Lab Biologia Prácticas 2017

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA
FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS

CARRERA DE MEDICO Y CIRUJANO
CENTRO UNIVERSITARIO DE SAN MARCOS
UNIDAD DIDACTICA
DE BIOLOGA MOLECULAR Y CELULAR
PRACTICAS DE LABORATORIOS
2017
Universidad de San Carlos de Guatemala, Carrera de Medico y Cirujano, Unidad
acadmica de Biologa molecular y celular, Fase I,
Centro Universitario De San Marcos (CUSAM) Pgina
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Semana 1 a la 7
RECOMENDACIONES PARA EL
TRABAJO EN EL LABORATORIO
La presente gua de laboratorio de Biologa celular y molecular pretende orientar al
estudiante para que su trabajo en el laboratorio sea efectivo y se alcancen los objetivos
propuestos.
Para ello es importante seguir las siguientes recomendaciones:
Conocer el documento PRACTICAS DE LABORATORIO
Previo a cada prctica debe haberla ledo y haberse documentado en el tema
correspondiente
Asegurarse de llevar al laboratorio bata, equipo protector y los materiales
solicitados.
Seguir las instrucciones de cada prctica y elaborar su reporte correspondiente
segn las indicaciones de su docente
Debe guardar sus reportes de laboratorio para usarlos como material de estudio
para el examen parcial.
Manual de Prcticas de Laboratorio 2017

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SEMANA 1
NORMAS DE BIOSEGURIDAD
INTRODUCCIN
La unidad didctica de Biologa Molecular y Celular tiene
programado dentro de las prcticas de laboratorio, el uso de material
orgnico e inorgnico, en su gran mayora no contaminante. Las
normas de Bioseguridad estn diseadas para evitar daos a la salud
del personaly los estudiantes, y la preservacin del medio ambiente.
El estudiante de Medicina debe conocer cuales son esas normas.
El presente documento sintetiza las normas que debern regir la
conducta durante las prcticas de esta unidad didctica, el uso adecuado del equipo, y
manejo de desechos en forma ordenada para no poner en riesgo a ninguna de las
personas participantes
Accesorios y vestimenta necesaria

1. BATA BLANCA, mangas largas, el largo de la bata que llegue hasta las rodillas
2. LENTES, transparentes que cubra arriba de cejas y hasta los pmulos
3. GUANTES Descartables (no estriles)
RECOMENDACIONES DENTRO DEL SALON DE

LABORATORIO
No ingerir alimentos
Lavado de manos al inicio y final de la prctica con
jabn y agua.
Secado de manos con papel absorbente (papel
mayordomo)
Uso de Lentes al manipular material orgnico o
inorgnico
La bata debe usarse exclusivamente dentro del saln
DESCARTAR CORRECTAMENTE EL MATERIAL UTILIZADO SEGN ESTAS

RECOMENDACIONES:
PUNZOCORTANTES (agujas de jeringas, lancetas, bistur, cristaleria rota,
porta y cubre objetos y tubos de ensayo) en recipiente color ROJO para
descartar materialespunzocortantes.
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MATERIALES NO PUNZOCORTANTES CONTAMINADOS tales como
algodones, jeringassinagujas, hisopos, cajas de Petri, guantes, pipetas de
pasteur plsticas y botellas plsticas en bote con bolsa color ROJA.
MATERIALES NO CONTAMINADOS: restos biolgicos, empaques de
jeringas, material de oficina (crayones, grapas, clips, etc) enel bote con bolsa
color negra.
PRACTICA DE LA SEMANA 2
USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO.
TECNICAS PARA HACER PREPARACIONESMICROSCOPICAS
I. INTRODUCCION.
La Biologa Celular es una ciencia que se origin y ha

avanzado gracias a la implementacin tecnolgica; y ms
especficamente con el desarrollo de mejores tcnicas
microscpicas.
Por ello, es necesario apoyar las explicaciones tericas con
prcticas de laboratorio; en donde cada persona puede realizar
sus propias observaciones y sacar conclusiones.
El poder de resolucin del ojo humano logra identificar objetos de hasta de 200 micras,
por lo que se hace necesario recurrir a instrumentos pticos que faciliten la
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observacin de objetos de menor tamao, como las clulas; este instrumento es
el microscopio, que consiste en juegos de lentes que agrandan amplifican la
imagen.
Para observar los objetos a travs del microscopio ptico compuesto, es
necesario colocarlos sobre una laminilla de vidrio (Porta objetos) y generalmente
se le coloca otra laminilla de vidrio ms delgada (Cubre objetos); en esta forma
se obtiene la preparacin microscpica; la que puede durar poco tiempo
(preparacin temporal), o puede ser guardada (preparacin permanente), lo que
nos da la clasificacin de preparaciones de acuerdo a su duracin.
En esta prctica se darn los lineamientos generales para el uso correcto del
microscopio, cmo hacer preparaciones microscpicas y efectuar el reporte de
laboratorio.
II. OBJETIVOS.
Al finalizar la prctica, el estudiante ser capaz de:

1. Identificar las partes pticas y mecnicas del microscopio y su funcin
2. Elaborar preparaciones microscpicas temporales.
3. Utilizar correctamente el microscopio ptico compuesto
4. Elaborar correctamente reportes de laboratorio.
III. MATERIALES:
MATERIALES APORTADOS POR EL MATERIALES APORTADOS POR

ESTUDIANTE LA UNIDAD DIDACTICA
1. Porta Objetos y Cubre Objetos

2. Papel impreso (peridico) con letra
pequea
3. Tijeras y cuchilla descartable nueva
4. Lpiz y Crayones 1. Microscopio ptico compuesto.
5. Trozo de corcho 2. Pipeta con agua destilada
6. Papel limpia lentes 3. Xilol
7. Papel mayordomo (1 rollo por cada 3
estudiantes)
8. Jabn lquido de manos (1 bote por
cada 3 estudiantes)
IV. FUNDAMENTACION TERICA:

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DESCRIPCION DEL MICROSCOPIO.
PARTE MECANICA.
Est compuesta por el pie, la platina y el tubo.
EL PIE. Es una pieza maciza y pesada, para asegurar la estabilidad del aparato y
servir de soporte a sus dems partes. Suele estar provista de charnela, que permite la
inclinacin de la parte superior.
LA PLATINA: Es una pieza metlica, redonda o cuadrada, donde se colocan las
preparaciones; tiene en el centro una abertura circular por la que pasarn los rayos
luminosos procedentes del sistema de iluminacin. En los microscopios corrientes
puede ser fija o estar endosada a un carro con dos tornillos y cremallera que permitan
dos movimientos de translacin, para centrarla, y tambin, si los tornillos estn
graduados, para medir sus desplazamientos.
La preparacin se sujeta, en las platinas fijas, con dos palanquitas mviles, y en las
platinas de carro, por un reborde, en forma de escuadra y pestillo, que le impide
cualquier movimiento imprevisto.
El pie se prolonga por encima de la platina, en arco ms o menos curvo. La parte
superior de este arco es la que sostiene el tubo y su mecanismo de traslacin vertical.
Esta tiene suma importancia, pues permite enfocar el objetivo mediante dos
movimientos uno rpido, gracias a una cremallera, y otro lento, con un tornillo
micromtrico.
PIE, BASE O SOPORTE: sostiene el cuerpo del microscopio.
COLUMNA O BRAZO: se utiliza para transportarlo.
CARRO Y TORNILLOS DEL CARRO: con ellas se puede movilizar la preparacin
microscpica hacia atrs, adelante y hacia los lados.
TORNILLO MACROMTRICO: sube y baja la platina.
TORNILLO MICROMTRICO: afina la imagen una vez enfocada.
MECANISMO DE REVOLVER: en l se encuentran incrustados los lentes objetivo
y se utiliza para rotar aumentos entre seco, dbil y el objetivo de inmersin.
EL TUBO: En l est instalado el sistema ptico. Est constituido por dos tubos o
cuerpos. Uno de ellos, externo, en el que se encuentran la cremallera y el ocular, y
otro, interno, adosado al anterior, donde est el objetivo. En la parte superior hay una
divisin milimtrica que permite modificar la distancia entre objetivo y ocular. Son
corrientes en los aparatos modernos los binoculares, que facilitan la visin con los dos
ojos, y los revlveres porta-objetivos, con los cuales se pueden cambiar los objetivos
instantneamente, sin desenfocar la preparacin. Tubo del ocular:en el estn
incorporados lo lentes del ocular.
DIAFRAGMA: abertura ubicada por debajo de la platina que permite abrir cerrar el
paso de la luz. Al abrirlo la intensidad de luz es mayor, al cerrarlo disminuye la
intensidad.
PARTE OPTICA.

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OBJETIVOS (LENTES OBJETIVO)
Son los elementos ms importantes del microscopio. Estn formados por la reunin de
varias lentes para corregir las aberraciones. Deben tratarse con mucho cuidado, pues
cualquier golpe puede variar la posicin de las lentes y averiarlas. Se atornillan a la
parte inferior del tubo o al revlver portaobjetivos.
La lente inferior del objetivo lente frontal. De ella depende principalmente la mayor o
menor ampliacin. Es siempre plano-convexa, de foco muy corto y de dimetro tanto
menor cuanto mayor sea el aumento.
Detrs de esta lente hay otras, que son las que corrigen las aberraciones cromticas y
esfricas.
OBJETIVOS EN SECO: Son los que se emplean ms corrientemente. Entre la lente

frontal y el cubreobjetos slo hay aire. A este grupo pertenecen los objetivos de
menores aumentos. Las lentes frontales tienen de 3 a 10 milmetros de dimetro.
Poseen gran profundidad de foco, lo cual permite observar diferentes planos paralelos
del objeto.
OBJETIVOS DE INMERSION: Se llama as a aquellos en los cuales, para la

observacin, deben interponerse entre la lente frontal y la preparacin un lquido que,
por su ndice de refraccin apropiado, permita una mayor luminosidad. Este lquido
puede ser agua, aceite, monobromuro de naftaleno, etc. Estos objetivos son de gran
aumento y de gran poder definidor. Se emplean en Bacteriologa y Parasitologa.
Requieren gran luminosidad y empleo de condensador.
CUALIDADES DE LOS OBJETIVOS: Los objetivos deben poseer tres cualidades:

poder definidor, poder penetrante y poder de resolucin.
El poder definidor consiste en la propiedad de presentar con limpieza y
correccin los contornos de la imagen.
El poder penetrante es la propiedad de presentar, sin variar el enfoque,
perfectamente detallados, varios planos del espesor de una preparacin.
El poder de resolucin permite apreciar delicados detalles de estructura,
diferenciando un punto zona del resto de la muestra.
OCULARES (LENTES OCULARES)
Los forman dos lentes separadas por un diafragma, y van montados en la extremidad
superior del tubo. La lente superior se llama lente ocular; la inferior, lente de campo.
Hay dos tipos de oculares; los positivos o de Ramsden, que tienen dos lentes plano-
convexas, y cuyas convexidades se oponen una a la otra y los negativos, o de

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Huyghens, que se llaman tambin de compensacin, por tener compensadas las
desigualdades del espectro y en los que las curvaturas de las lentes se dirigen al
objeto. Tanto el microscopio simple como el compuesto pueden ser binoculares; estos
dan mejor calidad a la imagen y ms cmoda visin. El tubo se bifurca, con los
correspondientes prismas de reflexin total, y termina en dos oculares iguales.
SISTEMA DE ILUMINACION.
Se encuentra situado bajo la platina y tiene la misin de iluminar los objetivos por medio
de luz transmitida, a causa de que la mayora de las observaciones se realizan por
transparencia. Consta de un espejo y de un diafragma. El espejo, redondo y adaptable
a las ms variadas posiciones, tiene una superficie plana y otra cncava, que pueden
intercambiarse a voluntad. Es espejo plano, para objetivos de escaso aumento, y el
cncavo, para grandes aumentos. La fuente luminosa puede ser natural o artificial.
Esta ltima es idnea cuando proviene de una lmpara especial para estos aparatos.
El diafragma va montado bajo la platina. Es de sistema iris, y permite, por medio de
una palanca, obtener a voluntad conos luminosos de distinto tamao y, mediante
condensadores, conos luminosos muy grandes. Los condensadores constan de un
sistema de lentes de gran abertura sujetos a una montura y colocados entre la platina y
el espejo, pueden subirse y bajarse a voluntad y tienen un diafragma unido al conjunto.
REGLAS GENERALES DE OBSERVACIN
ILUMINACION. Puede utilizarse luz natural o artificial elctrica. En general basta

cualquier lmpara potente, de filamento y esmerilada. Si no se dispone de lmpara
esmerilada, se intercalar en el sitio correspondiente un vidrio deslustrado o azul, o un
sencillo matraz lleno de agua con sulfato de cobre y unas gotas de amonaco que filtre
los rayos amarillos. Si se utiliza luz natural, no debe ser nunca la directa del sol, sin luz
difusa; una excesiva iluminacin en la mesa de trabajo perturba la observacin.
ENFOQUE. Es regla general enfocar la preparacin de abajo arriba: se aproxima el
objetivo a la preparacin de modo que la distancia entre ambos sea menor que la
distancia focal. Se mira por el ocular y se hace retroceder el tubo lentamente mediante
el tornillo rpido, hasta conseguir ver la preparacin ms o menos enfocada.
Seguidamente, lograse el enfoque exacto con el tornillo micromtrico.
Es conveniente efectuar la observacin monocular con los dos ojos abiertos, pero
mirando slo con uno. Es fcil de conseguir cuanto menor iluminada est la mesa.
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El objetivo de inmersin requiere ms cuidado: depositada ya la gota de lquido sobre la
preparacin, bjese el objetivo hasta que la toque. Para enfocar se utiliza el tornillo
micromtrico, pero sin perder contacto con la gota y sin tocar la preparacin.
LIMPIEZA. Una vez terminada la observacin debe limpiarse el objetivo con papel
limpia lentes, empapado de xilol o de tolueno. Se guarda el aparato en una caja de
madera o se tapa con una campana de cristal o de plstico.
2.3 CUIDADO DEL MICROSCOPIO. El microscopio es un instrumento costoso.

Debemos darle el mejor cuidado posible. Siga siempre estas instrucciones generales
cuando lo utilice:
1* Transporte el microscopio sujetndolo con las dos manos: una por debajo de la base y la otra en el
brazo.
2* Colquelo alejado del borde de la mesa. Si hay una lmpara unida al microscopio, tenga cuidado con
los cables. Cuando trabaje con el microscopio quite de la mesa de laboratorio aquellas cosas que no
sean absolutamente necesarias.
3* Las lentes del microscopio cuestan casi tanto como todas las dems partes juntas. NUNCA LAS
LIMPIE CON OTRA COSA QUE NO SEA PAPEL LIMPIALENTES).
4* Cuando termine su trabajo guarde el microscopio, DESMONTANDO LAS PREPARACIONES
MICROSCOPICAS QUE HA OBSERVADO Y COLOQUE EL OBJETIVO DE MENOR AUMENTO EN
LA POSICION DE ENFOQUE, CON LA PLATINA EN SU POSICIN MAS BAJA.
PARA OBSERVAR EN UN MICROSCOPIO
Se debe poner una mano en los tornillos que mueven la platina y la otra mano en los
tornillos macromtrico y micromtrico. Si el microscopio es binocular se debe graduar la
separacin de los oculares a nuestros ojos; si es monocular la observacin se debe
hacer con los dos ojos abiertos.
ENFOQUE DEL MICROSCOPIO
1. Baje completamente la platina del microscopio, usando el tornillo macromtrico

2. Haciendo uso del mecanismo del revolver, coloque frente a la preparacin el lente
objetivo de menor aumento ( llamado seco dbil 10 X).
3. Coloque la preparacin microscpica sobre la platina sujetndola con las pinzas del
carro y centre la preparacin haciendo uso de los tornillos del carro.
4. Regule la luz mediante el uso del mecanismo del diafragma.
5. Haciendo uso del tornillo macromtrico suba al mximo la preparacin hasta que
encuentre tope sin observar por los oculares.
6. Observando a travs del ocular, accione el tornillo macromtrico hasta que visualice
la imagen en el campo microscpico.
7. Una vez enfocada la imagen, afine el enfoque microscpico, haciendo uso del tornillo
micromtrico.

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8. Si desea mayor detalle aumento de la imagen, cambie de aumento rotando el
mecanismo del revolver a un lente objetivo que le proporcione el aumento deseado,
corrigiendo el enfoque de imagen moviendo el tornillo micromtrico, y graduando la
intensidad de luz con el diafragma.
9. Despus de haber realizado la observacin, se limpian las lentes con papel limpia
lentes, se coloca el objetivo de menor aumento en posicin de enfoque, se baja la
platina, se desconecta y se tapa. El microscopio queda listo para la prxima
observacin.
V. PROCEDIMIENTO: Este laboratorio consta de 3 fases:

a) Actividad de repaso
b) Elaboracin de preparaciones temporales y observacion microscpica
c) Elaboracin del reporte de laboratorio
a) ACTIVIDAD DE REPASO:
Complete el siguiente cuadro con las funciones de cada parte del microscopio y
el nmero que identifica a cada una de ellas en el esquema.
En el dibujo coloree de rojo las partes pticas y de verde las partes mecnicas
PARTE FUNCION #
Oculares
PARTES OPTICAS Objetivos
se llaman asi porque:
Condensador
Filtros de luz
________________
Prismas
PARTES Pie, base o
MECANICAS soporte
se llaman asi porque: Columna o brazo
Platina
Carro y tornillos
del carro
_________________ Tornillo
macromtrico
Tornillo
micromtrico
Mecanismo de
revolver

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Tubo del ocular
Diafragma
b. ELABORACION DE PREPARACIONES MICROSCOPICAS TEMPORALES Y

OBSERVACIN MICROSCPICA
El profesor explicar la tcnica correcta de hacer las preparaciones microscpicas
temporales, con los materiales que el estudiante aporte utilizando agua destilada como
medio de montaje.
1. LETRA IMPRESA:
Busque en el peridico la letra ms pequea que encuentre, corte una
letra NO SIMTRICA (e, a, etc)
En un porta objetos coloque una gota de agua destilada y coloque en l el
pedazo de papel con la letra seleccionada, cbrala con el cubre objetos
procurando que no lo quede burbujas de aire.
obsrvela en el microscopio usando el objetivo seco dbil y seco fuerte
COMPARE LA DIRECCION DE LA LETRA EN LA LAMINILLA Y EN LA
OBSERVACION MICROSCPICA
Elabore sus esquemas.
2. PREPARACIN DE CORCHO:
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Haga varios cortes delgados de corcho utilizando la navaja y escoja el
ms delgado. Recuerde que es material para observacin microscpica
por lo que puede ser una muestra MUY pequea.
En un porta objetos coloque una gota de agua destilada y coloque en l el
pedazo de corcho seleccionado, y pngale un cubre objetos, procurando
que no lo quede burbujas de aire.
Proceda a su observacin microscpica usando el objetivo seco dbil y
seco fuerte
Haga sus esquemas correspondientes.
c. REPORTE DE LABORATORIO
Todos sus reportes de laboratorio debern incluir lo siguiente:
Datos generales: Nombre de la Universidad, Facultad, unidad didctica, curso,
grado o ciclo, nombre y nmero de laboratorio, grupo de laboratorio, nombre y
carn del estudiante, da y fecha, nombre del docente.
I. Introduccin.
II. Objetivos.
2.1. General.
2.2. Especficos.
III. Marco Terico.
IV. Metodologa.
V. Resultados. Esquema (s)
VI. Anlisis, Conclusiones y Recomendaciones.
VII. Bibliografa.
Recomendaciones para sus esquemas de observaciones microscpicas:

Hacerlos a lpiz
Colorear segn lo observado en el laboratorio
El tamao del esquema debe ser proporcional a las obsevaciones
Indicar aumentos microscpicos del ocular, del objetivo y aumentos totales
Hacer una pequea descripcin de lo que representa, sealando detalles
sobresalientes de la observacin.
Letra clara y sencilla
Al rotular el esquema (sealando detalles en el mismo) se debe hacer a ambos
lados para que quede equilibrado.

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OBSERVACION MICROSCOPICA
DE CELULA
PROCARIONTE Y EUCARIONTE
I. INTRODUCCION.
Los seres vivos presentan
diversidad en forma, dimensin
y estructura;estas caractersticas
dependen de las clulas que los
integran, de la actividad que
realizan y del entorno que les
rodea.
La clula como unidad morfolgica tiene un patrn general de estructura, pero existen
variantes que establecen diferencia entre ellas.
Una de las diferencias ms significativas es la ausencia o presencia de una envoltura
alrededor del material gentico, que es la base para la clasificacin en dos
grandes grupos: clulas procariontes (sin envoltura nuclear, por lo que presentan
nucleoide) y clulas eucariontes (presentan envoltura nuclear y por ello, ncleo
verdadero).
Para poder observar las clulas procariotas se utiliza la tincin de gram que permite
clasificar a las bacterias en Gram positivas y Gram negativas; la tcnica para esta
tincin es la siguiente:
TINCIN DE GRAM:
- Aplique una capa delgada del espcimen en el portaobjetos, djelo secar

fjelo con calor utilizando un quemador.
- Cbralo con cristal violeta durante 1 minuto, lvelo con agua.
- Aplique solucin yodada durante 1 minuto, lvelo con agua.
- Cuidadosamente decolore la laminilla con alcohol-acetona hasta que el color
azul se torne en celeste claro.
- Aplique solucin de safranina por un minuto, lvelo con agua, secando la
laminilla con papel filtro.
Las bacterias Gram positivo se tien de color azul violeta.

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Las bacterias Gram negativo se tien de color rosado.
Es importante anotar que an dentro de las clulas eucariontes existen diferencias

estructurales que permiten dividirlas en clula animal y vegetal. La clula vegetal
presenta pared celular, vacuolas prominentes, cloroplastos y plastidios y la clula
animal carece de ellos, presentando centriolos y lisosomas.
II. OBJETIVOS.
Que el estudiante:
a) Diferencie por medio de la microscopa de luz las clulas procariontes de las
eucariontes y las clulas animales de las vegetales.
b) Utilice correctamente el microscopio.
III. MATERIALES.

1. Microscopio ptico
compuesto.
2. Piseta con agua destilada
1. Porta Objetos y Cubre Objetos 3. Frasco gotero con solucin de
2. Cebolla lugol
3. Palillos de dientes de punta roma 4. Papel limpialentes
4. Cuchilla descartable 5. Xilol
6. Frotes bacterianos coloreados
con tincin de Gram
7. Aceite de inmersin
IV. PROCEDIMIENTO.

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1. OBSERVACION DE CELULAS EUCARIONTES VEGETALES:
Tome la cebolla y con la cuchilla corte profundamente en el bulbo de la cebolla
un cuadro de aproximadamente 0.5 cm por lado levantando una de las capas
De la parte interna desprenda una capa de la epidermis
Ponga una gota de lugol sobre la parte central del portaobjetos, coloque la
epidermis de la cebolla, cuidando que no se arrugue.
Cbrala con el cubre objetos
Realice su observacin microscpica con objetivo seco dbil y fuerte,
identifique el ncleo, pared celular y nucleolos.
Haga esquemas de sus observaciones.
2. OBSERVACION DE CELULA ANIMAL:

Coloque una gota de lugol en la parte central de un portaobjetos.
Con un palillo de dientes de punta roma, raspe cuidadosamente la parte interna
de la mejilla y deposite la muestra obtenida en la gota de lugol, cubra con un
cubreobjetos.
Realice su observacin microscpica con objetivo seco dbil y seco fuerte.
Elabore sus esquemas.
3. OBSERVACION DE CELULAS PROCARIONTES (OBSERVACION DEFROTES

BACTERIANOS CON TECNICA DE GRAM).
El estudiante deber investigar cual es la utilidad de esta tcnica en la
medicina
Coloque el frote en la platina del microscopio, enfoque primero con seco dbil
y luego con seco fuerte. Observe las diferencias que ocurren al cambiar de
lentes.
Agregue una gota de aceite de inmersin en el frote y observe ahora con el
objetivo de inmersin (100X). El aceite forma un medio continuo entre el vidrio
y el sistema de lentes del objetivo, lo cual permite un mayor aumento de la
imagen del objeto observado.
Haga los esquemas correspondientes y complete su reporte de laboratorio.

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CARBOHIDRATOS
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS Y LIPIDOS POR REACCIONES
QUIMICAS, DE COLOR , Y MICROSCOPIA DE LUZ
I. INTRODUCCION.
Los compuestos qumicos del protoplasma se clasifican en dos grandes grupos:

substancias inorgnicas y substancias orgnicas, las primeras se caracterizan por la
ausencia de uniones carbono-carbono en su estructura qumica; pudindose
mencionar entre este grupo: agua, gases y sales disueltas, las segundas se
caracterizan por presentar uniones carbono-carbono y carbono-hidrgeno y tomos
de oxgeno en su estructura qumica, adems de estos elementos, pueden existir
tomos de nitrgeno, fsforo, azufre y algunos metales.
Las principales substancias orgnicas responsables de las caractersticas

estructurales y funcionales del protoplasma son: carbohidratos, lpidos, protenas y
cidos nucleicos, dichas substancias pueden ser identificadas por una gran variedad
de pruebas qumicas y fsicas. En esta prctica se efectuarn algunas de estas
pruebas qumicas para identificar carbohidratos y lpidos, en forma cualitativa.
II. OBJETIVOS: Al finalizar la prctica cada estudiante ser capaz de:
1. Identificar carbohidratos y lpidos a travs de reacciones qumicas y microscopa de

luz.
1. Utilizar correctamente el microscopio ptico compuesto.

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III. EQUIPO Y MATERIALES NECESARIOS.

1. Microscopio compuesto
2. 6 pipetas de 2 a 5 ml o goteros
1. Porta y cubre-objetos 3. Solucin de lugol (2 frascos)
2. 6 tubos de ensayo, resistentes al calor 4. Solucin de Benedict (2 frascos)
(pyrex o quimax) 5. Solucin de Glucosa al 1% (2
3. Gradilla para tubos de ensayo frascos gotero)
4. Una cuchilla descartable 6. Solucin de Sacarosa al 1 % (2
5. Una papa frascos gotero)
6. Marcador permanente para identificar 7. Solucin de Almidn al 1% (2
tubos de ensayo frascos gotero)
8. Pinzas para tubos de ensayo
9. 3 Mecheros
10. Papel limpialentes
11. Xilol
IV. PROCEDIMIENTO.
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS: El almidn se identifica con lugol (solucin

de I2/KI), tindose de un azul o morado intenso (reaccin positiva); y los azcares
reductores se identifican con la solucin de Benedict, los cuales, despus de llevarse a
ebullicin, producen un precipitado color rojo ladrillo (reaccin positiva)
OBSERVACION MACROSCOPICA.
1. Numere 6 tubos de ensayo de 1 a 6

2. A los tubos 1 y 2 agregue 1 ml de almidn.
1. A los tubos 3 y 4 agregue 1 ml de sacarosa
1. A los tubos 5 y 6 agregue 1 ml de glucosa

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1. A los tubos 1,3 y 5 agrgueles 2 gotas de solucin de lugol, observe y anote
resultados en el cuadro
1. A los tubos 2, 4 y 6 agregue 5 gotas de solucin de Benedict, luego, usando el
mechero de alcohol lleve los tubos a ebullicin, (use lentes protectores, las pinzas y
evite quemarse)
2. Observe y anote los resultados en el cuadro que se adjunta.
3. Complete su reporte de laboratorio.
LUGOL BENEDICT
COLOR DEL
REACTIVO
COLOR FINAL +/- COLOR FINAL +/-
ALMIDON TUBO 1: TUBO 2:
SACAROSA TUBO 3: TUBO 4:
GLUCOSA TUBO 5: TUBO 6:
OBSERVACION MICROSCOPICA: Observacin de PLASTIDIOS LLENOS DE

ALMIDN.
1. Con su cuchilla descartable haga un corte muy fino del tubrculo de papa y
colquelo sobre un porta objetos, agregue una gota de solucin de lugol como
medio de montaje y obsrvela al microscopio usando el objetivo 10X y 40X.
2. Elabore los esquemas de lo observado y complete su reporte de laboratorio.

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LIPIDOS
I. INTRODUCCION:
Los lpidos son molculas orgnicas insolubles en agua pero solubles en solventes
orgnicos como benceno, alcohol, etc. No forman polmeros y cumplen funciones en la
clula tan importantes como:reserva energtica a LARGO PLAZO (grasas),
estructurales en membranas (fosfolpidos, glucolpidos y colesterol) y como seales
qumicas para comunicacin intercelular.
Los lpidos son identificados usando algunas tinciones como el reactivo de Sudn, ste
al mezclarse con lpidos, los tie de un color rojo brillante.
MATERIALES:

1. Porta y cubre-objetos
1. Microscopio compuesto
2. 1 tubo de ensayo
2. Solucin de sudn (2 frascos
3. Una cuchilla descartable
gotero)
4. Aceite de cocina (10 ml)
3. Papel limpialentes
5. Trozo de tejido adiposo (de res o de
4. Xilol
pollo)
PROCEDIMIENTO:
OBSERVACION MACROSCOPICA.

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a. Coloque en un tubo de ensayo 1 ml. de aceite de cocina, agregue 1 ml. de agua
destilada. Observe y anote sus observaciones.
b. Agrguele unas gotas de Sudn; observe inmediatamente y anote los resultados
c. Agite enrgicamente, djelo reposar por 5 minutos, obsrvelo y anote los
resultados.
OBSERVACION MICROSCOPICA: Observacin de tejido adiposo.
a. Usando la cuchilla descartable haga un corte delgado del tejido adiposo.

b. Mntela en el portaobjetos y agrguele una gota de Sudn, cbrala con el
cubreobjetos y presione suavemente
c. Obsrvela al microscopio con el objetivo seco dbil (10X), y luego con el objetivo
seco fuerte (40X)
d. Elabore sus esquemas y complete su reporte de laboratorio
CUESTIONARIO:
1. Al colocar agua sobre el aceite de cocina, se mezclan? Por qu?

________________________________________________________________
2. Cul de los dos compuestos se va al fondo del tubo? Explique por qu

________________________________________________________________
3. Por qu el sudn tie el aceite y no el agua destilada?

________________________________________________________________
4. Qu es un adipocito?
________________________________________________________________
5. Por qu se tien con sudn los adipocitos?

________________________________________________________________
6. Qu tipo de lpidos almacenan los adipocitos?

________________________________________________________________
7. Qu partes de la clula estn estructuradas de lpidos?

________________________________________________________________

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8. Enumere las funciones de los lpidos en las clulas:
a. ______________________________________
b. ______________________________________
c. ______________________________________
IDENTIFICACION DEL ENLACE PEPTIDICO
POR REACCIONES QUMICAS
I. INTRODUCCION.
Las protenas son compuestos cuaternarios formados por (C, H, 0, N) que tienen como
unidades bsicas aminocidos los cuales se unen por enlaces peptdicos. Ellas
cumplen en los seres vivos gran variedad de funciones, entre las cuales estn: ser
catalizadores de reacciones biolgicas (enzimas), defender al organismo
(anticuerpos) y formar estructuras.
Las protenas pueden ser afectadas por cambios en la temperatura,

concentracin de iones H+ (pH) y pueden ser identificadas por reacciones de color
como Xantoproteica, Milln y Biuret; as como por cromatografa en capa fina o de
gases. La identificacin podemos hacerla en forma cualitativa o cuantitativa.
Los cidos nucleicos en su forma polmera forman ADN y ARN, los cuales se
encuentran tanto en clulas eucariontes como procariontes y algunos virus. El ADN
tiene diferentes funciones para la clula y virus tales como material gentico
II. OBJETIVO.
Al finalizar la prctica cada estudiante ser capaz de identificar el enlace peptdico

presente en protenas a travs de reacciones qumicas; as como extraer ADN de
clulas vegetales tal como la cebolla.
III. MATERIALES.
Identificacin de enlaces peptdico
3 Tubos de ensayo*
Leche*
Orina*
Solucin de clara de huevo*
Solucin de hidrxido de sodio al 10% (3
222522222225
frascos)
Solucin de sulfato de cobre al 10% (3 frascos)
Gradilla para tubos de ensayo
3 Pipetas de 2 a 5 ml o goteros
3 Agitadores de vidrio
Guantes descartables*
El material marcado con asterisco * lo aportan los estudiantes por grupo.
IV. PROCEDIMIENTO.
A) IDENTIFICACION DEL ENLACE PEPTIDICO DE PROTEINAS.
Reaccin de Biuret (Identificacin del enlace peptdico)
En un tubo de ensayo ponga 2 ml. De solucin de clara de huevo al 10%; luego

agregue 10 gotas de hidrxido de sodio al 10%, agrguelo cuidadosamente gota a
gota y agite despus de cada adicin. Luego agregue solucin de sulfato de cobre
II al 10% hasta que se produzca una coloracin violeta o prpura, color que indica
que la prueba es positiva.
Repita el mismo procedimiento con la leche y la orina. Anote sus resultados en el

cuadro, y explique a qu se deben los cambios observados. Complete su reporte
de laboratorio de VARIOS.
CUADRO: RESULTADOS CON REACCIN DE BIURET
MUESTRA CAMBIOS OBSERVADOS

LECHE
CLARA DE
HUEVO
ORINA

232523232325
PRACTICA DE LA
SEMANA 7
ELABORACION DE UN MODELO TRIDIMENSIONAL DE LA MEMBRANA
PLASMTICA
I. INTRODUCCION.
La membrana citoplasmtica es una estructura comn a todas las clulas, recubre
el contenido interno manteniendo as las diferencias esenciales entre el contenido
de la clula y su entorno. Dentro de la clula eucarionte, existen estructuras como
retculo endoplsmico, complejo de Golgi, mitocondrias y otros delimitados por
membrana que mantienen dentro de cada compartimiento especfico los
contenidos moleculares propios de cada uno de ellos, separndolos as del
citoplasma circundante y permitindoles realizar sus funciones.
Todas las membranas biolgicas tienen una estructura bsica comn: doble capa
continua de molculas lipdicas y protenas inmersas dentro de la doble capa
lipdica que pueden ser de ubicacin intrnseca o perifrica, la unin entre ambas
molculas se debe a interacciones no covalentes, y la presencia de fuerzas
hidroflicas e hidrofbicas, secundarias a las caractersticas anfipticas de las
molculas. Las membranas pueden interrelacionarse hacia los espacios acuoso
extracelular y tambin al acuoso intracelular y permiten que se realicen las
diferentes funciones a su cargo.
II. OBJETIVOS:
Que el estudiante comprenda la estructura de la membrana plasmtica, mediante
la elaboracin de un modelo tridimensional.
III. MATERIALES SUGERIDOS.

242524242425
Se sugiere emplear plasticina, duroport, alambre, clips, etc.
IV. PROCEDIMIENTO.
ELABORACION DEL MODELO DE MEMBRANA PLASMTICA.
Sobre una plancha de duroport de ms o menos 22 x 20 cms., para representar
los planos de las monocapas, proceda as:
A) Elaborar las molculas de fosfolpidos con variados colores, para diferenciar la
cabeza hidroflica de las colas hidrocarbonadas e hidrofbicas.
B) Utilizando colores diferentes en el material elegido, construya y coloque las

protenas de ubicacin intrnseca y perifrica.
C) No olvide colocar adems las molculas de colesterol y carbohidratos en donde

corresponda, de acuerdo al modelo de su libro de texto.
D) El modelo puede elaborarse individualmente o en grupo no mayor de 5 estudiantes,

segn las indicaciones del profesor.
V. BIBLIOGRAFIA.
- BRUCE ALBERTS. Biologa Molecular de la Clula. Espaa, Edit. FELICIA.

1998.
CUESTIONARIO:
Despus de elaborar su modelo de membrana plasmtica responda las siguientes
preguntas:
1. Cul es el concepto de Modelo de Mosaico Fluido de la membrana celular?
2.Qu caractersticas estructurales y de solubilidad poseen las molculas que

conforman las membranas celulares?
3 Cul es la localizacin de las molculas en la estructura de la membrana celular y

sus implicaciones funcionales?
4.Cul es el concepto del Sistema Intermembranas de la clula eucarionte?
5.Qu importancia tienen las interacciones hidrofbicas en la organizacin molecular de la

membrana celular?
252525252525
6 Puede Ud. A travs del modelo explicar la funcin de la estructura?

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FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS

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Al finalizar la prctica, el estudiante ser capaz de:

MATERIALES APORTADOS POR EL MATERIALES APORTADOS POR

1. Porta Objetos y Cubre Objetos

IV. FUNDAMENTACION TERICA:

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OBJETIVOS EN SECO: Son los que se emplean ms corrientemente. Entre la lente

OBJETIVOS DE INMERSION: Se llama as a aquellos en los cuales, para la

CUALIDADES DE LOS OBJETIVOS: Los objetivos deben poseer tres cualidades:

OCULARES (LENTES OCULARES)

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REGLAS GENERALES DE OBSERVACIN

ILUMINACION. Puede utilizarse luz natural o artificial elctrica. En general basta

2.3 CUIDADO DEL MICROSCOPIO. El microscopio es un instrumento costoso.

PARA OBSERVAR EN UN MICROSCOPIO

ENFOQUE DEL MICROSCOPIO

1. Baje completamente la platina del microscopio, usando el tornillo macromtrico

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V. PROCEDIMIENTO: Este laboratorio consta de 3 fases:

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b. ELABORACION DE PREPARACIONES MICROSCOPICAS TEMPORALES Y

Recomendaciones para sus esquemas de observaciones microscpicas:

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- Aplique una capa delgada del espcimen en el portaobjetos, djelo secar

Las bacterias Gram positivo se tien de color azul violeta.

Las bacterias Gram negativo se tien de color rosado.

Es importante anotar que an dentro de las clulas eucariontes existen diferencias

MATERIALES APORTADOS POR EL MATERIALES APORTADOS POR

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2. OBSERVACION DE CELULA ANIMAL:

3. OBSERVACION DE CELULAS PROCARIONTES (OBSERVACION DEFROTES

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Los compuestos qumicos del protoplasma se clasifican en dos grandes grupos:

Las principales substancias orgnicas responsables de las caractersticas

II. OBJETIVOS: Al finalizar la prctica cada estudiante ser capaz de:

1. Identificar carbohidratos y lpidos a travs de reacciones qumicas y microscopa de

1. Utilizar correctamente el microscopio ptico compuesto.

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III. EQUIPO Y MATERIALES NECESARIOS.

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS: El almidn se identifica con lugol (solucin

1. Numere 6 tubos de ensayo de 1 a 6

Manual de Prcticas de Laboratorio 2017

ALMIDON TUBO 1: TUBO 2:

SACAROSA TUBO 3: TUBO 4:

GLUCOSA TUBO 5: TUBO 6:

OBSERVACION MICROSCOPICA: Observacin de PLASTIDIOS LLENOS DE

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MATERIALES APORTADOS POR EL MATERIALES APORTADOS POR

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OBSERVACION MICROSCOPICA: Observacin de tejido adiposo.

a. Usando la cuchilla descartable haga un corte delgado del tejido adiposo.

1. Al colocar agua sobre el aceite de cocina, se mezclan? Por qu?

2. Cul de los dos compuestos se va al fondo del tubo? Explique por qu

3. Por qu el sudn tie el aceite y no el agua destilada?

5. Por qu se tien con sudn los adipocitos?

6. Qu tipo de lpidos almacenan los adipocitos?

7. Qu partes de la clula estn estructuradas de lpidos?