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Curso de Toxicologa Ing.

Ambiental - UNFV Copyright

MANUAL DE PRACTICAS DEL


CURSO DE
TOXICOLOGA

Elaborado por:

Blgo. Erik Mercado Zarate

Blgo. F. Javier Alvarez Alvarez

2015
Curso de Toxicologa Ing. Ambiental - UNFV Copyright

REGLAMENTO DEL LABORATORIO

Los horarios de prctica debern respetarse.

Los alumnos tienen una tolerancia de 10 minutos en su horario respectivo.


Pasado esto se les considera como Ausencia y NO podr presentar el informe
correspondiente.

Los alumnos deben traen los materiales respectivos, indicados en las guas de
prctica.

No se podr entrar al laboratorio sin el mandil limpio.

No se podr comer ni beber en el momento que se estn realizando las


prcticas.

Los alumnos con cabello largo deben mantenerlo amarrado.

Los informes de prctica se entregaran a la semana siguiente de realizada.

Los alumnos deben dejar limpio el material de vidrio del laboratorio.

El 30% de Inasistencias inhabilita al alumno para dar el examen.


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Practica N 1: BIOSEGURIDAD EN LABORATORIO

I. INTRODUCCIN.

Los profesionales del laboratorio estn expuestos a una variedad de riesgos a su salud
relacionados con su trabajo. Como ejemplo, se encuentran aqullos derivados del manejo de
material infeccioso, radiacin, compuestos txicos y qumicos e inflamables. En el caso
particular del material biolgico-infeccioso, el peligro surge de la posibilidad de exponerse a
agentes patgenos e infectarse por dicha exposicin.

En laboratorios de diagnstico clnico, de investigacin, industriales, de patologa clnica, de


produccin de biolgicos, de enseanza, u otros donde se lleguen a manejar patgenos
aislados o muestras que los contengan, los profesionales del laboratorio debemos prestar
especial cuidado en las medidas que tomamos para prevenir un accidente.

La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) reconoce que la seguridad, y en particular la


seguridad biolgica son importantes cuestiones de inters internacional, es as como la OMS
pblico en 1983 el primer Manual de bioseguridad en el laboratorio, en el que se mostraba a
todos los pases la importancia de aceptar y aplicar conceptos bsicos de seguridad biolgica y
a elaborar cdigos nacionales para la manipulacin sin riesgo de microorganismos patgenos
en el laboratorio que se encontraban dentro de las barreras nacionales. Desde 1983 muchos
pases han seguido la orientacin presente en el manual para elaborar estos cdigos de
prcticas.

II. OBJETIVOS ESPECFICOS DE BIOSEGURIDAD.

Los objetivos especficos de Bioseguridad comprenden una serie de acciones al control del
riesgo que encierran las actividades en las siguientes reas:
Manipulacin de microorganismos patgenos.
Manipulacin del material infeccioso.
Uso de frmacos, radiaciones y elementos qumicos de efecto daino en el hombre,
probado o no bien definido.
Medidas de proteccin del ambiente.

III. RIESGOS BIOLGICOS.

El Riesgo Biolgico es aquel susceptible de ser producido por una exposicin no controlada a
agentes biolgicos. Se entiende por agente biolgico Microorganismos, incluidos los
modificados genticamente, los cultivos celulares y los endoparsitos humanos, que pueden
provocar cualquier tipo de infeccin, alergia o toxicidad.

Existe un smbolo internacional que representa el Riesgo Biolgico (Figura 1). Este smbolo y
signo internacional de peligro biolgico debe colocarse en las puertas de los locales donde se
manipulen Agentes Biolgicos del grupo de riesgo 2 o superior.

Entre los agentes Bio-peligrosos se encuentran: ciertas bacterias, hongos, virus, rickettsias,
chlamidias, parsitos, productos recombinantes, alrgenos, cultivos de clulas humanas y
animales y los agentes infecciosos potenciales que contengan estas clulas, viroides, priones y
otros agentes infecciosos.
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El riesgo concierne a aquel que trabaja directamente con estos agentes bio-peligrosos, a
aquellos que trabajan en el mismo lugar fsico y tambin a todos aquellos que estando fuera del
lugar podran estar conscientemente o inconscientemente en contacto con los desechos
producidos por este trabajo de laboratorio. De ah entonces que es necesario tener claridad
sobre las diferentes situaciones de riesgo, as como sobre los niveles de Bioseguridad que
permitan proteger internamente y externamente al Hombre de estas contingencias.

Fig. 01. Smbolo internacional de riesgo biolgico

III.1. Situaciones de Riesgos.

III.1.1. Riesgos por agentes biolgicos.


Microorganismos.
El riesgo de infeccin por microorganismos en el laboratorio se produce por inhalacin,
ingestin, contacto directo, a travs de la piel o mucosas erosionadas y/o sanas y a travs de la
conjuntiva.

III.1.2. Riesgos por agentes qumicos.


El riesgo a que se est expuesto por la manipulacin de agentes qumicos se produce por:
Ingestin, inhalacin y/o contacto con la piel, tejidos, mucosas u ojos, de sustancias
txicas, irritantes, corrosivas y/o nocivas.
Grado de inflamabilidad de la sustancia.
Capacidad de las sustancias de liberar energa.

III.1.3. Riesgos por agentes fsicos.


El riesgo a que se est expuesto por la manipulacin o ingestin de gases o partculas
radioactivas; exposicin a radiaciones ionizantes y/o no ionizantes; exposicin a ruidos y
vibraciones o a una carga calrica sobre la superficie corporal y quemaduras, especialmente
aquellas que estn sin proteccin.

IV. CLASIFICACIN DE LOS AGENTES BIOLOGICOS POR GRUPOS DE RIESGOS.

Segn la peligrosidad de los microorganismos infectantes, existe una clasificacin por grupos
de riesgo:
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IV.1. Agente Biolgico del Grupo I.


Es aqul que resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre y en la
comunidad.

IV.2. Agente Biolgico del Grupo II.


Es aqul que puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los
trabajadores, siendo poco probable que se propague a la comunidad y existiendo generalmente
profilaxis o tratamiento eficaz.

IV.3. Agente Biolgico del Grupo III.


Aqul que puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para
los trabajadores, pudiendo causar la muerte con riesgo de que se propague a la comunidad y
existiendo frente a l generalmente profilaxis o tratamiento eficaz.

IV.4. Agente Biolgico del Grupo IV.


Aqul que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para los
trabajadores, con muchas posibilidades de que se propague a la comunidad y sin que exista
generalmente frente a l profilaxis o tratamiento eficaz.

V. NIVELES DE BIOSEGURIDAD DE LABORATORIO.

De acuerdo con el nivel de riesgo, el tipo de laboratorio, la barrera de contencin requerida, los
procedimientos y tcnicas a usar, se han establecido los siguientes niveles de Bioseguridad.

V.1. Nivel de Bioseguridad I (Microorganismos no patgenos para el hombre).


Es aquel que corresponde a las actividades desarrolladas en un laboratorio bsico, por
personal adiestrado en los procedimientos que se ejecutan en l. En este nivel se trabaja con
agentes clasificados en el Grupo de riesgo I por presentar un peligro mnimo para el personal
del laboratorio y para el ambiente. En el nivel de Bioseguridad I no se requiere equipo especial
ni un diseo especfico de las instalaciones. El personal de estos laboratorios es generalmente
supervisado por un cientfico con entrenamiento en microbiologa.

Es el habitualmente utilizado en los laboratorios de prcticas de universidades o centros


docentes donde se emplean cepas no patgenas. Se debe trabajar en condiciones mnimas de
asepsia y esterilidad. Ejemplos tpicos son Escherichia coli.

V.2. Nivel de Bioseguridad II (Microorganismos y procedimientos de riesgos moderados).


Es aquel que corresponde a las actividades desarrolladas en un laboratorio bsico, por
personal adiestrado en el manejo de agentes de riesgo del grupo II.

Deben ser manipulados por personal especializado y son los que con ms frecuencia se
estudian en laboratorio de microbiologa clnica: Salmonella typhi, Mycobacterium tuberculosis,
Virus de la Hepatitis B, etc.

Otros aspectos que se deben considerar en este nivel son:


El rea de riesgo debe restringirse al personal, no permitindose el acceso a personas
que tengan aumentado, por alguna causa, el riesgo de infeccin (Ejemplo. Inmunosuprimidos).
En el acceso al laboratorio figurarn seales de riesgo biolgico, condiciones de ingreso
y responsables del mismo (nombre, telfono y domicilio).
El personal debe estar vacunado (si correspondiera) y entrenado para prevenir
accidentes y actuar correctamente en caso de que ocurriere.
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Control permanente de roedores e insectos.


Uso de guardapolvo en el rea de trabajo exclusivamente (considerar que el
guardapolvo es potencialmente un elemento contaminante).
Evitar el uso de jeringas o cualquier otra prctica que genere aerosoles.

V.3. Nivel de Bioseguridad III (Microorganismos que pueden causar la muerte o aquellos
con riesgos moderados).

En este nivel se trabaja con agentes biolgicos del grupo III, microorganismos que causan
patologa grave, de difcil y largo tratamiento, que pueden dejar secuelas y ocasionalmente
producir la muerte, en cuya manipulacin se aplican procedimientos de trabajo, que implican
alto riesgo de infeccin. El mayor y ms frecuente peligro que entraan stos es la infeccin
adquirida a travs de aerosoles y por fluidos biolgicos. Por ello las principales medidas a
tomar en este caso son la correcta manipulacin y la utilizacin de cabinas de seguridad
(incluidas las medidas de los niveles anteriores como las condiciones mnimas de asepsia y
esterilidad, adems del uso de batas, mscaras, respiradores, guantes, etc.). En los
laboratorios de microbiologa clnica los ejemplos ms tpicos de este tipo de microorganismos
son el Virus de la fiebre de Lassa, Brucella spp, Histoplasma capsulatum, etc.

Solo pueden ser procesados por personal calificado, por ello se debe restringir el acceso al
personal del laboratorio y llevar un registro de las visitas, del personal de servicio y de
accidentes. La infraestructura apropiada para el nivel de contencin 3, incluye, adems, aire
acondicionado independiente, sin recirculacin, con gradiente de presin, entre otras.
Peridicamente se tomarn muestras de sangre a todo el personal.

V.4. Nivel de Bioseguridad IV (Microorganismos exticos y/o altamente peligrosos y


procedimientos de alto riesgo).
Es aquel que corresponde a las actividades desarrolladas en el laboratorio de contencin
mxima. Este nivel es el que se utiliza para trabajar con agentes biolgicos clasificados en el
grupo de riesgo IV por representar un alto riesgo individual de contagio y que adems son un
riesgo para la vida. Los agentes nuevos que presentan caractersticas antignicas, patognicas
u otras similares a agentes de nivel III y IV son confinados a nivel IV hasta que exista suficiente
informacin cientfica para establecer a cual grupo de riesgo pertenecen.

Debe trabajarse en laboratorios especiales de mxima seguridad (contencin mxima), en los


que es necesario ducharse y cambiarse de ropa tanto a la entrada como a la salida del mismo y
en donde existen barreras de aire con el exterior. El manejo del material limpio y contaminado
se realiza por canales altamente controlados.

Ejemplos de este nivel son el virus Junn, virus bola, el virus de la fiebre aftosa, el virus del
HIV. Adems, deben incluirse en este nivel de contencin los microorganismos propios del
grupo 3 que adquieren propiedades patgenas que los elevan al grupo 4. Un ejemplo sera
Mycobacterium bovis multirresistente que puede causar fallecimiento por fracaso teraputico.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.

Conicyt. 2008. Manual de normas de Bioseguridad 2da edicin. Comisin Nacional de Investigacin
cientfica y Tecnolgica. Chile.
Lara-Villegas, Humberto y col. 2008. Bioseguridad en el laboratorio: medidas importantes para el trabajo
seguro. Academia.edu. Artculo 2 de bioqumica. Vol. 33. p. 59-70.
OMS. 2005. Organizacin Mundial de la Salud. Manual de bioseguridad en el laboratorio. Ginebra.