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U N I V E R S I D A D M I C H

U N I V E R S I D A D

M I C H O A C A N A

D E

S A N

N I C O L Á S

D E

H I D A L G O

FACULTAD DE QUÍMICO FARMACOBIOLOGÍA

ANÁLISIS

INSTRUMENTAL

5. Polarimetría.

FARMACOBIOLOGÍA ANÁLISIS INSTRUMENTAL 5. Polarimetría. PROF. JOSÉ LUIS SALVADOR HERNÁNDEZ. UMSNH/FQFB/15-16

PROF. JOSÉ LUIS SALVADOR HERNÁNDEZ.

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POLARIMETRÍA.

La actividad óptica es una medida de la capacidad de ciertas substancias para hacer girar la luz polarizada. Las interacciones de la radiación con la materia que causan la rotación de la luz polarizada se comprenden con menos claridad que los procesos de la absorción, emisión o refracción. El término Polarimetría, puede definirse como el estudio de la rotación de la luz polarizada por substancias transparentes. La dirección y el grado de rotación (potencia rotatoria óptica) es útil para el análisis cualitativo y cuantitativo, y para la elucidación de estructuras químicas.

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La determinación de la rotación específica es muy útil si se trata de distinguir un isómero óptico de otro (enantiómeros). Por ejemplo, En 1848, el químico Louis Pasteur mientras estaba realizando un trabajo sobre sales del ácido tartárico, observó que, el tartrato de sodio, ópticamente inactivo, existía como una mezcla de dos clases diferentes de cristales que eran imágenes especulares entre sí. Separó la mezcla cuidadosamente en dos montones, uno de cristales derechos y el otro de izquierdos. La mezcla original era ópticamente inactiva; sin embargo, cada grupo de cristales por separado era ópticamente activo. Además, las rotaciones específicas de ambas soluciones eran iguales, pero de signo contrario; es decir, una solución rotaba la luz polarizada en un plano hacia la derecha y, la otra, un número igual de grados hacia la izquierda. En todas las demás propiedades, ambas sustancias eran idénticas.

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IMPORTANCIA DE LOS COMPUESTOS, DROGAS O MEDICAMENTOS QUIRALES:

DE LOS COMPUESTOS, DROGAS O MEDICAMENTOS QUIRALES: H 3 C CH 3 H C C H

H 3 C

CH 3 H C C H H
CH 3
H
C
C
H
H
DROGAS O MEDICAMENTOS QUIRALES: H 3 C CH 3 H C C H H CH 3
CH 3 C C
CH 3
C
C

H O

OH

Ibuprofeno

(isómero “S”).

(Advil, Motrin, Nupren): Acción Antiinflamatoria

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IMPORTANCIA DE LOS COMPUESTOS, DROGAS O MEDICAMENTOS QUIRALES:

DE LOS COMPUESTOS, DROGAS O MEDICAMENTOS QUIRALES: HO HO H CH 3 C CO 2 H

HO

DE LOS COMPUESTOS, DROGAS O MEDICAMENTOS QUIRALES: HO HO H CH 3 C CO 2 H

HO

H CH 3 C
H CH 3
C

CO 2 H

H NH 2

Metildopa (isómero “S”).

(Aldomet): Acción Antihipertensiva

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exclusiva

IMPORTANCIA DE LOS COMPUESTOS, DROGAS O MEDICAMENTOS QUIRALES:

DE LOS COMPUESTOS, DROGAS O MEDICAMENTOS QUIRALES: CH 3 H H 3 C C C CO
CH 3 H H 3 C C C CO 2 H SH NH 2
CH 3
H
H 3 C
C
C
CO 2 H
SH
NH 2

Penicilamina: Acción altamente potente; Artritis crónica

(isómero “S”) (El isómero “R” no tiene acción terapéutica y es

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altamente tóxico).

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TEORÍA. Según la teoría electromagnética, la luz se comporta como una onda y las vibraciones de su movimiento ondulatorio ocurren en un plano a ángulo recto de su dirección. En la luz natural, estas vibraciones ocurren en todos los planos perpendiculares a su dirección. La luz común, natural y sin reflejar, se comporta como si consistiera en un gran número de ondas electromagnéticas vibrando en todas las direcciones posibles, alrededor de la dirección de la propagación. Si por algún medio se separan de la conglomeración natural sólo aquellos rayos vibrando en un plano particular, se obtiene entonces luz polarizada plana. (Desde luego, y puesto que una onda de luz consta de un componente eléctrico y otro magnético vibrando a ángulos rectos entre sí, el término plano puede ser no muy descriptivo, pero se puede considerar que el rayo es plano al tomar en cuenta únicamente la dirección del componente eléctrico.

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Al aplicar luz polarizada a una sustancia habrá interacción entre ambas, dependiendo de la estructura molecular o cristalina de la sustancia y la longitud de onda de la luz. Si la sustancia presenta actividad óptica, hará girar el plano en que ocurre la onda electromagnética. Se mide cuántos grados hizo girar la muestra a dicho plano (grados de rotación) mediante un segundo prisma o filtro polarizador rotatorio (analizador) que tiene acoplada una escala en grados, la mitad con signo (+) y la otra con signo (-). El signo de los grados indica la si la sustancia es levógira (-) o dextrógira (+) y el número de grados es directamente proporcional a la concentración.

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POLARÍMETRO.

El polarímetro consta de las siguientes partes básicas:

Una fuente de luz.El polarímetro consta de las siguientes partes básicas: Un polarizador. Tubos para muestras. Un analizador. Un

Un polarizador.consta de las siguientes partes básicas: Una fuente de luz. Tubos para muestras. Un analizador. Un

Tubos para muestras.partes básicas: Una fuente de luz. Un polarizador. Un analizador. Un círculo graduado para medir el

Un analizador.Una fuente de luz. Un polarizador. Tubos para muestras. Un círculo graduado para medir el grado

Un círculo graduado para medir el grado de rotación.Una fuente de luz. Un polarizador. Tubos para muestras. Un analizador. UMSNH/FQFB/15-16 ICP-MS / Anál Inst

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FUENTES DE LUZ.

Las fuentes de luz más comunes para la polarimetría son las lámparas de vapor de sodio y las lámparas de vapor de mercurio.

La lámpara de sodio emite luz de longitudes de onda de 589.0 y 589.6 nm más lámpara de sodio emite luz de longitudes de onda de 589.0 y 589.6 nm más un pequeño fondo continuo que puede eliminarse en gran parte por medio de un filtro de dicromato de potasio al 7 %, empleado en una capa de 6 cm de grueso.

La lámpara de mercurio emite luz de varias longitudes de onda, estando las líneas visuales prominentes lámpara de mercurio emite luz de varias longitudes de onda, estando las líneas visuales prominentes a 435.8, 491.6, 546.1, 577.0 y 579.1 nm. Cada línea puede aislarse por medio de una selección adecuada de filtros. Si se puede emplear una fuente de luz continua, entonces es posible usar la luz de día ordinaria o una lámpara de filamento de tungsteno.

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POLARIZADOR.

El polarizador (y el analizador) pueden ser de diversos tipos. Uno de ellos consiste de un cristal, por lo general de calcita o cuarzo, cortado en forma diagonal a un ángulo tal que uno de los componentes de la luz sea totalmente reflejado. El segundo componente pasa a través de la otra mitad del cristal y emerge en la misma dirección que la del haz original. La dos mitades del prisma están adheridas por medio de un cemento que posee un índice de refracción tan próximo como sea posible a 1.4865, que es el valor de η, el índice de refracción extraordinario de la calcita. El índice de refracción de la calcita a ángulos rectos con este rayo de η 0 = 1.6584. Se conocen diversos tipos de prismas polarizadores (y analizadores). Varían en los ángulos de las caras del prisma y en el corte diagonal a través del mismo. El prisma de Glan-Thompson y el prisma de Nicol son los más comunes.

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Filtros Polaroid.

Un tercer método para producir luz polarizada consiste en el uso de filtros Polaroid. Los filtros Polaroid están formados por cristales fuertemente dicroicos orientados en un material plástico. Estos cristales son fuertes absorbentes de la luz que vibra en una dirección, pero sólo absorben débilmente la que vibra en dirección perpendicular. Los polaroids nunca producen 100 % de polarización; además la luz debe estar entre 500.0 y 680.0 nm. Por consiguiente, el filtro Polaroid sólo se emplea en los instrumentos más económicos.

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De acuerdo a su efecto sobre la luz polarizada tenemos entonces dos clases de sustancias: ópticamente activas, que son capaces de desviar (rotar) el plano de polarización y ópticamente inactivas, si no lo rotan.

La actividad óptica se debe a:

La estructura cristalina de la substancia.inactivas, si no lo rotan. La actividad óptica se debe a: La estructura quiralidad). molecular de

se debe a: La estructura cristalina de la substancia. La estructura quiralidad). molecular de la substancia

La

estructura

quiralidad).

molecular

de

la

substancia

(presencia

de

un

centro

de

En ambos casos la característica común es la falta de simetría. En el primer caso tenemos algunos cristales sólidos, como el cuarzo y el clorato de sodio; cuando se destruye la estructura cristalina de estas substancias (fundiéndolas o disolviéndolas) pierden su actividad óptica. En el segundo caso, la actividad óptica ocurre sólo en solución o en estado gaseoso. (Como ejemplo tenemos gran variedad de substancias orgánicas: glucosa, ácido tartárico,

morfina, etc…

determinaciones de este tipo de substancias.

La principal aplicación de la polarimetría es hacer

).

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ISÓMEROS.

(Compuestos diferentes con la misma fórmula molecular).

(Compuestos diferentes con la misma fórmula molecular). Isómeros de constitución. (Isómeros cuyos átomos

Isómeros de constitución.

(Isómeros cuyos átomos tienen diferente conectividad).

Estereoisómeros.

(Isómeros que tiene la misma conectividad, pero difieren en la distribución de sus átomos en el espacio).

difieren en la distribución de sus átomos en el espacio). Enantiómeros. (Estereoisómeros que son imágenes en

Enantiómeros.

(Estereoisómeros que son imágenes en el espejo uno de otro).

Diastereómeros.

(Estereoisómeros que no son imágenes en el espejo uno de otro).

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QUIRALIDAD.

CENTRO ESTEREOGÉNICO O ESTEREOQUÍMICO.

NOMENCLATURA R y S.

QUIRALIDAD. CENTRO ESTEREOGÉNICO O ESTEREOQUÍMICO. NOMENCLATURA R y S. UMSNH/FQFB/15-16 ICP-MS / Anál Inst / JLSH

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Pruebas de la quiralidad: planos de simetría.

Cl H Br
Cl
H
Br

Cl

Pruebas de la quiralidad: planos de simetría. Cl H Br Cl H Br H H UMSNH/FQFB/15-16
H Br
H
Br

H

H

Pruebas de la quiralidad: planos de simetría. Cl H Br Cl H Br H H UMSNH/FQFB/15-16

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Pruebas de la quiralidad: planos de simetría.

Cl H Br
Cl
H
Br

F

Pruebas de la quiralidad: planos de simetría. Cl H Br F H F Cl H F

H

F

Cl

Pruebas de la quiralidad: planos de simetría. Cl H Br F H F Cl H F
H F Br
H
F Br
Pruebas de la quiralidad: planos de simetría. Cl H Br F H F Cl H F

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Pruebas de la quiralidad: planos de simetría.

Pruebas de la quiralidad: planos de simetría. H Espejo. H Enantiómeros. ICP-MS / Anál Inst /

H

Pruebas de la quiralidad: planos de simetría. H Espejo. H Enantiómeros. ICP-MS / Anál Inst /

Espejo.

Pruebas de la quiralidad: planos de simetría. H Espejo. H Enantiómeros. ICP-MS / Anál Inst /

H

Pruebas de la quiralidad: planos de simetría. H Espejo. H Enantiómeros. ICP-MS / Anál Inst /

Enantiómeros.

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Pruebas de la quiralidad: planos de simetría.

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Nomenclatura de los enantiómeros: el sistema R-S.

(NOMENCLATURA DE LOS ISOMEROS CONFIGURACIONALES).

El sistema más aceptado para nombrar la configuración de un centro estereogénico es la denominada convención de Cahn-Ingold-Prelog, que asigna una letra R o S a cada centro estereogénico de una molécula quiral.

Las reglas que hay que seguir para asignar una configuración R o S son las siguientes:

1º. Cada átomo unido al carbono estereogénico recibe un número 1, 2, 3 ó 4. El 1 se asigna al grupo de mayor prioridad y el 4 al de menor prioridad. La prioridad se establece según el número atómico: el átomo de mayor prioridad es el de mayor número atómico.

carbono

estereogénico desde el lado opuesto al grupo de menor prioridad.

2º.

Una

vez

asignado

el

orden

de

prioridad

se

mira

el

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Nomenclatura de los enantiómeros: el sistema R-S.

Si el orden de prioridades decreciente de los restantes grupos representa una secuencia en el sentido de las agujas del reloj se asigna al estereocentro la configuración R (rectus, derecha).

Si la secuencia gira en el sentido opuesto a las agujas del reloj la configuración del estereocentro es S (sinister, izquierda).

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ACTIVIDAD ÓPTICA.

Propiedades de los Enantiómeros. Los enantiómeros tienen idénticas temperaturas de fusión, de ebullición, igual índice de refracción, solubilidad en disolventes comunes, espectros de IR y velocidades de reacción con los reactivos ordinarios.

Propiedad física.

(R)-2-butanol

(S)-2-butanol

P. Ebullición (1 atm)

99.5 °C

99.5 °C

Densidad (g/mL, 20 °C)

0.808

0.808

Índice de refracción (20 °C)

1.397

1.397

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Propiedades diferentes de los enantiómeros:

Interacción con otras sustancias quirales.Propiedades diferentes de los enantiómeros: El comportamiento frente a la luz polarizada en un plano. Cuando

El comportamiento frente a la luz polarizada en un plano.enantiómeros: Interacción con otras sustancias quirales. Cuando un haz de la luz polarizada en un plano

Cuando un haz de la luz polarizada en un plano pasa a través de un enantiómero, el plano de polarización gira. Los enantiómeros separados hacen girar el plano de la luz polarizada en un plano en cantidades iguales, pero en direcciones opuestas. (por eso se conocen como compuestos ópticamente activos).

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El origen de la actividad óptica.

No es posible dar un panorama condensado y completo del origen de la actividad óptica que se observa en los enantiómeros separados. Sin embargo, puede obtenerse cierta idea de cual es la fuente que origina este fenómeno si se compara lo que ocurre cuando un haz de luz polarizada en un plano pasa a través de una solución de moléculas aquirales contra lo que ocurre cuando el mismo haz de luz pasa a través de una solución de moléculas quirales.

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El origen de la actividad óptica.

El origen de la actividad óptica. UMSNH/FQFB/15-16 ICP-MS / Anál Inst / JLSH

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El origen de la actividad óptica.

El origen de la actividad óptica. UMSNH/FQFB/15-16 ICP-MS / Anál Inst / JLSH

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Rotación específica.

El análisis se basa en la medición de cuántos grados hace rotar la sustancia al plano de polarización; esto depende de:

El espesor de la capa de sustancia ópticamente activa.la sustancia al plano de polarización; esto depende de: La concentración de la sustancia. Las características

La concentración de la sustancia.de: El espesor de la capa de sustancia ópticamente activa. Las características individuales de la sustancia

Las características individuales de la sustancia (rotación específica).ópticamente activa. La concentración de la sustancia. Estas se relacionan por la expresión matemática:

Estas se relacionan por la expresión matemática:individuales de la sustancia (rotación específica). UMSNH/FQFB/15-16 α α c l ICP-MS / Anál Inst /

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α
α

α

c l

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Donde:

α

α c l
α
c l

[α] = rotación específica.

α

= rotación observada en grados.

l

= longitud de la celda (dm).

c

= concentración de la muestra (g/mL).

La rotación puede ser en sentido de las manecillas del reloj (signo positivo o dextrógira) o al contrario (signo negativo o levógira).

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Factores que afectan la rotación específica. La λ de la luz. La aumenta o disminuye; en algunas sustancias cambia de signo y hay una longitud de onda en la que no desvían la luz polarizada, ej. La efedrina a 546 nm; en esta dependencia se basa otro método de análisis (dispersión óptica rotatoria). La temperatura. La aumenta. La naturaleza de la sustancia. Esto ayuda a identificarla. El solvente. Generalmente se usa agua u otro disolvente orgánico.

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Al igual que en refractometría, como la temperatura y la λ afectan la medición hay que indicarlas. La temperatura en grados centigrados y la λ se indica con una letra; generalmente es la línea D del sodio. El símbolo es:

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t α λ
t
α
λ
HOOC H 3 C H
HOOC
H 3 C
H
COOH CH 3 OH HO H
COOH
CH 3
OH
HO
H

Äcido Láctico

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Ejemplo:

La forma d del ácido láctico tiene una rotación de:

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25° α +3.8° D
25°
α
+3.8°
D

La forma l tiene una rotación de:

 

25°

α

 

-3.8°

D

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Esto significa que se usó como fuente luminosa la línea D de una lámpara de sodio (l = 589.6 nm), que se determinó a una temperatura de 25 °C, y que una muestra que contenía 1 g / mL de la sustancia óptimamente activa en un tubo de 1 dm produjo una rotación de (+) , (-) 3.8°. La magnitud de la rotación depende del disolvente usado al medir las soluciones. Esta es la razón de que se especifique el disolvente cuando se registra en la bibliografía el valor de una rotación.

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Formas racémicas. La rotación neta del plano de polarización que se observa con una solución formada por moléculas (R), únicamente no se observaría si se hiciera pasar el rayo a través de una solución que contenga cantidades equimolares de (R) y (S). Se producirían las cancelaciones de todas las rotaciones y la solución de la mezcla equimolar de enantiómeros sería ópticamente inactiva.

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Pureza enantiomérica, pureza óptica y exceso enantiomérico. Una muestra de una sustancia pura ópticamente activa y compuesta por un solo enantiómero se dice que es enantioméricamente pura. Por otro lado, una muestra que contenga menos de una cantidad equimolar, presentará una rotación específica inferior, pero superior a 0 o . Esta muestra tendrá una pureza enantiomérica inferior a 100%. El porcentaje de pureza enantiomérica se define como:

mo l es d e un enan tió mero - mo l es d e l o t ro enan tió mero

P orcen t a j e d e p ureza enan ti om é r i ca =

mo l es d e am b os enan tió meros

X 100

El porcentaje de pureza enantiomérica también se llama exceso enantiómerico (ee) y es igual al porcentaje de pureza óptica:

P orcen t a j e d e p ureza ópti ca =

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ro t ac ió n es p ec ífi ca o b serva d a

ro t ac ió n es p ec ífi ca d e l enan tió mero p uro

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X 100

APLICACIONES:

Análisis de substancias con actividad óptica.

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Análisis cuantitativo. La actividad óptica de una solución es directamente proporcional a la concentración de la substancia óptimamente activa. Determinación de concentración de azúcares en la industria de alimentos. Determinación de principios activos en la industria farmacéutica.

Análisis cualitativo. La rotación específica es una constante física característica de la substancia, al igual que el p. f., p. e., etc. (Aminoácidos, esteroides, alcaloides y carbohidratos). Es el único método que permite distinguir entre los isómeros ópticos. La variación de la actividad óptica en función de la longitud de onda (dispersión óptica rotatoria) es característica de cada substancia.

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Limitaciones:

La muestra debe tener actividad óptica.

Requisitos de la muestra:

Debe ser una solución o líquido puro. Debe de tener un centro de quiralidad. Debe ser transparente a la longitud de onda analítica. De preferencia debe de estar libre de turbidez o presentar muy poca.

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Bibliografía adicional:

Química Orgánica

1.

Solomons.

2.
2.

Fessenden.

3.
3.

Morrison.

4.
4.

Carey.

5.
5.

Wade.

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