Está en la página 1de 3

SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE

CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS


LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

DETERMINACION DE MESOAEROBIOS O AEROBIOS MESOFILOS


EN ALIMENTOS

Juan Guillermo Cubillos Hinojosa


Microbiologo Agroindustrial, (c)MSc
1. INTRODUCCION

Los mesoaerobios son el indicador ms amplios en los alimentos, debido a que incluye
todos los gneros aerobios y facultativos que crecen en medios simples a una temperatura
de 20C y 45C.

El recuento de este grupo de microorganismos se considera como un indicador del grado de


contaminacin de los alimentos en cualquier etapa del proceso de produccin, permite
tambin obtener informacin sobre la alteracin incipiente de los alimentos y su probable
vida til.

2. OBJETIVOS

Adquirir destreza en la determinacin de aerobios mesfilos en alimentos.


Realizar informe de los resultados obtenidos por la muestra analizada.

3. MATERIALES

Standar Plate Count Agar


Cajas petri
Erlenmeyer
Tubos de ensayo
Morteros
Agua peptonada
Puntas estriles
Micropipetas

4. METODOLOGIA

1. Preparar el medio de cultivo SPC.


2. Tomar 10g de muestra y macerarla; en caso que la muestra sea liquida tome 10mL en
una probeta estril.
3. Agregar la muestra al erlenmeyer que contiene 90mL de agua peptonada.
4. Realice diluciones seriadas hasta 10-3.
5. Siembre en profundidad por duplicado cada una de las diluciones.
6. Incubar a 35C+/-2 durante 24-48 horas.

Muestra
de 10g
90mL
H2O
Peptonada

9mL
H2O
Sembrar en Peptonada
profundidad

10-1 10-2 10-3

2x

Figura 1. Esquema de determinacin de aerobios mesfilos en alimentos

5. LECTURA DE RESULTADOS

a) Despus del perodo de incubacin especificado, se cuentan las colonias de las cajas,
empleando el equipo de recuento de colonias bajo luz tenue.
b) Seleccione las dos cajas correspondientes a la misma dilucin que presenten entre 30 y
300 colonias. Hallar la media de los valores y multiplicar por el factor de dilucin. Si se
presentan recuentos menores a 15 y mayores a 150 se deben contar todas las diluciones
sacando el promedio entre ellas.
c) Es importante que las colonias en punta de alfiler sean incluidas en el recuento, pero es
esencial que la persona que realiza la lectura evite confundir las partculas no disueltas o
precipitadas con colonias en punta de alfiler.
d) Se recomienda examinar con atencin los elementos dudosos, empleando una lupa cuando sea
necesario, con el objeto de diferenciar las colonias de partculas extraas.
e) Las colonias invasoras deben ser consideradas como una sola colonia. Si menos de un cuarto de la
placa est invadida por dichas colonias, se cuentan las colonias de la parte no afectada
de la placa y se calcula el nmero correspondiente a la placa entera. Si est invadido ms
de un cuarto de la placa, se desecha el recuento.

6. EXPRESION DE RESULTADOS

Se redondea el resultado calculado con dos cifras significativas. Se toma como resultado el
nmero de unidades formadoras de colonias, UFC/ml o UFC/g de producto, expresado
como un nmero entre 1,0 y 9,9 multiplicado por 10x donde x es la potencia apropiada de 10.

Se calcula el nmero de N de colonias por mililitro o por gramo de producto, dependiendo


del caso, usando la siguiente ecuacin:

7. BIBILOGRAFIA

ICONTEC. 2009. Norma Tcnica Colombiana NTC 4519. Microbiologa de los alimentos
para consumo humano y animal. Mtodo horizontal para el recuento de microorganismos.
Tcnica de recuento de colonias a 30 C.
ICONTEC. 2009. Norma Tcnica Colombiana NTC 4092. Microbiologa de alimentos y
productos para alimentacin animal. Requisitos generales y directrices para anlisis
microbiolgicos.
INVIMA. 1998. Manual de tcnicas de anlisis para control de calidad microbiolgico
de alimentos para consumo humano. 110-111pp.