La tuberculosis es una zoonosis de gran importancia, especialmente en las
explotaciones de ganadera lechera del pas, por su carcter crnico en animales, causan grandes prdidas econmicas en las explotaciones lecheras. En el pas ya existen algunas reas donde se viene controlando adecuadamente esta enfermedad, en base a permanentes pruebas diagnsticas, entre las que se destaca la prueba de la tuberculina. La definicin de la prueba de tuberculina, es sin duda el primer paso. Esta prueba consiste en la inoculacin de un antgeno, la PPD (derivado proteico purificado) en forma intradrmica a un animal, con el objeto de poder establecer si el mismo fue infectado por el agente causante de la enfermedad. La lenta y localizada respuesta del organismo al antgeno inyectado se debe a un mecanismo de hipersensibilidad de tipo IV (retardada), la cual se manifiesta durante las 72 horas posteriores a la exposicin al antgeno. Al contrario de lo que ocurre en otras formas de hipersensibilidad, la de tipo IV no puede ser transferida de un animal a otro mediante la transferencia de suero, sino que es necesario transferir clulas T (linfocitos), por lo que la respuesta inmune en tuberculosis se considera mediada por clulas. La reaccin a la tuberculina es una reaccin in vivo, sigue siendo una de las respuestas biolgicas ms interesantes, ms estudiadas, que requiere del desarrollo de habilidades, y es la nica forma prctica masiva que tenemos para demostrar el hecho ms significativo en tuberculosis, que es la infeccin del ganado con el Mycobacterium bovis. Reactivo para la prueba tuberculnica El PPD, Derivado Proteico Purificado de tuberculina, es un extracto antignico derivado del cultivo de un bacilo tuberculoso en un medio sinttico. Los Derivados Proteicos Purificados de tuberculinas que se producen son tres, utilizando ya sea Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovis y Mycobacterium avium. De ellas slo las tuberculinas bovina y aviar tienen aplicacin veterinaria. De acuerdo con los diferentes mtodos de elaboracin, existan distintos tipos de tuberculina, incluyendo la tuberculina vieja de Koch (O.T y K.O.T) y la tuberculina de Medio Sinttico concentrado por calor (H.C.S.M). En la actualidad solamente se usa el PPD por su mayor potencia y especificidad. Este PPD se inocula a un animal o animales para determinar su situacin de exposicin con respecto al agente. De tal manera, cuando es inoculado intradrmicamente a animales no expuestos a Mycobacterias, denominados vrgenes o sanos, no se observa ninguna respuesta inflamatoria local importante o que puedan clasificarse como sospechosas o positivas. Por lo tanto, falt en esos animales el estmulo previo que los sensibilizara y generen una respuesta frente al agente o sus productos. De la otra manera, si se inoculara a animales infectados o enfermos, es decir ya anteriormente expuestos y sensibilizados al bacilo tuberculoso, aparecer la reaccin tuberculnica, siendo la misma un ejemplo destacado de una respuesta inmunolgica especfica de hipersensibilidad tarda de tipo IV, mediada por clulas. Interpretacin de la prueba Una adecuada interpretacin, sobre todo para que los resultados sean confiables, se requiere en cada prueba: Potencia de la PPD. Dosificacin del antgeno. Sitio de la inoculacin. Tiempo de lectura. Medicin de las respuestas o reacciones para su interpretacin. El sitio de inoculacin, es posiblemente el dato ms comnmente registrado, ya que sirve para identificar el tipo de prueba utilizada. Prueba Intradrmica nica (pliegue caudal): Se aplica 0.1 ml de PPD bovino de forma intradrmica en el pliegue caudal o en la unin mucocutnea del pliegue vulvar (en desuso sta ltima). Se debe realizar una lectura a las 72 horas despus de haber aplicado la tuberculina. El mdico veterinario correspondiente o autorizado realiza la palpacin del rea de aplicacin, donde se distinguir una reaccin positiva ante el hallazgo de inflamacin, con engrosamiento perceptible (aumento de tamao, rubor, calor o dolor) comparado con el pliegue del lado opuesto. Esta prueba no diferencia entre M. bovis y otras micobacterias, por lo que se pueden presentar un gran nmero de falsos positivos. Prueba Intradrmica nica (Cervical Simple): Se emplea para el mismo fin que se persigue con la prueba en pliegue caudal es decir la existencia de infeccin por M. bovis, con la ventaja de que es por lo menos 25% ms sensible que el resto del cuerpo. Para esta prueba se requiere rasurar un rea pequea de la piel tercio medio del cuello, cuyo grosor ser medido previamente a la inoculacion del PPD. Pasadas las 72 horas se realiza la lectura utilizando un cutmetro que para el caso los vernier o pie de rey de uso en mecnica es igual. Se considera postivo un resultado de 2 mm o ms de engrosamiento, comparndolo la medida previa a la aplicacin. Prueba Doble Comparativa: Se aplican tanto PPD bovino como PPD aviar a una distancia de 12 cm en promedio uno del otro, midiendo previamente el grosor de la piel con un vernier o cutmetro antes y despus de la aplicacin en los dos puntos. La finalidad de esta prueba es determinar si la reaccin inflamatoria es por M. bovis o por otras micobacterias. Previo a la inoculacin deber rasurarse dos reas de alrededor de 1cm 2 y se aplicar 0.1 ml de PPD aviar y 12cm por debajo 0.1 ml de PPD bovino. La segunda lectura se realizar a las 72 horas y la interpretacin se realizar restando la lectura final a la inicial.