Receptores

y
Transduccin de seales

Sistemas y niveles de regulacin

biolgica

Fisiologa sistmica Mensajero endocrino

Evolucin

Fisiologa regional Mensajero paracrino

Fisiologa celular y tisular Mensajero autocrino

E

Homeostasis nuclear Mensajero intracrino

1
 La comunicacin clula-clula por
seales extracelulares involucra seis
pasos
Sntesis de la molcula de sealizacin
por la clula sealizadora
Liberacin de la molcula de sealizacin
por la clula sealizadora
Transporte de la seal a la clula blanco
Deteccin de la seal por un receptor
especfico
Remocin de la seal, terminando as la
respuesta celular

Las molculas de sealizacin

funcionan a distintas distancias

2
 TRANSDUCCION DE SEALES
(Cell Signaling- Signal transduction):

TRANS (al otro lado) - DUCTO (que lleva)

Son los eventos moleculares de transferencia

de informacin vectorial que ocurren dentro
de las clulas o entre ellas y que relacionan
los cambios externos con las
correspondientes respuestas internas.

Objetivos de la transduccin de
seales

Comunicar una seal del mundo exterior

al mundo interior de una clula
(extraorganismo)
Comunicar una clula con otra clula
(intraorganismo)
Amplificar y decodificar la seal

3
 Tipos de seales
transduccionales
1 mensajeros Seal

2 mensajeros Recepcin
Amplificacin
3 mensajeros Transduccin

Respuesta(s)

SIGNALOSOMA
Cada tipo celular expresa un repertorio nico de genes
que codifican para componentes transduccionales.

En las etapas finales del desarrollo, las clulas

expresan un fenotipo particular y este proceso de
diferenciacin celular incluye la expresin de un set
distintivo de componentes transduccionales que
controla
t l sus funciones
f i particulares.
ti l

4
Un remodelado anormal de los sealosomas origina
defectos en la transduccin de seales que tiene como
consecuencia la gnesis de enfermedades.

5
 Alfabetos

Son agrupacin de smbolos con

un orden determinado.

Se utiliza en el lenguaje escrito y

sirve para comunicarse.

Primeros mensajeros
Son los caracteres de un alfabeto biolgico de
comunicacin entre clulas ppara regular
g una
determinada funcin o proceso

La comunicacin mediante primeros mensajeros

Es un proceso indispensable en los seres

pluricelulares debido a su especializacin
celular
Esencial para la regulacin de la homeostasis
(mantencin del medio interno)

6
 Primeros mensajeros
Hormonales (polipptidos, esteroides)
Fsicos (radiaciones, presin, etc)
Metablicos (glucosa, lpidos, H+, etc)
Protenas (ECM, receptores de otras
clulas, etc)
Factores de crecimiento
Neurotransmisores

Papel de los primeros

mensajeros
Regulan el funcionamiento bsico y
normall d
de llas clulas
l l
Metabolismo bsico (regulacin de las
vas bioqumicas)
Respuesta celular (transcripcin gnica)
Proliferacin celular (ciclo celular)
Movimiento celular (matriz extracelular)
Crecimiento celular (organognesis)

7
 Homeostasis energtica
Molculas que transportan energa
Entre clulas (glucosa y cidos grasos)
Dentro de la clula (ATP, NADH/NADPH)

Regulacin de la energa
Catecolaminas: movilizacin urgente de energa
Glucagn: movilizacin de energa
Insulina: almacenar energa

Un ejemplo concreto:

Emisor Receptor
Clulas con
Clulas pancreticas
receptores Insulina

Mensaje Respuesta
Glucosa
DECODIFICACION
CODIFICACION DECODIFICACION Ingreso
sangre GLUT-4 glucosa
Insulina

8
 Cmo se reconocen y decodifican
estos mensajes?

Mecanismo de Accin
Receptores de Superficie
Los receptores para las hormonas
proteicas peptdicas,
proteicas, peptdicas catecolaminas y
eicosanoides estn localizados en la
membrana plasmtica.

La unin del ligando a su receptor

i i i una serie
inicia i de
d eventos
t que llevan
ll a
la generacin de los segundos
mensajeros dentro de la clula.

9
 Interaccin 1 mensajero-receptor:
evento determinante de una respuesta
biolgica
M + R M:::R
N y tipos de
enlaces qumicos

Cantidad de mensaje
(concentracin)
Afinidad
Nmero o densidad Alta
Tipo de receptores Baja

Tipos de uniones

Situacin real (unin total)

L*+ R + X L*:::R + L*..X
Unin inespecfica: exceso L
L*+ R + X+ L L:::R + L*..X

10
 Ecuacin de Scatchard
Linearizacin de una curva de
saturacin
B/F

B/F = A- m B m
n

A: intercepto eje Y
Pendiente = m = Ka
Kd: constante disociacin: 1/Ka 1/m B
Si B/F = 0 n : nmero de receptores

Transduccin de seales
Es un proceso dinmico en la que hay
mecanismos de encendido (ON) para que la
informacin fluye ro debajo de la va en respuesta
al estmulo externo (flechas verdes) y tambin
aquellos opuestos (mecanismos de apagado o
OFF) que permiten desconectar el sistema de
transduccin una vez que el estmulo externo ha
cesado su accin (flechas rojas).

11
Mecanismos de transferencia de informacin

Cambio en el estado de actividad de un componente

upstream
t lleva
ll a un cambiobi en la
l actividad
ti id d del
d l
componente down-stream.

Cambio es generalmente vectorial

Cambio puede conducir ya sea a activacin o

inhibicin. Esta es una interaccin especifica. (ej.
fosforilacin de un blanco puede aumentar o reducir
su actividad)

Vas versus redes (networks)

Las vas generalmente involucra una cascada de

reacciones simples que conducen al flujo de
informacin.

Ejemplos de vas
1) Vas asociadas a protenas G
2) Va RTKRasMAPK
3) Va receptor citokinaJAK-Stat

12
 Va transduccional lineal
Seal: NE, LH

Receptor: beta1-AR, LHR

Efector Adenilato ciclasa a g
b
cAMP ATP Transductor
2 mensajero Gs heterotrimrica
cAMP
Protena Kinasa A

Protenas fosforiladas
Cambio en actividad de enzimas,
canales, factores de transcripcin

Metabolismo glucosa
+ Contractilidad cardiaca
Expresin gnica

Vas versus Networks

Networks se originan de las interacciones

d d un componente
donde t de
d una va
regula
l la
l
actividad de una segunda va.

Un ejemplo de un network:
Interacciones entre vas RTKRasMAPK y RTK-PLC-PKC

13
 Consecuencia del networking: un loop de
retroalimentacin que tiene biestabilidad

RTK
SOS Ras
Grb2 c-Raf
PLC- GAP

IP3 DAG

Ca2+ PKC MEK-1,2

AA

cPLA2 MAPK-1,2
Activacin
persistente
Bhalla & Iyengar (1999)
Estimulacin proliferacin
Science 283:381

Tipos de receptores de membrana

14
 Evolutionary origins of the human plasma membrane
signaling receptor families

Los 6 criterios para ser un 2 mensajero:

1. Deben imitar la accin biolgica del 1 mensajero
2. Son compuestos qumicos de masa molecular pequea que
difunden al interior de la clula,
clula transportando informacin.
informacin
3. Sus concentraciones intracelulares se modifican espacial y
temporalmente.
4. Son generados enzimticamente o liberados desde
reservorios intracelulares especficos
5. Son efmeros es decir tienen una vida media muy corta pues
son rpidamente
id t degradados
d d d por sistemas
i t enzimticos
i ti o
almacenados en reservorios intracelulares especficos.
6. Son reconocidos por dominios especficos en efectores
proteicos, regulando actividad biolgica de enzimas,
canales, transportadores, factores de transcripcin, etc.

15
 Clasificacin de 2 mensajeros
1. Mensajeros hidroflicos
Son solubles en agua
Residen en el citosol
p
Interaccionan con sus efectores en este compartimento
Ejemplos: cAMP, cGMP, IP3 y calcio

2. Mensajeros hidrofbicos
Se encuentran o generan en membranas biolgicas
(plasmtica, ncleo, etc)
Difunden en la membrana para acceder a sus protenas
efectoras de membrana y regulan su actividad.
Ejemplos: diacilglicerol, PIP2, PIP3

3. Mensajeros gaseosos
NO y CO

2 mensajeros

16
 Cmo actan estos 2M
hidrofbicos o hidroflicos?

17
 G-Protein Coupled
p Receptor
p
(GPCR)

Receptores acoplados a protena G

Sistema receptor de membrana

Receptor - Transductor - Amplificador

Reconoce seal Decodifica seal Genera 2 mensajero

externa Multiplica seal

18
 Receptores de membrana acoplados a
protena G (GPCR)

GPCRs
Son protenas integrales de membrana que tienen:
7 dominios hidrofbicos = 7 hlices transmembrana

Funciones: reconocer seales externas y tranducir

desde afuera hacia adentro

Activan protenas G heterotrimricas, las que

activan o inhiben un efector: ej. adenilil ciclasa,
fosfolipasas o canales onicos

19
 GPCRs

Son el blanco del 50% de los actuales frmacos.

Regulan virtualmente todos los procesos fisiolgicos

conocidos en los mamferos.

Son la 4 superfamilia en el genoma humano con ms de

1.000 genes.

Son activados por hormonas, quimioquinas,

neurotransmisores, ones, odorantes, palatantes,
fotones de luz.

Modificaciones post-transduccionales
Glicosilacin
Contribuye a estabilidad, afinidad por ligando y
transduccin.

Palmitoilacin
Forma 4 loop intracelular
Modula internalizacin, desensibilizacin
Contribuye a acoplamiento de ERK a algunos
receptores

Fosforilacin

20
Receptores de membrana de 7
hlices ms importantes

Estructura de los GPCRs:

7 HELICES

21
Nomenclatura en la estructura
del GPCRs

22
 CR: chimeric receptors

Principales dominios funcionales

en la estructura del GPCRs

23
 GPCRs
Sitios para acoplamiento y activacin de protena G estn
principalmente en el 3 loop intracelular, pero tambin en el 2
loopp y dominio COOH-terminal

* * *

Promiscuidad en acoplamiento a protena G

Transicin de estado inactivo a uno activo: reorganizacin de las

hlices TM3 y TM6

Caractersticas estructurales
generales
Un segmento amino terminal extracelular (7-595 aa)
Ncleo del receptor : 7 segmentos de transmembrana
(20-27 aa)
3 loops extracelulares (5-230 aa)
3 loops intracelulares (5-230 aa)
Segmento COOH terminal intracelular (12-359 aa)
4 loop intracelular es palmitoilado en Cys.
Existe una pequea correlacin entre el tamao del
segmento N terminal y el tamao del ligando
Segmento amino terminal (glicosilacin y unin del
ligando)
Segmento carboxilo terminal (palmitoilacin y
fosforilacin, permitiendo la desensibilizacin e
internalizacin del receptor)

24
Los TM varan en longitud y pueden extender ms all de la
bicapa lipdica
Los extremos son irregulares y dinmicos
TMs 1, 4 y 7 son ms hidrofbicos que TMs 2,3,5 y 6,
conteniendo residuos aminoacdicos neutros y/o inicos
TM 1,4
TMs 1 4 y 7 tienen
ti slo
l un residuo
id hidroflico
hid fli (Ser
(S o Asn)
A )
Residuos de prolina ayudan a torcer el ncleo de la hlice en
26 y modificar la estructura global de la protena.
Algunos TMs estn inclinadas en la membrana
TMs 3,5 y 6 protruyen ms que los otros sobre la membrana
hacia el extracelular
TMs a menudo contienen residuos de Cys y algunos estn
formando puentes GSSG.

25