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USP 38

NF- 33
2015
VOLUME 4
USP 38-NF 33 Contenido iii

Contenido
VOLUMEN 1 Artculos Nuevos que Aparecen en USP 38 Ausentes
en USP 37 y sus Suplementos ............. xi

Artculos Incluidos en USP 3 7 Ausentes


en USP 38 ............................ xli
Misin y Prefacio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . vii
Lista Detallada . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xlii

Integrantes del Ciclo de Revisin


2010-2015 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xv Advertencias
Funcionarios ............................ xv Advertencias y Requisitos Generales . . . . . . . . . . 1

Junta Directiva .......................... xv


Captulos Generales
Consejo de Expertos ...................... xv
Ver pgina 52 para detalles del contenido
Comits de Expertos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xvi
Pruebas y Valoraciones Generales ........... 57
Grupos Asesores . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xxiv
Requisitos Generales para Pruebas y
In Memriam ......................... xxiv Valoraciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 7
Miembros y Delegados de la Conven- Equipos para Pruebas y Valoraciones . . . . . . . . 104
cin de la Farmacopea de los
Estados Unidos de Amrica, a partir Pruebas Microbiolgicas . . . . . . . . . . . . . . . . . 109
del 31 de mayo de 2014 ........... xxv Pruebas y Valoraciones Biolgicas . . . . . . . . . . 144
Reconocimiento para los Donantes de Pruebas y Valoraciones Qumicas. . . . . . . . . . . 233
Materiales de Referencia y de
Monografas en 2013 ............ xxxii Pruebas y Determinaciones Fsicas . . . . . . . . . . 416

Informacin General . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 752


Acta Constitutiva . . . . . . . . . . . . . . . . . xxxiv Suplementos Dietticos . . . . . . . . . . . . . . . . . 191 7
Gobierno de la USP ................ xxxv
Estatutos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xxxv Reactivos, Indicadores y
Normas y Procedimientos ................ xxxv Soluciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1979

Polticas de la USP ...................... xxxv Especificaciones de Reactivos . . . . . . . . . . . . . 1984

Indicadores y Papeles Indicadores de


Prueba . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2056
Incorporaciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . xxxix Soluciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2058
Artculos Incorporados a USP 38 mediante Soluciones Amortiguadoras . . . . . . . . . . . . 2058
Suplementos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xxxix
iv Contenido USP 38-NF 33

Soluciones Colorimtricls . . . . . . . . . . . . . 2060

Soluciones Reactivo . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2060 ndice


Soluciones Volumtricas . . . . . . . . . . . . . . . 2069 ndice Combinado de USP 38 y NF 33 . . . . . . . 1-1
Columnas Cromatogrficas . . . . . . . . . . . . . . 2078

Tablas de Referencia VOLUMEN 3


Envases para Dispensar Cpsulas y Tabletas. . 2083

Descripcin y Solubilidad Relativa de Artculos Gua para los Captulos Generales. . . . vii
de la USP y del NF. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2093

Solubilidades Aproximadas de Artculos de la Advertencias


USP y del NF . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2157
Pesos Atmicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2166 Advertencias y Requisitos Generales .......... xi

Masas Atmicas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2169

Tabla Alcoholimtrica . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21 71

Tabla de Viscosidad Intrnseca . . . . . . . . . . . . 21 73


USP 38
Equivalencias de Temperatura . . . . . . . . . . . . 21 75

Monografas
ndice Monografas Oficiales de USP 38, 1-Z . . . . . . 4207
ndice Combinado de USP 38 y NF 33 . . . . . . . 1-1

ndice
ndice Combinado de USP 38 y NF 33 . . . . . . . 1-1

VOLUMEN 2
VOLUMEN 4
Gua para los Captulos Generales. . . . vii
Gua para los Captulos Generales. . . . vii

Advertencias
Advertencias y Requisitos Generales .......... xi Advertencias
Advertencias y Requisitos Generales .......... xi

USP 38
Suplementos Dietticos
Monografas Oficiales . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6289
Monografas
Monografas Oficiales de USP 38, A-H. . . . . . 21 77
USP 38-NF 33 Contenido v

NF 33
Excipientes
Excipientes USP y NF, Agrupados por
Incorporaciones Categora . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6957

Artculos Incorporados a NF 33 mediante


Suplementos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6954 Monografas
Artculos Nuevos que Aparecen en NF 33 Monografas Oficiales de NF 33. . . . . . . . . . . 6967
Ausentes en NF 32 y sus Suplementos . . . . 6954

Artculos Incluidos en NF 32 Ausentes ndice


en NF 33 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6954
ndice Combinado de USP 38 y NF 33 ....... 1-1
Lista Detallada . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6955
USP 38 Cwa para los C..ap1tulos Generales vii

Gua para los Captulos


Generales
(Para obtener la lista alfabtica completa de los captulos generales de esta Farmacopea, consulte "Captulos Generales" en el
ndice.)

PRUEBAS Y VALORACIONES GENERALES (111) Diseo y Anlisis de Valoraciones Biolgicas ... 190
(115) Valoracin de Dexpantenol ............... 207
(121) Valoracin de Insulina .................. 208
(121 .1) Procedimientos Analticos Fisicoqumicos
Requisitos Generales para para Insulinas ....................... 211
Pruebas y Valoraciones (123) Pruebas de Identidad Biolgica de Glucagn .. 213
(124) Valoraciones Biolgicas de Eritropoyetina ..... 216
(1) Inyectables ............................. 57 (126) Pruebas de Identidad Biolgica de Soma-
(2) Medicamentos Orales-Pruebas de Calidad de tropina ............................ 218
Productos ............................. 71 (1 30) Atributos de Calidad de la Protena A ....... 220
(3) Medicamentos Tpicos y Transdrmicos-Pruebas de (151) Prueba de Pirgenos ................... 228
Calidad del Producto ..................... 76 (161) Equipos para Transfusin e Infusin y
(4) Medicamentos para Mucosas-Pruebas de Calidad .. Dispositivos Mdicos Similares ........... 229
....................................... 82 (1 71) Valoracin de Actividad de Vitamina B11 ..... 230
(5) Medicamentos Nasales y para Inhalacin-
Informacin General y Pruebas de Calidad del
Producto ............................. 86 Pruebas y Valoraciones Qumicas
(7) Etiquetado ............................. 95
(11) Estndares de Referencia USP .............. 101 Pruebas de Identificacin
(181) Identificacin-Bases Orgnicas Nitroge-
Equipos para Pruebas y Valoraciones nadas ............................. 233
(191) Identificacin-Pruebas Generales .......... 233
(1 7) Etiquetado de Envases de Medicamentos de Venta (193) ldentificacin-Tetraciclinas .............. 237
Bajo Receta .......................... 104 (197) Pruebas de Identificacin Espectrofoto-
(21) Termmetros ......................... 107 mtrica ............................ 237
(31) Aparatos Volumtricos ................... 107 (201) Prueba de Identificacin por Cromatografa en
(41) Balanzas ............................. 108 Capa Delgada ....................... 239

Pruebas Microbiolgicas
Pruebas de Lmite
(51) Pruebas de Eficacia Antimicrobiana .......... 109
(55) Indicadores Biolgicos-Pruebas de Resistencia ... . (206) Aluminio ............................ 240
...................................... 112 (207) Prueba para el Derivado 1,6-Anhidro de
(61) Examen Microbiolgico de Productos No Estriles: Enoxaparina Sdica .................... 241
Pruebas de Recuento Microbiano .......... 115 (208) Valoracin de Actividad Anti-Factor Xa y Anti-Factor
(62) Examen Microbiolgico de Productos No Estriles: lla para Heparinas No Fraccionadas y de Bajo
Pruebas de Microorganismos Especficos ..... 122 Peso Molecular ...................... 246
(63) Pruebas para Micoplasmas ................ 1 30 (209) Determinaciones de Peso Molecular de
(71) Pruebas de Esterilidad ................... 1 36 Heparinas de Bajo Peso Molecular ......... 250
(211) Arsnico ............................ 252
(221) Cloruros y Sulfatos .................... 254
Pruebas y Valoraciones Biolgicas (223) Dimetilanilina ........................ 255
(226) 4-Epianhidrotetraciclina ................. 255
(81) Antibiticos-Valoraciones Microbiolgicas .... 144 (227) 4-Aminofenol en Medicamentos que Contienen
(85) Prueba de Endotoxinas Bacterianas .......... 163 Acetaminofeno ...................... 256
(87) Pruebas de Reactividad Biolgica, In Vitro ..... 169 (228) xido de Etileno y Dioxano .............. 257
(88) Pruebas de Reactividad Biolgica, In Vivo ..... 1 71 (231) Metales Pesados ...................... 260
(89) Enzimas Usadas como Materiales Auxiliares en (232) Impurezas Elementales-Lmites ........... 262
la Fabricacin de Productos Farmacuticos .... 1 77 (233) Impurezas Elementales Procedimientos ..... 265
(90) Suero Fetal Bovino-Atributos de Calidad y (241) Hierro .............................. 269
Pruebas de Funcionalidad ................ 180 (251) Plomo ............................. 270
(91) Valoracin de Pantotenato de Calcio ......... 184 (261) Mercurio ............................ 271
(92) Factores de Crecimiento y Citokinas Usados en la (267) Porosimetra por Intrusin de Mercurio ...... 274
Fabricacin de Productos de Terapia Celular ... 186
viii Gua para los Capitulas Generales USP 38

(268) Porosidad Mediante Adsorcin-Desorcin (670) Envase,-Componenles Auxiliares .......... 494


de Nitrgeno ....................... 277 (671) Envases--Pruebas de Desempeo .......... 497
(271) Prueba para Sustancias Fcilmente Carbo- (691) Alqodn . . . . . . . . . . . . . . . . . . 505
niLables ........................... 281 (695) Crlstalinidad ......................... 507
(281) Re,iduo de Incineracin ................. 281 (696) Caracteriza~in de Slidos, Cristalmos p~r Micro-
(291) Selenio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 282 calorimetria y Calonmetna de D1soluc1on .... 507
(697) Contenido en Envases para Inyectables ...... 51 O
(698) Volumen de Entrega ................... 511
Otras Pruebas y Valoraciones (699) Densidad de Slidos ................... 514
(701) Desintegracin ....................... 516
(301) Capacidad Neutralizante de cido ......... 282 (705) Atributos de Calidad para Tabletas Cuyo
(311) Valoracin de Alginatos ................. 284 Etiquetado Indica Ranurado Funcional ...... 519
(341) Agentes Antimlcrobianos-Contenido ....... 285 (711) Disolucin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 520
(345) Valoracin de Acido Ctrico/Citrato y Fosfato .. 288 (721) Intervalo de Destilacin ................. 531
(351) Valoracin de Esteroides ................. 289 (724) Liberacin de Frmacos ................. 532
(361) Valoracin de Barbitricos ............... 289 (729) Distribucin del Tamao de Glbulos en Emul-
(371) Valoracin de Cobalamina con Marcador siones Inyectables de Lpidos ............ 538
Radioactivo ......................... 290 (730) Espectroqumica de Plasma .............. 541
(381) Tapones Elastomricos para Inyectables ...... 291 (731) Prdida por Secado .................... 549
(391) Valoracin de Epinefrina ................. 297 (733) Prdida por Incineracin ................ 549
(401) Grasas y Aceite,s Fijos ................... 298 (735) Espectrometra de Fluorescencia de Rayos X .. 550
(411) Valoracin de Acido Flico ............... 313 (736) Espectrometra de Masas ................ 555
(41 3) Anlisis de Impurezas en Gases Medicinales ... 31 3 (741) Intervalo o Temperatura de Fusin ......... 561
(415) Valoracin de Gases Medicinales ........... 314 (751) Partculas Metlicas en Ungentos
(425) Antibiticos-Valoracin Yodomtrica ....... 317 Oftlmicos ......................... 564
(429) Medicin del Tamao de Partcula por Difraccin (755) Llenado Mnimo ...................... 564
de Luz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 318 (761) Espectroscopa de Resonancia Magntica
(431) Determinacin de Grupos Metoxilo ........ 323 Nuclear . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 565
(441) Valoracin de Niacina o Niacinamida ....... 325 (771) Ungentos Oftlmicos .................. 575
(451) Volumetra con Nitrito .................. 330 (776) Microscopja Optica .................... 575
(461) Determinacin de Nitrgeno ............. 330 (781) Rotacin Optica ...................... 578
(466) Impurezas Comunes ................... 331 (785) Osmolalidad y Osmolaridad .............. 579
(467) Disolventes Residuales .................. 333 (786) Estimacin de la Distribucin del Tamao de
(469) Etilenglicol, Dietilenglicol y Trietilenglicol Partcula por Tamizado Analtico .......... 582
en Sustancias Etoxiladas ................ 348 (787) Partculas Subvisibles en Inyectables de
(471) Combustin en Matraz con Oxgeno ....... 350 Protenas Teraputicas ................. 586
(481) Valoracin de Riboflavina ................ 350 (788) Partculas en Inyectables ................ 589
(501) ~a les de Bases Orgnicas Nitrogenadas ...... 351
(789) Partculas en Soluciones Oftlmicas ......... 593
(503) Acido Actico en Pptidos ............... 352 (790) Partculas Visibles en Inyectables ........... 594
(511) Valoracin de un Esteroide Aislado ......... 352 (791) pH ................................ 595
(525) Dixido de Azufre ..................... 353 (795) Preparacin Magistral-Preparaciones No
(531) Valoracin de Tiamina .................. 358 Estriles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 599
(541) Volumetra . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 359 (797) Preparacin Magistral-Preparaciones
(551) Valoracin de Vitamina E ................ 362 Estriles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 608
(561) Artculos de Origen Botnico ............. 370 (801) Polarografa ......................... 657
(563) Identificacin de Artculos de Origen (811) Finura de Polvos ...................... 661
Botnico ........................... 384 (821) Radioactividad ........................ 662
(565) Extractos Botnicos .................... 397 (823) Frmacos para Tomografa de Emisin de Posi-
(5 71) Valoracin de Vitamina A ................ 400 trones para Uso en Preparaciones Ma_gistrales,
(581) Valoracin de Vitamina D ................ 405 , Investigacin Clnica y Estudios Cient1ficos ... 674
(591) Determinacin de Cinc ................. 415 (831) Indice de Refraccin ................... 684
(841) ~eso Especfico ....................... 685
Pruebas y Determinaciones Fsicas (846) Area Superficial Especfica ................ 686
(851) Espectrofotometra y Dispersin de Luz ...... 690
(601) Medicamentos Nasales y para Inhalacin: (852) Espectroscopa de Absorcin Atmica ....... 698
Pruebas de Calidad de Desempeo (853) Espectroscopa de Fluorescencia ........... 702
de Aerosoles, Atomizadores y Polvos ....... 416 (854) Espectroscopa en el Infrarrojo Medio ....... 709
(602) Propelentes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 442 (857) Espectroscopa Ultravioleta-Visible .......... 713
(603) Aerosoles Tpicos ..................... 444 (861) Suturas-Dimetro .................... 720
(604) Velocidad de Fuga ..................... 445 (871) Suturas-Sujecin de Agujas .............. 721
(61 O) Mtodos de Muestreo Microbiolgico (881) Resistencia a la Tensin ................. 722
Alternativos para Productos Nasales (891 >Anlisis Trmico ...................... 723
e Inhaladores No Estriles ............... 445 (905) Uniformidad de Unidades de Dosificacin .... 727
(611) Determinacin de Alcohol . . . . . . ........ 447 (911) Viscosidad--Mtodos Capilares ............ 731
(616) Densidad Aparente y Densidad por Asenta- (912) Viscosidad-Mtodos Rotatorios ........... 733
miento de los Polvos .................. 449 (91 3) Viscosidad-Mtodo de Bola Rodante ....... 738
(621) Cromatografa ........................ 453 (921) Determinacin de Agua ................. 740
(631) Color y Acromatismo ................... 464 (941) Caracterizacin de Slidos Cristalinos
(641) Totalidad de la Disolucin ............... 465 y Parcialmente Cristalinos por Difraccin
(643) Carbono Orgnico Total ................. 466 de Rayos X sobre Polvo (DRXP). . . 744
(645) Conductividad del Agua ................. 467
(651) Temperatura de Solidificacin ............. 471
(659) Requisitos de Envasado y Almacenamiento ... 472 INFORMACIN GENERAL
(660) Envases-Vidrio ....................... 481
(661) Envases-Plsticos ..................... 487 (1005) Emisin Acstica ..................... 752
USP 38 Gua para los Captulos Generales x

(101 O) Datos Analticos-Interpretacin y Trata- (1094) Cpsulas-Pruebas de Disolucin y


miento ........................... 756 Atributos de Calidad Relacionados ....... 1193
(1015) Aparatos Automatizados de Sntesis (1097) Procedimientos para el Muestreo de Polvos
Radioqufmica . . . . . . . . . . . . . . . . 772 <l Gr<lnel ..... , . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1202
(1024) Suero Bovino................. . . 774 (11 02) Mtodos de Pruebas Inmunolgicas-
(1 027) Citometra de Flujo ................... 788 Consideraciones Generales ............ 121 6
(1 030) Captulos de Valoraciones Biolgicas-Infor- (11 03) Mtodos de Pruebas Inmunolgicas-
macin GeneralJ Glosario ............. 806 Ensayo por lnmunoadsorcin Ligado a
(1031) Biocompatibilida de los Materiales Usados en Enzimas (ELISA) .................... 1225
Envases de Medicamentos, Dispositivos (1104) Mtodos de Pruebas Inmunolgicas-
Mdicos e Implantes ................. 818 Anlisis por lnmunotransferencia ........ 1236
(1 032) Diseo y Desarrollo de Valoraciones Biol- (11 05) Mtodos de Pruebas Inmunolgicas-
gicas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 829 Resonancia de Plasmn Superficial ....... 1249
(1033) Validacin de Valoraciones Biolgicas ...... 849 (1106) Ensayos de lnmunogenicidad-Diseo y
(1034) Anlisis de Valoraciones Biolgicas ......... 866 Validacin de lnmunoensayos para Detectar
(1 035) Indicadores Biolgicos para Esterilizacin .... 880 Anticuerpos Antifrmacos ............. 1 266
(1041) Productos Biolgicos .................. 885 (1111) Examen Microbiolgico de Productos No
(1043) Materiales Auxiliares para Productos Celulares, Estriles: Criterios de Aceptacin para
Gnicos y de Ingeniera Tisular .......... 886 Preparaciones Farmacuticas y Sustancias
(1044) Crioconservacin de Clulas ............. 895 de Uso Farmacutico ................ 1284
(1045) Artculos Obtenidos por Biotecnologa ...... 909 (1112) Determinacin de Actividad de Agua en
(1046) Productos Derivados de Clulas y Tejidos .... 925 Productos Farmacuticos No Esteriles ..... 1 285
(1047) Productos de Terapia Gnica ............ 958 (1113) Caracterizacin, Identificacin y
(1048) Calidad de Productos Biotecnolgicos: Anlisis de Tipificacin de Cepas Microbianas ....... 1288
la Construccin Expresable en Clulas Usadas (1115) Control de Biocarga de Frmacos y Medi-
para la Produccin de Productos Protenicos camentos No Estriles ................ 1293
Obtenidos con ADN Recombinante ....... 990 (1116) Control Microbiolgico y Monitoreo de
(1 049) Calidad de Productos Biotecnolgicos: Pruebas ,Ambientes de Procesamiento Asptico .... 1 300
de Estabilidad de Productos Biotecnolgicos (111 7) Optimas Prcticas de Laboratorio Microbiol-
o Biolgicos ........................ 993 gico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1314
(1 050) Evaluacion de la Seguridad Viral en Productos (1118) Dispositivos de Monitoreo-Tiempo, Tempe-
Biotecnolgicos Obtenidos de Lneas ratura y Humedad .................. 1321
Celulares de Origen Humano o Animal .... 998 (1119) Espectroscopa en el Infrarrojo Cercano .... 1 328
(1051) Limpieza de Material de Vidrio .......... 1012 (1120) Espectroscopa Raman ................ 1335
(1 052) Artculos Obtenidos por Biotecnologa- (1121) Nomenclatura ..... , ................ 1343
Anlisis de Aminocidos .............. 1012 (1125) Tcnicas Basadas en Acidos Nucleicos-
(1053) Electroforesis Capilar ................. 1026 Generalidades .... , ................ 1 346
(1054) Artculos Obtenidos por Biotecnologa- (1126) Tcnicas Basadas en Acidos Nucleicos-
lsoelectroenfoque ................... 1034 Extraccin, Deteccin, y Secuenciacin ..... 1 352
(1 055) Artculos Obtenidos por Biotecnologa- (1127) Tcnicas Basadas en Acidos Nucleicos-
Mapeo de Pptidos ................. 1037 Amplificacin ..... ,. ................ 1 362
(1 056) Artculos Obtenidos por Biotecnologa- (1128) Tcnicas Basadas en Acidos Nucleicos-
Electroforesis en Gel de Poliacrilamida .... 1043 Micromatrices .... , ................. 1373
(105 7) Artculos Obtenidos por Biotecnologa- (1129) Tcnicas Basadas en Acidos Nucleicos-
Valoracin de Protenas Totales ......... 1050 Genotipificacin ... ,. ................ 1 380
(1058) Calificacin de Instrumentos Analticos .... 1055 (1130) Tcnicas Basadas en Acidos Nucleic9s-
(1059) Desempeo de Excipientes ............. 1061 Enfoques para Detectar Trazas de Acidos
(1061) Color-Medicin Instrumental .......... 1083 Nucleicos (Anlisis de ADN Residual) ..... 1 385
(1 065) Cromatografa lnica ................. 1086 (11 36) Envasado y Reenvasado-Envases
(1066) Ambientes Fsicos que Promueven el Uso Seguro Unitarios ......................... 1388
de los Medicamentos ................ 1089 (1151) Formas Farmacuticas ................ 1398
(1072) Desinfectantes y Antispticos ........... 1 097 (1152) Medicamentos Veterinarios Usados en
(1074) Guas para la Evaluacin de la Seguridad Alimentos para Animales .............. 1424
Biolgica de los Excipientes ............ 1103 (11 60) Clculos Farmacuticos en la Preparacin
(1078) Buenas Prcticas de Fabricacin para Excipientes Magistral de Prescripciones ............ 1426
Farmacuticos a Granel ............... 1107 (1163) Garanta de Calidad en la Preparacin
(1079) Buenas Prcticas de Almacenamiento y Magistral ......................... 1441
Distribucin para Medicamentos ....... 1125 (1171) Anlisis por Solubilidad de Fases ......... 1447
(1080) Excipientes Farmacuticos a Granel- (1174) Fluidez de Polvos .................... 1450
Certificado de Anlisis ................ 11 36 (11 76) Balanzas y Aparatos Volumtricos para Prescrip-
(1084) Anlisis de Glicoprotenas y Glicanos- ciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1454
Consideraciones Generales ............ 1144 (11 77) Buenas Prcticas de Envasado ........... 1456
(1086) lmpurez~s en Frmacos y Productos (11 78) Buenas Prcticas de Reenvasado ......... 1459
Farmaceut1cos ..................... 1155 (1180) Plasma Humano .................... 1462
(1087) Disolucin Intrnseca Aparente-Procedi- (1181) Microscopia l::lectrn1ca de Barrido ....... 1487
mientos de Pruebas de Disolucin para (1184) Pruebas de Sensibilizacin ............ 1497
Disco Rotatorio y Disco Estacionario ..... 1158 (1191) Consideraciones sobre Estabilidad en la Prctica
(1 088) Evaluacin In Vivo e In Vitro de Formas de Dispensacin .................... 1509
Farmacuticas ..................... 1163 (1195) Gua sobre Cambios Significativos en Excipientes
(1 090) Evaluacin de Desempeo del Producto Farma- Farmacuticos a Granel ............... 1514
cutico-Biodisponibilidad, Bioequivalencia \1197) Buenas Prcticas de Distribucin para Exci-
y Disolucin ...................... 11 75 pientes Farmacuticos a Granel ......... 1526
(1 091) Etiquetado de Ingredientes Inactivos ...... 11 84 (1207) Envasado de Productos Estriles-Evaluacin
(1092) Procedimiento de Disolucin: Desarrollo de Integridad ...................... 1551
y Validacin ....................... 1184
x Gua para los Captulos Generales USP 38

(1208) Pruebas de Esterilidad-Validacin de Sistemas (1601) Productos para Nebulizacin-Pruebas de


Aisladores ........................ 1553 Caracterizacin .................... 1765
(1209) Esterilizacin-Indicadores e Integradores (1644) Teora y Prctica de Mediciones de
Qumicos y Fi~irnrurnicos ............ 1558 Conductividad Elctrica de Solu1..iu11e~ .... 1 768
(1211) Esterilizacin y Garanta de Esterilidad de <1660) Envases de Vidrio-Evaluacin de la
Artculos Farmacopeicos .............. 1561 Durabilidad de la Superficie Interna ...... 1 776
(1216) Friabilidad de las Tabletas .............. 1566 (1724) Medicamentos Semislidos-Pruebas de
(121 7) Fuerza de Ruptura de las Tabletas ........ 1567 Desempeo ....................... 1 781
(1222) Productos Farmacuticos con Esterilizacin (1 736) Aplicaciones de la Espectrometra de
Terminal-Liberacin Paramtrica ....... 1571 Masas ........................... 1795
(1223) Validacin de Mtodos Microbiolgicos (1761) Aplicaciones de la Espectroscopa de
Alternativos ....................... 1575 Resonancia Magntica Nuclear ......... 1818
(1224) Transferencia de Procedimientos Analticos .. 1579 (1787) Medicin de Partculas Subvisibles en
(1225) Validacin de Procedimientos Farma- Inyectables de Protenas Teraputicas ..... 1840
copeicos ......................... 1581 (1 788) Metodos para la Determinacion de Partculas
(1226) Verificacin de Procedimientos Farma- en Inyectables y Soluciones Oftlmicas .... 1855
copeicos ......................... 1587 (1852) Espectroscopa de Absorcin Atmica-Teora
(1227) Validacin de Recuperacin Microbiana en y Prctica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18 70
Artculos Farmacopeicos .............. 1588 (1853) Espectroscopa de Fluorescencia-Teora
(1229) Esterilizacin de Artculos Farmacopeicos ... 1593 y Prctica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1880
(1229.1) Esterilizacin con Vapor de Agua por (1854) Espectroscopa en el Infrarrojo Medio-Teora
Contacto Directo ................. 1598 y Prctica ........................ 1890
(1229.2) Esterilizacin con Calor Hmedo de (1857) Espectroscopa Ultravioleta-Visible-Teora
Lquidos Acuosos ................. 1602 y Prctica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1900
(1229.3) Monitoreo de la Biocarga ............ 1607 (1911) Reometra ......................... 191 O
(1229 .4) Esterilizacin de Lquidos por Filtracin ... 1 61 O
(1229.6) Esterilizacin en Fase Lquida .......... 1618
(1229.7) Esterilizacin por Gases .............. 1621 SUPLEMENTOS DIETTICOS
(1229.8) Esterilizacin por Calor Seco .......... 1624
(1229 .10) Esterilizacin por Radiacin .......... 1626 (2021) Pruebas de Recuento Microbiano-Suplementos
(1230) Agua para Uso en Hemodilisis .......... 1631 Nutricionales y Dietticos ............. 191 7
(1231) Agua para Uso Farmacutico ........... 1632 (2022) Procedimientos Microbiolgicos para Comprobar
(1234) Vacunas para Uso Humano-Vacunas la Ausencia de Microorganismos Especficos-
de Polisacridos y Glicoconjugados ...... 1662 Suplementos Nutricionales y Dietticos ... 1922
(1235) Vacunas para Uso Humano-Consideraciones (2023) Atributos Microbiolgicos de los Suplementos
Generales ........................ 1680 Nutricionales y Dietticos No Estriles .... 1929
(1237) Mtodos de Pruebas Virolgicas ......... 1698 (2030) Informacin Complementaria para Artculos de
(1238) Vacunas para Uso Humano-Vacunas Bac- Origen Botnico .................... 1932
terianas .......................... 1 720 (2040) Desintegracin y Disolucin de Suplementos
(1240) Anlisis de Virus en Plasma Humano para Dietticos ........................ 1942
Fabricacin Posterior ................ 1 734 (2091) Variacin de Peso de Suplementos
(1241) Interacciones Agua-Slido en Sistemas Dietticos ........................ 1950
Farmacuticos ..................... 1745 (2232) Contaminantes Elementales en Suplementos
(1251) Pesada en una Balanza Analtica ......... 1750 Dietticos ........................ 1951
(1265) Informacin Escrita de los Medicamentos (2250) Deteccin de Suplementos Dietticos
Recetados-Guas ................... 1755 Irradiados ........................ 1955
(1285) Preparacin de Muestras Biolgicas para (2750) Prcticas de Fabricacin para Suplementos
Anlisis Histolgico e lnmunohisto- Dietticos ........................ 1958
qumico .......................... 1757
(1285.1) Tincin con Hematoxilina y Eosina de Cortes
de Tejidos para Examen Microscpico .. 1762
USP 38 Advertencias Generales xi

Advertencias y Requisitos
Generales

Aplicables a las Normas, Pruebas,


Valoraciones y Otras Especificaciones
de la Farmacopea de los Estados Unidos

1. Ttulo y Revisin ...................... xiii 6.70. Reactivos ............................ xviii


6.80. Equipo ............................. xviii
2. Estado Oficial y Reconocimiento
Legal .................................. xiii 7. Resultados de Pruebas ................ xix
2. lO. Texto Oficial .......................... xiii 7.1 O. Interpretacin de los Requisitos ............. xix
2.20. Artculos Oficiales ...................... xiii 7.20. Reglas para Redondeo ................... xix
2.30. Reconocimiento Legal ................... xiii
8. Trminos y Definiciones ............... xix
3. Cumplimiento de las Normas .......... xiv 8.1 O. Abreviaturas .......................... xix
3.1 O. Aplicabilidad de las Normas ............... xiv 8.20. Aproximadamente ..................... xx
3.20. Indicacin de Cumplimiento ............... xiv 8.30. Contenido de Alcohol ................... xx
8.40. Pesos Atmicos ....................... xx
8.50. Determinaciones con Blancos ............. xx
4. Monografas y Captulos Generales .... xv 8.60. Concomitantemente .................... xx
4.1 O. Monografas .......................... xv 8.70. Desecador ........................... xx
4.20. Captulos Generales ..................... xv 8.80. Logaritmos ........................... xx
8.90. Cepas Microbianas ..................... xx
8.1 OO. Inapreciable .......................... xx
5. Componentes de las Monografas ..... xv 8.11 O. No menos de (NLT) y No ms de (NMT) ..... xx
5.1 O. Frmulas Moleculares .................... xv 8.120. Olor ............................... xx
5.20. Sustancias Agregadas .................... xv 8.1 30. Por ciento ........................... xx
5.30. Descripcin y Solubilidad ................. xvi 8.140. Concentraciones Porcentuales ............. xx
5.40. Identidad ............................ xvi 8.150. Presin ............................. xx
5.50. Valoracin ............................ xvi 8.160. Tiempo de Reaccin .................... xx
5.60. Impurezas y Sustancias Extraas ............ xvi 8.1 70. Peso Especfico ....................... xx
5.70. Pruebas de Desempeo ................. xvii 8.180. Temperaturas ........................ xx
5.80. Estndares de Referencia USP ............. xvii 8.190. Tiempo ............................. xx
8.200. Transferir ............................ xx
6. Prcticas y Procedimientos de 8.21 O. Vaco .............................. xx
Prueba . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xvii 8.220. Desecador al Vaco ..................... xx
6.1 O. Prcticas Seguras de Laboratorio . . . . . . . . . . . xvii 8.230. Agua .............................. xx
6.20. Procedimientos Automatizados ............ xvii 8.240. Pesos y Medidas . . . . . . .... xxi
6.30. Mtodos y Procedimientos Alternativos y
Armonizados . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xvii 9. Prescripcin y Dispensacin .......... xxii
6.40. Con Respecto a la Sustancia Seca, Anhidra, 9 .1 O. Uso de Unidades Mtricas ............... xxii
Incinerada o Exenta de Disolventes ............ xvii 9.20. Cambios en Volumen ................... xxii
6.50. Preparacin de Soluciones ............... xviii
6.60. Unidades Necesarias para Completar una
Prueba ................................ xviii
xii Advertencias Generales USP 38

1 O. Conservacin, Envasado, Almacena- 1O.1 O. Envasado y Almacenamiento . . . . . . . . . . . . . xxii


10.40. Etiquetado . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xxii
miento y Etiquetado . . . . . . . . . . . . . . . . . . xxii
USP 38 Advertencias Generales xiii

ADVERTENCIAS Y
REQUISITOS GENERALES
La seccin de Advertencias y Requisitos Generales (en lo vertencias Generales. Las revisiones al texto oficial se presen-
sucesivo, Advertencias Generales) presenta las suposiciones tan en los Suplementos, lnterim Revision Announcements y Re-
bsicas, definiciones y condiciones que se usan por defecto vision Bul/etins. Los captulos generales con numeracin del
para la interpretacin y aplicacin de la Farmacopea de los 1000 al 1 999 se consideran explicativos y estn destinados a
Estados Unidos de America ( USP, por sus siglas en ingls) y definir, describir o informar sobre un tema en particular. No
del Formulario Nacional (NF, por sus siglas en ingls). contienen requisitos obligatorios aplicables a ningn artculo
Los requisitos establecidos en estas Advertencias Generales oficial a menos que sean referidos por las Advertencias Gene-
se aplican a todos los artculos reconocidos en la USP y en el rales, una monografa o un captulo general con numeracin
NF (en lo sucesivo, los "compendios") y a todos los captu- inferior a 1000. Los captulos generales con numeracin su-
los generales, a menos que se especifique algo diferente. perior a 2000 aplican nicamente a artculos destinados
Cuando los requisitos de una monografa individual sean di- para su uso como ingredientes dietticos y suplementos
ferentes a los de las Advertencias Generales o de un captulo dietticos.
general, los requisitos de la monografa se aplicarn y reem- 2.20. Artculos Oficiales
plazarn a los requisitos de las Advertencias Generales o del Un artculo oficial es un artculo reconocido en la USP o el
captulo general, aunque la monografa no haga mencin NF. Se considera que un artculo est reconocido e incluido
expresa de las diferencias. en un compendio cuando se publica su monografa en el
1. TTULO Y REVISIN compendio y se le asigna una fecha oficial a la misma en
El ttulo completo de esta publicacin (que consiste en forma especfica o general.
cuatro volmenes e incluye sus Suplementos) es: Farmacopea El ttulo especificado en una monografa es el ttulo oficial
de los Estados Unidos de Amrica, Trigsima Octava Revisin para ese artculo. Los nombres que se consideren sinnimos
y Formulario Nacional, Trigsima Tercera Edicin. Estos ttulos de ttulos oficiales no pueden ser utilizados para sustituir a
pueden abreviarse a USP 38, a NF 33, y a USP 38-NF 33. La los nombres oficiales.
Farmacopea de los Estados Unidos, Trigesima Octava Revisin, Los artculos oficiales incluyen tanto sustancias oficiales
y el Formulario Nacional, Trigsima Tercera Edicin, reempla- como productos oficiales. Una sustancia oficial es un frmaco,
zan a todas las revisiones anteriores. Cuando se emplean las excipiente, ingrediente diettico u otro ingrediente, o un
siglas "USP", "NF" o "USP-NF" sin ningn otro calificativo, componente de un dispositivo terminado para el cual el t-
las mismas se refieren nicamente a USP 38, NF 33, y a sus tulo de la monografa no incluye indicacin alguna sobre la
Suplementos, durante el tiempo que estos compendios estn naturaleza de la forma terminada.
vigentes. Los mismos ttulos, sin ninguna distincin, se apli- Un producto oficial es un producto farmacutico, suple-
can tanto a la presentacin impresa como a la electrnica mento diettico, preparacin magistral, o dispositivo termi-
de este contenido. Aunque la USP y el NF se publican en nado para el cual se provee una monografa.
forma conjunta y comparten estas Advertencias Generales, 2.30. Reconocimiento Legal
cada uno de ellos constituye por s mismo un compendio Los compendios USP y NF estn reconocidos por las legis-
separado. laciones y reglamentaciones de muchos pases del mundo.
Esta revisin es oficial a partir del 1 de mayo de 2015, a Las autoridades reguladoras pueden hacer cumplir las nor-
menos que se indique algo diferente mediante un texto mas presentadas en la USP y el NF; no obstante, debido a
especfico. que el reconocimiento de los compendios USP y NF puede
Los Suplementos de la USP y el NF se publican variar de pas a pas, se recomienda que los usuarios conoz-
peridicamente.
Los lnterim Revision Announcements (Anuncios de Revisin
can las legislaciones y reglamentaciones f licables. En los
Estados Unidos, de acuerdo con la Federa Food, Orug, and
Intermedia) son revisiones de la USP y del NF que se publi- Cosmetic Act (Ley Federal de Alimentos, Medicamentos y
can en el sitio Web de la USP. Los lnterim Revision Announce- Cosmticos o FOCA), tanto la USP como el NF estn recono-
ments contienen revisiones oficiales y sus fechas de entrada cidos como compendios oficiales. Un medicamento con un
en vigencia. Asimismo, el sitio Web de la USP, en el apar- nombre reconocido en USP-NF debe cumplir con las normas
tado "New Official Text" (Nuevo Texto Oficial) incluye farmacopeicas de identidad o se le considerar adulterado,
anuncios de disponibilidad de nuevos Estndares de Referen- rotulado incorrectamente (misbranded) o ambos. Ver, p.ej.,
cia USP y anuncios de pruebas o procedimientos que se la FOCA 501 (b) y 502(e)(3)(b); ver tambin las reglamen-
mantienen en suspenso por falta de los Estndares de Refe- taciones de la FOA, el Ttulo 21 del CFR 299.5(a&b). Para
rencia USP requeridos. evitar que se les considere adulterados, los medicamentos
Los Revision Bul/etins (Boletines de Revisin) son revisiones deben cumplir adems con las normas farmacopeicas de
del texto oficial o aplazamientos que requieren de publica- contenido, calidad y pureza, a menos que se declaren en el
cin expedita. Se publican en el sitio Web de la USP y, por etiquetado todos los aspectos en los que el medicamento
lo general, se oficializan inmediatamente, a menos que se difiere. Ver, p.ej., FOCA 501 (b) y Ttulo 21 del CFR
indique algo distinto en el Boletn de Revisin. 299.5(c). Asimismo, para evitar que se les considere rotula-
La Errata (Fe de Erratas) comprende las correcciones a ar- dos incorrectamente, los medicamentos reconocidos en los
tculos publicados errneamente que no han sido aprobados compendios USP-NF deben tambin envasarse y etiquetarse
por el Consejo de Expertos y que no reflejan los requisitos de conformidad con las normas farmacopeicas. Ver la FOCA
oficiales. 502(g).
2. ESTADO OFICIAL Y RECONOCIMIENTO LEGAL Un suplemento diettico que declara cumplir con las es-
2.10. Texto Oficial pecificaciones de USP se considerar como un alimento in-
El Texto Oficial es el texto contenido en la USP y el NF, correctamente rotulado (misbranded food) si incumpliera
incluidas las monografas, los captulos generales y estas Ad- con las mismas. Ver la FOCA 403(s)(2)(0).
xiv Advertencias Generales USP 38

La ejecucin de las normas USP es responsabilidad de la ingrediente de un medicamento. Dichos artculos (productos
FDA y dems autoridades gubernamentales en los EE.UU. y farmcuticos, frmacos y excipientes) incluyen medicamen-
dems pases. La USP no desemper1a ningn papel en la tos para humanos (ya sea dispensados con receta, "de venta
ejecurion de las normas !ibrc" o de oto tipo), asi corno n-1edicarnentos pa,-a a11ir11d-
3. CUMPLIMIENTO DE LAS NORMAS les. las normas correspondientes se aplican a dichos artcu-
3.1 O. Aplicabilidad de las Normas los, independientemente de que se agregue o no la deno-
Las normas para un artculo reconocido en los compen- minacin "USP" o "NF". Las normas se aplican por igual a
dios ( USP-NF) se expresan en la monografa del artculo, en los artculos con ttulos oficiales o nombres derivados por
los captulos generales aplicables y en las Advertencias Gene- transposiciones de las palabras que componen los ttulos ofi-
rales. La identidad, contenido, calidad y pureza de un art- ciales, o por transposicin en el orden de los nombres de
culo se determinan mediante pruebas, procedimientos y cri- dos o mas ingredientes activos en los ttulos oficiales, o
terios de aceptacin oficiales, incluidos ya sea en su cuando se usen sinnimos con la intencin o efecto de su-
monografa, en las Advertencias Generales o en los captulos gerir un grado significativo de identidad con el ttulo o
generales aplicables, a menos que se excepte en alguna nombre oficial.
otra parte de los compendios. Est permitida la adopcin 3.10.20. Aplicabilidad de las Normas a Dispositivos
temprana de las normas revisadas. Cuando las normas revi- Mdicos, Suplementos Dietticos y a sus Componentes e
sadas para un artculo existente hayan sido publicadas como Ingredientes
"texto oficial" aprobado (conforme a lo aprobado en la sec- Un artculo reconocido en la USP o el NF debe cumplir
cin 2.1 O) pero an no sean oficiales (seis meses despus de con las normas farmacopeicas si el artculo es un dispositivo
su publicacin, a menos que se especifique algo distinto; ver mdico, componente destinado para un dispositivo mdico,
"fecha oficial," seccin 2.20), el cumplimiento con la norma suplemento diettico, ingrediente diettico, u otro ingre-
revisada no excluir una determinacin o indicacin de diente destinado para su incorporacin en un suplemento
cumplimiento con las normas farmacopeicas, a menos que diettico, y si declara en su etiquetado el cumplimiento con
la USP especifique algo distinto prohibiendo la adopcin los compendios USP o NF.
temprana en una norma en particular. En general, los suplementos dietticos se elaboran con in-
Las normas en la monografa, captulo(s) general(es) y Ad- gredientes que cumplen con las normas de los compendios
vertencias Generales rertinentes son aplicables en todo mo- USP, NF, o Food Chemicals Codex. Cuando no existen tales
mento de la vida de artculo, desde su produccin hasta su normas, las sustancias pueden usarse en suplementos diet-
caducidad. Las especificaciones del fabricante y las buenas ticos siempre que hayan mostrado ser de grado alimenticio
prcticas de fabricacin (incluyendo, p.ej., iniciativas de Cali- de calidad aceptable utilizando otros procedimientos
dad por Diseo), por lo general, se desarrollan y siguen para adecuados.
asegurar que el artculo cumplir con las normas farmaco- 3.20. Indicacin de Cumplimiento
peicas hasta su fecha de caducidad, siempre que se alma- Un producto farmacutico, frmaco o excipiente puede
cene de acuerdo con las instrucciones dadas al respecto. Por usar la denominacin "USP" o "NF" junto a su ttulo oficial
consiguiente, se espera que todo artculo oficial cumpla con o en otra parte de la etiqueta nicamente cuando: (1) existe
las normas farmacopeicas en caso de analizarse, y todo art- una monografa en el compendio especificado y (2) el art-
culo oficial analizado segn se indica en la monografa perti- culo cumple con la identidad estipulada en el compendio
nente debe cumplir con tales normas para demostrar el correspondiente.
cumplimiento. Cuando se determina que un producto farmacutico, fr-
En ocasiones, las normas farmacopeicas toman el carcter maco o excipiente difiere de las normas USP o NF pertinen-
de procedimientos estadsticos cuando implican unidades tes de contenido, calidad, o pureza al aplicar las pruebas,
mltiples y, posiblemente, un diseo de procedimiento se- procedimientos y criterios de aceptacin establecidos en el
cuencial que permite al usuario determinar que el artculo compendio correspondiente, estas diferencias deben indi-
analizado cumple o no con la norma. La similitud con pro- carse de forma clara en la etiqueta.
cedimientos estadsticos podra sugerir un intento de infe- Cuando un producto farmacutico, frmaco o excipiente
rencia para algn grupo de unidades ms grande, pero en no cumple con la identidad estipulada en los compendios
todos los casos, las declaraciones sobre si se ha cumplido USP o NF o se le ha agregado una sustancia que interfiere
con la norma farmacopeica slo aplica a las unidades anali- con las pruebas y procedimientos establecidos, se le debe
zadas. Los compendios no indican ni prohben las repeticio- asignar un nombre diferente y totalmente distinto de cual-
nes, las mediciones mltiples, el rechazo estadstico de valo- quier otro nombre reconocido en los compendios USP o NF.
res aberrantes o las extrapolaciones de los resultados a Un dispositivo mdico, suplemento diettico o ingrediente
poblaciones ms grandes, ni tampoco la necesidad y fre- o componente de un dispositivo mdico o suplemento die-
cuencia adecuada del anlisis de las partidas. La frecuencia ttico puede usar la denominacin "USP" o "NF" junto a su
del anlisis y el muestreo se deja libre a las preferencias o ttulo oficial o en otra parte de la etiqueta, nicamente
instrucciones de aqullos que llevan a cabo los anlisis para cuando: (1) existe una monografa en el compendio especi-
determinar el cumplimiento con las normas y a los dems ficado y (2) el artculo cumple con las normas de la mono-
usuarios de USP-NF, incluidos fabricantes, compradores o grafa y dems normas aplicables en el compendio
autoridades regluladoras. correspondiente.
Los productos oficiales se preparan de acuerdo con los La denominacin "USP" o "NF" en la etiqueta de un art-
principios reconocidos de buenas prcticas de fabricacin y culo no debe ni puede interpretarse como un aval por parte
a partir de ingredientes que cumplan con las normas de USP de la USP ni tampoco debe interpretarse como una confir-
o NF, siempre que existan normas para dichos ingredientes macin por parte de la USP de que tal artculo cumple con
(para suplementos dietticos, ver la seccin 3.1 0.20). las normas ertinentes de la USP. La USP puede iniciar una
Las sustancias oficiales se elaboran segn principios reco- accin lega si se declara o presenta un artculo como un
nocidos de buenas prcticas de fabricacin con ingredientes artculo oficial en uno de los compendios de la USP y sta
que cumplen con las especificaciones establecidas para ase- determina que tal aseveracin no fue hecha de buena fe.
gurar que las sustancias resultantes cumplan con los requisi- La denominacin "USP-NF" puede usarse en la etiqueta
tos de las monografas oficiales. de un artculo, siempre que dicha etiqueta tambin lleve
3.10.1 O. Aplicabilidad de las Normas a Productos una frase tal como "Cumple con las normas NF publicadas
Farmacuticos, Frmacos y Excipientes por la USP", indicando el compendio particular que corres-
Las normas correspondientes de los compendios USP o NF ponde aplicar.
se aplican a cualquier artculo comercializado en los Estados Cuando se usan las siglas "USP," "NF," o "USP-NF" en la
Unidos que (1) se reconozca en el compendio y (2) que se etiqueta de un artculo para indicar que el artculo cumple
destine o etiquete para su uso como medicamento o como con las normas farmacopeicas, las siglas deben aparecer
LJSP 38 Advertencias GPnPmiP'> xv

junto al ttulo oficial del artculo. Las siglas no debern apa- una sustancia presente en un suplemento diettico sea ma-
recer dentro de smbolos, como por ejemplo crculos, cua- yor que el criterio de aceptacin inferior permitido por la
drados etc., y debern estar en letras maysculas. monografa, el criterio de aceptacin superior de la mono-
Si un supiemenlo diellico 110 curnie con Lodus los re- grafa puede incrcmcnt..ir5c en unJ cantidad
quisitos farmacopeicos aplicables, pero contiene uno o ms correspondiente.
ingredientes dietticos u otros ingredientes reconocidos en Los criterios de aceptacin especificados en las monogra-
los compendios USP o NF, se puede indicar que tales ingre- fas individuales y en los captulos generales para preparacio-
dientes individuales cumplen con las normas USP o NF o nes magistrales se basan en los atributos de calidad que se
que son de calidad USP o NF siempre y cuando la denomi- espera podran caracterizar un artculo preparado magistral-
nacin se limite a los ingredientes individuales y no se insi- mente a partir de frmacos e ingredientes a granel de
ne que el suplemento diettico cumple con las normas en acuerdo con los procedimientos establecidos o con los prin-
USP. cipios reconocidos de buenas prcticas de preparacin ma-
4. MONOGRAFAS Y CAPTULOS GENERALES gistral descritos en estos compendios.
4.1 O. Monografas 4.20. Captulos Generales
Las monografas establecen el nombre, definicin, especi- A cada captulo general se le asigna un nmero que apa-
ficaciones y dems requisitos relacionados con el envasado, rece entre parntesis angulares junto al ttulo (p.ej.: Croma-
almacenamiento y etiquetado del artculo. Las especificacio- tografa (621 >). Los captulos generales pueden contener lo
nes consisten en pruebas, procedimientos y criterios de siguiente:
aceptacin que ayudan a asegurar la identidad, contenido, Descripciones de pruebas y procedimientos para su apli-
calidad y pureza del artculo. Para los requisitos generales cacin en monografas individuales,
relacionados con secciones especficas de la monografa, ver C?escripciones y e_specifica_ciones de condiciones y prc-
la seccin 5, Componentes de las Monografas. ticas de preparac1on magistral,
Debido a que, en ocasiones, las monografas no propor- Informacin general para la interpretacin de requisitos
cionan normas para todas las caractersticas relevantes, algu- farmacopeicos,
nas sustancias oficiales pueden ajustarse a las normas USP o Descripciones de prcticas generales de almacena-
NF, pero diferir en lo que respecta a propiedades no norma- miento farmacutico, dispensacin y envasado, o
lizadas que son relevantes para su uso en preparaciones es- Guas generales para fabricantes de sustancias oficiales o
pecficas. Para asegurar la intercambiabilidad en esos casos, productos oficiales.
se recomienda a los usuarios comprobar la equivalencia fun- Cuando una monografa hace referencia a un captulo ge-
cional o determinar tales caractensticas antes de su uso. neral, los criterios de aceptacin pueden presentarse des-
4.10.1 O. Aplicabilidad de los Procedimientos de Prueba pus de dos puntos.
Una sola monografa puede incluir distintas pruebas, pro- Algunos captulos pueden servir como descripciones gene-
cedimientos y/o criterios de aceptacin que reflejen atribu- rales introductorias de una prueba o tcnicas analticas. Ade-
tos de diversos artculos del fabricante. Tales alternativas ms, pueden hacer referencia a otros captulos generales
pueden presentarse para distintos casos de formas polimrfi- que contengan tcnicas, detalles de los procedimientos y,
cas, impurezas, hidratos y disoluciones. Las monografas in- en ocasiones, criterios de aceptacin.
dican las pruebas, procedimientos y/o criterios de acepta- 5. COMPONENTES DE LAS MONOGRAFAS
cin que se deben usar, as como el etiquetado requerido. 5.1 O. Frmulas Moleculares
Una prueba en una monografa puede contener y requerir Las frmulas moleculares de los ingredientes activos que
procedimientos mltiples. Sin embargo, se pueden incluir se usan en la definicin del contenido requerido de un art-
mltiples procedimientos en monografas particulares espec- culo farmacopeico tienen por objeto designar las entidades
ficamente con el objetivo de asegurar la disponibilidad de qumicas, tal como aparecen en el nombre qumico com-
un procedimiento adecuado para un producto en particular. pleto del artculo, con una pureza absoluta (100 por ciento).
En dichos casos, se incluir en la monografa una declara- 5.20. Sustancias Agregadas
cin de etiquetado que indique la aplicacin adecuada de Las sustancias agregadas se presumen inadecuadas para
los procedimientos. No se requiere una declaracin en el su inclusin en un artculo oficial y por lo tanto quedan
etiquetado si se usa la Prueba 1. prohibidas siempre que: (1) excedan la cantidad mnima re-
4.10.11. Pruebas de Disolucin, Desintegracin y querida para lograr el efecto deseado; (2) su presencia
Liberacin de Frmacos afecte la biodisponibilidad, la eficacia teraputica o la seguri-
La monografa puede incluir mltiples pruebas de Disolu- dad del artculo oficial; o (3) interfieran con las pruebas o
cin, Desintegracin o Liberacin de Frmacos. El orden en valoraciones prescritas para determinar el cumplimiento de
el que se presentan estas pruebas en la monografa se basa las normas farmacopeicas.
en el orden en el que fueran aprobadas por el Comit de El aire contenido en el envase de un artculo oficial puede
Expertos pertinente para su inclusin en la monografa. La extraerse o reemplazarse por dixido de carbono, helio, ar-
Prueba 1 no es necesariamente la prueba para el producto gn o nitrgeno, o una mezcla de estos gases, siempre que
innovador o para el producto de referencia. El cumplimiento sea apropiado. No es necesario declarar en el etiquetado el
con alguna de las pruebas no garantiza la bioequivalencia ni uso de alguno de dichos gases.
la biodisponibilidad. 5.20.10. Sustancias Agregadas, Excipientes e Ingredientes
4.10.20. Criterios de Aceptacin en Sustancias Oficiales
Los criterios de aceptacin consideran errores analticos y Las sustancias oficiales pueden contener nicamente las
variaciones inevitables durante la fabricacin y preparacin sustancias agregadas especficas permitidas por la monogra-
magistral, as como el deterioro hasta un grado considerado fa individual. Si se permite tal adicin, la etiqueta debe indi-
aceptable en condiciones prcticas. La existencia de criterios car los nombres y las cantidades de las sustancias
de aceptacin farmacopeicos no constituye razn para ase- agregadas.
verar que una sustancia oficial cuya pureza se aproxima al 5.20.20. Sustancias Agregadas, Excipientes e Ingredientes
100 por ciento "excede" la calidad farmacopeica. De igual en Productos Oficiales
manera, el hecho de que un artculo se haya preparado A menos que se especifique algo diferente en la monogra-
usando criterios ms estrictos que los especificados en la fa individual, pueden agregarse sustancias y excipientes
monografa no constituye una razn vlida para aseverar adecuados tales como agentes antimicrobianos, bases far-
que el artculo "excede" los requisitos farmacopeicos. macuticas, transportadores, recubrimientos, saborizantes,
Un producto oficial debe formularse con la intencin de conservantes, estabilizantes y vehculos a un producto oficial
suministrar el 1 00 por ciento de la cantidad de cada ingre- para mejorar su estabilidad, utilidad o apariencia, o para fa-
diente declarado en la etiqueta. Cuando debido a requisitos cilitar su preparacin.
legales aplicables, se requiera que la cantidad mnima de
xvi Advertencias Generales USP 38

Se pueden emplear excipientes y sustancias agregadas ex- La solubilidad aproximada de. una sustan_cia farmacopeica
clusivamente para impartir color a los productos of1e1ales, se indica mediante uno de los s1gu1entes terminas
excepto para aqu.l los destinados a la administracin paren- descriptivos:
teral u oftlmic-il, siempre que cumplan con !Js rcgl<imcnta-
ciones de la FDA para el uso de colorantes y que sean ade- 1
Partes de Disolvente
cuadas en todos los otros aspectos. (Ver tambin Sustancias 1
Requeridas para
Agregadas en Inyectables (1 )). . . Trmino Descrlotlvo 1 Parte de Soluto
En la preparacin de ungentos y supositorios, se pueden Menos de 1
Muv soluble
variar las proporciones de las sustancias que constituyen la
base para mantener la consistencia adecuada ~n diferentes Fcilmente soluble De 1 a 10
condiciones climticas, siempre que no se vane la concen- Soluble De 1O a 30
tracin de los ingredientes. activos y gue no se afe~te la Moderadamente soluble De 30 a 100
biodisponibilidad, la eficacia terapeut1ca o la segundad de la Poco soluble De 100 a 1000
preparacin. Muv ooco soluble De 1000 a 1O 000
5.20.20.1. En Preparaciones Magistrales . Prcticamente insoluble o Mayor que o igual a
Las preparaciones magistrales para las que ,se proporciona Insoluble 10 000
una composicin completa deben contener un1camente los
ingredientes indicados en las frmulas, a menos que se ex- 5.40. Identidad
cepte especficamente en este documento. o _en la mono- La prueba farmacopeica bajo el ttulo ldentida~. o Identifi-
grafa individual. Se pueden prese~tar desv1ae1ones er:i,los cacin se proporciona como u,na ay_ud~ para "'.enf1car la .
procesos especificados o en los metodos de p~eparac!on ma- identidad de los artculos segun se indica, p.ej., en la eti-
gistral, pero no en sus ingredientes o proporciones, ~1empre queta de sus envases y para establecer si se trata del art-
que la preparacin final cumpla con las _n_ormas pertinentes culo nombrado en USP-NF. La prueba de Identidad o Identi-
y se prepare siguiendo el proceso espec1f1~?do. . . ficacin para un artculo en particular puede comprender
Cuando la monografa de una preparac1on magistral exige uno o ms procedimientos. Cuando se lle~a a ~,abo una
una cantidad de un ingrediente expresada con respecto a la prueba farmacopeica de Identidad o ldent1f1caC10'}, ~e deben
sustancia seca, no es necesario secar el ingrediente antes de cumplir todos los requisitos de tod_o_s los proced1m1entos. es-
utilizarlo, siempre que se tome debida cuent? del ag~a u pecificados para satisfacer los requ1s1tos d~ _la prueba. El in-
otras sustancias voltiles presentes en la cantidad utilizada. cumplimiento de un artculo con los reqws1tos de una
Existen formulaciones de alcohol especialmente desnatura- prueba de Identidad o Identificacin prescrita (es ~ec_ir, que
lizado que se usan de acuerdo con los estatut_os y reglamen- no cumpla con los requisitos d~ todos los p~oc~d1m1entos
taciones federales de la Interna! Revenue Serv1ce, (IRS, por especificados que componen dicha prueba) indica que el
sus siglas en ingls, Oficina de Recaudacin de lmp~estos artculo est rotulado incorrectamente y/o adulterado.
del Gobierno de los Estados Unidos). Una formulae1on apro-
piada de alcohol especia_lme_n_te desnaturaliz~do puede susti- 5.50. Valoracin
tuir al Alcohol en la fabncac1on de preparaciones farmaco- Las pruebas de valoracin para preparaciones m?9istrales
peicas destinadas para us<? interno o pa;~ uso tpico, no han sido concebidas para evaluar una preparac1on ~-a
siempre que el desnatural1zante sea vol~til y no q~ede en el gistral antes de su dispensacin, sino como pr~ebas of1c1ales
producto terminado. Un producto terminado destinado a para casos en los que exista duda o controversia acerca de
aplicacin tpica sobre la piel puede contener alcoh~I espe- la conformidad de la preparacin con las normas oficiales.
cialmente desnaturalizado, siempre que e~ ,desnatural1zante. 5.50. 1O. Unidades de Potencia (Biolgica)
sea un ingrediente normal en la preparac1on o una. sustancia Para las sustancias que no pueden ser caracterizadas com-
agregada permitida; en ambos casos, el desn_a,tura!1z~nte se pletamente por m_e9ios qumi~os y fsicos, pued_e s~r n_e~esa
debe identificar en la etiqueta de la preparac10~ ~op1_c?. rio expresar la act1v1<;Jad en unidades 9e po~ene1a b1olog1ca,
Cuando se indique un proceso en la monograf1a ind1v1dual, definidas por un estandar de referencia designado como pa-
toda preparacin elaborada magistralmente cc;>n alcoh~I des- trn oficial.
naturalizado debe ser idntica a la que se obtiene mediante Las unidades de potencia biolgica defi_nidas po; la Orga-
el proceso indicado. nizacin Mundial de la Salud (OMS) mediante Estandares
5.20.20.2. En Suplementos Dietticos Biolgicos Internacionales y Preparaciones ~iolgicas lnter:
Pueden agregarse ingredi0ntes adicionales. los productos nacionales de Referencia se denominan Unidades Internacio-
de suplementos dietticos siempre que tales 1ngr~d1entes: nales (UI). Las monografas se refierer:i a las unidad,~s d_efini-
(1) cumplan con los requisitos reglamentarios aplicables y. das mediante Estndares de Referencia USP como Unidades
(2) no interfieran con las valoraciones y las pruebas presen- USP". Para los productos biolgicos, existan o no ~n.idades
tas para determinar el cumplimiento de las normas Internacionales o Unidades USP (ver Productos 81olog1cos
farmacopeicas. (1 041)), las unidades de potencia se definen mediante los
correspondientes Estndares de los Estados Unidos (U.S.
5.30. Descripcin y. Solubilidad . . . , Standards) establecidos por la FDA.
Una prueba cuantitativa de solubilidad se considerara
como una prueba de pureza, nicamente cyando se des- 5.60. Impurezas y Sustancias Extraas . .
cribe y designa como tal en una monograf1a. . Las pruebas para determinar la prese!lc!a de sustanc.1as ex-
Una monografa puede incluir informacin relacionada traas e impurezas se establecen para l1m1tarlas a cantidades
con la descripcin del artculo .. La informaci~n de "des~;ip que no sean objetables en las cond1c1ones no~males de em-
cin y solubilidad" correspondiente a un articulo tam.b1en pleo del artculo (ver tambin Impurezas en Farmacos y Pro-
aparece en la tabla de referencia Descripcin y Solub1l1dad . ductos Farmacuticos (1086)). , . . .
Relativa de Artculos de la USP y del NF. La tabla de referencia
Adems de las pruebas prescritas en la_ mc;>nograf1a 1nd1v1-
indica slo las propiedades de los artculos que cu_mple~ con dual, se deben aplicar otras pruebas y entenas de acepta-
las normas de la monografa. La tabla de referene1a esta cin adecuados para detectar y controlar impurezas que pu-
destinada principalmente para aqullos que usan, elaborar:i y dieran resultar de cambios en los mtodos de
dispensan frmacos y/o artculos relaciona<;Jos. Aur:ique la in- procesamiento o que provengan de fuentes externas,, .
formacin proporcionada en las monograf1as y ! informa- cuando su presencia no concu~r~e con las b,uer:ias practicas
cin en la tabla de referencia puede ayudar 1nd1.rectamen~e de fabricacin o las buenas practicas farmaceut1cas
a la evaluacin preliminar de un artculo, dicha 1nformac1on aplicables.
no constituye en s misma una norma o prueba de pureza.
USP 38 4clvertenrias Genemlt>s xvii

5.60.10. Otra~ Impurezas en los Artculos de la USP y el USP o NF indique el uso de un Estndar de Referencia USP,
NF slo se considerarn concluyentes los resultados obtenidos
Cuando una monografa de los compendios USP o NF in- usando el Estndar de Referencia USP especificado. Cuando
Lluye ui1a valu1aci11 v 1-1rueLci de impurezas Og5r.iGJS C- Ul ro(cdirncnto cxijJ e! u~o de un artfculo oficia! y no de
matogrfica, diferente de una prueba de disolventes resi- un Estndar de Referencia lJSP rnmo material de referencia,
duales, y el procedimiento de la monografa no detecta una se debe utilizar una sustancia que satisfaga todos los reque-
impureza presente en la sustancia, se deben expresar la can- rimientos indicados para dicho artculo en la monografa ofi-
tidad e identidad de la impureza, si fueran ambas conoci- cial. Si alguna norma nueva de la USP o del NF requiere el
das, bajo el encabezado Otra(s) lmpureza(s) en el etiquetado uso de un Estndar de Referencia USP nuevo que an no
(certificado de anlisis) de la sustancia oficial. est disponible, dicha parte de la norma que contiene el
La presencia en una sustancia oficial de cualquier impu- requisito no ser oficial hasta que el material de referencia
reza no declarada en el etiquetado constituye una desvia- USP especificado est disponible.
cin de la norma si el contenido es de O, 1% o mayor. La Salvo que la etiqueta del estndar de referencia indique
suma de las Otras Impurezas combinada con las impurezas una potencia o contenido especficos, se asume que el es-
detectadas por los mtodos de la monografa no puede ex- tndar de referencia tiene una pureza del 100,0% para la
ceder del 2,0% (ver Impurezas Comunes (466)), a menos aplicacin oficial. A menos que se indique algo diferente en
que en la monografa se indique algo diferente. el procedimiento de la monografa individual o en un cap-
Las siguientes categoras de frmacos quedan excluidos de tulo general, los Estndares de Referencia USP deben usarse
los requisitos de Otras Impurezas: de acuerdo con las instrucciones de sus etiquetas.
productos de fermentacin y derivados semisintticos
obtenidos a partir de ellos,
radiofrmacos, Cambio en la redaccin:
productos biolgicos,
productos obtenidos por biotecnologa, 6. PRCTICAS Y PROCEDIMIENTOS DE PRUEBA
pptidos, 6.10. Prcticas Seguras de Laboratorio
productos botnicos y Al realizar procedimientos farmacopeicos, se deben seguir
productos crudos de origen animal o vegetal. prcticas seguras de laboratorio, las cuales incluyen medidas
No debe incluirse ninguna sustancia conocida como t- precautorias, equipo de proteccin y prcticas de trabajo
xica en Otras Impurezas. acordes a las sustancias qumicas y procedimientos usados.
5.60.20. Disolventes Residuales en los Artculos de la USP Antes de realizar cualquier procedimiento descrito en los
y el NF compendios, el analista debera conocer los peligros asocia-
Todos los artculos de los compendios USP y NF estn su- dos con las sustancias qumicas y las tcnicas y medios de
jetos al control pertinente de disolventes residuales, incluso proteccin contra dichos riesgos. Estos compendios no tie-
cuando la prueba no est indicada en la monografa indivi- nen como objetivo describir tales peligros o medidas de
dual. Los disolventes que se empleen durante los procesos proteccin.
de fabricacin deben ser de calidad adecuada. Asimismo, se 6.20. Procedimientos Automatizados
debe tomar en consideracin la toxicidad y el nivel residual Los procedimientos automatizados y manuales que em-
de cada disolvente y limitar los disolventes conforme a los plean los mismos fundamentos qumicos se consideran equi-
principios definidos y los requisitos especificados en Disol- valentes.
ventes Residuales (467), segn los mtodos generales indica- 6.30. Mtodos y Procedimientos Alternativos y
dos en dicho captulo u otros mtodos adecuados. Armonizados
5.60.30 Impurezas Elementales en Medicamentos y Se pueden usar mtodos y/o procedimientos alternativos
Suplementos Dietticos USP que proporcionen alguna ventaja en cuanto a exactitud,
LNOTA-EI captulo general (232) se public el 1 de junio sensibilidad, precisin, selectividad o adaptabilidad a la au-
de 2012 en el Segundo Suplemento de USP 35-NF 30 y se tomatizacin o a la reduccin de datos computarizados o en
oficializ el 1 de febrero de 2013. El captulo general otras circunstancias especiales. Dichos mtodos y procedi-
(2232) se public el 1 de febrero de 201 3 en el Primer mientos alternativos se deben validar segn se describe en
Suplemento de USP 36-NF 31 y se oficializ el 1 de agosto el captulo general Validacin de Procedimientos Farmacopei-
de 201 3. No obstante, su fecha de aplicabilidad a los artcu- cos (1225) y se debe demostrar que proporcionan resultados
los reconocidos en los compendios USP-NF es el 1 de di- equivalentes o mejores. Solamente aquellos resultados obte-
ciembre de 2015, fecha de oficializacin de esta disposicin nidos por los mtodos y procedimientos suministrados en
de las Advertencias Generales.] los compendios sern concluyentes.
Las impurezas elementales se controlan en los medica- Se recomienda remitir a la USP los procedimientos alter-
mentos oficiales de acuerdo con los principios y requisitos nativos para su evaluacin como reemplazos potenciales o
especificados en el captulo Impurezas Elementales-Lmites para agregarlos a las normas (ver la seccin 4.1 O.
(232). Ver tambin el captulo (232) para informacin rela- Monografws).
cionada con frmacos y excipientes. Los contaminantes ele- En ciertos captulos generales se indica que el texto en
mentales se controlan en los suplementos dietticos oficiales cuestin est armonizado con el texto correspondiente de la
de acuerdo con los principios y requisitos especificados en Farmacopea Europea y/o la Farmacopea japonesa y que estos
Contaminantes Elementales en Suplementos Dietticos (2232). textos son intercambiables. Por ello, si el cumplimiento de
(Oficial a partir del 1 de diciembre de 2015) un requisito de una sustancia o preparacin fuera determi-
5.70. Pruebas de Desempeo nado usando un mtodo intercambiable de una de estas
Cuando las determinaciones de uniformidad de contenido farmacopeas, tambin debera cumplir los requisitos de la
se hayan efectuado usando la misma metodologa analtica USP. Sin embargo, si apareciera una diferencia, o en el caso
especificada en la Valoracin, tomando debida cuenta de las de controversia, slo el resultado obtenido mediante el pro-
diferencias en la preparacin de la muestra, el promedio de cedimiento y/o metodo dado en la USP sera concluyente.
todas las determinaciones individuales de uniformidad de 6.40. Con Respecto a la Sustancia Seca, Anhidra,
contenido puede usarse como el resultado de la Valoracin. Incinerada o Exenta de Disolventes
5.80. Estndares de Referencia USP A menos que se especifique algo diferente, todos los cl-
Los Estndares de Referencia USP son materiales autnti- culos se efectan con respecto a !a sustancia "tal como se
cos que han sido aprobados como adecuados para su uso encuentra".
como estndares de comparacin en las pruebas y valora- Se pueden realizar los procedimientos de las pruebas so-
ciones de la USP o el NF. (Ver Estndares de Referencia USP bre la sustancia sin secar o sin incinerar y calcular los resul-
(11 )). Cuando una prueba o valoracin de los compendios tados con respecto a la sustancia seca, anhidra o incinerada
xviii Advertencias CPnPrnlp\ USP 38

siempre que la monografa indique una prueba para Prdida uancio se indica el ajuste del pH mediante un cido o
por Secado, Determinacin de Agua o f'rdida por l11cineruci11, base y no se indica la concentrac1on, se pueden usar con-
respectivamente. Cuando la presencia de humedad u otro centraciones apropiadas de dicho acido o base.
mntPrinl vnl~ti! puede !nterferir con e! pru\_cdi11icnto, la iY10- 6.50.20.2. Soluciones Reactivo
noqrafa individual especifica que es necesario secar la sus- La ir1furniacin acerca de las Soluciones Reactivo (SR) se
tancia con anterioridad, paso que es obligatorio. encuentra en el apartado Soluciones Reactivo en la. seccin
La expresin "exenta de disolventes" significa que se de- Reactivos, Indicadores y Soluciones de los compendios
ben corregir los clculos por la presencia de disolventes co- USP-NF. El uso de una Solucin Reactivo alternativa o cam-
nocidos, segn se determinan usando los mtodos descritos bios en la Solucin Reactivo utilizada puede requerir de
en Disolventes Residuales (467), a menos que la monografa validacin.
proporcione una prueba de lmite de disolventes residuales. 6.50.20.3. Soluciones Indicadoras
La expresin "previamente secada(o)" sin otro calificativo Cuando se especifica el uso de una SR indicadora en un
significa que la sustancia se debe secar segn se indica en procedimiento, se deben agregar aproximadamente 0,2 mL
Perdida por Secado (731) o Determinacin de Agua (921) (de-
3 gotas de dicha solucin, a menos que se indique algo
terminacin gravimtrica). diferente.
Cuando se indique secar al vaco sobre un desecante, se
debe utilizar un desecador al vaco, una pistola para secado 6.60. Unidades Necesarias para Completar una Prueba
al vaco u otro instrumento apropiado para secado al vaco. A menos que se especifique algo diferente, se debe tomar
un nmero suficiente de unidades para asegurar un resul-
6.40.1 O. Incinerar hasta Peso Constante tado analtico adecuado.
"Incinerar hasta peso constante" significa que deber con-
tinuarse la incineracin a 800 25, a menos que se indique 6.60.1 O. Tabletas
algo diferente, hasta que dos pesadas consecutivas, la se- Cuando en el procedimiento de una monografa de Table-
gunda de las cuales se realiza despus de un periodo adicio- tas se indica pesar y reducir a polvo fino no menos de un
nal acorde con la naturaleza y cantidad del residuo, no difie- cierto nmero de Tabletas, se entiende que se debe pesar y
ran en ms de 0,50 mg por g de sustancia tomada. reducir a polvo un nmero contado de Tabletas. La porcin
tomada de Tab.letas reducidas a polvo debe ~er representa-
6.40.20. Secado hasta Peso Constante tiva del total de Tabletas y pesada con exactitud.
"Secado hasta peso constante" significa que deber conti-
nuarse el secado hasta que dos pesadas consecutivas, la se- 6.60.20. Cpsulas
gunda de las cuales se realiza despus de un periodo adicio- Cuando en el procedimiento de una monografa de Cp-
nal de secado acorde con la naturaleza y cantidad del sulas se indique vaciar, tan completamente como sea posi-
residuo, no difieran en ms de 0,50 mg por g de sustancia ble, el contenido de no menos de cierto nmero de Cpsu-
tomada. las, se entiende que se debe abrir cuidadosamente un
nmero contado de Cpsulas y se debe retirar cuantitativa-
6.50. Preparacin de Soluciones mente, combinar, mezclar y pesar con exactitud el. conte-
6.50. l O. Filtracin nido de las mismas. La porcin tomada del contenido de las
Cuando en un procedimiento se indica "filtrar" sin otro Cpsulas debe ser representativo del contenido total de las
calificativo, el lquido se debe pasar a travs de un papel de Cpsulas y pesado con exactitud.
filtro adecuado o dispositivo equivalente hasta que el fil- 6.70. Reactivos
trado sea transparente. Dados los posibles efectos del filtro, La ejecucin adecuada de las pruebas y valoraciones far-
se pueden desechar los volmenes iniciales del filtrado. macopeicas y la confiabilidad de los resultados dependen,
6.50.20. Soluciones en parte, de la calidad de los reactivos .ublizados en. estos
A menos que se especifique de otro modo, todas las solu- procedimientos. A menos que se espeofrque algo d1f~rente,
ciones deben prepararse con Agua Purificada. Las soluciones se deben usar reactivos que cumplan con lo establecido en
para mediciones cuantitativas deben prepararse us.a_ndo ana- las especificaciones de la edicin vigente de Reagent Chemi-
litos medidos o pesados con exactitud (ver la secc1on 8.20. cals publicada por la American Chemical Society (ACS). .
Aproximadamente). Cuando tales especificaciones no existan o cuando por dis-
Una expresin tal como "(l en 1 O)" significa que 1 parte tintas razones la pureza requerida de un reactivo fuera dife-
en volumen de un lquido debe diluirse con, o que 1 parte rente se suministran especificaciones farmacopeicas de reac-
en peso de un slido debe disolverse en,. rnR co1-ago-2014) una 1
tivos de calidad aceptable (ver la seccin Reactivos,
cantidad suficiente de diluyente o disolvente para que el Indicadores y Soluciones en USP-NF). Los reactivos no trata-
volumen de la solucin final sea de 1 O partes medidas en dos por ninguna de estas especificaciones deben ser de
volumen. Expresiones similares a "(20:5:2)" significan que los grado adecuado para la realizacin del mtodo de valora-
nmeros respectivos de partes, medidas en volumen, .de. los cin o prueba en cuestin. . . .
lquidos sealados deben mezclarse, a menos que se 1nd1que La inclusin en los compendios de estos reactivos, 1nd1ca-
algo diferente. dores y soluciones empleadas como reactivos, no implica
6.50.20.1. Ajuste de Soluciones que tales sustancias tengan utilidad teraputica. Cua.lquier
Cuando un procedimiento exige una concentracin espe- referencia a la USP o el NF en sus etiquetados debe 1nclu1r
cfica, se puede usar una solucin con otra normalidad. o tambin el trmino "reactivo" o "grado reactivo". La USP
molaridad, siempre que se tenga en cuenta la d1ferenc1a en puede proveer reactivos en caso de que no se encuentren
la concentracin y no se aumente el error de la medicin. comercialmente disponibles.
En las pruebas y valoraciones se pueden tomar cantidades 6.80. Equipo . . . ._
proporcionalmente mayores o menores que los espec1f1cados A menos que se indique algo diferente, la espec1f1cac1on
de las sustancias a analizar y los correspondientes Estndares de un tamao o tipo definido de recipiente o de aparato es
de Referencia, siempre y cuando las mediciones resulten con slo una recomendacin. b po~ible usar otras dimensiof'.es
una exactitud equivalente o mejor. . o tipos siempre que sean adecuados para el uso pretendido.
A menos que se indique algo diferente, las concentracio- 6.80.10. Aparatos de Medicin
nes de analitos deben prepararse de modo que queden den- Cuando se indique el uso de matraces volumtricos u
tro del diez por ciento (10%) del valor indicado. En el caso otros dispositivos para medir, pesar o clasificar en forma
particular de que un procedimiento se adapte al intervalo exacta, se deben emplear estos equipos u otros que posean,
de trabajo de un instrumento, las concentraciones de las al menos, una exdctitud equivaienle.
soluciones pueden diferir del valor mdicado en ms de diez
por ciento (1 0%), realizando los cambios apropiados en los 6.80. 1O.1. Pipeta
clculos asociados. Todo cambio realizado debe quedar den- Cuando se especifica el uso de una pipeta, sta se puede
tro del intervalo validado del instrumento. sustituir por una bureta adecuada. Cuando se indica el uso
USP 38 Advertencias Generales x1x

rlP unil pipetil cillibrilda "para contener", sta se puede sus- El valor de informe, que por lo general se obtiene combi-
tituir por u11 111aliaL volumti-ico adecuado. nando valores de varias determinaciones individuales, se
6.80.10.2. Proteccin contra la Luz compara con los criterios de aceptacin. El valor de informe
Luando se indique ci uso de reciienles cor1 roleLur 1 es el resu!tado fina! de un proced!rnient0 (omrlPtn rlP mPrli-
actnica o resistentPs a la lu1, 'iC' pueden utili1ar rC'cipientes cin, segn se ha documentado.
especialmente tratados para proteger el contenido contra la Cuando los criterios de aceptacin se expresan de forma
luz, o recipientes transparentes que se hayan recubierto o numrica en estas Advertencias Generales mediante la espe-
envuelto adecuadamente para volverlos opacos. cificacin de un lmite superior y/o inferior, los valores per-
6.80.20. Instrumentos mitidos incluyen a los valores especificados, pero no los va-
Es posible sustituir el instrumento especificado por otro lores fuera del lmite o lmites. Los criterios de aceptacion se
instrumento siempre que el instrumento sustituto se base en consideran significativos hasta el ltimo dgito sealado.
los mismos principios fundamentales de operacin y tenga 7.10.5. Concentraciones Nominales en Ecuaciones
una sensibilidad y exactitud equivalente o mayor; tales ca- Cuando se especifica una "concentracin nominal", calcu-
ractersticas se deben calificar como apropiadas. Si se men- lar la concentracin basndose en la cantidad declarada en
cionara una marca o un proveedor de un material, un ins- la etiqueta. En los procedimientos de valoracin, la correc-
trumento o una pieza de equipo, o el nombre y la direccin cin por contenido de agua tpicamente se indica en la De-
de un fabricante o distribuidor (por lo general pueden apa- finicin y en la etiqueta del Estndar de Referencia USP. Para
recer como notas al pie de pgina), esta informacin se otros procedimientos, la correccin por contenido y/o po-
brinda slo por conveniencia y no implica aprobacin, aval tencia valorados se realiza antes de usar la concentracion en
o certificacion. la ecuacin provista en la monografa.
6.80.20.1. Columnas y Tubos Cromatogrficos 7.10.10. Equivalencia en Procedimientos Volumtricos
El trmino "dimetro" se refiere al dimetro interno (DI). Las instrucciones de los procedimientos volumtricos con-
6.80.20.2. Otros Tipos de Tubos y Tuberas cluyen con una declaracin de equivalencia entre el peso
El trmino "dimetro" se refiere al dimetro externo (DE). del analito y cada mL de solucin volumtrica normalizada.
En tales equivalencias, se entender que el nmero de cifras
6.80.20.3. Bao de Vapor significativas en la concentracin de la solucin volumtrica
Cuando se indique el uso de un bao de vapor, se usa corresponde al del nmero de cifras significativas en el peso
vapor vivo fluente u otra fuente de calor regulado a una del analito. Siempre que corresponda, se deben hacer co-
temperatura equivalente. rrecciones en todas las valoraciones volumtricas basndose
6.80.20.4. Bao de Agua en la determinacin con un blanco (ver Volumetra (541 )).
A menos que se especifique algo diferente, un bao de 7.20. Reglas para Redondeo
agua requiere agua en ebullicin vigorosa. Los valores observados o calculados deben redondearse al
6.80.30. Dispositivos de Medicin de Temperatura mismo nmero de decimales que el expresado para el l-
Los dispositivos de medicin de temperatura adecuados mite. No deber efectuarse el redondeo antes de concluir
para las pruebas Farmacopeicas cumplen con especificacio- los clculos correspondientes para obtener el valor de in-
nes que son rastreables a un estndar del NIST (Instituto forme. Los clculos intermedios (p.ej., la pendiente de la
Nacional de Normas y Tecnologa de los EE.UU.) o equiva- curva de linealidad) pueden redondearse para propsitos de
lente. Los dispositivos de medicin de temperatura pueden informe, pero si se requiere realizar clculos adicionales se
ser del tipo lquido en vidrio o un tipo de indicador de deben utilizar los valores originales sin redondear. Los crite-
temperatura anlogo o digital, tal como un dispositivo de rios de aceptacin son nmeros fijos y no se redondean.
temperatura con resistencia, termistor o termopar. La estan- Cuando se requiere redondear una cifra, se considera so-
darizacin de termmetros se lleva a cabo en una frecuencia lamente el dgito que se encuentra a la derecha del ltimo
de anlisis establecida con una temperatura estndar rastrea- lugar decimal en la expresin del lmite. Si este dgito es
ble al NIST. Por ejemplo, se puede consultar la edicin vi- menor de 5, se elimina sin cambiar el dgito que lo precede.
gente de las normas El de la ASTM para termmetros de Si este dgito es igual o mayor a 5, se elimina y el dtgito
lquido en vidrio. que lo precede se aumenta en 1.
7. RESULTADOS DE PRUEBAS 8. TRMINOS Y DEFINICIONES
7.1 O. Interpretacin de los Requisitos 8.1 O. Abreviaturas
Los resultados analticos observados en el laboratorio (o ER corresponde a un Estndar de Referencia USP.
los calculados a travs de determinaciones experimentales) SC corresponde a una Solucin Colorimtrica.
se comparan con los criterios de aceptacin especificados SR se refiere a una Solucin Reactivo.
para determinar si el artculo cumple con los requisitos SV corresponde a una Solucin Volumtrica estandari-
farmacopeicos. zada de conformidad con las instrucciones provistas en

t-----------------------
Re uisito Farmaco eico
Limite de valoracin >98,0'l'o
--E-j-em~p~lo~s~d~e~R-e~d~o~n-d~e~o-d~e-V_a_l_o_re_s_N_u_m_=r~ic~o~s~~~-------- -_-Cu~:~ple ---~
para Comparacin con los Requisitos
Valor Sin Redondear
97,96%
Resultado Redondeado
98,0%
-- -

Lmite de valoracion '. I 01,S'i'b


97,92%
97 95%
101,55%
97,9%
98 0%
1 01,6%
S
No
1
101,46% 101.5% S
l~O~l~4=5~%~-----------~1~0~1~5~/c~--------~S~___ -~
Prueba de lmite <0,02% 0,025% 0,03% No
0,015% 0,02% Sr
o 027% o 03% No
Prueba de lmite :.3 ppm 3,5 ppm 4 ppm No
3,4 ppm 3 ppm ~1 __J
2,5 ppm
----- ---------------- _______ s_i__
3 ppm
xx AdVPrtmcias Generales USP 38

la monoqrafa individual o en la seccin Rmrtivos, Indi- Porcentaje peso en peso, para mezclas de slidos y
cadores y Soluciones de USP-NF. semislidos;
8.20. Aproximadamente Porcentaje peso en volumen, para soluciones o suspen-
[I trminu "dfJI uxillld<.idmente indrca una cantidad que siones de siidos en 1lqu1dos;
puede variar dentro del 10%. Porcentaje volumen en volumen, para ~oluciones de l-
Si se especifica una medicin como "medida con exacti- quidos en lquidos; y
tud" o "pesada con exactitud" se deben seguir las especifi- Porcentaje peso en volumen, para soluciones de gases
caciones de los captulos generales Aparatos Volumtricos en lquidos.
(31) y Balanzas ( 41), respectivamente. Por ejemplo, una solucin al 1 por ciento se prepara disol-
8.30. Contenido de Alcohol viendo 1 g de un slido o semislido, o 1 mL de un lquido,
Los porcentajes de alcohol, como los indicados en Conte- en disolvente suficiente para obtener 1 00 mL de solucin.
nido de Alcohol, son porcentajes en volumen de C2HsOH a 8.140. Concentraciones Porcentuales
15,56. Cuando se exige el uso de alcohol, alcohol etlico o Las concentraciones porcentuales se expresan segn se in-
etanol en una frmula, prueba o valoracin, se debe usar el dica a continuacin:
artculo de la monografra Alcohol de la USP. Cuando se hace Porcentaje Peso en Peso (p/p) se define como el nmero
referencia a "C2HsOH", significa etanol absoluto (100 por de g de un soluto en 100 g de solucin.
ciento). Cuando un procedimiento exige alcohol deshidra- Porcentaje Peso en Volumen (p/v) se define como el n-
tado, alcohol absoluto o alcohol anhidro, se debe usar el mero de g de un soluto en 100 mL de solucin.
artculo de la monografa Alcohol Deshidratado de la USP. Porcentaje Volumen en Volumen (v/v) se define como el
8.40. Pesos Atmicos nmero de mL de un soluto en 100 mL de solucin.
Los pesos atmicos usados para calcular pesos molecu- 8.150. Presin
lares y los factores en las valoraciones y en otras partes La presin se determina usando un manmetro o bar-
donde stos aparezcan, son los establecidos por la Commis- metro adecuado, calibrado en trminos de la presin ejer-
sion on Atomic Weights and lsotopic Abundances de la IU- cida por una columna de mercurio de la altura indicada.
PAC (Comisin de Pesos Atmicos y Abundancias Isotpicas 8.160. Tiempo de Reaccin
de la Unin Internacional de Qumica Pura y Aplicada). El tiempo de reaccin es de 5 minutos a menos que se
8.50. Determinaciones con Blancos especifique algo diferente.
Cuando se indique realizar "cualquier correccin necesa- 8.170. Peso Especfico
ria" por medio de una determinacion con un blanco, tal El Peso especfico es el peso de una sustancia en aire a
determinacin debe efectuarse usando las mismas cantida- 25 dividido por el peso de un volumen igual de agua a la
des de los mismos reactivos tratados de la misma manera misma temperatura.
que la solucin o mezcla que contiene la porcin de sustan- 8.180. Temperaturas
cia en anlisis, pero omitiendo dicha sustancia. A menos que se indique algo diferente, las temperaturas
8.60. Concomitantemente se expresan en grados centgrados (Celsius) y todas las me-
El trmino "concomitantemente" indica que las determi- diciones se hacen a 25. Cuando se especifica calor mode-
naciones o mediciones deben efectuarse en sucesin rado, se indica toda temperatura no mayor de 45 (11 3 F).
inmediata. 8.190. Tiempo
8.70. Desecador A menos que se especifique algo diferente, las reglas para
La instruccin "en un desecador" indica el uso de un reci- redondeo, segn se describen en la seccin 7.20. Reglas
piente cerrado hermticamente, de tamao y diseo ade- para Redondeo, se aplican a todos los tiempos especificados.
cuados, que mantiene una atmsfera de bajo contenido de 8.200. Transferir
humedad mediante un desecante adecuado, por ejemplo, El trmino "transferir" indica una manipulacin
cloruro de calcio anhidro, perclorato de magnesio, pent- cuantitativa.
xido de fsforo o gel de slice. Ver tambin la seccion 8.220. 8.21 O. Vaco
Desecador al Vaco. El trmino "al vaco" especifica la exposicin a una pre-
8.80. Logaritmos sin menor de 20 mm de mercurio (2,67 kPas), a menos
Los logaritmos empleados son logaritmos en base 1 O. que se indique algo diferente.
8.90. Cepas Microbianas 8.220. Desecador al Vaco
Cuando se cita e identifica una cepa microbiana por el Un "desecador al vaco" es un desecador que mantiene
nmero de catlogo ATCC, la cepa especfica debe em- una atmsfera de baja humedad a una presion reducida de
plearse directamente o, si se hacen cultivos sucesivos, no no ms de 20 mm de mercurio (2,67 kPas) o a la presin
deben usarse ms de cinco pasajes a partir de la cepa indicada en la monografa individual.
original. 8.230. Agua
8.1 OO. Inapreciable 8.230.1 O. Agua como Ingrediente de un Producto Oficial
El trmino "inapreciable" indica una cantidad que no ex- Cuando aparece como un ingrediente en un producto ofi-
cede de 0,50 mg. cial, el agua cumple con los requisitos de la monografa de
8.11 O. No menos de (NLT) y No ms de (NMT) agua adecuada en la USP o el NF.
Las siglas en ingls "NLT" (not less than) significan y se 8.230.20. Agua en la Fabricacin de Sustancias Oficiales
traducen como "no menos de". Las siglas en ingls "NMT" En la fabricacin de sustancias oficiales, se puede usar
(not more than) significan y se traducen como "no ms agua que cumpla con los requisitos para agua potable
de". (drinking water) establecidos en las reglamentaciones de la
8.120. Olor U.S. Environmental Protection Agency (Agencia de Protec-
Los trminos "inodoro," "prcticamente inodoro," "con cin Ambiental de los Estados Unidos).
un dbil olor caracterstico" y expresiones semejantes, indi- 8.230.30. Agua en un Procedimiento Farmacopeico
can la evaluacin de una cantidad adecuada de material re- Cuando se exige agua en un procedimiento farmaco-
cientemente abierto despus de la exposicin al aire durante peico, se entiende que debe emplearse el artculo Agua Puri-
15 minutos. La asignacion de un olor es slo descriptiva y ficada de la USP, a menos que se especifique algo diferente.
no deber considerarse como una norma de pureza para un Lds definiciones de Agua de Alta Pureza y Agua Exenta de
lote particular de un artculo. Dixido de Carbono se encuentran en Envases-Vidrio (660).
8.130. Por ciento Las definiciones de otros tipos de agua se encuentran en
La expresin "por ciento" usada sin otros calificativos Agua para Uso Farmacutico (1231 ).
significa:
USP 38 Advertencias Generales xx1

8.240. Pesos y Medidas - - - T Unidades Smbolo Comentarios


En general, )e emplea el Si)lerna lrllemacional Je Unida- _----- 1
deul1Lro
1
dl ____j__
~i~o (;l~fv~;:ge~~~ ~a ~~~1i~~:;1~,oeg'~1~~1e d~~ 11p~~d~s~~~111~-su- 1
1

1,
1 ml es-;~-;;; 1 c~1 ',
en ocasiones se deno-
res (Conferencia General de Pesos y Medidas). A los fines de mililitro ml 111lfla ce.
los compendios, el trmino "peso" se considera como sin-
nimo de "masa". r-------+--n_1_ic_r_ol_it_ro__--+------ _}JL ____________ _
La molalidad se representa por medio del smbolo m pre- Tempera-
cedido por un nmero que es el nmero de moles de soluto tura
contenidos en 1 kilogramo de disolvente. Celsius e
La molaridad se representa por medio del smbolo M pre- Cantidad
cedido por un nmero que es el nmero de moles de soluto de Sus-
contenidos en una cantidad de disolvente suficiente para tancia
preparar 1 litro de solucin. Histricamente referido
La normalidad se representa por medio del smbolo N como peso molecular
precedido por un nmero que es el nmero de equivalentes en gramos o peso
de soluto contenidos en una cantidad de disolvente sufi- f--------+~~-----1----
mol mol atmico en aramos
ciente para preparar 1 litro de solucin mili mol mmol
Listado de Smbolos y Prefijos comnmente usados para micromol u mol
unidades mtricas del SI y otras unidades:
femtomol fmol
Tambin referido como
Unidades Smbolo Comentarios
peso equivalente en
Lonaitud gramos. Se usa en el
metro m clculo de concentra-
centmetro cm cin de sustancia en
milmetro mm unidades de normali-
Anteriormente referido dad. Esta unidad ac-
micrmetro um como micrn tualmente ya no
representa la de uso
Anteriormente se usaba
preferido en qumica
el smbolo m (para
euuivalente Ea analtica o metroloaa.
nanmetro nm milimicrn)
mili-
nastriim laual a O 1 nm
equivalen-
Masa te mEq
kiloaramo ka Presin osmtica de
aramo a una solucin, relacio-
miliaramo ma nada con la concen-
El smbolo g se usa en tracin de una
la USP y el NF para re- os mol Osmol suslancia
presentar microgra- miliosmol mOsmol
mos, pero los Presin ____ _ - - - - - - - - - - - ____ __._ _ _ _ _ _ _ _ _ _

microgramos se pue- pascal Pa


den representar como
kilopascal kPa
"mcg" para propsi-
tos de etiquetado y libras por psi
prescripcin. El trmi- pulgada
no "gamma", simboli- cuadrada
~------+--"-=~~~-+------+-----------!

zado por la letra milmetro Igual a 133,322 Pa


griega y, se usa con de mer-
frecuencia para desig- curio mm Hu
nar al microgramo en Unidades
microgra- la literatura de bioqu- elctricas
mo 11n mica. amperio A
nanonramo nn voltio V
- -- - --
niconramo __Jlg___ ~
,. __________ _m_il_iv_o_lt_io_--+___m_V__________________________ _
Tambin referido como hercio Hz Unidad de frecuencia
la unidad de masa kilohercio
f------------ 1 - - - - - - - t - - - -kHz
- - - - r - - - - - _ _ _ _ _ _ _____,
atmica unificada y es
meqahercio MHz
l__-----+--'-"="-'-'-=-"=--+--~~~-t-----------------l
igual a 1/12 veces !a
1 1 electronvol-
1 ma'a de un tomo no
enlazado de carbono- tio eV
dalton Da 12. kiloelec-
[ lronvollio keV
kilodalton kDa
Tiemoo 1 megaelec-

'euundo s ~ ____ -+--"-lr-"o'--'n-'-v_o"'l""ti-"o--+---~M~e~V~-+----------------l


minuto m1n 1 Radiacin 1 ----- -------- -- ------ Unidad del SI p~-ra-1;
hora h 1
actividad de radionu-
Volumen
--n~--~,-
1 1 becquerel10 1 Bq cle1dos
es igual a 1000 kilobecque-
i1' (centmetros c-
L___ _ _ _ _______:_r~e~lio"------'---"k~Ba~--~-------------
lilro ______L _ _L_ cm).
xxii Advertenrim Genemles USP 38

[___=+
1
1 1
Unidades
n1eyduec-
+-~1111!0~ ;-~;;;~~~!_(!s-===J
I 1
que aoarezcan diren;imPntr rnbrr el envase primario de un
cirtculo, ~olne o dentro del empcique o envoltorio, secunda-
1 yuereliu 1 rvrng 1
rio, con excepcin de los embalajes externos destinados
para el uan~p01le. .:I l1111i11u "eliyueld" Jei<:Jlld ci parte dei
9'9""~ GB i
"f
. f
_ gtJ__Cr_c_l(l___
f
Cj____ 1 1 etiquetado que se encuentra sobre el envase primario.
----
-- -
Los embalajes para el transporte que contengan un solo
artculo se etiquetan por lo menos con la identificacin del
1 depoco
ad"'J lo "'""' 1
rad1onucle1dos
producto (excepto los artculos controlados), el nmero de
ue no forma parte
lote, la fecha de caducidad y las condiciones de almacena-
curio C1 del SI
miento y distribucin, salvo que dicho envase sea tambin
milicurio mCi el envase primario o la parte exterior del empaque desti-
microcurio uCi nado al consumidor.
nanocurio nCi Adems de los requisitos de etiquetado establecidos en
Otros estos compendios, los artculos estn sujetos al cumpli-
aceleracin miento de otras normas de etiquetado que puedan promul-
debida a Usada para expresar la gar entidades gubernamentales.
la grave- velocidad de centrifu- 10.40.10. Cantidad de Ingrediente por Unidad de Dosifi-
dad q,, oacin. cacin
revolucio- Usada ara expresar la El contenido de un producto farmacutico se expresa en
nes por velocidad de cenlrifu- la etiqueta del envase en trminos de porcentaje, microgra-
minuto mm aacin. mos, miligramos o gramos del frmaco, o de su parte tera-
puticamente activa, de acuerdo con la forma usada en el
ttulo del artculo, a menos que se indique algo diferente en
la monografa individual. En el etiquetado se indican los
Prefijos Seleccionados del SI
---- ------- ---- nombres y cantidades equivalentes tanto del frmaco como
Nombre Smbolo Factor de su parte activa.
qiqa G 10'' Los artculos oficiales en cpsulas, tabletas u otras unida-
mea a M 106 des de dosificacin debern etiquetarse de forma tal que
kilo k 10 3
expresen la cantidad de cada ingrediente activo o nutriente
reconocido contenido en cada unidad; excepto cuando se
deci d 10 1
trate de soluciones o suspensiones orales envasadas en dosis
centi e 10-2 nicas, ya sea que stas se suministren como preparaciones
mili m 1o l lquidas o preparaciones lquidas reconstituidas a partir de
micro u 1o 6 slidos, por la adicin de un volumen dado de un diluyente
nano n 1o 9 especfico, cuyas etiquetas indicarn la cantidad de cada in-
oico D 1o 12
grediente activo o nutriente reconocido extrable en las con-
diciones indicadas en Volumen de Entrega (698). Para los
femta f 10 1-'
productos farmacuticos oficiales que no se presentan en
unidades de dosificacin se debe expresar en el etiquetado
9. PRESCRIPCIN Y DISPENSACIN la cantidad de ingrediente activo por mililitro o por gramo,
9.10 Uso de Unidades Mtricas o el porcentaje de cada ingrediente (ver 8.140. Concentra-
Las prescripciones de artculos farmacopeicos se escribirn ciones Porcentuales), excepto en el caso de los lquidos ora-
usando unidades mtricas para indicar la cantidad y/o con- les, o los slidos que se reconstituyan para producir lquidos
tenido deseados, a menos que se indique algo diferente en orales, que se pueden etiquetar alternativamente en trmi-
la monografa individual (ver tambin la seccin 5.50.1 O. nos de la cantidad de ingrediente activo por 5 mL del l-
Unidades de Potencia [Biolgica]). Si la prescripcin de una quido o del preparado reconstituido. A menos que se espe-
cantidad se hace en otro sistema de medidas, se debe dis- cifique algo diferente en una monografa o en un captulo,
pensar slo una cantidad equivalente a la prescrita usando tales indicaciones de contenido o cantidad debern decla-
el sistema mtrico. No se deben usar unidades del sistema rarse slo en unidades mtricas. Ver tambin 5.50.1 O. Uni-
apotecario en el etiquetado. dades de Potencia (Biolgica).
9.20 Cambios en Volumen 10.40.20. Uso de Ceros al Comienzo y al Final de una
En la dispensacin de medicaciones prescritas, pueden ob- Cantidad
viarse los pequeos cambios de volumen que se producen Con el fin de minimizar la posibilidad de errores en la
debido a variaciones en la temperatura ambiente. dispensacin y administracin de medicamentos, cuando la
10. CONSERVACIN, ENVASADO, ALMACENAMIENTO Y cantidad de ingrediente activo se exprese en nmeros ente-
ETIQUETADO ros, se debe indicar sin coma decimal seguida de ceros (por
[NOTA-Se han omitido las disposiciones relacionadas con ejemplo, indicar 4 mg [no 4,0 mg]). La cantidad de ingre-
el almacenamiento y envasado previamente tratadas en las diente activo que sea un nmero decimal menor de 1 se
Advertencias Generales, excepto la breve disposicin pro- escribir con un cero antes de la coma decimal (por ejem-
puesta a continuacin en el apartado 10.1 O; para compo- plo: 0,2 mg [no ,2 mg]).
nentes de envasado y condiciones de almacenamiento, ver 10.40.30. Etiquetado de Sales de Frmacos
el nuevo captulo general (659). De manera similar, las dis- Es un principio establecido que los artculos oficiales de-
posiciones relacionadas con el etiquetado tambin estn ben tener un nico ttulo oficial. Con el objeto de ahorrar
siendo trasladadas a un nuevo captulo general (7) y se omi- espacio en las etiquetas, y dado que lm '>mbolm qumicos
tirn en un futuro.] de las sales inorgnicas ms comunes son ronocidos por los
10.10. Envasado y Almacenamiento profesionales de la salud como sinnimos de sus formas es-
Todos los artculos en los compendios USP o NF estn critas, se permiten las siguientes alternativas para el etique-
sujetos a los requisitos de envasado y almacenamiento espe- tado de artculos oficiales que son sales: HCI para clorhi-
cificados en el captulo general Requisitos de Envasado y Al- drato; HBr para bromhidrato; Na para sodio y K para
macenamiento (659), a menos f]Ue se provean requisitos dis- potasio. Los smbolos Na y K se usan para abreviar el nom<
tintos en una monografa especfica. bre de las sales de cidos orgnicos; sin embargo, estos sm-
10.40. Etiquetado bolos no deben usarse cuando se emplea la preposicin
El trmino "etiquetado" se refiere a todas las etiquetas o "de" en el ttulo oficial, es decir cuando se denominan ofi-
marbetes y dems materiales escritos, impresos o grficos cialmente "de sodio" o "de potasio" (con el metal al co-
USP 38 AdVPrtpnrim C.PnPralP\ xxiii

mien_zo d~ la denominacin oficial en ingls), (p.ej., Feno- cuyo etiquetado no se establezcan limitaciones de dosifica-
barb1tal Sod1co, que se denomina Phenobarbital Sodium en cion y que se mantengan estables durante un perodo de no
ingles, se_ p_uede abreviar a fenobarb1tal Na, pero no se de- menos de 3 aos, siempre que se almacenen en las condi-
b~_'rd ('JcnlJr .s{~hcddtG de ~Jd pdd ubr-cv'iJ SJ!ic.i!:ito de So ciones prcscrt3s.
dio, el cual se rlenomina Sorlium Salicylate en ingls). En el caso de artculos oficiales que deban exhibir una
10.40.40. Etiquetado de los Productos con Vitaminas fecha de caducidad, tales art1culos deben dispensarse en un
La etiqueta de los productos farmacuticos oficiales debe envase, o a partir de un envase, etiguetado con fecha de
in~icar su contenido de vitaminas expresado en unidades caducidad, y la fecha de dispensacion del producto debe ser
metncas por unidad de dosificacin. Los contenidos de vita- anterior a la fecha de caducidad declarada. La fecha de ca-
mina A, D y E tambin se pueden expresar en Unidades ducidad identifica el perodo durante el cual se estima que
USP. Las cantidades de vitamina A expresadas en unidades el artculo cumple con los requisitos de la monografa oficial,
mtricas hacen referencia a las cantidades equivalentes de siempre que se conserve en las condiciones de almacena-
retino! (alcohol de vitamina A). La etiqueta de los suplemen- miento prescritas. La fecha de caducidad limita el tiempo
tos nutricionales debe incluir un nmero identificatorio de durante el cual un artculo puede ser dispensado o usado.
lote, de control o de partida. En los casos en que se indica slo el mes y el ao de caduci-
10.40.50. Etiquetado de los Productos Botnicos dad, se entiende que la fecha se refiere al ltimo da del
La etiqueta de una hierba u otro producto botnico desti- mes indicado. La fecha lmite de uso es la fecha despus de
nado para uso como suplemento diettico contiene la le- la cual no se debe utilizar un artculo. Basndose en la infor-
yenda "Si est embarazada o en perodo de lactancia, con- macin provista por el fabricante y las Advertencias Genera-
sulte a un profesional de la salud antes de usar este les, el dispensador debe colocar una fecha lmite de uso
producto". adecuada en la etiqueta del envase del artculo recetado
para limitar el uso del mismo por parte del paciente. La
1~.~0.60. Etiquetado de Preparaciones Parenterales y fecha lmite de uso colocada en la etiqueta no debe ser
Top1cas posterior a la fecha de caducidad del envase del fabricante .
. La etiqueta de una preparacin para uso parenteral o t- Para los artculos que requieran ser reconstituidos antes de
pico debe especificar el nombre de todas las sustancias su uso, se debe colocar en el etiquetado una fecha lmite de
agregadas (ver 5.20. Sustancias Agregadas y ver Etiquetado uso apropiada para el producto reconstituido.
en Inyectables (1 )) y, en caso de preparaciones para uso pa- Para todas las otras formas farmacuticas en las que se
renteral, tambin debe especificar sus cantidades o propor- deba determinar el perodo posterior a la dispensacin du-
ciones, excepto en el caso de sustancias agregadas slo para rante el cual es prudente que un paciente conserve un me-
a1ustar el pH o para lograr isotonicidad, para las cuales dicamento prescrito, el dispensador debe tener en conside-
puede mencionarse simplemente su presencia y la razn por racin, adems de cualquier otro factor relevante: la
la cual se agregan. naturaleza del medicamento; el envase en el que fue enva-
10.40.70. Etiquetado de Electrlitos sado por el fabricante y su fecha de caducidad; las caracte-
La concentracin y dosificacin de electrlitos para tera- rsticas del envase para el paciente, si el artculo se reenvasa
pias de reemplazo (p.ej., cloruro de sodio o cloruro de pota- para su dispensacin; las condiciones de almacenamiento
sio), debe especificarse en la etiqueta en miliequivalentes esperadas o inusuales a las que el artculo puede ser ex-
(mEq). Asimismo, la etiqueta del producto debe indicar la puesto y el perodo estimado para la duracin del trata-
cantidad del ingrediente o ingredientes, expresada en trmi- miento. Considerando todo lo anterior, el dispensador debe
nos de peso o concentracin porcentual. colocar en la etiqueta de un envase de unidades mltiples
10.40.80. Etiquetado de Alcohol una fecha lmite de uso adecuada, a fin de limitar la utiliza-
El contenido de alcohol en una preparacin lquida debe cin del artculo por parte del paciente. A menos que se
especificarse en la etiqueta como porcentaje (v/v) de especifique algo diferente en la monografa individual, o en
C2HsOH. ausencia de datos de estabilidad, esa fecha lmite de uso no
10.40.90. Cpsulas y Tabletas Especiales podr ser posterior a: (a) la fecha de caducidad indicada en
La etiqueta de cualquier Cpsula o Tableta destinada para el envase del fabricante, o (b) un ao a partir del momento
una administracin que no sea la ingestin oral de la unidad en que se dispense el medicamento, lo que represente un
entera, debe llevar una indicacin bien visible sobre el modo perodo menor. Para formas farmacuticas lquidas y slidas
de uso. no estriles que estn envasadas en envases unitarios y de
dosis nica, la fecha lmite de uso debe ser de 1 ao a partir
10.40.100. Fecha de Caducidad y Fecha Lmite de Uso de la fecha de envasado del medicamento en envases unita-
(N. del T. Las expresiones "fecha de caducidad", "fecha rios o de dosis nica, o la fecha de caducidad indicada en el
de expiracin" y "fecha de vencimiento" son equivalentes.) envase del fabricante, lo que represente un perodo menor,
La etiqueta de un producto farmacutico oficial, o de un a menos que los datos de estabilidad o el etiquetado del
suplemento nutricional o diettico oficial, debe llevar una fabricante indiquen algo diferente.
fecha de caducidad. Todos los productos deben exhibir la El dispensador debe mantener las instalaciones donde se
fecha de caducidad de manera tal que pueda ser leda por envasan y almacenan las formas farmacuticas a una tempe-
una persona comn en las condiciones normales de compra ratura cintica media no mayor de 25. El material de pls-
y ~so. La fecha de caducidad debe aparecer en forma pro- tico usado para envasar debe brindar una mejor proteccin
minente, conlraslando claramente con el fondo, o grabada que la que ofrece el cloruro de polivinilo, que no brinda una
en relieve con nitidez, y debe ser fcilmente comprendida adecuada proteccin contra la permeacin de la humedad.
(p.ej., "EXP 6/08," "Exp. junio de 2008", o "Caduca el 6/ Se deben guardar registros de la temperatura del lugar
08"). [NOTA-Para obtener informacin adicional, consultar donde se almacenan las formas farmacuticas y de los mate-
los Voluntary Codes and Guidelines of the Self-Medication ln- riales plsticos usados en el envasado.
dustry de la Consumer Healthcare Products Association.]
. Las monografas para ciertas preparaciones especifican 10.40.100.1. Preparaciones Magistrales
como se debe determinar la fecha de caducidad que apa- La etiqueta del envase o empaque que contiene una pre-
rece en la etiqueta. En ausencia de un requisito especfico paracin magistral oficial debe llevar una fecha lmite de
en la> monografas individuales de un producto farmacu- 11so. La fecha lmite de uso es la fecha despus de la cual no
tico o un suplemento nutricional, la etiqueta debe llevar una debe usarse la preparacin magistral. Debido a que las pre-
fecha de caducidad asignada para dicha formulacin y em- paraciones magistrales estn destinadas a administrarse in-
paque en particular del artculo, con la siguiente excepcin: mediatamente o luego de un perodo de alniacenarniento
no es necesario exhibir la fecha de caducidad en el caso de corto, las fechas lmite de uso pueden determinarse basn-
productos farmacuticos o suplementos nutricionales enva- dose en criterios distintos a los utilizados para determinar las
sados en envases destinados a la venta sin receta mdica, en
xxiv Advertencias Gmerales USP 38

fechas de caducidad de los productos farmacuticos fabrica- rns, se han desarrollado recomendaciones de fecha lmite de
dos en forma industrial. u~o mxima para preparaciones magistrales no estriles en-
La monografa de una preparacin magistral oficial in- vasadas en envases impermeables y resistentes a la luz, al-
rli1yP, rnr lo genera!, un requisito de lmite de u>o que es- ir1ci<..enciJd) d lernperdlura ambiente controiada, a menos
pecifica el perodo desde la fecha de preparacin durante el que se especifique algo diferente (ver Criterios de Estabilidad
cual, en condiciones de almacenamiento adecuadas, se y Determinacin de la Fecha Lmite de Uso en Estabilidad de
puede usar la preparacin. En caso de que no haya datos de Preparaciones Magistrales en el captulo de pruebas generales
estabilidad aplicables a un frmaco y preparacin especfi- Preparacin Magistral-Preparaciones No Estriles (795)).
USP 38 Suplementos Dietticos / N-Acetilglucosamina 6289

Suplementos Dietticos
Monografas Oficiales

[NOTA-Los tiempos de retencin relativos pa_ra N-acetil-


N-Acetilglucosamina glucosamina y glucosamina son 1,0 y aproximada-
mente 2,8, respectivamente.]
nH
Requisitos de aptitud .
Relacin seal-ruido: No menos de 1O para el pico

HO ~ \-OH
de glucosamina, Solucin de aptitud del sis.tema
Resolucin: No menos de 5,q entre lo~ picos de _N-
acetilglucosamina y glucosam1na, Soluc1on de aptitud
HO
del sistema
Factor de asimetra: No ms de 2,0, Solucin
estndar
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%, Solu-
CsH1sN06 221,21 cin estndar
2-(Acetylam ino )-2-deoxy-D-glucose; Anlisis
N-Acetil-o-glucosamina [7512-1 7-6]. Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Calcular el porcentaje de N-acetilglucosamina
DEFINICIN
(C 8 H1sN06) en la porcin de N-Acetilglucosamina
La N-Acetilglucosamina contiene no menos de 98,0% y no tomada:
ms de 102,0% de N-acetilglucosamina (CsH1sN06), cal-
culado con respecto a la sustancia seca. Resultado = (ru! r1) x ( Cs/ Cu) x 100
IDENTIFICACIN
ru = respuesta del pico de la Solucin muestra
A. ABSORCIN EN El INFRARROJO (197K) r5 = respuesta del pico de la Solucin estndar
B, Cumple con los reguisitos de la prueba de Rotacin C5 = concentracin de ER N-Acetilglucosamina USP
Optica, Rotacin Espeofica (781 S). en la Solucin estndar (mg/mL)
C. El tiempo de retencin del pico principal de la Solu- Cu = concentracin de N-Acetilglucosamina en la
cin muestra corresponde al de la Solucin estndar, se- Solucin muestra (mg/mL)
gn se obtienen en la Valoracin. Criterios de aceptacin: 98,0%-102,0% con respecto
VALORACIN
a la sustancia seca
PROCEDIMIENTO IMPUREZAS
Solucin amortiguadora: Transferir 3,5 g de fosfato di- RESIDUO DE INCINERACIN (281 ): No ms de O, 1%
bsico de potasio a un matraz volumtrico de 1 L y CLORUROS y SULFATOS, Cloruros (221 ): No ms de o, 1%
agregar suficiente agua para disolver. Agregar 0,25 mL IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS (233)
de hidrxido de amonio, diluir con agua a volumen y Criterios de aceptacin
mezclar. Ajustar con cido fosfrico a un pH de 7,5. Arsnico: No ms de 1 g/g
Fase mvil: Acetonitrilo y Solucin amortiguadora Plomo: No ms de 1O g/g
(75:25) COMPUESTOS RELACIONADOS
Diluyente: Acetonitrilo y agua (50:50) Solucin amortiguadora, Fase mvil, Diluyente, Solu-
Solucin de aptitud del sistema: 1,0 mg/mL de_ ER N- cin de aptitud del sistema, Sistema cromatogrfico
Acetilglucosamina USP y 0,6 mg/mL de ER Clorhidrato y Aptitud del sistema: Proceder segn se indica en la
de Glucosamina USP en Diluyente Valoracin.
Solucin estndar: 1,0 mg/mL de ER N-Acetilglucosa- Solucin muestra: 2,5 mg/mL de N-Acetilglucosamina
mina USP en Diluyente en Diluyente
Solucin muestra: 1,0 mg/mL de N-Acetilglucosamina Anlisis
en Diluyente Muestra: Solucin muestra
Sistema cromatogrfico Calcular el porcentaje de cada impureza en la porcin
(Ver Cromatografa (621 ), Aptitud del Sistema.) de N-Acetilglucosamina tomada:
Modo: HPLC
Detector: UV 195 nm Resultado= (rulr1) x 100
Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L8 de 3 m
Temperatura de la columna: 35 ru = respuesta del pico de cada impureza de la
Velocidad de flujo: 1,5 ml/min Solucin muestra
Volumen de inyeccin: 1 O L rr - suma de las respuestas de los picos de IJ
Aptitud del Sistema Solucin muestra
Muestras: Solucin de aptitud del sistema y Solucin
estndar
6290 N-.1\cetilglucosamina / Suplementos Dieteticos USP 38

Criterios de aceptacin DEFINICIN


Impureza individual: No ms de 0,5% La N-Acetiltirosina contiene no menos de 98,5% y no ms
. Impurezas totales: No ms de 2,0% df' 101.0% dP N-ilrPtiltirminil ((' .H.,NO.) rnmn l\/_:in>til_
LIMITE DE GLUCOSAMINA L-tirosina, calculado con respecto a la sust~n~ia ~~c~. _.,_, ..
Solucin amortiguadora, Fase mvil, Diluyente, Solu-
cin de aptitud del sistema, Sistema cromatogrfico IDENTIFICACIN
y Aptitud del sistema: Proceder segn se indica en la A. ABSORCJN,EN EL INFRARROJO (l 97K)
Valoracin. B. ROTACION OPTICA, Rotacin Especfica (781 S)
Solucin estndar: 0,6 mg/ml de ER Clorhidrato de Solucin muestra: 1 O mg/ml
Glucosamina USP en Diluyente Criterios de aceptacin: No menos de +46,0 y no
Solucin muestra: 50 mg/ml de N-Acetilglucosamina ms de +49,0, determinada a 20
en Diluyente C. El valor Rr de la mancha principal de la Solucin mues-
Anlisis tra en la prueba de Impurezas Orgnicas corresponde al
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra de la Solucin estndar 1.
Calcular el porcentaje de glucosamina en la porcin de
VALORACIN
N-Acetilglucosamina tomada:
PROCEDIMIENTO
Resultado= (ru/r,) x (C/Cu) x (M1/M2) x 100 Solucin muestra: Disolver aproximadamente 180 mg
de N-Acetiltirosina, pesada, en 50 ml de agua exenta
ru = respuesta del pico de glucosamina de la de dixido de carbono.
Solucin muestra Sistema volumtrico
= respuesta del pico de glucosamina de la (Ver Volumetra (541 ).)
Solucin estndar Modo: Valoracin directa
= concentracin de ER Clorhidrato de Solucin volumtrica: Hidrxido de sodio O, 1 N SV
Glucosamina USP en la Solucin estndar Deteccin del punto final: Potenciomtrica
(mg/ml) Equivalencia: Cada ml de hidrxido de sodio O, 1 N
Cu = concentracin de N-Acetilglucosamina en la SV equivale a 22,32 mg de N-acetiltirosina
Solucin muestra (mg/ml) (C,, H13N4).
= peso molecular de glucosamina, 179,17
= peso molecular de clorhidrato de glucosamina, IMPUREZAS
215,63 RESIDUO DE INCINERACIN (281): No ms de 0,1%
Criterios de aceptacin: No ms de 1,0% CLORUROS y SULFATOS, Cloruros (221)
Muestra: 0,7 g
PRUEBAS ESPECFICAS Estndar: 0,40 ml de cido clorhdrico 0,01 N
ROTACIN PTICA, Rotacin Especfica (781 S) Criterios de aceptacin: No ms de 200 ppm
Solucin muestra: 20 mg/ml en agua; realizar la medi- CLORUROS y SULFATOS, Sulfatos (221)
cin 3 horas despus de la preparacin de la muestra. Muestra: 1,2 g
P~r~~e;~)s de aceptacin: +39,0 a +43,0 Estndar: 0,25 ml de cido sulfrico 0,020 N
Criterios de aceptacin: No ms de 200 ppm
Solucin muestra: 1 O mg/ml en agua HIERRO (241 ): No ms de 20 ppm
<;:riterios de aceptacin: 6,0-8,0
PERDIDA POR SECADO (731) Eliminar lo siguiente:
Anlisis: Secar una muestra a 105 durante 2 horas.
Criterios de aceptacin: No ms de 0,5% . METALES PESADOS, Mtodo 7 (231): No ms de
INTERVALO O TEMPERATURA DE FUSION (741): l 96-205
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- 1 O ppme (Oficial oi-dic-2015)
IMPUREZAS 0RGANICAS
tal de microorganismos aerobios no excede de 10 3 ufc/g Adsorbente: Capa de mezcla de gel de slice para cro-
y el recuento total combinado de hongos filamentosos y mato9rafa de 0,25 mm
levaduras no excede de 103 ufc/g. , Solucion madre del estndar 1: 8 mg/ml de ER N-
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum- Acetil-L-tirosina USP en una mezcla de agua, cido ac-
ple co~ los requisitos de las pruebas para determinar la tico glacial y alcohol (3:3:94)
ausencia de Salmonel/a spp. y Escherichia coli. Solucin estndar 1: Diluir Solucin madre del estndar
REQUISITOS ADICIONALES 7 con alcohol hasta obtener una solucin con una con-
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im- centracin conocida de aproximadamente 0,4 mg/ml .
pe~meables y resistentes a la luz. Solucin estndar 2: 0,8 mg/ml de ER L-Tirosina USP
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) disuelta en una mezcla de cido actico glacial y agua
ER N-Acetilglucosamina USP (1: 1 ), y diluida con alcohol
ER Clorhidrato de Glucosamina USP Solucin muestra: Transferir 0,8 g de N-Acetiltirosina a
un matraz volumtrico de 1 O ml, disolver en 6 ml de
una mezcla de cido actico glacial y agua (1 :1 ), y di-
luir con alcohol a volumen.
Volumen de aplicacin: 5 pl
Fase mvil: Una mezcla de amonaco y 2-propanol
N-Acetiltirosina (3:7)
Solucin reveladora: Disolver 0,2 g de ninhidrina en
100 ml de una mezcla de butano! y cido actico 2 N
(95:5).
Anlisis: Proceder segn se indica en Cromatografa
(621 ), Cromatografa en Capa Delgada. Despues de secar
la placa al aire, repetir e! proceso de desarrollo. Despus
de secar al aire por segunda vez, observar la placa bajo
C11HllNQ4 223,2 luz UV de longitud de onda corta y registrar las man-
fY-Acetyl-L -tyrosine; chas principales y secundarias. Rociar la placa con Solu-
Acido (2S)-2-(acetilamino )-3-( 4-hidroxifenil)propanoico cin reveladora y calentar a una temperatura entre 1 00'
(537-55-3]. y 1 05' durante aproximadamente 15 minutos. Observar
USP 38 ~wpiementos U1etet1cos ! Adenosil 629 1

la placa baio luz blanca v reqistrar las manchas princi- Solucin muestra: 20 rng de Disulfato Tosilato de S-
pales y secundarias. Adenosil-L-metionina en 40 ml de agua. Mezclar du-
Criterios de aceptacin: Bajo luL UV de lonqitud de rante 30 minutos, lueqo diluir rnn aqua hasta 50,0 ml.
onda corta, ninguna mancha secundaria observada de Transferir 1,0 ml de la solucin a un -tubo de microcen-
la Solucin munlra es de mayor tamao o intensidad trfuga de 1,5 mL y centrifugar durante 1 minuto. Usar
que la mancha principal de la Solucin estndar 7. Des- una porcin del sobrenadante.
pus de aplicar la Solucin reveladora bajo luz blanca, Sistema cromato9rfico
ninguna mancha secundaria en el sitio de tirosina de la (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
Solucin muestra es de mayor tama1o o intensidad que Modo: HPLC
la mancha principal de la Solucin estndar 2. Detector: UV 260 nm
Impurezas individuales: No ms de 0,5% Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L1 de 3 pm
Lmite de tirosina: No ms de 1,0% Velocidad de flujo: 1 ml/min
Volumen de inyeccin: 1 O ~tl
PRUEBAS ESPECFICAS Aptitud del sistema
PRDIDA POR SECADO (731) Muestras: Solucin de aptitud del sistema y Solucin es-
Anlisis: Secar una muestra a 105 durante 3 horas. tndar B
Criterios de aceptacin: No ms de O, 1% [NOTA-Los tiempos de retencin relativos para S-ade-
nosil-L-homocistena y S-adenosil-L-metionina son apro-
REQUISITOS ADICIONALES
ximadamente 0,68 y 1,0, respectivamente.]
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
Requisitos de aptitud
cer,rados. Almacenar a temperatura ambiente controlada. Resolucin: No menos de 1,5 entre S-adenosil-L-ho-
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) mocistena y S-adenosil-L-metionina
ER N-Acetil-L-tirosina USP
Factor de asimetra: No ms de 1,5, Solucin estn-
ER L-Tirosina USP
dar B
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
S-adenosil-L-homocistena, Solucin estndar B
Anlisis
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B, So-
Disulfato Tosilato de S-Adenosil-L- lucin estndar C y Solucin muestra
metionina [NOTA-Registrar los cromatogramas y medir el rea
Ttulo anterior: Disulfato Tosilato de Ademetionina del pico de S-adenosil-L-homocistena en las tres Solu-
ciones estndar y el pico de S-adenosil-L-metionina en
la Solucin muestra.]
Graficar una curva de calibracin del rea del pico de
1 11,\1)1
las Soluciones estndar en funcin de la concentracin
HO
correspondiente de S-adenosil-L-homocistena, en
mg/ml, y trazar la recta que mejor se ajuste a los tres
puntos. A partir de la curva de calibracin y usando
C22Hi4N6016S4 766,80 el rea del pico de S-adenosil-L-metionina del croma-
S-(Adenosyl)-L-methionine disulfate tosylate; tograma de la Solucin muestra, determinar la con-
Disulfato-metilbencenosulfonato de (3S)-5'-((3-amino-3-car- centracin, C, en mg/ml, de S-adenosil-L-metionina
boxipropil)metilsulfonio ]-5' -desoxiadenosina (9 7 540-22-2]. como S-adenosil-L-homocistena en la Solucin
DEFINICIN muestra.
El Disulfato Tosilato de S-Adenosil-L-metionina es la sal mixta Calcular el porcentaje de C1sH23N60sS+ en la porcin
de disulfato-tosilato de una mezcla de diastereoismeros de S-Adenosil-L-metionina tomada:
del in de S-adenosil-L-metionina. Contiene no menos de Resultado = (C/Cu) x (M,i/M,2) x 100
95,0% y no ms de 1 05,0% de disulfato tosilato de S-
adenosil-L-metionina (C22H 34N6016S4) calculado con el C = concentracin de S-adenosil-L-metionina como
contenido de S-adenosil-L-metionina (C1sHnN60sS+) calcu- S-adenosil-L-homocistena obtenida a partir
lado con respecto a la sustancia anhidra. de la lnea de regresin lineal (mg/ml)
IDENTIFICACIN Cu = concentracin de Disulfato Tosilato de 5-
A. ABSORCIN EN EL INFRARROJO (197K) Adenosil-L-metionina en la Solucin muestra
B. El tiempo de retencin del pico principal de la Solu- (mg/ml)
cin muestra corresponde al de S-adenosil-L-metionina en M 1 = peso molecular de 5-adenosil-L-metionina,
la Solucin de aptitud del sistema, segn se obtienen en 399,44
Contenido de S-Adenosil-L-metionina.
M = peso molecular de S-adenosil+homocistena,
384,41
COMPOSICIN Criterios de aceptacin: 49,5%-54,7% con respecto a
CONTENIDO DE S-ADENOSIL-L-METIONINA la sustancia anhidra, equivalente a 95,0%-105,0% de
Solucin A: 1O ml de cido actico glacial en 500 ml disulfato tosilato de 5-adenosil-L-rnetionina con respecto
de agua. Agregar 2,06 g de 1-hexanosulfonato de sodio a la sustancia anhidra
y diluir con agua hasta 1000 ml. CONTENIDO DE SULFATO
Fase mvil: Acetonitrilo y Solucin A (15:85) Fase mvil: Carbonato de sodio 8,0 mM y bicarbonato
Solucin de aptitud del sistema: 400 pg/ml de ER Di- de sodio 1,0 mM en agua
sulfato Tosilato de S-Adenosil-L-metionina USP y de ER Solucin estndar: O, 18 mg/ml de sulfato de potasio
S-Adenosil-L-homocistena USP Solucin muestra: 0,5 mg/ml de Disulfato Tosilato de
Solucin estndar A: 400 ~tg/ml de ER S-Adenosil-L-ho- S-Adenosil-L-metionina
mocistena USP Sistema cromato9rfico
Solucin estndar B: 200 pg/ml a partir de Solucin (Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.)
estndar A Modo: HPLC
Solucin estndar C: 80 pg/ml a partir de Solucin es- Detector: Detector inico con conductividad
tndar A suprimida
6292 Adenosil I '\11pl1?11wnt<)<, Dietliws USP 38

Columna: 4,0 mm ;< 25 cm; relleno L74 de 7 m i"" = rea) Je lo) pie.os c.orre)po11dientes al ismero
Temperatura de la columna: 30' S.S en la Solucin muestra
Velocidad de flujo: 1 ml/min r" = reas de los picos correspondientes al ismero
Volumen de inyeccion: l':J L R, S de la Slucin mues'tra
Aptitud del sistema Criterios de aceptacin: No menos de 60'fo y no me-
Muestra: Solucin estndar nos de la cantidad declarada del ismero S, S
Requisitos de aptitud
Eficiencia de la columna: No menos de 8200 platos REQUISITOS ADICIONALES
tericos ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im-
Factor de asimetra: No ms de 1,5 permeables y resistentes a la luz. Almacenar en un
Desviacin estndar relativa: No ms de 1,0% refrigerador.
Anlisis ETIQUETADO: Etiquetar indicando el contenido mnimo de
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra isr;nero S,S, como porcentaje.
[NOTA-Medir el rea del pico de sulfato.] ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
Calcular el porcentaje de sulfato (504) en la porcin de ER Disulfato Tosilato de S-Adenosil-L-metionina USP
Disulfato Tosilato de S-Adenosil-L-metionina tomada: ER S-Adenosil-L-homocistena USP

Resultado = (ru/rj) x (Cs/Cu) x 1 00


ru = respuesta del pico de sulfato de la Solucin
muestra Agnocasto
rs = respuesta del pico de sulfato de la Solucin
estndar DEFINICIN
Cs = concentracin de sulfato (504) en la Solucin El Agnocasto consiste en los frutos maduros y secos de Vitex
estndar (mg/ml) agnus-castus L. (Fam. Verbenaceae). Contiene no menos
Cu = concentracin de Disulfato Tosilato de S- de 0,05% de agnsido y no menos de 0,08% de casti-
Adenosil-l -metionina en la Solucin muestra cina, calculado con respecto a la materia seca.
(mg/ml)
Criterios de aceptacin: 23,5%-26,5% IDENTIFICACIN
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
IMPUREZAS DELGADA
Solucin estndar: 1 00 mg de ER Extracto en Polvo de
Eliminar lo siguiente: Agnocasto USP en 1 ml de metano!. Calentar en un
bao de agua a 60 durante 1 O minutos. Centrifugar y
METALES PESADOS, Mtodo I (231): No ms de usar el sobrenadante transparente .
20 ppme (Oficial Ol-dic-2015)
Solucin muestra: Transferir aproximadamente 1 g del
material vegetal en polvo a un tubo de centrfuga con
PRUEBAS ESPECFICAS tapa de rosca. Agregar 1 O ml de metano!, calentar en
PH (791 ): 11 0-2,0, en una solucin acuosa (1 en 20) un bao de agua a 60 durante 10-15 minutos, enfriar
DETERMINACION DE AGUA, Mtodo la (921): No ms de y filtrar .
3,0% Adsorbente: Gel de slice para cromatografa con un
RELACIN ISOMRICA tamao promedio de part1cula de 1 0-15 m (placas
Solucin amortiguadora: Transferir 4,2 g de cido c- para TLC)
trico monohidrato y 2,03 g de fosfato dicido de sodio Volumen de aplicacin: 90 L, Solucin estndar;
dihidrato a un matraz volumtrico de 1 L, disolver, y 60 L, Solucin muestra; en bandas de 2 cm de longitud
diluir con agua a volumen. Fase mvil: Acetato de etilo, metano! y agua (77:15:8)
Fase mvil: 4,0 g de dodecil sulfato de sodio y 440 ml Solucin reveladora: 1 O mg/ml de p-dimetilaminoben-
de acetonitrilo. Diluir con Solucin amortiguadora hasta zaldehdo en cido clorhdrico 1 N
1 L. Anlisis
Solucin estndar: 1,0 mg/ml de ER Disulfato Tosilato Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
de S-Adenosil-L-metionina USP Desarrollar hasta una longitud de no menos de 12 cm
Solucin muestra: 1,0 mg/ml de Disulfato Tosilato de y secar la placa en una corriente de aire. Rociar la
S-Adenosil-L-metionina placa con Solucin reveladora y calentar durante 1 O
Sistema cromato9rfico minutos a 120''.
(Ver Cromatografla (621 ), Aptitud del Sistema.) Criterios de aceptacin: La Solucin muestra presenta
Modo: HPLC lo siguiente: una zona azul (a un valor RF de aproxima-
Detector: UV 254 nm damente 0,21) debida a la presencia de aucubina y que
Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m corresponde en color y valor R1 a una zona similar de la
Velocidad de flujo: 1,2 ml/min Solucin estndar; una zona azul (a un valor Rr de apro-
Volumen de inyeccin: 20 L ximadamente 0,44) como resultado de la presencia de
Aptitud del sistema agnsido que corresponde en color y valor R1 a una
Muestra: Solucin estndar zona similar de la Solucin estndar; y una zona ancha,
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos para el is- color violeta en el medio, que est cerca del frente de
mero R,S e ismero S,S son aproximadamente 0,94 y la fase mvil y que corresponde en color y valor Rr a
1,0, respectivamente.] una zona similar de la Solucin estndar. Se pueden ob-
Requisitos de aptitud servar otras zonas de color de intensidades variables en
Resolucin: No menos de 1,0 entre el ismero S,S y la Solucin muestra.
el ismero R,S B. En la prueba de Contenido de Casticina, el cromato-
Anlisis grama de la Solucin muestra presenta un pico en el
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra tiempo de retencin correspondiente al del pico de casti-
Identificar los picos de los ismeros S,S y R,S en la cina en el cromatograma de la Solucin estndar.
Solucin muestra por comparacin con la Solucin es-
tndar, y calcular el porcentaje del ismero S,S:
Resultado = [rss/(rss + rRs)] x 1 00
USP 38 Suplementos Dietticos / Agnocasto 6293

COMPOSICIN ExtraPr rlos veces con 40 ml de metano!, usando un


CONTENIDO DE CASTICINA homoyeneizador manual a 19 000 rpm durante 2 mi-
Solucin estndar: Aproximadamente 0,05 mg/ml de nutos. Centrifugar y transferir cada sobrenadante a un
ER Caslicina USP e11 mela11oi, co11 ullraso11iuo. Pa;ar a 111al1aL Je fondo redondo de 250 mL. Enjuagar el resi-
travs de un filtro de membrana de celulosa con un duo con metano! y filtrar la solucin resultante en el
tamao de poro de 0,45 ~tm o menor. matraz. Evaporar el extracto combinado hasta sequedad
Solucin muestra: Colocar aproximadamente 1 000 mg y disolver el residuo en 2 ml de Disolvente. Transferir
del material vegetal molido en un recipiente con tapn. cuantitativamente la solucin a un cartucho de extrac-
Extraer dos veces con 40 ml de metano!, usando un cin de fase slida relleno con xido de aluminio neu-
homogeneizador manual a 19 000 rpm durante 2 mi- tro acondicionado previamente con 5 ml de Disolvente.
nutos. Filtrar cada sobrenadante y transferir a un matraz Conectar el cartucho a una presin de vaco que no
de fondo redondo de 250 ml. Enjuagar el residuo con exceda de 300 mbar y recoger el eluato. Enjuagar el
metanol y filtrar la solucin resultante en el matraz. Eva- matraz de fondo redondo con 2 ml de Disolvente, pasar
porar el extracto combinado hasta sequedad. Disolver esta solucin a travs del cartucho, aplicar el vaco y
el residuo en metano!, transferir cuantitativamente a un recoger el eluato. Enjuagar el cartucho con 4 ml de Di-
matraz volumtrico de 20 ml y diluir con metano! a solvente y recoger el eluato. Combinar los eluatos del
volumen. Pasar a travs de un filtro de membrana de cartucho, transferir a un matraz volumtrico de 1 O ml y
celulosa con un tamao de poro de 0,45 m o menor. diluir con Disolvente a volumen.
Solucin A: Metano! Solucin A: Acetonitrilo
Solucin B: 5,88 g/L de cido fosfrico en agua Solucin B: 5,88 g/L de cido fosfrico en agua
Fase mvil: Ver la Tabla 7. Fase mvil: Ver la Tabla 2.

Tabla 1 Tabla 2
Tiempo Solucin A Solucin B Tiempo Solucin A Solucin B
(min) (%) (%) Cmin) (%) (%)
o 50 50 o 7 93 -----
o 50 50 06 10 90
13 65 35 5 10 90
18 100 o 7 14 86
23 50 50 13 15 85
13 1 100 o
Sistema cromato9rfico
(Ver Cromatograf/O (621 ), Aptitud del Sistema.) 18 100 o
Modo: HPLC 18 1 7 93
Detector: UV 348 nm 23 7 93
Columna: 3, 1 mm x 12,5 cm; relleno L1 de 5 m
Temperatura de la columna: 25 Sistema cromato9rfico
Velocidad de flujo: 1 ml/min (Ver Cromatografta (621 ), Aptitud del Sistema.)
Volumen de inyeccin: 1 O L Modo: HPLC
Aptitud del sistema Detector: UV 258 nm
Muestra: Solucin estndar Columna: 3, 1 mm x 12,5 cm; relleno L1 de 5 ~lm
Requisitos de aptitud Temperatura de la columna: 25~
Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de Velocidad de flujo: 1,3 ml/min
casticina Volumen de inyeccin: 1 O L
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para Aptitud del sistema
el pico de casticina en inyecciones repetidas Muestra: Solucin estndar
Anlisis Requisitos de aptitud
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de
Calcular el porcentaje de casticina en la porcin de agnsido
Agnocasto tomada: Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
el pico de agnsido en inyecciones repetidas
Resultado= (ru/rs) x (Cs/Cu) x 100 Anlisis
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
ru = respuesta del pico de casticina de la Solucin Calcular el porcentaje de agnsido en la porcin de
muestra Agnocasto tomada:
rs = respuesta del pico de casticina de la Solucin
estndar Resultado= (ru/rs) x (CdCu) x 100
C ~
concentracin de ER Casticina USP en la
Solucin estndar (mg/ml) ru = respuesta del pico de agnsido de la Solucin
Cu = concentracin de Agnocasto en la Solucin muestra
muestra (mg/ml) rs = respuesta del pico de agnsido de la Solucin
Criterios de aceptacion: No menos de 0,08% de casti- estndar
cina con respect9 a la materia seca Cs = concentracin de ER Agnsido USP en la
CONTENIDO DE AGNOSIDO Solucion estndar (mg/ml)
Disolvente: Metano! y agua (1: 19) C = concentracin de Agnocasto en la Solucin
Solucin estndar: Disolver una cantidad de ER Agn- muestra (mg/ml)
sido USP en Disolvente, con ultrasonido. Diluir con me- Criterios de aceptacion: No menos de 0,05% de ag-
tano! hasta obtener una concentracin de aproximada- nsido con respecto a la materia seca
mente O, 125 mg/ml. Pasar a travs de un filtro de CONTAMINANTES
membrana de celulosa con un tamao de poro de 0,45 METALES PESADOS, Mtodo 111 (231): No ms de 20 ppm
m o menor. ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Mtodo General para An-
Solucin muestra: Colocar aproximadamente 1000 mg lisis de Residuos de Plaguicidas (561): Cumple con los
del material vegetal molido en un recipiente con tapn. requisitos.
6294 Agnocasto / 'luplPmPnto<; Diellilo' USP 38

PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021): E! recuento to-


tal de microorganismos aerobios no excede de 10 6 ufc/g,
el recuento total combinado de hongos filamentosos y Agnocasto en Polvo
levctdur d\ 110 exude de 1 " ufc;g, iei recuento de ente-
robJctcriJs no excede de 101 ufc/g. DEFINICIN
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cum- El Agnocasto en Polvo es Agnocasto reducido a polvo o a
ple con los requisitos de las pruebas para determinar la polvo muy fino. Contiene no menos de 0,05% de agn-
ausencia de Salmonella spp. y Escherichia coli. s1do y no menos de 0,08% de casticina, calculados con
respecto a la materia seca.
PRUEBAS ESPECFICAS
CARACTERSTICAS BOTNICAS IDENTIFICACIN
Macroscpicas: Los frutos maduros del Agnocasto son A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
de forma esfrica a ovoide, con un dimetro de DELGADA
2-4 mm, muy duros y generalmente con un pedicelo Solucin estndar: 100 mg de ER Extracto en Polvo de
corto. EJ fruto es de color marrn rojizo a negro, ligera- Agnocasto USP en 1 mL de metano/. Calentar en un
mente aspero y cubierto de pelos glandulares. Presenta bao de agua a 60'' durante 1 O minutos. Centrifugar y
cuatr() estras, ,perpendiculares entre s, y una ligera de- usar el sobrenadante transparente.
pres1on en el apice que resulta ms evidente en los fru- Solucin muestra: Transferir aproximadamente 1 g de
tos de mayor tamao. El interior del fruto es de color Agnocasto en Polvo a un tubo de centrfuga con tapa
amarillento .. La_ estructura interna del fruto incluye cua- de rosca. Agregar 1 O mL de metano/, calentar en un
tro compart1m1entos, cada uno de ellos conteniendo bao de agua a 60 durante 10-15 minutos enfriar y
una semilla ob!S>nga de alto contenido graso. Los frutos filtrar. '
maduros tamb1en pueden estar acompaados de un Adsorbente: Gel de slice para cromatografa con un
grupo de hasta seis frutos inmaduros, esponjosos y de tamao promedio de part1cula de 1 0-15 m (placas
color tostado claro. A menudo el fruto est cubierto de para TLC)
un cliz tubular, persistente, finamente tomentoso y de Volumen de aplicacin: 90 L, Solucin estndar;
color gris verdoso que posee cinco dientes. 60 ~tL, Solucin muestra; en bandas de 2 cm de longitud
Mi~roscpicas: El exocarpo es estrecho y de color ma- Fase mvil: Acetato de etilo, metano/ y agua (77:15:8)
rran; consta de clulas parenquimticas de paredes del- Solucin reveladora: 1 O mg/mL de p-dimetilaminoben-
gadas y clulas parcialmente lignificadas con numerosos zaldehdo en cido clorhdrico 1 N
engrosamientos punteados en el interior. Visto desde la Anlisis
sup_erficie, el exocarpo muestra una epidermis de clulas Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
poligonales con engrosamientos irregulares y pelos Desarrollar hasta una longitud de no menos de 12 cm
glandulares, c51da uno de ellos con un pedicelo corto, y secar la placa en una corriente de aire. Rociar la
de una sola celula, y una cabeza de cuatro clulas que placa con Solucin reveladora y calentar durante 1O
contienen aceite esencial. El mesocarpo externo consta minutos a 120.
de varias capas de clulas parenquimticas isodiamtri- Criterio_s de aceptacin: La Solucin muestra presenta
cas de color marrn. El mesocarpo interno posee clulas lo s1gu1ente: una zona azul (a un valor Rr de aproxima-
esclerenquimticas finamente punteadas; algunas de damente 0,21) debida a la presencia de aucubina y que
ellas de paredes moderadamente engrosadas y otras corresponde en color y valor R1 a una zona similar de la
formadas por clulas ptreas isodiamtricas con un pe- S?lucin estndar; una zona azul (a un valor R1 de apro-
queo lumen. El endocarpo est formado por una capa ximadamente 0,44) como resultado de la presencia de
de pequeas esclereidas de color marrn. Las semillas agnsido que corresponde en color y valor R1 a una
son pequeas y presentan grandes cotiledones rodea- zona similar de la Solucin estndar; y una zona ancha,
dos por grandes clulas parenquimticas de paredes de color violeta en el medio, que est cerca del frente
d~l_gadas con, engrosamientos acostillados. El tejido nu- de la fase mvil y que corresponde en color y valor Rr a
tritivo y las celulas germinales contienen granos de una zona similar de la Solucin estndar. Se pueden ob-
aleurona y glbulos de aceite. El almidn est ausente. servar otras zonas de color de intensidades variables en
La epidermis externa del cliz est compuesta por clu- la Solucin muestra.
las poligonales cubiertas por abundantes tricomas cur- B. En la prueba de Contenido de Casticina, el cromato-
vados unicelulares o multicelulares. La epidermis interna grama de la Solucin muestra presenta un pico en el
del cliz es glabra y est compuesta por clulas rectan- tiempo de retencin correspondiente al pico de casticina
gylares y alargadas con ,paredes ligeramente onduladas . en el cromatograma de la Solucin estndar.
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Materia Orgnica Extraa
COMPOSICIN
(?61/: No ms de 3,0% CONTENIDO DE CASTICINA
PERDIDA POR SECADO (731 ): Secar 1 g a 1 05 durante 2
Solucin_ estndar: Aproximadamente 0,05 mg/mL de
hor,as: pierde no ms de) 0,0% de su peso. ER Cast1cina USP en metano/, sometiendo a ultrasonido .
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Totales (561):
Pasar a travs de un filtro de membrana de celulosa con
No ms de 8,0% un tamao de poro de 0,45 m o menor .
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Insolubles en cido
Solucin muestra: Colocar aproximadamente 1000 mg
(561/: No ms de 2,0% de Agnocasto en Polvo en un recipiente con tapn. Ex-
REQUISITOS ADICIONALES traer dos veces con 40 mL de metano/, usando un ho-
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien moge_neizador manual a 9 000 rpm durante 2 minu-
cerrados. Almacenar a temperatura ambiente controlada. tos. Filtrar cada sobrenadante y transferir a un matraz
ETIQUETADO: La etiqueta declara el nombre cientfico en de fondo redondo de 250 ml. Enjuagar el residuo con
latn y, despus de la denominacin oficial, la parte de la metano/ y filtrar la solucin resultante en el matraz. Eva-
pla,nta contenida en el artculo. porar los extractos combinados hasta sequedad. Disol-
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) ver el residuo en metano/, transferir cuantitativamente a
ER Agnsido USP un matraz volumtrico de 20 mL y diluir con metano/ a
ER Casticina USP volumen P;i~ar ri trrivP~ de 11n filtro de membrana de
ER Extracto en Polvo de Agnocasto USP celulosa con un tamano de poro de 0,45 m o menor.
USP 38 Suplementos Dietticos / Agnocasto 6295

Solucin A: Metanol Solucin A: Acetonitrilo


Solucin B: 5,88 g/L de cido fosfricu en dlJUd Solucin B: 5,88 g/L de cido fmfrico en agua
Fase mvil: Ver la Tabla l. Fase mvil: Ver la Tabla 2.

Tabla 1 Tabla 2
1
Tiempo Solucin A Solucin B Tiempo Solucin A Solucin B
(min) {%) (%) Cmin) l/o) llo\
-----~-
o 50 50 o 7 93
o 50 50 06 10 90
13 65 35 ~
5 10 90
18 100 o 7 14 86
23 50 50 13 15 85
13 1 100 o
Sistema cromato9rfico
(Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.) _ _ _l_!L__ _ --- 100 o
Modo: HPLC 18 1 7 -
93
Detector: UV 348 nm 23 7 93
Columna: 3, 1 mm x 12,5 cm; relleno L1 de 5 m
Temperatura de la columna: 25 Sistema cromato9rfico
Velocidad de flujo: 1 ml/min (Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.)
Volumen de inyeccin: 1 O L Modo: HPLC
Aptitud del sistema Detector: UV 258 nm
Muestra: Solucin estndar Columna: 3, 1 mm x 12,5 cm; relleno L1 de 5 m
Requisitos de aptitud . Temperatura de la columna: 25
Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de Velocidad de flujo: 1, 3 ml/min
casticina Volumen de inyeccin: 1 O ~1L
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para Aptitud del sistema
el pico de casticina en inyecciones repetidas Muestra: Solucin estndar
Anlisis Requisitos de aptitud .
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de
Calcular el porcentaje de casticina en la porcin de agnsido
Agnocasto en Polvo tomada: Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
el pico de agnsido en inyecciones repetidas
Resultado= (ru/r1) x (Cs/Cu) x 100 Anlisis
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
ru = respuesta del pico de casticina de la Solucin Calcular el porcentaje de agnsido en la porcin de
muestra Agnocasto en Polvo tomada:
rs = respuesta del pico de casticina de la Solucin
estndar Resultado= (ru!r1) x (C1/Cu) x 100
C = concentracin de ER Casticina USP en la
Solucin estndar (mg/ml) ru = respuesta del pico de agnsido de la Solucin
Cu = concentracin de Agnocasto en Polvo en la muestra
Solucin muestra (mg/ml) r1 = respuesta del pico de agnsido de la Solucin
Criterios de aceptacin: No menos de 0,08% de casti- estndar
cina con respect9 a la materia seca C = concentracin de ER Agnsido USP en la
CONTENIDO DE AGNOSIDO Solucin estndar (mg/ml)
Disolvente: Metanol y agua (1 :19) , Cu = concentracin de Agnocasto en Polvo en la
Solucin estndar: Disolver una cantidad de ER Agno- Solucin muestra (mg/ml)
sido USP en Disolvente sometiendo a ultrasonido. Diluir Criterios de aceptacin: No menos de 0,05% de ag-
con metanol hasta obtener una concentr~cin de ~pro nsido con respecto a la materia seca
ximadamente O, 125 mg/ml. Pasar a traves de un filtro CONTAMINANTES
de membrana de celulosa con un tamao de poro de METALES PESADOS, Mtodo 111 (231): No ms de 20 ppm
0,45 ~1m o menor. ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Mtodo General para An-
Solucin muestra: Colocar aproximadamente 1000 mg lisis de Residuos de Plaguicidas (561): Cumple con los
de Agnocasto en Polvo en un recipiente con tapn. Ex- requisitos.
traer dos veces con 40 ml de metanol, usando un ho- PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
mogeneizador manual a 19 000 rpm durante 2 minu- tal de microorganismos aerobios no excede de 10 6 ufc/g;
tos. Centrifugar y transferir cada sobrenadante a un . el recuento total combinado de hongos filamentosos y
matraz de fondo redondo de 250 ml. Enuagar el resi- levaduras no excede de 1 0 4 ufc/g; y el recuento de ente-
duo con metano! y filtrar la solucin resultante en el robacterias no excede de 10 1 ufc/g.,
matraz. Evaporar los extractos combina.dos hasta seque- AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum-
dad y disolver el residuo en 2 ,ml de Disolvente. Transfe- ple con los requisitos de las pruebas _pa_ra de_terminar la
rir cuantitativamente la soluc1on a un cartucho de ex- ausencia de Salmont'llu >pp. y Eschenchw wl1.
traccin de fase slida relleno con xido de aluminio
neutro acondicionado previamente con 5 ml de Disol- PRUEBAS ESPECFICAS
vente. Conectar el cartucho a una presin de vaco que CARACTERSTICAS BOTNICAS: El Agnocasto en Polvo es
no exceda de 300 mbar y recoger el eluato. Enjuagar el marrn oscuro, con un olor levemente aromtico a moho
matraz de fondo redondo con 2 ml de Disolvente, pasar y un sabor similar al de la salvia., ~resen_ta las siguientes
esta solucin a travs del cartucho, aplicar el vaco y caractersticas: fragmentos del cal1z cubiertos con tnc9-
recoger el eluato. tnuagar el cartucho con 4 ml de Di- mas y tricomas glandulares sobre la cara externa, y celu-
solvente y recoger el eluato. Combinar Jos eluatos del las rectangulares y alargadas con paredes ligeramente
cartucho, transferir a un matraz volumetnco de 1 O ml y onduladas en la cara interna; fragmentos de exocarpo
diluir con Disolvente a volumen. con tricomas y clulas con grandes puntuaciones en la
6296 Agnoctisto / 5uplPmPntos DiPtf'ticos USP 38

rvirPrl Pxterna; c!u!as parenquimticas de pared delgada servar otras zonas de color de intensidades variables en
y glbulos de aceites fijos; clulas ptreas del mesocarpo la Soluuon muestra.
con puntuacione\ clulas de la testa lignificadas, ovoi- B. E.n la prueba de Contenido de Caslicina, el cromato-
de~, cu11 lia11ct\ de t'lllJl~a11licrllos reticuiJdus; y endos- grdma de id 5oiuc1on muestra presenta u11 pico en ei
P,erma y cotiledones con Jccitcs fijos. tiempo de retenrin rorrespondiente al de rasticina.
PERDIDA POR SECADO (731): Secar 1 g a 105 durante 2 C. En la prueba de Contenido de Agnsido, el cromato-
hor,as: pierde no ms de ) 0,0% de su peso. grama de la Solucin muestra presenta un pico en el
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Totales (561): tiempo de retencin correspondiente al de agnsido .
No ms de 8,0%
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Insolubles en cido COMPOSICIN
(561): No ms de 2,0% CONTENIDO DE CASTICINA
Solucin estndar: Aproximadamente 0,05 mg/mL de
REQUISITOS ADICIONALES ER Casticina USP en metano!, sometiendo a ultrasonido.
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien Pasar a travs de una membrana de celulosa con un
cerrados y almacenar a temperatura ambiente tamao de poro de 0,45 m o menor.
controlada. Solucin muestra: Transferir una cantidad de Extracto,
ETIQUETADO: La etiqueta declara el nombre cientfico en equivalente a aproximadamente 2,5 mg del contenido
latn, y despus de la denominacin oficial, la parte de la declarado de casticina, a un matraz volumtrico de
pla,nta de donde se obtuvo en el artculo. 50 mL. Agregar 25 mL de metano! y someter a ultraso-
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) nido en un bao a 40 durante 1 O minutos, agitando
ER Agnsido USP para dispersar los slidos. Enfriar a temperatu~a am-
ER Casticina USP biente y diluir con metano! a volumen. Centrifugar o
ER Extracto en Polvo de Agnocasto USP pasar a travs de un filtro con un tamao de poro de
0,45 m o menor.
Solucin A: Metano!
Solucin B: 5,88 g/L de cido fosfrico en agua
Fase mvil: Ver la Tabla 1.
Extracto en Polvo de Agnocasto
Tabla 1
DEFINICIN
Tiempo Solucin A Solucin B
El Extracto en Polvo de Agnocasto se prepara a partir del lmin) (%) (O/o)
Agnocasto mediante extraccin con mezclas hidroalcoh-
licas u otros disolventes adecuados. Contiene no menos o 50 50
de 90,0% y no ms de 11 0,0% de la cantidad declarada o 50 50
de casticina y agnsido, calculado con respecto a la ma- 13 65 35
teria seca. Puede contener sustancias agregadas 18 100 o
adecuadas. ~____ll__ ______ --~-_()---~-----L 50
IDENTIFICACIN Sistema cromato9rfico
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
DELGADA Modo: HPLC
Solucin estndar: 1 00 mg de ER Extracto en Polvo de Detector: UV 348 nm
Agnocasto USP en 1 mL de metano!. Calentar en un Columna: 3, 1 mm x 12,5 cm; relleno L1 de 5 m
bao de agua a 60 durante 1 O minutos. Centrifugar y Temperatura de la columna: 25"
usar el sobrenadante transparente. Velocidad de flujo: 1 mL/min
Solucin muestra: Agitar una cantidad de Extracto, Volumen de inyeccin: 1 O L
equivalente aproximadamente a 1 O mg de la cantidad Aptitud del sistema
declarada de agnsido, en 1 O mL de metano!. Calentar Muestra: Solucin estndar
en un bao de agua a 60. Centrifugar o filtrar antes de Requisitos de aptitud
usar. Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de
Adsorbente: Gel de slice para cromatografa con un casticina
tamao promedio de partrcula de 1 0-15 m (placas Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
para TLC) el pico de casticina en inyecciones repetidas
Volumen de aplicacin: 90 L, Solucin estndar; Anlisis
60 L, Solucin muestra; en bandas de 2 cm de longitud Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Fase mvil: Acetato de etilo, metano! y agua (77: 15:8) Calcular el porcentaje de casticina, Pe, en la porcin de
Solucin reveladora: 1 O mg/mL de p-dimetilaminoben- Extracto tomada:
zaldehdo en cido clorhdrico 1 N
Anlisis Pe = (ru! rs) x ( C/ C1) x 100
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Desarrollar hasta una longitud de no menos de 12 cm r11 = respuesta del pico de casticina de la Solucin
y secar la placa en una corriente de aire. Rociar la muestra
placa con Solucin reveladora y calentar durante 1 O rs = respuesta del pico de casticina de la Solucin
minutos a 120. estndar
Criterios de aceptacin: La Solucin muestra presenta C concentracin de ER Casticina USP en la
=
lo siguiente: una zona azul (a un valor R1 de aproxima- Solucin estndar (mg/mL)
damente 0,21) debida a la presencia de aucubina y que Cu = concentracin de Extracto en la Solucin
corresponde en color y valor R, a una zona similar de la muestra (mg/mL)
Solucin estndar; una zona azul (a un valor Rr de apro- Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de
ximadamente 0,44) como resultado de la presencia de casticina en la porcin de Extracto tomada:
agnsido que corresponde en color y valor Rr a una
zona similar de la Solucin estndar; y una zona ancha, Resultado = (Pe/ L) x 100
de color violeta en el medio, que est cerca del frente
de la fase mvil y que corresponde en color y valor Rr a Pe = contenido de casticina segn se calcul
una zona similar de la Solucin estandar. Se pueden ob- anteriormente (%)
USP 38 Sup!emmtos Dietticos /Ajo 6297

I = rJntirfaci ciecllrlcil cie rJsticina (%) Pa = contenido de agnsido calculado


Criterios de aceptacin: 90,0/ci- l l 0,0% con respecto anteriormente (%)
a la materia seca = cantidad declarada de agnsido (%)
CONTENIDO OE AGNSOO Criterios de aceptacin: 90,0%--110,0% con respello
Disolvente: Metano/ y agua (1: 19) a la materia seca
Solucin estndar: Disolver una cantidad de ER Agn-
sido USP en Disolvente, sometiendo a ultrasonido. Diluir CONTAMINANTES
con metanol hasta obtener una concentracin de apro-
ximadamente O, 125 mg/ml. Filtrar a travs de una Eliminar lo siguiente:
membrana de celulosa con un tamao de poro de 0,45
m o menor. . METALES PESADOS, Mtodo 11 (231): No ms de
Solucin muestra: Transferir una cantidad de Extracto,
equivalente a aproximadamente 6,25 mg del contenido 20 ppme (Oficial 01.dic.2015)
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
declarado de agnsido, a un matraz volumtrico de tal bacteriano no excede de 1 0 4 ufc/g. El recuento total
50 mL. Agregar 25 mL de Disolvente y someter a ultra- combinado de hongos filamentosos y levaduras no ex-
sonido en un bao a 40 durante 1 O minutos, agitando
cede de 1 0 3 ufc/g. ,
para dispersar los slidos. Enfriar a temperatura am- AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum-
biente y diluir con Disolvente a volumen. Centrifugar o ple con los requisitos de las pruebas para determinar la
pasar a travs de un filtro con un tamao de poro de ausencia de Salmonella spp. y Escherichia coli.
0,45 m o menor. OTROS REQUISITOS: Cumple con los requisitos en Extractos
Solucin A: Acetonitrilo Botnicos (565), Disolventes Residuales y Residuos de
Solucin B: 5,88 g/L de cido fosfrico en agua Plaguicidas.
Fase mvil: Ver la Tabla 2.
PRUEBAS ESPECFICAS
Tabla 2 PRDIDA POR SECADO (731): No ms de 6,0%
- Tiem;;---T Solucin A Solucin B REQUISITOS ADICIONALES
lmin) (%) (%) ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im-
o 7 93 permeables y almacenar en un lugar fresco. Proteger de
06 10 90 la luz.
5 10 90 ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
7 14 86
latn, y despus de la denominacin oficial, la parte de la
planta a partir de la cual se prepar el artculo. La eti-
13 15 85 queta tambin indica el contenido de casticina y agn-
13 1 100 o sido, el disolvente de extraccin o mezcla de disolventes
18 100 o que se utiliz en la preparacin, la relacin entre el mate-
18 1 7 93 rial vegetal crudo inicial y el Extracto, el porcentaje de
23 7 93 extracto nativo y el nombre y la cantidad de todas las
sustancias agregadas. Cumple con los requisitos en Ex-
Sistema cromato9rfico trm;tos Botnicos (565), Etiquetado.
(Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.) ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
Modo: HPLC ER Agnsido USP
Detector: UV 258 nm ER Casticina USP
Columna: 3, 1 mm x 12,5 cm; relleno L1 de 5 m ER Extracto en Polvo de Agnocasto USP
Temperatura de la columna: 25
Velocidad de flujo: 1,3 mL/min
Volumen de inyeccin: 1 O L
Aptitud del sistema
Muestra: Solucin estndar Ajo
Requisitos de aptitud
Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de DEFINICIN
agnsido El Ajo consiste en los bulbos compuestos frescos o secos de
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para Allium sativum L. (Fam. Liliaceae). Contiene no menos de
el pico de agnsido en inyecciones repetidas 0,5% de alina y no menos de 0,2% de y-glutamil-(S)-alil-
Anlisis L-cistena, calculado con respecto a la materia seca.
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Calcular el porcentaje de agnsido, Pa, en la porcin IDENTIFICACIN
de Extracto tomada: A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
DELGADA
Pa = (ru/r 1) x (C/Cu) x 100 Solucin estndar A: 0,5 mg/ml de ER L-Metionina
USP en una mezcla de metanol y agua (1: 1)
ru = respuesta del pico de agnsido de la Solucin Solucin estndar B: 0,5 mg/mL de ER Alina USP en
muestra una mezcla de metanol y agua (1: 1)
r1 = respuesta del pico de agnsido de la Solucin Solucin muestra: Cortar un bulbo de ajo liofilizado en
estndar trozos pequeos, transferir 1 g de los trozos cortados a
C = concentracin de ER Agnsido USP en la un extractor y extraer con dos porciones de 20 ml de
Solucin estndar (mg/ml) una mezcla de metanol y agua (1 :1 ), combinando los
e, = concentracin de Extracto en la Solucin extractos. Concentrar hasta un volumen pequeo (apro-
muestra (mg/mL) ximadamente 5 mL), usando un evaporador rotatorio.
Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa
agnsido en la porcin de Extracto tomada: de 0,25 mm, por lo regular de 20 cm de longitud (pla-
cas para TLC)
Resultado = (Pal L) x 1 00 Volumen de aplicacin: 20 L, aplicados por separado
en bandas de 1 O mm
6298 Ajo / Suplementos Dietticos USP 38

Fase mvil: Alcohol butlico, alcohol n-proplico, cido Fnfriar PI tuho rle ensayo, agregar 20 mL de agua y
actico glacial y agua (3: 1: 1: 1) tramferir la solucin a una Columna de extraccin re-
Solucin reveladora: Solucin al 0,2% de ninhidrina en cientemente acondicionada, dejar que escurra y dese-
un'-1 n1cLcla de Jkohol butlico y cido actico 2 ~'4 cl 1ci1 el elualu. Lavat la culu111r1ct LOll 30 r11L Je ur1ct
(19:1) mezcla de metano! y agua (7:3), y desechar el eluato.
Anlisis Por ltimo, eluir la columna con 50 mL de metano!. Re-
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar By coger el eluato, evaporarlo hasta sequedad y disolver el
Solucin muestra residuo en 0,5 mL de metano!.
Desarrollar los cromatogramas hasta que el frente de la Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa
fase mvil haya recorrido aproximadamente tres cuar- de 0,25 mm, por lo regular de 20 cm de longitud (pla-
tos de la placa, en una cmara saturada. Retirar la cas para TLC)
placa y dejar que la fase mvil se evapore. Rociar con Volumen de aplicacin: 20 L, en bandas de 7 mm
Solucin reveladora, calentar a 100-l 05 durante 1 O Fase mvil: Cloruro de metileno y metano! (15:2)
minutos y observar la placa inmediatamente. Solucin reveladora: Disolver 0,5 mL de 4-metoxiben-
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- zaldehdo y 0,5 mL de cido sulfrico en alcohol sufi-
cin muestra presenta las siguientes zonas de color ana- ciente para obtener 1 O mL.
ranjado y violeta rosado: una zona violeta con un valor Anlisis
R, de aproximadamente 0,89; una zona rosada con un Muestras: Solucin estndar y .SOiucin muestra
valor R, de aproximadamente 0,5 y que corresponde en Desarrollar los cromatogramas en una cmara saturada
color y valor R, a la obtenida del cromatograma de la hasta que el frente de la fase mvil haya recorrido
Solucin estndar A; una zona rosada con un valor Rr de aproximadamente tres cuartos de la placa. Retirar la
aproximadamente 0,43; una zona anaranjada intensa placa y dejar que la fase mvil se evapore. Rociar la
con un valor Rr de aproximadamente 0,38; una zona placa con Solucin reveladora, calentar la placa a
violeta rosado con un valor Rr de aproximadamente 0,3 100-l 05 durante 5 minutos y observar la placa.
y que corresponde en color y valor Rr a la del cromato- Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
grama de la Solucin estndar B; y zonas adicionales de cin muestra presenta, entre varias manchas de color
color anaranjado rosado ubicadas muy cerca una de verde amarillento y grisceo, una mancha verde gris-
otra justo por debajo de la zona atribuida a alina en el ceo a un valor R, de aproximadamente 0,4, que corres-
cromatograma de la Solucin estndar B. ponde a la mancha verde grisceo debida a -cloroge-
B. nina de la Solucin estndar. El cromatograma de la
Muestra: Aproximadamente 1 O g de bulbos de ajo cor- Solucin muestra no presenta manchas a un valor Rr de
tados en piezas pequeas aproximadamente 0,2, que corresponde a agigenina de
Anlisis: Transferir la Muestra a un matraz adecuado. la Solucin estndar.
Agregar 1 O mL de hidrxido de sodio 1 N y 1 O mL de
agua, calentar el matraz en agua hirviendo durante 1 O COMPOSICIN
minutos, enfriar y filtrar. Agregar unas pocas gotas de CONTENIDO DE ALINA
nitroferricianuro de sodio SR recientemente preparado a Solucin inhibidora de aliinasa: Disolver 109 mg de
2 mL del filtrado. hemiclorhidrato de carboximetoxilamina en 1 00,0 mL
Criterios de aceptacin: La aparicin de un color rojo de agua.
o rojo anaranjado indica la presencia de compuestos Solucin A: Fosfato monobsico de sodio 0,045 M en
que contienen azufre en la Muestra. agua, ajustado con hidrxido de sodio 0,2 M a un pH
C. El tiempo de retencin del pico principal de la Solu- de 7, 1.
cin muestra corresponde al de la Solucin estndar, se- Solucin amortiguadora: Fosfato monobsico de sodio
gn se obtienen en la pn)eba de Contenido de,Alina. 0,05 M en agua, ajustado con hidrxido de sodio 0,2
D. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR CROMATOGRAFIA EN CAPA M a un pH de 9,5.
DELGADA Reactivo de derivatizacin: Disolver 140 mg de o-ftal-
Columna de extraccin: De fase slida de 1 cm x dialdehdo en 5 mL de metano!, agregar 1 00 L de t-
5 cm; contiene relleno de copolmero de estireno-divi- butiltiol y diluir con Solucin amortiguadora hasta
nilbenceno con un dimetro tje 75 a 150 m y un ta- 50 ml. [NOTA-Este reactivo puede tornarse ocasional-
mao de poro de 400 a 600 A. Acondicionar la co- mente opaco durante la preparacin. Almacenar a tem-
lumna antes de su uso lavando con 50 mL de metano! peratura ambiente y usar dentro de la primera semana.]
y 50 mL de una mezcla de metano! y agua (3:7). Fase mvil: Acetonitrilo, 1,4-dioxano, tetrahidrofurano
[NOTA--No dejar que la columna se seque.] y Solucin A (25: 2,9: 2,2: 69,9)
Solucin estndar: 0,2 mg/mL de ER ,B-Clorogenina Solucin estndar: 0,05 mg/ml de ER Alina USP en
USP y de ER Agigenina USP en metano! una mezcla de metano! y agua (1 :1)
Solucin muestra: Transferir aproximadamente 1 O g de Solucin madre de la muestra: Transferir aproximada-
diente de ajo recientemente pelado a un vaso de ho- mente 10,0 g de dientes de ajo recientemente pelados,
mogeneizacin de 37 ml y homogeneizar con 25 ml pesados con exactitud, a un vaso de homogeneizacin
de metano! a la velocidad ms alta durante 1 minuto. de 11 O mL. Agregar 70,0 mL de Solucin inhibidora de
Centrifugar la mezcla y decantar el sobrenadante en un aliinasa y mezclar a la velocidad ms alta durante 30
matraz. Agregar 70 mL de agua. Transferir a la Columna segundos. Centrifugar y decantar el sobrenadante en un
de extraccin, dejar que escurra y desechar el eluato. matraz volumtrico de 100 mL. Mezclar los slidos re-
Lavar la columna con 50 mL de una mezcla de metano! manentes en el vaso con 20 mL de Solucin inhibidora
y agua (3: 7), dejar que la mezcla de disolventes escurra de aliinasa, centrifugar y agregar el sobrenadante al ma-
y desechar el eluato. Por ltimo, eluir la fraccin de traz volumtrico. Diluir el contenido del matraz con So-
saponina sin procesar en la columna con 20 ml de me- lucin inhibidora de aliinasa a volumen.
tano! y recoger el eluato. Evaporar el disolvente hasta Solucin muestra: Diluir una porcin de la Solucin ma-
sequedad. Disolver el residuo en 4 mL de una mezcla dre de la muestra 1 en 1 O con una mezcla de metano! y
de cido sulfrico al 8% y alcohol (1 :1 ), transferir la agua (1 :1 ).
solucin a un tubo de ensayo con tapa de rosca y ca- Sistema cromato9rfico
lentar en u11 bao de agua hirviendo durante 5 horas. (Ver Cron1atografa \621 ), Aptitud de/ 5istena.)
USP 38 \111/prrwuim Dit>lf>licc1\ /Ajo 6299

Modo: HPLC Anlisis


Detector: UV 3 3 7 nm Muestras: Soluc1on estandar y Solucn muestra
Columna: 4 mm x 1 O cm; relleno L1 Calcular el porcentaje de y-glutamil-(S)-alil-L-cistena en
Velocidad de flujo: 1 mUm1n la porc1on de Ao tomada:
Volumen de inyeccin: 1O p L
Aptitud del sistema Resultado= (ru/r,) x Cs x (V/W) x 100
Muestra: Solucin estndar
Requisitos de aptitud ru = respuesta del pico de y-glutamil-(S)-alil-L-
[NOTA-La alina presenta dos picos principales que re- cistena de la Solucin muestra
presentan sus diasteremeros.] rs = respuesta del pico de y-glutamil-(S)-alil-L-
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para cistena de la Solucin estndar
cada _uno de los picos principales, en inyecciones Cs = concentracin de ER y-Glutamil-(S)-alil-L-
repetidas cistena USP en la Solucin estndar (mg/mL)
Anlisis V = volumen de Solucin muestra (mL)
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra W = peso de Ajo usado para preparar la Solucin
Con una jeringa, transferir O, 1 mL de la Solucin estn- muestra (mg)
dar o de la Solucin muestra a sendos viales con tapa Criterios de aceptacion: No menos de 0,2% con res-
de septo y agregar 0,5 mL del Reactivo de derivatiza- pecto a la materia seca
cin a cada vial. Permitir un tiempo de reaccin de no
CONTAMINANTES
menos de _2 minutos antes de inyectar en el cromat-
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Residuos de Plaguicidas
grafo. Registrar los cromatogramas y medir las reas
de los picos de diasteremeros de alina. (561): Cumple con los requisitos.
Calcular el porcentaje de alina en la porcin de Ajo PRUEBAS ESPECFICAS
tomada: CARACTERSTICAS BOTNICAS
Macroscpicas: Bulbos subglobulares compuestos de
Resultado = (ru/rs) x C5 x (V/W) x O x 100 3-5 cm de ancho, que consisten en 8-20 dientes 'ro-
ru = rea del pico de alina de la Solucin muestra deado en su totalidad por 2-5 capas de hojas esamo-
rs = reas de los picos de diasteremeros de alina sas blancas unidas a una base circular aplanada los
de la Solucin estndar dientes son ovoides con 3 a 4 lados, punta agu'da, es-
Cs = concentracin de ER Alina USP en la Solucin trechada en una porcin similar a un hilo de base fi-
estndar (mg/mL) brosa, truncada, cada diente cubierto con una hoja es-
V = volumen de Solucin madre de la muestra (mL) camosa blanca y una epidermis de color blanco rosado
W = peso de Ajo usado para preparar la Solucin fcilmente_ separable de la porcin slida, que consiste '
madre de la muestra (mg) en dos hoas escamosas y dos hojas conduplicadas de
O = factor de dilucin para preparar la Solucin color verde amarillento
Mi~roscpicas: La hoja, protectora in_cluye una epider-
muestra a partir de la Solucin madre de la
muestra, 1 O mis que rodea un mesofilo sin clorofila. La epidermis
Criterios de acep_tacin: No menos de 0,5% con res- externa consta de esclereidas de clulas lignificadas, de
pecto a la materia seca paredes gruesas con puntuaciones, alargadas, recubier-
CONTENIDO DE y-GLUTAMIL-(S)-ALIL-L-CISTENA
tas con una cutcula fina, fibras largas de hasta 500 m
Soluci~'m A: Disolver 6,80 g de fosfato monobsico de de longitud y 30 m de ancho.
potasio en 900 mL de agua y ajustar con cido fosfrico Las clulas co.rticales tienen paredes gruesas, no lignifi-
a un pH de 2,6. Diluir con agua hasta 1000,0 mL y cadas, que tienden a colapsarse en su madurez isodia-
mezclar. mtricas y contienen pigmentos prpuras. Los haces
Fase mvil: Metano! y Solucin A (3:17). ".s~~lares consiste~ en vasos espiralados y anillados
l1grnf1c~dos. ~as hoas de alr;iacenamiento presentan
Solucin estndar: 0,08 mg/mL de ER y-Glutamil-(S)-
alil-L-cistena USP en una mezcla de metanol y agua una ep1derm1s ~xterna de celulas delicadas y delgadas
(1 : 1) con formas variables, colocadas en filas algo irregula-
Solucin muestra: Transferir aproximadamente 1 O g de res, de 60 m de largo y 30 m de ancho. Se presen-
dient~s de ajo recientemente pelados, pesados con
tan estomas en la epidermis externa nicamente en la
exactitud, a un vaso de homogeneizacin de 11 O ml.
Agregar 80 n:L de una mezcla de ,metanol y agua (1 :1 ),
f
unta del extremo cerca de la base de las hojas.
E mes!ilo con_sta de clulas parenquimticas de alma-
~enam1ento hinchadas rellenas de material granular
y homogeneizar a la velocidad mas alta durante 1 mi-
nuto. Centrifugar la mezcla y decantar el sobrenadante fino de reserva; se presentan 20 conductos laticferos
en un matraz volumtrico de 250 mL. Mezclar los sli- esparcidos en la corteza, de 500-1 000 m de largo.
Lo~ haces .vas_culares consisten en vasos espiralados y
dos remanentes con dos porciones de 70 mL de una
mezcla de metano! y agua (1 :1 ), centrifugar y transferir anillados l1grnf1cados estrechos que se distribuyen en
los sobrenadantes al matraz volumtrico. Diluir el conte- dos series en el mesfilo.
ARTCU~OS DE ORIGEN BOTNICO, Contenido de Acua (561):
nido del matraz con una mezcla de metanol y agua
(1 :1) a volumen. No mas de 65,0% para bulbos frescos y no mas de 7,0%
Sistema cromato9rfico para bulbos secos
ARTCU~OS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Totales (561):
(Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
Modo: HPLC No mas de 5,0%
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Insolubles en cido
Detector: UV 205 nm
Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L1 (561): No ms de 1,0%
Velocidad de flujo: 0,8 ml/min REQUISITOS ADICIONALES
Volumen de inyeccin: 1 O uL ENVASADO V ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
Aptitud del sistema ' cerrados en un lugar fresco y seco. Proteger de la luz.
Muestra: Solucin estndar ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
Requisitos de aptitud latn y despus de la denominacin oficial, la parte de la
Desv!acin estndar relativa: No ms de 2,0% para planta contenida en el artculo.
el pico de y-glutamil-(S)-alil-L-cistena en inyecciones
repetidas
6300 Ajo / Suplementos Dietticos USP 38

ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11) Criterios de aceptacin: La aparicin de un color rojo


ER Agigenina USP o rojo anaranjado indica la presencia de compuestos
ER Alina USP que contienen azufre en la Muestra.
CR J-Clu1uge11i11a USP (. Ei tiempo de retencin del pico principal de la ~o/u
ER 1-Glutamil (S)-alil-L-cistcna USP cin muestra corresponde al de la Solucin estndar, se-
ER L-Metionina USP gn se obtienen en la pryeba de Contenido de,Alina.
D. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR CROMATOGRAFIA EN CAPA
DELGADA
Columna de extraccin: De fase slida de 1 cm x
5 cm; contiene relleno de copolmero de estireno-divi-
Ajo en Polvo nilbenceno con un dimetro tje 75 a 150 m y un ta-
mao de poro de 400 a 600 A. Acondicionar la co-
DEFINICIN lumna antes de su uso lavando con 50 mL de metano!
El Ajo en Polvo se produce a partir de Ajo que ha sido y 50 mL de una mezcla de metano! y agua (3:7).
cortado, liofilizado o secado a una temperatura que no [NOTA-No dejar que la columna se seque.]
exceda de 65 y reducido a polvo. Contiene no menos de Solucin estndar: 0,2 mg/mL de ER 3-Clorogenina
0,3% de alina y no menos de 0, 1 % de y-glutamil-(S)-alil- USP y de ER Agigenina USP en metano!
L-cistena, calculado con respecto a la materia seca. Solucin muestra: Transferir aproximadamente 1 O g de
Ajo en Polvo a un vaso de homogeneizacin de 37 mL
IDENTIFICACIN y homogeneizar con 25 mL de metano! a la velocidad
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA ms alta durante 1 minuto. Centrifugar la mezcla y de-
DELGADA cantar el sobrenadante en un matraz. Agregar 70 mL de
Solucin estndar A: 0,5 mg/mL de ER L-Metionina agua. Transferir a la Columna de extraccin, dejar que
USP en una mezcla de metano! y agua (1 :1) escurra y desechar el eluato. Lavar la columna con
Solucin estndar B: 0,5 mg/mL de ER Alina USP en 50 mL de una mezcla de metano! y agua (3:7), dejar
una mezcla de metano! y agua (1 :1) que la mezcla de disolventes escurra y desechar el
Solucin muestra: Transferir 1 g de Ajo en Polvo a un eluato. Por ltimo, eluir la fraccin de saponina sin pro-
extractor y extraer con dos porciones de 20 mL de una cesar en la columna con 20 mL de metano! y recoger el
mezcla de metano! y agua (1 :1 ), combinando los ex- eluato. Evaporar el disolvente hasta sequedad. Disolver
tractos. Concentrar hasta un volumen pequeo (aproxi- el residuo en 4 mL de una mezcla de cido sulfrico al
madamente 5 mL), usando un evaporador rotatorio. 8% y alcohol (1 :1 ), transferir la solucin a un tubo de
Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa ensayo con tapa de rosca y calentar en un bao de
de 0,25 mm, por lo regular de 20 cm de longitud (pla- agua hirviendo durante 5 horas. Enfriar el tubo de en-
cas para TLC) sayo, agregar 20 mL de agua y transferir la solucin a
Volumen de aplicacin: 20 L, aplicados por separado una Columna de extraccin recientemente acondicio-
en bandas de 1 O mm nada, dejar que escurra y desechar el eluato. Lavar la
Fase mvil: Alcohol butlico, alcohol n-proplico, cido columna con 30 mL de una mezcla de metano! y agua
actico glacial y agua (3:1 :1 :1) (7:3), y desechar el eluato. Por ltimo, eluir la columna
Solucin reveladora: Solucin de ninhidrina 0,2 en con 50 mL de metano!. Recoger el eluato, evaporarlo
1 00 en una mezcla de alcohol butlico y cido actico hasta sequedad y disolver el residuo en 0,5 mL de
2 N (19:1) metano l.
Anlisis Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar By de 0,25 mm, por lo regular de 20 cm de longitud (pla-
Solucin muestra cas para TLC)
Desarrollar los cromatogramas hasta que el frente de la Volumen de aplicacin: 20 L, en bandas de 7 mm
fase mvil haya recorrido aproximadamente tres cuar- Fase mvil: Cloruro de metileno y metano! (15:2)
tos de la placa, en una cmara saturada. Retirar la Solucin reveladora: Disolver 0,5 mL de 4-metoxiben-
placa y dejar que la fase mvil se evapore. Rociar con zaldehdo y 0,5 mL de cido sulfrico en alcohol sufi-
Solucin reveladora, calentar a 100-l 05 durante 1 O ciente para obtener 1 O mL.
minutos y observar la placa inmediatamente. Anlisis
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
cin muestra presenta las siguientes zonas de color ana- Desarrollar los cromatogramas en una cmara saturada
ranjado y violeta rosado: una zona violeta con un valor hasta que el frente de la fase mvil haya recorrido
Rr de aproximadamente 0,89; una zona rosada con un aproximadamente tres cuartos de la placa. Retirar la
valor Rr de aproximadamente 0,5 y que corresponde en placa y dejar que la fase mvil se evapore. Rociar la
color y valor Rr a la obtenida del cromatograma de la placa con Solucin reveladora, calentar la placa a
Solucin estndar A; una zona rosada con un valor R1 de 100-l 05 durante 5 minutos y observar la placa.
aproximadamente 0,43; una zona anaranjada intensa Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
con un valor Rr de aproximadamente 0,38; una zona cin muestra presenta, entre varias manchas de color
violeta rosado con un valor Rr de aproximadamente 0,3 verde amarillento y grisceo, una mancha verde gris-
y que corresponde en color y valor Rr a la del cromato- ceo a un valor R, de aproximadamente 0,4, que corres-
grama de la Solucin estndar B; y zonas adicionales de ponde a la mancha verde grisceo debida a 3-cloroge-
color anaranjado rosado ubicadas muy cerca una de nina de la Solucin estndar. El cromatograma de la
otra justo por debajo de la zona atribuida a alina en el Solucin muestra no presenta manchas a un valor Rr de
cromatograma de la Solucin estndar B. aproximadamente 0,2, que corresponde a agigenina de
B. la Solucin estndar.
Muestra: Aproximadamente 1 O g de Ajo en Polvo
Anlisis: Transferir la Muestra a un matraz adecuado. COMPOSICIN
Agregar 1 O mL de hidrxido de sodio 1 N y 1 O mL de CONTENIDO DE ALINA
agua, calentar el matraz en agua hirviendo durante 1 O Solucin inhibidora de aliinasa: Disolver 1 09 mg de
minutos, enfriar y filtrar. Agregar unas pocas gotas de hemiclorhidrato de carboximetoxiiamina en 100,0 mL
nitroferricianuro de sodio SR recientemente preparado a de agua.
2 mL del filtrado. Solucin A: Fosfato monobsico de sodio 0,045 M en
agua. Ajustar con hidrxido de sodio 0,2 M a un pH de
7, l.
USP 38 Suplementos Dietticos /Ajo 6301

Solucin amortiguadora: Fosfato monobsico de sodio Solucin muestra: Transferir aproximadamente 1,0 g
0,05 M en aqua. Ajustar con hidrxido de sodio 0,2 M de Ajo en Polvo, pesados con exactitud, a un matraz
a un pH de 9,5. volumtrico de 50 mL. Aqreqar 30 mL de metano! y
Reactivo de derivatizacin: Disolver 140 mg de o-ftal- agua (1: 1) y agitar vigorosamente hasta que el polvo se
dialdehdo en 5 mL de metdnol, agregar 100 pL de t- disperse por completo. Diluir el contenido del matraz
butiltiol y diluir con Solucin amortiguadora hasta con una mezcla de metano! y agua (1 :1) a volumen.
50 ml. [NOTA-Este reactivo puede tornarse ocasional- Centrifugar hasta obtener una solucin transparente.
mente opaco durante la preparacin. Almacenar a tem- Sistema cromato9rfico
peratura ambiente y usar dentro de Ja primera semana.] (Ver Cromatografia (621 ), Aptitud del Sistema.)
Fase mvil: Acetonitrilo, 1,4-dioxano, tetrahidrofurano Modo: HPLC
y Solucin A (25: 2,9: 2,2: 69,9) Detector: UV 205 nm
Solucin estndar: 0,05 mg/mL de ER Alina USP en Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L1
una mezcla de metano! y agua (1 :1) Velocidad de flujo: 0,8 mL/min
Solucin madre de la muestra: Transferir aproximada- Volumen de inyeccin: 1 O pL
mente 1,0 g de Ajo en Polvo, pesados con exactitud, a Aptitud del sistema
un matraz. Agregar 30,0 mL de Solucin inhibidora de Muestra: Solucin estndar
aliinasa y agitar vigorosamente hasta que el polvo se Requisitos de aptitud
disperse por completo. Centrifugar hasta obtener una Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
solucin transparente. el pico de y-glutamil-(S)-alil-L-cistena en inyecciones
Solucin muestra: Transferir 5,0 mL de Solucin madre repetidas
de la muestra a un matraz volumtrico de 1O mL y diluir Anlisis
con Solucin inhibidora de aliinasa a volumen. Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Sistema cromato9rfico Calcular el porcentaje de y-glutamil-(S)-alil-L-cistena en
(Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.) la porcin de Ajo en Polvo tomada:
Modo: HPLC
Detector: UV 337 nm Resultado = (ru/rs) x C, x (V/V\/) x 100
Columna: 4 mm x 1 O cm; relleno L1
Velocidad de flujo: 1 mL/min ru = respuesta del pico de y-glutamil-(S)-alil-L-
Volumen de inyeccin: 1O pL cistena de la Solucin muestra
Aptitud del sistema r1 = respuesta del pico de y-glutamil-(S)-alil-L-
Muestra: Solucin estndar cistena de la Solucin estndar
Requisitos de aptitud C5 = concentracin de ER y-Glutamil-(5)-alil-L-
[NOTA-La alina presenta dos picos principales que re- cistena USP en la Solucin estndar (mg/ml)
presentan sus diasteremeros.] V = volumen de Solucin muestra (mL)
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para W = peso de Ajo en Polvo usado para preparar la
cada uno de los picos principales, en inyecciones Solucin muestra (mg)
repetidas Criterios de aceptacin: No menos de 0, 1 % con res-
Anlisis pecto a la materia seca
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Con una jeringa, transferir O, 1 mL de la Solucin estn- CONTAMINANTES
dar o de la Solucin muestra a sendos viales con tapa MET,ALES PESADOS, Mtodo, I (231 ): No ms de 1 o ppm
de septo, agregar 0,5 mL del Reactivo de derivatizacin ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Residuos de Plaguicidas
a cada vial y mezclar. Permitir un tiempo de reaccin (561): Cumple con los requisitos.
de no menos de 2 minutos antes de inyectar en el PRUEBAS ESPECFICAS
cromatgrafo. Registrar los cromatogramas y medir las CARACTERSTICAS BOTNICAS: Caracterizacin del Ajo en
reas de los picos de diasteremeros de alina. Polvo al microscopio: numerosos fragmentos de parn-
Calcular el porcentaje de alina en la porcin de Ajo en quima con clulas grandes que contienen cristales de
Polvo tomada: oxalato de calcio y pequeos espacios intercelulares,
triangulares o cuadrangulares, en las esquinas; vasos espi-
Resultado = (ru!r1) X e X (V/V\/) X oX 100 ralados acompaados de clulas subcuadrticas; clulas
ru = rea del pico de alina de la Solucin muestra epidrmicas alargadas con paredes gruesas y punteadas.
r, =suma de las reas de los picos de AUSENCIA DE ALMIDN: Una suspensin espesa acuosa de
diasteremeros de alina de la Solucin Ajo en Polvo no presenta coloracin azul cuando se le
estndar
a_grega yodo SR.
C = concentracin de ER Alina USP en la Solucin
PERDIDA POR SECADO (731 ): Secar 1 g del artculo a 1 05
dur,ante 2 horas: pierde }O ms de 7,0% de su peso.
estndar (mg/mL)
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Totales (561 ):
V = volumen de Solucin madre de la muestro (ml)
W = peso de Ajo en Polvo usado para preparar Ja
No ms de 5,0%
Solucin madre de la muestra (mg)
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Insolubles en cido
(561): No ms de 1,0%
O = factor de dilucin para preparar la Solucin
muestra a partir de la Solucin madre de la REQUISITOS ADICIONALES
muestra, 2 ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
Criterios de aceptacin: No menos de 0,3% con res- cerrados en un lugar fresco y seco. Proteger de la luz.
pecto a la materia seca , ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
CONTENIDO DE y-GLUTAMIL-(S)-ALIL-L-CISTEINA latn y despus de la denominacin oficial, la parte de Ja
Solucin A: Disolver 6,80 g de fosfato monobsico de planta de donde se obtuvo el artculo.
potasio en 900 mL de agua y ajustar con cido fosfrico
a un pH de 2,6. Diluir con agua hasta 1000,0 mL y
mezclar.
Fase mvil: Metano! y ~oluoon A (3:i /).
Solucin estndar: 0,08 mg/mL de ER y-Glutamil-(S)-
alil-L-cistena USP en una mezcla de metano! y agua
( 1 :1)
6302 Ajo / Sup!PmPnto1 OiPti'ticm USP 38

ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11) COMPOSICIN


ER Agigenina USP CONTENIDO DE ALINA
ER Alina USP Solucin inhibidora de aliinasa: 1,09 mq/mL de hemi-
E:R 3-Clorogen1na USf, clorhidrato de carboximetoxilamina
ER y-Clutamil-(S)-alil-1-cistena USP Solucin A: Fosfato monobsico de sodio 0,045 M en
ER L-Metionina USP agua, ajustado con hidrxido de sodio 0,2 M a un pH
de 7, 1.
Solucin amortiguadora: Fosfato monobsico de sodio
0,05 M en agua, ajustado con hidrxido de sodio 0,2
M a un pH de 9,5.
Extracto en Polvo de Ajo Reactivo de derivatizacin: Disolver 140 mg de o-ftal-
dialdehdo en 5 mL de metano!. Agregar 100 L de t-
DEFINICIN butiltiol, diluir con Solucin amortiguadora hasta 50 mL
El Extracto en Polvo de Ajo se prepara a partir de bulbos y mezclar. [NOTA-Este reactivo puede tornarse ocasio-
frescos de Ajo mediante extraccin con alcohol. La rela- nalmente opaco durante la preparacin. Almacenar a
cin entre el material vegetal crudo inicial y el Extracto en temperatura ambiente y usar dentro de la primera
Polvo es 9,5:1-13,5:1. Contiene no menos de 4,0% de semana.]
alina (C6H11 NO,S). Puede contener Ajo en Polvo u otras Fase mvil: Acetonitrilo, 1,4-dioxano, tetrahidrofurano
sustancias adecuadas agregadas. y Solucin A (25: 2,9: 2,2: 69,9)
Solucin estndar: 0,05 mg/mL de ER Alina USP en
IDENTIFICACIN una mezcla de metanol y agua (1 :1)
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA Solucin muestra: Transferir aproximadamente O, 1 O g
DELGADA de Extracto en Polvo, pesados con exactitud, a un ma-
Solucin estndar A: 0,5 mq/mL de ER L-Metionina traz volumtrico de 50 mL. Agregar 30 mL de Solucin
USP en una mezcla de metanol y agua (1: 1) inhibidora de aliinasa y agitar hasta que el Extracto en
Solucin estndar B: 0,5 mg/mL de ER Alina USP en Polvo se disperse por completo. Diluir con Solucin inhi-
una mezcla de metanol y agua (1 : 1) bidora de aliinasa a volumen. Centrifugar, transferir
Solucin muestra: Transferir una cantidad de Extracto 5 mL del sobrenadante transparente a un matraz volu-
en Polvo, equivalente a aproximadamente 5 mg de mtrico de 1 O mL y diluir con Solucin inhibidora de alii-
alina, a un recipiente adecuado. Agregar 40 mL de una nasa a volumen.
mezcla de metanol y agua (1 :1 ), y agitar hasta que el Sistema cromato~rfico
polvo se disperse por completo. Centrifugar y decantar (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
el sobrenadante en un matraz de fondo redondo. Con- Modo: HPLC
centrar hasta un volumen pequeo (aproximadamente Detector: UV 337 nm
5 mL) usando un evaporador rotatorio. Columna: 4 mm x 1 O cm; relleno L1
Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa Velocidad de flujo: 1 mL/min
de 0,25 mm, por lo regular de 20 cm de longitud (pla- Volumen de inyeccin: 1 O L
cas para TLC) Aptitud del sistema
Volumen de aplicacin: 20 L, aplicados por separado Muestra: Solucin estndar
en bandas de 1 O mm Requisitos de aptitud
Fase mvil: Alcohol butlico, alcohol n-proplico, cido [NOTA-La alina presenta dos picos principales que re-
actico glacial y agua (3:1 :1 :1) presentan sus diasteremeros.]
Solucin reveladora: Solucin al 0,2% de ninhidrina en Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
una mezcla de alcohol butlico y cido actico 2 N cada uno de los picos principales
(19:1) Anlisis
Anlisis Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra Con una jeringa volumtrica, transferir O, 1 mL de la So-
Desarrollar los cromatogramas en una cmara saturada lucin muestra o de la Solucin estndar a sendos viales
hasta que el frente de la fase mvil haya recorrido con tapa de septo y agregar 0,5 mL del Reactivo de
aproximadamente tres cuartos de la placa. Retirar la derivatizacin a cada vial. Permitir un tiempo de reac-
placa y dejar que la fase mvil se evapore. Rociar con cin de no menos de 2 minutos antes de inyectar en
Solucin reveladora, calentar a 100"-l 05 durante 1 O el cromatgrafo. Registrar los cromatogramas y medir
minutos y observar la placa inmediatamente. las reas de los picos de diasteremeros de ali1na.
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- Calcular el porcentaje de alina en la porcin de Ex-
cin muestra presenta las siguientes zonas de color ana- tracto en Polvo tomada:
ranjado y violeta rosado: una zona violeta con un valor
R, de aproximadamente 0,89; una zona rosada con un Resultado= (ru/r,) X e X (V/VV) >\ l 00
valor R, de aproximadamente 0,5 y que corresponde en
color y valor R, a la obtenida del cromatograma de la r1' = rea del pico de alina de la Solucin muestra
Solucin estndar A; una zona rosada con un valor Rr de r1 = reas de los picos de diasteremeros de alina
aproximadamente 0,43; una zona anaranjada intensa de la Solucin estndar
con un valor R, de aproximadamente 0,38; una zona C = concentracin de ER Alina USP en la Solucin
violeta rosado con un valor R, de aproximadamente 0,3 estndar (mg/mL)
y quP corresponde en color y valor Rr a la del cromato- V = volumen de Solucin muestra (mL)
grama de la Solucin estndar B; y zonas adicionales de W = peso de Extracto en Polvo de Ajo usado para
color anaranjado rosado ubicadas muy cerca una de preparar la Solucin muestra (rng)
otra justo por debajo de la zona atribuida a alina en el Criterios de aceptacin: No menos de 4,0% con res-
cromatograma de la Solucin estndar B. pecto a la materia seca
B. El tiempo de retencin del pico de alina de la Solu-
cin muestra corresponde al de la Solucin estndar, se-
gn se obtienen en la prueba de Contenido de Alina.
USP 38 ~uplcmcntos D1ctet1cos ! Ao 6303

CONTAMINANTES IDENTIFICACIN ,
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFIA EN CAPA
DELGADA
Eliminar lo siguiente: Columna de extraccin: Usar una columna de extrac-
con en tase slida que contenga ,bencenosulfonilpropil
. METALES PESADOS, Mtodo I (231): No ms de unido a gel de slice en la forma ac1da con una relac1on
1 O ppme (Oficial 01-dic-2015) entre la masa del sorbente y el volumen de la columna
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- de 1 g por 6 mL o equivalente. Acondicionar la co-
tal de microorganismos aerobios no excede de 10 4 ufc/g, lumna antes de usar lavando con 1 O mL de metano! y
y el recuento total combinado de hongos filamentosos y 1 O mL de agua. [NOTA-No dejar que la columna se
levaduras no excede de 10 3 ufc/g. , seque.] . . ,
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum- Solucin estndar: 0,5 mg/mL de ER S-Alil-L-mte1na
ple con los requisitos de las pruebas _pa_ra de_terminar la USP en una mezcla de metano! y agua (1 :1)
ausencia de Salmonel/a spp. y Eschenchta colt. Solucin muestra: Mezclar 1 mL de Extracto Fluido y
PRUEBAS ESPECFICAS 5 mL de agua, y transferir a la Columna de extraccin.
ACTIVIDAD DE ALllNASA Dejar que escurra y desechar el eluato. Lavar la co-
Solucin inhibidora de aliinasa, Solucin A, Solucin lumna con 1 O mL de agua y 1 O _n;L de me~an<;>I,_ dese-
amortiguadora, Reactivo de derivatizacin1 _Fase m~ chando los eluatos. Eluir la fracc1on de aminoac1do con
vil, Solucin estndar, Sistema cromatograf1co y Ana- 3 mL de solucin de hidrxido de amonio en metano!
lisis: Proceder segn se indica en la prueba de Conte- (7 en 100) y recoger el eluato.,. ,
nido de Alina. Adsorbente: Capa de gel de s1hce para cromatograf1a
Solucin muestra: Incubar 200 mg de Extracto en de 0,25 mm, por lo regular de 20 cm de longitud (pla-
Polvo con 20 mL de agua a temperatura ,ambien~e du- cas para TLC)
rante 5 minutos. Inmediatamente despues de la incuba- Volumen de aplicacin: 5 L , .
cin, agregar 80,0 mL de Solucin inhibidora de aliinasa, Fase mvil: Acetato de etilo, metano!, acetona, ac1do
mezclar y centrifuga_r; , . ., actico glacial y agua (10:4:3:1_:3)
Criterios de aceptac1on: El area del Pl\O de al11n~ de la Solucin reveladora: Yodoplat1nato SR
Solucin muestra es no ms de 1 % del area del pico de Anlisis
alina de la Solucin estndar. Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
DETERMINACIN DE ALCOHOL, Mtodo 11 (611): No ms de
Desarrollar los cromatogramas en una cmara saturada
hasta que el frente de la fase mvil haya recor~ido
0,5J'o , . aproximadamente tres cuartos de la placa. Retirar la
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Contentdo de Agua (561):
No ms de 5,0% placa y dejar que la fase mvil se evapore. Rociar con
OTROS REQUISITOS: Cumple con los req~isitos en ~xtractos
Solucin reveladora y observar la placa.
Botnicos (565), Envasado y Almacenamiento y Residuos de Criterios de aceptacion: El croi:natograma de la ~olu
Plaguicidas. cin muestra presenta entre vanas manchas amarillas
sobre la placa prpur~, una mancha am_arilla a un valor
REQUISITOS ADICIONALES . Rr de aproximadamente 0,4 correspondiente al de la
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases Im- mancha amarilla obtenida en el cromatograma de la
permeables, en un lugar fresco. Proteger de_ la 1,u_z. Solucin estndar (presencia de S-alil-L-cistena).
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre c1ent1f1co en
COMPOSICIN ,
latn y despus de la denominaci~ oficia~ la parte ~e la
CONTENIDO DE S-ALIL-L-CISTEINA
planta a partir de la que se preparo el a~~1culo. La eti-
queta tambin indica el contenido .~e al11na, el disolvente Fase mvil: Transferir 15,8 g de citrato de sodio dihi-
o mezcla de disolventes de extracc1on usados para la pre- drato a 250 mL de agua y agregar cuidadosamente .
paracin y la relacin entre el material vegetal c~~do ini- 1 O 5 mL de cido clorhdrico. Con ayuda de un medi-
cial y el Extracto en Polvo. Cumple con los requ1s1tos en do~ de pH, ajustar con hidrxido de sodio 6 N a un pH
Extractos Botnicos (565), Etiquetado. de 4,0. Diluir con agua hasta 1 000 mL y mezclar.
ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11)
Reactivo de derivatizacin: Disolver 0,8 g de o-ftalal-
ER Alina USP dehdo en 2 mL de 2-mercaptoetanol. Agregar a una
ER L-Metionina USP solucin que contenga 24,70 g de cido brico y
22, 35 g de hidrxido de potasio en 1000 mL de agua, y
mezclar.
Solucin de reactivacin: Hidrxido de sodio 0,2 N.
Preparar disolviendo 0,8 g de hidrxido de sodio en
1 00 mL de agua. . . ,
Extracto Fluido de Ajo Solucin estndar: 0,01 mg/mL de ER S-Alil-L-mteina
USP en agua
DEFINICIN Solucin muestra: Transferir aproximadamente 2,0 g
El Extracto Fluido de Ajo se prepara segn se indica a. conti- de Extracto Fluido, pesados con exactitud, a un matraz
nuacin. Empapar 1000 g de Ajo, entero o en roda1as, en volumtrico de 100 mL, diluir con solucin de cido tri-
un volumen de una mezcla de agua y alcohol (entre cloroactico (5 en 1 00) a volumen y mezclar. Centrifu-
80:20 y 50:50) suficiente para cubrir los dientes. Almace- gar durante 5 minutos y filtrar el sobrenadante.
nar en un envase adecuado durante un periodo suficiente Sistema cromato9rfico
para extraer los componentes, evitando _cualquier conta- (Ver Cromatograf1a \621 ), Aptitud del Sistema.)
minacin, y luego filtrar. Conc,entrar el fdtrado, s1 fuera Modo: HPLC
necesario, a la temperatura mas ba1a posible y agregar Detector: Fluoromtrico; longitud de onda de excita-
suficiente agua o alcohol para que el producto alcance cin de 340 nm y longitud de onda de emisin de
1 000 ml. [NOTA-Completar la extraccin puede tomar 455 nm
30 das.] Columna: 4,6 mm x 12 cm; relleno L1 7
Temperatura de la columna: 40'"
Volumen de inye~cin: 1 O L_ _ . .,
[NOTA-La Fase movil y la Soluoon de react1vac1on se
bombean por separado, cada una a una velocidad de
0,4 ml/min, usando bombas conectadas a los brazos
6304 Ajo / Suplementos Dietet1cos USP 38

opuestos de una T. La saliua Je la T se conecta al


inyector y a la columna cromatogrfica. Conectar la ,
salida de la columna a una T, cuyo brarn opuesto esta Ajo, Tabletas de Liberacin Retardada
conectado a un tubo desde el cual se bombea cons-
tantemente el Reactivo de derivatizacin a travs del DEFINICIN
sistema a una velocidad de 0,6 ml/min. Conectar la Las Tabletas de Liberacin Retardada de Ajo se preparan a
salida de la Ta un espiral de reaccin de tefln post- partir de Ajo en Polvo o Extracto en, Polvo de Ajo y con-
columna, de 0,5 mm x 2,0 m, mantenida a 40. Co- tienen no menos de 90,0% y no mas de 140,0% de la
nectar la salida del espiral de reaccin al detector. Pro- cantidad declarada de alina (C0H11NOiS) y no menos de
gramar el sistema para que administre la Fase mvil 90,0% y no ms de 140,0% de la cantidad declarada de
durante 1 O minutos, la Solucin de reactivacin durante alicina potencial (C6H100S2).
los siguientes 6 minutos y la Fase .m.vil durante 1.~s 24 IDENTIFICACIN , ,
minutos remanentes antes de la s1gu1ente inyecc1on.] A. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR CROMATOGRAFIA EN CAPA
Aptitud del sistema DELGADA
Muestra: Solucin estndar Solucin estndar A: 0,5 mg/mL de ER L-Metionina
Requisitos de aptitud USP
Factor de capacidad (k'): 2,5-4,5 Solucin estndar B: 0,5 mg/ml de ER Alina USP, en
Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de una mezcla de metano! y agua (1 :1)
S-alil-L-cistena Solucin muestra: Transferir una cantidad de Tabletas
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para reducidas a polvo, equivalente a 30 mg de alina, a un
el pico de S-alil-L-cistena en inyecciones repetidas matraz volumtrico de 100 ml. Agregar 70 mL de una
Anlisis mezcla de metanol y agua (1 :1 ), agitar y centrifugar.
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra Concentrar hasta un volumen pequeo (aproximada-
Calcular el porcentaje de S-alil-L-cistena (C6H11SN) en la mente 5 ml) usando un evaporador rotatorio.
porcin de Extracto Fluido tomada: Sistema cromato9rfico
(Ver Cromatografw (621 ), Cromatografa en Capa Del-
Resultado= (ru/rs) x C1 x (V/11\1) x 100
gada.)
ru = altura del pico de S-alil-L-cistena de la Solucin Volumen de aplicacin: 20 L, aplicados por separado
muestra en bandas de 1O mm
r5 = altura del pico de S-alil-L-cistena de la Solucin Fase mvil: Alcohol butlico, alcohol n-proplico, cido
estndar actico glacial y agua (3:1 :1 :1) . . .
Cs = concentracin de ER S-Alil-L-cistena USP en la Solucin reveladora: 2 mg/ml de ninh1dnna en una
Solucin estndar (mg/ml) mezcla de alcohol butlico y cido actico 2 N (19:1)
V = volumen de Solucin muestra (ml) Anlisis
W = peso de Extracto Fluido usado para preparar la Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra
Solucin muestra (mg) Proceder segn se indica en el captulo. Rociar con
Criterios de aceptacin: No menos de 0,05% con res- Solucin reveladora, calentar a 100-l 05 durante 1 O
pecto a la materia seca minutos y observar la placa inmediatamente.
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
CONTAMINANTES cin muestra presenta las siguientes zonas de color ana-
ranjado y violeta rosado: una zona violeta con un valor
Rf de 0,89; una zona rosada con un valor RF d~ 0,5 y
Eliminar lo siguiente: que corresponde en color y valor R1 a la obtenida del
cromatograma de la Solucin estndar A; una zona ro-
METALES PESADOS, Mtodo 11 {231): No ms de sada con un valor Rr de 0,43; una zona anaranjada in-
1O ppm (Oficial Ol -dic-2015) tensa con un valor RF de 0,38; una zona violeta rosada
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- con un valor RF de 0,3 y que corresponde en color y
tal de microorganismos aerobios no excede de .10 3 ufc/ valor Rf a la del cromatograma de la Solucin estndar
ml, y el recuento total combinado de hongos filamento- B; y zonas adicionales de color anaranjado rosado ubi-
sos y levaduras no excede de 10 2 ufs:/mL. cadas muy cerca una de otra justo por debajo de la
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum- zona atribuida a alina en el cromatograma de la Solu-
plen con los requisitos de las prueba.s para determinar la cin estndar B.
ausencia de Salmonella spp. y Eschenchw coll. B. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR HPLC
Anlisis: Proceder segn se indica en la prueba de Con-
PRUEBAS ESPECFICAS
tenido de Alina .
RESIDUO DE EVAPORACIN: Proceder segn se indica en Criterios de aceptacin: La .solucin muestra pre.senta
Extractos Botnicos (565): No menos de 20% de la por- un pico de alina_correspond1ente .~no d~ los picos del
cin de Extracto Fluido tomada permanece como par de diasteroisomeros de la SoluC1on estandar.
residuo .
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Totales (561): CONTENIDO
No ms de 3,0% , CONTENIDO DE ALINA
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Insolubles en Acido Solucin inhibidora de aliinasa: Disolver 1 09 mg de
(561) No ms de 0,2% hemiclorhidrato de carboximetoxilamina en 1 00,0 mL
PH (791): 4,5-6,5 de agua. , .
OTROS REQUISITOS: Cumple con los requisitos de Extractos Solucin A: Disolver 1,24 g de fosfato monobas1co de
Botnicos (565/, Requisitos Farmacopeicos Generales, sec- sodio en 1 00 ml de agua, ajustar con hidrxido de so-
ciones de Envasado y Almacenamiento, Etiquetado, Resi- dio 0,2 M a un pH de 7, 1 y diluir con agua hasta
duos de Plaguicidas y Contenido de Alcohol para Extractos 200,0 ml.
Lquidos. Solucin amortiguadora: Disolver 1,38 g de fosfato
monobsico de sodio en 100 ml de agua, aiustar con
REQUISITOS ADICIONALES hidrxido de sodio 0,2 M a un pH de 9,5 y diluir con
ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11) agua hasta 200,0 ml.
ER S-Alil-L-cistena USP Reactivo de derivatizacin: Disolver 140 mg de o-ftal-
dialdehdo en 5 ml de metanol, agregar 100 L de t-
USP 38 Suplementos Dietticos /Ajo 6305

butiltiol y diluir con Solucin amortiguadora hasta Diluir con agua a volumen y pasar a travs de un filtro
50 ml. [NOTA-Este reactivo puede tornarse ocasional- con un tamao de poro de 0,45 m o menor.
mente opaco durante la preparacin. Almacenar a tem- Solucin muestra: Transferir el equivalente a 5 mg de
peratura ambiente y usar denlro de ia primera ~emana.] aiiuna polenciai, a par lir Je ai.Jiela~ reJuciJa~ a polvu
Fase mvil: Acetonitrilo, 1,4-dioxJno, tetrJhidrofurano fino (no menos de 20), a un matraz volumtrico de
y Solucin A (25: 2,9: 2.2: 69,9) 200 ml y agregar 25 ml de agua. Incubar a tempera-
Solucin estndar: 0,05 mg/ml de ER Alina USP en tura ambiente durante exactamente 30 minutos. Dete-
una mezcla de metano! y agua (1: 1) Con una jeringa, ner la reaccin enzimtica diluyendo con Solucin inhibi-
transferir O, 1 ml de esta solucin a un vial con tapa de dora de aliinasa a volumen. Centrifugar una porcin de
septo y agregar 0,5 ml del Reactivo de derivatizacin. esta solucin, transferir 1,0 ml del sobrenadante a un
Permitir un tiempo de reaccin de no menos de 2 mi- matraz volumtrico de 5 ml y diluir con agua a
nutos antes de inyectar en el cromatgrafo. volumen.
Solucin muestra: Pulverizar un nmero contado de Solucin blanco: 1 00 L de Solucin de aliinasa cruda
Tabletas, equivalente a 50 mg de alina, con un mortero diluida con agua hasta 1 ml.
y mano de mortero. Transferir una cantidad de polvo, Sistema cromato9rfico
equivalente a 5 mg de alina, a un matraz volumtrico (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
de 100 ml. Agregar 70 ml de Solucin inhibidora de alii- Modo: HPLC
nasa y agitar durante 1 minuto. Diluir con Solucin inhi- Detector: UV 240 nm
bidora de aliinasa a volumen. Con una jeringa volum- Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1
trica, transferir O, 1 ml de esta solucin a un vial con Velocidad de flujo: 1 ml/min
tapa de septo y agregar 0,5 ml del Reactivo de derivati- Volumen de inyeccin: 1 00 L
zacin. Permitir un tiempo de reaccin de no menos de Aptitud del sistema
2 minutos antes de inyectar en el cromatgrafo. Muestras: Solucin estndar, Solucin muestra y Solu-
Sistema cromato9rfico cin blanco
(Ver Cromatograf10 (621 ), Aptitud del Sistema.) [NOTA-El pico de alicina se identifica comparando los
Modo: HPLC cromatogramas de la Solucin blanco y la Solucin
Detector: UV 337 nm estndar.)
Columna: 4 mm x 1 O cm; relleno L1 Requisitos de aptitud
Velocidad de flujo: 1 ml/min Resolucin: No menos de 2,0 entre el pico de alicina
[NOTA-La alina presenta dos picos principales que re- y el pico precedente a un tiempo de retencin rela-
presentan sus diasteremeros.] tivo de 0,80 (tiosulfinatos de alil metilo), Solucin
Volumen de inyeccin: 1 O L muestra
Aptitud del sistema Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%
Muestra: Solucin estndar Anlisis
Requisitos de aptitud Muestras: Solucin estndar, Solucin muestra y Solu-
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para cin blanco
cada uno de los picos principales Calcular el porcentaje de alicina potencial en la por-
Anlisis cin de Tabletas tomada:
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
[NOTA-Registrar los cromatogramas y medir las reas Resultado= (ru/r,) x (Cs/(,) x (Mc1/M,2) x 100
de los picos de diasteremeros de alina.]
Calcular el porcentaje de alina en la porcin de Table- ru = rea del pico de alicina de la Solucin muestra
tas tomada: corregida por la respuesta de la Solucin
blanco
Resultado= (ru/rs) x (Cs/Cu) x 100 r5 = rea del pico de alicina de la Solucin estndar
corregida por la respuesta de la Solucin
ru = rea del pico de alina de la Solucin muestra blanco
rs = suma de las reas de los picos de Cs = concentracin de ER Alina USP en la Solucin
diasteremeros de alina de la Solucin estndar (g/ml)
estndar Cu = concentracin nominal de alicina potencial en
Cs = concentracin de ER Alina USP en la Solucin la Solucin muestra (g/ml)
estndar (g/ml) M,, = peso molecular de alicina, 162,26
Cu = concentracin nominal de alina en la Solucin M2 = dos veces el peso molecular de alina, 354,42
muestra (g/ml) Criterios de aceptacin: 90,0%-140,0%
Criterios de aceptacin: 90%-140,0%
CONTENIDO DE ALICINA POTENCIAL PRUEBAS DE DESEMPEO
Solucin inhibidora de aliinasa: Disolver 1 09 mg de LIBERACIN DE ALICINA: Proceder segn se indica en Diso-
hemiclorhidrato de carboximetoxilamina en 100,0 ml lucin (711) para el Mtodo A en Aparato 1 y Aparato 2,
de agua. Formas Farmacuticas de Liberacin Retardada. Colocar un
Solucin de aliinasa cruda: Homogeneizar 5 g de dien- nmero de Tabletas, equivalente a 5 mg de alicina poten-
tes de ajo crudos con 25 ml de agua. Filtrar y extraer cial, en cada vaso.
tres veces con 50 ml de terc-butil metil ter. Desechar Aparato 2: 1 00 rpm
la fase orgnica y retirar el disolvente residual de la fase Tiempo: 60 minutos para la Etapa amortiguada
acuosa mediante evaporacin rotatoria al vaco durante Solucin de aliinasa cruda, Fase mvil, Solucin
5 minutos. Filtrar y almacenar congelada en viales pe- blanco y Sistema cromatogrfico: Proceder segn se
queos. [NOTA--Esta solucin es estable durante 6 me- indica en la prueba de Contenido de Alicina Potencial.
ses cuando se almacena segn se indica. Descongelar a Solucin madre del estndar: 50 g/ml de ER Alina
temperatura ambiente justo antes de su uso.] USP
Fase mvil: Metano! y agua (3:2) Solucin estndar: Transferir 1,0 ml de la Solucin ma-
Solucin madre del estndar: 50 g/ml de ER Alina dre del estndar a un matraz volumtrico de 5 ml que
USP contenga 100 L de Solucin de a!iinasa cruda y dejar
Solucin estndar: Transferir 1,0 ml de la Solucin ma- en reposo durante 5 minutos a temperatura ambiente.
dre del estndar a un matraz volumtrico de 5 mL que Diluir con agua a volumen y pasar a travs de un filtro
contenga 1 00 L de Solucin de aliinasa cruda y dejar de membrana con un tamao de poro de 0,45 m o
en reposo durante 5 minutos a temperatura ambiente. menor.
6306 Ajo / Suplementm Dietticos USP 38

Solucin muestra: TransfPrir 1,0 mi dP la 5olucin en ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11)


anlisis a un tubo Je emayo que contenga 50 L de ER Alina USP
solucin de hemiclorhidrato de carboximeloxilamina ER L-Metionina USP
0,21 M.
[NOTA-La solucin debe transferirse inmediatamente
una vez retirada del vaso de disolucin para inhibir la
enzima aliinasa.]
Volumen de inyeccin: l 00 L L-Alanil-t-glutamina
Anlisis
[NOTA-No llevar a cabo la determinacin de alicina en
la Etapa cida.] 'J
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra OH

Calcular el porcentaje de alicina potencial liberada en o


la Etapa amortiguada:
NH,

Resultado= (ru/rs) x (C x O x V/L) x (Mc1/M2) x 100


CsH1sN104 217,23
ru = rea del pico de alicina de la Solucin muestra L-2-(1-0xo-2-amino-propylamino)-4-amino-4-oxobutanoic
rs = rea del pico de alicina de la Solucin estndar acid
Cs = concentracin de ER Alina USP en la Solucin cido L-2-(l -oxo-2-am ino-propilamino )-4-am ino-4-oxobuta-
estndar (g/mL) noico [39537-23-0).
O = factor de dilucin de la Solucin muestra,
1,050 (1 mL de la Solucin muestra + 50 L DEFINICIN
de solucin de hemiclorhidrato de La L-Alanil-L-glutamina contiene no menos de 98,0% y no
carboximetoxilamina 0,21 M) ms de 101,5% de L-alanil-L-glutamina (CsH1sNi04), cal-
V = volumen de medio final, 1000 mL culado con respecto a la sustancia anhidra y exenta de
L = cantidad declarada de alicina potencial disolventes, y excluyendo alanina y glutamina.
(g/Tableta)
M,1 = peso molecular de alicina, 162,26 IDENTIFICACIN
M,1 = dos veces el peso molecular de alina, 354,42 A. ABSORCIN EN El INFRARROJO (197A) ,
Tolerancias: Cumplen con los requisitos de la Tabla de B. Cumple con los requisitos de Rotacin Optica, Rotacin
Aceptacin 4 en Disolucin (711 ). LNOTA-Q es el por- Especfica (781 S) en Pruebas Especficas.
centaje de la cantidad declarada de alicina potencial li-
berad51 nicamente en la Etapa amortiguada.] VALORACIN
VARIACION DE PESO (2091 ): Cumplen con los requisitos. PROCEDIMIENTO
Muestra: 300 mg
PRUEBAS ESPECFICAS Blanco: Mezclar 5 mL de cido frmico con 50 mL de
ACTIVIDAD DE ALllNASA cido actico glacial.
Solucin inhibidora de aliinasa, Solucin A, Solucin Sistema volumtrico
amortiguadora, Reactivo de derivatizacin, Fase m- (Ver Volumetra (541 ).)
vil, Solucin estndar y Sistema cromatogrfico: Modo: Valoracin directa
Proceder segn se indica en la prueba de Contenido de Solucin volumtrica: Acido perclrico O, 1 N SV
Alina. Deteccin del punto final: Potenciomtrica
Solucin muestra: Transferir el equivalente a 5 mg de Anlisis: Disolver la Muestra en 5 mL de cido frmico,
alina, a partir de Tabletas reducidas a polvo fino (no agregar 50 mL de cido actico glacial y valorar con la
menos de 20), a un matraz volumtrico de 100 mL y Solucin volumtrica. Realizar una determinacin con el
agregar 25 mL de agua. Incubar a temperatura am- Blanco y hacer las correcciones necesarias.
biente durante exactamente 5 minutos. Detener la reac- Calcular el porcentaje de L-alanil-L-glutamina
cin enzimtica diluyendo con Solucin inhibidora de (CsH1sN14) en la Muestra tomada:
aliinasa a volumen. Centrifugar una porcin de esta so-
lucin y usar una jeringa volumtrica para transferir Resultado1 = [(Vs - Vs) x N x (F/W)) x 100
O, 1 mL del sobrenadante a un vial con tapa de septo.
Agregar 0,5 mL del Reactivo de derivatizacin y permitir Vs = volumen de la Solucin volumtrica consumida
un tiempo de reaccin de no menos de 2 minutos an- por la Muestra (mL)
tes de inyectar en el cromatgrafo. Vs = volumen de la Solucin volumtrica consumida
Anlisis por el Blanco (mL)
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra N = normalidad real de la Solucin volumtrica
Proceder segn se indica en la prueba de Contenido de (mEq/mL)
Alina. F =factor de equivalencia, 217,2 mg/mEq
Criterios de aceptacin: El rea del pico de alina de la W "' peso de la Muestra (mg)
Solucin muestra es no ms de 1% del rea del pico de Calcular el porcentaje de L-alanil-L-glutamina
alina de la Solucin estndar. (CsH 11N i4) en la Muestra tomada, excluyendo alanina
y glutamina:
REQUISITOS ADICIONALES
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases Resultado:= [(Resultado; - a - b)]/[(l 00 - Ala - Gin)] x
impermeables. 100
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
latn y despus de la denominacin oficial, el artculo a
partir del que se prepararon las Tabletas. Etiquetar indi-
cando la cantidad de alina total, en g/Tableta, y la can-
tidad de alicina potencial, en g/Tableta.

Ala = porcentaje de alanina a partir de la prueba de


Compuestos Relacionados
LJSP 38 Suplt>t11t>11t<i\ Dit>tt'ticos / Alanil 6 30 7

Gin = porcentJjc de glutJmina J partir de la prueba V = volumen de la Solucin muestra (ml)


de eompt!PS(O\ Relacionados C = concentracin de iones amonio en la Soluc1on
M;1 = peso molecular de L-alanil-L-glutamina, 21 7,2 muestra, determinada a partir de la Linea de
M/ = peso molecular de alanina, 89, 1 respuesta aei estandar tg;mL)
M; ~ peso molecular de glutamina, 146, 1 W = peso de 1-Alanil-1-glutamina tomada para
Criterios de aceptacin: 98,0%-101,5% con respecto preparar la Solucin muestra (g)
a la sustancia anhidra y exenta de disolventes, y exclu- Criterios de aceptacin: No ms de 200 g/g
yendo alanina y glutamina COMPUESTOS RELACIONADOS
Solucin amortiguadora: Disolver 6,84 g de fosfato
IMPUREZAS monobsico de potasio en 1000 mL de agua.
RESIDUO DE INCINERACIN (281 ): No ms de o, 1% Fase mvil: Acetonitrilo y Solucin amortiguadora
CLORUROS V SULFATOS, Cloruros (221) (650:350)
Muestra: 0,89 g Solucin de aptitud del sistema: Transferir 25 mg de
Solucin estndar: 0,50 mL de cido clorhdrico 0,01 O ER L-Alanil-L-glutamina USP y 5 mg de ER L-Alanil-L-ala-
N nina USP a un matraz volumtrico de 25 ml y diluir
Criterios de aceptacin: No ms de 200 g/g con agua a volumen. Transferir 1,0 ml de esta solucin
CLORUROS V SULFATOS, Sulfatos (221) a un matraz volumtrico de 1 O ml y diluir con Fase
Muestra: 0,98 g mvil a volumen.
Solucin estndar: 0,20 mL de cido sulfrico 0,01 O N Solucin estndar 1: 0,025 mg/ml de ER L-Alanina USP
Criterios de aceptacin: No ms de 200 g/g en Fase mvil
HIERRO (241): No ms de 1 o g/g Solucin estndar 2: O, 1 mg/ml de ER Glutamina USP
DISOLVENTES RESIDUALES (467) en Fase mvil
Criterios de aceptacin Solucin muestra: 2,5 mg/ml de L-Alanil-L-glutamina
lsopropanol: No ms de 0,5% en Fase mvil
[NOTA-Para los Criterios de aceptacin de cualquier otro Sistema cromato9rfico
disolvente residual, ver Disolventes Residuales (467).] (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
LMITE DE AMONIO Modo: HPLC
Solucin madre del estndar: Disolver 1,486 g de clo- Detector: UV 215 nm
ruro de amonio en 500,0 mL de agua. Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L8 de 5 m
Soluciones estndar de calibracin: Transferir 0,01; Velocidad de flujo: 0,7 mL/min
O, 1; 1,0 y 10,0 mL de Solucin madre del estndar a Volumen de inyeccin: 20 L
sendos matraces volumtricos de 100 mL y diluir con Aptitud del sistema
agua a volumen. Las concentraciones finales son O, 1; 1; Muestra: Solucin de aptitud del sistema
1 O y 100 g/mL de iones amonio (NH4+), [NOTA-Los tiempos de retencin relativos para L-alanil-
respectivamente. L-alanina y L-alanil-L-glutamina son 0,86 y 1,0,
Solucin muestra: Transferir 1,0 g de L-Alanil-L-gluta- respectivamente.]
mina a un vaso de precipitados de 150 mL que con- Requisitos de aptitud
tenga una barra mezcladora recubierta de plstico, Eficiencia de la columna: No menos de 8000 platos
agregar 100,0 mL de agua y mezclar hasta disolver. tericos para el pico de L-alanil-L-glutamina
Sistema de electrodos: Usar un electrodo indicador, Resolucin: No menos de 2,0 entre L-alanil-L-gluta-
detector de gases, especfico para amonaco con refe- mina y L-alanil-L-alanina
rencia interna conectado a un medidor de pH capaz de Anlisis
medir los potenciales con una reproducibilidad mnima Muestras: Solucin estndar 1, Solucin estndar 2 y
de 0, 1 mV (ver pH (791 )). Acondicionar el electrodo Solucin muestra
de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Calcular el porcentaje de alanina y glutamina en la por-
Anlisis cin de la Muestra tomada:
Lnea de respuesta del estndar: Transferir 100 mL
de agua a un vaso de precipitados de 150 mL que Resultado= (ru/rs) x (Cs/Cu) x 100
contenga una barra mezcladora recubierta de plstico,
insertar el electrodo en el agua, mezclar y medir el ru = respuesta del pico de alanina o glutamina de
potencial. Agregar 1 mL de solucin de hidrxido de la Solucin muestra
sodio 1O N, mezclar y medir el potencial despus de la rs = respuesta del pico de alanina de la Solucin
estabilizacin (aproximadamente 3 minutos). La dife- estndar 7 o glutamina de la Solucin
rencia de potencial debe ser inferior a 20 mV. Transfe- estndar 2
rir 100,0 mL de cada una de las Soluciones de calibra- Cs = concentracin de ER L-Alanina USP en la
cin estndar (O, 1; 1; 1O y 100 g/mL de iones Solucin estndar 7 (mg/ml) o concentracin
amonio) a sendos vasos de precipitados de 150 mL y de ER Glutamina USP en la Solucin estndar
agregar 1 ml de hidrxido de sodio 1 O N. Insertar el 2 (mg/ml)
electrodo en cada solucin, mezclar y medir el poten- Cu = concentracin de L-Alanil-L-glutamina en la
cial despus de la estabilizacin (aproximadamente 3 Solucin muestra (mg/ml)
minutos). Graficar una curva (cuatro puntos de calibra- Calcular el porcentaje de cualquier otra impureza
cin) del potencial (mV) en funcin de las concentra- especificada y no especificada en la porcin de la
ciones de in amonio (g/ml). Muestra tomada:
Muestra: Solucin muestra
Enjuagar el electrodo, insertarlo en la Solucin muestra, Resultado = (ru/rr) x 100
agregar 1 ml de hidrxido de sodio 1 O N y mezclar.
Verificar el pH, que debe ser superior a 11; si no fuera ru = respuesta del pico de cada impureza individual
as, ajustar con hidrxido de sodio 1 O N. Despus de rr = suma de las respuestas de todos los picos,
3 minutos, medir el potencial y determinar la conce- excluyendo las respuestas de los picos de
tracin de in amonio correspondiente, a partir de la alanina y glutamina
curva de calibracin. Criterios de aceptacin: Ver la Tabla 7.
Calcular el contenido de amonio en la porcin de la
Muestra tomada:

Resultado= (V x C)/W
6308 Alanil /Suplementos Dietticos USP 38

Tabla 1 Fase mvil: Una mezcla de acetato de etilo, cido fr-


Tiempo de Criterios de
mico y agua (15:1: 1)
Retencin Aceptacin
Distancia de desarrollo: 6 cm
Nombre Relativo No ms de too)
Reactivo de derivatizac1n A: ::io1uc1on de d1tenilbori-
nato de 2-aminoetilo de S mg/mL en acelalo de elilo
Ciclol dld-aln) o 27 02 Reactivo de derivatizacin B: Solucin de polietilen-
Alanina o 55 1o glicol 400 de 50 mg/mL en diclorometano
Glutamina o 59 05 Anlisis
Ala-dla-Clln 1 10 03 Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar 8 y
Ala-ni u 2 20 02 Solucin muestra
Cualquier impureza no es-
Aplicar las Muestras en bandas a una placa para croma-
necificada - o1 tografa en capa delgada de alta resolucin adecuada y
secar al aire (ver Cromato9rafa (621 )). Desarrollar los
Impurezas no especificadas
cromatogramas en una camara saturada, retirar la
totales - _fil_ placa de la cmara y secar al aire. Calentar la placa a
100 durante 3 minutos, derivatizar la placa mientras
PRUEBAS ESPECFICAS est tibia con Reactivo de derivatizacin A y secar al
ROTACIN PTICA, Rotacin Especfica (781 S) aire. Luego, derivatizar con Reactivo de derivatizacin 8,
Solucin muestra: 50 mg/mL en agua. Realizar la me- secar al aire y observar bajo luz UV a 366 nm.
dicin a 20. Aptitud del sistema: El cromatograma de la Solucin
Criterios de aceptacin: +9,0 a + 11,0 estndar 8 presenta, en el tercio superior, una banda de
DETERMINACIN DE AGUA, Mtodo la (921): No ms de color azul fluorescente que corresponde a la banda de-
1,0% bida a cido rosmarnico en el cromatograma de la So-
lucin estndar A, y una banda de color azul fluores-
REQUISITOS ADICIONALES cente menos intensa directamente sobre la banda
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im- debida a cido rosmarnico, correspondiente a cido ca-
pe~meables, bien cerrados y resistentes a la luz. feico, y una banda de color rojo por encima de la
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) banda de cido cafeico. Las bandas debidas a cido ros-
ER L-Alanina USP marnico y cido cafeico estn claramente separadas. El
ER L-Alanil-L-alanina USP cromatograma de la Solucin estndar 8 tambin pre-
ER L-Alanil-L-glutamina USP senta la banda ms intensa, una banda de color na-
ER Glutamina USP ranja, en el tercio inferior del cromatograma; y dos ban-
das de color verdoso en el tercio medio del
cromatograma.
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
cin muestra presenta las siguientes bandas correspon-
Alanina-ver Alanina en Monografas dientes a bandas similares en el cromatograma de la
Solucin estndar 8: una banda de color azul fluores-
Generales cente a un valor R1 correspondiente a la banda de cido
rosmarnico; una banda de color azul fluorescente me-
nos intensa a un valor R1 por encima del de la banda de
cido rosmarnico, correspondienLe a cido cafeico; una
Hojas de Albahaca Santa banda de color rojo por encima de la banda de cido
cafeico; una banda de color rojo en el frente de la fase
DEFINICIN mvil debida a clorofila; dos bandas de color verdoso
Las Hojas de Albahaca Santa consisten en las hojas secas de en el tercio medio del cromatograma; y la banda ms
Ocimum tenuiflorum L. (Fam. Lamiaceae). Contienen no intensa, una banda de color anaranjado, con una banda
menos de 0,5% de triterpenos, calculados como la suma de color azul justo por encima en el tercio inferior del
de cido oleanlico y cido urslico, con respecto a la cromatograma (a diferencia de hojas de salvia, hojas de
materia seca. tomillo, hojas de albahaca y hojas de organo, todas las
cuales presentan dos bandas de color anaranjado en el
IDENTIFICACIN tercio inferior del cromatograma; y las hojas de blsamo
A. Las Hojas de Albahaca Santa cumplen con los requisi- de melisa que carecen de esta banda). La Solucin
tos de Pruebas E,specficas, Caractersticas Botnicas. muestra no presenta bandas de color anaranjado amari-
B. CROMATOGRAFIA EN CAPA DELGADA llento en la seccin media del cromatograma (a diferen-
Solucin estndar A: 0,5 mg/mL de ER cido Rosmar- cia de hojas d~ romero y hojas tomillo).
nico USP en metano! C. CROMATOGRAFIA EN CAPA DELGADA ,
Solucin estndar B: 1 O mg/mL de ER Extracto en Solucin estndar A: 0,2 mg/mL de ER Acido Urslico
Polvo de Albahaca Santa USP en metano! USP en metano!
Solucin muestra: Someter a ultrasonido aproximada- Solucin estndar B: 1,0 mg/ml de eugenol en
mente 1 g de Hojas de Albahaca Santa, reducidas a metano!
polvo fino, en 1 O mL de metano! durante 1 O minutos, Solucin estndar C: 1,0 mg/ml de metileugenol en
centrifugar y usar el sobrenadante. [NOTA-Reservar una metano!
porcin del sobrenadante para la prueba de Identifica- Solucin estndar D: 1 O mgiml de ER Extracto en
cin C.] Polvo de Albahaca Santa USP en metano!
Sistema cromatogrfico Solucin muestra: Usar la solucin preparada en la
Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatogra- prueba de Identificacin 8.
fa con un tamao promedio de part1cula de 5 m Sistema cromatogrfico
(placas para HPTLC) Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatogra-
Volumen de aplicacin: 2 L de Solucin estndar A, fa con un tamao promedio de partcula de 5 m
4 L de Solucin estndar 8 y 8 L de Solucin muestra, (placas para HPTLC)
en bandas de 8 mm Volumen de aplicacin: 2 L de Solucin estndar A,
Humedad relativa: Acondicionar la placa a una hume- de Solucin estndar 8 y de Solucin estndar C, 4 L
dad relativa de aproximadamente 33% usando un dis- de Solucin estndar O y 8 L de ')olucion muestra en
positivo adecuado. bandas de 8 mm
LJSP 38 Suplementos Diettico~ /Albahaca \anta 6309

Humedad relativa: Acondicionar la placa a una hume- pasar a travs de un filtro de membrana con un tamao
dad relativa de aproximadamente 33% usando un dis- de poro de 0,45 m o menor, desechando los primeros
positivo adecuado. mL del filtrado.
1-ase mvil: Una meLcid de toiue11u y dLelcu Jt etilo Sistema cromatogrfico
(85:15) (Ver Cromatograf1a (621 ), Artitud del Sistema.)
Distancia de desarrollo: 6 cm Modo: HPLC
Reactivo de derivatizacin: Colocar 85 mL de meta- Detector: UV 205 nm
no! en un frasco de vidrio de 100 mL y enfriar en un Columna: 3,0 mm x 1 O cm; relleno L1 de 2,5 m
bao de agua con hielo y sal o en un congelador. Velocidad de flujo: O, 3 ml/min
Agregar lenta y cuidadosamente 1 O mL de cido ac- Volumen de inyeccin: 5 L
tico y 5 mL de cido sulfrico al metano! helado y Aptitud del sistema
mezclar bien. De/ar que la mezcla se enfre a tempera- Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B
tura ambiente y uego agregar 0,5 mL de p- Requisitos de aptitud
anisaldehdo. Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
Anlisis de la Solucin estndar B es similar al cromatograma
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B, So- de referencia provisto con el lote de ER Extracto en
lucin estndar C, Solucin estndar O y Solucin Polvo de Albahaca Santa USP usado.
muestra Resolucin: No menos de 1,3 entre los picos de
Aplicar las Muestras en bandas a una placa para croma- cido oleanlico y cido urslico, Solucion estndar B
tografa en capa delgada de alta resolucin adecuada y Desviacin estndar relativa: No ms de 2% para el
secar al aire (ver Cromatografa (621 )). Desarrollar los P.ico de cido urslico, Solucin estndar A
cromatogramas en una camara saturada, retirar la Analisis
placa de la cmara, secar al aire, derivatizar la placa Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B y
con Reactivo de derivatizacin, calentar a 100 durante Solucin muestra
3-5 minutos, dejar que se enfre y observar bajo luz Usando los cromatogramas de la Solucin estndar A, la
visible. Solucin estndar By el cromatograma de referencia
Aptitud del sistema: La Solucin estndar A presenta provisto con el lote de ER Extracto en Polvo de Alba-
una banda de color violeta. La Solucin estndar B y haca Santa USP usado, identificar el tiempo de reten-
Solucin estndar C presentan cada una una banda ver- cin de los picos correspondientes a cido oleanlico y
dosa. La Solucin estndar O presenta una banda de cido urslico en el cromatograma de la Solucin
color prpura por encima de la banda de color verde muestra.
correspondiente a eugenol o metileugenol en la Solu- Calcular el porcentaje de triterpenos, cido oleanlico y
cin estndar o la Solucin estndar C. cido urslico en la porcin de Hojas de Albahaca
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- Santa tomada:
cin muestra presenta la banda ms intensa, una banda
de color violeta a un valor Rr correspondiente a la Resultado= (ru/rs) x Cs x (V/W) x 100
banda de cido urslico en el cromatograma de la Solu-
cin estndar A y la Solucin estndar O, y una banda de ru = suma de las reas de los picos de cido
color verdoso a un valor Rr correspondiente a la banda oleanlico y cido urslico de la Solucin
de eugenol o la banda de metileugenol en los cromato- muestra
gramas de la Solucin estndar B o la Solucin estndar rs = rea del pico de cido urslico de la Solucin
C. [NOTA-Las Hojas de Albahaca Santa pueden presen- estndar A
tarse en dos quimiotipos, uno caracterizado por la pre- C, = concentracin de cido urslico en la Solucin
sencia de eugenol y el otro por la presencia de estndar A (mg/mL)
metileugenol.] V =volumen de la Solucin muestra (mL)
D. HPLC W = peso de Hojas de Albahaca Santa tomadas
Anlisis: Proceder segn se indica en la prueba de Con- para preparar la Solucin muestra (mg)
tenido de Triterpenos. Criterios de aceptacin: No menos de 0,5%, con res-
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- pecto a la sustancia seca
cin muestra presenta dos picos a los tiempos de reten-
cin correspondientes a los picos de cido urslico y CONTAMINANTES
cido oleanlico de las Soluciones estndar. IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS (233)
Criterios de aceptacin
COMPOSICIN Arsnico: No ms de 1,0 g/g
CONTENIDO DE TRITERPENOS Cadmio: No ms de 0,5 g/g
Fase mvil: Una mezcla de acetonitrilo y una solucin Plomo: No ms de 5,0 g/g
de acetato de amonio de 2,5 mg/mL en 51gua (67:33) Mercurio: No ms de 1,0 g/g
Solucin estndar A: O, 1 mg/mL de ER Acido Urslico ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Mtodo General para An-
USP en metano!. Someter a ultrasonido, si fuera necesa- lisis de Residuos de Plaguicidas (561): Cumplen con los
rio, hasta disolver. requisitos.
Solucin estndar B: 4,0 mg/mL de ER Extracto en PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
Polvo de Albahaca Santa USP en metano!. Someter a tal de microorganismos aerobios no excede de 1 0 5 ufc/g;
ultrasonido, si fuera necesario, hasta disolver. Antes de el recuento total combinado de hongos filamentosos y
la inyeccin, pasar a travs de un filtro de membrana levaduras no excede de 1 0 3 ufc/g; y el recuento de bac-
con un tamao de poro de 0,45 m o menor. terias Gram negativas tolerantes a la bilis no excede de
Solucin muestra: Transferir aproximadamente 3,0 g 10 3 ufc/g. ,
de Hojas de Albahaca Santa, reducidos a polvo fino y AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum-
pesados con exactitud, a un matraz de fondo redondo plen con los requisitos de las pruebas para determinar la
de 100 mL equipado con un condensador de reflujo. ausencia de Salmonella spp. y Escherichia coli.
Agregar 50 mL de metano!, someter a reflujo en un
bao de agua durante 20 rninutm, enfriar a tempera- PRUEBAS ESPECFICAS
CARACTERSTICAS BOTNICAS
tura ambiente y decantar el sobrenadante. Repetir hasta
que el ltimo extracto sea incoloro. Combinar los ex- Macroscpicas: Las hojas son pecioladas; simples;
tractos, filtrar, concentrar al vaco y ajustar con metano! oblongo elpticas a elpticas; pice agudo u obtuso;
hasta un volumen de 100 mL. Antes de la inyeccin, margen serrado u ocasionalmente entero; base aguda u
631 O Albahaca Santa / SuplPmentos Dit>tticos USP 38

obtusa; pubescente, ms tricomas en la superficie infe-


rior alrededor de su nervadura central venas reticula-
df!S, ver~as ms prominentes en la sup'erficie inferior; pe-
Hojas de Albahaca Santa En Polvo
noln :i11nrlnc0, _ligeramente acanalado en !J superficie
superior, con tricomas. La superficie superior es de color DEFINICIN
verde; la s~perficie inferio_r es de color verde plido; Las Hojas de Albahaca Sant_a En Polvo consisten en las hojas
olor aromat1co caractenst1co. El artculo farmacopeico secas pulverizadas de Oc1mum tenudlorum L. (Fam. Lamia-
consi~te en hojas quebradizas, secas y de color verde
ceae). Contienen no meno;; de 0,5% ~~ triterpenos, cal-
amarillento. culados como la suma de ac1do oleanolico y acido urs-
Microscpicas lico, con respecto a la materia seca.
Seccin transversal de la hoja: La lmina es dorsiven- IDENTIFICACIN
tral; la epidermis superior y !a epidermis inferior, cada A. Las ~~jas de Albahaca Santfl En Polvo cumplen con
una con una so~a capa de celulas rectangulares cubier- los requ1s1tos de Pruebas Espeoficas, Caractersticas
tas c~m una cut1cula delgada, presentan gran cantidad Botnicas.
de tr~coma~ de recubrimiento y glandulares, ms sobre B. CROMATOGRAFA EN CAPA DELGADA
la ep1derm1s inferior; los tricomas de recubrimiento son Solucin estndar A: 0,5 mg/mL de ER cido Rosmar-
uniseriados, unicelulares a multicelulares a menudo nico USP en metano!
curvados, con clulas basales abultadas; '1os tricomas Solucin estndar B: 1 O mg/mL de ER Extracto en
gla[ldulares, s_on de varios tamaos y formas, en su ma- Polvo de Albahaca Santa USP en metano!
yona son ses1les con una cabeza de 4 clulas unos Solucin muestra: Someter a ultrasonido aproximada-
p~Kos con un pe~icelo unicelular, algunos c~n un pe- mente 1 g de Hojas de Albahaca Santa En Polvo en
dicelo de 1 a 2 celulas y una cabeza de 1 a 2 clulas 1 O mL de metano! durante 1 O minutos, centrifugar y
una c_apa de clula;; en emp?li~ada bajo la epidermis' usar el sobrenadante. [NOTA-Reservar una porcin del
superior en la reg1on de la lamina; 2-4 hileras de clu- sobrenadante para la prueba de ldentificacion C.]
las colenquimticas bajo cada epidermis en la regin Sistema cromatogrfico
de la nervadura central; un arco de haces vasculares Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatogra-
colaterales conjuntos en eJ centro, y 2-4 parches de fa con un tamao promedio de part1cula de 5 m
haces de floema o pequenos haces vasculares rudi- (placas para HPTLC)
mentarios por enci_ma del arco; y clulas de parn- Volumen de aplicacin: 2 L de Solucin estndar A
quima esponoso neas en contenido de oleorresina 4 L de Solucin estndar By 8 L de Solucin muesa
Seccin transversal del pecolo: Similar a la seccin en bandas de 8 mm '
transversal. travs de la nervadura central de la hoja; Humedad relativa: Acondicionar la placa a una hume-
la ep1derm1s superior y la epidermis inferior, cada una dad relativa de aproximadamente 33% usando un dis-
con una_ sola capa de clulas rectangulares cubiertas positivo adecuado.
con cut1cula delgad_a, presentan gran cantidad de tri- Fase mvil: Una mezcla de acetato de etilo cido fr-
cc;imas de recubrimiento y glandulares; 2-4 hileras de mico y agua (15:1 :1) '
celulas colenquimticas bajo cada epidermis; un arco Distancia de desarrollo: 6 cm
de ha~es vasculares ~olaterales conjuntos en el centro, Reactivo de derivatizacin A: Solucin de difenilbori-
una hilera de pequenos haces vasculares rudimentarios nato de 2-aminoetilo de 5 mg/mL en acetato de etilo
por encima d~I arco que da hacia la cara superior y un Re~ctivo de derivatizacin B: Solucin de polietilen-
haz vascul?r a1~lado en cada extremo del arco; y clu- gl1col 400 de 50 mg/mL en diclorometano
l9s de parenqu1ma esps:injoso. Anlisis
ARTICULOS DE ~RIGEN BOTANICO, Materia Orgnica Extraa Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar By
(561): No mas de 5% de tallos; no ms de 2,0% de Solucin muestra
otra materia extraa Aplicar ,las Muestras en bandas a una placa para croma-
PRDIDA POR SECADO (731) tograf1a en capa delgada de alta resolucin adecuada y
Muestra: 1,0 g de Hojas de Albahaca Santa reducidas a secar al aire (ver Cromato9rafa (621 )). Desarrollar los
polvo fino cromatogramas en una camara saturada retirar la
Anlisis: Secar a 1 05 durante 2 horas. placa de la cmara, secar al aire, calenta'r a 100 du-
Cri,terios de aceptacin:, No ms de 1 0% rante 3 minutos, derivatizar la placa mientras est tibia
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Totales (561)
con. Re?ctivo de deriv?tizacin ~, secar.?' aire, luego
Muestra: 2 g de Hojas de Albahaca Santa reducidas a denvat1zar con Reactivo de denvat1zaoon A, secar al aire
polvo fino y observar bao luz UV a 366 nm.
Cri,terios de aceptacin:, No ms de 1 8% Apti!ud del sistema: El cromatograma de la Solucin
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO Cenizas Insolubles en cido estandar B presenta, en el tercio superior, una banda de
(561 > ' c?lor a~ul fluorescen_te que corresponde a la banda de-
Muestra: 2-4 g de Hojas de Albahaca Santa reducidas a bida a ac1do rosmannico en el cromatograma de la So-
polvo fino lucin estndar A, y una banda de color azul fluores-
Criterios de aceptacin: No ms de 3% cente menos intensa directamente sobre la banda
d~bida a cido rosmarnico, correspondiente a cido ca-
REQUISITOS ADICIONALES
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien fe1co, y una banda de color rojo por encima de la
cerrados. Proteger de la luz y la humedad. Almacenar a banda de cido cafeico. Las bandas debidas a cido ros-
temperatura ambiente. marnico y cido cafeico estn claramente separadas. El
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en cromatograma de la Solucin estndar B tambin pre-
latn y, despus de la denominacin oficial, la parte de la senta la banda ms intensa, una banda de color na-
pla,nta contenida en el artculo. ranja, en el tercio inferior del cromatograma; y dos ban-
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) das de color verdoso en el tercio medio del
ER ~xtracto en Polvo de Albahaca Santa USP cromatograma.
ER Acido Rosmarnico USP Cri~erios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
ER Acido Urslico lJSP oon muestra presenta las siguientes bandas correspon-
dientes a bandas similares en el cromatograma de la
Solucin estndar B: una banda de color azul fluores-
cente a un valor Rr correspondiente a la banda de cido
rosmarnico; una banda de color azul fluorescente me-
USP 38 Suplementos Dietticos /Albahaca Santa 6 311

nos intensa a un valor R por encima del de la banda rle de eugenol o la banda de metileugenol en los cromato-
ac1do rosmarnico, correspondiente a cido cafeico; una gr arnas de Id Solucin estndar B o la Solucin estndar
banda de color rojo por encima de la banda de cido C. [NOTA~Las Hojas de Albahaca Santa pueden presen-
cafeico; una banda de coior rojo e11 ei re11le de id d'e lci1 '.)e e(1 dos quimiotipo:), uno cuuctci.tudo pe:- !J pre
mvil rlebida a clorofilJ; rlm bandJs rlc color verdoso sencia de eugenol y el otro por la presencia de
en el tercio medio del cromatograma; y la banda ms metileugenol. J
intensa, una banda de color anaranjado, con una banda D. HPLC
de color awl justo por encima en el tercio inferior del Anlisis: Proceder segn se indica en la prueba de Con-
cromatograma (a diferencia de hojas de salvia, hojas de tenido de Triterpenos.
tomrllo, hojas de albahaca y hojas de organo, todas las Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
cuales presentan dos bandas de color anaranjado en el cin muestra presenta dos picos a los tiempos de reten-
tercio inferior del cromatograma; y las hojas de blsamo cin correspondientes a los picos de cido urslico y
de melrsa que carecen de esta banda). La Solucin cido oleanlico de las Soluciones estndar.
muestra no presenta bandas de color anaranjado amari-
llento en la seccin media del cromatograma (a diferen- COMPOSICIN
cia de hojas d~ romero y hojas tomillo). CONTENIDO DE TRITERPENOS
C. CROMATOGRAFIA EN CAPA DELGADA Fase mvil: Una mezcla de acetonitrilo y una solucin
Solucin estndar A: 0,2 mg/mL de ER cido Urslico de acetato de amonio de 2,5 mg/mL en 9gua (67:33)
USP en metano! Solucin estndar A: O, 1 mg/mL de ER Acido Urslico
Solucin estndar B: 1,0 mg/mL de eugenol en USP en metano!. Someter a ultrasonido, si fuera necesa-
metano! rio, hasta disolver.
Solucin estndar C: 1,0 mg/mL de metileugenol en Solucin estndar B: 4,0 mg/mL de ER Extracto en
metano! Polvo de Albahaca Santa USP en metano!. Someter a
Solucin estndar D: 1 O mg/mL de ER Extracto en ultrasonido, si fuera necesario, hasta disolver. Antes de
Polvo de Albahaca Santa USP en metano! la inyeccin, pasar a travs de un filtro de membrana
Solucin muestra: Usar la solucin preparada en la con un tamao de poro de 0,45 m o menor.
prueba de Identificacin B. Solucin muestra: Transferir aproximadamente 3,0 g
Sistema cromatogrfico de Hojas de Albahaca Santa En Polvo, pesados con
Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatogra- exactitud, a un matraz de fondo redondo de 100 mL
fa con un tamao promedio de part1cula de 5 m equipado con un condensador de reflujo. Agregar
(placas para HPTLC) 50 mL de metano!, someter a reflujo en un bao de
Volumen de aplicacin: 2 L de Solucin estndar A, agua durante 20 minutos, enfriar a temperatura am-
de Solucin estndar B y de Solucin estndar C, 4 L biente y decantar el sobrenadante. Repetir hasta que el
de Solucin estndar O y 8 L de Solucin muestra en ltimo extracto sea incoloro. Combinar los extractos, fil-
bandas de 8 mm trar, concentrar al vaco y ajustar el volumen hasta
Humedad relativa: Acondicionar la placa a una hume- 1 00 mL con metano!. Antes de la inyeccin, pasar a
dad relativa de aproximadamente 33% usando un dis- travs de un filtro de membrana con un tamao de
positivo adecuado. poro de 0,45 ~tm o menor, desechando los primeros
Fase mvil: Una mezcla de tolueno y acetato de etilo mL del filtrado.
(85:15) Sistema cromato9rfico
Distancia de desarrollo: 6 cm (Ver Cromatograf1a <621 ), Aptitud del Sistema.)
Reactivo de derivatizacin: Colocar 85 mL de meta- Modo: HPLC
no! en un frasco de vidrio de 100 mL y enfriar en un Detector: UV 205 nm
bao de agua con hielo y sal o en un congelador. Columna: 3,0 mm x 1 O cm; relleno L1 de 2,5 rn
Agregar lenta y cuidadosamente 1 O mL de cido ac- Velocidad de flujo: 0,3 mL/min
tico y 5 mL de cido sulfrico al metano! helado y Volumen de inyeccin: 5 L
mezclar bien. Dejar que la mezcla se enfre a tempera- Aptitud del sistema
tura ambiente y luego agregar 0,5 mL de p- Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B
anisaldehdo. Requisitos de aptitud
Anlisis Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B, So- de la Solucin estndar B es similar al cromatograma
lucin estndar C, Solucin estndar O y Solucin de referencia provisto con el lote de ER Extracto en
muestra Polvo de Albahaca Santa USP usado.
Aplicar las Muestras en bandas a una placa para croma- Resolucin: No menos de 1, 3 entre los picos de
tografa en capa delgada de alta resolucin adecuada y cido oleanlico y cido urslico, Solucion estndar B
secar al aire (ver Cromato9rafa <621 )). Desarrollar los Desviacin estndar relativa: No ms de 2%, deter-
cromatogramas en una camara saturada, retirar la minada a partir del pico de cido urslico en inyec-
placa de la cmara, secar al aire, derivatizar la placa ciones repetidas, Solucin estndar A
con Reactivo de derivatizacin, calentar a 1 00 durante Anlisis
3-5 minutos, dejar que se enfre y observar bajo luz Muestras: Solucin estndar A, SoluC1on estndar B y
visible. Solucin muestra
Aptitud del sistema: La Solucin estndar A presenta Usando, los c~omatogramas de la Solucin estndar A, la
una banda de color violeta. La Solucin estndar By SoluC1on estandar B y el cromatograma de referencia
Solucin estndar C presentan cada una una banda ver- provisto con el lote de ER Extracto en Polvo de Alba-
dosa. La Solucin estndar O presenta una banda de haca Santa USP usado, identificar el tiempo de reten-
color prpura por encima de la banda de color verde cin de los picos correspondientes a cido oleanlico y
correspondiente a eugenol o metileugenol en la Solu- cido urslico en el cromatograma de la Solucin
cin estndar o la Solucin estndar C muestra.
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- Calcular el porcentae de triterpenos, cido oleanlico y
cin muestra presenta la banda ms intensa, una banda cido urslico en la porcin de Hojas de Albahaca
de color violeta a un valor R1 correspondiente a la Santa En Polvo tomada:
banda de cido urslico en el cromatograma de la Solu-
cin estndar A y la Solucin estndar O, y una banda de Resultado= (r11/r1) X e, X (V/W) X 100
color verdoso a un valor Rr correspondiente a la banda
6) 12 Al ha haca Santa / Suplementos Dietticos USP 38

ru = suma de las reas de los picos de cido


oleanlico y cido urslico en el
cromatograma de la Solucion muestra Extracto en Polvo de Hojas de Albahaca
r, rea de! pico de .leido Usiico en el Santa
cromatograma de la Solucin estndar A
Cs = concentracin de cido urslico en la Solucin DEFINICIN
estndar A (mg/ml) El Extracto en Polvo de Ho1as de Albahaca Santa se prepara
V = volumen de la Solucin muestra (ml) a partir de Hojas de Albahaca Santa mediante extraccin
W = peso de Hojas de Albahaca Santa En Polvo con mezclas de alcohol-agua o metano! agua. Contiene
tomadas para preparar la Solucin muestra no menos de 90,0% y no ms de 11 0,0% de la cantidad
(mg) declarada de triterpenos, calculados como la suma de
Criterios de aceptacin: No menos de 0,5%, con res- cido oleanlico y cido urslico, con respecto a la ma-
pecto a la sustancia seca teria seca. Puede contener sustancias agregadas adecua-
das como vehculos.
CONTAMINANTES
IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS (233) IDENTIFICACIN
Criterios de aceptacin A. CROMATOGRAFA EN CAPA DELGADA
Arsnico: No ms de 1,0 g/g Solucin estndar A: 0,5 mg/ml de ER cido Rosmar-
Cadmio: No ms de 0,5 g/g nico USP en metano!
Plomo: No ms de 5,0 g/g Solucin estndar B: 1 O mg/ml de ER Extracto en
Mercurio: No ms de 1,0 g/g Polvo de Albahaca Santa USP en metano!
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Mtodo General para An- Solucin muestra: 1 O mg/ml de Extracto en Polvo de
lisis de Residuos de Plaguicidas (561 ): Cumplen con los Hojas de Albahaca Santa en metano!. [NOTA-Reservar
requisitos. una porcin para su uso en la prueba de Identificacin
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- B.]
tal de microorganismos aerobios no excede de 10 5 ufc/g; Sistema cromatogrfico
el recuento total combinado de hongos filamentosos y Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatogra-
levaduras no excede de 10 3 ufc/g; y el recuento de bac- fa con un tamao promedio de partcula de 5 m
terias Gram negativas tolerantes a la bilis no excede de (placas para HPTLC)
103 ufc/g. , Volumen de aplicacin: 2 L de Solucin estndar A,
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum- 4 L de Solucin estndar B y 8 L de Solucin muestra,
plen con los requisitos de las pruebas para determinar la en bandas de 8 mm
ausencia de Salmonella spp. y Escherichia coli. Humedad relativa: Acondicionar la placa a una hume-
dad relativa de aproximadamente 33% usando un dis-
PRUEBAS ESPECFICAS positivo adecuado.
CARACTERSTICAS BOTNICAS Fase mvil: Una mezcla de acetato de etilo, cido fr-
Macroscpicas: Polvo de color verde amarillento; olor mico y agua (15:1:1)
aromtico caracterstico Distancia de desarrollo: 6 cm
Microscpicas: Presenta fra9mentos de paredes anticli- Reactivo de derivatizacin A: Solucin de difenilbori-
nales rectas de clulas epidermicas en la superficie supe- nato de 2-aminoetilo de 5 mg/ml en acetato de etilo
rior y ligeramente onduladas en la superficie inferior, Reactivo de derivatizacin B: Solucin de polietilen-
con estomas diacticos, con tricomas de recubrimiento y glicol 400 de 50 mg/ml en diclorometano
glandulares; tricomas de recubrimiento, uniseriados, Anlisis
unicelulares a multicelulares, a menudo curvados, con Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B y
clulas basales abultadas; tricomas glandulares con una Solucin muestra
cabeza de 4 clulas y de 1 a 2 clulas; fibras; y tejido Aplicar las Muestras en bandas a una placa para croma-
vascular. tografa en capa delgada de alta resolucin adecuada y
PRDIDA POR SECADO (731) secar al aire (ver Cromato9rafa (621 )). Desarrollar los
Muestra: 1,0 g de Hojas de Albahaca Santa En Polvo cromatogramas en una camara saturada, retirar la
Anlisis: Secar a 1 05 durante 2 horas. placa de la cmara, secar al aire, calentar a 100 du-
Cri,terios de aceptacin~ No ms de 10% rante 3 minutos, derivatizar la placa mientras est tibia
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Totales (561) con Reactivo de derivatizacin A, secar al aire, luego
Muestra: 2 g de Hojas de Albahaca Santa En Polvo derivatizar con Reactivo de derivatizacin A, secar al aire
Cri,terios de aceptacin~ No ms de 18% , y observar bajo luz UV a 366 nm .
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Insolubles en Acido Aptitud del sistema: El cromatograma de la Solucin
(561) estndar B presenta, en el tercio superior, una banda de
Muestra: 2-4 g de Hojas de Albahaca Santa En Polvo color azul fluorescente que corresponde a la banda de-
Criterios de aceptacin: No ms de 3% bida a cido rosmarnico en el cromatograma de la So-
lucin estndar A, y una banda de color azul fluores-
REQUISITOS ADICIONALES
cente menos intensa directamente sobre la banda
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien debida a cido rosmarnico, correspondiente a cido ca-
cerrados. Proteger de la luz y la humedad. Almacenar a feico, y una banda de color rojo por encima de la
temperatura ambiente. banda de cido cafeico. Las bandas debidas a cido ros-
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en marnico y cido cafeico estn claramente separadas. El
latn y, despus de la denominacin oficial, la parte de la cromatograma de la SoluC1on estandar B tambin pre-
pla,nta de la que se obtuvo el artculo. senta la banda ms intensa, una banda de color na-
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) ranja, en el tercio inferior del cromatograma; y dos ban-
ER Extracto en Polvo de Albahaca Santa USP das color verdoso en el tercio medio del cromatograma.
ER cido Rosmarnico USP Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
ER cido Urslico USP cin muestra presenta las siguientes bandas correspon-
dientes a banda, -,imiiai-b en el crnmatograrna de la
Solucin estndar B: una banda de color azul fluores-
cente a un valor R1 correspondiente a la banda de cido
rosmarnico; una banda de color azul fluorescente me-
nos intensa a un valor R1 por encima del de la banda de
USP 38 Sup!ementns nietPtirm .1 Albahaca Santa 631 3

cido rosmarnirn, rnrrPsrnnrliente a cido cateico; una C. [Nm A-Las Hojas de Albahaca Santa pueden presen-
banda de color rojo por e11ci111d de la banda de cido tarse en dos quimiotipos, uno caracterizado por la pre-
cafeico; una banda de color rojo en el frente de la fase sencia de eugenol y el otro por la presencia de
rnvii cieiUd d ciu1 uild, Ju) Licti idas de colo \/Cdo~o rncti!cugcnc!.]
en el tercio medio del cromatograma; y la banda ms C. HPLC
intensa, una banda de color anaranjado, con una banda Anlisis: Proceder segun se indica en la prueba de Con-
de color azul justo por encima en el tercio inferior del tenido de Triterpenos.
cromatograma (a diferencia de hojas de salvia, hojas de Cri!erios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
tomillo, hojas de albahaca y hojas de organo, todas las c1~n muestra presenta dos picos a los tiempos de reten-
cuales presentan dos bandas de color anaranjado en el c1on correspondientes a los picos de cido urslico y
tercio inferior del cromatograma; y las hojas de blsamo cido oleanlico de las Soluciones estndar.
de melisa que carecen de esta banda). La Solucin
muestra no presenta bandas de color anaranjado amari- COMPOSICIN
llento en la seccin media del cromatograma (a diferen- CONTENIDO DE TRITERPENOS
cia de hojas d~ romero y hojas tomillo). Fase mvil: Una mezcla de acetonitrilo y una solucin
8. CROMATOGRAFIA EN CAPA DELGADA de acetato de amonio de 2,5 mg/mL en 9gua (67:33)
Solucin estndar A: 0,2 mg/mL de ER cido Urslico Solucin estndar A: O, 1 mg/mL de ER Acido Urslico
USP en metano! USP en metano!. Someter a ultrasonido, si fuera necesa-
Solucin estndar B: 1,0 mg/mL de eugenol en rio, hasta disolver.
metanol Solucin estndar B: 4,0 mg/mL de ER Extracto en
Solucin estndar C: 1,0 mg/mL de metileugenol en Polvo de Albahaca Santa USP en metano!. Someter a
metano! ultrasonido, si fuera necesario, hasta disolver. Antes de
Solucin estndar D: 1 O mg/mL de ER Extracto en la inyeccin, pasar a travs de un filtro de membrana
Polvo de Albahaca Santa USP en metano! con un tamao de poro de 0,45 m o menor.
Solucin muestra: Usar la solucin preparada en la Solucin muestra: Una cantidad de Extracto en Polvo
prueba de Identificacin A. de Hojas de Albahaca Santa, equivalente a 5 mg de tri-
Sistema cromatogrfico terpenos, en 50 mL de metano!. Someter a ultrasonido,
Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatogra- si fuera nec~sario, hasta disolver. Antes de la inyeccin,
fa con un tamao promedio de partrcula de 5 m pasar a traves de un filtro de membrana con un tamao
(placas para HPTLC) de poro de 0,45 m o menor.
Volumen de aplicacin: 2 L de Solucin estndar A, Sistema cromato9rfico
de Solucin estndar 8 y de Solucin estndar C, 4 L (Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.)
de Solucin estndar O y 8 L de Solucin muestra en Modo: HPLC
bandas de 8 mm Detector: UV 205 nm
Humedad relativa: Acondicionar la placa a una hume- Columna: 3,0 mm x 1 O cm; relleno L1 de 2,5 m
dad relativa de aproximadamente 33% usando un dis- Velocidad de flujo: 0,3 mL/min
positivo adecuado. Volumen de inyeccin: 5 L
Fase mvil: Una mezcla de tolueno y acetato de etilo Aptitud del sistema
(85:15) Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar 8
Distancia de desarrollo: 6 cm Requisitos de aptitud
Reactivo de derivatizacin: Colocar 85 mL de meta- Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
no! en un frasco de vidrio de 1 00 mL y enfriar en un de la Solucin estndar 8 es similar al cromatograma
bao de agud rn11 hielo y sal o en un congelador. de referencia provisto con el lote de ER Extracto en
Agregar lenta y cuidadosamente 1 O mL de cido ac- Polvo de Albahaca Santa USP usado.
tico y 5 mL de cido sulfrico al metano! helado y Resolucin: No menos de 1, 3 entre los picos de
mezclar bien. Dejar que la mezcla se enfre a tempera- cido oieanlico y cido urslico, Sofucion estndar 8
tura ambiente y luego agregar 0,5 mL de p- Desviacin estndar relativa: No ms de 2%, deter-
anisaldehdo. minada a partir del pico de cido urslico en inyec-
Anlisis ciones repetidas, Solucin estndar A
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar 8, So- Anlisis
lucin estndar C, Solucin estndar O y Solucin Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar 8 y
muestra Solucin muestra
Aplicar las Muestras en bandas a una placa para croma- Usando los cromatogramas de la Solucin estndar A la
tografa en capa delgada de alta resolucin adecuada y Solucin estndar 8 y el cromatograma de referenci~
secar al aire (ver Cromato9rafa (621 )). Desarrollar los provisto con el lote de ER Extracto en Polvo de Alba-
cromatogramas en una camara saturada, retirar la haca Santa USP usado, identificar el tiempo de reten-
placa de la cmara, secar al aire, derivatizar la placa Sin de lo,s picos correspondientes a cido oleanlico y
con Reactivo de derivatizacin, calentar a 100 durante acrdo ursolrco en el cromatograma de la Solucin
3-5 minutos, dejar que se enfre y observar bajo luz muestra.
visible. Calcular el porcentaje de triterpenos, cido oleanlico y
Aptitud del sistema: La Solucin estndar A presenta cido urslico en la porcin de Extracto en Polvo de
una banda de color violeta. La Solucin estndar 8 y Hojas de Albahaca Santa tomada:
Solucin estndar C presentan cada una una banda ver-
dosa. La Solucin estndar O presenta una banda de P = (r11/r1) x (C/Cu) x 100
color prpura por encima de la banda de color verde
correspondiente a eugenol o metileugenol en la Solu- ru = suma de las reas de los picos de cido
cin estndar o la Solucin estndar C. oleanlrco y cido urslico en el
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- cromatograma de la Solucin muestra
rs ~ rea del pico de cido urslico en el
cin muestra presenta la banda ms intensa, una banda cromatograma de la Solucin estndar A
de color violeta a un valor R, correspondiente a la
= concentracin de cido urslico en la Solucin
banda de acido urslico en el crornalogrdrna Je la Solu-
cin estndar A y la Solucin estndar O, y una banda de estndar A (mgmL)
color verdoso a un valor R, correspondiente a la banda Cu = concentracin de Extracto en Polvo de Hojas
de eugenol o la banda de. rnetileugenol en los cromato- de Albahaca Santa en la Solucin muestra
gramas de la Solucin estndar 8 o la Solucin estndar (mg/mL)
6 314 Albahaca Santa / Suplementos Diettico'> USP 38

Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de nicas, durante 1 0-1 5 minutos en 25 mL de metanol


triterpcnos, cido oleanlico y cido ur,iico en Id centrifugar, y usar el 'obrenadante. '
porc1on de Extracto en Polvo de Hojas de Albahaca Solucin muestra: Usar la Solucion madre de la muestra
Santa tomada: f.1Ft'f.ldl dUd 'cgn se indica en ia prueba de Lonten/C10 d~
Lactonas Dtrrrrnirm
Resultado = (P/ L) x l 00 Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatografa
con un ta mano de partcula promedio de 1 0-15 -m
p = c~ntenido 9~ triterp~nos, cido ole~nlico y (placas para TLC)
ac1do ursol1co, segun se determino Volumen de aplicacin: 1 O L, en bandas de 5-1 O mm
anteriormente (%) Fase r:r!vil: Cloroformo, acetona y tolueno (2:2: 1)
L = cantidad declarada de triterpenos, cido Soluc1on reveladora: Mezcla de vainillina al 1 % en al-
oleanlico y cido urslico (%) cohol y cido sulfrico al 1 0% en alcohol (1: 1)
Criterios de aceptacin: 90%-110% de la cantidad de- Anlisis
clarada, con respecto a la materia seca Muestras: Solucin estndar 7, Solucin estndar 2 y
Solucin muestra
CONTAMINANTES Usar una cmara saturada. Desarrollar los cromatogra-
IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS (233)
mas hasta gue el frente de la fase mvil haya reco-
Criterios de aceptacin rrido aproximadamente 90% de la longitud de la
Arsnico: No ms de 1,0 g/g placa. Retirar la placa de la cmara secar rociar con
Cadmio: No ms de 0,5 g/g Solucin reveladora, calentar durante 5-1 minutos a
Plomo: No ms de 5,0 g/g 100, y observar bajo luz visible.
tv!ercurio: No ms de ,1,0 g/g Criterios de aceptacin: La Solucin muestra presenta
AR!ICULOS !?E ORIGEN BOTANICO, Mtodo General para An-
tres zonas principales de color azul grisceo con valores
l1s1s cj~ Residuos de Plaguicidas (561 ): Cumple con los Rr de aprox.ir:i_adamente 0,4; 0,6 y 0,8 que correspon-
requ1s1tos. den en pos1C1on y color a las zonas en la Solucin estn-
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
dar 2. La Solucin estndar 7 presenta una zona de
tal de microorganismos aerobios no excede de 104 ufc/g color azul gris~eo correspondiente a andrograflido a
y el recuento total combinado de hongos filamentosos y un RF de aproximadamente 0,4. La Solucin muestra
levaduras no excede de 10' ufc/g. presenta una zona similar en color y valor Rr a la corres-
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cum-
pondiente a andrograflido en la Solucin estndar 7.
ple con los requisitos de las pruebas para determinar la B.,, El tiempo de retencin del pico principal de la Solu-
ausencia de Salmonella spp. y Escherichia coli. oon muestra obtenido en la prueba de Contenido de Lac-
PRUEBAS ESPECFICAS tonas Diterpncas corresponde al de andrograflido en la
PRDIDA POR SECADO (731) Solusi_n estndar A. ld~ntificar otros picos de lactonas di-
Muestra: 2,0 g de Extracto en Polvo de Hojas de Alba- terpen_icas e_n la Soluc1on muestra por comparacin con la
haca Santa Soluoon estandar By el cromatograma de referencia pro-
Anlisis: Secar a 1 05 durante 2 horas. visto con el lote de ER Extracto en Polvo de Andrografis
Criterios de aceptacin: No ms de 5,0% USP. La Soluc1on muestra presenta picos adicionales co-
rrespondientes a neoandrograflido, l 4-desoxi-11 12-di-
REQUISITOS ADICIONALES deshidroandrograflido y andrograpanina. '
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
cerrados. Proteger de la luz y la humedad. Almacenar a COMPOSICIN
temperatura ambiente controlada. CONTENIDO DE LACTONAS DITERPNICAS
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en Solucin A: Disolver O, 14 g de fosfato dicido de pota-
latn y, despus de la denominacin oficial, la parte de la s! en .9qo mL de agua, agregar 0,5 mL de cido fosf-
plan~a. de la qu~ se obtuvo el artculo. Cumple con otros rico, diluir con agua hasta 1 000 mL, mezclar filtrar y
requ1s1tos de etiquetado en Extractos Botnicos (565). desgasificar. ' '
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) Soluc~<?n B: ,Usar aceton.itrilo filtrado y desgasificado.
ER i;xtracto en Polvo de Albahaca Santa USP Solucion estandar A: Disolver una cantidad pesada de
ER ~cido Rosmarnico USP ER Andrograflido USP en metano! para obtener una
ER Acido Urslico USP solucin con una concentracin conocida de aproxima-
damente 1,0 mg/mL. Transferir 5,0 mL de esta solucin
a un matraz volumtrico de 1 O mL, diluir con acetoni-
trilo a volumen, y mezclar.
Solucin estndar B: Transferir una cantidad de ER Ex-
tracto en Polvo de Andrografis USP, equivalente aproxi-
Andrografis madamente a 25 mg de lactonas diterpnicas, a un ma-
traz volumtrico de 50 ml, agregar 25 mL de metano!,
DEFINICIN calentar suavemente durante 15-20 minutos diluir con
La Andrografis consiste en los tallos y hojas secos de Andro- ac~tonitrilo a volu_men, y mezclar. Antes de I~ inyec-
graph1s pamculata (Burm. f.) Nees. Contiene no menos de c1on, pasar a traves de un filtro de membrana con un
1,0% _de lactonas diterpnicas, calculado con respecto a la tamao de poro de 0,45 rn o menor, desechando los
mat~na seca como la suma de andrograflido, neoandro- primeros 5 mL del filtrado.
grafol1do, l 4~desoxi- l l, 12-dideshidroandrograflido y Solucin_ madre de la muestra: Transferir aproximada-
andrograpanina. mente 2,0 g de Androgratis reducida a polvo tino a un
IDENTIFICACIN matraz de 250 mL provisto con un condensador de re-
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA flujo. \gregar 50 mL de metano.!, someter a reflujo en
DELGADA (201)
un bano de agua durante 15 minutos, enfriar a tempe-
Solucin est_ndar 1: Usar la Solucin estndar A, pre- ratura amb1e~te, y decantar el sobrenadante. Repetir
parada segun se 1nd1ca en la prueba de Contenido de hasta que el ultimo extracto se torne incoloro. Combi-
Lactonas Dterpnicas. nar los extracl), fiilra1, LurJLer1lrar al vaco, y ajustar ei
Solucin estndar 2: Someter a ultrasonido una canti- volumen hasta 50,0 mL usando metanol.
dad de ER Extracto en Polvo de Andrografis USP, equi- Solucin muestra: Transferir 25,0 ml de Solucin madre
valente aproximadamente a 15 mg de lactonas diterp- de la muestra a un matraz volumtrico de 50 mL diluir
con acetonitrilo a volumen, y mezclar. Antes de a in-
USP 38 Suplementos Oiettirm .1 Anrlrografis 6315

)IPrrinn, r(lqr i'l tri'lVP~ riP lln filtro de membrana con F = factorde conversin de cada analito
un tamao de poro Je 0,45 ~un u 11ie1101, desechando (1,00 para andrograflido, 3,90 para .
los primeros 5 mL del filtrado. neoandrograflido, 1,45 para l 4-desoxr-
fd~~ 111v: Ve1 ta laUla Je ~t"aJit:ntS siguiente. 11, 12 dideshidroandrog:af!!do y 2,65 para
andrograpanina)
Tiempo Solucin A
-r - - -- -----
Solucin B Criterios de aceptacin: No menos de 1,0%, con res-
1
(min) (%) l/o) pecto a la materia seca, c31lculado como la su,ma de los
o porcentajes de andrografolido, neoandrografolido,
- 95 5
l 4-desoxi-11, 12-dideshidroandrograflido y
18 55 45 andrograpanina
25 20 80
28 20 80 IMPUREZAS
35 55 45 lmpu~ezas Inorgnicas , . .
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Insolubles en Aodo
40 95 5
(561): No ms de 3,0%
45 95 5 METALES PESADOS, Mtodo 11 (231): No ms de 20 ppm
Sistema cromatogrfico
Impurezas Orgnicas, , .
PROCEDIMIENTO 1: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Matena
(Ver Cromatografa (621 ), Aptitud del Sistema.) Orgnica Extrara (56) ): No ms de 2,0%, ,
Modo: HPLC
PROCEDIMIENTO 2: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Melado
Detector: UV 223 nm
General para Anlisis de Residuos de Plaguicidas (561 ):
Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m
Cumple con los requisitos
Velocidad de flujo: 1,5 mL/min
Volumen de inyeccin: 20 L PRUEBAS ESPECFICAS
Aptitud del sistema CARACTERSTICAS BOTNICAS
Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B Macroscpicas: El tallo es de color verde oscuro, le-
Requisitos de aptitud oso de 2-6 mm de dimetro, con numerosas ramas,
El cromatograma de la Solucin estndar B es similar al pres~nta nodos ligeramente hinchados, la parte supe:ior
cromatograma de referencia provisto con el lote de es ntidamente cuadrangular con cuatro protuberancias
ER Extracto en Polvo de Andrografis USP. en las cuatro esquinas y la parte inferior es algo redon-
Eficiencia de la columna: No menos de 5000 platos deada; la textura es fragil y se rompe fcilmente; las
tericos, Solucin estndar A ramas son cuadrangulares y con frecuencia estrecha-
Factor de asimetra: No ms de 1,5 para el pico de mente aladas en la parte superior. Las hojas son sim-
andrograflido, Solucin estndar A ples, opuestas, con pecolo corto o casi ssil; la lmina
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% de- es plegada y se rompe fcilmente, cuando est com-
terminada a partir del pico de andrograflido en in- pleta, lanceolada o lanceolada ovada, de 2-7 cm de
yecciones repetidas, Solucin estndar A largo, 1-3 cm de ancho, con un pice acuminado, ve-
Resolucin: No menos de 5 entre los picos de nacin reticulada y base decurrente cuneada, borde
neoandrograflido y l 4-desoxi-11, 12-dideshidroan- completo u ondulado; la superficie superior es de color
drograflido, Solucin estndar B verde; la superficie inferior es de col?r verde grisc~o;
Anlisis ambas superficies son glabras. El articulo farmacope1co
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar By consiste en una mezcla seca de hojas quebradas verdes
Solucin muestra oscuras y tallos cuadrangulares; hojas quebradizas; tallos
Usando el cromatograma de la Solucin estndar~' So- de fractura corta y fibrosa.
lucin estndar By el cromatograma de referencia Histol~ga . , .
provisto con el lote de ER Extracto e.n Polvo de An- Seccion transversal de los tallos: La capa ep1derm1ca
drografis USP usado, identificar los t1empc:is de reten- presenta clulas que contienen depsitos de carbonato
cin de los picos correspondientes a las diferentes lac- de calcio redondos, elpticos largos o en forma de
tonas diterpnicas. Lo.s tiempos de reten~in ~el.ativos palos de bowling (cistolitos), pelos no glandulares de
aproximados de las diferentes lactonas d1terpen1cas se 1-4 clulas y pelos glandulares multicelulares en forma
proveen en la tabla siguiente. de disco; colnquima debajo de la epidermis y en las
protuberancias; endodermis distinguible; haces vascu-
Tiempo de lares que rodean el parnquima de la mdula central;
Analito ... Retencin Relativo cristales pequeos aciculares de oxalato de calcio pre-
~_graflido 1 00 sentes en la corteza y la mdula .
--------- . - -- --- -----
Neoandroaraflido 1 16
Seccin transversal de las hojas: Clulas epidrmicas
--------r-
superiores e inferiores subcuadradas o rectangulares;
14-Desoxi- l l 12-dideshidroandroaraflido 1 31 las clulas epidrmicas inferiores son relativamente ms
Androaraoanina -------- 1 50 pequeas; ambas capas epidrmicas presentan clulas
que contienen cistolitos, pelos no glandulares y pelos
Calcular por separado los porcentajes de andrograf- glandulares similares a los del tallo; mesfilo com-
lido, neoandrograflido, l 4-desoxi-11, 12-dideshi- puesto por 1-2 capas de parnquima en empalizada y
droandrogratlido y andrograpanina en la porcin de parnquima esponjoso; a travs <je la_ parte sup~nor de
Andrografis tomada: la nervadura central aparece parenqu1ma esponioso;
los haces vasculares de la nervadura central son colate-
Resultado = (Cs/W) x (ru/rs) x 1 OF rales y acanalados; las clulas que contienen cistolitos
C = concentracin de ER Andrograflido USP en la aparecen por encima del xilema.
PRDIDA POR SECADO (731 ): Secar 1,0 g de Andrografis
Solucin estndar A (mg/mL)
W = peso de Andrografis tomada para preparar la reducida a polvo fino a 105 durante 3 horas: pierde no
Solucin muestra (g) ms de 12,0% de su peso.
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Totales (561 ):
ru = respuesta del picu Je cada laduna diterpnica
de la Solucin muestra No ms de 15%, determinado en 1,0 g de Andrografis
r, = respuesta del pico de andrograflido de la reducida a polvo fino
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Extractos Solubles en Al-
Solucin estndar A
cohol, Mtodo 2 (561 ): No menos de 8,0%
6316 Androqrafis / Suplementos Dietticos USP 38

PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021): El recuento to- terpnicas en la Solucin muestra por comparacin con la
tal de microorgani~rnm cJerobim no excede de 10 5 ufcig; Solucin estandar 8 y el cromatograma de referencia pro-
el recuento total combinado de hongos filamentosos y visto con el lote de ER Extracto en Polvo de Andrografis
icv.JdurJ> ;o c;.;cede de 10' uk/~, y ei 1ecue11lo Je bcJc- USP. La Soiucin muestra presenta picos ad1c1onales co-
terias Gram negativas tolerantes a la bilis no excede de rrespondientes a neoandrograflido, l 4-desoxi-11, 12-di-
10' ufc/g. deshidroandrograflido y andrograpanina.
PROCEDIMIENTOS MICROBIOLGICOS PARA COMPROBAR LA AU-
SENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cumple COMPOSICIN
con los requisitos de las pruebas para determinar la au- CONTENIDO DE LACTONAS DITERPNICAS
sencia de Salmonella spp. y Escherichia coli Solucin A: Disolver O, 14 g de fosfato dicido de pota-
sio en 900 mL de agua, agregar 0,5 mL de cido fosf-
REQUISITOS ADICIONALES rico, diluir con agua hasta 1000 mL, mezclar, filtrar, y
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien desgasificar.
cerrados. Proteger de la luz y la humedad, y almacenar a Solucin B: Usar acetonitrilo filtrado y desgasificado.
temperatura ambiente. Solucin estndar A: Disolver una cantidad pesada de
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en ER Andrograflido USP en metanol para obtener una
latn y despus de la denominacin oficial, las partes de solucin con una concentracin conocida de aproxima-
la planta contenidas en el artculo. damente 1,0 mg/mL. Transferir 5,0 mL de esta solucin
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) a un matraz volumtrico de 1 O mL, diluir con acetoni-
ER Andrograflido USP trilo a volumen, y mezclar.
ER Extracto en Polvo de Andrografis USP Solucin estndar B: Transferir una cantidad de ER Ex-
tracto en Polvo de Andrografis USP, equivalente aproxi-
madamente a 25 mg de lactonas diterpnicas, a un ma-
traz volumtrico de 50 mL, agregar 25 mL de metanol,
calentar suavemente durante 15-20 minutos, diluir con
Andrografis en Polvo acetonitrilo a volumen, y mezclar. Antes de la inyec-
cin, pasar a travs de un filtro de membrana con un
DEFINICIN tamao de poro de 0,45 m o menor, desechando los
La Andrografis en Polvo es Andrografis reducida a polvo fino primeros 5 mL del filtrado.
o a polvo muy fino. Solucin madre de la muestra: Transferir aproximada-
mente 2,0 g de Andrografis en Polvo a un matraz de
IDENTIFICACIN 250 mL provisto con un condensador de reflujo. Agre-
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA gar 50 mL de metano!, someter a reflujo en un bao de
DELGADA (201) agua durante 15 minutos, enfriar a temperatura am-
Solucin estndar 1: Usar la Solucin estndar A, pre- biente, y decantar el sobrenadante. Repetir hasta que el
parada segn se indica en la prueba de Contenido de ltimo extracto se torne incoloro. Combinar los extrac-
Lactonas Diterpnicas. tos, filtrar, concentrar al vaco, y ajustar el volumen
Solucin estndar 2: Someter a ultrasonido una canti- hasta 50,0 mL usando metano!.
dad de ER Extracto en Polvo de Andrografis USP, equi- Solucin muestra: Transferir 25,0 mL de Solucin madre
valente aproximadamente a 15 mg de lactonas diterp- de la muestra a un matraz volumtrico de 50 mL, diluir
nicas, durante 10-15 minutos en 25 mL de metanol, con acetonitrilo a volumen, y mezclar. Antes de la in-
centrifugar, y usar el sobrenadante. yeccin, pasar a travs de un filtro de membrana con
Solucin muestra: Usar la Solucin madre de la muestra, un tamao de poro de 0,45 m o menor, desechando
preparada segn se indica en la prueba de Contenido de los primeros 5 mL del filtrado.
Lactonas Diterpnicas. Fase mvil: Ver la tabla de gradientes siguiente.
Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatografa
con un tamao de partcula promedio de 1 0-15 m Tiempo Solucin A Solucin B
(placas para TLC) ~-----{!!!!!L. _ _ ~. (%) (%)
Volumen de aplicacin: 1 O ~tL, en bandas de 5-1 O mm o 95 5
Fase mvil: Cloroformo, acetona y tolueno (2:2:1)
Solucin reveladora: Mezcla de vainillina al 1 % en al- 18 55 45
cohol y cido sulfrico al 10% en alcohol (1: 1) 25 20 80
Anlisis 28 20 80
Muestras: Solucin estndar 7, Solucin estndar 2 y 35 -~-
55 45
Solucin muestra 40 95 5
Usar una cmara saturada. Desarrollar los cromatogra- 45 95 5
mas hasta que el frente de la fase mvil haya reco-
rrido aproximadamente 90% de la longitud de la Sistema cromatogrfico
placa. Retirar la placa de la cmara, secar, rociar con (Ver Cromatografa (621 ), Aptitud del Sistema.)
Solucin reveladora, calentar durante 5-1 O minutos a Modo: HPLC
1 ooc, y observar bajo luz visible. Detector: UV 223 nm
Criterios de aceptacin: LCI Solucin muestra presenta Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m
tres zonas principales de color azul grisceo con valores Velocidad de flujo: 1,5 ml/min
Rf de aproximadamente 0,4; 0,6 y 0,8 que correspon- Volumen de inyeccin: 20 ~tl
den en posicin y color a las zonas principales de la Aptitud del sistema
Solucin estndar 2. La Solucin estndar 7 presenta una Muestras: Solucin estandar A y 5oluoon estandar B
zona de color azul grisceo correspondiente a androgra- Requisitos de aptitud
flido a un Rf de aproximadamente 0,4. LCI Solucin El cromatograma de la Solucin estndar B es similar al
muestra presenta una zona similar en color y valor RF a cromatograma de referencia provisto con el lote de
la correspondiente a andrograflido en la Solucin es- ER Extracto en Polvo de Androqrafis USP.
tndar 7. Eficiencia de la columna: No menos de 5000 platos
B. El tiempo de retencin del pico principal de la Solu- tericos, Solucin estndar A
cin muestra obtenido en la prueba de Contenido de Lac- Factor de asimetra: No ms de 1,5 para el pico de
tonas Diterpnicas corresponde al de andrograflido en la androgratlido, Solucin estndar A
Solucin estndar A. Identificar otros picos de lactonas di-
usr 38 Suplementos Dieteticos / Androgratis 631 7

Desviacin estndar relativa: No mils de 2,0% de- tolitos, estomas, pelos no glandulares y pelos glandula-
terminada a partir del pico de andrograflido en in- res similares a los de las hoas; clulas parenquimticas
yecciones repetidas, Solucion estndar A de paredes delgadas; clulas colenquimticas; fibras de
Re~olud11: hJo 111e11os de S e11l1e ios fJILos de ioerna aciculares; traqueidas; vasm con engrosamien-
neoandrograflido y 14 dcsoxi 11, 12 didcshidroan , tos cspirJlrs y cscalariformrs.
drograflido, Solucin estndar 8 PERDIDA POR SECADO (731 ): Secar 1,0 g de Andrografis en
Anlisis Polvo a 105 durante 3 horas: pierde no ms de 12,0%
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar 8 y de ,su peso. ,
Solucin muestra ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Totales (561):
Usando el cromatograma de la Solucin estndar A, So- No ms de 15%, determinado en 1,0 g de Andrografis
lucin estndar 8 y el cromatograma de referencia en Polvo
provisto con el lote de ER Extracto en Polvo de An- ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Extractos Solubles en Al-
drografis USP usado, identificar los tiempos de reten- cohol, Mtodo 2 (561): No menos de 8,0%
cin de los picos correspondientes a las diferentes lac- PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
tonas diterpnicas. Los tiempos de retencin relativos tal de microorganismos aerobios no excede de 10 5 ufc/g;
aproximados de las diferentes lactonas diterpnicas se el recuento total combinado de hongos filamentosos y
proveen en la tabla siguiente: levaduras no excede de 10 3 ufc/g; y el recuento de bac-
terias Gram negativas tolerantes a la bilis no excede de
Tiempo de 10 3 ufc/g. ,
Analito Retencin Relativo PROCEDIMIENTOS MICROBIOLOGICOS PARA COMPROBAR LA AU-
SENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cumple
Androqraflido 1 00
con los requisitos de las pruebas para determinar la au-
Neoandroqraflido 1 16 sencia de Salmonella spp. y Escherichia coli
14-Desoxi-11 12-dideshidroandromaflido 1 31
Androqraoanina ------- 1 50 REQUISITOS ADICIONALES
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
Calcular por separado los porcentajes de andrograf- cerrados. Proteger de la luz y la humedad, y almacenar a
lido, neoandrograflido, l 4-desoxi-11, 12-dideshi- temperatura ambiente.
droandrograflido y andrograpanina en la porcin de ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
Andrografis en Polvo tomada: latn y despus de la denominacin oficial, las partes de
la r,lanta contenidas en el artculo.
Resultado = (Cs/W) x (ru/rs) x 1 OF ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
ER Andrograflido USP
Cs = concentracin de ER Andrograflido USP en la ER Extracto en Polvo de Andrografis USP
Solucin estndar A (mg/mL)
W = peso de Andrografis en Polvo tomada para
preparar la Solucin muestra (g)
ru = respuesta del pico de cada lactona diterpnica
de la Solucin muestra Extracto en Polvo de Andrografis
rs = respuesta del pico de andrograflido de la
Solucin estndar A DEFINICIN
F factor de conversin de cada analito
=
El Extracto en Polvo de Andrografis se prepara a partir de
(1,00 para andrograflido, 3,90 para
Andrografis mediante extraccin con metanol o alcohol.
neoandrograflido, 1,45 para l 4-desoxi-
La relacin entre el material vegetal y el extracto est en-
11, 12-dideshidroandrograflido y 2,65 para
tre 15:1 a 10:1. Contiene no menos de 90,0% y no ms
andrograpanina)
de 110,0% de la cantidad declarada de lactonas diterp-
Criterios de aceptacin: No menos de 1,0%, con res-
nicas, calculado con respecto al extracto seco, como la
pecto a la materia seca, calculado como la suma de los
suma de andrograflido, neoandrograflido, l 4-desoxi-
porcentajes de andrograflido, neoandrograflido,
11, 12-dideshidroandrograflido y andrograpanina. El con-
l 4-desoxi-11, 12-dideshidroandrograflido y
tenido de l 4-desoxi-11, 12-dideshidroandrograflido es no
andrograpanina
ms de 15% del total de lactonas diterpnicas. Puede
IMPUREZAS contener sustancias agregadas adecuadas como
lmpu!'ezas Inorgnicas , portadores.
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Insolubles en cido IDENTIFICACIN
(561): No ms de 3,0%
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
METALES PESADOS, Mtodo 11 (231): No ms de 20 ppm DELGADA (201)
Impurezas Orgnica_s ,
Solucin estndar 1: Usar la Solucin estndar A, pre-
PROCEDIMIENTO: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Mtodo
parada segn se indica en la prueba de Contenido de
General para Anlisis de Residum de Plaguicidas (561 ): Lactonas Diterpnicas.
Cumple con los requisitos
Solucin estndar 2: Someter a ultrasonido durante
PRUEBAS ESPECFICAS 1 0-15 minutos una cantidad de ER Extracto en Polvo
CARACTERSTICAS BOTNICAS de Andrografis USP, equivalente aproximadamente a
Macroscpicas: Es un polvo de color marrn grisceo. 15 mg de lactonas diterpnicas, en 25 mL de metano!.
Histologa Centrifugar y usar el sobrenadante.
Examen microscpico: Presenta clulas de la epider- Solucin muestra: Someter a ultrasonido durante
mis superior e inferior de las hojas, algunas clulas 1 0-15 minutos una cantidad de Extracto en Polvo de
contienen cistolitos grandes, de hasta 36 m de di- Andrografis, equivalente aproximadamente a 15 mg de
metro y 1 80 ~lm de largo, con una cicatriz en forma lactonas diterpnicas, en 25 mL de metano!. Centrifugar
de hilio en el extremo qrande; pelos no glandulares de y usar el sobrenadante.
1-4 clulas; pelos glandulares en forma de disco, ca- Adsorbente: fv1eLcia de gel de slice para cromatografa
beza de 8 celulas y pednculo muy corto; estomas con un tamao de partcula promedio de 10-15 m
diacticos en su mayora en la epidermis inferior; clu- (placas para TLC)
las epidrmicas del tallo, alguna clulas contienen cis-
6318 Andrografis /Suplementos Dietticos USP 38

Volumen de aplicacin: 10 !' 1, Pn hncfas de 5-1 O mm Tl_e_m-po-- --- Solucin A s~h;dn 81


Fase mvil: Clorofonnu, dcelond y lolueno (2:2:1)
Solucin reveladora: Mezda de vainillina al 1 % en al-
t- _(~J J--- _ e;;} ---+--- {~o} ---1
cohol y (cido sulf-ico al 1oq,u e11 dkuf1ul CL1) L __ _ _ 4~5_ _ _ __L__ _ ~9~5'---_ _ _ L ._ _ _ ~5_ ____J
Anlisis
Muestras: Solucin estndar 7, Solucin estndar 2 y Sistema cromatogrfico
Solucin muestro (Ver Cromatografa (621 ), Aptitud del Sistema.)
Usar una cmara saturada. Desarrollar hasta que el Modo: HPLC
frente de la fase mvil haya recorrido aproximada- Detector: UV 223 nm
mente 90% de la placa. Retirar la placa de la cmara. Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m
Secar y rociar con Solucin reveladora. Calentar du- Velocidad de flujo: 1,5 ml/min
rante 5-1 O minutos a 100' y observar bajo luz visible. Volumen de inyeccin: 20 L
Criterios de aceptacin: La Solucin muestro presenta Aptitud del sistema
tres zonas principales de color azul grisceo con valores Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B
Rr de aproximadamente 0,4, 0,6 y 0,8 que correspon- Requisitos de aptitud
den en posicin y color a las zonas en la Solucin estn- El cromatograma de la Solucin estndar B es similar al
dar 2. La Solucin estndar 7 presenta una zona de cromatograma de referencia provisto con el lote de
color azul grisceo correspondiente a andrograflido a ER Extracto en Polvo de Andrografis USP.
un R, de aproximadamente 0,4. La Solucin muestro Eficiencia de la columna: No menos de 5000 platos
presenta una zona similar en color y valor Rr a la corres- tericos, Solucin estndar A
pondiente a andrograflido en la Solucin estndar 7. Factor de asimetra: No ms de 1,5 para el pico de
B. El tiempo de retencin del pico principal de la Solu- andrograflido, Solucin estndar A
cin muestra obtenido en la prueba de Contenido de Lac- Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%, de-
tonas Diterpnicas corresponde al de andrograflido en la terminada a partir del pico de andrograflido en in-
Solucin estndar A. Identificar otros picos de lactonas di- yecciones repetidas, Solucin estndar A
terpnicas en la Solucin muestro por comparacin con la Resolucin: No menos de 5 entre los picos de
Solucin estndar B y el cromatograma de referencia pro- neoandrograflido y 14-desoxi-11, 12-dideshidroan-
visto con el lote de ER Extracto en Polvo de Andrografis drograflido, Solucin estndar B
USP. La Solucin muestro presenta picos adicionales co- Anlisis
rrespondientes a neoandrograflido, l 4-desoxi-11, l 2-di- Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar By
deshidroandrograflido y andrograpanina. Solucin muestro
Usando el cromatograma de la Solucin estndar A, So-
COMPOSICIN lucin estndar By el cromatograma de referencia
CONTENIDO DE LACTONAS DITERPNICAS
provisto con el lote de ER Extracto en Polvo de An-
Solucin A: Disolver 0, 14 g de fosfato dicido de pota- drografis USP usado, identificar los tiempos de reten-
sio en 900 mL de agua, agregar 0,5 mL de cido fosf- cin de los picos correspondientes a las diferentes lac-
rico, diluir con agua hasta 1000 mL, mezclar, filtrar, y tonas diterpnicas. Los tiempos de retencin relativos
desgasificar. aproximados de las diferentes lactonas diterpnicas se
Solucin B: Usar acetonitrilo filtrado y desgasificado. proveen en la tabla siguiente:
Solucin estndar A: Disolver una cantidad pesada de
ER Andrograflido USP en metano! para obtener una
solucin con una concentracin conocida de aproxima- Tiempo de
damente 1,0 mg/ml. Transferir 5,0 mL de esta solucin Ana lito Retencin Relativo
a un matraz volumtrico de 1 O mL, diluir con acetoni- Andronraflido 1 00
trilo a volumen, y mezclar. Neoandronraflido 1 16
Solucin estndar B: Transferir una cantidad de ER Ex- 14-Desoxi l l 12-dideshidroandronraflido 1 31
tracto en Polvo de Andrografis USP, equivalente aproxi- Andronrananina 1 50
madamente a 25 mg de lactonas diterpnicas, a un ma-
traz volumtrico de 50 mL, agregar 25 mL de metano!, Calcular por separado los porcentajes de andrograf-
calentar suavemente durante 15-20 minutos, diluir con lido, neoandrograflido, l 4-desoxi-11, 12-dideshi-
acetonitrilo a volumen, y mezclar. Antes de la inyec- droandrograflido y andrograpanina en la porcin de
cin, pasar a travs de un filtro de membrana con un Extracto en Polvo de Andrografis tomada:
tamao de poro de 0,45 ~tm o menor, desechando los
primeros 5 mL del filtrado. Resultado = (ru/r,) x (C,/W) x 5F
Solucin muestra: Transferir una cantidad pesada de
Extracto en Polvo de Andrografis, equivalente aproxima- ru = respuesta del pico de cada lactona diterpnica
damente a 25 mg de lactonas diterpnicas, a un matraz de la Solucin muestra
volumtrico de 50 mL, agregar 25 mL de metano!, ca- r, = respuesta del pico de andrograflido de la
lentar suavemente durante 15-20 minutos, diluir con Solucin estndar A
acetonitrilo a volumen, y mezclar. Antes de la inyec- C. = concentracin de ER Andrograflido USP en la
cin, pasar a travs de un filtro de membrana con un Solucin estndar A (mg/ml)
tamao de poro de 0,45 m o menor, desechando los W = peso de Extracto en Polvo de Andrografis
primeros 5 mL del filtrado. tomada para preparar la Solucin muestra (g)
Fase mvil: Ver la tabla de gradientes siguiente. F = factor de conversin de cada analito
( 1,00 para andrograflido, 3,90 para
Tiempo Solucin A i Solucin B neoandrograflido, 1,45 para l 4-desoxi-
min) (%) 1 (%) 11, 12-dideshidroandrograflido y 2,65 para
andrograpanina)
o 95 5
Criterios de aceptacin: 90.0%-11 0,0%, con respecto
18 55 45 al extracto seco, de la cantidad declarada de lactonas
2S 20 80 JitepniLd~ Llkuiddu Lomo la suma de los porcentajes
28 20 80 de andrograflido, neoandrograflido, 14-desoxi-11, 12-
35 55 45 dideshidroandrograflido y andrograpanina.
usr 38 Suplementos Dietticos / Ar<nd;.mo 6319

IMPUREZAS precipitados de 50 ml, agregar 5 mL de agua para for-


Impurezas Inorgnicas mar una suspensin espesa y transferir la suspensin es-
pesa auna pipeta automtica de polipropileno con un
equeno laor1 Je ia11a Je viJru ~ia11iLaJa. Tram[e1i1
Eliminar lo siguiente: cuantitativamente la suspensin espesa a un tubo cro-
matogrfico pequeo, enjuagar el vaso de precipitados
METALES PESADOS, Mtodo 11 (231): No ms de con agua y rellenar la columna de forma uniforme.
20 ppme (Oficial Ol-dic 2015) Mantener la columna hmeda hasta que est lista para
Impurezas Orgnicas usar. Usando una pipeta volumtrica, transferir 1 O mL
PROCEDIMIENTO: ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Mtodo de la Preparacin Lquida a la columna, recolect;r el
General para Anlisis de Residuos de Plaguicidas (561 ): e_luato y desecharlo. Pipetear 4,0 mL de agua y transfe-
Cumple con Jos requisitos rir a la parte superior de la columna, recolectar el eluato

PRUEBAS ESPECFICAS
en un vial limpio y filtrar, si fuera necesario .
PRDIDA POR SECADO (731): Secar 2,0 g a 105 durante 3 Sistema cromato9rfico
horas: pierde no ms de 5,0% de su peso. (Ver Cromatografla (621 ), Aptitud del Sistema.)
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
Modo: HPLC
tal de microorganismo~ aerobios no excede de 104 ufc/g. Detector: ndice de refraccin
El recuento total combinado de hongos filamentosos y Columnas
levaduras no excede de 101 ufc/g. Guarda columna: Relleno L19
PROCEDIMIENTOS MICROBIOLGICOS PARA COMPROBAR LA AU-
Columna analtica: 7,8 mm x 30 cm; relleno L19
SENCIA DE Ml_CROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cumple
Temperatura de la columna: 85
con los reqws1tos de las pruebas para determinar la au- Velocidad de flujo: 0,6 mL/min
senoa de Salmonella spp. y Escherichia coli. Volumen de inyeccin: 20 L
Aptitud del sistema
REQUISITOS ADICIONALES Muestra: Solucin estndar
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien [NOTA-Los tiempos de retencin relativos aproximados
cerrados. Proteger de la luz y la humedad, y almacenar a para dextrosa y fructosa son aproximadamente 0,8 y
temperatura ambiente controlada. 1,0, respectivamente.]
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en Requisitos de aptitud
latn y despus de la denominacin oficial, la parte de la Resolucin: No menos de 1,8 entre los picos de dex-
plan~a. de la qu~ se prepar el artculo. Cumple con otros trosa y fructosa
requ1s1tos de etiquetado en Extractos Botnicos (565). Desviacin estndar relativa: No ms de 2 0%
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) Anlisis '
ER Andrograflido USP Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
ER Extracto en Polvo de Andrografis USP Calcular los porcentajes de dextrosa y fructosa en el vo-
lumen de Preparacin Lquida tomado:
Resultado= (rulr1) x (C/V) x 0,5
ru = respuesta del pico del analito correspondiente
Arndano, Preparacin Lquida de la Solucin muestra
rs = respuesta del pico del analito correspondiente
DEFINICIN de la Solucin estndar
La Preparacin Lquida de Arndano es un jugo de color C = concentracin del Estndar de Referencia USP
ro10 brillante que se obtiene de los frutos de Vaccinium correspondiente en la Solucin estndar
macrocarpon Ait. o Vaccinium oxycoccos L. (Fam. Erica- (mg/mL)
ceae). No contiene sustancias agregadas. V = volumen de Preparacin Lquida tomado para
la Solucin muestra (mL)
IDENTIFICACIN
Criterios de aceptacin: No menos de 2,4% de dex-
A,-
HPLC: Los tiempos de retencin de Jos picos del trosa y no m~nos de 0,7,% de fructosa
ac1do_ qunico, del acido mlico y del cido ctrico de la CONTENIDO DE ACIDOS 0RGANICOS
Soluoon muestra corresponden a los de la Solucin estn- Fase mvil: Transferir 27,2 g ?e fosfato monobsico de
dar, segn se obtienen en la prueba de Contenido de ci- potasio a un matraz volumetnco de 1000 mL y disolver
dos Orgnicos. en 950 mL de agua. Ajustar con cido fosfrico a un pH
B. AUSENCIA DE ADULTERANTES de 2,4, y diluir con agua a volumen.
Solucin estndar: 1,0 mg/mL de cido tartrico y Solucin est~ndar: 1,0 mg/mL de ER cido Ctrico
O, 1 r;i_g/mL de cido fumrico USP, de ER Acido Mlico USP y de ER cido Qunico
Soluc1on muestra: Usar la Preparacin Lquida. USP
Fase m_vil y Sistema cromatogrfico: proceder segn Solucin muestra: Usar la Preparacin Lquida filtrada.
se indica en la prueba de Contenido de Acidos Orgnicos. Sistema cromato9rfico
Anlisis (Ver Cromatograf10 (621 ), Aptitud del Sistema.)
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra Modo: HPLC
Volumen de inyeccin: 20 L Detector: UV 214 nm
Criterios de aceptacin: Los tiempos de retencin de Columnas
los picos del cido tartrico y del acido fumrico de la Guarda columna: Relleno L1 de 5 m
Solucin estndar no corresponden a ninguno de los [NOTA-Antes de usar, acondicionar la columna con
tiempos de retencin de Jos picos observados de Ja So- metano!, luego con agua y finalmente con Fase mvil.]
lucin muestra. Columna analtica: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1
COMPOSICIN Velocidad de flujo: 0,6 ml/min
CONTENIDO DE DEXTROSA Y FRUCTOSA Volumen de inyeccin: 20 L
Fase mvil: Agua Aptitud del sistema
Solucin estndar: 6,0 mg/mL de ER Dextrosa USP y Muestra: Solucin estndar
2,0 r;i_g/mL de ER Fructosa USP en agua [NOTA-;-Los tier;ipos ~e. reten~in rel~ti_vos aproximados
Soluc1on mu~stra: Transfer: 1,0 g de resina de inter- para ac1do qu1n1co, ac1do mal1co y ac1do c1trico son
cambio cat1onico de carboxilato de sodio a un vaso de 0,4; 0,5 y 1,0, respectivamente.]
6320 Arndano /Suplementos Dietticos USP 38

Requisitos de aptitud ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11)


Resolucin: No meno' Je 2,5 enlre cido qunico y ER cido Ctrico USP
cido malico ER Dextrosa USP
Desviacin estndar relativa. 1-.Ju 111, Je 2,010 ER Fructosa USP
Anlisis ER cido Mlico USP
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra ER cido Qunico USP
Medir el rea de los picos. Calcular los porcentajes de ER Sorbitol USP
cido qunico, cido mlico y cido ctrico en el volu- ER Sacarosa USP
men de Preparacin Lquida tomado:
Resultado = (ru! rs) x Cs x O, 1
ru = rea del pico de cada analito correspondiente
de la Solucin muestra Arginina-ver Arginina en Monografas
rs = rea del pico de cada analito correspondiente Generales
de la Solucin estndar
C = concentracin del Estndar de Referencia USP
correspondiente en la Solucin estndar
(mg/mL) Arginina, Cpsulas
Criterios de aceptacin: No menos de 0,9% de cido
qunico y de cido ctrico; no menos de 0,7% de cido DEFINICIN
mlico. El cociente entre cido qunico y cido mlico Las Cpsulas de Arginina contienen no menos de 90,0% y
es no menos de 1,0. no ms de 110,0% de la cantidad declarada de arginina o
clorhidrato de arginina en una cantidad equivalente a ar-
ADULTERANTES ginina (C6H14N402).
LMITE DE SORBITOL Y SACAROSA
Fase mvil y Solucin muestra: Preparar segn se in- IDENTIFICACIN , ,
dica en la prueba de Contenido de Dextrosa y Fructosa. A. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR CROMATOGRAFIA EN CAPA
Solucin estndar: 0,5 mg/mL de ER Sorbitol USP y de DELGADA (201)
ER Sacarosa USP Solucin estndar: 1,5 mg/mL de ER L-Arginina USP o
Sistema cromatogrfico: Proceder segn se indica en ER Clorhidrato de Arginina USP en agua
la prueba de Contenido de Dextrosa y Fructosa. Solucin muestra: Pesar el contenido de no menos de
Aptitud del sistema 20 Cpsulas, mezclar, y transferir una porcin del con-
Muestra: Solucin estndar tenido, equivalente a aproximadamente 150 mg de ar-
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos para sacarosa ginina, a un matraz volumtrico de 100 mL, agregar
y sorbitol son aproximadamente 0,4 y 1,0, 80 mL de agua, someter a ultrasonido durante 15 mi-
respectivamente.] nutos, diluir con agua a volumen, mezclar, y filtrar.
Requisitos de aptitud Volumen de aplicacin: 5 L
Resolucin: No menos de 1,8 entre los picos de sa- Fase mvil: Alcohol isoproplico e hidrxido de amonio
carosa y sorbitol (7:3)
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% Solucin reveladora: 2 mg/mL de ninhidrina en una
Anlisis mezcla de alcohol butlico y cido actico 2 N (95:5)
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra Anlisis: Proceder segn se indica en Cromatografa
Volumen de inyeccin: 20 L (621), Cromatografa en Capa Delgada. Secar la placa a
Calcular los porcentajes de sacarosa y sorbitol en el vo- 100-105 hasta que el amonaco desaparezca por
lumen de Preparacin Lquida tomado: completo. Rociar con la Solucin reveladora y calentar a
100-105 durante aproximadamente 15 minutos. Ob-
Resultado = (ru!rs) x (Cs/V) x 0,5 servar la placa bajo luz blanca.
Criterios de aceptacin: La mancha principal de la So-
ru = respuesta del pico de cada analito lucin muestra corresponde en apariencia y valor RF a la
correspondiente de la Solucin muestra de la Solucin estndar.
rs = respuesta del pico de cada analito B. El tiempo de retencin del pico principal de la Solu-
correspondiente de la Solucin estndar cin muestra corresponde al de la Solucin estndar, se-
C = concentracin del Estndar de Referencia USP gn se obtienen en Contenido.
correspondiente en la Solucin estndar
(mg/mL) CONTENIDO
V = volumen de Preparacin Lquida tomado para PROCEDIMIENTO
la Solucin muestra (mL) Solucin amortiguadora: 6, 9 g/L de fosfato monob-
Criterios de aceptacin: No ms de 0,05% de sorbitol sico de sodio en agua. Ajustar con cido fosfrico a un
y de sacarosa pH de 3,5.
Solucin A: 0,5 mg/mL de sal sdica del cido 1-octa-
PRUEBAS ESPECFICAS nosulfnico en Solucin amortiguadora
NDICE DE REFRACCIN (831): 1,3435-1,3445 Fase mvil: Solucin A y acetonitrilo (95:5)
PH (791): 2,5 O, 1 Solucin estndar: 1,5 mg/mL de ER L-Arginina USP o
REQUISITOS ADICIONALES ER Clorhidrato de Arginina USP en Solucin
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien amortiguadora
cerrados y almacenar en un refrigerador. Solucin muestra: Pesar el contenido de no menos de
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en 20 Cpsulas, mezclar, y transferir una porcin del con-
latn y, despus de la denominacin oficial, las partes de tenido, equivalente a aproximadamente 150 mg de ar-
la planta de donde se obtuvo el artculo. La etiqueta ginina, a un matraz volumtrico de 1 00 mL, agregar
tambin indica que se utiliza >lo con fine' de fabrica- 80 mL de Solucin amortiguadora, someter a ultrasonido
cin. Este artculo est exento de los requisitos de las durante 15 minutos, diluir con Solucin amortiguadora a
Advertencias Generales con respecto a la declaracin de volumen, mezclar, y filtrar.
embarazo y lactancia (seccin 1 0.40.50. Etiquetado de Sistema cromato9rfico
Productos Botnicos). (Ver Cromatograf!a (621 ), Aptitud del Sistema.)
USP 38 )uplementos U1etet1cos / Arginina 6321

Modo: HPLC fJolvo, equivalente a aproximadamente 150 mg de argi-


Detector: UV 215 nm nina, a un matraz volumtrico de 100 ml, agregar
Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L7 80 ml de aqua, someter a ultrasonido durante 15 mi-
Velocidad de flujo: 0,8 ml/min nutos, diluir con agua a volumen, mezclar, y filtrar.
Volumen de inyeccin: 1O L Volumen de aplicacin: 5 L
Aptitud del sistema Fase mvil: Alcohol isoproplico e hidrxido de amonio
Muestra: Solucin estndar (7:3)
Requisitos de aptitud Solucin reveladora: 2 mg/mL de ninhidrina en una
Eficiencia de la columna: No menos de 1 500 platos mezcla de alcohol butlico y cido actico 2 N (95:5)
tericos Anlisis: Proceder segn se indica en Cromatografa
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% a (621 ), Cromatografa en Capa Delgada. Secar la placa a
r.artir del pico de arginina, en inyecciones repetidas 100-l 05 hasta que el amonaco desaparezca por
Analisis completo. Rociar con la Solucin reveladora y calentar a
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra 100-l 05 durante aproximadamente 15 minutos. Ob-
Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de argi- servar la placa bajo luz blanca.
nina en la porcin de Cpsulas tomada: Criterios de aceptacin: La mancha principal de la So-
lucin muestra corresponde en apariencia y valor Rr a la
Resultado = (ru/rs) x (Cs/Cu) x 100 de la Solucin estndar.
B. El tiempo de retencin del pico principal de la Solu-
ru = respuesta del pico de la Solucin muestra cin muestra corresponde al de la Solucin estndar, se-
rs = respuesta del pico de la Solucin estndar gn se obtienen en Contenido.
C = concentracin de la Solucin estndar (mg/ml)
Cu = concentracin nominal de Arginina en la CONTENIDO
Solucin muestra (mg/mL) PROCEDIMIENTO
Criterios de aceptacin: 90,0%-110,0% de la cantidad Solucin amortiguadora: 6,9 g/L de fosfato monob-
declarada de arginina (C6H 14N402) sico de sodio en agua. Ajustar con cido fosfrico a un
pH de 3,5,
PRUEBAS DE DESEMPEO Solucin A: 0,5 mg/ml de sal sdica del cido 1-octa-
DESINTEGRACIN V DISOLUCIN DE SUPLEMENTOS DIETTICOS nosulfnico en Solucin amortiguadora
(2040): ~umplen con los requisitos de Disolucin Fase mvil: Solucin A y acetonitrilo (95:5)
Medio: Acido clorhdrico O, 1 N; 900 mL Solucin estndar: 1,5 mg/mL de ER L-Arginina USP o
Aparato 2: 100 rpm ER Clorhidrato de Arginina USP en Solucin
Tiempo: 60 min amortiguadora
Solucin estndar: Proceder segn se indica en el Pro- Solucin muestra: Pesar y reducir a polvo fino no me-
cedimiento de Contenido. nos de 20 Tabletas, mezclar, y transferir una porcin del
Solucin muestra: Muestrear segn Desintegracin y Di- polvo, equivalente a aproximadamente 150 mg de argi-
solucin de Suplementos Dietticos (2040). Diluir con Me- nina, a un matraz volumtrico de 100 mL, agregar
dio hasta una concentracin similar a la de la Solucin 80 mL de Solucin amortiguadora, someter a ultrasonido
estndar. durante 15 minutos, diluir con Solucin amortiguadora a
Anlisis: Determinar la cantidad de arginina disuelta en volumen, mezclar, y filtrar.
el Procedimiento de Contenido, haciendo las modificacio- Sistema cromato9rfico
nes necesarias. (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
Tolerancias: No menos de 75% de la cantidad decla- Modo: HPLC
rada ge arginina (C6H14N402). , Detector: UV 215 nm
VARIACION DE PESO DE SUPLEMENTOS DIETETICOS (2091): Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L7
Cumplen con los requisitos Velocidad de flujo: 0,8 mL/min
Volumen de inyeccin: 1O L
REQUISITOS ADICIONALES
Aptitud del sistema
ENVASADO V ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im- Muestra: Solucin estndar
permeables y resistentes a la luz. Requisitos de aptitud
ETIQUETADO: La etiqueta indica la forma de arginina que
Eficiencia de la columna: No menos de 1 500 platos
se ysa y la cantidad equivalente de arginina. tericos
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% a
ER L-Arginina USP r.artir del pico de arginina, en inyecciones repetidas
ER Clorhidrato de Arginina USP Analisis
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de argi-
nina en la porcin de Tabletas tomada:
Arginina, Tabletas Resultado = (ru/rs) x (C;/Cu) x 100

DEFINICIN ru = respuesta del pico de la Solucin muestra


Las Tabletas de Arginina contienen no menos de 90,0% y r1 = respuesta del pico de la Solucin estndar
no ms de 11 0,0% de la cantidad declarada de arginina o Cs = concentracin de la Solucin estndar (mg/ml)
clorhidrato de arginina en una cantidad equivalente a ar- Cu concentracin nominal de Arginina en la
=
ginina (C6H14N42). Solucin muestra (mg/ml)
Criterios de aceptacin: 90,0%-110,0% de la cantidad
IDENTIFICACIN declarada de arginina (CAH14N402)
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
DELGADA (201) PRUEBAS DE DESEMPEO
Solucin estndar: 1,5 mg/ml de ER L-Arginina USP o DESINTEGRACIN V DISOLUCIN DE SUPLEMENTOS DIETTICOS
ER Clorhidrato de Arginina USP en agua (2040): Cumplen con los requisitos de Disolucin
Solucin muestra: Pesar y reducir a polvo fino no me-
nos de 20 Tabletas, mezclar, y transferir una porcin del
6322 Arginina /Suplementos Dieteticos USP 38

Medio: cido clorhdriLO O, l N; 900 mL aslaxantina total, calc1ilarlo como astaxantina lihrP con
Aparato 2: l 00 rpm respecto a la sustancia anhidra.
Tiempo: 60 min
Solucin estndar: Proceder segn se indica en el Pro- IDENTIFICACIN
cedimiento de Contenido. A. CROMATOGRAFA EN CAPA DELGADA
Solucin muestra: Muestrear segn Desintegracin y Di- Solucin estndar: 1 O mg/mL de ER steres de Asta-
solucin de Suplementos Dietticos (2040). Diluir con Me- xantina a partir de Haematococcus pluvialis USP en
dio hasta una concentracin similar a la de la Solucin acetona
estndar. Solucin muestra: 1 O mg/mL de steres de Astaxantina
Anlisis: Determinar la cantidad de arginina disuelta en en acetona
el Procedimiento de Contenido, haciendo las modificacio- Sistema cromato9rfico
nes necesarias. (Ver Cromatografw ( 621 ), Cromatografa en Capa Del-
Tolerancias: No menos de 75% de la cantidad decla- gada.)
rada ge arginina (C6H14N402). , Adsorbente: Capa de mezcla de gel de slice para cro-
VARIACION DE PESO DE SUPLEMENTOS DIETETICOS (2091 ): matografa de 0,25 mm. Secar el adsorbente a 11 O
Cumplen con los requisitos durante 1 hora antes de su uso.
Volumen de aplicacin: 5 ~tL
REQUISITOS ADICIONALES Fase mvil: Hexano y acetona (70:30)
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im- Aptitud del sistema
permeables y resistentes a la luz. Requisitos de aptitud: El cromatograma de la Solucin
ETIQUETADO: La etiqueta indica la forma de arginina que estndar presenta tres zonas claramente separadas,
se ysa y la cantidad equivalente de arginina. donde el dister de astaxantina tiene el valor R, ms
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) alto, seguido por el monoster de astaxantina (el ms
ER L-Arginina USP intenso) y astaxantina libre (el menos intenso).
ER Clorhidrato de Arginina USP Anlisis
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Desarrollar el cromatograma en la Fase mvil hasta que
el frente de la fase mvil haya recorrido aproximada-
mente tres cuartos de la longitud de la placa. Retirar la
Clorhidrato de Arginina-ver Clorhidrato placa de la cmara y secar en una corriente de aire.
Observar las placas bajo luz blanca.
de Arginina en Monografas Generales Criterios de aceptacin: La Solucin muestra presenta
tres zonas principales correspondientes en valor RF a las
obtenidas a partir de la Solucin estndar. La zona en la
parte media (monoster) es la ms intensa y la zona
cido Ascrbico-ver cido Ascrbico en con el valor R1 ms bajo es la menos intensa.
Monografas Generales B. HPLC: La Solucin muestra presenta tres picos princi-
pales con tiempos de retencin correspondientes a los de
los picos de 1 3-cis-astaxantina, la forma todo trans de
astaxantina y 9-cis-astaxantina de la Solucin estndar, se-
cido Ascrbico, Solucin Oral-ver gn se obtienen en la prueba de Contenido de Astaxan-
tina Total.
Acido Ascrbico, Solucin Oral en Monografas
Generales VALORACIN
CONTENIDO DE ASTAXANTINA TOTAL
[NOTA-La astaxantina determinada por este mtodo es
la astaxantina total, que incluye la astaxantina libre, el
monoster y el dister.]
cido Ascrbico, Tabletas-ver cido Solucin amortiguadora: Disolver 6,06 g de tris(hidro-
Ascrbico, Tabletas en Monografas Generales ximetil)aminometano en 750 mL de agua, ajustar con
cido clorhdrico 1 N a un pH de 7,0 y diluir con agua
hasta 1 000 mL.
Solucin de colesterol esterasa: 4 Unidades/mL de co-
cido Asprtico-ver cido Asprtico en lesterol esterasa 1 en Solucin amortiguadora. Preparar en
Monografas Generales el da de su uso.
Solucin A: Metano!
Solucin B: t-Butilmetilter
Solucin C: cido fosfrico, 1% acuoso
Fase mvil: Ver la Tabla 7
steres de Astaxantina
~staxanthin esters;
~steres de cidos grasos de astaxantina;
Esteres de cidos grasos de (3S,3'S)-3,3'-dihidroxi-f:l,fkaro-
teno-4,4'-diona.
DEFINICIN
Los steres de Astaxantina se obtienen mediante extraccin
con dixido de carbono supercrtico o acetona prove-
niente de cultivos de Haematococcus pluvialis. Consta prin-
cipalmente de este reo ismeros 3S, 3' S de astaxantina en
las formas monoster, dister y libre. La forma monoster
es la ms abundante, seguida por la forma dister. La 1 Usar Wako Pure Chemicals, N" de catlogo 037-11221, disponible en www.

forma libre es un componente menor. Se pueden agregar wakousa.com; Sigma, N" de cat,logo C928 I, disponible en www.sigmaal-
antioxidantes adecuados. Contiene no menos de 5% de drich.com; o equivole111e.
USP 38 Supementos Dietticos / Astaxantina 6323

Solucin de estndar interno: 37,5 pq/ml de [R Apo- Tabla 2


carotenal USP en acetona
S9lucin madre del estndar: Transferir 30 mq de ER
Esteres de Astaxantina a p~rf de HaPmatornccus pluvia-
1
1
Nombre del
Tiempo de
Retencin
,l

I
Factor de
Respuesta
Compuesto Relativo ___ Relativa
l1s USP a un mJtrJz volumctnco de 100 ml. Disolver en r---
1 3-cis-Astaxantina --~ _______ _QJI____________ !-----____)_,]________
30 ml de Jcetona, agitar mecnicamente y diluir con
acetona a volumen. Todo tram de Astaxdn-
Solucin estndar: Combinar 2,0 ml de Solucin madre tina 1o 1 o
del estndar y 1,0 mL de Solucin de estndar interno en 9-cis-Astaxanti11d 14 1 1
un tubo de centrfuga de vidrio. Agregar 3,0 ml de So- Apocarotenal (estndar
lucin de colesterol esterasa al tubo y mezclar suave- interno: 1 7 -
mente por inversin. Colocar el tubo en un bloque de
calenta.miento ajustado a 37 y dejar que la reaccin Requisitos de aptitud
continue durante 45 minutos, invirtiendo el tubo de Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
manera suave y lenta cada 1 O minutos. Despus de 45 de la Solucin estndar es similar 91 Cromatograma
minutos: agregJr 1 g de sulfato de sodio y 2 mL de ter de Referencia provisto con el ER Esteres de Astaxan-
de petroleo al tubo. Mezclar en un mezclador de vr- tina a partir del Haematococcus pluvialis USP usado.
tice durante 30 segundos, luego centrifugar a 3000 Resolucin: No menos de 2,0 entre 13-cis-astaxan-
rpm durante 3 minutos. Transferir cuidadosamente la tina y la forma todo trans de astaxantina
capa de ter de petrleo a un tubo de centrfuga de Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%
v1dno de 1 O mL que contenga 1 g de sulfato de sodio para el pico de la forma todo trans de astaxantina
anhidro. Procurar no pipetear la capa emulsiva inter- Anlisis
media. Evaporar la capa de ter de petrleo usando va- Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
co o una corriente de gas inerte a temperatura am- Calcular el porcentaje de contenido de astaxantina total
biente, agregar 3 ml de acetona, someter a ultrasonido en la porcin de muestra tomada:
y filtrar la mezcla. La solucin filtrada es la Solucin
estndar. Resultado~ (Ru/R1) x (Cs/Cu) x P
Solucin madre de la muestra: Entibiar una cantidad
de la muestra en un bao de agua a 50-60 durante Ru = [(1, 3 x rea del pico de 1 3-cis-astaxantina +
30 minutos. Agitar bien la muestra en intervalos de 1 O rea del pico de la forma todo trans de
minutos. Despus de 30 minutos, transferir 30 mg de la astaxantina + 1, 1 x el rea del pico de 9-cis-
muestra a un matraz volumtrico de 100 ml. Disolver astaxantina)/rea del pico del estndar
en 30 ml de acetona, agitar mecnicamente y diluir interno] de la Solucin muestra
con acetona a volumen. Rs = [(l, 3 x rea del pico de 1 3-cis-astaxantina +
Solucin muestra: Combinar 2,0 mL de Solucin madre rea del pico de la forma todo trans de
de la muestra y 1,0 ml de Solucin de estndar interno astaxantina + 1, 1 x el rea del pico de 9-cis-
en un tubo de centrfuga de vidrio. Agregar 3,0 mL de astaxantina)/rea del pico del estndar
Solucin de colesterol esterasa al tubo y mezclar suave- interno] de la Soluciqn estndar
mente por inversin. Colocar el tubo en un bloque de C = concentracin de ER Esteres de Astaxantina a
calentamiento ajustado a 37 y dejar que la reaccin partir de Haematococcus pluviolis USP en la
contine durante 45 minutos, invirtiendo el tubo de Solucin estndar (mg/ml)
manera suave y lenta cada 1 O minutos. Despus de 45 Cu ~ concentracin de la Solucin muestra (mg/ml)
minutos, agregar 1 g de sulfato de sodio y 2 mL de ter P = cantidad declarada de astaxantina total como
de petrleo al tubo. Mezclar en un mezclador de vr- astaxantina libre en el ER steres de
tice durante 30 segundos, luego centrifugar a 3000 Astaxantina a partir de Hoemotococcus
rpm durante 3 minutos. Transferir cuidadosamente la pluvialis USP (%)
cap~ de ter de petrleo a un tubo de centrfuga de Criterios de aceptacin: No menos de 5% de astaxan-
v1dno de 1 O ml que contenga 1 g de sulfato de sodio tina total, calculado como astaxantina libre con res-
anhidro. Procurar no pipetear la capa emulsiva inter- pecto a la sustancia anhidra
media. Evaporar la capa de ter de petrleo usando va-
CONTAMINANTES
co o una corriente de gas inerte a temperatura am-
biente, agregar 3 ml de acetona, someter a ultrasonido IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS <233)
Criterios de aceptacin
y filtrar la mezcla. La solucin filtrada es la Solucin
Arsnico: No ms de 2,0 g/g
muestra. Cadmio: No ms de 1,0 g/g
Sistema cromato9rfico Plomo: No ms de 1,0 ~tg/g
(Ver Cromatografw <621 ), Aptitud del Sistema.)
Mercurio: No ms de 1,0 g/g
Modo: HPLC
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 /: El recuento to-
Detector: 474 nm tal de microorganismos aerobios no excede de 1 03 ufc/g
Columna: YMC Carotenoide, de 4,6 mm x 25 cm, re-
y el recuento total combinado de hongos filamentosos y
lleno L62 de 5 m
Velocidad de flujo: 1,0 ml/min levaduras no excede de 1 0 2 ufc/g. ,
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum-
Volumen de inyeccin: 20 L ple con los requisitos de las pruebas para determinar la
Aptitud del sistema ausencia de Salmonella spp. y Escherichio coli.
Muestra: Solucin estndar CONTENIDO DE FEOFORBIDA
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos aproximados
Solucin A: 50 mg/ml de sulfato de sodio
para l 3-cis-astaxantina, forma todo trans de astaxan-
Solucin B: Solucin saturada de sulfato de sodio
tina, 9-cis-astaxantina y apocarotenal (trans-beta-apo- Solucin madre de la muestra: Transferir 1 00 mg de !a
8'-carotenal) se listan en la Tabla 2.]
muestra a un tubo de ensayo de 1 O ml, agregar 1 O ml
de acetona y disolver con ultrasonido. Transferir cuanti-
tativamente esta solucin a un embudo de separacin,
enjuagando el tubo de ensayo tres veces con porciones
de 1 O ml de acetona y agregando los enjuagues al em-
budo. Agregar 30 mL de ter etlico al embudo de se-
paracin, seguido por 50 ml de Solucin A. Mezclar el
6324 Astilxdnlin<l / Suplt'menlos Dietticos USP 38

contenido de! embudo de sepaacin agitando suave- El Aceite de Hgado de Bacalao se puede sabori7iir con la
mente, luego retirar y desechar la capa inferior. Repetir adicin de no ms del 1 % de un saborizante o mezcla de
el lavado con So/ucion A tres veces. Deshidratar el ex- saborizantes adecuados. Se puede aareaar un antioxi-
tracto remanente con sulfato de sodio anhidro, luego dante adecuado. - -
transferir el extracto a un matraL volumtrico de 50 mL
y diluir con ter etlico a volumen. IDENTIFICACIN
Solucin muestra: Transferir 20 mL de Solucin madre A. PRESENCIA DE VITAMINA A
de la muestra a un vaso de precipitados pequeo. Agre- Solucin muestra: 25 mg/mL de aceite contenido en
gar 20 mL de cido clorhdrico al 1 7% y mezclar la so- las Cpsulas, en cloroformo
lucin vigorosamente. Transferir la capa de cido clorh- Anlisis: Agregar 1 O mL de tricloruro de antimonio SR a
drico a un embudo de separacin y repetir la extraccin 1 mL de la Solucin muestra.
con una segunda porcin de 1 O mL de cido clorhdrico Criterios de aceptacin: Se produce un color azul
al 1 7%, agregando la capa de cido clorhdrico al em- inmediata ll)ente.
budo de separacin. Agregar 150 mL de Solucin By B. PERFIL DE ACIDOS GRASOS
20 mL de ter etlico, y mezclar el contenido del em- Solucin antioxidante: 0,05 mg/mL de butil hidroxito-
budo de separacin agitando. Transferir la capa de ter lueno en hexanos
etlico a un matraz volumtrico de 20 mL y diluir con Solucin de aptitud del sistema: Preparar una mezcla
ter etlico a volumen. que contenga cantidades iguales de palmitato de me-
Condiciones instrumentales tilo, estearato de metilo, araquidato de metilo y behe-
(Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).) nato de metilo en Solucin antioxidante.
Longitud de onda analtica: 667 nm Solucin madre del estndar: 45 m_g/mL de ER Aceite
Longitud ,de paso de la celda: 1 cm de Hgado de Bacalao USP en Solucion antioxidante
Blanco: Eter etlico Solucion estndar: Transferir 2,0 mL de Solucin madre
Anlisis del estndar a un tubo de cuarzo y evaporar con una
Muestra: Solucin muestra corriente suave de nitrgeno. Agregar 1,5 mL de una
Calcular el porcentaje de feoforbida en la porcin de solucin al 2% de hidrxido de sodio en metanol. Tapar
muestra tomada: hermticamente con una tapa con recubrimiento
interno de politetrafluoroetileno, mezclar y calentar en
Resultado = A/(C x F) un bao de agua durante 7 minutos. Enfriar y agregar
2 mL de una solucin de 120 mg/mL de tricloruro de
A = absorbancia de la Solucin muestra boro en metanol. Cubrir con nitrgeno, tapar hermti-
C = concentracin de la Solucin muestra (g/mL) camente y mezclar. Calentar en un bao de agua du-
F = coeficiente de extincin (E 1%) de feoforbida rante 30 minutos. Enfriar a 40-50. Agregar 1 mL de
pura en ter etlico (100 mL. g 1 . cm 1), isooctano, tapar y mezclar en un mezclador de vrtice
702 o agitar vigorosamente durante al menos 30 segundos.
Criterios de aceptacin: No ms de 0,02% Agregar inmediatamente 5 mL de solucin saturada de
cloruro de sodio. Cubrir con nitrgeno, tapar y mezclar
PRUEBAS ESPECFICAS en un mezclador de vrtice o agitar minuciosamente
DETERMINACIN DE AGUA, Mtodo I (921 ): No ms de durante al menos 15 segundos. Dejar que la capa supe-
0,5% rior se torne transparente y transferir a otro tubo. Agitar
la capa metanlica una vez ms con 1 mL de isooctano
REQUISITOS ADICIONALES y combinar los extractos isooctnicos. Lavar los extrac-
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar Pn envases bien tos combinados dos veces con 1 mL de agua y secar
cerrados. sobre sulfato de sodio anhidro.
EST~DARES DE REFERENCIA USP ( 11) Solucin muestra: Proceder segn se indica en Solucin
ER Esteres de Astaxantina a partir de Haematococcus plu- estndar, excepto que se debe usar una cantidad pe-
vialis USP
sada del aceite contenido en las Cpsulas.
ER Apocarotenal USP Sistema cromato~rfico
trans-beta-Apo-8' -ca roten al. (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
CioH40
Modo: Cromatografa de Gases
Detector: Ionizacin a la Llama
Columna: Capilar de slice fundida, de 0,25 mm x 30
m recubierta con una pelcula de Gl 6 de 0,25 m.
Temperatura
Aceite de Hgado de Bacalao-ver Aceite Inyector: 250
de Hgado de Bacalao en Monografas Detector: 280
Columna: Ver la Tabla 7.
Generales
Tabla l

Aceite de Hgado de Bacalao, Cpsulas --~- Tiempo de


Espera (Hold
Time)
DEFINICIN a la Tempe-
Las Cpsulas de Aceite de Hgado de Bacalao contienen no Temperatura 1 Rampa de 1 Temperatura ratura
menos de 95,0% y no ms de 105,0% de la cantidad Inicial Temperatura Final Final
declarada de Aceite de Hgado de Bacalao, en donde el /min min
Aceite de Hgado de Bacalao es el aceite fijo, parcialmente 170 . L.-~-_l_--~-~2=2=5~-~--~2=0_ ____,
destearinizado, que se obtiene de hgados frescos de Ga-
dus morrhua L. y otras especies de la Fam. Gadidae. El Gas transportador: Helio
Aceite de Hgado de Bacalao contiene, en cada g, no me- Relacin de particin de flujo: 1 :200
nos de 180 g (600 Unidades USP) y no ms de 750 g Volumen de inyeccin: 1 L
(2500 Unidades USP) de vitamina A y no menos de Aptitud del sistema
1,5 g (60 USP Unidades) y no ms de 6,25 g (250 Uni- Muestras: Solucin de aptitud Je/ '>istema y Solucin
dades USP) de vitamina D. estandar
USP 38 Suplementos Dietticos / Bacalao 6325

Requisitos de aptitud CONTENIDO


Similitud de los cromatogramas: El cromatograma VITAMINA A
de la Solucin estndar es similar al Cromatograma de Muestra: 500 mg a 1 g del aceite contenido en las
Referencia provisto rnn e ER Aceile de Hgctdo de Cci~uict~
Bacalao USP. Identificar los tiempos de retencin de Anlisis: Proceder segn se indica en Valoracin de Vita-
los steres metlicos de los cidos grasos pertinentes mina A (571 ).
comparando el cromatograma de la Solucin estndar Criterios de aceptacin: 180 g (600 Unidades USP) a
con el Cromatograma de Referencia provisto con el 750 g (2500 Unidades USP) de vitamina A por g de
ER Aceite de Hgado de Bacalao USP. aceite contenido en las Cpsulas
Resolucin: No menos de 1, 3 entre oleato de metilo VITAMINA D
y cis-vaccinato de metilo, y aqul entre gadoleato de Solucin A: Alcohol n-amlico y hexano deshidratado
metilo y gondoato de metilo es suficiente para pro- (3:997)
psitos de identificacin y medicin del rea, Solucin Solucin B: Acetonitrilo, agua y cido fosfrico
estndar (96:3,8:0,2)
Porcentajes tericos de rea: 24,4 1 para palmi- Solucin de butil hidroxitolueno: 1O mg/mL de butil
tato de metilo, 24,8 1 para estearato de metilo, hidroxitolueno en hexano cromatogrfico
25,2 1 para araquidato de metilo y 25,6 1 para Solucin acuosa de hidrxido de potasio: 800 mg/mL
behenato de metilo, Solucin de aptitud del sistema de hidrxido de potasio en agua hervida recientemente.
Anlisis Mezclar y enfriar. [NOTA-Preparar esta solucin en el
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra da de su uso.]
Identificar los tiempos de retencin de los steres metli- Solucin alcohlica de hidrxido de potasio: Disolver
cos de los cidos grasos pertinentes en la Solucin 3 g de hidrxido de potasio en 50 mL de agua hervida
muestra comparando el cromato9rama de la Solucin recientemente. Agregar 1 O mL de alcohol y diluir con
muestra con el de la Solucin estandar. agua hervida recientemente hasta 100 ml. [NOTA-Pre-
Determinar el nmero de picos de steres metlicos de parar esta solucin en el da de su uso.]
cidos grasos en la Solucin muestra: El nmero de pi- Solucin de cido ascrbico: 100 mg/mL de cido as-
cos de steres metlicos de cidos grasos que exceden crbico en agua. [NOTA-Preparar esta solucin en el
de 0,05% del rea total de los steres metlicos de da de su uso.]
cidos grasos es, por lo menos, 24 y los 24 picos ms Solucin de estndar interno: 5 g/mL de ER Ergocal-
grandes de los steres metlicos representan ms del ciferol USP en alcohol
90% del rea total. (Estos corresponden a los siguien- Solucin madre del estndar: 5 g/mL de ER Colecal-
tes, en orden comn de elucin: 14:0, 15:0, 16:0, ciferol USP en alcohol
16:1 n-7, 16:4 n-1, 18:0, 18:1 n-9, 18:1 n-7, 18:2 Solucin estndar: Transferir 2,0 mL de Solucin madre
n-6, 18:3 n-3, 18:4 n-3, 20:1 n-11, 20:1 n-9, 20:1 del estndar y 2,0 mL de Solucin de estndar interno a
n-7, 20:2 n-6, 20:4 n-6, 20:3 n-3, 20:4 n-3, 20:5 n- un matraz de fondo redondo. Proceder segn se indica
3, 22:1 n-11, 22:1 n-9, 21 :5 n-3, 22:5 n-3 y 22:6 n- en Solucin muestra 7, comenzando donde dice "Agre-
3.) gar 5 mL de ... ".
Calcular el porcentaje de rea de cada ster metlico de Solucin muestra 1: Transferir una cantidad equiva-
cidos grasos en la porcin de Cpsulas tomada: lente a 4,00 g del aceite contenido en las Cpsulas a un
matraz de fondo redondo. Agregar 5 mL de Solucin de
Resultado = (rAI rB) x 100 cido ascrbico, 100 mL de alcohol y 1 O mL de Solucin
acuosa de hidrxido de potasio, y mezclar. Someter la
rA ~
rea del pico de cada cido graso individual mezcla a reflujo en un bao de vapor durante 30 minu-
rB rea total de todos los picos, excepto por el
= tos. Agregar 100 mL de una solucin de cloruro de so-
pico del disolvente y el butil hidroxitolueno dio de 1 O mg/ml. Enfriar rpidamente bajo agua co-
Criterios de aceptacin: La Solucin muestra cumple rriente y transferir la mezcla saponificada a un
con los lmites descritos en la Tabla 2. separador de 500 mL, enjuagando el matraz de saponi-
ficacin con 75 mL de una solucin de cloruro de sodio
Tabla 2 de 1 O mg/mL y luego con 150 mL de una mezcla de
ter y hexano (1 :1 ). Agitar la mezcla saponificada y los
Lmite Lmite
enjuagues combinados vigorosamente durante 30 se-
Anotacin Inferior Superior
gundos y dejar en reposo hasta que las capas se tornen
cido Graso Abreviada (rea%) (rea%)
transparentes. Desechar la capa inferior. Lavar los ex-
cidos arasos saturados tractos de ter-hexano agitando vigorosamente con
cido mirstica 14:0 20 60 50 mL de Solucin alcohlica de hidrxido de potasio y,
cido palmtico 16:0 70 f-
14 o posteriormente, lavando con tres porciones de 50 mL
cido esterico 18:0 1o 40 de una solucin de cloruro de sodio de 1 O mg/mL. Pa-
cidos arasos monoinsaturados
sar la capa superior a travs de 5 g de sulfato de sodio
anhidro, colocados en un papel de filtrado rpido, en
cido palmitoleico 16:1 n-7 -- -- _4_,5 11 5 un matraz de 250 mL adecuado para un evaporador ro-
cido cis-vaccnico 18:1 n-7 20 7o tatorio. Lavar el filtro con 1 O mL de una mezcla de ter
cido oleico 18:1 n-9 12 o 21 o y hexano (1: 1 ), y combinar con el extracto. Evaporar el
cido oadoleico 20:1 n-11 1o 55 disolvente usando presin reducida a una temperatura
cido oondoico 20:1 n-9 50 17 o que no exceda de 30 y llenar con nitrgeno cuando se
cido ercico ~2:l__ri_-:-_'L __ _Q. 15
haya completado la evaporacin. Como alternativa,
-------~

evaporar el disolvente bajo una corriente suave de ni-


cido cetoleico 22:1 n-11 50 12 o trgeno a una temperatura que no exceda de 30. Di-
cidos_!l!asos poliinsatu_r1a_clos --- -------- -- ~olver el residuo en 1,5 mL de Solucin A. [NOTA-Puede
Acido linoleico 18:2 n-6 05 30 ser necesario calentar suavemente en un bao ultras-
cido <L:llriolnico ____ 18:3 n 3 o 20 nico. Una gran parte del residuo blanco es colesterol.]
cido morctico 18:4 n-3 05 45 Solucin muestra 2: Agregar 2,0 mL de Solucin de e:.-
cido eicosapentaenoico 20:5 n-3 70 16 o
tndar interno a 4,00 g del aceite contenido en las Cp-
sulas y proceder segn se indica en Solucin muestra 7
cido docosahexaenoico 22:6 n--3 60 18 o comerlLando donde dice "Agregar 5 mL de .. .
6326 Bacalao ! 'lufJIP11wnlm Dielf>tico~ USP 38

Sistem_a cromatogrfico de limpieza una corriente de aire seco hasta que se haya evaporado
(Ver lromatogrofta ( 621 ), Aptitud del Sistema.) por completo el isooctano. f)esar las cubiertas de las
Modo: HPLC Cpsulas vacas en el frasco de pesada tarado oriqinal y
Detector: UV Lb.'.> nm c~lcu!ar el pe)o net~ promedio por Cp~ula. , .
Fase mvil: Solucin A Criterios de aceptac1on: 95,0% l 05,0% de 1a cantidad
Columna: Acero inoxidable, de 25 mm x 4,6 cm; re- declarada de aceite de hgado de bacalao
lleno L1 O
Volumen de inyeccin: 350 L PRUEBAS DE DESEMPEO
Anlisis (limpieza) VARIACIN DE PESO DE SUPLEMENTOS DIETTICOS (2091):
Muestras: Solucin estndar Solucin muestra 7 y Solu- Cumplen co~ los requisito,s. ,
cin muestra 2 ' DESINTEGRACION Y DISOLUCION DE SUPLEMENTOS DIETETICOS
Recoger por separado los eluatos de 2 minutos antes (2040): Cumplen con los requisitos de Prueba de Rup-
hasta 2 _minutos despus del tiempo de retencin de tura para Cpsulas Blandas
colecalc1ferol en un tubo de vidrio que contenga
1 mL de Soluci~n. de butil hidroxitolueno y provisto de PRUEBAS ESPECFICAS
un cierre hermet1co. Evaporar cada tubo bajo una co- GRASAS y ACEITES FIJOS, Materia lnsaponificable (401): No
rriente de nitrgeno a una temperatura que no ex- ms de 1,30%
ceda de 30. Disolver el residuo en 1,5 mL de GRASAS y ACEITES FIJOS, ndice de Acidez (401)
acetonitrilo. Solucin muestra: Mezclar 15 mL de alcohol con
Sistema cromato9rfico analtico 15 mL ~e ter, agrega_r 5 gotas ~e fenolftalena SR y
(Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.) neutralizar con h1drox1do de sodio O, l N. Disolver 2,0 g
Modo: HPLC del aceite contenido en las Cpsulas en la mezcla y ca-
Detector: UV 265 nm lentar la solucin de aceite a ebullicin suave bajo un
Fase mvil: Solucin B condensador de reflujo durante 1 O minutos.
Columna: Acero inoxidable, de 15 mm x 4,6 cm; re- Anlisis: Enfriar y valorar la mezcla con hidrxido de
lleno Ll de 5 m sodio O, 1 N SV hasta que se produzca un color rosado
Volumen de inyeccin: 200 ~tL que persista despus de agitar durante 30 segundos.
Aptitud del sistema Criterios de aceptacin: Se requiere no ms de 1,0 mL
Muestra: Solucin estndar (despus de la limpieza) de hidrxido de sodio,O, l N.
Requisitos de aptitud GRASAS y ACEITES FIJOS, !Jldice de Yodo (401 ): 145-180
Resolucin: No menos de 1,4 entre colecalciferol y GRASAS y ACEITES FIJOS, Indice de Saponificacin (401 ):
ergocalciferol 180-192
[NOTA~Si se ha usado dixido de carbono como conser-
Desv!acin estndar relativa: No ms de 2,0% para
el pico de colecalciferol en inyecciones repetidas vante, exponer el aceite contenido en las Cpsulas en
Anlisis una cpsula hueca en un desecador de vaco durante
M~,estras: Solucin est?ndar, Solucin muestra 7 y Solu-
24 horas antes de pesar la muestra para la determina-
c1on muestra 2 (despues de la limpieza) cin del ndice de saponificacin.]
Calcu!~r el contenido de vitamina D, en g/g, en la REQUISITOS ADICIONALES
porc1on de aceite tomada: ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im-
permeables a temperatura ambiente. Proteger de la luz.
Resultado= (Ru/Rs) x (Cs/Cu) ETIQUETADO: La potencia de la vitamina A y de la vita-
Ru ~ respuesta de colecalciferol con respecto al mina D, cuando se indican en la etiqueta, se pueden
estndar interno corregido en la Solucin expre_s,ar en Unidades USP por g de aceite. La potencia
muestra 2, segn se calcula a continuacin tamb1en se puede expresar en unidades mtricas, basn-
= respuesta de colecalciferol con respecto al dose en que 1 Unidad USP de Vitamina A= 0,3 g de la
estndar interno en la Solucin estndar forma todo trans retino! y 40 Unidades USP de Vitamina
= concentracin de ER Colecalciferol USP en la D = 1 g. Etiquetar las Cpsulas enfatizando la necesidad
Solucin estndar (g/ml) de evitar la congelacin o la exposicin a la humedad
Cu = concentracin de aceite en la Solucin muestra excesiva o a una temperatura superior a 40. Cuando se
2 (g/mL) c;Jedara _el contenido de cido docosahexaenoico y de
ac1do e1cosapentaeno1co, indicar en la etiqueta la canti-
da9 en mg por Cpsula.
ESTANDARES DE REFERENCIA USP ( 11)
rw = respuesta del pico de colecalciferol de la ER Colecalciferol USP
Solucin muestra 2 ER Aceite de Hgado de Bacalao LJSP
r11> = respuesta del pico del estndar interno de la ER Ergocalciferol USP
Solucin muestra 2 ER Vitamina A USP
r111 respuesta del pico del estndar interno de la
=
Solucin muestra 7
ru1 = respuesta del pico de colecalciferol de la
Solucin muestra 7
Criterios de aceptacin: 1,5 g (60 Unidades USP) a Bacopa
6,25 g (250 Unidades USP) de vitamina D por g de
aceite contenido en las ~psulas DEFINICIN
CONTENIDO DE ACEITE DE HIGADO DE BACALAO La Bacopa consta de los tallos y hojas secos de Bacopa mon-
Anlisis: Pesar no menos de 1 O Cpsulas en un frasco men (L.) Pennell (Fam. Scrophulariaceae). Contiene no
de pesada tarado. Mediante una cuchilla afilada u otros menos de 2,5% de glicsidos triterpPnirn<;, calculado con
medios apropiados, abrir cuidadosamente las Cpsulas, resp~cto a la materia seca como la suma de bacopsido 1,
sin perder material de la cubierta, y transferir el conte- bacos1do A3, bacopsido 11, el ismero JUjubogennico de
nido combimdo de las Cpsulas a un vaso de precipita- bacopa)aponina C y bacopasaponina C.
dos de 100 mL. Retirar cualquier sustancia adherida a
las cubiertas de las Cpsulas vacas lavando con varias IDENTIFICACIN
porciones pequeas de isooctano. Desechar los lavados A.,. La Bacopa c~mple cor; los requisitos de Pruebas Espe-
y dejar que las cubiertas de las Cpsulas se sequen en cificas, Caractemlicus Botamcas.
USP 38 Suplementos Dietticos / Bacopa 6327

8. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA mente 8 mL de metano!. Someter a ultrasonido y calen-
DELGADA (201) tar suavemente durante 15-20 minutos, diluir con me-
Solucin estndar: Trdmferir dproximaddmente 1 O rng tano! a volumen, y mezclar. Antes de la inyeccin, pasar
de tR Exlt ctclu e11 Pulvu Je BaLU!.Jd USP a u11 1t1ctl1 aL d lr dv~ Je ur 1 illr v Je 111e11 d.J1 dlld c011 un ta1r1a1)0 de
volumtrico de 1 O mL y agregar aproximadamente poro de 0,45 pm o menor, desechando los primeros
8 mL de metano!. Someter a ultrasonido y calentar sua- 5 mL del filtrado.
vemente durante 1 5-20 minutos, diluir con metano! a Solucin muestra: Transferir aproximadamente 2,5 g
volumen, mezclar, centrifugar, y usar el sobrenadante. de Bacopa, reducida a polvo fino, a un matraz de fondo
Solucin muestra: Usar la Solucin muestra, preparada redondo de 1 00 mL equipado con un condensador de
segn se indica en la prueba de Contenido de Glicsidos reflujo. Agregar 25 mL de metano!, someter a reflujo en
Triterpnicos. un bao de agua durante 1 O minutos, enfriar a tempe-
Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatografa ratura ambiente, y decantar el sobrenadante. Repetir
con un tamao promedio de partcula de 10-15 m hasta que el ltimo extracto se torne incoloro. Combi-
(placas para TLC) nar los extractos, filtrar, concentrar al vaco, y ajustar el
Volumen de aplicacin: 15 L, en bandas de 5-1 O mm volumen hasta 1 00 mL usando metano!. Antes de la in-
Fase mvil: Acetato de etilo, metano! y agua (7:2:1) yeccin, pasar a travs de un filtro de membrana con
Solucin reveladora: Vainillina al 1 % en alcohol y un tamao de poro de 0,45 m o menor, desechando
cido sulfrico al 1 0% en alcohol (1: 1) los primeros 5 mL del filtrado.
Anlisis Sistema cromatogrfico
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra (Ver Cromatografa (621 ), Aptitud del Sistema.)
Aplicar las muestras en bandas a una placa para cro- Modo: HPLC
matografa en capa delgada adecuada (ver Cromato- Detector: UV 205 nm
grafa (621 )). Usar una cmara saturada. Desarrollar Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m desac-
los cromatogramas hasta que el frente de la fase m- tivado para bases con recubrimiento exhaustivo
vil haya recorrido aproximadamente tres cuartos de la (endcapped).
placa. Retirar la placa de la cmara, secar, rociar con Temperatura de la columna: 27 1
Solucin reveladora, calentar durante 5-1 O minutos a Velocidad de flujo: 1,5 mL/min
aproximadamente 70, y observar bajo luz visible. Volumen de inyeccin: 20 L
Criterios de aceptacin: La Solucin muestra presenta Aptitud del sistema
una zona principal de color azul oscuro debida a una Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B
mezcla de bacsido A3, bacopsido 11, el ismero juju- Requisitos de aptitud
bogennico de bacopasaponina e y bacopasaponina e a Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
un valor Rr de aproximadamente 0,6 y una mancha de de la Solucin estndar B es similar al cromatograma
color rosado plido debida a bacopsido 1 a un valor Rr de referencia provisto con el lote de ER Extracto en
de aproximadamente 0,4, las cuales corresponden en Polvo de Bacopa USP usado.
posicin y color a las zonas en el cromatograma de la Resolucin: No menos de 1,0 entre los picos de ba-
Solucin estndar. Se observan otras zonas para la Solu- copsido 11 y bacsido Ai, Solucin estndar B
cin muestra y la Solucin estndar. Factor de asimetra: No ms de 1,5 para el pico de
c. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR HPLC: La Solucin mues- bacsido A3, Solucin estndar A
tra de la prueba de Contenido de Glicsidos Triterpnicos Desviacin estndar relativa: No ms de 2% deter-
presenta un pico principal en el tiempo de retencin co- minada a partir del pico de bacsido A1 en inyeccio-
rrespondiente al de bacsido A3 en el cromatograma de nes repetidas, Solucin estndar A
Id SuluLin estndar A. ldentific.dr otros picos de glicsidos Anlisis
triterpnicos en la Solucin muestra por comparacin con Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar By
el cromatograma de la Solucin estandar By el cromato- Solucin muestra
grama de referencia provisto con el lote de ER Extracto Usando los cromatogramas de la Solucin estndar A, la
en Polvo de Bacopa USP. La Solucin muestra presenta Solucin estndar By el cromatograma de referencia
picos adicionales correspondientes a bacopsido 1, baco- provisto con el lote de ER Extracto en Polvo de Bacopa
psido 11, el ismero jujubogennico de bacopasaponina USP, identificar los tiempos de retencin de los picos
e y bacopasaponina c. correspondientes a los diferentes glicsidos triterpni-
cos. Los tiempos de retencin relativos aproximados
COMPOSICIN para los diferentes glicsidos triterpnicos se propor-
CONTENIDO DE GucSIDOS TRITERPNICOS cionan en la siguiente tabla.
Solucin A: Disolver O, 14 g de fosfato dicido de pota-
sio anhidro en 900 mL de agua, agregar 0,5 mL de
cido fosfrico, diluir con agua hasta 1000 mL, mezclar, Tiempo de
filtrar, y desgasificar. Retencin
Analito Relativo
Solucin B: Usar acetonitrilo filtrado y desgasificado.
Fase mvil: Ver la tabla de gradientes siguiente. Bacoosido 1 o 73
Bacsido A1.... ------- 1 00
---------r-----------------~-~------~

Tiempo Solucin A Solucin B Bacoosido 11 --~--


1 04
min lo lo El ismero iuiuboaenrnico de bacooasaoonina C 1 15
>-------~---
________ _lL____ 1-~
______f_6_-__ -----
____ _z_Q_______

-
60 j
30
40

--~~ ~-=-~i=~~-- -~==-=


Bacooasaoon ina _~-- __

Calcular por separado los porcentajes de bacopsido 1,


bacsido A,, bacopsido 11, el ismero jujubogennico
1 22

de bacopasaponina e y bacopasaponina e en la por-


cin de Bacopa tomada:
Solucin estndar A: ~ometer a ultrasonido una canti-
dad pesada de ER Bacsido A, USP en metano! para Resultado = (r11/r,) X e, X (V /W) X F X 1 00
obtener una solucin con una concentracin de aproxi-
madamente 0,5 mg/mL. ru = respuesta del pico de cada glicsido
Solucin estndar B: Transferir aproximadamente triterpnico de la Solucin muestra
1 O mg de ER Extracto en Polvo de Bacopa USP a un r, = respuesta del pico de bacsido Ai de la
matraz volumtrico de 1 O mL y agregar aproximada- Solucin estndar A
6328 Barnra / )up!ementos Dietticos USP 38

Cs =concentracin de ER Bacsiclo A, lJ)P en la PROCEDIMIENTOS MICROBIOLGICOS PARA COMPROBAR LA AU-


Solucin estndar A (mg/mL) SENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cumple
V = volumen final de la Solucin muestra (mL) con los requisitos de las pruebas para determinar la a11-
W peso de B.:icop,1 usado para fJ' efJdf di ict senc1a de ">almonella spp. y Escherichia coli.
Solucin muestra (mg)
F = factor de conversin para cada analito: .. REQUISITOS ADICIONALES .
1,00 para bacsido A 3; 1,03 para bacopas1do ENVASADO V ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
1; 0,81 para bacopsido 11; 0,99 para el . cerrados. Proteger de la luz y la humedad, y almacenar a
ismero jujubogennico de bacopasaponina temperatura ambiente. . ,.
c y 0,75 para bacopasaponina c . ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre c1ent1f1co en
Criterios de aceptacin: Sumar los porcentaies de ba- latn y despus de la denominacin oficial, las partes de
copsido 1, bacsido Ai, bacopsido 11, el ismero juju- la r;lanta contenidas en el artculo.
bogennico de bacopasaponina e y bacopasaponina C: ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
Se encuentra no menos de 2,5%, con respecto a la ER Bacsido Ai USP
materia seca. ER Extracto en Polvo de Bacopa USP
IMPUREZAS
lmpu~ezas Inorgnicas , . .
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Insolubles en Aodo
(561): No ms de 6,0% Bacopa en Polvo
METALES PESADOS, Mtodo /JI (231): No ms de 20 ppm
Impurezas Orgnicas, , . DEFINICIN
PROCEDIMIENTO 1: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Matena La Bacopa en Polvo es Bacopa reducida a polvo o a polvo
Orgnica Extraa (56)): No ms de 2,0%, , muy fino. Contiene no menos de 2,5% de glicsidos tri-
PROCEDIMIENTO 2: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Metodo terpnicos, calculado con respecto a la materia seca como
General para Anlisis de Residuos de Plaguicidas (561 ): la suma de bacopsido 1, bacsido A,, bacopsido 11, el
Cumple con los requisitos. ismero jujubogennico de bacopasaponina c y bacopasa-
PRUEBAS ESPECFICAS
ponina C.
CARACTERSTICAS BOTNICAS IDENTIFICACIN
Macroscpicas: El tallo es rastrero, suculento, glabro, A. La Bacopa en Polvo cumple con los requisitos de Prue-
blando, obtuso-angular; con entrenudos largos, inser- bas Especficas, Caractersticas Botnicas. ,
ciones de races en los nudos; sin hojas en direccin a B. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR CROMATOGRAFIA EN CAPA
la base; con ramas ascendentes. Las hojas son simples, DELGADA (201)
ssiles o con pecolo corto, opuestas, suculentas, de Solucin estndar: Transferir aproximadamente 1 O mg
1-2 mm de espesor; oblongo-obovadas en forma de de ER Extracto en Polvo de Bacopa USP a un matraz
esptula, borde completo o en raras ocasiones denta- volumtrico de 1 O mL y agregar aproximadamente
dos, pice redondeado, nervadura central poco mar- 8 mL de metano!. Someter a ultrasonido y calentar sua-
cada, de 0,6-2,5 cm de largo y 3-8 mm de ar:ic.h~; la vemente durante 15-20 minutos, diluir con metano! a
superficie superior es de color verde, la ~uperf1c1e infe- volumen, mezclar, centrifugar, y usar el sobrenadante.
rior es de color verde y punteada. El articulo farmaco- Solucin muestra: Usar la Solucin muestra, preparada
peico es de color amarillento; consta d!" mezclas. secas segn se indica en la prueba de Contenido de Clicsidos
de hojas y tallos partidos, en su mayoria con hojas des- Trilerpnicos.
prendidas; olor suave similar al del heno y sabor muy Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatografa
amargo. con un tamao promedio de partcula de 10-15 m
Histologa . , . (placas para TLC)
Seccin transversal de los tallos: Capa ep1derm1ca; Volumen de aplicacin: 15 L, en bandas de 5-1 O mm
corteza amplia compuesta de clulas parenquimticas Fase mvil: Acetato de etilo, metano! y agua (7:2: 1)
de paredes delgadas y grandes espacios .1nterce!ulares; Solucin reveladora: Vainillina al 1 % en alcohol y
vasos de xilema dispuestos en forma radial, r_ad1os me- cido sulfrico al 10% en alcohol (1: 1)
dulares uniseriados; mdula compuesta de celulas re- Anlisis
dondas o isodiamtricas de paredes delgadas con es- Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
pacios intercelulares definidos. Ausencia de canales de Aplicar las muestras en bandas a una placa para cro-
resina y esclereidas pericclicas. matografa en capa delgada adecuada (ver Cromato-
Seccin transversal de las hojas: Presentan una es- grafa (621)). Usar una cmara saturada. Desarrollar,
tructura ms o menos isobilateral; epidermis con pelos los cromatogramas hasta que el frente de la fase mo-
glandulares y estomas; la superficie superior t!ene ms vil haya recorrido aproximad~mente tres cuar~os de la
pelos y menos estomas que la superf1c1e inferior; me- placa. Retirar la placa de la camara, secar, ro~1ar con
sfilo compuesto de tejido esponjoso, con unos pocos Solucin reveladora, calentar durante 5-1 O minutos a
prismas de oxalato de calcio y haces vasculares aproximadamente 70', y observar bajo luz visible.
presentes . Criterios de aceptacin: La Solucin muestra presenta
PRDIDA POR SECADO <731 ): Secar 1,0 g de Bacopa redu-
una zona principal de color az~I oscuro debida a ~na
cida a polvo fino a 105 durante 3 horas: pierde no ms mezcla de bac.sido Ai, bacopas1do 11, el 1somero JUJU-
de 12,0% de su peso . bogennico de bacopasaponina e y bacopasaponina c l
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Totales (561 ): un valor R, de aproximadamente 0,6 y una mancha de
No ms de 18%, determinado en 1,0 g de Bacopa redu- color rosado plido debida d bacopasido 1 a un valor RF
cida a polvo fino de aproximadamente 0,4, las cuales corresponden en
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Extractos Solubles en Al- posicin y color a las zonas en el cromatograma de la
cohol, Mtodo 2 (561 ): No menos de 6,0% Solucin estndar. Se observan otras zonas para la Solu-
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- cin muestra y la Soluciqn estndar. .,
tal de microorganismos aerobios no excede de 10 5 ufc/g; c. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR HPLC: La Solue1on mues-
el recuento total combinado de hongos filamentosos y tra de la prueba de Contenido de .Clicsidos Triterpr;icos
levaduras no excede de 1 0 3 ufc/g; y el recuento de bac- presenta un pico principal en el tiempo de retenc1on co-
terias Gram negativas tolerantes a la bilis no excede de rrespondiente al de bac6s1do Ai en el cromatogram~ de
10 3 ufc/g. la Solucin estndar A. Identificar otros picos de gl1cos1dos
lJSP :rn Suplt?menio<> Dieteticos / Bacopa 6329

tritcrpnicos en !J Solucin rnucstra por comparacin con Anlisis


el nomatograma de la .'iolunon estandar H y el cromato- Muestras: Solucin estandar A, Solucion estndar B y
grama de referencia provisto con el lote de ER Extracto Solucion muestro
en Polvo de l1acopa U'.:>!' usado. La Soiuc;on muestra pre- u~amio im crornaLOgrarna~ de ia Suiuciun olnJw A,
senta picos adicionales correspondientes a harnrsido 1, la ~nfucinn i'\tndar R y f'I nomatograma de referen-
bacopsido 11, el ismero jujubogennico de bacopasapo- cia provisto con el lote de ER Extracto en Polvo de
nina c y bacopasaponina c. Bacopa USP, identificar los tiempos de retencin de
los picos correspondientes a los diferentes glicsidos
COMPOSICIN triterpnicos. Los tiempos de retencin relativos apro-
CONTENIDO DE GucSIDOS TRITERPNICOS ximados para los diferentes glicsidos triterpnicos se
Solucin A: Disolver O, 14 g de fosfato dicido de pota- proporcionan en la siguiente tabla.
sio anhidro en 900 ml de agua, agregar 0,5 ml de
cido fosfrico, diluir con agua hasta 1 000 ml, mezclar, ---------------- - -----------
Tiempo de
filtrar, y desgasificar.
Retencin
Solucin B: Usar acetonitrilo filtrado y desgasificado.
Analito Relativo
Fase mvil: Ver la tabla de gradientes siguiente.
Bacoosido 1 o 73
-----------
_Bilc:cs.iQo A5_ 1 00
Tiempo Solucin A Solucin B ------ -

(min) (O/o) (O/o) Bacoosido 11 -- ~---_l,_()1__


Elismero iuiuboaennico de bacopasaponina C 1 15
---------- r------70 . - -- ---- ----
30
Bacopasaoonina C 1 22
25 60 40
26 70 30 Calcular por separado los porcentajes de bacopsido 1,
30 70 30 bacsido Ai, bacopsido 11, el ismero jujubogennico
de bacopasaponina e y bacopasaponina c en la por-
Solucin estndar A: Someter a ultrasonido una canti- cin de Bacopa en Polvo tomada:
dad pesada con exactitud de ER Bacsido A3 USP en
metanol para obtener una solucin con una concentra- Resultado = (r"/rs) x Cs x (V /W) x F x 100
cin conocida de aproximadamente 0,5 mg/ml.
Solucin estndar B: Transferir aproximadamente ru = respuesta del pico de cada glicsido
1 O mg de ER Extracto en Polvo de Bacopa USP a un triterpnico de la Solucin muestra
matraz volumtrico de 1 O ml y agregar aproximada- rs = respuesta del pico de bacsido A1 de la
mente 8 ml de metanol. Someter a ultrasonido y calen- Solucin estndar A
tar suavemente durante 15-20 minutos, diluir con me- Cs = concentracin de ER Bacsido A1 USP en la
tano! a volumen, y mezclar. Antes de la inyeccin, pasar Solucin estndar A (mg/ml)
a travs de un filtro de membrana con un tamao de V = volumen final de la Solucin muestra (ml)
poro de 0,45 m o menor, desechando los primeros W =peso de Bacopa en Polvo usado para preparar
5 ml del filtrado. la Solucin rnuestra (mg)
Solucin muestra: Transferir aproximadamente 2,5 g F = factor de conversin para cada analito:
de Bacopa en Polvo, pesados con exactitud, a un ma- 1,00 para bacsido A1; 1,03 para bacopsido
traz de fondo redondo de 100 ml equipado con un 1; 0,81 para bacopsido 11; 0,99 para el
condensador de reflujo. Agregar 25 ml de metano!, so- ismero jujubogennico de bacopasaponina
meter a reflujo en un bao de agua durante 1 O minu- e y 0,75 para bacopasaponina e
tos, enfriar a temperatura ambiente, y decantar el so- Criterios de aceptacin: Sumar los porcentajes de ba-
brenadante. Repetir hasta que el ltimo extracto se copsido 1, bacsido Ai, bacopsido 11, el ismero juju-
torne incoloro. Combinar los extractos, filtrar, concen- bogennico de bacopasaponina c y bacopasaponina C:
trar al vaco, y ajustar el volumen hasta 1 00 ml usando Se encuentra no menos de 2,5% con respecto a la ma-
metanol. Antes de la inyeccin, pasar a travs de un teria seca.
filtro de membrana con un tamao de poro de 0,45
m o menor, desechando los primeros 5 ml del IMPUREZAS
filtrado. lmpu!"ezas Inorgnicas ,
Sistema cromatogrfico ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Insolubles en cido
(Ver Cromatografa (621 ), Aptitud del Sistema.) (561): No ms de 6,0%
Modo: HPLC METALES PESADOS, Mtodo 111 (231 ): No ms de 20 ppm
Detector: UV 205 nm Impurezas Orgnic~s , ,
Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m desac- PROCEDIMIENTO: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Metodo
tivado para bases con recubrimiento exhaustivo General para Anlisis de Re;iduos de Plaguicidas (561 ):
(endcapped). Cumple con los requisitos.
Temperatura de la columna: 27 t 1"
Velocidad de flujo: 1,5 mL/min PRUEBAS ESPECFICAS
Volumen de inyeccin: 20 L CARACTERSTICAS BOTNICAS: Color amarillento, olor suave
Aptitud del sistema similar al del heno y sabor muy amargo. Bajo el micros-
Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B copio puede observarse: fragmentos de clulas epidrmi-
Requisitos de aptitud cas dorsales y ventrales de las hojas en vista superficial,
Similitud de los cromatogramas: El cromatograma con tricomas glandulares ssiles con 4-8 clulas y esto-
de la Solucin estndar B es similar al cromatograma mas diacticos o anomocticos; la epidermis superior tiene
de referencia provisto con el lote de ER Extracto en ms tricomas y menos estomas que la epidermis inferior;
Polvo de Bacopa USP usado. clulas de la epidermis inferior con paredes anticlinales
Resolucin: No menos de 1,0 entre los picos de ba- :,inuu~a> y en algunos lugares, cutcula estriada; fragmen-
copsido 11 y bacsido A,, Solucin estndar B tos de celulas epidrmicas del tallo en vista superficial;
Factor de asimetra: ~~o ms de 1,5 para el pico de clulas parenquimticas que encierran cavidades, algunas
bacsido Ai, Solucin estndar A contienen cristales de oxalato de calcio con forma pris-
Desviacin estndar relativa: No ms de 2% deter- mtica y de roseta; fragmentos de vasos anillados y espi-
minada a partir del pico de bacsido A, en inyeccio- ralados cortados longitudinalmente; fragmentos de clu-
nes repetidas, Solucin estndar A las corticales del tallo; y cristales de oxalato de calcio.
6330 Bctcopct /Suplementos DictCticos lJSP 38

PRDIDA POR SECADO 1731): ';prar 1,0 g de Rampa en !os cromatogramas hasta que el frente de la fase m-
Polvo a 105 durd11le 3 l1ord>: pierde no ms de 12,0% vil haya recorrido aproximadamente tres cuartos de la
de ;u peso. , placa. Retirar la placa de la cmara, secar, rociar con
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, (11/Lm Tuiub (56lj: Suiuuun reveimiuru, caiemar durante 5- i minutos a
No ms de 18%, determinado en 1,0 g de Bacopa en JproximadJmC'ntC' 70' y oh\ervJr bajo lu? visible.
Polvo Criterios de aceptacin: La Solucin muestra presenta
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Extractos Solubles en Al- una zona principal de color azul oscuro debida a una
cohol, Mtodo 2 (561): No menos de 6,0% mezcla de bacsido Ai, bacopsido 11, el ismero juju-
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- bogennico de bacopasaponina c y bacopasaponina c a
tal de microorganismos aerobios no excede de 10 5 ufc/g; un valor Rr de aproximadamente 0,6 y una mancha de
el recuento total combinado de hongos filamentosos y color rosado plido debida a bacopsido 1 a un valor Rr
levaduras no excede de 1 oi ufc/g; y el recuento de bac- de aproximadamente 0,4, las cuales corresponden en
terias Gram negativas tolerantes a la bilis no excede de posicin y color a las zonas en el cromatograma de la
1 0 3 ufc/g. , Solucin estndar. Se observan otras zonas para la Solu-
PROCEDIMIENTOS MICROBIOLOGICOS PARA COMPROBAR LA AU- cin muestro y la Soluciqn estndar.
SENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cumple 8. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR HPLC: La Solucin mues-
con los requisitos de las pruebas para determinar la au- tra de la prueba de Contenido de Glicsidos Triterpnicos
sencia de Salmonel/a spp. y Fscherichia coli. presenta un pico principal en el tiemFo de retencin co-
rrespondiente al de bacsido Ai en e cromatograma de
REQUISITOS ADICIONALES la Solucin estndar A. Identificar otros picos de glicsidos
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien triterpnicos en la Solucin muestra por comparacin con
cerrados. Proteger de la luz y la humedad, y almacenar a el cromatograma de la Solucin estandar By el cromato-
temperatura ambiente. grama de referencia provisto con el lote de ER Extracto
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en en Polvo de Bacopa USP usado. La Solucin muestra pre-
latn y despus de la denominacin oficial, las partes de senta picos adicionales correspondientes a bacopsido 1,
la P,lanta contenidas en el artculo. bacopsido 11, el ismero jujubogennico de bacopasapo-
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) nina c y bacopasaponina c.
ER Bacsido A3 USP
ER Extracto en Polvo de Bacopa USP COMPOSICIN
CONTENIDO DE GucSIDOS TRITERPNICOS
Solucin A: Disolver O, 14 g de fosfato dicido de pota-
sio anhidro en 900 mL de agua, agregar 0,5 mL de
cido fosfrico, diluir con agua hasta 1000 mL, mezclar,
Extracto en Polvo de Bacopa filtrar, y desgasificar.
Solucin B: Usar acetonitrilo filtrado y desgasificado.
DEFINICIN Fase mvil: Ver la tabla de gradientes siguiente.
El Extracto en Polvo de Bacopa se prepara a partir de Ba-
copa mediante extraccin con agua, alcohol, metanol o Tiempo Solucin A Solucin B
una mezcla de estos disolventes. La relacin entre el ma- lmin) l/o) 1%)
terial vegetal y el extracto est entre 20:1 y 10:1. Con- o 70 30
tiene no menos de 90,0% y no ms de 110,0% de la 25 60 40
cantidad declarada de glicosidos triterpnicos, calculado
26 70 30
con re>pecto a la materia seca como la suma de bacop-
sido 1, bacsido Ai, bacopsido 11, el ismero jujubogen- 30 70 30
nico de bacopasaponina C y bacopasaponina C. Puede
contener sustancias agregadas adecuadas como Solucin estndar A: Someter a ultrasonido una canti-
portadores. dad pesada de ER Bacsido Ai USP en metanol para
obtener una solucin con una concentracin de aproxi-
IDENTIFICACIN madamente 0,5 mg/mL.
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA Solucin estndar B: Transferir aproximadamente
DELGADA 1 O mg de ER Extracto en Polvo de Bacopa USP a un
Solucin estndar: Transferir aproximadamente 1 O mg matraz volumtrico de 1 O mL y agregar aproximada-
de ER Extracto en Polvo de Bacopa USP a un matraz mente 8 mL de metanol. Someter a ultrasonido y calen-
volumtrico de 1 O mL y agregar aproximadamente tar suavemente durante 15-20 minutos, diluir con me-
8 mL de metanol. Someter a ultrasonido y calentar sua- tano! a volumen, y mezclar. Antes de la inyeccin, pasar
vemente durante 15--20 minutos, diluir con metanol a a travs de un filtro de membrana con un tamao de
volumen, mezclar, centrifugar, y usar el sobrenadante. poro de 0,45 ,um o menor, desechando los primeros
Solucin muestra: Someter a ultrasonido durante apro- 5 mL del filtrado.
ximadamente 1 O minutos una cantidad de Extracto en Solucin muestra: Transferir una cantidad de Extracto
Polvo de Bacopa equivalente a aproximadamente en Polvo de Bacopa equivalente a aproximadamente
40 mg de glicsidos triterpnicos en 1 O mL de metanol, 25 mg de glic'>idm triterpnicos a un matraz volum-
centrifugar, y usar el sobrenadante. trico de 25 mL y agregar 15 mL de metanol. Someter a
Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatografa ultrasonido y calentar suavemente durante 15-20 minu-
con un tamao promedio de partcula de 1 0-15 m tos, diluir con metanol a volumen, y mezclar. Antes de
(placas para TLC) la inyeccin, pasar a travs de un iltro de membrana
Volumen de aplicacin: 15 pL, en bandas de 5-1 O mm con un tamao de poro de 0,45 ,um o menor, dese-
Fase mvil: Acetato de etilo, metanol y agua (7:2:1) chando los primeros 5 mL del filtrado.
Solucin reveladora: Vainillina al 1 % en alcohol y Sistema cromatogrfico
cido sulfrico al 10% en alcohol (1 :1) (Ver Cromatografa (621 ), Aptitud del Sistema.)
Anlisis Modo: HPLC
Muestras: Solucin s/11Ja1 y Solucin muestra Detector: UV 205 nm
Aplicar las muestras en bandas a una placa para cro- Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 pm desac-
matografa en capa delgada adecuada (ver Cromato- tivado para bases con recubrimiento exhaustivo
grafa (621)). Usar una cmara saturada. Desarrollar (endcapped).
USP 38 Suplcrnentos OictCticos / BJnabJ 63 31

Temperatura de la columna: 27 + 1" Impurezas Orgnica_s ,


Velocidad de flujo: 1,5 ml/min PROCEDIMIENTO: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Mtodo
Volumen de inyeccin: 20 pL General para Anlisis de Residuos de Plaguicidas (561 ):
Aplilud del ~blemd Cu111pie coi 1 io' 1eyu1,fio,.
Muestras: Solucin estndar !\ y Solucin estndar B
Requisitos de aptitud PRUEBAS ESPECFICAS
Similitud de los cromatogramas: El cromatograma PRDIDA POR SECADO (731 ): Secar 1,0 g de Extracto en
de la Solucin estndar B es similar al cromatograma Polvo de Bacopa a 1 05 - durante 3 horas: pierde no ms
de referencia provisto con el lote de ER Extracto en de 5% de su peso.
Polvo de Bacopa USP usado. PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
Resolucin: No menos de 1,0 entre los picos de ba- tal de microorganismos aerobios no excede de 1 0 4 ufc/g.
copsido 11 y bacsido A 3, Solucin estndar B El recuento total combinado de hongos filamentosos y
Factor de asimetra: No ms de 1,5 para el pico de levaduras no excede de 101 ufc/mL.
bacsido A1, Solucin estndar A PROCEDIMIENTOS MICROBIOLGICOS PARA COMPROBAR LA AU-
Desviacin estndar relativa: No ms de 2% deter- SENCIA DE Ml_C~OORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cumple
minada a partir del pico de bacsido A3 en inyeccio- con los requ1s1tos de las pruebas para determinar la au-
nes repetidas, Solucin estndar A sencia de Salmonella spp. y Escherichia coli.
Anlisis OTROS REQUISITOS: Cumple con los requisitos de la
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar By prueba de Disolventes Residuales en Extractos Botnicos
Solucin muestra (565).
Usando los cromatogramas de la Solucin estndar A,
REQUISITOS ADICIONALES
la Solucin estndar B y el cromatograma de referen-
cia provisto con el lote de ER Extracto en Polvo de ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
Bacopa USP usado, identificar los tiempos de reten- cerrados. Proteger de la luz y la humedad, y almacenar a
cin de los picos correspondientes a los diferentes gli- temperatura ambiente controlada.
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
csidos triterpnicos. Los tiempos de retencin relati-
vos aproximados para los diferentes glicsidos latn y despus de la denominacin oficial, la parte de la
triterpnicos se proporcionan en la siguiente tabla. planta de donde se obtuvo el artculo. Cumple con otros
requisitos de etiquetado en Extractos Botnicos (565).
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
Tiempo de ER Bacsido Ai USP
Retencin ER Extracto en Polvo de Bacopa USP
Ana lito Relativo
Bacoosido 1 o 73
Bacsido A3 1 00
Bacoosido 11 1 04
El ismero iuiuboqennico de bacooasaoonina C 1 15 Agregar lo siguiente:
Bacooasaoonina C 1 22

Calcu)a_r por separado los porcentajes de bacopsido 1, Hojas de Banaba


bacos1do A1, bacopsido 11, el ismero jujubogennico
de bacopasaponina c y bacopasaponina c en la por-
DEFINICIN
cin de Extracto en Polvo de Bacopa tornada:
Las Hoja_s deB~naba consisten en las hojas secas de Lagers-
Resultado = (ru/rs) x (Cs/Cu) x F x 1 00 troem1a speoosa (L.) Pers. (Fam. Lythraceae). Contienen
no menos de 0,2% de cido coroslico (C 30 H48 0 4), calcu-
ru = respuesta del pico de cada glicsido lado con respecto a la materia seca.
triterpnico de la Solucin muestra
IDENTIFICACIN
r1 = respuesta del pico de bacsido A3 en la
Solucin estndar A A. Cumplen con los requisitos en Pruebas Especficas Ca-
Cs =concentracin de ER Bacsido A1 USP en la ractersticas Botnicas. '
Solucin estndar A (mg/mL) 8. CROMATOGRAFA EN CAPA DELGADA
Cu = concentracin de Extracto en Polvo de Bacopa
Solucin estndar A: 0,2 mg/ml de ER cido Coros-
en la Solucin muestra (mg/mL) lico USP en metanol
F = factor de conversin para cada analito:
Solucin estndar B: 1 O mg/ml de ER Extracto Seco
1,00 para bacsido A3; 1,03 para bacopsido de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP en metanol. So-
1; 0,81 para bacopsido 11; 0,99 para el meter a ultrasonido durante 1 O minutos, centrifugar y
ismero jujubogennico de bacopasaponina usar el sobrenadante.
c y 0,75 para bacopasaponina c Solucin muestra: Aproximadamente 0,2 g de Hojas de
Criterios de aceptacin: Sumar los porcentajes de ba- Banaba, reducidas a polvo fino, en 1O ml de metano!.
copsic;Jo 1, bacsido Ai, bacopsido 11, el ismero juju- Someter a ultrasonido durante 15 minutos, centrifugar
bogenin1co de bacopasapon1na C y bacopasaponina C: y usar el sobrenadante.
Se encuentra no menos de 90,0%-no ms de 110,0% Sistema cromato9rfico
de la cantidad declarada de glicsidos triterpnicos con (Ver Cromatografta (621 ), Cromatografa en Capa Del-
respecto a la materia seca. gada.)
Modo: HPTLC
IMPUREZAS Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatogra-
Impurezas Inorgnicas fa con un tamao promedio de partJCula de 5 m
(placas para HPTLC)
Volumen de aplicacin: 6 L de Solucin estndar A y
Eliminar lo siguiente: de Solucin estndar B, y 8 L de Solucin muestra, en
bandas de 8 mm
METALES PESADOS, Mtodo fil (231): No ms de Humedad relativa: Acondicionar la placa a una hume-
20 ppme (Oficial Ol-dic-2015) dad relativa de aproximadamente 33%, usando un dis-
positivo adecuado.
6332 BJnJbJ /Suplementos OictCticos usr 38

Fase mvil: Una mncla de tolueno, acetato de etilo y 75 ml. de metano!, someter a reflujo durante 15 minu-
cido actico (55: 45: 0,5) tos, dejar en reposo para que sedimente y decantar el
Reactivo de derivatizacin: 85 rnL de rnetanol en- sobrenadante. Repetir la extraccin tres veces ms,
friado con hielo mezclado con 1O rnL de cido aclirn luego Lomui11dr lo~ extractos. Filtrar y concentrar a pre-
glacial, 5 rnL de cido sulfrico y 0,5 mL de p- sin reducida. Transferir a un matraz volumtrico de
anisaldehdo. , 100 mL, ajustar con metano! a volumen y mezclar. An-
Anlisis tes de inyectar, pasar a travs de un filtro de membrana
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B y
Solucin muestra
con un tamao de porode 0,45 m o menor. Desechar
los primeros mL de filtrado.
Aplicar las muestras en bandas a una placa para HPTLC Sistema cromato9rfico
adecuada y secar al aire. Desarrollar los cromatogra- (Ver Cromatografta <621 ), Aptitud del Sistema.)
mas en una cmara no saturada, retirar la placa ae la Modo: HPLC
cmara y secar. Tratar con Reactivo de derivatizacin, Detector: UV 205 nm
calentar a 100 durante 3 minutos y observar bajo luz Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m
visible. Temperatura de la columna: 25
Aptitud del sistema: Bajo luz visible, el cromatograma Velocidad de flujo: 1,6 ml/min
de la Solucin estndar B presenta la banda ms intensa, Volumen de inyeccin: 20 L
una banda de color violeta o azul, con valor RF y color Aptitud del sistema
similares a la banda de cido coroslico en el cromato- Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B
grama de la Solucin estndar A; una banda de color [NOTA-Los tiempos de retencin relativos aproximados
azul cercana al origen (valor RF de aproximadamente para los picos individuales de cido coroslico, cido
O, 1), consistente con cido asitico; dos bandas meno- virgtico y cido oleanlico son 1,0; 1, 1 y 3,2,
res de color azul entre las bandas de los cidos coros- respectivamente.]
lico y asitico; una banda menor de color azul debida a Requisitos de aptitud
cido virgtico, por encima de la banda debida a cido Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
coroslico; y directamente por debajo de la banda de de la Solucin estndar B es similar al cromatograma
cido asitico, una banda menor de color marrn. La de referencia provisto con el lote de ER Extracto Seco
Solucin estndar B tambin presenta dos bandas meno- de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP usado.
res de color violeta, separadas, en aproximadamente Resolucin: No menos de 1,5 entre el pico de cido
tres cuartos del cromatograma; la banda con el valor RF coroslico y el pico precedente, Solucin estndar B
inferior corresponde a cido oleanlico. Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de
Criterios de aceptacin: Bajo luz visible, el cromato- cido coroslico, Solucin estndar A
grama de la Solucin muestra presenta la banda ms Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%, de-
intensa como una banda de color violeta correspon- terminada a partir del pico de cido coroslico en
diente en color y valor RF a la banda debida a cido inyecciones repetidas, Solucin estndar A
coroslico en el cromatograma de la Solucin estndar Anlisis
A, as como las siguientes bandas correspondientes a Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar By
bandas similares de la Solucin estndar B: una banda Solucin muestra
menor de color azul cercana al origen (valor RF de apro- Identificar los tiempos de retencin relativos para los
ximadamente O, 1 ), una banda menor de color amarro- picos de cido coroslico, cido virgtico y cido olea-
nado por encima del cido coroslico y una banda me- nlico de la Solucin muestra.
nor de color violeta en aproximadamente tres cuartos Calcular el porcentaje de cido coroslico en la porcin
del cromatograma. de Hojas de Banaba tomada:
C. HPLC
AIJlisis: Proceder segn se indica en Contenido de Resultado = (ru/rs) x Cs x (V/W) x 100
Acido Coroslico.
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- ru = rea del pico de cido coroslico de la
cin muestra presenta un grupo de tres picos. El pico Solucin muestra
central es el ms intenso del grupo y ocurre a un rs = rea del pico de cido coroslico de la
tiempo de retencin correspondiente al de cido coro- Solucin estndar A
slico en el cromatograma de la Solucin estndar A. La Cs concentracin de cido coroslico en la
=
intensidad del pico que eluye antes del cido coroslico Solucin estndar A (mg/mL)
es de aproximadamente la mitad a un tercio de la in- V = volumen de Solucin muestra (mL)
tensidad del cido coroslico, y el pico que eluye des- W = peso de Hojas de Banaba tomado para
pus del cido coroslico tiene la menor de las tres in- preparar la Solucin muestra (mg)
tensidades y es consistente con cido virgtico. Un pico Criterios de aceptacin: No menos de 0,2% de cido
menor debido a cido oleanlico eluye despus en el coroslico con respecto a la materia seca
cromatograma.
CONTAMINANTES
COMPOSICIN IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS <233)
CONTENIDO DE CIDO COROSLICO Criterios de aceptacin
Solucin A: Diluir cido fosfrico hasta O, 1% en agua. Arsnico: No ms de 2,0 g/g
Solucin B: Acetonitrilo Cadmio: No ms de 0,5 g/g
Fase mvil: Una mezcla de Solucin A y Solucin B (4:6) Plomo: No ms de 5 g/g
Solucin estndar A: O, 1 mg/mL de ER cido Coros- Mercurio: No ms de 0,2 g/g
lico USP en metanol ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Mtodo General para An-
Solucin estndar B: 5,0 mg/mL de ER Extracto Seco lisis de Residuos de Plaguicidas <561): Cumplen con los
de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP en metano!. So- requisitos.
meter a ultrasonido, si fuera necesario. Antes de inyec- PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO <2021): El recuento to-
tar, pasar a travs de un filtro de membrana con un tal de microorganismos aerobios no excede de 10 5 ufc/g;
tamao de poro de 0,45 m o menor. Desechar los el recuento total combinado de hongos filamentosos y
primeros mL del filtrado. levaduras no excede de 10 3 ufc/g; y el recuento de bac-
Solucin muestra: Transferir aproximadamente 5,0 g terias Gram-negativas tolerantes a la bilis no excede de
de Hojas de Banaba, reducidas a polvo fino y pesadas 10 3 ufc/g.
con exactitud, a un matraz de fondo redondo. Agregar
USP 38 Supicmentos Dietticos/ Banaba 6333

AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS <2022): Cum- EST~DARES DE REFERENCIA USP (11)


plen con los requisitos de las pruebas para determinar la ER Acido Coroslico USP
ausencia de Safmonella spp. y Escherichia coli. ER Extracto Seco de Hojas de Laqerstroemia speciosa USP
lt..USPJ8
PRUEBAS ESPECFICAS
CARACTERSTICAS BOTNICAS
Macroscpicas: Las hojas de banaba varan en forma,
incluyendo lanceoladas, oblongo-lanceoladas, oblongas
y elptico ovadas. Son de hasta 34 cm de longitud y
11 cm de ancho; de color verde oliva a marran amari- Agregar lo siguiente:
llento; enteramente o ligeramente onduladas en los
mrgenes; base aguda; pice agudo a acuminado; tex-
tura coricea; y peciolada con pecolos de hasta 1 cm Hojas de Banaba en Polvo
de longitud.
Microscpicas DEFINICIN
Seccin transversal de la nervadura central: Una Las Hojas de Banaba en polvo consisten en las hojas secas
capa de la epidermis superior compuesta de clulas de Lagerstroemia speciosa (L.) Pers. (Fam. Lythraceae) re-
rectangulares a redondeadas cubiertas con una cut- ducidas a polvo o polvo muy fino. Contiene no menos de
cula delgada; unas pocas capas de clulas colenquim- 0,2% de la cantidad declarada de cido coroslico
ticas; numerosas capas de clulas parenquimticas, al- (C30H4s4), calculado con respecto a la materia seca.
gunas contienen cristales de oxalato de calcio en
grupos, con grandes espacios intercelulares; grupos de IDENTIFICACIN
haces de fibras lignificadas; y canales secretores disper- A. Cumplen con los requisitos en Pruebas Especficas, Ca-
sos en la zona del parnquima. Haz vascular bicolateral ractersticas Botnicas.
rodeado por una vaina continua de fibras acompaada B. CROMATOGRAFA EN CAPA DELGADA ,
por esclernquima y clulas que contienen cristales de Solucin estndar A: 0,2 mg/mL de ER Acido Coros-
oxalato de calcio en grupos; canales secretores entre lico USP en metano!
los haces vasculares; numerosas capas de clulas pa- Solucin estndar B: 1O mg/mL de ER Extracto Seco
renquimticas, algunas contienen cristales de oxalato de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP en metano!. So-
de calcio en grupos, con grandes espacios intercelula- meter a ultrasonido durante 1 O minutos, centrifugar y
res; unas pocas capas de colnquima; una capa de c- usar el sobrenadante.
lulas epidrmicas inferiores. Solucin muestra: Aproximadamente 0,2 g de Hojas de
Seccin transversal de la lmina: Una capa de la epi- Banaba en Polvo en 1O mL de metano!. Someter a ultra-
dermis superior compuesta de clulas rectangulares sonido durante 15 minutos, centrifugar y usar el
con aproximadamente el doble de tamao que las de sobrenadante.
la epidermis inferior. Algunas son clulas secretoras, Sistema cromato9rfico
que tienden a protuberar en el mesfilo y a veces pa- (Ver Cromatograf1a (621 ), Cromatografa en Capa Del-
recen estar por debajo de la epidermis superior. Dos gada.)
capas de clulas rectangulares en empalizada; 4-6 ca- Modo: HPTLC
pas de clulas parenquimticas, algunas que contienen Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatogra-
prismas de oxalato de calcio y otras que contienen fa con un tamao promedio de part1cula de 5 m
cristales de oxalato de calcio en grupos, con grandes (placas para HPTLC)
espacios intercelulares; grupos de haces vasculares dis- Volumen de aplicacin: 6 L de Solucin estndar A y
persos en la zona del parnquima; una epidermis infe- de Solucin estndar B, y 8 L de Solucin muestra, en
rior que presenta estomas . bandas de 8 mm
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Materia Orgnica Extraa Humedad relativa: Acondicionar la placa a una hume-
(?61): No ms de 2,0% dad relativa de aproximadamente 33%, usando un dis-
PERDIDA POR SECADO (731) positivo adecuado.
Anlisis: Secar 2,0 g de Hojas de Banaba, reducidas a Temperatura de la columna: 25
polvo fino, a 105 durante 2 horas. Fase mvil: Una mezcla de tolueno, acetato de etilo y
Cri,terios de aceptacin:, No ms de 10% cido actico (55: 45: 0,5)
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Totales (561) Reactivo de derivatizacin: 85 mL de metano! en-
Anlisis: 2,0 g de Hojas de Banaba reducidas a polvo friado con hielo mezclado con 1O mL de cido actico
fino glacial, 5 mL de cido sulfrico y 0,5 mL de p-
Cr~terios de aceptacin~ No ms de 7,0% anisaldehdo.
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Extractos Solubles en Al- Anlisis
cohpl, Mtodo 1 (561): t)Jo ms de 10,0% , Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B y
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Insolubles en Acido Solucin muestra
(561) Aplicar las muestras en bandas a una placa para HPLTC
Anlisis: 4,0 g de Hojas de Banaba reducidas a polvo adecuada y secar al aire. Desarrollar los cromatogra-
fino mas en una cmara no saturada, retirar la placa de la
Cri):erios de aceptacin:, No ms de 2% cmara y secar. Tratar con el Reactivo de derivatizacin,
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Extractos Solubles en Agua, calentar a 100 durante 3 minutos y observar bajo luz
Mtodo 1 (561 ): No menos de 18,0% visible.
Aptitud del sistema: Bajo luz visible, el cromatograma
REQUISITOS ADICIONALES de la Solucin estndar B presenta la banda ms intensa,
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien una banda de color violeta o azul, con valor Rr y color
cerrados. Proteger de la luz y la humedad. Almacenar a similares a la banda de cido coroslico en el cromato-
temperatura ambiente. grama de la Solucin estndar A; una banda de color
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en azul cercana al origen (valor Rr de aproximadamente
latn y, despus de la denominacin oficial, las partes de O, 1), consistente con cido asitico; dos bandas meno-
la planta contenidas en el artculo. res de color azul entre las bandas de coroslico y asi-
tico; una banda menor de color azul debida a cido
virgtico, por encima de la banda debida a cido coro-
slico; y directamente por debajo de la banda de asi-
6.B4 Rc111rifM / Suplf>rnentos Dietticos LJSP 38

tico, una bandJ men de color marrn. La Solucin de referencia provisto con el lote de ER Extracto
estndar B tambin presenta dos bandas menores de Seco de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP usado.
color violeta, separadas, en aproximadamente tres cuar- Resolucin: No menos de 1,5 entre el pico de cido
tos del cromatograma; _la banda con el valor Rr inferior coroslico y el pico precedente, Solucin estndar B
corresponde a cido oleanlico. Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de
Criterios de aceptacin: Bajo luz visible, el cromato- cido coroslico, Solucin estndar A
grama de la Solucin muestra presenta la banda ms Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%, de-
1~tensa como una banda de color violeta correspon- terminada a partir del pico de cido coroslico en
diente en color y valor Rr a la banda debida a cido inyecciones repetidas, Solucin estndar A
coroslico en el cromatograma de la Solucin estndar Anlisis
A, as como las siguientes bandas correspondientes a Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B y
bandas similares de la Solucin estndar B: una banda Solucin muestra
menor de color azul cercana al origen (valor Rr de apro- Identificar los tiempos de retencin relativos para los
ximadamente O, 1), una banda menor de color amarro- picos de cido coroslico, cido virgtico y cido olea-
nado por encima del cido coroslico y una banda me- nlico de la Solucin muestra.
nor de color violeta en aproximadamente tres cuartos Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de cido
del cromatograma. coroslico en la porcin de Hojas de Banaba en Polvo
C. HPLC tomada:
AIJlisis: Proceder segn se indica en Contenido de
Acido Coroslico. Resultado= (ru/rs) x Cs x (V/W) x 100
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
cin muestra presenta un grupo de tres picos. El pico ru = rea del pico de cido coroslico de la
central es el ms intenso del grupo y ocurre a un Solucin muestra
tiempo de retencin correspondiente al de cido coro- rs = rea del pico de cido coroslico de la
slico en el cromatograma de la Solucin estndar A. La Solucin estndar A
intensidad del pico que eluye antes del cido coroslico Cs = concentracin de cido coroslico en la
es de aproximadamente la mitad a un tercio de la in- Solucin estndar A (mg/mL)
tensidad del cido coroslico, y el pico que eluye des- V = volumen de Solucin muestra (mL)
pus del cido coroslico tiene la menor de las tres in- W = peso de Hojas de Banaba en Polvo tomado
tensidades y es consistente con cido virgtico. Un pico para preparar la Solucin muestra (mg)
menor debido a cido oleanlico eluye despus en el Criterios de aceptacin: No menos de 0,2% de la can-
cromatograma. tidad declarada de cido coroslico con respecto a la
materia seca
COMPOSICIN
CONTENIDO DE CIDO COROSLICO CONTAMINANTES
Solucin A: Diluir cido fosfrico hasta O, 1% en agua. IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS (233)
Solucin B: Acetonitrilo Criterios de aceptacin
Fase mvil: Una mezcla de Solucin A y ~olucin B (4:6) Arsnico: No ms de 2,0 g/g
Solucin estndar A: O, 1 mg/mL de ER Acido Coros- Cadmio: No ms de 0,5 g/g
lico USP en metano! Plomo: No ms de 5 g/g
Solucin estndar B: 5,0 mg/mL de ER Extracto Seco f'v1ercurio: No ms de ,0,2 g/g
de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP en metano!. So- ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Mtodo General para An-
meter a ultrasonido, si fuera necesario. Antes de inyec- lisis de Residuos de Plaguicidas (561): Cumplen con los
tar, pasar a travs de un filtro de membrana con un requisitos.
tamao de poro de 0,45 m o menor. Desechar los PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021): El recuento to-
primeros mL del filtrado. tal de microorganismos aerobios no excede de 104 ufc/g;
Solucin muestra: Transferir aproximadamente 5,0 g y el recuento total combinado de hongos filamentosos y
de Hojas de Banaba en Polvo, pesadas con exactitud, a levaduras no excede de 102 ufc/g.
un matraz de fondo redondo. Agregar 75 mL de meta- PROCEDIMIENTOS MICROBIOLGICOS PARA COMPROBAR LA AU-
no!, someter a reflujo durante 15 minutos, dejar en re- SENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cum-
poso para que sedimente y decantar el sobrenadante. plen con los requisitos de las pruebas para determinar la
Repetir la extraccin tres veces ms, luego combinar los ausencia de Salmonella spp. y Escherichia coli.
extractos. Filtrar y concentrar a presin reducida. Trans-
PRUEBAS ESPECFICAS
ferir a un matraz volumtrico de 100 mL, ajustar con
metanol a volumen y mezclar. Antes de inyectar, pasar CARACTERSTICAS BOTNICAS
a travs de un filtro de membrana con un tamao de Macroscpicas: Polvo de color verde grisceo
poro de 0,45 m o menor. Desechar los primeros mL Microscpicas: Fragmentos de la epidermis superior
del filtrado. con clulas poligonales, algunas contienen cristales de
Sistema cromato9rfico oxalato de calcio, y sin estomas; fragmentos de clulas
(Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.) de la epidermis inferior con formas irregulares y paredes
Modo: HPLC ligeramente onduladas, estomas anomocticos; fragmen-
Detector: UV 205 nm tos de clulas de la epidermis superior con clulas en
Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m empalizada subyacentes; fragmentos de clulas paren-
Velocidad de flujo: 1,6 ml/min quimticas, algunas contienen prismas de oxalato de
Volumen de inyeccin: 20 L calcio y otras contienen cristales de oxalato de calcio en
Aptitud del sistema grupos; clulas con aceites; fragmentos de fibras lignifi-
Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B cadas; fragmentos de vasos espiralados; fragmentos de
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos aproximados vgsos punteados asocia<;Jos con fibras.
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Mtodo General para An-
para los picos individuales de cido coroslico, cido
lisis cf~ Residuos de Plaguicidas (561 ): Cumplen con los
virgtico y cido oleanlico son 1,0; 1, 1 y 3,2,
r~qu1s1tos.
respectivamente.]
PERDIDA POR SECADO (731)
Requisitos de aptitud Muestra: 2,0 g de Hojas de Banaba reducidas a polvo
Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
de la Solucin estndar B es similar al cromatograma fino
USP 38 Supiememos Dietticos /Banaba 6335

Anlisis: Secar la Muestra a 105 durante 2 horas. Distancia de desarrollo: 6 cm


Criterios de aceptacin: No ms de 10% Reactivo de derivatizacin: 85 mL de metano! en-
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Totales (561) friado con hielo mezclado con 1 O mL de cido actico
Anlisis: 2,0 g de Hojas de Banaba reducidas a polvo glacial, 5 mL de cido sulfrico y 0,5 mL de p-
fino anisaldehdo
Criterios de aceptacin: No ms de 7,0% , Anlisis
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Insolubles en Acido Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B y
(561) Solucin muestra
Anlisis: 4,0 g de Hojas de Banaba reducidas a polvo Aplicar las muestras en bandas a una placa para HPLTC
fino adecuada y secar al aire. Desarrollar los cromatogra-
Criterios de aceptacin: No ms de 2% mas en una cmara no saturada, retirar la placa de la
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Extractos Solubles en Al- cmara y secar. Tratar con Reactivo de dervatizacin,
cohol, Mtodo 1 (561): No menos de 10,0% calentar a 100 durante 3 minutos y observar bajo luz
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Extractos Solubles en Agua, visible.
Mtodo 1 (561): No menos de 18,0% Aptitud del sistema: Bajo luz visible, el cromatograma
de la Solucin estndar B presenta la banda ms intensa,
REQUISITOS ADICIONALES una banda de color violeta o azul, con un valor Rr y
ENVASADO V ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien color similares a la banda de cido coroslico en e[ cro-
cerrados. Proteger de la luz y la humedad. Almacenar a matograma de la Solucin estndar A; una banda de
temperatura ambiente. color azul cercana al origen (valor Rr de aproximada-
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en mente O, 1 ), consistente con cido asitico; dos bandas
latn y, despus de la denominacin oficial, las partes de menores de color azul entre las bandas de coroslico y
la i;>lanta contenida en el artculo. asitico; una banda menor de color azul debida a cido
ESTA~DARES DE REFERENCIA USP (11) virgtico, por encima de la banda debida a cido coro-
ER Acido Coroslico USP sllco; y directamente por debajo de la banda de asi-
ER Extracto Seco de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP tico, una banda menor de color marrn. La Solucin
AUSP38 estndar B tambin presenta dos bandas menores de
color violeta, separadas, en aproximadamente tres cuar-
tos del cromatograma; la banda con el valor Rr inferior
corresponde a cido oleantico.
Criterios de aceptacin: Bajo luz visible, el cromato
Agregar lo siguiente: grama de la Sofucin muestra presenta la banda ms
intensa como una banda de color violeta correspon-
diente en color y valor Rr a la banda debida a cido
coroslico en el cromatograma de la Solucin estndar
Extracto Seco de Hojas de Banaba A, as como las siguientes bandas correspondientes a
bandas similares de la Solucin estndar 8: una banda
DEFINICIN menor de color azul cercana al origen (valor Rr de apro-
El Extracto Seco de Hojas de Banaba se prepara a partir de ximadamente O, l ), dos bandas menores de color pur-
las hojas secas de Lagestroemia speciosa (L.) Pers. (Fam. pura por debajo de cido coroslico, dos bandas meno-
Lythraceae) mediante extraccin con mezclas hidroalcoh- res de color azul por encima del cido coroslico, y dos
licas. Contiene no menos de 90,0% y no ms de 110,0% bandas menores de color violeta, que estn separadas,
de la cantidad declarada de cido coroslico (C30H4a4), en aproximadamente tres cuartos del cromatograma.
calculado con respecto a la materia seca. C. HPLC
Al)lisis: Proceder segn se indica en Contenido de
IDENTIFICACIN Acido Coroslico.
A. Cumple con los requisitos en Pruebas Especficas, Ca- Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
ractersticas Bot,nicas. cin muestra presenta un grupo de tres picos. El pico
B. (ROMATOGRAFIA EN CAPA DELGADA , central es et ms intenso del grupo y ocurre a un
Solucin estndar A: 0,2 mg/mL de ER Acido Coros- tiempo de retencin correspondiente al de cido coro-
lico USP en metano! slico en el cromatograma de la Solucin estndar A. La
Solucin estndar B: 1 O mg/mL de ER Extracto Seco intensidad del pico que eluye antes del cido coroslico
de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP en metano!. So- es de aproximadamente la mitad a un tercio de la in-
meter a ultrasonido durante 1O minutos, centrifugar y tensidad del cido coroslico, y el pico que eluye des-
usar el sobrenadante. pus del cido coroslico tiene la menor de las tres in-
Solucin muestra: Extracto Seco de Hoas de Banaba tensidades y es consistente con cido virgtico. Un pico
en metano! a una concentracin equiva ente a 0,2 mg/ menor debido a cido oleanlico eluye despus en el
mL de cido coroslico de acuerdo a la cantidad decla- cromatograma.
rada. Someter a ultrasonido, si fuera necesario.
Sistema cromato9rfico COMPOSICIN , ,
(Ver Cromatografw (621 ), Cromatografa en Capa Del- CONTENIDO DE ACIDO COROSOLICO
gada.) Solucin A: Diluir cido fosfrico hasta O, 1% en agua.
Modo: HPTLC Solucin B: Acetonitrilo
Adsorbente: Mezcla de gel de slice para cromatogra- Fase mvil: Una mezcla de Solucin A y ~olucin B (4:6)
fa con un tamao promedio de part1cula de 5 m Solucin estndar A: O, 1 mg/mL de ER Acido Coros-
(placas para HPTLC) lico USP en metano!
Volumen de aplicacin: 6 L, en bandas de 8 mm Solucin estndar B: 5,0 mg/mL de ER Extracto Seco
Humedad relativa: Acondicionar la placa a una hume- de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP en metano!. So-
dad relativa de aproximadamente 33%, usando un dis- meter a ultrasonido, si fuera necesario. Antes de inyec-
positivo adecuado. tar, pasar a travs de un filtro de membrana con un
Temperatura de la columna: 25 tamao de poro de 0,45 m o menor. Desechar los
Fase mvil: Una mezcla de tolueno, acetato de etilo y primeros mL del filtrado.
cido actico (55: 45: 0,5) Solucin muestra: Extracto Seco de Hoas de Banaba
en metano! a una concentracin equiva ente a O, 1 mg/
mL de cido coroslico de acuerdo a la cantidad decla-
USP 38

rnrl<i Someter a ultrasonido, si fuera necesario. Antes de y el recuento total combinado de hongos filamentosos y
inyectar, pasar a travs de un filtro de membrana con levaduras no excede de 1Q3 ufc/g.
un tamao de poro de 0,45 m o menor. Desechar los PROCEDIMIENTOS MICROBIOLOGICOS PARA COMPROBAR LA AU-
pri11ie1u~ rnl dei fiitrado. SENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cumple
Sistema cromato9rfico con los requisitos de las pruebas par~ det~rminar la au-
(Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.) sencia de Salmonella spp. y Eschench1a col1.
Modo: HPLC
Detector: UV 205 nm PRUEBAS ESPECFICAS
Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m PRDIDA POR SECADO (731)
Velocidad de flujo: 1,6 mL/min Muestra: 2,0 g de Extracto Seco de Hojas de Banaba
Volumen de inyeccin: 20 L Anlisis: Secar la Muestra a 105 durante 2 horas.
Aptitud del sistema Criterios de aceptacin: No ms de 8%
Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B
REQUISITOS ADICIONALES
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos aproximados
para los picos individuales de cido coroslico, cido ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
virgtico y cido oleanlico son 1,00; 1, 1 y 3,2, cerrados. Proteger de la luz y la humedad. Almacenar a
respectivamente.] temperatura ambiente.
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
Requisitos de aptitud
Similitud de los cromatogramas: El cromatograma latn y, despus de la denominacin oficial, las partes de
de la Solucin estndar Bes similar al cromatograma la planta a partir de las que se deriv el artculo. Cumple
de referencia provisto con el lote de ER Extracto con los requisitos de etiquetado en Extractos Botnicos
Seco de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP usado. (565).
ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11)
Resolucin: No menos de 1,5 entre el pico de cido
coroslico y el pico precedente, Solucin estndar B ER cido Coroslico USP
Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de ER Extracto Seco de Hojas de Lagerstroemia speciosa USP
,1i.USP38
cido coroslico, Solucin estndar A
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%, de-
terminada a partir del pico de cido coroslico en
inyecciones repetidas, Solucin estndar A
Anlisis
Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B y Beta Caroteno-ver Beta Caroteno en
Solucin muestra Monografas Generales
Identificar los tiempos de retencin relativos para los
picos de cido coroslico, cido virgtico y cido olea-
nlico de la Solucin muestra.
Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de cido Beta Caroteno, Cpsulas-ver Beta
coroslico en la porcin de Extracto Seco de Hojas de
Banaba tomada: Caroteno, Cpsulas en Monografas Generales
Resultado = (ru/rs) x (Cs/Cu) x 100
ru = rea del pico de cido coroslico de la Beta Caroteno, Preparacin
Solucin muestra
rs = rea del pico de cido coroslico de la DEFINICIN
Solucin estndar A La Preparacin de Beta Caroteno es una combinacin de
Cs = concentracin de cido coroslico en la beta caroteno con una o ms sustancias inertes. Puede
Solucin estndar A (mg/mL) presentarse en forma slida o lquida. Contiene no menos
Cu = concentracin de Extracto Seco de Hojas de de 95,0% y no ms de 1 30,0% de la cantidad declarada
Banaba en la Solucin muestra (mg/mL) de beta caroteno total (C40Hs6), con respecto a la sustan-
Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de cido cia anhidra. Contiene no menos de 95,0% de la forma
coroslico en la porcin de Extracto tomada: todo trans de beta caroteno en el contenido de beta caro-
teno total.
Resultado = (PI L) x 100 (Pospuesto indefinidamente)
P = contenido de cidocoroslico segn se IDENTIFICACIN
determin anteriormente (%) A.
L = cantidad declarada de cido coroslico (%) Solucin muestra: Transferir 5,0 mL de Solucin madre
Criterios de aceptacin: 90,0%-110,0% de la cantidad de la muestra A o Solucin madre de la muestra B, a
declarada de cido coroslico con respecto a la materia partir de la prueba de Contenido de Beta Caroteno, a un
seca matraz volumtrico de 100 mL y diluir con ciclohexano
a volumen. Pasar la solucin a travs de un filtro de
CONTAMINANTES
membrana con un tamao de poro de 0,45 m.
IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS (233)
Anlisis: Reqistrar el espectro UV-Vis de 300 a 600 nm.
Criterios de aceptacin Criterios de -aceptacin: La Solu<in muestra presenta
Arsnico: No ms de 2,0 g/g un hombro a aproximadamente 427 nm, un mximo
Cadmio: No ms de 0,5 g/g de absorcin a aproximadamente 455 nm y otro m-
Plomo: No ms de 5 g/g ximo a aproximadamente 483 nm. El cociente de ab-
Mercurio: No ms de 0,2 g/g sorbancias Am/.A.40; est entre 1, 14 y 1, 18 .
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Mtodo General para An-
B .. El tiempo de retencin del pico princ]pal d~ la Solu-
lisis de Residuos de Plaguicidas (561): Cumple con los cion muestra corresponde al de la Soluc1on estandar, se-
requisitos. gn se obtienen en la prueba de Contenido de Beta
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- Caroteno.
tal de microorganismos aerobios no excede de 104 ufc/g;
USP 38 '\11ilPmPnio1 DiPtNico1 /Beta Camteno 6337

COMPOSICIN en la oscuridad hasta que alcance la temperatura am-


CONTENIDO DE BETA CAROTENO biente (aproximadamente 2 horas). Agregar cloruro de
(NOTA-Usar material de vidrio con proteccin actnica.] metileno a volumen y agitar de nuevo vigorosamente.
Fase mvil: 1ranstem .'.>O mg de but1I h1drox1tolueno a Solucin muestra: Transferir 5,0 mL de SoiuC1on madre
un matraz volumtrico de 1 L y disolver con 20 ml de de la muestro A o Solurin madrP de la miutra B a un
2-propanol. Agregar 0,2 ml de N-etildiisopropilamina, matraz volumtrico de 50 mL y diluir con una mezcla
25 ml de solucin de acetato de amonio al 0,2%, de cloruro de metileno y Diluyente (1 :1) a volumen. Pa-
455 mL de acetonitrilo y aproximadamente 450 mL de sar a travs de un filtro de membrana con un tamao
metanol. Dejar que la solucin alcance la temperatura de poro de 0,45 m.
ambiente y diluir con metanol a volumen. Sistema cromato9rfico
Diluyente: 50 g/mL de butil hidroxitolueno en alcohol (Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.)
Solucin de aptitud del sistema: Transferir 20 mg de Modo: HPLC
ER Beta Caroteno para Aptitud del Sistema USP a un Detector: UV 448 nm
matraz volumtrico de 50 ml. Agregar 1 ml de agua y Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L68 de 5 m
4 mL de tetrahidrofurano, y someter a ultrasonido du- Temperatura de la columna: 30
rante 5 minutos. Diluir con Diluyente a volumen y so- Velocidad de flujo: 0,6 mL/min
meter a ultrasonido durante 5 minutos. Enfriar a tempe- Volumen de inyeccin: 20 L
ratura ambiente, pasar la suspensin a travs de un Aptitud del sistema
filtro de membrana con un tamao de poro de 0,45 Muestras: Solucin de aptitud del sistema y Solucin es-
m y usar el filtrado transparente. tndar A
Solucin madre del estndar: 60 g/ml de ER Beta Los tiempos de retencin relativos aproximados de los
Caroteno USP en tetrahidrofurano componentes en la Solucin de aptitud del sistema se
Solucin estndar A: Transferir 5,0 mL de Solucin ma- proveen en la Tabla 7.
dre del estndar a un matraz volumtrico de 100 ml,
agregar 5,0 ml de tetrahidrofurano y diluir con Dilu- Tabla 1
yente a volumen. La concentracin de la forma todo -
trans de beta caroteno en esta solucin se determinar Tiempo de 1 Factor de 1

mediante el procedimiento espectrofotomtrico, usando Retencin Respuesta


Solucin estndar B, segn se indica a continuacin. Nombre Relativo Relativa
Solucin estndar B: Transferir 5,0 ml de Solucin ma- Forma todo trans de alfa
dre del estndar a un matraz volumtrico de 100 ml y ca rote no o 93 11
diluir con ciclohexano a volumen. Preparar por Forma todo trans de be-
triplicado. ta caroteno 1 00 1
Condiciones instrumentales 9-cis-Beta caroteno 1 07 1
(Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).) 1 3-cis-Beta caroteno 1 17 12
Longitud de onda analtica: 457 nm
Paso de celda: 1 cm 15-cis-Beta caroteno 1 21 14
Blanco: Ciclohexano Requisitos de aptitud
Anlisis Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
Muestra: Solucin estndar B de la Solucin de aptitud del sistema es similar al cro-
Calcular la concentracin de beta caroteno total matograma de referencia provisto con el ER Beta Ca-
(mg/mL), como la forma todo trans de beta caroteno roteno para Aptitud del Sistema USP usado.
(C40Hs6) en la Solucin estandar B. Resolucin: No menos de 1,5 entre beta caroteno y
Resultado= A/F alfa caroteno, y entre beta caroteno y 9-cis-beta caro-
teno, Solucin de aptitud del sistema
A = absorbancia promedio de las tres Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de
preparaciones de la Solucin estndar B beta caroteno, Solucin estndar A
F = absortividad de la forma todo trans de beta Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
caroteno pura en ciclohexano, 250,5 el pico de beta caroteno en inyecciones repetidas, So-
Solucin madre de la muestra A (para Preparaciones lucin estndar A
slidas de Beta Caroteno): Transferir una cantidad de Anlisis
Preparacin, equivalente a 1 O mg de beta caroteno, a Muestras: Solucin estndar A y Solucin muestra
un matraz volumtrico de 250 mL. Agregar 250 mg de [NOTA-Los factores de respuesta relativa para 1 3-cis-
butil hidroxitolueno, 0,5 mL de proteasa R alcalina y beta caroteno y 15-cis-beta caroteno son 1,2 y 1,4,
15 mL de agua. Inclinar ligeramente el matraz para hu- respectiva mente.]
medecer todo el contenido. Someter la solucin a ultra- Registrar los cromatogramas e identificar los picos de
sonido en un bao ultrasnico a aproximadamente 50 los analitos pertinentes de la Solucin muestra por
durante 30 minutos y agitar por rotacin suave en comparacin con los de la Solucin de aptitud del sis-
intervalos de 1 O minutos. Agregar 1 00 mL de alcohol a tema. Medir el rea de los picos.
la suspensin tibia y agitar vigorosamente. Agregar Calcular el porcentaje de beta caroteno total en la por-
1 35 ml de cloruro de metileno y agitar nuevamente. cin de Preparacin tomada:
Dejar la mezcla en reposo en la oscuridad hasta que
alcance la temperatura ambiente (aproximadamente 2 Resultado= (ru/r1) x (C/Cu) x 100
horas). Diluir con cloruro de metileno a volumen, agitar ru = [(rea del pico de la forma todo trans de beta
vigorosamente y dejar que los slidos sedimenten en la caroteno) + (rea del pico de 9-cis-beta
oscuridad. caroteno) + (rea del pico de 1 3-cis-beta
Solucin madre de la muestra B (para suspensiones l- caroteno x 1,2) + (rea del pico de 15-cis-
quidas de Beta Caroteno en Preparaciones oleosas): beta caroteno x 1,4) + (suma de las reas de
Transferir una cantidad de Preparacin, equivalente a los picos de otros ismeros-cis de beta
20 mg de beta caroteno, a un matraz volumtrico de caroteno)] en la Solucin muestra
250 mL. Agregar 250 mg de butil hidroxitolueno, r1 = rea del pico de la forma todo trans de beta
120 mL de cloruro de metileno y 1 00 ml de alcohol. caroteno en la Solucin estndar A
Agitar el matraz hasta que la muestra se haya disuelto o
suspendido completamente. Dejar la mezcla en reposo
6338 Beta Carotcno /Suplementos Dietticos USP 38

C, = concentracin cJp la fnrma torio tmm rle beta ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11)
caruter ru e11 ia Sulucin e>lndar A, segn se ER Beta Caroteno USP
determina usando el procedimiento (todo-E)- 1, 1 ' -( 3, 7, 12,1 6-Tetrametil-
b.JeCUv1_1_1~t1 iLv (11 t'::j/111Lj . 1 3 S 7 9 i 3 i S i l-octadecanonaeno-1, l 8-d11l)b1s
C = concentracion nominal de Preparac1on en la 2 6, 6-tri~etil<:-i~lohexeno].
Solucin muestra (mg/mL) ER Beta Caroteno para Aptitud del Sistema USP
Calcular el porcentaje de la forma todo trans de beta
caroteno en la porcin de Preparacin tomada:
Resultado= (ru/rs) x (C/Cu) x 100
r11 = rea del pico de la forma todo trans de beta
Beta Glucano
caroteno en la Solucin muestra
DEFINICIN
rs = rea del pico de la forma todo trans de beta
caroteno en la Solucin estndar A El Beta Glucano se obtiene mediante extraccin de la pared
Cs = concentracin de la forma todo trans de beta celular de levadura de cerveza Baker (Saccharomyces cere-
caroteno en la Solucin estndar A, segn se visiae) fermentada y procesad? trmicamente. Est C?~
determina mediante el procedimiento puesto principalmente de po/1meros de glucano ram1f1ca~
espectromtrico (mg/mL) dos /)-(1,3)/(1,6). Asimismo, se puede esperar la presencia
Cu = concentracin nominal de Preparacin en la de pequeas cantidades de /3-(1,6)-glucano y quitina en el
Solucin muestra (mg/mL) producto final. Contiene no menos de 70% de beta glu-
Criterios de aceptacin: La Preparacin contiene cano calculado como glucosa despus de la hidrlisis en-
95 0%-130 0% de la cantidad declarada de beta caro- zimtica, con respecto a la sustancia seca.
te~o total, ~a/culado como (C40Hs6) con respecto a la IDENTIFICACIN
sustancia anhidra, y no menos de 95,0% de la forma RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR (761>
todo trans de beta caroteno en el contenido de beta Solucin estndar: Disolver 1 O mg de ER Beta Glucano
caroteno total. USP en O 6 mL de dimetil sulfxido-d6 y calentar a 100
(Pospuesto indefinidamente) durante 1, hora. Luego, agregar O, 1 mL de D10~ mezclar
ALFA CAROTENO Y OTROS COMPUESTOS RELACIONADOS la solucin y transferir a un tubo para resonancia mag-
Fase mvil, Solucin de aptitud del sistema, Solucin ntica nuclear (RMN).
muestra y Sistema cromatogrfico: Proceder segn Solucin muestra: Disolver 1 O mg de Beta Glucano en
se indica en la prueba de Contenido de Beta Caroteno. O 6 mL de dimetil sulfxido-d6 y calentar a 100 du-
Anlisis r~nte 1 hora. Luego, agregar O, 1 mL de D10, mezclar la
Muestra: Solucin muestra solucin y transferir a un tubo para RMN.
Volumen de inyeccin: 20 L Anlisis: Registrar los espectros 1 H NMR a_~O y compa-
Calcular el porcentaje de alfa caroteno y de otros com- rar las resonancias individuales de la Soluoon muestra
puestos relacionados in<;Jividua!es relat1_~os al beta ca- con las de la Solucin estndar. Las seales principales
roteno total en la porc1on de Preparac1on tomada: asociadas con Beta Glucano se presentan en la Tabla 7.
Resultado = (ru! rr) x 1 00
Tabla 1
r11 = rea del pico de alfa caroteno u otros Seales de RMN Principales
compuestos relacionados individuales de 1 H ER Beta Glucano USP
rr = suma de las reas de todos los picos
H-1 11 3)-alucano 4 52 d 1 = 7 5 Hz lH
Criterios de aceptacin
Alfa caroteno: No ms de 1,0% H-2 4 v 5 (1 3-) 3 27-3 33 m 3H
Cualquier otro compuesto relacionado individual: t-------------
_.tt:3 y 6b (1,3-) 3 45-3 48 m 2H
No ms de 1,0% H-6a 11 3-) 3 71 d 1 = 11 Hz lH
Compuestos relacionados totales (incluyendo alfa ca- H- 1 11 6)-alucano 4 27 d 1 = 7 7 Hz lH
roteno): No ms de 5,0%
Integrar el rea bajo los picos en cin.co ocasiones pa_ra
IMPUREZAS , cada muestra y promediar. Determinar el porc~ntaie re-
RESIDUO DE INCINERACION (281>: No ms de 2,0% lativo de glucano con enlaces (1,6) en la porc1on de
Beta Glucano tomada:
Eliminar lo siguiente:
Resultado = {A/(A + 8)) x 1 00
METALES PESADOS, Mtodo 11 (231): No ms de A = valores de integracin para la seal a
1O ppme (Oficial 01-dic-2015)
4,27 ppm, correspondientes a H-1 del
PRUEBAS ESPECFICAS glucano (1,6)
DETERMINACIN DE AGUA, Mtodo I (921>: No ms de B = valores de integracin para la seal a
8,0% para Preparaciones slidas; no ms de 1,0% para 4,52 ppm, correspondientes a H-1 del
Preparaciones lquidas. glucano (1, 3)
Criterios de aceptacin: El espectro de 1 H de _la So/u- ,
REQUISITOS ADICIONALES cin muestra presenta un patron de desplazamiento qu1-
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases se- mico con ubicaciones de seal e intensidades relativas
llados hermticamente y resistentes a la luz y al oxgeno. que corresponden a las de la Solucin estndar. Asi-
Almacenar en un lugar fresco. . mismo, el porcentaje relativo de glucano con enlaces
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre y el conten1,do (1,6) equivale a 10%-18% de los enlaces totales.
de vehculos y antioxidantes agregados a la formulac1on,
y el contenido de rarotenoides totales como beta COMPOSICIN
ca roten o. CONTENIDO DE BETA GLUCANO
Solucin amortiguadora A: Disolver 11,6 mL de cido
actico glacial en aproximadamente 900 mL de agua.
USP 38 Sup!crncntos Diettico~ /Beta G!ucano 6339

Aj11\t;ir l;i 'nl11rin rnn \nlllin rlP hidrxido dP 'orlio los ricios de mezcla en un mezclador de vrtice y colo-
di 20% d u11 pH de 5 y dilui1 Lll dYUd lld~ld 1000 rnl. LdLi11 de lo:, vidle> en el ba1'10 de hielo durante 20
Solucin amortiguadora B: Disolver 69,6 rnL de cido minutos. La mezcla debe convertirse en una dispersion
aLliui ~laLial et 1 fJ' uxi111aJa111e11te 800 rnL de agua.
1_ ~ ~- - - ::._ - - . '--~-_,l,', ... :,.J,,
1IUI11uye1 lt:'.Cl y u Cl.)IUUUa.
Austar con solucin de hidrxido de sodio al 20% a un Solucin estndar: Proceder seqn se indica en la Solu-
pH de 3,8 y diluir con agua hasta 1000 rnL. cin muestra excepto que se debe usar ER Beta Glucano
Solucin amortiguadora C: Disolver 12, 12 g de lris(hi- USP en lugar de Beta Glucano. [NOTA-Preparar la Solu-
droxirnetil)aminornetano (TRIS), 11,69 g de cloruro de cin muestra y la Solucin estndar por triplicado. Re-
sodio y 4, 16 g de la sal tetrasdica dihidrato del cido sulta crtico para el xito de la valoracin que la mues-
etilendiaminotetraactico (EDTA) en aproximadamente tra est bien dispersada.]
900 rnL de agua. Ajustar con cido clorhdrico concen- Digestin de liticasa: Al retirar todos los viales que
trado o con solucin de hidrxido de sodio al 20% a contienen la Solucin muestra o la Solucin estndar del
un pH de 7,5 y diluir con agua hasta 1 000 rnL. [NOTA- bao de hielo, agregar 1,6 mL de Solucin amortigua-
La Solucin amortiguadora C se puede almacenar du- dora By 600 L de Solucin de liticasa a cada vial. Incu-
rante 1 ao a 2c-8.] bar la mezcla a 50 durante 12-18 horas y enfriar a
Solucin amortiguadora D 1 : Transferir 45,287 g de temperatura ambiente.
fosfato dibsico de potasio, 30, 382 g de cido p-hidro- Digestin de (1,6)-glucanasa: Despus de enfriar to-
xibenzoico y 4 g de azida sdica a un matraz volum- dos los viales, retirar una alcuota de 1 30 L de cada
trico de 1000 rnL y agregar cuidadosamente 800 rnL de vial y digerir ms agregando 25 L de solucin de hi-
agua. Mezclar con una barra mezcladora y calentar mo- drxido de potasio al 16,7% y 300 L de Solucin de
deradamente hasta disolver por completo. Dejar que la (7, 6)-glucanasa. Incubar los viales a 80 durante 15 mi-
solucin se enfre, ajustar con solucion de hidrxido de nutos y enfriar a temperatura ambiente.
potasio al 16,7% a un pH de 7,4 y diluir con agua a Digestin de beta glucanasa/glucosidasa: Despus de
volumen. [NOTA-Almacenar la Solucin amortiguadora enfriar todos los viales, agregar 390 L de la Mezcla de
D en un frasco color mbar con una fecha de caduci- enzimas de pulido a cada vial e incubar los viales a 40
dad de 3 aos a 4.] durante 1 hora. Enfriar los viales a temperatura am-
Solucin de liticasa: Preparar el volumen requerido de biente, centrifugar y transferir alcuotas de 50 L (por
liticasa a partir de Arthrobacter luteus 2 a una concentra- duplicado) a nuevos viales.
cin de 1 O U/L disolviendo la cantidad declarada por Solucin blanco de enzimas: Preparar blancos de en-
el fabricante (U/mg) en una solucin que contenga So- zima por triplicado combinando todos los reactivos usa-
lucin amortiguadora Cal 10% (v/v). [NOTA-La solucin dos durante las etapas de digestin, excepto por la So-
no utilizada se puede almacenar a no ms de -15 con lucin muestra o la Solucin estndar.
una fecha de caducidad de 1 ao. Cada vez que se Condiciones instrumentales
utilice un lote diferente de liticasa, se debe calificar la (Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).)
concentracin de solucin de liticasa requerida.] Modo: Vis
Solucin de (1,6)-glucanasa: Solucin de 1 U/300 L Longitud de onda analtica: 51 O nm
de (1,6)-glucanasa liofilizada 3 en Solucin amortigua- Anlisis: Diluir las alcuotas de 50 L obtenidas despus
dora A. [NOTA-Es posible que los slidos no se disuel- de la Digestin de beta glucanasa/glucosidasa con 50 L
van por completo; por lo tanto, esta solucin se debe de agua y luego agregar 3 mL de Reactivo de glucosa
manejar corno una suspensin homognea. Esta solu- oxidasa/peroxidasa. Incubar los viales durante 20 minu-
cin es estable durante al menos 60 das a no ms de tos a 40. Determinar las absorbancias de cada vial de
-15 .] la Solucin muestra o de la Solucin estndar contra la
Mezcla de enzimas de pulido: Mezclar 2000 U de exo- Solucin blanco de enzimas. Preparar una curva estndar
beta-glucanasa4 y 400 U de beta-glucosidasa 5 en usando la absorbancia de una serie de estndares de
100,0 rnL de Solucin amortiguadora A. Se puede usar glucosa tratados de manera similar (O; O, 1; 0,25; 0,5 y
corno alternativa una prernezcla de las enzimas 6 1,0 mg/mL). A partir de la pendiente de la curva estn-
[NOTA--Almacenar sobre hielo durante el procedimiento dar y de la absorbancia de la Solucin muestra y de las
y para su uso en una valoracin en el mismo da. La Soluciones estndar digeridas, determinar la concentra-
mezcla de enzimas de pulido no utilizada se puede volver cin, C, en mg/mL, de glucosa liberada en la cubeta:
a congelar una vez a no ms de -15 con una fecha de
caducidad de 2 aos.] Resultado = (A1 - Ae)/pendiente
Reactivo de glucosa oxidasa/peroxidasa: Disolver el
contenido del Reactivo de Determinacin de Glucosa 7 A, = absorbancia promedio de la muestra o de ER
en 1 L de agua que contenga 50 mL de Solucin amorti- Beta Glucano USP
guadora D. [NOTA-Almacenar el reactivo en un frasco As = absorbancia promedio de la Solucin blanco de
de color mbar y etiquetar con una fecha de caducidad enzimas
de 3 meses a una temperatura entre 2 y 8 o 1 ao a Calcular el porcentaje de beta glucano como glucosa en
no ms de -1 r. Minimizar el tiempo en que el reactivo la porcin de Beta Glucano tomada:
est a temperatura ambiente.]
Solucin muestra: Transferir 15-20 mg de Beta Glu- Resultado= 100 x C/{[(WT1/FI) x (F2/F3)]/2)
cano a un vial de vidrio de 16 x 100 mm. Colocar el
vial en un bano de hielo. Agregar una alcuota de WT1 = peso original de la muestra o de ER Beta
0,4 rnL de hidrxido de potasio fro (1 en 6) mientras Glucano USP (mg)
FI = volumen total en el vial durante la Digestin
se mezcla en un mezclador de vrtice hasta dispersar el
polvo. Devolver el vial al bao de hielo. Continuar con de liticasa, 2,6 mL
F2 = volumen de la muestra o de ER Beta Glucano
' Esta solucin amortiguadora tambien est disponible como Frasco #3 (Bottle USP transferido a un nuevo vial durante la
#3) del kit K-YBGL (MegMyme), o Frasco #1 (Bottle #1) del kit de GOPOD Digestin de (7, 6)-glucanasa, O, 1 30 m L
(Meg01vme)
2 Liticasa de Arlhrobacter luleus, Sigma L4025 o equivalente. F3 = volumen total durante la Digestin de beta
i Disponible comercialmente como Pustulanasa, Cell 36, Proka2yme o equiva- glucanasa/glucosidasa, 0,845 mL
lente. CritPrio~ dP aceptacin: No menos de 70% de beta
'E-EXBGL 200 U/ml, 200 U/frasco, Mcgayme o equivalente.
'200 U/frasco, Megaqrne u equivalente.
glucano, calculado como glucosa despus de la hidrli-
6 E-EXBGOS, MegaLynw o equivalente. sis enzimtica, con respecto a la sustancia seca
7 Frasco #4 (Bottle #4) riel kit K-YBGL o Frasco #2 (Bottle !12) del kit GOPOD,
Megazyme o equivalente.
6340 RPtJ Clucano / Sup!ernentos Dietticos lJSP 38

CONTENIDO DE PROTENA Criterim de aceptacin: No ms de l ,01i1


Muestra: 1,0 g de Beta Glucano . . MANOSA
Anlisis: Proceder segun se ndica en J)p/prmmauon de Solucin A: Aguci purificada al 1OO'Yo
nitrgcns :~ 61) y :-~:u!! p!:cdi (_- cv1tcitid0 de 11trogenu SuluL11 B: ii1drox1uo ce sodio 9Sb mivi
por 6 . 25. Fase mvil: Ver !J Tabla 2.
Criterios de aceptacin: No mas de 10,0%
CONTENIDO DE GRASA
Tabla 2
Muestra: 2 g de Beta Glucano, previamente secado.,
Anlisis: Transferir la Muestra a un dedal de extracc1on 1empo Sol UCI'n A Solucin B
y mezclar con una can!idad equiva!ente de arena. se.ca y lmin) __ .......__.____ ___ _{%) l/o)
limpia. Colocar un tapan de algodon o lana de vidrio o - --
2Q,_() __ 64 o
exento de grasa en la parte superi.~r del dedal. Col~xar 1 so 36 o 64 o
el dedal en un aparato de extracc1on continuo equi- 35,0 (inyeccin de
pado con un matraz de recoleccin tarado. Verter muestra) 59 4 40 6
------- t - - - - -
75 ml de ter de petrleo a travs de la mezcla en el 80 o 59 4 40 6
matraz de recoleccin. Extraer a una velocidad de con-
densacin de 5-6 gotas/segundo durante 4 horas y (NOTA-El tiempo de corrida generalmente requerido es
lueqo a una velocidad de 2-3 gotas/segundo durante 80 minutos.] .
las si9uientes 1 6 horas. Desconectar el. matraz de reco- Solucin de estndar interno: 0,8 mg/ml de ER lnos1-
leccion, evaporar cuidadosamente el disolvente y secar tol USP en agua
el matraz de recoleccin y su contenido en un horno Solucin muestra: Pesar 2,0-4,0 mg de Beta Glucano
de secado a 1 00 durante 30 minutos hasta peso cons- por duplicado en viales con barras mezcladoras. Agre-
tante. Calcular el porcentaje del extracto (grasa cruda) gar 500 L de cido trifluoroactico (TFA) puro y deiar
en la porcin de Beta Glucano tomada. que la mezcla forme una dispersin uniforme mez-
Criterios de aceptacin: No ms de 20,0% clando durante 1 hora a temperatura ambiente. Incubar
CONTAMINANTES
en un bao de agua a 80 durante 2 horas mezclando
IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS (233)
y luego enfriar a temperatura ambiente. Agreg~r 1 00 L
Criterios de aceptacin de la Solucin de estndar interno a cada vial e incubar
Arsnico: No ms de 0,5 g/g mezclando en un bao de agua hirviendo duran!e 15
Cadmio: No ms de 0,5 g/g minutos. Enfriar nuevamente a temperatura ambiente y
Plomo: No ms de 0,5 g/g luego agregar 1,07 ml de agua a .ca9a vial, e incubar
mezclando en un bao de agua h1rv1endo durante 1
Mercurio: No ms de O, 1 ~tg/g
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- hora. Enfriar las soluciones a temperatura ambiente y
tal de microorganismos aerobios no excede de 2 x 10 4 secar durante toda la noche en un aparato SpeedVac o
ufc/g; el recuento total combinado de hongos filamento- equivalente, a baja temperatura con el .~istema de crio-
sos y levaduras no excede de 2,5 x 10 1 ufc/g; y el re.-. bombeo apagado. Disolver la preparac1on ~eca en .
cuento de bacterias Gram negativas tolerantes a la bilis 2,5 ml de agua desionizada y pasa~ a traves de un filtro
no excede de 1 O ufc/g. de PTFE para jeringa, con ur: tamano de poro de 0,2
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cum-
m. Diluir con un volumen igual de agua antes de
ple con los requisitos de las pruebas .Pa.ra de.terminar la inyectar. ..
ausencia de Salmone!la spp. y Eschenchw col1. Soluciones estndar: Preparar una soluc1on de ER Dex-
trosa USP de 4 mg/ml y una solucin de ER Manosa
PRUEBAS ESPECFICAS USP de 80 pg/mt.: Transferir por separado alcuotas de
GucGENO estas soluciones a viales individuales (ver la Tabla 3).
Solucin amortiguadora B: Preparar segn se indica Preparar cada estndar por ?uplicado y liofilizarl?,s. Tra-
en Contenido de Beta Glucano. tar los viales liofilizados segun se 1nd1ca en Soluoon
Solucin de amiloglucosidasa/invertasa8 : Una mezcla muestra, comenzando donde dice "Agregar 500 L de
de 1630 U/ml de amiloglucosidasa y 500 U/ml de in- cido trifluoroactico puro".
vertasa en solucin de glicerol (50% v/v)
Muestra: 1 00 mg . . . Tabla 3
Anlisis: Transferir la Muestra por triplicado a viales indi-
Nmero
viduales de vidrio con tapa de rosca de 16 x 150 mm.
de L/Vial Conteni- L/Vial Conteni-
Colocar los viales en un bao de hielo y agregar a cada
ldenti- de do de do
vial una al1cuota de 2 ml de hidrxido de potasio fro
ficacin 4 mg/mL de 80 pg/mL de
(1 en 6) mientras se mezcla en un mezclador _de vrtice
del de Glu- Glucosa de Mano- Manosa
hasta dispersar el polvo. Devolver el vial al bano de 1

Estndar cosa 1 110) sa "10)


hielo. Continuar con los ciclos de mezcla en un mezcla-
dor de vrtice y colocacin de los viales en el bao de
hielo durante 20 minutos. La mezcla debe convertirse
_ _Q _ _
1
-
100
o-- -+-------~
i 400
o
25
o
2
en una dispersin homognea y traslcida. Agregar 2 200 800 so 4

Ft=r
-

~: -+-!.~.~~---~-
8 ml de Solucion amortiguadora B. Mezclar minuc1o~a- [ 1200 100 8
111ente en un mezclador.de vrtice y agregar inmediata- 200 16
mente 200 L de Solucion de amiloglucos1dasa/mvertasa ~-- -1000 400 'l2
y mezclar de nuevo en un mezclador .de vrtice .. Incu-
bar la mezcla a 40' durante 30-35 minutos. Enfriar a Sistema cromato9rfico
temperatura ambiente. Mezclar nuevamente en un, (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
mezclador de vrtice, transferir a un tubo de centrifuga Modo: HPLC
adecuado y centrifugar hasta obtener un sobrenada1ite Detector: Electroqumico _ , .
transparente. Transferir alkuotas duplicadas d_e 50 ~tl de Modo del detector: Deteccion amperometrica por
sobrenadante a nuevos viales y proceder segun se in- pulso~
dica en el Anlisis de Contenido de Beta Glucano. Intervalo del detector: 3000 C (se puede modificar
s Como alternc\i~a. se puede lJlar directamente el Frasco #2 (Bottle #2) del en caso necesario)
kit K-YBGI (Meca1vme n P'l<J1valente)
USP 38 Sult>mt"ntos ni:;tf"ticos /Aceite de ScmillJ de Borraja 6341

Electrodo de trabajo: Oro ESTNDARES DE REFERENCIA USP 111)


Electrodo de referencia: pH, plata-cloruro de plata tR Beta Glucano USP
Forma de onda electroqu1mica: Ver la Tabla 4. ER Dextrosa USP
ER inositoi USP
Tabla 4 rR Manos;i USP
--- ------- ,---------------~-

Tiempo Potencial
(s) ---
(V) lntearacin
o 00 010
o 20 010 Inicio Biotina-ver Botna en Monografas
o 40 010 Fin
Generales
o 41 --2 00
o 42 -2 00
o 43 o 60
~-___QI_'\__ o 10 ----- Aceite de Semilla de Borraja
o 50 010
[84012-16-8].
Columnas DEFINICIN
Guarda columna: 4 mm x 5 cm; relleno L47 El Aceite de Semilla de Borraja se obtiene a partir de semi-
Columna analtica: 4 mm x 25 cm; relleno L47 llas de Borago officinalis L. El aceite se extrae mediante
Temperatura de la columna: 30 prensado en fro o con fluidos s~p~rcrticos y luego se
Velocidad de flujo: 0,4 ml/min refina. Se puede agregar un ant1ox1dante adecuado.
Volumen de inyeccin: 1 O L
Aptitud del sistema IDENTIFICACIN
Muestra: Identificacin de estndar #5 A. Cumple con los requisitos de Prueb,as Especficas en
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos para inositol, Grasas y Aceites Fijos, Composicin de Acidos Grasos (401 ).
manosa y glucosa son 0,68; 0,95 y 1,0
respectivamente.] IMPUREZAS
Requisito de aptitud:
Resolucin: No menos de 1,5 entre manosa y
9,lucosa Eliminar lo siguiente:
Ana lisis
Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra METALES PESADOS, Mtodo JI (231 ): No ms de 1 o g/
Calcular los cocientes entre las reas de los picos de ge (Oficial Ol-dic-2015)
glucosa y manosa y el estndar interno de las Solucio- PRUEBAS ESPECFICAS ,
nes estndar. Generar dos lneas de respuesta estndar GRASAS y ACEITES F11os, Indice de Acidez (401): No ms
graficando el cociente entre las reas de los picos en de 1,0 ,
funcin de la cantidad (g) de glucosa y manosa en GRASAS y ACEITES F11os, Indice de Perxido (401): No ms
las Soluciones estndar. Calcular el cociente entre las de 5,0 ,
reas de los picos de glucosa y manosa y el estndar GRASAS y ACEITES F11os, Indice de Saponificacin (401):
interno de la Solucin muestra. A partir de los cocientes 184-194
de respuesta calculados entre los picos de glucosa y GRASAS y ACEITES F11os, Materia lnsaponificable (401): No
manosa y sus respectivas lneas de respuesta estndar, ms de 2,0% ,
determinar el contenido de glucosa, Ce, y manosa, CM, GRASAS y ACEITES F11os, Composicin de Acidos Grasos
ambos en g, en la Solucin muestra. (401 ): El Aceite de Semilla de Borraja presenta el perfil
Calcular el porcentaje de manosa en la porcin de Beta de composicin de cidos grasos de la Tabla 7.
Glucano tomada:
Resultado = CM/(CM + Ce) x 100 Tabla 1
Anotacin Porcentaje
CM =contenido de manosa en la Solucin muestra a cido Graso Abreviada (%)
partir de la lnea de regresin de manosa
cido oalmtico } 6:0 8 0-11 o
(g) .,
Ce = contenido de glucosa en la Solueton muestra a cido esterico 18:0 2 0-5 o
partir de la lnea de regresin de glucosa cido oleico 18:1 ___ljL0-19 _o__
(g) , cido Y-linolnico ,__ - _Ul_:_l__ --- t----- 18 0--24 o
Criterios de aceptacin: No mas de 1,0% de manosa, cido linoleico 18:2 ---
___ _14,0-42,Q _ _
como una funcin de hexosa rernperada total (glucosa cido araaudico 20:0 No ms de O 5
y manosa) ,
cido gadoleico 20:1 2 0-6 o
RESIDUO DE INCINERACION (281): No ms de 2,5% r---
~---------

PRDIDA POR SECADO (731) cido behnico 22:0 No ms de O 8


Muestra: 1 g cido ercico ---- - - - - - - - 2_2_: 1 _______ ,,_ No ms de 5 O
Anlisis: Secar la Muestra a 1 05 durante 3 horas. cido nervnico 24:1 No ms de 4 5
Criterios de aceptacin: No ms de 8,0%
NDICE DE REFRACCIN (831 ): 1,47 4-1,478 a 20"
REQUISITOS ADICIONALES
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im- REQUISITOS ADICIONALES .
permeables y resistentes a la luz. ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im-
permeables, preferiblemente bajo una atmsfera de gas
inPrtP Protpger de la luz.
6342 Bo::iwelia / Sulcmcntos OictCticos USP 38

en metano! para obtener una solucin con una concen-


Boswelia Serrata tracin conocida de 1O mg/ml. Antes de la inyeccin,
pasar a travs de un filtro con un tamao de poro de
0,45 ~tm.
DEFINICIN
Solucin muestra: Transferir apruximdddiTH:'nle 2,0 g
La. Boy.~elia Serr dtd es Id resir1d oleogommd obtenida por de Boswelia Serrata triturada a un matraz Erlenmeyer, y
1nc1s1on o producida mediante exudado espontneo del someter a reflu10 en 50 ml de metano! en un bao de
tallo y las ramas de Boswe!lia serrato Roxb. (Fam. Bursera- agua durante 15 minutos, mezclando con un agitador
ceae). Contiene no menos de 1,0% de los derivados ceto magntico. Repetir hasta que el ltimo extracto se
de cido J-boswlico, calculado con respecto a la materia torne incoloro. Evaporar los extractos combinados hasta
seca como la suma de cido 11-ceto-J-boswlico y cido aproximadamente 50 ml, transferir a un matraz volu-
3-acetil-11-ceto-3-boswlico. mtrico de 100 ml, y diluir con metanol a volumen.
IDENTIFICACIN Antes de la inyeccin, pasar a travs de un filtro con un
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA tamao de poro de 0,45 m y desechar los primeros
DELGADA (201) ml del filtrado.
Solucin estndar: Tratar una cantidad de ER Extracto Fase mvil: Preparar una mezcla filtrada y desgasificada
de Boswelia Serrata USP calentando suavemente en me- de acetonitrilo, agua y cido actico glacial
tano! para obtener una solucin con ur1d concentracin (900:100:0, 1 ). Realizar los ajustes necesarios.
conocida de 30 mg/ml, enfriar, centrifugar, y usar el Sistema cromato9rfico
sobrenadante. (Ver CromatograflO (621 ), Aptitud del Sistema.)
Solu~in mui::stra: Usar la Solucin muestra, preparada
Modo: HPLC
segun se )nd1ca en la prueba de Con len ido de Derivados Detector: UV 254 nm
Ceto de Acidos f3-Boswlicos siguiente y concentrar hasta Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1
10% del volumen. Velocidad de flujo: Ver la tabla de gradientes si-
Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa guiente.
de 0,25 mm -----
Fase mvil: Mezcla de hexdno y dcetato de etilo (6:4) Tiempo Velocidad de flujo
R~activo p~~a inmersin: Preparar una solucin de (min) mL/min)
ac1d(_) sulfunco al 10% en metano!. [NOTA-Preparar in- o 1
mediatamente antes de su uso.] 5 15
Volumen de aplicacin: 1 O L 10 2
Anlisis --
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra 30 2
Aplicar las muestras en bandas a una placa para cro- 32 1
matografa en capa delgada adecuada (ver Cromato- 45 1
grafa (621 )). Usar una cmara saturada. Desarrollar
hasta .que el frente de la fase mvil haya recorrido Volumen de inyeccin: 20 L
aproximadamente 90% de la placa. Retirar, secar, y Aptitud del sistema
observar bajo luz UV a 254 nm. Sumergir en el Reac- Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B
tivo para inmersin, calentar durante 5-1 O minutos a [NOTA-Los tiempos de retencin relativos para cido
100, y observar bajo luz visible. 11-ceto-3-boswlico y cido 3-acetil-11-ceto-3-bosw-
Criterios de aceptacin: Bajo luz UV a 254 nm, la Solu- lico son aproximadamente 1,0 y 1,4, respectivamente.]
C/On muestra presenta dos zonas principales debidas a Requisitos de aptitud: El cromatograma de la Solucin
cido 11-ceto-J-boswlico y cido 3-acetil-11-ceto-J- estndar B es similar al Cromatograma de Referencia a
boswlico a valores Rr de aproximadamente 0,30 y 254 nm provisto con el ER Extracto de Boswelia Se-
0,36, respectivamente, correspondientes a zonas de la rrata USP.
Solucin estndar. Bajo luz visible, la Solucin muestra Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
presenta dos zonas adicionales debidas a cido J-bos- la respuesta del pico de cido 3-acetil- 11 -ceto-J-bos-
wlico y cido 3-acetil-/3-boswlico a valores Rr de apro- wlico en inyecciones repetidas, Solucin estndar A
xi.madamente 0,49 y 0,58, respectivamente, correspon- Factor de asimetra: No ms de 1,5, pico de cido
diente a zonas de la Solucin estndar. Se observan 3-acetil-11-ceto-3-boswlico, ERR co1-dic-20B) Solucin es-
otras zonas de menor intensidad en la Solucin muestra tndar A
y la Solucion estndar. Anlisis
B. - El cromatograma a 210 nm de la Solucin JT1Uestra, en Muestras: Solucin estndar A, Solucin estndar B y
la pru_e.ba de Contenido de Derivados Celo de Acidos J- Solucin muestra
Bosw~ltcos, presenta picos para cido l l -ceto-f3-bosw- Usando el cromatograma de la Solucin estndar By el
l1co, ac1do 3-acetil-11-ceto-J-boswlico, cido J-bosw- Cromatograma de Referencia a 254 nm provisto con
lico y cido 3-acetil-/3-boswlico a tiempos de retencin el lote de ER Extracto de Boswelia Serrata USP, identi-
que corresponden a los del cromatogr arnd d 21 O nm de ficar los tiempos de retencin de los picos de cido
la Solucin estndar By al Cromatograma de Referencia a 11-ceto-f-l-boswlico y cido 3-acetil-11-ceto-J-bosw-
21 O nm provisto con el ER Extracto de Boswelia Serrata lico en la SoluC1n muestra.
USP. Calcular por separado los porcentajes de los dos anali-
tos en la porcion de Boswelia Serrata tomada:
COMPOSICIN
Resultado = (ru/rs) x (Cs/W) x 1 OF
Cambio en la redaccin: ~ rea del pico de cada analito de la Solucin
muestra
CONTENIDO DE DERIVADOS CHO DE CIDOS J-BOSWLICOS = rea del pico de cido 3-acetil-11-ceto-J-
S9lucin estndar A: Disolver una cantidad de ER boswlico de la Solucin estndar A
Acido 3-Acetil-11-ceto-J-bosvvlico USP en metar1ol pdrd = concentrac1on de ER cido 3-Acetil-11-ceto-/3-
obtener una solucin con una concentracin conocida boswelico USP en la Solucin estndar A
de O, 1 mg/ml. (mg/ml)
Solucin estndar B: Tratar una cantidad de ER Ex- w = peso de Boswelia Serrata tomada para
tracto de Boswelia Serrata USP calentando suavemente preparar la Solucin muestra (g)
Suplementos Diettico) / Bosvvelia 6 34 3

F =factor de conversin para cada analito Solucin muestra: Tratar una cantidad de Extracto ca-
(O, 9 3 para cido l 1-ceto-/!-boswlico y lenta1H.:lo sudvernente en metano! para obtener unJ so-
1,0 para cido 3-acetil-11-ceto-{3-boswlico) lucin con una concentrac1on conocida de 30 mg/mL,
Lntenos de aceptacin: Sumdr io~ orcenlae~ caicuia- t:-nf1 id1, Ler-,t-ifugat, y usu ci :-,obrcn{1dJntc.
clos para cido 11-<eto-/l-hos\vflirn y 5cido 3-acctil Adsorbente: Capa de qel de slice para rromatografa
11-ceto-/3-boswlico: No menos de 1,0% con respecto de 0,25 mm
a la materia seca. Fase mvil: Mezcla de hexano y acetato de etilo (6:4)
Reactivo para inmersin: Preparar una solucin de
IMPUREZAS cido sulfrico al 10% en metano!. [NOTA-Preparar in-
Impurezas Inorgnicas , mediatamente antes de su uso.]
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Insolubles en cido Volumen de aplicacin: 1 O L
(561): No ms de 0,5% Anlisis
METALES PESADOS, Mtodo 11 (231): No ms de 20 ppm Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Impurezas Orgnicas, , Aplicar las Muestras en bandas a una placa para cro-
PROCEDIMIENTO 1: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Materia matografa en capa delgada adecuada (ver Cromato-
Orgnica Extraa (56)): No ms de 2,0%, , grafa (621 )). Usar una cmara saturada. Desarrollar
PROCEDIMIENTO 2: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Metodo hasta que el frente de la fase mvil haya recorrido
General para Anlisis de Residuos de Plaguicidas (561 ): aproximadamente 90% de la placa. Retirar, secar, y
Cumple con los requisitos observar bajo luz UV a 254 nm. Sumergir en el Reac-
tivo para inmersin, calentar durante 5-1 O minutos a
PRUEBAS ESPECFICAS
100, y observar bajo luz visible.
CARACTERSTICAS BOTNICAS
Criterios de aceptacin: Bajo luz UV a 254 nm, la Solu-
Macroscpicas: Se presenta como lgrimas ovoides pe- cin muestra presenta dos zonas principales debidas a
queas, que en ocasiones forman masas aglomeradas cido 11-ceto-3-boswlico y cido 3-acetil-11-ceto-/3-
de hasta 5 cm de largo y 2 cm de espesor; de color boswlico a valores Rr de aproximadamente 0,30 y
blancuzco a amarillo dorado; la fractura es quebradiza y 0,36, respectivamente, correspondientes a zonas de la
la superficie fracturada es cerosa y translcida; presenta Solucin estndar. Bajo luz visible, la Solucin muestra
un olor aromtico caracterstico; sabor aromtico y lige- presenta dos zonas adicionales debidas a cido /3-bos-
,ramente mucilaginoso. wlico y cido 3-acetil-3-boswlico a valores RF de apro-
PERDIDA POR SECADO (731 ): Secar 1,0 g de Boswelia Se-
ximadamente 0,49 y 0,58, respectivamente, correspon-
rrata reducida a polvo fino a 105 durante 2 horas: dientes a zonas de la Solucin estndar. Se observan
pierde no ms de 12,0%,de su peso. otras zonas de menor intensidad en la Solucin muestra
(561):
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Totales
y la Solucin estndar.
No ms de 2,0%, determinado en 2,0 g de Boswelia Se- B. El cromatograma a 21 O nm de la Solucin muestra, en
rra~a reducida a polvo fin,o.
la prueba de Contenido de Derivados Ceto de Acidos /3-
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Extractos Solubles en Al-
Boswlicos, presenta picos para cido 11-ceto-3-bosw-
cohol, Mtodo 2 (561): No menos de 56% lico, cido 3-acetil-11-ceto-3-boswlico, cido /3-bosw-
REQUISITOS ADICIONALES lico y cido 3-acetil-{1-boswlico a tiempos de retencin
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien que corresponden a los del cromatograma a 21 O nm de
cerrados. Proteger de la luz y la humedad, y almacenar la Solucin estndar By al Cromatograma de Referencia a
en un lugar fresco. 21 O nm provisto con el ER Extracto de Boswelia Serrata
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en USP.
latn de la especie de Boswellia de la que se obtuvo la COMPOSICIN
resina oleogomosa.
ESTA~DARES DE REFERENCIA USP (11)
ER Acido 3-Acetil-11-ceto-/3-boswlico USP Cambio en la redaccin:
ER Extracto de Boswelia Serrata USP
CONTENIDO DE DERIVADOS CETO DE CIDOS /3-Boswucos
Solucin estndar A: Disolver una cantidad de ER
cido 3-Acetil-11-ceto-3-boswlico USP en metano! para
obtener una solucin con una concentracin conocida
Extracto de Boswelia Serrata de O, 1 mg/ml.
Solucin estndar B: Tratar una cantidad de ER Ex-
DEFINICIN tracto de Boswelia Serrata USP calentando suavemente
El Extracto de Boswelia Serrata se prepara a partir de Boswe- en metano! para obtener una solucin con una concen-
lia Serrata reducida a polvo, usando disolventes adecua- tracin conocida de 1 O mg/ml. Antes de la inyeccin,
dos tales como isopropanol, alcohol, metanol, hexanos o pasar a travs de un filtro con un tamao de poro de
mezclas de estos disolventes. La relacin entre el material 0,45 m.
vegetal inicial y el Extracto es aproximadamente 6:1. Con- Solucin muestra: Tratar una cantidad de Extracto ca-
tiene no menos de 90,0% y no ms de 110,0% de la lentando suavemente en metano! para obtener una so-
cantidad declarada de Extracto, calculado con respecto al lucin con una concentracin conocida de 1 O mg/ml.
extracto seco como la suma de cido 11-ceto-/3-boswlico Antes de la inyeccin, pasar a travs de un filtro con un
y cido 3-acetil-11-ceto-3-boswlico; puede contener sus- tamao de poro de 0,45 pm y desechar los primeros
tancias agregadas adecuadas. ml del filtrado.
Fase mvil: Preparar una mezcla filtrada y desgasificada
IDENTIFICACIN de acetonitrilo, agua y cido actico glacial
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA (900:100:0, 1 ). Realizar los ajustes necesarios.
DELGADA \201) Sistema cromato9rfico
Solucin estndar: Tratar una cantidad de ER Extracto (Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.)
de Bosvvelia Serrata USP calentando suavemente en me- Modo: HPLC
tano! para obtener una solucin con una concentracin Detector: UV 254 nm
conocida de 30 mg/mL, enfriar, centrifugar, y usar el Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1
sobrenadante Velocidad de flujo: Ver la tabla de gradientes si-
guiente.
6344 BmwPliil ./ )up!emt>ntos Dietticos lJSP 38

~-----.:;;;.;~- ---- l - Velocidad de flujo l PRUEBAS ESPECFICAS

(m~n-)-----+~----___-___J_'!'_L_/~1 m__n_}===-~---j1 PRDIDA POR SECADO (731 : Seun l , g de l::xtracto a


1 05 durante 2 horas: pierde no ms de 5,0% de su

__
.Jt:>U.

~~-i~f '{~~~-J___,
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 \: El recuento to-
tal de microorganismos aerobios no excede de 1 0 4 ufc/g,
y el recuento total combinado de hongos filamentosos y
__,j_ _ _ _ levaduras no excede de 1 qi ufc/g.
PROCEDIMIENTOS MICROBIOLOGICOS PARA COMPROBAR LA AU-
SENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cumple
Volumen de inyeccin: 20 L con los requisitos de las pruebas para determinar la au-
Aptitud del sistema sencia de Salmonella spp. y Escherichia coli.
Muestras: Solucin estndar A y Solucin estndar B
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos para cido REQUISITOS ADICIONALES
11-ceto-/J-boswlico y cido 3-acetil-11-ceto-/:l-bosw- ENVASADO V ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
lico son aproximadamente 1,0 y 1,4, respectivamente.] cerrados. Proteger de la luz y la humedad, y almacenar
Requisitos de aptitud: El cromatograma de la Solucin en un lugar fresco.
estndar B es similar al Cromatograma de Referencia a ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
254 nm provisto con el ER l::xtracto de Boswelia Se- latn y despus de la denominacin oficial, la parte de la
rrata USP. planta de la que se prepar el artculo. Cumple con otros
Factor de asimetra: No ms de 1,5, pico del cido requisitos de etiquetado en Extractos Botnicos (565).
3-acetil-11-ceto-/3-boswlico,e ERR (ol-dic-2013) Solucin ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
estndar A ER cido 3-Acetil-11-ceto-/3-boswlico USP
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para ER Extracto de Boswelia Serrata USP
la respuesta del pico de cido 3-acetil- 11 -ceto-f3-bos-
wlico en inyecciones repetidas, Solucin estndar A
Anlisis
Muestras: Soluon estandar A, Solucin estndar B y
Solucin muestra Ascorbato de Calcio-ver Ascorbato de
Usando el cromatograma de la Solucin estndar B y el
Cromatograma de Referencia a 254 nm provisto con Calcio en Monografas Generales
el lote de ER Extracto de Boswelia Serrata USP, identi-
ficar los tiempos de retencin de los picos de cido
11-ceto-/)-boswlico y cido 3-acetil-11-ceto-/3-bosw-
lico en el cromatograma de la Solucin muestra. Carbonato de Calcio-ver Carbonato de
Calcular por separado los porcentajes de cido Calcio en Monografas Generales
11-ceto-f:l-boswlico y cido 3-acetil-11-ceto-f:l-bosw-
lico en la porcin de Extracto tomada:

Resultado = (ru/rs) x (CV /W) x 1 OOF Carbonato de Calcio, Suspensin


ru = rea del pico de cada analito de la Solucin Oral-ver Carbonato de Calcio, Suspensin
muestra Oral en ,f\.,1onografas Generales
rs = rea del pico de cido 3-acetil-11-ceto-/3-
boswlico de la Solucin estndar A
Cs = concentracin de ER cido 3-Acetil-11-ceto-/3-
boswlico USP en la Solucin estndar A
(mg/mL)
Carbonato de Calcio, Tabletas-ver
V = volumen final de la Solucin muestra (mL) Carbonato de Calcio, Tabletas en Monografas
W = peso de Extracto tomado para preparar la Generales
Solucin mues:a (mg)
F = factor de conversin de cada analito
(0,93 para cido 11-ceto-/3-boswlico y
1,0 para cido 3-acetil-11-ceto-/)-boswlico) Citrato de Calcio-ver Citrato de Calcio en
Criterios de aceptacin: Sumar los porcentajes de los
dos analitos. Contiene no menos de 90,0% y no ms Monografas Generales
de 110,0% de la cantidad declarada de Extracto, calcu-
lado con respecto al extracto seco, como la suma de
cido l l -ceto-f3-boswlico y cido 3-acetil-11-ceto-/)-
boswlico. Citrato de Calcio, Tabletas
IMPUREZAS DEFINICIN
Impurezas Inorgnicas Las Tabletas de Citrato de Calcio contienen no menos de
90,0% y no ms de 110,0% de la cantidad declarada de
Eliminar lo siguiente: calcio (Ca).
IDENTIFICACIN
METALES PESADOS, Mtodo JI (231): No ms de A. La Solucin muestra de la prueba de Contenido pro-
20 ppme (Oficial Ol-rlic-2015) duce lneas de emisin o absorcin a las longitudes de
Impurezas Orgnic~s , . onda caractersticas del calcio .
PROCEDIMIENTO: ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Metodo B. IDENTIFICACIN-PRUEBAS GENERALES .. Calcio (191; y \i-
General para Anlisis de Residuu; de Pluyuiudm (561 ): tratos (191)
Cumple con los requisitos Anlisis: Moler una Tableta hasta polvo fino en un mor-
tero. Transferir el polvo a un tubo de centrfuga, agre-
USP 38 '\111lpmpntm Dietticos /Calcio 6345

gar 2-5 mL cie agua, snmPIPr a 11ltrasonido durante 1 Solucin estndar de calcio: Disolver 1,001 g de car-
minuto, agitar y cenlrifugdr. bonato de calcio, previamente secado a 300" durante 3
Criterios de aceptacin: El sobrenaddnte cumple con horas, y enfriado en un desecador durante 2 horas, en
los requi~ilo~ de id~ p1 ueua::i. 25 rnL de cido c!orhdrfco 1 t'J. Ca!ent(lr !1 t?hullirin
ha\ta expulsar el dixido de carbono y diluir con agua
CONTENIDO hasta 1 000 mL para obtener una concentracin de
[NOTA-Una solucin madre del estndar est disponible co- 400 _g/mL de calcio.
mercialmente con diferentes concentraciones de calcio. Solucion madre del estndar: 100 g/mL de calcio, a
Pueden realizarse ajustes volumtricos necesarios en la So- partir de Solucin estndar de calcio en cido clorhdrico
lucin estndar. Las concentraciones de la Solucin estn- O, 125 N
dar y la Solucin muestra pueden modificarse para que se Soluciones estndar: Pipetear y transferir 1,0; 1,5; 2,0;
adapten al intervalo linea o de trabajo del instrumento.] 2,5 y 3,0 mL de Solucin madre del estndar a sendos
CONTENIDO DE CALCIO, Procedimiento 1 matraces volumtricos de 1 00 mL. Agregar a cada ma-
Solucin madre del estndar: Pesar aproximadamente traz 1,0 mL de Solucin de cloruro de lantano y diluir
1,001 g de carbonato de calcio, previamente secado a con agua a volumen hasta obtener concentraciones de
300 durante 3 horas y enfriado en un desecador du- 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 y 3,0 g/mL de calcio.
rante 2 horas, y disolver en 25 mL de cido clorhdrico Solucin muestra: [NOTA-Reducir a polvo fino no me-
1 N. Calentar a ebullicin para expulsar el dixido de nos de 20 Tabletas.] Transferir el equivalente a 5 Table-
carbono y diluir con agua hasta 1 00 mL para obtener tas, a partir de Tabletas reducidas a polvo, a un crisol_
una solucin con una concentracin conocida de apro- de porcelana. Calentar el rnsol en una mufla mantenida
ximadamente 4000 g/mL de calcio. a 550 durante 6-12 horas y enfriar. Agregar 60 mL de
Solucin estndar: Agregar a un matraz volumtrico cido clorhdrico y calentar a ebullicin suave en un?
de 200 mL, 100 mL de agua y 4 mL de cido ntrico, y placa caliente o en un bao de vapor durante 30 minu-
mezclar meticulosamente. Pipetear y transferir 25,0 mL tos, enjuagando intermitentemente la superficie interna
de Solucin madre del estndar al matraz volumtrico y del crisol con cido clorhdrico 6 N. Enfriar y transferir
diluir con agua a volumen para obtener una solucin cuantitativamente el contenido del crisol a un matraz
con una concentracin conocida de aproximadamente volumtrico de 100 ml. Enjuagar el crisol con pequeas
500 _g/mL de calcio. porciones de cido clorhdrico 6 N y agregar los enjua-
Solucion muestra: Pesar y reducir a polvo fino no me- gues al matraz. Diluir con agua a volumen y filtrar, des-
nos de 20 Tabletas. Transferir una porcin pesada de echando los primeros 5 mL del filtrado. Diluir esta solu-
Tabletas reducidas a polvo, equivalente a aproximada- cin cuantitativamente con cido clorhdrico O, 125 N
mente O, 1 g de calcio, a un matraz de 50 ml. Agregar hasta obtener una concentracin de 2 g/mL de calcio,
4 mL de cido ntrico y calentar la solucin a ebullicin agregando 1 mL de Solucin de cloruro de lantano por
suave, durante la cual se desprenda humo. Calentar a 1 00 mL del volumen final.
ebullicin la solucin durante 30 minutos adicionales Condiciones instrumentales
con agitacin constante por rotacin suave, periodo du- (Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).)
rante el cual no debe observarse desprendimiento de Modo: Espectrofotometra de absorcin atmica
humo. Enfriar la solucin a temperatura ambiente, Longitud de onda analtica: Lnea de emisin de cal-
transferir cuantitativamente toda la solucin a un ma- cio a 422,7 nm
traz volumtrico de 200 mL, diluir con agua a volumen, Lmpara:. Calcio, de ctodo hueco
mezclar y filtrar. Llama: Oxido nitroso-acetileno
Condiciones instrumentales Blanco: cido clorhdrico O, 125 N que contenga 1 mL
(Ver Espcctroqurnica de Plasma (730).) de Solucin de cloruro de lantano por 1 00 mL
Modo: Plasma inductivamente acoplado, ICP-AES Anlisis
Longitud de onda analtica: 317,93 nm. [NOTA-Las Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra
condiciones de operacin pueden desarrollarse y opti- Determinar las absorbancias de las soluciones, usando
mizarse basndose en las recomendaciones del fabri- el Blanco. A partir de la ecuacin de regresin lineal,
cante. La configuracin tpica incluye una potencia de calculada usando las absorbancias de las Soluciones
radiofrecuencia (RF) de aproximadamente 1 300 vatios, estndar en funcin de las concentraciones, determi-
un flujo de antorcha de argn de aproximadamente nar la concentracin, C, en g/mL de calcio en la
15 L/min, un flujo auxiliar de argn de aproximada- Solucin muestra.
mente 0,2 L/min y una velocidad de flujo del nebuliza- Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de cal-
dor de aproximadamente 0,8 L/min.] cio (Ca) en la porcin de Tabletas tomada:
Anlisis: Determinar la emisin de la Solucin estndar,
la Solucin muestra y una solucin de cido ntrico al Resultado = (C/Cu) x 100
2% como el blanco a la longitud de onda indicada
anteriormente. C = concentracin determinada de calcio en la
Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de calcio Solucin muestra
(Ca) en la porcin de Tabletas tomada: Cu = concentracin nominal de calcio en la Solucin
muestra
Resultado= (ru/r1) x (C/Cr) x 100 Criterios de aceptacin: 90,0%-110,0%
r11 = respuesta del pico de calcio de la Solucin CONTAMINANTES
muestra PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
11 ~ respuesta del pico de calcio de la Solucin tal de microorganismos aerobios no excede de 1000
estndar ufc/g. El recuento total combinado de hongos filamento-
C = concentracin de calco en la Solucin estndar sos y levaduras no excede de 100 uf,c/g.
(g/mL) AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum-
Cu = concentracin nominal de Cdlcio en la Solucin plen con los requisitos de la prueba para determinar la
muestra (~tg/mL) ausencia de Escherichia coli.
Criterios de aceptacin: 90,0%-11 0,0%
CONTENIDO DE CALCIO, Procedimiento 2 PRUEBAS DE DESEMPEO
Solucin de cloruro de lantano: 267 mg/mL de clo- DESINTEGRACIN Y DISOLUCIN DE SUPLEMENTOS DIETTICOS
ruro de lantano heptahidrato en cido clorhdrico O, 125 (2040): Cumplen con los requisitos en Desintegracin,
N 15 minutos.
6 ~46 Cillcio / Suplementos Dietticos USP 38

VARIACIN DE PESO DE SUPLEMENTOS DIETTICOS (2091\; Levulinato de Calcio-wr I evulinoto de


Cumplen con los requisitos. '
Calcio en Monografas Generales
REQUISITOS ADICIONALES
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
cerrados.
ETIQUETADO: La etiqueta indica la cantidad de calcio en L-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio
trminos de mg/Tableta.
11/N

Fosfato Dibsico de Calcio-ver Fosfato


Dibsico de Calcio Anhidro y Fosfato Dibsico
de Calcio Dihidrato en Monografas Generales o

C20H23CaN10o xH,O
Fosfato Dibsico de Calcio, Tabletas- C20HnCaN106 (anhidro) 497,52
N-[ 4-[[(2-Amino-1,4,5,6,7,8-hexahydro-5-methyl-4-oxo-( 6S)-
ver Fosfato Dibsico de Calcio, Tabletas en pteridinyl)methyl]amino ]benzoyl]-L-glutamic acid, calcium
Monografas Generales salt (1 :1 );
Sal clcica (1 :1) del cido N-{4-[[((6S)-2-amino- l ,4,5,6,7,8-
hexa h id ro-5-meti 1-4-oxo-6-pterid i nil)meti l]a mino ]-benzoil}-
L-g l utm ico [151533-22-1 ].
Fosfato Tribsico de Calcio-ver Fosfato DEFINICIN
Tribsico de Calcio en Monografas Generales El L-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio contiene no menos de
95,0% y no ms de 102,0% de 5-metiltetrahidrofolato de
calcio (C20H23CaN106), la suma de los diastereoismeros L
y D, calculada con respecto a la sustancia anhidra y
Glubionato de Calcio, Jarabe-ver exenta de disolventes, de la cual no ms de 1,0% corres-
Glubionato de Calcio, jarabe en Monografas ponde a D-5-metiltetrahidrofolato de calcio.
Generales IDENTIFICACIN
A. ABSORCIN EN EL INFRARROJO (197K)
[NOTA-Si los espectros obtenidos presentan diferencias,
disolver la sustancia a examinar y el ER DL-5-Metiltetra-
Gluceptato de Calcio-ver Gluceptato de hidrofolato de Calcio USP por separado en una canti-
dad mnima de agua y agregar gota a gota suficiente
Calcio en Monografas Generales acetona para producir un precipitado. Dejar en reposo
durante 15 minutos, centrifugar para recoger el precipi-
tado, lavar el precipitado dos veces con una cantidad
mnima de acetona y secar. Registrar los nuevos espec-
Gluconato de Calcio-ver Gluconato de tros usando los residuos.]
Calcio en Monografas Generales B. IDENTIFICACIN-PRUEBAS GENERALES, Calcio (191): Una
solucin de 5 mg/ml cumple con los requisitos.
C. HPLC: El tiempo de retencin del pico principal de la
Solucin muestra corresponde al de la Solucin estndar,
Gluconato de Calcio, Tabletas-ver segn se obtienen en la Valoracin. Cumple con los crite-
rios de aceptacin de la prueba de Pureza Enantiomrica.
Gluconato de Calcio, Tabletas en Monografas
Generales VALORACIN
PROCEDIMIENTO
Solucin amortiguadora: 7,8 g/L de fosfato dicido de
sodio dihidrato en agua
Lactato de Calcio-ver Lactato de Calcio en Solucin A: Ajustar Solucin amortiguadora con solucin
de hidrxido de sodio al 32% (p/v) a un pH de 6,5.
Monografas Generales Solucin B: Metano! y Solucin amortiguodora (35:65).
Ajustar con solucin de hidrxido de sodio al 32% (p/v)
a un pH de 8,0.
Fase mvil: Elucin por gradiente. Ver la Toblo 7.
Lactato de Calcio, Tabletas-ver Lactato
de Calcio, Tabletas en Monografas Generales Tabla 1
Tiempo Solucin A nnT Solucin B

Lactobionato de Calcio-- ver Lactobionato


1--------~(=~=n~)~ +--
T
--~~--H-n+------(~o)
11

[ __ . . ~---------"1---~~~-=+---~=l
r-:
de Calcio en Monografas Generales

~
1 . 1 j ::: -
USP )8 Suplementos Dietticos /Calcio 6347

[NOTA Despus de! anlisis, se debe lavar la columna y IMPUREZAS


almacenarla en una mezcla de metano! y agua CLORURO
(85:15).] Muestra: 300 mg
~olus:1n de aptitud dei sistema: fransferir 25 mg de Blanco: Mezciar 1 m L de cido niuico con 7 5 m L de
ER Acido Flico USP y 25 mg rlP ER Acirlo 4-aminoben- agua.
zoilglutmico USP a un matraz volumtrico de 100 mL. Sistema volumtrico
Agregar aproximadamente 15 mg de bicarbonato de (Ver Volumetra (541 ).)
sodio y de carbonato de sodio al matraz, agregar sufi- Modo: Valoracin directa
ciente agua, someter a ultrasonido hasta disolver y di- Solucin volumtrica: Nitrato de plata 0,005 M SV
luir con agua a volumen. Transferir 1,0 mL de esta solu- Deteccin del punto final: Potenciomtrica
cin a un segundo matraz volumtrico de 100 mL que Anlisis: Disolver la Muestra en 75 mL de agua (calentar
contenga 50 mg de ER DL-5-Metiltetrahidrofolato de hasta un mximo de 40'), agregar 1 mL de cido n-
Calcio USP, disolver y diluir con agua a volumen. trico y valorar con Solucin volumtrica. Realizar una de-
[NOTA-Las siguientes Soluciones estndar y muestra terminacin con un Blanco y hacer las correcciones
deben inyectarse inmediatamente despus de su pre- necesarias.
paracin y slo una vez.] Calcular el porcentaje de cloruro (CI) en la Muestra
Solucin estndar: 0,5 mg/mL de ER DL-5-Metiltetrahi- tomada:
drofc;il,ato de Calcio USP en agua
Soluc1on muestra: 0,5 mg/mL de L-5-Metiltetrahidrofo- Resultado = [(Vs - VB) x M x F/W] x 100
lato de Calcio en agua
Sistema cromato9rafico Vs = volumen de Solucin volumtrica consumida
(Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.) por la Muestra (mL)
Modo: HPLC Vs = volumen de Solucin volumtrica consumida
Detector: UV 280 nm por el Blanco (mL)
Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m M = molaridad real de la Solucin volumtrica
Temperatura de la columna: 32 (mmol/mL)
Velocidad de flujo: 1, 1 mL/min F = factor de equivalencia, 35,45 mg/mmol
Volumen de inyeccin: 1 O L W = peso de la Muestra (mg)
Aptitud del sistema Criterios de aceptacin: No ms de 0,5%
Muestras: Solucin de aptitud del sistema y Solucin IMPUREZAS ELEMENTALES-PROCEDIMIENTOS (233)
estndar Criterios de aceptacin
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos para los pi- Boro: No ms de 50 g/g
cos de los componentes de la Solucin de aptitud del Platino: No ms de 1O g/g
sistema se listan en la Tabla 2. Los ismeros L y o de Arsnico: No ms de 1,5 g/g
5-metiltetrahidrofolato coeluyen como un solo pico. El Cadmio: No ms de 0,5 g/g
cido 4a-hidroxi-5-metiltetrahidroflico, el cido 5-me- Plomo: No ms de 1,0 g/g
tiltetrahidropteroico y el cido dimetiltetrahidroflico Mercurio: No ms de 1,5 g/g
se incluyen como componentes menores en el ER DL- DISOLVENTES RESIDUALES (467)
5-Metiltetrahidrofolato de Calcio USP.] Criterios de aceptacin
Requisitos de aptitud Etanol: No mas de 0,5%
Resolucin: Solucin de aptitud del sistema 2-Propanol: No ms de 0,5%
No menos de 6 entre cido 4-aminobenzoilglut- [NOTA-Para los criterios de aceptacin para cualquier
mico y cido 4a-hidroxi-5-metiltetrahidroflico otro disolvente residual, ver Disolventes Residuales
No menos de 8 entre cido flico y cido (467).]
5-metiltetrahidroflico COMPUESTOS RELACIONADOS
No menos de 15 entre cido 5-metiltetrahidrof- Solucin A, Solucin B, Fase mvil, Solucin de apti-
lico y cido dimetiltetrahidroflico tud del sistema, Solucin estndar, Solucin mues-
Desviacin estndar relativa: Preparar tres Soluciones tra, Sistema cromatogrfico, Aptitud del sistema y
estndar distintas e inyectar cada una inmediata- Requisitos de aptitud: Proceder segn se indica en la
mente y slo una vez. No ms de 2,0%; factor de Valoracin.
respuesta del pico en tres inyecciones Anlisis
Anlisis Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra [NOTA-Las impurezas se listan en la Tabla 2.]
Calcular el porcentaje de 5-metiltetrahidrofolato de cal- Calcular el porcentaje de cada impureza, como cido
cio (CoH21CaN106), la suma de los diastereoismeros L libre, en la porcin de L-5-Metiltetrahidrofolato de Cal-
y D, en la porcin de 1-5-Metiltetrahidrofolato de Cal- cio tomada:
cio Lomada:
Resultado= (ru/r1) x (Cs/Cu) x F x (M,;/M,2) x 100
Resultarlo = (r1,/r1) x (Cs/C11) x 100
ru = respuesta del pico de la impureza
r,. respuesta del pico de la Solucin muestra
= correspondiente de la Solucin muestra
r, = respuesta del pico de la Solucion estndar rs = respuesta del pico principal de la Solucin
C, = concentracin de ER DL-5-Metiltetrahidrofolato estndar
de Calcio USP en la Solucin estndar Cs = concentracin de ER DL-5-Metiltetrahidrofolato
(mg/mL) de Calcio USP en la Solucin estndar
C - concentracin de L-5-Metiltetra- (mg/mL)
hidrofolato de Calcio en la Solucin muestra Cu = concentracin de L-5-Metiltetra-
(mg/mL) hidrofolato de Calcio en la Solucin muestra
Criterios de aceptacin: 95,0%-102,0%, con respecto (mg/mL)
a la sustancia anhidra y exenta de disolventes F = factor de respuesta relativa para el pico de la
impureza correspondiente (ver !a Tabla 2)
= peso molecular de cido L-
5-metiltetrahidroflico, 459,46
= peso molecular de L-5-metiltetra-
hidrofolato de calcio, 497,52
6348 Calcio /Suplementos Dieti'licos usr 38

Criterios de aceptacin Modo: HPLC


fNJA-No tomar en cuenta los picos de impurezas me- Detector: UV 280 nm
nores de 0,05%.J Columna: 4,0 mm x 1 S cm; rPllPno 179 1 de 5 um
Impurezas individuales: Ver la labia l. Temperatura de la columna: 40
Velocidad de flujo: 1,0 ml/min
Tabla 2 Volumen de inyeccin: 1O L
Aptitud del sistema
Criterios de Muestra: Solucin de aptitud del sistema
Tiempo de Factor de Aceptacin, [NOTA-Los tiempos de retencin relativos para L-5-me-
Retencin Respuesta No ms de tiltetrahidrofolato y D-5-metiltetrahidrofolato son apro-
Nombre Relativo Relativa (%) ximadamente 1 y 1,5, respectivamente.]
cido 4-aminoben- Requisitos de aptitud
-~lgllltmico' o 29 o 91 05 Resolucin: No menos de 1,5 entre L-5-metiltetrahi-
cido 4a-hidroxi-5- drofolato y D-5-metiltetrahidrofolato
metil-tetr ahidrof- Anlisis
lico" o 37 1 09 1 o Muestra: Solucin muestra
(6R)-Mefox' d o 49 1 05 - Calcular el porcentaje de D-5-metiltetrahidrofolato en la
1,0 (suma de
porcin de L-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio tomada:
(65)-MefOX'"' o 50 1 05 6R V 65)
Resultado = [(ro/(ro + rt) x 100]
cido tetrahidrof-
lico' o 65 J,QQ'< 05 ro ~ respuesta del pico de D-5-metiltetrahidrofolato
cido 7,8-dihidro- de la Solucin muestra
flico 1 o 83 o 95 05 r1 = respuesta del pico de L-5-metiltetrahidrofolato
cido flico" o 85 o 83 05 de la Solucin muestra
cido 5, 10-metile-
Criterios de aceptacin: No ms de 1,0% de D-
notetrahidrofli- 5-metiltetrahidrofolato
cot1 o 88 1 ' 05
PRUEBAS ESPECFICAS
cido 5-metiltetra- CALCIO
hidrooteroico' 1 10 o 67 05 Muestra: 250 mg
cido dimetiltetra- Blanco: 150 ml de agua, 15 ml de hidrxido de sodio
hidrofliw
lmourezas totales
1 25
-
1 '
-
015
2 5
1 N y 300 mg de azul de hidroxinaftol
Sistema volumtrico
'cido N-(4-aminobenzoil)-L-glutmico. (Ver Volumetra (541 ).)
b cido N-[4-({[(65)-2-amino-4a-hidroxi-5-metil-4-oxo-1,4,4a,5,6,7,8,8a-oc- Modo: Valoracin directa
tahidropteridin-6-il]metil}amino)benzoil]-L-glutmico. Solucin volumtrica: Edetato disdico 0,05 M SV
' 2-Ami no-8-metil-4, 9-dioxo-7 -metil-p-aminobenzoil-g lutamato-6, 7,8, 9-te- Deteccin del punto final: Visual
trah idro-4H-pi razino-(1 ,2-a)- s-triazi na. Anlisis: Disolver la Muestra en 150 ml de agua, agre-
0 Informar la impureza Mefox como la suma de 65- y 6R-Mefox.
gar 15 ml de hidrxido de sodio 1 N y 300 mg de azul
'cido N-[4-({[(5)-2-amino-4-oxo-1,4,5,6,7,8-hexahidropteridin-6-il]me- de hidroxinaftol, y valorar con Solucin volumtrica hasta
til}amino)benzoil]-L-glutmico. que la solucin tenga un color azul intenso. Realizar
1cido N-(4-{[(2-amino-4-oxo-1,4,7,8-tetrahidropteridin-6-il)metil]ami-
no}benzoil)-L-glutmico.
una determinacin con un Blanco y hacer las correccio-
" cido N-( 4-{[(2-amino-4-oxo- 1,4-dihidropteridin-6-il)metil]amino}ben-
nes necesarias.
zoil)-L-glutmico. Calcular el porcentaje de calcio (Ca) en la Muestra
h cido N-(4-(3-amino-l -oxo-5,6,6a,7-tetrahidroimidazo[1,5-f]pteridin- tomada:
8(1 H,4H,9H)-il)bencil)-L-glutmico.
'cido (5)-4-{[(2-amino-5-metil-4-oxo- 1,4,5,6, 7,8-hexahidropteridin-6- Resultado = [(Vs - Va) x M x F/W] x 100
il)metil]amino}benzoico.
1 cido N-L4-({[(5)-5-metil-2-(metilamino)-4-oxo- l ,4,5,6,7,8-hexahidropteri- Vs volumen de Solucin volumtrica consumida
=
din-6-il]metil}amino)benzoil]-L-glutmico. por la Muestra (ml)
k Factor estimado.
VB = volumen de Solucin volumtrica consumida
PUREZA ENANTIOMRICA por el Blanco (ml)
Solucin amortiguadora: 4,54 g/L de fosfato dicido M = molaridad real de la Solucin volumtrica
de sodio dihidrato en agua (mmol/ml)
Fase mvil: Acetonitrilo y Solucin amortiguadora F =factor de equivalencia, 40,08 mg/mmol
(3:97). Ajustar con hidrxido de sodio al 32% (p/v) a W = peso de la Muestra (mg)
un pH de 6,8. Criterios de aceptacin: 7,0%-8,5% con respecto a la
Solucin estndar: 0,5 mg/ml de ER DL-5-Metiltetrahi- sustancia a,nhidra y exenta de disolventes
drofolato de Calcio USP en agua DETERMINACION DE AGUA, Mtodo le (921)
Solucin muestra: 0,5 mg/ml de L-5-Metiltetrahidrofo- Muestra: Transferir 40 mg de L-5-Metiltetrahidrofolato
lato de Calcio en agua de Calcio a un vial para muestreo de fase gaseosa de
Solucin de aptitud del sistema: Transferir 1,0 ml de 20 ml y tapar hermticamente. Calentar el vial en un
Solucin estndar a un matraz volumtrico de 50 ml y horno adecuado a 250 para determinacin por Karl
diluir con Solucin muestra a volumen. Fischer.
Sistema cromato~rfico Anlisis: FI agua liberada y evaporada se transfiere a
(Ver Cromatografta (621 ), Aptitud del Sistema.) una celda de valoracin en una corriente de nitrgeno
seco a una velocidad de flujo de aproximadamente
40 ml/m1n segun se indica en Determinacin de Agua,
Mtodo le (921).
' Una protenJ de reco11oci111ie11to quirdi, alli111ina srica humana de (HSA,
por sus siglas en inqls), qu1micamente ligada a part1culas de slice, de aproxi-
madamente 5 pm rle rlimetro. Por e1emplo: Chromtech Chiral HSA, disponi-
ble en www.chromtech.com
USP 38 Suplementos Dietticos/ Calcio 6349

Criterios de aceptacin: fi,0% 17,0% lente a O, 1 mg/ml de L-5-metiltetrahidrofolato de cal-


cio, a partir del contenido combinado de las Cpsulas,
REQUISITOS ADICIONALES en Solucion A y filtrar .
ENVASADO y AL:\1AC[NAf.'11ENTC: /\!rnJccnar en un envase Sistema uomato9rfico
imperme<1hle en tin l11g<1r fre'>c o y seco. (Ver Cromatoqraf10 (621 ), Aptitud dPI Si\tPma.)
ESTAJ:IDARES DE REFERENCIA USP (11) Modo: HPLC
E~ Acido 4-aminobenzoilglutmico USP Detector: UV 280 nm
Acido N-( 4-aminobenzoil)-L-glutmico. Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m
C "H 14N)O, 266,25 Temperatura de la columna: 32
ER DL-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio USP Velocidad de flujo: 1, 1 ml/min
Sal clcica (1 :1) del cido N[4-[[(2-amino- l ,4,5,6,7,8- Volumen de inyeccin: 1O L
hexahidro-5-meti 1-4-oxo-6-pterid in i l)meti l]am i no ]ben- Aptitud del sistema
zoi 1)-L-g l utm ico. Muestras: Solucin de aptitud del sistema y Solucin
C29H2lCaN10o 497,52 estndar
ER Acido Flico USP [NOTA-Para la Solucin de aptitud del sistema, los tiem-
pos de retencin relativos para cido flico y los is-
meros L y o de 5-metiltetrahidrofolato, que coeluyen
como un solo pico, son 0,85 y 1,0, respectivamente.]
Requisitos de aptitud
L-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio, Resolucin: No menos de 8 entre cido flico y
Cpsulas cido 5-metiltetrahidroflico, Solucin de aptitud del
sistema
DEFINICIN Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%, Solu-
Las Cpsulas de L-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio contie- cin estndar
nen no menos de 90,0% y no ms de 110,0% de la can- Anlisis
tidad declarada de L-5-metiltetrahidrofolato de calcio Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
(C20HnCaN106). Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de
L-5-metiltetrahidrofolato de calcio (C20H23CaN106) en
IDENTIFICACIN la porcin de Cpsulas tomada:
A. HPLC: El tiempo de retencin del pico principal de la
Solucin muestra corresponde al de la Solucin estndar, Resultado = (ru/rs) x (Cs/Cu) x 100
segn se obtienen en Contenido, y al del ismero L de la
Solucin estndar en la prueba de Pureza Enantiomrica, ru = respuesta del pico de la Solucin muestra
rs = respuesta del pico de la Solucin estndar
CONTENIDO Cs = concentracin de ER D,L-
PROCEDIMIENTO 5-Metiltetrahidrofolato de Calcio USP en la
Solucin amortiguadora: 7,8 g/L de fosfato dicido de Solucin estndar (mg/ml)
sodio dihidrato en agua Cu = concentracin nominal de L-
Solucin A: Ajustar Solucin amortiguadora con solucin 5-metiltetrahidrofolato de calcio en la
de hidrxido de sodio al 32% (p/v) a un pH de 6,5. Solucin muestra (mg/ml)
Solucin B: Metanol y Solucin amortiguadora (35:65), Criterios de aceptacin: 90,0%-110,0%
Ajustar con solucin de hidrxido de sodio al 32% (p/v)
d Ull pH de 8,0.
IMPUREZAS
Fase mvil: Elucin por gradiente. Ver la Tabla 7. PUREZA ENANTIOMRICA
Solucin amortiguadora: 4,54 g/L de fosfato dicido
de sodio dihidrato en agua
Tabla 1 Fase mvil: Acetonitrilo y Solucin amortiguadora
Tiempo Solucin A Solucin B (3:97). Ajustar con hidrxido de sodio al 32% (p/v) a
(min) (%) (%) un pH de 6,8.
o 100 o Solucin estndar: 0,4 mg/ml de ER D,L-5-Metiltetrahi-
drofolato de Calcio USP en agua
14 45 55
.. Solucin muestra: Porcin fiftrada, equivalente a
17 o 100 0,4 mg/ml de L-5-metiltetrahidrofolato de calcio, a par-
24 -- ~
o 100 tir del contenido de no menos de 30 Cpsulas, en agua
24 01 100 o Solucin de aptitud del sistema: Transferir 0,2 ml de
33 100 o Solucin estndar a un matraz volumtrico de 1 O ml y
--~

diluir con Solucin muestra a volumen.


Solus:in de aptitud del sistema: Transferir 25 mg de Sistema cromato~rfico
ER Acido Flico USP a un matraz volumtrico de (Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.)
l 00 ml. Agregar aproximadamente 15 mg de bicarbo- Modo: HPLC
nato de sodio y de carbonato de sodio al matraz, agre- Detector: UV 280 nm
gar suficiente agua, someter a ultrasonido hasta disolver Columna: 4,0 mm x 15 cm; relleno L79 1 de 5 m
y diluir con agua a volumen. Transferir 1,0 ml de esta Temperatura de la columna: 40
solucin a un segundo matraz volumtrico de 100 ml Velocidad de flujo: 1,0 ml/min
que contenga 50 mg de ER D,L-5-Metiltetrahidrofolato Volumen de inyeccin: 1O L
de Calcio USP, disolver y diluir con agua a volumen, Aptitud del sistema
[NOTA--La Solucin estndar y la Solucin muestra si- Muestra: Solucin de aptitud del sistema
guientes deben inyectarse inmediatamente despus de [NOTA-Los tiempos de retencin relativos para L-5-me-
su preparacion y solo una vez.] Liltelrahidrofolato y D-5-metiltetrahidrofolato son apro-
Solucin estndar: O, 1 mg/ml de ER D,L-5-Metiltetrahi- ximadamente 1 y 1,5, respectivamente.]
drofolato de Calcio USP en Solucin A Una proteina de reconol imiento yui1 di, dil>ln1lind s1 ica hurlld1"1d (HSA, por
Solucin muestra: Retirar, tanto como sea posible, el sus siglas en ingls), qumicamente ligada a partculas de slice, de aproxima-
contenido de no menos de 30 Cpsulas y pesar con damente 5 m de dimetro. Por ejemplo: Chromtech Chiral HSA, disponible
exactitud. Preparar una solucin, nominalmente equiva- en www.chromtech.com.
6350 Calcio / )up!Pmf'ntos Ditticos USP 38

Requisitos de aptitud gar s11ficiPntP agua, someter a ultrasonido hasta disolver


Resolucin: No menos de 1,5 entre L-5-metiltetrahi- y uiluir COll agua a volumen. Transferir 1,0 mL de esta
drofolato y u-5-metiltetrahidrofolato solucin a un segundo matraz volumtrico de 100 mL
Anlisis que L011le11ya SO 111~ Je ::R lJ,L-.S-ivieliilelrahicirooiato
Muestra: Solucin muestra de Calcio USP, disolver y diluir con agua a volumen.
Calcular el porcentaje de D-5-metiltetrahidrofolato en la [NOTA-La Solucin l?stndar y la Solucin muestra si-
porcin de L-5-metiltetrahidrofolato de calcio tomada: guientes deben inyectarse inmediatamente despus de
su preparacin y slo una vez.]
Resultado = [rn/(rn + r1)] x 100 Solucin estndar: O, 1 mg/mL de ER D,L-5-Metiltetrahi-
drofolato de Calcio USP en Solucin A
r[) =respuesta del pico de o-5-metiltetrahidrofolato Solucin muestra: Disolver una porcin, a partir de no
de la Solucin muestra menos de 30 Tabletas reducidas a polvo fino, en Solu-
rL = respuesta del pico de L-5-metiltetrahidrofolato cin A, agitando minuciosamente. Diluir con Solucin A
de la Solucin muestra para obtener una solucin, nominalmente equivalente a
Criterios de aceptacin: No ms de 1,0% O, 1 mg/mL de L-5-metiltetrahidrofolato de calcio, y
filtrar.
PRUEBAS DE DESEMPEO Sistema cromato9rfico
DESINTEGRACIN V DISOLUCIN (2040>:Cumplen con los (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud di?! 5istema.)
requisit9s de Desintegracin. Modo: HPLC
VARIACION DE PESO (2091>: Cumplen con los requisitos.
Detector: UV 280 nm
REQUISITOS ADICIONALES Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L1 de 5 m
ENVASADO V ALMACENAMIENTO: Almacenar en un envase Temperatura de la columna: 32
impermeable y resistente a la luz, en un lugar fresco y Velocidad de flujo: 1, 1 mL/min
seco. Volumen de inyeccin: 1 O ~LL
ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11 > Aptitud del sistema
ER Q,L-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio USP Muestras: Solucin de aptitud del sistema y Solucin
ER Acido Flico USP estndar
[NOTA-Para la Solucin de aptitud del sistema, los tiem-
pos de retencin relativos para cido flico y los is-
meros L y o de 5-metiltetrahidrofolato, que coeluyen
como un solo pico, son 0,85 y 1,0, respectivamente.]
Requisitos de aptitud
L-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio, Resolucin: No menos de 8 entre cido flico y
Tabletas cido 5-metiltetrahidroflico, Solucin de aptitud del
sistema
DEFINICIN Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%, Solu-
Las Tabletas de L-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio contie- cin estndar
nen no menos de 90,0% y no ms de 11 0,0% de la can- Anlisis
tidad declarada de L-5-metiltetrahidrofolato de calcio Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
(C20HnCaN106). Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de
L-5-metiltetrahidrofolato de calcio (C20HnCaN106) en
IDENTIFICACIN la porcin de Tabletas tomada:
A. HPLC: El tiempo de retencin del pico principal de la
Solucin muestra corresponde al de la Solucin estndar, Resultado = (ru! r,) x ( C/ Cu) x 1 00
segn se obtienen en Contenido, y al del ismero L de la
Solucin estndar en la prueba de Pureza Enantiomrica. ru = respuestadel pico de la Solucin muestra
r5 respuesta del pico de la Solucin estndar
=
CONTENIDO Cs = concentracin de ER D,L-
PROCEDIMIENTO 5-Metiltetrahidrofolato de Calcio USP en la
Solucin amortiguadora: 7,8 g/L de fosfato dicido de Solucin estndar (mg/mL)
sodio dihidrato en agua Cu = concentracin nominal de L-
Solucin A: Ajustar Solucin amortiguadora con solucin 5-metiltetrahidrofolato de calcio en la
de hidrxido de sodio al 32% (p/v) a un pH de 6,5. Solucin muestra (mg/mL)
Solucin B: Metano! y Solucion amortiguadora (35:65). Criterios de aceptacin: 90,0%-110,0%
Ajustar con solucin de hidrxido de sodio al 32% (p/v)
a un pH de 8,0. IMPUREZAS
Fase mvil: Elucin por gradiente. Ver la Tabla 7. PUREZA ENANTIOMRICA
Solucin amortiguadora: 4,54 g/L de fosfato diacido
Tabla 1 de sodio dihidrato en agua
Fase mvil: Acetonitrilo y Solucin amortiguadora
- - - Ti~mp~ . r Solucin A 1. Solucin B-- (3:97). Ajustar con hidrxido de sodio al 32% (p/v) a
>----'~m=i=n~)---+------~<~Yo~L__ (%) un pH de 6,8.
o 100 ------ o Solucin estndar: 0,4 mg/mL de ER D,L-5-Metiltetrahi-
14 45 1 55 drofolato de Calcio USP en agua
Solucin muestra: Porcin filtrada, equivalente a
f------~~4_7_ _ _-+------~~----i----~~-~--- 0,4 mg/mL de L-5-metiltetrahidrofolato de calcio, a par-
tir de no menos de 30 Tabletas reducidas a polvo fino,
>-----2~4JD_________~1~0~0_ _ _ + - - l_ _ _ o~----< en agua
33 100 ! o Solucin de aptitud del sistema: Transferir 0,2 mL de
Solucin estndar a un matraz volumtrico de 1 O mL y
Solus:in de aptitud del sistema: Transferir 25 mg de diluir ron \nlwin muestra a volumen.
ER Acido Flico USP a un matraz volumtrico de Sistema cromato9rfico
100 mL. Agregar aproximadamente 1 5 mg de bicarbo- (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
nato de sodio y de carbonato de sodio al matraz, agre-
lJW ~R Suplementos Dietticos /Calcio 6351

Modo: HPLC contienen otras vitaminas o minerales para los que se de-
Detector: UV 280 nm clare un valor nutrimental. Pueden contener otras su~tar1-
Columna: 4,0 mm x 1 S cm; relleno L79' de 5 m cias a~r~gadas, decl~~adas o ingredientes adicionales en
lemperatura de la columna: 4Q~ cantidades 1nooeLau1e~.
Velocidad de flujo: 1,0 ml /min
Volumen de inyeccin: 1O L CONTENIDO
Aptitud del sistema CALCIO
Muestra: Solucin de aptitud del sistema [NOTA-Se puede usar una solucin estndar de calcio
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos para L-5-me- para absorcin atmica disponible comercialmente
tiltetrahidrofolato y D-5-metiltetrahidrofolato son apro- cuando se describe la preparacin de una Solucin ma-
ximadamente 1 y 1,5, respectivamente.] dre del estndar de calcio en la siguiente valoracin. Se
Requisitos de aptitud pueden modificar las concentraciones de las Soluciones
Resolucin: No menos de 1,5 entre L-5-metiltetrahi- estndar y de la Solucin madre de la muestra para ajus-
drofolato y D-5-metiltetrahidrofolato tarse al intervalo lineal o de trabajo del instrumento.]
Anlisis Solucin de cloruro de lantano: Disolver 26, 7 g de
Muestra: Solucin muestra cloruro de lantano en cido clorhdrico O, 125 N para
Calcular el porcentaje de D-5-metiltetrahidrofolato en la obtener 100 ml.
porcin de L-5-metiltetrahidrofolato de calcio tomada: Solucin madre del estndar de calcio: Pesar 1,001 g
de carbonato de calcio, previamente secado a 300 du-
Resultado = [rn/(ro + r)] x 100 rante 3 horas y enfriado en un desecador durante 2
horas, y disolver en 25 mL de cido clorhdrico 1 N. Ca-
ro = respuestadel pico de D-5-metiltetrahidrofolato lentar a ebullicin para expulsar el dixido de carbono
de la Solucin muestra y diluir con agua hasta 1000 mL para obtener una solu-
rL = respuesta del pico de L-5-metiltetrahidrofolato cin con una concentracin de 400 g/mL de calcio.
de la Solucin muestra Solucin madre del estndar: 100 g/mL de calcio, a
Criterios de aceptacin: No ms de 1,0% partir de un volumen de Solucin madre del estndar de
calcio en cido clorhdrico O, 1 25 N
PRUEBAS DE DESEMPEO Soluciones estndar: Pipetear por separado 1,0; 1,5;
DESINTEGRACIN y DISOLUCIN (2040): Cumplen con los 2,0; 2,5 y 3,0 mL de Solucin madre del estndar y
requisit9s de Desintegracin. transferir a sendos matraces volumtricos de 100 mL .
VARIACION DE PESO (2091): Cumplen con los requisitos. Agregar a cada matraz 1,0 mL de Solucin de cloruro de
lantano y diluir con agua a volumen para obtener Solu-
REQUISITOS ADICIONALES ciones estndar con concentraciones de 1,0; 1,5; 2,0;
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Almacenar en un envase
2,5 y 3,0 g/mL de calcio.
impermeable y resistente a la luz, en un lugar fresco y Solucin madre de la muestra: Pesar y reducir a polvo
seco. fino no menos de 20 Tabletas. Transferir el equivalente
ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11) a 500 mg de calcio a 25 mL de cido clorhdrico con-
ER Q,L-5-Metiltetrahidrofolato de Calcio USP centrado y calentar durante 30 minutos en un bao de
ER Acido Flico USP
vapor. Enfriar, diluir con agua hasta 1000 mL, y filtrar.
Solucin muestra: Diluir cuantitativamente un volumen
de la Solucin madre de la muestra con cido clorhdrico
O, 125 N para obtener una concentracin de 1 00 g/mL
de calcio. Transferir 2,0 mL de esta solucin a un matraz
Pantotenato de Calcio-ver Pantotenato volumtrico de 100 mL, agregar 1,0 mL de Solucin de
de Calcio en Monografas Generales cloruro de lantano, y diluir con agua a volumen.
Condiciones espectromtricas
(Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).)
Modo: Espectrofotmetro de absorcin atmica
Pantotenato de Calcio Racmico-ver Lmpara:, Calcio, de ctodo hueco
Llama: Oxido nitroso-acetileno
Pantotenato de Calcio Racmico en Longitud de onda analtica: Lnea de emisin de cal-
Monografas Generales cio, 422,7 nm
Blanco: 1 mL de Solucin de cloruro de lantano por
100 mL de cido clorhdrico O, 125 N
Anlisis
Pantotenato de Calcio, Tabletas-ver Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra
Determinar las absorbancias de las soluciones contra el
Pantotenato de Calcio, Tabletas en Blanco, Graficar las absorbancias de las Soluciones es-
Monografas Generales tndar en funcin de sus concentraciones, en g/mL,
de calcio y trazar la recta que mejor se ajuste a los
cinco puntos graficados. A partir de la grfica as ob-
tenida, determinar la concentracin, C, en g/mL de
Calcio con Vitamina D, Tabletas calcio en la Solucin muestra.
Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de cal-
DEFINICIN cio (Ca) en la porcin de Tabletas tomada:
Las Tabletas de Calcio con Vitamina D contienen no menos
de 90,0% y no ms de 125,0% de la cantidad declarada Resultado = (C/Cu) x 100
de calcio (Ca), derivado de sustancias generalmente reco-
C = concentracin medida de calcio en la Solucin
nocidas como seguras, y no menos de 90,0% y no ms
de 165,0% de la cantidad declarada de Vitamina D, como muestra (9/ml)
colecalciferol (C21H44) o ergocalc1terol (L2sH44). No
C, - concentracion nnminI rlP rlrio Pn lil Solwin
muestra (g/mL)
' Una protena de reconocimiento quiral, albmina srica humana (HSA, por Criterios de aceptacin: 90,0%-125,0% de la cantidad
sus siqlas en ingls), qumicamente ligada a partculas de slice, de aproxima- declarada de calcio (Ca)
damente 5 pm de dimetro. Por ejemplo: Chromtech Chiral HSA, disponible
en www chromtech.com.
6352 Calcio / Suplementos Dietticos USP 38

COLECALCIFEROL O ERGOCALCIFEROL (VITAMINA D) PRUEBAS DE DESEMPEO


[NOTA-Usdr llldlerial de vidrio con proteccin act1nica DESINTEGRACIN Y DISOLUCIN DE SUPLEMENTOS DIETTICOS
durante lodo esle procedimiento.] (2040): Cumplen con los requisitos de Disolucin con
Fase mvil. 11-i ie.x.d11u y dicuhoi isopropiico (99: l) respecto a, calcio
Solucin estndar: 2 g/mL de ER Ergocalciferol USP o Medio: AL ido LlorhdriLO O, 1 N; 900 ml
ER Colecalciferol USP en n-hexano Aparato 2: 75 rpm
Solucin de aptitud del sistema: Calentar un volumen Tiempo: 30 min
de Solucin estndar a 60c' durante 1 hora para isomeri- Anlisis: Determinar la cantidad disuelta de calcio (Ca)
zar parcialmente la vitamina D (ergocalciferol o colecal- usando el procedimiento de Calcio, haciendo los ajustes
ciferol) a su precursor correspondiente. volumtricos necesarios.
Solucin muestra: Pesar y moler no menos de 20 Ta- Tolerancias: No menos de 75% de la cantidad decla-
bletas. Transferir el equivalente a 20 g de colecalciferol rada de Ca.
o ergocalciferol a un recipiente con tapa de rosca con VARIACIN DE PESO DE SUPLEMENTOS DIETTICOS (2091):
recubrimiento interno de tefln. Agregar 8 mL de dime- Cumplen con los requisitos.
til sulfxido y 12 mL de n-hexano, y agitar durante 45
minutos en un agitador de movimiento tipo mueca CONTAMINANTES
(wrist-action) con tubos en un bao de agua mante- PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
nido a 60. Centrifugar durante 1 O minutos, retirar la tal de microorganismos aerobios no excede de 3000 ufc/
capa de hexano con una pipeta, y transferir a un ma- g, y el recuento total combinado de hongos filamentosos
traz de evaporacin. Agregar 12 mL de n-hexano a la y levaduras no excede de ;wo ufc/g.
capa de dimetil sulfxido, mezclar en un mezclador de PROCEDIMIENTOS MICROBIOLOGICOS PARA COMPROBAR LA AU-
vrtice durante 5 minutos, y retirar nuevamente la capa SENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022): Cum-
de hexano con una pipeta y a9regar al matraz de eva- plen con los requisitos de las pruebas para determinar la
poracin. Repetir esta extraccion con tres porciones adi- ausencia de Salmonella spp., Escherichia coli y Staphylococ-
cionales de 12 mL de n-hexano, agregando los extrac- cus aureus.
tos de hexano al matraz de evaporacin. Evaporar los
extractos de hexano combinados al vaco a temperatura REQUISITOS ADICIONALES
ambiente hasta sequedad. Disolver y diluir el residuo en ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im-
un volumen de n-hexano para obtener una concentra- permeables y resistentes a la luz.
ETIQUETADO: La etiqueta indica que el producto es Table-
cin de 2 g/mL.
Sistema cromato9rfico tas de Calcio con Vitamina O. La etiqueta indica adems
(Ver Cromatografla (621 ), Aptitud del Sistema.) las cantidades de calcio y Vitamina D en trminos de
Modo: HPLC unidades mtricas/Tableta, y la forma salina de calcio y la
Detector: UV 265 nm forria qumica de Vitamina D presente en la Tableta.
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L8 de 3 m
Velocidad de flujo: 1 mL/min ER Colecalciferol USP
Volumen de inyeccin: 100 L ER Ergocalciferol USP
Aptitud del sistema
Muestras: Solucin estndar y Solucin de aptitud del
sistema
Requisitos de aptitud
Resolucin: No menos de 1 O entre la forma de vita- Calcio y Vitamina D con Minerales,
mina D presente y su precursor correspondiente, So- Tabletas
lucin de aptitud del sistema
Desviacin estndar relativa: No ms de 3,0%, Solu- DEFINICIN
cin estndar Las Tabletas de Calcio y Vitamina D con Minerales contienen
Anlisis Vitamina D como Ergocalciferol (Vitamina D2) o Colecalci-
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra ferol (Vitamina D3), Calcio, y uno o ms minerales deriva-
Medir las reas de los picos de vitamina D. Calcular el dos de sustancias generalmente reconocidas como segu-
porcentaje de la cantidad declarada de colecalciferol ras, que presentan uno o ms de los siguientes elementos
(C21H44) o ergocalciferol (C2sH44) en la porcin de en forma ionizable: cobre, magnesio, manganeso y cinc.
Tabletas tomada: Las Tabletas contienen no menos de 90,0% y no ms de
165,0% de la cantidad declarada de vitamina D, como
Resultado = (ru/r 5) x (C/Cu) x F x 100 colecalciferol (CnH44) o ergocalciferol (C2sH44), y no
menos de 90,0% y no ms de 125,0% de las cantidades
ru rea del pico de colecalciferol o ergocalciferol
=
declaradas de calcio (Ca), cobre (Cu), magnesio (Mg),
de la Solucin muestra manganeso (Mn) y cinc (Zn). Pueden contener otras sus-
rs = rea del pico de colecalciferol o ergocalciferol tancias agregadas declaradas generalmente reconocidas
de la Solucin estndar como seguras, en cantidades inobjetables.
Cs = concentracin de ER Colecalciferol USP o ER
Ergocalciferol USP en la Solucin estndar CONTENIDO
(g/mL) COLECALCIFEROL o ERGOCALCIFEROL (VITAMINA D)
Cu = concentracin nominal de colecalciferol o [NOTA-Usar material de vidrio con proteccin actnica
ergocalciferol en la Solucin muestra (g/mL) durante todo este procedimiento.]
F = factor de correccin que se debe tomar en Fase mvil: n-Hexano y alcohol isoproplico (99: 1)
cuenta para la cantidad promedio de Solucin estndar: 2 g/mL de ER Ergocalciferol USP o
previtamina D presente en la Solucin ER Colecalciferol USP en n-hexano
muestra, 1,09 Solucin de aptitud del sistema: Calentar un volumen
Criterios de aceptacin: 90,0%-165,0% de la cantidad de Solucin estndar a 60 durante 1 hora para isomeri-
declarada de vitamina D como colecalciferol (C21H44) zar parcialmente la vitamina D (ergocalciferol o colecal-
o ergocalciferol (C2sH44) ciferol) a su precursor correspondiente.
Solucin muestra: Pesar no menos de 20 Tabletas y
moler las Tabletas a polvo fino. Transferir el equivalente
a 20 g de colecalciferol o ergocalciferol a un recipiente
con tapa de rosca con recubrimiento interno de tefln.
USP 38 '\111JIPrr1Pnto\ Dif'tftiros /Calcio 6353

Agregar 8 ml de dimetil sulfxido y 12 ml de n-he- Solucin madre del estndar: 1 00 g/ml de calcio, a
xano, y agitar durante 45 minutos en un agitador de partir de Soluc1on estandar de calc1o diluida con cido
movimiento tipo mueca (wrist-action) con tubos en un clorhdrico O, 125 N
bao de agua mantenido a 60''. Centrifugar durante 1O Soluciones estndar: l'1petear y transferir i ,O; 1,5; 2,0;
minutos, retirar la capa de hexano con una pipela, y 2,5 y 3,0 ml de Solucin madw drl rstndar a sendos
transferir a un matraz de evaporacin. Agregar 12 ml matraces volumtricos de 1 00 ml. Agregar a cada ma-
de n-hexano a la capa de dimetil sulfxido, mezclar en traz 1,0 ml de Solucin de cloruro de lantano y diluir
un mezclador de vrtice durante 5 minutos, y retirar con agua a volumen para obtener Soluciones estndar
nuevamente la capa de hexano con una pipeta y a9re- con concentraciones de 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 y 3,0 g/ml
gar al matraz de evaporacin. Repetir esta extraccion de calcio.
con tres porciones adicionales de 12 ml de n-hexano, Solucin madre de la muestra: Pesar y reducir a polvo
agregando los extractos de hexano al matraz de evapo- fino no menos de 20 Tabletas. Mezclar una porcin del
racin. Evaporar los extractos de hexano combinados al polvo equivalente a una cantidad nominal de 500 mg
vaco a temperatura ambiente hasta sequedad. Disolver de calcio con 25 ml de cido clorhdrico concentrado y
y diluir el residuo en un volumen de n-hexano para calentar durante 30 minutos en un bao de vapor. En-
obtener una concentracin de 2 g/ml. friar, diluir con agua hasta 1000 ml, y filtrar.
Sistema cromatowfico Solucin muestra: Diluir cuantitativamente un volumen
(Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.) de la Solucin madre de la muestra con cido clorhdrico
Modo: HPLC 0, 125 N para obtener una concentracin nominal de
Detector: UV 265 nm 100 g/ml de calcio. Transferir 2,0 ml de esta solucin
Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L8 de 5 m a un matraz volumtrico de 100 ml, agregar 1,0 ml de
Velocidad de flujo: 1 ml/min Solucin de cloruro de lantano, y diluir con agua a
Volumen de inyeccin: 100 L volumen.
Aptitud del sistema Condiciones espectromtricas
Muestras: Solucin estndar y Solucin de aptitud del (Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).)
sistema Modo: Espectrofotometra de absorcin atmica
Requisitos de aptitud Lmpara:, Calcio; de ctodo hueco
Resolucin: No menos de 1 O entre la forma de vita- Llama: Oxido nitroso-acetileno
mina D presente y su precursor correspondiente, So- Longitud de onda analtica: Lnea de emisin de cal-
lucin de aptitud del sistema cio, 422,7 nm
Desviacin estndar relativa: No ms de 3,0%, Solu- Blanco: Acido clorhdrico O, 125 N que contenga 1 ml
cin estndar de Solucin de cloruro de lantano/100 ml
Anlisis Anlisis
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra
Medir las respuestas de los picos de vitamina D. Calcu- Determinar las absorbancias de las soluciones contra el
lar el porcentaje de la cantidad declarada de colecal- Blanco. Graficar las absorbancias de las Soluciones es-
ciferol (C21H44) o ergocalciferol (C2sH44) en la por- tndar en funcin de sus concentraciones, en g/ml,
cin de Tabletas tomada: de calcio y trazar la recta que mejor se ajuste a los
cinco puntos graficados. A partir de la grfica, deter-
Resultado = (ru/rs) x (Cs/Cu) x F x 1 00 minar la concentracin, en g/ml, de calcio en la
Solucin muestra.
ru = altura del pico de colecalciferol o Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de cal-
ergocalciferol de la Solucin muestra cio (Ca) en la porcin de Tabletas tomada:
rs = altura del pico de colecalciferol o
ergocalciferol de la Solucin estndar Resultado = (C/Cu) x 100
Cs = concentracin de ER Ergocalciferol USP o ER
Colecalciferol USP en fa Solucin estndar C = concentracin medida de calcio en la Solucin
(g/ml) muestra (9/ml)
Cu = concentracin nominal de ergocalciferol o Cu = concentracion nominal de calcio en la Solucin
colecalciferol en la Solucin muestra (g/ml) muestra (g/ml)
F = factor de correccin para considerar la Criterios de aceptacin: 90,0%-125,0% de la cantidad
cantidad promedio de previtamina D declarada de Calcio (Ca)
presente en la Solucin muestra, 1,09 COBRE, Mtodo 7
Criterios de aceptacin: 90,0%-165,0% de la cantidad Solucin estndar de cobre: Disolver 1,00 g de lmina
declarada de colecalciferol (C21H44) o ergocalciferol de cobre en un volumen mnimo de una solucin de
(C23H44) cido ntrico al 50% (v/v) y diluir con una solucin de
CALCIO, Mtodo 7 cido ntrico al 1 % (v/v) hasta 1000 ml. Esta solucin
[NOTA-Se puede usar una solucin estndar de calcio contiene 1000 g/ml de cobre.
para absorcin atmica disponible comercialmente Solucin madre del estndar: 100 g/ml de cobre, a
cuando se describe la preparacin de una Solucin ma- partir de Solucin estndar de cobre diluida con cido
dre del estndar de calcio en la siguiente seccin. Se clorhdrico O, 1 25 N
pueden modificar las concentraciones de las Soluciones Soluciones estndar: Transferir 1,0; 2,0; 4,0; 6,0 y
estndar y de la Solucin madre de la muestra para ajus- 8,0 ml de la Solucin madre del estndar a sendos ma-
tarse al intervalo lineal o de trabajo del instrumento.] traces volumtricos de 200 ml. Diluir con agua a volu-
Solucin de cloruro de lantano: 267 mg/ml de clo- men para obtener concentraciones de 0,5; 1,0; 2,0; 3,0
ruro de lantano heptahidrato en cido clorhdrico O, 125 y 4,0 ~tg/ml de cobre.
N Solucin muestra: Pesar y reducir a polvo fino no me-
Solucin madre del estndar de calcio: 400 g/ml de nos de 20 Tabletas. Transferir el equivalente a 5 mg de
calcio. Disolver 1,001 g de carbonato de calcio, secado cobre, a partir de Tabletas reducidas a polvo, a un crisol
previamente a 300 durante 3 horas y enfriado en un de porcelana. Calentar durante 6-12 horas en una mu-
desecador durante 2 horas, y disolver en 25 ml de fla man len ida a 550 y enfriar. Agregar 1 5 ml de cido
cido clorhdrico 1 N. Calentar a ebullicin para expul- clorhdrico y calentar a ebullicin suave sobre una placa
sar el dixido de carbono y diluir con agua hasta de calentamiento o en un bao de vapor durante 30
1000 ml. minutos, enjuagando intermitentemente la superficie in-
terior del crisol con cido clorhdrico 6 N. Enfriar y
6354 Calcio / 'lupiern'nlos Dietticos

transferir cuantitativamente el contenido del crisol a un Modo: Espectrofotometra de absorcin atmica


matraz volumtrico de 100 mL, enjuagando el crisol Lmpara: Magnesio; de ctodo hueco
con porciones de cido clorhdrico 6 N. Diluir el conte- Llama: Aire-acetileno
nido de matraz con agua a volumen y filtrar, dese- Longitud de onda analtica: Lnea de emisin de
chando los primeros 5 rnL del filtrado. Diluir el filtrado magnesiq, 285,2 nm
cuantitativamente con cido clorhdrico O, 125 N para Blanco: Acido clorhdrico O, 125 N que contenga 1 mL
obtener una concentracin de 2 g/mL de cobre. de Solucin de cloruro de lantano/100 mL
Condiciones espectromtricas Anlisis
(Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).) Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra
Modo: Espectrofotometra de absorcin atmica Determinar las absorbancias de las soluciones contra el
Lmpara: Cobre; de ctodo hueco Blanco. Graficar las absorbancias de las Soluciones es-
Llama: Aire-acetileno tndar en funcin de sus concentraciones, en g/mL,
Longitud de onda analtica: Lnea de emisin de co- de magnesio y trazar la recta que mejor se ajuste a
bre, 324,,7 nm los cinco puntos graficados. A partir de la grfica, de-
Blanco: Acido clorhdrico O, 125 N terminar la concentracin, C, en g/mL, de magnesio
Anlisis en la Solucin muestra.
Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de
Determinar las absorbancias de las soluciones contra el magnesio (Mg) en la porcin de Tabletas tomada:
Blanco. Graficar las absorbancias de las Soluciones es-
tndar en funcin de sus concentraciones, en g/mL, Resultado = (C/Cu) x 1 00
de cobre y trazar la recta que mejor se ajuste a los
cinco puntos graficados. A partir de la grfica, deter- C 7 concentracin medida de magnesio en la
minar la concentracin, C, en g/mL, de cobre en la Solucin muestra (g/mL)
Solucin muestra. Cu = concentracin nominal de magnesio en la
Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de Co- Solucin muestra (g/mL)
bre (Cu) en la porcin de Tabletas tomada: Criterios de aceptacin: 90,0%-125,0% de la cantidad
declarada de magnesio (Mg)
Resultado = (C/Cu) x 100 MANGANESO, Mtodo 1
Solucin madre del estndar de manganeso: Transfe-
C = concentracin medida de cobre en la Solucin rir 1,000 g de manganeso, a un matraz volumtrico de
muestra ($)/mL) 1000 ml. Disolver en 20 mL de cido ntrico, diluir con
Cu = concentracion nominal de cobre en la Solucin cido clorhdrico 6 N a volumen, y mezclar para obte-
muestra (g/mL) ner una solucin con una concentracin de 1000 g/
Criterios de aceptacin: 90,0%-125,0% de la cantidad mL de manganeso.
declarada de cobre (Cu) Solucin madre del estndar: 50 g/mL de manga-
MAGNESIO, Mtodo 1 neso, a partir de Solucin madre del estndar de manga-
Solucin de cloruro de lantano: 267 mg/mL de clo- neso diluida con cido clorhdrico O, 125 N
ruro de lantano heptahidrato en cido clorhdrico O, 125 Soluciones estndar: Transferir 1,0; 1,5; 2,0; 3,0 y
N 4,0 mL de la Solucin madre del estndar a sendos ma-
Solucin madre del estndar de magnesio: Transferir traces volumtricos de 100 mL. Diluir el contenido de
1,00 g de magnesio a un matraz volumtrico de cada matraz con cido clorhdrico O, 125 N a volumen
1000 mL, disolver en 50 mL de cido clorhdrico 6 N, para obtener soluciones con concentraciones de 0,5;
diluir con agua a volumen, y mezclar para obtener una 0,75; 1,0; 1,5 y 2,0 g/mL de manganeso.
solucin con una concentracin conocida de 1 000 g/ Solucin muestra: Reducir a polvo fino no menos de
mL. 20 Tabletas. Transferir el equivalente a 9 mg de manga-
Solucin madre del estndar: 20 g/mL de magnesio, neso, a partir de Tabletas reducidas a polvo, a un crisol
a partir de Solucin madre del estndar de magnesio di- de porcelana. Calentar durante 6-12 horas en una mu-
luida con cido clorhdrico O, 125 N fla mantenida a 550 y enfriar. Agregar 15 mL de cido
Soluciones estndar: Transferir 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 y clorhdrico y calentar a ebullicin suave sobre una placa
3,0 mL de la Solucin madre del estndar a sendos ma- de calentamiento o en un bao de vapor durante 30
traces volumtricos de 100 ml. Agregar a cada matraz minutos, enjuagando intermitentemente la superficie in-
1,0 mL de Solucin de cloruro de lantano y diluir con terior del crisol con cido clorhdrico 6 N. Enfriar y
cido clorhdrico O, 125 N a volumen para obtener con- transferir cuantitativamente el contenido del crisol a un
centraciones de 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 y 0,6 g/mL de matraz volumtrico de 1 00 mL, enjuagando el crisol
magnesio. con porciones de cido clorhdrico 6 N. Diluir el conte-
Solucin muestra: Reducir a polvo fino no menos de nido del matraz con agua a volumen y filtrar, dese-
20 Tabletas. Transferir el equivalente a 200 mg de mag- chando los primeros 5 mL del filtrado. Diluir el filtrado
nesio a un crisol de porcelana. Calentar durante 6-12 cuantitativamente con acido clorhdrico O, 125 N para
horas en una mufla mantenida a 550 y enfriar. Agregar obtener una concentracin de 1 g/mL de manganeso.
15 mL de cido clorhdrico y calentar a ebullicin suave Condiciones espectromtricas
sobre una placa de calentamiento o en un bao de (Ver Espect rofolometria y Dispersin de LuL (851).)
vapor durante 30 minutos, enjuagando intermitente- Modo: Espectrototometra de absorcin atmica
mente la superficie interior del crisol con cido clorh- Lmpara: Manganeso; de ctodo hueco
drico 6 N. Enfriar y transferir cuantitativamente el conte- Llama: Aire-acetileno
nido del crisol a un matraz volumtrico de 100 mL, Longitud de onda analtica: Lnea de emisin de
enjuagando el crisol con porciones de cido clorhdrico mangane,so, 279,5 nrn
6 N. Diluir el contenido del matraz con agua a volumen Blanco: Acido clorhdrico O, 125 N
y filtrar, desechando los primeros 5 mL del filtrado. Di- Anlisis
luir el filtrado cuantitativamente con cido clorhdrico Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra
O, 125 N para obtener una concentracin de 0,4 ~tg/mL Determinar las absorbancias de las soluciones contra el
de magnesio, agregando 1 mL de Solucin de cloruro de Blanco. Grat1car las absorbanc1as de las Soluciones es-
lantano/100 mL del volumen final. tndar en funcin de sus concentraciones, en g/mL,
Condiciones espectromtricas de manganeso y trazd la recta que mejor se ajuste a
(Ver Espectrofotometra y Dispersin de LuL (851 ).) los cinco puntos graficados. A partir de la grfica as1
USP 38 )uplcmcntos U1ctet1cos /Calcio 6355

C, ell ITH:J/illl,
uule11iud, uele1111illdl id LUllLt:lllldLill, CALCIO, COBRE, MAGNESIO, MANGANESO y CINC, Mtodo 2
de manganeso en la Solucin muestra. Solucin madre de agua regia: Preparar una mezcla
Calcular el riorcentaie de la cantidad declarada de de cido clorhdriro y cido ntrico (3:1) aqreqando el
manganeso (Mn) en la porcin de Tabletas tomada: cido ntrico al cido clorhdrico. [NOTA-Ventilar peri-
dicamente la solucin en una campana de extraccin
Resultado = (C/Cu) x 1 00 apropiada.]
Diluyente: Preparar una mezcla de Solucin madre de
C concentracin medida de manganeso en la
= agua regia y agua (1 en 1 O) agregando un volumen de
Solucin muestra (g/mL) Solucin madre de agua regia a dos volmenes de agua.
Cu = concentracin nominal de manganeso en la Diluir con ms agua a volumen y mezclar bien.
Solucin muestra (g/mL) Solucin de aptitud del sistema: Preparar una mezcla
Criterios de aceptacin: 90,0%-125,0% de la cantidad de 1 000 mg/L de itrio en solucin de cido ntrico al
declarada de manganeso 5% (v/v) y 1000 mg/L de escandio en solucin de cido
CINC, Mtodo 7 ntrico al 5% (v/v) con Diluyente (1 :1 :198), y mezclar .
Solucin madre del estndar de cinc: 1000 g/mL de Solucin madre del estndar (Ca, Cu, Mg, Mn y Zn):
cinc, a partir de xido de cinc disuelto en cido clorh- [NOTA-Slo es necesario incluir los minerales de inters
drico 5 M (3,89 mg/mL) y diluida con agua hasta el en la solucin.] Usando soluciones estndar de ele-
volumen final. [NOTA--Disolver en cido clorhdrico 5 M mentos (individuales o combinados) disponibles comer-
entibiando, si fuera necesario, enfriar, y luego diluir a cialmente en solucin de cido ntrico al 5% (v/v), pi-
volumen final.] petear la cantidad apropiada de solucin_ e~tndar_d~
Solucin madre del estndar: 50 g/mL de cinc, a elementos, transferir a un matraz volumetnco, y diluir
partir de Solucin madre del estndar de cinc diluida con con solucin de cido ntrico al 5% (v/v) para obtener
cido clorhdrico O, 125 N una solucin con concentraciones finales de aproxima-
Soluciones estndar: Transferir 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 y damente 1000 mg/L de calcio, 100 mg/L de cobre,
5,0 mL de Solucin madre del estndar a sendos matra- 500 mg/L de magnesio, 1 00 mg/L de manganeso y
ces volumtricos de 100 ml. Diluir el contenido de cada 250 mg/L de Sine. .,
matraz con cido clorhdrico O, 125 N a volumen para Soluciones estandar: Preparar una mezcla de Soluoon
obtener concentraciones de 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 y 2,5 g/ madre del estndar en Diluyente para preparar una curva
mL de cinc. de calibracin de seis puntos que abarque el intervalo
Solucin muestra: Pesar y reducir a polvo fino no me- de concentracin de cada mineral de inters.
nos de 20 Tabletas. Transferir el equivalente a 40 mg de Solucin muestra: Pesar y reducir a polvo fino no me-
cinc, a partir de Tabletas reducidas a polvo, a un crisol nos de 20 Tabletas. Transferir una porcin que sea igual
de porcelana. Calentar durante 6-12 horas en una mu- al peso promedio por Tableta a un matraz volumtrico
fla mantenida a 550 y enfriar. Agregar 15 mL de cido de 250 ml. Agregar lentamente 25 ml de Solucin ma-
clorhdrico y calentar a ebullicin suave sobre una placa dre de agua regia en incrementos de 5 ml seguidos de
de calentamiento o en un bao de vapor durante 30 mezclado. [NOTA-Si la muestra contiene carbonato, se
minutos, enjuagando intermitentemente la superficie in- producir burbujeo. Esperar hasta que cese el burbujeo
terior del crisol con cido clorhdrico 6 N. Enfriar y para proceder.] Calentar la solucin a ebullicin sobre
transferir cuantitativamente el contenido del crisol a un una placa de calentamiento. Continuar calentando sua-
matraz volumtrico de 1 00 mL, enjuagando el crisol vemente hasta que cese la produccin de humos (apro-
con porciones de cido clorhdrico 6 N. Diluir el conte- ximadamente 1 hora). Retirar del calor, enfriar, y diluir
nido del matraz con agua a volumen y filtrar, dese- con agua a volumen. Filtrar aproximadamente 30 mL
chando los primeros 5 mL del filtrado. Diluir el filtrado en un tubo de centrfuga usando un filtro de nailon
cuantitativamente con cido clorhdrico O, 125 N para para jeringa con un tamao de poro de 5 m. Si fuera
obtener una concentracin de 2 g/mL de cinc. necesario, realizar diluciones adicionales usando
Condiciones espectromtricas Diluyente.
(Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).) Condiciones espectromtricas
Modo: Espectrofotometra de absorcin atmica (Ver Espectroqumica de Plasma (730).)
Lmpara: Cinc; de ctodo hueco Modo: Espectrometra de plasma inductivamente aco-
Llama: Aire--acetileno plado, usando un espectrmetro ajustado para medir
Longitud de onda analtica: Lnea de emisin de cinc, la emisin de cada mineral de inters aproximada-
21 3,8 nrry mente a la longitud de onda correspondiente.
Blanco: Acido clorhdrico O, 125 N [NOTA-Las condiciones operativas se pueden desarrollar
Anlisis y optimizar basndose en la recomendacin del fabri-
Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra cante. Se debe demostrar mediante experimentos que
Determinar las absorbancias de las soluciones contra el las longitudes de onda seleccionadas proporcionan la
Blanco. Graficar las absorbancias de las Soluciones es- especificidad, sensibilidad, linealidad, exactitud y preci-
tndar en funcin de sus concentraciones, en g/ml, sion suficientes.]
de cinc y trazar la recta que mejor se ajuste a los Aptitud del sistema ., . .
cinco puntos graficados. A partir de la grfica, deter- [NOTA-Analizar la Soluc1on de aptitud del sistema y ob-
minar la concentracin, C, en ~1g/ml, de c111c en la tener la respuesta segn se indica en el Anlisis.]
Solucin muestra. Requisitos de aptitud
Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de cinc Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0%
(Zn) en la porcin de Tabletas tomada: Anlisis
Muestras: Soluciones estndar y Solucin muestra
Resultado = (C/Cu) " 1 00 Determinar la emisin de cada mineral de inters en
las Soluciones estndar y la Solucin muestra con un
C concentracin medida de cinc en la Solucin
=
sistema de plasma inductivamente acoplado usando
muestra (8/mL) Diluyente como blanco. Graficar la emisin de las So-
Cu = concentracion nominal de cinc en la Solucin luciones estndar en funcin de las concentraciones,
muestra (g/mL) . en mg/L, de los minerales de inters y trazar la recta
Criterios de aceptacin: 90,0%-125,0% de la cantidad que mejor se ajuste a los puntos graficados. A partir
declarada de cinc (Zn) de la grfica, determinar la concentracin, C, en
mg/L, de cada mineral de inters en la Solucin mues-
6 356 Calcio / Suplementos Dietticos USP 38

tra. CalculJr el porcentilje de la cantidad declarada de eslar i1idralados. FI Glicerofosfato de Calcio contiene no
cada mineral: menos de 18,6rl{i y no ms dr 19,4'.Yo de calcio (Ca), cal-
CI dado con respecto a la sustancia seca.
Resuitado ~ L x lV/W) x ~ x (WTIL) x 100
IDENTIFICACIN
C = concentracin medida del elemento pertinente A.
en la Solucin muestra (mg/L) Anlisis: Incinerar O, 1 g en un crisol. Tomar el residuo
V = volumen de la Solucin muestra (L) con 5 mL de cido ntrico, calentar en un bao de agua
W = peso de la muestra (mg) durante 1 minuto y filtrar. Mezclar 1 mL del filtrado con
F = factor de dilucin de la Solucin muestra 2 mL de molibdalo de amonio SR.
WT = peso promedio por Tableta (mg) Criterios de aceptacin: Se desarrolla un color
L = cantidad declarada del elemento pertinente amarillo.
(mg/Tableta) B.
Criterios de aceptacin: No menos de 90,0%-125,0% Anlisis: Disolver 20 mg de la sustancia en anlisis en
de la cantidad declarada de calcio (Ca), cobre (Cu), 5 mL de cido actico 5 M y agregar 0,5 mL de solu-
magnesio (Mg), manganeso (Mn) y cinc (Zn). cin de ferrocianuro de potasio (53 mg/mL). La solu-
cin resultante permanece transparente. Agregar 50 mg
PRUEBAS DE DESEMPEO de cloruro de Jmonio la solucin transparente.
DESINTEGRACIN Y DISOLUCIN DE SUPLEMENTOS DIETTICOS Criterios de aceptacin: Se produce un precipitado
(2040): Cumplen con los requisitos de Disolucin con blanco cristalino.
respecto a, calcio
Medio: Acido clorhdrico O, 1 N; 900 mL VALORACIN
Aparato 2: 75 rpm PROCEDIMIENTO
Tiempo: 30 min Muestra: 200 mg
Anlisis: Determinar la cantidad disuelta de calcio (Ca) Sistema volumtrico
usando el procedimiento de la valoracin de Calcio, rea- (Ver Volumetra (541 ).)
lizando los ajustes volumtricos necesarios. Modo: Valoracin directa
Tolerancias: No menos de 75% (Q) de la cantidad de- Solucin volumtrica: Edetato disdico O, 1 M SV
clarada de Ca. Deteccin del punto final: Calorimtrico
VARIACIN DE PESO DE SUPLEMENTOS DIETTICOS (2091): Blanco: 300 mL de agua. Agregar 6 mL de hidrxido
Cumplen con los requisitos. de sodio 1 O M y 15 mg de cido calconcarboxlico
triturado.
PRUEBAS ESPECFICAS Anlisis: Disolver la Muestra en 300 mL de agua, agre-
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO-SUPLEMENTOS NUTRl- gar 6 mL de hidrxido de sodio 1 O M y 15 mg de acido
CIONALES y DIETTICOS (2021 ): El recuento total de mi- calconcarboxlico triturado. Valorar con Solucion volum-
croorganismos aerobios no excede de 3000 ufc/g, y el trica hasta que la solucin adquiera un color azul ntido.
recuento total combinado de hongos filamentosos y leva- Calcular el porcentaje de calcio (Ca) en la porcin de
duras no excede de 300 ufc/g. , Glicerofosfato de Calcio tomada:
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS-SUPLEMENTOS
NUTRICIONALES y DIETTICOS (2022): Cumplen con los re- Resultado = [(V - B) x M x F x 100)/W
quisitos de las pruebas para determinar la ausencia de
Salmonella spp., Escherichia coli y Staphylococcus aureus. V = volumen de solucin volumtrica consumido
por la Muestra (mL)
REQUISITOS ADICIONALES B = volumen de solucin volumtrica consumido
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im- por el Blanco (mL)
permeables y resistentes a la luz. M = molaridad de la solucin volumtrica
ETIQUETADO: La etiqueta indica que el producto es Table- (mM/mL)
tas de Calcio y Vitamina O con Minerales. La etiqueta tam- F = factor de equivalencia, 40,08 mg/mM
bin indica las cantidades de cada mineral y vitamina D/ W = peso de la Muestra (mg)
unidad de dosificacin, la forma salina del mineral usado Criterios de aceptacin: 18,6%-19,4% con respecto a
como la fuente de cada elemento presente y la forma la sustancia seca
qumica de vitamina D presente en la unidad de
dosificacin. IMPUREZAS
ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11) PLOMO (251 ): No ms de 4 ppm
ER Colecalciferol USP HIERRO (241)
ER Ergocalciferol USP Solucin estndar: Diluir 1 volumen de Solucin de
Hierro Estndar, preparada segn se indica en el cap-
tulo, con agua a 1O volmenes (1 g/mL).
Anlisis: Disolver 0,20 g en 1O mL de agua. Agregar
2 mL de una solucin de cido ctrico al 20% (p/v) y
Glicerofosfato de Calcio O, 1 mL de cido tiogliclico y mezclar. Alcalinizar con
amonaco 1O M, diluir con agua hasta 20 mL y dejar en
reposo durante 5 minutos. Cualquier color rosado que
se produzca no es ms intenso que el obtenido tra-
HO ()'
tando 4 mL de la Solucin e'tndar de la misma ma-
(JH
nera.
Criterios de aceptacin: No ms de 20 ppm
C3H1Ca06P 21O,14
1,2, 3-Propanetriol, mono(dihydrogen phosphate) calcium
Eliminar lo siguiente:
salt (1 :1 );
Glicerofosfato de calcio [27214-00-2).
. METALES PESADOS, Mtodo I (231): No ms de
DEFINICIN 2j) ppme (Oficial Ol-dic-2015)
El Glicerofosfato de Calcio es una mezcla, en proporciones LIMITE DE CLORUROS
variables, de (RS)-2,3-dihidroxipropil fosfato de calcio y Solucin estndar: 8,24 g/mL de cloruro de sodio en
2-hidroxi-1-(hidroximetil)etil fosfato de calcio, que pueden agua
USP 38 Suplementos Dietticos/ Calcio 6357

Solucin muestra: Disolvf'r 125 mg en 1 O ml de una uniforme de gas. Despus de no menos de 2 horas,
rm:Lcld Je ciJo dLlico 5 M y dLJUd (2:8) y Jiluir con observar la mancha producida en el papel de bromuro
agua hasla 15 ml. mercrico. Realizar el mismo procedimiento usando
Anlisis. Agregar a id 5uluci01i 1iu5ti l mL de cido 1,0 1T1L de la Solucin estnda. La mtJnchJ poducid<l Cl
ntrico 2 M, luego agregar 1 ml de una solucin de ni- el papel de bromuro mercrico por la Solucin muestra
trato de plata (1 7 mg/ml) y dejar en reposo durante 5 no es ms intensa que la producida por la Solucion
minutos protegida de la luz. Agregar 5 ml de agua, estndar.
1 ml de cido ntrico 2 M y 1 ml de solucin de nitrato ~riterios de aceptacin: No ms de 3 ppm
de plata (1 7 mg/ml) a 1 O ml de la Solucin estndar y LIMITE DE FOSFATOS
dejar en reposo durante 5 minutos protegida de la luz. Solucin sulfomolbdica: Disolver con calentamiento
Cuando se observa contra un fondo oscuro, la Solucin 2,5 g de molibdato de amonio en 20 ml de agua. Diluir
muestra no es ms turbia que la Solucin estndar. 28 ml de cido sulfrico con 50 ml de agua y enfriar.
~riterios de aceptacin: No ms de 0,04% Mezclar las dos soluciones y diluir con agua hasta
LIMITE DE SULFATOS 100 ml.
Solucin estndar: 36,2 g/ml de sulfato de potasio Solucin de cloruro de estao (11): Preparar segn se
en agua indica en la prueba de Lmite de Arsnico.
Solucin muestra: Usar la Solucin muestra preparada Solucin madre del estndar: 14,3 g/ml de fosfato
segn se indica en la prueba de Apariencia de la monobsico de potasio en agua
Solucin. Solucin estndar: Transferir 1,0 ml de Solucin madre
Anlisis: Agregar 0,5 ml de cido actico 5 M y 1 ml del estndar a un matraz volumtrico de 100 ml y diluir
de solucin de cloruro de bario (250 mg/ml) a 15 ml con agua a volumen.
de la Solucin estndar. Repetir, usando 15 ml de la So- Solucion muestra: Transferir 2,5 ml de la Solucin
lucin muestra. Dejar las soluciones en reposo durante 5 muestra de la prueba de Apariencia de la Solucin a un
minutos protegidas de la luz. Cuando se observa contra matraz volumtrico de 1 00 ml y diluir con agua a
un fondo oscuro, la Soiucin muestra no es ms turbia volumen.
que la Solucin estndar. Anlisis: Agregar 4 ml de Solucin sulfomolbdica a
~riterios de ,aceptacin: No ms de 0,2% 1 00 ml de la Solucin muestra, mezclar y agregar
LIMITE DE ARSENICO O, 1 ml de Solucin de cloruro de estao (//). Agregar
Solucin madre del estndar: En un matraz volum- 4 ml de Solucin sulfomolbdica a 100 ml de Solucin
trico de 250 ml, disolver 330 mg de trixido de ars- estndar, mezclar y agregar 0, 1 ml de Solucin de clo-
nico en 5 ml de hidrxido de sodio 2 N y diluir con ruro de estao (//). Dejar las preparaciones en reposo
agua a volumen. Transferir 1 ml de esta solucin a un durante 1 O minutos y luego observar 20 ml de cada
matraz volumtrico de 1 00 ml y diluir con agua a preparacin. Cualquier color producido por la Solucin
volumen. muestra no es ms intenso que el producido por la So-
Solucin estndar: Transferir 1 ml de Solucin madre lucin estndar.
del estndar a un matraz volumtrico de 1 O ml, diluir ,Criteri9s de aceptacin: No ms de 0,04%
con agua a volumen. ACIDO CITRICO
Solucion de cloruro de estao (11): Calentar 20 g de Solucin de sulfato de mercurio (11): 1 g de xido
estao con 85 ml de cido clorhdrico hasta que no se mercrico en 20 ml de agua y 4 ml de acido sulfrico
desprenda ms hidrgeno. Dejar que se enfre. Diluir 1 Anlisis: Mezclar 5 g de Glicerofosfato de Calcio con
volumen de esta solucin con 1 O volmenes de cido 20 ml de agua exenta de dixido de carbono y filtrar.
clorhdrico diluido (200 mg/ml de cido clorhdrico en Agregar al filtrado 0, 15 ml de cido sulfrico y filtrar.
agua). Agregar al filtrado 5 ml de Solucin de sulfato de mer-
Solucin muestra: Transferir 330 mg de Glicerofosfato curio (//) y calentar a ebullicin. Agregar 0,5 ml de per-
de Calcio a un matraz volumtrico de 25,0 ml y diluir man~anato de potasio 0,2 M y calentar a ebullicin.
con agua a volumen. Criterios de aceptacin: No se forma precipitado.
Aparato: Preparar un matraz Erlenmeyer de 100 ml GLICEROL Y SUSTANCIAS SOLUBLES EN ALCOHOL
con brazo lateral que contenga una barra mezcladora Anlisis: Mezclar 1 g con 25 ml de alcohol y agitar du-
magntica. Acoplar al matraz Erlenmeyer un tapn de rante 1 minuto. Filtrar, evaporar hasta sequedad el fil-
vidrio esmerilado a travs del cual pasa un tubo de vi- trado en un bao de agua y secar el residuo a 70
drio de 20 cm de largo con un dimetro interno de durante 1 hora.
5 mm. El extremo inferior del tubo est dentro del ma- Criterios de aceptacin: El residuo pesa no ms de
traz Erlenmeyer y se ha estrechado hasta formar una 5 mg (0,5%).
punta con un dimetro interno de 1 mm. A 15 mm de
la punta y al menos 3 mm por debajo de la superficie PRUEBAS ESPECFICAS
inferior del tapn, hay un orificio de 3 mm de dimetro. APARIENCIA DE LA SOLUCIN
El extremo superior del tubo tiene una superficie esme- Suspensin opalescente: Disolver 1 g de sulfato de hi-
rilada plana en ngulo recto respecto al eje del tubo. drazina en 1 00 ml de agua y dejar en reposo durante
Un segundo tubo de vidrio con el mismo dimetro 4-6 horas. Agregar 25 ml de esta solucion a 25 ml de
interno y 30 mm de longitud, con una superficie esme- una solucin que contenga 100 mg/ml de metenamina
rilada plana similar, se coloca en contacto con la super- en agua y dejar en reposo durante 24 horas.
ficie esmerilada del primer tubo y se mantiene en posi- Suspension de referencia primaria: Diluir 15,0 ml de
cin mediante una pinza y resortes. Insertar dentro del Suspensin opalescente con agua hasta 1 000 ml.
tubo inferior, como un relleno poco compacto, 55 mg [NOTA-Esta suspensin se prepara en el momento y se
de algodn con acetato de plomo. Entre las superficies puede almacenar durante no ms de 24 horas.]
planas de los tubos, colocar un disco de papel de bro- Suspensin de referencia: Suspensin de referencia pri-
muro mercrico. maria y agua (30:70). [NOTA-Agitar antes de usar.]
Anlisis: Antes de colocar el montaje de tubos dentro Solucin muestra: Disolver 1,5 g a temperatura am-
del matraz, transferir la Solucin muestra al matraz y biente en 150 ml de agua exenta de dixido de
agregar 15,0 ml de cido clorhdrico, O, 1 ml de Solu- carbono.
cin de cloruro de estao (//) y 5 ml de yoduro de pota- Anlisis: Comparar la opalescencia de volmenes igua-
sio SR. Dejar en reposo durante 15 minutos y agregar les de la Solucin muestra y de la Suspensin de referen-
5 g de cinc activado. Ensamblar el aparato inmediata- cia.
mente y sumergir el matraz en un bao de agua a una Criterios de aceptacin: La Solucin muestra no es ms
temperatura tal que se mantenga un desprendimiento opalescente que la Suspensin de referencia.
6358 Calcio ! Suplementos Dietticos USP 38

ACIDEZ O ALCALINIDAD Criterios de aceptacin: 94,0% 1 00,5%


Anlisis: Disolver 1 LJ de Glicerofosfato de Calcio en
1 00 mL de agua. Agregar O, 1 mL de solucin de fenolf- IMPU~EZAS
tJlcnJ .:JI 1,0% (p/v). ARSENICO, fv1todo / ,';211 l
Criterios de aceptacin: Se requiere no ms de 0,5 mL Preparacin de prueba: D1so!ver lentamente 1,0 g en
de hidrxido de sodio O, 1 M o de cido clorhdrico O, 1 15 mL de cido clorhdrico y diluir con agua hasta
,M para cambiar el color del indicador. 55 ml.
PERDIDA POR SECADO (731 >: Secar una muestra a 150 Anlisis: Proceder segn se indica en el captulo, ex-
durante 4 horas: pierde no ms de 12,0% de su peso. cepto que se debe omitir la adicin de 20 mL de cido
sulfrico 7 N.
REQUISITOS ADICIONALES Criterios de aceptacin: Cumple con los requisitos del
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien captulo (no mas de 3 ppm).
cerrados y almacenar a temperatura ambiente PLOMO (251>
controlada. Preparacin de prueba: Mezclar 1,0 g con 5 ml de
agua, agregar lentamente 8 mL de cido clorhdrico
3 N, evaporar en un bao de vapor hasta sequedad y
disolver el residuo en 5 mL de a~ua.
Criterios de aceptacin: No mas de 3 ppm
Piedra Caliza Molida
Eliminar lo siguiente:
DEFINICIN
La Piedra Caliza Molida es un polvo microcristalino fino, de . METALES PESADOS (231>
color blanco a blanquecino, que consiste principalmente Preparacin de prueba: Mezclar 1,0 g con 5 ml de
en carbonato de calcio. Se obtiene mediante trituracin, agua, agregar lentamente 8 mL de cido clorhdrico 3 N
molienda y clasificacin de piedra caliza natural, benefi- y evaporar en un bao de vapor hasta sequedad. Disol-
ciada por flotacin y/o clasificacin area. Despus de se- ver el residuo en 20 ml de agua, filtrar y agregar agua
car a 200 durante 4 horas, contiene no menos de 94 0% al filtrado hasta obtener 25 ml.
y no ms de 100,5% de carbonato de calcio (CaC0 3).1 Criterios de aceptacin: No ms de 20 ppme (Oficial 01-dic
IDENTIFICACIN , 2015)
LIMITE DE MAGNESIO Y SALES ALCALINAS
A. IDENTIFICACIN-PRUEBAS GENERALES, Calcio (191)
Anlisis: Agregar cido actico a la Piedra Caliza Molida Muestra: 1,0 g
y calentar a ebullicin la solucin resultante. Anlisis: Mezclar la Muestra con 40 mL de agua. Agre-
Criterios de aceptacin: La solucin produce eferves- gar cuidadosamente 5 mL de cido clorhdrico, calentar
cencia (presencia de carbonato) despus de la adicin la solucin y calentar a ebullicin durante 1 minuto.
de cido actico. Despus de calentar a ebullicin, cum- Agregar rpidamente 40 mL de cido oxlico SR y mez-
ple con los requisitos del cgptulo. clar vigorosamente hasta que se establezca bien la pre-
B. ~~STANCIAS INSOLUBLES EN ACIDO: Cumple con lo,s re- cipitacin. Agregar inmediatamente a la mezcla tibia
qu1s1tos de la prueba para Sustancias Insolubles en Acido. 2 gotas de rojo de metilo SR y luego hidrxido de amo-
nio 6 N, gota a gota, hasta que la mezcla se torne ape-
VALORACIN nas alcalina. Enfriar a temperatura ambiente. Transferir a
PROCEDIMIENTO una probeta graduada de 100 mL, diluir con agua hasta
Muestra: 200 mg de Piedra Caliza Molida, previamente 1 00 mL, mezclar y dejar en reposo durante 4 horas o
secada a 200 durante 4 horas durante toda la noche. Filtrar y agregar a 50 ml del
Blanco: Proceder segn se indica en Anlisis, excepto filtrado transparente en una cpsula de platino 0,5 ml
que se debe omitir la muestra de prueba. de cido sulfrico, y evaporar la mezcla en un bao de
Sistema volumtrico vapor hasta un volumen pequeo. Calentar cuidadosa-
(Ver Volumetra (541 >.) mente sobre una llama libre hasta sequedad y continuar
Modo: Valoracin directa calentando hasta completar la descomposicion y volati-
Solucin volumtrica: Edetato disdico 0,05 M SV lizacin de las sales de amonio. Incinerar el residuo
Deteccin del punto final: Visual hasta peso constante.
Anlisis: Transferir la Muestra a un vaso de precipitados Criterios de aceptacin: No ms de 3,5%. El peso del
de 250 rnL. Humedecer minuciosamente con unos po- , residuo es no ms de 1 7,5 mg.
cos mL de agua y agregar, gota a gota, suficiente acido LIMITE DE FLUORUROS
clorhdrico 3 N para disolver. Agregar 100 mL de agua, [NOTA~Preparar y almacenar todas las soluciones en en-
1? mL.de hidrxido de sodio 1 N )' 300 m<; de azul de vases de plstico.]
h1drox1naftol, y valorar con Solucion volumetnca hasta Solucin amortiguadora: 294 mg/ml de citrato de so-
que la solucin se torne de color un azul distintivo. Rea- dio dihidrato en agua
lizar una determinacin con el Blanco. Solucin madre del estndar: 1, 1 052 mg/mL de ER
Calcular el porcentaje de carbonato de calcio (CaCO,) Fluoruro de Sodio USP en agua
en la Muestra tornada: Solucin estndar: Transferir 20,0 mL de Solucin ma-
dre del estndar a un matraz volumtrico de 100 ml
Resultado = {[( V1 - VB) x M x F]/W} x 100 que contenga 50,0 ml de Solucin amortiguadora, diluir
con agua a volumen y mezclar. Cada ml de Solucin
V\ = volumen de Solucin volumtrica consumido estndar contiene 1 00 pg de in fluoruro.
por la Muestra (ml) Solucin muestra: Transferir 2,0 g de Piedra Caliza Mo-
VR = volumen de Solucin volumtrica consumido lida a un vaso de precipitados que contenga una varilla
por el Blanco (mL) mezcladora recubierta de plstico. Agregar 20 ml de
M ~ molaridad real de la Solucin volumtrica agua y 4,0 ml de cido clorhldrico, y mezclar hasta di-
(mM/mL) solver ..Agregar 50,0 ml de Solucin amortiguadora y su-
F = factor de equivalencia, 100, l mg/mM ficiente agua hasta obtener l 00 mL.
W = peso de la Muestra (mg) Sistema de electrodos: Usar un electrodo especfico in-
dicador de in fluoruro y un electrodo de referencia de
plata-cloruro ele plata conectado a un medidor de pH
USP 38

capaz de medir los potPnrialP<> ron 1ma reproducibi!i- Sistema cromatogrfico


dad mnima Je ~t0,2 111V (ver H (791)). (Ver lromatogratw (621 ), lromatograt1a en Capa Del-
Anlisis gada.)
Muestras: So/uclon ni.:11Jw y Suiuci11 111ue)ilu Adsorbente: Capa de gel de s111ce para cromatograt1a
Lnea de respuesta del estndar: Transferir 50,0 mL de 0,25 mm, por lo general de 20 cm de longitud
de Solucin amortiguadora y 4,0 mL de cido clorh- (placas de TLC)
drico a un vaso de precipitados, y agregar agua hasta Volumen de aplicacin: 1O L
obtener 100 ml. Agregar una barra mezcladora recu- Fase mvil: Mezcla recientemente preparada de cloro-
bierta de plstico, insertar los electrodos en la solu- formo, acetona y cido frmico anhidro (75: 16,5: 8,5)
cin, mezclar durante 1 5 minutos y leer el potencial, Solucin reveladora A: Solucin de difenilborinato de
en mV. Continuar mezclando y agregar, en intervalos 2-aminoetilo de 1 O mg/mL en metano!
de 5 minutos, 100; 1 00; 300 y 500 L de la Solucin Solucin reveladora B: Solucin de polietilenglicol
estndar, leyendo el potencial 5 minutos despus de 4000 de 50 mg/mL en alcohol
cada adicin. Graficar los logaritmos de las concentra- Anlisis
ciones de in fluoruro acumulado (O, 1; 0,2; 0,5 y Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
1,0 g/mL) en funcin del potencial, en mV. Desarrollar los cromatogramas hasta que el frente de la
Enjuagar y secar los electrodos, insertarlos en la Solu- fase mvil haya recorrido aproximadamente tres cuar-
cin muestra, mezclar durante 5 minutos y leer el po- tos de la placa y secarla durante 30 minutos en una
tencial, en mV. A partir del potencial medido y de la corriente de aire fro. Rociar la placa con Solucin reve-
Lnea de respuesta del estndar, determinar la concen- ladora A, dejar que se seque y luec;io rociar con Solu-
tracin, C (en g/mL), de in fluoruro en la Solucin cin reveladora B. Una hora despues, observar la placa
muestra. bajo luz UV de longitud de onda larga.
Calcular el contenido de fluoruro en la porcin de Pie- Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
dra Caliza Molida tomada: cin muestra presenta una zona fluorescente azul ver-
dosa intensa a un valor R1 de aproximadamente 0,5
Resultado = (C x V)/W (presencia de silibina) y presenta una mancha azul gri-
scea a un valor R1 de aproximadamente 0,4 que co-
C =concentracin de in fluoruro, obtenida a rresponde a una mancha observada en el cromato-
partir de la Lnea de respuesta del estndar, grama de la Solucin estndar. El cromatograma de la
en la Solucin muestra (g/mL) Solucin muestra puede presentar otras zonas colorea-
V = volumen de Solucin muestra (mL) das: una zona azul verdosa intensa a un valor R1 de
W = peso de Piedra Caliza Molida tomado para aproximadamente 0,25 (presencia de silicristina) y una
preparar preparar la Solucin muestra (g) zona anaranjada rojiza a un valor R1 de aproximada-
Criterios de aceptacin: No ms de 50 ppm mente 0,3 (presencia d~ taxifolina).
8. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR HPLC
PRUEBAS ESPECFICAS
Anlisis: Proceder segn se indica en Contenido de
SUSTANCIAS INSOLUBLES EN CIDO
Muestra: 5,0 g
Silimarina.
Criterios de aceptacin: Los tiempos de retencin de
Anlisis: Mezclar la Muestra con 25 mL de agua. Agre- los picos para silidianina, silicristina, silibina A, silibina B,
gar 25 mL de cido clorhdrico, gota a gota, agitando, isosilibina A e isosilibina B en el cromatograma de la
hasta que cese la efervescencia. Agregar agua hasta que Solucin muestra corresponden a los del cromatograma
la mezcla alcance 200 ml y filtrar. Lavar el residuo inso- de la Solucin estndar de cardo mariano.
luble con agua hasta que el ltimo lavado no presente
ms cloruro e incinerar y pesar el residuo. COMPOSICIN
Criterios de aceptacin: 0,2%-2,5%. El peso del resi- CONTENIDO DE SILIMARINA
,duo est entre 1 O y 125 mg. Solucin A: Metano!, cido fosfrico y agua
PERDIDA POR SECADO (731 ): Secar una muestra a 200 (20: 0,5: 80)
durante 4 horas: pierde no ms de 2,0% de su peso. Solucin B: Metano!, cido fosfrico y agua
(80: 0,5: 20)
REQUISITOS ADICIONALES
Fase mvil: Ver la Tabla 7.
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien
cerrados.
ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11) Tabla 1
ER Fluoruro de Sodio USP Tiempo Solucin A Solucin B
(min) (%) (O/o)

f--~~~--~--~f--~~~~~~~-+--~~~~~~-
5 85 15

Cardo Mariano t--~~~2~---~--+~~~~5~5~~~-+-~~~-4~5~--~

DEFINICIN
El Cardo Mariano se compone del fruto maduro seco de
Slybum marianum (L.) Gaertn. (Fam. Asteraceae), una vez
eliminado el vilano. Contiene no menos de 2,0% de sili- Solucin estndar de cardo mariano: 0,7 mg/mL de
marina, calculado como silibina (C2:,H220rn), con respecto ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP en meta-
a la materia seca. no!. Someter a ultrasonido durante 20 minutos para di-
solver. Pasar a travs de un filtro de membrana con un
IDENTIFICACIN tamao de poro de 0,45 m o menor. Diluir 1 en 5
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA cor1 rnelanol para obtener una solucin de O, 14 mg/mL
DELGADA de ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP.
Solucin estndar: l ,O mg/rnL de ER Silidianina USP en Soluciones estndar de silibina: 0,20; 0,02 y
metano! 0,004 mg/mL de ER Silibina USP en metano!. Pasar a
Solucin muestra: Usar la Solucin muestra, preparada travs de un filtro de membrana con un tamao de
segn se indica en la prueba de Contenido de Silimarina, poro de 0,45 m o menor.
6360 Cardo Mari<1no ./ 'luJIPrrwn/n) ()ip/p/ic m USP 38

Solucin madre de la muestra: Transferir 1 O g de CalculJr por sepJrJdo el porcentJje de cada compo-
Cardo Mariano reducido a polvo tino a un dedal de nente pertinente rle silimarina, como silibina
extraccin y cubr.ir con una bola pequera de algodn. (C,1H))010), en la porcion de Cardo Mariano tomada:
Transferir el dedal a un aparato de extracc1on continua
equipado con un matraz de fondo redondo de 250 mL Resultarlo - r , (ViV'v) ~: n -: 100
que contenga 150 mL de ter de petrleo y calentar el
matraz sobre un manto de calentamiento durante 4 ho- C = concentracin del componente pertinente en
ras. Despus de la extraccin, separar el matraz de la Solucin muestra segn se interpola en la
fo~do redondo que contiene el extracto de ter de pe- grfica de calibracin (mg/mL)
troleo del aparato de extraccin y desechar la solucin V = volumen de la Solucin madre de la muestra
de ter de petrleo. Eliminar el ter de petrleo rema- (mL)
nente e_n el dedal de extraccin mediante secado y W = peso de la porcin de Cardo Mariano tomada
transferir el dedal a un aparato de extraccin adecuado (mg)
para extraccin en caliente y equipado con un matraz O = factor de dilucin para preparar la Solucin
de fondo redondo de 250 mL que contenga 100 mL de muestra a partir de Solucin madre de la
acetato de etilo. [NOTA-Ajustar el volumen de acetato muestra, 25
d_~ etilo, ~i fuera necesario, para mantener una extrac- Calcular el contenido de silimarina, como porcentaje,
c1on continua.] Calentar el matraz sobre un manto de en la porcin de Cardo Mariano tomada sumando los
calentamiento para permitir el reflujo suave del disol- porcentajes individuales.
vente. Despus de 8 horas, transferir el extracto cuanti- Criterios de aceptacin: No menos de 2,0% de silima-
tativamente a un matraz volumtrico de 100 mL y diluir rina, calculado como silibina (C2sH2210), con respecto a
con metanol a volumen. la materia seca
Solucin muestra: Diluir la Solucin madre de la mues-
tra (1 en 25) con metanol. CONTAMINANTES
Sistema cromato9rfico MET,ALES PESADOS (231 ,No ms de 1 o g/g
>:
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Residuos de Plaguicidas
(Ver Cromatografta (621 j, Aptitud del Sistema.)
Modo: HPLC (561j: Cumple con los requisitos.
Detector: UV 288 nm PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 >:
El recuento to-
Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L1 de 5 m tal bacteriano no excede de 1 0 4 ufc/g, y el recuento total
Temperatura de la columna: 40 combinado de hongos filamentosos y levaduras no ex-
Velocidad de flujo: 1 ml/min cede de 10 2 ufc/g.
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECFICOS (2022j: Cum-
Volumen de inyeccin: 1 O L
Aptitud del sistema ple con los requisitos de las pruebas para determinar la
Muestra: Solucin estndar de cardo mariano ausencia de Salmonella spp. y Escherichia coli, y la ausen-
[NOTA-Para los tiempos de retencin relativos, ver la cia de Staphylococcus aureus.
Tabla 2.] PRUEBAS ESPECFICAS
CARACTERSTICAS BOTNICAS
Tabla 2 Macroscpicas: Los frutos (aquenios) son ovoides y
Tiempo de
alargados, ligeramente retorcidos, moderadamente
Retencin aplanados, de 6-7 mm de longitud aproximadamente,
Relativo
de hasta 3 mm de ancho y 1,5 mm de espesor; tienen
un borde saliente amarillo brillante y cartilaginoso en la
Silicristll}-. ______ -----~- --~-~-- --------- o 68 superficie superior y un hilo acanalado en la base. El
Silidianina o 73 recubrimiento del fruto es negro amarronado brillante o
Silibina A 1 00 m,a:rn grisceo mate co~ lneas de color oscuro o gris
Silibina B 1 05 palido; contiene el embnon recto con dos cotiledones
Deshidrosilibina 1 09 gruesos y aplanados que contienen aceite graso y gr-
lsosilibina A 1 15
nulos de aleurona.
Microscpicas: La epidermis de la pared del fruto con-
lsosilibina B 1 19 ~iene clulas en empalizada casi incoloras dispuestas en
Requisitos de aptitud angulos rectos con respecto a la superficie. Poseen pa-
Similitud de los cromatogramas: El cromatograma redes externas muy gruesas dentro de las cuales el
de la Solucin estndar de cardo mariano es similar al lumen contina durante cierta distancia en forma de
cromatograma de referencia provisto con el lote de ranura. Observadas desde arriba con gran aumento las
ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP usado. clulas muestran slo un lumen en forma de ranur;.
Resolucin: No menos de 1,0 entre silibina A y sili- Poseen rebordes gruesos que aparecen como engrosa-
bina B mientos nodulares de la pared celular cuando se obser-
Factor de asimetra: 0,8-2,0 van desde arriba. La capa subepidrmica de la pared
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para del fruto se compone de clulas parenquimticas de
la suma de las respuestas de los picos debidos a sili- pared delgad,a no l!gnificadas_ y c~nstituye una capa de
bina A y silibina B pigmento. Celulas incoloras, ind1v1duales y en grupos,
Anlisis se alternan con clulas pigmentadas de nmero varia-
Muestras: Solucin estndar de cardo mariano, cada ble, lo que le da a la pared del fruto su apariencia mo-
una de las Soluciones estndar de silibina y Solucin teada. A continuacin se encuentra el tejido de la pared
muestra del fruto, con un grosor de aproximadamente 8 capas
ld_e~tificarlos picos debidos a silicristina, silidianina, si- de clul.as, con clulas parenquimticas punteadas alar-
l1b1na A, silibina B, isosilihina A e isosilibina B por gadas situadas a lo largo del eje longitudinal del fruto.
C()mparacin con el cromatograma de la Solucin es- Las clulas de la capa ms interna de la pared del fruto
tandar de cardo mariano, y medir las reas de los pi- pueden estar colapsadas; contienen grandes prismas de
cos pertinentes. Graficar las reas de la suma de los oxalato de calcio monoclnicos o en forma de cigarro.
picos de silibina A y silibina B en funcin de la con- La ep1derm1s de la cubierta de la semilla est formada
centracin de ER Silibina USP en las Soluciones estn- por clulas grandes amarillas en empalizada. Las clulas
dar de silibina, y obtener una lnea de regresin para tienen un lumen estrecho, algo expandido en cada ex-
calibracin. tremo de la clula, y las paredes celulares muestran una
USP 38 Sup!ernenlos Dietticos/ Cardo Mariano 6361

laminacin conspicua. Las clulas subepidrmicas de la /adora A, dejar que se seque y luego rociar con Solu-
cubierta de la semilla contienen clulas punteadas pecu- cin reveladora B. Una hora despues, observar la placa
liares; sus membranas celulares lignificadas tienen rebor- bao luz UV de longitud de onda larga.
des o cngo'.">omicnto~ poinincnlc:> cerrado'.:> ("clu!J:, Criterios de aceptacin: [! uomiltogrm de I So/u-
en red") junto a ellas hay una niu1 capa de clulas <ir5n muestra presenta una zona fluorescente azul ver-
con paredes duras, algo hinchadas y con contenido li- dosa intensa a un valor Rr de 0,5 (presencia de silibina)
poflico (residuo de endosperma). El embrin consiste y presenta una mancha azul griscea a un valor R, de
en clulas de paredes delgadas que, adems de glndu- 0,4 que corresponde a una mancha observada en el
las pequeas, contienen grupos de cristales y gotculas cromatograma de la Solucin estndar. El cromatograma
d~ grasa (en los cotiled9nes). de la Solucin muestra puede presentar otras zonas colo-
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Materia Orgnica Extraa readas: una zona azul verdosa intensa a un valor Rr de
(561): No ms de 2,0% 0,25 (presencia de silicristina) y una zona anaranjada
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas Totales (561): rojiza a un valor Rr de 0,,3 (presencia de taxifolina).
No ms de 8,0%, determinado en 1,0 g de Cardo Ma- B. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR HPLC
r\ano reducido a polvo fino. Anlisis: Proceder segn se indica en Contenido de
PERDIDA POR SECADO (731 ): Secar 1,0 g de Cardo Ma- Silimarina.
riano reducido a polvo fino a 105 durante 2 horas: Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
pierde no ms de 8,0% de su peso. cin muestra presenta picos para silidianina, silicristina,
silibina A, silibina B, isosilibina A e isosilibina B a tiem-
REQUISITOS ADICIONALES pos de retencin que corresponden a los de la Solucin
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien estndar de cardo mariano.
cerrados. Proteger de la luz y de la humedad.
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en CONTENIDO
latn y, despus de la denominacin oficial, la parte de la CONTENIDO DE SILIMARINA
pla,nta contenida en el artculo. Solucin A: Metano!, cido fosfrico y agua
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) (20: 0,5: 80)
ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP Solucin B: Metano!, cido fosfrico y agua
ER Silibina USP (80: 0,5: 20)
ER Silidianina USP Fase mvil: Ver la Tabla 7.

Tabla 1
Tiempo Solucin A Solucin B
(min) (%) (%)
Cardo Mariano, Cpsulas
o o o
DEFINICIN 5 85 15
Las Cpsulas de Cardo Mariano se preparan a partir de Ex- 20 55 45
tracto en Polvo de Cardo Mariano. Contienen no menos 40 55 45
de 90,0% y no ms de 110,0% de la cantidad declarada 41 85 15
de silimarina como silibina (C;,Hn010), calculada como la
55 85 15
suma de silidianina, silicristina, silibina A, silibina B, isosili-
bina A e isosilibina B. Solucin estndar de cardo mariano: 0,7 mg/mL de
IDENTIFICACIN
ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP en meta-
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA no!. Someter a ultrasonido durante 20 minutos para
DELGADA
disolver.
Solucin estndar: 1,0 mg/mL de ER Silidianina USP en Soluciones estndar de silibina: 0,20; 0,02 y
metano! 0,004 mg/mL de ER Silibina USP en metano!. Pasar a
Solucin muestra: Equivalente a 5 mg/mL de silima- travs de un filtro de membrana con un tamao de
poro de 0,45 m o menor.
rina, a partir del contenido de las Cpsulas reducido a
polvo (reducir a polvo fino el contenido de no menos Solucin muestra: Pesar y reducir a polvo fino el conte-
nido de no menos de 20 Cpsulas. Transferir una canti-
de 20 Cpsulas) en metano!. Agitar durante 1 minuto y
someter a ultrasonido durante 1 O minutos. Dejar en re- dad del polvo, pesada con exactitud, equivalente a
100 mg de silimarina a un matraz volumtrico de
poso durante 15 minutos antes de usar.
100 mL, agregar 90 mL de metano! y someter a ultraso-
Sistema cromato9rfico
(Ver Cromatograf1a (621 ), Cromatografa en Capa Del- nido durante 20 minutos, agitando ocasionalmente. En-
friar a 20 y diluir con metano! a volumen. Filtrar a
gada.)
travs de una membrana con un tamao de poro de
Modo: TLC
0,45 m o menor.
Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa
Sistema cromato9rfico
de 0,25 mm, por lo ~eneral de 20 cm de longitud
(Ver Cromalografta (621 ), Aptitud del Sistema.)
Volumen de aplicacion: 1 O L
Modo: HPLC
Fase mvil: Mezcla recientemente preparada de cloro-
Detector: UV 288 nm
formo, acetona y cido frmico anhidro (75: 16,5: 8,5)
Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L1 de 5 m
Solucin reveladora A: Solucin de difenilborinato de
Temperatura de la columna: 40
2-aminoetilo de 1 O mg/mL en metano!
Velocidad de flujo: 1 ml/min
Solucin reveladora B: Solucin de polietilenglicol
Volumen de inyeccin: 1 O L
4000 de 50 mg/mL en alcohol
Anlisis Aptitud del sistema
Muestra: Solucin estndar de cardo mariano
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
[NOTA~Para los tiempos de retencin relativos, ver la
Desarrollar los cromatogramas hasta que el frente de la
Tabla 2.]
fase mvil haya recorrido aproximadamente tres cuar-
tos de la placa y secarla durante 30 minutos en una
corriente de aire fro. Rociar la placa con Solucin reve-
6362 Cardo Marilno / Suplementos Dietticos USP 38

Tabla 2 Aparato 2: 1 00 rpm


Tiempo: 45 min
1
1
Nombre
1

----+--________
Tiempo de
Retencin
Relativo ~
Determinar la cantidad de silimarina, como silibina
(( J-1
\ ' - L JI
(!_
lU~
\
il!/f
rfir1 inlt-:l 11rnrln ni rn,;;tnrl" nn l""l ..,,.., 1,-,.h-.
U I J U ' - H....... U...1'-"1 IUV

de Contenido dP Silimarina, reali1ando las modificacio-


'--1 11 ''-1..V\..IV '---11 HA f'-'11 Ul..-UU

Siliuhtind o 68 nes necesarias.


Silidia11ina ----- o 73 Tolerancias: No menos de 75% de la cantidad decla-
Silibina A
~----"------
1 00 rada de silimarina como silibina (C2sHnOro)
Silibina B ------~ --- ----
1 05 VARIACIN DE PESO (2091 ): Cumplen con los requisitos.
Deshidrosilibina 1 09
CONTAMINANTES
lsosilibina A 1 15 PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021): El recuento to-
lsosilibina B 1 19 tal bacteriano no excede de 10 4 ufc/g, el recuento total
combinado de hongos filamentosos y levaduras no ex-
Requisitos de aptitud cede de 10 3 ufc/g, y el recuento de enterobacterias no
Similitud de los cromatogramas: El cromatograma excede de 10 2 ufc/g. ,
de la Solucin estndar de cardo mariano es similar al AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum-
cromatograma de referencia provisto con el lote de ple con los requisitos de las pruebas para determinar la
ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP usado. ausencia de Salmonella spp. y Escherichia coli.
Resolucin: No menos de 1,0 entre silibina A y sili-
bina B REQUISITOS ADICIONALES
Factor de asimetra: 0,8-2,0 ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im-
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para permeables y resistentes a la luz.
la suma de las respuestas de los picos debidos a sili- ETIQUETADO: La etiqueta ndica el nombre cientfico en
bina A y silibina B latn y, despus de la denominacin oficial, el artculo a
Anlisis partir del que se prepararon las Cpsulas. La etiqueta
Muestras: Solucin estndar de cardo mariano, cada tambin indica el contenido de silimarina, en mg/
una de las Soluciones estndar de silibina y Solucin Cpsula.
muestra ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
Identificar los picos debidos a silicristina, silidianna, sili- ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP
bina A, silibina B, isosilibina A e isosilibina B compa- ER Slibina USP
rando el cromatograma de la Solucin estndar de ER Silidianina USP
cardo mariano con el cromatograma de referencia y
medir las reas de los picos pertinentes. Graficar las
reas de la suma de los picos de silibna A y slbna B
en funcin de la concentracin de ER Slibina USP en
las Soluciones estndar de silibina, y obtener una lnea Cardo Mariano en Polvo
de regresin para calibracin.
Calcular por separado el contenido, en mg, de cada DEFINICIN
componente pertinente de silimarina, como silibina El Cardo Mariano en Polvo es Cardo Mariano reducido a
(C2sH220ro), en la porcin de contenido de Cpsulas polvo fino o muy fino. Contiene no menos de 2,0% de
tomada: silimarina, calculado como silibna (C2sH22010), con res-
Resultado = cX V pecto a la materia seca.
IDENTIFICACIN
C = concentracin del componente pertinente en A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
la Solucin muestra segn se interpola en la DELGADA
grfica de calibracin (mg/mL) Solucin estndar: 1,0 mg/mL de ER Slidianna USP en
V =volumen de la Solucin muestra (mL) metano!
Calcular el contenido de silmarina, como porcentaje, Solucin muestra: Usar la Solucin muestra, preparada
en la porcin de Cpsulas tomada: segn se indica en la prueba de Contenido de Silimarina.
Resultado= Cs x (Awc!W) x (100/L) Sistema cromato9rfico
(Ver Cromatograf1a (621 ), Cromatografa en Capa Del-
e = suma del contenido de cada componente gada.)
Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa
pertinente de silimarina en la porcin de
contenido de Cpsulas tomada (mg) de 0,25 mm, por lo general de 20 cm de longitud
Aw, = peso promedio del contenido de las Cpsulas (placas de TLC)
(mg/Cpsula) Volumen de aplicacin: 1 O L
W = peso de la porcin del contenido de las Fase mvil: Mezcla recientemente preparada de cloro-
Cpsulas tomada (mg) formo, acetona y cido frmico anhidro (75: 16,5: 8,5)
L = cantidad declarada de silimarina (mg/Cpsula) Solucin reveladora A: Solucin de difenilborinato de
Criterios de aceptacin: 90,0%-11 0,0% de la cantidad 2-aminoetilo de 1 O mg/mL en metano!
declarada de silimarina como silibina Solucin reveladora B: Solucin de polietilenglicol
4000 de 50 mg/mL en alcohol
PRUEBAS DE DESEMPEO Anlisis
DESINTEGRACIN y DISOLUCIN (2040): Cumplen con los Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
requisitos para Disolucin. Desarrollar los cromatogramas hasta que el frente de la
Solucin amortiguadora: 6,9 g/L de fosfato monob- fase mvil haya recorrido aproximadamente tres cuar-
sico de sodio y 1,52 g/L de hidrxido de sodio en agua. to> Je la placa y secarla durante 30 minutos en una
Ajustar a un pH de 7,5. corriente de are fro. Rociar la placa con Solucin reve-
Medio: Solucin amortiguadora que contenga lauril sul- ladora A. dejar que se seque y luego roriar ron 'iolu-
fato al 2%; 900 mL cin reveladora B. Una hora despues, observar la placa
bajo luz UV de longitud de onda larga.
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
cin muestra presenta una zona fluorescente azul ver-
USP 38 SunlPmPntos
' DiPtPtirm ./tardo Mariano 6 36 3

dosa intensa a un valor R1 de aproximadamente 0,5 Sistema cromatogrfico


(presencia de sli1b1na) y presenta una mancha azul gri- (Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.)
scea a un valor R1 de aproximadamente 0,4 que co- Modo: HPLC
rrPsnonrle a 1ma manrh;i nh,Prv:irfa Pn PI crom!to- Detector: U\/ 288 nrn
grama de la Solucin estndar. El cromatograma de la Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L1 de 5 ,Ltm
Solucin muestra puede presentar otras zonas colorea- Temperatura de la columna: 40
das: una zona azul verdosa intensa a un valor Rr de Velocidad de flujo: 1 ml/min
aproximadamente 0,25 (presencia de silicristina) y una Volumen de inyeccin: 1 O L
zona anaranjada rojiza a un valor R, de aproximada- Aptitud del sistema
mente O, 3 (presencia d~ taxifolina). Muestra: Solucin estndar de cardo mariano
8. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR HPLC [NOTA-Para los tiempos de retencin relativos, ver la
Anlisis: Proceder segn se indica en Contenido de Tabla 2.]
Silimarina.
Criterios de aceptacin: Los tiempos de retencin de Tabla 2
los picos para silidianina, silicristina, silibina A, silibina B,
isosilibina A e isosilibina B en el cromatograma de la Tiempo de
Solucin muestra corresponden a los del cromatograma Retencin
de la Solucin estndar de cardo mariano. Relativo
Silicristina o 68
COMPOSICIN Silidianina o 73
CONTENIDO DE SILIMARINA
Silibina A 1 00
Solucin A: Metano!, cido fosfrico y agua
(20: 0,5: 80) Silibina B 1 05
Solucin B: Metanol, cido fosfrico y agua Deshidrosilibina 1 09
(80: 0,5: 20) lsosilibina A 1 15
Fase mvil: Ver la Tabla 7. lsosilibina B --~
1 19

Tabla 1 Requisitos de aptitud


-------- -
Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
Tiempo Solucin A Solucin B de la Solucin estndar de cardo mariano es similar al
lmln\ t 0 /o\ llo\ cromatograma de referencia provisto con el lote de
o o o ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP usado.
5 85 15 Resolucin: No menos de 1,0 entre silibina A y sili-
20 55 45 bina B
40 55 45 Factor de asimetra: 0,8-2,0
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
41 85 15 la suma de las respuestas de los picos debidos a sili-
55 85 15 bina A y silibina B
Anlisis
Solucin estndar de cardo mariano: 0,7 mg/ml de Muestras: Solucin estndar de cardo mariano, cada
ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP en meta- una de las Soluciones estndar de silibina y Solucin
nol. Someter a ultrasonido durante 20 minutos para di- muestra
solver. Pasar a travs de un filtro de membrana con un Identificar los picos debidos a silicristina, silidianina, si-
tamao de poro de 0,45 m o menor. Diluir 1 en 5 libina A, silibina B, isosilibina A e isosilibina B por
con metanol hasta obtener una solucin de O, 14 mg/ comparacin con el cromatograma de la Solucin es-
ml de ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP. tndar de cardo mariano, y medir las reas de los pi-
Soluciones estndar de silibina: 0,20; 0,02 y cos pertinentes. Graficar las reas de la suma de los
0,004 mg/ml de ER Silibina USP en metanol. Pasar a picos de silibina A y silibina B en funcin de la con-
travs de un filtro de membrana con un tamao de centracin de ER Silibina USP en las Soluciones estn-
poro de 0,45 m o menor. dar de silibina, y obtener una lnea de regresin para
Solucin madre de la muestra: Transferir 1 O g de calibracin.
Cardo Mariano en Polvo a un dedal de extraccin y Calcular por separado el porcentaje de cada compo-
cubrir con una bola pequea de algodn. Transferir el nente pertinente de silimarina, como silibina
dedal a un aparato de extraccin continua equipado (C 25 H22010), en la porcin de Cardo Mariano en Polvo
con un matraz de fondo redondo de 250 ml que con- tomada:
tenga 150 ml de ter de petrleo y calentar el matraz
sobre un manto de calentamiento durante 4 horas.
Despus de la extraccin, separar el matraz de fondo
Resultado= e X (V/W) X o X 100
redondo que contiene el extracto de ter de petrleo e = concentracin del componente pertinente en
del aparato de extraccin y desechar la solucin de ter la Solucin muestra segn se interpola en la
de petrleo. Eliminar el ter de petrleo remanente en grfica de calibracin (mg/ml)
el dedal de extraccin mediante secado y transferir el V = volumen de la Solucin madre de la muestra
dedal a un aparato de extraccin adecuado para extrac- (ml)
cin en caliente y equipado con un matraz de fondo w = peso de la porcin de Cardo Mariano en Polvo
redondo de 250 ml que contenga 100 ml de acetato tomada (mg)
de etilo. (NOTA-Ajustar el volumen de acetato de etilo, o = factor de dilucin para preparar la Solucin
si fuera necesario, para mantener una extraccin con- muestra a partir de Solucin madre de la
tinua.] Calentar el matraz sobre un manto de calenta- muestra, 25
miento para permitir el reflujo suave del disolvente. Calcular el contenido de silimarina, como porcentaje,
Despus de 8 horas, transferir el extracto cuantitativa- en la porcin de Cardo Mariano en Polvo tomada
mente a un matraz volumtrico de 100 ml y diluir con sumando los porcentajes individuales.
metanol a volumen. Criterios de aceptacin: No menos de 2,0% de silima-
Solucin muestra: Diluir la Solucin madre de la mues- rina, calculado como silibina (C2sH22010), con respecto a
tra (1 en 25) con metanol. la materia seca
6364 Cardo Mariano / Suplementos Dietticos USP 38

CONTAMINANTES ms de 45,0% de la suma de silidianina y silicristina, no


METALES PESADOS 2311: J'-io rnc~ de 20 pg/g menos de 40,0% y no mas de 65,0% de la suma de
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Residuos de Plaguicidas silibina A y silibina B, y no menos de 10,0% y no ms de
(561 ): Cumple rnn lm requisitos 70, 0% rle l;i '11m;i rlP ;,milihin:i A ,.., isosilibina 8.
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 >: El recuento to-
ldl bdcteriano no excede de 10 1 utc/g, y el recuento total IDENTIFICACIN
combinado de hongos filamentosos y levaduras no ex- A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
cede de 10 2 ufc/g. , DELGADA
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum- Solucin estndar: 1,0 mg/mL de ER Silidianina USP en
ple con los requisitos de las pruebas para determinar la metanol
ausencia de Salmonella spp. y Escherichia co!i, y la ausen- Solucin muestra: 1O mg/mL de Extracto en Polvo en
cia de Staphylococcus aureus. metanol y dejar en reposo durante 15 minutos antes de
usar.
PRUEBAS ESPECFICAS Sistema cromato9rfico
CARACTERSTICAS BOTNICAS: El polvo se caracteriza por (Ver Cromatografw (621 ), Cromatografa en Capa Del-
presentar fragmentos de clulas incoloras, hasta de apro- gada.)
ximadamente 75 m de longitud y 8 m de ancho, de la Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa
capa en empalizada de la epidermis de la pared del de 0,25 mm, por lo general de 20 cm de longitud
fruto, que poseen una capa de pigmento adherente (ad- Volumen de aplicacion: 1O L
quieren un color rojo en preparaciones de hidrato de clo- Fase mvil: Mezcla recientemente preparada de cloro-
ral), y por partculas grises, vistas desde arriba, con el formo, acetona y cido frmico anhidro (75: 16,5: 8,5)
lumen en forma de hendija producido por el engrosa- Solucin reveladora A: Solucin de difenilborinato de
miento pronunciado de la pared o por los nudos presen- 2-aminoetilo de 1O mg/mL en metanol
tes en la pared celular formados por las crestas engrosa- Solucin reveladora B: Solucin de polietilenglicol
das; fragmentos de la capa de pigmento vistos desde 4000 de 50 mg/mL en alcohol
arriba, con la coloracin rojiza que se diluye de ellos en Anlisis
las preparaciones de hidrato de cloral, clulas pigmenta- Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
rias que alternan con clulas parenquimticas incoloras; Desarrollar los cromatogramas hasta que el frente de la
clulas incoloras claramente punteadas a travs de las fase mvil haya recorrido aproximadamente tres cuar-
cuales pueden verse las clulas pigmentadas cuando se tos de la placa y secarla durante 30 minutos en una
las observa desde arriba; prismas de oxalato de calcio corriente de aire fro. Rociar la placa con Solucin reve-
monoclnicos o en forma de cigarro, que se depositan ladora A, dejar que se seque y luego rociar con Solu-
sueltos o en grupos de clulas; numerosos fragmentos de cin reveladora B. Una hora despues, observar la placa
las clulas en empalizada color amarillo limn del recu- bajo luz UV de longitud de onda larga.
brimiento de la semilla, hasta aproximadamente 150 m Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
de longitud, con un lumen muy angosto y claramente cin muestra presenta una zona fluorescente azul ver-
punteado notablemente flameados cuando se los observa dosa intensa a un valor RF de aproximadamente 0,5
desde arriba; fragmentos amarillo plido de la capa de (presencia de silibina) y presenta una mancha azul gri-
clulas en red junto con porciones de embrin formado scea a un valor RF de aproximadamente 0,4 que co-
por clulas de paredes delgadas con pequeas glndulas rresponde a una mancha observada en el cromato-
y systancias lipoflicas. , grama de la Solucin estndar. El cromatograma de la
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Materia Orgnica Extraa Solucin muestra puede presentar otras zonas colorea-
(561 ): No ms de 2,0% das: una zona azul verdosa intensa a un valor RF de
ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Cenizas lota/es (561): aproximadamente 0,25 (presencia de silicristina) y una
No ms de 8,0%, determinado en 1,0 g de Cardo Ma- zona anaranjada rojiza a un valor RF de aproximada-
riano en Polvo mente 0,3 (presencia d~ taxifolina).
PRDIDA POR SECADO (731 ): Secar 1,0 g de Cardo Ma- B. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR HPLC
riano en Polvo a 105' durante 2 horas: pierde no ms de Anlisis: Proceder segn se indica en Contenido de
8,0% de su peso. Silimarina.
Criterios de aceptacin: Los tiempos de retencin de
REQUISITOS ADICIONALES los picos para silidianina, silicristina, silibina A, silibina B,
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases bien isosilibina A e isosilibina B en el cromatograma de la
cerrados. Proteger de la luz y de la humedad. Solucin muestra corresponden a los del cromatograma
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en de la Solucin estndar de cardo mariano.
latn y, despus de la denominacin oficial, la parte de la
pla,nta de donde se obtuvo el artculo. COMPOSICIN
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) CONTENIDO DE SILIMARINA
ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP Solucin A: Metanol, cido fosfrico y agua
ER Silibina USP (20: 0,5: 80)
ER Silidianina USP Solucin B: Metano!, cido fosfrico y agua
(80: 0,5: 20)
Fase mvil: Ver la Tabla 7.

Tabla 1
Extracto en Polvo de Cardo Mariano Tiempo 1
Solucin A
1
Solucin B
1
Cmin) 1
(%) 1
(%)
DEFINICIN
El Extracto en Polvo de Cardo Mariano se prepara a partir o o o
de los frutos o las semillas de Cardo Mariano mediante la 5 85 15
remocin de la materia grasa y la posterior extraccin con 20 55 45
disolventes adecuados. Contiene no menos de 90,0% y
no ms de 110,0% de la cantidad declarada de silimarina,
40 ---- -- - - __ _?_L __ I 45
15
41 85
calculada como silibina (C2sH22010), con respecto al ex- 55 85 15
tracto seco, que consiste en no menos de 20,0% y no
USP 38 Sur1it'rrw11im DiPIPli< u\/ Cardo Mariano 6365

Solucin estndar de cardo mariano: 0,7 mg/ml de \V peso de la porcin de Extracto en Polvo
=
ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP en meta- tomada (mg)
no!. Someter a ultrasonido durante 20 minutos para Calcular el porcentaje de la cantidad declarada de
disolver. s1l1manna en la porc1on de txtracto en Polvo tomada:
Soluciones estndar de silibina: 0,20; 0,02 y
0,004 mg/mL de ER Silibina USP en metano!. Pasar a Resultado = L.S/ L x 1 00
travs de un filtro de membrana con un tamao de
poro de 0,45 m o menor. L:S suma de los porcentajes de cada componente
=
Solucin muestra: Disolver una muestra de Extracto en pertinente de silimarina
Polvo en metano! hasta obtener una solucin equiva- L = cantidad declarada de silimarina, como
lente a 0,4 mg/ml de silimarina. Someter a ultrasonido porcentaje, en el Extracto en Polvo
durante 20 minutos, enfriar a 20" y pasar a travs de Criterios de aceptacin: 90,0%-11 0,0% de la cantidad
un filtro con un tamao de poro de 0,45 ~tm o menor. declarada de silimarina, calculada como silibina
Sistema cromato9rfico (C2sH22010), con respecto a la materia seca, que con-
(Ver Cromatografw (621 ), Aptitud del Sistema.) siste en: 20,0%-45,0% para la suma de silidianina y
Modo: HPLC silicristina; 40,0%-65,0% para la suma de silibina A y
Detector: UV 288 nm silibina B; y 10,0%-20,0% para la suma de isosilibina A
Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L1 de 5 m e isosilibina B
Temperatura de la columna: 40
CONTAMINANTES
Velocidad de flujo: 1 ml/min
Volumen de inyeccin: 1 O L
Aptitud del sistema Eliminar lo siguiente:
Muestra: Solucin estndar de cardo mariano
[NOTA-Para los tiempos de retencin relativos, ver la METALES PESADOS, Mtodo 11 (231): No ms de 20 g/
Tabla 2.] ge (Oficial Ol-dic-2015)
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
Tabla 2 tal bacteriano no excede de 104 ufc/g, el recuento total
combinado de hongos filamentosos y levaduras no ex-
Tiempo de cede de 10 3 ufc/g, y el recuento de enterobacterias no
Retencin
excede de 103 ufc/g. ,
Nombre Relativo AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum-
Silicristina o 68 ple con los requisitos de las pruebas para determinar la
Silidianina o 73 ausencia de Salmonella spp. y Eschercha coli.
Silibina A 1 00 OTROS REQUISITOS: Cumple con los requisitos en Extractos
Silibina B 1 05 Botnicos (565) para las pruebas en las secciones Residuos
Deshidrosilibina 1 09 de Plaguicidas y Disolventes Residuales.
lsosilibina A 1 15 PRUEBAS ESPECFICAS
lsosilibina B 1 19 PRDIDA POR SECADO (731 ): Secar una muestra a 105
durante 2 horas: pierde no ms de 5,0% de su peso.
Requisitos de aptitud
Similitud de los cromatogramas: El cromatograma REQUISITOS ADICIONALES
de la Solucin estndar de cardo mariano es similar al ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im-
cromatograma de referencia provisto con el lote de permeables, resistentes a la luz y en un lugar fresco.
ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP usado. ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
Resolucin: No menos de 1,0 entre silibina A y sili- latn y, a continuacin de la denominacin oficial, la
bina B parte de la planta a partir de la que se prepar el art-
Factor de asimetra: 0,8-2,0 culo. Cumple con los requisitos de Extractos Botnicos
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para (5~5), Etiquetado.
la suma de las respuestas de los picos debidos a sili- ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
bina A y silibina B ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP
Anlisis ER Silibina USP
Muestras: Solucin estndar de cardo mariano, cada ER Silidianina USP
una de las Soluciones estndar de silibina y Solucin
muestra
Identificar los picos debidos a silicristina, silidianina, sili-
bina A, silibina B, isosilibina A e isosilibina B por com-
paracin con el cromatograma de la Solucin estndar Cardo Mariano, Tabletas
de cardo mariano, y medir las reas de los picos perti-
nentes. Graficar las reas de la suma de los picos de DEFINICIN
silibina A y silibina B en funcin de la concentracin Las Tabletas de Cardo Mariano se preparan a partir de Ex-
de ER Silibina USP en las Soluciones estndar de silibina, tracto en Polvo de Cardo Mariano. Contienen no menos
y obtener una lnea de regresin para calibracin. de 90,0% y no ms de 110,0% de la cantidad declarada
Calcular por separado el porcentaje de cada compo- de silimarina, como silibina (C ,sH22010), calculada como la
nente pertinente de silimarina, como silibina suma de silidianina, silicristina, silibina A, silibina B, isosili-
(C2sHn010), en la porcin de Extracto en Polvo bina A e isosilibina B.
tomada:
IDENTIFICACIN
Resultado = eX (V/W) X 100 A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
DELGADA
e = concentracin del componente pertinente en Solucin estndar: 1,0 mg/ml de ER Silidianina USP en
la Solucin muestra segn se interpola en la metano!
grfica de calibracin (mg/mL) Solucin muestra: Equivalente a 5 mg/ml de silima-
V = volumen de la Solucin muestra (mL) rina, a partir de Tabletas reducidas a polvo fino (no me-
nos de 20) en metano!. Agitar durante 1 minuto y so-
6366 CJrdo MJriano / SuplPmPnto' Dif:'IPli<m USP 38

meter a 1iltrasonido durante 1 O minutos. Dejar en de metanol y someter a ullra,onido durante 70 minu-
reu'u durante 15 minutos antes de usar. tos, agitando ocasionalmente. Enfriar a 20' y diluir con
Sistema cromatogrfico metanol a volumen. Filtrar a travs de una memhrana
(Ver Cru111uiuyw1u \62 l , Cromatogratw en lapa Uel- con un tamao de poro de 0,45 m o menor.
gada.) Sistema cromatografico
Modo: TLC (Ver Cromatograf1a (621 ), Aptitud del Sistema.)
Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa Modo: HPLC
de 0,25 mm, por lo 9eneral de 20 cm de longitud Detector: UV 288 nm
Volumen de aplicacion: 1 O L Columna: 4,6 mm x 15 cm; relleno L1 de 5 m
Fase mvil: Mezcla recientemente preparada de cloro- Temperatura de la columna: 40'
formo, acetona y cido frmico anhidro (75: 16,5: 8,5) Velocidad de flujo: 1 ml/min
Solucin reveladora A: Solucin de difenilborinato de Volumen de inyeccin: 1 O L
2-aminoetilo de 1O mg/ml en metanol Aptitud del sistema
Solucin reveladora B: Solucin de polietilenglicol Muestra: Solucin estndar de cardo mariano
4000 de 50 mg/ml en alcohol [NOTA-Para los tiempos de retencin relativos, ver la
Anlisis Tabla 2.]
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra
Desarrollar los cromatogramas hasta que el frente de la Tabla 2
fase mvil haya recorrido aproximadamente tres cuar-
tos de la placa y secarla durante 30 minutos en una Tiempo de
corriente de aire fro. Rociar la placa con Solucin reve- Retencin
ladora A, dejar que se seque y luego rociar con Solu- Nombre Relativo
cin reveladora B. Una hora despues, observar la placa Silicristina o 68
bajo luz UV de longitud de onda larga. Silidianina o 73
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- Silibina A 1 00
cin muestra presenta una zona fluorescente azul ver- Silibina B 1 05
dma intensa a un valor Rr de 0,5 (presencia de silibina) - - ---------------
y presenta una mancha azul griscea a un valor Rr de Deshidrosilibina 1 09
0,4 que corresponde a una mancha observada en el lsosilibina A 1 15
cromatograma de la Solucin estndar. El cromatograma lsosilibina B 1 19
de la Solucin muestra puede presentar otras zonas colo-
readas: una zona azul verdosa intensa a un valor Rr de Requisitos de aptitud
0,25 (presencia de silicristina) y una zona anaranjada Similitud de los cromatogramas: El cromatograma
rojiza a un valor R1 de O,, 3 (presencia de taxifolina). de la Solucin estndar de cardo mariano es similar al
B. PRUEBA DE IDENTIFICACION POR HPLC cromatograma de referencia provisto con el lote de
Anlisis: Proceder segn se indica en Contenido de ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP usado.
Silimarina. Resolucin: No menos de 1,0 entre silibina A y sili-
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- bina B
cin muestra presenta picos para silidianina, silicristina, Factor de asimetra: 0,8-2,0
silibina A, silibina B, isosilibina A e isosilibina B a tiem- Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para
pos de retencin que corresponden con los de la Solu- la suma de las respuestas de los picos debidos a sili-
cin estndar de cardo mariano. bina A y silibina B
Anlisis
CONTENIDO Muestras: Solucin estndar de cardo mariano, cada
CONTENIDO DE SILIMARINA una de las Soluciones estndar de silibina y Solucin
Solucin A: Metanol, cido fosfrico y agua muestra
(20: 0,5: 80) Identificar los picos debidos a silicristina, silidianina, sili-
Solucin B: Metanol, cido fosfrico y agua bina A, silibina B, isosilibina A e isosilibina B compa-
(80: 0,5: 20) rando el cromatograma de la Solucin estndar de
Fase mvil: Ver la Tabla 1. cardo mariano con el cromatograma de referencia y
medir las reas de los picos pertinentes. Graficar las
Tabla 1 reas de la suma de los picos de silibina A y silibina B
Tiempo
--- Solucin A Solucin B
en funcin de la concentracin de ER Silibina USP en
las Soluciones estndar de silibina, y obtener una lnea
(min) (%) (%) de regresin para calibracin.
o __ _Q_ __ o -- Calcular por separado el contenido, en mg, de cada
5 85 15 componente pertinente de silimarina, como silibina
20 55 45 (C2sH22010), en la porcin de Tabletas tomada:
40 55 45
41
55
------

-=t ____ ____fil__


85
- - ----
15
15 C
Resultado =
= concentracin del componente pertinente en
la Solucin muestra segn se interpola en la
eX V

Solucin estndar de cardo mariano: 0,7 mg/ml de grfica de calibracin (mg/ml)


ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP en meta- V = volumen de la Solucin muestra (ml)
no!. Someter a ultrasonido durante 20 minutos para Calcular el contenido de silimarina, como porcentaje,
disolver. en la porcin de Tabletas tomada:
Soluciones estndar de silibina: 0,20; 0,02 y
0,004 mg/ml de ER Silibina USP en metanol. Pasar a Resultado= Cs x (Awr!W) x (100/L)
travs de un filtro de membrana con un tamao de
poro de 0,45 pm o menor. C = suma del contenido de cada componente
Solucin muestra: Pesar y reducir a polvo fino no me- pertinente de silimarina en la porcin de
nos de 20 Tabletas. Transferir una cantidad del polvo, Tabletas tomada (mg)
pesada con exactitud, equivalente a 100 mg de silima- Aw: = peso promedio de las Tabletas (mg/Tableta)
rina a un matraz volumtrico de 1 00 ml, agregar 90 ml W = peso de la porcin de Tabletas tomada (mg)
usr 38 Suplementos Dietticos / Cistano de Indias 6367

1. = cantidad declarada de silimarina (mg/Tableta) Solucin reveladora: Metanol, cido actico glacial,
Criterios de aceptacin: 90,0%- 110,0% cido sulfric.o y -anisaldehdo (85: 1 O: 5: 0,5)
Anlisis
PRUEBAS DE DESEMPEO Mu~~lrd~: Su/w.i11 1::;iu11Jur y Suluci11 111u1::;itu
DESINTEGRACIN y DISOLUCIN (2040\: Cumrlen ron lm Desarrollar los cromatogramas hasta una longitud de
requisitos para Disolucion. , no menos de 1 5 cm y secar la placa en una corriente
Solucin amortiguadora: 6,9 g/L de fosfato monoba- de aire. Rociar la placa con Solucin reveladora, calen-
sico de sodio y 1,52 g/L de hidrxido de sodio en agua. tar a 1 00 durante 5 minutos y observar la placa bajo
Ajustar a un pH de 7,5. . luz diurna.
Medio: Solucin amortiguadora que contenga launl sul- Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu-
fato al 2%; 900 mL cin muestra presenta una zona de color violeta ,azulado
Aparato 2: 1 00 rpm correspondiente a escina, comparable en pos1c1on y
Tiempo: 45 min color a la zona principal en el cromatograma de la Solu-
Determinar la cantidad de silimarina, como silibina cin estndar. Por encima de esta zona, el cromato-
(C2sH2010), disuelta usando el mtodo en la prueba grama de la Solucin muestra presenta diversas zonas
de Contenido de Silimarina, realizando las modificacio- estrechas de color marrn a rojo amarronado menos
nes necesarias. intensas que la zona correspondiente a escina.
Tolerancias: No menos de 75% de la cantidad decla-
rada de silimarina, como silibina (C;sHn010) COMPOSICIN , ,
VARIACIN DE PESO (2091): Cumplen con los requisitos. CONTENIDO DE GLICOSIDOS TRITERPENICOS
Disolvente A: Metanol y agua (13:7)
CONTAMINANTES Disolvente B: Usar la fase inferior de una mezcla de
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- cloroformo, cido clorhdrico O, 1 N y 1-propanol
tal bacteriano no excede de 10 4 ufc/g, el recuento total (5:3:2). , .
combinado de hongos filamentosos y levaduras no ex- Reactivo: Disolver 75 mg de cloruro fernco en 50 mL
cede de 1 0 3 ufc/g, y el recuento de enterobacterias no de cido actico glacial. Agregar 50 mL de cido sul-
excede de 10 2 ufc/g. , frico, mientras se mezcla y enfra. Preparar inmediata-
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum- mente antes de usar.
ple con los requisitos de las pruebas .Pa.ra de.terminar la Solucin estndar A: 0,2 mg/mL de ER Escina USP en
ausencia de Salmonel/a spp. y Eschenchw co/1. cido actico glacial, agitando durante 1 minuto.
Solucin estndar B: 0,4 mg/mL de ER Escina USP en
REQUISITOS ADICIONALES cido actico glacial, agitando durante 1 minuto .
ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im- Solucin estndar C: 0,6 mg/mL de ER Escina USP en
permeables y resistentes ? la luz. . ,. cido actico glacial, agitando durante 1 minuto.
ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre c1ent1f1co en Solucin muestra: Pesar 1 g de semillas molidas y colo-
latn y, a continuacin de la denominacin oficial, el art- car en un matraz de fondo redondo de 250 ml. Agre-
culo a partir del que se prepararon las Tabletas. La eti- gar exactamente 100 mL de Disolvente A y pesar el ma-
queta tambin indica el contenido de silimarina, en mg/ traz lleno con una precisin de 0, 1 g. Acoplar un
Tableta. condensador al matraz, someter a reflujo durante 30
ESTNDARES DE REFERENCIA USP (11) minutos y dejar que se enfre. Ajustar al peso inicial
ER Extracto en Polvo de Cardo Mariano USP agregando Disolvente A, segn sea necesario, y filtrar.
ER Silibina USP Transferir 30,0 mL del filtrado a un matraz de fondo
ER Silidianina USP redondo y evaporar los disolventes al vaco. Disolver el
residuo con 20 mL de cido clorhdrico O, 1 N y transfe-
rir cuantitativamente con ayuda de dos porciones adi-
cionales de 5 mL de cido clorhdrico O, 1 N a un em-
budo de separacin de 250 mL. Agregar 20 mL de
Castao de Indias 1-propanol y 50 mL de cloroformo, y agitar vigorosa-
mente durante 2 minutos. Separar la capa clorofrmica
DEFINICIN y agregar Disolvente B a la fase superior remanente en
El Castao de Indias consiste en las semillas secas de Aescu- el embudo de separacin. Agitar vigorosamente durante
lus hippocastanum L. (Fam. Hippocastanaceae). Se cose~ha 2 minutos y separar la capa clorofrmica. Combinar las
durante el otoo. Contiene no menos de 3,0% de gl1cos1- capas clorofrmicas en un matraz de fondo redondo y
dos triterpnicos, calculado con respecto a la materia seca evaporar hasta sequedad al vaco. Evaporar los disolven-
como escina (CssHs624). tes remanentes con ayuda de una corriente de aire. La-
var el residuo con dos porciones de 1 O ml de ter, fil-
IDENTIFICACIN , trar, lavar el filtro con 1 O mL de ter y desechar los
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFIA EN CAPA filtrados etreos. Despus de la evaporacin del ter re-
DELGADA sidual, agregar al residuo una porcin de 1 O mL de
Solucin estndar: 5 mg/mL de ER Escina USP en cido actico glacial y pasar a travs del filtro seco
metanol usado previamente a un matraz volumtrico de 50 mL.
Solucin muestra: Transferir 1 g del material vegetal re- Repetir la adicin de cido actico glacial seguida de
ducido a polvo a un tubo de centrfuga con tapa de dos pasos adicionales de filtracin, combinando los fil-
rosca, agregar 1 O mL de una mezcla de alcohol y ag.ua trados en el matraz volumtrico. Lavar el matraz de
(7:3), y calentar en un bao de vapor durante 1 O minu- fondo redondo con pequeas cantidades de cido ac-
tos. Centrifugar y usar el sobrenadante transparente. tico glacial y filtrar en el matraz volumtrico. Diluir con
Sistema cromato9rfico cido actico glacial a volumen.
(Ver Cromatografta (621 ), Cromatografa en Capa Del- Condiciones instrumentales
gada.) Modo: Visual
Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa (Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).)
de 0,25 mm Longitud ,de onda: 540 nm
Volumen de aplicacin: 1 O L Blanco: Acido actico glacial
Fase mvil: Usar la fase superior de una mezcla de Anlisis: Transferir 1 mL de la Solucin estndar A, de la
1-butanol, cido actico glacial y agua (5:1 :4). Solucin estndar B, de la Solucin estndar C, de la So-
lucin muestra y del Blanco a sendos tubos de ensayo
6368 Castao de Indias/ Suplementos Dietticos USP 38

con tapn. Aqreqar 4,0 ml de Reactivo a cada tubo, irrPgulares y ms o menos poligonales, lo que propor-
tapar los tubos y coloci.lrlos en un ba1o de agua a 60 cior1a un aspecto reticulado con puntuaciones. Los coti-
durante 25 minutos, i.lgitando ocasionalmente. Medir ledones son moderadamente engrosados y con puntua-
las absorbJnciJ~ de !.J s~;/u(in lnufstra reaccionada y de 1_iu11e) ir 1Jislir rlas, con ciuias parenquimticas
las Solucione; Pstndnr A, R y C reaccionadas, y corregir redondeadas a ovoides densamente llenas de almidn.
por el Blanco. Graficar las absorbancias de las Soluciones Los grnulos de almidn, en su mayora simples, se pre-
estndar A, By C reaccionadas en funcin de sus con- sentan en dos intervalos de tamao: de 15 a 30 m y
centraciones, en mg/mL, de ER Escina USP en la Solu- de 3 a 1 O m. Los grnulos ms grandes presentan una
cin estndar correspondiente. A partir de las grficas, forma que vara de circular, ovoide, y claramente poli-
determinar la concentracin, C, en mg/mL, de glicsi- gonal a piriforme, la mayora de los cuales tienen un
dos triterpnicos, como escina (C 51 H86 024), en la Solu- hilio radial o hendido bien marcado y carecen de es-
cin muestra. tras. Los grnulos de almidn ms pequeos son me-
Calcular el porcentaje de glicsidos triterpnicos como nos variables, de forma esfrica a ovoide, con el hilio
escina en la porcin de Castao de Indias tomada: frecuentemente como un punto. Es poco frecuente la
presencia de gr?nulos de almidn compuestos.
Resultado= (C/VV) x (50/3) SUSTANCIAS EXTRAIBLES
Anlisis: Proceder segn se indica en Artculos de Origen
C = concentracin de glicsidos triterpnicos en la Botnico (561 ), Extractos Solubles en Alcohol, Mtodo 2,
Solucion muestra segun se obtuvo excepto 9ue se debe usar una mezcla de metano! y
anteriormente (mg/mL) agua (8:2) en lugar de alcohol.
W = peso de Castao de Indias tomado para Criterios de aceptacin: No menos de 18,0%
preparar la Solucin muestra (g) ARTCULOS DE ORIGEN BOTNICO, Materia Orgnica Extraa
Criterios de aceptacin: No menos de 3,0% de glicsi- <?61): No ms de 2,0%
dos triterpnicos, calculado como escina (Cs 5 Hs624), PERDIDA POR SECADO (731 ): Secar una muestra a 1 05
con respecto a la materia seca. du~ante2 horas: pierde '1 ms de .1 0,0% de su peso .
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cemzas Totales (561):
CONTAMINANTES
No ms de 4,0%
MET,ALES PESADOS, Mtodo,!// (231): No ms de 20 g/g
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Residuos de Plaguicidas REQUISITOS ADICIONALES
(561 ): Cumple con los requisitos. ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Almacenar en un envase
PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to- bien cerrado y resistente a la luz. Proteger de la
tal de microorganismos aerobios no excede de 106 ufc/g, humedad.
el recuento total combinado de hongos filamentosos y ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
levaduras no excede de 1 0 4 ufc/g, y el recuento de ente- latn, y despus de la denominacin oficial, la parte de la
robacterias es no ms de 1 0 3 ufc/g. , pla,nta contenida en el artculo .
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum- ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11/
ple con los requisitos de las pruebas para determinar la ER Escina USP
ausencia de Salmonella spp. y Escherichia coli.
PRUEBAS ESPECFICAS
CARACTERSTICAS BOTNICAS
Macroscpicas: Las semillas de Castao de Indias son
compactas y duras, subesfricas a ovaladas, levemente Castao de Indias en Polvo
aplanadas y de 2 a 4 cm de dimetro. El recubrimiento
de la semilla es de color marrn oscuro de 1 a 1,5 mm DEFINICIN
de espesor, con una mancha grande y redonda de color El Castao de Indias en Polvo es Castao de Indias reducido
marron claro (hilo). El recubrimiento de la semilla es a polvo o a polvo muy fino. Contiene no menos de 3,0%
brilloso, pero slo cuando es fresca. El espacio bajo el de glicsidos triterpnicos, calculado con respecto a la
recubrimiento est totalmente ocupado por un enorme materia seca como escina (CssHs624).
embrin macizo brilloso y sus grandes cotiledones de
IDENTIFICACIN
color amarillo plido que carecen de endosperma.
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
Microscpicas: La epidermis de la testa vista desde la
DELGADA
superficie presenta clulas de color marrn amarillento
de tamao bastante uniforme, en su mayora con forma Solucin estndar: 5 mg/mL de ER Escina USP en
redonda a poligonal y unas pocas con forma cuadrada metano!
a levemente triangular. Las paredes de estas clulas tie- Solucin muestra: Transferir 1 g de Castao de Indias
nen un espesor considerable pero irregular y carecen de en Polvo a un tubo de centrfuga con tapa de rosca,
puntuaciones. Al corte, las clulas son columnares, agregar 1 O mL de una mezcla de alcohol y agua (7: 3),
aproximadamente 3-4 veces ms altas que anchas, con y calentar en un bao de vapor durante 1 O minutos.
la pared periclinal externa significativamente engrosada, Centrifugar y usar el sobrenadante transparente.
irregular y que se afina hacia la base; debajo de la epi- Sistema cromato9rfico
dermis se observan unas pocas capas de clulas colen- (Ver Cromatograf1a (621 ), Cromatografa en Capa Del-
quimticas engrosadas con pequeos espacios intercelu- gada.)
lares; la parte ms grande de la testa consiste en clulas Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa
parenquimticas de mayor tamao no muy comprimi- de 0,25 mm
das que forman un tejido esponjoso; las paredes pre- Volumen de aplicacin: 1 O L
sentan un engrosamiento variable e irregular, con gran- Fase mvil: Usar la fase superior de una mezcla de
des espacios intercelulares circulares bien marcados; la 1-butanol, cido actico glacial y agua (5:1 :4).
capa interna de la testa es una zona estrecha, con clu- Solucin reveladora: Metano!, cido actico glacial,
las mal definidas de paredes ms delgadas. Todas las cido sulfrico y p-anisaldehdo (85: 1 O: 5: 0,5)
clulas parenquimticas de la testa presentan una pig- Anlisis
mentacin oscura. El embrion tiene una capa exterior Muestras; Solucin i:ol(),,Jur y Sulucin muestra
de clulas incoloras pequeas, casi cuadradas al corte, Desarrollar los cromalogramas hasta una longitud de no
con paredes externas y laterales engrosadas. Desde la menos de i 5 cm y secar la placa en una corriente de
superficie, nicamente pueden vislumbrarse los lmenes aire. RociM la placa con Solucin reveladora, calentar a
USP 38 Supiememos Dietticos / C1-,1 cHlO de Indias 6369

l 00" durante S mintnm y observar Id JJldLd bdjo luL por el Blanco. Graficar las absorbancias obtenidas de las
diurna. Soluciones estndar A, B y C reaccionadas en funcin de
Criterios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- sus concentraciones, en mg/mL, de ER Escina USP en la
cin muestra presenta una zona de color violeta azulado Solucin estndar correspondiente. A partir de ias grfi-
correspondiente a escina, comparable en posicin y cas as obtenida~, determi11dr la concentracin, C, en
color a la zona principal en el cromatograma de la Solu- mg/mL, de glicsidos triterpnicos, como escina
cin estndar. Por encima de esta zona, el cromato- (CssHB<,024), en la Solucin muestra.
grama de la Solucin muestra presenta diversas zonas Calcular el porcentaje de glicsidos triterpnicos como
estrechas de color marrn a rojo amarronado menos escina en la porcin de Castao de Indias en Polvo
intensas que la zona correspondiente a escina. tomada:
COMPOSICIN Resultado= (C/V\/) x (50/3)
CONTENIDO DE GucSIOOS TRITERPNICOS
Disolvente A: Metanol y agua (1 3:7) C = concentracin de glicsidos triterpnicos en la
Disolvente B: Usar la fase inferior de una mezcla de Solucin muestra, segn se obtuvo
cloroformo, cido clorhdrico O, 1 N y 1-propanol anteriormente (mg/mL)
(5:3:2). W = peso de Castao de Indias en Polvo tomado
Reactivo: Disolver 75 mg de cloruro frrico en 50 mL para preparar la Solucin muestra (g)
de cido actico glacial. Agregar 50 mL de cido sul- Criterios de aceptacin: No menos de 3,0% de glicsi-
frico, mientras se mezcla y enfra. Preparar inmediata- dos triterpnicos, calculado como escina (CssHs624),
mente antes de usar. con respecto a la materia seca.
Solucin estndar A: 0,2 mg/mL de ER Escina USP en
cido actico glacial, agitando durante 1 minuto. CONTAMINANTES
Solucin estndar B: 0,4 mg/mL de ER Escina USP en MET,ALES PESADOS, Mtodo,!// (231): No ms de 20 ppm
cido actico glacial, agitando durante 1 minuto. ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Residuos de Plaguicidas
Solucin estndar C: 0,6 mg/mL de ER Escina USP en (561): Cumple con los requisitos.
cido actico glacial, agitando durante 1 minuto. PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021 ): El recuento to-
Solucin muestra: Pesar 1 g de Castao de Indias en tal de microorganismos aerobios no excede de 10 6 ufc/g,
Polvo y colocar en un matraz de fondo redondo de el recuento total combinado de hongos filamentosos y
250 mL. Agregar exactamente 100 mL de Disolvente A y levaduras no excede de 104 ufc/g, y el recuento de ente-
pesar el matraz lleno con una precisin de 0, 1 g. Aco- robacterias es no ms de 10 3 ufc/g. ,
plar un condensador al matraz, someter a reflujo du- AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum-
rante 30 minutos y dejar que se enfre. Ajustar al peso ple con los requisitos de las pruebas para determinar la
inicial agregando Disolvente A segn sea necesario y fil- ausencia de Salmone/la spp. y Escherichia coli.
trar. Transferir 30,0 mL del filtrado a un matraz de
fondo redondo y evaporar los disolventes al vaco. Di- PRUEBAS ESPECFICAS
solver el residuo con 20 mL de cido clorhdrico O, 1 N y CARACTERSTICAS BOTNICAS: Polvo de color marrn ama-
transferir cuantitativamente con ayuda de dos porciones rillento, inodoro, con un sabor algo harinoso, desagrada-
adicionales de 5 mL de cido clorhdrico O, 1 N a un blemente amargo y persistente. Presenta numerosas goti-
embudo de separacin de 250 mL. Agregar 20 mL de tas de aceite graso de diferentes tamaos que estn
1-propanol y 50 mL de cloroformo, y agitar vigorosa- libres o dentro del tejido incoloro de pared delgada de
mente durante 2 minutos. Separar la capa clorofrmica los cotiledones. Los fragmentos de la testa consisten en
y agregar Disolvente B a la tase superior remanente en clulas esclerenquimticas de pared gruesa con puntua-
el embudo de separacin. Agitar vigorosamente durante ciones. Tambin se presenta lo siguiente: grnulos de al-
2 minutos y separar la capa clorofrmica. Combinar las midn individuales piriformes, redondeados o reniformes
capas clorofrmicas en un matraz de fondo redondo y de mayor tamao de 15 a 30 m de dimetro, grnulos
evaporar hasta sequedad al vaco. Evaporar los disolven- individuales ms pequeos de 3 a 1 O m y slo unos
tes remanentes con ayuda de una corriente de aire. La- pocos grnulos compuestos que consisten en 2-4 granos
var el residuo con dos porciones de 1 O mL de ter, fil- individuales que forman filas de hasta 45 m de largo.
trar, lavar el filtro con 1 O mL de ter y desechar los Muchos de los grnulos de almidn tienen un hilio bies-
filtrados etreos. Despus de la evaporacin del ter re- trellado o poliest~ellado, pero rara vez simple.
sidual, agregar al residuo una porcin de 1 O mL de SUSTANCIAS EXTRAIBLES
cido actico glacial y pasar a travs del filtro seco Anlisis: Proceder segn se indica en Artculos de Origen
usado previamente a un matraz volumtrico de 50 mL. Botnico (561 ), Extractos Solubles en Alcohol, Mtodo 2,
Repetir la adicin de cido actico glacial seguida de excepto que se debe usar una mezcla de metano! y
dos pasos adicionales de filtracin, combinando los fil- agua (8:2) en lugar de alcohol.
trados en el matraz volumtrico. Lavar el matraz de c;::riterios de aceptacin: No menos de 18,0%
PERDIDA POR SECADO (731 ): Secar una muestra a 105'
fondo redondo con pequeas cantidades de cido ac-
tico glacial y filtrar en el matraz volumtrico. Diluir con dur,ante 2 horas: pierde }O ms de 10,0% de su peso.
ARTICULOS DE ORIGEN BOTANICO, Cenizas Totales (561):
cido actico glacial a volumen.
Condiciones instrumentales No ms de 4,0%
Longitud de onda: 540 nm REQUISITOS ADICIONALES
Modo: Visible ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Almacenar en envases
Blanco: cido actico glacial bien cerrados y resistentes a la luz. Proteger de la
Anlisis: Transferir 1 mL de la Solucin estndar A, de la humedad.
Solucin estndar B, de la Solucin estndar C, de la So- ETIQUETADO: La etiqueta indica el nombre cientfico en
lucin muestra y del Blanco a sendos tubos de ensayo latn, y despus de la denominacin oficial, la parte de la
con tapn. Agregar 4,0 mL de Reactivo a cada tubo, pla11ta de donde se obtuvo el artculo.
tapar los tubos y colocarlos en un bao de agua a 60 ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11)
durante 25 minutos, agitando ocasionalmente. Medir FR Fsrina LJSP
las absorbancias de la Solucin muestra reaccionada y de
las Soluciones estndar A, By C reaccionadas, y corregir
6370 Castailo df' India\ / S111lnrwnim Oieiiiws USP 38

y agregar Oi-,olvenle B a la fase superior remanente en


el embudo de separacin. Agitar vigorosamente durante
Extracto en Polvo de Castao de Indias 2 minutos y separar la capa clorofrmica. Comhinar las
capas clorofrmicas en uri matraz de fondo redondo y
DEFINICIN evaporar hasta sequedad al vac10. Evaporar los disolven-
El Extracto en Polvo de Castano de Indias ,se prepara a partir tes remanentes con ayuda de una corriente de aire. La-
de Castano de Indias mediante extraccion con mezclas de var el residuo con dos porciones de 1 O ml de ter, fil-
alcohol-agua o mezclas de metanol-agua. La relacin en- trar, lavar el filtro con 1 O mL de ter y desechar los
tre el mat_erial vegetal inicial y el extracto est entre 5:1 y filtrados etreos. Despus de la evaporacin del ter re-
8:1. Contiene no menos de 90,0% y no ms de 110,0% sidual, agregar al residuo una porcin de 1 O mL de
de la cantidad declarada de glicsidos triterpnicos, calcu- cido actico glacial y pasar a travs del filtro seco
lado con respecto a la materia seca como escina usado previamente a un matraz volumtrico de 100 ml.
(CssHs624). Puede contener sustancias agregadas Repetir la adicin de cido actico glacial seguida de
adecuadas. dos pasos adicionales de filtracin, combinando los fil-
IDENTIFICACIN trados en el matraz volumtrico. Lavar el matraz de
A. PRUEBA DE IDENTIFICACIN POR CROMATOGRAFA EN CAPA
fondo redondo con pequeas cantidades de cido ac-
DELGADA tico glacial y filtrar en el matraz volumtrico. Diluir con
Solucin estndar: 5 mg/mL de ER Escina USP en cido actico glacial a volumen.
metano! Condiciones instrumentales
Soluc_in muestra: Agregar a 1 O mL de metanol una (Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).)
cant1d~d de Extracto en Polvo equivalente a 25 mg de
Modo: Visible
la cant1_dad declarada de glicsidos triterpnicos y agi- Longitud ,de onda: 540 nm
tar. Deiar en reposo durante 15 minutos antes de usar. Blanco: Acido actico glacial
Sistema cromato9rfico Anlisis: Transferir 1 mL de la Solucin estndar A, de la
Solucin estndar B, de la Solucin estndar C, de la So-
(Ver Cromatograf/O (621 ), Cromatografa en Capa Del-
lucin muestra y del Blanco a sendos tubos de ensayo
gada.)
Adsorbente: Capa de gel de slice para cromatografa con tapn. Agregar 4,0 mL de Reactivo a cada tubo,
de 0,25 mm tapar los tubos y colocarlos en un bao de agua a 60
Volumen de aplicacin: 1 O L durante 25 minutos, agitando ocasionalmente. Medir
Fase mvil: Usar la fase superior de una mezcla de las absorbancias de la Solucin muestra reaccionada y de
1-butanol, cido actico glacial y agua (5:1 :4). las Soluciones estndar A, By C reaccionadas, y corregir
Solucin reveladora: Metano! cido actico glacial por el Blanco. Graficar las absorbancias de las Soluciones
estndar A, B y C reaccionadas en funcin de sus con-
cido sulfrico y p-anisaldehd (85: 1 O: 5: 0,5) '
Anlisis centraciones, en mg/mL, de ER Escina USP en la Solu-
Muestras: Solucin estndar y Solucin muestra cin est_ndar correspondiente. A partir de las grficas,
Desarrollar los cromatogramas hasta una longitud de no determinar la concentracin, C, en mg/mL, de glicsi-
menos de 15 cm y secar la placa en una corriente de dos triterpnicos como escina (CssHs624) en la Solucin
muestra.
aire. Rociar la placa con Solucin reveladora, calentar a
1 ~O durante 5 minutos y observar la placa bajo luz Calcular _el p~rc_entaje de la ca_~tidad declarada de glic-
diurna. s1dos tnterpenicos en la porc1on de Extracto en Polvo
Cri!erios de aceptacin: El cromatograma de la Solu- tomada:
oon muestra presenta una zona de color violeta azulado
Resultado = (C/Cu) x 100
correspondiente a escina, comparable en posicin y
color a la zona principal en el cromatograma de la Solu- C = concentracin de glicsidos triterpnicos en la
cin estndar. Por encima de esta zona, el cromato- Solucin muestra, segn se obtuvo
grama de la Solucin muestra presenta diversas zonas anteriormente (mg/mL)
~strechas de color marrn a rojo amarronado menos Cu concentracin nominal de glicsidos
=
intensas que la zona correspondiente a escina. . . triterpnic<;>~ en la Solucin muestra (mg/ml)
COMPOSICIN
Cntenos de aceptac1on: 90,0%-110,0% de la cantidad
CONTENIDO DE GucSIDOS TRITERPNICOS
declarada de glicsidos triterpnicos, como escina
Disolvente A: Metanol y agua (13:7) (CssHs624), con respecto a la materia seca
Disolvente B: Usar la fase inferior de una mezcla de CONTAMINANTES
cloroformo, cido clorhdrico O, 1 N y 1-propanol
(5:3:2).
Reactivo: Disolver 75 mg de cloruro frrico en 50 mL Eliminar lo siguiente:
de cido actico glacial. Agregar 50 mL de cido sul-
frico, mientras se agita y enfra. Preparar inmediata- METALES PESADOS, Mtodo 11 (231 ): No ms de 20 g/
mente antes de usar. 9 (Oficial Oldic-2015)
Solucin estndar A: 0,2 mg/mL de ER Escina USP en PRUEBAS DE RECUENTO MICROBIANO (2021): El recuento to-
cido actico glacial, agitando durante 1 minuto. tal de microorganismos aerobios no excede de 10 4 ufc/g;
Solucin estndar B: 0,4 mg/mL de ER Escina USP en el recuento total combinado de hongos filamentosos y
cido actico glacial, agitando durante 1 minuto. levaduras no excede de 10 2 ufc/g; y el recuento de ente-
Solucin estndar C: 0,6 mg/mL de ER Escina USP en robacterias no excede de 1 oi ufc/g.,
cido actico glacial, agitando durante 1 minuto. AUSENCIA DE MICROORGANISMOS ESPECIFICOS (2022): Cum-
Solucin muestra: Transferir una cantidad de Extracto ple con los requisitos de las pruebas para determinar la
en Polvo, equivalente a 50 mg de la cantidad declarada ausencia de Salmonel/a spp. y Escherichia coli.
de glicsidos triterpnicos, a un matraz de 50 ml. Agre-
gar 20 ml de cido clorhdrico O, 1 N y agitar durante 5 PRUEBAS ESPECFICAS
minutos. Filtrar en un embudo de separacin de PRDIDA POR SECADO <731>: Secar 1 g a 105'' durante 2
250 mL con ayuda de dos porciones adicionales de horas: pierde no ms de 5,0% de su peso.
5 mL de cido clorhdrico O, 1 N. Agregar 20 mL de OTROS REQUISITOS: Cumple con los requisitos en Extractos
1-propanol y 50 mL de cloroformo, y agitar vigorosa- Botnicos (565), Requisitos Farmacopeicos Generales, para
mente durante 2 minutos. Separar la capa clorofrmica Envasado y Almacenamiento, Disolventes Residuales y Resi-
duos de Plaguicidas para extractos en polvo.
USP 38 Suplementos Dietticos/ CempasCJChil 6371

REQUISITOS ADICIONALES longitud de onda analtica: 450 nm


ENVASADO y ALMACENAMIENTO: Conservar en envases im- Paso de celda: 1 cm
permeables y resistentes a la luz. Almacenar en un lugar Blanco: Etanol
fresco. Ancli~i~
ETIQUETADO: La etiqueta indica PI nombre cientfico en Muestra: Solucin muestra
latn, y despus de la denominacin oficial, la parte de la [NOTA-La lectura de la absorbancia debe estar entre
planta de la que se prepar el artculo. La etiqueta tam- 0,2 AU y 1,0 AU. Si no fuera as, reajustar la dilucin
bin indica el contenido de glicsidos triterpnicos, el di- de la solucin.]
solvente o la mezcla de disolventes de extraccin usados Calcular el porcentaje de carotenoides totales como
para la preparacin, la relacin entre el material vegetal zeaxantina (C40Hs62):
crudo inicial y el Extracto en Polvo, y el nombre y conte-
nido de cualquier sustancia agregada. Cumple con los Resultado = A/(C x F)
requisitos de etiquetado en Extractos Botnicos (565).
ESTANDARES DE REFERENCIA USP (11) A = absorbancia de la Solucin muestra
ER Escina USP C concentracin de la Solucin muestra (g/mL)
=
F = coeficiente de extincin (f1%) de zeaxantina en
etanol (100 mL. g 1 . cm 1), 2480
Criterios de aceptacin: No menos de 36,0% de caro-
tenoides totales ( D como zeaxantina (C40Hs602) con
Extracto de Zeaxantina de Cempaschil respecto a la materia seca
CONTENIDO DE ZEAXANTINA
[NOTA-Usar material de vidrio con proteccin actnica.]
Solucin A: terc-Butil metil ter
Solucin B: Agua
Solucin C: Metano!
CJI,
Diluyente: Mezcla de hexano, etanol, acetona y to-
lueno (10:6:7:7)
(40Hso2 568,87 Fase mvil: Elucin en gradiente. Ver la Tabla 7.
(all-E)-1, 1'-(3,7,12, 16-Tetramethyl-1, 3,5,7, 9, 11, 13,15, 1 7-oc-
tadecanonaene-1, 18-diyl)bis[2,6,6-trimethylcyclohexene- Tabla 1
3-ol]; Tiempo Solucin A Solucin B Solucin C
3R, 3' R-/3,/3-Caroteno-3, 3'-diol [148-68-3]. (min) (%) (%) (%)
DEFINICIN 00 5 7 88
El Extracto de Zeaxantina de Cempaschil es un extracto 15 15 7 78
purificado, derivado de las flores de Tagetes erecta L., la 30 45 7 48
cual se cultiva de las semillas de variedades del cultivar 60 75 65 18 5
Scarletade rico en zeaxantina. El extracto contiene no me- 66 75 19
nos de 36,0% de carotenoides totales, calculado como ----~-6-
zeaxantina (C40Hs602), no menos de 30,0% de todo-trans- 76 5 7 88
zeaxantina y no ms de 8,0% de lutena, calculado con 86 5 7 88
respecto a la materia seca.
Solucin madre del estndar: Transferir 20,0 mg de ER
IDENTIFICACIN Extracto de Zeaxantina de Cempaschil USP a un ma-
A. traz volumtrico de 1 00 mL, agregar 75 mL de Diluyente
Solucin muestra: Usar la Solucin muestra de la al matraz para suspender la muestra y someter a ultra-
prueba de Contenido de Carotenoides Totales. sonido durante 5 minutos. Diluir con Diluyente a volu-
Anlisis: Registrar el espectro UV-Vis desde 300-600 men y mezclar bien. Dejar que la materia insoluble sedi-
nm. mente durante al menos 1 O minutos. Pasar el
Criterios de aceptacin: La Solucin muestra presenta sobrenadante a travs de un filtro de membrana con un
un hombro a aproximadamente 428 nm, un mximo tamao de poro de 0,45 m.
de absorcin a aproximadamente 450 nm y otro m- Solucin estndar: Transferir 0,5 mL de Solucin madre
ximo a aproximadamente 478 nm. del estndar a un vial de 8 mL y evaporar hasta seque-
B. El tiempo de retencin del pico principal de la Solu- dad con ayuda de una corriente de nitrgeno. Disolver
cin muestra corresponde al de la Solucin estndar, se- el residuo en 4,0 mL de una mezcla de terc-butil metil
gn se obtienen en la prueba de Contenido de ter y metano! (5:95).
Zeaxantina. Solucin madre de la muestra: Transferir 20,0 mg de
C. El tiempo de retencin del pico principal de la Solu- Extracto a un matraz volumtrico de 1 00 mL, agregar
cin muestra corresponde al de 3R,3'R-/3,f3-caroteno-3,3'- 75 mL de Diluyente al matraz para suspender la muestra
diol de la Solucin estndar, segn se obtienen en la y ~ometer a ultrasonido durante 5 minutos. [PRECAU-
prueba de Composicin Estereoisomrica. CION-Las cargas electrostticas pueden causar la disper-
sin descontrolada de la muestra y que sta se pegue a
COMPOSICIN las paredes del matraz. Usando Diluyente, lavar el pro-
CONTENIDO DE CAROTENOIDES TOTALES ducto con cuidado en el matraz.] Diluir con Diluyente a
[NOTA-Usar material de vidrio con proteccin actnica.] volumen y mezclar bien. Dejar que la materia insoluble
Solucin madre de la muestra: Usar la Solucin madre sedimente durante al menos 1 O minutos. Pasar el sobre-
de la muestra de la prueba de Contenido de Zeaxantina. nadante a travs de un filtro de membrana con un ta-
Solucin muestra: Transferir 2,0 mL de Solucin madre mao de poro de 0,45 m.
de la muestra a un matraz volumtrico de 1 00 mL, diluir Solucin muestra: Transferir 0,5 mL de Solucin madre
con etanol a volumen y mezclar bien. de la muestra a un vial de 8 mL y evaporar hasta seque-
Condiciones instrumentales dad rnn ayuda de una corriente de nitrgeno. Disolver
(Ver Espectrofotometra y Dispersin de Luz (851 ).) el residuo en una mezcla de 4,0 mL de terc-butil metil
ter y metano! (5:95).
Sistema cromato9rfico
(Ver Cromatografia (621 /, Aptitud del Sistema.)
6372 CemrasCichil /Suplementos Dietticos USP 38

Modo: HPLC Tabla 2


Detector: 450 nm - --------- ----------~------ 1,--~

Tiempo 1 n-Hexano j 2-Propanol


Columna: 2,0 mm x 15 crn; relleno L62 de 3 rn
Velocidad de flujo: 0,4 mL/min ( min) I {_Djtl_ _____+------'l'-'l'-"
1.1...'- - - -

Volumen de inyeccin: 1 O L 1 Q,Q_____--+-_ _ _ _ _9_)________ L 5


Aptitud del sistema c_ ____ ____2Q___ ---J---- _ _c:_95"-----t-----5"-------j
Muestra: Solucin estndar 55 50 50
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos aproximados 63 50 50
para lutena y zeaxantina son 0,87 y 1,0,
respectivamente.]
Requisitos de aptitud
Similitud de los cromatogramas: El cromatograma Solucin madre del estndar: O, 1 mg/mL de ER Ex-
de la Solucin estndar es similar al cromatograma de tracto de Zeaxantina de Cempaschil USP en cloruro de
referencia provisto con el ER Extracto de Zeaxantina metileno. Someter a ultrasonido, si fuera necesario,
de Cempaschil USP usado. . hasta disolver la muestra.
Resolucion: No menos de 1,0 entre zeaxantina y Solucin estndar: Transferir 1,0 mL de Solucin madre
lutena del estndar a un tubo de ensayo de 15 ml y evaporar
Factor de asimetra: No ms de 2,0 para el pico de hasta sequedad con ayuda de una corriente de nitr-
zeaxantina geno. Disolver el residuo en una mezcla de 1 0,0 ml de
Desviacin estndar relativa: No ms de 2,0% para 2-propanol y hexano (5:95). Pasar a travs de un filtro
el pico de zeaxantina de membrana con un tamao de poro de 0,45 m.
Anlisis Solucin madre de la muestra: Pesar 1O mg de Ex-
Muestra: Solucin muestra tracto en un matraz volumtrico de 1 00 ml, agregar
Calcular el porcentaje de todo-trans-zeaxantina 85 mL de cloruro de metileno, someter a ultrasonido y
(C0Hs602) en la porcin de la muestra tomada: mezclar por rotacin suave hasta disolver. Diluir con
cloruro de metileno a volumen.
Resultado = (ru/ rr) x T Solucin muestra: Transferir 1,0 mL de Solucin madre
ru = respuesta del pico de todo-trans-zeaxantina de
de la muestra a un tubo de ensayo de 15 mL y evaporar
la Solucin muestra hasta sequedad con ayuda de una corriente de nitr-
r1 = suma de las respuestas de todos los picos de
geno. Disolver el residuo en una mezcla de 1 0,0 mL de
la Solucin muestra 2-propanol y hexano (5:95). Pasar la so~ucin a travs
T = porcentaje de carotenoides totales, segn se
de un filtro de membrana con un tamano de poro de
determina en la prueba de Contenido de 0,45 m.
Carotenoides Totales Sistema cromato9rfico
(Ver Cromatografla (621 )1 Aptitud del Sistema.)
Criterios de aceptacin: No menos de ~0,0% de todo-
Modo: HPLC
trqns-zeaxantina con respecto a la materia seca
Detector: 450 nm
LUTEINA V OTROS COMPUESTOS RELACIONADOS
Columna: 4,6 mm x 25 cm; relleno L51 de 5 m
[NOTA-Usar material de vidrio con proteccin actnica.]
Velocidad de flujo: 0,8 ml/min
Fase mvil, Solucin estndar, Solucin muestra, Sis-
Volumen de inyeccin: 20 L
tema cromatogrfico y Aptitud del sistema: Proce-
der segn se indica en la prueba de Contenido de Zea- Aptitud del sistema
xantina. Muestra: Solucin estndar
Anlisis
[NOTA-Los tiempos de retencin relativos aproximados
Muestra: Solucin muestra para (3R,3'S meso)-zeaxantina, (3R,3'R)-zeaxantina y
(3R,3'R,6'R)-lutena son 0,92; 1,00 y 1,12,
Calcular el porcentaje de lutena en la porcin de la
muestra tomada: respectivamente.]
Requisitos de aptitud .