TEMA 7

Seguridad en el laboratorio de
Microbiologa Clnica
Tema 7. Seguridad en el laboratorio de Microbiologa Clnica

1. Seguridad biolgica en los laboratorios de Microbiologa Clnica

1.1. Riesgos generales
1.2. Bioseguridad
2. Clasificacin de los microorganismos segn el grupo de riesgo
2.1. Criterios para la clasificacin
2.2. Grupos de riesgo
2.2.1. Grupo 1
2.2.2. Grupo 2
2.2.3. Grupo 3
2.2.4. Grupo 4
3. Medios de contencin
3.1. Barreras primarias
3.2. Barreras secundarias
3.3. Normas y procedimientos estndar
3.3.1. Limpieza de superficies
3.3.2. Eliminacin de residuos
3.3.3. Precauciones en casos de derrames
3.3.4. Normas para el envo de muestras biolgicas
Tema 7. Seguridad en el laboratorio de Microbiologa Clnica

4. Niveles de contencin
4.1. Nivel de contencin para trabajar en un laboratorio de nivel
de bioseguridad 1 (microorganismos de grupo de riesgo 1)
4.2. Nivel de contencin para trabajar en un laboratorio de nivel
de bioseguridad 2 (microorganismos de grupo de riesgo 2 y 3)
4.3. Nivel de contencin para trabajar en un laboratorio de nivel
de bioseguridad 3 (microorganismos de grupo de riesgo 3 y 4)
4.4. Nivel de contencin para trabajar en un laboratorio de nivel
de bioseguridad 4 (microorganismos de grupo de riesgo 4)
1. Seguridad biolgica en el laboratorio de Microbiologa Clnica
1.1. Riesgos generales

Riesgos en el laboratorio de Microbiologa Clnica

Infecciones contradas en el laboratorio

Seguridad con respecto a:

Compuestos qumicos

Istopos radiactivos

Gases comprimidos

Electricidad

Incendios
1.2. Bioseguridad

Responsable de bioseguridad

Manual de bioseguridad

Capacitacin de los transentes

Capacitacin del personal

Precauciones estndar

Logotipo de riesgo biolgico

Sitio donde debe colocarse

2. Clasificacin de los microorganismos segn el grupo de riesgo

2.1. Criterios para la clasificacin

Contagiosidad

Patogenicidad y virulencia

Dosis infectiva y dosis letal

Existencia de tratamiento o profilaxis

Vas de transmisin

Capacidad de extenderse entre la poblacin

Capacidad de supervivencia en el ambiente

2.2. Grupos de riesgo
2.2.1. Grupo 1

Microorganismos con improbabilidad de causar enfermedad en personas sanas.

Ejemplos: Escherichia coli, Staphylococcus epidermidis, Lactobacillus bulgaricus,

Streptococcus lactis, Sacharomyces cerevisiae, Penicillium roqueforti.

2.2.2. Grupo 2
Microorganismos que causan enfermedad de buen pronstico, frente a los que
existe tratamiento y que en general no se transmiten por va area y no es fcil
su difusin en la comunidad.

Ejemplos de bacterias:

Bordetella pertussis, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Corynebacterium

diphtheriae, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Streptococcus,
Micobacterias oportunistas, Haemophilus influenzae, Yersinia enterocolitica,
Salmonelas gastroenterticas, Shigella, Legionella, Borrelia, Neiserias patgenas,
Vibrio, Treponema pallidum.
Ejemplos de hongos:

Aspergillus spp, Candida spp, Cryptococcus neoformans, Dermatofitos,

Pneumocystis jiroveci, Sporothrix schenckii.

Ejemplos de virus:

Adenovirus, Parvovirus B19, Rotavirus, Virus de la hepatitis A, Virus de la gripe,

Virus del sarampin, Virus de las paperas, Virus de la rubola.

Ejemplos de parsitos:

Ascaris lumbricoides, Criptosporidium spp, Entamoeba histolytica, Giardia

intestinalis, Schistosoma, Toxoplasma gondii, Trichinella.

2.2.3. Grupo 3

Microorganismos que causan infecciones graves, algunas de transmisin area,

con riesgo variable de transmitirse a la comunidad. Existe tratamiento aunque
de eficacia variable.
Ejemplos de bacterias:

Bacillus anthracis, Brucella, Escherichia coli (verotoxignica), Francisella

tularensis, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae, Rickettsias,
Salmonella ser. Typhi, Shigella dysenteriae ser. 1, Yersinia pestis.

Ejemplos de hongos:

Blastomyces dermatitidis, Coccidioides immitis, Histoplasma capsulatum,

Paracoccidioides brasiliensis.

Ejemplos de virus:

Virus de la encefalitis de California, Virus de la encefalitis equina americana,

Virus de la estomatitis vesicular, Virus de la hepatitis B, Virus de la hepatitis C,
Virus de la hepatitis D, Virus de la fiebre amarilla, VIH.

Ejemplos de parsitos:

Echinococcus, Leishmania brasiliensis, Leishmania donovani, Plasmodium

falciparum, Taenia solium, Trypanosoma cruzi.
2.2.4. Grupo 4

Microorganismos que causan infecciones graves o muy graves, muchas de

transmisin area, que pueden pasar a la comunidad y frente a las que no hay
tratamiento eficaz.

Ejemplos:

Virus de la viruela, Virus de la fiebre hemorrgica de Crimea (Congo), Virus de

Marburg, Virus bola.
3. Medios de contencin

El trmino contencin se utiliza para describir los mtodos que hacen segura
la manipulacin de los productos en el laboratorio.

Su objetivo es reducir al mnimo la exposicin del personal y del entorno a

agentes potencialmente patgenos.

Para la seguridad biolgica de los laboratorios de microbiologa son

importantes tres elementos:

Barreras de contencin primarias (equipos de proteccin: bata, guantes,

gafas, gorro, mascarillas, CSB, etc.).

Barreras de contencin secundarias (instalaciones: diseo de ingeniera

del laboratorio de microbiologa clnica).

Normas y procedimientos estndar (tcnica del personal: aptitud y actitud

del personal para minimizar los riesgos y la exposicin a agentes
patgenos).
3. Medios de contencin

3.1. Barreras primarias

Vestimenta protectora

Bata

Guantes

Mascarilla

Gafas
 Cabinas de seguridad biolgica

Cabinas de clase I

Cabinas de clase II

Cabinas de clase III

Clase I
Clase II
 Microorganismos
Clase III
anaerobios

Entrada y salida de aire (filtros hepa, espacio

cerrado, trabajo con guantes adaptados)

3.2. Barreras secundarias

Diseo de ingeniera del laboratorio de microbiologa clnica

El ambiente de laboratorio

Paredes

Ventanas

Superficies de trabajo

Circulacin de aire

Filtros HEPA

Logotipo de riesgo biolgico

3.3. Normas y procedimientos estndar

Prohibido comer, beber, fumar, almacenar alimentos

No pipetear con la boca

Barreras de proteccin (vestimenta protectora, CSB)

No salir del laboratorio con bata, guantes, etc.

Evitar formacin aerosoles (utilizar mecheros elctricos, usar asas

desechables, centrfugas de tapa hermtica, centrifugaciones en CSB)
Trasvase de lquidos

Eliminacin adecuada de residuos

Al final, limpieza de mesa

Lavado de manos

Comunicar cualquier accidente

Tcnica del personal (concentracin en el trabajo para evitar pinchazos,
accidentes, aerosoles, etc.)
3.3.1. Limpieza de superficies

Limpieza de mesas de trabajo y superficie de las CSB

Para trabajo con virus usar leja 1/10

Para trabajo con bacterias

Alcohol etlico o isoproplico al 70%

Fenol 1%

Glutaraldehdo 1-2 %

Para trabajo con bacterias esporuladas utilizar Alcide (producto

patentado)

Para trabajo con priones usar NaOH 1 N

3.3.2. Eliminacin de residuos

Residuos biolgicos:

Restos de muestras

Hisopos, frascos, etc.

Medios sembrados

Bolsas de autoclave

Utilizar doble bolsa

Material punzo-cortante: agujas,

escalpelos, cabezas de bistur,
etc.

Cajas de plstico rgido

Lquidos
3.3.3. Precauciones en casos de derrames

Vestimenta protectora

Toallas de papel

Colocar las toallas de papel en bolsa

de autoclave

Desinfectar la zona

Lavado de manos (antisptico, con

clorhexidina o povidona yodada)

Autoclavar bata

Comunicar el accidente
3.3.4. Normas para el envo de muestras biolgicas

Envo de muestras por correo

Empaquetamiento
Etiquetado como material de riesgo biolgico
Envases autorizados
Empresas autorizadas
4. Niveles de contencin
Existen 4 niveles de contencin o niveles de seguridad biolgica (BSL, biosafety
levels) de complejidad creciente relacionada con el grado de peligrosidad de los
microorganismos que se han de manipular.
4.1. Nivel de contencin para trabajar en un
laboratorio de nivel de bioseguridad 1
(microorganismos de grupo de riesgo 1)
Una buena tcnica de laboratorio
Respetar las precauciones estndar
No es necesario trabajar en CSB
No es necesario que el aire salga por filtro HEPA
4.2. Nivel de contencin para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad
2 (microorganismos de grupo de riesgo 2 y 3)

Respetar las precauciones estndar (usar bata, guantes, mascarillas para

mtodos que formen aerosoles, no comer, beber, etc., lavarse las manos al
finalizar el trabajo).
Acceso limitado (prohibido a nios, embarazadas, inmunodeprimidos).
Logotipo de riesgo biolgico en los aparatos.
Superficies impermeables y limpieza adecuada.
Se puede trabajar con microorganismos de grupo de riesgo 2 y 3 (dentro de
CSB).
Trabajar con mtodos que minimicen aerosoles (asas desechables) o realizar
estas tcnicas en CSB.
Trabajar en CSB de tipo 2.
Presin negativa en la zona de trabajo.
No es necesario que el aire del laboratorio
salga por filtro HEPA.
Eliminacin correcta de residuos (restos
de muestras, objetos punzantes-cortantes,
etc.).
Tcnica del personal.
4.3. Nivel de contencin para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad
3 (microorganismos de grupo de riesgo 3 y 4)

Respetar precauciones estndar (no comer, beber, fumar, llevarse nada a la

boca, frotarse los ojos, etc., lavarse las manos aunque se utilicen guantes).
Barreras de seguridad primarias (bata de microbiologa, guantes,
mascarillas para formacin de aerosoles, gafas).
Acceso restringido (slo personal del laboratorio).
Diseo de ingeniera del laboratorio (presin negativa, habitaciones
separadas, salida del aire por filtros HEPA).
Logotipo de riesgo biolgico en las puertas y en los aparatos.
Se puede trabajar con microorganismos de nivel de bioseguridad 3 y 4.
Trabajar en CSB2 o CSB3.
Vacuna hepatitis/prueba tuberculosis
para los trabajadores del laboratorio.
Se guarda muestra inicial de suero de
los trabajadores durante 10 aos.
Eliminacin correcta de residuos.
Almacn de seguridad para agentes
etiolgicos.
Tcnica del personal: personal
entrenado especficamente.
4.4. Nivel de contencin para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad
4 (microorganismos de grupo de riesgo 4)

Laboratorios de estados
Especialistas en casos de bioterrorismo