GOTA GRUESA

1. OBJETIVO
Preparar una muestra de sangre para su estudio microsco pico, comprobando la
presencia o ausencia de para sitos hematolo gicos en ella, durante el proceso de
observacio n.
2. FUNDAMENTO
La preparacio n de gota gruesa es un tipo de te cnica que se utiliza para el estudio de
parasitosis en sangre, como las distintas especies de Plasmodium, responsables de la
Malaria o Paludismo, y para la identificacio n de distintas especies de Trypanosoma (T.
gambiense y T. rhodesiense, responsables de la enfermedad del suen o o
tripanosomiosis africana; T. cruzi, agente responsable de la enfermedad de Chagas).
Los procedimientos especficos usados para diagnosticar los para sitos comunes de los
tejidos pueden resumirse en el siguiente cuadro:

Existen ma s de 150 especies de Plasmodium que infectan diferentes vertebrados, pero

solamente cuatro (P. falciparum, P. vivax, P. ovale y P. malariae) infectan al hombre. Las
dos especies ma s comunes son:
P. falciparum
P. vivax
La malaria es trasmitida por la picadura de mosquitos del ge nero Anopheles
infectados con Plasmodium.
El ciclo vital de los plasmodios es complejo, pero lo vamos a resumir en el siguiente
esquema:

Cuando estudiamos
muestras sanguneas con
un microscopio o ptico de forma
rutinaria, se hace una
preparacio n de gota gruesa y otra en forma de extensio n fina en el mismo porta.
La extensin fina se realiza para confirmar un diagno stico de malaria, prestando
atencio n en los hemates infectados y en los para sitos que hay dentro de ellos.
La gota gruesa se observa la morfologa de los para sitos, ya que son ma s abundante
que en la extensio n y ma s compactos.
3. MATERIALES NECESARIOS
2 portaobjetos.
Microscopio o ptico.
Muestra sangunea
(propia o donada).
Colorante Giemsa al 3% en
agua destilada.
4. DESARROLLO DE LA PRCTICA
Obtenemos un poco de sangre.
Colocamos una gota de la muestra, con ayuda de una pipeta pasteur, en el

centro de un portaobjetos.
A la derecha de esta, colocamos tres gotas un poco ma s grandes,
aproximadamente a 1cm de distancia de la gota central.

Realizamos una extensio n con la gota central, con ayuda de otro

portaobjetos.

Con una esquina del portaobjetos extensor, mezclamos las tres gotas de
sangre restantes, de manera que formen una capa gruesa uniforme.

Cuando la extensio n este seca la fijamos con metanol, deja ndola actuar
durante aproximadamente un minuto.
Una vez fijada la extensio n, dejamos secar la muestra hasta el da siguiente,

pues la gota gruesa necesita 24 horas para su procesado.

Una vez transcurridas las 24 horas, colocamos un puente de tincio n sobre
un cristalizador, ponemos los portas con las muestras encima y an adimos
Giemsa al 3%, el cual dejamos actuar de 30 a 45 minutos.
 1. Para finalizar, desechamos el exceso de colorante y retiramos con ayuda de

agua destilada el que quede por encima de la preparacio n. Lavamos hasta que
deje de salir agua con colorante.
2. El porta se deja secar de forma vertical y listo para el estudio microsco pico.

5. RESULTADO

La muestra de sangre tratada no presenta ningu n para sito visible y se observa lisis
celular.

6. VALORACIN DE LOS RESULTADOS

La extensio n es va lida, pero la muestra de gota gruesa no. El individuo al que

pertenece la sangre debe ser considerado como: No infestado por Plasmodium.

7. OBSERVACIONES

En la gota gruesa no se puede realizar el estudio, pues las ce lulas sanguneas se

ven apelmazadas y muy oscuras por la tincio n.

En general, la preparacio n completa, frotis y gota gruesa, no ha dado buenos

resultados, posiblemente a causa de un mal proceso de tincio n.