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UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BSICAS


LABORATORIO DE GENTICA
GUIA DE LABORATORIO

GENERALIDADES DE LA DROSOPHILA MELANOGASTER

OBJETIVOS:

Identificar el ciclo de vida de la mosca de la fruta


Conocer las diferentes estructuras anatmicas externas de la drosophila
Diferenciar las caractersticas visibles entre machos y hembras.

1. Introduccin

Muchos conceptos bsicos de la gentica clsica, la molecular y la evolutiva se han


obtenido empleando a la Drosophila como organismo en la biologa experimental.
Adems, el cmulo de conocimientos generados sobre la estructura y la funcin del
genoma de Drosophila, as como de diversos procesos esenciales de la biologa, tales
como el patrn de formacin del embrin, el desarrollo y funciones de los rganos de
los sentidos y del sistema nervioso, han propiciado el que la mosca de la fruta se
considere como un organismo modelo.

La transmisin de informacin biolgica de progenitores a progenie, ha sido un factor


esencial en el desarrollo de los organismos, est transmisin ha requerido de la
evolucin de mecanismos genticos, que garanticen la fidelidad de este proceso.
Debido a su fundamental importancia estos mecanismos fueron establecidos desde muy
temprano en la historia de la vida, de manera que en la actualidad son compartidos por
muchos grupos taxonmicos. Para comprender los principios genticos, es posible
entonces estudiar organismos muy diferentes y llegar a conclusiones generales. La
seleccin de un organismo especfico, para realizar estudios genticos, depende
bsicamente de las ventajas especficas que ste puede ofrecer en la respuesta de
preguntas particulares de investigacin.

Para el estudio de principios genticos tales como transmisin de genes,


entrecruzamiento, ligamiento al sexo, interaccin de genes y muchos otros aspectos
genticos, no hay otro organismo mejor que la mosca Drosohila. melanogaster. La
mosca de la fruta, ha sido empleada en estudios de herencia desde 1909, empezando
con T.H. Morgan y sus colaboradores, y a travs de los aos un sinnumero de
experimentos se han realizado con este organismo.

Las principales ventajas de Drosophila melanogaster como material de trabajo en el


estudio de la gentica sobre biologa celular y evolutiva son:
- Facilidad de cultivo (puede ser cultivada sobre una variedad de medio de cultivo
simple)
- Ciclo rpido de generacin (se obtienen varios cientos de descendientes de un
simple par de cruces).
- Tamao pequeo (permite facilidad de manejo y almacenamiento)
- Ciclo de vida corto, dura de 10 das a 25C con una humedad relativa de 60%.

Es un insecto que pertenece al orden Dptera que agrupa a aquellos organismos en el


que solo el primer par de alas es funcional y el segundo se ha transformado en rganos
del equilibrio, los llamados halterios o balancines. Es un organismo representativo de la
familia Droshophiloidae la que incluye a las mosquitas pequeas, con algunas cerdas y
venacion de las alas, el gnero Drosophila comprende varias especies de moscas con la
vena subcostal degenerada, incompleta o ausente, las pertenecientes a la especie
melanogaster (1830, Meigen) tienen 2 interrupciones en la vena costal.

El nmero cromosmico de D. melanogaster es relativamente pequeo, ya que posee 4


pares de cromosomas, todos ellos mapeados por recombinacin y secuenciados
mediante herramientas como la clonacin y la bioinformtica. El cromosoma X
(cromosoma 1) es acrocntrico, el cromosoma Y es submetacntrico, los pares
autosmicos 2 y 3 son metacntricos y muy grandes, mientras que el par de
cromosomas 4 es acrocntrico muy pequeo, casi puntual. El cromosoma de mayor
tamaos en este organismo es comparable con el tamao del cromosoma humano ms
pequeo. Cada brazo cromosmico, excepto el del cromosoma 4, tiene una longitud de
2,5m. En los autosomas se encuentra un bloque pericntrico de heterocromatina
constitutiva, que corresponde a 25% de la cromatina. El cromosoma X es
heterocromtico en 50%, el cromosoma Y lo es casi en su totalidad y el cromosoma 4
es completamente heterocromtico.

Al tomar a Drosophila como base de experimentacin, es importantsimo familiarizarse


con su desarrollo, caractersticas morfolgicas y condiciones de manejo en el
laboratorio.

CLASIFICACION
Phylim: Artrpoda
Clase: Hexpoda
Orden: Dptera
Familia: Drosophilidae
Gnero: Drosophila
Especie: melanogaster

CICLO DE VIDA
El ciclo de vida de Drosophila melanogaster incluye cuatro etapas: Huevo, larva, pupa y
adulto. La duracin del ciclo vara con la temperatura de cultivo. A 25 0C el ciclo dura
alrededor de 10 a 12 das, pero a 20C puede durar alrededor de 15 das. Los cultivos
no deben exponerse a temperaturas altas 30C, esto resulta en la esterilidad o muerte
de las moscas; ni a bajas temperaturas (10C), lo cual resulta en ciclos de vida
prolongados (tal vez de 57 das), y reducir viabilidad. La temperatura ptima del cultivo
es de 25C.

Huevo (0.5mm): Las hembras adultas son capaces de poner huevos dos das despus
de emerger del estado de pupa, la puesta aumenta por da durante una semana
hasta 50 o 75 huevecillos por das. Los ponen sobre la superficie del alimento.
El huevo es ovoide, con dos pequeas proyecciones que emergen de un
extremo, stas son aplanadas y le sirven al huevo para que no se hunda dentro
del medio. El desarrollo embrionario del huevo dura aproximadamente 1 da a
250C. La larva emerge del huevo.

Larva (4-5mm): Es blanca, segmentada y vermiforme. Tiene partes bucales de


coloracin negra (ganchos mandibulares) en una regin ceflica estrecha, que
penetran en el alimento comiendo vorazmente. No tiene ojos por lo que este
animal es completamente ciego. Las larvas tampoco tienen apndices y deben
empujarse comiendo para desplazarse por su ambiente. Respiran por trqueas
y poseen un par de espirculos visibles (poros areos) en los extremos
anteriores y posteriores del cuerpo.
La fase larvaria en el ciclo de Drosophila melanogaster es de rpido comer y de
crecer. Consiste de tres subdivisiones llamadas estadios. El primero y segundo
estadio terminan en mudas, cada muda significa una eliminacin completa de la
piel y partes orales de la larva y es el mecanismo por medio del cual esta crece.
El tercer estadio termina en la pupacin. Inmediatamente antes de la pupacin
la larva deja de comer, se arrastra hacia una superficie seca, y se revierte sus
espirculos anteriores. La fase larvaria dura alrededor de 4 das a 25C, es ese
momento el tercer estadio y mide aproximadamente 4. 5m m.
Pupa (3mm): La pupa es considerada la fase reorganizativa del ciclo de la mosca,
durante el cual la mayora de las estructuras larvarias son destruidas y las
estructuras adultas se desarrollan a partir de tejidos embrionarios llamados
anlagen (o tambin discos imaginables). Estos tejidos embrionarios han
permanecido latentes en el animal desde su diferenciacin en el huevo. El
animal empupa dentro de la ltima piel larvaria, la cual es en un inicio suave y
blanca pero gradualmente se endurece y adquiere un color ms oscuro. Los
cambios anteriores resultan en el desarrollo de un organismo con la forma
corporal y las estructuras de adulto (imago). La fase de pupa tarda alrededor de
4 das a 25C; el adulto emerge del pupario.

Adulto (2mm): El adulto es considerado la fase reproductiva del ciclo. La mosca emerge
o eclosiona del pupario forzando su salida por el extremo anterior. En un inicio,
la mosca adulta es de forma elongada con alas no expandidas. En una hora las
alas se expanden y el cuerpo gradualmente adquiere una forma de adulto ms
definitiva. En un principio los adultos son de un color claro , dentro de las
primeras pocas horas se oscurecen y adquieren el color caracterstico (caf
claro).
Los adultos de D. melanogaster pueden aparearse 6 horas despus de haber
emergido de la pupa. El esperma es almacenado en las espermatecas y en los
receptculos ventrales de la hembra y es liberado gradualmente al oviducto a
medida que se producen los huevos pasados por el oviducto a la vagina. El
promedio de vida de la mosca adulta es de 30 das a 25C.

Cabeza
La cabeza se compone de 6 segmentos fusionados. En ella encontrar:
Antena, cada una consiste de tres segmentos
Aristas, cada una ramificada con origen cerca del segmento distal de
cada antena
Proboscis, lengua
Ojos compuestos, formados de un gran nmero de facetas
independientes (omatidios)
Ocelos, ojos simples, en nmero de tres y localizados entre los ojos
compuestos en la superficie dorsal de la cabeza.
Setas, vibrisas, orbitales, ocelares, verticales, posterverticales.

Trax
El trax est compuesto por tres segmentos fusionados:
Protrax, consiste en un par de hmeros y el primer par de patas (cada
pata formada de coxa, trocnter, fmur, tibia y cinco articulaciones
tarsicas, en el caso de los machos el peinecillo sexual, en la articulacin
tarsica proximal.
Mesotrax, consiste de mesonoto y escutelo de localizacin dorsal:
mesopleura, petropleura y esternopleura de localizacin lateral, las alas
(note las posiciones generales de las venas longitudinales y
transversales), y el segundo par de patas.
Metatrax, consiste de metanoto, hipleura, los alterios o balancines (alas
traseras modificadas que funcionan para el equilibrio de la mosca) y el
tercer par de patas.
Espirculos torxicos, en nmero de dos
Setas, dorso-centrales, noto-pleurales, presuturales, supra-alares, pos-
alares y escutares.

Abdomen
Consiste de 7 u 8 segmentos visibles en la hembra y 5 o 6 en el macho. En l
encontrar:
Tergitos, escleritos dorsales (placas intergumentales), uno por
segmento.
Esternitos, escleritos abdominales, uno por segmento.
Espirculos abdominales
Regin genital

CRONOLOGIA DEL DESARROLLO DE Drosophila melanogaster (25C)

Por da Por hora Fase


0 0 Huevo depositado
0-1 0-22 Embrin
1 22 Eclosin del huevo (primer estadio)
2 47 Primera muda (segundo estadio)
3 70 Segunda muda (tercer estadio)
5 118 Formacin delpupario
5 122 Muda prepupal (cuarto estadio)
5,5 130 Pupa: eversin de cabeza, alas y patas
7 167 Pigmentacin de ojos pupales
9 214 Adulto emerge del pupario con alas dobladas
9 215 Las alas se expanden al tamao adulto

2. Procedimiento

- Observe al estereoscopio las diferentes etapas que se dan en el ciclo de vida de la


drospohila y realice el dibujo correspondiente.
- Observe un adulto e identifique las diferentes estructuras propias de esta etapa
- Observe un macho y una hembra y describa las diferencias morfolgicas que
existen entre los 2.

Realice un Preinforme donde conteste las siguientes preguntas y por favor incluya la
bibliografa consultada, debe presentarse en forma individual.

Que tipo estudios realiz Tomas morgan con la drosophila melanogaster y cul
era su finalidad.

En un dibujo describa de manera detallada las caractersticas morfolgicas de la


Drosophila melanogaster y las diferencias entre macho y hembra.

Mencione dos medios de cultivo ideales para la drosophila melanogaster y


cules son las condiciones para la siembra y cultivo de este organismo.

Consulte el FlyBase Drosophila melanogaster y haga un resumen de toda la


informacin genetica que puede encontrar en este sitio. (tamao del genoma,
proteinas, genes representativos, homologia etc)

3. Bibliografa.

THOMPSON J.S. Gentica mdica, 3a. Ed. Salvat. 2008


- KLUG, WILLIAN. Conceptos de gentica, 8a Ed. Pearson, Prentice Hall, 2006.
- SUZUKI, DAVID. Gentica, 5a Ed. Mc Graw Hill, 2003
- STRACHAN TOM. Gentica Humana, 3 Edicin. Mc Graw Hill, 2006
- GARCIA HERREROS, CECILIA. Manual de Laboratorio de Gentica. UIS

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