Toluca, Mxico a 24, 25 de Octubre del 2013

Se realizaron 4 prcticas para el apoyo del CBT de Zinacantepec, proveniente

de Santamara del Monte. Solicitado

Impartidas por el Dr. Moiss Tejocote Prez

Dra. Mara del Lourdes Fraire cordero

Apoyo a la prctica: Ma. Cristina Vzquez Hurtado

Ma. Albina Morales Garca

Jesus Gonzlez Santana

Con una duracin de 12 horas seguidas

Practica #1. MICROBIOTA DE LACTEOS

OBJETIVO: observar que y demostrar que la acidez en los lcteos favorece su

descomposicin, modificacin de su microbiota y contaminacin microbiana.

Material:

Leche bronca

Leche pasteurizada

Vinagre

Pipeta de 2ml

2 vasos de precipitado de 600 ml

Procedimiento:

Verter 300ml de leche en cada uno de los vasos, adicionar 2ml de acido
actico agitando constantemente, medir con el potencimetro el pH, seguir el
procedimiento hasta obtener un pH de 3.
Practica # 2 MICROBIOTA DE CARNICOS (RES, PESCADO, POLLO)

OBJETIVO: demostrar que las protenas de la carne al desnaturalizarse

favorecen al cambio y contaminacin de la carne.

Material

1 Mechero Fisher

4 vasos de precipitado

Carnes (pollo, pescado, res)

Procedimiento:

Colocar 300ml de agua en cada uno de los vasos, colocando en cada uno de
ellos la carne correspondiente, colocar a fuego cada uno de los vasos hasta
obtener un caldo, vaciar el contenido de los tres vasos en uno solo, dejar
reposar y observar.

Practica #3 MICROBIOTA DE CEREALES (Trigo, lenteja, frijol)

OBJETIVO: observar la humedad en un cereal o semilla modificada

MATERIAL:

Balanza

3 vasos de precipitado de 250ml

Cereales (trigo, lenteja, frijol)

PROCEDIMIENTO:

Pesar las semillas

Depositar 100 semillas con 100ml de agua en cada uno de vasos

Dejar reposar durante 1 hora, posteriormente secar las semillas y pesarlas

nuevamente.
Practica #4MICROBIOTA DE FRUTAS Y VERDURAS.

OBJETIVO: demostrar que las frutas y verduras son susceptibles a fermentarse

con el aumento de temperatura. Observar cmo es que cambia su microbiota y
descomposicin.

MATERIAL:

Tripie

Mechero bunsen

Tela de asbesto

3 vasos de precipitado de 600ml

Matraz de 250ml

Procedimiento:

Picar las frutas para ponche

Agregar 300ml de agua y hervir

Juntar los extractos o caldos en el matraz (200ml)

Agregar una cucharada de levadura para fermentarse

Calentar levemente con el mechero

Dejar fermentar por 1 hora

Practica #5 PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

OBJETIVO : Aprender la clasificacin y uso de los medios de cultivo,. Preparar

medios de cultivo y manejar adecuadamente la autoclave

Material:

Agar Bacteriolgico

Agar Standar

Matraz Elermeyer 250 ml

Mechero Fisher
Cajas petri ,

Papel Parafilm

Autoclave

Incubadora

Agitador de vidrio

Esptula

Balanza

PROCEDIMIENTO: Pesar los reactivos necesarios para preparar 250 mL de

medio (por equipo). Ponerlos en el matraz.

2. Con la probeta, medir 250 mL de agua destilada y aadirla al matraz con el

polvo.

3. Poner el matraz sobre el agitador con para que la suspensin se mezcle

homogneamente.

4. Cuando la solucin est homognea, retirarla del agitador, y tapar con un

pedazo de aluminio.

5. La autoclave estar prendida previamente por la profesora. Con su ayuda,

introduce

tu matraz en el interior de la autoclave. Cirrala siguiendo las indicaciones de

la maestra.

6. Una vez que empiece a salir vapor, coloca la vlvula en la autoclave, para
que la presin comience a subir. Tiene que llegar hasta 15 lb/in2. A partir de
este momento, debers tomar el tiempo de 15 minutos. Debers tener cuidado
de que la presin de la autoclave, nunca rebase los 20 lb/in2, ni est por
debajo de los 15 lb/in2. Esto se puede controlar conectando y desconectando la
autoclave, segn te indique la maestra.

7. Transcurridos los 15 minutos, desconecta la autoclave. Comienza a abrir la

vlvula para liberar el vapor y que la presin comience a bajar. La autoclave
puede abrirse nicamente cuando el manmetro marque cero. Antes no ya
que podra explotar!

8. La autoclave se abre desde atrs, procurando que nadie quede de frente

hacia donde se abre la tapa, ya que saldr mucho vapor caliente que causa
quemaduras. Una vez que se abri con cuidado, con ayuda del trapo, sacar el
matraz.

9. Vaciar el medio en las cajas de Petri estriles siguiendo la tcnica asptica.

Las cajas no pueden ser destapadas a menos que sea entre los mecheros o
dentro de la campana de flujo laminar. Las tapas no se tocan por dentro con los
dedos, ni se sacan del rea de esterilidad.

10. Ya slidas, se cierran adecuadamente y se etiquetan con el tipo de medio,

equipo, grupo y fecha de elaboracin. Guardar en la incubadora para utilizar la
siguiente prctica.

11. Vaciar el agua de la autoclave con cuidado de no quemarse.

Practica #6 OBSERVACION DEL HONGO AL MICROSCOPIO

OBJETIVO: La identificacin de microorganismos se basa en la observacin de

las caractersticas microscpicas y de desarrollo que presentan en medios
lquidos, semislidos y slidos. En los ltimos la formacin de colonias visibles
con caractersticas particulares permite diferenciar a los microorganismos, as
como detectar contaminantes en los cultivos

Material:

Microscopio

Aceite de inmersin

Colorantes para tincin de Gram

Cajas de Petri sembradas

Mecheros Fisher

Asas

Portaobjetos

PROCEDIMIENTO: Revisar y registrar las caractersticas coloniales del desarrollo

bacteriano.

2. Seleccionar una colonia aislada de cada una de las cepas en estudio, y a

partir de ellas:

3. Realizar un frote y una tincin de Gram.

4. Mediante la tcnica, tomar una muestra del hongo filamentoso para hacer
una preparacin en fresco y teir Colocar una gota de lactofenol azul de
algodn en un portaobjetos limpio y desengrasado. Esterilizar el asa micolgica
y dejar enfriar. Sobre el cultivo de hongo cuidando de no frotar,

5. Observar al microscopio con los objetivos Registrar los resultados , para ello
describir las caractersticas de los hongos