ALUMNAIO .. 1 EXAMEN SEGUNDO PARCIAL DE PROBLEMAS: 2" DE BIOLOGIA (6-4-2016) La enzima A transformasa, de una bacteria encontrada en el planeta ujaen, cataliza la reaccién A = B. Cuando se realiza la representacién de Lineweaver-Burk, tv frente a 1/s, de un ensayo cinético con dicha enzima, la ordenada en el origen tiene un valor de 6,17 x 10° min/umol y la abcisa en el origen es de -0,16 uM". Cuando ‘esta enzima se ensaya en presencia de una concentracién de inhibidor 2 x 10% M, entonces estos valores son de 6,17 x 10° min/umol y -0,01 uM, respectivamente. 1) Caleular Km y Vmax sin inhibidor. (3 puntos). 2) Determinar qué tipo de inhibicién se produce y qué valor tiene Ki, (3 puntos). 3) Indicar a qué concentracién de sustrato se puede decir que la enzima esta trabajando a Vmax. A la concentracién de sustrato que hace a la velocidad maxima, calcular cuanto tardara en consumirse la rmitad del sustrato. (4 puntos). Analizada esta enzima en la cepa salvaje, se ha observado que tiene un fragmento que presenta la secuencia ~ ‘Trp-Cys-Arg-Met-Arg-Pro-. Cuando se examinaron tres cepas mutantes provenientes de esta, se observé que dicho fragmento presentaba algunas variaciones respecto de la cepa original. Asi, en la cepa 1 se encontré que la cadena se terminaba en la metionina, la cepa dos tenia tirosina en lugar de cisteina y en la cepa tres este fragmento estaba formado por los aminodcidos ~Trp-Ser-Glu-Cys-Asp-Gin-. Establecer la secuencia de los péptidos tanto de la cepa salvaje como los de las cepas mutantes (6 puntos) y establecer que ha ocurrido en cada caso (4 puntos). Una enzima tiene un peso molecular de 60000. 50 pl de la misma tienen una actividad de 20 ymol/min. La concentracién de proteinas es de 2 mgiml. Calcular a) la actividad de la enzima en U/ml (3 puntos) ; b) la actividad especifica (3 puntos), y c) la K,q de la enzima (4 puntos), ‘Analizada la composicién de aminodcidos de un fragmento de esta enzima arrojé la siguiente secuencia: R-Val- ‘Asn-Trp-Ser-Glu-Lys-lle-R’. Cuando se estudié la misma enzima proveniente de un organismo obtenido por ‘mutacién del anterior se observé que ese mismo fragmento presentaba una secuencia de aminodcidos diferente: R-Val-Asn-Gly-Val-Lys-Asn-lle-R’ a) Diga qué debié ocurrir para que esto fuese posible. (2 puntos). b) Averigile las secuencias correspondientes a los cuatro aminodcidos que son diferentes en el salvaje y en el mutante. (6 puntos). ©) A partir de la cepa salvaje se aislé otro mutante en el cual se observé que la sintesis de la proteina objeto de estudio finalizaba en Asn (R-Val-Asn-COOH). Sefiale lo que ha podido ocurrir en este caso. (2 puntos). ‘Second letter u ic A UUU] phe UCU UAU u WAL oy UC UAA Stop UGA A vue J'®" uce VAG Sion G cuu ccu CAL i u Bc CUI 4, COC],,. orc lM . © cua cca om in as ® cus} coc} cae az 2 aw ACU AAU. ug AUG file ACC ac L880 ce AUA ACA] TT AAA * Aue met aca} — ana tle é Guy} Gou) aut, u gug|,, acc], Gact Ase © & GER} cca] GAA), A ua Go sacl a G