Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
PROFESORA:
ALUMNOS:
EQUIPO N3
1
IDENTIFICACION CUALITATIVA DE PROTEINAS Y AMINOACIDOS
1. OBJETIVO
Familiarizar a los estudiantes con el reconocimiento de protenas o residuos
de aminocidos presentes en las protenas mediante pruebas qumicas
cualitativas.
2. FUNDAMENTO TEORICO
Por la estructura peptdica y la presencia de determinados grupos (grupos R), las
protenas pueden reaccionar con una variedad de agentes originndose productos
coloreados. Estas reacciones son la base para la determinacin cuantitativa y
cualitativa de las protenas. Por presentarse variaciones en la composicin de los
aminocidos de las diferentes protenas, se manifiestan diferentes colores y grados de
intensidad para una misma reaccin, ntimamente relacionado con la naturaleza de la
protena analizada.
La Reaccin Xantoproteica
Los aminocidos, que contienen un ncleo aromtico forman nitroderivados de color
amarillo cuando se calientan con cido ntrico concentrado. Las sales de estos
derivados son de color naranja intenso en medio alcalino. Si una vez realizada la
prueba se neutraliza con un lcali, se torna color amarillo oscuro. La fenilalanina, la
tirosina y en cierto grado el Triptfano, as como todas las protenas que los contienen,
dan positiva la prueba.
Prueba de Biureth
es aquel que detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y otros compuestos
con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de composicin desconocida. El
reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y vira a rosa
cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El Hidrxido de Potasio no
participa en la reaccin, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga
lugar.
Desnaturalizacin por calor y pH extremos
Una prdida de la estructura tridimensional suficiente para causar prdida de la
funcin se llama desnaturalizacin. Se forma un conjunto de cadenas polipeptdicas
con distinto grado de plegamiento. La desnaturalizacin no significa que siempre se
obtenga la cadena polipptidica totalmente desplegada. Los productos de
desnaturalizacin en solucin se agregan fsicamente y segn las condiciones de pH y
fuerza inica, precipitan.
El objetivo de elegir un paso de purificacin desnaturalizante es crear las condiciones
donde la protena de inters no se desnaturalice mientras que los otros componentes
se desnaturalicen y precipiten.
2
3. DESARROLLO EXPERIMENTAL
SOLUBILIDAD Y EFECTOS DE PH DE PROTEINAS
Observaciones:
Medio Observaciones Resultado
PH de la solucin = 6
Agua Fra Parcial
Restos solidos blancos
PH de la solucin = 10
NaOH 0.2% Solucin ligeramente amarilla con Ligeramente soluble
pequea cantidad de espuma
PH de la solucin = 11
NaOH 10% Se forma una masa gelatinosa dentro No es soluble
de la solucin
PH de la solucin = 2
HCl 0.2% Solucin amarilla, pero con restos Insoluble
solidos blancos considerables
PH de la solucin = 1
HCl 10 % Insoluble
Solucin blanquecina
PH de la solucin = 10
Na2CO3 0.5 % Soluble
Solucin transparente
Tabla 1: Solubilidad y efectos de ph
Conclusiones:
La albmina no es soluble en cido clorhdrico dado que este lo
desnaturaliza primero.
En medio acuoso, la albmina no resulta soluble dado que estructura no lo
favorece, adems si vemos en tablas el pk resulta ser de 8.5 siendo muy
bajo en agua
Tras ver que en medios bsicos de poca concentracin resulta incrementar
su solubilidad, y al ser grande la concentracin vuelve a ser insoluble
La influencia del ph en una protena es bastante importante para la
estabilidad de esta, y pueda realizar sus funciones sin alguna alteracin.
3
DESNATURALIZACION DE UNA PROTENA
Observaciones:
Agente Observaciones
desnaturalizante
Sin agitar existen dos fases una solucion blanquecina y otra amarilla, luego
de agitar toda la solucion o muestra, ahora es blanca con particulas
precipitadas.
1. Alcohol
etilico
2. Nitrato
de plata
3. Calor
4
Reacciones:
Conclusiones:
Prueba de Biuret
Observaciones
5
Conclusiones
PRUEBA XANTOPROTEICA
Observaciones
Muestra Observaciones Resultado
Inicio incoloro, con el HNO3 no paso nada,
con NaOH tampoco sucedi algun tipo de
cambio Negativo
1. Agua
Con base
Con cido Calentado
Positivo
Sustancia de color amarillenta traslucida,
agregando HNO3 aparece precipitado
amarillo, al calentarlo la parte de la solucion
2. Albunima que no reacciono se torno de color amarillo
vivo, agreagando el NaOH iba virando a un
color anaranjado
Con base
6
Con acido Calentado
3. Gelatina
4. Leche
Con base
Con acido Calentado
Sustancia incolora, con HNO3 no pasa nada al
calentarlo no hay cambios y cuando se agrega
5. Urea
el NaOH no sufre ningun cambio Negativo
7
Con acido Calentado Con base
Reacciones:
Conclusiones:
Al agregar el cido los nicos que dieron positivos para las pruebas fueron la
albumina y la leche
Los nicos que sufrieron cambios al momento de calentarlos fueron la albumina
y la leche
Los nicos que dieron cambios al agregar el NaOH fueron la albumina (de forma
rpida y persistente en el color) y la leche (no reacciono tan rpido y el color se
perda, ya casi no haba mucho reactivo para seguir agregando)
4. CUESTIONARIO
1. Aplicacin Industrial
8
clarificacin de vinos o como ingrediente en
preparados de biologa molecular y microbiologa.
Siendo parcialmente hidrolizado, colgeno produce
gelatina, que ha sido ampliamente utilizado como un
Colgeno ingrediente en muchos productos alimenticios. La
gelatina tambin se ha aplicado en muchas
aplicaciones farmacuticas, cosmticas y fotogrficas.
Para la preparacin de formulaciones reconstituyentes
de tejido entre otras.
Hemoglobina En preparacin de fertilizantes orgnicos nitrogenados.
Suplementos dietarios para nios, ancianos y
deportistas.
Algunos alelos de la actina son causantes de
patologas, por lo que se han desarrollado tcnicas
para su deteccin. Adems, la actina puede emplearse
Actina como marcador indirecto en patologa quirrgica: es
posible emplear variaciones en pauta de localizacin
en los tejidos como marcadores de invasin de
neoplasias, vasculitis y otros.
9
Los 9 aminocidos esenciales son: histidina, isoleucina, leucina, lisina,
metionina, fenilalanina, treonina, triptfano y valina.
Estos aminocidos requieren ser incorporados al organismo en su cotidiana
alimentacin y, con ms razn, en los momentos en que el organismo ms los
necesita: en la disfuncin o enfermedad. Hay que destacar que, si falta uno solo
de ellos (aminocido esencial) no ser posible sintetizar ninguna de las protenas
en la que sea requerido dicho aminocido. En el caso de la histidina, es un
aminocido esencial en la infancia que pasa a ser no esencial en la etapa adulta.
5. ANEXO
Desnaturalizacin de las protenas
El calor, los cidos y las bases fuertes, los disolventes tales como el alcohol etlico, las
soluciones concentradas de algunas sales, la urea y algunas sustancias fenlicas,
generalmente provocan cambios profundos en las propiedades fisicoqumicas de las
protenas solubles.
10
Estos cambios incluyen la prdida de la solubilidad (coagulacin), la formacin de geles
irreversibles, la exposicin de grupos reactivos tales como los sulfhidrilos, una mayor
susceptibilidad frente al hidrlisis enzimtica (y, por tanto, una mejor digestibilidad),
alteracin de los patrones de difraccin de rayos X y rotacin ptica. Los cambios son a
menudo, aunque no siempre, prcticamente irreversibles. Se acostumbra agrupar todos
estos cambios bajo un trmino: desnaturalizacin.
En este proceso se pierden las estructuras secundaria, terciaria y cuaternaria sin que
haya una hidrlisis del enlace peptdico. En el caso de que se rompan los enlaces
disulfuro que estabilizan la estructura terciaria es difcil que regrese a su estado
11
natural, aunque como en el caso de algunas enzimas la reactivacin o renaturalizacin
es posible.
Una protena desnaturalizada cuenta nicamente con su estructura primaria. Por este
motivo, en muchos casos, la desnaturalizacin es reversible. El proceso mediante el
cual la protena desnaturalizada recupera su estructura nativa se llama renaturalizacin,
estructura primaria la que contiene la informacin necesaria y suficiente para adoptar
niveles superiores de estructuracin.
6. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
12