PRODUCCION DE ALFA AMILASA POR MICROORGANISMOS.

Bertoluzzo, S.M.; Ostinelli, C.A.; Agostinis, F.; Lpez, D.; Bertoluzzo, M.G.
Taller de Fsica. Facultad de Ciencias Bioqumicas y Farmacuticas. Universidad Nacional de
Rosario- E-mail: mgbertol@hotmail.com

Actualmente la biotecnologa desarrolla cada vez ms la obtencin de enzimas microbianas

para su utilizacin en los procesos industriales de produccin de alimentos y la obtencin de
productos de alta calidad. Las bacterias pueden usar alimentos macromoleculares; para ello, es
necesaria una hidrlisis extracelular preliminar, igual que sucede en los animales superiores.
Las distintas bacterias elaboran para este fin una cierta variedad de enzimas extracelulares que
se segregan al medio. El objetivo de este trabajo es estudiar los parmetros de fermentacin
para la obtencin de alfa amilasa extracelular en cepas de Bacillus subtilis. Para comprobar
que las cepas de Bacillus subtilis producen alfa amilasa se utiliz un medio de cultivo
compuesto por 10g/l de peptona, 5g/l de NaCl, 2g/l de almidn soluble, 20 g/l de agar-agar y
se ajust el pH a 7,2. A continuacin se inocul la superficie de las placas con las bacterias y
se las incub a 35C durante 48 hs. Posteriormente se agreg una solucin de Lugol
observndose un halo transparente alrededor de las colonias indicando las zonas de hidrlisis
del almidn. Luego se analiz la produccin de alfa amilasa en fermentadores sumergidos con
50ml de medio de cultivo con 5% de almidn durante 48 hs a 37C. Se determin la
viscosidad, la densidad, el pH del medio antes y despus de la fermentacin. La actividad de la
amilasa se determin midiendo la absorbancia a 540nm en funcin del tiempo, incubando las
muestras de amilasa en una solucin de almidn y Lugol. La biomasa obtenida fue de 1g/ml y
la constante de tiempo, es decir el tiempo que tard la amilasa en degradar el 63% del almidn
presente fue de 5 min. Estos resultados preliminares son alentadores, por lo que se continuar
con la investigacin utilizando biorreactores para la fermentacin sumergida con distintos
medios de cultivo lquidos para mejorar la produccin de la enzima.