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Curso 2004/05

CIENCIAS Y TECNOLOGAS/26
I.S.B.N.: 84-7756-666-6

MIGUEL NGEL NEGRN MEDINA

Especiacin de fsforo
en suelos ndicos de las Islas Canarias

Director
JOS MANUEL HERNNDEZ MORENO

SOPORTES AUDIOVISUALES E INFORMTICOS


Serie Tesis Doctorales
Memoria que presenta el Licenciado en Ciencias Qumicas Miguel ngel
Negrn Medina para optar al grado de Doctor en Qumica

La Laguna, Mayo de 2005

Este trabajo ha sido realizado en parte en el Laboratorio de Edafologa y Qumica Agrcola


del Dpto. de Qumica de la Universidad de Burgos y en el Centre de Pedologie Biologique,
CNRS, de Nancy (Francia)

II
A Julia, Araceli y Marcos,
Faros que alumbran el sendero de mi existencia

A mis padres, y en especial a ella que ya no est entre nosotros

III
AGRADECIMIENTOS

Deseo expresar mi ms sincero agradecimiento a todas aquellas personas que, de una u


otra manera, han dejado su impronta en este trabajo por su colaboracin, esfuerzo y
amistad.

Al Dr. Jos Manuel Hernndez Moreno, amigo personal y maestro en el arte de


aprender amar el quehacer cientfico, por su apoyo y dedicacin en la direccin de este
trabajo, pero sobre todo por su confianza despus de todos estos aos.

A todas las personas que hacen posible el da a da en el Departamento de Edafologa y


Geologa de la Universidad de La Laguna, pero en especial:
A la Dra. Montserrat Espino Mesa por ser compaera de fatiga en una parte
importante de esta Tesis. Un recuerdo especial para ella.
A la Dra. Carmen Arbelo Rodrguez y a su madre, Da. M Amalia Rodrguez,
por su inestimable colaboracin en el diseo y fabricacin de las bolsas de nylon para
las resinas granulares de intercambio aninico.
A la Lcda. Julia Domnguez Hernndez por sus consejos, esfuerzo y ayuda en
las determinaciones analticas realizadas, pero sobre todo por su comprensin y
paciencia.
Al Lcdo. Carmelo Batista por su ayuda en los inicios. Al Dr. Pablo Vinuesa y a
los Ingenieros Juan Jos Prez Surez y Pedro Martnez Costa por utilizar las
muestras de suelo de sus ensayos biolgicos. En este sentido, mi agradecimiento a la
Dra. Carmen Martnez Barroso del Dpto. de Biologa Vegetal de la Universidad de La
Laguna y la Dra. Mara del Carmen Jaizme Vega del Instituto Canario de
Investigaciones Agrarias (ICIA) de Valle Guerra por la labor de coordinacin en los
ensayos biolgicos realizados tanto en la Escuela Tcnica Superior de Ingeniera
Agrcola de la universidad de La Laguna como en el ICIA.
A la Dra. Gladys E. Vargas por iniciar juntos la desagregacin de suelos con
resinas de intercambio aninico. Al resto de Profesores y Profesoras del
Departamento, as como al Personal de Administracin y Servicios: Juan Luis

IV
Ventura, Antonio Padrn y al desaparecido Antonio Medina. A Pili y Loli del
Consejo, por su desinteresada colaboracin en este trabajo.

Tambin deseo expresar mi agradecimiento al Dr. F. Bartoli y a los tcnicos G. Burtin y


R. Philippy del CPB de Nancy (Francia), as como a los compaeros del Laboratorio de
Edafologa y Qumica Agrcola de la Universidad de Burgos, en especial al Dr.
Salvador Gonzlez Carcedo, por sus enseanzas y colaboracin durante las estancias
realizadas en dichos centros durante la fase experimental de este trabajo. Por ltimo al
Dr. M. Brossard del IRD/EMBRAPA de Cerrados (Brasilia) por su desinteresada
colaboracin en esta Tesis durante su breve estancia en nuestro Departamento en la que
32
ayud a poner a punto la tcnica de intercambio isotpico de P en Andosoles, en
coordinacin con la Dra. Carmen Mara vora Garca del Dpto. de Ingeniera Qumica y
Tecnologa Farmacutica de la Universidad de La Laguna.

Al resto de mi familia y a los que me consideran su amigo.

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

NDICE

I. INTRODUCCIN 1
1. Planteamiento y objetivos 2
2. El problema de la estimacin del P disponible 3
3. El fsforo en el suelo 5
4. Formas de P en el suelo 6
5. Referencias 11

II. SUELOS Y TCNICAS ANALTICAS 14


1. Suelos 15
1.1. Suelos Forestales 15
1.2. Suelos Cultivados 16
1.3. Caractersticas ms relevantes de las muestras de suelo 16
2. Tcnicas Analticas 18
3. Referencias 19

III. RESULTADOS Y DISCUSIN 21

III.1. EXTRACCIN DE FSFORO CON NaHCO3 0,5 M (pH=8,5): CONDICIONES


DE EXTRACCIN Y VARIABILIDAD DE SUS FRACCIONES 22
1. Introduccin 23
2. Metodologa 24
2.1. Suelos 25
2.2. Fraccionamiento del P 25
2.3. Fracciones del COD, Al y Fe 25
2.4. Fsforo hidrolizable por la fosfatasa cida 25
2.5. Fsforo microbiano 26
2.6. Tcnicas Analticas 27
3. Resultados y discusin 27
3.1. Influencia de la temperatura de centrifugacin y de la tcnica de filtrado
28
3.2. Fsforo orgnico 28
3.3. Fsforo Olsen 33
3.4. Fsforo hidrolizado por la enzima fosfatasa 35

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3.5. Fsforo particulado 37


3.6. Fumigacin de muestras de suelo con cloroformo 47
4. Referencias 48

III.2. EXTRACCIN DE FSFORO CON AGUA: ASOCIACIONES


RGANOMINERALES [Al(Fe)-P-CIDO FLVICO] Y FASES
INORGNICAS 53
1. Introduccin 54
2. Metodologa 56
2.1. Suelos 58
2.2. Extractos suelo-agua 59
2.3. Espectroscopia ultravioleta-visible 59
2.4. Dilisis de los extractos acuosos filtrados por 0,45 m 59
2.5. Fraccionamiento del P 60
2.6. Fracciones del COD 61
2.7. Tcnicas analticas 62
3. Resultados y discusin 62
3.1. Liberacin de P con la dilucin en el conjunto de todas las muestras estudiadas
(con filtracin secundaria, < 0,45 m) 62
3.2. Muestras seleccionadas de suelos forestales y cultivados para el estudio de
dilisis 66
3.2.1. Influencia de la relacin w:s sobre las propiedades qumicas de los extractos
filtrados por 0,45 m 66
3.2.2. Influencia de la dilucin sobre la liberacin de P y sus distintas fracciones
69
3.2.3. COD, relaciones E4/E6 y absorbancia a 272 nm 71
3.2.4. Fracciones reactivas y no reactivas calculadas en funcin del tipo de filtrado
72
3.2.5. Fsforo hidrolizable por la enzima fosfatasa y P microbiano 79
3.2.6. Experimento de dilisis 82
3.3. Informacin relativa a las fases slidas fosfatadas 84
3.3.1. Solubilidad de los fosfatos de Al y Fe 84
3.3.2. Informacin sobre la solubilidad de fosfatos de aluminio en extractos
dializados 87
4. Conclusiones 91

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

5. Referencias 92

III.3. ESTIMACIN DE LA FRACCIN TOTAL DISPONIBLE DEL FSFORO


MEDIANTE LA TCNICA DE DILUCIN ISOTPICA EN SUELOS NDICOS
NATURALES Y FERTILIZADOS: TRANSFERENCIA DE P ENTRE LOS
CONSTITUYENTES DEL SUELO Y DISOLUCIN 99

1. Introduccin 100
1.1. Transferencia de iones fosfato entre la fase slida y la disolucin del suelo:
factor intensidad 100
1.2. Transferencia de iones fosfato entre la fase slida y la disolucin del suelo:
factor cantidad y la dilucin isotpica 102
2. Metodologa 103
2.1. Suelos 103
2.2. Fsforo presente en la disolucin del suelo 103
2.3. Cintica de intercambio isotpico 103
3. Resultados y discusin 105
3.1. Parmetros cinticos de intercambio isotpico 105
3.2. Constantes medias asociadas al intercambio 108
3.3. Anlisis compartimental del P intercambiado isotpicamente 109
3.4. Experimento con membrana de resina y P radioactivo en las muestras fertilizadas
111
3.4.1. Mtodo experimental 112
3.4.2. Balance de fosfato, COD y Al en los extractos y membrana de intercambio
aninico 112
3.4.3.Anlisis multicompartimental y estocstico del P intercambiable en ausencia
y presencia de MIA 116
4. Conclusin 118
5. Referencias 119

III.4. DESORCIN DE FSFORO DISPONIBLE EN SUELOS DE ORIGEN


VOLCNICO MEDIANTE EL USO DE RESINAS DE INTERCAMBIO ANINICO
123
1. Introduccin 124

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1.1. Procesos de sorcin del P en las superficies sorbentes de P (xidos, minerales


de arcilla, carbonatos y materia orgnica) del suelo 124
1.1.1. Sorcin sobre xidos de Al y Fe 124
1.1.2. Caractersticas del proceso de desorcin de fosfato 126
1.1.3. Uso de resinas de intercambio aninico en la cuantificacin del fosfato
disponible 128
1.1.4. Estudio de liberacin de fosfato empleando resinas de intercambio inico
130
2. Material y mtodos 134
2.1. Suelos 134

2.2. Preparacin de las resinas 134

2.3.Extraccin cintica y secuencial de P y otros elementos asociados mediante


membranas de dilisis y MIA como agente receptor 136
2.4. Tcnicas analticas 137
3. Resultados y discusin 138
3.1. Caracterizacin inicial de los eluatos de las diferentes resinas empleadas
138

3.1.1. Variacin del pH en la suspensin sobrenadante de las resinas 138

3.1.2. Fsforo y sulfato extrados por las resinas 139


3.2. Extraccin secuencial del P en suelos de un ensayo biolgico por membranas
de intercambio aninico 151
3.3. Variacin del P extrado con el nmero de MIA empleadas y con la relacin
w:s 156
3.4. Extraccin secuencial de P y elementos asociados mediante membranas de
dilisis y MIA como agente receptor 169
3.4.1. Consideraciones iniciales 169
3.4.2. Ecuaciones cinticas empleadas en el estudio de la desorcin de nutrientes
171
3.4.3. Curvas de liberacin de P y del resto de los elementos 175
4. Referencias 198

IV. ANEJOS: CALIBRADO DE P DISPONIBLE Y ENSAYOS BIOLGICOS


EN SUELOS VOLCNICOS CON ELEVADA CAPACIDAD DE RETENCIN
DE FOSFATO 205

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

IV. 1. Anejo 1: CAMBIOS EN LAS FRACCIONES DE P EN UN ANDISOL,


INDUCIDOS POR LA INFECCIN DE MICORRIZAS ARBUSCULARES EN
CULTIVOS DE TAGASASTE (Chamaecytisus proliferus ssp. proliferus var. Palmensis)
206
1. Introduccin 207
2. Material y mtodos 208
3. Resultados y discusin 209
4. Referencias 212

IV. 2. Anejo 2: CALIBRADO DE P DISPONIBLE EN SUELOS CON ALTA


CAPACIDAD DE RETENCIN POR LOS MTODOS DE LA MEMBRANA DE
INTERCAMBIO INICO Y OLSEN EN MAZ (Zea mays L.) 214
1. Introduccin 215
1.1. Mtodos de calibrado del P disponible 216
2. Material y mtodos 217
3. Resultados y discusin:
Evaluacin del P en los suelos despus del ensayo biolgico 218
3.1. Fsforo Olsen 218
3.2. Fsforo extrado por MIA 219
3.3. Calibrado del P por ambos mtodos 221
4. Referencias 222

V. CONCLUSIONES GENERALES 224


1. Mtodo Olsen y extractos acuosos 225
2. Intercambio isotpico 226
3. Resinas de intercambio aninico 227
4. Interpretacin del calibrado de P 228
5. Consideraciones finales 229

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RELACIN DE FIGURAS

I. INTRODUCCIN

1) Fig. 1. Esquema del fraccionamiento secuencial del P (Hedley et al., 1982) 8

II. SUELOS Y TCNICAS ANALTICAS


III. RESULTADOS Y DISCUSIN

III.1. EXTRACCIN DE FSFORO CON NaHCO3 0,5 M (pH=8,5): CONDICIONES DE


EXTRACCIN Y VARIABILIDAD DE SUS FRACCIONES

2) Fig. 1. Diagrama que describe las distintas etapas del fraccionamiento del P en los extractos
de bicarbonato 26
3) Fig. 2. Complejos propuestos para explicar la interaccin entre compuestos humus-Al y el
ortofosfato: (I) Gerke, 1992; (II) P orgnico 35

III.2.EXTRACCIN DE FSFORO CON AGUA: ASOCIACIONES


RGANOMINERALES [Al(Fe)-P-CIDO FLVICO] Y FASES INORGNICAS

4) Fig. 1. Diagrama que describe las distintas etapas del fraccionamiento del P en los extractos
acuosos 61
5) Fig. 2. Efecto de la dilucin sobre PR en los suelos cultivados () y forestales () estudiados.
Valores medios al 95% de intervalo de confianza y barras de error igual a 2xESM 64
6) Fig. 3. Efecto de la dilucin sobre el pH () y COD () en los suelos forestales y cultivados
estudiados 64
7) Fig. 4. Relacin entre los valores de PR en el rango w:s estudiado (, todas las muestras; ,
suelos forestales) 64
8) Fig. 5. Relacin entre los valores de PT en el rango w:s estudiado (, todas las muestras; ,
suelos forestales) 64
9) Fig. 6. Relaciones E4/E6 en los extractos acuosos a las dos relaciones w:s estudiadas 73
10) Fig. 7. Absorbancia a 272 nm en los extractos acuosos a las dos relaciones w:s estudiadas
73
11) Fig. 8. Diagrama de solubilidad para el Al-fosfato en la disolucin del suelo (2,5:1). (1)
Variscita (2) Variscita amorfa. , muestras cultivadas; muestras forestales 85

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12) Fig. 9. Diagrama de solubilidad para la strengita y el FePO4 en equilibrio con el


Fe(OH)3(amorfo) y Fe(OH)3(suelo) en la disolucin del suelo (2,5:1). Strengita: (1) amorfo (2)
suelo; FePO4: (3) amorfo (4) suelo. , muestras cultivadas; muestras forestales 86
13) Fig. 10. Doble funcin de solubilidad para el sistema Ca-P para las relaciones 2,5:1 y 75:1.
Los nmeros corresponden a las muestras T2-S: 3 y Esperanza A1: 4. (1) Brushita
CaHPO4.2H20, (2) Hidroxiapatito
89
14) Fig. 11. Solubilidad del fosfato de aluminio en los extractos acuosos. (a) 2,5 l kg-1 (b) 75 l
kg-1. (1) Amorfo anlogo, (2) Variscita. Dializados 89

III.3. ESTIMACIN DE LA FRACCIN TOTAL DISPONIBLE DEL FSFORO


MEDIANTE LA TCNICA DE DILUCIN ISOTPICA EN SUELOS NDICOS
NATURALES Y FERTILIZADOS: TRANSFERENCIA DE P ENTRE LOS
CONSTITUYENTES DEL SUELO Y DISOLUCIN

III.4. DESORCIN DE FSFORO DISPONIBLE EN SUELOS DE ORIGEN


VOLCNICO MEDIANTE EL USO DE RESINAS DE INTERCAMBIO ANINICO

15) Fig. 1. Influencia de los tratamientos de P sobre las fracciones de P extrado obtenidas en los
eluatos. Las barras de error constituyen el error estndar de la media (Pinorg-Bix10 = Bi-Pc)
154
16) Fig. 2. Relaciones entre las fracciones de P en los eluatos del suelo La Esperanza A
(mediasSD) 154
17) Fig. 3. Relaciones entre CO, Al y Fe en los eluatos de bicarbonato del suelo La Esperanza A
(mediaSD) 155
18) Fig. 4. Rendimiento del cultivo frente al P en los eluatos de cloruro para el suelo La
Esperanza A 155
19) Fig. 5. Fsforo acumulado durante cada perodo de extraccin y P liberado del suelo durante
cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA en muestras de suelos seleccionadas.
Clave de muestras: D= LE A; E= LE-50; F= LE-200; J= LE A (30000g); L= LE-50 (30000g); N=
LE-200 (30000g) 176
20) Fig. 6. Aluminio acumulado durante cada perodo de extraccin y Al liberado del suelo
durante cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA en muestras de suelos
seleccionadas. Para clave de muestras, ver Fig. 5 177

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21) Fig. 7. Hierro acumulado durante cada perodo de extraccin y Fe liberado del suelo durante
cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA en muestras de suelos seleccionadas. Para
clave de muestras, ver Fig. 5 178
22) Fig. 8. Carbono orgnico (CO) acumulado durante cada perodo de extraccin y CO
liberado del suelo durante cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA en muestras de
suelos seleccionadas 179
23) Fig. 9. Silicio acumulado durante cada perodo de extraccin y Si liberado del suelo durante
cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA 180
24) Fig. 10. Dependencia temporal de la adsorcin total de P por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo. Clave de muestras: A= BC Bw;
B= LL A; C= LE Bw; D= LE A; E= LE-50; F= LE-200; G= LE A (arc 1 ext.); H= LE Bw
(30000g); I= LE Bw (50000g, 4C); J= LE A (30000g); K= LE A (50000g, 4C); L= LE-50
(30000g); M= LE-50 (50000g, 4C); N= LE-200 (30000g); O= LE-200 (50000g, 4C) 181
25) Fig. 11. Dependencia temporal de la adsorcin total de Al por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo. Claves ver Fig. 10 182
26) Fig. 12. Dependencia temporal de la adsorcin total de Fe por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo 183
27) Fig. 13. Dependencia temporal de la adsorcin total de CO por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo 184
28) Fig. 14. Dependencia temporal de la adsorcin total de Si por las siete MIA empleadas durante
las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo 185
29) Fig. 15. Dependencia temporal de la adsorcin total de P por las siete MIA empleadas durante
las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos cinticos
explicados en el texto 186-187
30) Fig. 16. Dependencia temporal de la adsorcin total de Al por las siete MIA empleadas durante
las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos cinticos
explicados en el texto 188-189
31) Fig. 17. Dependencia temporal de la adsorcin total de Fe por las siete MIA empleadas durante
las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos cinticos
explicados en el texto 190-191
32) Fig. 18. Dependencia temporal de la adsorcin total de Fe por las siete MIA empleadas durante
las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos cinticos
explicados en el texto 192-193

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33) Fig. 19. Dependencia temporal de la adsorcin total de Si por las siete MIA empleadas durante
las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos cinticos
explicados en el texto 194-195

IV. ANEJOS: CALIBRADO DE P DISPONIBLE Y ENSAYOS BIOLGICOS EN


SUELOS VOLCNICOS CON ELEVADA CAPACIDAD DE RETENCIN DE
FOSFATO

IV. 1. Anejo 1: CAMBIOS EN LAS FRACCIONES DE P EN UN ANDISOL,


INDUCIDOS POR LA INFECCIN DE MICORRIZAS ARBUSCULARES EN CULTIVOS DE
TAGASASTE (Chamaecytisus proliferus ssp. proliferus var. Palmensis)

34) Fig. 1. Esquema procedimental del fraccionamiento del P. POL: P en el extracto de HCO3-
determinado por colorimetra directa. Este incluye, en principio, tanto compuestos inorgnicos
como orgnicos "lbiles" del P; POLC: contenido en P del extracto de HCO3- despus de su
tratamiento con carbn activo para remover la mayor parte del P orgnico; PEN: P hidrolizable
por la enzima fosfatasa, potencial fuente de P biodisponible; PT: contenido de P total en los
extractos de HCO3- medido colorimtricamente despus de digestin (autoclave) con K2S2O8 y
H2SO4 5N 209

IV. 2. Anejo 2: CALIBRADO DE P DISPONIBLE EN SUELOS CON ALTA


CAPACIDAD DE RETENCIN POR LOS MTODOS DE LA MEMBRANA DE
INTERCAMBIO INICO Y OLSEN EN MAZ (Zea mays L.)

35) Fig. 1. Rectas de regresin del POL ()y Cl-P () frente a los tratamientos con P en la
muestra Esperanza 220
36) Fig. 2. Rectas de regresin del POL ()y Cl-P () frente a los tratamientos con P en la
muestra Karting 220
37) Fig. 3. Absorcin de P por las plantas frente a los tratamientos con P en las muestras
Karting () y Esperanza () 221

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RELACIN DE TABLAS

I. INTRODUCCIN

1) Tabla 1. Algunos ejemplos de minerales de la familia del apatito 5


2) Tabla 2. Relacin entre el grado de disponibilidad y las fracciones de P de la extraccin
secuencial de Hedley et al. (1982) (adaptada de Cross y Schlesinger, 1995) 10

II. SUELOS Y TCNICAS ANALTICAS

3) Tabla 1. Clasificacin de los suelos y algunas de sus propiedades ms relevantes 17

III. RESULTADOS Y DISCUSIN

III.1. EXTRACCIN DE FSFORO CON NaHCO3 0,5 M (pH=8,5): CONDICIONES DE


EXTRACCIN Y VARIABILIDAD DE SUS FRACCIONES

4) Tabla 1. Fraccionamiento del P en los extractos de bicarbonato (mg kg-1), centrifugados a dos
temperaturas diferentes (4 o 20C) 29

5) Tabla 2. Fraccionamiento del COD, Al y Fe en los extractos de bicarbonato (mg kg-1),


centrifugados a 4 o 20C 30
-1
6) Tabla 3. Fraccionamiento del P en los extractos de bicarbonato (mg kg ), filtrados por 0,45
m y centrifugados a 4 o 20C 31
7) Tabla 4. Fraccionamiento del COD, Al y Fe en los extractos de bicarbonato (mg kg-1),
filtrados por 0,45 m y centrifugados a 4 o 20C 32
8) Tabla 5. Fosfato hidrolizable por la enzima fosfatasa alcalina en los extractos de bicarbonato
(mg kg-1) 34
9) Tabla 6. Fracciones de P particulado (> 0,45 m) en los extractos de bicarbonato (mg kg-1) y
centrifugados a 4 o 20C 38
10) Tabla 7. Fracciones de COD, Al y Fe particulado (> 0,45 m) en los extractos de
bicarbonato (mg kg-1) y centrifugados a 4 o 20C 39
11) Tabla 8. Fraccionamiento del P en extractos de bicarbonato (mg kg-1) de muestras
fumigadas y centrifugados a 4 o 20C 40
12) Tabla 9. Fraccionamiento del COD, Al y Fe en los extractos de bicarbonato (mg kg-1) de
muestras fumigadas con cloroformo y centrifugados a 4 o 20C 41

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

13) Tabla 10. Fraccionamiento del P en los extractos de bicarbonato (mg kg-1) de muestras
fumigadas con cloroformo, filtrados por 0,45 m y centrifugados a 4 o 20C 42
14) Tabla 11. Fraccionamiento del COD, Al y Fe en los extractos de bicarbonato (mg kg-1) de
muestras fumigadas con cloroformo, filtrados por 0,45 m y centrifugados a 4 o 20C 43
15) Tabla 12. Fracciones de P particulado (> 0,45 m) en extractos de bicarbonato (mg kg-1) de
muestras fumigadas con cloroformo y centrifugados a 4 o 20C 44
16) Tabla 13. Fracciones de COD, Al y Fe particulado (>0,45m) en los extractos de
bicarbonato (mg kg-1) de muestras fumigadas con cloroformo y centrifugados a 4 o 20C
45
17) Tabla 14. Fracciones de P y COD microbiano y P hidrolizado por la enzima fosfatasa en los
extractos de bicarbonato (mg kg-1) de muestras fumigadas con cloroformo, filtradas por
Whatman No. 42 o por 0,45m y centrifugados a 4 o 20C ( desviacin estndar) 46

III.2.EXTRACCIN DE FSFORO CON AGUA: ASOCIACIONES


RGANOMINERALES [Al(Fe)-P-CIDO FLVICO] Y FASES INORGNICAS

18) Tabla 1. Fraccionamiento del P en extractos acuosos de suelos (mg kg-1) filtrados por 0,45 m
(DS: desviacin estndar, ESM: error estndar de la media) 63
19) Tabla 2. Ecuaciones de regresin que relacionan los valores de P-0,45m (PR y PT) en los
diferentes extractos acuosos. Los valores entre parntesis de la ecuacin representan las
relaciones w:s (l kg-1) (todos los suelos: n=29; suelos forestales: n=15; SEM: error estndar de la
media) 65
-1
20) Tabla 3. Efecto de la relacin w:s sobre la composicin de la disolucin del suelo (mg l )
68
21) Tabla 4. Fraccionamiento del P (mg kg-1) en los extractos acuosos-0,45 m de suelo a las dos
relaciones w:s (2,5:1 o 75:1 l kg-1) 70
-1
22) Tabla 5. Fraccionamiento del COD en los extractos acuosos-0,45 m (mg kg ) a las dos
relaciones w:s (2,5:1 o 75:1 l kg-1) 71
23) Tabla 6. Efecto de la relacin w:s sobre la composicin de la disolucin del suelo (mg l-1) en los
extractos filtrados por Whatman 42 74
-1
24) Tabla 7. Fraccionamiento del COD en los extractos acuosos (mg kg ) filtrados por Whatman
42 a las dos relaciones w:s (2,5:1 o 75:1 l kg-1) 75
25) Tabla 8. Fraccionamiento del P (mg kg-1) en los extractos acuosos de suelo en los extractos
filtrados por Whatman 42 a las dos relaciones w:s (2,5:1 o 75:1 l kg-1) 76

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

-1
26) Tabla 9. Fracciones de P (mg kg ) reactivas y no reactivas en los extractos acuosos de
suelo a las dos relaciones w:s (2,5:1 o 75:1 l kg-1) 77
-1 -1 -1
27) Tabla 10. Fracciones de COD (mg kg ) y Al (mg l ) en los extractos acuosos (mg kg ) con un
tamao de partcula >0,45 m a las dos relaciones w:s (2,5:1 o 75:1 l kg-1) 78
28) Tabla 11. Influencia de la dilucin (extractos-0,45m) sobre el P hidrolizado por la enzima
fosfatasa y sobre las fracciones de P, C y Al liberadas por el cloroformo (mg kg-1) ( error estndar
de la media) 80
-1 -1
29) Tabla 12. Anlisis de P, Al (mol l ) y COD (mg l ) en los dializados y en las
disoluciones exteriores en los extractos 2,5:1 83
30) Tabla 13. Actividades de P y Al, pH y productos de actividades inicas (PAI) para los
slidos considerados en todas las muestras de suelo estudiadas 85
31) Tabla 14. Valores de -log del producto de actividad inica (pPAI) respecto a la variscita y
Al(OH)2H2PO4 en los dializados de los extractos acuosos 90

III.3. ESTIMACIN DE LA FRACCIN TOTAL DISPONIBLE DEL FSFORO


MEDIANTE LA TCNICA DE DILUCIN ISOTPICA EN SUELOS NDICOS
NATURALES Y FERTILIZADOS: TRANSFERENCIA DE P ENTRE LOS
CONSTITUYENTES DEL SUELO Y DISOLUCIN

32) Tabla 1. Concentracin de P en la disolucin del suelo (Cp) despus de aadir el P radiactivo
durante el experimento de intercambio isotpico y cantidad de P intercambiado isotpicamente
hasta 1 min (E1min) en las muestras estudiadas 106
33) Tabla 2. Constantes medias de velocidad de intercambio y de flujo transferido (Fardeau et al.,
1991) 109
34) Tabla 3. Contenido de P (mg kg-1) en las diferentes fracciones intercambiables calculadas a
partir del anlisis multicompartimental (Ec. 7) de Fardeau (1993) 110
35) Tabla 4. Balance del P en los extractos y eluatos y disoluciones remanentes de la MIA (g l-1
ESM) 114
36) Tabla 5. Caracterizacin de los extractos y eluatos de resina 114
37) Tabla 6. Anlisis de la radioactividad en los extractos (Cp), eluatos de la membrana de resina
(NaCl y NaOH) y su sobrenadante (cpm) 115
38) Tabla 7. Anlisis compartimental de las fracciones de P despus del intercambio isotpico
en las muestras fertilizadas, previas al tratamiento con la membrana de intercambio aninico
(MIA). Cp-PR y Cp-PT= P reactivo y total de los extractos (g l-1), E (mg kg-1), tiempo = 1
minuto, 1 da y 40 das 115

XVII
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

39) Tabla 8. Anlisis compartimental de las fracciones de P despus del intercambio isotpico
en las muestras fertilizadas y posterior extraccin con membrana de intercambio aninico
(MIA). Cp-Cl-PR y Cp-OH-PR = P reactivo en los eluatos de NaCl y NaOH en la MIA (g l-1);
E(mg kg-1), tiempo = 1 minuto, 1 da y 40 das 116
40) Tabla 9. Anlisis estocstico del intercambio isotpico en los eluatos de las membranas de
resina de las muestras fertilizadas. Km (min-1), Tm (min), Fm (mg kg-1 min-1), CpR = P reactivo (g l-
1
), CpT= P total del extracto (g l-1), MIACl = membrana eluda con NaCl (g l-1), MIAOH =
membrana eluda con NaOH (g l-1), MIAt = PR[eluato NaCl + NaOH (g l-1)]. Las
concentraciones empleadas para calcular el parmetro F se expresaron en mg kg-1 min-1 118

III.4. DESORCIN DE FSFORO DISPONIBLE EN SUELOS DE ORIGEN


VOLCNICO MEDIANTE EL USO DE RESINAS DE INTERCAMBIO ANINICO

41) Tabla 1. Resumen de los experimentos realizados con los diferentes tipos de
intercambiadores aninicos 133
42) Tabla 2. Caractersticas ms importantes de las resinas empleadas 135
43) Tabla 3. Cantidades de P y S extrados por la resina Dowex y fraccionamiento del P en la
suspensin sobrenadante (muestras V: cultivadas) 140-141
44) Tabla 4. Cantidades de P y S extrados por la MIA y fraccionamiento del P en la suspensin
sobrenadante (V: cultivadas) 142-143
45) Tabla 5. Cantidades de P y S extrados por la resina Merck y fraccionamiento del P en la
suspensin sobrenadante (muestras V: cultivadas) 144-145
46) Tabla 6. Cantidades de Al, Si y Fe en equilibrio extrados por las diferentes resinas (mg kg-1) en
la suspensin sobrenadante (muestras V: cultivadas) 147-148
47) Tabla 7. Caractersticas de los eluatos de MIA procedentes de las eluciones secuenciales 152
48) Tabla 8. Fraccionamiento del P en los eluatos de MIA (Cl- y Bi-) para el suelo La Esperanza A
(mediaESM) 152
49) Tabla 9. Fraccionamiento del P en los eluatos de MIA (Cl- y Bi-) para el suelo Karting A
(mediaESM) 153
50) Tabla 10. Fraccionamiento del P en los eluatos (Cl- y Bi-) para cada tratamiento con MIA
(mediaESM; l.d.: lmite deteccin) 157-158
51) Tabla 11. Fraccionamiento del P en los eluatos (Cl- y Bi-) para cada relacin w:s y con una MIA
(mediaESM; l.d.: lmite deteccin) 159-160
52) Tabla 12. Fsforo reactivo (PR) en funcin de la relacin w:s (sin MIA) en los suelos del
experimento (2) (mediaESM) 161

XVIII
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

53) Tabla 13. Cantidades de P, carbono orgnico (CO), Al, Fe y Si en las suspensiones
sobrenadantes en funcin del nmero de membranas (mediaESM) 162-163
54) Tabla 14. Cantidades de P, carbono orgnico disuelto (CO), Al, Fe y Si en las suspensiones
sobrenadantes en funcin de la relacin w:s (mediaESM) 164-165
-1
55) Tabla 15. Relaciones molares (mol mol ) entre el P y el CO, Al, Fe y Si extrados (Cl-+Bi-) por
las membranas en funcin del nmero de MIA empleadas 167
56) Tabla 16. Relaciones molares (mol mol-1) entre el P y el CO, Al, Fe y Si extrados (Cl-+Bi-)
por las membranas en funcin de la relacin w:s (l kg-1) 167
57) Tabla 17. Cantidades acumuladas de P, carbono orgnico disuelto (CO), Al, Fe, Si y S extradas
por la MIA despus de 96 h de extraccin secuencial (media de dos observaciones) (mol MIA-1 y
mg kg-1 de suelo respectivamente) 170
58) Tabla 18. Cantidades de P, carbono orgnico disuelto (CO), Al, Fe, Si y S en la disolucin del
suelo resultante despus de 96 h de extraccin secuencial (media de dos observaciones) (mg kg-1 de
suelo) 171
59) Tabla 19. Relaciones molares entre los diferentes elementos encontrados en los eluatos despus
de seis extracciones secuenciales con MIA 196

IV. ANEJOS: CALIBRADO DE P DISPONIBLE Y ENSAYOS BIOLGICOS EN


SUELOS VOLCNICOS CON ELEVADA CAPACIDAD DE RETENCIN DE
FOSFATO

IV. 1. Anejo 1: CAMBIOS EN LAS FRACCIONES DE P EN UN ANDISOL,


INDUCIDOS POR LA INFECCIN DE MICORRIZAS ARBUSCULARES EN CULTIVOS DE
TAGASASTE (Chamaecytisus proliferus ssp. proliferus var. Palmensis)

60) Tabla 1. Valores de P extrable con bicarbonato POL (mg kg-1) antes y despus del cultivo
(mediasESM) 210
-1
61) Tabla 2. Valores de POLC, PW3 y PEN (mg kg ) para los niveles P0 y P2 211

IV. 2. Anejo 2: CALIBRADO DE P DISPONIBLE EN SUELOS CON ALTA


CAPACIDAD DE RETENCIN POR LOS MTODOS DE LA MEMBRANA DE
INTERCAMBIO INICO Y OLSEN EN MAZ (Zea mays L.)

XIX
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

62) Tabla 1. Valores medios de POL y Cl-P en funcin del tratamiento aplicado a los suelos
(desviacin estndar) 219

XX
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

SMBOLOS QUE APARECEN CON MS FRECUENCIA EN EL TEXTO

Al, Fe, Si, S: aluminio, hierro, silicio y azufre. Para estos elementos es de aplicacin las
abreviaturas que acompaan al fsforo (pe.: Alf, Feh, AlD, etc.).
Al-4: Al monmero
Bi-: eluato de NaHCO3 0,5 M procedente de resina o MIA
Cl-: eluato de NaCl 1M procedente de resina o MIA
CO: carbono orgnico
COD: carbono orgnico disuelto
CODf: carbono orgnico disuelto asociado a la fraccin flvica de la materia orgnica
CODh: carbono orgnico disuelto asociado a la fraccin hmica de la materia orgnica
CODD: carbono orgnico disuelto en dializado
CODM: carbono orgnico disuelto asociado a la fraccin microbiana
Cp: concentracin de iones P en disolucin
E1min: fsforo intercambiado isotpicamente hasta 1 min
MIA: membrana de intercambio aninico
OH-: eluato de NaOH 1M procedente de MIA
P: fsforo
PAI: producto de actividad inica
Pc: fsforo en eluatos de resina despus de tratamiento con carbn activo
PD: fsforo dializado
PEN: fsforo hidrolizable por la enzima fosfatasa
Pf: fsforo asociado a la fraccin flvica de la materia orgnica
Ph: fsforo asociado a la fraccin hmica de la materia orgnica
PI: fsforo inorgnico
PINRA: fsforo orgnico insoluble no reactivo en medio cido
PM: fsforo microbiano
PND: fsforo no dializable
PNR: fsforo acuoso no reactivo
PO: fsforo orgnico
POL: fsforo Olsen
POLA: fsforo Olsen + reactivo citrato-arsenito
POLC: fsforo Olsen despus de tratamiento con carbn activo
POP: fsforo Olsen particulado
PP: fsforo acuoso particulado
PR: fsforo acuoso reactivo

XXI
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) ndice

PRC: fsforo acuoso reactivo despus de tratamiento con carbn activo


PSRA: fsforo soluble reactivo en extracto acuoso acidificado
PSTA: fsforo soluble total en extracto acuoso acidificado
PT: fsforo total
PTI: P total en extracto acidificado
PW3: fsforo acuoso para relacin w:s=3
R, r: radiactividad introducida y remanente en disolucin, respectivamente
sob: sobrenadante de resina
w:s: relacin agua/suelo

XXII
CAPTULO I:

INTRODUCCIN
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

por su importancia agronmica y ambiental.


1. Planteamiento y objetivos
Precisamente, en la definicin de
propiedades ndicas se encuentra un
Los suelos de origen volcnico, parmetro de retencin de fosfato.
especialmente los Andosoles y suelos con En el Departamento de Edafologa y
propiedades ndicas presentan un Geologa de la Universidad de La Laguna
comportamiento nico respecto a otros se ha venido desarrollando una lnea de
tipos de suelos, tanto en sus caractersticas investigacin sobre el fsforo en Andosoles
fsicas como qumicas. Destaca su notable y suelos ndicos que combina el estudio de
1
capacidad de sorcin especfica de cationes la qumica del fsforo con otras medidas de
y aniones, incluyendo compuestos reactividad de los materiales ndicos, con el
orgnicos. Esta capacidad se debe a sus fin de comprender los mecanismos de
elevados contenidos en materiales amorfos, interaccin del fsforo con estos materiales
o de ordenacin de corto alcance: silicatos y los efectos en sus propiedades (carga
de aluminio (alofana e imogolita) y oxi- superficial, propiedades fsicas) y su
hidrxidos de hierro y aluminio, de gran biodisponibilidad. Estos trabajos se irn
superficie especfica, lo que, unido a la citando a lo largo de esta Memoria.
accesibilidad de grupos funcionales Destacamos de los resultados de esta
superficiales hidroxilados, confiere al investigacin -llevada a cabo en el
conjunto una gran reactividad qumica. A la laboratorio, en el invernadero y en el
misma tambin contribuyen los compuestos campo- la gran dependencia que presentan
rganominerales, principalmente los las reacciones del fsforo en estos tipos de
complejos entre las molculas hmicas y suelos de las condiciones de humedad, pH y
aluminio y hierro, frecuentemente concentracin de fsforo, as como la
hidroxilados. estrecha relacin entre este elemento y el
No es de extraar que la investigacin aluminio, hierro amorfos y la materia
de la dinmica del fsforo en estos tipos de orgnica.
suelos haya adquirido un gran desarrollo En este contexto, el objetivo del
1 presente trabajo se centra en interpretar las
Se emplea en este trabajo la palabra sorcin
(procedente del ingls sorption) utilizando la interacciones del fsforo con el aluminio,
definicin dada por Barrow (1987): este trmino
indica el conjunto del proceso de eliminacin hierro y materia orgnica en Andosoles y
del P de la disolucin del suelo, bien mediante suelos ndicos, su interaccin con la
adsorcin, por haber penetrado en la superficie
adsorbente formando una unin tridimensional disolucin del suelo y sus repercusiones en
(el in adsorbido se encuentra localizado sobre
la superficie de la fase slida), o bien por la biodisponibilidad del fsforo. Para ello,
precipitacin. La primera referencia de la que se han investigado los siguientes aspectos
hemos tenido noticia sobre el empleo de este
trmino aplicado al anlisis de suelos en de la interaccin entre las fases slida y
publicaciones en castellano en Espaa
corresponde a Guadalix y Pardo (1990). lquida: (1) especiacin de la disolucin del

2
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

suelo y de diferentes extractos de suelos, (2) Debido a la alta retencin de fosfato que
utilizacin de ensayos enzimticos para presentan estos suelos es frecuente que no
diferenciar el fsforo orgnico del rgano- haya respuesta a la fertilizacin fosfatada y
mineral, (3) utilizacin de tcnicas que sea necesario sobrefertilizar para
isotpicas, (4) utilizacin de resinas de alcanzar los niveles de saturacin de fsforo.
intercambio aninico y (5) calibrado del Como consecuencia de las altas dosis de
fsforo disponible en ensayos biolgicos. fertilizantes aplicadas y el alto poder de
fijacin de estos suelos, la proporcin de
2. El problema de la estimacin del P fertilizante inmediatamente disponible para
disponible los cultivos es muy baja y, por tanto, cabe
esperar un efecto residual de P en sucesivas

Los Andosoles y suelos con cosechas.

caractersticas ndicas, propios de zonas El principal problema que se plantea es la

volcnicas y de gran importancia agrcola y puesta a punto de tcnicas estimativas del P

forestal en las Islas Canarias, presentan una disponible. Su propsito no es otro que

gran afinidad por el in ortofosfato por parte determinar la cantidad de P complementario,

de los compuestos activos de Fe y Al tanto de necesario para evitar posibles prdidas

naturaleza orgnica como rganomineral econmicas debidas a la deficiencia de este

(Wada, 1980). Estas elevadas capacidades de macronutriente en los cultivos (Fixen y

retencin no implican necesariamente una Grove, 1990). As, desde que Dyer utilizara a

inmovilizacin del fsforo en el suelo finales del siglo XIX el cido ctrico como

(Hernndez-Prez, 1991); de ah la extractante del P disponible, han ido

importancia del estudio de la reversibilidad apareciendo distintos procedimientos

del fosfato retenido en funcin de los encaminados a tal fin. Sin embargo, la gran

diferentes componentes del suelo. diversidad de formas del fsforo en el suelo

Tanto los procesos implicados en la constituye una de las principales causas del

reversibilidad de la retencin de fosfato como desarrollo de diferentes metodologas

en la cintica de desorcin juegan un papel analticas encaminadas a extraer aquellas

determinante en la eficacia de los fertilizantes fracciones de P de fcil disponibilidad para la

fosfatados aplicados y en su solubilidad en el planta.

suelo, incidiendo directamente en el Los mtodos ms ampliamente utilizados

aprovechamiento del P disponible por parte en la determinacin del P disponible

de las plantas. En suelos volcnicos, la encuentran su base en la extraccin qumica.

cantidad de P disponible es baja en En principio, se buscaba un reactivo que

comparacin con el fsforo total lo cual fuese capaz de solubilizar la misma cantidad

parece constituir un factor limitante en el de fosfatos del suelo que las races de las

rendimiento de los cultivos. plantas, ignorando que las diferentes especies

3
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

vegetales pueden extraer cantidades materia orgnica, el fsforo orgnico y la


diferentes de fosfatos en el mismo suelo propia dinmica qumica del P en los
(Wild, 1992). A esto hay que unir el diferentes tipos de suelos (Sharpley, 2000).
desplazamiento de los equilibrios existentes Por otra parte, los bajos niveles de P en la
en el suelo debido a la propia naturaleza del disolucin del suelo han dado pie a
agente extractante y, sobre todo, al pH de numerosos trabajos que describen las
extraccin. relaciones que existen entre el P en
Esta problemtica ha sido motivo de disolucin y el resto de fracciones que
estudio en diferentes pases y zonas agrcolas interaccionan con l; es por ello que en los
de todo el mundo, donde los mtodos de ltimos quince aos haya aumentado el
rutina utilizados como cuantificadores del inters por los procesos de mineralizacin del
fsforo no reflejan las respuestas de los P orgnico, por ser este la principal reserva
cultivos, ni las necesidades de fertilizacin de P potencialmente disponible de los suelos.
(Kamprath y Watson, 1980). En el caso de Aunque la mayor parte del fsforo
los Andosoles y otros suelos de carga orgnico del suelo esta considerado como
variable, este problema es mucho ms inerte y su estructura lo hara no disponible
acusado; en este tipo de suelos, las por las plantas, recientes estudios parecen
calibraciones utilizadas habitualmente para indicar que el fosfato en la disolucin del
evaluar las necesidades de los cultivos suelo esta muy ligado a la fraccin lbil del P
fracasan estrepitosamente (Fox, 1980). orgnico debido a la rapidez con que
El establecimiento de planes de transcurre el ciclo del P, atribuible en gran
fertilizacin en los cultivos ha llevado a la medida a la biomasa del suelo (McLaren y
necesidad de encontrar nuevos mtodos de Cameron, 1990). El fosfato liberado de los
anlisis de suelos, orientativos de sus organismos muertos y en descomposicin
necesidades ms inmediatas. De esta manera, mediante ruptura enzimtica (mineralizacin)
el cultivo no slo estara bien nutrido, sino podra ser inmovilizado nuevamente, en
que adems, la utilizacin de cantidades parte, por la biomasa mientras que el resto
ptimas de fertilizantes, repercutira podra ser tomado por las races de las
favorablemente en el ahorro en los costes de plantas. Siguiendo esta va, la biomasa podra
produccin, en la conservacin de recursos ayudar a mantener la disponibilidad del
naturales y en reducir la contaminacin. fosfato para las plantas y en cierta medida,
Adems de todas las ventajas e "proteger" a los iones fosfato de las
inconvenientes que por su propio origen los reacciones de fijacin.
mtodos qumicos de extraccin puedan Debido a la relacin existente entre la
tener, no cabe duda que existen otros factores disponibilidad del fosfato y el P orgnico,
que afectan a los valores obtenidos por cada hemos realizado una pequea sntesis de los
uno de ellos. Entre estos factores tenemos la mtodos de extraccin del P disponible en el

4
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

Tabla 1. Algunos ejemplos de minerales de la familia del apatito

Mineral Frmula qumica


Florapatito 3Ca3(PO4)2CaF2
Hidroxiapatito 3Ca3(PO4)2Ca(OH)2
Carbonato apatito 3Ca3(PO4)2CaCO3
Cloroapatito 3Ca3(PO4)2CaCl2

suelo y el estado actual de las investigaciones Schlesinger, 1988) como por el tipo de
del papel que desempea el P orgnico en el horizonte (Wood et al., 1984). De aqu la
ciclo del macronutriente y su importancia gran estabilidad que presenta el P en el suelo,
dentro de la edafognesis. siendo su poder limitante para el desarrollo
de las plantas muy superior al del Ca e
3. El fsforo en el suelo incluso al del K.
En el suelo no existe P en su forma libre,
El P juega un papel esencial en todos los sino combinado en fosfatos de diferente
procesos metablicos de los seres vivos. naturaleza y estado, procedentes del material
Procesos bioqumicos especializados como la de origen o de los fertilizantes aadidos. El
respiracin en los mamferos, la fotosntesis material de origen de un suelo contiene
en las algas o el fitociclaje microbiano de la fundamentalmente fosfatos de Ca, agrupados
materia vegetal en descomposicin no seran dentro de la familia del apatito (Tabla 1).
posibles sin unos niveles de P adecuados. Por Estos compuestos son poco solubles en
esta razn, la distribucin y el flujo de las suelos neutros y alcalinos y se hidrolizan a
diferentes formas del P podran indicarnos medida que progresa la alteracin y el
los niveles y tipos de actividad bioqumica desarrollo del suelo, pasando a formar parte
que tienen lugar en un ecosistema (Cole et de su fase disolucin. El P en disolucin
al., 1977). puede ser retenido por las superficies
En los suelos, la existencia de diferentes minerales, precipitando con algunos cationes
formas de P est condicionada por los o ser incorporado a la biomasa y a la materia
procesos edficos que afectan a su orgnica del suelo. Durante el proceso de
disponibilidad; de esta manera, una gran alteracin, se produce una prdida de bases
variedad de procesos biolgicos y por lavado, generndose oxi-hidrxidos de
geoqumicos interactuarn para controlar la Al y Fe, seguido por la formacin de fosfatos
cantidad de P disponible en el suelo (Tiessen secundarios de Fe o Al (Hsu, 1977).
et al., 1984; Smeck, 1985). La importancia El contenido total de P en los suelos es
relativa de estos procesos puede variar tanto relativamente bajo. En suelos minerales de
por el tipo de ecosistema (Lajtha y zonas templadas, su contenido suele variar

5
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

entre 0.02 y 0.08% (200-800 ppm), si bien de ecosistemas jvenes, con suelos ligeramente
esta cantidad el porcentaje del P orgnico alterados, la mayor parte del P proviene de
oscila entre el 25 al 75% (Wild, 1992). Como los minerales primarios, cuya alteracin da
excepcin, los suelos jvenes procedentes de lugar a una fraccin lbil de disponibilidad
cenizas volcnicas, caso de los Andosoles, inmediata para las plantas. En ecosistemas
presentan un mayor contenido de P total, con un moderado rgimen de alteracin, gran
especialmente los desarrollados a partir de parte del P se encuentra formando parte de
piroclastos de composicin basltica. compuestos orgnicos o adsorbidos a
El contenido de P es mayor en los minerales secundarios de arcilla. Finalmente,
horizontes superficiales, disminuyendo al aquellos ecosistemas con suelos altamente
aumentar la profundidad debido a la alterados, presentan formas de P no lbiles,
disminucin en el contenido de materia ocluidas o formando parte de compuestos
orgnica. Asimismo, el contenido en P, sus orgnicos estables.
formas y su distribucin, parecen depender El conocimiento sobre la procedencia,
de la textura del suelo, de forma que cuanto evolucin y comportamiento de cada una de
ms fina sea su textura mayor ser su estas formas de P es importante desde el
contenido en P y viceversa (O'Halloran et al., punto de vista de la nutricin de los cultivos,
1987). ya que no todas estn disponibles para los
mismos y en ocasiones estas formas a priori
4. Formas de P en el suelo no disponibles pasan a serlo a travs de
procesos propios del suelo, o con la
Las cantidades y formas en las que el P participacin de microorganismos.
puede presentarse varan de acuerdo con los Sin embargo, los qumicos del suelo no
factores de formacin del suelo (Walker, han encontrado una terminologa general que
1965; Smeck, 1973). En este sentido, Walker agrupe las diversas formas en que se
(1965) indica el importante papel que encuentra el P. A pesar de que los reactivos
desempeara este elemento durante la de extraccin utilizados habitualmente no
edafognesis debido a su papel ecolgico. separan claramente ni agrupan las formas
Ms tarde, Cole y Heil (1981) discutieron la discretas de P en el suelo, la mayora de los
influencia de la concentracin de P sobre la investigadores las clasifican segn el tipo de
tendencia del C y el N a acumularse durante extractantes empleados. La ventaja de esta
la formacin del suelo. terminologa radica en que se pueden
Por otro lado, Walker y Syers (1976) establecer relaciones entre las diversas
sugieren que tanto los procesos edafognicos formas, su evolucin y la transformacin que
como el grado de intensidad con que un suelo sufren en el suelo.
se altera, condicionan la distribucin del P La clasificacin ms simple de las formas
total (PT) a medida que ste se desarrolla. En de P, nos lleva a dividirlas atendiendo a su

6
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

naturaleza primaria. As, tendramos la explicar los procesos de transformacin del P


fraccin total de P (PT) del suelo que a su durante la edafognesis (Westin y Brito,
vez se subdivide en otras dos, la fraccin 1969; Smeck, 1973). Sin embargo, este
inorgnica (PI) asociada al P de naturaleza mtodo no diferencia las fracciones del PO,
mineral y la fraccin orgnica (PO) asociada las cuales no son slo importantes per se,
a la materia orgnica del suelo. La relacin sino que parecen jugar un papel relevante en
entre las tres fracciones vendra dada por: la nutricin vegetal.
Hedley y Stewart (1982) y Hedley et al.
PT= PI + PO (1982) proponen un fraccionamiento
conociendo la fraccin total y la inorgnica, secuencial (Fig. 1) que intenta examinar a
por diferencia obtendramos la fraccin travs del anlisis del P en extractos de
orgnica. suelos no slo el PI, sino tambin las formas
Sin embargo esta visin holstica no lbiles y ms estables del PO en suelos
diferencia entre las formas qumicas de sometidos a diferentes condiciones de
naturaleza inorgnica como orgnica del P en incubacin y manejo. Mediante este
el suelo. Por ejemplo, entre los fosfatos fraccionamiento, los iones fosfatos son
inorgnicos se pueden distinguir formas bien extrados de la disolucin del suelo mediante
definidas y cristalizadas, formas amorfas, los resinas de intercambio aninico, mientras que
fosfatos adsorbidos y los presentes en la las formas de P inorgnico y orgnico se
disolucin del suelo. Por otra parte, tampoco extraen secuencialmente utilizando reactivos
nos da cuenta de la naturaleza de la fraccin y condiciones de agresividad progresiva.
disponible o asimilable para la planta, ni los
2
Con anterioridad al fraccionamiento de
procesos que pueden gobernar la distribucin Hedley, numerosos mtodos de extraccin y
y transformacin del P. digestin fueron diseados para cuantificar la
El fraccionamiento del P unido al cantidad de P disponible para las plantas y el
carbonato clcico o a los minerales de Fe y P geoqumicamente fijado. As, en suelos
Al desarrollado por Chang y Jackson (1957), alcalinos el P disponible se determinaba en
o cualquiera de sus posteriores extractos de NaHCO3 (Olsen et al., 1954),
modificaciones (Jackson, 1958; Peterson y mientras que en suelos cidos, ste era
Corey, 1966; Williams et al., 1967), ha sido medido en extractos cidos (Bray y Kurtz,
utilizado para la caracterizacin del PI y para 1945). El P inorgnico se estimaba utilizando

2 la metodologa ya comentada de Chang y


A lo largo de este trabajo emplearemos el
trmino P disponible y no el de P asimilable ya Jackson (1957). La fraccin de P total en el
que este ltimo es mucho ms restrictivo que el
primero, pues puede ocurrir que de todo el P del suelo era determinada a travs de tcnicas de
suelo disponible para la planta solo una parte digestin, ignicin o fusin (Metha et al.,
sea asimilable por ella ya que su absorcin por
las races depende de la forma qumica en que 1954; Dormaar y Webster, 1964; Dick y
se encuentre y cuan exigente sea la planta hacia
el macronutriente. Tabatabai, 1977a; Lajtha and Schlesinger,

7
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

Figura 1. Esquema del fraccionamiento secuencial del P desarrollado por Hedley et al.
(1982)
Suelo Resina intercambio aninico Dowex 1x8 PI-res

Residuo Extraccin NaHCO3 0.5M (pH=8.5) P-NaHCO3 (PI y PO)

Residuo Extraccin NaOH 0.1M P-NaOH (PI y PO)

Residuo Extraccin NaOH 0.1M + Ultrasonido P-NaOHus (PI y PO)

Residuo Extraccin HCl 1.0M P-HCl (PI)

Suelo residual Digestin H2SO4 + H2O2 P-residual (PT)

1988; Condron et al., 1990; Fox et al., 1990). formas orgnicas e inorgnicas del P en el
Combinando resultados, se poda establecer suelo las podemos agrupar en:
la cantidad de P que corresponda a cada una
de las fracciones. - Minerales primarios: minerales asociados
La principal ventaja del esquema de al apatito los cuales son extrables por cidos
Hedley sobre estos mtodos es que con la como el HCl. Consistira en la forma ms
misma muestra de suelo, tratada estable de PI debido a la baja solubilidad que
secuencialmente con diversos reactivos, se presentan estos minerales (Schoenau et al.,
puede establecer la proporcin existente entre 1989).
las diferentes fracciones de P en la muestra,
separando las formas potencialmente - P soluble: extrable con agua o disoluciones
disponibles de otras que no lo son (Tiessen y salinas (Van der Paaw, 1971; Sissingh,
Moir, 1993). 1971).
Utilizando la terminologa actualizada por
Cross y Schlesinger (1995), basada en el - P lbil: formas intercambiales
fraccionamiento qumico de Hedley, las isotpicamente, extrables con resinas

8
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

intercambiadoras de aniones o con NaHCO3. La reactividad de los minerales


Aunque Mattingly (1975) indicara la secundarios de P es variable debido a que
posibilidad de que la fraccin lbil pudiese a incluyen P cristalino, P amorfo y P no lbil
su vez subdividirse en otras series de sorbido (Wagar et al., 1986); adems, su
fracciones de diferentes energas de enlace, persistencia en el suelo es elevada debido a
con el trmino P lbil nos referiremos al P del su gran estabilidad termodinmica (Lindsay,
suelo que se equilibra rpidamente con la 1979), por tanto constituye una fraccin de
disolucin del suelo. Con esta definicin, el P menor disponibilidad. A la variscita se la
soluble formara parte de la fraccin ms relaciona con el P extrable con NH4F, a la
lbil del suelo (Cross y Schlesinger, 1995). El strengita con el extrable con NaOH
P lbil conformara la fraccin disponible a (inmovilizacin del Fe en forma de
corto plazo para las comunidades hidrxidos) y a los fosfatos de Ca con la
microbianas y vegetales, pues se desorbe extraccin en HCl.
rpidamente de la superficie de las partculas Smeck (1985) y Schoenau et al. (1989)
del suelo. El PI asociado sera el de mayor incluyen dentro de la fraccin no lbil al PI y
disponibilidad para las plantas ya que se el PO asociado a los compuestos hmicos y
encuentra adsorbido sobre las superficies adsorbidos a los xidos de Al y Fe. Este PO
cristalinas de compuestos de P (Wagar et al., estable formara parte de la reserva de P, por
1986) o sobre los coloides del suelo lo que su disponibilidad es a medio plazo
(Schoenau et al., 1989). La fraccin orgnica (Tiessen et al., 1984; Wagar et al., 1986).
PO, adsorbida sobre los coloides del suelo
(Schoenau et al., 1989), sera fcilmente - P ocluido: consiste en el encapsulamiento
mineralizada contribuyendo a la fraccin fsico del P por minerales que no presentan al
disponible (Tiessen et al., 1984; Wagar et al., macronutriente en su estructura, de esta
1986). manera est protegido frente a las otras
formas de P ms reactivas (Smeck, 1985), y
- P no lbil: incluyen minerales secundarios por tanto su disponibilidad sera a muy largo
de P, originados por quimisorcin, plazo; el P tiende a ocluirse en xidos de Fe
fundamentalmente xidos de Al y Fe y (hematite y goetita) y Al (gibbsita). Los
carbonatos, as como minerales formados a primeros se suelen relacionar con el P que se
bajas temperaturas de cristalizacin en los solubiliza mediante agentes reductores como
que el P es uno de sus componentes el citrato-bicarbonato-ditionito, mientras que
estructurales (Hedley et al., 1982; Smeck, el ocluido en la gibbsita con el extrable con
1985). En esta categora podemos incluir a NaOH. En esta categora estaran incluidos
los fosfatos amorfos y cristalinos de Al los minerales primarios (Schoenau et al.,
(variscita), Fe (strengita) y fosfatos de Ca, 1989).
bruscita, monetita y el fosfato octoclcico.

9
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

Tabla 2. Relacin entre el grado de disponibilidad y las fracciones de P de la extraccin


secuencial de Hedley et al. (1982a) (adaptada de Cross y Schlesinger, 1995).

PI-resina PI-NaHCO3 PI-NaOH PI-NaOHus

No ocluido No ocluido No ocluido Ocluido

Lbil Lbil Minerales Minerales


secundarios secundarios
Asociaciones humus- Agregados
Me-P protegidos

Alta biodisponibilidad Alta biodisponibilidad Baja No disponible


biodisponibilidad

PI-HCl PT-residual PO-NaHCO3 PO-NaOHus

Ocluido Ocluido No ocluido No ocluido

Minerales primarios Asociaciones Lbil, mineralizable No lbil,


inorgnicas y orgnicas por la biomasa del asociaciones muy
con minerales suelo estables de PO
silicatados como humus-Me-
PO

No disponible Baja disponibilidad Contribuye a la No disponible


disponibilidad

El PI ocluido tambin incluira al que se Na2CO3. En esta categora tambin se


encuentra en las superficies internas de los encuadraran los PO de mayor estabilidad y
agregados del suelo, al encapsulado en el asociaciones P-humus de baja
interior de los sesquixidos (Hedley et al., biodisponibilidad (Cross y Schlesinger,
1982; Wagar et al., 1986), al PI menos lbil 1995).
asociado con el interior de los fosfatos
amorfos de Fe y Al, y a gran parte del PI - P no ocluido: incluye al P extrado con
enlazado con el Ca (Tiessen et al., 1984). NaOH; se le considera como una fraccin
El P encapsulado por los minerales disponible a medio plazo. Incluira
silicatados, primarios o secundarios, tambin asociaciones rganominerales estables de PI
denominado P residual, requerira para su y PO (Wagar et al., 1986), as como las
solubilizacin de tratamientos ms fuertes asociaciones menos lbiles del PI con el
como la disolucin con HF o la fusin con exterior de los fosfatos amorfos de Fe y Al

10
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo I Introduccin

(Tiessen et al., 1984) o PI y PO Cross, A. F.; Schlesinger, W. H. 1995. A


quimiadsorbidos muy fuertemente a los literature review and evaluation of the

compuestos superficiales de Fe y Al (Hedley Hedley fractionation: Applications to the


biogeochemical cycle of soil phosphorus in
et al., 1982).
natural ecosystems. Geoderma 64, 197214.
Como podemos observar, la terminologa
Dick, W.A.; Tabatabai, M. A. 1977.
empleada ha sido interpretada por la
Determination of orthophosphate in aqueous
bibliografa de diversas maneras. En la Tabla
solutions containing labile organic and
2 se resumen las distintas fracciones de P y inorganic phosphorus compounds. Journal of
su grado de disponibilidad en los extractos Environmental Quality 6, 8285.
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13
CAPTULO II:

SUELOS Y TCNICAS ANALTICAS


Negrn Medina Tesis Doctoral( 2005) Captulo II Suelos y Tcnicas Analticas

1. Suelos gua de campo del Congreso Internacional de


Suelos Volcnicos, mientras que el segundo
En este estudio se han empleado diecisiete fue descrito por Rodrguez (1977).
muestras de suelos forestales de capas En estas muestras podemos distinguir los
superiores e inferiores (horizontes A y B) de siguientes grupos:
suelos derivados de materiales volcnicos
(Andosoles y suelos ndicos) procedentes de las Grupo 1.- Andosoles Alofnicos
islas de La Gomera, La Palma y Tenerife. El Todos los suelos de este grupo se
material de origen es basltico excepto para dos encuentran en situaciones climticas con
perfiles desarrollados sobre pumitas fonolticas. rgimen hdrico dico y bajo diferentes tipos
Como complemento a los suelos forestales de vegetacin, fundamentalmente bajo la
tambin se emplearon los suelos procedentes de asociacin Pinar-Fayal Brezal (La Esperanza)
dos reas cultivadas del norte (seis muestras) y y/o Laurisilva (Garajonay). Dentro de este
sur (ocho muestras) de Tenerife. Todas las grupo hay que distinguir los suelos con
muestras de suelo presentaban caractersticas carcter hdrico (tendencia a formar
ndicas. irreversiblemente agregados estables al secar)
como es el caso de perfil Bona.

1.1. Suelos Forestales Son Andosoles tpicos, en cualquiera de


los sistemas de clasificacin.

Las muestras de suelos forestales


estudiadas pertenecen a distintas tipologas: Grupo 2.- Andosoles Vtricos

Andisoles, Inceptisoles y Ultisoles con Se incluye en este tipo Andosoles con un

caractersticas ndicas. alto contenido en vidrio volcnico (superior al

Los perfiles Las Lajas, Bona, Garajonay y 30%), distintos grados de alteracin y con

La Esperanza se encuentran descritos en la rgimen hdrico xrico (Cho).

gua de campo del Congreso Internacional de


Suelos Volcnicos celebrado en Tenerife Grupo 3.- Andosoles rganominerales

(Departamento de Edafologa, 1984). Los En este grupo se encuentran Andosoles que

perfiles Cho I, Izaa y el Portillo fueron presentan un alto grado de alteracin y

descritos por Fernndez-Caldas y Tejedor evolucin hacia suelos con mucho menor

(1975). Para el calibrado de P, se emplearon contenido en materiales amorfos.

los horizontes superficiales del perfil La Para diferenciarlos de los grupos anteriores

Esperanza (horizonte A1) y Karting (horizonte los denominaremos Intergrados. Se incluye en

Ap); el primero de ellos descrito en la citada este grupo el perfil Las Lajas.

15
Negrn Medina Tesis Doctoral( 2005) Captulo II Suelos y Tcnicas Analticas

1.2. Suelos Cultivados Predominan en estos suelos materiales


piroclsticos de las series slicas que han
Suelos de La Victoria cubierto gran parte de las coladas de la serie III
Terraza caracterstica de la zona de y IV, quedando estos al descubierto en algunos
medianas altas del norte de la Isla de Tenerife ncleos. Dentro de los materiales piroclsticos
con unas dimensiones de (50x15) m. Est se distinguen los estratificados (normalmente
localizada en el municipio de La Victoria de cementados) y no estratificados. Estos ltimos
Acentejo a 600 m de altitud (16 27' 00", 28 25' se emplean en los aterrazamientos de la zona
55"), con una pluviometra anual que ronda los que han modificado la primigenia morfologa de
700 mm. Los materiales dominantes son la comarca. El rgimen de humedad en las zonas
basaltos de la serie III. La zona presenta fuertes bajas de estos aterrazamientos es ardico,
pendientes por lo que el uso natural de los suelos mientras que en zonas superiores es xrico.
es el pastizal, aunque las mejoras introducidas El elevado grado de erosin que presenta
(aterrazamientos) permiten clasificar el uso del esta zona, junto con la presencia de materiales
suelo dentro de la clase IV (Departamento de pumticos jvenes, dan cuenta del escaso grado
Edafologa, 1984). de evolucin de los suelos (Entisoles,
La vegetacin natural predominante es el Inceptisoles y Aridisoles), presentando unas
trbol (Oxalis spp.), el laurel [Laurus azorica caractersticas ndicas ms o menos acusadas.
(Senb.) Franco] y brezo (Erica arborea L.), Los cultivos de la zona son: papa, via y maz
mientras que los tipos de cultivos ms comunes (Zea mays L.)
son la papa (Solanum tuberosum L.) y la via
(Vitis vinifera L.). Los suelos predominantes son Todos los suelos cultivados empleados en
Andosoles y suelos pardos ndicos. En el este estudio fueron caracterizados por Espino
subsuelo es frecuente encontrar zonas muy Mesa (1991).
arcillosas (greda).
La fertilizacin est basada en la utilizacin 1.3. Caractersticas ms relevantes de las
de estircol (compost a base de elementos de muestras de suelo
vegetacin natural de la zona, un ao bajo las
cabras) y en una fertilizacin mineral muy Los nombres de los suelos (Soil Survey
variable en cuanto a cantidad y composicin, Staff, 1992) y algunas de sus propiedades se
aunque destacan las sales amnicas de tipo resumen en la Tabla 1 (se dan rangos de
sulfato y fosfato. Durante el mes de Junio, la valores cuando en cada subgrupo de suelo se
via es tratada con azufre en polvo. haya empleado ms de una muestra). El pH del

Suelos de Arico y Fasnia


16
Negrn Medina Tesis Doctoral( 2005) Captulo II Suelos y Tcnicas Analticas

17
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III Resultados y Discusin

suelo se midi en la suspensin acuosa b) Extraccin con agua (relaciones agua:suelo


(relacin 1:2,5), oscilando entre 4,0 y 7,2 en = 2,5:1; 25:1; 75:1) (van der Paaw, 1971).
los suelos forestales y entre 3,8 a 7,5 en las c) Extraccin con resinas aninicas
reas cultivadas. Los suelos contenan mucho (Sibbesen, 1977) y membranas de
sulfato sorbido, especialmente en los intercambio aninico (Cooperband y
horizontes B donde el sulfato desplazado por el Logan, 1994).
fosfato oscil entre los 160 y los 250 mmol kg- d) Intercambio isotpico (Morel et al., 1994).
1
(Arbelo, 1989).
El criterio ndico, extraccin de Al y Fe La evaluacin cuantitativa del P en los
con oxalato amnico (Alo+1/2Feo), fue diferentes extractos se realiz siguiendo el
siempre mayor al 2% en todas las muestras las mtodo colorimtrico propuesto por Murphy y
cuales presentaban una elevada capacidad de Riley (1962), referencia obligada en los
retencin de fosfato (>85%). Los Andosoles laboratorios de anlisis de suelos a nivel
alofnicos (definidos por la relacin molar en mundial y ampliamente utilizado en las
la alofana, Tabla 1) contenan solo pequeas determinaciones rutinarias de este elemento en
cantidades de filosilicatos (<5%). En los el Departamento de Edafologa y Geologa de
Andosoles rganominerales (relacin Al- la Universidad de La Laguna.
pirofosfato/Al-oxalato, Alp/Alo>0,5, Tabla 1) La determinacin espectrofotomtrica del
y en otros suelos ndicos solo se detect como P extrado es posible gracias a la
mineral de arcilla la haloisita, excepto en un proporcionalidad que se establece entre la
suelo que presentaba el estratificado smectita- concentracin de in ortofosfato y la
vermiculita. coloracin azul del complejo formado por
reduccin con cido ascrbico del
2. Tcnicas Analticas fosfomolibdato, formado al reaccionar el anin
fosfato con molibdato amnico (Porta et al.,
En cada captulo de esta memoria se 1986).
describen con detalle las tcnicas de El complejo formado posee absorciones
determinacin del P disponible y la caractersticas a 660 y 800 nm, si bien la
especiacin de los diferentes extractos. En sensibilidad para la primera longitud de onda
sntesis, los procedimientos empleados para las es un tercio de la correspondiente a la segunda
diferentes extracciones han sido las siguientes: (Jackson, 1974). Normalmente, las
determinaciones se realizan a una longitud de
a) Extraccin con bicarbonato sdico 0,5 M onda de 882 nm (Kuo, 1996).
(pH=8,5; relacin suelo:disolucin =1:20, El complejo azul formado cumple la ley de
tiempo de extraccin 30 min.) (Olsen et Lambert-Beer hasta valores de 2 mg l-1 en la
al., 1954). disolucin final de extractos de suelo (Kuo,
1996) mientras que para aguas lo cumple hasta
18
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III Resultados y Discusin

valores de 1 mg l-1 (ver sucesivas ediciones del Publicaciones de la Universidad de La Laguna,


Standard Meted for Water Analysis) que fue el Tenerife.

valor tomado como referencia en las Cooperband. L. R.; Logan, T. J. 1994. Measuring in
situ changes in labile soil P using anion
determinaciones analticas del P en este
exchange membranes. Soil Science Society of
trabajo. Por otro lado, la sensibilidad del
America Journal 58, 109-114.
mtodo es de 150 g l-1 con cubetas de 1 cm de
Departamento de Edafologa, Universidad de La
paso de luz (Kuo, 1996).
Laguna. 1984. Gua de Campo del Congreso
El procedimiento experimental seguido en Internacional de Suelos Volcnicos. Tenerife.
este trabajo para la determinacin Espino Mesa M. 1991. Caracterizacin de la Acidez
colorimtrica del P mediante el mtodo del en Suelos de Origen Volcnico.
cido ascrbico es el descrito por Kuo (1996). Secretariado de Publicaciones de la Universidad de
En la determinacin del P en los extractos de La Laguna, Tenerife.

bicarbonato (mtodo Olsen) tambin se emple Fernndez-Caldas, E.; Tejedor, M. L. 1975.


Andosoles de las Islas Canarias. Servicio de
el mtodo de Dick y Tabatabai (1977) que
Publicaciones de la Caja General de Ahorros de
modifica el mtodo de Murphy y Riley (1962)
Santa Cruz de Tenerife, Tenerife.
aadiendo una mezcla reactiva, junto con el
Jackson, M. L. 1974. Soil Chemical Analysis-
agente reductor, de citrato-arsenito con el fin
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III Resultados y Discusin

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Guide Book: Fieldtrip in Tenerife. Meeting on The
Soil as a Strategic Resource: Degradation
Processes. Dpto. de Edafologa y Geologa de la
Universidad de La Laguna y ESSC, Tenerife.
van der Paauw, F. 1971. An effective water
extraction method for the determination of plant
available soil phosphorus. Plant and Soil 34,
467-481.

20
CAPTULO III:

RESULTADOS Y DISCUSIN
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

CAPTULO III.1:

EXTRACCIN DE FSFORO CON NaHCO3


0,5 M (pH=8,5): CONDICIONES DE
EXTRACCIN Y VARIABILIDAD DE SUS
FRACCIONES

22
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

1. Introduccin Myers et al., 1999). Recientemente, este


mtodo se ha empleado en el estudio de la
El uso del bicarbonato sdico 0,5 M (pH= vinculacin existente entre el P del suelo y su
8,5) constituye uno de los mtodos ms transferencia al agua de escorrentas (Pote et
empleados en la extraccin de P disponible del al., 1996; Leinweber et al., 1999).
suelo en muchos pases, siendo ampliamente La gran variabilidad del P extrado por este
utilizado en Canarias para estimar el contenido reactivo bajo diversas condiciones
de este P. El mtodo se fundamenta en la experimentales han sido investigadas por
accin de los iones OH- y CO32- que hacen diversos autores como Barrow y Shaw (1976a,
disminuir la concentracin o actividad de los 1976b, 1976c), Poile et al. (1990), Magid y
iones Ca2+ y Al3+ provocando un aumento en la Nielsen (1992), Turner y Haygarth (2003), etc.
solubilidad del P en el suelo. El extractante se Los procedimientos analticos de rutina solo
ha mostrado eficaz tanto en suelos cidos prevn la determinacin de la fraccin
como en suelos carbonatados (Kuo, 1996). En inorgnica de P (PI) en los extractos de
estos ltimos, la solubilidad del fosfato de bicarbonato; sin embargo, este agente tambin
calcio provoca la disminucin de la es capaz de extraer parte de la fraccin
concentracin de Ca debido a que la alta orgnica (PO), cuya cantidad total puede ser
concentracin de CO32- provoca la determinada mediante un proceso de digestin
precipitacin de CaCO3. En suelos cidos o (Hedley et al., 1982). Aunque poco se sabe de
neutros, la solubilidad de los fosfatos de hierro la naturaleza qumica del PO extrable por el
y aluminio aumentan debido a que un bicarbonato, algunos autores piensan que
incremento en la concentracin de OH- podra formar parte de la fraccin activa y lbil
disminuye la concentracin de Fe3+ por del P orgnico del suelo (Bowman y Cole,
precipitacin como xido y la del Al3+ por la 1978a; Dick y Tabatabai, 1978; Hedley et al.,
formacin de aluminatos. El aumento de las 1982; Tiessen et al., 1984; Trasar-Cepeda et
cargas negativas superficiales y/o la al., 1990), a pesar de que en algunos tipos de
disminucin del nmero de lugares de sorcin suelos la enzima fosfatasa solo es capaz de
sobre los xidos de Fe y Al superficiales a hidrolizar una pequea cantidad de este PO
elevados niveles de pH tambin podran ser (Otani y Ae, 1999; Hayes et al., 2000).
responsables de la desorcin del P sorbido por Los Andosoles y suelos con caractersticas
accin del reactivo alcalino (Kamprath y ndicas presentan, en general, elevadas
Watson, 1980). cantidades de carbono orgnico disuelto (COD),
Por otra parte, la extraccin con Fe y Al en los extractos alcalinos. Estos
bicarbonato tambin se utiliza para extraer el P elementos tambin estn presentes en los
asociado a la biomasa microbiana del suelo extractos de bicarbonato en los que el anlisis
(Brookes et al., 1982; Oberson et al., 1997; del P y su interpretacin no es muy clara (Turner

23
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

y Haygarth, 2003). Nuestro objetivo en este centrifugacin. Por otra parte, la metodologa
estudio ha consistido en abordar las diferentes empleada en algunos trabajos incluye procesos
fracciones de P en los extractos de bicarbonato de centrifugacin a temperatura controlada,
con respecto al COD y al Al y Fe soluble en aunque en los procedimientos de rutina sta se
Andosoles bajo diferentes condiciones realiza a temperatura ambiente. Hedley y
experimentales, dado el uso habitual del mtodo Steward (1982) y Schoenau y Huang (1991)
de Olsen en nuestros laboratorios. La cuestin realizan la centrifugacin de los extractos en
primordial radica en qu cantidad de P en forma un rango de temperaturas entre 0 a 4C con el
rganomineral se encuentra asociado a fin prevenir la actividad biolgica y de
compuestos orgnicos y complejos de Fe y Al en favorecer la sedimentacin del material
relacin con la biodisponibilidad y movilidad del coloidal, respectivamente.
P. Por otro lado, el uso del carbn activo para La temperatura a la cual se realiza la
eliminar de los extractos de bicarbonato la extraccin tambin parece influir en la
materia orgnica coloreada se relaciona con la variabilidad de los resultados: Magid y Nielsen
prevencin de posibles interferencias durante la (1992) observan como al disminuir la
determinacin colorimtrica (Olsen y Sommers, temperatura disminuye el P extrado. Por
1986), aunque esto pueda traer consigo la ltimo, sealar la correccin
perdida del fsforo orgnico biodisponible. Por espectrofotomtrica del color de los extractos
otra parte, hemos investigado el uso de la que realizan Hedley et al. (1982) que evita
enzima fosfatasa para liberar P de las formas aadir carbn activo conjuntamente con la
orgnicas o persulfato para oxidar el material disolucin alcalina con el fin de no eliminar el
orgnico, con el fin de acceder a la estimacin C soluble y, por extensin, el P asociado a la
de la disponibilidad del P asociado con la misma.
materia orgnica extrable en estos extractos. La propuesta metodolgica que se expone a
continuacin, basada en las experiencias
2. Metodologa realizadas por Hedley et al. (1982) y Poile et
al. (1990), tiene como objetivo disear un
El mtodo desarrollado por Olsen ha esquema de fraccionamiento del P en los
sufrido numerosas modificaciones desde que extractos de bicarbonato que permitan
se introdujo en 1954. El procedimiento interpretar tanto las variables asociadas a la
original, por ejemplo, no prev una etapa de extraccin como la dinmica de la fraccin
centrifugacin, previa al filtrado (Olsen et al., inorgnica y orgnica de este elemento en
1954; Olsen y Dean, 1965; Watanabe y Olsen, trminos de su reactividad, asimilabilidad y
1965); as, Poile et al. (1990) han observado movilidad dada la consideracin de la
cmo las cantidades de P extradas por el extraccin Olsen como uno de los indicadores
bicarbonato disminuyen con el tiempo de ms apropiados en el estudio de la respuesta de

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

las plantas ante la deficiencia o fertilizacin (iv) El contenido en P total en los extractos de
fosfatada (Bowman y Cole, 1978b). bicarbonato (PT) se determin despus de
digestin en autoclave con K2S2O8 y H2SO4
2.1. Suelos 2,5 M (Hedley et al., 1982; Rowland y
Haygarth, 1997). Una parte del extracto se
Este estudio se realiz con siete muestras de acidific con H2SO4 1 M para precipitar la
suelos, seis de naturaleza forestal y uno materia orgnica extrada y determinar el P
cultivado. Los suelos forestales corresponden a inorgnico (PI) en el sobrenadante. El P total
los perfiles La Esperanza, Las Lajas y Bona en las disoluciones acidificadas (PTI) se
Camino. La muestra cultivada, V-4, se determin despus de digestin con
corresponde a un suelo rganomineral con persulfato (propuesta de este trabajo).
caractersticas ndicas (0-30 cm). Algunas de (v) Con el fin de acceder al P asociado a las
sus propiedades ms importantes se researon en partculas dispersas en el bicarbonato
el captulo II. (fsforo Olsen particulado, POP), el
fraccionamiento tambin se realiz en
2.2. Fraccionamiento del P extractos que previamente fueron sometidos
a filtracin con filtros de ster de celulosa

Los extractos de bicarbonato, centrifugados Millipore (Millipore Corp., Milford, MA)

a 4 y 20 C y filtrados a travs de papel que excluyen partculas superiores a 0,45

Whatman No. 42 (Whatman Ltd, Clifton, NJ), se m (propuesta de este trabajo).

sometieron al esquema de fraccionamiento que


se muestra en la Fig.1 para acceder a diferentes 2.3. Fracciones del COD, Al y Fe
fracciones de P. El P se determin:
(i) Mediante colorimetra directa con el El COD, Al y Fe totales se determinaron en

reactivo molbdico (POL) (Watanabe y cada extracto de bicarbonato (CODT, AlT y

Olsen, 1965). FeT) y las correspondientes fracciones flvicas

(ii) Mediante colorimetra directa con el (CODf, Alf y Fef) en el sobrenadante de los

reactivo molbdico en presencia de reactivo extractos acidificados.

combinado citrato-arsenito (POLA) (Dick y


Tabatabai, 1977). 2.4. Fsforo hidrolizable por la fosfatasa
(iii) Mediante colorimetra despus de cida
tratamiento con carbn activo (POLC) (se
agitaron 0.5 g de carbn con 30 ml del El P soluble hidrolizado por la enzima
extracto de bicarbonato durante 30 min. con fosfatasa cida (PEN) se determin en los
posterior filtrado a travs de papel Whatman extractos de bicarbonato. Se tomaron 2 ml de
No. 42) (propuesta de este trabajo). tampn universal modificado (Skunjins et al.,

25
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

(POL+PEN)-POL
PEN POL + PEN

1. HIDRLISIS ENZIMTICA
2. COLORIMETRA
COLORIMETRA DIRECTA
CITRATO-ARSENITO
POL POLA
COLORIMETRA DIRECTA

EXTRACTO DE HCO3-
1. CARBN ACTIVO 2-
1. S2O8
POLC PT
2. COLORIMETRA
2. COLORIMETRA H+

SOBRENADANTE
PRECIPITADO 2-
1. S2O8
COLORIMETRA DIRECTA
PT - PI 2. COLORIMETRA

PO PI PTI

Figura 1. Diagrama que describe las distintas etapas del fraccionamiento del P en los
extractos de bicarbonato. Las fracciones POLC y PTI constituyen propuestas metodolgicas de
este trabajo.

1962) ajustado a pH 6 que se aadieron a 5 ml determinado de esta forma representa el POL


del extracto; posteriormente se aadi 1 ml de ms el P hidrolizado por la enzima (POL+
fosfatasa cida al 0.1% [fosfohidrolasa PEN). Esta tcnica fue puesta a punto en los
monoster ortofosfrico procedente de germen laboratorios del Departamento de Qumica de la
de trigo (acidez ptima, EC 3.1.3.2, Sigma Universidad de Burgos.
Chemical Co., San Luis, MO)], dejando
reaccionar la mezcla resultante durante 90 min. a 2.5. Fsforo microbiano
37C. La hidrlisis se detuvo aadiendo 1 ml de
CaCl2 0,5 M y 1 ml de NaOH 0,5 M; la El P asociado a la biomasa microbiana se
suspensin se filtr y el P se determin en el determin utilizando el mtodo de fumigacin-
sobrenadante. En este experimento se utilizaron extraccin con cloroformo (CHCl3) (Brookes et
tres extractos de bicarbonato y sus al., 1982; Hedley y Steward, 1982; Kouno et al.,
correspondientes controles (POL). El P 1999): 10g de suelo fueron fumigados con

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

CHCl3 lquido, en equilibrio con su vapor, determinacin analtica con el azul de


durante 24 h con lo que se asegura la muerte y molibdeno, la obtenida en una alcuota del
ruptura celular de la biomasa microbiana. La extracto al que no se le aadi el cido ascrbico
fumigacin se realiz por triplicado y las del reactivo molbdico (Hedley et al., 1982). Las
fracciones de P, Al, Fe y COD de las muestras fracciones de COD se determinaron midiendo la
fueron extradas siguiendo el esquema de prdida de color que sufri el complejo de
fraccionamiento dado en la Fig. 1. Mn(III)-pirofosfato reducido por el C orgnico
El P microbiano (PM) se estim restando al en presencia de H2SO4 concentrado (Bartlett y
P Olsen de las muestras fumigadas (POLCHCl3) Ross, 1988). Las concentraciones de Fe y Al en
los correspondientes valores de las muestras sin las diferentes disoluciones (total y cida) se
fumigar (POL) multiplicado por 2,50 por lo que determinaron por espectroscopia de absorcin
se asume que el 40% del P de la masa atmica (modelo Perkin Elmer 3100).
microbiana es liberada en forma de P inorgnico
por el CHCl3 (McLaughlin et al., 1986; Kouno 3. Resultados y discusin
et al., 1999). El correspondiente valor de C
asociado a esta fraccin (CCHCl3) se estim Las siguientes fracciones de P se dedujeron
multiplicando la diferencia entre los valores de de los parmetros experimentales definidos
COD (CODCHCl3 - COD) por el factor 2,22 anteriormente:
asumiendo que la biomasa contiene,
aproximadamente, un 50% de C (Brookes et al., - P orgnico:
1984; Kouno et al., 1999). PO = PT - PI (definicin convencional).
- P flvico y hmico:
2.6. Tcnicas analticas Pf = PTI PI
Ph = PO Pf
La concentracin de P obtenida en las - P particulado:
diferentes fracciones de los extractos POP = POL POL0,45
centrifugados y filtrados se determin - P microbiano:
colorimtricamente mediante el mtodo del PM = 2,5 x (POLCHCl3 POL)
azul de molibdeno (Murphy y Riley, 1962), - P hidrolizable por la enzima fosfatasa:
excepto la fraccin POLA que se determin PEN = (POL + PEN) - POL
por formacin de azul de molibdeno en
presencia del reactivo combinado cido Por analoga con la definicin de P
ascrbico-citrato-arsenito (Dick y Tabatabai, hmico, las diferencias entre CODT, AlT, FeT
1977). La interferencia causada por la absorcin y CODf, Alf, Fef se definieron como las
de la materia orgnica coloreada se corrigi correspondientes fracciones hmicas (CODh,
descontando de la absorbancia procedente de la Alh, Feh). Los diferentes valores de P

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

definidos en el esquema de fraccionamiento considerando que las relaciones propuestas para


(PT, PI, PO, POL, POLA, POLC, PTI) una capacidad de complejacin mxima en la
obtenidos en los extractos de bicarbonato formacin de complejos Al(Fe)-humus oscilara
centrifugados a 4 y 20C (E-4 y E-20) se entre 0,1 y 0,2 (Higashi, 1983; Mandley et al.,
muestran en la Tabla 1, mientras que los 1987).
correspondientes valores de COD, Al y Fe se El uso de diferentes tcnicas de filtrado
muestran en la Tabla 2. Los datos equivalentes parece corroborar la tendencia observada con la
de los extractos filtrados a travs de 0,45 m temperatura de centrifugacin ya que tambin
se muestran en las Tablas 3 y 4. tuvo efecto sobre los diferentes contenidos de P,
COD, Al y Fe en disolucin alcalina (Tablas 3 y
3.1. Influencia de la temperatura de 4). As, se observa que ha existido una
centrifugacin y de la tcnica de filtrado disminucin en la concentracin de estos
elementos que oscil entre el 10 y el 20% en sus

La temperatura de centrifugacin ha tenido diferentes fracciones en los extractos filtrados

un efecto importante sobre el contenido en por 0,45 m. Esto parece estar relacionado con

disolucin de P y COD, observndose una un posible reparto de las asociaciones entre estos

disminucin de ambos en las diferentes elementos por su tamao. Una parte de los

fracciones en los extractos E-4 (Tablas 1 y 2). compuestos hmicos asociados a materiales

Este hecho puede ser atribuido al efecto que coloidales del suelo de tamao mayor a 0,45 m

ejercen las bajas temperaturas sobre la podran haber quedado retenidos en el papel de

sedimentacin de la materia orgnica coloidal. filtro, manteniendo consigo parte del P extrado

Poile et al. (1990) observ este efecto cuando por el agente alcalino.

aument la velocidad de centrifugacin. Los


valores de Al y Fe total tambin disminuyeron 3.2. Fsforo orgnico

en los extractos E-4, aunque en menor


proporcin que el COD. En este sentido, la En la definicin operacional de P orgnico

concentracin de Al y Fe excede la solubilidad en los extractos alcalinos de suelo, PO = PT - PI,

de sus compuestos amorfos a los valores de pH generalmente se asume que en la disolucin

de la extraccin. Esto pone en evidencia la cida sobrenadante que resulta del

existencia de material inorgnico coloidal fraccionamiento, PI representa el P total (PTI).

(alofana, ferrihidrita) junto con los complejos Sin embargo, existen referencias que indican que

humus-Al(Fe). Johnson y McBride (1991) esta suposicin es incorrecta (pe. Bowman y

encuentran complejos estables en suspensin de Cole, 1978a). En la Tabla 1 se puede observar

alofana-humus en disoluciones alcalinas de que PI puede, en muchos casos, corresponder al

Spodosoles. Las relaciones Al(Fe)-COD menos al 50% de PTI. Esta tendencia se

sugieren formas coloidales de estos elementos, mantiene en el caso de los extractos filtrados por

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0,45 m (Tabla 3). Fox y Comerford (1992) ortofosfato libre. La posible existencia en los
encuentran que los valores de PI pueden estar extractos de fosfatos complejos de Al(Fe)-
sobrestimados debido a la liberacin de P humus capaces de hidrolizarse a pH<4 (Gerke,
durante su determinacin analtica por la 1992) podran explicar este hecho. Los altos
hidrlisis que sufre parte de los compuestos contenidos de Al y Fe encontrados en las
orgnicos de P (resistentes a la hidrlisis cida disoluciones cidas (Tablas 2 y 4) parecen
anterior), como los fosfatos de inositol u otros indicar la presencia de este tipo de complejos
ster fosfatos, con la subsiguiente asociados fundamentalmente con la fraccin
infravaloracin de Pf y por tanto de PO. flvica.
Por otra parte, Borie y Zunino (1983), Las relaciones COD/PO (Tablas 2 y 4)
investigando extractos de NaOH de Andisoles, parecen apuntar a la existencia de complejos de
asumen la existencia de dos fracciones en la P-Al(Fe)-humus. Smeck (1985) indica que
fraccin PO, una asociada a los cidos flvicos suelos con una relacin C/PO inferior a 100
(Pf) y la otra a los cidos hmicos (Ph) (Pf se poseen altos contenidos de P lbil, posiblemente
define operacionalmente como la diferencia asociada en nuestro caso a estos compuestos,
entre PTI y PI mientras que Ph corresponde a la siendo menor esta relacin en el caso de los
diferencia existente entre PT y PTI). El elevado extractos centrifugados a 20C,
contenido de COD en el sobrenadante cido independientemente del filtrado utilizado. La
(CODI) (Tablas 2 y 4), junto con los valores de labilidad de los compuestos de P o de sus
PTI, parecen confirmar la existencia de Pf, asociaciones con la materia orgnica extrada
aunque esta fraccin probablemente estara por el bicarbonato parece estar relacionada con
infravalorada. la menor actividad fosfatsica que presentaban
los extractos centrifugados a 20C con respecto a
3.3. Fsforo Olsen los centrifugados a 4C (datos no mostrados).
Esto podra significar que el bicarbonato es
Los valores de POL se situaron entre los de capaz de extraer fracciones bioqumicamente
PT y PI, y fueron ms bajos que los de PTI, activas del suelo que pueden estimular o
independientemente de la temperatura de reprimir la actividad fosfatsica del extracto en
centrifugacin y el tipo de filtrado realizado funcin de las condiciones trmicas bajo las
(Tablas 1 y 3). La diferencia entre POL y PI cuales se realiza el proceso de centrifugacin.
pudo deberse a la hidrlisis de una parte de Pf y Por otra parte, los valores del P Olsen con
Ph durante la determinacin del POL, ya que el carbn activo (POL) oscilaron entre el 3% y el
medio fuertemente cido de la disolucin 27% del POL en los suelos forestales. Si
molbdica (pH < 1) podra inducir la hidrlisis asumimos que el carbn activo es capaz de
de parte del P asociado a los compuestos adsorber el P orgnico y los fosfatos complejos
hmicos de los extractos (Poile et al., 1990; de Al(Fe)-humus, entonces POLC podra
Gerke y Jungk, 1991), sobrestimando el considerarse como una estimacin del
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

Tabla 5. Fosfato hidrolizable por la enzima fosfatasa alcalina en los extractos de bicarbonato
(mg kg-1) ( desviacin estndar de la media)
a) Filtrados por Whatman No. 42
PEN PEN/PO (%)
4C 20C 4C 20C
V-4 5+1 63+2 61 46
ESPERANZA A1 26+2 18+1 92 71
Bw2 16+2 36+3 65 92
Bw/C 11+1 28+1 85 71
LAS LAJAS A1 11+1 35+1 72 85
Bw 5+1 30+2 61 72
BONA CAMINO Bw3 4+1 33+3 37 64
b) Filtrados por 0,45 m
PEN PEN/PO (%)
4C 20C 4C 20C
V-4 4+1 59+2 57 77
ESPERANZA A1 22+2 18+1 97 72
Bw2 14+1 30+2 95 92
Bw/C 9+1 27+2 54 78
LAS LAJAS A1 10+1 31+2 90 76
Bw 4+1 26+2 58 65
BONA CAMINO Bw3 4+1 31+2 51 64

ortofosfato libre. Por tanto, PI - POLC esta tendencia en los extractos filtrados por
representa la cantidad de PI sobrestimado papel Whatman y por 0,45 m (Tabla 3). Sin
debido a la hidrlisis del P orgnico y embargo, estos valores son muy superiores a
rganomineral en la disolucin cida de los correspondientes a POLC (Tablas 1 y 3).
molibdato (Tablas 1 y 3) que en nuestras La diferencia entre POLA y POLC indica que
condiciones experimentales, oscila entre el 20 podran existir en el extracto, compuestos
y el 50% del PT del extracto. Los valores de P lbiles de P hidrolizables en presencia del
determinados por el mtodo de Tabatabai y reactivo combinado cido ascrbico-citrato-
Dick (POLA) siempre fueron inferiores a los arsenito. Tabatabai y Dick (1977) demuestran
de POL, oscilando entre un 90% de esta que el reactivo combinado no es capaz de
fraccin en el caso de los extractos atacar compuestos orgnicos de P como el
centrifugados a 4C y un 70% en el caso de los nucletido trifosfopiridina, la D-glucosa-6-
centrifugados a 20C (Tabla 1), mantenindose fosfato, el p-nitrofenil fosfato y el

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

C O

Al O PO3H

C O
I.
O

Estructura hmica indefinida

C O

Al O P(orgnico)

C O

O II.

Figura 2. Complejos propuestos para explicar la interaccin entre compuestos humus-Al y el


ortofosfato: (I) Gerke, 1992; (II) P orgnico.

cido ftico o compuestos inorgnicos como el 3.4. Fsforo hidrolizado por la enzima
pirofosfato, metafosfato y polifosfatos en fosfatasa
general. Asumiendo este resultado, POLA
POLC podra representar la cantidad de P Una fraccin importante del P soluble en los
asociado a complejos Al(Fe)-humus (P extractos de bicarbonato fue hidrolizado por la
rganomineral) capaces de hidrolizarse bajo las enzima fosfatasa (PEN) (Tabla 5). PEN fue
condiciones del reactivo combinado que aunque mucho mayor en los extractos E-20 que en los
no sean tan extremas como en el caso del E-4, excepto en el horizonte A del perfil La
mtodo clsico de Murphy y Riley (1962), el pH Esperanza. Esta diferencia podra estar asociada
del reactivo es inferior a 4 que, tal y como se con las altas cantidades de COD y PO en los
expuso anteriormente, constituye el lmite extractos E-20. PEN oscil entre el 33 y el 93%
superior de acidez para la hidrlisis de estos de PO. La tendencia fue la misma
compuestos (Gerke, 1992). independientemente del tipo de filtrado lo cual
parece indicar que el P hidrolizable por la
enzima fosfatasa debera tener un tamao
35
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

inferior a las 0,45 m. Nuestros resultados asociados con las superficies minerales de
contrastan con los de otros autores que indican Al(Fe) (oxi-hidrxidos, alofanas) es improbable
valores mucho ms bajos de P hidrolizable, tanto debido a que las molculas se encontraran
por la fosfatasa cida como por la fosfatasa fuertemente retenidas (Borie et al., 1989). Esto
alcalina, en extractos acuosos (Fox y Comerford, pone de manifiesto la posibilidad de que los
1992; Pant et al., 1994; Shand y Smith, 1997; fosfatos complejos de Al(Fe)-humus puedan
Turner et al., 2002). En principio, PEN debe encontrarse en disolucin bajo condiciones
provenir de la hidrlisis de los monosteres alcalinas. Por otra parte, se han propuesto
fosfato (Skunjins, 1967; Tabatabai y Fu, 1992; complejos ternarios del tipo: HA-Al-P (ver Fig.
Fox y Comerford, 1992), aunque recientemente 2, complejos del tipo I, HA: estructura hmica
se ha considerado la posibilidad de que una parte indefinida) (Lvesque y Schnitzer, 1967; Sinha,
de otros compuestos orgnicos del P, como el 1972; Gerke, 1992). En suelos ndicos, la
hexafosfato de inositol (HPI) y los disteres fraccin del aluminio activo total (definido
fosfato, puedan ser hidrolizados por la fosfatasa operacionalmente como el aluminio extrado con
alcalina (Shand y Smith, 1997; Hayes et al., NH4Ox pH 3) asociado con los compuestos
2000). hmicos probablemente se encuentre en forma
Se le ha prestado mucha atencin a la HA-Al-OH. Estos suelos reaccionan
extraccin de los steres fosfatos del suelo. As, vigorosamente con el ortofosfato, con la
Bowman y Cole (1978b) encontraron que los liberacin concomitante de grupos OH, de tal
fosfatos de glicerol y el ARN podran extraerse manera que los productos resultantes podran
con NaHCO3 0,5 M, pero no as el HPI. Evans tender a los complejos del tipo I. La solubilidad
(1985) encontr HPI en los percolados de suelo, y sensibilidad a la hidrlisis de estos compuestos
aumentando su cantidad cuando disminuye la depende de su masa molecular, tipo de puente
fuerza inica de la disolucin percolante (KCl). metlico, etc. Los complejos solubles del tipo I
Este resultado fue atribuido a las transiciones podran hidrolizarse parcialmente bajo
conformacionales de la materia orgnica, condiciones cidas, por ejemplo, durante la
inducidas por la fuerza inica, lo cual permite determinacin analtica del P, como lo han
que su solubilidad se vea incrementada a fuerzas sugerido Sinha (1972) y Gerke (1992), aunque la
inicas relativamente bajas. Por otra parte, Borie reaccin con la fosfatasa no tendra lugar. Sin
et al. (1989) extrajeron HPI en Andisoles embargo el P hidrolizable por la enzima puede
chilenos (cuyos valores oscilaron entre un 47 y tener lugar con complejos del mismo tipo
un 67% del P orgnico) mediante una vigorosa propuesto por Gerke (1992), en los cuales los
extraccin con NaOH 1 M en caliente, aunque steres fosfato se encuentran enlazados va
no se produjo la extraccin cuando se utiliz el puentes Al(Fe) a las sustancias hmicas (ver Fig.
mtodo de Steward y Oades (1972) mucho 2, complejos del tipo II). Su solubilidad, al igual
menos vigoroso. Estas observaciones sugieren que en los complejos del tipo I, dependera de la
que la extraccin de los fosfatos de inositol estructura del resto HA. Estos complejos podran
36
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

representar parcialmente la "estabilizacin del En las Tablas 6 y 7 se recogen las


fosfato orgnico por el Al(Fe)", sugerida por cantidades de P asociadas a las distintas
Borie et al. (1989). fracciones estudiadas cuyo tamao de partcula
Nuestros resultados muestran la necesidad es superior a 0,45 m. Se observa como
de estandarizar la extraccin de P por el mtodo independientemente de la temperatura de
Olsen, al menos en suelos ndicos; la centrifugacin, los valores de P en las
importancia del PO hidrolizable por la enzima diferentes fracciones son relativamente bajos
fosfatasa, tal y como ha revelado nuestro con respecto a los obtenidos en disolucin.
estudio, est de acuerdo con los resultados sobre Devlin et al. (2000) ponen de manifiesto que el
la estabilizacin del P orgnico lbil del suelo, P particulado presente en las aguas de
en diferentes partes del mundo y bajo diferentes escorrentas parece estar: (i) asociado a las
condiciones de uso y manejo, a travs de los partculas del suelo, (ii) en forma mineral
monosteres ortofosfato (Dai et al., 1996; como compuestos de Al, Fe o Ca y (iii)
Gressel et al., 1996; Mller et al., 2000; Cardoso incorporado a la materia orgnica, siendo
et al., 2003; Toor et al., 2003) que parece ser la controlada su asimilabilidad a travs de ciertos
especie de P dominante en cada una de las procesos qumicos, biolgicos e hidrolgicos
diferentes fracciones de suelo (Makarov et al., (Mallarino et al., 2002). Nuestros resultados
2004). Algunos autores sealan que esta ponen de manifiesto que el P extrado por el
predominancia puede ser debida a la hidrlisis bicarbonato parece estar asociado
de disteres procedentes de la masa microbiana fundamentalmente a partculas de tamao
tales como ARN y fosfolpidos (Makarov et al., inferior a 0,45 m aunque, posiblemente, parte
2002). De todas maneras, la bioasimilidad del P de este P podra haber sido arrastrado por
orgnico podra explicar la baja respuesta a la partculas superiores a 0,45 m lo que
fertilizacin fosfatada observada en algunos explicara los valores obtenidos para el POLC.
tipos de Andosoles con altas capacidades de Por otra parte, los datos de COD parecen
retencin de P (Hernndez Moreno et al., 1990). indicar que una parte de la fraccin hmica del
El reconocimiento del importante papel que extracto alcalino fue retenida por el filtro, siendo
puede jugar el P orgnico en la biodisponibilidad mayor la retencin en los extractos centrifugados
del P (Tiessen et al., 1984) podra ser de especial a 20C que a 4C. Los valores de Al y Fe,
relevancia en suelos ndicos y en otros suelos de aunque importantes, constituyen solo una
carga variable donde los habituales ensayos de pequea fraccin del total extrado por el
calibracin del P no son los adecuados (Fox, bicarbonato. Estos elementos pueden que estn
1980). asociados a la materia orgnica disuelta,
posiblemente de elevada masa molecular,
3.5. Fsforo particulado retenida en el filtro. Los resultados parecen
confirmar que la materia hmica de las
asociaciones del tipo P-Al(Fe)-humus presentes
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en el extracto sean, en gran parte, de naturaleza extractos de muestras no fumigadas por 0,45m
flvica de tamao de partcula < 0,45 m, que provocara una mayor diferencia entre las
aunque sin descartar la posibilidad de que dos fracciones reactivas (POLCHCl3- POL) y por
existan otros compuestos orgnicos de P tanto en PM. Con respecto a la temperatura de
asociados con material hmico presente en el centrifugacin, los valores de PM y CODM
suelo. siempre fueron mayores a 20C que a 4C,
excepto en el perfil La Esperanza (alofnico) en
3.6. Fumigacin de las muestras de suelo con el cual los valores de PM fueron menores en los
cloroformo segundos que en los primeros, a pesar del
aumento en CODM lo que podra estar
Las Tablas de la 8 a la 13 detallan los datos relacionado por una posible fijacin de una parte
referentes a la caracterizacin de los extractos importante de PM a la matriz del suelo durante
fumigados con cloroformo. Se observa, en el proceso de extraccin.
primer lugar, un aumento considerable de los En principio, estos resultados parecen indicar
contenidos de las diferentes fracciones de P que las asociaciones Al(Fe)-humus con el P en
(Tablas 8 y 10), de COD y de Al y Fe (Tablas 9 los extractos de bicarbonato en muestras
y 11) con respecto a las muestras no fumigadas, fumigadas parecen constituir el componente
independientemente de la temperatura de mayoritario de los mismos, confirmando los
centrifugacin y tipo de filtrado. La tendencia es resultados anteriores. El efecto de la fumigacin
similar tanto en el suelo cultivado como en los del suelo con cloroformo se traduce en un
naturales, incluso en los diferentes perfiles aumento de estas asociaciones en los extractos lo
considerados. En lo que se refiere a la fraccin cual parece indicar que durante el proceso de
particulada (> 0,45 m) la tendencia es parecida hidrlisis bacteriana se han podido producir
a las de las muestras sin fumigar (Tablas 12 y reagrupamientos de las fracciones de P, en teora
13), con un ligero repunte del COD retenido en lbiles, con la liberacin de estos complejos. Si
el filtro. consideramos que el P proveniente de los
Con respecto a la fraccin microbiana, las microorganismos del suelo est formado en un
cantidades de PM y de CODM, calculadas a 60% de cidos nucleicos, en un 20% de P
partir de los datos de POL y COD de las inorgnico soluble en medio cido y steres
muestras fumigadas y sin fumigar, son orgnicos de P (azcares, steres nucletidos,
relativamente bajas (Tabla 14) con respecto a los co-enzimas fosforiladas y polifosfatos) y en <
valores de PT y CODT, siendo mayores, 10% de fosfolpidos (Stewart y Tiessen, 1987),
independientemente de la temperatura de siendo la proporcin entre las formas orgnicas e
centrifugacin, en los extractos filtrados por inorgnicas de P en los microorganismos
0,45m que por Whatman No. 42 lo que podra dependientes de la concentracin de P en la
estar relacionado con la retencin en el filtro de disolucin del suelo, as como del contenido de
mayor cantidad de material coloidal en los P de las clulas y la edad de las mismas (Hedley
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.1 P Olsen

y Stewart, 1982), podemos intuir que el depender de complejas relaciones de afinidad


desplazamiento concomitante de las entre los diversos compuestos de P (tanto de
asociaciones humus-Al(Fe)-P durante el tiempo procedencia bitica como abitica) y la matriz
de extraccin pudo deberse a la fijacin de los del suelo. Si estas relaciones originan que gran
productos procedentes de la lisis bacteriana a la parte de los productos del P procedentes de la
matriz inorgnica de las suelos, desplazando a biomasa microbiana [fraccin que puede actuar
los complejos o bien a la rpida incorporacin de como fuente de P disponible para las plantas
este P liberado a la fase slida formando estos dentro de las fracciones lbiles de este elemento
complejos. A favor de esta hiptesis juega el (Macklon et al., 1997)] no se encuentren
hecho que los valores de PM y DOCM (Tabla disponibles podra explicar, en parte, la falta de
14) son altos comparados con otros encontrados respuesta de estos suelos a la fertilizacin
en la bibliografa y cuyas muestras de suelo fosfatada, dada la dificultad de transformar en
haban recibido un tratamiento fosfrico previo formas asimilables los complejos ternarios de P
(Thien y Myers, 1992; Kouno et al., 1999; Oehl y que la extraccin con bicarbonato, por tanto la
et al., 2001). Por otro lado, como hemos significacin del valor de POL obtenido
asumido el hecho de que alrededor del 40% del analticamente, sea mucho ms compleja que la
P de la biomasa microbiana es liberada por el simple extraccin del P dbilmente adsorbido
cloroformo en forma de P inorgnico (Kuo et al., definido por Hedley et al. (1982) en, al menos,
1999), este fosfato podra tambin desplazar a este tipo de suelos.
parte de la materia orgnica ligada a la superficie
del suelo, posiblemente unida a estos complejos, 4. Referencias
aumentando as su concentracin en los
extractos alcalinos. Barrow, N. J.; Shaw, T. C. 1976a. Sodium

Otro aspecto a destacar es el aumento del P bicarbonate as an extractant for soil phosphate. I.

hidrolizado por la enzima fosfatasa en los Separation of the factors affecting the amount of
phosphate displaced from soil from those affecting
extractos fumigados, oscilando entre un 30 y un
secondary adsorption. Geoderma 16, 91-107.
50% respecto a las muestras sin fumigar (Tabla
Barrow, N. J.; Shaw, T. C. 1976b. Sodium
14). Este resultado, unido a los datos anteriores,
bicarbonate as an extractant for soil phosphate. II.
refuerza la hiptesis de la existencia en
Effect of varying the conditions of extraction on
disolucin de los complejos rganominerales del the amount of phosphate initially displaced and on
tipo Gerke o asociados a PO que hemos the secondary adsorption. Geoderma 16, 109-123.
destacado en la Figura 2. Barrow, N. J.; Shaw, T. C. 1976c. Sodium
Bajo esta premisa, podemos considerar que bicarbonate as an extractant for soil phosphate. III.
las asociaciones P-Al(Fe)-humus deben jugar un Effects of the buffering capacity of a soil for

papel fundamental en el control de la phosphate. Geoderma 16, 273-283.


Bartlett, R. J.; Ross, D. S. 1988. Colorimetric
disponibilidad del P en Andosoles ya que su
determination of oxidizable carbon in acid soil
incorporacin a la disolucin del suelo parece
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52
CAPTULO III.2:

EXTRACCIN DE FSFORO CON AGUA:


ASOCIACIONES RGANOMINERALES
(Al-P-CIDO FLVICO) Y FASES
INORGNICAS
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

1. Introduccin del suelo as como de las correspondientes


concentraciones asociadas, constituye el marco
Es bien conocido el papel esencial que el P bsico en la investigacin de los mecanismos
juega en todas las formas de vida de nuestro que concurren en la toma de P por parte de la
planeta. La distribucin de las formas planta y en las prdidas de este macronutriente
qumicamente activas del P puede por fenmenos de lavado (Leinweber et al.,
proporcionarnos un ndice que nos indique el 2002).
nivel y tipo de actividad biolgica en un Los extractos acuosos se han empleado en
ecosistema dado. En el suelo, la existencia de ocasiones como modelo de la disolucin del
diferentes formas de P est condicionada por suelo (Wolt, 1994). Por otro lado, los ensayos
todos los procesos edafognicos que afectan a de P basados en la extraccin con agua
la disponibilidad de P a travs de mecanismos (Sissingh, 1971; van der Paaw, 1971) tienen un
biolgicos o geoqumicos (Tiessen et al., 1984; inters potencial tanto para fines
Smeck, 1985). El peso que tienen los medioambientales como agronmicos, aunque
diferentes procesos especficos que controlan su uso est limitado por los problemas
la disponibilidad del P puede verse afectado metodolgicos relacionados con la
tanto por el tipo de ecosistema (Lajtha y incertidumbre analtica en la determinacin de
Schlesinger, 1988) como por el tipo de los contenidos de las diferentes formas de P
horizonte del suelo (Wood et al., 1984). que contribuyen a la fraccin soluble en agua.
Un ndice para determinar la Por otro lado, la dinmica del fsforo en
disponibilidad de P debe ser capaz de integrar Andosoles y suelos ndicos est controlada por
todos estos procesos, poniendo un especial el contenido de Al y Fe activo que incluyen
hincapi en el lugar crtico donde ocurren gran fases inorgnicas del tipo alofana y ferrihidrita,
parte de los procesos fsico-qumicos del suelo: as como por complejos rganominerales. En
la disolucin del suelo. La composicin de sta relacin con los suelos que presentan una
refleja la solubilidad, la disponibilidad para las elevada capacidad para fijar fosfato se acepta,
plantas y el posible movimiento a travs del generalmente, que el in ortofosfato reacciona
perfil de los elementos nativos o aadidos en el con minerales de Al(Fe) para formar
suelo. Sin embargo, el trmino disolucin del compuestos superficiales y fosfatos de Al(Fe)
suelo es definido de forma operacional debido, que presentan un amplio rango de
fundamentalmente, a los diferentes mtodos solubilidades. Sin embargo, los aspectos
disponibles y a la ausencia de un mtodo relacionados con los mecanismos implicados y
estandarizado para obtener una muestra de la las fases fosfatadas formadas continan siendo
disolucin, qumicamente inalterada, motivo de discusin y controversia. En este
representativa de la matriz de la cual fue sentido, Hetrick y Schawb (1992) han
extrada. En cualquier caso, la determinacin observado en suelos sometidos a largos
de las diferentes formas de P en la disolucin perodos de fertilizacin que la solubilidad del
54
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Al y el P podran depender del tipo de conjuntamente, los minerales tipo variscita y los
fertilizacin aplicada, estando el proceso complejos humus-Al-P. Sin embargo, en los
controlado por algunas fases como el Al(OH)3 Andosoles existe un rango continuo de Al activo
amorfo, el hidroxiapatito, el fosfato entre las asociaciones alofana-imogolita y Al-
octoclcico y la variscita. Sin embargo, en humus en los que estos miembros finales son
suelos cidos o con contenidos importantes de raros (Mizota y van Reeuwijk, 1989). Esta
Al y/o Fe activos, los productos iniciales de la diversidad de asociaciones podra explicar
reaccin de los fertilizantes fosfatados con el parcialmente el por qu las calibraciones usuales
suelo parecen ser los fosfatos de Al y Fe que relacionan el P extrable con los
cristalinos y amorfos (Veith y Sposito, 1977; rendimientos esperados de los cultivos y los
Lindsay, 1979; Pierzynski et al., 1990b). requerimientos de fertilizacin de P parecen no
Por otra parte, y como complemento del ser los adecuados para estos suelos (Fox, 1980).
mecanismo que conlleva la reaccin del P con La extraccin en fase acuosa del P del suelo
las superficies hidroxiladas de Al y Fe, se ha ha sido empleada como indicador de la
demostrado en suelos alofnicos la formacin de asimilabilidad y disponibilidad del P en una
minerales fosfatados secundarios como el amplia tipologa de suelos, principalmente en
amorfo anlogo a la variscita (Veith y Sposito, suelos muy fertilizados o en suelos alcalinos
1977). Este compuesto se ha considerado como (Sorn-Srivichai et al., 1988). Se debe tener en
producto de reaccin entre los iones ortofosfato cuenta, adems, la incertidumbre analtica
con el Al cambiable y los hidrxidos de Al y existente en la determinacin del P acuoso en
aluminosilicatos estables a valores de pH > 7 aquellos suelos pobres en este elemento (van der
(Coleman et al., 1960). Sin embargo en este tipo Zee et al., 1988; Salcedo et al., 1991). Sin
de suelos, Veith y Sposito (1977) han embargo, el estudio de los mecanismos de
suministrado evidencias de la formacin de desorcin de P mediante este mtodo es de sumo
fosfatos de Al amorfos debido a una inters para la investigacin en nutricin vegetal
precipitacin secundaria ms que por formacin y calidad del agua (Schoenau y Huang, 1991).
de una fase superficial fosfatada. Estos estudios Esto tiene una especial importancia en
se han basado principalmente en evidencias Andosoles y suelos ndicos en los que ocurren
indirectas como el criterio de solubilidad, cambios importantes en la capacidad de cambio
aunque en los ltimos quice aos se han catinica y aninica debido a las oscilaciones en
utilizado evidencias directas como la la fuerza inica de la disolucin del suelo
microscopa y la espectroscopia (Pierzynski, (Espino-Mesa et al., 1993), de sumo inters
1991). prctico en los procesos de lavado y salinizacin
Considerando las conclusiones establecidas secundaria. El P extrable en agua tambin ha
por Borie y Zunino (1983) para suelos sido utilizado en modelos para predecir el P del
volcnicos chilenos, las fuentes principales de P suelo solubilizado por la lluvia y que entra a
en los suelos alofnicos parecen ser, formar parte de las aguas de escorrenta
55
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

(Sharpley, 1983). De todas maneras, existe una a) Un fraccionamiento qumico del extracto sin
cierta controversia conceptual sobre la filtrar o con una filtracin primaria utilizando
terminologa ms apropiada para representar las papel Whatman No. 42 basado en la reaccin del
formas de P extrables con agua en el estudio de P inorgnico con el reactivo molbdico, seguido
la transferencia de P hacia desde los terrenos de una subsiguiente reduccin y deteccin
agrcolas. As, Haygarth y Sharpley (2000) han espectrofotomtrica. Esta deteccin se basa en el
sugerido una clasificacin de estas formas mtodo descrito por Murphy y Riley (1962) para
solubles de P en funcin de la definicin la determinacin del ortofosfato. El P as
operacional de los diferentes mtodos analticos determinado se ha denominado como P reactivo
y del tamao de poro del filtro empleado. (PR) y no P inorgnico (Haygarth y Sharpley,
En ensayos preliminares (Negrn et al., 2000) debido a la sobreestimacin del
1993) hemos encontrado que Andosoles y suelos ortofosfato libre.
ndicos de Canarias pueden liberar al agua De todas maneras, la preparacin de la
cantidades importantes de P, Al y carbono muestra y las condiciones de la reaccin podran
orgnico disuelto (COD) bajo las condiciones de llevar a la hidrlisis de especies lbiles de P
extraccin dadas por el mtodo de van der Paaw orgnico dadas las condiciones fuertemente
(1971). Traina et al. (1986) atribuy el cidas requeridas para el desarrollo del color
incremento de la solubilidad del ortofosfato en (Staiton, 1980; Tarapachak et al., 1982 y 1993),
agua a la presencia de complejos solubles de Al- sin descartar las posibles interferencias causadas
P-materia orgnica. por un exceso de Si (Ciavatta et al., 1990) y la
El objetivo que nos hemos propuesto ha turbidez de las disoluciones.
consistido en acceder a la sensibilidad del P, b) Un fraccionamiento fsico basado en el
pH, Al, Fe, COD a los cambios en las filtrado de los extractos o muestras de aguas a
relaciones w:s en suelos volcnicos forestales y travs de filtros con un tamao de poro inferior a
cultivados, y determinar los factores que 1 m, utilizndose comnmente aquellos filtros
podran gobernar la liberacin de P en el agua con un tamao de poro de 0,45m. El filtrado <
bajo estas condiciones experimentales. 0,45 m se sometera entonces al
correspondiente fraccionamiento qumico,
2. Metodologa similar al realizado a la muestra no filtrada o con
filtracin primaria.
Tal y como indicamos en la Introduccin, Mediante este proceso se definen las
las formas de P potencialmente extrables por fracciones disuelta (< 0,45 m) y
el agua o que se encuentran presentes en ella, particulada (> 0,45 m) del P acuoso, aunque
han sido determinadas convencionalmente ciertos autores han puesto en duda esta
sobre la base de procedimientos operacionales clasificacin (Haygarth y Sharpley, 2000;
que incluyen: Leinweber et al., 2002) debido a que las
muestras acuosas parecen contener un continuo
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

de partculas para el rango de tamao < 0,45 m, filtradas o no (o bien con filtracin primaria con
estando incluidas en ellas parte de las papel Whatman 42 y por 0,45 m):
denominadas partculas coloidales (1 nm 1 Total: PT, PT(< 0,45 m).
m) que estaran asociadas a especies minerales Reactiva: PR, PR(< 0,45 m).
especficas (Kretzschmar et al., 1999). A partir de estas fracciones, se calcularan
c) Siguiendo a Haygarth y Sharpley (2000) y a otras cuatro por diferencia:
Leinweber et al. (2002), tendramos dos tipos de
fracciones de P en funcin de su PNR(< 0,45 m) = PT( < 0,45 m) - PR(< 0,45 m)
comportamiento frente al reactivo molbdico:
una fraccin reactiva al Mo (PR) y otra PT (> 0,45 m) = PT - PT(< 0,45 m)
residual no reactiva frente al Mo (PNR). Esta
fraccin no reactiva se calculara mediante la PR(> 0,45 m) = PR - PR(< 0,45 m)
diferencia que existe entre el P total del extracto
(PT), determinado mediante un mtodo PNR (> 0,45 m) = PT( > 0,45 m) - PR( > 0,45 m)
apropiado de digestin (Rowland y Haygarth,
1997) y PR. En resumen, la equivalencia de estos
La fraccin PNR representara, en trminos con los ya establecidos sera el
principio, compuestos orgnicos de P como siguiente:
monosteres fosfatos (pe.: fosfatos de inositol, 1.- PR(<0,45 m): P reactivo al molibdato
azcares fosfato o mononucletidos), disteres (PRM), P reactivo disuelto (PRD), P reactivo
fosfato (p. e.: cidos nuclicos y fosfolpidos), soluble (PRS), P disuelto reactivo al molibdato,
fosfonatos (cido aminoetilfosfnico) y otras ortofosfato, P inorgnico, fosfato.
formas condensadas de P orgnico (ATP), 2.- PR: P total reactivo (PTR), muestra sin filtrar
aunque solo algunas de estas formas han sido o filtrado por Whatman 42.
detectadas directamente en las disoluciones 3.- PT(<0,45 m): P total disuelto (PTD).
acuosas (Espinosa et al., 1999). Para Ron-Vaz 4.- PT: P total, muestra sin filtrar o filtrado por
et al. (1993) no toda la fraccin PNR debe ser Whatman 42.
atribuida al P orgnico ya que esta podra 5.- PNR(<0,45 m): P orgnico disuelto (POD),
incluir formas condensadas de P inorgnico P orgnico soluble (POS), P disuelto no reactivo
inactivas frente al reactivo molbdico como, al molibdato (PDNR).
por ejemplo, los pirofosfatos y otros 6.- PT(>0,45 m): P particulado (PP); este
polifosfatos que podran estar presentes en trmino sigue siendo ampliamente utilizado.
cantidades importantes en la disolucin del 7.- PR(>0,45 m): P particulado reactivo al
suelo. molibdato (PPRM), P particulado reactivo
d) Desde esta perspectiva tendramos cuatro (PPR).
fracciones directamente determinadas a travs de En este trabajo haremos uso de esta
su reaccin frente al Mo, con o sin digestin, y terminologa, aunque en muchas partes
57
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

emplearemos la equivalente ya que sigue Es por todo esto que la propuesta


siendo utilizada con asiduidad en la literatura metodolgica que se expone a continuacin
edafolgica. tiene como objetivo disear un esquema de
Aunque el empleo de una terminologa fraccionamiento de las especies de P solubles
apropiada sigue siendo un problema a resolver, en agua que permita aglutinar los aspectos
existen otros, de tipo analtico, asociados a la reseados con otras variables a considerar
falta de una metodologa claramente definida como son la solubilidad de los compuestos de
para la extraccin de P del suelo con agua. P asociados tanto a la fraccin activa del Al
Entre otros, cabran citarse: (Fe) como a la materia orgnica, primordiales
1.- Las condiciones de humedad de la muestra: en los mecanismos de desorcin de fosfato del
el mtodo de Sissingh (1971) y van der Paauw suelo.
(1971) exigen una incubacin previa con agua En una primera etapa estudiaremos las
antes de la extraccin. caractersticas de los extractos que han sido
2.- La relacin agua:suelo (w:s) en los extractos: sometidos a filtracin secundaria (0,45 m) en
relaciones 2:1, 2,5:1 y 5:1 han sido utilizadas en lo referente al fraccionamiento de P, COD, Al
anlisis de rutina (Sonnenveld et al., 1990), en el y Fe, as como los mecanismos de desorcin y
estudio de ndices de Na del suelo en relacin solubilidad que puedan estar controlando la
con la supresividad que presentan algunos suelos liberacin de estos elementos a la fase acuosa,
volcnicos al mal de Panam (Domnguez et al., en una serie de Andosoles y suelos ndicos
2003) y en el diseo de modelos que estudian forestales y cultivados. Posteriormente
mecanismos de concentracin o dilucin de haremos un anlisis pormenorizado y con
sales en sistemas suelo-agua (Rieu et al., 1998). experiencias particulares a un grupo
De todas maneras, no existe un criterio nico seleccionado de estos suelos, con el fin de
que fije esta variable ya que en el estudio de poder enunciar algn mecanismo plausible que
predicciones de prdidas de P por lavado o por explique el comportamiento de estos suelos
aguas de escorrenta, las relaciones w:s han ante la extraccin con agua.
oscilado entre 1,2:1 hasta 15:1 (Chapman et al.,
1997) o superiores, llegando hasta relaciones 2.1. Suelos
que oscilaban entre 100 y 2000 (Yli-Halla et al.,
1995; Yli-Halla et al., 2002) e incluso hasta El estudio se realiz con todas las muestras
10000 bajo condiciones de agitacin de suelos forestales y cultivadas descritas en el
cuasiestticas o turbulentas (Torrent y Delgado, captulo II (29 muestras), aunque con ocho de
2001). Tngase en cuenta que tanto la fuerza ellas, cinco de naturaleza forestal y tres
inica de los extractos como la composicin cultivadas, se realizaron experimentos
catinica de los mismos depender de la relacin especficos. Los suelos forestales corresponden a
w:s empleada. los horizontes A y B de los perfiles La
Esperanza, Las Lajas, Bona Camino y
58
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Garajonay, mientras que las muestras cultivadas, espectrofotmetro Shimadzu UV-160 (Kyoto,
V-2 y V-4, corresponden a suelos Japn), equipado con una cubeta de 1,0 cm de
rganominerales con caractersticas ndicas y paso de radiacin. Las medidas de las
carcter alofnico en general. La muestra absorbancias fueron realizadas inmediatamente
cultivada T2-S se trata de un suelo poco despus de cada extraccin, a los valores de
desarrollado sobre pumita fonoltica. pH original de cada extracto, con el fin de
prevenir los cambios estructurales debido a
2.2. Extractos suelo-agua
procesos de polimerizacin o la oxidacin del
COD (Gressel et al., 1995). Los extractos
La extraccin en fase acuosa se realiz fueron diluidos a una concentracin en la cual
siguiendo la metodologa empleada por Dufey el espectro de absorcin producido obedece la
y Marot (1987), modificado por Delvaux Ley de Lambert-Beer (Baes y Bloom, 1990).
(1988): se agitaron 10g de suelo con 25 ml de Este procedimiento constituye una adaptacin
agua destilada en un agitador mecnico durante del mtodo de Chen et al. (1977) para la
30 min., equilibrando posteriormente el medida de las relaciones E4/E6 de las
sistema a una temperatura de 4C durante 24h. sustancias hmicas.
El equilibrio se realiz a esta temperatura con Tambin se realiz la medida de la
el fin de prevenir la actividad biolgica y absorbancia de cada extracto a 272 nm, pues
favorecer la sedimentacin del material esta constituye una rpida estimacin de la
coloidal. Al finalizar este tiempo, las naturaleza aromtica del COD (Traina et al.,
suspensiones se centrifugaron durante 15 min. 1990) debido a que a esa longitud de onda se
a 2000g, realizndose una filtracin primaria produce el solapamiento de las transiciones p
por papel Whatman 42 (Whatman Ltd, Clifton, p* en las estructuras aromticas de los
NJ) y luego una secundaria a travs de filtro de arenos fenlicos, cidos benzicos, polienos e
ster de celulosa Millipore 0,45m (Millipore hidrocarburos aromticos policclicos con un
Corp., Milford, MA). En ambos filtrados se nmero de anillos igual o superior a dos
midieron el pH y la conductividad elctrica, (Gauthier et al., 1987).
determinndose los cationes y aniones
mayores, Al, Fe, P y carbono orgnico disuelto 2.4. Dilisis de los extractos acuosos
(COD). Tambin se realiz el equilibrio filtrados por 0,45 m
empleando relaciones agua:suelo (w:s) 25:1 y
75:1.
Los extractos 2,5:1 y 75:1 de las muestras
estudiadas fueron dializados para su
2.3. Espectroscopia ultravioleta-visible especiacin siguiendo el mtodo desarrollado
por LaZerte (1984). Los sacos empleados se
Las absorbancias de los extractos acuosos fabricaron a partir de membranas de dilisis
a 465 y 665 nm se midieron utilizando un
59
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Spectrapor 6 para un tamao molecular de (iii) Posteriormente, una parte del extracto se
paso de hasta 1000 Da y un dimetro de 11,5 acidific con H2SO4 2N para precipitar la
mm (relacin 3,5 de superficie a volumen); materia orgnica disuelta, determinndose
previamente fueron sumergidas en HNO3 al en el sobrenadante tanto el P soluble
1% durante 24 h y luego enjuagadas con agua reactivo e hidrolizable en medio cido
destilada antes de su uso. Un saco de dilisis (PSRA) como el P total presente en este
con 5 ml de agua destilada se sumergi en 100 medio (PSTA) (contribucin de este
ml del extracto (la cantidad de agua respecto al trabajo).
extracto no debe superar el 5% para evitar PSRA constituye una definicin
efectos de dilucin), equilibrndose el sistema operacional del ortofosfato libre pues la
durante 24h. Seguidamente, se retir el saco, se acidificacin puede hidrolizar una parte del P
agit fuertemente para mezclar su contenido, orgnico disuelto. La fraccin del P orgnico
se enjuag el exterior con agua destilada y se no hidrolizable en medio cido se encontrara
extrajo el dializado. En estos ltimos se incluida en la fraccin que hemos denominado
determinaron Al, Fe, P y COD. como P no reactivo insoluble en este medio
(PINRA), calculada como la diferencia entre
2.5. Fraccionamiento del P PT y PSTA.
(iv) en el interior de la membrana de dilisis

El fraccionamiento del P en los extractos (1000 Da). Los valores encontrados por

centrifugados, tanto los filtrados procedentes 1,05 (factor de dilucin debido a la adicin

de filtracin primaria como aquellos con de un saco con agua) se defini como P

filtracin secundaria, se realiz de acuerdo con dializable (PD) en el extracto original

la Fig. 1. (contribucin de este trabajo).

El fsforo total disuelto en los extractos (v) despus de aadir al extracto acuoso la

(PT) se determin una vez finalizada su enzima fosfatasa cida con el fin de valorar

digestin en autoclave con K2S2O8 y H2SO4 5N el posible P hidrolizable por ella.

(Hedley et al., 1982; Rowland y Haygarth, (vi) despus de tratar a la muestra de suelo con

1997). El fsforo reactivo disuelto se analiz: cloroformo y realizar la extraccin acuosa

(i) como la fraccin de P acuoso que ha para valorar el P microbiano extrable.

reaccionado directamente con los iones En los casos (v) y (vi) se siguieron las

molibdato (PR). pautas y clculos indicados en el captulo III.1.

(ii) mediante colorimetra despus de Las concentraciones de fsforo en las

tratamiento con carbn activo (PRC) (se diferentes fracciones fueron determinadas

agitaron 0.5 g de carbn con 30 ml del colorimtricamente mediante la formacin de

extracto de bicarbonato durante 30 min. con un complejo fosfomolbdico a una longitud de

posterior filtrado a travs de papel Whatman


No. 42) (contribucin de este trabajo).
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

(P R+P EN)-P R PR+PEN 1. 1000 Da


PEN PD
1. Hidrlisis PD+PND 2. Colorimetra
Enzimtica
2. Colorimetra Fumigacin del suelo (clorof ormo)
Colorimetra
Colorimetra Directa
PR PM
Directa 2,5x[(P R+P M)-P R]
Extracto acuoso
1. Carbn activo 1. S 2 O 8 2-
PRC PT
2. Colorimetra 2. Colorimetra
Colorimetra

H+
P recipitado Sobrenadante
Colorimetra 1. S 2 O 8 2-
P T - P STA Directa
2. Colorimetra

PINRA
PSRA PSTA

Figura 1. Diagrama que describe las distintas etapas del fraccionamiento del P en los
extractos acuosos. En negrita y cursiva se destaca la contribucin metodolgica de este
trabajo.

onda a 882 nm (Murphy y Riley, 1962); en Por ltimo, sealar que el protocolo
cada una de las determinaciones se realiz una completo de fraccionamiento se realiz en las
correccin colorimtrica en una alcuota de muestras forestales y cultivadas seleccionadas
cada extracto para eliminar la absorcin (filtracin primaria y secundaria). Para el
causada por la materia orgnica disuelta, conjunto de todos los suelos, el anlisis
omitiendo el cido ascrbico del reactivo cido realizado se llev a cabo en los extractos
molbdico (Hedley et al., 1982). Con los datos filtrados por 0,45 m.
de las fracciones de P determinadas en los
extractos filtrados a travs de papel Whatman 2.6. Fracciones de COD
No. 42 [PT, PR] y 0,45 m [PR (< 0,45 m),
PT (< 0,45 m)] se calcularon, por diferencia, Tal y como se indic anteriormente, el
las fracciones PNR (< 0,45 m), PNR (> 0,45 COD se determin en cada uno de los extractos
m), PR (> 0,45 m), PT (> 0,45 m) y (COD) y en los dializados (CODD). Con el fin
PTNR. de obtener otras fracciones de inters de

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

carbono disuelto, tambin se determin el 3. Resultados y discusin


COD en el sobrenadante de las disoluciones
acidificadas para acceder a la fraccin flvica 3.1. Liberacin de P con la dilucin en el
(CODF) de los extractos y por diferencia conjunto de todas las muestras estudiadas (con
obtener la fraccin hmica (CODH=COD- filtracin secundaria, < 0,45 m)
CODF).
Las figuras 2 y 3 muestran la influencia de
2.7. Tcnicas analticas la dilucin sobre el P soluble, COD y pH. El
valor de este ltimo parmetro se increment
Las concentraciones de los cationes moderadamente al aumentar la relacin w:s.
mayoritarios en el extracto (Ca, Mg, Na y K) Tanto las concentraciones de PR y PSRA (mg
se determinaron mediante espectroscopia de l-1) permanecieron relativamente constantes a
absorcin atmica (espectrofotmetro Perkin lo largo de las relaciones w:s utilizadas (Tabla
Elmer 3100), el cloruro mediante valoracin 1), aunque el COD disminuy
potenciomtrica normal (Frakenberger et al., significativamente (Fig. 3); este resultado est
1996) y el sulfato mediante valoracin en consonancia con los encontrados por otros
potenciomtrica con electrodo selectivo de Pb autores (Zsolnay, 1996; Chapman et al., 1997;
(Espino-Mesa y Hernndez-Moreno, 1994). El Staunton et al., 2002) en suelos de naturaleza
COD y el COD dializable (CODD) se no volcnica. Sin embargo, hemos encontrado
determinaron midiendo la prdida de color del concentraciones elevadas para PT en los
complejo Mn(III)-pirofosfato reducido por el C extractos 2,5:1. Los valores de PR oscilaron
orgnico en presencia de H2SO4 concentrado desde el 70 al 80% de PT, lo que indica que
(Bartlett et al., 1988). Tanto en los filtrados- entre el 20 y el 30% del PT no fue hidrolizable
0,45m como en los dializados, la durante la determinacin colorimtrica del P
concentracin de Al monmero reactivo fue (Tabla 1); esta fraccin del PT probablemente
determinada con violeta de pirocatecol (VPC) consista en P orgnico no hidrolizable.
(Dougan y Wilson, 1974) con unos 4 min. de Las figuras 4 y 5 representan la relacin
tiempo de contacto (Al-4 y AlD), mientras que entre los valores de P (PR y PT) en los
el Al monmero total (Al) se determin diferentes extractos, mientras que en la Tabla 2
despus de 2h de reaccin (Seip et al., 1984); se presentan las ecuaciones de regresin lineal
el F fue determinado mediante electrodo de in entre los valores de P para los diferentes
selectivo. extractos de 29 muestras de suelo. La
Las actividades de todas las especies linealidad observada muestra que el equilibrio
inicas en los extractos y en los dializados se de saturacin se encuentra gobernado por las
calcularon con el programa MINTEQA1 relaciones w:s. Por otra parte, nuestros datos
(Brown y Allinson, 1987). El Al y AlD se parecen adaptarse al modelo simplificado dado
usaron como datos de entrada para el Al. por Sharpley et al. (1981) para la liberacin del
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Figura 2. Efecto de la dilucin sobre PR Figura 4. Relacin entre los valores de PR


en los suelos cultivados () y forestales () en el rango w:s estudiado (, todas las
estudiados. Valores medios al 95% de muestras; , suelos forestales).
intervalo de confianza y barras de error
igual a 2xESM.

Figura 3. Efecto de la dilucin sobre el pH Figura 5. Relacin entre los valores de PT


() y COD () en los suelos forestales y en el rango w:s estudiado (, todas las
cultivados estudiados. Valores medios al muestras; , suelos forestales).
95% de intervalo de confianza y barras de
error igual a 2xESM.
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Tabla 2. Ecuaciones de regresin que relacionan los valores de P-0,45m (PR y PT) en los
diferentes extractos acuosos. Los valores entre parntesis de la ecuacin representan las
relaciones w:s (l kg-1) (todos los suelos: n=29; suelos forestales: n=15; ESM: error estndar de
la media)
PR (mg l-1)

PR(2,5:1) = 1,05PR(25:1) 6x10 3 n=29, r=0,99, ESM=0,38


PR(2,5:1) = 0,99PR(25:1) 0,017 n=15, r=0,98, ESM=0,07
PR(25:1) = 0,94PR(75:1) + 0,081 n=29, r=0,98, ESM=0,69

PR(25:1) = 0,99PR(75:1) 9x10 3 n=15, r=0,96, ESM=0,09


PR(2,5:1) = 0,98PR(75:1) + 0,104 n=29, r=0,96, ESM=0,97
PR(2,5:1) = 0,99PR(75:1) 0,020 n=15, r=0,96, ESM=0,09
PT (mg l-1)
PT(2,5:1) = 1,12PT(25:1) + 0,014 n=29, r=0,99, ESM=0,20
PT(2,5:1) = 1,02PT(25:1) 0,019 n=15, r=0,98, ESM=0,06
PT(25:1) = 1,14PT(75:1) + 0,184 n=29, r=0,97, ESM=0,99
PT(25:1) = 1,12PT(75:1) + 0,031 n=15, r=0,95, ESM=0,11
PT(2,5:1) = 1,07PT(75:1) - 0,074 n=29, r=0,99, ESM=0,44
PT(2,5:1) = 1,06PT(75:1) 0,013 n=15, r=0,97, ESM=0,09

P al agua: condiciones experimentales, la ecuacin (1) se


transforma en:
Pd=kPatW (1)
PR= K(w:s) (2)
donde W es la relacin w:s del sistema en
equilibrio, Pa representa la cantidad de P donde K= kPat, t=30 min y Pa= POL.
liberado por desorcin que, por motivos Los valores obtenidos para oscilaron
prcticos, se asimila al estimado como P desde 1 hasta 1,26 para PR. Para =1, la
disponible (pe. P Olsen) y t es el tiempo de ecuacin (2) predice que la concentracin de P
extraccin (h). Los coeficientes de extraccin (k, (mg l-1) permanecer constante sobre el rango
, y ) conforman un conjunto de constantes de w:s, tal y como observamos en este estudio.
caractersticas para un suelo dado; k representa Para Sharpley (1983) la constante est
un trmino asociado a la capacidad asociada al poder tampn (buffer) del suelo y
amortiguadora del suelo y expresa la que esta al aumentar por efecto de la dilucin,
velocidad de desorcin de P. Para nuestras provoca que la interaccin entre el suelo y

65
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

agua tenga un importante efecto sobre el fuertemente cido de la disolucin molbdica


proceso de desorcin de P. Para este autor, (pH<1), con la subsecuente sobreestimacin
valores bajos de la constante podran estar del ortofosfato libre (Gerke y Jungk, 1991; Fox
relacionados con fenmenos de desorcin pues y Comerford, 1992a).
el mayor contacto con la superficie de los Torrent y Delgado (2001), en una amplia
suelos al aumentar la relacin w:s provocara tipologa de suelos europeos, han encontrado
una disminucin en la capacidad de los que a bajas relaciones w:s (pe. 1:1), PR parece
mismos para seguir reteniendo P (tanto constituir un ndice muy til para predecir la
orgnico como inorgnico sorbido). liberacin potencial de P desde el suelo al agua
La capacidad de los suelos para liberar P para diferentes condiciones de desorcin de
con el incremento de la dilucin confirma fosfato, aunque este poder predictor parece
trabajos previos en Andosoles y suelos ndicos disminuir al aumentar la relacin w:s; para este
(Negrn et al., 1993). Sorn-Srivichai et al. caso, Freese et al. (1995) ponen de manifiesto
(1988) encontraron un resultado similar en un que la cintica de liberacin de fosfatos podra
Eutrochrept de Nueva Zelanda el cual verse enmascarada por procesos de readsorcin
presentaba concentraciones constantes de P en de P. Por otra parte, Sorn-Srivichai et al.
disolucin, aumentando la desorcin al (1988) sugieren que en las medidas realizadas
aumentar la relacin w:s. Por otro lado, es a mayores relaciones w:s se incluyen
conocido el hecho de que la concentracin del cantidades relacionadas con el P que se
P en la disolucin del suelo est controlado por encuentra sobre las superficies adsorbentes
el equilibrio que se establece entre el sistema (cantidad de fosfato, Q) y, adems, podra ser
de sorcin del suelo, la composicin de la indicativo de la capacidad tampn del suelo
disolucin del suelo y los compuestos de P para el P (dQ/dI, donde I constituye el factor
precipitados (McDowell y Sharpley, 2003). intensidad). En nuestro caso, el hecho de que
Por ello hemos atribuido el comportamiento los valores de PR para la relacin 75:1 oscilara
encontrado en nuestras muestras a: (i) la entre el 60% y ms del 100% del P extrable
solubilizacin de una parte del P mineral para con bicarbonato, sugiere que el PR en
que el sistema pueda mantener la Andosoles puede incluir al factor capacidad.
concentracin de P en disolucin (Schoenau y
Huang, 1991; Sparks, 1999) y (ii) los cambios 3.2. Muestras seleccionadas de suelos
en las transiciones conformacionales de la forestales y cultivados para el estudio de
materia orgnica a elevadas relaciones w:s que dilisis
podran provocar la ruptura y desorcin de
compuestos hmicos que favoreceran la
3.2.1. Influencia de la relacin w:s sobre las
hidrlisis del P asociado (fosfatos de inositol u
propiedades qumicas de los extractos filtrados
otros steres fosfatos) durante su
por 0,45 m
determinacin analtica, debido al medio
66
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

En primer lugar, y al igual que ocurri con de un cido poliprtico dbil, en horizontes
las propiedades estudiadas para el conjunto de orgnicos (O y E) de Spodosoles, aunque
todos los suelos, la dilucin ha ejercido un muestras procedentes de horizontes B
importante papel en las propiedades qumicas mostraron una mayor intensidad tampn del
de los extractos filtrados por 0,45 m en las pH en relacin con la dilucin. Sin embargo,
muestras seleccionadas (Tabla 3). Con el en un trabajo posterior, Skylberg et al. (2001)
incremento de la relacin w:s, el pH de los indican que la casustica que se encuentra
extractos aument en todas las muestras. Sin detrs de los cambios de pH en estos suelos
embargo, el incremento fue mucho mayor en estara asociada a: (i) los cambios en la
los horizontes orgnicos y en las muestras cantidad de materia orgnica soluble, (ii) la
cultivadas que en los horizontes B; en estos fuerza inica de la disolucin del suelo y (iii)
suelos, el pH permanece constante o la composicin relativa del Al y el H adsorbido
incrementa ligeramente al aumentar w:s. El en el suelo. Por ello, en Andosoles y suelos
incremento de este parmetro con la dilucin ndicos podra ocurrir un mecanismo tampn
parece indicar una posible disminucin de la mucho ms complejo que un simple equilibrio
+
capacidad de los suelos para liberar H . de un cido dbil, en donde parmetros como
Es bien conocido el efecto que sobre el el carbono disuelto y el contenido en Al
aumento pH ejerce la dilucin (Thomas, 1996). podran jugar un papel preponderante en el
De todas maneras, el efecto no es proporcional: control del pH de los extractos.
un incremento de w:s desde la relacin 1:1 a Las cantidades de COD disminuyeron
10:1 solo parece provocar un aumento medio significativamente al aumentar la relacin w:s.
de 0,4 unidades de pH (Davis, 1943; Thomas, Los rangos obtenidos en los extractos 2,5:1 y
1996). En suelos cidos, este efecto parece 75:1 oscilaron desde 142 a 16 mg l-1 y desde
deberse a que la dilucin tiende a aumentar la 22 a 1,5 mg l-1 respectivamente. El hecho de
disociacin de H+ desde la superficie del suelo que la materia orgnica liberada disminuyera
y, adems, aumentar la hidrlisis de cualquier podra indicar que las cantidades de carbono
especie de Al que pudiese estar presente. soluble disuelto estuviesen controlados desde
Ambos efectos ayudan a tamponar la la fase slida orgnica y la relacin w:s. En
disolucin y, por tanto, a mantener el pH en experimentos de equilibrio, Nodvin et al.
un valor relativamente estable en este rango de (1986) han encontrado que las cantidades de
dilucin. En nuestro caso, se produce este COD liberadas a la fase acuosa por el suelo
efecto con un aumento medio de 0,4 unidades son funcin lineal de las cantidades iniciales de
de pH al incrementar 30 veces el contenido de C aadido al sistema suelo-agua. Este
agua para la extraccin. resultado fue interpretado en trminos de una
Sin embargo, Skyllberg (1995) ha obtenido distribucin simple entre las fases slidas y
+
un aumento importante en la liberacin de H acuosas de acuerdo con un coeficiente de
con la dilucin, comportamiento asimilable al
67
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Tabla 3. Efecto de la relacin w:s sobre la composicin de la disolucin del suelo (mg l-1)
Suelo Horizonte pH CE (dS m-1) I (M)** PR COD Al Al-4
W:s 2,5:1
V-2 Cultivado 4,3 0,55 0,0029 0,9 16 1,8 1,0
V-4 Cultivado 4,2 0,73 0,0018 2 37 1,9 1,9
T-2S Cultivado 7,4 1,43 0,0089 12 142 0,7 0,5
Esperanza A1 6,9 0,20 0,0009 0,3 25 0,3 0,3
Garajonay A1 5,8 0,46 0,0019 1 33 0,7 0,6
Las Lajas A1 5,4 0,21 0,0016 0,4 82 0,8 0,6
Las Lajas Btg 6,0 0,18 0,0004 0,1 14 0,6 0,4
Bona Camino Bw3 5,2 0,10 0,0002 0,3 17 0,3 0,3
*
ESM 0,4 0,16 0,0010 1,4 16 0,2 0,2
W:s 75:1
V-2 Cultivado 5,2 0,07 0,0004 1 7 0,5 0,5
V-4 Cultivado 4,8 0,10 0,0004 2 4 0,6 0,5
T-2S Cultivado 7,9 0,11 0,0009 9 25 0,6 0,6
Esperanza A1 7,8 0,05 0,0003 0,3 2 0,6 0,5
Garajonay A1 6,3 0,06 0,0003 1 15 0,4 0,3
Las Lajas A1 6,1 0,04 0,0003 0,7 15 0,6 0,5
Las Lajas Btg 6,4 0,03 0,0001 0,1 2 0,5 0,4
Bona Camino Bw3 5,7 0,02 0,0001 0,2 8 0,2 0,1
ESM 0,4 0,01 0,0001 1 3 0,1 0,1

*
Error estndar de la media.
**
Fuerza Inica calculada a partir de los valores de EC mediante la relacin emprica de Gillman y
Bell (1978): I = 0,0120CE 0,0004.

reparto entre ambas. Nuestros resultados ponen Este hecho es atribuido al efecto de la dilucin
de manifiesto que el posible reparto de la sobre la presencia de la materia orgnica
materia orgnica entre el suelo y la fase acuosa coloidal disuelta en los extractos. Los cambios
parece ser funcin de la relacin w:s. La en las transiciones conformacionales de la
conductividad elctrica y la fuerza inica de materia orgnica a altas relaciones w:s podra
los extractos 2,5:1 fueron significativamente provocar la ruptura de compuestos hmicos y,
mayores que los extractos 75:1. Los rangos por tanto, desorcin de molculas orgnicas de
obtenidos para la fuerza inica de la disolucin baja masa molecular lo que podra hacer
del suelo en los extractos oscilaron desde 10-3 a disminuir la dispersin de la materia orgnica
9.10-3 M y 10-4 a 9.10-4 M, respectivamente.

68
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

coloidal y, subsecuentemente, disminuir la tendencia encontrada para las diferentes


fuerza inica en los extractos. especies de P estudiadas en el conjunto de
Los valores de Al reactivo y total tambin todas los suelos fue prcticamente la misma en
disminuyeron, aunque en una proporcin las muestras forestales y cultivadas:
menor que el COD. Esta diferencia podra estar a) Parte del PT consisti en P orgnico no
asociada con las elevadas cantidades de COD hidrolizable en medio cido.
en los extractos 2,5:1 y con el incremento del b) Los valores de PR se encontraban entre los
pH provocado por la dilucin. En este sentido, valores de PSTA y PSRA.
algunos autores (Walker et al., 1990) La diferencia entre PR y PSRA la hemos
consideran que la concentracin de Al en atribuido a la hidrlisis del P asociado a las
disolucin podra estar controlada por el pH de fracciones flvicas (Pf = PSTA PSRA) y
la misma y por la saturacin de las posiciones hmicas (Ph = PINRA Pf) del COD durante
orgnicas de intercambio del suelo con este la determinacin de PR.
elemento, mientras que otros (Mulder y Stein, Por otro lado, los valores de P obtenidos
1994) parten de la premisa que parte de la despus del tratamiento con carbn activo
solubilidad del Al estara controlada por las (PRC) aumentan con la dilucin en los suelos
modificaciones que ocurriran en la fraccin cultivados y en uno de los suelos forestales
de Al del suelo asociada con la materia (Tabla 4), el resto est por debajo del lmite de
orgnica. deteccin. Al igual que postulamos en el
Nuestros resultados parecen indicar que captulo anterior, PRC constituira la
alguna de las caractersticas qumicas de los estimacin del ortofosfato libre en el extracto
extractos acuosos de Andosoles y suelos y, por tanto, PSRA-PRC representara la
ndicos que podran estar influyendo sobre los cantidad de PSRA que est sobreestimado por
mecanismos de liberacin del Al, parecen estar la hidrlisis de los compuestos orgnicos en la
controlados por los cambios en la relacin w:s. disolucin molbdica fuertemente cida (Tabla
4).
3.2.2. Influencia de la dilucin sobre la Estos resultados son consistentes con la
liberacin de P y sus distintas fracciones extraccin, al aumentar la relacin w:s, de
cantidades importantes de P orgnico
Al igual que para el conjunto de todos los hidrolizable en medio cido. Este P, en
suelos, la concentracin de PR en disolucin principio lbil, formara parte de la fraccin de
-1
(mg l ) permaneci relativamente constante en P soluble disponible. Nuestros datos parecen
el rango de relaciones w:s estudiadas (Tabla 3). volver a indicar que la relacin w:s controlara
Esto signific una respuesta positiva a los la liberacin y calidad de las fracciones de P
cambios de w:s en trminos de incremento de extradas, constituyendo el P orgnico la
PR y del resto de fracciones de P liberadas (mg fraccin ms importante para este elemento en
kg-1) (Tabla 4). En lneas generales, la
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

70
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Tabla 5. Fraccionamiento del COD en los extractos acuosos-0,45 m (mg kg-1) a las
dos relaciones w:s (2,5:1 o 75:1 l kg-1).
Suelo Horizonte COD CODf CODh
w:s 2.5:1
V-2 Cultivado 39 30 9
V-4 Cultivado 112 92 20
T-2S Cultivado 520 480 40
Esperanza A1 86 70 16
Garajonay A1 84 81 3
Las Lajas A1 198 148 50
2Btg 30 30 0
Bona Bw3 44 40 4
ESM* 58 - -
w:s 75:1
V-2 Cultivado 549 520 29
V-4 Cultivado 288 280 8
T-2S Cultivado 1700 1540 160
Esperanza A1 117 107 10
Garajonay A1 990 985 5
Las Lajas A1 1113 1025 88
2Btg 125 125 0
Bona Bw3 463 455 8
ESM 197 - -
*
Error estndar de la media.

la disolucin del suelo en Andosoles y suelos la disminucin que mostr en disolucin (mg
ndicos. C l-1) (Tabla 3). Las cantidades de COD
oscilaron desde los 30 mg C kg-1 hasta los 520
3.2.3. COD, relaciones E4/E6 y absorbancia a mg C kg-1 para los extractos 2,5:1 y desde los
272 nm 125 mg C kg-1 hasta 1700 mg C kg-1 para los
extractos 75:1. La diferencia en COD entre
En la Tabla 5 se recoge la influencia que ambos extractos se debi fundamentalmente al
tuvo la dilucin sobre el carbono orgnico incremento de la fraccin flvica (Tabla 5). En
extrable en agua (COD). Los valores de COD todos los extractos, esta fraccin fue
-1
(mg C kg suelo) aumentaron moderadamente significativamente mayor que la hmica,
con el incremento de la relacin w:s, a pesar de aunque en los extractos 75:1 las cantidades de

71
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

CODh no fueron diferentes a las encontradas mayores relaciones E4/E6 (Gressel et al.,
en los extractos 2,5:1 (excepto la muestra 1995).
sobrefertilizada T2-S). Tambin existieron marcadas diferencias
Tipping y Hurley (1988) ponen de en los valores de absorbancia a 272 nm en
manifiesto la necesidad de una elevada carga todas las muestras en correspondencia con los
negativa en la interfase slido/disolucin para cambios en las relaciones w:s. Los valores de
que se produzca la solubilizacin de los cidos absorbancia fueron mucho ms elevados en los
orgnicos de elevada masa molecular, cosa que extractos 2,5:1 que en los 75:1 (Fig. 8). Traina
no ocurre con los cidos de menor masa que et al. (1990) consideran que el contenido de C
requieren una carga neta negativa mucho aromtico en cidos hmicos puede ser
menor para pasar a la fase acuosa. Esto podra estimado mediante la medida de la absorbancia
indicar dos cosas, o bien que los cidos de en UV (272 nm) de disoluciones acuosas de
elevada masa molecular se encuentran cidos hmicos. Considerando lo anterior,
precipitados fuera de la disolucin del suelo en nuestros resultados sugieren la presencia de
un mayor grado que los cidos orgnicos ms compuestos aromticos con un amplio rango
pequeos, a relaciones w:s elevadas, o que los de masas moleculares en los extractos 2,5:1; el
primeros podran sufrir reacciones de hidrlisis carcter aromtico del COD tendera a
por efecto de la dilucin, liberando molculas disminuir al incrementarse la relacin w:s.
mucho ms pequeas contribuyendo de esta Esto es consistente con las altas cantidades de
forma al aumento de la fraccin flvica del CODf con un carcter menos aromtico en los
COD. extractos 75:1. La disminucin en el carcter
En este sentido, las relaciones E4/E6 aromtico y el tamao de la materia orgnica
fueron significativamente mayores en los soluble extrada a elevadas relaciones w:s
extractos 75:1 que en los 2,5:1 (Fig. 7). Esto podran atribuirse, entonces, a la ruptura de las
parece indicar que la dilucin ha jugado un estructuras (moieties) hmicas, incluyendo la
papel importante en las relaciones obtenidas y, ruptura de posibles compuestos aromticos y
por tanto, sobre la calidad de la materia otros steres (polisacridos) (Baldock et al.,
orgnica extrada. Chen et al. (1977) atribuyen 1992), con lo que se incrementara la fraccin
el carcter de las relaciones E4/E6 a los flvica.
tamaos moleculares y a las masas (aumenta la
relacin E4/E6 cuando disminuye el tamao 3.2.4. Fracciones reactivas y no reactivas
molecular). Los resultados seran consistentes calculadas en funcin del tipo de filtrado
con la extraccin de cromforos de pequea
talla molecular o con un menor grado de
En las Tablas 6, 7 y 8 se recogen los datos
condensacin, estructuras que contribuiran a
relativos a la caracterizacin de los extractos
dar al COD un carcter menos aromtico a
acuosos filtrados por Whatman 42. En ellos se

72
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

V-2
V-4
T-2S
Esperanza A1 w:s 2,5:1
w:s 75:1
Garajonay A1
Las Lajas A1
Las Lajas 2Btg
Bona Bw3
0 2 4 6 8 10 12
RELACIN E4/E6

Figura 6. Relaciones E4/E6 en los extractos acuosos a las dos relaciones w:s estudiadas.

V-2
V-4
T-2S
Esperanza A1 w:s 2,5:1
w:s 75:1
Garajonay A1
Las Lajas A1
Las Lajas 2Btg
Bona Bw3
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5

Unidades de Absorbancia

Figura 7. Absorbancia a 272 nm en los extractos acuosos a las dos relaciones w:s estudiadas.

73
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Tabla 6. Efecto de la relacin w:s sobre la composicin de la disolucin del suelo (mg l-1) en los
extractos filtrados por Whatman 42
Suelo Horizonte pH CE (dS m-1) I (M)** PR COD Al Al-4
w:s 2,5:1
V-2 Cultivado 4,0 0,72 0,0082 1,9 30 3,5 2,0
V-4 Cultivado 4,0 0,99 0,0115 3,2 54 2,9 2,5
T-2S Cultivado 7,5 1,83 0,0216 17 192 1,1 0,8
Esperanza A1 6,4 0,29 0,0031 0,9 35 0,6 0,5
Garajonay A1 5,2 0,66 0,0075 1,8 55 1,2 0,9
Las Lajas A1 5,0 0,31 0,0033 0,9 107 1,3 0,9
Las Lajas Btg 5,5 0,27 0,0028 0,5 33 1,1 0,8
Bona Camino Bw3 4,9 0,18 0,0018 0,7 30 0,5 0,4
ESM* 0,8 0,43 0,0047 3,4 41 0,7 0,6
w:s 75:1
V-2 Cultivado 5,2 0,07 0,0004 2,1 15 0,8 0,7
V-4 Cultivado 4,8 0,10 0,0008 2,8 9 0,9 0,7
T-2S Cultivado 7,9 0,11 0,0009 13 37 0,6 0,6
Esperanza A1 7,8 0,05 0,0002 0,8 9 0,6 0,5
Garajonay A1 6,3 0,06 0,0003 1,4 22 0,8 0,5
Las Lajas A1 6,1 0,04 0,0001 1,0 26 0,8 0,6
Las Lajas Btg 6,4 0,03 0,0001 0,5 11 0,6 0,5
Bona Camino Bw3 5,7 0,02 0,0001 0,6 14 0,3 0,2
ESM 0,8 0,03 0,0002 2,6 8 0,1 0,1

*
Error estndar de la media.
**
Fuerza Inica calculada a partir de los valores de EC mediante la relacin emprica de Gillman y
Bell (1978) : I = 0,0120CE 0,0004.

infiere una tendencia similar a los extractos 2,5:1 que en los extractos 75:1, pudiendo ser
filtrados por 0,45 m, con unos valores de pH en algunos casos el 70% del PT del extracto
ligeramente inferiores y de conductividad filtrado por Whatman 42. Esto parece indicar
elctrica ligeramente superiores. que formas del P mucho ms condensadas y no
Con respecto a las fracciones reactivas y reactivas son extradas a diluciones bajas. En
no reactivas del P, en las Tablas 9 y 10 se los extractos 75:1, la fraccin >0,45m
recogen los resultados obtenidos. Se observa contribuye menos a la fraccin total del P
como la fraccin de P total >0,45m tiene un extrable (Tabla 9). Es aqu donde radica la
peso mucho ms importante en los extractos importancia de la seleccin de las fracciones

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Tabla 7. Fraccionamiento del COD en los extractos acuosos (mg kg-1) filtrados por
Whatman 42 a las dos relaciones w:s (2,5:1 o 75:1 l kg-1)
Suelo Horizonte COD CODF CODH
w:s 2.5:1
V-2 Cultivado 55 36 19
V-4 Cultivado 137 95 40
T-2S Cultivado 611 506 105
Esperanza A1 106 77 29
Garajonay A1 120 98 22
Las Lajas A1 228 158 70
2Btg 52 40 12
Bona Bw3 60 45 15
ESM* 124 - -
w:s 75:1
V-2 Cultivado 609 532 77
V-4 Cultivado 312 282 30
T-2S Cultivado 1799 1549 250
Esperanza A1 149 120 29
Garajonay A1 1115 1010 105
Las Lajas A1 1167 1045 122
2Btg 158 140 18
Bona Bw3 521 477 44
ESM 491 - -
*
Error estndar de la media.

extrables en fase acuosa: diferentes fracciones aguas. En este sentido, Devlin et al. (2000)
podran indicar diferentes formas nativas de P ponen de manifiesto que el P particulado
que han sido solubilizadas del suelo por el presente en las aguas de escorrenta parece
agua. Esto puede significar o bien que a bajas estar asociado a los sedimentos que son
diluciones las formas ms complejas son transportados a las fases minerales fosfatadas
desorbidas de la fase slida con una mayor de Al, Fe y Ca o incorporado a la materia
facilidad que a diluciones elevadas o, por el orgnica en forma de P orgnico, en principio
contrario, estas formas podran verse sometidas no disponible, cuya disponibilidad estara
a procesos de hidrlisis durante la extraccin controlada a travs de ciertos procesos
que las transformaran en formas ms simples qumicos, biolgicos e hidrolgicos (Mallarino
y que seran fcilmente transportables por las et al., 2002).

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

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Los datos ponen de manifiesto que el P asociaciones complejas del P con la materia
extrado en fase acuosa parece estar asociado a orgnica relacionada con partculas mayores de
partculas de tamao inferior a 0,45 m, en 0,45 m. En este sentido, Pant et al. (2002) han
gran parte reactivo, aunque no es descartable observado elevadas cantidades de P orgnico en
que una parte de este P pudiera haber sido la fraccin >0,45m que podran tener un
arrastrado por partculas superiores a 0,45 m, carcter biodisponible importante a pesar de
quedando atrapado por el filtro estar asociado a partculas que tienen un bajo
independientemente de la dilucin empleada. potencial de hidrlisis enzimtica. Por tanto sera
Esto explicara los bajos valores obtenidos para interesante un estudio con detenimiento de la
el PRC que, como hemos establecido, podra fraccin orgnica y, por supuesto, rganomineral
constituir una medida del ortofosfato libre y, del P en suelos como los Andosoles, ricos en
por tanto, de disponibilidad inmediata para la materia orgnica con gran capacidad para
planta desde la disolucin del suelo. asociarse con los materiales amorfos reactivos
Los datos de COD parecen poner de que podran controlar el paso del P a la
manifiesto que una parte importante de la disolucin del suelo.
fraccin hmica de los extractos acuosos qued Por ltimo, concluir que la definicin de
retenida por el filtro, independientemente de la fracciones reactivas y no reactivas de P en
dilucin realizada, aunque el grueso principal funcin del tipo de filtrado, brinda la
del C disuelto parece tener un tamao de oportunidad de establecer un criterio fsico del
partcula inferior a 0,45 m (Tabla 10). Los tamao de las partculas de P que son extrables
valores de Al reactivo de tamao superior a 0,45 por el agua. Sin embargo, creemos conveniente
m (Tabla 10), aunque importantes, constituyen que esta clasificacin debe completarse con el
solo una pequea fraccin del total extrado anlisis de lo que qumicamente representa cada
(Tabla 6). Este dato pone en evidencia su una de ellas ya que, a fin de cuentas, estamos
asociacin con la materia orgnica disuelta, interesados de cun disponible puede ser el P
posiblemente de elevada masa molecular, disponible para las plantas desde la disolucin
retenida en el filtro. Los resultados parecen del suelo, incluida su naturaleza qumica y las
confirmar que la materia hmica de las asociaciones que puede formar, mxime en
asociaciones del tipo P-Al-humus presentes en el suelos como los Andosoles que per se necesitan
extracto acuoso sean, en gran medida, de una metodologa especfica.
naturaleza flvica, con un tamao de partcula <
0,45 m, aunque sin descartar la posibilidad de 3.2.5. Fsforo hidrolizable por la enzima
que existan otros compuestos orgnicos de P fosfatasa y P microbiano
asociados con material hmico presente en el
suelo y otras asociaciones inorgnicas que Al igual que ocurri en los extractos de
contribuyan a la concentracin de P en bicarbonato, una fraccin importante de PT de
disolucin. Tampoco se pueden descartar
79
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Tabla 11. Influencia de la dilucin (extractos-0,45m) sobre el P hidrolizado por la enzima


fosfatasa y sobre las fracciones de P, C y Al liberadas por el cloroformo (mg kg-1) ( error
estndar de la media)
Suelo Horizonte PEN PEN/PNR(%)* PM CODM Al-4M
w:s 2.5:1
V-2 Cultivado 10,2 50 0,50,0 453 60,2
V-4 Cultivado 30,2 50 10,2 1229 90,5
T-2S Cultivado 151 35 80,4 57821 50,2
Esperanza A1 0,20,0 22 0,20,0 956 30,1
Garajonay A1 20,3 67 0,50,0 917 60,3
Las Lajas A1 0,60,0 60 0,50,0 22114 50,3
2Btg 0 0 0,10,0 343 40,1
Bona Camino Bw3 0,50,0 50 0,20,0 533 40,2
w:s 75:1
V-2 Cultivado 505 63 60,4 59921 554
V-4 Cultivado 242 92 110,8 30018 493
T-2S Cultivado 27311 58 322 1779110 594
Esperanza A1 40,3 100 20,2 14810 414
Garajonay A1 222 85 60,3 101663 313
Las Lajas A1 141 78 20,1 115077 493
2Btg 10,0 33 10,1 17511 382
Bona Camino Bw3 191 83 140,2 53022 192
*
PNR (<0,45m)

los extractos acuosos fue hidrolizada por la PNR hidrolizable por la fosfomonoesterasa
enzima fosfatasa (Tabla 11). La hidrlisis fue alcalina, aunque estos autores indican que
mayor para la relacin 75:1 que para la otros investigadores han encontrado valores
relacin 2,5:1. PEN oscil entre el 20 y el 60% superiores, utilizando tanto la fosfatasa cida
del PNR (<0,45m) para el caso de la relacin como alcalina, y que se ajustan a los resultados
2,5:1 y entre el 30 y el 100% de esta fraccin obtenidos en este trabajo (Pant et al., 1994;
para el caso de la relacin 75:1. Esto significa Shand y Smith, 1997; Pant y Warman, 2000).
que gran parte del P hidrolizado por la enzima De todas maneras, en extractos de bicarbonato
fosfatasa procede de la fraccin orgnica no de suelos cultivados, el propio equipo del Dr.
reactiva ante el molibdato. Estos valores Turner (Turner et al., 2003) encuentra valores
difieren con los obtenidos por Turner et al. de hidrlisis de PO que oscilaban entre el 30 y
(2002a) que encuentran bajas cantidades de el 60%.

80
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Tal y como explicamos en el captulo de tipo I (HA-Al-P) y II (HA-Al-PO), analizados


anterior, PEN proviene de la hidrlisis de en el captulo anterior, y que la enzima fosfatasa
monosteres fosfatos. Sin embargo, su presencia cida podra hidrolizar en el caso de los
en los extractos acuosos parece ser escasa complejos tipo II. Esto sugiere que la solubilidad
debido principalmente a que estos compuestos de este tipo de complejos hacia la disolucin del
se hidrolizan rpidamente al ser aadidos al suelo podra tener un importante papel en la
suelo (Bowman y Cole, 1978; Dick y Tabatabai, bioasimilabilidad del P en suelos de naturaleza
1978) por lo que su tiempo de residencia en la volcnica.
disolucin del suelo debera ser escaso (Turner En cuanto a la fraccin microbiana, los
et al., 2002a). Esto significa que nuestros valores de PM son relativamente bajos con
resultados podran ser compatibles con la respecto al resto de fracciones estudiadas para
presencia en los extractos acuosos de ambas relaciones w:s (Tabla 11). Sin embargo,
monosteres fosfatos lbiles, disteres fosfatos e los valores de CODM son superiores a los de
incluso hexafosfatos de inositol (HPI) COD. Esto parece indicar que el P liberado por
potencialmente hidrolizables por la fosfatasa la lisis bacteriana se ha fijado en el suelo,
cida (Shand y Smith, 1997; Haynes et al., desplazando materia orgnica lo que se
2000). traducira en un aumento del COD. Por otro
Por otro lado, el incremento del porcentaje lado, se observa un aumento del Al reactivo por
de PNR hidrolizable por la enzima para la efecto del cloroformo lo que indica la presencia
relacin w:s 75:1 parece indicar que al disminuir de asociaciones Al-humus, posiblemente
la fuerza inica podra: (i) hidrolizar a asociado al P obtenido. El efecto del tratamiento
monosteres fosfatos y una parte de los disteres del suelo con cloroformo y de la relacin w:s se
presentes en el suelo, facilitando el ataque traduce en un aumento de estas asociaciones en
posterior de la enzima y (ii) liberar HPI que, en los extractos lo cual parece indicar que durante
principio, no constituye una fraccin el proceso de hidrlisis bacteriana se han podido
biodisponible pues se encuentra protegida de producir reagrupamientos de las fracciones de P,
ataques enzimticos en el suelo debido a que en teora lbiles, con la liberacin de estos
est fuertemente complejada a compuestos de Al complejos. Este anlisis coincide con los
(en suelos ndicos a los oxihidrxidos y a resultados obtenidos en los extractos de
material alofnico) y Ca del suelo (Turner et al., bicarbonato. A favor de esta hiptesis se
2002b). Los cambios conformacionales de la encuentra el hecho de que los valores de PM y
materia orgnica por efecto de la fuerza inica CODM para las relaciones 75:1 son mayores
(Evans, 1985) que tambin tendra su efecto cuando lo comparamos con los obtenidos por
sobre el estado de los agregados durante la otros autores que previamente haban sometido a
extraccin, ayudara a la solubilizacin de HPI. sus muestras a tratamientos de fertilizacin
Esto pone de manifiesto la posibilidad de que en (Thien y Myers, 1992; Kouno et al., 1999; Oehl
los extractos se encuentren presentes complejos et al., 2001).
81
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

3.2.6. Experimento de dilisis Las relaciones P a COD (Tabla 7)


sugieren la presencia en los extractos de
Los resultados para el Al, COD y P en los compuestos orgnicos de estos elementos, si
extractos 2,5:1 se muestran en la Tabla 12. No nos atenemos a las relaciones propuestas por
existieron cambios significativos en el pH Borie et al. (1989) para las asociaciones
entre las disoluciones del interior (dializada) y solubles cido hmico-P. Si CODD podemos
del exterior. Una fraccin importante del P considerarlo como una fraccin asociada
disuelto pas a la disolucin interior del tubo fundamentalmente a los cidos flvicos
de dilisis. Los valores de PD oscilaron entre (incluyendo cidos orgnicos de baja masa
el 40 y el 65% del PT y desde el 70 al 95% del molecular), el compartimiento PD podra
PR, con una media del 50 y el 80% representar la cantidad de P asociado con los
respectivamente (Tabla 4 y 12). Para los compuestos flvicos ms el ortofosfato libre.
extractos 75:1 se observ la misma Estas asociaciones AF-P podran contribuir de
distribucin con un ligero desplazamiento en forma importante a las cantidades de P
los valores medios. El reparto uniforme del P desorbido y sobre .
entre el interior y el exterior de la membrana Por otra parte, AlD represent entre el 20 y
en el extracto 2,5:1, en funcin de PR y PT, el 60% de Al-4, con una media del 47%,
mostr una elevada correlacin: sugiriendo un reparto menos uniforme:
- PD = 0,80PR + 2,27x103 (mg l-1), R2=0,99, - AlM = 0,458Al4 7,8x105 (mg l-1),
P<0,01. R2=0,93, P<0,01.
- PD = 0,50PT + 0,017 (mg l-1), R2=0,99, Aunque el equilibrio de dilisis se realiz
P<0,01. con el fin de separar las fracciones del Al
Para los extractos 75:1 se obtuvo una monmero, el tubo utilizado (1000 Da)
tendencia similar, con ligeros desplazamientos tambin permiti la entrada de cidos flvicos
de las pendientes. Estos resultados sugieren de pequeo tamao y asociaciones Al-AF
que el PR se encuentra asociado con los (LaZerte, 1984). El Al tambin podra estar
compuestos de masa molecular inferior a 1000 enlazado a compuestos orgnicos de baja masa
Da. molecular (tipo oxalato, malato, etc.). Los
Las concentraciones de CODD variaron resultados son consistentes con la existencia de
desde el 10% hasta el 90% del COD con una complejos orgnicos solubles con Al. Por otra
media del 60%. La variacin del P a travs de parte, Lazerte et al. (1988) indica que una de
la membrana (P=PR-PD) se explica, en parte, las potenciales desventajas del uso del mtodo
a travs de la correspondiente diferencia del violeta de pirocatecol (VPC) en la
encontrada en el COD (COD=COD-CODD): determinacin de las fracciones de Al

- P = 0,015 COD 8,6x10 3 (mg l-1), monmero es la debilidad del enlace que se
establece al formarse el complejo entre el Al
R2=0,97, P<0,01.
enlazado orgnicamente y el pirocatecol
82
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

83
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

respecto al mtodo de la oxina. En principio, el 3.3. Informacin relativa a las fases slidas
Al determinado con VPC con 4 min. de tiempo fosfatadas
de contacto (Al reactivo) comprendera: Al en
disolucin en forma de acuo-complejos (Al3+), 3.3.1.Solubilidad de fosfatos de Al y Fe
Al polimrico y complejos monmeros con
OH, F y SO4, quedando las asociaciones de Al Los fosfatos de Al y Fe son, posiblemente
monmero con los ligandos orgnicos entre otros minerales secundarios de P, los ms
incluidos en el Al determinado con VPC importantes en Andosoles y otros suelos
despus de 2 h de contacto. Sin embargo, ndicos (Veith y Sposito, 1977). Los slidos
nuestro estudio muestra que el mtodo del considerados para determinar la contribucin
VPC sobrestima el Al inorgnico monmero de los fosfatos de Al a la liberacin de P fueron
debido a que tambin determina algo del Al la variscita (AlPO4.2H2O) y el anlogo amorfo
orgnico (Bloom y Erich, 1989). a la variscita, Al(OH)2H2PO4. Para todos los
Nuestros datos parecen ser consistentes suelos, los diagramas de estabilidad se
con la presencia de complejos ternarios establecieron para los extractos 2,5:1. En la
solubles del tipo cido flvico-Al-fosfato (FA- Tabla 2 se muestran los valores medios de pH
Al-P). Stevenson y Vance (1989) informaron y los productos de actividad inica (PAI) del
que parte del fosfato en las soluciones del fosfato y Al de las disoluciones. El valor
suelo y en las aguas de lavado de suelos medio de pPAI para los suelos cultivados fue
forestales se encuentran en forma de FA-Al-P. sensiblemente menor a los obtenidos para los
La liberacin de estos complejos por el suelo suelos forestales.
podra estar favorecidos por el aumento del pH El valor del producto de solubilidad (Kps)
y la disminucin de la fuerza inica con la utilizado para la variscita fue pKps = 30,5 e
dilucin. En el captulo anterior hemos incluye la hidrlisis del agua (Lindsay, 1979).
sugerido la presencia de estos complejos en los El valor de pKps para el anlogo amorfo de la
extractos de bicarbonato. Las interacciones variscita vara en la literatura, con un rango de
entre el carbono orgnico, el Al y el P podran valores que van desde 27 a 29 (Traina et al.,
producir complejos y reagrupamientos 1986; Veith y Sposito, 1977). En la Fig. 8 se
estructurales relativamente estables, dando una representan los datos obtenidos en el diagrama
proteccin adicional a la accin de ciertas de ejes combinados log (aH2PO4-)pH frente a
enzimas del suelo (Pant et al., 1994) y podra log (aAl+3pH), utilizados para eliminar la
representar, en parte, el reparto del P orgnico dependencia del pH (Lindsay, 1979). Como
entre las fases slida y lquida del suelo en referencia se han tomado las siguientes
Andosoles y otros suelos con carga variable. ecuaciones correspondientes a los dos slidos
considerados:

84
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Variscita: (3) forestales se situaron principalmente alrededor

log( aH2PO4 ) pH = 2,5 {log(aAl) + 3pH} de la lnea de la variscita, mientras que los
cultivados eran, generalmente, ms solubles.
Este resultado es coherente con la regla de
Al(OH)2H2PO4: (4)
Gay-Lussac-Ostwald (GLO) (Sposito, 1985) lo
log(aH2PO4 ) pH = 1 {log(aAl) + 3pH}
que explicara por qu el compuesto amorfo
est favorecido cinticamente y, por tanto, es
La mayor parte de los suelos se capaz de persistir en el suelo, contrariamente a
encontraron entre las lneas de solubilidad de lo que ocurre con la variscita cuya estabilidad
la variscita y de su anlogo amorfo. Los suelos se encuentra termodinmicamente favorecida

Tabla 13. Actividades de P y Al, pH y productos de actividades inicas (PAI) para los
slidos considerados en todos los suelos estudiados

Variscita Strengita
Suelos pH p(aH2PO4-) p(aAl) p(PAI) p(PAI)

Forestales 5,4 5,0 8,3 30,4 34,4

ESM** 0,5 0,2 0,5 0,4 0,8

Cultivados 5,1 4,3 7,6 29,8 34,9

ESM 0,2 0,3 0,5 0,3 0,5

Todos 5,3 4,7 8,0 30,0 34,7

ESM 0,4 0,3 0,5 0,4 0,7

*
Suponiendo control del hidrxido de hierro amorfo
(Lindsay, 1979).
**
Error estndar de la media.

Figura 8. Diagrama de solubilidad para el


Al-fosfato en la disolucin del suelo
(2,5:1). (1) Variscita (2) Variscita amorfa.
, suelos cultivados; muestras forestales.

85
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

(Sposito, 1981). Las ecuaciones 5-8 se han representado


Por otra parte, el slido considerado para como lneas de referencia. Hemos empleado
el caso de los fosfatos de Fe fue la strengita, estas ecuaciones y no las dadas en trminos de
FePO4.2H2O; el FePO4 cristalino (forma no parmetros de doble funcin que incluyen las
estable de fosfato de hierro en el suelo; actividades de H+, H2PO4- y Fe3+, debido a las
Lindsay, 1979) se utiliz como referencia. El dificultades que supone la correcta
valor de pKps para la strengita vara segn determinacin analtica del Fe(III) en estos
diversos autores; as Nriagu (1972) (citado por extractos (Lindsay, 1979). Por ejemplo, el
Ball y Nordstrom, 1991) calcula un valor de
26,4 para esta fase mineral mientras que
Lindsay (1979) propone como valor probable
de pKps el de 35 y, ms recientemente, de
Haas et al. (2001) sealan un valor de 28,7.
Para nuestros propsitos, hemos empleado
como valor de pKps para la strengita el dado
por Lindsay (1979). Los valores de pPAI
correspondientes al fosfato frrico (paH2PO4- +
paFe 2pH) (Tabla 13) se calcularon
asumiendo el control de la actividad del Fe por
parte del hidrxido de Fe amorfo (Lindsay,
1979). Los datos de solubilidad de los fosfatos
de Fe en los extractos acuosos 2,5:1 de las
muestras estudiadas se representan en la Figura
6, utilizando las ecuaciones siguientes:

Strengita-Fe(OH)3(amorfo): (5)
log(aH2PO4 ) = 10,39 pH
Figura 9. Diagrama de solubilidad para la
Strengita-Fe(OH)3(suelo): (6)
strengita y el FePO4 en equilibrio con el
log( aH2PO4 ) = 9,55 pH
Fe(OH)3(amorfo) y Fe(OH)3(suelo) en la
FePO4-Fe(OH)3(amorfo): (7)
disolucin del suelo (2,5:1). Strengita: (1)
log(aH2PO4 ) = 8,91 pH
amorfo (2) suelo; FePO4: (3) amorfo (4)
FePO4-Fe(OH)3(suelo): (8)
suelo. , suelos cultivados; suelos
log(aH2PO4 ) = 8,08 pH
forestales

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

lmite de deteccin para el Fe de un mtodo y el Fe amorfo complica el estudio de la


colorimtrico como el de la fenantrolina es de solubilidad de los fosfatos de Al(Fe) en estos
0,1 mg l-1 de Fe (Olson et al., 1982). suelos. Algunos autores consideran que la
Por otra parte, el diagrama de solubilidad solubilidad de estos elementos depende de
de la Fig. 9 parece indicar que los valores de factores como las reacciones que se establecen
solubilidad se distribuyen a travs de las lneas con los agentes complejantes orgnicos de baja
correspondientes a la strengita y el Fe(OH)3 masa molecular (Fox y Comerford, 1992b;
amorfo con lo que la solubilidad del fosfato de Gerke, 1994a), el pH y la fuerza inica
Fe precipitado debera ser independiente de la (Murrmann y Peech, 1969). Blazer y Sposito
relacin molar Fe/P en consonancia con el (1987) encuentran en extractos acuosos,
modelo sugerido por Blanchar y Frazier (1991) especies alumnicas complejadas con ligandos
para la solubilidad-precipitacin de estos orgnicos formando cuasi-partculas con Al y
fosfatos (coprecipitacin desde la disolucin Al(OH).
del suelo y reaccin del P con los hidrxidos Por otro lado y en suelos con un alto
de Fe precipitados). La grfica tambin pone contenido en materia orgnica, ms del 90%
de manifiesto que aparentemente la solubilidad del Al en disolucin podra estar complejado
de los Fe-P no depende del pH; este hecho por sustancias hmicas dada la elevada
podra ser consistente con el hecho de que el estabilidad de los complejos de Al-humus
Fe(OH)3 es mucho ms insoluble que el (Gerke, 1994b), aunque la solubilidad del Fe
Al(OH)3, dificultndose la formacin de Fe-P, parece depender de las especies carboxiladas y
pudiendo existir un mayor control del Al a la el pH (Gerke, 1993). Todos estos supuestos
hora de liberar P desde las especies AlPO4. hacen que exista una importante incertidumbre
De todas maneras y aunque la formacin en la estimacin de las actividades de Al y Fe
de diferentes precipitados de Fe-P se vea cuando se calcula los PAI de los fosfatos de Al
dificultada, Pierzynski et al. (1990b) y (Fe) (Pierzynski et al., 1990b), especialmente
McDowell y Sharpley (2003) ponen de en suelos de naturaleza volcnica que
manifiesto la posibilidad de que se formen presentan, per se, elevadas cantidades de
precipitados heterogneos de composicin Al(Fe) activo y macromolculas orgnicas
mixta en relacin con las especies minerales solubles.
puras.
Los resultados obtenidos podran ser 3.3.2. Informacin sobre la solubilidad de
compatibles con un control simultneo de los fosfatos de aluminio en extractos dializados
fosfatos de Fe y Al en la liberacin de P a la
disolucin del suelo en la gran mayora de las Los valores de actividad inica del P
muestras estudiadas. Por otra parte, a pesar de (pPAI), calculados a partir del experimento de
ser los responsables del fosfato adsorbido dilisis, se presentan en la Tabla 14. En todos
(Freese et al., 1992), la alta reactividad del Al los suelos, excepto en el horizonte A de La
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Esperanza, los valores de PAI en los extractos En este sentido, es interesante sealar que en
2,5:1 y 75:1 no fueron significativamente este estudio (experimento de dilisis), todas las
diferentes. Los valores de pPAI para suelos muestras presentaban una saturacin aparente
con pH<6 indicaron un equilibrio aparente con respecto a la alofana, gibbsita o haloisita.
la variscita. Suelos con pH superiores se En nuestro estudio el tiempo de contacto
localizaron en la regin de los fosfatos de Ca entre el suelo y el agua fue de 24h;
(Fig. 10). El aparente equilibrio que se generalmente, los estudios de solubilidad en el
establece para el control simultneo de la suelo que implican fosfatos de Al y Fe
solubilidad del P entre el Al y el Ca fue necesitan de unos cuantos das para poder
indicado por Hetrick y Schwab (1992) en alcanzar las condiciones de estado estacionario
suelos ricos en fosfatos en el rango de pH que (Pierzynski et al., 1990b). Sin embargo, la
iba desde 5,5 a 6,5. constancia de los PAI observados en nuestro
Por otra parte, la muestra V-4 se aproxim estudio, a las dos relaciones w:s utilizadas
a la solubilidad del anlogo amorfo a la (Tabla 9), sugiere una rpida aproximacin al
variscita (Kps=28,1; Veith y Sposito, 1977). estado estacionario. Este rpido equilibrio
Este slido fue el primero que se indic como cintico aparentemente podra estar favorecido
producto de la reaccin entre los iones por la elevada superficie especfica que
ortofosfato con el Al cambiable (Coleman et presenta estos suelos. Desde el punto de vista
al., 1960); en suelos alofnicos, Veith y ambiental, el resultado sugiere que, a corto
Sposito (1977) sealaron evidencias que plazo, lluvias intensas podran eliminar la
indicaban la formacin de un compuesto fraccin inorgnica de P del suelo soluble en
amorfo de Al con el fosfato debido a una agua y redistribuirlo en las aguas de
precipitacin secundaria y no por la formacin escorrenta.
de una fase fosfatada superficial. Adems de los datos obtenidos en el
Observaciones realizadas sobre partculas ricas experimento de dilisis, los valores de P
en P, procedentes de suelos excesivamente obtenidos de los filtrados por 0,45 m que se
fertilizados, mediante microscopa de utilizaron como entradas en el programa
transmisin electrnica de barrido (STEM) MINTEQA1 para calcular las actividades de
(Pierzynski et al., 1990a) indican la existencia H2PO4-, tambin nos indicaron que la mayora
de un slido amorfo de fosfato de Al, de los suelos estaban sobresaturadas respecto a
sugiriendo que estas partculas son la variscita (Figura 11). Para tener ms
cinticamente estables en muchos de los informacin cuantitativa sobre la contribucin
ambientes en los que el suelo se desarrolla; de la disolucin de los fosfatos de Al,
Pierzynski et al. (1990a) llaman la atencin comparamos las cantidades de P dializable
sobre la incertidumbre en la estimacin de las (PD) con los valores tericos (P) (Tabla 9)
actividades del Al cuando se calculan los de las especies H2PO4- y HPO42-, calculados a
productos de solubilidad de los fosfatos de Al.
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

Figura 10. Doble funcin de solubilidad para el sistema Ca-P para las relaciones 2,5:1 y 75:1.
Los nmeros corresponden a las muestras T2-S: 3 y Esperanza A1: 4. (1) Brushita
CaHPO4.2H20, (2) Hidroxiapatito.

Figura 11. Solubilidad del fosfato de


aluminio en los extractos acuosos. (a)
2,5 l kg-1 (b) 75 l kg-1. (1) Amorfo
anlogo, (2) Variscita. Dializados.

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

travs de las ecuaciones (3) y (4) para la sulfato en el trabajo de Espino-Mesa y


disolucin de la variscita o su anlogo amorfo. Hernndez-Moreno (1994), que los datos de la
En la Tabla 14, P y PD representan la disolucin del suelo en Andosoles y otros
-1
suma de concentraciones, en mg kg de suelo, suelos con caractersticas ndicas deberan ser
de las especies de P predominantes despus de interpretados en funcin del control simultneo
la correccin de los coeficientes de actividad. que realizan una variedad de fases con una
En la mayora de los casos, PD oscil entre el amplia ordenacin que conforman un conjunto
40 y el 100% de P, con una media del 70%, ensamblado pero en permanente desequilibrio.
lo cual parece indicar que los fosfatos de Al y
Fe pueden jugar un importante papel en las 4. Conclusiones
cantidades de PD obtenidas. De esta manera
concluimos que el control de la solubilidad del La solubilidad de los fosfatos de Al
P por la variscita y su anlogo amorfo puede (probablemente tambin los fosfato de Fe) y el
explicar parte de P liberado (como ortofosfato reparto de P orgnico entre las fases slida y
libre) con el aumento de la relacin w:s. lquida del suelo podran ser los mecanismos
Sin embargo, hay que ser cuidadosos con principales que expliquen el comportamiento
el uso de los diagramas de equilibrio para de la liberacin de P desde el suelo al agua en
interpretar la qumica del P y el Al en estos Andosoles y suelos ndicos. Esto reafirma la
suelos. Por ejemplo, las condiciones favorables hiptesis de que la principal fuente de P en
para la cristalizacin de la variscita seran Andosoles (rganominerales y alofnicos) son
aquellas disoluciones ricas en Al-P los fosfatos de Al(Fe) y los complejos de P-
fuertemente cidas, lo cual no es compatible Al(Fe)-humus los cuales parecen influir sobre
con las condiciones ambientales de los suelos el reparto del P entre el suelo y la disolucin.
(Hsu y Sikora, 1993); estas solo podran La solubilidad de estos compuestos depende
desarrollarse en las proximidades de los granos del pH del suelo y de la fuerza inica; esto
de fertilizantes que contienen hidrgenofosfato podra dar cuenta de la inconsistencia de los
clcico (Lindsay y Stephenson, 1959), aunque mtodos de extraccin de P del suelo cuando
estas condiciones no se mantienen en el suelo se aplican a los Andosoles y suelos ndicos. El
pasados unos cuantos das. Por ello la control de la solubilidad del P por la variscita
composicin de la disolucin del suelo (datos (y su anlogo amorfo) y la biodisponibilidad
de partida de este estudio) debe ser reflejo del P orgnico podran explicar la falta de
tanto de la solubilidad como de la respuesta a la fertilizacin fosfatada observada
disponibilidad para la planta y el movimiento a en Andosoles y en suelos con elevadas
travs del perfil del suelo de los elementos que capacidad de retencin de P (Hernndez-
les son aadidos (Bierman et al., 1995). Sin Moreno et al., 1990).
embargo, nuestros datos apuntan, tal y como Por otro lado, debe existir una estrecha
tambin qued reflejado para el caso del S- relacin entre los procesos de agregacin y
91
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.2 P soluble en agua

solubilidad en aquellos agregados formados speciation of major, trace, and redox elements in
por el entrecruzamiento de sustancias hmicas natural waters. Open-file Report 91-183

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CAPTULO III.3:

ESTIMACIN DE LA FRACCIN TOTAL


DISPONIBLE DEL FSFORO MEDIANTE
LA TCNICA DE DILUCIN ISOTPICA
EN SUELOS NDICOS NATURALES Y
FERTILIZADOS: TRANSFERENCIA DE P
ENTRE LOS CONSTITUYENTES DEL
SUELO Y DISOLUCIN
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

1. Introduccin atribuido por Wada (1995) a la elevada


capacidad de retencin que muestran
En suelos de origen volcnico, las habitualmente los suelos de origen volcnico.
fracciones activas de Al y Fe constituyen los El P sorbido en un Andosol podra estar
componentes mayoritarios de la fraccin presente (en trminos absolutos) en una
arcilla; en horizontes superficiales alofnicos elevada cantidad pero en lo que se refiere a su
estas fracciones se encuentran representadas capacidad de adsorcin, la cantidad de P
por las asociaciones alofana-imogolita y los adsorbido es pequea. As, la capacidad de
complejos de Al(Fe)-humus, mientras que en retencin de P en Andosoles y suelos ndicos
horizontes no alofnicos son estos complejos de Canarias puede superar el 90%,
metal-humus y silicatos del tipo 2:1 sus mantenindose esta capacidad incluso despus
constituyentes. Estos compuestos activos de fertilizarlos como consecuencia de los
reaccionan fcilmente con el fsforo para compuestos activos de Al/Fe que provocan la
formar compuestos qumicos poco solubles. irreversibilidad de la reaccin de adsorcin
Por tanto, la eficacia fertilizante del P en estos observada en suelos volcnicos ricos en
suelos para el crecimiento de plantas bajo alofanas alumnicas y oxi-hidrxidos de Fe.
cultivo es muy baja, teniendo que recurrir a Todo esto justifica la importancia que para el
elevadas dosis de fertilizantes fosfatados para establecimiento de niveles de P disponible
suplir esta deficiencia. recomendables para el desarrollo sostenible de
A pesar de que los niveles ptimos de P cultivos en nuestros suelos tiene la
disponible recomendado no deberan exceder modelizacin y validacin de los procesos de
los 30 mg kg-1 (Pierzynski, 1991), en suelos transferencia de los iones fosfato desde la fase
volcnicos niveles superiores a este parecen slida a la disolucin del suelo.
tener un impacto positivo (Shoji y Takahashi,
2002). En las Islas Canarias se han observado 1.1. Transferencia de iones fosfato entre la
valores superiores a los 100 mg kg-1 en suelos fase slida y la disolucin del suelo: factor
de fincas de platanera afectadas por Fusarium intensidad.
sin que se produzca, en principio, ningn
efecto negativo sobre el cultivo y sobre la La representacin ms simple que permite
expresin de la enfermedad (Domnguez et al., estudiar la transferencia de iones P entre las
2003). Por otro lado, es conocido el hecho de fases slida y lquida del suelo viene dada por
la existencia de discrepancias, en este tipo de las relaciones Q/I; la transferencia de estos iones
suelos, entre los valores recomendados de entre ambas fases vendr determinada por el
fertilizacin fosfatada para un cultivo anlisis del P en la disolucin del suelo [factor
determinado y las calibraciones habituales que intensidad (I)] y la cantidad de iones P presente
relacionan el P extrable con el rendimiento de sobre los constituyentes del suelo [factor
los cultivos (Fox, 1980). Este hecho ha sido
100
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

cantidad (Q)] que acta como reserva de iones P 1970) o el verde de malaquita (van Veldhoven y
para su reemplazo en disolucin (Olsen y Mannaerts, 1987). La determinacin
Khasawneh, 1980). La cantidad Q de iones P colorimtrica presenta el problema, como ya se
transferidos al suelo depende de la actividad de ha citado en captulos precedentes, que el medio
este elemento en disolucin (I). La relacin fuertemente cido puede liberar molculas de
curvilnea Q= f(I) describe la evolucin de Q en ortofosfato provenientes, por ejemplo, de
funcin de I permitiendo estimar, para cualquier coloides ricos en fsforo, de polifosfatos y de
nivel de I, la capacidad de un suelo para fsforo orgnico (Haygarth et al., 1997; Sinaj et
mantener constante la actividad de iones P en al., 1998). Por esta razn, algunos investigadores
disolucin cuando esta vara [factor capacidad o se decantan por la cromatografa inica para
capacidad tampn (CT)] debido a la absorcin determinar Cp ya que se evita el paso previo de
por las plantas o por aportaciones de fertilizantes la acidificacin de la disolucin, necesaria en el
fosfatados al suelo (Holford, 1997). mtodo colorimtrico, y mediante ella
Matemticamente, CT representa la derivada podramos discernir esta fraccin del P total
primera de Q respecto a I, es decir, constituye la disuelto que se puede determinar mediante, por
recta tangente a la curva de la relacin Q= f(I). ejemplo, la espectroscopia de emisin atmica
Por otra parte, del anlisis de este tipo de (ICP) (Masson et al., 2001). La diferencia es,
curvas podramos distinguir una serie de factores adems, funcin de la concentracin de iones
que, aunque complementarios entre s, inciden fosfato en disolucin provenientes de los
sobre la informacin obtenida. Estos factores coloides a cuya estructura se encontraran unidos
seran: estos iones en una mayor o menor cantidad. La
relacin w:s de la propia suspensin tambin
1) La metodologa que permite evaluar la influira sobre la concentracin de P en la
reserva del P en el suelo (Q) y el que se disolucin del suelo (Chapman et al., 1997). Por
encuentra en disolucin (I). ltimo sealar que a pesar de utilizar la misma
2) La descripcin de aquellas variables que nos tcnica de filtrado para separar la suspensin del
ayudan a dilucidar la trasferencia de iones P suelo, los valores de Cp parecen depender del
entre la fase slida y la disolucin del suelo. tipo de muestra analizada (Sinaj et al., 1998).
3) Los modos operacionales que permiten Todos estos factores de incertidumbre
determinar la relacin Q= f(I). indican que no existe un mtodo perfecto para
estimar la actividad de iones fosfato en
Generalmente, la actividad de iones P en disolucin. En muchos tipos de suelos tropicales,
disolucin se estima mediante la concentracin con elevada capacidad de retencin de P, los
de iones fosfato en disolucin (Cp, siguiendo la valores de Cp se encuentran prximos al lmite
terminologa empleada por Morel (2001)] de deteccin admitido por los mtodos
utilizando mtodos colorimtricos como el azul colorimtricos; en este caso, se prefiere filtrar la
de molibdeno (Murphy y Riley, 1962; John, suspensin a travs de 0,025 m y emplear la
101
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

cromatografa inica para su determinacin del fsforo (32PO43- o 33


PO43-),
(Masson et al., 2001) puesto que las radioqumicamente puros y no acompaados por
suspensiones filtradas por 0,45 m podran iones P no marcados (R), son introducidos en la
contener P no intercambiable isotpicamente disolucin de una suspensin de suelo en estado
con el suelo (Sinaj et al., 1998; Hens y Merckx, estacionario (Cp constante), producindose un
2001; Masson et al., 2001). Sin embargo en los intercambio homoinico entre el istopo
31
suelos de regiones templadas, cultivados y radiactivo introducido y el PO43- localizado
fertilizados a lo largo de muchas dcadas, la sobre la fase slida del suelo, con la subsiguiente
incertidumbre sobre los niveles de iones fosfato disminucin de la radioactividad al aumentar el
en las disoluciones del suelo filtradas por 0,20 tiempo de intercambio (Fardeau, 1996). La
m es baja en comparacin con los niveles de cantidad de iones transferidos por difusin entre
Cp (Morel, 2001). Esta es la razn por la que en las dos fases, lquida y slida, se calcula
la mayora de los estudios la determinacin del P aplicando el principio de dilucin isotpica: los
se realiza por colorimetra, mtodo simple, iones P isotpicamente diluidos en el suelo
rpido y poco costoso en su anlisis. poseen la misma composicin isotpica que en
disolucin. Puesto que el flujo neto de iones P
1.2.Transferencia de iones fosfato entre la entre el suelo y la disolucin es nula, esta tcnica
fase slida y la disolucin del suelo: factor permite cuantificar el flujo bruto de iones P entre

cantidad y la dilucin isotpica el suelo y la disolucin cuando este se realice


entre istopos iguales o diferentes (Morel et al.,
2000).
Existen varios mtodos experimentales que
De acuerdo con este principio, la
permiten medir el factor Q del suelo. Entre estos
32 31
composicin isotpica ( P/ P) de iones P en
mtodos tenemos la adsorcin/desorcin
disolucin en equilibrio con el P isotpicamente
(Barrow, 1978; Barrow, 1979; Chardon y
intercambiable vendra dado por la expresin:
Blaauw, 1998), la electroultrafiltracin (Steffens,
R / Q = r / Qw (1)
1994; Nair, 1996) y la dilucin isotpica. Esta
ltima tcnica ha sido ampliamente utilizada en donde:

durante dcadas para estimar la fraccin total Q = Qw(R / r)


disponible del P (E-value) en el suelo (Russell et y
al., 1954; Talibudeen, 1957; Fardeau y Japp, Qw = Cp w: s
1976 y 1988; Fardeau, 1981; Tran et al., 1988; R es la cantidad de 32P aadida a la suspensin,
Fardeau, 1993; Morel y Plenchette, 1994; Morel r es la cantidad de 32P remanente en disolucin,
y Torrent, 1997; Frossard y Sinaj, 1997, etc.), as Q es la cantidad de iones P que se encuentran
como su asimilabilidad desde diferentes tipos de en la fase slida del suelo y Qw la cantidad de
fertilizantes (Hendricks y Dean, 1947; Frossard iones P en disolucin calculada como el
et al., 1996). Cualquiera de los iones radiactivos producto entre Cp y la relacin w:s. Con

102
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

respecto a otros mtodos, la informacin es todas ellas presentan una elevada capacidad para
obtenida sobre el grueso de la transferencia de fijar fosfato.
iones P entre la fase lquida y los
constituyentes del suelo. Si Cp es constante (la 2.2. Fsforo presente en la disolucin del
suspensin del suelo ha alcanzado el estado suelo
estacionario), la transferencia neta de P es nula
pues la transferencia directa e inversa entre la Las muestras fueron sometidas a extraccin
fase lquida y slida del suelo son iguales y con agua desionizada empleando una relacin
cuantificable por la Ec. (1). w:s de 10 l kg-1 de suelo. Las suspensiones,
Nuestro objetivo ha consistido en estudiar agitadas durante 18h, fueron filtradas a travs de
la cintica de la transferencia de iones P entre filtro de ster de celulosa Millipore de 0,025 m.
los constituyentes del suelo y la disolucin El P presente en las disoluciones obtenidas (Cp)
mediante el intercambio isotpico entre ambas se determinaron empleando el mtodo
fases en Andosoles naturales y fertilizados colorimtrico del molibdato amnico y cido
como diagnstico del P disponible y de las ascrbico descrito por Jones (1970), similar al
necesidades de fertilizacin de estos suelos. mtodo de Murphy y Riley (1962) excepto por
el uso de una disolucin 0,1 M de cido
2. Metodologa ascrbico.

2.1. Suelos 2.3. Cintica de intercambio isotpico

En esta experiencia se emplearon los suelos El mtodo de intercambio isotpico para


ndicos forestales Las Lajas A (LL A) cuantificar la transferencia del in P entre el
(representante de suelo rganomineral), La suelo y la disolucin que hemos empleado fue el
Esperanza Bw3 (E Bw3) (representante de suelo descrito por Morel et al (1994): se agitan 10 g de
alofnico) y el horizonte Ap del perfil fersialtico suelo con 199 ml de agua desionizada en un
Karting (K). Adems se han empleado muestras recipiente plstico durante 18 h; a esta
del horizonte A1 del perfil La Esperanza suspensin se le aade una disolucin marcada
(muestras E), procedentes de un ensayo con 32
P (1 ml de H332PO4 con un nivel de
biolgico con maz (vase anejo II del Captulo radioactividad que oscila entre 0,01 y 0,1 MBq),
IV de este trabajo), que fueron sometidas a homogeneizndose vigorosamente con un
fertilizacin fosfatada mediante tratamientos de agitador magntico. Despus de 1, 3, 10 minutos
0 (control, E-0), 100 (E-100) y 200 (E-200) mg de intercambio isotpico, se extraen, mediante
-1
de P kg de suelo. En la seleccin de estas jeringa, entre 8-10 ml de la mezcla separndose
muestras ha primado, adems de sus diferencias inmediatamente la disolucin de la fase slida
en sus caractersticas fsico-qumicas, en que mediante filtracin Millipore (primero a travs

103
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

de 0,45 m y luego por 0,025 m para eliminar (4). Por tal motivo, en este experimento se
32
el posible P particulado). La actividad de P calcul n como la pendiente de la ecuacin de
(nmero de cuentas del istopo radiactivo) regresin entre log [r(t)/R] y log (t).
remanente en la disolucin, para cada tiempo, se La relacin r()/R es la mxima dilucin
determina por efecto Cerenkov empleando un posible del istopo la cual se aproxima al
contador de lquido de centelleo (Packard 2500 cociente entre Cp, concentracin de P en la
TR de los Servicios Generales de Apoyo a la disolucin (mg P l-1), y el P inorgnico total
Investigacin de la Universidad de La Laguna) (PI) del suelo (mg P kg-1) (Fardeau, 1993;
con 1 ml del filtrado. Todos los anlisis se han Frossard et al, 1995):
realizado por triplicado. r( ) 10Cp Qw
= = (5)
La cantidad de radioactividad [r(t)], R Pi Pi
remanente en la disolucin disminuye con el donde el factor 10 procede de la relacin w:s
tiempo (min), de acuerdo con la ecuacin (10:1) y Qw representa la cantidad de iones P en
(Fardeau et al.,1985): disolucin.
n Para caracterizar el intercambio isotpico de
r ( t ) r (1) r (1)
(1/ n )
r ( )
= t + + (2)
R R R R iones fosfato entre el suelo y la disolucin se
determinaron los parmetros m, n, Cp y PI. El
donde r(1) y r() son las medidas de
parmetro m que sustituye al parmetro r(1)/R,
radioactividad (MBq) remanente en la
est relacionado con la capacidad del suelo para
disolucin despus de 1 min. y despus de un
fijar P (Frossard et al., 1993). As suelos que
perodo infinito de intercambio isotpico,
presentan valores de m<0,2 tienen una alta
respectivamente. Simplificando (Fardeau, 1993;
capacidad para fijar fosfato, mientras que suelos
Morel et al., 2000):
con m>0,4 presentan una baja capacidad de
r r( )
= m(t + m1/ n ) n + (3) fijacin.
R R
Aunque el sistema haya alcanzado el estado
donde m y n son parmetros cinticos. Fardeau y
estacionario (la concentracin de ortofosfato en
Japp (1978) y Fardeau et al. (1991) encuentran
la disolucin es constante), la disminucin de la
una elevada correlacin entre los valores de log
radioactividad se debe al intercambio
[r(t)/R] y log (t), siguiendo la siguiente
homoinico entre los iones ortofosfato-32P
expresin emprica:
aadidos a la disolucin y los iones ortofosfato-
log [r(t)/R]=log [r(1)/R]-nlog (t) (4) 31
P localizados sobre la fase slida del suelo.
Fardeau et al. (1991) indicaron que la
Para nuestras condiciones, la cantidad de P
funcin anterior no es sino la simplificacin de
intercambiado isotpicamente en un tiempo t
la ecuacin terica (3) ya que los datos que
[E(t)] se calcul asumiendo que (i): los ines
predice esta ltima son compatibles con los 31 32
PO4 y PO4 tienen el mismo destino en el
obtenidos de la regresin lineal de los datos
sistema y (ii): para cualquier tiempo t, la
experimentales que genera la ecuacin emprica
actividad especfica de los iones fosfato en la
104
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

disolucin del suelo es idntica a la que tienen Qwn


Fm = 10Cpkm = Qwkm = (10)
los iones fosfato intercambiados isotpicamente ( )
r (1) 1/ n
en el interior del sistema (Frossard et al ., 1994; R
Bhler et al., 2003):
E( t ) 10Cp Qw
= = (6) 3. Resultados y discusin
R r r
por tanto:
3.1. Parmetros cinticos de intercambio
10RCp Qw
E( t ) = = (7) isotpico
r n r ( )
m t + m n
1
+
R
En algunos casos, donde los valores de n Los valores de Cp, r(1)/R, E(1min),
son inferiores a 0,2, la ecuacin anterior puede E(1min)/Cp y el exponente n de la funcin
simplificarse (Fardeau et al., 1985), tomando la compleja que define E(t) (Ec. 8) se presentan en
forma de la ecuacin cintica emprica la Tabla 1.
desarrollada por Wiklander (1950): El P en la disolucin del suelo (Cp)
procedente de los tres suelos forestales y del
E(t) = 10Cp R r(1) t n = Qw R r(1) t n (8)
suelo fertilizado E-0 no presentaban una
desviacin significativa, oscilando entre 25 y 27
Por otra parte, los parmetros
g l-1; en el resto de los suelos fertilizados (E-
experimentales de la cintica de intercambio
100 y E-200), Cp fue slo ligeramente superior a
permiten el clculo de otras variables asociadas a
las anteriores, oscilando entre 16 g l-1 para el
la capacidad de los iones fosfato para transferirse
suelo E-100 y 31 m l-1 para el E-200. A efectos
ms o menos rpidamente desde el suelo hacia la
prcticos, si suponemos que el mtodo de John
disolucin (Fardeau et al., 1991; Frossard et al
(1970) para la determinacin del P en estos
1995). As, se puede calcular la velocidad media
extractos milliporados por 0,025 m nos
de intercambio km (min-1) de los iones fosfato
proporciona el P libre en disolucin, se observa
entre la disolucin del suelo y la fase slida,
como este es muy bajo y que la fertilizacin
como:
aumenta en muy poca cuanta esta fraccin
n
km = (9) soluble del P.
( )
r (1) 1/ n Por otra parte, los valores de r(1)/R siempre
R
fueron inferiores a 0,2 excepto en LL A en el
que se aproxim a 0,9. Esto parece significar que
El tiempo medio de residencia de los iones
los suelos estudiados presentan una elevada
fosfato en la disolucin, Tm (min), se define
capacidad tampn para el P (Tran et al., 1988;
como el inverso de km, mientras que el flujo
Salcedo et al., 1991). En el caso de Las Lajas,
medio de intercambio Fm (mg kg-1 min-1), entre
este valor se correspondera con suelos con baja
la fase slida y la disolucin se ha definido de la
capacidad para fijar fosfato (Frossard et al.,
siguiente manera:
105
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

Tabla 1. Concentracin de P en la disolucin del suelo (Cp) despus de aadir el P radiactivo


durante el experimento de intercambio isotpico y cantidad de P intercambiado isotpicamente
hasta 1 min (E1min) en las muestras estudiadas

Suelo Cp (mg l-1) r(1)/Ra nb E1min (mg kg-1) E1min/Cp (l kg-1)

E-0 0,013 0,033+0,003 0,61+0,03 3,5 269

E-100 0,016 0,069+0,005 0,60+0,02 2,3 139

E-200 0,031 0,086+0,006 0,55+0,02 3,8 120

E Bw3 0,010 0,008+0,001 0,61+0,01 13,5 1323

LL A 0,016 0,879+0,007 0,04+0,01 0,18 11

K 0,014 0,010+0,001 0,36+0,05 15,3 1085


a
Relacin entre la radioactividad remanente en la disolucin del suelo despus de 1 min [r(1)] y la
radioactividad introducida (R).
b
n se ha determinado como la pendiente de la ecuacin de regresin lineal entre log [r(t)/R] y log (t). Se
muestra el valor absoluto de n para cada muestra de suelo.

1993); sin embargo este suelo presenta una de 0,03 en la muestra E-0 a 0,09 en la E-200. Sin
capacidad de retencin para el fosfato del 95% embargo, estos valores estn todava muy por
(Departamento de Edafologa, 1994). El carcter debajo del lmite de 0,2 para suelos con alta
rganomineral de la muestra (Alp/Alo = 1,05) capacidad de retencin. Este resultado parece
podra ser un factor a tener en cuenta, pues la indicar que dosis de 200 mg kg-1 de suelo son
formacin en el suelo de complejos insuficientes para superar la capacidad tampn
rganominerales de P de gran estabilidad, podra para el P en este suelo, rico en material
no favorecer el intercambio entre el 31P y el 32P alofnico. En este sentido, Frossard et al.(1994),
lo cual supondra que la actividad radiactiva del encuentran que la aplicacin de 100 mg de P
extracto siguiera siendo elevada y, por tanto, soluble en agua por kg de suelo, incrementa el
tambin el factor r(1)/R. Por otro lado, una parte parmetro r(1)/R, duplicndose en el caso de los
de estos complejos son solubles en medio vertisoles cuyos valores de r(1)/R eran similares
acuoso y en disolucin podran ser susceptibles a los que presentaban las muestras E. Salcedo et
de sufrir el proceso de intercambio isotpico: el al. (1991) en un experimento de invernadero y
32
P se intercambiara con el P presente en los con fertilizacin de hasta 43,7 mg P kg-1 de
complejos (AH-Al-P), dejando una elevada suelo, relaciona el incremento de r(1)/R con el
radiactividad en el extracto acuoso de este suelo. incremento del P sorbido, pues al saturar con P
En el caso de las muestras fertilizadas, la las superficies de sorcin disminuye la velocidad
32
razn r(1)/R aumenta con el tratamiento pasando de desaparicin de P de la disolucin. Sin
106
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

embargo, en el caso de los suelos E, la adicin en la disolucin del suelo. Sin embargo, las
de hasta 200 mg P kg-1 y debido a su capacidad muestras E presentan un aumento poco
tampn para el P, el incremento en r(1)/R es significativo del Cp con relacin al tratamiento;
limitado en trminos reales. esto parece indicar que el P soluble aadido ha
El parmetro cintico n vari de acuerdo con sido fuertemente retenido por la fase slida, sin
el tipo de suelo. As los suelos alofnicos (E y E descartar la posible inmovilizacin va
Bw) presentaron los valores mximos; el suelo microbiana que en el caso de los Andosoles es
fersialtico (K) present un valor de n inferior a menos importante que su capacidad tampn para
las muestras alofnicas a pesar de tener entre el P (Frossard et al., 1995).
ellas valores similares de r(1)/R. La muestra De los valores experimentales de Cp, r(1)/R
rganomineral (LL A) present el valor ms y n se ha determinado el P isotpicamente
elevado de r(1)/R (permanece en disolucin intercambiable despus de 1 min. (E1min). Este
cerca del 80% de la radiactividad introducida) valor refleja la cantidad de iones ortofosfato que
que se correspondera, como se indic se encuentran libres en el sistema suelo-
anteriormente, con un suelo poco fijador de P lo disolucin y que es potencialmente disponible
cual entra en aparente contradiccin con su por la planta, pues se supone que estos iones no
capacidad de retencin de fosfato. En captulos sufren ninguna transformacin qumica en el
anteriores qued reflejada la mayor labilidad de suelo (Tran et al., 1988; Salcedo et al., 1991).
las asociaciones del P con complejos Al-humus Bajo estas condiciones, los suelos no fertilizados
32
en este suelo, por lo que la permanencia del P E Bw y K presentan valores de E1min tpicas de
podra atribuirse a la interaccin con estos suelos con un contenido medio de P disponible,
complejos. En este sentido Larsen (1967) indica mientras que LL A presentara deficiencias en P.
que en suelos cidos, los valores de r(1)/R Sin embargo, todas estas muestras presentan una
pueden subestimarse debido a la presencia de elevada capacidad para retener P; esto parece
complejos de P y Al marcados en disolucin que significar que el parmetro E1min sobreestima
pueden ser detectados por el contador pero no el P disponible en suelos ndicos.
por el anlisis convencional de ortofosfato. En la muestra de suelo fertilizada E, el
mostr el valor mnimo de n a pesar de tener el parmetro E1min parece indicar que, a pesar de
valor ms elevado de r(1)/R. aplicar dosis de hasta 200 mg P kg-1, el suelo
Por otro lado, n tiende a disminuir sigue presentando una elevada capacidad de
ligeramente con el tratamiento en las muestras retencin y, por tanto, un bajo contenido de P
fertilizadas del suelo E; Frossard et al. (1994) disponible. Los valores de E1min no varan
encuentran una drstica disminucin de la significativamente con el tratamiento, situndose
constante n en Ultisoles cuando la muestra se en los tres casos alrededor de 3 mg kg-1. Puesto
somete a fertilizacin con P soluble; estos que el parmetro r(1)/R s aumenta
autores asocian este resultado, junto con el significativamente con el tratamiento, el
aumento de la relacin r(1)/R, al aumento del P problema se encuentra o bien en la
107
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

determinacin de Cp o en una inmovilizacin Los valores medios de velocidad de


del P en posiciones de alta afinidad pero intercambio (km) y de flujo transferido entre la
intercambiable isotpicamente. fase slida y lquida (Fm) se recogen en la Tabla
Por otra parte, Fardeu et al. (1991) indican 2. Los valores de km variaron en funcin del tipo
que la concentracin Cp constituye una medida de suelo; as los ms elevados correspondieron
de del factor intensidad, mientras que el valor de al suelo fersialtico (K) y el horizonte Bw3 de la
E1min parece ser representativa del factor Esperanza; sin embargo, el menor valor de todas
cantidad (Tran et al., 1988). Estos autores las muestras de suelo (incluidas las fertilizadas)
-1
adoptan la relacin E(1min)/Cp (l kg ) como correspondi al suelo rganomineral (LL A). La
factor de capacidad o coeficiente de reparto. Los constante km representa la velocidad de
suelos E Bw y K presentaran, entonces, un intercambio de iones fosfatos entre la fase
elevado factor de capacidad mientras que el lquida y el suelo, estando afectada por la
suelo rganomineral (LL A) no, a pesar de su composicin de la fase slida del suelo. Valores
elevada capacidad de retencin. En el suelo elevados de la constante indican que la cintica
fertilizado E, el factor capacidad parece transcurre muy rpidamente y que por tanto la
disminuir con el tratamiento; esto significara formacin y transformacin de compuestos
que la superficie reactiva del suelo comienza a fosfatados en la fase slida del suelo transcurre
saturarse en P, aunque sigue siendo elevado (120 de forma relativamente rpida (Barrow, 1980);
-1
l kg ) para el tratamiento mayor. esto est en concordancia con la elevada
De todas maneras, la literatura indica que el capacidad de retencin que presentan para el P
parmetro Cp debe ser analizado con cautela los suelos K y E Bw3.
dadas las caractersticas analticas de su El valor de km para la muestra de suelo
determinacin. Algunos autores atribuyen esta rganomineral (LL A) puede atribuirse al efecto
sobreestimacin del parmetro E1min a errores que las formas orgnicas y rganominerales del
que se cometen durante la determinacin de Cp P ejercen sobre los parmetros r(1)/R y n de los
(Frossard et al., 1994), a la adsorcin especfica cuales depende el valor de la constante cintica;
de una fraccin de la radioactividad aadida esto parece sealar que en dicha muestra, el
(Amer et al., 1969; Wolf et al., 1986), a procesos intercambio parece transcurrir entre estas formas
32
microbianos (Oberson et al., 2001; Buehler et solubles de P orgnico y el P en disolucin,
al., 2002) o bioqumicos (Oelh et al., 2001) de con una posible cintica mucho ms rpida que
hidrlisis del P orgnico durante el proceso de entre la superficie y la disolucin del suelo.
intercambio isotpico. Por otra parte, km disminuye
significativamente con la fertilizacin hasta 100
3.2. Constantes medias asociadas al mg kg-1 de P, aunque cuando se duplica la dosis

intercambio. las diferencias entre E-100 y E-200 son

108
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

Tabla 2. Constantes medias de velocidad de intercambio y de flujo transferido (Fardeau et al.,


1991).

Suelo Km(min-1) Tm (min) Fm (mg kg-1 min-1)


E-0 159 0,006 21
E-100 51 0,019 8
E-200 48 0,021 15
E Bw3 1749 6x10-4 131
LL A 19 0,053 3
-6
K 138200 7x10 12440

mnimas; esto parece indicar que a medida que slida y lquida del suelo de las diferentes
el tratamiento aumenta, el intercambio con la fracciones de P en este tipo de suelos parece
fase slida va disminuyendo y que, por tanto, el ocurrir a travs de una cintica rpida.
intercambio podra ocurrir, ad hoc, con las Por otro lado, la constante Fm vari
formas solubles presentes en disolucin. Es significativamente entre suelos; as el valor ms
interesante hacer notar que esta disminucin en elevado, con diferencia, correspondi a la
km ha ido aparejada con el aumento del carbono muestra de suelo K, mientras que LL A present
orgnico disuelto (COD) en los extractos (Tabla el valor ms bajo. Este parmetro representa el
5); esto significa que tanto este parmetro como flujo medio de intercambio y de transferencia de
de los que depende, podran estar afectados por iones fosfato entre la fase slida y lquida del
el contenido de COD presente en disolucin. El suelo. As, niveles de Fm superiores a 80 mg kg-1
parmetro inverso a km, Tm, que representa el min-1 indican, segn Fardeau et al. (1991), que el
tiempo necesario para que una cantidad de iones P no constituye un factor limitante para el
fosfato presente en la disolucin del suelo sea crecimiento de los cultivos. Esto parece
renovada en su totalidad por una cantidad igual significar que las muestras K y E Bw3 no
proveniente de la fase slida (Fardeau et al., deberan presentar problemas en cuanto a
1991), es bastante bajo (muy por debajo a 1 min) disponibilidad del macronutriente lo cual vuelve
en todos los suelos (incluido el sometido a a entrar en contradiccin con la capacidad de
fertilizacin); estos valores parecen indicar que retencin que presentan las muestras estudiadas.
los iones ortofosfato que se encuentran en
disolucin, reaccionan muy rpidamente con la 3.3. Anlisis compartimental del P
fraccin coloidal presente en la suspensin o con intercambiado isotpicamente
la superficie reactiva del suelo. Estos resultados,
ponen de manifiesto que el reparto entre la fase

109
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

Tabla 3. Contenido de P (mg kg-1) en las diferentes fracciones intercambiables calculadas a


partir del anlisis multicompartimental (Ec. 7) de Fardeau (1993).

Muestra E1min E1min-1d E1d-40d E40d-1A E>1A

E-0 3,9 830 307 42 17

E-100 2,3 829 236 24 8,3

E-200 4,0 886 101 8 2,5

E Bw3 13 1154 30 1,9 0,5

K 16 563 264 80 54

LL A 0,19 0,6 0,3 0,2 998

El contenido de P en cada fraccin del Tabla 3 recoge estos valores de P calculados


modelo compartimental se calcul segn la para los diferentes perodos de intercambio.
descripcin hecha por Fardeau (1993) Como ocurri para los parmetros
representada por la Ec. 7. El contenido de P en cinticos de intercambio, el contenido en P de
la fraccin que indica la cantidad de P libre en los diferentes compartimientos vari segn el
el sistema se aproxim al valor dado por tipo de suelo y con la fertilizacin. As se
E1min (Tran et al., 1988). El P contenido en el encontraron valores de P libre (E1min)
compartimiento E1min-1d se calcul como la superiores a 10 mg P kg-1 para las muestras LE
diferencia entre E1d y E1min. El contenido de Bw y K, mientras que para LL A este
P en los compartimientos E1d-40d y E40d-1A compartimiento se situ alrededor de 1 mg P
se calcularon como E40d-E1d y E1A-E40d kg-1. El suelo fertilizado E present valores de
respectivamente. El P del ltimo E1min que oscilaron entre los 2,3 mg P kg-1
compartimiento (E>1A) se calcul como la para el tratamiento 100 y los 4,0 mg P kg-1 para
diferencia entre el P inorgnico total del suelo el tratamiento 0, aunque el tratamiento 200 fue
(PI) y E1A. Este clculo es posible debido a la ligeramente inferior a este ltimo. Las mayores
validez de la expresin general para E(t) la cantidades de P ms lentamente intercambiable
cual puede extrapolarse para una duracin del correspondi al suelo LL A, mientras que las
proceso de intercambio superiores a 12 cantidades mnimas correspondieron a LE Bw.
semanas (Frossard et al., 1994; Bhler et al., El suelo fertilizado E tambin present esta
2003). Los valores de PI rondaron los 1000 mg tendencia; as el valor ms bajo correspondi
kg-1 para los suelos forestales y entre los 1000 al tratamiento 0 (2 mg kg-1), le sigui el
y 1250 mg kg-1 para los diferentes tratamientos tratamiento 100 (8 mg kg-1) y finalmente la
del suelo fertilizado E (datos no mostrados). La
110
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

cantidad mayor correspondi al tratamiento sugiere que la disponibilidad del P estara


200 (17 mg kg-1). limitada a solo 24 h, ya que el intercambio a ms
Todas las muestras, excepto LL A e largo plazo parece estar limitado y, por tanto, el
incluyendo las fertilizadas, presentaron el posible P potencialmente disponible estara
mximo de intercambio en el compartimiento fuertemente retenido por las superficies activas
E1min-1d, superndose los 1000 mg P kg-1 en el de los suelos, en forma de fosfatos de Al
suelo LE Bw. El resto de compartimientos (E1d- (variscita) y Fe (strengita) o complejos ternarios
40d, E40d-1A y E>1A) fueron decreciendo del tipo AH-P-Al(Fe). En este sentido,
paulatinamente su contenido en P, aunque consideramos espectacular la cada del P
disminuy muy rpidamente para LE Bw. LL A intercambiado en la muestra LE Bw que de 1100
presenta en sus compartimientos cantidades de P mg P kg-1 potencialmente intercambiable en el
muy bajas, inferiores a 0,5 mg P kg-1 para cada compartimiento E1min-1d, pasa a 30 mg P kg-1
uno de ellos. en el compartimiento E1d-E40d.
Los resultados obtenidos indican que la
muestra fertilizada E y la rganomineral (LL A) 3.4. Experimento con membrana de resina y
presentan valores de P disponible bajos, P radioactivo en las muestras fertilizadas
-1
inferiores a 5 mg kg ; este valor de E1min se ha
considerado como lmite para afirmar que un Hamon y McLaughlin (2002) en un trabajo
suelo presenta deficiencias de P (Tran et al., sobre las interferencias que tiene el proceso
1988). Esto contradice el resultado que para la analtico de determinacin del P sobre el
muestra LL A se obtuvo con los parmetros parmetro E, indican que el uso de membranas
cinticos de intercambio. Este resultado, de intercambio aninico (MIA) durante el
apoyara la hiptesis del intercambio de P proceso cintico de intercambio isotpico
radiactivo en disolucin con las formas solubles disminuye las interferencias causadas por el P no
rganominerales del P presentes en fase acuosa intercambiable isotpicamente asociado a los
lo que podra explicar la alta radioactividad coloides del suelo, concentrando el P procedente
remanente que presenta dicha muestra. de la fraccin lbil. Maertens et al. (2004), por
Por otra parte, los resultados de E1min otra parte, modifican el procedimiento analtico
parecen indicar que las muestras LE Bw y K no diseado por los dos autores anteriores
presentan, a priori, deficiencias de P. Este dato aadiendo una MIA una vez que el intercambio
vuelve a entrar en contradiccin con la elevada isotpico ha finalizado de tal manera que sta
capacidad de retencin que presentan estos solo debera extraer ortofosfato de la fraccin
suelos para el macronutriente. Sin embargo, el lbil, independientemente del istopo que se
elevado porcentaje del P intercambiado en el trate, ya que la membrana no tendra ningn tipo
compartimiento E1min-1d que, para Frossard et de selectividad sobre alguno de ellos (31P o 32P)
al. (1995) representa el perodo de tiempo en el en las posiciones de enlace de su matriz. Los
cual una raz simple puede tomar activamente P, resultados de estos autores parecen dar buenos
111
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

resultados en aquellos suelos donde el P soluble (Barlett y Ross, 1988), el Al monmero (Al-
se encuentra cerca del lmite de deteccin del 4Cl y Al-4OH) presente mediante el mtodo
mtodo colorimtrico. del violeta de pirocatecol con 4 min de
Debido a los resultados que hemos obtenido contacto (Seip et al., 1984) y el Si por
anteriormente, nos hemos planteado la necesidad colorimetra (Weaver et al., 1968). En la
de estudiar, de forma indirecta mediante la MIA, disolucin remanente antes separada
la importancia que en el mecanismo de (sobrenadante de la MIA) se determinaron
intercambio isotpico tienen tanto el P orgnico tanto el P reactivo (PRR) como el P total
como los complejos rganominerales de P-Al en presente (PTR).
los suelos de naturaleza volcnica. Para ello, Las extracciones se realizaron por
hemos hecho uso de una MIA que por sus triplicado, con tres blancos sin MIA. En estos
caractersticas permiten, a priori, separar la se determinaron el pH, el P reactivo (PR), el P
fraccin inorgnica de la orgnica de los total (PT), el COD y el Al monmero (Al-4);
extractos acuosos en los que se realiza el tambin se determin el pH en NaF, indicador
intercambio radiactivo. de la presencia de alofanas en el medio.
El proceso se repiti aadiendo a las
32
3.4.1.Mtodo experimental suspensiones suelo-agua 1 ml de P (20000-
50000 cpm), con un tiempo de intercambio entre
A 10g de suelo fertilizado (suelo E) se istopos de 1 h. Una vez finalizada esta fase, las
aadieron 100 ml de agua, permaneciendo el suspensiones se filtraron a travs de filtros
sistema en agitacin durante 16 h; a 20 ml de Millipore de 0,025 m, midindose la
las suspensiones, centrifugadas y filtradas por radioactividad remanente en los extractos. A
0,025 m, le fue aadida una 1 MIA (para la continuacin se tomaron 20 ml de la disolucin
descripcin de las membranas, vase el Cp, aadindole 1 MIA tal y como se detall
captulo III.4). El nuevo sistema continu en anteriormente. En los eluatos de resina se
agitacin durante 16 h, separando al final de determinaron la radiactividad extrada por el
este proceso la disolucin remanente, NaCl y el NaOH. Este experimento fue
sometiendo posteriormente a la membrana a realizado, al igual que el anterior, por triplicado.
dos extracciones sucesivas: (a) NaCl 1N,
tiempo de agitacin 1 h y (b) NaOH 1 N, 3.4.2. Balance de fosfato, carbono orgnico
tiempo de agitacin 1 h. En estos eluatos se y aluminio en los extractos y membrana de
determin el P reactivo (Cl-P y OH-P, intercambio aninico
respectivamente) mediante colorimetra directa
(Murphy y Riley, 1962) y el P total (Cl-PT y Los valores de PR aumentaron con el
OH-PT) mediante el mtodo del persulfato tratamiento de P aplicado a los suelos, aunque
potsico (Hedley et al., 1982); tambin se el PT en los extractos triplicaba e incluso
determinaron el pH, el carbono orgnico (CO)
112
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

cuadriplicaba al PR (Tabla 4). Esto parece fosfato aplicado desplazara parte de la materia
indicar que una parte del P presente en los orgnica ligada a la superficie de los xidos de
extractos era orgnico no hidrolizable por el Fe y Al y con ella el posible P orgnico u
molibdato. Este resultado discrepa con el rganomineral asociado, facilitando entonces su
encontrado por Hens y Merckx (2001) quienes mineralizacin (Kudeyarova, 1991) .
indican que el P que es capaz de atravesar un La idea anterior parece ser consistente con
filtro de 0,025 m es el hidrolizable por el los valores de C orgnico disuelto encontrados
reactivo molbdico. El Si no pareci interferir en los extractos (COD) y en los eluatos de MIA
en los datos de P pues sus valores siempre se (carbono orgnico fijado en la membrana, CO)
mantuvieron por debajo del lmite de deteccin (Tabla 5). As el COD extrado y el CO en los
del mtodo (0,4 mg Si l-1). eluatos alcalinos aumentaron con la fertilizacin;
Por otra parte, en la muestra E-0 se sin embargo no se detect CO en los eluatos de
observa como gran parte del PT es retenido por NaCl. Esto podra explicarse a travs del efecto
la membrana (PTMIA), aunque para los que la fuerza inica del agente eluyente ejerce
tratamientos E-100 y E-200 esta cifra es de sobre la conformacin espacial de la materia
solo un 50% (Tabla 4). orgnica retenida. Esto podra suponer que
La mayor parte del PR parece estar grupos funcionales no ionizados asociados a la
fuertemente asociado a la MIA. Para la muestra materia orgnica disuelta que en principio no
E-0, el NaCl es incapaz de recuperar PR, estuviesen fijados a las posiciones de cambio de
mientras que para los tratamientos E-100 y E- la MIA ahora si lo estn y por tanto, se liberara
200 la disolucin salina eluye poco ms del 10% P de esta matriz orgnica y no CO.
de esta fraccin. El NaOH, por otra parte, se Por otra parte la cantidad de Al monmero,
muestra como un mejor agente eluyente para el al igual que el CO y el P, aumenta con la
P (OH-P) que el NaCl (Cl-P), aunque de todas fertilizacin (Tabla 5). Esto parece significar
maneras en la MIA queda una cantidad de P que una parte muy importante del P estara
residual (P) que resiste a ambos tratamientos asociado a complejos ternarios P-Al-AF dada
(Tabla 4); tambin es de inters sealar que la la presencia de Al en los eluatos de NaOH,
cantidad de PRR despus de la extraccin con la aunque no se detect en los eluatos de NaCl;
MIA, no presenta diferencias significativas con esto podra deberse a la influencia de la fuerza
el correspondiente PTR que queda en disolucin. inica sobre la materia orgnica, tal y como se
Esto parece poner de manifiesto el posible coment anteriormente para el caso del P, pero
carcter orgnico de estas fracciones, una muy que en el caso del Al hara posible que este
afn a la membrana mientras que la otra es elemento, asociado al P y a la materia
netamente hidrfila. Por otra parte, tanto el P orgnica, posiblemente de naturaleza flvica,
residual que permanece en la MIA (P) como el retenida en la MIA no pasase a la disolucin
P remanente en disolucin (PRR) aumentan con salina por estar fuertemente retenido al CO;
la fertilizacin; esto hace sospechar que el solo bajo la accin del NaOH como eluyente,
113
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

114
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

Tabla 6. Anlisis de la radioactividad en los extractos (Cp), eluatos de la membrana de resina


(NaCl y NaOH) y su sobrenadante (cpm).

Suelo E-0 E-100 E-200


Cuentas-Cl 14,7 10,7 10,9
Cuentas-OH 9,0 9,5 9,2
Cuentas-Sob 34,0 105,3 45,2
Cuentas 57,7 125,5 65,3
Cuentas Cp 54,9 158,8 200,9
Radioactividad residual 0 33,3 135,6
en resina

Tabla 7. Anlisis compartimental de las fracciones de P despus del intercambio isotpico en


los suelos fertilizados, previas al tratamiento con la membrana de intercambio aninico
(MIA). Cp-PR y Cp-PT= P reactivo y total de los extractos (g l-1), E (mg kg-1), tiempo = 1
minuto, 1 da y 40 das.

Suelo E-0 E-100 E-20


Cp-PR 12,21,3 17,00,7 31,41,3
E1min 3,9 2,3 3,8
E1d 889 831 834
E40d 989 1067 1141
E1min-1d 830 829 886
E1d-40d 307 236 101
Cp-PT 21,40,7 59,60,3 137,40,6
E1mint 6,5 8,8 16,2
E1dt 932 1014 1090
E40dt 994 1091 1186
E(1min-1d)t 926 1005 1074
E(1d-40d)t 62 77 96
E1d 43 183 256
E1min 2,6 6,5 12,4
E40d 5 24 45

115
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

Tabla 8. Anlisis compartimental de las fracciones de P despus del intercambio isotpico en


los suelos fertilizados y posterior extraccin con membrana de intercambio aninico (MIA).
Cp-Cl-PR y Cp-OH-PR = P reactivo en los eluatos de NaCl y NaOH en la MIA (g l-1); E(mg
kg-1), tiempo = 1 minuto, 1 da y 40 das.

Suelo E-0 E-100 E-200


Cp-Cl-PR 0 3,40,3 10,80,8
E1min-Cl 0 0,5 1,3
E1d-Cl 0 455 525
E40d-Cl 0 966 1041
E1min-1d(Cl) 0 455 524
E1d-40d(Cl) 0 511 516
Cp-OH-PR 19,10,1 30,60,1 53,20,9
E1min-OH 6,1 4,5 6,3
E1d-OH 924 945 952
E40d-OH 993 1051 1164
E1min-1d(OH) 918 941 946
E1d-40d(OH) 69 106 212
E1min 6,1 4,0 5,0
E1d 924 490 427
E40d 993 85 123

el Al monmero y el CO abandonaran la Posiblemente este P estara asociado a


matriz de la membrana intercambiadora. En complejos rgano-alumnicos que no son
este sentido, sealar que el pH de los eluyentes solubles o intercambiables a pH elevados. Se
salino y alcalino no variaron lo cual es ha observado que a pH y relaciones Al/C
indicativo que el proceso de extraccin de la elevadas, el Al puede presentarse en forma de
membrana fue independiente de este complejos rgano-alumnicos insolubles (Jasen
parmetro. et al., 2002; Nierop et al., 2002) lo que
Por ltimo, poner de manifiesto que el avalara, en parte, nuestro anlisis.
balance de P (Tabla 4) y de radioactividad
(Tabla 6) en el global del proceso indica que 3.4.3. Anlisis multicompartimental y
existe una parte del P, parte del l radiactivo, estocstico del P intercambiable en
que es retenido por la membrana a pesar de las ausencia y presencia de MIA
extracciones sucesivas con NaCl y NaOH.
116
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

1
En las Tablas 7 y 8 se recogen, para E-0 (no existe P lbil disponible) hasta
respectivamente, los anlisis compartimentales los 1,3 mg kg-1 para E-200 (disponibilidad muy
en ausencia y presencia de una MIA en los limitada a pesar de la fertilizacin). Sin
extractos acuosos filtrados por 0,025 m. Para embargo, estos valores son muy superiores en
el primer caso, los valores de E para el P los eluatos de NaOH lo que da cuenta, junto
reactivo (PR) ya se analiz en las secciones con los valores de CO y Al obtenidos (Tabla
anteriores. Es interesante hacer resaltar como 6), que este P constituye una fraccin
los elevados valores de PT en cada uno de los importante del P total del extracto que hace
extractos, elevan significativamente los valores que los valores de E1min estn sobreestimados
de E1min (Tabla 7) hasta alcanzar cifras que, en el caso del intercambio isotpico normal.
en principio, no contemplaran al P como un Estos datos ponen de manifiesto que el uso de
elemento limitante de los cultivos (Tran et al., la MIA, utilizando como eluyente el NaCl, es
1988). Gran parte de este P, tanto hidrolizable mucho ms selectivo a la hora de limitar la
como no hidrolizable por el molibdato, sera de fraccin del P lbil extrado (P disponible por
naturaleza orgnica u rganomineral. Por otro la planta) y que los resultados con compatibles
lado se observa como la inmensa mayora del P con la elevada capacidad de retencin del P
es intercambiable entre 1 min. y 1 da, que presentan los Andosoles y suelos ndicos
aumentando muy poco con el tratamiento de que limita la presencia de P lbil en la
fertilizacin al cual fue sometida la muestra (el disolucin del suelo.
parmetro parece no ser sensible al proceso de Por otro lado, tambin se observa como los
fertilizacin). Esto parece significar que los valores de E entre 1 min-1 da y entre 1 da-40
valores de E en el extracto acuoso estn muy das en los eluatos muestran un crecimiento
condicionados por la determinacin analtica mucho ms lento, aumentando con la
del P reactivo que, como se observa, hace que fertilizacin, siendo prcticamente la mitad que
los valores de E1min estn sobreestimados y en el caso de los extractos sin MIA. Para el
que, por tanto, este parmetro no constituira caso de los eluatos de NaOH, prcticamente
una medida representativa de la fraccin lbil todo el P sera intercambiable entre 1 min. y 1
del P en Andosoles y suelos ndicos. da. Esto indica que un tratamiento de 200 mg
Sin embargo, el anlisis compartimental de kg-1 de P es insuficiente para que el suelo
las fracciones de P utilizando la MIA (Tabla 8) pueda responder a las necesidades fosfricas
arroja resultados que son ms acordes con la que puedan necesitar los cultivos.
falta de respuesta que presentan los cultivos El anlisis estocstico del intercambio
cuando los suelos ndicos y Andosoles son isotpico utilizando la MIA (Tabla 9) arroja
sometidos a fertilizacin. En concreto, los como dato significativo los bajos valores del
valores de E1min en los eluatos de NaCl flujo neto de intercambio. Los valores de Fm en
indican que las cantidades de P los eluatos de NaCl oscilaron entre 0 para E-0
intercambiables son muy bajas, desde 0 mg kg- (flujo nulo de nutriente entre la fase slida y
117
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

Tabla 9. Anlisis estocstico del intercambio isotpico en los eluatos de las membranas de
resina de los suelos fertilizados. Km (min-1), Tm (min), Fm (mg kg-1 min-1), CpR = P reactivo (g
l-1), CpT= P total del extracto (g l-1), MIACl = membrana eluda con NaCl (g l-1), MIAOH =
membrana eluda con NaOH (g l-1), MIAt = PR[eluato NaCl + NaOH (g l-1)]. Las
concentraciones empleadas para calcular el parmetro F se expresaron en mg kg-1 min-1.

Suelo E-0 E-100 E-200


n 0,61 0,60 0,55
r1/R 0,033 0,069 0,086
km 159 51 48
Tm 0,006 0,019 0,021
Fm-CpR 14,4 6,7 13,5
Fm-CpT 25,6 25,3 58,5
Fm-MIACl 0 1,4 4,6
Fm-MIAOH 22,9 13,0 22,6
Fm-MIAt 22,9 14,5 27,7
Fm-CpR-Fm-MIACl 14,4 5,3 8,9
Fm-CpR-Fm-MIAOH -8,5 -6,3 -9,1
Fm-CpT-Fm-MIAt 2,7 10,8 30,8

acuosa del suelo) y 4,6 mg kg-1 min-1 que son Los resultados ponen de manifiesto las
indicativos de lo limitado que se encuentra el P dificultades del mtodo clsico de la cintica
en el suelo. En el caso de los eluatos de NaOH de intercambio en la determinacin del P lbil
los datos son ms elevados pero an bajos en Andosoles debido a la presencia de
comparados con la bibliografa (Fardeau et al., fracciones no reactivas del P frente al reactivo
1991; Frossard et al., 1995). Como sealamos molbdico en los extractos acuosos filtrados
anteriormente, Fardeau et al.(1991) sugiere que por 0,025 m. La presencia de Al y COD
cuando los valores de E1min son inferiores a 5 tambin indica la importancia que tanto el P
-1 -1 -1
mg kg y de Fm son inferiores a 80 mg kg min orgnico como la posible presencia en
son indicativos de que el P es un factor limitante disolucin de complejos de P-Al-AF tienen en
para el crecimiento de las plantas en este tipo de el contenido y dinmica del P lbil, as como
suelos como el estudiado. en el proceso de intercambio isotpico que
hace, desde el punto de vista analtico, la
4. Conclusin sobreestimacin del parmetro E1min.

118
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

Debemos realizar una autocrtica con la de la existencia de complejos


aplicacin de esta metodologa a suelos con rganominerales de P-Al-AF solubles en los
una elevada capacidad de retencin de P, dado extractos acuosos.
los bajos valores de concentracin observados 4) La radioactividad remanente en la MIA
en disolucin. Fardeau et al. (1994) indican indica que existe una fraccin de P que es
que al comienzo de cualquier experimento de resistente a la extraccin sucesiva con estos
intercambio isotpico en estos casos tan eluyentes lo que pone de manifiesto que
32
desfavorables, la relacin entre el P aadido existe una fraccin de P ms compleja (de
31
y el P presente es de uno radiactivo por cada naturaleza orgnica o compuestos
2000 no radiactivo. Dado que el suelo no tiene condensados inorgnicos solubles) que son
preferencia por ninguno de estos istopos, no muy afines a la matriz de la membrana.
hay razn para suponer una adsorcin El uso de la MIA en la cintica de
especfica de 32P y por tanto en estos sistemas intercambio isotpico abre nuevas posibilidades
altamente reactivos, la concentracin de experimentales en el estudio del P lbil
ortofosfato libre permanece relativamente baja. disponible para las plantas, as como los
Por ello se recomienda la preconcentracin con procesos de transferencia desde la fase slida a
resinas aninicas antes de su determinacin la acuosa en Andosoles y suelos ndicos.
(Salcedo et al., 1991).
El uso de la MIA como agente extractante
5. Referencias
del P libre (radiactivo o no) en disolucin una
vez finalizado el proceso de intercambio, pone
Amer, F.; Mahdi, S.; Alradi, A. 1969. Limitations
de manifiesto que:
in isotopic measurements of labile phosphate in
1) Las extracciones sucesivas con NaCl y
soils. Journal of Soil Science 20, 91-100.
NaOH han permitido diferenciar varias
Bartlett, R. J.; Ross, D. S. 1988. Colorimetric
fracciones de P. determination of oxidizable carbon in acid soil
2) Si se usa en primer lugar el NaCl, este se ha solutions. Soil Science Society of America
mostrado como un agente ms selectivo a la Journal 52, 1191-1192.
hora de extraer la fraccin lbil, Barrow, N. J. 1978. The description of phosphate
obtenindose unos valores de E1min de adsorption curves. Journal of Soil Science 29,

acuerdo con la elevada capacidad para fijar 447-462.


Barrow, N. J. 1979. The description of desorption
fosfato que presentan estos suelos. El flujo
of phosphate from soil. Journal of Soil Science
neto de transferencia desde la fase slida a la
30, 259-270.
acuosa del suelo (Fm), calculada sobre la
Buehler, S.; Oberson, A.; Rao, I. M.; Friesen, D.
base anterior, tambin est en concordancia
K.; Frossard, E. 2002. Sequential phosphorus
con las propiedades de estos suelos. extraction of a 33
P-labeled Oxisol under
3) La presencia de C y Al, adems de P, en los contrasting agricultural systems. Soil Science
eluatos de NaOH da consistencia a la idea Society of America Journal 66, 868-877.
119
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.3 P intercambiado isotpicamente

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122
CAPTULO III.4:

DESORCIN DE FSFORO DISPONIBLE EN


SUELOS DE ORIGEN VOLCNICO
MEDIANTE EL USO DE RESINAS DE
INTERCAMBIO ANINICO.
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

1. Introduccin primordial de estudio debido a la importancia


de la reaccin reversible de sorcin del P en
Las calibraciones usuales que relacionan el procesos agronmicos de uso sostenible de la
P extrable con el rendimiento de los cultivos y fertilizacin fosfatada y medioambientales,
los requerimientos de fertilizacin de P no debido a los problemas de eutrofizacin de las
parecen ser los ms adecuados para suelos de aguas asociados al exceso de concentracin de
carga variable (Fox, 1980). Un mtodo P en las aguas de escorrenta (Sharpley et al.,
alternativo es el mtodo de la resina de 2000).
intercambio aninico que ha sido ampliamente
utilizado como mtodo de rutina para suelos 1.1. Procesos de sorcin del P en las
ricos en oxihidrxidos de Brasil (van Raij, superficies sorbentes de P (xidos,
1997). Los Andosoles y suelos ndicos minerales de arcilla, carbonatos y
presentan muchos problemas cuando se intenta
materia orgnica) del suelo
determinar el P disponible con extractantes
qumicos debido a la alta solubilidad que
Es un hecho incuestionable que la
presentan sus componentes principales:
concentracin de P en la disolucin del suelo
minerales de ordenacin de corto alcance de
no sigue las reglas que conforman un simple
Al-, Fe-, y Si- y compuestos rganominerales
equilibrio de precipitacin-disolucin (Wolt,
[humus-Al(Fe)] los cuales constituyen el
1994). Los principales procesos que controlan
principal sumidero de P en estos suelos de
la concentracin de P en disolucin en los
elevada capacidad para fijar P. Por otro lado, la
suelos son la adsorcin y desorcin que
extraccin de P con membranas de resinas de
transcurren con la participacin de los
intercambio aninico (MIA) parece
diferentes constituyentes del suelo. Como gran
constituirse como un procedimiento
parte de las especies de P en la disolucin del
prometedor en este tipo de suelos (Cooperband
suelo estn cargadas negativamente, los
y Logan, 1994).
sorbentes de P sern aquellos constituyentes
Dado que el mecanismo de actuacin de
del suelo que presentan cargas positivas. Entre
las resinas de intercambio aninico con el
ellos, y dada su importancia en suelos de
suelo es la de simular la toma de los iones
naturaleza volcnica, tenemos compuestos de
fosfato del suelo por las plantas (Hedley et al.,
carga variable que contienen grupos hidroxilos
1982) que, a su vez, est vinculado a los
(xidos de Al y Fe), carboxilos (materia
procesos de desorcin del macronutriente
orgnica) y silanoles (minerales de arcilla).
desde las superficies reactivas a la disolucin
del suelo, el anlisis de los procesos de
1.1.1. Sorcin sobre xidos de Al y Fe
desorcin de fosfato en suelos de carga
variable como los Andosoles y suelos con
caractersticas ndicas constituyen un objetivo
124
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Muchos factores del suelo influyen sobre disminucin de la movilidad del P inorgnico
la sorcin del P. Entre ellos destacan la (Jones y Brassington, 1998; Hissinger, 2001).
naturaleza y cantidad de los componentes del La sorcin de P se ha explicado a travs de
suelo, as como los xidos e hidrxidos de Al y una reaccin de cambio de ligando sobre las
Fe, la arcilla, la materia orgnica, el pH del superficies ricas en xidos de Al(Fe) por el
sistema y el electrolito de fondo (su intercambio de OH- por el in fosfato
concentracin y la valencia del catin base) (Breeuwsma, 1973; van Riemsdijk y Lyklema,
(Mulder y Cresser, 1994). Debido a su elevado 1980):
punto cero de carga (ZPC), los xidos
metlicos [trmino genrico considerado aqu
para designar xidos, oxihidrxidos e
hidrxidos, tal y como proponen Schwertmann
y Taylor (1989)] poseen cargas positivas en el
rango de pH de los suelos. Estos compuestos,
bien formando pequeos cristales o minerales
de corto alcance, poseen una elevada superficie con formacin de un enlace covalente entre el
especfica, razn por la cual su reactividad in metlico y el fosfato. El P inorgnico se
como sorbentes es muy elevada (Parfitt, 1978; adsorbe sobre estos xidos en forma de un
Norrish y Roser, 1983; Schwertmann y Taylor, complejo de esfera interna (Goldberg y
1989), jugando un papel fundamental en el Sposito, 1985) en el que la coordinacin se
proceso de adsorcin de P en muchos suelos, realiza en lugares especficos de estos xidos,
tanto aquellos situados en zonas tropicales no existiendo molculas de agua entre la
(ricos en xidos) como los calcreos (Matar et superficie y el in fosfato.
al., 1992; Samadi y Gilkes, 1998; Rahmatullah Durante la primera etapa de la reaccin, el
y Torrent, 2000). Al ser minerales de carga P se une a un in Al3+ a travs de un enlace Al-
variable, su capacidad para adsorber aniones O-P, siendo en esta etapa todava lbil. En una
como el P se incrementa cuando el pH segunda etapa se forma una estructura en anillo
disminuye debido al aumento de la carga con dos iones Al que hace que la capacidad de
positiva de estos minerales como consecuencia desorcin del P disminuya en las superficies
de su mayor protonacin a pH bajos (Parfitt, reactivas con lo que el fosfato se encuentra
1978; Barrow, 1984; Quang et al., 1996; menos disponible. Este proceso se denomina
Strauss et al., 1997). Esto significa que si quimisorcin: la adsorcin de P a los
consideramos solo el proceso de adsorcin de componentes del suelo transcurre a travs de
iones P sobre los xidos de Al y Fe, al un proceso en superficie en dos dimensiones;
disminuir el pH estos iones son retenidos con bajo elevadas concentraciones de P o largos
una mayor intensidad que se traduce en una periodos de tiempo lo anterior podra significar
que la sorcin incluira algn proceso de
125
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

precipitacin con la formacin de una nueva adsorbido (Pox) as como los xidos amorfos
fase slida (van der Zee y van Riemsdijk de Al y Fe [(Al+Fe)ox]. La suma de estos
1988). La sorcin de P sobre estos xidos xidos metlicos cuantificaran la cantidad de
consistira, entonces, en un proceso continuo sorcin total del P inorgnico en suelos ricos
secuencial de adsorcin y precipitacin en componentes activos (Beek, 1979;
transcurriendo a travs de dos mecanismos, Loganathan et al., 1987; van der Zee y van
uno relativamente rpido, proceso de adsorcin Riemsdijk, 1988; Sanyal et al., 1993). La
relativamente reversible (Breeuwsma, 1973; importancia de la reaccin reversible del P con
van Riemsdijk y Lyklema, 1980a y b), y otro la fase slida es considerada de inters tanto
relativamente lento, prcticamente irreversible desde el punto de vista agrcola como
(van der Zee y van Riemsdijk, 1988), siendo medioambiental. Debido a la limitada
muy difcil distinguir entre ambos. disponibilidad de P para las plantas en
Se considera que el mecanismo de Andosoles y suelos con caractersticas ndicas
adsorcin reversible (proceso rpido) hace que el estudio de este proceso pueda
transcurre con un tiempo de reaccin de 1 da, ayudar a comprender los mecanismos para
mientras que la reaccin lenta que conlleva un mantener una ptima fertilidad del suelo para
proceso de difusin reactiva del P a travs de la produccin sostenible de los cultivos.
la fase slida del suelo o a travs de los
microporos de los xidos de Al (Fe) seguida 1.1.2. Caractersticas del proceso de
con toda probabilidad, por procesos de desorcin de fosfato
precipitacin y/o adsorcin en el interior de los
agregados (van Riemsdijk y Lyklema 1980a y Los suelos con una elevada capacidad
b; Barrow, 1983; van Riemsdijk et al., 1984; tampn liberan su P a la disolucin del suelo
Madrid y De Arabarri, 1985; Willet et al., lentamente, a travs de la reaccin lenta de
1988). En suelos no carbonatados, la fraccin desorcin de P por los coloides del suelo
total de P sorbido ha sido interpretada en (Barrow y Shaw 1975). Sin embargo la
trminos de una suma entre el P adsorbido liberacin de P desde el suelo tambin
reversiblemente y el P enlazado cuasi- transcurre adems de por la desorcin de P de
irreversiblemente (van der Zee et al., 1987; van las superficies activas, por la disolucin de
der Zee y van Riemsdijk, 1988). El empleo de minerales y la mineralizacin de P orgnico.
tiras de papel impregnadas con oxido de Fe se En cualquier caso, centraremos nuestro anlisis
ha propuesto como procedimiento para sobre los procesos de desorcin.
determinar la cantidad de P adsorbido Al igual que la sorcin, la desorcin
reversiblemente (FeO-P) (van der Zee et al., tambin parece ocurrir a travs de un
1987). La extraccin con oxalato amnico mecanismo que incluira el intercambio de
cido (Schwertmann, 1964) se ha utilizado ligando con el OH- . Sin embargo, la desorcin
tanto para determinar la fraccin total de P de P sobre las superficies activas de suelo
126
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

constituye un proceso mucho ms lento que la tendra, en principio, mucha ms incidencia en


sorcin (combinacin de adsorcin y suelos neutros o alcalinos, incluidos los
precipitacin) (Brling, 2003). Gran parte del carbonatados (influencia decisiva del
P adsorbido no es fcilmente desorbible, comportamiento de los equilibrios bicarbonato-
especialmente cuando se ha formado la CO2) que en los suelos de nuestro estudio cuyo
estructura en anillo. La oclusin del P en los rango de pH es inferior a la neutralidad.
xidos de Al y Fe tambin previenen la Tal y como hemos venido apuntando a lo
desorcin (Smeck, 1985). largo de este anlisis, los procesos de
La desorcin del P va intercambio de adsorcin del P controlan fuertemente el P en
ligando puede verse beneficiada por una la disolucin del suelo especialmente en
sensible disminucin de los iones fosfato en la horizontes con elevadas cantidades de
disolucin del suelo y por un aumento de sesquixidos (pe.: horizontes B) (Mulder y
aniones competidores que podran desplazar el Cresser, 1994). La disponibilidad del P en
equilibrio de adsorcin-desorcin hacia este estos horizontes depende de la estabilidad de
ltimo proceso (Hinsinger, 2001). De todas los complejos superficiales Al(Fe)O-P y de la
maneras, numerosos trabajos han puesto de presencia de ligandos orgnicos que puedan
manifiesto que las superficies de xidos de Al desplazar el P. Fox et al. (1990) demuestran
y Fe, as como otros sorbentes del suelo como que tanto la liberacin del P inorgnico como
los minerales de arcilla, tienen una fuerte la del Al en un horizonte spdico aumenta con
afinidad por los iones fosfato en comparacin la presencia de un cido orgnico simple que
con otros ligandos inorgnicos (como el forma complejos estables con el Al.
silicato, el sulfato o el bicarbonato) u orgnicos Por otra parte, Jones y Brassingnton (1998)
(aniones carboxilato) competidores del P. demuestran que, dentro de los carboxilatos ms
Nagarajah et al. (1968) demuestran que la comunes, el oxalato y el citrato presentan una
afinidad por las superficies kaolinticas de los mayor capacidad de adsorcin y afinidad por
aniones disminuye siguiendo el siguiente los componentes activos del suelo y por un tipo
orden: fosfato > citrato > bicarbonato. Estos de xido de Fe sinttico (ferrihidrita) aunque
autores pusieron de manifiesto que tanto el los iones fosfato siempre presentaban, desde el
citrato como el bicarbonato podran desorber punto de vista energtico, la mayor fuerza de
algo de fosfato. Investigando el efecto de los adsorcin por las superficies estudiadas. Estos
ligandos sobre la desorcin de P en el rango autores concluyen que solo a elevadas
milimolar de concentracin, Kafkafi et al. concentraciones de estos ligandos
(1988) demuestran que los iones bicarbonato competidores podran desorberse iones P de
podran desorber mucho ms P que el citrato forma significativa. Stauton y Leprince (1996),
de la montmorillonita, aunque sera menos trabajando con concentraciones de aniones
efectivo que el citrato para desorber P desde la orgnicos en el rango de 1 mM [concentracin
kaolinita. La reactividad del bicarbonato muy superior a los valores de referencia dados
127
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

por Jones (1998) para estos ligandos en el (Barrow, 1983). Debido a que la difusin
suelo y en la rizosfera], encontraron que la desde el interior de los agregados es lenta, este
relacin entre P soluble y P adsorbido aument P solo se transformar en disponible solo a
2,5 veces con el citrato, aunque para otros muy largo plazo. La importancia de la difusin
carboxilatos (oxalato, fumarato y acetato) este desde el interior de los agregados como etapa
aumento fue mucho ms moderado. Kirk limitante en la transferencia de materia de los
(1999) report un mayor efecto del citrato al solutos reactivos entre los lugares de sorcin
trabajar en un rango de concentraciones entre en el interior de los sorbentes porosos y la
0,1 a 2,5 mM. Sin embargo, tal y como pone disolucin se ha estudiado con diferentes
de manifiesto el autor, el efecto del citrato (y metales (Trivedi y Axe, 2000; Lin y Wu, 2001)
cualquier otro anin orgnico complejante) y con compuestos orgnicos (Wu y Gschwend,
sobre la movilidad del P inorgnico del suelo 1986; Rijnaarts et al., 1990). Por tanto este
parece transcurrir a travs de ciertos mecanismo parece ser muy importante en el
mecanismos que, a su vez, parecen influir control de la biodisponibilidad y transporte de
sobre la desorcin del P va intercambio de varios solutos reactivos como el P, en el suelo.
ligando (pe.: complejacin del Al y el Fe; Earl La difusin desde el interior de los agregados
et al., 1979). Gerke et al. (2000a y b) muestran tambin debera considerarse en aquellos
un incremento concomitante de la modelos que intenten modelizar procesos de
concentracin de los cationes metlicos (Al y desorcin de estos solutos a largo plazo en el
Fe) y el P en la disolucin del suelo con la suelo (Koopmans et al., 2004).
adsorcin del anin citrato; aunque este
incremento no fue tan importante con los 1.1.3. Uso de resinas de intercambio
aniones malato y oxalato, fue muy superior en aninico en la cuantificacin del fosfato
comparacin con el anin oxaloacetato. disponible
Por otra parte es necesario considerar la
importancia que tiene la difusin en la El empleo de las resinas de intercambio
desorcin del fosfato. Para que exista una aninico constituy un avance metodolgico
renovacin del P de la disolucin del suelo de importante en la cuantificacin del P lbil del
cara a la absorcin por las plantas, debe ocurrir suelo respecto al uso de extractantes qumicos
una reaccin inicial rpida de desorcin del P (Amer et al., 1955), siendo considerada la
adsorbido sobre la superficie que conforman extraccin por las resinas como uno de los
los xidos de Al y Fe (van der Zee et al., mejores mtodos para la estimacin del P
1987). La disminucin del P adsorbido en disponible por la planta (Bowman et al., 1978;
superficie podra paliarse mediante la Sibbensen, 1978; Bache e Ireland, 1980;
desorcin del P enlazado en el interior de los Sibbensen, 1983; Schoenau y Huang, 1991;
xidos de Al(Fe), seguido de una difusin del Cooperband y Logan, 1994). Ello se debe a que
P de las capas externas de los agregados
128
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

las resinas aninicas simulan la forma de actuar este mtodo sea poco atractivo para
de las races de las plantas (Sibbensen, 1978). La determinaciones rutinarias de laboratorio. Sin
cantidad de P sorbido por la resina depende embargo, las resinas se han empleado con xito
solamente de la cantidad de P desorbido o en la estimacin de flujo de nutrientes en suelos
solubilizado de la matriz del suelo y no de las (Skogley y Dobermann, 1996; Lehmann et al.,
propiedades de la propia resina (Palma y 1999; Lehmann et al., 2001).
Fassbender, 1970; Krauser y Ramlal, 1987). Los Aunque las resinas aninicas en forma de
iones fosfato, procedentes de las partculas del membranas (MIA) han estado disponibles desde
suelo, pasan a la disolucin donde son hace mucho tiempo, han recibido poca atencin
absorbidos por las resinas que remueven por parte de los qumicos del suelo y slo en los
continuamente estos iones de la disolucin para ltimos quince aos ha comenzado a
evitar que se alcance el equilibrio inico entre la generalizarse su uso. Saunders (1964) fue el
fase slida y lquida. Debido a este modo de primero en utilizar una tira de membrana para
accin, las resinas granulares aninicas de tipo extraer P del suelo. La MIA simula la accin de
base fuerte, las ms empleadas en el anlisis las races de las plantas ya que absorbe
edfico de rutina, son independientes del tipo de continuamente nutrientes de la disolucin (Yang
suelo estudiado. et al., 1991; Tran et al., 1992), estimando tanto
La extraccin con este tipo de resinas la concentracin en disolucin de esos nutrientes
granulares se considera un mtodo ms eficaz como la velocidad de difusin de los mismos en
que la extraccin con bicarbonato o agua debido el suelo (Abrams y Jarrel, 1992). Debido a esto,
a su bajo coste, simplicidad y elevada la MIA parece reflejar los cambios en la
correlacin con la cantidad de P exportada por la concentracin de los nutrientes en la disolucin
planta. Sin embargo, algunos autores la han del suelo cuya dinmica fsico-qumica depende
considerado como poco adecuada para la de los factores biticos y abiticos del suelo
caracterizacin precisa del P lbil, ya que no da (Cooperband y Logan, 1994). Muchos trabajos
cuenta de mecanismos implicados como el ponen de manifiesto que esta tcnica posee un
proceso de difusin (Yang et al., 1991; Abrams potencial superior como indicador de
y Jarrell, 1992). disponibilidad de nutrientes del suelo que la
A pesar de estas propiedades, las resinas han extraccin qumica clsica (Schoenau y Huang,
sido poco utilizadas en anlisis agronmicos 1991; Qian et al., 1992; Ziadi et al., 2001).
para recomendaciones sobre fertilizacin. Esto Con respecto al fosfato, la MIA se ha
se debe a la dificultad para separar las resinas de utilizado en la cuantificacin del P disponible
la suspensin del suelo despus de la extraccin. (Abrams y Jarrell, 1992), considerndole como
Sibbensen (1977) recurre a la utilizacin de una medida tanto del P soluble como del P
bolsas de nylon para facilitar el proceso de fcilmente desorbible (Cooperband et al., 1999),
separacin. Sin embargo, el tiempo empleado y emplendosele, adems, en la determinacin in
el esfuerzo realizado en su fabricacin hacen que situ de los cambios del P lbil del suelo
129
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

(Cooperband y Logan, 1994; Huang y para describir estos procesos. Se han realizado
Schoenau, 1996; Cooperband et al., 1999). Los numerosos estudios sobre la cintica de
valores de P determinados por la MIA se han desorcin de P en suelos y minerales de arcilla
empleado para predecir el movimiento potencial empleando resinas de intercambio aninico
del P por efecto de los procesos erosivos que (Evans y Jurinak, 1976), tubos de membrana
tienen lugar en el suelo y en las aguas de de dilisis (Lookman et al., 1995) y mtodos
escorrenta. En este sentido, Gale et al. (2000) de enriquecimiento de P en serie (Lookman et
encuentran que el P asociado a la MIA presenta al., 1996). En estos trabajos se han empleado
una estrecha correlacin con la aplicacin de como modelos que relacionan el tiempo con la
residuos animales al suelo y con el P disponible liberacin de P la cintica de primer orden, la
determinado por el mtodo de Olsen. ecuacin de Elovich y la ecuacin de difusin
Las membranas ofrecen como ventaja su parablica. Tambin se han empleado
estructura plana, permitiendo un rea superficial ecuaciones modificadas que relacionan las
constante y un mejor contacto con el suelo propiedades del suelo con las constantes
(Cooperband y Logran, 1994), pudiendo ser asociadas a dichas ecuaciones (Sharpley, 1983;
insertadas en el suelo con una mnima Vadas y Sims, 2002). Los estudios de
modificacin del terreno circundante. La mayor liberacin de P han mostrado que la desorcin
virtud del mtodo de la membrana radica en la es habitualmente rpida en los estadios
facilidad con que el intercambiador puede ser iniciales, seguida de una liberacin ms lenta.
separado de la matriz del suelo (Saunders, Este comportamiento bifsico se ha atribuido a
1964). Por ltimo sealar que las MIA se han las diferentes fracciones de P que poseen
empleado recientemente en la determinacin de diferentes estabilidades y/o velocidades de
P isotpicamente intercambiable cuya disolucin.
concentracin en disolucin se aproxima a los El anlisis anterior nos lleva a concluir que
lmites de deteccin del mtodo colorimtrico en el P desorbido en un tiempo determinado
suelos con una elevada capacidad de retencin constituye un buen ndice de disponibilidad de
de P (Maertens et al., 2004). P en el suelo (Tran et al., 1992; Raven y
Hossner, 1994) mientras que el P extrado por
1.1.4. Estudio de liberacin de fosfato las resinas de intercambio aninico est
empleando resinas de intercambio inico directamente relacionado con el P absorbido
por las plantas y la produccin de materia seca

Tal y como hemos indicado, los (Delgado y Torrent, 1997). En este sentido,

mecanismos de liberacin de P y las reacciones algunos trabajos, principalmente aquellos que

de sorcin con las partculas del suelo son utilizan suelos de zonas templadas, han

complejas, si consideramos todos los tipos de unificado ambos criterios y han estudiado la

agentes adsorbentes y las numerosas cintica de toma de P del suelo (cintica de

expresiones cinticas que han sido empleadas liberacin o desorcin de fosfato) mediante
130
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

resinas de intercambio aninico, aunque las contenidos de C y una elevada actividad


interpretaciones de estos estudios son todava microbiana explica la mayor velocidad de
motivo de discusin. difusin del P en suelos arcillosos en
Amer et al. (1955) consideraron que la comparacin con otros suelos de textura ms
adsorcin de P por las resinas aninicas desde gruesa (Bissonnette et al., 2001; Zheng et al.,
la disolucin del suelo poda describirse 2001; Morel, 2002)
mediante dos o tres etapas simultneas cuya Por otra parte, Yang y Skogley (1992),
cintica se puede considerar de primer orden, empleando bolsas de nylon con resinas,
aunque Griffin y Jurinak (1974) indicaron que concluyeron que la difusin parece ser la etapa
estas etapas estaban asociadas a limitante de la velocidad pero no pudieron
pseudocinticas de primer orden. distinguir explcitamente la naturaleza de la
Vaidyanathan y Talibudden (1970) limitacin difusional. De todas formas, las
demostraron que la velocidad de toma de P por evidencias parecen indicar que los modelos
resinas de intercambio inico en algunos basados en mecanismos de difusin explican
suelos britnicos estaba limitada por la mejor las cinticas y los cambios energticos
dispersin interparticular, una idea rechazada asociados a la liberacin de P mediante el
posteriormente por Bache e Ireland (1980) empleo de mezclas de resinas aninicas y
quienes indicaron que la adsorcin de P por catinicas, estando controlada la reaccin de
resinas de intercambio aninico, bien en forma intercambio inico por la difusin
cloruro o en forma bicarbonato, no constitua interparticular (Agbenin y van Raij, 2001).
una reaccin controlada a travs de una Siddique y Robinson (2004), despus de siete
difusin interparticular en otros suelos extracciones sucesivas con mezclas de resinas
britnicos. Dalal (1974) concluye con una aninicas y catinicas, concluyeron que la fase
interpretacin no mecanicista de estas cinticas rpida del proceso representaba la desorcin
en algunos tipos de suelos tropicales pues la del P ms lbil, siendo el resto de las
expresin de la ecuacin de velocidad parece fracciones menos mviles y de ms difcil
n/m
seguir una funcin del tipo t . Soldano y liberacin.
Boyd (1953) indicaron que la velocidad de Con respecto a las MIA, se ha observado
adsorcin de P por las resinas de intercambio que los valores de P obtenidos tambin son
aninico en una disolucin libre de electrolitos sensibles a los procesos de difusin (Zheng et
estaba controlada por varios procesos al., 2003). Por otra parte, ciertos autores han
simultneos de difusin pelicular o cinticas puesto de manifiesto que el contenido de
qumicas de primer orden en superficie. En arcilla en el suelo parece ejercer cierta
este sentido, es bien conocido el hecho de que influencia sobre los cambios en el fosfato
la difusin del P est gobernada por los liberado, empleando membranas de
procesos biticos y abiticos que tienen lugar intercambio en un Humaquepts que haba
en el suelo (Frossard et al., 2000); as elevados recibido fertilizacin fosfatada de origen
131
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

mineral (Simard et al., 1991; Zheng et al., biolgico de invernadero. En los eluatos de
2003). Por ltimo, poner de manifiesto que resina se determinaron Al, Fe, Si y CO as
ensayos biolgicos realizados con cebada como las diferentes fracciones de P con el
(Hordeum vulgare L.) y soja (Glycine max L.) fin de encontrar una posible relacin entre
indican que parece existir una buena ellos.
correlacin entre los valores de iones P 3) Como una de las ventajas de la membrana
liberados por el suelo y absorbidos por las de resinas intercambiadoras de aniones
MIA con la toma de P por parte de las plantas (MIA) es la capacidad del experimentador
(Schoenau y Huang, 1991; Tran y para controlar la superficie de contacto con
Ndayegamiye, 1995; Zheng et al., 2003). el suelo a travs del nmero de membranas
En esta experiencia hemos empleado el empleadas, nos propusimos investigar
mtodo de la resina para acceder a la como este parmetro podra influir en las
cuantificacin del P disponible, lbil y cantidades extradas de P y en el resto de
fcilmente desorbible, siguiendo el concepto elementos asociados.
de Cooperband et al. (1999), y de otros 4) Por ltimo, las MIA fueron empleadas en
elementos como S, Al, Fe, Si y C orgnico, el estudio de la desorcin o liberacin de P
tanto en los eluatos como en los sobrenadantes del suelo en funcin del tiempo de
de resina, en una serie de Andosoles naturales agitacin continua de la suspensin de
y fertilizados. Con este fin planteamos los suelo para, por un lado, evitar posibles
siguientes aspectos experimentales: fenmenos de readsorcin de P en la fase
slida durante el proceso como el
1) Se han empleado dos tipos de resinas observado por Freese et al. (1995) en
aninicas granulares, una bsica fuerte cinticas de desorcin de P y, por otro,
(Dowex) y otra dbilmente alcalina para evitar el efecto perturbador que poda
(Merck), y un tipo de membrana de ejercer cuando en una serie de
intercambio aninico (Ionics) con el fin de suspensiones de suelo, procedentes de la
compararlas dadas las diferencias que fraccin <2 mm (suelo total) y de
desde el punto de vista cintico existen diferentes fracciones granulomtricas
entre ellas (DeSilva, 1999). (empleando resinas de intercambio
2) Por otro lado, para determinar si la catinico como agente dispersante), se
adherencia de las partculas del suelo a las coloca una membrana de resina en el
membranas de intercambio aninico se interior de una membrana de dilisis de
podra considerar como una 10000 Da. En este caso, la MIA simula la
contaminacin, en este trabajo el P accin de las races para secuestrar el P de
disponible fue determinado empleando la disolucin del suelo (Cooperband y
MIA en dos Andosoles tratados con Logan, 1994) pudiendo constituir un
diferentes niveles de P en un ensayo
132
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

133
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

potente absorbente del P liberado desde la mediante tratamiento con una disolucin
fase slida a la soluble. nutritiva de fosfato monopotsico (KH2PO4) y
En la Tabla 1 hemos realizado un resumen puestos bajo cultivo de maz (Zea mays L.), tal
de los experimentos realizados. y como se describe en el anejo II, con el fin de
corroborar si existe correspondencia entre el
rendimiento esperado con el cultivo y la
2. Material y mtodos extraccin de P por parte de la MIA.
Las muestras procedentes de las terrazas

2.1. Suelos cultivadas se han tomado a una profundidad de


0 a 30cm.
Suelos forestales: se han estudiado diferentes
tipos de Andosoles de Canarias: alofnicos
2.2. Preparacin de las resinas
(perfiles: Bona Camino y La Esperanza),
rganominerales (perfiles: Las Lajas y
Garajonay) y vtricos con diferente grado de Se emplearon los siguientes tipos de resinas
evolucin (perfiles: Cho, Izaa y Portillo). Los de intercambio aninico:
dos ltimos perfiles han sido descritos por
Fernndez Caldas et al. (1975); el resto se
a) Resina MERCK cambiadora
encuentra en la Gua de Campo del
de iones II (cambiador de iones
Congreso Internacional de Suelos Volcnicos
Granulares dbilmente bsica).
(Departamento de Edafologa. Universidad de
b) Resina DOWEX 1X8
La Laguna, 1984).
fuertemente bsica.
Suelos cultivados:
a) Muestras V. Corresponden a suelos
MIA: IONICS tipo 204-U-386 alcalina fuerte.
procedentes de terrazas de la zona de
medianas alta del Norte de Tenerife. Se trata
En la Tabla 2 se resumen las caractersticas
de Andosoles, en general alofnicos y de
fsicas y qumicas de cada una de ellas.
carcter cido.
b) Muestras P. Terrazas de la zona alta del sur
i.- Resinas granulares
de Tenerife con suelos pumticos con pH
alcalino.
Para la preparacin de las resinas se
c) Dos de los suelos forestales (horizontes A
siguieron los siguientes pasos:
de los perfiles La Esperanza y Karting)
derivados de material volcnico (Hapludands y 1) Lavados iniciales: las resinas se
Ustalfs respectivamente), tamizadas por 2 mm, sometieron a lavados con agua destilada en
que fueron fertilizadas con cuatro niveles de P: agitacin continua con el fin de eliminar
0 (control), 50, 100 y 200 mg de P/kg de suelo cualquier impureza coloreada, as como
134
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Tabla 2. Caractersticas ms importantes de las resinas empleadas.


Caractersticas Dowex Merck MIA Ionics
Tipo Geliforme Geliforme Membrana
Copolmero Estireno-DVB Estireno-DVB Vinilo
Reticulacin (%) 8 5 -
+ + * +
Grupo Funcional ~ N (CH3)3 ~ N (R)3 (poliamidas) ~ N (CH3)3
- -
Contrain Cl Base libre (OH ) Cl-
Color Crema Ocre Blanca
Forma Esfrica Esfrica Plana
Capacidad de Cambio
3.3 5.5 8.7
(meq/g)
Temperatura mxima de
80 100 -
trabajo (C)
Intervalo de pH 1-14 1-9 1-14
Tamao Granular (mm) 0.10-0.25 0.3-0.9 -
Humedad (%) 39-80 45-55 46
Densidad Aparente (g/l) 700 670 -

*
Aminas [R~N(R)2] primarias, secundarias o terciarias que se encuentran parcialmente ionizadas
debido a su carcter bsico [R~N+H(R)2OH-]
desionizada y guardadas en nevera (aprox.
como partculas ligeras adheridas a las
4 C) para su posterior utilizacin.
mismas.
3) Extraccin y anlisis: las extracciones se
2) Conversin de ambas resinas a la forma
realizaron en envases de polipropileno. En
inica requerida: para la preparacin de las
estos envases se aadi 4,0 g de suelo seco
resinas se sigui el mtodo de Sibbesen
al aire, junto a una bolsa de resina y 100
(1977). Se prepararon bolsas individuales
ml de agua desionizada. El sistema se
de tela de polipropileno (nylon), con un
someti a agitacin durante 16 h a 40 rpm
tamao de malla de 300 m, en las cuales
y 20 C. Una vez finalizado el proceso, las
se introdujo 1g de resina aninica en forma
bolsas fueron retiradas y lavadas con agua
bicarbonato. Para saturarlas, cada bolsa de
destilada a presin para eliminar las
resina fue puesta en contacto con una
partculas de suelo adheridas. Cada una de
disolucin de NaHCO3 0,5 M en agitacin
estas bolsas se colocaron en nuevos
rotatoria continua durante 24 h. Una vez
envases de plstico que contenan 50 ml de
finalizado este proceso, las bolsas se
NaHCO3 0,5M, agitndose el sistema
guardaron en envases de plstico con agua
durante 30 min. Una vez finalizado este
proceso, los eluatos fueron filtrados para
135
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

su posterior anlisis. Por otro lado, las 3) Extraccin y anlisis: una tira de MIA en
suspensiones sobrenadantes fueron forma cloruro se aadi a un tubo de PVC
centrifugadas a 2000g durante 15 min. y con 40 ml de agua y 1 g de suelo (<2mm).
luego filtradas por 0,45 m. Las Los tubos se sometieron a un proceso de
disoluciones resultantes se analizaron agitacin continua durante 16 h a 25C.
como si se tratasen de extractos acuosos, Finalizado el proceso, la tira, despus de
determinndose P total (PTsob), S-SO4 y retirarla de la suspensin, se lav
COD, adems de un fraccionamiento reiteradamente con agua destilada para
clsico del P (PIsob y POsob). eliminar las partculas del suelo adheridas.
Con carcter general, las MIA fueron

ii.- Membranas de intercambio aninico (MIA) eludas con 40 ml de NaCl 1M durante 30


min. En un segundo experimento, las MIA
1) Preparacin de las membranas: las fueron eludas secuencialmente con: (i) 40
propiedades qumicas y mecnicas de este ml de NaCl 1M (30 min.) y (ii) 40 ml de

tipo de resinas parecen ser ptimas para su NaHCO3 0,5M (30 min.).
agitacin con las partculas de suelo. Las 4) Efecto del nmero de MIA empleadas y la

membranas se comercializan en forma de relacin agua:suelo (w:s): la experiencia

lminas las cuales se cortaron en tiras de anterior se repiti empleando 1, 3 y 5 MIA

40 mm de largo por 20 mm de ancho de tal o empleando relaciones w:s de 40:1, 75:1 y

manera que cada tira tuviese una superficie 150:1 en presencia de una MIA con el fin

reactiva de 800 mm2 y una capacidad de de observar el efecto de estos parmetros


sorcin de P aproximadamente igual a 175 sobre las cantidades de P y de otros
mg P por 800 mm2 de membrana o 350 elementos extrados.

mg P/g de resina.
2) Conversin de las MIA a forma Cl: las 2.3. Extraccin secuencial de P y otros
tiras de membranas fueron saturadas con elementos asociados mediante
Cl debido a la relativa baja afinidad de las membranas de dilisis y MIA como
MIA por el Cl de tal manera que pueda ser agente receptor
fcilmente desplazado por otros aniones
como el ortofosfato (Cooperband y Logan, Suspensiones procedentes de las fracciones
1994). Las tiras se colocaron en recipientes suelo total y arcilla de las muestras estudiadas
de plstico que contenan 15 ml de una se sometieron a extracciones secuenciales con
disolucin de NaCl 1M, dejndose en MIA (2 h por secuencia) a travs de una
contacto y en agitacin continua durante membrana de dilisis. Los sacos para dializar
30 min. para posteriormente lavarlas con se fabricaron a partir de tubos de dilisis
agua desionizada antes de su uso. Spectrapor 6 con una masa molecular de paso

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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

de 10000 Da; previamente fueron lavado un de Robinson y centrifugacin se separaron las


mnimo de 24 h en HNO3 al 1% y luego fracciones arcilla (0-2m) y limo (2-50m).
enjuagadas con agua destilada. Un saco con 50 Posteriormente, parte de las suspensiones de la
ml de agua destilada, conteniendo una MIA, se fraccin arcilla fueron sometidas a
sumergi en 500 ml de suspensin, en ultracentrifugacin a 30000g y 50000g a 4C
agitacin continua, sustituyndose por otro a antes de introducir las membranas de dilisis
las 2, 4, 8, 22, 24 y 26 h (en el caso de la con la MIA. La fraccin arcilla de la muestra
muestra La Esperanza A se realizaron medidas LL A se someti a fraccionamiento
adicionales a las 28, 30, 46 y 48h). El ltimo submicrnico en flujo continuo (aumento de la
saco se retir a las 96 h, considerndose este masa de las partculas por aceleracin) con el
tiempo como el necesario para alcanzar el fin de obtener la fraccin <0,1 m (Rouiller et
estado estacionario (Agbenin y van Raij, al., 1972).
2001). La experiencia se realiz por duplicado,
Posteriormente, los sacos fueron lavados siempre que la variabilidad en los resultados
con agua destilada extrayndose la MIA. En no excediese del 5%. En algunos casos fue
esta se determinaron Al, Fe, P, S, Si y CO necesario realizar una tercera repeticin con el
empleando NaHCO3 0,5M (30 min.) como fin de obtener resultados consistentes.
agente eluyente. En las disoluciones del suelo La puesta a punto de esta metodologa se
procedentes de las suspensiones tambin se realiz en el Centre de Pedologie Biologique
determinaron P, S, CO, Al, Si y Fe asociados a de Nancy (Francia) bajo la direccin del Dr. F.
fracciones mayores a 10000 Da. La fraccin de Bartoli.
P y S determinada fue la activa ante sus
correspondientes agentes reactivos (P y S 2.4. Tcnicas analticas
reactivos).
Empleando el mtodo descrito por Bartoli El P reactivo en las resinas (Cl-P o Bi-P
et al. (1991) las muestras de suelo fueron dependiendo del tipo de resina) y en las
fraccionadas en fraccin arcilla (<2m), limo suspensiones sobrenadantes de los suelos (P-
(2-50m), arena fina (50-200m) y arena sob) se determinaron como la fraccin de P
gruesa (200-2000m). Diez gramos de suelo que reacciona directamente con iones
tamizado (<2mm) se sometieron a agitacin molibdato (Murphy y Riley, 1962), mientras
continua a 40 rpm durante 2 h con 200 ml de que el P inorgnico (PI) se determin mediante
agua destilada. La fraccin arena fue separada colorimetra despus de tratamiento de los
mediante tamizado en hmedo. La fraccin 0- eluatos y suspensiones con carbn activo; por
50 m fue sometida a un tratamiento ltimo, el P total en las suspensiones se
dispersivo con 100 ml de resina catinica (Na) determin mediante hidrlisis en autoclave con
IR 77 Amberlite con 200 ml de agua destilada. K2S2O8 (Hedley et al., 1982). Con respecto al
Mediante sedimentacin, extraccin con pipeta sulfato reactivo (S-Cl o S-Bi), este fue
137
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

determinado mediante turbidimetra una vez unidades para el conjunto de todos los suelos.
precipitado con cloruro de bario cristalino en Esto parece indicar que el mecanismo de
medio actico (Blanchar et al., 1965; Santelli desorcin de aniones desde la fase slida hacia
et al., 1995). la resina parece ser distinto dependiendo del tipo
Las concentraciones de fsforo reactivo de resina utilizada.
en los eluatos y P reactivo y total en las Las propiedades intrnsecas de cada tipo de
suspensiones de suelos fueron determinadas resina podran estar detrs de esta variacin de
mediante colorimetra en forma de un pH en las suspensiones resultantes (Tabla 2).
complejo fosfomolbdico cuyo mximo de Los grupos funcionales (amonio cuaternario) de
absorcin se encuentra localizado a una las resinas aninicas fuertes (Dowex y MIA-
longitud de onda de 882 nm. El carbono Ionics) permanecen ionizados en un amplio
orgnico (CO) fue determinado mediante la rango de pH, mientras que, los grupos activos
medida de la prdida de color por un complejo (aminas) de las resinas dbilmente alcalinas
de Mn(III)-pirofosfato reducido por el CO en (Merck) son fuertemente dependientes del pH
presencia de cido sulfrico concentrado del medio ya que su actividad y su capacidad de
(H2SO4) (Bartlett y Ross, 1988). Las cambio inico disminuyen cuando el pH
concentraciones de Al, Fe y Si se determinaron aumenta, inactivndose a valores por encima de
por espectrometra de absorcin atmica 9 (Merck, 1986), lo cual no parece ser nuestro
(Perkin Elmer 3100). caso. Aunque la capacidad de intercambio
podra disminuir en esta resina por efecto del
3. Resultados y discusin pH, la saturacin de las posiciones de cambio
inico no se ha debido producir pues los
3.1. Caracterizacin inicial de los eluatos de contenidos en fosfato y sulfato que han sido
las diferentes resinas empleadas adsorbidos por la resina han sido inferiores a 1
mmolc/g resina; parece que ha ocurrido lo
3.1.1. Variacin del pH en la suspensin mismo tanto para la resina Dowex como para la
sobrenadante de las resinas MIA. A ttulo orientativo, sealar que la
El pH de la suspensin sobrenadante capacidad de intercambio inico para la resina
aument o disminuy respecto al pH del agua Dowex es de 3,3 mmolc/g resina (Serva, 2004),
desionizada empleada (pH6) en funcin del para la MIA es de 8,7 mmolc/g (Ionics, 1987),
tipo de resina utilizada y el tipo de suelo (Tablas mientras que para la Merck es de 5,5 mmolc/g
3, 4 y 5). As en las suspensiones de suelo de (Merck, 1986).
resina Dowex y MIA (ambas alcalinas fuertes), Por ltimo sealar que las MIA recuperadas
el pH disminuy una media de dos unidades de las diferentes suspensiones presentaban un
para la primera y entre dos y tres unidades para color oscuro que permaneca una vez lavadas y
la segunda, mientras que en el caso de la resina eludas con NaCl lo que podra ser indicativo de
Merck (alcalina dbil), el aumento fue de dos
138
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

una posible interaccin entre los coloides del Las cantidades de S extradas parecen no
suelo y las membranas de resina. presentar una tendencia definida en funcin de
los suelos estudiados. El valor mximo fue del
3.1.2. Fsforo y sulfato extrados por las 70% de S total reactivo en los suelos naturales
resinas alofnicos (perfiles LE y BC), mientras que fue

Las Tablas 3, 4 y 5 dan cuenta de las inferior al 40% en el caso de los horizontes A

cantidades de fosfato y S-sulfato extrados por el rganominerales (mnimo LL A). En el caso de

conjunto de las resinas empleadas. En un primer los suelos cultivados, las cantidades extradas

anlisis de los datos, se observa que el reparto de variaron entre un 40 y un 70% en el caso de las

las cantidades totales de P y S extradas (resinas muestras V y entre un 40 y un 90% en el caso

+ soluble en las suspensiones de los suelos) fue de las muestras del sur de Tenerife (S y P).

uniforme entre las dos fases. Esto parece indicar


que tras 16 h de extraccin el sistema trifsico ii.- Resina Merck:

(resina:agua:suelo) ha alcanzado el estado En los suelos sobrefertilizados del sur, el Cl-

estacionario. P vari entre un 30 y un 90% del P total

El P-resina o P-MIA reactivo (Bi-P, para las extrado, mientras que en el caso de las muestras

resinas Merck y Dowex, o Cl-P en el caso de la V est variacin alcanz el 75% del total. En el

MIA) y el S-resina o el S-MIA reactivo (Bi-S o caso de los suelos naturales el Cl-P vari desde

Cl-S siguiendo la misma nomenclatura que para el 30% al 90% del P total extrado: as el perfil

el P) constituyeron algo ms del 50% del P y el LE alcanz el valor ms alto de extraccin con

S desorbido por los suelos durante la extraccin; un 80%, mientras que el valor ms bajo fue el

sin embargo, las cantidades extradas fueron horizonte Bw3 de Bona Camino.

diferentes segn el tipo de resina utilizada: El Cl-S fue el 90% del S extrado en el caso
de LE, mientras que en el resto de suelos

i.- Resina Dowex y MIA: naturales vari desde un 25% (PT Bw) al 60%

Hemos unificado la discusin para ambas (BC Bw3). En las muestras V el Cl-S constituy

resinas pues su comportamiento en el conjunto el 60% del sulfato extrado, mientras que en las

de suelos tendi a ser similar (Tablas 3 y 4) muestras S y P vari entre el 40 y el 60%.

dado su tipo comn (intercambiadoras de


aniones bsica fuerte). Tanto el Bi-P (Dowex) iii.- Comparacin entre resinas:

como el Cl-P (MIA) constituyeron ms del No se encontr ningn tipo de correlacin

90% del P reactivo total extrado en los suelos entre las cantidades de P y S extradas por la

sobrefertilizados del sur (muestras S y P); en resina Merck con respecto a las extradas por la

los suelos cidos fertilizados del norte resina Dowex y la MIA; en lneas generales, se

(muestras V), constituyeron el 65% del total, observa que la primera extrae entre dos y tres

mientras que en los suelos naturales variaron veces ms P que las segundas, excepto en los

desde el 75% (Izaa A) al 22% (LL A).


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suelos GJ A y en S-1 donde ocurre lo regeneracin, al mtodo tradicional de las


contrario, aunque sin duplicar a la Merck. resinas granulares microporosas.
Sin embargo, se observa que para el caso
del sulfato, la resina Dowex y la MIA extraen iv.- P y S en la suspensin sobrenadante:
entre dos y tres veces ms que la resina Merck En todas las suspensiones de resinas
en los suelos cultivados, mientras que en los granulares y MIA, el PRsob (fraccin reactiva)
naturales ocurre lo contrario (excepto muestra ha sido inferior al PTsob (fraccin total)
GJ A). Esto parece indicar que los mecanismos (Tablas 3, 4 y 5). Las cantidades de sulfato que
implicados en la desorcin de P y S parecen permanecen en disolucin (Ssob) siempre
ser diferentes dependiendo del tipo de resinas fueron muy superiores a las de cualquier
empleadas. fraccin de fosfato siguiendo la misma pauta
Por otro lado, las cantidades de P extradas que los eluatos de los diferentes tipos de
por las resinas Dowex y MIA presentan una resinas. En la resina Merck la diferencia fue
correlacin bastante estrecha tanto si: menos acusada en las muestras
sobrefertilizadas S y P.
2
i.- consideramos todos los suelos (R =0,998,
P<0,001): v.- Cationes asociados y contenido en carbono
orgnico:
[Bi - P(MIA)] = 1,05[Bi - P(DOWEX)] + 4,93 En los eluatos de resina granular no se
detectaron, en ningn caso, Al, Si, Fe y CO.
ii.- consideramos los suelos forestales Sin embargo, en la suspensin sobrenadante la
2
(R =0,975, P<0,01): presencia de Al, Si y Fe elementos fue muy
importante (Tabla 6). El contenido en Al, Si y

[Bi - P(MIA)] = 1,11[Bi - P(DOWEX)] + 2,11 Fe fue mayor en las suspensiones de la resina
Merck que en las de la resina Dowex lo cual
parece indicar que la primera resina ha actuado
iii.- solo consideramos las muestras cultivadas
como un agente dispersante de los coloides del
(R2=0,998; P<0,001):
suelo ms eficaz que la resina Dowex; esta
afirmacin se ve confirmada por el contenido
[Bi - P(MIA)] = 1,04[Bi - P(DOWEX)] + 8,01 en CO de estas suspensiones (Tablas 3 y 5) que
duplican e incluso triplican el valor obtenido
Esto pone de manifiesto que los en los sobrenadantes de la resina Dowex. En el
mecanismos implicados en la desorcin suelo alofnico (LE), no se detectaron
parecen ser similares. Desde el punto de vista cantidades apreciables de Al, mientras que el
prctico, esto viene a indicar que la extraccin contenido en Fe fue relativamente bajo, aunque
de P y S con membranas de resina puede no as el de Si.
sustituir, por operatividad y facilidad de
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En los sobrenadantes de MIA (Tabla 6) se despus de muchas horas de agitacin (<80h),


detectaron niveles elevados de Si, aunque la concentracin de P en disolucin llega a ser
siempre inferiores a 10 mg/l que se considera baja. Por otro lado, si suponemos que la resina
como lmite a partir del cual este elemento es capaz de absorber todo el ortofosfato libre,
interfiere en la determinacin analtica del P podemos suponer, en una primera
3
(American Public Health Association et al.., aproximacin, que el fsforo que queda en la
1995). En los sobrenadantes correspondientes, suspensin del suelo despus del tratamiento
la tendencia fue similar a la observada para la con las resinas es orgnico u rganomineral
resina Dowex. soluble en medio acuoso y de difcil acceso
para las resinas microporosas empleadas.
vi.-Anlisis de los resultados: En el caso del S, el anin SO42- parece
Tradicionalmente, se ha considerado por estar ms dbilmente ligado a los coloides del
parte de diversos autores que la resina suelo de lo que puede estarlo el fosfato; esto
intercambiadora de aniones acta como un explicara la diferencia entre ambos en las
sumidero o sink infinito para los iones que se resinas. De todas maneras, siguiendo la misma
desorben del suelo lo cual impide que la pauta del fosfato, el S que queda en suspensin
concentracin de los mismos permanezca alta debera ser tambin de naturaleza orgnica u
en disolucin (Amer et al., 1955; Sibbesen, rganomineral. Esto parece indicar que en una
1978; Somasiri et al., 1991). Sin embargo, a la primera etapa, la resina acta como un
vista de los resultados, en los Andosoles y el sumidero rpido para las formas dbilmente
resto de suelos de carga variable, la resina ligadas al complejo de cambio, produciendo un
parece constituir un falso sumidero debido al aumento en la velocidad de desorcin de P y S
equilibrio que se establece en el sistema resina: desde el suelo, debido a la adsorcin especfica
agua:suelo. Barrow y Shaw (1977) indican que de iones HCO3- sobre la superficie de cambio
la resina no constituye un potente absorbente de los coloides (Sibbesen, 1978), lo que
para el P pues las cantidades extradas tienden provocara la sustitucin de los iones H2PO4- y
a variar en funcin de la masa de resina SO42- por el HCO3- en el caso de las resinas
empleada, el volumen de agua y el tiempo de Dowex y Merck (etapa I):
extraccin. En opinin de estos autores, slo
O-PO3H2 O-CO2H
O-PO3H2 + HCO3-R+ 2H2PO4-R+ + O-CO2H
3 O-PO3H2 O-CO2H
En los sobrenadantes correspondientes a la resina
Merck los valores de Si superaron este lmite. La
interferencia analtica en la determinacin
colorimtrica del P pensamos que no es dramtica
en este caso ya que segn la edicin online del
Standard Methods (2005) y en trminos de P, 100 para el caso de la MIA, la adsorcin en los
mg l-1 de Si (10 veces superior al valor considerado coloides del Cl- no es del todo claro.
como lmite) aumenta en una media de 0,025 mg l-1
de P las cantidades obtenidas del macronutriente. Sin embargo, en suelos de carga variable
Nuestros datos de Si en disolucin son inferiores a
esta concentracin de referencia. tanto el fosfato como el sulfato se encuentran
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

fuertemente retenidos por los compuestos y por tanto la etapa (I) dejara de ser la
activos de Fe y Al. La simple competencia controlante del proceso, aumentando la
entre el in HCO3- o el in Cl- y los iones adsorcin al disminuir el pH. En cualquier caso
- 2-
H2PO4 y SO4 por estos compuestos activos y debido a este aumento de la acidez, la
no parece explicar por si solo las cantidades solubilizacin de los minerales tipo variscita y
liberadas de ambos iones. La presencia de CO, alunita se vera mucho ms restringida y por
Al y Fe, as como los cambios de pH en las tanto estas especies no contribuiran de forma
suspensiones de los suelos parecen sugerir significativa a los contenidos de P y S
otros mecanismos, a parte del reseado, que desorbidos. Sin embargo los contenidos en CO,
explique esta desorcin. Al y Fe parece sugerir la existencia de
En el caso de la resina Dowex y la MIA compuestos orgnicos de P (o S) o bien
(fuertemente bsicas) podra ocurrir la etapa (I) complejos ternarios del tipo: humus-Al(Fe)-P(S)
en una primera fase. Sin embargo, Taylor y que liberaran P (o S) a pH cercanos a 4 (Gerke,
Ellis (1978), sugieren una desprotonacin de la 1992):
2-
especie H2PO4 , previa a la adsorcin por la
resina: O O

C O C O
+ H
Al O PO3H2 + 2H3O Al3+ + H2PO4- +

C O
H2PO4- HPO42- + H+ O
C O
H
O

la hidrlisis del H2PO42-, permitira explicar la posteriormente los iones H2PO4- liberados se
disminucin de dos unidades de pH en las hidrolizaran con lo que se mantendra el pH
suspensiones de equilibrio. Para el S las etapas relativamente bajo para que la hidrlisis
seran similares: contine. El sulfato podra sufrir una reaccin de
o- SO 3H O-CO 2H
o- SO 3H + HCO3-R+ 2H2PO4-R+ + O-CO 2H hidrlisis similar al fosfato (Marcano-Martnez y
o- SO 3H O-CO 2H
McBride, 1989).
En el caso de la resina Merck, el
HSO4- SO42- + H+
intercambio entre los iones fosfato y sulfato
provenientes de la etapa (I) hacia la resina podra
En el caso de las suspensiones de la resina
ocurrir mediante el siguiente mecanismo:
Dowex, al disminuir el pH, el HCO3- que sale de
la resina y entra en contacto con la disolucin
a) Etapa (I):
sufrira un proceso de hidrlisis: O-PO3H2 O-CO2H
O-PO3H2 + HCO3-R+ 2H2PO4-R+ + O-CO2H
O-PO3H2 O-CO2H
HCO3- + H+ H2CO3*

b) Hidrlisis de la especie H2PO4-:

150
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H2PO4- + H2O H3PO4 + OH- jugando un papel preponderante en la dinmica


de la disolucin del suelo en relacin con ambos
lo cual explicara el aumento del pH en los elementos y, por ende, en su disponibilidad.
sobrenadantes. Por otro lado, aunque los mecanismos aqu
reseados pudieran explicar los resultados
c) Difusin hacia la resina: obtenidos, el color que presentaron las MIA
despus de los sucesivos lavados y la
+
R-N(R)2 + H3PO4 R-(R)2NH - regeneracin de las membranas con NaCl 1M
H2PO4- nos hizo sospechar de la presencia de coloides
orgnicos e inorgnicos en las mismas. Es por
Al aumentar el pH, podran disolverse ello que nuestro inters, a partir de este punto,
fosfatos y sulfatos de Al y Fe tipo variscita o consisti en estudiar diferentes variables que
Alunita. Para el primero: pudieran influir sobre la extraccin de P, y
posiblemente por extensin sobre el S, por la
Al(OH)2PO4H2 + OH- H2PO4- + Al3+ MIA por ser este un mtodo, desde el punto de
+ 2H2O vista operacional, mucho ms sencillo que las
clsicas resinas intercambidoras de aniones.
y se hidrolizaran los posibles complejos
ternarios existentes (Gerke, 1992): 3.2. Extraccin secuencial del P en suelos
de un ensayo biolgico por
O O

C O C (-) membranas de intercambio aninico


- - - O
Al O PO3H2 + 4OH Al(OH)4 + H2PO4 +

C O C
(-)
O
O O En la Tabla 7 se muestran los elementos y
las fracciones de P detectadas en los eluatos de
Nuestros resultados parecen apuntar que la Cl- y Bi- procedentes de la MIA en los dos
dinmica fsico-qumica de las especies que suelos fertilizados estudiados. En los eluatos
contienen sulfato y fosfato en Andosoles y otros de Cl-MIA solo se detect P, Fe y Si. Las
suelos con caractersticas ndicas parecen ser Tablas 8 y 9 muestran las concentraciones para
similares. La competencia que parece los dos suelos estudiados. El fsforo
establecerse entre ambos aniones por la resina, recuperado en cada tratamiento por la MIA en
los cambios de acidez en las suspensiones las diferentes fracciones de P se muestra en la
resultantes y los contenidos de ambos elementos, Fig. 1 para el suelo fertilizado La Esperanza.
as como de otros elementos asociados, Al y Fe, Las fracciones de fsforo encontradas en este
cuya solubilidad puede deberse, en parte, a suelo presentaron una elevada correlacin (Fig.
compuestos orgnicos u rgano minerales 2). Por otra parte, el Al, Fe, CO y las
solubles presentes en los sobrenadantes de
resina. La materia orgnica soluble parece estar
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Figura 1. Influencia de los tratamientos de P sobre las fracciones de P obtenidas en los


eluatos. Las barras de error constituyen el error estndar de la media (Pinorg-Bix10 = Bi-Pc).

60

50

40
P mg kg-1

Pr-Cl
30 Pr-Bi
Pinorg-Bix10
20

10

0
0 1 2 3 4 5 6
tratamiento

Figura 2. Relaciones entre las fracciones de P en los eluatos del suelo La Esperanza A
(mediasSD).

50

45

40
Cl-P y Bi-P , mg kg-1

35

30
Bi-P
25
Cl-P
20

15

10

0
0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8
-1
Pc (eluato-Bi) mg kg

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Figura 3. Relaciones entre CO, Al y Fe en los eluatos de bicarbonato del suelo La Esperanza
A (mediaSD).

120

100
CO, Al, Fe mg kg-1

80

OC
60 Al
Bi-Fe

40

20

0
0 5 10 15 20 25 30
Bi-P , mg kg-1

Figura 4. Rendimiento del cultivo frente al P en los eluatos de cloruro para el suelo La
Esperanza A.

7
P planta, g materia seca maceta-1

0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50
-1
Cl-P, mg kg

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fracciones de P en este suelo tambin estaban perfil La Esperanza en el captulo dedicado al


correlacionadas (Fig. 3). mtodo Olsen. La reaccin de los complejos de
La fraccin Cl-P tambin estuvo P con unidades de alofanas o sus productos de
correlacionada con el rendimiento del cultivo despolimerizacin (hidroxialuminatos) tambin
de maz obtenido al finalizar el ensayo (Fig. 4). podra ser consistente con la composicin de
Es importante hacer hincapi que para el ms los compuestos absorbidos por la membrana.
elevado de los tratamientos (E-250), el P sigui El efecto de la fuerza inica y el pH de los
siendo factor limitante para el crecimiento de eluyentes podran haber inducido la hidrlisis y
la planta en ambos suelos. Esto no es la solubilizacin de los complejos adsorbidos
sorprendente ya que los Andosoles pueden por la MIA, aunque se necesitara tener ms
responder ante P aadido hasta niveles informacin para discutir los mecanismos
-1
superiores a 1000 mg kg (Parfitt, 1989). Por implicados.
otro lado, el P inorgnico extrado por la MIA A pesar de que el uso de la MIA para
(Bi-Pc) fue consistente con la baja intensidad estudios del P en este tipo de suelos parece
de P y la respuesta a la planta al tener algunas limitaciones, este mtodo podra
macronutriente. ayudar a comprender su dinmica en estos
La buena reproducibilidad observada para sistemas de Al(Fe) altamente reactivos.
cada tanda de cuatro rplicas, junto con las
correlaciones observadas entre las fracciones 3.3. Variacin del P extrado con el
de P y Al(Fe) y CO, sugiere que la adherencia nmero de MIA empleadas y con la
de las partculas del suelo a las MIA podra no relacin w:s
considerarse como una contaminacin en el
sentido de una adherencia aleatoria. Por tanto, La variacin del nmero de membranas de
el mecanismo de desorcin de fosfato resina en el sistema provoc un aumento en las
implicado para la extraccin de P por la MIA cantidades de P extradas en los suelos
para este tipo de suelos, puede que no se estudiados (Tabla 10), aunque en ningn caso
explique simplemente a travs de una reaccin estas cantidades superaron la capacidad de
de intercambio aninico. absorcin de una de las MIA para el fosfato.
El fsforo ha debido ser absorbido por la La misma tendencia fue observada cuando se
membrana en forma de complejos del tipo aument la relacin w:s empleando una sola
humus-Al(Fe)-P (donde P = P inorgnico u MIA (Tabla 11). Por otro lado, no pareci
orgnico) que podra haber sido formado por la existir diferencias importantes entre el P
reaccin del P inorgnico aadido al suelo con reactivo disuelto (PR) (Tabla 12) y el P en la
compuestos comunes presentes en los Andosoles MIA extrable con NaCl (Cl-P) para w:s = 30 l
como los del tipo humus-Al(Fe)-OH [a humus- kg-1 (Tabla 11). La diferencia entre ambos
Al(Fe)-P]. Estos complejos los hemos sugerido parmetros increment con la dilucin (Tablas
como presentes en la disolucin del suelo para el
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Tabla 12. Fsforo reactivo (PR) en funcin de la relacin w:s (sin MIA) en los suelos del
experimento (2) (mediaESM).
PR (mg kg-1) (Cl-P+Bi-P) en MIA (mg kg-1)
w:s (l kg-1) 30 75 150 30 75 150
Suelo
LL A 6,10,8 16,91,1 39,52,7 15,7 56,5 116
LE A 7,90,7 23,11,8 44,23,8 12,3 36,7 115
LE Bw/C 15,11,0 43,72,7 81,37,4 17,1 63,1 161
LE-0 6,00,7 19,31,4 37,93,0 12,0 52,3 95,2
LE-50 19,11,4 57,83,4 10910 36,3 88,0 191
LE-100 28,72,0 70,65,8 13912 41,3 128 179
LE-200 42,72,9 1048,7 20219 106 172 262
K-0 10,61,1 30,72,2 61,55,2 28,4 86,7 140
K-50 20,21,9 50,13,7 97,88,1 44,1 113 176
K-100 41,62,5 10911 20218 71,7 192 314
K-200 56,44,3 12911 25022 139 276 455

11 y 12) a favor de Cl-P. Si, por otra parte, verifique si el poder dispersivo de las
consideramos la suma total de P extrable por membranas aumenta al incrementar
la MIA (Cl-P+Bi-P) observamos como la significativamente el nmero de ellas en los
diferencia entre PR y (Cl-P+Bi-P)-MIA es tipos de suelos aqu estudiados.
considerable (Tabla 12). Este efecto lo hemos Por otro lado, el aumento de las
asociado al poder dispersivo del agua al cantidades de P encontradas debido a las
incrementar la relacin w:s sumado al propio variaciones experimentales bajo las cuales se
efecto que ejerce la membrana de resina sobre realiz la extraccin, tambin fue observado
el suelo. en el caso de las suspensiones sobrenadantes
El fenmeno de dispersin se pone en (Tablas 13 y 14). Las cantidades totales de P
evidencia cuando observamos un incremento extradas del suelo (P) superan con creces los
relativo en el error estndar de la media al valores de P obtenidos por otros mtodos como
comparar el efecto del nmero de MIA frente a el Olsen y el acuoso, analizados en captulos
la relacin w:s en la extraccin del P por el precedentes. Esto parece indicar que la desorcin
NaCl; el error tiende a ser mayor (y por tanto de la matriz del suelo, inducida por la dispersin
la variabilidad de los datos) por efecto de la del sistema, parece constituirse en el principal
relacin w:s que por efecto del nmero de mecanismo de actuacin de la membrana.
MIA. De todas maneras, sera necesario Tanto con el aumento del nmero de MIA
realizar un estudio complementario que como con la relacin w:s, el incremento del P

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extrado estuvo acompaado por un aumento complejos Al-humus tienen en estos


concomitante de las cantidades de CO, Al, Si mecanismos (Parfitt, 1989).
y Fe extrables de las MIA por el NaHCO3, Nuestros resultados vuelven a poner de
pues en los eluatos de NaCl solo se detect P, manifiesto que el P debera estar absorbido en
Fe y Si (Tablas 10 y 11); el Fe se detect en la MIA en forma de partculas Al(Fe)-CO
los suelos forestales a partir del uso de tres asociadas a complejos ternarios del tipo P-
MIA. Este resultado, similar al epgrafe Al(Fe)-humus, sin descartar otro tipo de
anterior, podra justificarse si consideramos el asociaciones como el humus-P y P orgnico.
efecto que la fuerza inica, aportada por la En el caso de los suelos fertilizados, al
disolucin salina, ejerce sobre las formas en presentar la misma tendencia que los
que estos elementos se encuentran en las naturales, parece confirmar que el P
membranas provocando la reorganizacin de inorgnico aadido desplaza al orgnico y
las especies presentes. As, por ejemplo, es rganomineral nativo de las superficies de
bien conocido el efecto que la fuerza inica sorcin de la fase slida quedando este
del medio ejerce sobre las transiciones ltimo, desde el punto de vista fsico-
conformacionales de la materia orgnica que qumico, dbilmente ligado a la matriz del
parece estar relacionadas con el aumento de suelo lo que hara que este P estuviese mucho
la solubilidad de esta cuando la fuerza inica ms disponible para los agentes extractantes.
del medio disminuye (Evans, 1985). Por otra parte, Nanzyo et al. (1992) han
Considerando este hecho, el contenido de P puesto de manifiesto que la dispersin de las
en los eluatos de bicarbonato debera arcillas alofnicas por aplicacin de
proceder de aquellos iones fosfatos liberados fertilizantes fosfatados sugiere que el
de la matriz orgnica u rganomineral desarrollo de cargas positivas en suelos
presentes en las MIA tal y como hemos volcnicos ricos en alofanas se encuentre
expresado en el epgrafe anterior. El anlisis bloqueado por la fertilizacin dada la sorcin
de los datos procedentes de los eluatos de del fosfato en los sitios de carga positiva. El
NaHCO3 con carbn activo parece confirmar efecto de la dispersin de las arcillas podra
la idea anterior pues no se detectaron en ellos explicar los mayores contenidos en Si
cantidades algunas de P, CO, Al y Fe. Esto obtenidos en las muestras fertilizadas LE
parece indicar una ntima relacin entre estos respecto a la homloga forestal LE A.
componentes, asociados estos ltimos a las Las relaciones molares P/CO, P/Al, P/Fe
superficies activas de los suelos de naturaleza y P/Si en funcin del nmero de membranas
volcnica. Los modelos que intentan explicar y de la relacin w:s se presentan en las Tablas
las reacciones del fosfato en los suelos 15 y 16 respectivamente. En el primer caso,
indican la importancia que los adsorbentes se observa como las relaciones P/CO, P/Al y
reactivos como la alofana, la ferrihidrita y los P/Fe disminuyen en todos los suelos excepto
en el caso del suelo fertilizado LE que
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Tabla 15. Relaciones molares (mol mol-1) entre el P y el CO, Al, Fe y Si extrados (Cl-+Bi-)
por las membranas en funcin del nmero de MIA empleadas.
P/CO P/Al P/Fe P/Si
Suelos MIA 1 3 5 1 3 5 1 3 5 1 3 5
LL A 0,27 0,24 0,21 0,68 0,61 0,52 3,81 3,12 2,72 0,043 0,055 0,059
LE A 0,62 0,55 0,45 0,78 0,73 0,68 7,66 5,01 3,41 0,023 0,038 0,047
LE Bw/C 1,20 1,01 0,71 1,10 1,01 0,89 6,72 4,38 3,77 0,068 0,074 0,083
LE-0 0,46 0,50 0,55 0,71 0,92 1,33 1,14 1,92 2,46 0,016 0,032 0,062
LE-50 0,40 0,42 0,46 1,08 1,30 1,38 1,67 1,83 1,91 0,035 0,057 0,079
LE-100 0,27 0,31 0,35 1,15 1,24 1,32 1,89 2,18 2,29 0,055 0,086 0,121
LE-200 0,25 0,27 0,34 1,43 1,58 1,68 2,38 2,65 2,96 0,086 0,129 0,171
K-0 0,37 0,30 0,25 1,07 1,01 0,86 2,90 2,03 1,76 0,060 0,063 0,066
K-50 0,31 0,25 0,20 1,17 1,11 1,03 2,43 1,83 1,74 0,070 0,079 0,085
K-100 0,21 0,17 0,14 0,64 0,51 0,47 1,23 0,83 0,76 0,073 0,083 0,088
K-200 0,18 0,16 0,12 0,66 0,51 0,46 1,32 0,99 0,95 0,078 0,088 0,094

Tabla 16. Relaciones molares (mol mol-1) entre el P y el CO, Al, Fe y Si extrados (Cl-+Bi-)
por las membranas en funcin de la relacin w:s (l kg-1).
P/CO P/Al P/Fe P/Si
Suelos W:s 30 75 150 30 75 150 30 75 150 30 75 150
LL A 0,27 0,24 0,23 0,61 0,98 1,19 3,81 3,51 3,48 0,043 0,070 0,101
LE A 0,62 0,47 0,49 0,68 0,85 1,42 7,66 3,78 2,72 0,023 0,044 0,088
LE Bw/C 1,20 0,62 0,58 1,01 1,71 1,83 6,72 4,72 3,46 0,074 0,093 0,151
LE-0 0,46 0,43 0,40 0,71 1,03 1,14 1,14 2,00 2,11 0,016 0,037 0,058
LE-50 0,52 0,44 0,39 1,08 1,64 1,71 1,67 2,34 2,49 0,035 0,079 0,095
LE-100 0,27 0,25 0,22 1,25 1,35 1,63 1,89 1,99 2,32 0,055 0,077 0,089
LE-200 0,40 0,30 0,25 1,43 1,58 1,76 2,38 2,59 2,93 0,086 0,120 0,126
K-0 0,37 0,34 0,30 1,07 1,10 1,27 2,90 2,24 1,94 0,028 0,042 0,052
K-50 0,31 0,26 0,22 1,17 1,19 1,32 2,43 2,17 2,05 0,039 0,048 0,062
K-100 0,25 0,22 0,20 1,46 1,57 1,86 2,91 2,81 2,41 0,066 0,070 0,091
K-200 0,28 0,25 0,22 1,62 1,81 1,87 3,23 3,12 2,67 0,084 0,089 0,106

167
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

ocurre lo contrario. La disminucin de las relativamente baja podran contribuir


diferentes relaciones podra indicar un decisivamente a los contenidos de P
aumento de las formas coloidales de Al y Fe encontrados en las membranas.
extrables por las membranas en estos suelos, De todas maneras, los resultados parecen
aunque para el caso de la muestra fertilizada estar directamente relacionados con el
E este comportamiento podra estar asociado aumento de las cantidades de Si encontradas
a la aportacin de formas de P, asociadas al tanto en los eluatos como en los
Al y Fe, resistentes a los procesos de sobrenadantes a medida que vara el nmero
solubilidad-desorcin asociados a la de MIA o la relacin w:s; esto indica un
extraccin por la MIA y cuyos equilibrios aumento del grado de dispersin en el
podran verse modificados por el incremento sistema. Este efecto dispersivo podra no solo
en el nmero de membranas; sin embargo, explicar la liberacin de P: el aumento del
cuando comparamos la muestra E-0 con su CO, Al y Fe extrados podra ser
equivalente forestal (LE A) observamos un consecuencia de este fenmeno el cual
comportamiento antagnico entre ambas que tambin estara vinculado al incremento
puede sealar una sensibilidad de los observado tanto en el P sobrenadante como
Andosoles hacia los procesos bajos los cuales en el resto de elementos estudiados (Tablas
se realiza la fertilizacin del suelo que 13 y 14). La dispersin favorecera la
conllevara la modificacin de los procesos liberacin de formas orgnicas complejas de
fsico-qumicos que controlan la liberacin P, no extrables desde las suspensiones por
del P del suelo. las membranas, posiblemente del tipo AH-P o
Con respecto a las relaciones w:s, los bien estructuras orgnicas de P de elevada
resultados de las relaciones molares indican masa molecular; esto estara avalado por el
que P/CO y P/Fe disminuyen con la dilucin, aumento del CO en los sobrenadantes. Por
aumentando las relaciones P/Al, P/Fe de la otro lado, los contenidos en Al y Fe en las
muestra E fertilizada y P/Si (Tabla 16). Esto suspensiones fueron inferiores a los
parece poner de manifiesto que a medida que encontrados en los eluatos de las MIA lo que
aumenta la dilucin, el control del aporte de P nos permitira reafirmar la idea expresada
a la fase acuosa podra provenir tanto por la anteriormente de que las formas
solubilidad de minerales alumnicos del tipo rganominerales de Al y Fe fueron
variscita como por la aportacin de complejos mayoritariamente extradas por las
Al(Fe)-humus, fundamentalmente de membranas y que los posibles complejos
naturaleza flvica, asociados al P tal como ternarios de humus-Al(Fe)-P estaran
qued de manifiesto en el captulo dedicado a asociados a la fraccin flvica de la materia
la extraccin de P con agua. Tanto la orgnica del suelo, quedando las formas ms
fraccin mineral como estos complejos complejas relacionadas con los cidos
ternarios con una masa molecular hmicos en el sobrenadante.
168
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Sin embargo, tampoco son descartables 3.4.1. Consideraciones iniciales


los cambios de conformacin que la materia
orgnica soluble pueda sufrir durante el Las cantidades de P, Al, Fe, S, Si y CO
proceso de extraccin con el aumento en el acumuladas despus de 96 h de extraccin
nmero de MIA o por disminucin de la secuencial se detallan en la Tabla 17. En la
fuerza inica del medio al aumentar w:s; este Tabla 18 se recogen los datos de la fraccin
hecho podra provocar la ruptura de la matriz superior a 10000 Da. Para el primer caso se
orgnica asociada a los agregados del suelo observa como las cantidades extradas de
que inducira a la liberacin concomitante de estos elementos son importantes, variando de
formas de P y de CO de masa molecular la misma manera, independientemente de que
menor asociadas al Al y Fe y potencialmente se trate de la fraccin total del suelo o de la
extrables por las MIA. Esta liberacin podra fraccin arcilla, en cualquiera de sus variantes
ser tanto mayor, cuanto mayor fuese la de centrifugacin, e incluso en la fraccin
dispersin del sistema. inferior a 0,1m de las Lajas A. Las
Estos resultados ponen de manifiesto la cantidades de estos mismos elementos que
sensibilidad de estos suelos a las condiciones persisten en suspensin una vez finalizado el
bajo las cuales se realiza el proceso de proceso y de tamao superior a 10000 Da
extraccin y que parece condicionar los tambin son importantes. Todo esto parece
valores de P disponible obtenidos que sirven sugerir una transferencia desde la fase slida
de referencia en la recomendacin de de material a medida que se sustituye la
enmiendas fosfricas para Andosoles y suelos membrana de resina que parece provocar
con caractersticas ndicas. Nuestros perturbaciones en el equilibrio fsico-qumico
resultados indican que el mtodo secuencial del sistema que respondera mediante la
de caracterizacin de las formas qumicas del liberacin de ms material desde la fase
P extrables de Hedley et al. (1982) no parece slida para alcanzar nuevamente el estado de
ser el ms adecuado para nuestros suelos equilibrio. Tngase en cuenta que en los
dadas las diferentes asociaciones encontradas experimentos de dilisis los volmenes de las
solo con el empleo de MIA que, en principio, disoluciones en el interior y el exterior del
no corresponderan a las formas lbiles de P saco de dilisis est prefijada de antemano
que prev la definicin que para esta fraccin (finito y en agitacin) por lo que la
dan estos autores en su estudio metodolgico. transferencia desde la disolucin del suelo
solo depende del tamao de poro de la
3.4. Extraccin secuencial de P y otros membrana de dilisis y del gradiente de
elementos por MIA a travs de concentraciones (flujo de materia) que se
membranas de dilisis establece dado el menor potencial qumico
existente en el interior de la membrana.

169
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

170
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Tabla 18. Cantidades de P, carbono orgnico disuelto (CO), Al, Fe, Si y S en la disolucin del
suelo resultante despus de 96 h de extraccin secuencial (media de dos observaciones) (mg kg-1
de suelo).

Suelo (Tratamiento) P CO Al Fe Si S
BC Bw 9,7 233 72,3 30,4 1123 65,2
LE A 19,8 170 44,7 24,3 989 89,9
LE A (Arc 1 ext) 12,6 120 41,5 21,6 455 79,7
LE A (Arc 2 ext) 10,2 107 37,8 20,6 416 70,1
LE A (30000g) 9,9 28,7 27,7 17,9 346 44,5
LE A (50000g 4C) 6,2 24,2 19,6 15,6 301 33,1
LE-50 40,1 198 43,1 37,2 1002 99,7
LE-50 (30000g) 15,6 30,2 22,9 21,3 334 62,5
LE-50 (50000g 4C) 11,0 21,7 16,2 18,5 287 54,3
LE-200 52,3 277 58,7 51,3 1435 133
LE-200 (30000g) 21,1 44,3 44,5 31,6 422 79,7
LE-200 (50000g 4C) 14,9 33,0 32,7 22,5 379 58,3
LE Bw 11,0 177 39,8 35,5 1776 88,4
LE Bw (30000g) 5,1 33,5 30,7 17,9 189 59,6
LE Bw (50000g 4C) 5,0 27,1 22,4 14,3 158 50,2
LL A 60,1 335 66,3 52,3 1078 65,8
LL A (30000g) 7,2 44,7 23,4 27,3 154 60,2
LL A (50000g 4C) 5,1 36,6 14,1 19,2 119 57,6
LL A (< 0,1 m) 5,0 30,2 13,4 15,8 85 33,7

3.4.2. Ecuaciones cinticas empleadas en satisface la siguiente ecuacin de


el estudio de la desorcin de nutrientes continuidad:

1) Sistemas suelo-resina-disolucin C
= J = divJ (1)
t

La cantidad de un nutriente que se


donde J es el flujo del nutriente en cuestin
desorbe del suelo y que es transportado desde
(mol m-2 s-1). Debido al efecto de la absorcin
la disolucin del suelo a una resina que acta
del nutriente por la resina se establece un
como absorbente y que se encuentra a una
gradiente negativo de concentracin con la
distancia dada durante un tiempo prefijado,
distancia desde el absorbente ( C ). Si

171
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

suponemos que el nutriente es movilizado a la donde kd es la constante aparente de


resina mediante difusin, los parmetros velocidad de difusin, Q es la cantidad de
asociados al proceso difusivo vendran nutriente absorbido por la resina en un tiempo
determinados por la primera ley de Fick: t y Q constituye la absorcin cuando el
sistema alcanza el equilibrio. En el caso del
J = D C = DgradC (2) P, la bibliografa indica que para la absorcin
del macronutriente por las resinas de

donde D es el coeficiente de difusin (m2 s-1). intercambio inico que obedece la ec. (4) no

Si consideramos que el transporte se realiza se excluye la reaccin de intercambio

de forma unidireccional, las ecuaciones (1) y aninico como etapa limitante del proceso

(2) se trasforman en: pues sigue una expresin equivalente


derivada de la ley de accin de masas

C J (Agbenin y van Raij, 2001).


= Por otra parte, Boyd el al. (1947) y
t x
(3) Helfferich (1962) desarrollaron las
C ecuaciones cinticas correspondientes a las
J = D
x etapas limitantes del proceso difusivo:

Para sistemas suelo-resina-disolucin, la a) Difusin pelicular:


absorcin desde el suelo de un nutriente como
el P por resinas de intercambio inico se Qt
ln(1 Q ) = kt (5)
encuentra limitado por la difusin o por las
reacciones de intercambio. Para Boyd el al. expresin similar para el caso de que la
(1947) y Helfferich (1962) las etapas reaccin de intercambio tambin fuese etapa
limitantes del proceso seran la difusin de que controlase el proceso.
los nutrientes a travs de la pelcula lquida
interfacial entre los dos intercambiadores b) Difusin particular (6):
(difusin pelicular) o la difusin a travs del
6 n=
[ ]
interior de las partculas de resina (difusin Qt
= 1 2 (1 / n2) exp( D 2 n2 t r 2)
particular). Si estos procesos controlan la Q n =1
velocidad de transferencia, esta se puede
describir mediante la expresin descrita por donde Qt es la cantidad de nutriente absorbido
Agbenin y van Raij (1999), desarrollada por la resina (mol m-2) para un tiempo t, Q
inicialmente por Boyd et al. (1947): es la cantidad de en el equilibrio (estado
estacionario), n es un nmero natural que
dQ dt = kd (Q Q) (4) vara desde 0 a , r es el radio de las
partculas de resina y k es una constante
172
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Qt
cintica. Si representamos ln(1 Q ) vs.
Existen muchas ecuaciones que han
t y obtenemos una lnea recta, la velocidad de permitido estudiar durante dcadas la cintica
absorcin desde la disolucin del suelo de los fenmenos qumicos del suelo (Sparks,
estara controlada por la difusin pelicular o 1989; Sparks, 2000). Un importante nmero
por la velocidad actual de intercambio inico. de ellas han permitido evaluar la dependencia
Si la velocidad de acumulacin estuviese con el tiempo de los fenmenos estudiados
controlada por la difusin particular, la empleando para ello los coeficientes de
2
grfica Qt/Q vs. Bt (donde B= D r ) se 2
correlacin y los errores estndar como
ajustara a una curva exponencial que, para ndices de evaluacin de los datos
un valor de r conocido, podramos obtener un experimentales. En este anlisis citaremos
valor medio para D. Sin embargo, se hace cinco (Galadina y Silvertooth, 1998; Chiou y
necesaria la bsqueda de una solucin Li, 2002):
numrica para esta expresin debido a las
series infinitas que origina (Agbenin y van a) Ecuacin modificada de Freundlich:
Raij, 2001); para partculas esfricas la
solucin numrica de la ec. (6) obliga a que el ln(Qt ) = ln(a ) + b ln( t ) (8)
valor de Bt se determine por interpolacin donde Qt es la cantidad de nutriente liberado,
para cada valor experimental de Qt/Q. a y b son constantes siendo esta ltima
Bajo nuestras condiciones experimentales positiva y menor que 1, y t es el tiempo. Esta
que no obedecen exactamente a un modelo en ecuacin se considera emprica, excepto para
el que el flujo de materia tienda a converger el caso en que b = 0,5 en la que se hace
hacia el interior de una esfera, tal y como se indistinguible de la ecuacin parablica de
deriva de la ec. (6) (ms se aproxima a un difusin.
flujo paralelo de materia que desde el suelo es
transportado hacia la membrana de dilisis), b) Ecuacin de Elovich:
el tiempo de reaccin no es elevado (t < 150
h) razn por la cual podemos utilizar una Qt = a + b ln( t ) (9)
aproximacin parablica a la solucin de la
ley de Fick (Aharoni y Sparks, 1991; Aharoni donde a y b son constantes. La ecuacin de
et al., 1991; Agbenin y van Raij, 2001): Elovich tambin es considerada como una
expresin emprica. De acuerdo con Havlin y
1/ 2
Qt Q = kdt (7) Westfall (1985) esta formulacin de la
ecuacin de Elovich es correcta para describir
2) Expresiones empleadas para cinticas de tiempos de reaccin acumulativos inferiores a
desorcin de nutrientes: 1000 h; para tiempos superiores se debe

173
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

aadir al trmino neperiano la constante t0 En la experiencia que aqu se muestra, la


(Aharoni et al., 1991). desorcin de los diferentes elementos
estudiados tanto desde la fraccin suelo total
c) Ecuacin parablica de difusin: como desde la fraccin arcilla hacia la
disolucin del suelo y que luego son

Qt = a + bt
1/ 2
(10) transferidos desde esta al interior de la
membrana de dilisis (10000 Da) vendr dada
por el menor potencial qumico existente en
d) Ecuacin cintica lineal de primer orden:
el interior de la bolsa de dilisis (reparto por
ln(1 Qt Q ) = k1t (11)
tamao de partculas) que origina un
gradiente negativo de concentraciones desde
donde Q es la cantidad de nutriente que se
el exterior. La MIA actuara como un
desorbe cuando el sistema alcanza el
absorbente rpido, reforzando el gradiente de
equilibrio y k1 es la constante de velocidad de
concentraciones que, por difusin a travs del
la ecuacin de primer orden. Esta expresin
saco de dilisis, se establece entre la MIA, el
es similar a la ec. (5) para la difusin
suelo y la disolucin que provocara la
pelicular.
inmovilizacin permanente en la MIA de las
especies lbiles; para ello, partimos de la
e) Ecuacin cintica de segundo orden:
hiptesis de que la concentracin en el
Sigue el mismo principio que el modelo
interior del saco de dilisis de aquellos
de primer orden:
elementos afines a la MIA debe ser nulo al
Q 1
Q ( 1) = (12) alcanzar el sistema el estado estacionario.
Q k2t
Cada cambio de MIA tendra como propsito
romper el equilibrio que se alcanzara en
El ajuste de cada una de estas ecuaciones
condiciones normales entre el interior y el
con la dependencia temporal de la liberacin
exterior del saco de dilisis, pues el elevado
del nutriente o elemento desde el suelo es
tamao de poro empleado favorece el que el
evaluado a travs de los coeficientes de
sistema alcance rpidamente el estado
determinacin (R2) y el error estndar de
estacionario (Kokubo y Sakai, 1998). Este
estimacin (ES): el mejor ajuste
sistema experimental simulara a un reactor
corresponder al valor ms elevado de R2 con
de membrana (en agitacin continua) en el
el valor ms bajo de ES (Galadina y
que el proceso qumico de extraccin y de
Silvertooth, 1998; Agbenin y van Raij, 2001).
separacin se realizara en la misma unidad y
en el que la MIA absorbe las especies
3) Consideraciones hacia el experimento:
extradas con el fin de que el posible
equilibrio que se estableciese no limite el
rendimiento del proceso.
174
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Desde el punto de vista sensu stricto, Durante las siete extracciones


nuestro procedimiento experimental no secuenciales con la MIA se observa como los
corresponde a una cintica clsica de valores de P y del resto de elementos
desorcin, equivalente a un reactor qumico estudiados (Al, Si, Fe y CO) se mantienen
discontinuo (tipo batch); sin embargo y dado relativamente constante durante las seis
que el proceso se realiza en agitacin primeras extracciones (tiempo de agitacin
continua, con extraccin secuencial de las del sistema hasta esa extraccin: 26 h) para
especies asociadas al P (incluidas las de luego aumentar en la sptima extraccin una
aquellos elementos que forman especies vez alcanzadas las 96 h de agitacin continua
aninicas) y acumulativa (con una misma (Figuras 5, 6, 7, 8 y 9). Si en vez de
muestra obtenemos todos los puntos considerar el nmero de extracciones
secuenciales ya que solo se cambia el saco de consideramos el tiempo en el que el sistema
dilisis con la MIA para un tiempo de estuvo en agitacin, observamos como la
agitacin t) consideramos de sumo inters el cantidad acumulada de los elementos
anlisis de los datos y su posible ajuste a estudiados parece depender del equilibrio
diferentes expresiones cinticas que nos qumico que tiene lugar en el sistema en vez
permitiese ahondar en los mecanismos de de un control cintico de la reaccin de
desorcin del fosfato y del resto de elementos liberacin (Figuras desde la 10 a la 19). Esto
estudiados. significa que el proceso no sigue un tipo de
Por otro lado, la extraccin por parte de cintica particular y que por tanto los
la MIA tambin podra describirse en funcin parmetros de velocidad asociados a los
del nmero de extracciones empleando la diferentes modelos cinticos analizados para
ecuacin empleada por Siddique y Robinson la liberacin del fosfato no pueden ser
(2004): determinados bajo nuestras condiciones
Qt = at
b
(13) experimentales.

similar a la empleada por Sharpley (1996), En un segundo anlisis exploratorio de

donde Q representa la cantidad de nutriente los resultados, estos no parecen coincidir con

liberado, la constante a la cantidad del mismo los de otros autores que emplean extracciones

obtenida mediante una sola extraccin y la sucesivas con mezclas de resinas aninicas y

constante b la velocidad de nutriente liberado catinicas realizadas en un proceso

por extraccin de MIA. discontinuo de extraccin de P; as Siddique y


Robinson (2004) encuentran en suelos
enmendados con lodos y estircol que la
3.4.3. Curvas de liberacin de P y del
velocidad de liberacin de P es muy rpida
resto de elementos
para las primeras extracciones, seguida por
una liberacin mucho ms lenta. Los
resultados de estos autores se encuentran en
175
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 5. Fsforo acumulado durante cada perodo de extraccin y P liberado del suelo
durante cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA en muestras de suelos
seleccionadas. Clave de muestras: D= LE A; E= LE-50; F= LE-200; J= LE A (30000g); L= LE-
50 (30000g); N= LE-200 (30000g).

176
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 6. Aluminio acumulado durante cada perodo de extraccin y Al liberado del suelo
durante cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA en muestras de suelos
seleccionadas. Para clave de muestras, ver Fig. 5

177
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 7. Hierro acumulado durante cada perodo de extraccin y Fe liberado del suelo
durante cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA en muestras de suelos
seleccionadas. Para clave de muestras, ver Fig. 5

178
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 8. Carbono orgnico (CO) acumulado durante cada perodo de extraccin y CO


liberado del suelo durante cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA en muestras
de suelos seleccionadas. Para clave de muestras, ver Fig. 5

179
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 9. Silicio acumulado durante cada perodo de extraccin y Si liberado del suelo
durante cada una de las siete extracciones sucesivas con MIA en muestras de suelos
seleccionadas. Para clave de muestras, ver Fig. 5

180
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 10. Dependencia temporal de la adsorcin total de P por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo. Clave de muestras: A= BC Bw;
B= LL A; C= LE Bw; D= LE A; E= LE-50; F= LE-200; G= LE A (arc 1 ext.); H= LE Bw
(30000g); I= LE Bw (50000g, 4C); J= LE A (30000g); K= LE A (50000g, 4C); L= LE-50
(30000g); M= LE-50 (50000g, 4C); N= LE-200 (30000g); O= LE-200 (50000g, 4C).

181
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 11. Dependencia temporal de la adsorcin total de Al por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo. Para clave de muestras ver Fig.
10.

182
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 12. Dependencia temporal de la adsorcin total de Fe por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo. Para clave de muestras ver Fig.
10.

183
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 13. Dependencia temporal de la adsorcin total de CO por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo. Para clave de muestras ver Fig.
10

184
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 14. Dependencia temporal de la adsorcin total de Si por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo. Para clave de muestras ver Fig.
10

185
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 15. Dependencia temporal de la adsorcin total de P por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos
cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

186
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 15 (cont.). Dependencia temporal de la adsorcin total de P por las siete MIA
empleadas durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando
diferentes modelos cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

187
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 16. Dependencia temporal de la adsorcin total de Al por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos
cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

188
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 16 (cont.). Dependencia temporal de la adsorcin total de P por las siete MIA
empleadas durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando
diferentes modelos cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

189
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 17. Dependencia temporal de la adsorcin total de Fe por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos
cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

190
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 17 (cont.). Dependencia temporal de la adsorcin total de P por las siete MIA
empleadas durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando
diferentes modelos cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

191
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 18. Dependencia temporal de la adsorcin total de CO por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos
cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

192
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 18 (cont.). Dependencia temporal de la adsorcin total de CO por las siete MIA
empleadas durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando
diferentes modelos cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

193
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 19. Dependencia temporal de la adsorcin total de Si por las siete MIA empleadas
durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando diferentes modelos
cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

194
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

Figura 19 (cont.). Dependencia temporal de la adsorcin total de P por las siete MIA
empleadas durante las 96 h de agitacin continua del sistema agua-suelo, empleando
diferentes modelos cinticos explicados en el texto. Para clave de muestras ver Fig. 10

195
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

196
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

consonancia con los obtenidos por Lookman et ya que las tendencias frente al nmero de
al. (1995), Sharpley (1996) y Toor y Bahl extracciones y al tiempo de agitacin parecen
(1999). La reaccin inicial rpida representara ser las mismas.
la desorcin del P ms lbil, mientras que las Nuestros resultados parecen indicar que la
fases ms lentas representaran la desorcin de naturaleza de las asociaciones entre los
especies de P menos mviles (Kuo y Lotse, diferentes elementos estudiados juega un papel
1974; Toor y Bahl, 1999). Siddique y preponderante. En la Tabla 19 se presentan las
Robinson (2004) ponen de manifiesto que el P relaciones atmicas medias entre los diferentes
liberado parece depender de la fuente de P, elementos encontrados en los eluatos de MIA
especialmente durante la primera extraccin, despus de seis extracciones secuenciales (26 h
siendo la liberacin del macronutriente de agitacin continuada del sistema y
prcticamente inexistente despus de seis liberacin casi constante de P). Si
extracciones con respecto a los elevados consideramos los dos tipos de Andosoles,
valores obtenidos para la primera. alofnicos (La Esperanza) y rganominerales
De todas maneras es necesario hacer (Las Lajas), observamos cmo los valores
mencin que durante las seis primeras obtenidos para las seis primeras extracciones
extracciones secuenciales, la cantidad de P secuenciales se corresponden con aquellos que
retirada del sistema por la MIA en cualquiera los diferencian (especie de huella digital para
de sus formas, siempre con un tamao inferior estos suelos). As, los valores acumulados para
a 10000 Da, parece seguir una cintica de el Al representaron entre el 0,05 y el 0,2% del
orden 0 (velocidad constante) incrementndose Al extrable con oxalato para el Andosol
la cantidad liberada por el suelo en la sptima alofnico y para el rganomineral
extraccin que abarca un total de 70 h de respectivamente.
agitacin del sistema sin cambio de MIA Las relaciones atmicas obtenidas son
(desde las primeras 26 h de agitacin del compatibles con las asociaciones del tipo AF-
sistema hasta las 96 h) lo que parece sugerir P-Al(Fe) e incluso formas asociadas al Si, con
que la desorcin de fosfato en este tipo de carcter aninico, que podran ser adsorbidas
suelos no puede describirse simplemente por la MIA. Estas asociaciones tendran un
mediante una fase rpida de liberacin, seguida tamao de partcula inferior a 10000 Da
de una segunda fase mucho ms lenta; parece impuesto por la membrana de dilisis. La
ms bien que el suelo, al no llegar a un umbral relativa constancia de los valores encontrados
mnimo en el grado de saturacin en formas para cada una de las extracciones provoca que
qumicas fcilmente disponibles de P para que la cantidad de estos elementos aumente con el
la reaccin rpida pueda transcurrir (Siddique tiempo de extraccin y que, al cabo de 96 h de
y Robinson, 2004), tienda a liberar el P que se agitacin continua, el sistema siga liberndolos
encuentra asociado al resto de elementos con a pesar de retirar parte de estos elementos
los que interacciona, mucho menos disponible, durante las seis primeras extracciones; esto
197
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

lleva a pensar que los procesos de liberacin o American Public Health Association; Water
desorcin del fosfato, asociado a la fraccin Environment Federation; American Water

activa del Al y Fe, parezcan depender, en los Works Association. 1995. Standard Methods
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suelos ndicos, de los equilibrios fsico-
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qumicos que se originan en las condiciones
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203
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo III.4 P resina y desorcin

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204
CAPTULO IV

ANEJOS:

CALIBRADO DE P DISPONIBLE Y
ENSAYOS BIOLGICOS EN SUELOS
VOLCNICOS CON ELEVADA
CAPACIDAD DE RETENCIN DE
FOSFATO
ANEJO 1:

CAMBIOS EN LAS FRACCIONES DE P EN


UN ANDISOL, INDUCIDOS POR LA
INFECCIN DE MICORRIZAS
ARBUSCULARES EN CULTIVOS DE
TAGASASTE (Chamaecytisus proliferus
ssp. proliferus var. Palmensis).
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

1. Introduccin arbusculares o la microflora que los


acompaa, podran ayudar a mejorar la

Los hongos micorrizgenos arbusculares disponibilidad del P del suelo mediante la

forman parte de seres simbiticos obligados a solubilizacin de las formas inorgnicas de

una perenne asociacin con las races de una fsforo o mediante la hidrlisis de sus

planta vascular a la que colonizan y a los compuestos orgnicos (Hetrick, 1989).

fenmenos ecolgicos que ocurren en el Bsicamente, se han empleado tres

suelo debido al micelio externo que se forma aproximaciones a travs de las cuales se han

al hacer de puente entre las races y el suelo tratado de identificar las fuentes de P en el

circundante (Toro et al., 1997). Estos hongos suelo que son accesibles a las plantas

son motivo de atencin ya que se consideran micorrizadas y no micorrizadas (Bolan et al.,

parte fundamental de los ecosistemas 1984): (i) aadiendo al suelo P radioactivo

agrcolas pues originan un incremento (32P) con el fin de comparar las actividades

espectacular de la superficie de las races en especficas de crecimiento de las plantas

las plantas infectadas (Smith y Read, 1997), control y micorrizadas sobre este sustrato

provocando un aumento en el contenido de marcado despus de un corto tiempo de

macro y micronutrientes en las plantas incubacin (ii) comparando la toma de P por

micorrizadas (Clark y Zeto, 1996) que, por las plantas a partir de fuentes de P con

razones que an se desconocen, ocurre diferentes solubilidades (iii) experimentos de

incluso a niveles bajos de fsforo y pH fraccionamiento del P del suelo.

(Lesica y Antibus, 1990; Len et al., 2004). La conclusin ms general y ms

Uno de los efectos ms dramticos de la ampliamente aceptada, sustentada sobre la

infeccin con el hongo micorrizgeno sobre base de estas aproximaciones, es la que nos

la planta hospedadora es el incremento de la indica que las plantas micorrizadas y control

toma de P (Koide, 1991) debido exploran los mismos compartimentos de P

principalmente a la capacidad de la micorriza (formas o fracciones). Los resultados de


32
para absorber P del suelo y transferirlo a las experimentos con P han sido los que ms

races del hospedador (Asimi et al., 1980). apoyan esta afirmacin. Sin embargo,

De todas maneras y aunque existen muchos algunos autores opinan que la interpretacin

trabajos que han intentado explicar el de los resultados obtenidos con trazadores

mecanismo a travs del cual la micorriza radiactivos es compleja y que puede llevar a

arbuscular (AM) interviene en la nutricin de falsas conclusiones (Bolan et al., 1984) lo

P por la planta, la pregunta relacionada a que nos lleva a pensar que la idea anterior

cerca de las formas de P que pueden tomar debe de ser tomada con ciertas reservas. El

contina sin contestar. Sin embargo, existen propsito de este estudio ha sido el de

muchas evidencias circunstanciales que calibrar la sensibilidad del procedimiento del

sugieren que los hongos micorrizgenos fraccionamiento de P desarrollado en esta

207
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

tesis doctoral en el captulo dedicado al P representativo (La Esperanza A, Typic


Olsen para probar su utilidad en la Hapludands) para realizar el experimento y
investigacin de las diferentes fracciones de que presenta un bajo contenido en P Olsen
P que las plantas AM pueden usar. (3,6 mg P kg-1 suelo). Se tomaron los
primeros 25 cm del horizonte A que
2. Material y mtodos presentaba un alto contenido en materia
orgnica (aproximadamente 20%). Despus
Se sigui un completo diseo de esterilizarlo con vapor, el suelo se incub
experimental factorial 3x5 con diez rplicas durante un mes en bolsas plsticas,
para estudiar la curva de respuesta del removindolo diariamente, con 0, 25, 50, 100
Chamaecytisus proliferus ssp. proliferus var. y 160 mg P kg-1 suelo (en forma de KH2PO4);
palmensis (tagasaste) a cinco niveles de P y a estos tratamientos se sealan como P0, P1,
dos micorrizas arbusculares, Glomus P2, P3, P4 respectivamente.
mosseae YV-135 (LMSS, aislada en Las semillas (coleccin del ICIA de
Rothampsted, UK) y Glomus intraradices Valle Guerra, Tenerife), despus de
(LINR, aislada en el NW de Espaa, de un escarificarlas, se germinaron sobre un lecho
Cambisols hmico). Tambin se incluy en de cenizas volcnicas esterilizadas con vapor
el estudio un control no micorrizado (CTRL). y al que se le extendi una fina capa de la
El tagasaste es un endemismo leoso de bacteria Bradyrhizobium (BTA-1), obtenida a
la familia de las fabceas (Fabaceae) de las partir de los ndulos de tagasaste (Vinuesa et
Islas Canarias siendo la planta forrajera ms al., 1998). Dos semanas ms tarde, los
importante de la flora local. Actualmente esta plantones se seleccionaron y fueron
especie se cultiva extensamente no slo en trasplantados a macetas de 1,4 l que
Canarias, tambin en Nueva Zelanda y contenan el suelo incubado. En ese
Australia tiene un gran valor como forrajera momento, cada unidad experimental recibi
y su utilidad se extiende hasta en programas el inculo saturado con AMF (Haas y
de conservacin de suelos (Francisco-Ortega Krikun, 1985), una suspensin de BTA-1 y
et al., 1991). Segn la bibliografa un extracto microbiano de suelo con el
consultada, los primeros trabajos sobre el inculo micorrizado.
estado de micorrizacin de esta especie Las plantas se distribuyeron en bloques
fueron realizados por Vinuesa et al. (1996; al azar y bajo condiciones controladas en
1998). invernadero de luz natural, temperatura y
En las Islas Canarias, alrededor del 50% humedad en el ICIA. El desarrollo del cultivo
de los cultivos de Tagasaste se desarrollan se prolong durante 4,5 meses en los que el
sobre suelos de naturaleza volcnica, suelo se reg con agua destilada. Cada
fundamentalmente Andosoles. Para este semana le fue aplicada una disolucin
estudio, hemos seleccionado un Andosol nutritiva libre de N y P, aunque durante el

208
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

(Pol+Pen)-Pol
PEN POL+PEN
1. Hidrlisis
Enzimtica
2.
Colorimetra directa Colorimetra
POL
1. S2O82-
Extracto de bicarbonato PT
1. Carbn activo 2. Colorimetra
POLC
2. Colorimetra

Figura 1. Esquema procedimental del fraccionamiento del P. POL: P en el extracto de


HCO3-determinado por colorimetra directa. Este incluye, en principio, tanto
compuestos inorgnicos como orgnicos "lbiles" del P; POLC: contenido en P del
extracto de HCO3- despus de su tratamiento con carbn activo para remover la mayor
parte del P orgnico; PEN: P hidrolizable por la enzima fosfatasa, potencial fuente de P
biodisponible; PT: contenido de P total en los extractos de HCO3- medido
colorimtricamente despus de digestin (autoclave) con K2S2O8 y H2SO4 5N.

primer mes esta disolucin contena, adems, del complejo PNP-fosfato por ml de
2 mM de KNO3, como fuente de N. extractante y una hora de incubacin.
Inmediatamente despus de arrancar las Tambin se obtuvieron para cada unidad
plantas de las macetas, el sustrato fue secado experimental, extractos acuosos con una
y tamizado por 2 mm. Los extractos de relacin w:s de 3:1. El P determinado en
bicarbonato se obtuvieron siguiendo el estos extractos (Pw3) son indicativos de una
mtodo descrito por Olsen et al. (1954), libre medida del parmetro intensidad, es decir,
de carbn activo. El fraccionamiento del nos proporcionara un valor de P
extracto de bicarbonato se realiz de acuerdo inmediatamente biodisponible presente en la
con el procedimiento propuesto en el captulo disolucin del suelo.
III.1 que se resume en la Fig. 1.. El anlisis estadstico se realiz en seis
Para determinar el P hidrolizable por el rplicas seleccionadas por tratamiento con el
enzima fosfatasa (Pen), se tomaron 5 ml del fin de analizar paramtricamente el
extracto al que se le aadieron 2 ml de crecimiento de las plantas.
fosfatasa cida al 0,1% y tamponada a pH 6
con tampn universal modificado, 3. Resultados y discusin
incubndose la suspensin durante 90 min a
37C. La actividad de la fosfatasa cida de De los resultados obtenidos se desprende
los extractos de bicarbonato se midi como la que ha debido existir interacciones
cantidad (mg) de p-nitrofenol (PNP) liberado

209
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

Tabla 1. Valores de P extrable con bicarbonato POL (mg kg-1) antes y despus del
cultivo (mediasESM)
Nivel de P Antes Despus
CTRL. LINR
P0 3,60,3 12,00,4 12,30,5
P2 9,90,5 16,10,4 17,10,6
P3 17,50,6 25,50,6 24,20,6

estadsticamente significativas entre la POL al final del experimento con respecto a


fertilizacin fosfatada y los tratamientos del los valores iniciales (antes de plantar y
suelo con micorrizas arbusculares. Despus despus del cultivo). No existieron
de 60 das de cultivo, la mayor dependencia diferencias estadsticamente significativas
relativa hacia la micorrizacin correspondi a en los valores de POL para los tratamientos
las plantas inoculadas con LINR, a un nivel micorrizados y control a cualquier nivel de
P2 de fertilizacin. LINR se mostr como el P.
hongo ms eficiente para todos los niveles de Se encontr, por otra parte, una
P. Los porcentajes de longitud de raz tendencia paralela entre POLC y Pw3 para
colonizada (RMD) por LINR, medida como ambos niveles de P (Tabla 2). Se observ
100 races/puntos de interseccin en la rejilla una disminucin de ambos parmetros en el
para cada rplica (Haas y Krikun, 1985) nivel P0 para el tratamiento con micorrizas
(92,67,3 para P0 y 86,84,8 para P2, con respecto a los controles. Este hecho se
desviacin estndar), fue tambin puede atribuir a las bajas concentraciones
significativamente ms elevada que para de P inorgnico presente en ambos
LMSS en todos los niveles de P. Al final del extractos lo cual hace suponer que para
experimento el mayor RMD le correspondi estos niveles, la exploracin de las races
a las plantas inoculadas con LINR a nivel de simbiticas ha sido mucho ms intensa.
P0 P2
P0 (RMD =67%, RMD =47%), Cualquiera de los mecanismos clsicos que
disminuyendo gradualmente cuando se explican el incremento de la toma del P
incrementa la dosis de P aadido. lbil por las plantas micorrizadas podra dar
El fraccionamiento de los extractos de cuenta de esta observacin, la cual, en
bicarbonato se realiz solo en los suelos principio, no es sorprendente (Hetrick,
procedentes de las macetas con las plantas 1989; Bolan, 1991). Estos resultados estn
control (CTRL) y las micorrizadas con de acuerdo con los encontrados por Sainz y
LINR para los niveles crticos P0 y P2. Arines (1988a) que detectaron
Como se observa en la Tabla 1, existi un disminuciones significativas en diferentes
incremento importante en los valores del

210
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

Tabla 2. Valores de POLC, PW3 y PEN (mg kg-1) para los niveles P0 y P2.
Nivel de P Tratamiento POLC PW3 PEN
CRTL 8,2 a 0,58 a 1,7 a
PO
LINR 6,7 b 0,32 b 0,4 a
CRTL 5,7 a 0,43 a 21,1 a
P2
LINR 9,8 b 0,54 b 16,5 b
En cada columna, los valores medios seguidos por una misma letra no son significativamente
diferentes para P < 0,001. Para abreviaturas ver Fig. 1.

fracciones de P inorgnico en tratamientos materia orgnica marcada con P respecto a


con inculos de AMF respecto al control. las muestras control, durante su
Estos experimentos se realizaron con mineralizacin. Por otra parte, Sainz y Arines
plantas de trbol cultivadas en macetas con (1988b) no pudieron detectar diferencias
un cambisol hmico, suelo que fue estadsticamente significativas en el
sometido a un fraccionamiento clsico para compartimiento de P orgnico en las macetas
el P. Por otro lado, se detect la tendencia micorrizadas y control siguiendo un
inversa en el nivel P2 donde las macetas procedimiento de fraccionamiento clsico. Es
con plantas micorrizadas presentaban, con interesante resaltar el hecho de que el
un nivel de significacin estadstica incremento de la exploracin del P orgnico
elevada, mayores valores de POLC y Pw3 ocurri solo en los niveles P2 de las plantas
que las macetas control (Tabla 2). micorrizadas por LINR que corresponde al
Si consideramos estos ltimos datos, nivel de P ptimo para el desarrollo del
conjuntamente con la fraccin hidrolizable fenotipo simbitico bajo nuestras condiciones
por la enzima fosfatasa (PEN), cuyos valores experimentales.
fueron significativamente mucho ms bajos Este P podra ser liberado por la mayor
en las plantas micorrizadas que en los eficiencia en la mineralizacin del P por parte
controles en el nivel P2 (Tabla 2), entonces de la microbiota micorrizosfrica, o por sus
podramos inducir que las plantas infectadas hifas (Bolan, 1991). La actividad fosfatsica
con micorrizas podran explorar la fraccin de los extractos de bicarbonato fue mucho
orgnica del P ms intensamente que las mayor en las unidades experimentales
plantas no micorrizadas. Estos resultados micorrizadas que en los controles, pero esta
estaran en concordancia con los encontrados tendencia no fue estadsticamente
con Joner y Jakobsen (1994) quienes dan significativa tanto en P0 como en P2. Las
cuenta de un incremento, dependiente de la races micorrizadas podran tomar de forma
32
AMF de partida, de la toma de P de la ms eficiente este P mineralizado

211
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

recientemente evitando que los materiales formas qumicas de P (incluyendo un ptimo


amorfos de las superficies reactivas de estos nivel de P para el funcionamiento de la
suelos fijen rpidamente el P liberado. La micorriza) debera arrojar ms luz a la
aparente mayor actividad mineralizadora todava oscura y controversial cuestin de
asociada a las macetas micorrizadas podra eficacia de las plantas colonizadas por AM
explicar los mayores valores de POLC y Pw3 para explorar las formas de P presentes en el
en este tratamiento con respecto a los suelo, mxime en suelos con elevada
controles. retencin de fosfato como los Andosoles.
El compartimiento de P orgnico
extrable con bicarbonato correspondi, 4. Referencias
aproximadamente, con el 50% del P total
extrado (ver Captulo III.1). Este dato es Asimi, S.; Gianinazzi-Pearson, V.; Gianinazzi,
similar a los de otros suelos ndicos de S. 1980. Influence of increasing soil

Canarias estudiados en esta memoria de tesis phosphorus levels on interactions between


vesicular-arbuscular mycorrhizae and
doctoral; sin embargo, los altos porcentajes
Rhizobium in soybeans. Canadian Journal of
de P orgnico degradable por la enzima
Botany 58, 2200-2205.
fosfatasa indican que esta fraccin es una
Bolan, N. S. 1991. A critical review on the role
fuente directa muy importante de P
of mycorrhizal fungi in the uptake of
biodisponible en este tipo de suelos. Esto phosphorus by plants. Plant & Soil 134, 189-
muestra cun importante son los programas 207.
de inoculacin, no solo para seleccionar Bolan, N. S.; Robson, A. D.; Barrow, J.; Aylmore,
aquellos inculos capaces de hacer ms L. A. G. 1984. Specific activity in mycorrhizal

accesible a las plantas las mltiples fuentes and non-mycorrhizal plants in relation to the

de P presentes en el suelo, sino tambin para availability of phosphorus to plant. Soil Biology
& Biochemistry 16, 229-304.
que la disolucin del suelo alcance niveles
Clark, R. B.; Zeto, S. K. 1996. Mineral
adecuados de P para una ptima funcin
acquisition by mycorrhizal maize grown on
simbitica de la cual va a depender el
acid and alkaline soil. Soil Biology and
aislamiento del hongo (Habte y Fox, 1993;
Biochemistry 28, 1495-1503.
Joner y Jakobsen, 1994). Francisco-Ortega, J.; Fernndez-Galvn, M.;
Para ayudar a explotar e incrementar la Santos-Guerra, A. 1991. A literature survey
sensibilidad de este procedimiento de (1696-1991) on the fodder shrubs tagasaste and
fraccionamiento, proponemos su uso para escobon (Chamaecytisus proliferus Link sensu
analizar pequeos volmenes de suelo de lato) (Fabaceae:Genisteae). New Zealand

cmaras de hifas de sistemas de cultivo Journal of Agriculture Research 34, 471-488.


Haas, J. H.; Krikun, J. 1985. Efficacy of
compartimentalizados. El crecimiento de
endomycorrhizal-fungus isolates and inoculum
plantas micotrficas bajo estas condiciones
de cultivo, aportando diferentes dosis y

212
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

quantities required for growth response. New Sainz, M. J.; Arines, J. 1988b. Effect of
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213
ANEJO 2:

CALIBRADO DE P DISPONIBLE EN
SUELOS CON ALTA CAPACIDAD DE
RETENCIN POR LOS MTODOS DE
LA MEMBRANA DE INTERCAMBIO
INICO Y OLSEN EN MAZ (Zea mays
L.).
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

1. Introduccin determinante para el desarrollo de polticas


sostenibles en el desarrollo agrcola de estos

A diferencia de los suelos de carga suelos.

permanente cuyo comportamiento viene Por otra parte, desde hace mucho

dado por los filosilicatos y minerales de tiempo se considera que las calibraciones

arcilla presentes en su estructura, los suelos habituales que relacionan el P extrable con

de carga variable se caracterizan por tener los rendimientos esperados y las

una capacidad de cambio catinico que necesidades de fertilizacin no son

depende esencialmente de su pH y del nivel adecuadas para los suelos de carga variable

salino que le rodea, de su capacidad de (Fox, 1980). En la mayora de los ensayos,

intercambio aninico (especfica y no los datos de suministro de P parecen ser los

especfica), a su microagregacin ptimos, atendiendo a la definicin clsica

estructural muy desarrollada y las de fertilizacin adecuada de un cultivo en

propiedades biolgicas particulares que funcin del agente extractante empleado

presentan. (pe. ver Pierzynskii, 1991), cuando en

Las caractersticas que identifican a realidad existe una marcada deficiencia.

estos suelos frente al resto hacen necesaria Esta aparente anomala puede explicarse en

una metodologa ad hoc en lo referente a su el caso de los Andosoles, esencialmente por

uso, manejo y conservacin. Mientras que los siguientes aspectos:

en pases tpicamente volcnicos como


Japn y Nueva Zelanda se ha desarrollado a) La citada capacidad de retencin de

desde hace mucho tiempo una metodologa fosfato.

especfica para este tipo de suelos, en las b) La cantidad de P retenido puede ser

Islas Canarias se siguen empleando los considerable (en trminos absolutos),

mtodos oficiales clsicos de anlisis de pero pequea en relacin con la

suelos que conllevan muchos problemas de capacidad de retencin del suelo. La

interpretacin cuando los modelos que los baja saturacin de P se traducira,

sustentan son aplicados a nuestros suelos. entonces, en una baja solubilidad del

La elevada capacidad de retencin de macronutriente.

fosfato que caracteriza a los suelos de carga c) La absorcin de P por las plantas est

variable hace posible que en zonas estrechamente relacionada con su

intertropicales, por ejemplo, se necesiten solubilidad.

ms de 1000 kg P Ha-1 para alcanzar una


produccin satisfactoria (Parfitt, 1989). En De todas maneras, tal y como ha

el caso de los Andosoles y otros suelos con indicado Hernndez-Prez (1991), estos

caractersticas ndicas de Canarias este aspectos que caracterizan a la dinmica del

parmetro se constituye en un factor P en los suelos de carga variable no

215
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

implican que necesariamente el elemento se parcial de la disolucin cida extractante


encuentre inmovilizado, por lo que es por el CaCO3 y/o precipitacin del fluoruro
importante, para el estudio de las por el Ca disuelto (Smith et al., 1957; Fixen
necesidades de fertilizacin en este tipo de y Grove, 1990). Mallarino (2003) compar
suelos, el proceso de reversibilidad del los valores de P determinados tanto por el
fosfato retenido en funcin de los diferentes mtodo colorimtrico clsico como por
componentes del suelo y, en especial, por espectrofotometra de plasma inducido
los compuestos activos de Al y Fe, tanto de (ICP) en suelos de Iowa (EEUU) que
naturaleza inorgnica como rganomineral. englobaban un amplio rango de pH sobre
los que se realiz un ensayo biolgico con
1.1. Mtodos de calibrado del P maz. Aunque los valores de P Mehlich
disponible determinados por el mtodo del ICP fueron
superiores a los obtenidos por el mtodo

El calibrado del suelo se ha considerado colorimtrico, ambos fueron igualmente

como una herramienta til en el diagnstico efectivos en su capacidad para predecir la

de la asimilabilidad-disponibilidad del respuesta del cultivo a los tratamientos de P

fosfato por las plantas. Los mtodos de en todos los suelos, independientemente de

determinacin del P disponible propuestos su pH y niveles de C orgnico. Otros

por Bray (Bray y Kurtz, 1945), Mehlich autores han observado, adems, que el

(Mehlich, 1984) y Olsen (Olsen et al., mtodo del ICP mide ms P en extractos de

1954) han sido, con pocas o ninguna suelo o agua que la determinacin

modificacin, los ms empleados en los colorimtrica (Hylander et al.,1995; Masson

mtodos oficiales de anlisis de suelos. Las et al., 2001; Nathan et al., 2002). El mtodo

reacciones qumicas que se establecen entre Olsen y tanto las versiones colorimtricas

los constituyentes del suelo y los agentes como de ICP del mtodo Mehlich

qumicos encargados de extraer el P pueden constituyen los mtodos recomendados en

explicar la diferencia en la adecuacin de estos suelos, aunque slo el mtodo Bray

los mtodos rutinarios de extraccin en slo se recomienda para suelos con pH <7,3

funcin de la tipologa de los suelos. As, el (Sawyer et al., 2002).

P Bray se ha considerado eficaz para los Los mtodos de adsorcin qumica,

suelos neutros o cidos pero parece basados en reacciones de sorcin-desorcin

subestimar el P disponible para las plantas de P, se han propuesto como alternativa a la

en algunos suelos con elevados valores de disolucin de P del suelo con agentes

pH o afectados por procesos de qumicos. Uno de ellos es el mtodo de la

carbonatacin (Sen Tran et al., 1990; resina de intercambio inico. Las

Mallarino, 1997). Este resultado se ha investigaciones realizadas con ellas para la

explicado a travs de una neutralizacin determinacin del P disponible (Fernandes

216
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

y Coutinho, 1997; Nuernberg et al., 1998; informacin en los laboratorios de nuestra


Fernandes et al., 1999; Mallarino y Atia, regin es el de Olsen, y de cuyo estudio
2005) han mostrado que las interrelaciones hemos dedicado un captulo en esta tesis
entre mtodos o entre el P extrado y los doctoral, aunque en los ltimos aos se han
ndices de asimilabilidad (disponibilidad) introducido nuevos mtodos como el
del P por la planta se ven afectados por las mtodo del absorbente o sumidero infinito
propiedades del suelo (pH del suelo, de tiras de papel impregnadas con Fe
tamao de partcula, mineraloga y materia (Hernndez-Prez, 1991) o el mtodo de las
orgnica), no siendo posible llegar a membranas de intercambio inico
conclusiones generales cuando se (Martnez-Costa, 1996).
contrastan suelos de diferentes regiones. El objetivo de este estudio ha
Rubaek y Sibbesen (1995) encuentran consistido en la calibracin del mtodo
rangos de valores similares para el mtodo Olsen y MIA en dos suelos de carga
Olsen y el mtodo de la resina en suelos variable y elevada capacidad de retencin
sometidos a diferentes tratamientos de P y a para el fosfato con la respuesta del maz a
lo largo de diferentes perodos de tiempo, su fertilizacin fosfrica hasta 1500 mg P
aunque la extraccin con resina tiende a dar kg-1 suelo y la comparacin entre ellos.
valores un poco ms elevados. Atia y Partimos para ello de los ensayos
Mallarino (2002) encontraron correlaciones biolgicos realizados por Prez Surez
lineales cerradas entre el P del suelo (1995) y Martnez Costa (1996) que
determinado por los mtodos de Olsen, constituyeron los primeros informes de
Mehlich y membranas de intercambio calibrado de P en suelos de carga variable
aninico (MIA) en suelos calcreos y no de Canarias.
calcreos con diferentes historiales de
fertilizacin o de aplicacin de residuos. 2. Material y mtodos
Ensayos biolgicos en los que se
determinaron cantidades de P tomadas por Los suelos naturales y cultivados de
plantas de maz y soja [Glycine max (L.) Canarias utilizados en este estudio han sido
Merr.] (rendimiento del grano no descritos en los captulos precedentes. Los
determinado) mostraron que los mtodos suelos seleccionados para el ensayo
anteriores presentaban correlaciones biolgico (Martnez Costa, 1996) fueron los
similares entre ellos y con la toma de P por denominados La Esperanza (Andosol) y
las plantas, aunque existieron diferencias Karting (fersialtico) de caractersticas
estadsticas cuando se compararon datos de fsicas y qumicas algo diferentes que
suelos de distintas procedencias. coinciden en su elevada capacidad de
En Canarias el mtodo de P lbil o retencin de fosfato.
disponible del que se posee una mayor

217
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

El ensayo consisti en el cultivo de 3.1. Fsforo Olsen


plantas de maz (Zea mays L.) sobre los El contenido de POL en las muestras de
suelos citados anteriormente y a los que se suelos originales fue de 261 mg P kg-1 en
les aplic dosis crecientes de P: 0 (testigo), el caso de La Esperanza y de 312 mg P kg-
250, 500, 1000 y 1500 mg de P kg-1 de 1
para la muestra Karting, mientras que el
suelo. El ensayo se realiz siguiendo las valor de PR fue de 2,80,1 mg P kg-1 para
directrices indicadas por Martnez Costa
el primer suelo y de 9,90,5 mg P kg-1 para
(1996) en un invernadero tipo holands de
el segundo.
la Escuela Tcnica Superior de Ingeniera
Los valores medios de POL en los
Agrcola de la Universidad de La Laguna.
suelos una vez finalizado el cultivo
Las determinaciones analticas del P de
oscilaron entre los 11,6 mg P kg-1 en el caso
los suelos correspondieron a las fracciones
de la muestra testigo y los 253 mg P kg-1 en
reactivas del mtodo Olsen (POL) y soluble
la dosis superior de P (1500 mg P kg-1) para
en agua (relacin w:s 75:1, PR), mientras
el suelo Karting, mientras que en La
que para el mtodo de la MIA (membrana
Esperanza estos los valores oscilaron entre
en forma Cl) corresponde a la de los eluatos
los 3,2 mg P kg-1 y los 144 mg P kg-1
de cloruro (Cl-P) (vase la metodologa
respectivamente (Tabla 1).
especfica para cada uno de los mtodos de
En ambos suelos, las cantidades de P
extraccin en los captulos III.1, III.2 y III.4
extradas con el mtodo Olsen fueron
respectivamente). Una vez realizado el
pequeas en comparacin con el
ensayo biolgico, se evalu el P en los
tratamiento aplicado a los suelos, de forma
suelos por los mtodos de Olsen y MIA
llamativa en el caso de La Esperanza, lo
como se indic anteriormente.
que nos indica que los resultados estaran
El P en la planta (parte area hoja y
directamente asociados a la elevada fijacin
pseudotallo- y raz, material seco y molido
de fosfato de los suelos; este hecho podra
en cada tratamiento y repeticin) se
verse potenciado por las extremas
determin por colorimetra, usando el
condiciones de temperatura y humedad a las
mtodo del vanadato-molibdato (Kuo,
que fueron sometidas las muestras en el
1996), en una disolucin procedente de la
invernadero (Wild, 1992), adems de la
digestin en medio clorhdrico 6M del
prdida de este elemento por las cantidades
material vegetal calcinado (Chapman y
importadas por la propia planta. Estos
Pratt, 1961).
mismos factores parecen que fueron los
causantes de que el valor del POL
3. Resultados y discusin: Evaluacin disminuyera notablemente en comparacin
del P en los suelos al final del ensayo con el valor obtenido para cada suelo al
biolgico inicio de la experiencia.

218
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

Tabla 1. Valores medios de POL y Cl-P en funcin del tratamiento aplicado a los
suelos (desviacin estndar).
TRATAMIENTO
SUELO -1
POL (mg kg-1) Cl-P (mg kg-1)
(mg kg )
Esperanza 0 3,240,45 25,24,3
250 30,78,9 69,98,8
500 51,111,9 1179
1000 92,015,9 23211
1500 14428 44014
Karting 0 11,63,2 7,841,02
250 57,311,2 50,73,8
500 11912 1126
1000 21317 2198
1500 25332 4539

Sealar que los valores de POL en la bajos comparados con la cantidad de P


muestra Karting fueron superiores a los que aportada en los tratamientos (Tabla 1).
present La Esperanza. Esto puede ser Si comparamos los valores de POL con
debido a la mayor capacidad de adsorcin los de Cl-P podemos observar como para el
para el fosfato que presenta las superficies suelo Karting las diferencias no fueron
activas de este ltimo suelo. De todas importantes, con excepcin del tratamiento
maneras, Prez Surez (1995) en su ensayo 1500 mg P kg-1 en el que el valor de Cl-P
biolgico a tasas de fertilizacin de los fue notablemente superior al POL (p<0,05)
suelos ms bajas que las empleadas en mientras que en la muestra testigo ocurri
nuestro caso (hasta 200 mg P kg-1), puso de lo contrario. Sin embargo, en la muestra La
manifiesto que los Andosoles como La Esperanza los valores de POL son, en
Esperanza tienden a presentar una baja cualquier caso, muy bajos en relacin con
respuesta a la extraccin con bicarbonato. los valores de Cl-P para todos los
tratamientos. Este hecho podra ser
3.2. Fsforo extrado por MIA imputado a la aplicacin inicial de sulfato,
Los valores de P extrados por la MIA realizada para intentar compensar en los
-1
oscilaron entre los 7,8 mg P kg y los 453 tratamientos ms bajos el exceso de potasio
mg P kg-1 para el suelo Karting y entre los en las dosis ms altas, que haya podido
25 mg P kg-1 y los 440 mg P kg-1 en el suelo producir una sobreestimacin del contenido
La Esperanza. Estos valores son igualmente

219
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

Figura 1. Rectas de regresin del POL ()y Cl-P () frente a los tratamientos con P en
la muestra Esperanza

500
450
400
350
P mg kg-1

300
250
200
150
100
50
0
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600

tratamiento (mg P kg-1)

Figura 2. Rectas de regresin del POL ()y Cl-P () frente a los tratamientos con P en
la muestra Karting

500
450
400
350
P mg kg-1

300
250
200
150
100
50
0
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600

tratamiento (mg P kg-1)

Figura 3. Absorcin de P por las plantas frente a los tratamientos con P en las muestras
Karting () y Esperanza ()

220
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

20
18
16
14
P mg kg-1

12
10
8
6
4
2
0
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600
-1
tratamiento (mg P kg )

del P disponible por el mtodo MIA en este kg-1) adquiere un valor bastante superior al
suelo; este hecho tendra consecuencias resto que hace que la funcin de regresin
importantes sobre las recomendaciones de tienda a la exponencialidad. En el caso del
fertilizacin de suelos en el caso de aplicar este mtodo Olsen esta tendencia no se produce lo
mtodo en zonas donde las enmiendas con que parece indicar que este mtodo queda
yeso sean frecuentes. saturado a altas concentraciones de P en el
Por ltimo, se destaca el hecho de que la suelo.
dispersin de los resultados obtenidos con el Excluyendo de las rectas de regresin el
mtodo MIA fue menor que para el mtodo punto de comportamiento anmalo del suelo
Olsen tal y como se infiere al comparar las Karting observamos que cuando comparamos
desviaciones estndar de ambos mtodos las cantidades de P extradas por ambos
(Tabla 1). mtodos, estas tienden a ser similares para
cada tratamiento, manteniendo entre ellos una
3.3. Calibrado del P por ambos mtodos relacin prcticamente igual a la 1:1.
Como se observa en las Fig. 1 y 2, el P Teniendo en cuenta lo anterior y
disponible determinado tanto por el mtodo atendiendo a los parmetros de crecimiento, en
Olsen como por el de la MIA presentan una especial, a la produccin de materia seca y a la
buena correlacin respecto a los tratamientos absorcin de P por las plantas (Fig. 3), as
aplicados en ambos suelos (Tabla 2). Sin como a la buena correlacin existente entre el
embargo, en el caso de la MIA, el punto rendimiento del cultivo con los mtodos de
correspondiente a la dosis mxima (1500 mg P extraccin de P empleados, se consider como

221
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo IV Anejos: Ensayos biolgicos y calibrado

adecuada la aplicacin de una dosis de P para Sen Tran, T.; Giroux, M.; Guibeault, J.; Audesse, P.
un crecimiento ptimo de las plantas que 1990. Evaluation of M3 extractant to estimate the

oscilase entre los 250 y los 500 mg P kg-1 en available P in Quebec soils. Communications in
Soil Science and Plant Analysis 21, 128.
ambos suelos, con lo que podramos tomar
Mallarino, A.P. 1997. Interpretation of soil
como valores crticos de P disponible para el
phosphorus tests for corn in soils with varying
POL y el Cl-P los siguientes:
pH and calcium carbonate content. Journal of
Andosol (Olsen): 45 mg P kg-1 Production Agriculture 10, 163167.
-1
Andosol (MIA): 100 mg P kg Mallarino, A. P.; Atia, A. M. 2005. Correlation of a
Suelo fersialtico (ambos): 100 mg P resin membrane soil phosphorus test with corn
-1 yield and routine soil tests. Soil Science Society
kg
Estos valores son muy superiores a los of America Journal 69, 266-272.
Smith, F.W.; Ellis, B. G.; Grova, J. 1957. Use of
considerados como adecuados para los cultivos
acid-fluoride solutions for the extraction of
en la mayora de los suelos.
available phosphorus in calcareous soils and in
soils to which rock phosphate has been added.
4. Referencias
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Wild, A. 1992. Condiciones del suelo y desarrollo
de las plantas segn Russell. Editorial Mundi-
Prensa, Madrid.

223
CAPTULO V:

CONCLUSIONES GENERALES
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo V Conclusiones generales

El estudio de los diferentes mtodos de resultados ponen de relieve que las


extraccin del P disponible aplicados a suelos asociaciones AH-Al(Fe)-P o AH-Al(Fe)-PO
volcnicos como los Andosoles y otros suelos podran ser componentes importantes en estos
de carga variable de Canarias, nos ha permitido extractos. Estas asociaciones podran explicar
acceder a los diferentes comportamientos que la efectividad de la enzima fosfatasa para
presentan estos suelos y que inciden sobre la liberar P de la matriz orgnica soluble en
certidumbre de los datos del P disponible o bicarbonato y su potencialidad como una
lbil en este tipo de suelos dada las herramienta til que nos indicara parte del P
caractersticas de las formas de P que son potencialmente biodisponible por las plantas.
extradas. Los procesos asociados a los Los valores de P microbiano ponen de
equilibrios de solubilidad y a la reversibilidad manifiesto la influencia que los agentes
de los procesos de sorcin-desorcin de las biolgicos pueden tener en los mecanismos de
superficies reactivas parecen sufrir movilizacin o inmovilizacin del P disponible
modificaciones con los procesos analticos de en este tipo de suelos. Nuestros datos
extraccin, favoreciendo la movilidad de este cuestionan, dadas las diferentes fracciones
elemento desde la fase slida, encontradas, el fraccionamiento clsico de P
sobredimensionndose los contenidos en su orgnico e inorgnico asociado a la extraccin
fraccin lbil, entrando en contradiccin con Olsen que, dada la complejidad de las
una de las principales caractersticas de los asociaciones, no podemos considerarlas como
Andosoles: sus elevadas capacidades de lbiles, dbilmente adsorbidos siguiendo la
retencin para el fosfato. clasificacin de Hedley et al. (1982), ni de fcil
disponibilidad para las plantas debido a la
1. Mtodo Olsen y extractos acuosos dificultad que supone el transformarlas en
disponibles.

El mtodo Olsen del que los laboratorios Los resultados de la extraccin con agua

de nuestra regin poseen una enorme cantidad muestran la constancia de los valores en

de datos se presenta como un mtodo que, a disolucin del P liberado desde el suelo con el

diferencia de su aplicacin en otra tipologa de aumento de la relacin w:s. La relativa

suelos, ofrece una enorme variabilidad de las constancia del pH de las suspensiones, la

cantidades extradas debido a la temperatura de disminucin del C orgnico disuelto con la

centrifugacin como al tipo de filtrado, relacin w:s, la presencia de P particulado

asociado al tipo de material que es extrado por asociado al tipo de filtrado realizado y la

el reactivo alcalino. Las asociaciones presencia de una importante cantidad de P

rganominerales y las alofnicas vinculadas al hidrolizable por la enzima fosfatasa indican

P, as como la materia orgnica soluble, se que concurren varios mecanismos que influyen

convierten en rbitros de las cantidades de P en la solubilidad del fosfato. Nuestros

extradas en este tipo de suelos. Nuestros resultados ponen de manifiesto que la


225
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo V Conclusiones generales

solubilidad (disolucin) de los fosfatos de suelo como deficiente en P (<5 mg kg-1),


Al(Fe) y el reparto de P orgnico limitando su disponibilidad a las primeras 24 h
(fundamentalmente de naturaleza flvica) entre de intercambio. La elevada radiactividad
las fases slida y lquida del suelo podran ser remanente, unida a la presencia en los
los mecanismos principales que expliquen el extractos de C orgnico y Al, parece indicar la
comportamiento de la liberacin de P desde el existencia de intercambio de P radiactivo en
suelo al agua en Andosoles y suelos con disolucin con las formas solubles
carcter ndico. Esto reafirma la hiptesis de rganominerales del P presentes en fase
que la principal fuente de P en Andosoles acuosa. Esto pone en tela de juicio la
(rganominerales y alofnicos) son los fosfatos aplicacin de la definicin de P lbil como el
de Al(Fe) y los complejos de P-Al(Fe)-humus intercambiado isotpicamente en Andosoles.
los cuales parecen influir sobre el reparto del P De todas maneras, tenemos que tener
entre el suelo y la disolucin. La solubilidad de precaucin con los errores de certidumbre en la
estos compuestos parece depender del pH del determinacin analtica del P reactivo (en
suelo y de la fuerza inica del medio. algunos casos cercanos al lmite de deteccin),
la presencia de Si y la contribucin de la
2. Intercambio isotpico materia inorgnica y orgnica coloidal a los
valores del parmetro Cp. Por otra parte, el uso

El mtodo de intercambio isotpico, de la MIA como agente extractante del P libre

propuesto como medida del P lbil liberado por el suelo (radiactivo o no) puso de

verdadero del suelo, pone de manifiesto en manifiesto que:

Andosoles y suelos con carcter ndico que las


fracciones activas de Al y Fe as como sus 1) Las extracciones sucesivas con NaCl y

asociaciones con la materia orgnica, NaOH permiten diferenciar diferentes

modifican los parmetros cinticos [r(1)/R y n] fracciones de P.

del proceso de intercambio isotpico del P, 2) El NaCl se ha mostrado como un agente

encontrndose contradicciones entre estos ms selectivo a la hora de extraer la fraccin

datos y aquellos procedentes de las diferentes lbil, obtenindose unos valores de E1min

fracciones intercambiables calculadas a partir acordes con la elevada capacidad para fijar

del modelo compartimental de Fardeau (1993): fosfato que presentan estos suelos. El flujo

los suelos presentaran valores de P disponible neto de transferencia desde la fase slida a la

sin deficiencias aparentes segn los parmetros acuosa del suelo (Fm) tambin est en

cinticos estudiados a pesar de la elevada concordancia con las propiedades de estos

capacidad de retencin de estos suelos. El suelos.

anlisis compartimental (E1min) indica que 3) La presencia de C y Al, adems de P, en los

nos encontramos con valores inferiores al eluatos de NaOH da consistencia a la idea

considerado como lmite para clasificar al de la existencia de complejos


226
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo V Conclusiones generales

rganominerales de P-Al-AF solubles en los de las partculas del suelo a las MIA podra no
extractos acuosos. considerarse como una contaminacin en el
4) La radioactividad remanente en la resina sentido de una adherencia aleatoria. Por tanto,
indica que existe una fraccin de P que es el mecanismo de desorcin de fosfato
resistente a la extraccin sucesiva con estos implicado para la extraccin de P por la MIA
dos eluyentes lo que pone de manifiesto que para este tipo de suelos es probable que no se
existe una fraccin de P ms compleja (de explique simplemente a travs de una reaccin
naturaleza orgnica o compuestos de intercambio aninico.
condensados inorgnicos solubles) que son Por otra parte, el aumento de las
muy afines a la matriz de la membrana. cantidades de P extradas de los suelos (tanto
los extrables por las membranas como el que
3. Resinas de intercambio aninico permanece remanente en disolucin) bien con
el aumento del nmero de MIA o con el

Comparando tres tipos de resinas, aumento de la relacin w:s empleando una sola

observamos la capacidad de las mismas para MIA, as como la del resto de los elementos

dispersar el suelo, con la liberacin destacando de forma especial el Si, estara

concomitante de cantidades importantes de P y asociado a fenmenos dispersivos del suelo.

S que se reparten entre las resinas y las Un aumento de la dispersin por incremento de

suspensiones remanentes de los suelos las cantidades de agua utilizada o por el

estudiados. Los mecanismos implicados ponen aumento del nmero de MIA parece provocar

en evidencia la capacidad de las resinas para la liberacin de formas complejas de P

dispersar el suelo debido a la presencia de asociadas a la materia orgnica, adems de la

asociaciones rganominerales de P y S contribucin de las formas minerales de P

[complejos AH-Al(Fe)-P(S)], cuya solubilidad (variscita y strengita) y los complejos ternarios

parece estar afectada por los equilibrios rganominerales de naturaleza flvica,

qumicos que se establecen durante el proceso provocada por la desagregacin del suelo. Este

de extraccin, y el contenido en Si presente en ltimo fenmeno estara relacionado con la

las suspensiones sobrenadantes. disminucin de la fuerza inica del medio

Por otra parte, el color que presentan las debido al aumento de las relaciones w:s o por

MIA despus de los sucesivos lavados y de su el nmero de MIA aadidas que incrementa la

regeneracin con NaCl 1M nos hace sospechar superficie de contacto e intercambio con el

de la presencia de coloides orgnicos e suelo. Estos resultados ponen de manifiesto la

inorgnicos en las mismas. La buena sensibilidad de los Andosoles y suelos ndicos

reproducibilidad en la extraccin secuencial en general a las condiciones bajo las cuales se

con Cl y bicarbonato, junto con las realiza el proceso de extraccin y que parece

correlaciones observadas entre las fracciones condicionar los valores de P disponible

de P y Al(Fe) y CO, sugieren que la adherencia obtenidos.


227
Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo V Conclusiones generales

La liberacin de P por las diferentes Al comparar mtodos de determinacin de


fracciones granulomtricas (suelo total, arcilla P disponible de rutina (Olsen, soluble y MIA)
y arcilla ultracentrifugada) mediante agitacin observamos que la precisin y reproducibilidad
continua de las suspensiones hasta 96h y del mtodo de la MIA hace de este
extraccin secuencial con MIA, aislada de las procedimiento, a pesar de sus limitaciones, una
suspensiones por un tubo de dilisis de 10000 potente herramienta para acceder a comprender
Da, muestra que despus de siete extracciones la dinmica del P lbil y potencialmente
sucesivas existe una transferencia de materia disponible en estos sistemas de Al(Fe)
desde la fase slida (P, Al, Fe, C y Si). Esto se altamente reactivos.
podra explicar por las perturbaciones del Por ltimo sealar que la extraccin
sistema en su equilibrio fsico-qumico al ser secuencial con MIA sugiere procesos de
sustituida una MIA por otra, la fase slida desagregacin en estos suelos, de elevada
respondera con la liberacin de ms materia estabilidad estructural, que merecen ser
para alcanzar nuevamente el estado de investigados.
equilibrio.
Las relaciones atmicas obtenidas en el 4. Interpretacin del calibrado de P
experimento son compatibles con las
asociaciones del tipo AH-P-Al(Fe) e incluso El calibrado de P en suelos de carga
formas asociadas al Si, con carcter aninico, variable con elevada capacidad de retencin
que pueden ser captadas por la MIA. Estas ponen de manifiesto que:
asociaciones tendran un tamao inferior a a) El fraccionamiento de extractos de
10000 Da impuesto por la membrana de bicarbonato permite estudiar las formas de
dilisis. La relativa constancia de los valores P que pueden ser exploradas por la
de P encontrados para cada una de las micorriza arbuscular para favorecer la
extracciones y que al cabo de 96 h de agitacin nutricin fosfrica de las plantas de las que
continua, el sistema siga liberndolo lleva a son simbiontes, como el tagasaste.
pensar que los procesos de liberacin o b) Los altos porcentajes de P orgnico
desorcin del fosfato parecen depender en degradable por la enzima fosfatasa que
suelos ndicos de los equilibrios fsico- presentaron estos extractos indican que esta
qumicos que se originan en las condiciones fraccin constituye una fuente muy
bajo las cuales se realiza la extraccin. La importante de P potencialmente
extrema sensibilidad de estos suelos a las biodisponible en este tipo de suelos,
condiciones experimentales contribuye a que permitiendo estudiar cmo las plantas
los valores de disponibilidad (asimilabilidad) micorrizadas pueden explorar la fraccin
tengan un alto grado de incertidumbre y que no orgnica del P, movilizndola.
se correspondan a los encontrados en ensayos c) Las extracciones de P, tanto por el mtodo
de campo. Olsen como por el mtodo de MIA, en un
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Negrn Medina Tesis Doctoral (2005) Captulo V Conclusiones generales

ensayo biolgico con maz a dosis El fraccionamiento del P en extractos de


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elevadas de P (hasta 1500 mg P kg suelos dado por Hedley et al. (1982), y sus
suelo), presentan una correlacin elevada sucesivas modificaciones, no es el
con respecto a las dosis aplicadas. adecuado en este tipo de suelos dada las
d) En el caso del Andosol (La Esperanza) la diferentes fracciones o especies de P que
extraccin de P con MIA fue mucho ms se obtienen con procedimientos de
efectiva que con bicarbonato, aunque para extraccin blandos como los empleados
el suelo fersialtico (Karting) las en este trabajo.
cantidades extradas fueron prcticamente La dificultad de utilizar un mtodo
iguales. especfico en la determinacin del P
e) En lneas generales, la precisin y la disponible para suelos de carga variable
reproducibilidad de las MIA fue siempre como los Andosoles y suelos ndicos,
superior al del mtodo Olsen. radica en su reactividad, en las
caractersticas fsico-qumicas de las
5. Consideraciones finales superficies activas y en la dinmica de la
materia orgnica. Esto requiere una
Los resultados obtenidos, junto con los profunda revisin del concepto de
ensayos de calibrado, contribuyen a explicar disponibilidad del P que contemple las
los elevados valores del denominado P ntimas relaciones superficie-disolucin
disponible (por cualquiera de los mtodos que tienen lugar durante la movilizacin
utilizados: Olsen, acuoso y resina) en relacin del nutriente en estos suelos y que permita
con el crecimiento ptimo de los cultivos en desarrollar una metodologa ad hoc,
los siguientes trminos: compatible con un correcto calibrado entre
el P extrado y los rendimientos en los
1.- La ntima relacin observada entre P, cultivos, as como en la determinacin de
Al(Fe) y materia orgnica tanto en fase slida las necesidades de fertilizacin fosfrica
como en disolucin determina una que posibilite la conservacin de estos
concentracin de P libre relativamente baja. suelos mediante un uso racional y
2.- La solubilidad de anlogos amorfos de sostenible de los mismos.
fosfatos tipo variscita y strengita, unido a la
elevada superficie especfica de estos suelos,
determina la capacidad de saturacin de P en
Andosoles y suelos ndicos.
Desde el punto de vista analtico
resaltamos dos conclusiones que afectan
fundamentalmente al proceso de extraccin del
P en estos suelos:
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