RESUMEN:

La identificacin de carbohidratos es realizada por varias reacciones que

determinan la clase de carbohidrato al cual corresponde la muestra que se
quiere analizar. Las diferentes pruebas que se utilizaron en este laboratorio
fueron: ensayo de molish el cual se utiliz para determinar si las diferentes
pruebas pertenecan a los carbohidratos o no. Ensayo Benedict el cual se
utiliza con el ion Cu+ para determinar si la muestra a analizar es un azcar
reductor o no. El ensayo de Barfoed el cual permite diferenciar entre
monosacridos y disacridos. El ensayo de Seliwanoff el cual se utiliza para
determinar cetosas. El ensayo de Bial el cual forma complejos de coloracin
solo con las pentosas.El ensayo de Lugol el cual es prueba de identificacin
para los polisacridos especialmente almidn y glicgeno. Los resultados de
las diferentes pruebas y de la clasificacin de las sustancias aanalizar se
encuentran ms adelante.

Son compuestos orgnicos que quitinas tienen funcin estructural

contienen carbono, hidrgeno y
oxgeno, y muchos de ellos
contienen estos elementos en la
relacin de Cn(H2O)n.
Qumicamente se definen como
aldehdos o cetonas, dentro de ellos
se clasifican los azcares simples
o monosacridos en donde n es un
nmero entero de 3 a 7. Si se unen
dos monosacridos forman un
disacrido; si se unen de 3-20
monosacridos resulta
un oligosacrido y cuando se unen
numerosas unidades de
monosacridos, constituyen
un polisacrido como por ejemplo
los almidones, celulosas, pectinas,
quitinas, etc.
Los carbohidratos como los
azcares y los almidones
generalmente se utilizan por los
organismos como fuentes de
energa; mientras que los otros
como las celulosas, pectinas y
en clulas individuales y an en
organismos completos como
hongos, plantas, bacterias
artrpodos, etc. Adems, algunos
polisacridos y polmeros ms
cortos de azucares actan como
marcadores para una variedad de
procesos de reconocimiento en las
clulas, incluyendo la adhesin de
ellas con sus vecinas y el transporte
de protenas a los destinos
intracelulares apropiados y otros
hacen parte de sustancias celulares
importantes como son los cidos
nucleicos y como cofactores que
contienen vitaminas.
En cuanto a sus propiedades
fisicoqumicas, los carbohidratos de
peso molecular bajo son solubles en
agua y tienen poder edulcorante
(endulzante) alto, caractersticas
que son opuestas en los
carbohidratos de peso molecular
alto en los cuales la solubilidad se
reduce notablemente.
1
De acuerdo con sus estructuras se
clasifican en:
MONOSACARIDOS:
Los monosacridos o azcares
simples son los glcidos ms
sencillos, que no se hidrolizan, es
decir, que no se descomponen para
dar otros compuestos, conteniendo
de tres a seis tomos de carbono.
Su frmula es (CH2O)n donde n
3.
DISACRIDOS:
Estn formados por la unin de
dos monosacrido iguales o
distintos. Los disacridos ms
comunes son:
* Sacarosa: Formada por la unin
de una glucosa y una fructosa.
* Lactosa: Formada por la unin de
una glucosa y una galactosa.
* Maltosa: Formada por la unin de
dos glucosas.
La formula de los disacridos
es C12H22O11. El enlace
covalente entre dos monosacridos
provoca la eliminacin de
un tomo de hidrgeno de uno de
los monosacridos y de un grupo
hidroxilo del otro monosacrido.
POLISACRIDOS:
Los polisacridos
son biomolculas formadas por la
unin de una gran cantidad
de monosacridos. Se encuadran
entre los glcidos, y cumplen
funciones diversas, sobre todo de
reserva energtica y estructural.
Homopolisacridos. Son
polisacridos que son polmeros de
un solo monosacrido.
Heteropolisacrido. Son los que
tienen ms de una clase de
monosacridos
OLIGOSACRIDOS:
Son polmeros formados a base
de monosacridos nidos por
enlaces O-glicosdicos, con un
nmero de unidades monomricas
entre 3 y 10.
Existe una gran diversidad de
oligosacridos, pues puede variar el
nmero, las ramificaciones, el tipo
de monosacridos que se unen y la
forma de enlazarse de los
monosacridos para formar una
cadena de polisacridos, se ha
establecido arbitrariamente un lmite
de 20 unidades para definir los
oligosacridos ya que por encima
de este valor se habla de
polisacridos.
Son slidos cristalinos, de color
blanco, sabor dulce y soluble en
agua. La mayora de ellos conserva
el poder reductor de los
monosacridos. Este poder reductor
reside en los tomos de carbono
carboxlicos y se pierde cuando
stos participan en un enlace
glucosdico.2
Metodologa
Ensayo de Molisch:
Soluciones patrn de carbohidratos:
ARABINOSA, GLUCOSA,
FRUCTOSA, SACAROSA Y
ALMIDN
Se adiciono en un tubo de
ensayo 2.0 mL de la solucin del
carbohidrato y se agreguo 0.2
mL de -naftol al 10%, el cual
se me zclo bien y luego
cuidadosamente por las paredes
del tubo se agrego, 1 mL de
cido sulfrico concentrado
Ensayo de Lugol:
Soluciones patrn de
carbohidratos: ALMIDN Y
GLICGENO.
Se agrego en un tubo de
ensayo 2.0 ml de la solucin del
carbohidrato y se agreguo 0.2
ml de Lugol.
Ensayo de Benedict:
Soluciones patrn de
carbohidratos: GLUCOSA,
MALTOSA Y SACAROSA.
Se agrego en un tubo de ensayo
2.0 ml de la solucin del
carbohidrato y se adiciono 0.1 ml
del reactivo de Benedict, se
coloco a bao mara.
Ensayo de Seliwanoff:
Soluciones patrn de
carbohidratos: FRUCTUOSA
Y GLUCOSA.
Coloque en un tubo de ensayo
2.0 ml de la solucin del
carbohidrato y agregue 2 ml del
reactivo de Seliwanoff, caliente
en bao mara a ebullicin por
dos minutos.
Ensayo de Bial:
Soluciones patrn de
carbohidratos: RIBOSA Y
GLUCOSA.
Coloque en un tubo de ensayo
2.0 ml de la solucin del
carbohidrato y agregue 3 ml del
reactivo de Bial, caliente en bao
mara a ebullicin y observe..
Resultados y anlisis
Prueba de Seliwanoff
Tanto las aldosas como las cetosas
en presencia de cidos minerales y
en un medio caliente sufren
procesos de deshidratacin, lo cual
da como producto un anillo
pentagonal de furfural o
hidroximetilfurfural, segn sea el
monosacrido pentosa o hexosa,
los furfurales se condensas dando
una coloracin roja. Las cetosas
se deshidratan ms rpido que
las aldosas, lo cual permite
diferenciarlos. En la prueba de
Seliwanoff la fructosa al ser una
cetohexosa da un resultado
positivo.3
Ilustracin . Reaccin de las
cetohexosas con el reactivo de
Seliwanoff

Ensayo con lugol

El color que dan los

polisacridos con el lugol
(solucin de I 2 y de IK) se debe a
que el I2 ocupa espacios vacos en
las hlices de la cadena de
unidades de glucosa, formando un
compuesto de inclusin que altera
las propiedades fsicas del
polisacrido, especialmente la
absorcin lumnica. El lugol da con
el almidn color azul y con el
glucgeno color rojo caoba.4

ENSAYO DE BENEDICT

Una de las reacciones ms

comunes en la identificacin de
carbohidratos es la reaccin de
Benedict. Esta reaccin es
especfica para azcares con grupo
reductores libres (C=O). Todos los
monosacridos poseen un grupo
reductor libre. Los disacridos
maltosa y lactosa tienen grupos
reductores libres, pero la sacarosa PRUEBA DE BIAL
no los posee, ya que se pierden los
grupos reductores de sus El reactivo de Bial contiene orcinol
componentes cuando sta es en cido clorhdrico, el cual forma
formada. complejos de coloracin slo con
las pentosas.
Esta prueba se basa en la
capacidad del carbohidrato de Cuando se calientan pentosas con
reducir el Cu2+ en un medio HCl concentrado, se forma Furfural
alcalino a Cu+. Este Cu+ se oxida y que se condensa con Orcinol en
precipita en forma de Cu2O, lo que presencia de iones ferricos para dar
proporciona la coloracin positiva de un color azul verdoso.6
la reaccin. La coloracin producida 6
va desde verde, amarillo,
anaranjado o rojizo, dependiendo de
la concentracin de xido de cobre
y sta a su vez de la cantidad de
cobre reducido.5

REACCIN DE MOLISCH

es una reaccin que tie cualquier

carbohidrato presente en una
disolucin; es llamada as en honor
del botnico austraco Hans
Molisch.
Ilustracin 1 Reaccin de la glucosa con el
Reactivo de Benedict
Se utiliza como reactivo una CONCLUSIONES
solucin de -naftol al 5% en etanol
de 96. En un tubo de ensayo a Los carbohidratos al poseer en su
temperatura ambiente, se deposita
estructura aldehdos o cetonas,
la solucin problema y un poco del
reactivo de Molisch. A continuacin, presentan un comportamiento
se le aade cido sulfrico e qumico ligado a los grupos
inmediatamente aparece un anillo
funcionales de estos, como por
violeta que separa al cido sulfrico,
debajo del anillo, de la solucin ejemplo la capacidad de oxidarse
acuosa en caso positivo. con agentes oxidantes suaves como

Es una reaccin cualitativa, por lo el reactivo de fehling o de Tollens o

que no permite saber la cantidad de la capacidad de formar osazonas,
glcidos en la solucin original.7 adems esta clase de reacciones
permiten diferenciar monosacridos
de disacridos como la sacarosa.

Los monosacridos se diferencia de

los disacridos (sacarosa) por su
poder reductor, poder que es
otorgado por el carbono libre que
posee, los monosacridos a su vez
se subdividen en aldosas y cetosas,
y en pentosas o hexosas, estos
fueron identificados y diferenciados
mediante la prueba de Tollens, de
Seliwanoff y de Bial, en las que se
evidencio la velocidad de
deshidratacin de las aldosas y
cetosas, y la formacin de furfural o
hidroximetil furfural, segn
provenga una pentosa o hexosa.

bibliografia

1. Morrison, J.Boyd, R. (1976).

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