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Campus Puebla
Departamento de Biotecnologa
Equipo 7:
Introduccin
Los compuestos que contienen carbono y estn presentes en los seres vivos reciben el nombre de
biomolculas o molculas orgnicas estas se clasifican en cuatro importantes grupos: carbohidratos
(glcidos), lpidos, aminocidos y protenas y cidos nucleicos.
CARBOHIDRATOS
Molculas formadas en primera instancia por organismos auttrofos durante la fotosntesis, su principal
funcin es almacenar energa qumica y como material de construccin durable para estructuras biolgicas
Hay tres tipos de carbohidratos clasificados segn el nmero de molculas que presenten: monosacridos
(1), disacridos (2), polisacridos (5 o ms).
Cada molcula de azcar contiene un esqueleto de tomos de carbono unidos en disposicin lineal mediante
enlaces sencillos. Cada tomo de carbono del esqueleto se une a un solo grupo hidroxilo, excepto los que
poseen un grupo carbonilo (C=O). Si el grupo carbonilo se localiza en una posicin interna forma un grupo
cetona y el azcar es una cetosa, como la fructuosa. Si el carbonilo se localiza en un extremo del azcar,
forma un grupo aldehdo y la molcula se llama aldosa como la glucosa, Los azcares con cinco o ms
tomos de carbono sufren una auto-reaccin que las convierte en molculas cerradas.
Por otra parte, hablando qumicamente los carbohidratos se pueden clasificar en dos tipos: azcar reductora
si reduce un agente oxidante dentro de una reaccin qumica y azcar no reductora a aquella que no reduce
la oxidacin.
LIPIDOS
Son molculas orgnicas solubles en solvente no polares (benceno, cloroformo, ter) e insolubles en agua.
Los lpidos importantes son grasas, fosfolpidos y esteroides.
AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Un aminocido es una molcula orgnica formada por una grupo amino y un cido carboxlico. Existen 20
aminocidos de los cuales 10 se consideran esenciales ya que el cuerpo humano no los puede sintetizar y
deben ser ingeridos en la dieta. Las protenas son macromolculas de elevado peso molecular formadas por
aminocidos unidos entre s mediante enlaces peptdicos (enlaces covalentes formados entre el grupo
carboxilo de una aminocido con el grupo amino del siguiente).
Las protenas desempean increbles y numerosas funciones en los seres vivos como enzimas, fibras
estructurales, hormonas, tareas homeostticas, forman anticuerpos, forman toxinas, cogulos sanguneos,
transportan sustancias etc. Se estima que una clula de mamfero puede tener hasta 10000 protenas
diferentes y esto se debe a la gran diversidad de estructuras que pueden formar sin dejar de ser altamente
especficas dndole a la vida esa singular complejidad.
NUCLEOTIDOS
Son quizs las molculas ms importantes ya que se les relaciona con la herencia debido a que en los
nucletidos esta la informacin para sintetizar las protenas. As como las protenas se forman de largas
cadenas de aminocidos los cidos nucleicos estn formados por largas cadenas de nucletidos; los
nucletidos a su vez estn formados por un grupo fosfato, una base nitrogenada (adenina, guanina, citosina,
uracilo, timina) y una pentosa (azcar de 5 carbonos).que puede ser ribosa para formar el ARN (cido
ribonucleico) o puede ser desoxirribosa para formar ADN (cido desoxirribonucleico). El fosfato est unido al
carbono 5' del azcar y la base nitrogenada se junta al carbono 1'.
Durante el ensamblado de una cadena de cido nucleico, el grupo hidroxilo fijado al carbono 3' del azcar de
un nucletido queda unido mediante una unin ster al grupo fosfato unido al carbono 5' del siguiente
nucletido de la cadena. As, los nucletidos de una cadena de ARN o ADN estn conectados por enlaces
azcar-fosfato que se describen como enlaces 3 '-5'-fosfodister debido a que el tomo de fosfato est
esterificado con los dos tomos de oxgeno, uno de cada azcar adyacente. Los nucletidos se dividen por
sus tipos de bases nitrogenadas en: pirimidinas, que tienen un solo anillo y son timina, uracilo y citosina; y
purinas que tienen dos anillos y son guanina y adenina.
(Mader 2007)
Desarrollo
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Figura 1. Tubos con el carbohidrato correspondiente, el reactivo de Fehling A y el reactivo de Fehling B.
Fuente: Laboratorio de Qumica Experimental, ITESM, Campus Puebla.
a) Coagulacin de protenas
1. Se coloraron en 3 tres tubos de ensayos de 2 a 3 ml de Lecha Alpura Clsica.
2. En tres tubos de ensayo distintos se colocaron de 2 a 3 ml de clara de huevo.
3. Cada muestra se someti a los siguientes tratamientos:
a. Calentamiento en bao mara.
b. 2 a 3 ml de HCl concentrado.
c. 2 a 3 ml de alcohol etlico.
b) Reaccin de Biuret
1. Se colocaron en un tubo de ensayo 3 ml de solucin de albmina al 1%.
2. Se aadieron 4 gotas de solucin de CuSO4 al 1%.
3. Se agregaron 3 ml de solucin de NaOH al 20%.
c) Prueba para Xantoprotenas
1. Una muestra de clara de huevo se deposit en un tubo de ensayo.
2. Se calent una vez que se le agreg HNO3
Resultados
Tabla. Resultados de diversos carbohidratos para saber si es reductor o no, bajo tres pruebas distintas.
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Figura . Tubos con el carbohidrato correspondiente, el reactivo de Fehling A y el reactivo de Fehling B
despus del calentamiento.
Fuente: Laboratorio de Qumica Experimental, ITESM, Campus Puebla.
Se obtuvo el ADN del pltano en forma de algodn mojado en la interface de la solucin de lisis con el
pltano y el alcohol.
Figura 3. Tubo de ensayo con la mezcla de tampn y pltano adems de alcohol etlico en la fase superior.
Fuente: Laboratorio de Qumica Experimental, ITESM, Campus Puebla.
La solucin alcohlica de Sudn III coloreo al aceite de un color anaranjado intenso. La prueba fue positiva a
presencia de tincin de lpidos.
Muestra Tratamiento
Leche + + +
Clara de huevo + + +
b) Reaccin de Biuret
Se observ cambio de coloracin de la solucin de albumina de blanco a morado.
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Figura. Reaccin de Biuret en presencia de albmina.
Fuente. Laboratorio de Qumica Experimental, ITESM, Campus Puebla.
Resultados
Tabla. Resultados de diversos carbohidratos para saber si es reductor o no, bajo tres pruebas distintas.
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Figura . Tubos con el carbohidrato correspondiente, el reactivo de Fehling A y el reactivo de Fehling B
despus del calentamiento.
Fuente: Laboratorio de Qumica Experimental, ITESM, Campus Puebla.
Se obtuvo el ADN del pltano en forma de algodn mojado en la interface de la solucin de lisis con el
pltano y el alcohol.
Figura 3. Tubo de ensayo con la mezcla de tampn y pltano adems de alcohol etlico en la fase superior.
Fuente: Laboratorio de Qumica Experimental, ITESM, Campus Puebla.
La solucin alcohlica de Sudn III coloreo al aceite de un color anaranjado intenso. La prueba fue positiva a
presencia de tincin de lpidos.
Muestra Tratamiento
Leche + + +
Clara de huevo + + +
b) Reaccin de Biuret
Se observ cambio de coloracin de la solucin de albumina de blanco a morado.
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Figura. Reaccin de Biuret en presencia de albmina.
Fuente. Laboratorio de Qumica Experimental, ITESM, Campus Puebla.
Discusin
El reactivo de Tollens es una solucin de nitrato de plata en hidrxido de amonio. Conforme el aldehdo se
oxida a la sal de un cido carboxlico, el ion plata Ag + se reduce a plata metlica. Si la reaccin se lleva a
cabo en un tubo de ensayo la plata se deposita en las paredes del vidrio y crea una superficie reflejante lisa,
de ah el nombre de prueba de espejo de plata.
La reaccin que se lleva acabo es la siguiente:
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Los reactivos de Benedict y Fehling consisten en una solucin de ion cobre (II) en firma de complejo con iones
de citrato y tratrato respectivamente. Al tener lugar la reaccin, el aldehdo se oxida a la sal del cido
carboxlico. En el proceso el complejo del ion cobre (II), de color azul profundo, se reduce a xido de cobre (I)
de color rojo ladrillo. Por lo general las cetonas no reaccionan. La reaccin que se lleva a cabo es la siguiente:
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(Bailey & Bailey, 1998)
Los carbohidratos que reducen los reactivos de Fehling, Benedict o Tollens se conocen como azcares
reductores. Todos los monosacridos, sean aldosas o cetosas, son azcares reductores, como lo son tambin
la mayora de los disacridos, siendo una excepcin importante la sacarosa, que no es reductora.
Las sustancias que dieron positivo a la prueba de Tollens fueron la glucosa y fructosa. Como se puede ver en
la imagen la glucosa presenta al grupo carbonilo como aldehdo, por lo que es positiva en la prueba de
Tollens. Y la fructosa da prueba positiva a esta prueba debido al equilibrio tautomrico ceto-enol catalizado
por base, lo que da por resultado su conversin en una aldohexosa como se muestra en la imagen b
La glucosa y la fructosa tambin dieron positivo a las pruebas de Fehling y Benedict y al ser monosacridos
entran en la categora de azcares reductoras.
La sacarosa es un disacrido formado por glucosa y fructosa, cuyo enlace implica al grupo aldehdo de la
primera y al grupo cetona de la segunda, por lo que ninguno puede actuar como reductor. Como se mencion
anteriormente, la sacarosa, no es un azcar reductor y eso se pudo confirmar experimentalmente, dando
negativa para las tres pruebas realizadas. Su estructura es la siguiente:
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La lactosa y maltosa tambin dieron negativo a la prueba de Tollens. La lactosa es un disacrido formado por
galactosa y glucosa, donde la galactosa no tiene efecto reductor, pero s la glucosa, pues su grupo aldehdo
del C1 no est implicado en el enlace. La maltosa se forma por dos molculas de glucosa unidas por enlace
(1,4) con un grupo aldehdo libre, por lo que puede actuar como reductor. Ambas presentaron un color
negro en el tubo, pero no se lleg a formar el espejo de plata.
(Fornaguera&Gmez)
Las estructuras de estos disacridos se presentan a continuacin:
Ambas, lactosa y maltosa, dieron positivas las pruebas de Fehling y de Benedict al ser disacridos y ya que
todas las aldosas y cetosas dan positivas a estas dos pruebas. La lactosa est formada por una molcula de
galactosa y una de glucosa, unidas entre s por un enlace (1 4). El carbono anomrico libre de la lactosa
hace que sea un azcar reductor.
a) Coagulacin de protenas
La estructura primaria de las protenas se da a travs de enlaces
covalentes. Sin embargo, la estructura secundaria, terciaria y
cuaternaria de las protenas son mantenidas a travs de interacciones
intermoleculares polares, no polares, puentes de hidrogeno. La
estructura es conservada debido a factores ambientas externos. Sin
embargo, tratamientos fsico-qumicos pueden interrumpir estas
interacciones dando como resultado la desnaturalizacin de las
protenas. (Garret, 2012)
b) Reaccin de Biuret
La reaccin de Biuret es un mtodo general para la determinacin de
protenas o pptidos. Se basa en la reaccin del sulfato de cobre con
compuestos que tengan dos o ms enlaces peptdicos en un medio
alcalino. Esta reaccin produjo un complejo color violeta con la muestra
de albumina, la cual consiste en una cadena polipetdica de 582
aminocidos, en el caso de la bovina. Esta reaccin es negativos con
dipptidos y aminocidos. (Quesada, 2007; Garrido et al, 2006)
Cuestionario
Conclusin
Por medio de tres pruebas, de Tollens, Fehling y Benedict; se logr
clasificar diversos carbohidratos, principalmente azcares, como
reductores o no reductores. Tambin se logr extraer DNA de pltano por
medio de una solucin de lisis y etanol.
Bibliografa
Garrido, A., Teijn, J., Blanco, D., Villaverde, C., Mendoza, C., Ramrez, J.
(2006) Fundamentos de Bioqumica Estructural. (2 ed) Editorial Tbar.
Madrid, Espaa. Recuperado el 7 de abril de 2013 de
http://books.google.com.mx/books?
id=avt8LFmp8q4C&printsec=frontcover&hl=es&source=gbs_ge_summa
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