Estructura de los aminocidos y precipitacin de la casena

Larry Holgun Valencia (115029)

Johan Alirio Valderrama Montalvo (115069)

Universidad Nacional De Colombia

Sede Palmira
2017
Estructura de los aminocidos y precipitacin de la casena
 1. Extraccin de la Casena:
Despus de que se llega al pH 4.7 (lo cual se hizo a ojo) en el cual la
protena casena se desnaturaliza y se precipita, se procedi a la
filtracin del producto por medio de separacin del suero de leche y
posteriormente se realiz secado de la casena. Se puede ver que en el
experimento aunque se trate de recoger totalmente la Casena y separarla
correcta y en su totalidad del suero de leche, pequeos restos de esta an
permanecen en el suero de leche.
La explicacin a esta fenomenologa se debe a que cuando la casena alcanza
su punto isoelctrico se neutralizan sus cargas, lo cual impide que esta
protena interacte con las dems molculas presentes en la solucin. Al no
interactuar con alguna otra molcula, la protena termina precipitndose, lo
que hace fcil su aislamiento del resto de la solucin. Pero en este punto es
importante considerar que la casena es la nica protena de la leche que
alcanza su punto isoelctrico a un pH de 4.8, lo que garantiza que es la nica
protena que se est aislando.

2. Verificacin de la presencia de protenas

Para esta prueba se usa reactivo de Biuret, el cual contiene CuSO4 en solucin
acuosa alcalina (gracias a la presencia de NaOH o KOH). La reaccin se basa en
la formacin de un compuesto de color violeta, debido a la formacin de un
complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no
compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos. As pues
la prueba da positiva puesto que ambas cuentan con presencia de protenas.

3. Determinacin de la presencia del carbohidrato

lactosa
El resultado de la prueba fue fsicamente la formacin de un precipitado rojizo
y visiblemente la mezcla se torn amarillo anaranjado tendiendo a rojo, siendo
una prueba positiva para el carbohidrato en cuestin.

Para explicar esto se debe tener en cuenta que los reactivos de Fehling son
usados para identificar la presencia de azucares reductores mediante un
mecanismo en el que el catin cprico Cu++ reacciona con el azcar pasando
a xido cuproso que se refleja mediante un precipitado rojizo. De esta manera,
nuestra prueba da positivo debido a que la lactosa, protena que se quiere
identificar, es un disacrido formado por glucosa y galactosa. La galactosa no
tiene carcter reductor pero la glucosa si, por lo cual la lactosa tiene
caracterstica de azcar reductor.

4. Determinacin de la presencia de calcio.

El tubo de ensayo dispuesto en su interior con 1mL de suero de leche al cual se
agregaron 3 gotas de Oxalato de amonio al 4% se torn blancuzco al instante,
su coloracin blanca da como resultado una prueba positiva, lo cual significa la
presencia de calcio en la mezcla en cuestin.

El Oxalato de Amonio ((NH4)22C2O4) en contacto con un compuesto que

contenga calcio reacciona dando lugar a Oxalato de Calcio (CaC2O4), de ah
que se obtenga un precipitado blanco ms otros productos de la reaccin, que
determina una prueba positiva para Calcio.

5. Determinacin de riboflavina en la leche.

En la presente prueba se dispuso en un tubo de ensayo 2mL aproximadamente
de suero de leche, posterior a esto se apagaron las luces del laboratorio y se
acerc a la muestra una lmpara fluorescente de luz negra que emite luz
ultravioleta (la longitud de onda lo determina el equipo que haya sido usado),
al acercar dicho artefacto al tubo el contenido del mismo se torn de un color
reflexivo verdoso fluorescente con el cual se concluye fue una prueba positiva
a la presencia de riboflavina en el suero de leche extrado.
La fluorescencia se puede explicar desde varios ngulos. Inicialmente hay que
mencionar ciertas caractersticas de la riboflavina, esta es una vitamina
hidrosoluble conformada bsicamente por un grupo de 3 anillos, dos de los
cuales son heterocclicos, y estos a su vez estn unidos a una cadena lineal
ribosa, la fluorescencia se asocia en este caso y en general en las flavinas
(grupo de bases nitrogenadas que poseen pigmentos amarillos fluorescentes
cuando se encuentran oxidadas) se debe a la gran cantidad de dobles enlaces
presentes en la riboflavina y adems a las diferentes estructuras que se
producen debido al movimiento de los electrones dentro de las estructuras
cclicas, los cuales actan en resonancia con los dobles enlaces externos con el
oxgeno.
Figura 1 (tubos de ensayos con los experimentos)