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TEMA 9: FERMENTACIONES INDUSTRIALES

1. Introduccin
2. Diseo y funcionamiento del fermentador
3. Tipos de fermentaciones
I. Fermentacin discontinua
II. Fermentacin alimentada
III. Fermentacin continua
IV. Reactores de enzimas o clulas inmovilizadas
4. Preparacin y Propagacin de Inculos
I. Preservacin del inculo
II. Crecimiento del inculo
III. Precultivo en fermentador
IV. Fermentacin de produccin
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1.- INTRODUCCIN

1. Procedimientos de fermentacin:
- Desarrollo de inoculos. 2. Recuperacin del producto:
- Preparacin de los medios. - Extraccin
- Regulacin del metabolismo - Purificacin
- Esterilizacin
- Fermentacin
- Control de los factores fsico-qumicos.

Y luego se produce a la recuperacin del producto cuando ya ha crecido, esto conlleva dos pasos:
extraccin y purificacin (segn para q se vaya a utilizar el producto obtenido se llega a purificacin o
no; si queremos que sea para un detergente de lavadora no es necesario el ltimo paso por ej.; un
antibitico por va intravenosa si es necesario purificarlo)

Para la agitacin de unos 200 mL se usa un motor de unos 300 w; para un fermentador pequeo de
10000L necesitamos un motor con una potencia de 15 megavatios (Mw), esto generara tal calor que
quemara el cultivo, por tanto no se puede usar, no se puede extrapolar lo del laboratorio a la industria

FASES DEL PROCESO FERMENTATIVO

---> Fermentador de produccin:

Los fermentador es tienen que estar diseados de tal manera que sea estanco, cerrado del aire
exterior para evitar contaminaciones y adems tienen que tener determinados controles que nos
indiquen que todo funciona correctamente.
2. DISEO Y FUNCIONAMIENTO DEL FERMENTADOR

Los fermentadores tienen que estar diseados para que sea algo cerrado y aislado del exterior para
evitar contaminaciones y adems, tienen que tener determinados controles que nos indiquen que todo
va funcionando correctamente. Los elementos fundamentales que hay q tener en cuenta a la hora de
disear uno son:

Tanque asptico, (que no est en contacto con el exterior)


Sistema de aireacin
Bajo consumo de energa
Control de pH
Toma de muestras (fundamental espita para poder ver cmo va)
Control de la temperatura (se est generando calor
Evitar evaporacin (si hay evaporaciones se va agua y por tanto los solutos quedaran ms
concentrados)
Mnimas operaciones
Verstil (que nos sirva para crecer distintas bacterias, ya que segn la demanda necesitaremos
unos u otros)
Superficies internas lisas (para que no se queden en las grietas y contaminen en la siguiente
fermentacin)
Geometra idntica (todos los tanques de la misma sala, para poder detectar rpidamente
donde est el fallo y evitar que fallen el resto de tanques)
Materiales baratos
Servicio de repuestos

3.- TIPOS DE FERMENTACIONES

I.- FERMENTACIN DISCONTINA (batch): Consiste en


introducir el medio de cultivo, inocular con el MO que nos
interesa y dejarlo hasta que tengamos y las cantidades
suficientes. A medida que las clulas crecen se va agotando el
sustrato, aqu no tenemos ningn control de los nutrientes,
hemos aadido al principio los nutrientes y no lo modificamos
ms, finaliza cuando obtenemos el crecimiento y el MO.

Tenemos que evitar que haya determinadas concentraciones


de sustancias que intervienen en la biosntesis de los
productos que nos interesan en el tanque.

Una fermentacin discontinua (en batch) es un "sistema


cerrado". Al inicio de la operacin se aade la solucin
esterilizada de nutrientes y se inocula con el microorganismo,
permitiendo que se lleve a cabo la incubacin en condiciones
ptimas de fermentacin.

En los procesos comerciales la fermentacin se interrumpe al


final de la fase logartmica (metabolitos primarios) o antes de que comience la fase de muerte
(metabolitos secundarios).

Positivo. Es un mtodo clsico. Bien conocido. Instalaciones simples

Negativo. Mala utilizacin de los medios materiales y humanos


II.- FERMENTACN ALIMENTADA (fed-batch):

Mantenemos la misma concentracin del sustrato durante


todo el tiempo que dura la fermentacin.

Igual que el anterior, pero algunos sustratos (F. de carbono,


F. de nitrgeno) se aaden escalonadamente a lo largo de la
fermentacin.

Positivo. Es un mtodo clsico. Bien conocido.


Instalaciones simples, mejora la produccin
(metabolitos secundarios)

Negativo. Mala utilizacin de los medios materiales y


humanos

III.- FERMENTACIN CONTINUA.

En la fermentacin continua se establece un sistema abierto. La solucin nutritiva estril se aade


continuamente al biorreactor y una cantidad equivalente del cultivo, con los microorganismos, se saca
simultneamente del sistema.

Positivo. Proceso continuo que permite una buena utilizacin de los medios materiales y
humanos

Negativo. Problemas en el mantenimiento de la estabilidad del sistema. Esterilidad

Consiste en mantener constante el nmero de clulas y la concentracin d sustrato as siempre


tenemos a las clulas en la misma fase y en principio este cultivo es eterno en el tiempo. La fase
estacionaria se consigue porque dejan de existir los nutrientes o porque el metabolismo de las clulas
produce sustancias txicas para ellas y por tanto dejan de crecer, esto se evita con este cultivo.
Vamos eliminando sobrenadante de cultivo con el MO u el mismo volumen que eliminamos lo
aadimos del medio de cultivo reciente, coman tenemos la concentracin de nutrientes prcticamente
constantes y eliminamos los txicos. Los que eliminamos lo vamos procesando para la extraccin y
purificacin del producto interesado, se usa menos que la alimentada ya que este sistema no aguanta
mucho ya que hay ms posibilidades de que se contamin y de que se rompa la estabilidad del
fermentador.
4. PREPARACIN Y PROPAGACIN DE INCULOS.
La fase de adaptacin al medio tiene que ser la ms corta posible.

I.- PRESERVACIN DEL INCULO.

Objetivo: Hay que obtener precultivos para que la fase de adaptacin sea ms corta. Preservar la
capacidad de formar producto. Siempre tenemos que conservar las cepas maestras. A partir de estas
cepas obtenemos y las cepas de trabajo, que son las que vamos a utilizar cada vez que inoculemos un
fermentador. Si se nos deteriorasen las cepas de trabajo recurriramos a las cepas maestras.

Cepas de trabajo. Las tenemos conservadas para que no haya metabolismo (congeladas, liofilizadas)
por lo que hay que revivirlas.

II.- CRECIMIENTO DEL INOCULO

Con las cepas de trabajo, que tenemos conservadas para que no haya metabolismo, las revivimos;
hay dos posibilidades, en medio solido (esporas) o en cultivo lquido (a partir de las cepas de trabajo
cogemos 10mL en un matraz de 200 mL). El tiempo depende del tipo de cultivo y de la forma de
conservacin.

III.- PRECULTIVO FERMENTADOR.

La concentracin ptima del inculo para el fermentador de produccin determina el nmero de etapas
del precultivo de fermentacin que son necesarias.

Una vez revivido hay una proporcin ideal para utilizar con inoculo en el tanque fermentador industrial.
Si es una bacteria el volumen de cultivo de inoculo que tenemos q utilizar es del 0,1 al 3% del volumen
del productor. En actinomycetes 5-10% y en hongos 5-10%.

Si tenemos un tanque de 30000 L tendremos que utilizar un inoculo de hongo de 3000 litros y para
obtenerlo tendremos que ir inoculando unos tres litros y as avanzando por diez hasta 3000.

IV.- FERMENTACION DE PRODUCCION

Tamao del fermentador segn el producto