La tincin de Gram es uno de los mtodos de tincin ms
importantes en el laboratorio bacteriolgico y con el que el
estudiante debe estar perfectamente familiarizado. las referencias a la morfologa celular bacteriana (cocos, bacilos, positivos,negativos, etc.) se basan justamente en la tincin de GRAM esta tincin se denominada as por el bacterilogo dans Christian Gram, quien la desarroll en 1844. las bacterias pueden dividirse en dos grupos, Gram positivas y Gram negativas estas designan dos grupos morfolgicos distintos de bacterias. Las bacterias Gram-positivas y Gram-negativas tien de forma distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares. La pared de la clula bacteriana sirve para dar tamao y forma al organismo, El material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el peptidoglicano. La pared de la clula Gram-positiva es gruesa y consiste en varias capas interconectadas de peptidoglicano as como algo de cido teicoico. sus paredes celulares son ms espesas debido a que tienen ms peptidoglicano Generalmente 80%-90% y menos lpido), no son permeables al disolvente ya que ste deshidrata la pared celular y cierra los poros, disminuyendo as el espacio entre las molculas y provocando que el de complejo cristal violeta-yodo quede atrapado dentro de la pared celular La pared de la clula Gram-negativa, por otro lado, contiene una capa mucho ms delgada, nicamente de peptidoglicano y est rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolpidos, lipopolisacridos, y lipoprotenas. Slo10% - 20% de la pared de la clula Gram-negativa es peptidoglicano. .Para poner de manifiesto las clulas Gram negativas se utiliza una coloracin de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina bsica. Despus de la coloracin de contraste las clulas Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules. Deben destacarse algunos aspectos cruciales de la tincin de Gram: 1) El tratamiento con cristal violeta debe preceder al tratamiento con yodo. El yodo por s solo tiene poca afinidad con las clulas. 2) La decoloracin debe realizarse con poca agua para evitar que pierdan la tincin las clulas Gram positivas. EI proceso de decoloracin debe ser corto y es esencial un clculo preciso del tiempo para obtener resultados satisfactorios. 3) Cultivos ms viejo de 24 horas pueden perder su habilidad de retener el complejo cristal violeta - yodo.
El carcter de Gram positivo no es siempre un fenmeno del todo o
nada. Algunos organismos son ms Gram positivos que otros y algunos son Gram-variables, es decir, unas veces Gram positivos y otras Gram negativos