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1. Cul es la utilidad de los colorantes en la microbiologa?

2. Que es un mordiente?

3. Que son colorantes positivos y colorantes negativos?

4. Como realizara usted el control de calidad de la coloracin de Gram?

5. Enuncie cinco microorganismos para cada tipo de morfologa (cocos,


bacilos, espirales, cocobacilos)

6. Mencione cinco microorganismos que tengan la capacidad de


desarrollar esporas?

7. Porque las esporas son ms resistentes a las condiciones


ambientales?

8. Mencione tres microorganismos capsulares?


1. Los colorantes son de gran utilidad, porque permiten ver
microorganismos, resaltar estructuras y mejores detalles de stos, son
sustancia muy tiles en los laboratorios, puedes ver sustancias o
partculas que son difciles de ver, por ser "transparentes", ya que la luz
puede cambiar la imagen y dificultar la visibilidad de lo deseado.

2. Los mordientes, aunque no son colorantes, tienen gran importancia


en algunas tcnicas de tincin. Los mordientes intensifican la tincin
porque aumentan la afinidad de la clula por el colorante. Tambin se
pueden utilizar para producir un engrosamiento de ciertas estructuras
celulares externas, como los flagelos, que debido a su delgadez no
podran ser visualizados de otra forma.
3. coloracin positiva
Es la tincin de los microorganismos, efectuada con colorantes bsicos
que, como ya dijimos, poseen afinidad por los constituyentes celulares y
se combinan qumicamente con el citoplasma microbiano. Tcnica: Se
cubre el frotis, despus de fijado, con la solucin colorante y se deja
actuar el tiempo preciso. Luego se lava con agua y se deja secar.
Con fucsina bsica: se diluye 1/10 la solucin de uso (fucsina fenicada
de Ziehl) y sedeja actuar 30 a 60 segundos.
Con violeta de genciana: se diluye al 1/10 la solucin de uso y se deja
actuar 30 a 60segundos.
Con azul de metileno: se cubre el preparado con la solucin de uso
(azul de metilenoalcalino de Loeffler) sin diluir y se deja actuar 3 a 5
minutos. El azul de metileno es el colorante ms dbil de los tres, razn
por la cual se usa ms concentrado y se deja actuar durante ms
tiempo. Tambin a la solucin de azul de metileno de uso se le agrega
un lcali (KOH) como intensificante, que acta haciendo ms rpida e
intensa la reaccin de coloracin.

La coloracin negativa
Es un modo satisfactorio de aumentar el contraste de los
microorganismos en microscopa ptica, pero su mxima utilidad est en
revelar estructuras como Cpsulas.
Tanto bacterianas como de levaduras, esporas que se observan como
cuerpos refringentes y espiroquetas que, por su pequeo dimetro
transversal, resulta difcil ponerlas en evidencia; por medio de la
coloracin negativa se observan sin dificultad.

4. El control de calidad en el laboratorio tiene como objetivo , que el


producto final del trabajo tenga un grado aceptable de seguridad , de
conformidad con los limites establecidos. Debido a que la mayora delos
resultados en microbiologa son producto de interpretaciones y
evaluacin de reacciones bioqumicas de seres vivos, donde la
capacidad y experiencia del evaluador tienen un gran valor, los clculos
de coeficientes de variacin y desviaciones estndares que son parte de
funciones analticas, tienen poca aplicacin en el laboratorio de
microbiologa. Es por ello que algunos expertos consideran que el control
de calidad en microbiologa es mas un arte que una ciencia. Un
programa de control de calidad debe contar con los siguientes
elementos mnimos:

Las pruebas y los procedimientos.


Verificacin y validacin del test.
Manual de procedimientos.
Mantenimiento de reportes y libros de registros.
Evaluacin del personal.
Controles externos.

La tincin de Gram o coloracin Gram es un tipo de tincin diferencial


empleado en microbiologa para la visualizacin de bacterias, sobre todo
en muestras clnicas. Debe su nombre al bacterilogo dans Christian
Gram, que desarroll la tcnica en1884. Se utiliza tanto para poder
referirse a la morfologa celular bacteriana como para poder realizar una
primera aproximacin a la diferenciacin bacteriana, considerndose
Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color violeta
y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa.

Recoger muestras.
Hacer el extendido en espiral.
Dejar secar a temperatura ambiente.
Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor(flameado 3
veces aprox.)
Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1
min. Todas las clulas Gram positivas y gramnegativos se tien de color
azul-purpura.
Enjuagar con agua.
Agregar lugol y esperar entre 30 segundos y 3 minutos.
Enjuagar con agua.
Agregar acetona y/o alcohol y esperar entre 15 y 20s.
Enjuagar con agua.
Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica y esperar 1-
2 min Este tinte dejar de color rosado-rojizo las bacterias Gram
negativas.
5.
Cocos:
- Staphylococcus aureus
- Streptococcus Pyogenes (Grupo A)
- Streptococcus Agalactiae (Grupo B)
- Neisseria meningitides (Meningococo)
- Neisseria gonorrhoeae (gonococo)

Bacilos:
- Bacillus antracis
- Clostridium tetani
- Clostridium botullinum
- Escherichia coli
- salmonella typhi

Espirilos:
- Rhodospirillum
- Oceanospirillum
- Magnetospirillum
- Azospirillum
- Phaeospirillum

Cocobacilos:
- Haemophilus influenzae
- Chlamydia trachomatis.
- Haemophilus ducreyi
- Brucella suis
- Brucella ovis

6.
Bacillus creus
Clostridium tetani
Sporosarcina
Clostridium botulino
Bacillus Anthrasis

7. Algunas bacterias grampositivas, pero no las gramnegativas,


pertenecientes a gneros como Bacillus (p. ej., Bacillus anthracis) y
Clostridium (p. ej., Clostridium tetar o botulinum) (bacterias edficas)
son capaces de formar esporas.

En condiciones ambientales adversas, como la desaparicin de un


nutriente, estas bacterias pueden pasar de un estado vegetativo a un
estado de latencia o de espora. La localizacin de la espora en el interior
de la clula constituye una caracterstica de cada bacteria que puede
facilitar su identificacin.

La espora es una estructura deshidratada formada por mltiples capas


que protege a la bacteria y le permite vivir en un estado de latencia.
La espora contiene una copia completa del cromosoma bacteriano, las
concentraciones mnimas imprescindibles de sus ribosomas y protenas
esenciales, y una elevada concentracin de calcio unido a cido
dipicolnico. Asimismo, la espora posee una membrana interna, dos
capas de peptidoglucano y una capa proteica semejante a la queratina
externa. En el examen al microscopio ptico, la espora aparece como
una estructura refringente (brillante)

8.
- Estreptococo
Streptococcus es un gnero de bacterias que incluye varios patgenos
humanos importantes, principalmente S. pyogenes y S. pneumoniae.
Ambos de estos patgenos son bacterias encapsuladas. El primero es
responsable de enfermedades como la faringitis estreptoccica,
imptigo, celulitis y fascitis necrotizante, los medios de comunicacin a
menudo se refiere como la fascitis necrotizante "enfermedad come
carne" o "bacteria carnvora". Como el nombre sugiere, S. pneumoniae
es la causa ms comn de neumona. Sus cpsulas de polisacridos
ayudan a hacer estos dos patgenos ms virulentos y ms peligroso
para la salud humana.
- Staphylococcus Aureus
Bacterias S. aureus se encuentran en grupos, como cuando l estudi
bajo el microscopio. Tpicamente colonizar las fosas nasales en los seres
humanos. Como los estreptococos, son bacterias encapsuladas, aunque
su cpsula se llama ms propiamente "microcpsulas", porque se puede
ver solamente con el microscopio electrnico. Los mdicos no estn del
todo seguro de lo que el papel de la cpsula en la virulencia de S. aureus
juega, pero saben que S. aureus puede causar una variedad de
enfermedades tales como fornculos, meningitis (infeccin de las
membranas que cubren el cerebro y la mdula espinal ), la neumona,
las infecciones del tracto urinario, mastitis (inflamacin de los senos) y
el sndrome de choque txico. Estas bacterias son especialmente
problemticas en el mbito hospitalario, donde pueden infectar heridas
en pacientes sometidos a ciruga. Cepas llamados colectivamente s
resistentes a la meticilina. aureus o MRSA es resistente a muchos
antibiticos comunes y representan un problema creciente.
- Haemophilus influenzae
Bacterias de H. influenzae estn presentes en ambas cepas
encapsuladas y no encapsuladas. El setenta y cinco por ciento de los
nios y los adultos sanos llevan esta bacteria en su nasofaringe cavidad
nasal, donde el enlace a la garganta. En los nios menores de 5 aos de
edad, H. influenzae puede causar meningitis aguda, tambin es
responsable de algunas infecciones del odo, infecciones de las vas
respiratorias y los casos de sinusitis. Tipo b encapsulado H. influenzae
son generalmente responsables de la enfermedad, ya que su cpsula
ayuda a prevenir los fagocitos. Vacunar a los nios con el polisacrido
presente en la cpsula los protege de contraer enfermedades causadas
por H. influenzae tipo b.
Trabajo de la microbiologa
(gua de laboratorio # 6)

Presentado por:
Jose jose mejia miranda

Presentado a:
Cristian Alberto Lpez

Instrumentacin quirrgica
Universidad del SINU

2016

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