Efecto antibacteriano in vitro de la semilla de Persea americana frente a Staphylococcus

epidermidis.

Preparacin del extracto hidroetanlico.

Para los ensayos, los extractos se diluyeron en dimetilsulfxido a una concentracin de

10 mg / ml, seguido de dilucin en agua destilada para dar una concentracin de 1024
g / ml.

Preparacin del inoculo

Las bacterias sern reactivadas en caldo BHI y se llevaran a incubar durante 18 horas a
35 C. Luego se tomar con una asa cada bacteria y se ajustar con solucin fisiolgica
al patrn de turbidez de Mac Farland N0.5.

Ensayo de actividad antimicrobiana.

La concentracin inhibitoria mnima (CIM) de cada se determin el extracto en un

ensayo de microdilucin (NCCLS,2008), utilizando un inculo de 100 l de cada
bacteriana, suspensiones en caldo BHI hasta una concentracin final de 105 colony-
forming units/mL en microdilucin en placa de 96 pocillos con dos diluciones en serie.
Un volumen de 100 l de cada solucin de extracto a cada pocillo. El final las
concentraciones de los extractos varian de 512 a 8 g / ml.

La CIM se determin como la menor concentracin que inhiba crecimiento bacterial.

Materiales

Muestra: Extracto hidroetanolico liofilizado

Cepa bacteriana
Medio de cultivo Muller Hinton
 Caldo BHI
Dimetil sulfoxido
1 Placa de elisa
Micropipeta de 1000 ul o de 200 ul
Asa bacteriolgica
10 o 20 tubos de 13 x100
Tubo de Mac Farland N3
200 ml Solucin salina estril
200 Agua destilada estril
Puntas de micropipeta esteril para 1000 ul y 200 ul
Mechero y encendedor
Guantes y mascarilla
Alcohol para desinfeccin
Un frasco o una bolsa