Observacin de Bacterias

Introduccin

Son tcnicas que permiten observar microorganismos en funcin de la capacidad de los

mismos para retener o no determinadas sustancias colorantes, lo que depende de la carga de
la clula y del colorante.

Los colorantes pueden ser de distintos tipos:

Catinicos. Son sustancias que tienen carga positiva. Penetran en el interior de las clulas y las
tien. Ejemplos: azul de metileno, cristal violeta, safranina.

Anicnicos. Con carga negativa. No penetran en el interior celular, de modo que no tien las
clulas, sino el entorno. En este caso se habla de tincin negativa. Ejemplos: eosina, tirosina.

Liposolubles. Se mezclan con los lpidos celulares y los tien. Ejemplo: negro Sudn.

Las tinciones pueden ser:

Simples. Utilizan un solo colorante. Se basan en el hecho de que las clulas tienen una
composicin qumica diferente a la de su entorno, de modo que ambos se comportan de
forma diferente frente a un colorante. El colorante tie las clulas (azul de metileno, safranina)
o no (tirosina).

Diferenciales. Se basan en el hecho de que distintos tipos de clulas tienen distinta

composicin qumica, y por lo tanto reaccionan de forma diferente frente a una tincin, lo que
permite clasificar los microorganismos en diferentes grupos, segn su capacidad de tincin. En
este apartado estn dos tinciones de importancia taxonmica y mdica: la tincin de Gram y la
de cido-alcohol resistencia (de Ziehl-Neelsen). Estas tinciones utilizan ms de un colorante.

Selectivas. Se basan en el hecho de que distintas estructuras celulares tienen distinta

composicin qumica, de modo que se tien selectivamente con ciertos colorantes. Ej.; tincin
de esporas, de flagelos, de paredes celulares, de corpsculos metacromticos. Pueden
utilizarse uno o ms colorantes.

a) Azul de metileno (Tincin positiva). Permite teir el interior celular. Tie microorganismos
procariticos (vivos o muertos). Los eucariticos slo se tien si estn muertos. Algunas
estructuras, como los corpsculos meta cromticos, se tien ms intensamente con este
colorante que el resto de la clula.

b) Nigrosina (Tincin negativa). Se trata de un colorante anicnico, que no penetra en el

interior celular. Proporciona una visin de la forma y el tamao celulares al observarse los

microorganismos brillantes sobre un fondo oscuro.

BACTERIAS DEL YOGURT

El yogur es un producto lcteo producido por la fermentacin natural de la leche. A escala

industrial se realiza la fermentacin aadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociacin de
dos cepas bacterianas: estreptococos termophilus, poco productor de cido, pero muy
aromtico, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta preparacin se podrn, por
tanto, observar dos morfologas bacterianas distintas (cocos y bacilos) y un tipo de agrupacin
(estreptococos, cocos en cadenas arrosariadas). Adems, el tamao del lactobacilo (unos
30m de longitud) facilita la observacin aunque no se tenga mucha prctica con el enfoque
del microscopio.

Contestar las siguientes preguntas:

1) El yogur es un alimento ms fcilmente digerible que la leche, por qu?

R/. Es debido a que los cultivos de bacterias que contiene el yogur rompen las cadenas de
lactosa y la hacen ms fcil de digerir. el proceso de hacer yogur tambin modifica
las protenas de la leche hacindolas ms digerible.

2) En casos de intolerancia a la lactosa, qu alimento ser ms fcilmente tolerado, la leche

o el yogur? Por qu?

R/. El yogur, porque es un derivado de la leche y se elabora mediante la fermentacin

bacteriana de leche que transforma a los azucares en cidos, as la lactosa se convierte
en cido lctico. El menor contenido de lactosa del yogur con respecto a la leche, hace que sea
mejor tolerado por quienes no consumen leche habitualmente y adems, permite comenzar a
tolerar la lactosa.

3) Qu papel desempea cada una de estas bacterias en la formacin del yogur a partir de
la leche?

R/. Tanto Lactobacillus bulgaris como Streptococcus thermophilusrealizan

la fermentacin del cido lctico. Transforman los azucares presentes en la leche (lactosa
formada por glucosa y galactosa) en cido lctico. Se trata de un proceso anaerbico que
confiere acidez al yogur.
BACTERIAS DEL VINAGRE

El vinagre es una solucin acuosa rica en cido actico resultante de la fermentacin

espontnea del vino o de bebidas alcohlicas de baja graduacin. La acetificacin del vino es
producida por bacterias aerbicas del cido actico, principalmente Acetobacter acetil, aunque
tambin Gluconobacter. Se trata de bacilos rectos con flagelos polares.

Tomar con una aguja enmangada una pequea porcin de madre de vinagre natural o de la
telilla que se forma sobre la superficie de los vinos agriado.

Extender la muestra en el portaobjetos con una gota de agua y hacer el frotis.

Dejar secar y fijar con calor.

Teir 2-3 minutos, lavar el exceso de colorante y secar.

BACTERIAS DEL SARRO DENTAL

El sarro dental es un depsito consistente y adherente localizado sobre el esmalte de los

dientes. Est constituido principalmente por restos proteicos, sales minerales y bacterias junto
con sus productos metablicos. La flora bacteriana de la cavidad bucal es muy variable
dependiendo de las condiciones que se den en el momento de hacer la preparacin, pero
suelen abundar bacterias saprfitas, pudindose observar gran variedad de morfologas:
espiroquetas, cocobacilos, diplococos y bacilos.

Con una aguja enmangada tomar una pequea porcin de sarro dental y disolverla en una gota
de agua sobre el portaobjetos.

Dejar secar y fijar con calor.

Teir 2-3 minutos, lavar el exceso de colorante y secar.

BACTERIAS DEL SUELO

La variedad de bacterias que pueden aparecer en una muestra de suelo es prcticamente

infinita, muchas de ellas no cultivables en los laboratorios y algunas, incluso, desconocidas
para los microbilogos. Para recoger la muestra y hacer el frotis basta con dejar parcialmente
enterrado en vertical un portaobjetos en la tierra de una maceta o de un jardn. Despus de
varios das, las bacterias se habrn adherido al vidrio y slo habr que fijarlas por calor y
teirlas con un colorante cualquiera. Previamente hay que limpiar los bordes del portaobjetos,
as como la parte que no se va a teir.

Conclusin

Durante este experimento pudimos observar las diferentes formas que tienen las bacterias.

La mayora de los entero cocos, estreptococos y dems grupos o genero microbianos son
algunos patgenos y no patgenos, de estos se pueden preparar fermentaciones, que
mediante un largo proceso,llegan a ser elaboradas en productos comestibles, garantizando la
mayor seguridad al consumir ese producto fermentado.