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Prctica No.

2
Produccin de piruvato y acetaldehdo durante la fermentacin

Objetivo
Experimentar en el metabolismo anaerbico en la produccin de piruvato a partir
de la utilizacin de glucosa como fuente de hidrato de carbono.

Introduccin
La fermentacin es un proceso catablico de oxidacin incompleta, totalmente
anaerbico, siendo el producto final un compuesto orgnico. Estos productos
finales son los que caracterizan los diversos tipos de fermentaciones.
El proceso de fermentacin es anaerbico ya que se produce en ausencia de
oxgeno; ello significa que el aceptor final de los electrones del NADH producido
en la gluclisis no es el oxgeno, sino un compuesto orgnico que se reducir para
poder reoxidar el NADH a NAD+. El compuesto orgnico que se reduce
(acetaldehdo, piruvato) es un derivado del sustrato que se ha oxidado
anteriormente.
En los seres vivos, la fermentacin es un proceso anaerbico y en l no
intervienen las mitocondrias ni la cadena respiratoria. Son propias de los
microorganismos, como algunas bacterias y levaduras. Tambin se produce la
fermentacin en la mayora de las clulas de los animales (incluido el hombre),
excepto en las neuronas que mueren rpidamente si no pueden realizar la
respiracin celular; algunas clulas, como los eritrocitos, carecen de mitocondrias
y se ven obligadas a fermentar; el tejido muscular de los animales realiza la
fermentacin lctica cuando el aporte de oxgeno a las clulas musculares no es
suficiente para el metabolismo aerobio y la contraccin muscular.
Desde el punto de vista energtico, las fermentaciones son muy poco rentables si
se comparan con la respiracin aerobia, ya que a partir de una molcula de
glucosa slo se obtienen 2 molculas de ATP, mientras que en la respiracin se
producen 36. Esto se debe a la oxidacin del NADH, que en lugar de penetrar en
la cadena respiratoria, cede sus electrones a compuestos orgnicos con poco
poder oxidante.
En la industria la fermentacin puede ser oxidativa, es decir, en presencia de
oxgeno, pero es una oxidacin aerbica incompleta, como la produccin de cido
actico a partir de etanol.
Las fermentaciones pueden ser: naturales, cuando las condiciones ambientales
permiten la interaccin de los microorganismos y los sustratos orgnicos
susceptibles; o artificiales, cuando el hombre propicia condiciones y el contacto
referido.

Diagrama de flujo

1. Resusupender
6. Hacer pruebas
las levaduras en las
para identificar
soluciones
acetaldehdo
reguladoras.

2. Dividir los
5. Hacer prubas
resuspendidos
para identificar el
como se estipula
piruvato.
en la metodologa.

3. Agregar la 4. Agregar como se


solucin de indica la solucin
glucosa. de malonato.
Resultados

Concentracin 0.5 %

IDENTIFICACIN DEL PIRUVATO

Fosfato de sodio 3 ml glucosa 0.5% POSITIVO


3 ml glucosa 0.5% + 3 ml POSITIVO
malonato
3 ml glucosa 0.5% + 6 ml POSITIVO
aceite
3 ml glucosa 0.5% + 6 aceite POSITIVO
+ 3 malonato
Fosfato de potasio 3 ml glucosa 0.5% POSITIVO
3 ml glucosa 0.5% + 3 ml POSITIVO
malonato
3 ml glucosa 0.5% + 6 ml POSITIVO
aceite
3 ml glucosa 0.5% + 6 aceite POSITIVO
+ 3 malonato

IDENTIFICACIN DEL ACETALDEHDO

Fosfato de sodio 3 ml glucosa 0.5% POSITIVO


3 ml glucosa 0.5% + 3 ml NEGATIVO
malonato
3 ml glucosa 0.5% + 6 ml POSITIVO
aceite
3 ml glucosa 0.5% + 6 aceite POSITIVO
+ 3 malonato
Fosfato de potasio 3 ml glucosa 0.5% POSITIVO
3 ml glucosa 0.5% + 3 ml POSITIVO
malonato
3 ml glucosa 0.5% + 6 ml POSITIVO
aceite
3 ml glucosa 0.5% + 6 aceite POSITIVO
+ 3 malonato
Concentracin 1%

IDENTIFICACIN DEL PIRUVATO

Fosfato de sodio 3 ml glucosa 1% NEGATIVO


3 ml glucosa 1% + 3 ml POSITIVO
malonato
3 ml glucosa 1% + 6 ml aceite POSITIVO
3 ml glucosa 1% + 6 aceite + NEGATIVO
3 malonato
Fosfato de potasio 3 ml glucosa 1% POSITIVO
3 ml glucosa 1% + 3 ml POSITIVO
malonato
3 ml glucosa 1% + 6 ml aceite NEGATIVO
3 ml glucosa 1% + 6 aceite + NEGATIVO
3 malonato

IDENTIFICACIN DEL ACETALDEHDO

Fosfato de sodio 3 ml glucosa 1% NEGATIVO


3 ml glucosa 1% + 3 ml NEGATIVO
malonato
3 ml glucosa 1% + 6 ml aceite NEGATIVO
3 ml glucosa 1% + 6 aceite + NEGATIVO
3 malonato
Fosfato de potasio 3 ml glucosa 1% POSITIVO
3 ml glucosa 1% + 3 ml NEGATIVO
malonato
3 ml glucosa 1% + 6 ml aceite POSITIVO
3 ml glucosa 1% + 6 aceite + NEGATIVO
3 malonato
Concentracin 2%

IDENTIFICACIN DEL PIRUVATO

Fosfato de sodio 3 ml glucosa 2% NEGATIVO


3 ml glucosa 2% + 3 ml NEGATIVO
malonato
3 ml glucosa 2% + 6 ml aceite NEGATIVO
3 ml glucosa 2% + 6 aceite + NEGATIVO
3 malonato
Fosfato de potasio 3 ml glucosa 2% POSITIVO
3 ml glucosa 2% + 3 ml POSITIVO
malonato
3 ml glucosa 2% + 6 ml aceite POSITIVO
3 ml glucosa 2% + 6 aceite + POSITIVO
3 malonato

IDENTIFICACIN DEL ACETALDEHDO

Fosfato de sodio 3 ml glucosa 2% NEGATIVO


3 ml glucosa 2% + 3 ml NEGATIVO
malonato
3 ml glucosa 2% + 6 ml aceite POSITIVO
3 ml glucosa 2% + 6 aceite + NEGATIVO
3 malonato
Fosfato de potasio 3 ml glucosa 2% NEGATIVO
3 ml glucosa 2% + 3 ml POSITIVO
malonato
3 ml glucosa 2% + 6 ml aceite POSITIVO
3 ml glucosa 2% + 6 aceite + NEGATIVO
3 malonato

El malonato es un inhibidor competitivo de la deshidrogenasa succnica, de


tal manera que la presencia de malonato detiene el ciclo de Krebs. La
reaccin que cataliza la enzima es la de deshidrogenar al succinato para
producir fumarato y FADH2. Detener el ciclo de Krebs implica parar la
cadena respiratoria y por lo tanto la maquinaria de produccin de ATP.

Discusin de Resultados
Como se puede observar en las tablas los resultados son muy diversos en algunos
casos bastantes discutibles puestos que tericamente en algunos casos no se
debi haber acumulado ninguno de los sustratos (piruvato y acetaldehdo),
debindose convertido en etanol por efecto de la fermentacin y en el caso del
inhibidor de malonato estos debieron haberse acumulado; pero esto no fue as en
algunos casos ya que las pruebas confirman la presencia o ausencia de estos en
condiciones que no debera suceder. Las concentraciones de glucosa tambin
juegan un papel importante en la forma en que se acumulan o no los sustratos.
Lo que mejor podra explicar estos casos es algn mal manejo de las condiciones
requeridas o que los tiempos de incubacin no fueron los indicados.

Comentarios

En el caso de los equipos de concentracin de glucosa al 0.5% y1% durante la


experimentacin les falto centrifugar en una de las partes de la metodologa lo que
pudo afectar los resultados obtenidos durante la prctica.

Referencias

Robert K. Murray; David A. Bender; Kathleen M. Botham, Harper. Bioqumica


Ilustrada, 28 Edicin, McGraw-Hill, 2013.
L/T Biologa 4, 10mo grado. Enseanza preuniversitaria. Editorial Pueblo y
Educacin. 2005.
UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO

DIVISIN DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS

PRCTICA No. 2

PRODUCCIN DE PIRUVATO Y ACETALDEHDO


DURANTE LA FERMENTACIN

LABORATORIO DE METABOLISMO INTERMEDIARIO

JOS CARLOS PRECIADO CARPIO

20/02/17