiadora. En este anlisis microbiolgico del aire se emple un mtodo de sedimentacin usando agar
nutritivo, y se registraron datos de tiempo, temperatura, altura y ubicacin por GPS de cada toma de
Palabras clave:
muestras, se recolectaron 2 muestras de cada lugar para el cultivo de microorganismos presentes en el
Agentes aerobiologicos, agar nutritivo,
aire.
Bacterias, Hongos, Unidad Formadora
de Colonias. En este estudio pudimos identificar las UFC/m3 de bacterias y de hongos que presentan los lugares donde
fueron tomadas las muestras. Se identific varios tipos de bacterias y hongos, se apreci una mayor
diversidad en las formas fngicas. Las colonias fngicas fueron las predominantes ante las bacterias, ya
que estas no presentaron mucha variacin de colonias ni en cantidad.

La presencia de hongos y bacterias en los dos lugares donde fueron tomadas las muestras, no son
significativas, segn la OMS, las 4 muestras, se encuentran en un nivel muy bajo de contaminacin de
hongos y de bacterias.

1. Introduccin 2. Marco terico

Los agentes aerobiologicos pueden ser transportados desde el exterior
hacia el interior de cualquier lugar por diferentes partculas presentes en el
aire, bien sea por medio de la ventilacin o de los visitantes. Estas
condiciones unidas a las temperaturas a las que se encuentran sometidas
ya sean altas o bajas, la contaminacin, y las actividades humanas,
favorecen la dispersin de microorganismos. Los microorganismos que se
encuentran en mayor cantidad en el aire son los hongos y las bacterias.
Segn el estudio de:
Max-Planck-Gesellschaft (2009) En cada metro cbico de aire flotan
entre 1.000 y 10.000 esporas de hongos. Cada inhalacin que realiza una
persona contiene entre 1 y 10 esporas, muchas de las cuales al entrar en
contacto con los pulmones pueden desencadenar alergias o
enfermedades.
Por otra parte las bacterias son capaces de vivir, en un medio adecuado,
sin la necesidad de un husped para completar su desarrollo. Segn:
Guillem Prats (2005) Las bacterias pueden resistir, durante aos
incluso, altas temperaturas, sequedad, falta de nutrientes, etc.,
recuperando su estado normal y capacidad infectiva al entrar en contacto
con un medio adecuado para su desarrollo.
El objetivo de este estudio es contar las unidades formadoras de
colonias o UFC presentes en cada placa. Se considera que cada colonia
que se desarrolla en el medio de cultivo despus de un cierto tiempo de
incubacin a la temperatura adecuada, proviene de un microorganismo o
de un agregado de ellos, ese microorganismo o microorganismos son
capaces de formar la colonia, es decir una UFC.
2.1. Descripcin de la tcnica del muestreo microbiolgico, cultivo
y conteo de bacterias y hongos en el aire.
La tcnica que utilizamos para realizar este estudio fue la recoleccin de
muestras en las placas de Petri, utilizando dos placas por cada lugar, y el
muestreo se lo realizo en dos lugares diferentes de la Universidad Tcnica
de Cotopaxi, como es un estudio de aire, utilizamos agar nutritivo para el
cultivo de los agentes aerobiologicos.
El agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina
para todo tipo de bacteria y hongo. Es muy til porque permanece slido
incluso a relativamente altas temperaturas. Adems, el crecimiento
bacteriano y fngico en este agar lo hace en la superficie, por lo que se
distinguen mejor las colonias pequeas.
Este es un medio de cultivo no selectivo, lo que significa que ah crecen
todo tipo de microorganismos, excepto los que necesitan condiciones
especiales. (Scribd 2014)
En este medio la pluripeptona y el extracto de carne constituyen la fuente
de carbono, nitrgeno y aportan nutrientes para el desarrollo bacteriano y
fngico. El agregado de cloruro de sodio mantiene el balance osmtico y
el agar es el agente solidificante. (Marimon Jos 2014)
Se realizaron 4 muestras, ests se incubaron en la estufa a 36 C en un
periodo de 48 horas despus de haber sido realizado el muestreo.
2

La estufa de Incubacin, es un equipo utilizado en los laboratorios, para 3.1. Ejemplo de un protocolo experimental que ya se haya realizado
incubar los medios de cultivo en un ambiente de temperatura controlados. con la tcnica que describi en la seccin 2.1
Utiliza una resistencia elctrica que genera calor al interior de una cmara
a manera de un horno. La temperatura generada es controlada por un 1. Preparar el Agar nutritivo.
termostato. La temperatura a la que se realice este proceso condiciona 2. Una vez que preparamos el agar, dejamos solidificarse en
crticamente la calidad del medio. las placas de Petri.
3. Realizamos el muestreo en dos diferentes lugares de la
Una vez que sacamos las placas de Petri de la estufa, pudimos reconocer a Universidad, en el establo y en la copiadora.
simple vista que el crecimiento predominante en variedad y cantidad fue 4. Dejar 15 minutos cada placa en el lugar donde va a realizar
de las colonias fngicas, por el contrario no se encontr gran variacin y el muestreo, tomar coordenadas de GPS y altura a la que se
cantidad en las colonias bacterianas. encuentra ubicada la placa.
5. Ubicar las 4 placas de Petri en la estufa a 36C durante 48
Luego de la incubacin de las cajas de Petri se realiz el conteo de horas.
colonias de bacterias y de hongos para determinar las unidades 6. Sacamos las placas de Petri de la estufa, procedemos al
formadoras de colonia sobre metro cbico de aire (UFC/m3). conteo y reconocimiento de las diferentes colonias de
bacterias y hongos.
Una vez determinado el nmero de colonias, y sabiendo el flujo de aire y 7. Una vez realizado el conteo de las colonias, procedemos a
el tiempo de muestreo que se ha aplicado, se puede calcular el nmero de calcular el nmero de unidades formadoras de colonias
unidades formadoras de colonias por metro cbico de aire, aplicando la UFC/m3, con la formula respectiva.
frmula siguiente: 8. Los resultados de la concentracin de UFC/m3 de hongos y
bacterias, nos dar a conocer los niveles de contaminacin,
NUFC/m3 = NC x 1000 / 30 x NU segn el documento de la OMS.
Siendo:
NC: nmero de colonias por placa
NU: nmero de unidades de tiempo empleadas en el muestreo 3.1.1. Tablas

Con esta frmula calculamos el UFC/m3 de bacterias y el UFC/m3 de Tabla 1 BACTERIAS

hongos, para poder determinar la concentracin microbiana presente en PLACA 1 MUESTRA DEL ESTABLO
los lugares donde se realiz el muestreo.
Coordenadas GPS X= 17M-0764227

La Organizacin Mundial de la Salud en el documento editado en 1993 Y= UTM 9889509

por la Comisin de las Comunidades Europeas, nos da a conocer los Tiempo Minutos 15
niveles de contaminacin de acuerdo a la concentracin de UFC/m3 de
Altura Metros 1.27
bacterias y hongos en el aire. Dependiendo de su concentracin nos dice
que el nivel de contaminacin puede ser: muy bajo, bajo, intermedia, alta UFC/m3 Muy bajo 24.44
y muy alta.
Tabla 2 BACTERIAS

PLACA 2 MUESTRA DEL ESTABLO

3. Materiales, mtodos y resultados Coordenadas GPS X= 17M-0764232

Y= UTM 9889506
Materiales:
Tiempo Minutos 15
Estufa de incubacin Altura Metros 1.29
Placas de Petri
UFC/m3 Muy bajo 20

Reactivos:
Tabla 3 BACTERIAS
Agar Nutritivo
Agua destilada PLACA 3 MUESTRA DE LA COPIADORA
Coordenadas GPS X= 17M-0764221
Mtodo utilizado: Como primer mtodo utilizamos el muestreo, se
Y= UTM 9889518
obtuvieron 4 muestras de dos diferentes lugares de la Universidad Tcnica
de Cotopaxi, otro mtodo utilizado fue el uso de Agar Nutritivo como Tiempo Minutos 15
medio de cultivo no selectivo, para el crecimiento de bacterias y hongos. Altura Metros 1.40

UFC/m3 Muy bajo 6.66

 ARAB ECONOMIC AND BUSINESS JOURNAL 00 (2014) 000000 3

3.1.2 Ilustraciones

Tabla 4 BACTERIAS En esta imagen podemos ver gran variedad y cantidad de formas
fngicas, por el contrario no hay gran variedad y cantidad de colonias de
PLACA 4 MUESTRA DE LA COPIADORA bacterias.
Coordenadas GPS X= 17M-0764220
Y= UTM 9889517

Tiempo Minutos 15

Altura Metros 1.40

UFC/m3 Muy bajo 13.33

Tabla 5 HONGOS Figura 1

Placa 1 Muestra del Establo
PLACA 1 MUESTRA DEL ESTABLO
Coordenadas GPS X= 17M-0764227 En esta imagen al igual que en la Figura 1, podemos distinguir la variedad
y la cantidad de colonias de hongos, en esta imagen podemos visualizar
Y= UTM 9889509
mejor las colonias de bacterias.
Tiempo Minutos 15

Altura Metros 1.27

UFC/m3 Muy bajo 8.88

Tabla 6 HONGOS

PLACA 2 MUESTRA DEL ESTABLO

Coordenadas GPS X= 17M-0764232 Figura 2
Placa 2 Muestra del Establo
Y= UTM 9889506

Tiempo Minutos 15 En esta imagen podemos observar que hay menos colonias de bacterias y
Altura Metros 1.29 de hongos, con relacin a las Figuras 1 y 2 que son tomadas las muestras
del establo y esta es de la copiadora.
UFC/m3 Muy bajo 13.33

Tabla 7 HONGOS

PLACA 3 MUESTRA DE LA COPIADORA

Coordenadas GPS X= 17M-0764221

Y= UTM 9889518

Tiempo Minutos 15
Figura 3
Altura Metros 1.40 Placa 3 Muestra de la Copiadora
UFC/m3 Muy bajo 13.33
En esta imagen podemos observar con ms claridad la cantidad de
colonias de bacterias y de hongos, sus diversas formas y variaciones. Esta
Tabla 8 HONGOS placa sigue teniendo menos colonias de bacterias y de hongos con relacin
a las placas del establo.
PLACA 4 MUESTRA DE LA COPIADORA
Coordenadas GPS X= 17M-0764220
Y= UTM 9889517

Tiempo Minutos 15

Altura Metros 1.40

UFC/m3 Muy bajo 20

Figura 4
Placa 4 Muestra de la Copiadora
4

3.2. Resultados del protocolo que se realiz en la seccin RESULTADOS HONGOS

PLACA 1: La muestra de la placa numero 1 fue tomada en la Universidad
RESULTADOSBACTERIAS Tcnica de Cotopaxi, en el establo, presenta 8,88 UFC/m3 de hongos.
PLACA 1: La muestra de la placa numero 1 fue tomada en la Universidad Segn el documento de la OMS, la concentracin de UFC/m3 de hongos
Tcnica de Cotopaxi, en el establo, presenta 24,44 UFC/m3 de bacterias. se encuentra en un nivel muy bajo de contaminacin ( <25UFC/m3 )
Segn el documento de la OMS, la concentracin de UFC/m3 de bacterias
se encuentra en un nivel muy bajo de contaminacin (<50UFC/m3 ) PLACA 1 MUESTRA DEL ESTABLO
Coordena X= 17M-0764227
PLACA 1 MUESTRA DEL ESTABLO das GPS
Y= UTM 9889509

Coordenadas X= 17M-0764227 Tiempo Minutos 15

GPS Y= UTM 9889509 Altura Metros 1.27
Tiempo Minutos 15
UFC/m3 Muy bajo 8.88
Altura Metros 1.27

UFC/m3 Muy bajo 24.44
PLACA 2: La muestra de la placa numero 2 fue tomada en la Universidad
Tcnica de Cotopaxi, en el establo, presenta 20 UFC/m3 de bacterias.
Segn el documento de la OMS, la concentracin de UFC/m3 de bacterias
se encuentra en un nivel muy bajo de contaminacin ( <50UFC/m3 )
PLACA 2: La muestra de la placa numero 2 fue tomada en la Universidad
Tcnica de Cotopaxi, en el establo, presenta 13,33 UFC/m3 de hongos.
Segn el documento de la OMS, la concentracin de UFC/m3 de hongos
se encuentra en un nivel muy bajo de contaminacin ( <25UFC/m3 )
PLACA 2 MUESTRA DEL ESTABLO

PLACA 2 MUESTRA DEL ESTABLO Coordenadas X= 17M-0764232

GPS
X= 17M-0764232 Y= UTM 9889506
Coordenadas
GPS Y= UTM 9889506 Tiempo Minutos 15

Tiempo Minutos 15 Altura Metros 1.29

Altura Metros 1.29 UFC/m3 Muy bajo 13.33

UFC/m3 Muy bajo 20

PLACA 3: La muestra de la placa numero 3 fue tomada en la Universidad
PLACA 3: La muestra de la placa numero 3 fue tomada en la Universidad Tcnica de Cotopaxi, en la copiadora, presenta 13,33 UFC/m3 de
Tcnica de Cotopaxi, en la copiadora, presenta 6,66 UFC/m3 de hongos. Segn el documento de la OMS, la concentracin de UFC/m3 de
bacterias. Segn el documento de la OMS, la concentracin de UFC/m3 hongos se encuentra en un nivel muy bajo de contaminacin
de bacterias se encuentra en un nivel muy bajo de contaminacin (<25UFC/m3)
(<50UFC/m3)
PLACA 3 MUESTRA DE LA COPIADORA
PLACA 3 MUESTRA DE LA COPIADORA
Coordenadas X= 17M-0764221
Coordenadas X= 17M-0764221
GPS
GPS Y= UTM 9889518
Y= UTM 9889518
Tiempo Minutos 15
Tiempo Minutos 15
Altura Metros 1.40
Altura Metros 1.40
UFC/m3 Muy bajo 13.33
UFC/m3 Muy bajo 6.66

PLACA 4: La muestra de la placa numero 4 fue tomada en la Universidad PLACA 4: La muestra de la placa numero 4 fue tomada en la Universidad
Tcnica de Cotopaxi, en la copiadora, presenta 13,33 UFC/m3 de Tcnica de Cotopaxi, en la copiadora, presenta 20 UFC/m3 de hongos.
bacterias. Segn el documento de la OMS, la concentracin de UFC/m3 Segn el documento de la OMS, la concentracin de UFC/m3 de hongos
de bacterias se encuentra en un nivel muy bajo de contaminacin se encuentra en un nivel muy bajo de contaminacin ( <25UFC/m3 )
(<50UFC/m3)
PLACA 4 MUESTRA DE LA COPIADORA
PLACA 4 MUESTRA DE LA COPIADORA Coordenadas X= 17M-0764220
GPS
Coordena X= 17M-0764220 Y= UTM 9889517
das GPS Y= UTM 9889517 Tiempo Minutos 15
Tiempo Minutos 15 Altura Metros 1.40
Altura Metros 1.40 UFC/m3 Muy bajo 20
UFC/m3 Muy bajo 13.33
 ARAB ECONOMIC AND BUSINESS JOURNAL 00 (2014) 000000
4. Discusin y conclusin
La concentracin microbiana de los dos lugares de la Universidad Tcnica
de Cotopaxi, el establo y la copiadora, mostraron un nivel muy bajo de
contaminacin, que de acuerdo con la Organizacin Mundial de la Salud,
cuando la concentracin de UFC/m3 de bacterias sea < 50, se considera
muy baja, mientras que de hongos es < 25 la concentracin muy baja,
entre 50-100 UFC/m3 se considera baja para las bacterias, entre 25 100
UFC/m3 se considera bajas para los hongos, estos son niveles normales en
una atmsfera limpia, los niveles intermedios se encuentran entre 100-500
UFC/m3 para las bacterias y hongos, mientras que niveles entre 500-
2.000 se consideran altos, por encima de 2.000 UFC/m3 son suficientes
para causar problemas de salud y se consideran como niveles muy altos de
contaminacin tanto de bacterias como de hongos.
Se evidenci un predominio de los hongos sobre las bacterias ya que los
resultados indicaron una concentracin fngica ms elevada.
Al realizar este estudio microbiolgico del aire, podemos dar un anlisis
sobre La calidad del aire en los lugares donde fue realizado el muestreo,
podemos decir que la temperatura, la contaminacin del ambiente y
algunas actividades humanas, son condiciones favorables para el
crecimiento de microorganismos que influyen en la vida de las personas.
Se ha mostrado que algunos hongos poseen una importante capacidad
alergnica y que en sujetos atpicos pueden provocar asma y rinitis.
5
Las bacterias pueden sobrevivir largos periodos de tiempo sometidas a
altas o bajas temperaturas, hasta entrar en contacto con un medio
adecuado y poder infectarlo y desarrollarse.
REFERENCIAS
Max-Planck-Gesellschaft, Higiene Ambiental, ao de publicacin (2009),
Recuperado de:
http://www.higieneambiental.com/calidad-de-aire-interior/el-aire-esta-
lleno-de-hongos
Guillem Prats, Microbiologa Bsica, ao de publicacin 2005,
Recuperado de:
https://books.google.com.ec/books?id=TdsoWPEYaoUC&pg=PA83&dq=
hongos+microbiologia&hl=es&sa=X&sqi=2&redir_esc=y#v=onepage&q
=hongos%20microbiologia&f=false
Scribd, Agar Nutritivo. Blog de internet Slide Share, publicado el 2014,
Recuperado de:
http://depa.fquim.unam.mx/bioseguridad/agentes/bacterias/bac_klebs.html
Marimn Jos, Protocolo de toma y transporte de muestras para
Microbiologa, Publicado el 2014, Recuperado de:
https://www.osakidetza.euskadi.eus/contenidos/informacion/hd_publicaci
ones/es_hdon/adjuntos/Protocolo42MuestrasMicrobiologia.pdf