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Cmo hacer diluciones seriadas

En qumica, la dilucin es el proceso que reduce la concentracin de una sustancia en


una solucin. Una dilucin seriada es la disolucin repetida de una solucin para ampliar
el factor de dilucin rpidamente.[1] Se realiza normalmente en experimentos que
requieren soluciones muy diluidas con gran precisin, como las relacionadas con curvas
de concentracin en una escala logartmica o con experimentos para determinar la
densidad de bacterias. Las diluciones en serie son ampliamente utilizadas en las ciencias
experimentales como bioqumica, microbiologa, farmacologa y fsica.

1 Determina el lquido de dilucin adecuado. El lquido en que vas a diluir tu


sustancia es muy importante. Muchas soluciones sern diluidas en agua destilada,
pero no siempre es este el caso. Si vas a diluir bacterias u otras clulas,
probablemente quieras hacerlo en caldos de cultivo. [2] El lquido que escojas ser
utilizado para cada dilucin en serie.
Si no tienes claro cul lquido utilizar, pide ayuda o busca en internet si otras
personas han llevado a cabo una dilucin similar.

2 Prepara varios tubos de ensayo con 9 ml del lquido de dilucin.


Estos recipientes actuarn como tus diluciones de valores en blanco. [3] Aadirs tu
muestra sin diluir al primer tubo y luego irs diluyendo en serie en los dems
tubos.
Es til etiquetar tu tubos de ensayo antes de comenzar, as no te
confundirs cuando hayas comenzado las diluciones.
Cada tubo de ensayo estar diez veces ms diluido que el anterior,
comenzando por el tubo sin diluir. [4] El primer tubo contendr una dilucin de 1:10,
el segundo de 1:100, el tercero de 1:1000, y as sucesivamente. Decide de
antemano la cantidad de diluciones que necesitars para no desperdiciar tubos de
ensayo o lquido de dilucin.
3 Prepara un tubo de ensayo que contenga al menos 2 ml de tu solucin sin
diluir.
La cantidad mnima necesaria para llevar a cabo esta dilucin en serie es 1 ml de
solucin sin diluir. Si nada ms tienes 1 ml, no te quedar nada de solucin sin
diluir. Etiqueta este tubo SSD por solucin sin diluir.
Mezcla minuciosamente la solucin antes de comenzar cualquier dilucin. [5]

4 Realiza la primera dilucin.


Extrae 1 ml de la solucin sin diluir del tubo de ensayoSSD con una pipeta y
transfirelo al tubo de ensayo etiquetado 1:10, que contendr 9 ml del lquido de
dilucin y mzclalo minuciosamente. Ahora tienes 1 ml de la solucin sin diluir en
9 ml del lquido de dilucin. Por tanto, la solucin ha sido diluida por factor de diez.
5 Realiza la segunda dilucin.
Para la segunda dilucin en serie, debes tomar 1 ml de la solucin del tubo1:10 y
aadirlo a la dilucin de 9 ml del tubo 1:100. Mezcla rigurosamente el
tubo 1:10 antes de aadirlo al tubo siguiente. Tambin mezcla rigurosamente el
tubo de ensayo 1:100 luego de realizar la dilucin. La solucin del tubo de
ensayo 1:10 fue diluido por un factor de diez en el tubo de ensayo 1:100.
6 Extiende este procedimiento para realizar mayores diluciones en serie.
Este proceso puede repetirse tantas veces sea necesario para obtener la solucin
deseada. En un experimento relacionado con las curvas de concentracin, puedes
utilizar una dilucin en serie para crear una serie de soluciones con disoluciones
de 1, 1:10, 1:100, 1:1000.

Cmo se preparan las diluciones seriadas?

En general se parte de una solucin concentrada y se preparan series de diluciones al dcimo


(1:10) o al medio (1:2). De esta manera se obtiene una serie de soluciones relacionadas por
ejemplo por un factor de dilucin 10 es decir 1/10; 1/100; 1/1000 y as sucesivamente. O la otra
serie es 1/2; 1/4; 1/8; 1/16; 1/32 etc.
Por ejemplo: si partimos de una solucin de 50mg/ml de una sustancia (Solucin A)

a. Dilucin 1/10: 1ml de la solucin A + 9 ml de agua= una solucin de 5 mg/ml (dilucin 1:10)
b. Dilucin 1/2: 5 ml de la solucin A + 5 ml de agua= una solucin de 25 mg /ml (dilucin 1:2)

Veremos dos ejemplos:


1) diluciones seriadas de una protena
2) diluciones seriadas de un neurotransmisor

1) El primer ejemplo que veremos es una protena. La albmina srica bovina es la protena que
ms usualmente se emplea como patrn para calcular la cantidad de protenas totales en una
muestra incgnita. Las unidades que habitualmente se usan para la solucin de stock son mg/ml, y
en general una solucin de 1 mg/ml puede resultar adecuada para realizar diluciones seriadas y
medir luego la concentracin de protenas en una muestra. Las diluciones se harn al medio en
una serie de tubos rotulados 1; 0,5; 0,25; 0,12; 0,06; 0,03; 0,015, a todos se les agrega 2 ml de
agua destilada y luego la solucin correspondiente:

tubo concentracin ml de H2O ml solucin x dilucin

1 0.5 mg/ml 2 ml 2 ml solucin madre (1 mg/ml) 1/2

2 0.25 mg/ml 2 ml 2 ml de la solucin 0.5 mg/ml 1/4

3 0.125 mg/ml 2 ml 2 ml de la solucin 0.25 mg/ml 1/8

2) El otro ejemplo es un neurotransmisor, como por ejemplo la noradrenalina, ya que las


concentraciones que se emplean para producir un efecto biolgico suelen ser tan pequeas que es
necesario hacer diluciones muy grandes de la sustancia. Por ejemplo, se parte de una solucin
madre 0,1 M y se hacen diluciones 1/10 hasta 10 -9 M.

tubo concentracin ml de H2O ml de solucin x dilucin

1 0.01M (10-2) 9 ml 1 ml solucin 0.1M 1/10

2 0.001M (10-3) 9 ml 1 ml solucin 0.01M 1/100

3 0.0001M (10-4) 9 ml 1 ml solucin 0.001M 1/1000

Estas diluciones las usaremos en los captulos siguientes para realizar una curva de calibracin y
una curva dosis-respuesta, experiencia que describiremos en el prximo captulo.

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