Guia Preparacion de Medios de Cultivo

Cdigo: MC-PRP-01
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

PREPARACIN DE MEDIOS DE
Laboratorio de Microbiologa General y Versin: 1
CULTIVO
Microbiologa Farmacutica
Hoja: 1 de 14
Facultad de Ciencias Qumicas
Laboratorio de Microbiologa General Y Farmacutica
Gua para la preparacin de medios de cultivo microbiolgicos.
REDACTADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:

Wendy Olmos Dra. Tern Soto Rommy Ivette Dra. Tern Soto Rommy Ivette
Y Rommy Tern Coordinador de rea Coordinador de rea
FECHA DE REDACCIN: FECHA DE REVISIN: FECHA DE APROBACIN:
Marzo, 2016 Marzo, 2016 Marzo, 2016
Cdigo: MC-PRP-01
CULTIVO
Hoja: 2 de 14
Contenido
INSTRUCCIONES para la PREPARACIN de medios de cultivo MICROBIOLGICOS ................................. 3
PREPARACIN de caldos de cultivo autoclavables. ............................................................................................... 3
PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO Slidos AUTOCLAVABLES. .......................................................... 5
MEDIOS SOLIDOS DISTRIBUIDOS EN CAJAS .................................................................................................. 5
MEDIOS SOLIDOS DISTRIBUIDOS EN TUBOS ................................................................................................. 7
PREPARACIN de medios de cultivo SLIDOS NO autoclavables..................................................................... 8
PREPARACIN de medios de cultivo especiales .................................................................................................. 10
BAIRD-PARKER Agar ............................................................................................................................................. 10
Agar sangre Humana............................................................................................................................................... 11
Urea Agar .................................................................................................................................................................. 13

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Hoja: 3 de 14
INSTRUCCIONES PARA LA PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO MICROBIOLGICOS

1. Buscar el nombre del medio que se va a preparar en la LISTA DE MEDIOS DE CULTIVO EN
ORDEN ALFABETICO localizada en la carpeta correspondiente.
2. Esta lista se encuentra en orden alfabtico y en ella se puede observar el nombre del medio de
cultivo en espaol, sus siglas (cuando corresponda), el cdigo del medio de cultivo, el nmero de
frascos disponibles y la fecha de caducidad. Si hay varios frascos del mismo medio debe
asegurarse que se abre el que est en uso.
3. Leer cuidadosamente las instrucciones del fabricante para la preparacin del medio de cultivo, est
informacin se localiza en el frasco.
En la siguiente seccin se darn ejemplos de cmo preparar los medios ms comnmente usados en
el laboratorio.
PREPARACIN DE CALDOS DE CULTIVO AUTOCLAVABLES.

Los caldos (broth en ingls) son medios de cultivo lquidos que se distribuyen en tubos o Erlenmeyers y que NO
contienen agar.
1. Buscar el nombre del medio que se va a preparar en la LISTA DE MEDIOS DE CULTIVO EN ORDEN
ALFABETICO.
informacin se localiza en el frasco.
3. Determinar el volumen de medio de cultivo a preparar, esto depende del nmero de tubos o
Erlenmeyers y del volumen de medio en cada uno.
Ejemplo:
Preparar 20 tubos con 10 ml de caldo TSB
Nmero de tubos: 20
Volumen de medio por tubo: 10 ml
4. Clculo: Todos los clculos deben hacerse en el cuaderno de laboratorio. NO se aceptar el uso
de hojas sueltas.
5. Calcular la cantidad de medio de cultivo a pesar, esto depende del volumen de medio a preparar y de
la relacin peso-volumen del medio.

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Hoja: 4 de 14
La relacin peso-volumen es propia de cada medio de cultivo, est dada por el fabricante y se encuentra
detallada en el frasco que contiene el medio en la PREPARACIN (instrucciones del fabricante). Esta
relacin por lo general es a un litro.
Ejemplo:
Preparar 20 tubos con 10 ml TSB
Volumen de medio de cultivo a preparase: 200 ml
La relacin peso-volumen del medio TSB indicada en el frasco es: 30g/L o 30g/1000 ml.
Clculo (se realiza un regla de tres simple):
Si para preparar 1000 ml de medio se necesita 30 g de medio slido para preparar 200 ml cuntos g
necesitamos:
1000 ml de medio 30 g medio en polvo
200 ml de medio Xg
6. Pesar la cantidad exacta de medio de cultivo.

7. Etiquetar un Matraz de Erlenmeyer con el nombre del medio. OJO se controlar que los alumnos
etiqueten correctamente los matraces.
8. Al matraz de Erlenmeyer etiquetado aadir la mitad del volumen de agua destilada del volumen de
medio de cultivo a preparar y la cantidad de medio pesado.
9. Despus de que el polvo y el agua destilada se mezclen totalmente, aadir el resto del agua destilada
hasta completar el volumen deseado (200ml en este ejemplo), teniendo la precaucin de arrastrar
todos los restos de la pared del recipiente.
10. Si es necesario calentar el medio hasta disolucin (NO sobrecalentar), para esto se debe tapar el
matraz con papel aluminio y hacer en l pequeos agujeros.
11. Etiquetar con un marcador el nombre del medio en cada uno de los tubos en los que se va a distribuir
el medio.
12. La distribucin del medio en los tubos se hace con una pipeta (no se necesita que sea estril pero si
limpia) y con la pera de succin, los tubos se tapan con tapones de gaza o tapas rosca (en este caso
no apretar muy fuerte la rosca).
13. Para autoclavar se debe colocar los tubos con el medio en latas destinadas para ello. Cada lata se
tapa con papel empaque en el que se especifica el nmero de tubos, el medio que contienen, la fecha
de preparacin y el cdigo de la persona que los prepar.
14. Una vez que los tubos salen del autoclave se dejan enfriar y se guardan en refrigeracin hasta su uso.

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PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO SLIDOS AUTOCLAVABLES.

Los medios slidos contienen agar, que es un agente solidificante y pueden ser distribuidos en cajas o
tubos segn el ensayo.
MEDIOS SOLIDOS DISTRIBUIDOS EN CAJAS
ALFABETICO
informacin se localiza en el frasco que contiene el medio.
3. Determinar el volumen de medio de cultivo a preparar, esto depende del nmero de cajas y del
volumen de medio por caja, por lo general 25 ml.
Ejemplo:
Preparar 20 cajas de TSA (Tripticasa Soya Agar)
Nmero de cajas: 20
Volumen de medio por caja: 25 ml
Clculo: Todos los clculos deben hacerse en el cuaderno de laboratorio. NO se aceptar el
uso de hojas sueltas.
4. Calcular la cantidad de medio de cultivo a pesar, esto depende del volumen de medio a prepararse y
de la relacin peso-volumen del medio.
detallada en el frasco. Esta relacin por lo general es a un litro.
Continuando con el ejemplo anterior:
La relacin peso-volumen del medio TSA indicada en el frasco es: 40g/L o 40g/1000 ml.
5. Si para preparar 1000 ml de medio se necesita 40 g de medio slido para preparar 500 ml cuntos g
necesitamos:
1000 ml de medio 40 g medio slido
500 ml de medio Xg

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7. ETIQUETAR un Matraz de Erlenmeyer con el nombre del medio, el nmero de cajas a preparar y el
cdigo de la persona o grupo responsable. La capacidad del Matraz de Erlenmeyer debe ser mayor al
volumen de medio de cultivo a preparar, de lo contrario el medio se regar en el autoclavado. En este
ejemplo para los 500ml deber usar un matraz de 1000ml.
8. Al matraz aadir la mitad del volumen de agua destilada y el medio pesado.
9. Disolver los 20g del medio en 250ml de agua destilada en un matraz de 1000 ml, una vez disuelto
completar el volumen con los 250 ml restantes.
10. Tapar el matraz con papel aluminio con pequeos agujeros y calentar hasta disolucin total en la
cocineta, para ello agitar repetidamente y evitar que el medio de cultivo se derrame.
11. Para autoclavar el medio, se reemplaza el papel aluminio por un tapn de gasa que se cubre con papel
empaque y se sujeta con piola. Escribir en el papel del tapn el nombre del medio de cultivo, nmero
de cajas y cdigo del alumno que prepara el medio.
Una vez que el medio sale del autoclave, se procede a la reparticin en cajas para lo cual se trabaja en el
interior de la cabina.
12. Limpiar la cabina con alcohol etlico y encender el mechero.
13. Sacar las cajas Petri estriles de su empaque cuidando de no destaparlas.
14. Etiquetar cada caja en la BASE SOLO CON EL NOMBRE DEL MEDIO EN SIGLAS.
15. Antes de distribuir el agar en cajas Petri, se debe esperar a que el medio tenga una temperatura de 45-
50C. Si la temperatura es ms alta, habr excesivo vapor de agua en las cajas, lo cual puede afectar
la calidad de los cultivos.
16. Distribuir el medio en la cajas:
a. Destapar el medio en la cabina, agitarlo suavemente para homogenizar y flamear bien la boca
del Erlenmeyer para evitar contaminacin.
b. Levantar la tapa de la caja solamente lo suficiente para que penetre la boca del matraz
c. Verter lentamente el medio hasta ms de la mitad de la caja, evitando la formacin de burbujas.
Si se forman burbujas en la superficie del medio ya distribuido en la caja, flamear con ayuda de
un mechero hasta desaparecer las burbujas.
d. Cerrar la caja.
17. Dejar enfriar las cajas tapadas a temperatura ambiente, en una superficie horizontal y no moverlas
hasta que el medio se solidifique.
18. Una vez que el medio ha solidificado (aproximadamente 1 hora), guardar las cajas en posicin invertida
(la tapa hacia abajo) en una funda plstica y etiquetada con el nombre del medio y nmero de cajas
que contiene.
19. Guardar en refrigeracin.
Notas:
Si al momento de distribuir el medio en las cajas este empieza a solidificar hay que recalentarlo tapado hasta que est completamente
fundido. Este procedimiento no es recomendable porque el medio pierda calidad, de manera que hay que evitarlo.
No pipetear el agar fundido esto ocasiona que las pipetas se tapen.

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MEDIOS SOLIDOS DISTRIBUIDOS EN TUBOS

ALFABETICO.
2. Leer cuidadosamente la PREPARACIN (instrucciones del fabricante) del medio de cultivo, est
3. Determinar el volumen de medio de cultivo a preparar, esto depende del nmero de tubos y del
volumen de medio por tubo.
Ejemplo:
Preparar 20 tubos con 10 ml de TSI
Nmero de tubos: 20
Volumen de medio por tubo: 10 ml
Clculo:
detallada en el frasco que contiene el medio en la PREPARACIN (instrucciones del fabricante). Esta
relacin por lo general es a un litro.
Ejemplo:
Preparar 20 tubos con 10 ml TSI (Triple Sugar Iron)
Volumen de medio de cultivo a preparase: 200 ml
La relacin peso-volumen del medio TSI indicada en el frasco es: 65g/L o 65g/1000 ml.
necesitamos:
200 ml de medio Xg

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Hoja: 8 de 14

6. Etiquetar un Matraz de Erlenmeyer con el nombre del medio.
7. Al matraz aadir la mitad del volumen de agua destilada y el medio pesado.
8. Despus de que el polvo y el agua destilada se mezclen totalmente, aadir el resto del agua destilada
hasta completar el volumen deseado, teniendo la precaucin de arrastrar todos los restos de la pared
del recipiente.
9. Tapar el matraz con papel aluminio y hacer pequeos agujeros calentar hasta disolucin total, para ello
agitar repetidamente y evitar que el medio de cultivo se derrame.
10. Etiquetar con el nombre del medio cada uno de los tubos en los que este se va a distribuir.
11. La distribucin del medio de cultivo en cada uno de los tubos, se puede realizar de dos formas:
a. Por comparacin con un tubo lleno de agua con el volumen de medio que se quiere medir en cada
tubo.
b. Medir el volumen que va en cada tubo con agua y marcar los tubos con un marcador y
posteriormente agregar el medio hasta dicha marca.
No pipetear el agar fundido esto ocasiona que las pipetas se tapen.
12. Para autoclavar se debe colocar los tubos con el medio en latas destinadas para ello. Cada lata se
tapa con papel empaque en el que se especifica cuantos tubos, el medio que contienen, la fecha de
preparacin y el cdigo de la persona que los prepar.
Notas:
Una vez que los tubos salen del autoclave hay que considerar si deben solidificarse inclinados o en
posicin vertical. Estas especificaciones estn en el frasco del medio. FAVOR LEER CUIDADOSAMENTE
LAS INSTRUCCIONES.
13. Una vez solidificado el agar en los tubos, estos se dejan enfriar y se guardan en refrigeracin en la lata
con el papel en el que consta el nombre del medio y el cdigo de quien los prepar.
PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO SLIDOS NO AUTOCLAVABLES.

Estos medios se caracterizan porque algunos de sus componentes pueden degradarse por accin del
calor, de manera que su preparacin es particular. Ej. Medio SS (Salmonella-Shigella).
LEER cuidadosamente las instrucciones de cada medio y si no est seguro de cmo prepararlo debe
solicitar AYUDA a la profesora o ayudante.
ALFABETIVO
informacin se localiza en el frasco que contiene el medio. Identificar la frase: NO AUTOCLAVE.
3. Determinar el volumen de medio de cultivo a preparar.

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Hoja: 9 de 14
4. El agua para preparar este tipo de medios debe estar previamente esterilizada, para lo cual, se coloca
el volumen de agua destilada en el matraz, se tapa con el tapn de gasa y se sujeta con piola. Hay que
etiquetar el matraz con el nombre del medio de cultivo para el que se va usar el agua y el volumen.
5. Luego de que el agua ha salido del autoclave, se debe trabajar en una cabina.
6. Limpiar la cabina con alcohol etlico y encender el mechero.
8. Pesar la cantidad exacta de medio de cultivo en la balanza que est dentro de la cabina con el
mechero encendido.
9. Destapar en la cabina, el matraz que contiene el agua previamente esterilizada y flamear bien la boca
del Erlenmeyer para evitar contaminacin.
10. Adicionar el medio pesado.
11. Volver a tapar el matraz y calentar el medio hasta disolucin total, para ello agitar repetidamente y
evitar que el medio de cultivo se derrame. No quitar el tapn durante en calentamiento, recuerde que el
medio est ESTERIL.
12. Sacar las cajas Petri estriles de su empaque cuidando de no destaparlas.
13. Etiquetar cada caja en la BASE SOLO CON EL NOMBRE DEL MEDIO EN SIGLAS.
14. Antes de distribuir el agar en cajas Petri, se debe esperar a que el medio tenga una temperatura de 45-
50C. Si la temperatura es ms alta, habr excesivo vapor de agua en las cajas, lo cual puede afectar
la calidad de los cultivos.
15. Distribuir el medio en la cajas:
a. Destapar el medio en la cabina, agitarlo suavemente para homogenizar y flamear bien la boca del
Erlenmeyer para evitar contaminacin.
b. Levantar la tapa de la caja solamente lo suficiente para que penetre la boca del matraz
c. Verter lentamente el medio hasta ms de la mitad de la caja, evitando la formacin de burbujas. Si
se forman burbujas en la superficie del medio ya distribuido en la caja, flamear con ayuda de un
mechero hasta desaparecer las burbujas.
d. Cerrar la caja.
16. Dejar enfriar las cajas tapadas a temperatura ambiente, en una superficie horizontal y no moverlas
hasta que el medio se solidifique.
17. Una vez que el medio ha solidificado (aproximadamente 1 hora), guardar las cajas en posicin invertida
(la tapa hacia abajo) en una funda plstica y etiquetada con el nombre del medio y nmero de cajas
que contiene.

Cdigo: MC-PRP-01
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Hoja: 10 de 14
PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO ESPECIALES

Son medios en los que primero se debe preparar una base que si es autoclavable y a la que se adiciona
un compuesto termosensible (no autoclavable).
Ejemplos de este tipo de medios son:
Baird-Parker Agar
Agar sangre
Urea agar
BAIRD-PARKER Agar
En este caso se hace la explicacin para la preparacin de 40 cajas (1litro de medio).
PREPARACIN DE LA BASE:
1. Buscar el medio Baird-Parker agar base en la lista de medios.
2. Suspender 60 g del polvo en 940 ml de agua destilada.
3. Dejar en reposo 5 a 10 minutos.
4. Calentar agitando frecuentemente y hervir durante 1 minuto, hasta disolucin total.
5. Esterilizar en autoclave a 121C durante 15 minutos.
6. Para la preparacin de este medio debe tambin esterilizar:
a. 10 ml de agua destilada en un tubo, etiquetado como agua para teluritos.
b. 50 ml de agua destilada en un frasco de vidrio (Gatorade) etiquetado como agua para
emulsin de yema de huevo.
c. Un frasco de vidrio Gatorade vaco.
d. Dos pipetas de 10 ml.
Luego del autoclavado (el siguiente procedimiento se debe realizar en las cabinas o en una zona estril).
PREPARACION DE LA SOLUCION NO AUTOCLAVABLE:

Preparacin de la solucin yema de huevo-telurito
1. En un vaso de precipitacin colocar un huevo y cubrirlo con alcohol etlico. Dejarlo reposar por medio
hora.
2. Preparar una solucin de telurito de potasio al 1%: Pesar 0,1 g de telurito de potasio y disolver en los
10 ml agua destilada estril etiquetada como agua para teluritos (esta solucin debe ser preparada en
la cabina).
3. En el frasco de vidrio vaco estril poner SOLO la yema de huevo y adicionar los 50 ml de agua
destilada estril etiquetada con el nombre agua para emulsin de yema de huevo (este procedimiento
debe llevarse a cabo en la cabina).
4. Enfriar la base del medio de cultivo a 45-50C y agregar los 10 ml de la solucin de telurito de potasio
al 1% y los 50 ml de la emulsin de yema de huevo (usar las pipetas estriles).
5. Mezclar suavemente y distribuir el medio en cajas previamente etiquetadas EN LA BASE SOLO CON
EL NOMBRE DEL MEDIO EN SIGLAS.
4. Empacar en fundas y guardar en refrigeracin.

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CULTIVO
Hoja: 11 de 14
Agar sangre Humana

PREPARACION DE LA BASE:
1. Buscar el medio TSA que sirve como base para preparar el medio agar sangre.
3. Determinar el volumen de medio de cultivo a preparar, esto depende del nmero de cajas y del
volumen de medio por caja, por lo general 25 ml.
Ejemplo:
Preparar 20 cajas de TSA (Tripticasa Soya Agar)
Nmero de cajas: 20
Volumen de medio por caja: 25 ml
Clculo:
Continuando con el ejemplo anterior:

La relacin peso-volumen del medio TSA indicada en el frasco es: 40g/L o 40g/1000 ml.
necesitamos:
500 ml de medio Xg
4. Disolver los 20g del medio en 250ml de agua destilada en un matraz de 1000 ml, una vez disuelto
completar el volumen con los 250 ml restantes.
5. Tapar el matraz con papel aluminio con pequeos agujeros y calentar hasta disolucin total en la
cocineta, para ello agitar repetidamente y evitar que el medio de cultivo se derrame.
6. Para autoclavar el medio, se reemplaza el papel aluminio por un tapn de gasa que se cubre con
papel empaque y se sujeta con piola. Escribir en el papel del tapn el nombre del medio de cultivo,
nmero de cajas y cdigo del alumno que lo prepar.
7. Esterilizar en autoclave a 121C durante 15 minutos.

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CULTIVO
Hoja: 12 de 14
PREPARACION DE LA SECCION NO AUTOCLAVABLE:

1. Calcular la cantidad de sangre necesaria para el volumen del agar base previamente preparado. La
sangre debe ser el 5% del volumen total de medio.
Ejemplo:
Si por cada 100 ml de medio TSA se necesitan 5 ml sangre, para 500 ml de TSA cuntos ml de sangre se
necesitara:
100 ml deTSA 5ml de sangre
500 ml de TSA X ml de sangre
= 500 5 100 = 25ml

2. Extraer aspticamente la cantidad de sangre necesaria (es recomendable sacar 2 ml adicionales de
sangre). La sangre debe desfibrinarse antes de ser adicionada a la base. Para lo cual se coloca la
sangre bajo condiciones aspticas en un matraz que previamente se envi a esterilizar y que contiene
vidrios rotos, se mezcla la sangre con movimientos uniformes por unos 5 minutos.
El siguiente procedimiento se debe realizar en las cabinas o en una zona estril.
3. Enfriar el medio TSA hasta 45-50C y agregar la cantidad de sangre humana extrada desfibrinada.
(OJO: si se agrega la sangre cuando el medio est ms caliente que la temperatura recomendada se
formar agar chocolate en vez de agar sangre).
4. Homogeneizar evitando la formacin de burbujas y distribuir en las cajas previamente etiquetadas.
5. Empacar en fundas y guardar en refrigeracin.

Cdigo: MC-PRP-01
CULTIVO
Hoja: 13 de 14
Urea Agar
PREPARACION DE LA BASE:
1. Buscar el nombre del medio que se va a preparar en la LISTA DE MEDIOS DE CULTIVO EN
ORDEN ALFABETICO
informacin se localiza en el frasco del medio.
3. Determinar el volumen de medio de cultivo a preparar, esto depende del nmero de tubos y del
volumen de medio por tubo (10 ml).
4. Calcular la cantidad de medio de cultivo a pesar, esto depende del volumen de medio a prepararse
y de la relacin peso-volumen del medio
5. Suspender X g del polvo en agua destilada. Mezclar para obtener una suspensin homognea.
Calentar con agitacin frecuente y hervir 1 minuto.
6. Esterilizar el medio en autoclave a 121C durante 15 minutos.
7. Para la preparacin de este medio debe tambin esterilizar:
a. Latas que contengan el nmero de tubos VACIOS etiquetados que necesita preparar. Cada
lata se tapa con papel empaque en el que se especifica el nmero de tubos vacos, el medio
y el cdigo de la persona que prepara el medio.
b. 50 ml agua destilada en un matraz, etiquetado como agua para urea"
c. Un frasco de vidrio Gatorade vaco.
d. Una pipeta de 10 ml.
PREPARACION DE LA SECCION NO AUTOCLAVABLE:

1. Calcular el volumen de solucin de urea al 40% necesario para el volumen de UREA AGAR BASE
preparado.
Ejemplo.
Volumen de UREA AGAR BASE preparado: 200 ml.
OJO: por cada litro de UREA AGAR BASE agregar 50 ml de solucin de urea al 40%.
1000 ml de medio 50ml de solucin de urea al 40%
200 ml de medio X ml de solucin de urea al 40%
2. Calcular los gramos de urea necesarios para preparar una solucin al 40%.
Ejemplo (continuacin del ejemplo anterior):

Cdigo: MC-PRP-01
CULTIVO
Hoja: 14 de 14
Volumen de solucin de urea al 40%: 10 ml

Relacin de urea/agua: 40g/100ml
100 ml de una solucin de urea al 40% 40 g urea
10 ml de una solucin de urea al 40% X g urea
El siguiente procedimiento se debe realizar en las cabinas o en una zona estril.

3. Al frasco de vidrio vaco estril, transferir con la pipeta tambin estril los 10 ml de agua destilada
estril necesarios para preparar la solucin de urea al 40 %.
En el mismo frasco pesar los 4 g de urea necesarios para preparar la solucin de urea al 40%. La urea
est en el armario de reactivos
4. Tapar y agitar hasta disolver completamente la urea.
5. Enfriar el medio UREA AGAR BASE a 45-50C y agregar toda la solucin de urea al 40 %
anteriormente preparada.
6. Homogeneizar y distribuir el medio de cultivo en los tubos estriles previamente etiquetados. Esto se
puede realizar comparando cada tubo con un tubo lleno de agua con el volumen de medio que se
quiere en cada tubo.
7. INCLINAR los tubos en forma de pico de flauta y dejar que solidifiquen.
8. Colocar los tubos con el medio en latas, cada lata se tapa con papel empaque en el que se especifica
el nmero de tubos, el medio que contienen UREA, la fecha de preparacin y el cdigo de la persona
que los prepar.


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Gua para la preparacin de medios de cultivo microbiolgicos.

REDACTADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:

PREPARACIN de caldos de cultivo autoclavables. ............................................................................................... 3

PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO Slidos AUTOCLAVABLES. .......................................................... 5

MEDIOS SOLIDOS DISTRIBUIDOS EN CAJAS .................................................................................................. 5

MEDIOS SOLIDOS DISTRIBUIDOS EN TUBOS ................................................................................................. 7

PREPARACIN de medios de cultivo SLIDOS NO autoclavables..................................................................... 8

PREPARACIN de medios de cultivo especiales .................................................................................................. 10

BAIRD-PARKER Agar ............................................................................................................................................. 10

Agar sangre Humana............................................................................................................................................... 11

Urea Agar .................................................................................................................................................................. 13

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INSTRUCCIONES PARA LA PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO MICROBIOLGICOS

PREPARACIN DE CALDOS DE CULTIVO AUTOCLAVABLES.

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6. Pesar la cantidad exacta de medio de cultivo.

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PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO SLIDOS AUTOCLAVABLES.

6. Pesar la cantidad exacta de medio de cultivo.

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MEDIOS SOLIDOS DISTRIBUIDOS EN TUBOS

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5. Pesar la cantidad exacta de medio de cultivo.

PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO SLIDOS NO AUTOCLAVABLES.

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PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO ESPECIALES

PREPARACION DE LA SOLUCION NO AUTOCLAVABLE:

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Agar sangre Humana

Continuando con el ejemplo anterior:

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PREPARACION DE LA SECCION NO AUTOCLAVABLE:

100 ml deTSA 5ml de sangre

500 ml de TSA X ml de sangre

= 500 5 100 = 25ml

REDACTADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:

PREPARACION DE LA SECCION NO AUTOCLAVABLE:

Clculo (se realiza un regla de tres simple):

1000 ml de medio 50ml de solucin de urea al 40%

200 ml de medio X ml de solucin de urea al 40%

REDACTADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:

Volumen de solucin de urea al 40%: 10 ml

100 ml de una solucin de urea al 40% 40 g urea

10 ml de una solucin de urea al 40% X g urea

El siguiente procedimiento se debe realizar en las cabinas o en una zona estril.

REDACTADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:

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