OBJETIVO:

Conocer las etapas para la realizacin del estudio gentico.

1. Etapas para la realizacin del estudio gentico:
Historia clnica y elaboracin del rbol genealgico
Antes de comenzar a realizar la historia clnica es muy importante disponer de los informes
que tiene el paciente u otros miembros de la familia afectados.
El paciente afectado se denomina PROBANDO. Debe obtenerse una historia clnica del
probando y del todo aquel familiar que este afecto.
La forma ms prctica de recoger la historia familiar es la construccin de pedigree o rbol
genealgico. El pedigree, es simplemente un diagrama esquemtico de la familia que nos
proporciona de forma grfica la relacin entre los diferentes miembros de la familia y un
resumen breve de algunas enfermedades que podran tener un significado. La ventaja
principal del pedigree es su interpretacin fcil y su formato compacto. Su mayor
inconveniente es la confusin a que puede dar lugar por utilizar smbolos, que deben ser
universalmente admitidos.
Tras la realizacin del rbol familiar es necesario completar la historia familiar. Debe
seguirse una sistemtica ordenada, para evitar olvidos que pueden ser importantes para el
diagnstico y posterior consejo gentico.
A continuacin les mostramos los smbolos comnmente usados para el desarrollo o
elaboracin del rbol genealgico.

Examen clnico: exploracin fsica

Una vez que hemos realizado la historia clnica, el paso siguiente debe ser una exploracin
fsica completa. La exploracin debe ser estrictamente ordenada. Aunque no toda
exploracin fsica en medicina debe ser realizada de manera ordenada, en dismorfologia
debe serlo todava ms. En segundo lugar, esta exploracin, adems de la habitual debe ir
acompaada de una definicin precisa de posibles rasgos dismorficos (que son aquellas
caractersticas fsicas que no estn dentro del rango normal de los individuos sanos
normales). Por ltimo, la impresin clnica (datos cualitativos) debe ser comprobada por una
serie de medidas antropomtricas, que posteriormente son valoradas segn tablas de
percentiles. El rango normal de cada medida, vara con la edad y sexo. Habitualmente todas
las medidas estn aproximadamente situadas en el mismo percentil. Cuando esto no es
as, significa que esa medida puede indicar una anomala. Por ejemplo, si la altura y el
permetro ceflico estn situadas en el percentil 10, pero la distancia interpupilar est
situada en el percentil 90, podemos decir que existe un hipertelorismo relativo, aunque la
medida actual de esa distancia interpupilar este dentro del rango normal.
La exploracin fsica se inicia por una valoracin del aspecto general (estado general, color,
nutricin, etc.) posteriormente comenzamos con una descripcin de la cabeza y cara.
Despus valoramos sucesivamente cuello, trax, abdomen, genitales externos,
extremidades y terminamos con la exploracin neurolgica bsica y de la piel.
Una vez que hemos terminado con el examen fsico detallado, podemos concluir con el
peso y talla del paciente (otra posibilidad es hacerlo al comienzo de la exploracin, pero en
los pacientes pequeos, es mejor realizarlo al final) y colocarlos en sus correspondientes
percentiles segn edad y sexo.
INSPECCION:
Observacin. Se inicia en el primer contacto con el paciente.
Registramos:

Postura: disnea, paciente sentado.

Movimientos corporales: falta de continuidad o asimetra.
Nutricin.
Forma de hablar.
Temperatura corporal.
Otros: estatura, estado de la piel.
Observaciones generales:
Sexo y raza.
Constitucin corporal.
Estados de salud, de conciencia y emocional.
Higiene y arreglo personal.
Actividad motora (postura y movimiento coordinados)
Expresin oral (cantidad, calidad, organizacin de pensamientos)
Olor corporal y aliento.
PALPACION:
Muchas estructuras corporales no visibles pueden ser exploradas con la mano o sentidas
por palpacin. Determina las caractersticas de la estructura corporal bajo la piel.
PERCUCION:
Golpear una superficie del cuerpo con uno o varios dedos para producir un sonido que
resulta de la vibracin de las estructuras corporales permitiendo determinar el tamao,
lmites y localizacin de un rgano.
AUSCULATCION:
Arte de escuchar los sonidos producidos por los rganos del cuerpo directamente con el
odo o el estetoscopio.

Valoracin de la historia familiar

Se deben valorar pautas que debemos saber para descartar o evidenciar dimorfismos:
Historia parental:

Edad de los padres al momento de la concepcin. ( ejemplo: mayores de 45 aos,

riesgo de trisoma 21)
Ocupacin y hbitos de los padres. ( si tienen trabajos riesgosos, expuestos a
qumicos o fumadores)
 Salud general de los padres.
Historia y evolucin de embarazos anteriores. ( complicaciones o partos
complicados)
Historia gestacional:

Factores maternos. ( enfermedades que pueden heredar)

Factores fetales. (amniocentesis para anlisis)
Parto:

Trabajo de parto, duracin y distocias.

Sufrimiento fetal, reanimacin, test de Apgar. (el recin nacido es avaluado de
acuerdo a cinco parmetros simples, que son: tono muscular, esfuerzo respiratorio,
frecuencia cardiaca, reflejos y color de la piel. A cada parmetro se le asigna una
puntuacin entre 0 y 2)
Periodo neonatal:

Estado neonatal.
Alimentacin.
Ganancia ponderal.
Signos neurolgicos de alerta. (cutneo palmar, reflejo de presin, reflejo de galant)
Olores especiales en la orina. (descarte de infeccin urinaria)
Infecciones.
Historia evolutiva del paciente:

Salud general.
Crecimiento y desarrollo: fsico y motor.
Comportamiento.
Personalidad.
2. Indicaciones para el estudio citogentico:

Una amplia gama de sndromes clnicos se ha encontrado para ser asociados con
aberraciones cromosmicas, y el anlisis del cariotipo es til cualquier momento se
descubre que un paciente tenga las manifestaciones de uno de estos sndromes. Cuando
una aberracin cromosmica se revela, no slo del paciente el mdico obtener valiosa
informacin sobre el pronstico, pero la visin de ganancia a los padres sobre la causa del
nio sus problemas y la familia pueden aconsejar con precisin-y por lo general asegur-
sobre los riesgos de recurrencia.
El retraso mental es un componente frecuente de los sndromes de malformaciones
congnitas. Cualquier persona con retraso mental inexplicable debera ser estudiada por
anlisis cromosmico.
Estudios recientes utilizando sondas fluorescentes para subtelomricas secuencias
genticas han demostrado reordenamientos sutiles o supresiones en alrededor del 6% de
los pacientes con retraso mental inexplicable de otro modo, con o sin rasgos dismrficos.
Estas supresiones se producen ya sea por una mutacin de novo o por reordenamientos
equilibrados debido a translocaciones de los padres. Estas aberraciones cromosmicas son
generalmente demasiado pequeos para ser detectados por el anlisis citogentico de
rutina. Anomalas de la diferenciacin sexual se puede entender slo despus de que el
paciente sexo gentico se aclara. La terapia hormonal y la ciruga plstica pueden, en cierta
medida determinan el sexo fenotpico, pero el sexo gentico es dictado por el complemento
de cromosomas sexuales. El ejemplo ms conocido de la dicotoma entre el sexo gentico
y el sexo fenotpico es el sndrome de feminizacin testicular, en la que la constitucin
cromosmica es 46, XY, pero, debido a un defecto en la protena del receptor de la
testosterona (especificada por un gen en el cromosoma Y) , el fenotipo externo es
completamente femenino.
2.1. Periodo pre natal
Cuando existe riesgo de anomala cromosmica fetal mayor que en la poblacin
general, como ocurre en las siguientes situaciones:
Edad materna igual o mayor de 35 aos.
Antecedente familiar de anomala cromosmica.
Anomala cromosmica balanceada (translocaciones) en uno de los progenitores.
Hallazgos ecogrficos o bioqumicos sugestivos de anomala cromosmica.
Otros signos que surjan de la historia personal o familiar de cada caso en particular.
2.2. Periodo neonatal
Malformaciones mayores aisladas.
Presencia de 3 o ms defectos congnitos menores.
Recin nacido con rasgos dismrficos.
Recin nacido con genitales ambiguos.
Parto con producto muerto de causa inexplicable.
Muerte neonatal de causa inexplicada.

2.3. Lactancia
Nios con dificultades para el aprendizaje.
Nios con rasgos dismrficos.
Nios con retraso psicomotor.
2.4. Niez
Trastornos del crecimiento.
Retraso psicomotor.
Rasgos dismrficos.
2.5. Adolescencia
Ginecomastia.
Falta de desarrollo puberal.
Amenorrea primaria o secundaria
Retraso mental.
Rasgos dismrficos.
2.6. Edad adulta
Padres de nios con anomalas cromosmicas estructurales.
Abortos de repeticin.
Infertilidad inexplicable.
Diagnstico prenatal (lquido amnitico y biopsia de corion)
Rasgos dismrficos.
2.7. Interrupcin del embarazo
Existen dos instancias importantes en esta situacin:
Cuanto ms temprano es el aborto, mayor es la frecuencia de anomalas
cromosmicas detectadas.
Cuanto mayor es la edad materna, la frecuencia de abortos espontneos y las
anomalas cromosmicas aumentan.
El estudio cromosmico del material de aborto permite, en algunos casos, poner en
evidencia alteraciones cromosmicas que pueden ser heredadas o no, aportando
informacin para futuros embarazos.
El estudio citogentico est indicado en los parentales con dos o ms abortos
espontneos, ya que podran ser portadores de translocacin; si es posible, est
recomendado hacer el cariotipo fetal de estos abortos.
3.- DIAGNSTICO

Sntomas y signos

La comprensin de las enfermedades depende de una descripcin clara de los sntomas,

los cuales son manifestaciones de los procesos vitales alterados. Pueden variar desde
relatos subjetivos de dolor, como cefalea (dolor de cabeza) o lumbago (dolor de la parte
inferior o lumbar de la espalda), a hechos objetivos o signos, como inflamacin o erupcin.
As pues, podra decirse que un signo es una manifestacin imposible de fingir ante un
mdico, mientras que un sntoma subjetivo es algo imposible de ser detectado por un
mdico. No podemos fingir que tenemos fiebre o tener varicela, por ejemplo; sin embargo,
un buen mdico nunca podr ver nuestro dolor de cabeza, aunque quizs con los avances
tecnolgicos pueda lograrse en un futuro.
Para el diagnstico necesitamos en muchas ocasiones consultar con determinados
especialistas, tales como cardilogos, radilogos, endocrinlogos, etc. Frecuentemente,
necesitamos determinadas exploraciones complementarias como comentamos
anteriormente. Estos incluyen cariotipo en sangre y otros tejidos, anlisis bioqumicos de
sangre y orina y de cultivos celulares, estudios radiolgicos, estudios moleculares, etc.

Estrategias generales de diagnstico de enfermedades genticas.

Como en cualquier otro tipo de patologas, el diagnstico de enfermedades genticas se

realiza mediante la identificacin clnica de los sntomas y signos que caracterizan cada
sndrome concreto, apoyado en datos de laboratorio. Con los avances del Proyecto
Genoma Humano, hoy en da es posible, en muchos casos, analizar directamente la
alteracin causal a nivel del ADN. De todas formas, en el entorno clnico nos encontramos
varios problemas que pueden dificultar el diagnstico correcto. En primer lugar, la posible
presencia de heterogeneidad gentica: varios genes pueden ser los responsables de una
nica enfermedad. Esta circunstancia hace muy laborioso el estudio mutacional, ya que
multiplica el nmero de exones que hay que analizar. Incluso en aquellos casos en los que
se sabe con exactitud cul gen est alterado, puede suceder que las mutaciones
responsables del cuadro clnico se distribuyan por todo el gen (fenmeno que algunos
autores denominan heterogeneidad allica), de manera que sera necesario analizar toda
la regin codificante antes de poder descartar o confirmar que el gen en cuestin est
mutado. Lgicamente, si se trata de un gen de gran tamao, el anlisis se hace
extremadamente laborioso. La situacin opuesta vendra dada por aquellas enfermedades
genticas que estn causadas, en la gran mayora de familias, por una misma mutacin, de
manera que podemos centrarnos en el estudio de esa mutacin concreta para confirmar o
descartar el defecto molecular que provoca esa enfermedad.

Por tanto, hemos de sopesar todas las circunstancias mencionadas para decidir si nos
inclinamos por realizar lo que se denomina diagnstico directo (anlisis de un individuo para
ver si es portador de la mutacin concreta que causa la enfermedad en esa familia), o si
por el contrario aplicaremos el denominado diagnstico indirecto (anlisis de marcadores
genticos en la familia para ver si el consultando ha heredado el cromosoma que lleva la
mutacin).

EXMENES COMPLEMENTARIOS

CARIOTIPO

Todos los seres humanos tienen 22 pares de cromosomas iguales, denominados

autosomas, y un par de cromosomas diferentes segn el sexo del individuo, los
cromosomas sexuales o heterocromosomas.

Los cromosomas de cada especie poseen una serie de caractersticas, como la forma, el
tamao, la posicin del centrmero y las bandas que presentan al teirse

Este conjunto de particularidades, que permite identificar los cromosomas de las distintas
especies, recibe el nombre de cariotipo, y su representacin grfica, ordenada por parejas
de cromosomas homlogos, se denomina cariograma.

A continuacin se puede ver un cariograma:

Es recomendable realizar un cariotipo de un individuo en los casos que a continuacin se
exponen:

Para confirmar sndromes congnitos

Cuando se observan algunas anomalas especficas o que pueden estar
relacionadas con los heterocromosomas
En situaciones de abortos repetidos, problemas de esterilidad.

Para determinar el cariotipo de un individuo, es necesario llevar a cabo un cultivo de

clulas y, cuando estas comienzan a dividirse, teirlas y hacer una preparacin
microscpica para fotografiar los cromosomas.
En un feto, las clulas se pueden obtener por amniocentesis, es decir, efectuando
una puncin en el vientre de la madre para obtener lquido amnitico o bien por
puncin directa del cordn umbilical para extraer sangre del feto. En un individuo
adulto se utilizan los glbulos blancos de la sangre.
El ltimo paso para determinar el cariotipo es ordenar y emparejar los cromosomas,
y verificar si es correcto.

UTILIDAD:

Mediante el estudio del cariotipo es posible detectar anomalas en el nmero o en la

forma de los cromosomas. La mayora de estas anomalas provocan deficiencias, y
muchos individuos no llegan a nacer o mueren en los primeros meses de vida

La determinacin del cariotipo del feto permite detectar, antes del nacimiento, algunas
de estas deficiencias

Citogentica convencional
 Hasta el ao 1970, los cromosomas se tean de forma uniforme, por lo que las
parejas de los diferentes cromosomas se ordenaban por su tamao y parecido
morfolgico (Figura 1a).
Ms adelante, en al ao 1971, se desarrollaron tcnicas que tean los cromosomas
en bandas claras y oscuras (o fluorescentes y no fluorescentes). Esas bandas
seguan distintos patrones que eran iguales solo en cada pareja de cromosomas
paterno y materno.

En conjunto se establecieron cinco tipos de anlisis de los patrones de bandas

citogenticas:

1. Bandas Q (Figura 1b), que aparecen como bandas fluorescentes y brillantes en

contraste con otras no fluorescentes. Estas bandas, aunque fciles de obtener,
presentan problemas metodolgicos y de anlisis (se ven solo con luz ultravioleta,
la fluorescencia dura poco tiempo).

2. Bandas C (Figura 1c), que tien especficamente la heterocromatina de las regiones

centromricas.

3. Bandas G (Figura 1d), llamadas as porque se tien con giemsa en forma de bandas
transversales claras y obscuras.

4. Bandas R (Figura 1e), que en realidad constituyen la representacin del patrn

reverso de las bandas G. As las G oscuras, son claras en la tincin R y viceversa.

5. Bandas Ag-NOR (Figura 1f), que muestran las regiones organizadoras nucleolares
de los cromosomas acrocntricos (pares 13, 14, 15, 21 y 22).

Figura 1. Tipos de tinciones de los cromosomas

 El cariotipo de un individuo puede realizarse por diversas tcnicas de bandeo
cromosmico y en diferentes tejidos, siendo el bandeo G en linfocitos de sangre
perifrica la tcnica y muestra de eleccin.
Esta metodologa de bajo costo, permite mediante el anlisis detallado de todos los
cromosomas, detectar la Introduccin presencia de anomalas numricas y
estructurales.
Las anomalas numricas (aneuploidas) implican la prdida y/o ganancia de uno o
varios cromosomas completos y puede incluir tanto a autosomas como a
cromosomas sexuales.
Las anomalas estructurales implican cambios en la estructura de uno o varios
cromosomas, las ms comunes en son: deleciones, inversiones, translocaciones.

En qu consiste un cariotipo de alta resolucin y cmo se obtiene?

o El cariotipo de alta resolucin (AR) consiste en el anlisis de los cromosomas en

profase y prometafase incrementando as el nmero de bandas visibles al
microscopio.
o Las clulas en profase y prometafase se obtienen a partir de un cultivo de linfocitos
o Los cromosomas en profase y prometafase pueden alcanzar una resolucin superior
a las 800 bandas
o De esta manera, al producirse una elongacin de los cromosomas es posible la
deteccin de alteraciones estructurales ms pequeas como microdeleciones,
duplicaciones y sutiles translocaciones
Figura 2. Comparacin entre cromosomas de una resolucin media (alrededor de 550
bandas) con cromosomas de alta resolucin (850 bandas).

o Tambin se utiliza para la confirmacin de resultados obtenidos en un cariotipo de

resolucin estndar, y para definir en forma precisa los puntos de ruptura de los
cromosomas involucrados en alteraciones estructurales.
o Es importante aclarar que:

-Ciertas deleciones muy pequeas pueden escapar a esta tcnica y dar resultado
falsos negativos.

- Cualquier delecin que se sospeche citogenticamente debe ser confirmada por

FISH u otra tcnica de citogentica molecular.

- Slo algunas microdeleciones son citogenticamente visibles. Actualmente, la

manera de identificar estos sndromes es por medio de FISH, utilizando sondas
especficas para las regiones delecionadas.
 Es importante recordar que la realizacin de cualquier prueba gentica debe ir
acompaada de un acto. asesoramiento gentico

PRUEBAS BIOQUIMICAS

Las pruebas bioqumicas observan los niveles de substancias y enzimas especficas

que son producidas por reacciones qumicas en el cuerpo.
Los desrdenes metablicos con frecuencia son el resultado de una enzima que
falta o que no funciona.
Cuando falta una enzima, o cuando sta se presenta en cantidad reducida, o no
funciona correctamente, el cuerpo no puede desempear sus reacciones qumicas
usuales
Como resultado, pueden ocurrir varios cambios dainos en la bioqumica del cuerpo.
Estas incluyen la acumulacin de substratos, la acumulacin de precursores,
deficiencia de productos, y el redireccionamiento de substratos a vas alternas

PRUEBAS EN SANGRE

Las pruebas de laboratorio o anlisis clnicos miden el sodio, el potasio, el cloro, el

bicarbonato, el nitrgeno ureico en sangre (BUN), el magnesio, la creatinina, y la
glucosa. A veces tambin incluyen el calcio y otros componentes de la sangre.
Algunos exmenes de sangre, tales como la medicin de la glucosa, colesterol, o
para la deteccin de enfermedades de transmisin sexual requieren ayuno (o no
consumicin de alimentos) de ocho a doce horas antes del examen de sangre.
Sin embargo, otros exmenes de sangre especializados, tales como la gasometra
arterial (AGA), requieren que la sangre sea extrada de una arteria. La gasometra
arterial de la sangre es primariamente usada para monitorear los niveles del dixido
de carbono relacionados con la funcin pulmonar. Sin embargo, tambin es
requerido al medir los niveles de pH y de bicarbonato de la sangre para ciertas
condiciones metablicas.

OTRAS PRUEBAS DE SANGRE COMUNES:

Hemograma: Deber incluir: el recuento de eritrocitos, la hemoglobina, el hematocrito,

los ndices corpusculares, el estudio de la morfologa eritrocitaria y, adems, el recuento
de leucocitos, la frmula leucocitaria, el recuento plaquetario, la morfologa plaquetaria.

Otros ndices que pueden incluirse son: recuento de reticulocitos, el ndice ictrico y la
velocidad de eritrosedimentacin.

Sin embargo, el "hemograma completo" difiere en cuanto a informe, en los distintos

laboratorios

Examen de Schilling: Es un examen que se utiliza para determinar si el cuerpo

absorbe la vitamina B12 de manera normal. (Anemia perniciosa)

PRUEBAS EN ORINA
 La orina puede analizarse de muchas maneras y con diversos objetivos. Como en el
caso de la sangre hay anlisis bsicos y otros ms complejos, que slo son solicitados
en condiciones especiales.

Cultivo de orina:

El cultivo se hace a partir de una muestra simple de orina (a veces recogida con
sonda).
La muestra se deposita en un medio frtil (por eso se llama cultivo) donde
comienzan a crecer las bacterias. Al cabo de unos das se ve cmo va la siembra.
Aqu no se trata de mirar qu sustancias son excretadas por la orina, sino de saber
si existe o no infeccin de orina y, caso de que exista, reconocer con exactitud el
germen responsable (identificacin microbiolgica) y cul es el antibitico ms
efectivo (antibiograma).
Si han crecido colonias de bacterias se informa como cultivo positivo y se informa
con exactitud qu tipo de microbio es el que ha crecido y cul es el antibitico que
puede eliminarlo (antibiograma).
Por esto los cultivos no son pruebas inmediatas y se debe esperar unos das a tener
un resultado (a veces la infeccin es tan evidente que las bacterias son visibles en
el simple examen del sedimento, con lo que el cultivo es slo para confirmacin y
antibiograma).

ESTUDIOS MOLECULARES DE ADN

En las ltimas dcadas la tecnologa de recombinacin del ADN tambin conocida

como ingeniera gentica, o ms acertadamente recombinacin gentica in vitro, ha
revolucionado la Biologa. Las investigaciones que se realizan en esta rea estn
enfocadas a un diagnstico oportuno de enfermedades, as como su posible tratamiento a
travs de la terapia con molculas recombinantes e introduccin de genes. Adems, la
manipulacin de genes proporciona una herramienta fundamental para la eliminacin futura
de enfermedades mortales para el hombre. Por estas razones resulta til que el mdico de
asistencia est familiarizado con conceptos bsicos sobre biologa molecular, su aplicacin
en la investigacin biomdica, y en especial con sus posibles aplicaciones clnicas.

Los estudios moleculares actuales que se han sido desarrollados sirven para el diagnstico
de

- Estudio de ADN para determinar paternidad.

- Estudios de ADN para diagnstico de desrdenes oncohematolgicos.
- Estudios de ADN para diagnstico de enfermedades gnicas:
- Sndrome de la Fragilidad del Cromosoma X.
- Distrofia Muscular de Duchenne.
- Gen SRY, Genes de la Azoospermia.
- -talasemia, a1 antitripsina.
- Prader Willi/Angelman.
- Acondroplasia, Anemia Falciforme, Fibrosis qustica.
- Atrofia Muscular Espinal.
- Gaucher, BRCA 1, BRCA 2.
ESTUDIOS ENZIMTICOS, HISTOLGICOS, ECOGRFICOS, ETC.

Hibridacin in situ: Es un mtodo histoqumico que emplea a la biologa molecular de la

misma manera que la inmunohistoqumica utiliza los mtodos de la inmunologa. La
especificidad de la hibridacin in situ (HIS) se basa en la unin recproca de una secuencia
de oligonucletidos (la sonda), con una secuencia complementaria de nucletidos presente
en las molculas de ARN o ADN dentro del tejido. Entre las ventajas de esta tcnica estn
su alto grado de resolucin espacial que permite la localizacin de secuencias gnicas
a escala cromosmica, con lo que se pueden detectar translocaciones y otras alteraciones,
as como tambin el estudio de expresin gnica a escala celular y subcelular. Otra de sus
ventajas es que se puede realizar en material fijado e incluido en parafina lo que permite
realizar estudios retrospectivos en material de archivo. Por otra parte la cantidad de tejido
requerido para realizar un estudio de HIS es mnima en comparacin con otras tcnicas de
biologa molecular.

Entre las principales aplicaciones de la HIS tenemos la deteccin de ARN o ADN de origen
viral, el anlisis de la expresin gnica (deteccin de ARNm) y los anlisis.

La HIS con fluorescencia (FISH) es una importante herramienta de uso rutinario en

investigacin y con grandes posibilidades de aplicacin en el diagnstico de enfermedades
neoplsicas, genticas, estudios a nivel cromosmico, etc. En ella la sonda se marca con
sustancias fluorescentes que se visualizan despus mediante microscopa.

Reaccin en cadena de la polimerasa.

La reaccin en cadena de la polimerasa o PCR es un mtodo enzimtico de amplificacin

de secuencias especficas de ADN, concebido por Kary Mullis y sus colaboradores
a principios de los aos 80. Este mtodo permite la sntesis in vitro de un fragmento de ADN
de forma tal que, en cada ciclo del proceso, se duplica el nmero de molculas. El principio
del PCR consiste en determinar la secuencia de inters y seleccionar pequeos segmentos
de nucletidos llamados iniciadores o cebadores, complementarios con la secuencia de
nucletidos de los extremos opuestos de las cadenas que flanquean a dicha secuencia, a
partir de los cuales se inicia la elongacin o sntesis de nuevas cadenas en el extremo 3'
de cada iniciador.

En esta tcnica se consideran importantes los siguientes parmetros: un suministro

abundante de iniciadores y de desoxinucletidos trifosfatados (dNTPs); una fuente
renovada de ADN polimerasa (enzima encargada de la sntesis de las cadenas
complementarias); y los ciclos peridicos de cambios de temperatura. Estos ltimos
consisten en: desnaturalizacin del ADN a 100 C, alineamiento de los iniciadores con las
secuencias de inters entre 50 y 60 C y sntesis del ADN a 72 C. Estas temperaturas
pueden variar de acuerdo con las condiciones de la reaccin.

Las aplicaciones de la PCR son mltiples y parecen estar slo limitadas por la imaginacin
de los cientficos. Entre ellas tenemos: la amplificacin de fragmentos de genes como rpida
alternativa de la clonacin, la modificacin de fragmentos de ADN, la deteccin sensible de
microorganismos seguido de una segura genotipificacin, si se desea, el anlisis de
muestras arqueolgicas y estudios antropolgicos, la deteccin de mutaciones importantes
en enfermedades hereditarias, transformacin maligna o tipaje de tejidos, el anlisis de
marcadores genticos para aplicaciones forenses, pruebas de paternidad y para el mapeo
de rasgos hereditarios, el estudio de expresin de genes, entre otras.

Mapas de restriccin.

Esta tcnica se basa en el principio de la enzimologa de restriccin donde de una molcula

de ADN dada se obtendrn siempre los mismos fragmentos cada vez que sea expuesta a
una enzima de restriccin particular. La complejidad del mapa depende del tamao de la
molcula (a mayor nmero de bases ser mayor el nmero de sitios de restriccin) y del
nmero de enzimas utilizadas. De esta forma, dos molculas de ADN del mismo tamao
pueden ser fcilmente diferenciadas por los mapas de restriccin que producen al tratarlas
con las mismas enzimas

Este mismo principio lo utiliza el procedimiento denominado anlisis de polimorfismos de

longitud de fragmentos de restriccin (RFLP), pero aprovechando el hecho de la existencia
de variaciones en la constitucin gentica de la poblacin (polimorfismo gentico), que hace
que se observen diferencias entre los individuos en cuanto al nmero y longitud de los
fragmentos producidos. La existencia de los RFLPs es la base de la tcnica que se ha
denominado huellas digitales del ADN y que permite establecer inequvocamente la
relacin padres e hijos, entre otras aplicaciones.

4. Asesoramiento Gentico
Es un proceso en el cual un profesional calificado comparte informacin acerca de
afecciones genticas. Esta informacin incluye aspectos especficos acerca de la afeccin
en cuestin, exmenes utilizados para identificarla y ayuda para comprender cualquier
resultado de las pruebas de laboratorio. Esto le ayuda a los padres, los padres potenciales
e individuos afectados a tomar decisiones informadas y con conocimiento para ellos y sus
hijos.
Qu es un Asesor Gentico?
Los Asesores genticos cuentan con capacitacin y entrenamiento especializado, y
experiencia dentro del rea de la gentica. Adems, los mismos/as estn calificados para
aconsejar a las personas altamente sensibles o que deben lidiar con problemas
emocionales. Un Asesor gentico debe contar -al menos- con un diploma de Maestra en
Asesoramiento Gentico. Este campo de la medicina es relativamente nuevo. Como
Asesor, su trabajo es informar a los pacientes acerca de los posibles defectos de
nacimiento, o de los trastornos genticos que podran afectar al beb. Su capacitacin y
entrenamiento en los temas relacionados con la gentica les permiten clasificar toda la
terminologa gentica que usted quizs no llegue a comprender, a fin de darle sentido a la
misma y permitirle entender de qu estn hablando. Ellos se encargarn de identificar
cualquier factor de riesgo que usted o su pareja pudieran tener, y de la probabilidad de que
el beb desarrolle un defecto gentico o un trastorno gentico. Estos profesionales le
presentarn todos los posibles escenarios resultantes que podran ayudar a comprender y
decidir mejor por usted qu es lo que debera hacer. Sin embargo, ellos no tomarn
decisiones por usted ni por su pareja. Los Asesores genticos toman en cuenta que cada
familia es diferente y que lo que podra estar bien para una pareja no sera necesariamente
la mejor opcin para otra pareja. Es por ello que tratan de que los pacientes se vuelvan
proactivos en lo que respecta a la toma de decisiones relacionadas con la solucin final.
Cundo Debera Concertar Una Cita con un Asesor Gentico?
Los Asesor genticos principalmente tratan casos de asesoramiento prenatal. Sin embargo,
usted no tendr que esperar hasta quedar embarazada para poder concertar una cita con
uno de ellos/as. Si estuviera pensando en quedar embarazada, y especialmente si tuviera
en cuenta que usted mismo entra en una de las siguientes categoras; sera una muy buena
idea concertar una cita con un Asesor gentico sin perder ms tiempo. Entre las parejas
que necesitarn asesoramiento gentico se incluyen a las siguientes:
Aquellas que saben o que sospechan que poseen antecedentes familiares de defectos de
nacimiento o de trastornos hereditarios.
Cualquier padre que ya haya tenido un nio/a con algn defecto de nacimiento o un
trastorno gentico.
Una madre que haya experimentado dos o ms abortos espontneos, o que haya dado a
luz un beb muerto, o que haya tenido un hijo que hubiera muerto en la infancia.
Si un examen mdico prenatal o una amniocentesis hubieran arrojado un resultado
anormal.
Cualquier padre que estuviera preocupado por estar expuesto a toxinas; ya sea en su lugar
de trabajo o por su estilo de vida (por ejemplo: la radiacin, ciertos medicamentos, o
infecciones.)
Si la edad de la futura mam fuera de 35 aos o ms (el riesgo de que el beb padezca
Sndrome de Down se incrementara a uno de cada 350 nacimientos; a la edad de 35 aos;
y sera de uno entre 30 nacimientos si la futura mam tuviera 45 aos de edad.)
Existe una preocupacin generalizada sobre el riesgo de desarrollar problemas genticos,
debido a los antecedentes tnicos de sus padres. Ciertas etnias cuentan con una mayor
predisposicin a desarrollar ciertos problemas genticos. Por ejemplo, los judos
provenientes de Europa Central y de Europa del Este son ms propensos a ser portadores
de la enfermedad de Tay Sachs; mientras que los Afroamericanos son ms propensos a
tener bebs que padezcan anemia drepanoctica.
CONCLUSIONES:
Las etapas para la realizacin del estudio gentico incluyen el pedigree o rbol
genealgico, que es un diagrama esquemtico muy importante, de la familia que
nos proporciona de forma grfica la relacin entre los diferentes miembros de la
familia y es importante utilizar smbolos estndar de forma que el rbol genealgico
sea interpretado por cualquier profesional de la salud.
BIBLIOGRAFIA:
OMIM
WWW.BIOMEDINET.COM
WWW.ACCESSXCELEN.COM
PUBMED (NCBI)