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PREPARACIN DE LA MUESTRA DE UN TEJIDO

1. OBTENCIN DE LA MUESTRA
BIOPSIA
NECROPSIA
AUTOPSIA
ETIQUETAR LA MUESTRA(bloque)

EN HOSPITALES:
CASSETES

2. FIJACION( 12-24 horas)


Inmediatamente
USO COMN: Formol ractificado al 10% o paraformaldehido en
medio acuoso 4
PASO IRREVERSIBLE
BLOQUES PEQUEOS DE 1mm3
Relacin fijador/muestra es de 1/40
Lavado: 1h

OBJETIVOS
1. Detener el proceso de degeneracin post-morte
2. Insubilizar los componentes celulares, mediante enlaces
cruzados
3. Mantiene la forma y volumen.
4. Facilitar las tinciones

3. DESHIDRATACIN(1 a 2 horas)
1. Agua
2. Alcohol corriente 70%
3. Alcohol corriente 80%
4. Alcohol corriente 96%
5. Alcohol absoluto
4. Aclaramiento(2h)
USO COMN: Xilol
1. Muestra totalmente deshidratada
2. Cambios sucesivos de alcohol hasta xilol
Si el tejido esta incorrectamente deshidratado el xilol se torna
blanquecino se debe deshidratar una media hora ms.

5. INCLUSIN: IMPREGNACIN DE PARAFINA


Se calienta la parafina a 58 C
Se coloca nuevamente en la estufa
Se deja enfriar hasta solidificar
Y se pasa a la preparacin del taco
OCUPA LOS ESPACIOS INTRA E INTER CELULAR
DA CONSISTENCIA A LOS TEJIDOS PARA SER CORTADOS
6. CORTE
USO COMN: Microtomo de Minot
Cortes:
1. Primero cortes gruesos de 35-40 para uniformizar el
taco
2. Luego cortes delgados de 3-5 um(debido al tamao de
los ncleos y el paso de la luz)
3. Colocacin sobre portaobjetos: se le agrega lbumina
de mayer(clara de huevo, glicerina y timol; previene
los hongos) a 58
4. Bao de infiltracin: Agua a una T de 45
5. Se extienden con un pincel
6. Se deja secar
7. TINCIN
I. Desparafinacin
Se vuelve a utilizar xilol para aclarar la muestra
nuevamente
II. Hidratacin
i. Pasa por alcohol absoluto y luego por alcohol
comercial(5 min cada uno)
ii. Lavado
III. Coloracin
USO COMUN: Hematoxilina-Eosina
i. Se coloca en Hematoxilina por 5 min y luego se
vuelve a lavar
ii. Se coloca en alcohol cido y se vuelve a lavar
iii. Viraje: Agua amoniacal, en los hospitales
bicarbonato de litio y se vuelve a lavar
iv. Se lleva a la Eosina(1-20 min)
v. Deshidratacin Se sumergen en alcoholes
(100,96,80,70) 5 min
vi. Aclaramientos: se pasa por xilol
IV. Montaje:
USO COMUN : Blsamo de Canada
1. Se coloca la lmina cubraobjetos
2. Se le agrega el blsamo de canada