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La Habana, 2011
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Catalogacin Editorial Ciencias Mdicas

Introduccin a la gentica mdica; 2. ed. / Araceli Lantigua Cruz et al.


La Habana: Editorial Ciencias Mdicas, 2011.
399 p.: il.
-
-
Gentica Mdica, Meiosis, Blastmeros, Marcadores Genticos,
Mutacin, Biologa Molecular

QU 450

N
Editor: Lic. Daisy Bello lvarez

CI
Diseo: Ac. Luciano Ortelio Snchez Nez
Ilustraciones: Yisleidy Real Llufro

UC
Emplane: Amarelis Gonzlez LaO

OD
Primera. edicin, 2004
PR
RE

Dra. Araceli Lantigua Cruz, 2011


SU

Sobre la presente edicin:


Editorial Ciencias Mdicas, 2011
DA
BI
I
OH

ISBN 978-959-212-689-3
PR

Editorial Ciencias Mdicas


Calle 23 No. 654 entre E y D
El Vedado, La Habana
CP- 10400, Cuba
Telfono: 832 5338, 838 3375
E-mail: ecimed@infomed.sld.cu
www.sld.cu/sitios/ecimed/
Autores
AUTORA PRINCIPAL

Araceli Lantigua Cruz


Doctora en Ciencias Mdicas. Especialista de II Grado en Gentica Clnica.
Profesora Titular y Consultante de Gentica Mdica de la Universidad de
Ciencias Mdicas de La Habana. Investigador Titular del Centro Nacional de
Gentica Mdica.

N
COLECTIVO DE AUTORES

CI
Rolando Hernndez Fernndez

UC
Doctor en Medicina. Especialista de II Grado en Bioqumica Clnica.
Profesor Titular de Bioqumica Clnica.Jefe del Departamento de Bioqumica
OD
del ICBP Victoria de Girn. Profesor Consultante de la Universidad de
PR
Ciencias Mdicas de La Habana.
RE

Jorge Quintana Aguilar


Doctor en Medicina. Especialista de II Grado en Gentica Mdica.
SU

Profesor Auxiliar de la Universidad de Ciencias Mdicas de La Habana.


DA

Asesor del Laboratorio de Citogentica del Servicio Provincial de Gentica


Mdica de La Habana.
BI
I

Estela Morales Peralta


OH

Doctora en Ciencias Mdicas. Especialista de II Grado en Gentica Clnica.


PR

Profesora Titular de la Universidad de Ciencias Mdicas de La Habana.


Investigador Titular del Centro Nacional de Gentica Mdica.

Brbara Barrios Garca


Doctora en Ciencias Biolgicas. Licenciada en Biologa.
Profesora Titular de la Universidad de Ciencias Mdicas de La Habana.
Iris Rojas Betancourt.
Doctora en Medicina. Especialista de II Grado en Gentica Mdica.
Profesora Auxiliar de la Universidad de Ciencias Mdicas de La Habana.
Mster en Biotica.

Alicia Martnez de Santelices Curvo.


Doctora en Medicina. Especialista de II Grado en Gentica Clnica.
Profesora Asistente de la Universidad de Ciencias Mdicas de La Habana.

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Al Comandante Fidel Castro Ruz, por la visin del futuro
del desarrollo de la Gentica Humana y su repercusin en las Ciencias
Mdicas, por su eterno sentimiento de justicia social e igualdad
de posibilidades de acceso a los avances de la tecnologa en la medicina
para todos y por mostrarnos con su generosidad y sabia

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conduccin, que un mundo mejor es posible.

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A los estudiantes de Ciencias Mdicas de Cuba, quienes sern sus lectores
principales y que han motivado a poner en sus manos un texto
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que responda a las exigencias de la enseanza de los fundamentos de la
gentica dirigidos a su aplicacin
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en la medicina.
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Prlogo a la segunda edicin
Esta segunda edicin del texto Introduccin a la Gentica Mdica mantiene
los objetivos y la visin de su primer diseo. Es un texto para los estudiantes de
Ciencias Mdicas, se ha adaptado al programa de la asignatura Gentica Mdi-
ca, pero puede ser de utilidad para estudiantes de educacin especial, de psico-
loga, docentes involucrados en la docencia de preuniversitario y estudiantes y
profesionales que de algn modo necesiten de conocimientos generales de
gentica dirigidos hacia el humano y en especial a la medicina. Aunque no es un
texto dirigido a estudios avanzados de posgrado puede ser tambin de utilidad
para todas las especializaciones mdicas en especial para la Medicina General
Integral y como un primer nivel de informacin, para estudiantes de diplomados
y maestras relacionados con Gentica Mdica y Asesoramiento Gentico.

N
Se ha nombrado Introduccin a la Gentica Mdica porque contiene elementos

CI
de Biologa Celular y Molecular, de Embriologa y de las leyes de Mendel escri-
tos con el enfoque que se requiere para que el estudiante, al tener esta informa-

UC
cin asequible, tenga la posibilidad de integrarla con mayor rapidez.
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Cada captulo ha sido diseado teniendo en cuenta las leyes y principios de la
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gentica general y humana necesarios y actualizados para la comprensin de
los fundamentos moleculares, celulares, mdicos, ticos, preventivos y sociales
RE

de la Gentica Mdica.
SU

Cuenta con un captulo introductorio en el cual se enfocan antecedentes histri-


cos del desarrollo de la Gentica Mdica y de la clasificacin etiolgica de los
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defectos genticos, as como con datos actuales, que muestran el efecto de la


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prevencin de los defectos congnitos como causa de mortalidad infantil en


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Cuba.
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Los captulos 2,3, 4 y 5 facilitan contenidos bsicos actualizados de la biologa


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celular y molecular, las caractersticas de la meiosis, piedra angular para la


comprensin de la transmisin hereditaria de los genes y caracteres, el fenme-
no de la fecundacin y los primeros estadios de divisiones celulares del cigoto
hasta la formacin del blastocisto, enfocando los momentos biolgicos ms sig-
nificativos para la comprensin de mecanismos genticos cuyas anormalidades
originan enfermedades genticas y defectos congnitos.

En los captulos 6, 7 y 12 se abordan los fundamentos tcnicos, mtodos y


herramientas necesarias para el estudio con fines diagnsticos del material gentico,
as como la forma en que se exponen sus resultados y su interpretacin.
En los captulos del 8 al 11 se exponen conocimientos acerca de los defectos
cromosmicos y de mutaciones simples del ADN y su repercusin en la causa
de enfermedades genticas.

Los captulos 13, 14 y 15 proporcionan conocimientos bsicos que permiten


comprender las posibilidades de aplicacin de las nuevas tecnologas moleculares
del ADN, del estudio de la gentica poblacional y su repercusin en la
epidemiologa de enfermedades genticas. Todos estos conocimientos se mues-
tran en funcin de la comprensin de objetivos preventivos en la prctica mdi-
ca y en proporcionar informacin sobre principios tcnicos del desarrollo de
investigaciones sobre el genoma humano.

El captulo 16 explica los fundamentos genticos de la herencia de rasgos


cuantitativos enfocados al estudio de malformaciones especficas y al novedoso
tema de las enfermedades comunes en general, pero sobre todo, a aquellas que

N
se aprecian como el resultado de la prolongacin de la vida y que por las dificul-

CI
tades de la comprensin de sus caractersticas genticas y de la participacin
ambiental en estas se les denomina tambin como enfermedades complejas.

UC
En el captulo 17 se abordan los defectos congnitos y se actualizan aspectos
OD
relacionados con los genes y mecanismos celulares que participan en la
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morfognesis, cuyas mutaciones explican su origen gentico y que, adems,
proporcionan conocimientos que permiten la comprensin de la accin de
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teratgenos que interfieren con estos mecanismos jerrquicamente programados.


SU

El captulo 18 est dedicado a la prevencin de las enfermedades genticas.


DA

Proporciona informacin acerca del Asesoramiento Gentico y de sus tcnicas


y brinda la oportunidad de integrar todos los conocimientos expuestos en los
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captulos anteriores.
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Finalmente en el captulo 19 se exponen los fundamentos biolgicos, ticos y el


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soporte organizativo y tcnico de los programas de prevencin de enfermeda-


des genticas y defectos congnitos en Cuba, estructurados en los tres niveles
de atencin (primario, secundario y terciario) y en los tres niveles de preven-
cin, incluyendo de forma especial la prevencin prenatal.

Esta segunda edicin ha sido cuidadosamente actualizada, teniendo en cuenta


los nuevos enfoques de interpretacin de los conocimientos derivados de
las continuas investigaciones que se realizan sobre el genoma humano y
que generan complejos dilemas ticos que proporcionan la aplicacin mdi-
ca de algunos de ellos.
Los autores esperamos que los estudiantes encuentren en este libro, los aspec-
tos fundamentales de la gentica humana relacionados con las variaciones
genticas del desarrollo y se apoderen de las bases y herramientas necesarias
para abordar la comprensin, atencin y prevencin de aquellas enfermedades
que por las caractersticas de su patognesis, requieren de atencin mdica,
educativa especializada y apoyo social.

Al propio tiempo, los autores aspiramos a que los conocimientos ofrecidos en el


texto se transformen, adems, en armas potentes que en manos de los futuros
galenos del siglo XXI, permitan asegurar una defensa oportuna y racional, frente
a las potentes amenazas filosficas, ticas y sociales, que para los grupos
poblacionales ms vulnerables ya se aprecian como premisas reduccionistas de
la ciencia, en respuesta a la aplicacin del uso indiscriminado de las denomina-
das pruebas genticas predictivas.

N
Escribi este prlogo la Profesora Dra. Araceli Lantigua Cruz, a nombre de todos los autores.

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Prlogo a la primera edicin
Este texto ha sido diseado para los estudiantes de Ciencias Mdicas, se ha
adaptado al programa de la asignatura Gentica Mdica, pero puede ser de
utilidad para estudiantes de educacin especial, de Psicologa, profesores
involucrados en la docencia de preuniversitario, estudiantes y profesionales que
de algn modo necesiten de conocimientos generales de gentica dirigidos
hacia el humano y en especial a la medicina.

Aunque no es un texto dirigido a estudios avanzados de posgrado, podra tam-


bin ser de utilidad para todas las especializaciones mdicas en especial para la
Medicina General Integral y en un primer nivel de informacin, para estudiantes
de diplomados y maestras relacionados con Gentica Mdica y Asesoramiento
Gentico.

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Se ha nombrado Introduccin a la Gentica Mdica, porque contiene elementos

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de Biologa Celular y Molecular, de Embriologa y las Leyes de Mendel escri-

UC
tos con el enfoque que se requiere para que el estudiante tenga esta informa-
cin asequible.
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Cada captulo ha sido diseado teniendo en cuenta los conocimientos sobre las
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leyes y principios de la Gentica General y Humana necesarios para la com-
prensin de los fundamentos de la Gentica Mdica.
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Cuenta con un captulo introductorio en el cual se enfocan antecedentes hist-


ricos del desarrollo de la Gentica Mdica y de la clasificacin etiolgica de los
SU

defectos genticos.
DA

Los captulos 2, 3, 4 y 5 facilitan contenidos bsicos actualizados de la biologa


BI

celular y molecular, las caractersticas de la meiosis, piedra angular para la


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comprensin de la transmisin hereditaria de los genes y caracteres, el fenme-


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no de la fecundacin y los primeros estadios de divisiones celulares del cigoto


hasta la formacin del blastocisto, enfocando los momentos biolgicos ms sig-
PR

nificativos para la comprensin de mecanismos genticos cuyas anormalida-


des originan enfermedades genticas y defectos congnitos.

En los captulos 6, 7 y 12 se abordan los fundamentos tcnicos, mtodos y


herramientas necesarios para el estudio con fines diagnsticos del material gentico,
as como la forma en que se exponen sus resultados y su interpretacin.

En los captulos del 8 al 11 se exponen conocimientos acerca de los defectos


cromosmicos y de mutaciones simples del ADN y su repercusin en la etiolo-
ga de enfermedades genticas.
Los captulos 13, 14 y 15 proporcionan conocimientos bsicos que permiten
comprender las posibilidades de aplicacin de las nuevas tecnologas moleculares
del ADN, del estudio de la gentica poblacional y su repercusin en la epide-
miologa de enfermedades genticas. Todos estos conocimientos en funcin de
la comprensin de objetivos preventivos en la prctica mdica y en proporcio-
nar informacin sobre principios tcnicos del desarrollo de investigaciones so-
bre el genoma humano.

El captulo 16 explica los fundamentos genticos de la herencia de rasgos cuan-


titativos enfocados al estudio de malformaciones especficas y al novedoso tema
de las enfermedades comunes en general, pero sobre todo a aquellas que se
aprecian como el resultado de la prolongacin de la vida y que por las dificulta-
des de la comprensin de sus caractersticas genticas y de la participacin
ambiental en ellas se les denomina tambin como enfermedades complejas.

En el captulo 17 se aborda la causa de los defectos congnitos y se detallan

N
aspectos relacionados con los genes y mecanismos celulares que participan en

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la morfognesis, cuyas mutaciones explican su origen gentico y, adems, pro-
porcionan conocimientos que permiten la comprensin de la accin de teratgenos

UC
que interfieren con estos mecanismos jerrquicamente programados.

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El captulo 18 est dedicado a la prevencin de las enfermedades genticas.
Proporciona informacin acerca del Asesoramiento Gentico y de sus tcnicas
PR
y da la oportunidad de integrar todos los conocimientos expuestos en los captu-
RE

los anteriores, finalmente en el captulo 19 se expone un ejemplo de programa


de atencin de una enfermedad gentica en el nivel primario de salud para el
SU

cual se seleccion la enfermedad gentica ms frecuente en Cuba, la anemia


de clulas falciformes.
DA

Aunque el texto fue diseado en un tiempo breve, su contenido ha sido larga-


BI

mente meditado y en cada captulo se han tenido en cuenta los progresos que
I

el desarrollo de la gentica en los ltimos aos, sobre todo aquellos surgidos


OH

como una consecuencia de los extraordinarios avances tcnicos en los estudios


del ADN y de los nuevos conocimientos surgidos como producto de las inves-
PR

tigaciones que se desarrollan en el Proyecto Genoma Humano.

Esperamos que en este texto los estudiantes de Ciencias Mdicas encuentren


los aspectos fundamentales de la gentica humana relacionados con las varia-
ciones genticas del desarrollo y se apoderen de las bases y herramientas nece-
sarias para abordar la comprensin, atencin y prevencin de aquellas
enfermedades que por las caractersticas de su patognesis requieren de aten-
cin mdica y educativa especializada.

Los autores
Contenido

CAPTULO 1
Historia de la gentica en la medicina humana/1
Antecedentes/ 1
Enfermedades genticas/ 5
Bibliografa/ 7
CAPTULO 2
Panorama de la biologa celular y molecular/ 8
Biologa celular/ 8
Ciclo celular/ 17

N
Biologia molecular/ 23

CI
Transmisin de la informacin gentica/ 26
Resumen/ 36

UC
Bibliografa /36
CAPTULO 3
OD
Expresin y conservacin de la informacin gentica/38
Genoma humano/ 39
PR
Transcripcin/ 43
RE

Traduccin/ 53
Conservacin de la informacin gentica / 60
SU

Mutaciones/ 62
Reordenamiento de la informacin gentica/ 65
DA

Comunicacin intercelular/ 66
BI

Resumen/ 70
I

Bibliografa/ 71
OH

CAPTULO 4
Fenmenos moleculares y celulares desde meiosis hasta la formacin
PR

del blastocisto /72


Meiosis/ 73
Fecundacin/ 81
Resumen/ 83
Bibliografa/ 84
CAPTULO 5
Leyes de Mendel/ 85
Experimentos mendelianos/ 86
Resumen/ 94
Bibliografa/ 96
CAPTULO 6
Cromosomas humanos y su estudio/ 97
Cromatina nuclear/ 97
Cromosomas/ 98
Tcnicas para la obtencin de cromosomas/ 102
Resumen/ 108
Bibliografa / 109
CAPTULO 7
Citogentica molecular/110
Tcnicas de hibridacin in situ / 110
Principios y protocolos de laboratorio/ 112
Resumen/ 114
Bibliografa/ 115
CAPTULO 8

N
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos/ 116

CI
Anormalidades o defectos cromosmicos/ 117
Aberraciones cromosmicas de estructura/ 122

UC
Inversiones y su repercusin en la gametognesis/ 129
Translocaciones y su repercusin en la gametognesis/ 130
OD
Expresin de las aberraciones cromosmicas no balanceadas/132
Caractersticas fenotpicas de aberraciones cromosmicas autosmicas no
PR
balanceadas/ 132
RE

Anormalidades de estructuras anatmicas/ 133


Caractersticas fenotpicas de las aberraciones de cromosomas sexuales/ 137
SU

Resumen/ 141
Bibliografa/ 142
DA

CAPTULO 9
Transmisin de simples mutaciones/ 143
BI

Cromosomas autosmicos y sexuales/ 144


I

Herencias mendelianas en el humano/ 146


OH

Simbologa para la confeccin del rbol genealgico/ 147


Herencia autosmica dominante/ 148
PR

Herencia dominante ligada al cromosoma X/ 150


Herencia autosmica recesiva/ 152
Herencia recesiva ligada al cromosoma X / 154
Herencia ligada al cromosoma Y /157
Herencias influidas por el sexo y limitadas al sexo / 157
Heterogeneidad gentica/ 160
Inactivacin del cromosoma X / 162
Nuevas mutaciones con expresin dominante / 164
Efecto de letalidad en un genotipo especfico/ 164
Resumen/ 164
Bibliografa/ 165
CAPTULO 10
Transmisin de simples mutaciones E interferencias biolgicas/166
Mutaciones dinmicas/ 166
Fenmenos epigenticos/ 170
Impronta genmica/ 170
Disomas uniparentales/ 172
Mosaicismos germinales/ 174
Mosaicismos somticos/ 174
Herencia mitocondrial/ 174
Herencia dignica/ 176
Prdida de heterocigocidad/ 177
Resumen/ 177
Bibliografa/ 177
CAPTULO 11
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas/179

N
Genes que codifican protenas/ 179
Mutaciones en genes que codifican protenas enzimticas/ 181

CI
Mutaciones en genes que codifican receptores de membrana / 188
Mutaciones en genes que codifican protenas de transporte/ 193

UC
Mutaciones en genes que codifican protenas estructurales/ 199
Mutaciones en genes que codifican protenas que intervienen en el
OD
desarrollo embrionario/ 204
Mutaciones en genes que codifican proteinas que intervienen en el
PR
ciclo celular/ 206
RE

Resumen/ 207
Bibliografa/ 208
SU

CAPTULO 12
Mtodos y aplicaciones del ADN recombinante/ 210
DA

Clonacin del ADN /210


Transformacin del organismo husped y obtencin del ADN espe-
BI

cfico/ 214
I

Anlisis molecular/ 216


OH

Resumen/ 223
Bibliografa/ 224
PR

CAPTULO 13
Ligamiento y recombinacin/225
Ligamiento. Concepto y clasificacin/ 226
Frecuencia de recombinacin/ 231
Alelos de loci ligados en acoplamiento y en repulsin/ 232
Localizacin de genes ligados/ 236
Anlisis de ligamiento en el hombre/ 239
Marcadores cromosmicos y aberraciones cromosmicas para el mapa
de genes humanos/ 240
Familias con fases genotpicas informativas/ 246
Utilidad mdica de las tcnicas de biologia molecular para deteccin prena-
tal de una mutacin por anlisis de ligamiento/ 249
Resumen / 252
Bibliografa /253
CAPTULO 14
Marcadores genticos
Definicin/ 254
Va de sntesis del sistema ABO/ 257
Sistema Rh/ 260
Gentica del sistema de histocompatibilidad mayor/ 262
Marcadores moleculares del ADN humano/ 265
Resumen/ 270
Bibliografa/ 270
CAPTULO 15
Los genes en las poblaciones humanas/ 271

N
Gentica poblacional/ 272

CI
Frecuencias y genotipos de genes ligados al cromosoma X/ 279
Factores que alteran el equilibrio de Hardy-Weinberg en una poblacin/279

UC
Ventajas selectivas de heterocigticos/ 283
Resumen/ 286
Bibliografa/ 286
CAPTULO 16
OD
PR
Herencia multifactorial/ 287
RE

Frecuencias de genotipos y fenotipos para rasgos discontinuos/ 288


Frecuencias de genotipos y fenotipos para rasgos continuos/ 290
Herencia multifactorial/ 291
SU

Heredabilidad/ 292
Modelo de predisposicin gentica/ 295
DA

Defectos congnitos de herencia multifactorial/ 296


BI

Herencia multifactorial de enfermedades comunes/ 297


I

Susceptibilidad gentica/ 298


OH

Riesgos de susceptibilidad gentica/ 299


Existencia de componente gentico en la expresin de enfermedad comn/ 300
PR

Mtodos para demostrar heterogeneidad gentica en la herencia


multifactorial/ 302
Caractersticas comunes en los que se sospecha herencia multifac-torial/ 302
Resumen/ 304
Bibliografa/ 305
CAPTULO 17
Defectos congnitos de origen gentico y ambiental/ 306
Tipos de defectos congnitos/ 307
Defectos congnitos y morfognesis /308
Mecanismos moleculares y celulares del desarrollo embrionario/ 312
Control gentico del desarrollo corporal/ 321
Desarrollo embrionario de las extremidades/ 327
Bases moleculares del patrn de formacin del esqueleto apen-dicular/ 329
Etiologa gentica de defectos congnitos/ 331
Etiologa ambiental de defectos congnitos/ 331
Defectos congnitos debidos a fuerzas mecnicas/ 338
Defectos congnitos debidos a disrupciones /339
Resumen/ 340
Bibliografa/ 341
CAPTULO 18
Prevencin de las enfermedades genticas y asesoramiento gentico/ 342

N
Servicios de gentica/ 342

CI
Asesoramiento gentico/ 347
Resumen/ 370

UC
Bibliografa/ 371
CAPTULO 19
OD
Programas de prevencin de enfermedades genticas/ 373
Generalidades de los programas preventivos en gentica mdica/ 374
PR
Edad de comienzo de la expresin de enfermedades genticas y defectos
congnitos/ 374
RE

Programa de deteccin preconcepcional de riesgo gentico/ 378


Programas de deteccin de riesgo gentico y ambiental en el embarazo/ 379
SU

Programa de pesquisas prenatales/ 380


Resumen/ 400
DA

Bibliografa/ 401
BI
I
OH
PR
Historia de la gentica en la medicina humana 1

Captulo 1
HISTORIA DE LA GENTICA
EN LA MEDICINA HUMANA

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Mencionar la relacin de hechos histricos que han confluido desde el
OD
redescubrimiento de las leyes de Mendel hasta la actualidad, requiere de largas
horas de bsqueda. Cada aporte cientfico ha sido un importante eslabn en
PR
esta larga cadena que lleva, desde la gentica general y humana, hasta la gentica
mdica y clnica actual, y que, sin dudas ha tenido un impacto impresionante en
RE

las ciencias mdicas.


SU

En este primer captulo se expone un cuadro que menciona apenas pincela-


das sobre hechos relevantes que han dejado una impronta en el desarrollo ac-
DA

tual de las disciplinas de Gentica Humana, Mdica y Clnica.


BI
I

Antecedentes
OH

Es prctica habitual comenzar los recuentos sobre la historia de la Gentica


PR

con los trabajos de Mendel a mediados del siglo XIX y su redescubrimiento en los
inicios del siglo xx. Sin embargo, desde el siglo XVII se encuentran evidencias de
observaciones sobre la herencia biolgica en humanos, aunque no tuvieron ni el
significado ni la trascendencia de los trabajos de Mendel, pues el estudio de la
gentica humana presenta cierto grado de complejidad. Estos intentos pioneros
estuvieron mejor encaminados ya a principios del siglo XIX. Como muestra de
esto se mencionan los siguientes:
En el ao 1814 Joseph Adams, mdico ingls, public un libro en el que se
destacan las observaciones siguientes:
Diferencias entre congnito, familiar y condiciones hereditarias.
Las enfermedades hereditarias no estn presentes al nacimiento sino que se
manifiestan por s mismas a diferentes edades.
2 Introduccin a la Gentica Mdica

Hay predisposiciones para enfermedades que determinan que estas solo se


manifiesten bajo la influencia de factores ambientales.
La reproduccin de personas afectadas puede estar disminuida y propuso
establecer registros de familias con enfermedades hereditarias.

Qu no hubiera hecho este cientfico con la automatizacin actual de datos?


El profesor de medicina alemn C. F. Nasse, hizo el reconocimiento en el ao
1820, de la transmisin de la hemofilia mediante las mujeres.
Debe tenerse presente que en el siglo XIX el nivel de reconocimiento de una
enfermedad gentica en el humano se basaba solamente en el anlisis clnico de
los signos y sntomas de enfermedades, el reconocimiento del carcter familiar
y la historia de la enfermedad, en especial la edad de comienzo de los primeros
sntomas.

N
Sin embargo, Mendel hizo sus experimentos con guisantes de lneas puras, lo

CI
cual le permiti llegar a sus trascendentales conclusiones. Las que no fueron
comprendidas por las limitaciones de conocimientos del momento.

UC
Durante las ltimas dcadas del siglo XIX se producen algunos descubrimien-
tos importantes.
OD
En 1875 Hertwig observ la fertilizacin animal y la continuidad de clulas
PR
nucleadas. Cinco aos despus Fleming observa y descubre las cromtidas
hermanas de los cromosomas en la mitosis.
RE

Ya en 1883, Von Beneden establece la regularidad de los cromosomas en los


ncleos de clulas hijas. En 1888 Boveri establece la individualidad de cada par
SU

cromosmico y en ese mismo ao, Waldeyer utiliza el trmino cromosoma (cuerpo


DA

que toma color) por las caractersticas de tincin de estas estructuras celulares.
Tambin para ese ao haban culminado los estudios sobre la mitosis.
BI

Todos estos acontecimientos hicieron posible la rpida aceptacin de los tra-


I

bajos de Mendel cuando fueron redescubiertos en los albores del siglo XX.
OH

A partir del redescubrimiento de las leyes de Mendel comienzan a emerger


PR

nuevos conocimientos sobre la gentica de caracteres humanos, que de forma


vertiginosa finalizaron en el siglo XX con el Proyecto Genoma Humano.
En el ao 1902 Archibald Garrod public un trabajo titulado La incidencia de
la alcaptonuria: un estudio en individualidad qumica. Con este trabajo se da
inicio al anlisis de las leyes de Mendel en humanos y se hicieron las observa-
ciones siguientes:
Una persona tiene alcaptonuria o no la tiene, son dos alternativas claras.
El defecto metablico est presente desde el nacimiento.
Se observa en hermanos, no en los padres.
Los padres con frecuencia son primos hermanos.
Existen, adems de la alcaptonuria, otros defectos de este tipo, como el
albinismo que puede estar en esta categora.
Historia de la gentica en la medicina humana 3
En el ao 1900 Landesteiner descubre el sistema de grupos sanguneos ABO
y en 1911 se comprueba su herencia mendeliana.
En 1908, el matemtico ingls, Hardy y, el mdico alemn Weinberg a un
tiempo, fundamentan la teora de la distribucin de los genes en las poblaciones
humanas, conocida, actualmente, como Ley de Hardy-Weinberg.
En 1924 Bernstein demuestra que los caracteres A, B y O estn determina-
dos por genes de un mismo locus o alelos mltiples.
Entre los aos 1910 y 1930 los resultados de investigaciones genticas en la
mosca de la fruta (Drosophila melanogaster) aportan nuevos e importantes
conocimientos, como ligamiento, no disyuncin, tasa de mutaciones.
Aparecen, al estudiar la herencia en el humano, conceptos como pleiotropa
del gen, heterogeneidad gentica y variacin en la expresin de los genes.
Las preguntas a partir de qu se considera raro? y por qu es raro? han

N
sido el eje central de los descubrimientos genticos en el humano.
La gentica humana se inicia con la alcaptonuria y se define como tal porque

CI
estudia rasgos que se distinguen como variaciones normales del desarrollo, pero

UC
es muy difcil delimitar el momento en que surge la gentica mdica, aunque
para algunos historiadores fue a partir de 1950 cuando se unen a los conoci-
OD
mientos anteriores la epidemiologa gentica y se investiga la prevalencia de
enfermedades genticas, su modo de herencia, heterogeneidad y tasa de mutacin.
PR
Los avances en reas especializadas como la citogentica, la gentica
RE

bioqumica y molecular y la aplicacin de estos conocimientos al diagnstico,


pronostico, prevencin, tratamientos y cuidado del enfermo promueven la apa-
SU

ricin de la gentica clnica.


La citogentica se hace fuerte a partir del ao 1959, pero se debe sealar
DA

que la historia de este campo de desarrollo tcnico de la gentica se ha dividido


BI

en cinco periodos:
I

1. De 1882 a 1956: cuando se descubre el nmero correcto de cromosomas


OH

humanos, y se introducen elementos tcnicos que permiten visualizar mejor


la estructura de los cromosomas. En este periodo se inicia el descubrimien-
PR

to de las aberraciones cromosmicas.


2. De 1956 a 1966: se considera el periodo de oro de la citogentica se descu-
bren nuevos tipos de aberraciones y se delinean sndromes cromosmicos.
3. De 1966 a 1969: se considera una etapa de receso en el desarrollo tcnico
de la citogentica.
4. 1969-1977: se considera el periodo de desarrollo de tcnicas de bandas y
se produce el descubrimiento de nuevos sndromes cromosmicos.
5. De 1977 hasta la actualidad: comienza y se desarrolla la era de la citogentica
molecular.

El ao 1956 marca el inicio de la gentica clnica ya que, paralelo al desarrollo de


la citogentica, se producen nuevos descubrimientos de defectos metablicos y
4 Introduccin a la Gentica Mdica

un importante avance en la gentica bioqumica. Entre estos se destaca el des-


cubrimiento del defecto bioqumico de la sicklemia por Pauling y sus colabora-
dores en el ao 1949.
En 1953 se produjo un hecho trascendental, no solo para la gentica, sino
para toda la biologa, cuando aparece el modelo molecular del ADN (cido
dexosinucleico) propuesto por Watson y Crick. A partir de ese momento el gen
dej de ser solo una intuicin para tomar materialidad en una molcula especfi-
ca. Este trabajo, considerado por muchos, como la hiptesis ms brillante de la
biologa contempornea, no solo aport el conocimiento sobre la estructura del
ADN, sino que, adems, dej demostrado fehacientemente que esta molcula
era la portadora material de la informacin gentica.
La ltima dcada del siglo XX ha desbordado la imaginacin en recursos
tcnicos, automatizacin, nuevos conocimientos, nuevas posibilidades para per-

N
sonas afectadas, familiares y para la sociedad.

CI
La manipulacin del genoma humano ha requerido incorporar a la tica m-

UC
dica principios bioticos, surgidos por la necesidad de tomar decisiones que
protejan y no daen la integridad de la especie humana.
OD
El futuro de las ciencias gentica humana, mdica y clnica es difcil de pre-
decir. La incertidumbre sobre nuevos tratamientos y utilizacin de nuevos
PR
frmacos dirigidos a enfermos con genotipos especficos, bajo el control de las
RE

grandes industrias farmacuticas, pone en peligro el principio tico de la justicia,


pues los recursos financieros para la produccin de estos frmacos es muy
SU

elevada y habra que preguntarse: qu personas con un tipo especfico de


defecto gentico tendran la posibilidad de ser tratados? qu nuevos recursos
DA

tcnicos se inventarn? qu nuevos conocimientos surgirn? beneficiarn o


BI

perjudicarn esos nuevos conocimientos a las poblaciones del Tercer Mundo?


I

Una verdad se abre, para contribuir en lo adelante al desarrollo del Proyecto


OH

Genoma Humano, es necesario tener presente que el punto de partida de ahora


PR

en lo adelante es conocer la epidemiologa de lo que es raro y tener el consen-


timiento de estudio de las personas afectadas con la finalidad de dar la respues-
ta a por qu es raro? y para eso se requiere del desarrollo de la gentica
comunitaria, que ser el pilar del futuro desarrollo de las genticas humana y
mdica, y que dar respuesta a las exigencias de diagnstico, tratamiento, pre-
vencin y pronstico, que comprometen al desarrollo de la gentica clnica. Las
ciencias mdicas no escapan a tan elevado volumen de informacin y de exi-
gencias prcticas tanto a nivel preclnico como a nivel clnico. Es necesario
prepararse para enfrentar un futuro insospechado en el campo de la gentica
del siglo XXI y la repercusin que es de esperar en la atencin mdica.
Historia de la gentica en la medicina humana 5
Enfermedades genticas

Los datos que ofrece la epidemiologa de las enfermedades genticas y de-


fectos congnitos, se caracterizan por su estabilidad en el tiempo en regiones
especficas, sus variaciones obedecen, fundamentalmente, a la edad del grupo
poblacional que se estudie, ya que muchos defectos genticos se ponen de
manifiesto a diferentes edades o causan mortalidad en diferentes periodos de la
vida, pero la tendencia, una vez realizados los estudios y conocida su epidemiologa,
es permanecer con prevalencias similares durante aos. Las frecuencias, solo
varan si se producen factores ambientales que cambien la tasa de nuevas mu-
taciones o por la ocurrencia de otros factores que pueden estudiarse en el cap-
tulo16; de ah la importancia de los registros de enfermedades genticas y de
defectos genticos ya recomendados por cientficos desde el siglo XIX.

N
Con frecuencia ocurre que dentro de los indicadores de mortalidad infantil se

CI
miden los defectos congnitos, pero las frecuencias de estos, cuando hay otros
factores ambientales que elevan las causas de mortalidad, impiden reconocer

UC
exactamente las variaciones casi constantes de sus frecuencias. Es por eso
que cuando se trata en el tema de Salud el anlisis epidemiolgico los defectos
OD
congnitos no alcanzan a identificarse como un problema principal cuando exis-
PR
ten otros defectos, con frecuencias mucho ms elevadas. Solo despus de re-
solver la prevencin de la mortalidad a expensas de enfermedades infecciosas
RE

y perinatales y de disminuir la incidencia de estas, es que los defectos congni-


SU

tos manifiestan un aumento relativo de estas que pueden incluso causar alarma.
Un ejemplo puede apreciarse en el grfico de la figura 1.1 en el que se
DA

analizan los 3 primeros factores causales de mortalidad en el primer ao de vida


BI

en Cuba desde el perodo de 1970 al 2008.


Tanto los factores perinatales, como las infecciones, experimentaron una dis-
I
OH

minucin gradual en el periodo 1970-1980 que reflej acciones preventivas con-


cretas. Si se observa la frecuencia de mortalidad por defectos congnitos en
PR

ese periodo, se puede observar que estas se mantuvieron constantes como era
de esperar. A partir del ao 1987, comenzaron a realizarse en Cuba medidas
preventivas prenatales para la deteccin temprana de defectos congnitos y
ofrecer a las parejas involucradas la opcin de descontinuar la gestacin. Con
esta intervencin y la incorporacin de los servicios de gentica clnica en todo
el pas, se ha logrado disminuir la tasa de mortalidad por defectos congnitos a
valores inferiores de 1 por 1 000 nacidos vivos en el ao 2008.
Si no hubiese existido accin de prevencin alguna, las frecuencias se hubie-
ran mantenido similares a las experimentadas en los aos anteriores, en la
figura 1.1 se aprecia en lneas de punto.
6 Introduccin a la Gentica Mdica

Los indicadores de mortalidad infantil en el primer ao de vida en Cuba,


exhiben tasas muy bajas a expensas de problemas perinatales y mucho meno-
res por infecciones. Estas ltimas, en los ltimos dos aos, inferiores a la morta-
lidad causada por defectos congnitos (Fig.1.1).
Los defectos congnitos por s mismos pueden manifestar variaciones en las
frecuencias al nacimiento porque sus causas no siempre son de causa gentica.
Muchas veces, son el resultado del efecto de un agente ambiental. Es por eso
que los registros de defectos congnitos ofrecen la posibilidad de tener el papel
de vigilancia epidemiolgica, ya que permiten identificar con rapidez, si existe
algn agente fsico, qumico o biolgico que se encuentre actuando como
teratgeno (ver captulo 17). La identificacin de un fenmeno de este tipo
ofrece la oportunidad de tomar las medidas preventivas pertinentes.
Por su parte, las enfermedades genticas obedecen a una serie de afectacio-

N
nes del ADN las cuales se puede clasificar en 3 grandes grupos, atendiendo al
tipo de defecto:

CI
Simples mutaciones que, generalmente, son hereditarias.

UC
Anormalidades de los cromosomas que pueden ser diagnosticadas por el
examen clnico y comprobadas al microscopio aplicando tcnicas citogenticas.
OD
Anormalidades de grupos de genes y el resultado de la interaccin ambiental
entre estos.
PR
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Fig. 1.1. La lnea azul ilustra la mortalidad infantil (MI), la rosada la mortalidad por
factores perinatales, la verde la mortalidad por infecciones y la roja la mortalidad por
defectos congnitos en la dcada de 1970 a 1980, y la reduccin de la MI y sus causas
experimentadas en los aos 1995; 2001; 2005; 2007 y 2008. La lnea roja de puntos indica
la mortalidad infantil por defectos congnitos por no haberse realizado las acciones
genticas preventivas especficas.
Historia de la gentica en la medicina humana 7
En pocas recientes se ha incorporado el efecto del ambiente y su relacin
con fenmenos epigenticos nutricionales y de suplemento de oxigeno, que
ocurrieron durante las etapas del desarrollo embrionario y fetal.
Cada una de estas alteraciones, tienen sus peculiaridades al ser analizadas y
diagnosticadas.
En los siguientes captulos, los lectores interesados encontrarn conocimien-
tos e instrumentos que le permitirn su comprensin etiolgica y la motivacin
hacia su diagnstico, pronstico, prevencin y tratamientos.

Bibliografa
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Lantigua Cruz, A., N. Lucas Gonzlez (2009): Desarrollo de la Gentica Mdica en Cuba: 39 aos

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Motulsky, V (1979): Human Genetics. Problems and Approaches. New York: Springer -Verlag.
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Passarge, E (2004): Gentica. Texto y Atlas.Editorial Mdica panamericana SA Madrid.
Rimon, D.L., Connor, J.M., Pyeritz, R.E., B.R. Korf (2007): Emory and Rimoins Principles and
PR
Practice of Medical Genetics 6th Ed. New York: Churchill Livingstone Vol 1.
RE
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8 Introduccin a la Gentica Mdica

Captulo 2
PANORAMA
DE LA BIOLOGA
CELULAR Y MOLECULAR

N
Rolando Hernndez Fernndez

CI
UC
En 1953 se produce un hecho trascendental en la historia de la biologa, cuan-
do la revista Nature public el trabajo sobre estructura del ADN (cido
OD
desoxiribonucleico) de James D. Watson y Francis H. C. Crick. Este trabajo dio
comienzo a una revolucin en el campo de la biologa y marc el inicio de la
PR
biologa molecular. Desde entonces y hasta estos das el conocimiento acerca
RE

de los mecanismos moleculares relacionados con la herencia biolgica ha al-


canzado un desarrollo insospechado en pocas anteriores.
SU

El conocimiento de la estructura molecular del ADN ha permitido esclarecer


los mecanismos relacionados con la duplicacin del ADN, la sntesis de los
DA

ARN (cido ribonucleico) y de las protenas, la recombinacin gentica y la


BI

mutagnesis, asi como los complejos mecanismos que permiten la autorregulacin


I

de todos estos procesos.


OH

Por si esto fuera poco, a partir de ese descubrimiento se han desarrollado


poderosos procedimientos experimentales que han rebasado el marco de la
PR

gentica molecular y han incidido de forma fundamental en el conocimiento: de


la estructura y las funciones celulares; de los procesos del desarrollo filogentico
y ontogentico; de la relacin entre el genoma y el ambiente y de las bases
moleculares de las enfermedades.
En este captulo es propsito hacer un resumen de los principales aspectos
de la biologa celular y molecular, asi como, una introduccin panormica para el
resto de los captulos del libro.

Biologa celular

La biologa celular contempornea tiene como objetivo explicar las funciones


de las clulas a partir del conocimiento de la estructura, las propiedades y las
Panorama de la biologa celular y molecular 9
funciones de las molculas que la forman, especialmente de los agregados
supramoleculares. Desde este punto de vista la clula eucarionte se presenta
como un complejo sistema biomolecular con un alto grado de organizacin es-
tructural y funcional que constituye la unidad bsica de los organismos superio-
res. Sus estructuras estn formadas por agrupaciones de molculas o de
macromolculas que forman verdaderos organitos en los cuales se llevan a
cabo todas las funciones celulares de una forma armnica y coordinada. Las
molculas que componen estos organitos son los lpidos, las protenas, los cidos
nucleicos y los polisacridos. En estas clulas se destacan dos aspectos, la
existencia del ncleo donde se encuentra confinado el ADN, y la existencia de
una basta red de estructuras membranosas que dividen la clula en numerosos
compartimentos, de manera que los procesos se producen con relativa indepen-
dencia uno de otros. Para realizar funciones complejas es necesario que se

N
genere un flujo de sustancia, energa e informacin, no solo entre la clula y su
entorno, sino, adems, entre los diferentes compartimentos intracelulares.

CI
UC
Membrana plasmtica
OD
La membrana plasmtica es una estructura laminar que rodea a la clula
PR
para separarla y comunicarla con el exterior. Est compuesta por lpidos,
polisacridos y protenas. La estructura bsica est formada por una doble capa
RE

de molculas de lpidos, que son: los fosftidos de glicerina, los esfingolpidos y


el colesterol.
SU

Los lpidos presentan una estructura anfiptica, es decir, contiene una zona
polar pequea y una zona apolar mucho ms grande. En las membranas, las
DA

zonas apolares se disponen hacia el interior de la clula y las zonas polares


BI

hacia el exterior, en contacto con el espacio extracelular. Hasta hace poco se


I

daba por sentado que los lpidos de la membrana solo tenan un papel pasivo
OH

como parte de la barrera que separa la clula del exterior; sin embargo, recien-
temente se ha descubierto que los componentes lipdicos de la membrana inter-
PR

vienen en complejos mecanismos de comunicacin intercelular: unos, generando


segundos mensajeros (como el diacilglicerol), otros, regulando la actividad de
enzimas (como el fosfatidil inositol) y unos terceros, como precursores de im-
portantes seales moleculares (como el cido araquidnico el cual da origen a
las prostaglandinas) que comunican a una clula con sus vecinas.
Adems participan en los mecanismos de difusin de sustancias apolares y
del agua a travs de la membrana.
Los polisacridos suelen ser cortos (14 a 20 unidades) y ramificados, con
monosacridos derivados (galactosamina, fucosa, glucosamina, etc.) y siempre
estn orientados hacia el espacio extracelular. Participan en funciones de reco-
nocimiento intercelular, como los grupos sanguneos (ver captulo 14) y se en-
cuentran unidos a los lpidos, o a las protenas.
10 Introduccin a la Gentica Mdica

Las protenas son los componentes funcionales ms importantes de las mem-


branas. Las funciones especficas que una membrana realiza se deben a las
protenas que contiene. Las protenas pueden ser extrnsecas o perifricas, si
solo estn en contacto con la parte polar de la membrana, e intrnsecas o inte-
grales si lo hacen con la zona apolar, entre las que se encuentran las
transmembranales que atraviesan la membrana de un lado al otro. Las prote-
nas pueden constituir: poros por donde pasan sustancias polares cuyo dimetro
es inferior a dichos poros; canales que cumplen una funcin similar, pero son
estructuras ms activas que se abren y se cierran en respuesta a determinados
estmulos (cambios de voltaje, unin de un ligando, traccin mecnica etc.); son
transportadores que llevan sustancias de un lado al otro de la membrana, bien a
favor de su gradiente de concentracin (transporte pasivo) o contra el gradiente
(transporte activo) en cuyo caso requieren de una fuente de energa como la

N
hidrlisis del ATP (adenosn trifosfato).
Otras protenas son enzimas que pueden estar formando parte permanente

CI
de la membrana o asociarse, temporalmente, con esta; existen protenas que

UC
actan como receptores de seales extracelulares, que permiten adaptar el fun-
cionamiento de la clula a las condiciones especficas del organismo en un mo-
mento dado. OD
Por ltimo, tambin existen funciones en las cuales las membranas participan
PR
como un todo, como es el caso de la endocitosis. En este proceso, sustancias de
RE

gran tamao u organismos muy pequeos se asocian a puntos de la membrana


donde existen molculas a las cuales son afines. Este contacto provoca la
SU

invaginacin de la membrana que va a interiorizar el cuerpo ajeno y lo deja


envuelto en una vescula rodeada por parte de la membrana plasmtica. A ve-
DA

ces estas vesculas son recubiertas con clatrina, una protena que forma una
BI

estructura en forma de jaula. Por un mecanismo inverso, la exocitosis, produce


I

la salida de la clula de macromolculas, como ocurre durante el proceso de


OH

secrecin de protenas. Las caractersticas ms sobresalientes de la estructura


de las membranas se resumen en la figura 2.1.
PR

Sistema de endomembranas

Consta de dos componentes, un sistema continuo de membranas intracelulares


y un conjunto de organitos citoplasmticos membranosos independientes
(Fig. 2.2). Al primer grupo pertenecen el retculo endoplsmico, tanto el liso
como el rugoso, el aparato de Golgi y la envoltura nuclear.
Las membranas de este sistema son de manera esencial iguales en estructu-
ra a la membrana plasmtica, sin embargo sus diferencias radican en las prote-
nas que poseen, lo que hace que cada una cumpla funciones diferentes. As, en
el retculo endoplsmico liso se encuentran las enzimas relacionadas con la
sntesis de lpidos y las que participan en los mecanismos de destoxificacin. En
Panorama de la biologa celular y molecular 11

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA

Fig. 2.1. Estructura de la membrana plasmtica. a) En la parte superior se muestra la


estructura general de la membrana plasmtica con sus dos capas de lpidos (CP), los
BI

polisacridos (PS) hacia el lado externo, las protenas integrales transmembranales (TM)
I

que atraviesan la membrana de un lado al otro, las perifricas (PP), las asociadas (PA) y
OH

las integrales no transmembranales (PI). b) En la parte inferior, algunas protenas espe-


cializadas como los poros y los canales.
PR

el retculo endoplsmico rugoso se encuentran protenas que actan como re-


ceptores para los ribosomas. A los receptores se fijan los ribosomas durante la
sntesis de protenas que van a formar parte de las membranas o que son segre-
gadas al exterior. Tambin en la luz del retculo se encuentran enzimas espec-
ficas que participan en el procesamiento postraduccional de las protenas.
La envoltura nuclear est formada por dos membranas: la externa cubierta
temporalmente de ribosomas y la interna asociada con la lmina nuclear. Estas
membranas se fusionan en numerosos puntos y dejan una abertura cuyas pare-
des estn cubiertas de protenas, formando el llamado complejo del poro nu-
clear por donde son transportadas macromolculas, tanto desde el ncleo hacia
el citoplasma, como en sentido contrario. Una aproximacin esquemtica al
complejo del poro nuclear se presenta en la figura 2.3.
12 Introduccin a la Gentica Mdica

Fig. 2.2. Sistema de endomembranas. Se muestran los compartimentos celulares separa-

N
dos por el sistema de endomembranas. De izquierda a derecha aparece el ncleo (N) con

CI
los territorios cromosmicos (TC) y el nuclolo (n) separado del citoplasma por la envol-
tura nuclear (EN). El retculo endoplsmico rugoso (RER) tachonado de ribosomas, se

UC
continua con el retculo endoplsmico liso (REL) en ntima relacin con el aparato de
Golgi (AG), de donde parten vesculas de secrecin (VS) hacia la membrana plasmtica
OD
(MP) que limita a la clula de la matriz extracelular (MEC). Dispersos por el citoplasma
estn los lisosomas (L), los peroxisomas (P) y las mitocondrias (M).
PR
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BI
I
OH
PR

Fig. 2.3. Estructura del complejo del poro nuclear. Se muestra cmo las membranas que
forman la envoltura nuclear se fusionan y forman el poro que est totalmente recubierto
de protenas. Los filamentos citoplasmticos estn libres, mientras que los nucleares
estn en contacto con la lmina nuclear y se renen en el centro y forman una estructura
en forma de cesto.
Panorama de la biologa celular y molecular 13
El aparato de Golgi est formado por un conjunto de sacos membranosos
aplanados que estn muy desarrollados en las clulas secretoras. En su interior
las protenas sintetizadas por los ribosomas unidos al retculo endoplsmico ru-
goso son modificadas (principalmente por glicosilaciones) concentradas y em-
paquetadas para ser enviadas a diferentes lugares, entre estos los lisosomas, los
peroxisomas y la membrana plasmtica.
Todos estos componentes celulares se comunican entre s y entre ellos se
establece un flujo permanente de sustancias que son procesadas y transporta-
das hacia el sitio donde deben realizar sus funciones.
Los organitos citoplasmticos membranosos son las mitocondrias, los lisosomas
y los peroxisomas. Las mitocondrias estn formadas por dos membranas: la
externa, es lisa y permeable a molculas de hasta 5 kDa, mientras que la interna
forma pliegues hacia el interior llamados crestas y es, prcticamente, imper-

N
meable a casi todas las sustancias con excepcin del agua, el oxgeno y el
dixido de carbono. El espacio limitado por la membrana interna recibe el nom-

CI
bre de matriz y es el asiento de importantes procesos metablicos, principal-

UC
mente del Ciclo de Krebs.
La membrana interna contiene cerca de 70 % de protenas entre las cuales
OD
se encuentran las que forman parte de la cadena transportadora de electrones y
la ATP sintetasa que cataliza la formacin del ATP. Muchas de las otras prote-
PR
nas actan como transportadores, lo cual es necesario debido a la poca per-
RE

meabilidad de la membrana. Estudios recientes demuestran que las mitocondrias


constituyen el centro de decisin de vida o muerte de la clula, pues tienen la
SU

propiedad de poder desencadenar varios tipos de muerte celular.


Los lisosomas contienen un gran nmero de enzimas hidrolticas capaces de
DA

degradar numerosas sustancias complejas, por lo que se han identificado como


BI

el sistema digestivo de la clula. Su membrana contiene una bomba de protones


I

que permite mantener en el interior un pH ms bajo que en el exterior. Como las


OH

enzimas tienen su mayor actividad a ese pH, en caso de ruptura de los lisosomas,
su contenido se vierte al citosol, donde el pH ms alto inactiva a las enzimas e
PR

impide la digestin de los componentes celulares.


Los peroxisomas son corpsculos membranosos redondeados que contienen
un buen grupo de enzimas oxidativas, entre estas, la catalasa y la peroxidasa, y
otras que participan en la oxidacin de los cidos grasos de cadena muy larga.
Se han descrito numerosas enfermedades debidas a la deficiencia gentica
de muchas de las protenas que forman parte del sistema de endomembranas.

Citoesqueleto

El citoesqueleto forma una especie de armazn de la clula y est integrado


bsicamente por tres tipos de estructuras: los microfilamentos, los microtbulos
y los filamentos intermedios.
14 Introduccin a la Gentica Mdica

Los microfilamentos se forman por la polimerizacin de la actina en presen-


cia de ATP. Estos filamentos forman una intricada red inmediatamente por de-
bajo de la membrana plasmtica y mediante protenas especficas estn en
contacto con componentes de la matriz extracelular. Son estructuras dinmicas.
Existe, normalmente, un equilibrio entre las reacciones de polimerizacin y
despolimerizacin de la actina que hace posible los movimientos que realiza la
membrana plasmtica en los movimientos ameboideos y durante el proceso de
fagocitosis. Tambin los microfilamentos sirven de carrilles para el movimiento
de la miosina, una de las protenas que acta como motores celulares.
Los microtbulos se forman por la polimerizacin de la tubulina, de la cual
existen dos variedades, la (alfa) y la (beta). Estas forman un dmero que se
polimeriza dependiendo de GTP (guanosin trifosfato).
Los microtbulos se organizan a partir de estructuras celulares llamadas centro

N
de organizacin de microtbulos, cuyos componentes y organizacin interna no
estn bien definidas. Los dmeros al polimerizarse dan lugar a una estructura

CI
helicoidal que deja una luz central que es el motivo de su nombre. Los microtbulos

UC
se disponen en forma radiada desde el ncleo hacia la periferia de la clula,
creando una armazn que da forma y consistencia a la clula. Protenas, como
OD
las kinesinas y las dinenas, que funcionan como motores moleculares, se aso-
cian a la superficie de los microtbulos y transportan sustancias de gran tama-
PR
o, incluyendo vesculas membranosas y macromolculas. Tambin constituyen
RE

una estructura dinmica que se polimeriza y despolimeriza de acuerdo con las


condiciones celulares. Una forma especial de estos microtbulos es el huso
SU

acromtico que se forma durante la divisin celular. En la figura 2.4 se


representan los microtbulos y microfilamentos con los motores celulares
DA

asociados a estos.
BI

Los filamentos intermedios son protenas fibrilares que se asocian lateral-


mente y dan a la clula consistencia y resistencia a las tensiones. Presentan un
I
OH

extremo globular (a veces llamado cabeza) y un largo segmento fibrilar (a ve-


ces llamado cola) que tiene un extremo ensanchado. La asociacin de los fila-
PR

mentos intermedios puede realizarse por ambos extremos. Mientras la actina y


la tubulina son las mismas en todas las estirpes celulares, los filamentos inter-
medios son especficos de cada tipo, as en los epitelios se encuentran los fila-
mentos de keratina mientas los neurofilamentos se encuentran en el sistema
nervioso. Entre los filamentos intermedios se encuentran las lminas A, B y C
que son los componentes moleculares de la lmina nuclear.

Ribosomas

Los ribosomas no son organitos membranosos pues estn constituidos por


cidos ribonucleicos ribosomales y protenas. Estn formados por dos subunidades
de tamao diferente denominadas L (del ingls large, grande) la mayor y S (del
Panorama de la biologa celular y molecular 15

N
CI
UC
OD
PR
RE

Fig. 2.4. Protenas como motores celulares. Arriba la miosina que es un motor celular
utiliza como carril de desplazamiento la actina. Abajo la kinesina y la dinena que usan
como carril los microtbulos y se pueden desplazar en un sentido o en otro. Como
SU

ejemplo se muestra una molcula de kinesina transportando una vescula.


DA
BI

ingls small, pequeo) la menor. La subunidad L contiene los ARNr (cido


ribonucleico ribosomal) de 28 S, 5,8 S y 5 S y ms de 50 protenas. La subunidad
I

S solo contiene el ARNr de 18 S y unas 35 protenas. Para su funcionamiento


OH

requieren, adems, del concurso de un buen nmero de protenas no ribosomales.


PR

La funcin de los ribosomas es la traduccin gentica, o sea, la sntesis de


protenas.
Los ribosomas pueden aparecer ms o menos libres en el citosol o asociados
a las membranas del retculo endoplsmico rugoso (son ellos los que dan el
aspecto rugoso). Los primeros forman protenas para el ncleo, las mitocondrias
y el citosol, y los segundos forman protenas para el sistema continuo de
endomembranas, los lisosomas, la membrana plasmtica y la secrecin.

Ncleo celular

El ncleo constituye una estructura caracterstica de las clulas eucariontes;


de hecho, es lo que le da el nombre. Est separado del citoplasma por una
16 Introduccin a la Gentica Mdica

envoltura compuesta de dos membranas como ya fue mencionado. Por debajo


de la membrana presenta una estructura protenica, llamada lmina nuclear,
compuesta por dos protenas denominadas lminas A y B, que al polimerizarse
forman la estructura laminar. A esta se encuentran unidas: por una parte, prote-
nas que la fijan a la membrana interna de la envoltura celular y, por otra, la
cromatina. La unin de la cromatina se produce en sitios especficos de manera
que la que corresponde a cada cromosoma ocupa un sitio definido dentro del
ncleo. Esta unin, al parecer, es necesaria para la replicacin. Al inicio de la
mitosis la lmina B es fosforilada por el complejo Cdk1/ciclina B (ver ms
adelante ciclo celular) y se despolimeriza provocando la desintegracin de la
envoltura nuclear.
Recientemente, se ha establecido que tambin en el ncleo existen
compartimentos, aunque estos no estn separados por membranas. As, se dis-

N
tinguen los cuerpos de Cajal, los corpsculos de empalme y otros.

CI
El componente fundamental del ncleo es la cromatina, un complejo
supramacromolecular formado por el ADN y protenas, principalmente histonas.

UC
La clula somtica humana contiene 22 pares de molculas de ADN, esen-
cialmente iguales, que se encuentran en los cromosomas denominados
OD
autosmicos. En las mujeres existe un par adicional representado por los dos
PR
cromosomas X mientras que el par adicional en el hombre est constituido por
dos molculas de ADN, una del cromosoma X y la otra del Y. La menor de
RE

estas molculas posee unos 50 millones de pares de bases y la mayor de alrede-


dor de 350. Estas molculas de ADN y las protenas correspondientes sufren un
SU

proceso de empaquetamiento al final de la etapa G2 del ciclo celular y se hacen


DA

visibles en forma de cromosomas al inicio de la mitosis. Las caractersticas


estructurales de los cromosomas se estudian con ms detalle en el captulo 6.
BI

En el ncleo se distingue una estructura ms o menos redondeada, casi siem-


I

pre ubicada hacia la periferia que es el nucleolo. Se forma por la agrupacin de


OH

los genes que codifican los ARNr localizados en los cromosomas 13, 14, 15, 21
PR

y 22. En este se distingue una zona central de carcter fibrilar reflejo de la


transcripcin activa de esos genes, y una zona perifrica de carcter granular
que se corresponde con el sitio de ensamblaje de las subunidades ribosomales.
En el ncleo se realizan los procesos de replicacin, reparacin y transcripcin
del ADN, as como el procesamiento de los ARN transcritos primarios. Igual-
mente se realiza un intenso trfico de macromolculas desde el ncleo hacia el
citoplasma y viceversa a travs del complejo del poro nuclear. Por lo general los
ARN son exportados del ncleo. Las protenas del ncleo se sintetizan en el
citoplasma y pasan al ncleo porque presentan en su estructura una secuencia
de localizacin nuclear (NLS, del ingls nuclear localization sequence). Sin
embargo, existen protenas que reciclan entre el ncleo y el citoplasma. Para su
entrada requieren de NLS y para su salida de una secuencia de exportacin
Panorama de la biologa celular y molecular 17
nuclear, NES (del ingls, nuclear export sequence). En los ltimos aos ha
cobrado fuerza la existencia de un nucleoesqueleto formado por protenas
fibrilares que le dan la forma y consistencia al ncleo.

Ciclo celular

En el desarrollo ontogentico de un organismo pluricelular las clulas ms


primitivas se multiplican y se van diferenciando de manera que cada clula
forma parte de un rgano o tejido especializado. Cada estirpe celular prolifera
hasta cierto punto y entonces se detiene. Los rganos slidos adquieren forma
y tamao fijos y despus cesa el crecimiento. En el individuo adulto el creci-
miento de muchos tipos celulares transcurre a velocidades muy lentas que solo
permiten reponer clulas viejas o daadas.

N
Al terminar la divisin celular (fase M) a las clulas hijas se le presentan dos

CI
alternativas:
1. Entrar en un periodo de reposo (G0) donde la mayor parte de las funciones

UC
celulares se expresan a un nivel basal.
2. Comenzar a prepararse para un nuevo ciclo de replicacin (G1).
OD
PR
Las clulas en la etapa G1 comienzan su actividad metablica pero esta
puede decrecer si en un momento determinado no son estimuladas por factores
RE

de crecimiento del tipo del factor de crecimiento derivado de plaquetas, PDGF


(del ingls, platelet derived growth factor), que hace a las clulas competen-
SU

tes (por eso se le llama punto C) para continuar su recorrido por G1. Pasado el
punto C, las clulas muestran una intensa actividad metablica. Se incrementa
DA

el transporte de nutrientes a travs de la membrana. Hay un aumento conside-


BI

rable de la gluclisis y de la sntesis de protenas. Pero aparece un nuevo punto


I

donde las clulas deben ser estimuladas por factores como la insulina o el factor
OH

insulinoide de crecimiento 1, IGF-1 (del ingls, insulin-like growth factor). Si


las clulas rebasan ese punto continan su progresin por el ciclo (por eso se le
PR

denomina punto P). A partir de aqu se produce un intenso trfico de protenas


hacia el ncleo, tal vez las que participan en la replicacin del ADN.
Las interacciones de las clulas con factores especficos de crecimiento cons-
tituyen un control positivo, pues la presencia del factor en el medio estimula la
proliferacin celular.
Los factores de crecimiento influyen sobre la actividad celular porque las
clulas poseen en la membrana plasmtica receptores especficos para estos.
Los receptores son protenas transmembranales que hacia el lado citoplasmtico
presentan un dominio enzimtico con actividad de la protena tirosilkinasa, TPK
(del ingls, tirosil protein kinasa), es decir, que transfiere grupos fosforilos del
ATP hacia protenas, en las cuales los esterifica con residuos de tirosina. La
unin del factor con su receptor especfico estimula la actividad de TPK del
18 Introduccin a la Gentica Mdica

receptor que, en primer lugar, se autofosforila y despus fosforila a otras prote-


nas de la membrana y del citosol.
Las protenas fosforiladas por el receptor son, por lo general, kinasas que
fosforilan a otras enzimas y as se establece una cadena de fosforilacin que
comienza en la membrana y avanza hacia el ncleo, donde la fosforilacin de
factores de transcripcin activa la expresin de genes especficos, cuyos pro-
ductos estn relacionados con los mecanismos de la proliferacin celular.
Los estudios de transformacin realizados con virus ADN llevaron a la con-
clusin de que el ciclo celular exhibe de igual forma un control negativo. Las
clulas elaboran protenas, cuya funcin es inhibir la progresin del ciclo.
Cuando uno de estos virus infecta a una clula, esta produce protenas codifica-
das por el genoma viral. Se ha podido comprobar que algunas de ellas se aso-
cian con protenas del hospedero y las mantienen inactivas. Libres del freno que
significa la actividad de las protenas inhibidoras, las clulas proliferan de forma

N
incontrolada.

CI
En condiciones normales los mecanismos positivos y negativos forman una
intrincada red molecular, cuyo funcionamiento armnico permite que el grado

UC
de proliferacin celular se adapte perfectamente al momento del desarrollo del
OD
organismo y a las condiciones ambientales imperantes.
Los estudios del ciclo celular en muchos organismos han mostrado que en
PR
todos ellos este ciclo progresa, bsicamente, por la intervencin de un nmero
reducido de familias de protenas con funciones similares a las de levaduras.
RE
SU

Ciclinas
DA

Las ciclinas constituyen una familia de protenas muy diversas de masa


BI

molecular relativamente pequea, 35 a 90 kDa, que fueron identificadas y nom-


I

bradas porque su sntesis flucta durante el ciclo celular. Presentan una secuen-
OH

cia de 100 residuos de aminocidos conocida como motivo de ciclinas. Este


motivo es necesario tanto para la unin como para la activacin de las Cdk
PR

(protenas kinasas dependientes de ciclina) correspondientes.


La concentracin intracelular de un tipo particular de ciclina se eleva brusca-
mente en un momento del ciclo celular y, poco tiempo despus, tambin dismi-
nuye de forma brusca. Mucho se ha investigado acerca del sistema regulador
capaz de generar esas oscilaciones en las concentraciones intracelulares de
ciclinas y se han podido identificar al menos dos sitios de regulacin: la trans-
cripcin gnica y la degradacin de protenas.
En los mamferos el conocimiento del control de la transcripcin de las ciclinas
se limita a la transicin entre la fase G1 y la S del ciclo de replicacin. La
cascada enzimtica desencadenada por los factores de crecimiento conduce a
la activacin de la protena kinasa de regulacin extracelular ERK (del ingls,
extracelular signal regulated protein kinase), una protena de la familia de
Panorama de la biologa celular y molecular 19
las protenas kinasas activadas por mitgenos, MAPK (del ingls, mitogen
activated protein kinase). La ERK por medio de la fosforilacin produce la
activacin de los factores de transcripcin AP-1 y ETS, que estimulan la trans-
cripcin del gen de la ciclina D. La ciclina D forma complejos con las Cdk4 y la
Cdk6. Estos complejos fosforilan a la protena pRB (protena del gen del
retinoblastoma) y eliminan la inhibicin que esta ejerca sobre los factores de
transcripcin de la familia E2F (Ver cuadro 2.1), los cuales son necesarios para
la transcripcin de varios genes cuyos productos estn involucrados en la
replicacin del ADN. Tambin E2F es capaz de estimular la transcripcin de los
genes de la ciclina E, la ciclina A y el propio E2F.

Cuadro 2.1. El factor de transcripcin E2F

N
Los adenovirus son virus que infestan a los seres humanos. Su mate-

CI
rial gentico est formado por una molcula nica de ADN recubierta
por protenas. Al ponerse en contacto con la clula el virus inyecta

UC
su ADN en la misma y utiliza la maquinaria molecular de la clula
para su replicacin, transcripcin y traduccin
OD
Presentan un grupo de genes que se expresan casi inmediatamente
PR
despus de la penetracin del ADN que han sido denominados E (del
ingls early, temprano) y otros que se expresan posteriormente.
RE

. Cada gen tiene su promotor que se identifica por nmeros consecuti-


vos a partir del extremo 5 de la hebra codificante (Fig. 2.5).
SU
DA

La transcripcin del gen de la ciclina E, permite la activacin del complejo


Cdk2/ciclina E que tambin fosforila a pRB. Como E2F, controla su propia
BI

transcripcin, estas fosforilaciones, desencadenan un ciclo de retroaccin posi-


I

tiva que incrementa, rpidamente, la concentracin de E2F y de esta forma la


OH

velocidad de la transcripcin de los genes que de l dependen, especialmente,


PR

los relacionados con la replicacin del ADN logran la transicin de la fase G1 a


la fase S del ciclo de replicacin. El E2F tambin estimula la transcripcin de la
ciclina A, que acta con la Cdk2 como pareja y forma el complejo Cdk2/ciclina
A. Este complejo, cuya concentracin se incrementa a medida que avanza la
fase S, es capaz de fosforilar a E2F y hace que este abandone el ADN. Con
este proceso se suprime la transcripcin de los genes dependientes de E2F.
De esta forma todos los genes cuya transcripcin dependen de E2F se co-
mienzan a transcribir de manera lenta a mediados de la fase G1, despus se
incrementa la transcripcin en la transicin de G1 a S, y prcticamente, queda
eliminada al final de la etapa S.
Si la regulacin transcripcional se conoce mejor para las ciclinas de la fase
G1, la regulacin por proteolisis est ms estudiada para las ciclinas mitticas,
20 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
Fig. 2.5. En experimentos realizados se determin que exista una protena de unin al
ADN en la clula hospedera del virus, la cual era imprescindible para activar la transcrip-
PR
cin del promotor E2. Esa protena fue denominada como factor de activacin del pro-
motor E2 de adenovirus, y se abrevi como E2F (del ingls, E2 promotor activating
RE

factor).
SU

es decir, A y B. Para arribar a la telofase y poder salir de la mitosis, las clulas


DA

promueven la degradacin proteoltica de las ciclinas.


BI

Esta proteolisis se lleva a cabo, por el sistema dependiente de la ubiquitina, y


I

requiere de una pequea secuencia de aminocidos localizada hacia el extremo


OH

N terminal de las ciclinas A y B, que se conoce como motivo de autodestruccin.


La destruccin se realiza por un gran complejo multiprotenico denominado
PR

complejo promotor de la anafase, o ciclosoma, APC (del ingls, anaphase


promoting complex, cyclosome) que cataliza la transferencia de ubiquitina a
varios sustratos mitticos, entre estos a las ciclinas.
La actividad del complejo promotor de la anafase permanece elevada du-
rante la fase G1, hasta la aparicin de las ciclinas caractersticas de esta etapa.
Tambin las ciclinas E y D, son degradadas por el sistema de la ubiquitina, pero
en esto interviene un complejo diferente del APC. En ambos casos, se requiere
la fosforilacin de las ciclinas.
Como se ha podido apreciar, estos diversos mecanismos de regulacin per-
miten que las ciclinas y sus Cdk acompaantes, existan solo en el lugar y en el
momento adecuado del ciclo celular. Esto permite que el ciclo progrese de una
generacin celular a la siguiente.
Panorama de la biologa celular y molecular 21
Protenas kinasas dependientes de ciclina (Cdk)

Las proteinas kinasas dependientes de ciclina (Cdk, del ingls, cyclin-


dependent kinases), son enzimas que transfieren grupos fosforilos del ATP
(adenosin trifosfato) hacia grupos hidroxilos de serina o treonina, de las prote-
nas sustratos.
La progresin del ciclo por la fase G1, en los vertebrados, requiere la
estimulacin externa por factores de crecimiento.
En muchos tipos celulares, la respuesta clave a estos factores de crecimien-
to, es la activacin de la Cdk4 (u otra relacionada, ntimamente, la Cdk6), las
cuales actan en asociacin con las ciclinas D (D1, D2 y D3). El complejo
protena Cdk4/ciclina D (o Cdk6/ciclina D), hace progresar las clulas por la
fase G1, al suprimir la accin antiproliferante de la protena pRB, como lo de-
muestra el hecho de que, clulas carentes de pRB progresan por G1 en ausen-

N
cia del complejo Cdk4/ciclina D. Un resumen de los eventos relacionados con la

CI
progresin de la clula por la fase G1 se muestra en la figura 2.6.

UC
La Cdk2 se asocia con la ciclina E en la transicin de la fase G1 a la fase S
y produce la activacin del complejo prereplicativo. Con posterioridad se asocia
OD
con la ciclina A y hace progresar la fase S, aunque su papel exacto no est
totalmente establecido.
PR
La concentracin nuclear de la ciclina B, se eleva a mediados de la fase G2
RE

y forma complejos con la Cdk1. A este complejo formado se ha llamado factor


promotor de la mitosis, MPF (del ingls, mitosis promoting factor). Este com-
SU

plejo, es el que fosforila la lmina nuclear en la profase, y posibilita la desinte-


gracin de la envoltura nuclear.
DA

Como mnimo existen 4 mecanismos principales para la regulacin de la ac-


BI

tividad de las Cdk. El mecanismo primario de activacin, es la unin con las


I

ciclinas, que se completa en la mayora de las Cdk, por la fosforilacin en un


OH

residuo especfico de treonina de la posicin 160. Por otra parte los complejos
Cdk/ciclina pueden ser inactivados por al menos dos mecanismos:
PR

La unin con protenas inhibidoras.


La fosforilacin en sitios inhibitorios cerca del extremo N-terminal.

Inhibidores de las Cdk (Cdl/Ckl)

Todos los mecanismos reguladores de la progresin de un proceso, no solo


necesitan de factores que lo aceleren, sino, que tambin requieren de algunos
que lo frenen o retarden. El ciclo celular tambin posee esos frenos moleculares
que son los inhibidores de las protenas kinasas dependientes de ciclina (Cdi o
Ckl). Estos inhibidores, forman un grupo de protenas de masa molecular, rela-
tivamente, pequea 15 a 57 kDa, cuya unin a los complejos Cdk/ciclina deter-
mina la inactivacin de estos.
22 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH

Fig. 2.6. Trnsito de las clulas por la etapa G1. Al final de la telofase, los promotores de
PR

los genes relacionados con la replicacin de ADN y controlados por E2F estn reprimi-
dos por la unin con RB y la histona desacetilasa (HDAC). A mediados de G1, RB es
fosforilado por Cdk4/D y permite la transcripcin a baja velocidad, que aumenta cuando
es nuevamente fosforilado al final de G1 por Cdk2/E lo cual hace que abandone el
promotor y los genes se expresen a mxima velocidad. A mediados de S el complejo
Cdk2/A fosforila a E2F y lo hace abandonar los promotores con lo cual los genes quedan
nuevamente silenciados.

En las clulas de mamferos se pueden distinguir dos grupos de CDI: la fami-


lia Cip/Kip y la familia INK4. Los primeros, son inhibidores de cualquiera de las
Cdk, mientras que los segundos, son especficos para las Cdk que actan con
las ciclinas D. Los distintos miembros de cada familia, actan en tejidos espe-
cficos y proporcionan un mecanismo mediante el cual se puede retardar la
Panorama de la biologa celular y molecular 23
progresin del ciclo celular, en respuesta a seales, tanto intracelulares como
extracelulares.
Anlisis de ligamiento gentico realizados a familias con melanoma heredita-
rio, localizaron un gen putativo de susceptibilidad, en la regin cromosmica
9p21, la cual es un sitio de rearreglos cromosmicos frecuentes y prdida de
heterocigocidad en otros tumores espordicos. Esta regin incluye los genes
INK4a e INK4b, ligados en tndem, y las mutaciones encontradas, argumen-
tan a favor de que el gen implicado sea el INK4a. Recientemente, se ha demos-
trado que mutaciones y borramientos que involucran a INK4a, son frecuentes
en diferentes tipos de tumores humanos. Esto significa que INK4a puede fun-
cionar como un gen supresor tumoral.

Fosfoprotenas fosfatasas

N
CI
Como fue sealado, la actividad de los complejos Cdk/ciclinas depende del
grado de fosforilacin de la subunidad cataltica. Por lo tanto, es el balance

UC
entre la actividad de las kinasas y las fosfatasas, lo que en ltima instancia,
determina el progreso del ciclo celular.
OD
Se ha identificado una actividad enzimtica designada fosfatasa asociada a
PR
la kinasa, KAP (del ingls, kinase associated phosphatase), que cataliza la
hidrlisis del enlace ster fosfrico en la posicin T160. Esta reaccin solo se
RE

realiza, si la Cdk no est unida a su ciclina acompaante, pues la enzima no es


capaz de actuar sobre los complejos Cdk/ciclina, porque la ciclina inhibe la
SU

actividad enzimtica de la KAP, o porque ambas protenas se unen a la Cdk por


el mismo sitio.
DA

La desfosforilacin de los sitios inhibitorios es catalizada, por fosfoprotenas


BI

fosfatasas pertenecientes a la familia gnica Cdc25. En los humanos existen, al


I

menos, tres miembros de esta familia, denominados: Cdc25A, Cdc25B y Cdc25C;


OH

de estas, las dos primeras se expresan en la fase G1 y en la transicin hacia la


fase S, mientras la Cdc25C es la isoforma mittica. Estas enzimas requieren ser
PR

fosforiladas para su activacin. La Cdc25A, que es necesaria para la iniciacin


de la fase S, es fosforilada y activada por el complejo Cdk2/ciclina E, que, como
se seal se encuentra activo al final de la fase G1.
En las desfosforilaciones, tambin, parecen estar implicadas otras
fosfoprotenas fosfatasas inespecficas como las tipo 1A y 2A.

Biologia molecular

La biologa molecular se ocupa, bsicamente, de los mecanismos moleculares


los cuales son el sustento de los procesos de transmisin, expresin y conserva-
cin de la informacin gentica a partir de la estructura, las propiedades y las
24 Introduccin a la Gentica Mdica

funciones de las macromolculas implicadas en esos procesos. Tambin estudia


las alteraciones que se producen en los procesos, como consecuencia de las
acciones de agentes internos y externos, las que ocurren sobre el individuo
actual o sobre sus antecesores.
Se encarga, adems, de la aplicacin a la industria, la agricultura, el cuidado
del ambiente, la medicina, etc., de esos conocimientos.
Las modernas biotecnologas son, la expresin ms acabada de la aplicacin
de la biologa molecular a la prctica diaria del hombre. Sus inicios pueden
ubicarse en 1953, con la aparicin del modelo molecular del ADN, postulado por
Watson y Crick.

Estructura del ADN

N
Se ha calculado que el organismo humano posee aproximadamente 1012 c-

CI
lulas somticas, y cada una posee en su ncleo 46 molculas de ADN, que
constituyen el contenido fundamental de los cromosomas. Adems, en cada una

UC
de las mitocondrias, existe un nmero variable de molculas de ADN, que se
diferencia en algunos aspectos de las molculas del ADN nuclear.
OD
Segn el modelo descrito por Watson y Crick, el ADN est formado por
PR
hebras de polidesoxinucletidos (esto es, que resultan de la unin de un gran
nmero de desoxinucletidos), enlazadas mediante un enlace fosfodister. Este
RE

enlace se establece entre la posicin 3 de un desoxinucletido y la posicin 5


del otro, por lo que se denomina 3, 5. De esta forma, la hebra posee un extre-
SU

mo con el grupo fosfato de la posicin 5 libre (extremo 5) y el otro, que presen-


ta libre con el grupo OH de la posicin 3 (extremo 3).
DA

Cada desoxinucletido, a su vez, est formado por una base nitrogenada, que
BI

puede ser purnica o pirimidnica, por la D-2-desoxirribosa, y una o ms molcu-


I

las de cido fosfrico, pero como resultado de la polimerizacin en el ADN solo


OH

queda un grupo fosfato por nucletido.


Las bases purnicas del ADN son: la adenina (A) y la guanina (G), mientras
PR

que las pirimidnicas son: la citosina (C) y la timina (T). Cuando se forma el
polmero, hay una zona con una estructura montona, pues en esta se alternan
la desoxirribosa y el grupo fosfato a todo lo largo de la cadena, pero tambin una
zona diversa, ya que las bases nitrogenadas que sobresalen de la estructura
montona, son diferentes en cada sector de la molcula. Es de forma precisa,
en el orden o sucesin de esas bases nitrogenadas, donde est contenida la
informacin gentica. Un resumen de las caractersticas del modelo de Watson
y Crick se muestra en la figura 2.7.
Watson y Crick propusieron que la molcula de ADN est formada por dos
hebras que se disponan en forma antiparalela, es decir, el extremo 5 de una
coincida con el 3 de la otra y adquiran la forma de una doble hlice de giro
derecho. La zona montona estaba dispuesta hacia el exterior, mientras que la
Panorama de la biologa celular y molecular 25

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA

Fig. 2.7. Estructura del ADN. Arriba se muestran los pares de bases tpicos. Abajo a la
izquierda una imagen extendida del ADN donde se puede observar la disposicin hacia
BI

el centro de los pares de bases y hacia fuera del eje pentosa fosfato. Tambin se muestra
I

el carcter antiparalelo. A la derecha la tpica estructura duplohelicoidal que da origen al


OH

surco mayor (Mayor) y al menor (Menor) sobre la superficie de la molcula.


Nota: En todas las figuras donde aparece el ADN se ha seguido un cdigo de colores; la
PR

adenina se representa en azul oscuro, la timina en azul claro, la guanina en rojo oscuro y
la citosina en rojo claro.

zona diversa se orientaba hacia el interior de la molcula, de manera que las


bases nitrogenadas de una hebra se enfrentaban a las bases de la otra. Lo ms
trascendental del modelo era que la estructura solo poda acomodar dos pares
de bases: los formados por la adenina y la timina (A-T) y por la citosina y la
guanina (C-G). Se dice que las bases de cada par, son complementarias. Estos
pares se mantenan unidos por la formacin de puentes de hidrgeno entre las
bases, dos puentes en el par A-T y tres en el C-G. No exista restriccin alguna
para la sucesin de las bases en una de las hebras, pero la de la otra hebra,
vena determinada por el carcter complementario del apareamiento.
26 Introduccin a la Gentica Mdica

El giro de las hebras origina en la superficie de la molcula, dos surcos de


tamao diferente que son sitios de interaccin con protenas especficas (en
especial el surco mayor), que intervienen en el control de los procesos relacio-
nados con el ADN como: la replicacin, transcripcin, reparacin, etc.
Este modelo permiti ver de manera rpida el fundamento de una de las
funciones ms trascendentales de los seres vivos: su reproduccin en seres de
su misma especie. Para esto, las molculas portadoras de la informacin gentica
deban duplicarse dando cada una dos molculas idnticas a las progenitoras.
Watson y Crick propusieron que durante ese proceso, las dos hebras del ADN
se separaban y cada una de estas serva de molde para la formacin de la hebra
complementaria. La idea bsica ha resultado ser cierta, aunque el mecanismo
es mucho ms complejo que lo imaginado en los primeros momentos.

N
Transmisin de la informacin gentica

CI
UC
Una de las caractersticas ms sobresaliente de los seres vivos es la de
poder originar organismos iguales en esencia a sus progenitores, es decir, que se
OD
puedan reproducir. Esto sucede gracias a que los organismos contienen en su
ADN toda la informacin necesaria para la formacin de un organismo similar.
PR
Por lo tanto, para reproducirse al organismo dado, le basta con obtener una
RE

copia lo ms exacta posible de su ADN y transferirlas a sus descendientes. En


los organismos monocelulares esta transferencia es directa, mientras que en los
SU

pluricelulares existen clulas especializadas en funcin de la reproduccin. Desde


el punto de vista molecular este proceso consiste en obtener dos molculas de
DA

ADN idnticas entre s e idnticas a la que les dio origen. En eso consiste la
BI

replicacin del ADN, que es el mecanismo molecular que sustenta la reproduc-


I

cin de todos los organismos vivos.


OH
PR

Replicacin del ADN

Durante la fase S del ciclo celular se produce la replicacin del ADN, proce-
so que consiste en obtener, a partir del ADN celular, dos molculas idnticas.
Para este proceso se requiere el concurso de un gran nmero de protenas
enzimticas y no enzimticas.
El proceso global de la replicacin comienza, prcticamente, durante la telofase
de la mitosis cuando protenas del llamado complejo de reconocimiento del ori-
gen (ORC) se unen a zonas especficas del ADN marcando los sitios donde
debe comenzar la replicacin. Las clulas humanas poseen, aproximadamente,
50 000 orgenes de replicacin espaciados a una distancia que vara de 30 a
150 Kb. Al ORC se unen otras protenas (Cdc6, Mcm8 y Cdt1) las cuales
Panorama de la biologa celular y molecular 27
reclutan dos copias de la helicasa hexamrica Mcm2-7 hacia ese sitio. Todas
ellas integran el complejo prereplicativo que est de forma total formado al
finalizar la fase G1. Estos eventos se resumen en la figura 2.8.
Para la formacin de este complejo es necesario que los niveles de actividad
de las Cdk estn disminuidos, como ocurre en estas etapas del ciclo. Cuando al
final de G1 se elevan los niveles de actividad del complejo Cdk2/ciclina E, varias
de las protenas que forman el complejo pre-replicativo son fosforiladas, lo que
permite reclutar a esos sitios a otras protenas (Mcm10 y Cdc45) que activan
las helicasas Mcm2-7, las que, a su vez, desenrollan el ADN para dar inicio a la
replicacin. Como durante todo el resto del ciclo celular los niveles de actividad
de las Cdk son altos, no es posible la formacin de un nuevo complejo replicativo
y esto garantiza que el ADN se replique solo una vez durante el ciclo celular.
Por otra parte, tanto la Cdc6, como la Cdt1 son degradadas mediante el sistema

N
ubiquitina proteasoma. La activacin del complejo prereplicativo se esquematiza
en la figura 2.9.

CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 2.8. Formacin del complejo pre-replicativo. Comienza con la unin del ORC al final
de la telofase, contina durante G1 con la unin de otras protenas y culmina al final de
G1 con la incorporacin de las helicasas Mcm2-7. Ver los detalles en el texto.
28 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU

Fig. 2.9. Activacin del complejo pre-replicativo. En transicin de G1 a S varios compo-


nentes del complejo pre-replicativo son fosforilados por Cdk2/E, lo cual permite la incor-
DA

poracin de otras protenas que promueven la apertura de la doble hlice que da lugar a
la formacin del ojal de replicacin.
BI
I

La accin de todas esas protenas permite la abertura de la doble hlice,


OH

dando acceso a las bases nitrogenadas. La protena replicativa A (RPA) estabiliza


PR

la hebra simple e impide que se vuelvan a aparear. A la zona abierta se une la


enzima ADN polimerasa (o la ), que intervendrn en la elongacin. A conti-
nuacin se incorpora la ADN polimerasa que posee actividad tanto de ADN
polimerasa como de ARN polimerasa por lo cual se le ha denominado pol /
iniciadora. Esta forma un pequeo ARN de unos 10 nucletidos que despus es
alargado por la pol unos 20 nucleticos, aunque puede llegar hasta 200. La
fase de iniciacin de la replicacin se ilustra en la figura 2.10.
Al extremo 3 de este polinucletido iniciador se asocia el factor replicativo C
(RF-C) que carga al antgeno nuclear de clulas proliferantes (PCNA) alrede-
dor del ADN. Dicho antgeno forma un anillo deslizante que rodea al ADN, pero
sin entrar en contacto directo con este. Al PCNA se asocia la ADN polimerasa
(o la ) que alarga el polmero hasta cerca de 5 000 nucletidos sin separarse
del ADN. El proceso de elongacin se ilustra en la figura 2.11.
Panorama de la biologa celular y molecular 29

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI

Fig. 2.10. Iniciacin de la replicacin. A cada hebra del ojal de replicacin se incorpora
I

la protena replicativa A (RPA) lo que impide que las hebras vuelvan a unirse. Se produce
OH

la incorporacin de la polimerasa y despus la polimerasa /iniciadora que sintetiza


un pequeo fragmento de ARN (en violeta) y otro fragmento de ADN que servir como
PR

especie de cebador para la polimerasa de la elongacin.

Como las polimerasas solo alargan la cadena en el sentido 5- 3, una de las


hebras se sintetiza de forma continua (hebra conductora), mientras que la otra
se tiene que sintetizar por fragmentos, por lo que es necesario el concurso del
complejo pol /iniciadora para la formacin de cada fragmento. Los segmentos
iniciadores son retirados por la accin combinada de una helicasa (Dna2) y una
endonucleasa (FEN1), las brechas son rellenadas por la polimerasa (o la ) y
la hebra es sellada por la accin de la ADN ligasa 1. Estos aspectos se
esquematizan en la figura 2.12.
El movimiento del sistema sintetizador crea superenrollamientos en el ADN
que son aliviados por la accin de la topoisomerasa I. Cuando dos horquillas de
30 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 2.11. Fase de elongacin. a) Al extremo del polinucletido formado en la iniciacin


se une el factor replicativo C (RFC). b) El RFC ensambla al PCNA alrededor del hbrido
formado por el iniciador y la hebra molde. c) La ADN polimerasa d se asocia al PCNA y
forma la unidad de elongacin. d) A medida que el PCNA se desliza sobre el ADN, la
polimerasa va formando una nueva hebra colocando frente a cada base de la hebra
patrn su base complementaria.

replicacin que avanzan en sentido contrario (una hacia la otra) se encuentran,


el proceso termina. Como en cada cromosoma se forman miles de horquillas y
cada cromosoma tiene entre 50 y 350 millones de pares de bases, la replicacin
se produce en pocas horas.
Panorama de la biologa celular y molecular 31

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH

Fig. 2.12. Sellado de la hebra conducida. El sellado de la hebra que se sintetiza por
segmentos (hebra conducida) requiere de la accin de una helicasa que separa un
PR

pequeo segmento del polinucletido que contiene al iniciador. Despus la endonucleasa


corta la hebra en el sitio donde esta se une a la doble hlice. La polimerasa d/PCNA
rellena la brecha y se sella por accin de una ligasa.

Para la replicacin de los extremos del ADN que forma parte de los telmeros
existe una enzima especial (telomerasa) que contiene como cofactor un ARN
que le sirve de molde para el alargamiento de los extremos.
Simultneamente con la replicacin del ADN se incrementa la sntesis de las
histonas y otras protenas que forman parte de la cromatina. Una vez que un
segmento de ADN ha sido replicado, se produce el depsito de las histonas y la
formacin de los nucleosomas que son la unidad estructural de la cromatina.
Los nucleosomas estn formados por: un ncleo con dos molculas de las
histonas H2A, H2B, H3 y H4 y un segmento de ADN de 147 pares de bases
32 Introduccin a la Gentica Mdica
(pb) que da 1 vueltas alrededor de las histonas. En microfotografas electrni-
cas la cromatina se observa como si fuera un collar de cuentas.
Tambin durante el proceso se produce la adicin de las cohesinas que son
protenas que forman un anillo alrededor de las dos molculas de ADN recin
sintetizadas de forma que estas se mantengan unidas hasta el momento de la
mitosis. Como en la zona del centrmero los nucleosomas estn formados por
variantes de las histonas, la unin de las cohesinas es ms fuerte y por eso
durante las primeras fases de la mitosis las cromtidas permanecen unidas al
nivel del centrmero. Un resumen de estos eventos se muestra en la figura 2.13.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 2.13. Formacin de las cromtidas. a) Arriba a la izquierda se muestra un esquema


del octmero de histonas que forman el ncleo del nucleosoma. b) Octmero de histonas
que forman el ncleo del nucleosoma que se muestra en la parte inferior con el ADN
enrollado 1,7 veces alrededor de las histonas. c) A la derecha un esquema de las hebras
recin sintetizadas ya en forma de nucleosomas y unidas por las cohesinas que forman
un anillo que atrapa a las dos molculas resultantes de la replicacin.
Panorama de la biologa celular y molecular 33
Todo este proceso se realiza con una alta fidelidad de copia pues las ADN
polimerasas cometen un error por cada 108 a 1010 desoxinucletidos incorpora-
dos. Durante la elongacin, a veces la polimerasa coloca una base incorrecta,
es decir, que no forma un par tipo Watson y Crick con la base de la hebra molde.
Se produce un defecto llamado bases mal apareadas. Tambin pueden produ-
cirse deslizamientos de la polimerasa que puede tener dos resultados:
Si el deslizamiento es hacia atrs, las bases pueden ser copiadas ms de una
vez y el resultado es la insercin de una o ms bases.
Si es hacia delante las bases pueden dejar de ser copiadas y se produce la
sustraccin de una o ms bases. Estos ltimos accidentes dan lugar a los
llamados microsatlites, que son repeticiones de un nmero pequeo de
nucletidos (generalmente 1 a 3).

Cuando alguno de estos accidentes ocurre, se pone en marcha un mecanis-

N
mo de rectificacin en el cual estn implicadas las protenas (codificadas por los

CI
genes: MSH1, MSH2, MLH2, PMS1 y PMS2), algunas de las cuales estn
asociadas a la polimerasa durante la elongacin. La accin efectiva de estas

UC
protenas corrige los errores cometidos por la polimerasa y permite el paso a la
fase G2 con un ADN replicado de forma correcta.
OD
Los microsatlites, son causas de inestabilidad cromosmica y con el tiempo
pueden conducir a la aparicin de la transformacin cancerosa como ocurre en
PR
el caso del cncer colorectal no polipsico hereditario cuya causa radica, en
RE

mutaciones en algunos de los genes cuyos productos participan en la rectifica-


cin de la replicacin.
SU

Al final de la etapa G2, comienza el proceso de empaquetamiento de la


cromatina, donde intervienen protenas de la familia de las condensinas que
DA

sustituyen a las cohesinas, excepto las asociadas a los centrmeros.


BI

Este empaquetamiento conduce a que en un momento dado, los cromosomas


I

sean visibles con el microscopio ptico, evento que marca el inicio de la mitosis.
OH

Mitosis
PR

La mitosis constituye la etapa final de la transmisin de la informacin


gentica, pues en esta las dos molculas de ADN formadas durante la replicacin
son segregadas hacia las clulas hijas, de modo que cada una de ellas reciba
igual informacin gentica que la clula madre. Se trata de un proceso extrema-
damente complejo, en el cual interviene un gran nmero de protenas, muchas
de estas formando parte de complejos supramacromoleculares, que constitu-
yen, por una parte, puntos de control que garantizan la culminacin de cada
etapa, y por otra, propician el paso de una etapa a la siguiente. En los prrafos
que siguen, se hace una descripcin somera del proceso, pues un estudio deta-
llado de este, desde el punto de vista molecular, va ms all del alcance de este
texto.
34 Introduccin a la Gentica Mdica

El estudio de la mitosis se acostumbra a dividir en 4 fases: profase, metafase,


anafase y telofase.
1. Profase: puede decirse que se inicia con la visualizacin de los cromosomas
que en este momento an son largos, pues no ha terminado su
empaquetamiento. Este empaquetamiento lleva a la desaparicin del
nucleolo. Por otra parte, se produce la desintegracin de la envoltura nu-
clear, mientras que en el citoplasma comienza a formarse el huso mittico.
Esta fase est determinada, en parte, por la actividad del factor promotor
de la mitosis (MPF, del ingls, mitosis promoting factor) formado por la
ciclina B y la Cdk1. Al inicio de la profase el MPF fosforila algunas histonas
con lo cual favorece la condensacin de la cromatina, fosforila la lmina B,
favorece la desintegracin de la lmina nuclear, y fosforila protenas espe-
cficas que unen la lmina a la envoltura nuclear. Por estas acciones el

N
MPF favorece: la condensacin de la cromatina y la desintegracin de la
envoltura nuclear.

CI
2. Metafase: la condensacin de la cromatina contina as como la formacin

UC
del huso, y los cromosomas se van asociando con las fibras del huso hasta
que en la metafase quedan orientados en el centro de la clula, unidas a las
OD
fibras del huso por el cinetocoro, dando lugar a la llamada placa ecuatorial.
Un complejo multiprotenico, controla la formacin adecuada del huso y ha
PR
sido denominado punto de control del ensamblaje del huso SAC (del ingls,
RE

spindle assembly checkpoint). El SAC controla que todos los cromosomas


estn unidos correctamente al cinetoco correspondiente, y detiene el pro-
SU

ceso hasta tanto se produzca la alineacin correcta de los cromosomas en


la placa ecuatorial.
DA

3. Anafase: una vez que todos los cromosomas se han alineado comienza
BI

esta fase con la separacin de las cromtidas y su migracin hacia los


I

polos del huso mittico. En la transicin de la metafase a la anafase inter-


OH

viene un complejo de protenas denominado liberador temprano de la anafase


por accin de la Cdc14, FEAR, (del ingls, Cdc14 (fourteen early anaphase
PR

release) que contribuye a la liberacin de la fosfatasa Cdc14 al inicio de la


anafase. De este complejo forma parte la separasa, una enzima proteoltica
que hidrolisa las cohesinas de los centrmeros y permite la separacin de
las cromtidas.
La separasa se encuentra inhibida por la segurina, que es marcada con
ubiquitina por el complejo promotor de la anafase (APC, del ingls, anaphase
promoting complex), tambin llamado ciclosoma. Las cromtidas separa-
das son atradas hacia los polos celulares por motores celulares asociados
a los microtbulos del huso. En la fase posterior de la anafase interviene el
complejo denominado va de salida temprana de la mitosis, MEN (del in-
gls, mitotic exit network), que hace que el APC marque con ubiquitina las
ciclinas A y B, que son degradadas por el proteasoma, que inactiva sus
Panorama de la biologa celular y molecular 35
respectivos complejos con las Cdk, que disminuyen de forma considerable
la actividad de kinasas, con el consecuente aumento de la actividad de
fosfatasas.
4. Telofase: ya en la telofase se produce la desaparicin del huso, la reapari-
cin de la envoltura nuclear, la descondensacin de la cromatina y reapare-
ce el nucleolo. Todas las protenas que fueron fosforiladas por el MPF son
desfosforiladas por las fosfatasas entre estas la codificada por el Cdc14. El
proceso termina cuando un anillo fibroso de actina se forma por debajo de
la membrana plasmtica en la posicin donde estuvo la placa ecuatorial.
Este anillo se va contrayendo y produce la estrangulacin de la clula,
hasta formar dos clulas hijas. Este ltimo fenmeno recibe el nombre de
citocinesis. Un resumen de la progresin de la mitosis se muestra en la
figura 2.14.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 2.14. Esquema de la mitosis mostrando en cada paso el complejo principal que hace
avanzar a la clula de una fase a la siguiente en el proceso de divisin. Ver ms detalles
en el texto.

De esta forma cada una de las clulas formadas, contiene igual informacin
gentica que a la vez, es igual a la de la clula que le dio origen y con esto
concluye el proceso de transmisin de la informacin gentica.
36 Introduccin a la Gentica Mdica

De lo anterior se deduce que la funcin reproductora de los seres vivos,


ocurre mediante dos procesos: la replicacin del ADN en el cual la informacin
gentica de la clula se duplica, y la divisin celular que divide la informacin
duplicada entre las dos clulas hijas.
Aunque en los organismos multicelulares el proceso es ms complejo, los
fundamentos moleculares son iguales.
Los mecanismos de expresin y conservacin de la informacin gentica se
estudian en el siguiente captulo.

Resumen
Las clulas eucariontes constituyen la base fundamental de existencia de los
organismos superiores. Posee una estructura compleja formada, fundamental-

N
mente, por agregados de macromolculas. La membrana plasmtica es la es-

CI
tructura que limita y a la vez comunica a la clula con su entorno. El citoplasma
presenta estructuras especializadas, que pueden ser o no de carcter

UC
membranoso.
OD
El ncleo es tambin una estructura con un alto grado de organizacin, donde
existen corpsculos, esencialmente, de carcter protenico que, a diferencia de
PR
las estructuras citoplasmticas, no estn separados por membranas. El compo-
nente fundamental del ncleo es la cromatina, formada por ADN y protenas,
RE

que adopta un estado relajado durante la interfase y un estado condensado


(cromosomas) durante la mitosis. La clula est dotada de finos y regulados
SU

mecanismos moleculares que controlan su proliferacin y crecimiento.


DA

El proceso fundamental en estas funciones es la replicacin del ADN, la que


se realiza en el ncleo solo una vez durante la vida de la clula.
BI

Son numerosas las macromolculas que intervienen en este proceso. Termi-


I

nado este proceso, la clula est en condiciones de pasar a la mitosis, donde las
OH

molculas de ADN que se han formado se distribuyen de manera uniforme en


PR

las clulas hijas.

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38 Introduccin a la Gentica Mdica

Captulo 3 EXPRESIN Y CONSERVACIN


DE LA INFORMACIN
GENTICA

N
CI
Rolando Hernndez Fernndez

UC
La funcin nica de la molcula de ADN (cido desoxirribonucleico), es la
de conservar la informacin gentica. Pero con eso no es suficiente para la
OD
formacin de un organismo, que necesita estructuras que realizan las funciones
PR
que les son inherentes. Para que ese organismo sea funcional es necesario que
la informacin se exprese.
RE

Los mecanismos de expresin de la informacin gentica, consisten, en la


formacin de molculas funcionales a partir de la informacin contenida en el
SU

ADN. Las nicas biomolculas, cuyas estructuras estn codificadas directa-


DA

mente en el ADN, son ARN (cido ribonucleico) y las protenas, por eso se les
llama productos gnicos primarios.
BI

Para que el organismo funcione de forma correcta es necesario mantener la


I

integridad estructural del ADN, pues si ocurren alteraciones, pueden formar


OH

productos no funcionales que conducen a la aparicin de enfermedades.


PR

Los organismos poseen diversos mecanismos para mantener la integridad


del ADN.
En los organismos multicelulares se hace necesario que las acciones de to-
dos los rganos y sistemas estn coordinadas, para lograr un funcionamiento
armnico. Esto se realiza, mediante los procesos de comunicacin intercelular,
que son, en ltima instancia, la transferencia de la informacin gentica de una
clula que la expresa, a otra, que, por lo general, no la expresa, pero puede
procesarla.
De los aspectos fundamentales del funcionamiento molecular del organismo,
se trata en el presente captulo.
Como parte inicial se hace una breve resea de las caractersticas del genoma
humano.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 39
Genoma humano
El trmino genoma, se refiere al conjunto de todos los genes que caracterizan
a una especie dada. En ocasiones y de forma errnea, se usa como sinnimo de
ADN total.
A diferencia de los procariontes, donde el genoma est formado por una sola
molcula de ADN, el genoma humano, como el de todos los organismos
eucariontes, est fragmentado en varias molculas, cuyo nmero es caracters-
tico de cada especie. Estas molculas de ADN estn asociadas con protenas y
forman los cromosomas durante la mitosis.
Cada cromosoma contiene: una molcula de ADN de gran tamao, la menor
de unos 48 millones de pares de bases (en el cromosoma 21) y la mayor de 270
millones de pares de bases (en el cromosoma 1). En su conjunto, el ADN total

N
de una clula humana haploide contiene 3 500 millones de pares de bases.
Si el ADN total de una clula se extendiera, tendra una longitud cercana

CI
a 1 m. Las clulas somticas humanas contienen 22 pares de molculas de

UC
ADN que forman parte de los cromosomas autosmicos. En las hembras existe
un par adicional en la estructura de los dos cromosomas X, mientras que en los
OD
varones hay dos molculas adicionales diferentes, una del cromosoma X y otra
del cromosoma Y.
PR
Estas molculas estn asociadas con protenas, principalmente, histonas; cons-
RE

tituyen la cromatina durante la interfase y los cromosomas durante la divisin


celular.
SU

Adems, existe ADN en las mitocondrias, con un grupo de genes que cons-
tituyen el genoma mitocondrial.
DA

En la interfase cada molcula de ADN, con sus protenas correspondientes,


ocupa una regin especfica dentro del ncleo, conocida como territorio
BI

cromosmico, donde estn separadas unos de otras por los espacios


I

intercromatnicos. Esta disposicin espacial explica, porqu se producen


OH

translocaciones con mucha frecuencia entre algunos pares de cromosomas,


PR

mientras que son raras entre otros.


Los genes con una transcripcin ms activa, se encuentran hacia el interior
del ncleo y los menos activos hacia la periferia. Dentro de la cromatina, cada
gen ocupa una posicin precisa llamada locus cromosmico.
El autor entiende por gen, uno o varios sectores de una molcula de ADN
que tiene la informacin necesaria para dirigir la sntesis de una o varias mol-
culas de ARN. En la estructura de todos los genes se distinguen dos zonas: la
zona de codificacin donde est contenida la informacin para la sntesis de la
molcula correspondiente de ARN, y que es transcripta por enzimas de la fami-
lia de las ARN polimerasas, y la zona de regulacin, que determina cundo,
dnde y con qu intensidad el gen debe ser transcrito. Entre los elementos
reguladores principales se encuentran: los promotores, los potenciadores y los
silenciadores. En este captulo solo se hace referencia a los primeros.
40 Introduccin a la Gentica Mdica
De acuerdo con su estructura informativa, su producto y la enzima que los
transcriben, los genes humanos son de tres clases:
1. Genes de clase I: codifican los tres ARNr (cidos ribonucleicos ribosomales)
de mayor tamao (28 S, 18 S y 5,8 S); el primero y el tercero forman parte
de la subunidad mayor de los ribosomas, y el segundo, de la subunidad
menor. Forman una unidad de transcripcin nica (que contiene los tres
genes pero un solo promotor), que se encuentra repetida, aproximadamen-
te, 400 veces, una detrs de otra en los cromosomas 13; 14; 15; 21 y 22.
Son transcritos por la enzima ARN polimerasa I.
2. Genes de clase II: codifican ARNm (cidos ribonucleicos mensajeros) que
despus dirigen la sntesis de protenas, ARN pequeos del tipo U (ricos en
uracilo) los cuales participan en el proceso de maduracin de los ARNm y
otros ARN pequeos que no codifican protenas. Son transcritos por la
enzima ARN polimerasa II.

N
3. Genes de clase III: codifican ARN pequeos con una longitud de 100 a 150

CI
nucletidos. Se distinguen tres tipos principales de acuerdo con las carac-
tersticas del promotor:

UC
Tipo IIIa, tiene el promotor interno (esto es, que forma parte de la zona
de codificacin), y est estructurado en tres mdulos. Codifica el ARNr
OD
de 5 S que forma parte de la subunidad mayor del ribosoma.
Tipo IIIb, tambin presenta el promotor interno, pero con dos mdulos y
PR
codifica los ARNt (cidos ribonucleicos de transferencia), que llevan
RE

los aminocidos a los ribosomas durante la sntesis de protenas.


Tipo IIIc, presenta el promotor externo, similar a los de ARN polimerasa
SU

II y codifica ARN pequeos, nucleares o citoplasmticos. Todos son


transcritos por la enzima ARN polimerasa III.
DA
BI

Recientemente se ha descubierto la existencia de un nuevo tipo de ARN,


llamado micro-ARN (se emplean las siglas en ingls, miRNA, pues permite
I
OH

pronunciarlo como la palabra mirna), que interviene en los mecanismos de


regulacin de la expresin de la informacin gentica tanto en la transcripcin
PR

como en la traduccin. En la actualidad, an, se desconoce la estructura de los


genes que codifican los micro-ARN pero se sabe que son transcritos por la
enzima ARN polimerasa II. El estudio de la estructura y funcin de los micro-
ARN rebasa los lmites de este texto.
Los genes pueden estar representados en el genoma de formas muy diversas.
En las consideraciones que siguen se toma como referencia el genoma
haploide. Un gen puede aparecer solo una vez en el genoma, son los llamados
genes de copia nica y constituyen la mayora de los genes eucariontes. Un
gen que codifica una protena puede estar repetido como sucede con el gen de
la cadena (alfa) de la hemoglobina que aparece dos veces en el cromosoma
16. A veces varios genes codifican protenas que realizan la misma funcin y,
por lo tanto, poseen estructuras similares, pero difieren en sus propiedades fsi-
cas, qumicas y biolgicas, y en su distribucin por los tejidos. Por ejemplo, las
Expresin y conservacin de la informacin gentica 41
hexokinasas son enzimas que catalizan la conversin de la glucosa en glucosa-
6-fosfato, que es el paso inicial de todo el metabolismo de esta hexosa. Existen
cuatro genes que codifican estas enzimas (hexokinasas I, II, III y IV o
glucokinasas) que difieren, entre otras cosas, en su distribucin. La glucokinasa
sola se expresa en el hgado y las clulas- del pncreas. Tambin las protenas
que transportan la glucosa a travs de la membrana plasmtica, estn codifica-
das por varios genes (GLUT1 a GLUT12) con propiedades diferentes.
Un caso singular es el de los receptores olfatorios, para los cuales existen
aproximadamente 5 000 genes. Cuando se trata de enzimas, esas formas alter-
nativas reciben el nombre de isoenzimas, cuando no, se nombran isoformas. As
se puede decir que existen cuatro isoenzimas de la hexokinasa, pero 12 isoformas
de los transportadores de glucosa. En todos los casos la transcripcin de estos
genes es independiente una de otra. Esto explica porqu en ocasiones la defi-
ciencia de una enzima u otra protena se manifiesta por alteraciones solamente,

N
en un rgano o tejido, aunque esa actividad est presente en todos.

CI
Sin embargo, existen grupos de genes, que se transcriben de forma coordina-
da. Cuando esto ocurre se dice que existe una familia gnica. Se han identifica-

UC
do tres tipos de familias gnicas cuyas caractersticas esenciales se describen a
continuacin.
OD
1. Familias multignicas simples. Comprende varios genes que son transcritos
a partir de un promotor nico. El ejemplo ms sobresaliente es la familia
PR
compuesta por los genes de los ARNr de 28 S, 18 S y 5,8 S. Los tres genes
RE

son transcritos a partir de un promotor en un ARN nico, que despus es


procesado para producir los 3 ARNr independientes. Un esquema de esta
SU

familia se representa en la figura 3.1a.


2. Familias multignicas compuestas. Comprende varios genes que se
DA

transcriben simultneamente, pero cada uno consta de un promotor inde-


BI

pendiente. Puede darse el caso de que la transcripcin de alguno de estos


se haga en sentido contrario al resto. El ejemplo ms notorio es la familia
I
OH

de las histonas, que se encuentra repetida en varios cromosomas. As, por


ejemplo, en 6p21.3 existe una agrupacin de genes de histonas formada
PR

por 6 genes para la H1; 4 para la H2A; 8 para las H2B; 7 para la H3 y
9 para la H4. Una representacin de esta familia se muestra en la figura 3.1b.
3. Familias multignicas controladas por el desarrollo. Los genes de estas
familias codifican protenas que solo ejercen su funcin en un momento
especfico del desarrollo ontogentico. Pasado ese periodo, el gen se deja
de expresar para dar paso a la expresin de otro miembro de la familia. El
ejemplo ms ilustrativo, es la familia de los genes que codifican las cadenas
de la hemoglobina. Unos se expresan en el embrin, otros en el feto y otros
en el adulto. Los genes que codifican las cadenas de tipo b se encuentran
en el cromosoma 11 (o sea: en el embrin; G , Aen el feto; es un
seudogen; y en el adulto), mientras que los de tipo estn en el
cromosoma 16 (esto es: en el embrin; , ya son seudogenes; 1 y 2
en el feto y en el adulto). Alejada miles de pares de bases de esos loci est
42 Introduccin a la Gentica Mdica

la llamada regin de control del locus (LCR, del ingls, locus control region),
encargada de determinar cul de los genes de la familia se expresa en cada
momento. La organizacin de los genes de la globina se ilustra en la figura 3.1c.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA

Fig. 3.1. Familias multignicas. a) La familia multignica simple de los genes para los
ARNr. b) La familia mutignica compleja de los genes de las histonas localizados en la
BI

regin 6p21.3-22. c) La familia multignica controlada por el desarrollo de los genes de


I

las globinas. En la parte superior los genes de las cadenas localizados en el cromosoma
OH

11 y abajo los de las cadenas ubicados en el cromosoma 16. Los genes se disponen en
el orden de expresin durante el desarrollo. El smbolo Y indica que se trata de un
PR

seudogen.

Por su parte, el genoma mitocondrial est formado por una molcula circular
de ADN, aunque puede haber varias en el mismo organelo. Tiene 16 569 pares
de bases y contiene 37 genes. Estos genes codifican los ARNr de las mitocondrias
as como los ARNt, pues las mitocondrias, pueden sintetizar protenas. El resto
de los genes, codifican protenas relacionadas con la respiracin celular. Muta-
ciones en estos genes, pueden provocar enfermedades que tienen una transmi-
sin caracterstica, debido a que durante la fecundacin, solo las mitocondrias
del vulo pasan a formar parte del cigoto. Un esquema representativo del genoma
mitocondrial aparece en la figura 3.2.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 43

N
CI
UC
OD
Fig. 3.2. Fig. 3.2. Mapa gentico mitocondrial. Los 37 genes mitocondriales se represen-
tan mediante el cdigo de colores que se indica en la figura.
PR
A diferencia de los procariontes, donde los genes que codifican protenas
RE

relacionadas de forma funcional se encuentran agrupadas, los estudios realiza-


dos hasta el momento no han permitido descubrir ninguna regularidad en la
SU

organizacin del genoma humano.


El genoma humano, no obstante, al igual que otros genomas complejos, se ha
DA

agrupado como ADN codificante, a lo que ya se ha hecho referencia, y el ADN


BI

no codificante de alto, moderado y bajo nmero de copias (de 1 a 10 nucletidos


I

hasta decenas y cientos de nucletidos). Muchos de estos se encuentran en


OH

unos cuantos sitios cromosmicos diferentes; por ejemplo, el ADN denominado


satlite est constituido por grandes repeticiones en tndem de ADN y se en-
PR

cuentra en regiones heterocromatnicas pericentromricas.

Transcripcin

Se denomina transcripcin al proceso de formacin de los ARN a partir de la


informacin contenida en la secuencia de bases del ADN. Como este posee
dos hebras de polinucletidos y los ARN solo una, en la transcricin se emplea
como molde para dirigir la sntesis, solamente, una de las hebras del ADN, a la
cual se le llama hebra molde. La hebra complementaria, recibe el nombre de
codificante, pues basta cambiar la T por U para tener la secuencia de bases del
ARN. Cuando se da la secuencia de un gen o de un sector de este, se escribe la
hebra codificante en direccin 5-3.
44 Introduccin a la Gentica Mdica

El promotor es la zona que controla la expresin del gen y, generalmente, se


encuentra adyacente hacia el extremo 5. El promotor consta de varias secuen-
cias de 6 a 8 nucletidos que son sitios de unin de las protenas que intervienen
en la fase de iniciacin de la transcripcin. Esas protenas se nombran factores
de transcripcin.

Transcripcin por la proteina ARN polimerasa I

Los genes de clase I son transcriptos por ARN polimerasa I. Es una enzima
compleja que est formada por 14 subunidades.
El promotor se encuentra adyacente a la zona de codificacin hacia el extre-
mo 5 de la unidad de transcripcin, la cual est formada por los genes que
codifican los ARNr de: 28 S, 5,8 S y 18 S. Contiene dos elementos de regula-

N
cin, un elemento proximal denominado ncleo del promotor, CP (del ingls,
core promoter), y un elemento distal nombrado UCE (del ingls, upstream

CI
control element).

UC
Una protena dimrica llamada factor de unin al elemento distal, UBF (del
ingls upstream binding factor) se une a UCE y favorece la unin del factor
OD
de seleccin 1, SL-1 (del ingls selective factor) al ncleo del promotor y reclu-
ta hacia este a la ARN polimerasa I.
PR
Otra protena, denominada factor de iniciacin de la transcripcin IA (TIFIA)
RE

(del ingls, transcripcin iniciation factor, IA) se asocia con la polimerasa


hasta que se forma el primer enlace fosfodister. Por ltimo, se incorpora el
SU

TFIIH (factor de transcripcin comn con la protena ARN polimerasa II) que
contiene subunidades con actividad de helicasa que son necesarias para la aper-
DA

tura de la doble hlice del ADN, y permite que la polimerasa tenga acceso a la
secuencia de bases que debe copiar. La enzima sintetiza un ARN de 49 S que
BI

despus es procesado y forma los 3 ARNr. Un resumen de la iniciacin de la


I

transcripcin por ARN polimerasa I, se muestra en la figura 3.3.


OH
PR

Transcripcin por la enzima ARN polimerasa II

Los genes de tipo II son, principalmente, los que codifican protenas y su


transcripcin produce los ARNm. Se han identificado, al menos, dos elementos
en el promotor, la secuencia TATA, aproximadamente a 35 nucletidos del sitio
de iniciacin de la transcripcin y otra muy cerca del sitio de iniciacin llamada
iniciador (Py-Py-AA-Py-Py, donde Py es una pirimidina). Los genes tipo
II pueden tener una de estas secuencias, las dos o ninguna. En estos sitios se
unen los factores generales de transcripcin, que son, un grupo de protenas
necesarias para la transcripcin por ARN polimerasa II.
Bastante alejados del sitio de iniciacin, se encuentran otras secuencias que
sirven de sitio de unin a factores de transcripcin gnico-especficos, es decir,
que solo son necesarios para intensificar la transcripcin de algunos genes.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 45

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I

Fig. 3.3. Iniciacin de la transcripcin por la ARN polimerasa I. En la parte superior se


OH

indican los sitios que forman el promotor. La unin del factor UBF al sitio UCE produce
el enrollamiento del ADN aproximando los dos sitios y permitiendo la incorporacin del
PR

SL-1 y el TIFIA. A este complejo se aade la polimerasa que recluta al TFIIH que, con su
actividad de helicasa, produce la apertura de la doble hlice del ADN.

Por su parte, la zona de codificacin tiene la caracterstica de presentar se-


cuencias intercaladas llamadas intrones (del ingls, inside, que significa dentro
porque despus de procesado el transcrito primario quedan dentro del ncleo).
Las secuencias que van a permanecer en el ARNm (cido ribonucleico mensa-
jero) maduro se llaman exones (del ingls, exit, que significa salida, porque
salen del ncleo formando parte del ARNm maduro). Estos genes son transcritos
por ARN polimerasa II, una enzima compleja formada por 12 subunidades. La
estructura de los genes de tipo II que codifican protenas se esquematiza en la
figura 3.4.
46 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE

Fig. 3.4. Fig. 3.4. Estructura de los genes de tipo II. a) Se representan las posibles
combinaciones de sitios en los promotores. b) La estructura interna de los genes toman-
do como modelo los genes de las globinas. Los nmeros en la parte superior representan la
SU

distancia en Kb, mientras que los inferiores se refieren al nmero de los aminocidos en la
cadena polipptica. FTGE (factores de transcripcin gnico espescos); Inr (iniciador).
DA
BI
I

Solo se estudia la transcripcin de genes cuyo promotor contiene el elemento


OH

TATA, pues es el caso ms conocido.


Los factores de transcripcin se identifican por letras maysculas. Primero
PR

las iniciales TF (del ingls, transcription factor), despus con nmeros roma-
nos se indica la ARN polimerasa que lo utiliza (puede ser II o III) y por ltimo
una letra mayscula que se le adjudic por el procedimiento de purificacin. As,
TFIID significa el factor de transcripcin D de la ARN polimerasa II. Los
factores de transcripcin de la ARN polimerasa I eran ya conocidos y su no-
menclatura no se ajusta a esta norma.
El proceso comienza cuando una de las subunidades del TFIID conocida
como protena de unin a TATA, TBP (del ingls, TATA-bindign protein) se
asocia a la secuencia TATA. Esta protena tiene la forma de una silla de montar,
se dispone a horcajadas sobre el ADN y provoca una flexin en este. A
continuacin se unen TFIIA y TFIIB, este ltimo determina el sentido de la
transcripcin. Como continuacin de la protena TBP se incorporan los factores
asociados al TBP, TAF (del ingls, TBP associated factors) con los cuales se
Expresin y conservacin de la informacin gentica 47
completa el TFIID. Se incorpora el TFIIF acompaado por la enzima ARN
polimerasa, al que le siguen el TFIIE y el TFIIH que contienen las helicasas. Se
produce la apertura del promotor y la polimerasa comienza a deslizarse sobre el
ADN hasta encontrar el sitio de iniciacin. El primer nucletido en ser copiado
es, generalmente, de adenina. Cuando comienza la sntesis del ARNm, muchos
de los factores de transcripcin abandonan a la enzima y son sustituidos por
factores de elongacin. Un resumen de los eventos de la iniciacin en los genes
que codifican protenas, se muestra en la figura 3.5.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 3.5. Iniciacin de la transcripcin por la ARN polimerasa II. De arriba a abajo se
muestra la unin secuencial de los factores generales de transcripcin. Observe que
existen factores que se incorporan con posterioridad a la polimerasa. La unin del
TFIIH permite la apertura de la doble hlice del ADN debido a su actividad de helicasa.
48 Introduccin a la Gentica Mdica
La transcripcin no ocurre a una velocidad constante, existen pausas que la
enzima puede superar y paros o detenciones que requieren de protenas adicio-
nales, llamadas factores de elongacin para continuar. Las mutaciones, en uno
de esos factores de elongacin, son la causa de la enfermedad de Von Hippel
Lindau. Una seal formada por dos secuencias muy separadas indica el sitio
donde la transcripcin debe terminar.
De forma simultnea con la sntesis del ARNm se producen modificaciones
en la molcula, en un proceso conocido como maduracin. Cuando se ha produ-
cido la sntesis de un pequeo fragmento de ARNm, un nucletido de guanina es
aadido al extremo 5 mediante un enlace trifosfato, despus se produce la
metilacin de la guanina, formando la 7-metil-guanina (7mG). Esta estructura,
conocida como casquete, protege al ARNm de la accin de exonucleasas, y
adems es importante para la incorporacin a los ribosomas. Los intrones, son
eliminados en la misma medida que son transcritos, por la accin de enzimas y

N
protenas no enzimticas que son reclutadas, hacia el dominio C-terminal de la

CI
subunidad mayor de ARN polimerasa II. Este proceso tambin requiere el con-
curso de varios ARN nucleares pequeos. Tambin el extremo 3, es modifica-

UC
do por la adicin de nucletidos de adenina, hasta un nmero de 250. Esta
estructura, conocida como cola de poli(A), tambin protege al ARNm de la
OD
accin de exonucleasas, y sirve para la unin de protenas especficas en el
citoplasma, que contribuyen a la incorporacin del ARNm a los ribosomas.
PR
Al concluir el proceso de maduracin, la estructura final del ARNm desde el
RE

extremo 5 hasta el 3 queda de la forma siguiente: el casquete ocupa el extremo


5, seguido por una secuencia de nucletidos de diferente longitud que no es
SU

traducible, y por eso recibe el nombre de regin no traducible, 5-UTR (del


ingls, untranslated region); a continuacin, aparece la seal de iniciacin de
DA

la traduccin que contiene el codn AUG; sigue toda la secuencia donde est
BI

codificada la protena, que finaliza con uno o varios codones de terminacin; le


I

sigue la regin no traducible del extremo 3 (3-UTR) y por ltimo la cola de


OH

poli(A). El proceso de maduracin y la estructura final del ARNm se muestran


en la figura 3.6.
PR

Todos estos elementos estructurales, tienen una funcin especfica durante


el proceso de traduccin.
Una vez concluido el proceso de maduracin, el ARNm es transportado ha-
cia el citoplasma a travs del complejo del poro nuclear, donde se comprueba
que la transcripcin ha sido realizada de forma correcta. En el citoplasma se
realiza un nuevo control de la calidad y el ARNm es conservado unido a prote-
nas hasta el momento de la traduccin.

Transcripcin por la enzima ARN polimerasa III

La ARN polimerasa III es la mayor de todas las ARN polimerasas pues est
formada por 17 subunidades. Transcribe tres tipos de genes.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 49

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 3.6. Procesamiento del transcripto primario de la ARN polimerasa II. 1) Cuando la
polimerizacin ha avanzado se produce la formacin del casquete en el extremo 5. En 2),
3) y 4) se eliminan los intrones en la medida que son transcritos. 5) Terminacin de la
transcripcin. 6) Adicin de la cola de poliadenina.

Los genes del subtipo IIIa codifican, nicamente, el ARNr de 5 S. El promo-


tor es interno, es decir, dentro de la unidad de transcripcin. Est formado por
una secuencia A, un elemento intermediario IE y una secuencia C que estn
conservados en diferentes especies. Todos ellos constituyen la regin de control
interna, ICR (del ingls, internal control region).
50 Introduccin a la Gentica Mdica

La formacin del complejo de preiniciacin, comienza cuando a la ICR se


une el TFIIIA, una protena con estructuras digitiformes de zinc consecutivas,
que le permiten la unin al ADN. La formacin del complejo TFIIIA-ICR per-
mite la incorporacin del TFIIIC, que es un complejo multiprotenico. Hacia el
promotor TFIIIC recluta al TFIIIB que est formado por la TBP y otros dos
polipptidos que permiten la incorporacin al promotor de ARN polimerasa III y
se da inicio a la transcripcin.
La elongacin es rpida y eficiente y el proceso concluye en una secuencia
de timinas repetidas, sin que al parecer sea necesaria la participacin de otros
factores. El transcrito primario, es acortado por sus dos extremos, debido a la
accin de exonucleasas, dando lugar al ARNr (cido ribonucleico ribosomal),
de 5 S maduro, que es transportado hacia el nucleolo donde participa en la biognesis
de los ribosomas. Un resumen del proceso se muestra en la figura 3.7.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 3.7. Iniciacin de la transcripcin del gen del ARNr de 5 S por la ARN polimerasa III.
De arriba a abajo se representa la secuencia de incorporacin de los factores de trans-
cripcin. Lo ms llamativo es que las secuencias del promotor se encuentran en el
interior del gen.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 51
Los genes del subtipo IIIb codifican el ARNt (cido ribonucleico de transfe-
rencia), y otros ARN pequeos. El promotor es tambin intragnico y est for-
mado por dos secuencias (A y B), separadas por una distancia variable. A estas
dos secuencias se une el TFIIIC, un complejo formado por dos estructuras
globulares unidas por una zona muy flexible, que le permite alargarse y acortar-
se y se adjusta a la distancia entre A y B. Este complejo recluta al TFIIIB y este
ltimo a la ARN polimerasa III, que da inicio a la transcripcin. La elongacin
ocurre sin pausas, y la terminacin es igual a los genes del subtipo IIIa. Este
proceso se resume en la figura 3.8.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
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BI
I
OH
PR

Fig. 3.8. Iniciacin de la transcripcin de los genes de los ARNt por la ARN polimerasa
III. Solo dos factores de transcripcin son necesarios para la iniciacin (A y B). Se
representa el orden de incorporacin de esos factores que permiten la unin de la
polimerasa y la apertura del ADN. Observe que las secuencias del promotor estn en el
interior del gen.
52 Introduccin a la Gentica Mdica

Los genes del subtipo IIIc, codifican los ARN pequeos nucleares U6 y otros
ARN pequeos, nucleares y citoplasmticos. El promotor es extragnico y ms
complejo que los anteriores. Estn situados adyacentes al extremo 5 del gen y
consta de tres elementos: la secuencia TATA ms prxima al sitio de inicio de la
transcripcin, despus el elemento de secuencia proximal (PSE) (del ingls,
proximal sequence element), y ms alejado el elemento distal (DSE) (del in-
gls, distal sequence element). A estos dos se une el complejo protenico
activador de los ARN nucleares pequeos SNAPc (del ingls, small nuclear
ribonucleic acid [snRNA] activating protein complex).
A continuacin se une una forma especial del TFIIIB, a la secuencia TATA,
y trae hacia este sitio a ARN polimerasa que da comienzo a la transcripcin. La
elongacin transcurre rpidamente, y la terminacin es igual a los dos subtipos
anteriores. Un resumen de estos procesos descritos se presenta en la figura 3.9.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 3.9. Transcripcin de los genes para ARN pequeos nucleares por la ARN polimerasa
III. Se representa de forma ordenada la incorporacin de los factores de transcripcin al
promotor que es externo al gen. Para el significado de las abreviaturas consultar el texto.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 53
Traduccin
La traduccin gentica es, en trminos bioqumicos el proceso de sntesis de
protenas. La informacin gentica, que tanto en el ADN como en el ARNm
est en forma de secuencia de bases nitrogenadas, pasa ahora al lenguaje de la
secuencia de aminocidos, lo que da el nombre al proceso. Para poder realizar
la traduccin, es necesaria la existencia de un cdigo que permita establecer la
equivalencia entre la secuencia de bases del ARNm y la secuencia de
aminocidos de las protenas, ese es el llamado cdigo gentico.
El cdigo gentico, est formado por tros de bases nitrogenadas (llamados
codones), y cada uno de estos codifica para un aminocido especfico. Cuando varios
codones significan el mismo aminocido, se dice que son sinnimos. La existencia
de codones sinnimos, es un mecanismo que permite atenuar el efecto de las muta-
ciones. Existe un codn de iniciacin (que es el AUG), y tr es codones para la

N
terminacin (que son el UGA; UAG y UGG). Si en el ADN el gen es discontinuo,

CI
debido a la presencia de los intrones, en el ARNm los codones se encuentran uno a
continuacin del otro, sin ninguna interrupcin, desde el codn de iniciacin hasta el de

UC
terminacin. El cdigo gentico se muestra en la figura 3.10.
La traduccin ocurre en los ribosomas, que presentan dos subunidades de
OD
tamao desigual. Para la traduccin se requiere adems, el concurso de prote-
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 3.10. El cdigo gentico. La representacin ms difundida del cdigo gentico. Los
aminocidos apolares aparecen en violeta, los polares inicos en rojo, los polares no
inicos en azul. Por sus caractersticas peculiares, la prolina y la glicina aparecen en un
color diferente.
54 Introduccin a la Gentica Mdica
nas no ribosomales los cuales se conocen con el nombre de factores de inicia-
cin (eIF) (del ingls, eukaryotic initiation factor), factores de elongacin
(eEF) (del ingls, eukaryotic elongation factor) y de factores de terminacin
(eRF) (del ingls, eukaryotic releasing factor).
Para el estudio del proceso de la traduccin se muestran varias etapas que
son descritas de forma breve a continuacin.

Activacin de los aminocidos

Los aminocidos no pueden interactuar directamente con los codones del


ARNm y por esto requieren de una preparacin, que consiste en unirlos con
ARNt especficos para cada uno de estos. Una familia de enzimas conocidas
como aminoacil-ARNt-sintetasas, cataliza el proceso que se desarrolla en dos
etapas. En la primera reacciona el aminocido con el ATP formando un inter-

N
mediario aminoacil-AMP, que permanece unido a la superficie de la enzima. En

CI
la segunda, el resto aminoacilo es transferido hacia el ARNt correspondiente al
aminocido. La enzima presenta un sitio de rectificacin, que controla si el

UC
aminocido ha sido unido al ARNt que le corresponde. Este es el paso ms
importante para garantizar la fidelidad de la traduccin. La activacin de los
aminocidos se resume en la figura 3.11.OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 3.11. Activacin de los aminocidos. En la parte superior aparece la unin del aminocido
al ATP formando el aminoacil-adenilato y pirofosfato. En la parte inferior, el grupo aminoacilo
es transferido al ARNt que le corresponde. Esta reaccin es importante para garantizar la
fidelidad de la traduccin.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 55
Asociacin de los aminoacil-
ARNt a la subunidad menor
del ribosoma

En el citoplasma los ribosomas se en-


cuentran en un estado de equilibrio entre
la forma asociada de 80 S (las dos
subunidades unidas), y la disociada (las dos
subunidades separadas). La iniciacin se
realiza sobre la unidad menor.
El primer aminocido que se incorpora
a la sntesis de las protenas es la metionina,
que posee un ARNt especfico para esa

N
funcin que se denomina ARNti, (i por ini-
ciador). El metionil-ARNti (met-ARNt), se

CI
une al eIF2 que en su forma activa est

UC
unido al GTP, y forma el complejo ternario
met-ARNt: eIF2: GTP. Este complejo se
OD
asocia a la subunidad menor del ribosoma
junto con el eIF1A y el eIF3. Con poste-
PR
rioridad, se aade el eIF5, para formar en
RE

su conjunto el complejo de preiniciacin de


43 S. Esta fase del proceso est represen-
SU

tada en la figura 3.12.


DA

Preparacin del ARNm


BI
I

Al llegar al citoplasma se encuentran


OH

unidas protenas llamadas PAB (protenas


PR

de unin a polyA) (del ingls, polyA


binding protein), a la cola de poli (A). A
la estructura del casquete se une el eIF4E
y despus, el eIF4G se une, simultnea-
mente, al eIF4E y a la PAB, y propicia al
ARNm una estructura circular. Una vez
formada la estructura circular el eIF4G
recluta hacia esa zona al eIF4A, al eIF4B Fig. 3.12. Preparacin del aminoacil-
y al eIF4H, que poseen actividad de ARNt. Los aminocidos activados
helicasa, se deslizan sobre el ARNm y eli- son transportados hacia la
mina estructuras secundarias en forma de subunidad menor del ribosoma por
tallo y asa que se puedan encontrar en la el eIF2 unido al GTP y se forma un
regin 5-UTR, as elimina cualquier obs- complejo de preiniciacin de 43 S.
56 Introduccin a la Gentica Mdica

tculo para el movimiento del ribosoma. La preparacin del ARNm se ilustra en


la figura 3.13.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA

Fig. 3.13. Preparacin del ARNm. El ARNm est unido a las PABP por la cola de
BI

poliadenina. El casquete es reconocido por el eIF4E. El eIF4G une al eIF4E con las PABP
I

dndole al ARNm una estructura circular que es la forma como participa en la traduccin.
OH

Iniciacin de la traduccin
PR

El complejo de 43 S se asocia al extremo 5 (casquete) del ARNm y se


comienza a deslizar sobre este hasta localizar la seal de iniciacin que contiene,
generalmente, al primer AUG. Cuando se produce la unin entre el codn de
iniciacin y el anticodn del met-ARNti, el eIF5 estimula al eIF2 a hidrolizar el
GTP (guanosin trifosfato). El complejo eIF2: GDP (guanosin difosfato), pierde
afinidad por el ribosoma y se separa dejando el met-ARNti en el sitio P. Con
posterioridad, el resto de los factores abandonan el ribosoma. La unin de la
subunidad mayor est mediada por el eIF5B: GTP que, cuando se produce la
unin de forma correcta hidroliza el GTP y, en forma de eIF5B: GDP, abandona
el ribosoma que est listo para comenzar la elongacin. En la figura 3.14 se
esquematiza esta fase del proceso.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 57

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I

Fig. 3.14. Iniciacin de la traduccin. El complejo 43 S se asocia al extremo 5 del ARNm


OH

donde est el eIF4E y comienza a deslizarse sobre este hasta localizar el codn de
PR

iniciacin. Cuando se produce un apareamiento correcto entre el codn de iniciacin y


el anticodn del metionil-ARNti, se origina la hidrlisis del GTP unido al eIF2 y este
abandona el ribosoma dejando el metionil-ARNt en el sitio adecuado. Con posterioridad
se incorpora la subunidad mayor y el ribosoma est listo para la fase de elongacin. En
la figura, en aras de la simplicidad, se han omitido otros factores de iniciacin. Para una
informacin ms detallada consultar el texto.

Elongacin de la traduccin

Al final de la iniciacin, el sitio P del ribosoma est ocupado por el met-


ARNti, mientras que el sitio A se encuentra desocupado. El siguiente aminocido
es trado al sitio A, en forma de un complejo ternario aminoacil-ARNt: eEF1A:
GTP. Si se produce el acoplamiento adecuado entre el codn del ARNm, que
58 Introduccin a la Gentica Mdica

ocupa el sitio A, y el anticodn del aminoacil-ARNt entrante, el eEF1A hidroliza


el GTP y en forma de eEF1A: GDP, abandona el ribosoma. El centro de peptidil-
transferasa de la subunidad mayor, transfiere la metionina del met-ARNti hacia
el aminoacil-ARNt, que ocupa el sitio A y se forma el enlace peptdico. Se
produce el movimiento del ribosoma de manera que el ARNti pasa al sitio E, el
dipeptidil-ARNt pasa el sitio P y el sitio A queda desocupado. Para este movi-
miento se necesita el concurso del eEF2: GTP, que mediante la hidrlisis del
GTP, proporciona la energa para el movimiento, y en estado de eEF2: GDP,
abandona el ribosoma. Este ciclo se repite tantas veces como aminocidos de-
ban ser incorporados, para la formacin de la protena que se est sintetizando.
La fase de elongacin se ilustra en la figura 3.15.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 3.15. Elongacin de la traduccin. 1) El aminoacil-ARNt es llevado al ribosoma por


el complejo eEF1: GTP ubicndolo en el sitio A. 2) Si el apareamiento codn con anticodn
es adecuado, se hidroliza el GTP y el eEF1: GDP abandona el ribosoma. 3) Se produce la
formacin del enlace peptdico. 4) La unin del complejo eEF2: GTP favorece el despla-
zamiento del ribosoma sobre el ARNm hasta el siguiente codn. 5) Al llegar el ribosoma
al siguiente codn se origina la hidrlisis del GTP y el complejo eEF2: GDP abandona el
ribosoma. 6) Con la salida del ARNt el ribosoma est listo para recibir un nuevo
aminocido.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 59
Terminacin de la traduccin

Cuando en el sitio A aparece un codn de terminacin, no existe aminoacil-


ARNt que pueda acoplarse con este sitio. Esto provoca que el ribosoma se
detenga. Esta pausa permite la incorporacin al sitio A del eRF1: GTP, que
estimula la hidrlisis de la protena unida al ltimo ARNt que se incorpor al
ribosoma. Entonces se incorpora el eRF3 que estimula al eRF1 a hidrolizar el
GTP, y en forma de eRF1: GDP, abandona el ribosoma. Entonces se produce la
disociacin de las subunidades ribosomales y la liberacin de la protena recin
sintetizada. Un resumen de esta etapa aparece en la figura 3.16.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 3.16. Terminacin de la traduccin. Al aparecer en el ARNm un codn de termina-


cin, este no puede ser ledo por ningn ARNt y el ribosoma se detiene. Se incorpora el
eRF1: GTP que provoca la liberacin de la protena formada. La incorporacin del eRF3
provoca la hidrlisis del GTP y todo el complejo sintetizador de protenas se desarma.
60 Introduccin a la Gentica Mdica

Eventos postraduccin

En ocasiones las protenas acabadas de salir del ribosoma, no muestran com-


pleta su estructura y, por tanto, no son totalmente funcionales. Entre las modifi-
caciones ms importantes que experimentan las protenas, despus de la
traduccin, se encuentran: eliminacin de aminocido de uno o de los dos extre-
mos, eliminacin de pptidos internos, formacin de los enlaces disulfuro, modi-
ficacin de aminocidos (hidroxilacin, fosforilacin, etc.), adicin de grupos
prostticos o coenzimas, adicin de glcidos o lpidos, etc. Por ltimo, las prote-
nas contienen seales moleculares que indican el lugar, dentro o fuera de la
clula, donde deben funcionar y hacia esos sitios son llevadas.
Las protenas realizan funciones mltiples en el organismo como:
Sirven de soporte o sostn a muchas estructuras.
Soportan fuerzas de tensin o estiramiento.

N
Participan en los mecanismos de contraccin y relajacin que producen al

CI
movimiento.
Catalizan las reacciones qumicas del metabolismo.

UC
Actan como receptores que reciben seales internas o externas.
OD
Funcionan como seales que contribuyen a la regulacin de diferentes procesos.
Participan en mecanismos de defensa contra agresores externos.
PR
RE

Es por esto que cuando se forman las protenas y realizan sus funciones se
est expresando la informacin que de forma original estaba codificada en la
SU

secuencia de bases del ADN.


DA

Conservacin de la informacin gentica


BI
I

La integridad de ninguna otra molcula es tan importante para la clula como


OH

la del ADN. Sin embargo, la molcula de ADN no es invulnerable a la accin de


PR

agentes internos o externos que lo amenazan de manera constante. Los mismos


procesos donde interviene el ADN pueden ser una fuente de daos estructura-
les a la molcula. Molculas que intervienen en el metabolismo celular, tambin
pueden ocasionar esos daos. Agentes externos a la clula o al organismo, son
igualmente, capaces de daar la integridad estructural del ADN. Todos estos
daos pueden, en ltima instancia, modificar el contenido informativo del ADN
o crear obstculos a los procesos de transmisin, expresin y conservacin de
la informacin gentica.
Debido a esta importancia, a lo largo de la evolucin se han creado numero-
sos mecanismos para garantizar esa integridad. En primer lugar est la propia
estructura del ADN: el hecho de que las bases nitrogenadas, se encuentren
hacia el interior de la molcula, en cuya secuencia est la informacin gentica,
proporciona un primer nivel de proteccin. En todos los organismos el ADN
Expresin y conservacin de la informacin gentica 61
est asociado, con protenas que lo rodean y forman un segundo nivel de pro-
teccin. En los organismos eucariontes el ADN est confinado al ncleo celular,
separado del resto de la clula por la envoltura nuclear constituida por una doble
membrana, lo cual hace que se origine un tercer nivel de proteccin. Pero, por
si esto fuera poco, cuando todos estos niveles fallan y se producen daos en el
ADN, todos los organismos cuentan con sistemas reparadores.
Las alteraciones ms frecuentes que pueden ocurrir en el ADN son: las
modificaciones de las bases y las prdidas de bases.
En cualquiera de los dos casos, se pueden producir de forma espontnea o
debido a la accin de agentes externos. Tambin pueden ocurrir enlaces
entrecruzados dentro de una hebra o entre las dos hebras por accin de agentes
externos. Los daos ms graves son la rotura de una o de las dos hebras,
provocadas, en lo fundamental, por la accin de las radiaciones y los radicales

N
libres.
La complejidad de estudiar el proceso de reparacin es el hecho de que,

CI
prcticamente, para cada uno de los daos mencionados, existe un mecanismo

UC
de reparacin particular. En los mamferos, aun cuando poseen todas las moda-
lidades de reparacin, el mecanismo ms usado es la reparacin por escisin de
OD
nucletidos, pues repara cualquier dao que provoque una alteracin en la es-
tructura tridimensional del ADN.
PR
La importancia de este mecanismo se pone de manifiesto de manera dram-
RE

tica en personas que padecen Xeroderma pigmentosum, una enfermedad he-


reditaria que se caracteriza por una hipersensibilidad a la luz solar, de forma tal
SU

que la exposicin de los pacientes al sol, provoca eritemas mltiples que evolu-
cionan a quemaduras, lceras de la piel y cicatrizaciones que provocan malfor-
DA

maciones. Tambin suelen presentar alteraciones del sistema nervioso central.


BI

Pero lo ms notable es el elevado riesgo de padecer cncer de la piel, con


I

peligro para sus vidas. Estudios realizados con cultivos de fibroblastos, de la piel
OH

de pacientes con Xeroderma pigmentosum, contribuyeron a dilucidar el meca-


nismo de reparacin por escisin de nucletidos (NER) (del ingls, nucleotide
PR

excision repair), y a identificar los genes cuyos productos participan en el


proceso y a los cuales por razones obvias se les denomin XP.
Existen dos modalidades del mecanismo:
Uno que produce la reparacin de daos en cualquier sitio del genoma
(denominado genoma global).
Otro que rectifica los daos en la hebra del ADN que se est transcribiendo
(llamado acoplado a la transcripcin).

Estas dos modalidades solo se diferencian en sus etapas iniciales pues al final
son iguales.
La reparacin global se inicia cuando los productos de los genes XPC (aso-
ciado a HR23B: homologue of RAD23) y XPE (junto con DDB2: DNA damage
62 Introduccin a la Gentica Mdica

binding protein), reconocen la alteracin estructural producida en la doble


hlice por el agente daino. Estas protenas reclutan hacia el sitio daado al
producto del gen XPA, que permite que a este complejo se asocien los produc-
tos de los genes XPB y XPD que poseen accin de helicasa y desenrollan el
ADN en la vecindad de la lesin. A las hebras simples se une RP-A lo que
impide que vuelvan a unirse. El producto del gen XP-G, que tiene actividad de
endonucleasa, corta la hebra daada unos 5 nucletidos hacia el extremo 3 de
la lesin, mientras que el producto del gen XP-F, hace lo mismo unos 24
nucletidos hacia el extremo 5. La brecha de 29 nucletidos que as se ha
creado, es rellenada por accin de la ADN polimerasa , unida al PCNA y,
posteriormente, es sellada por una enzima ADN ligasa.
Un resumen del proceso se muestra en la figura 3.17.
En la reparacin acoplada a la transcripcin, la seal radica en la detencin
de la ARN polimerasa II. En ese momento actan los productos de los genes

N
CSA y CSB (la denominacin se debe a que sus mutaciones originan el sndro-

CI
me Cockaine), que desplazan a la polimerasa y reclutan los productos de los
genes XPB y XPD.El resto es igual a la modalidad anterior.

UC
Otro mecanismo que contribuye a conservar la informacin gentica original
de un organismo es el sistema de modificacin-restriccin.
OD
Una vez que el ADN ha sido replicado, es metilado en bases especficas que
forman parte de secuencias especficas. Este patrn de metilacin es caracte-
PR
rstico de cada organismo, y viene a constituir la marca de identificacin del
RE

ADN propio. En esto consiste la modificacin.


Cuando un ADN de otro organismo penetra en una clula, se buscan las
SU

secuencias especficas que deben estar metiladas y si no lo estn, el ADN


forneo es hidrolizado. En esto consiste la restriccin, de ah que a las enzimas
DA

que hidrolizan el ADN de esta forma, se les llame enzimas de restriccin. As, la
clula puede distinguir entre el ADN propio y el ajeno.
BI

Las enzimas de restriccin que hidrolizan el ADN en secuencias especficas,


I

han sido un instrumento invaluable para el desarrollo de la moderna tecnologa


OH

del ADN recombinante y su aplicacin prctica, la ingeniera gentica.


PR

Mutaciones

Cuando no ocurre una reparacin correcta de cualquier dao al ADN, apare-


cen las mutaciones. Estas son alteraciones permanentes que se producen en el
ADN, y que son transmitidas de generacin en generacin. Pueden ser espon-
tneas, si surgen como consecuencias de errores en los procesos relacionados
con el ADN o inducidas, si son productos de agentes externos. Los agentes
externos ms frecuentes son:
Anlogos de bases.
Mutgenos qumicos.
Radiaciones.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 63

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 3.17. Reparacin por escisin de nucletidos. El dao al ADN es reconocido por
XPE, XPC y otras protenas que reclutan a las helicasas XPB y XPD que desenrollan el
ADN. Las endonucleasas XPF y XPG cortan el ADN a ambos lados de la lesin y la
brecha es llenada por la ADN polimerasa y sellada por la ADN ligasa.
64 Introduccin a la Gentica Mdica

Los anlogos de bases son sustancias similares a las bases nitrogenadas,


capaces de formar nucletidos, que son incorporados al ADN durante el proce-
so de replicacin. Estos anlogos tienen formas tautomricas, que en una de
ellas se aparean con una base y en la otra se aparean con otra. Un ejemplo
tpico es el bromouracilo que es un anlogo de la timina y, por lo tanto, se aparea
con la adenina en su forma ceto, pero en su forma enol lo hace con la guanina,
por lo que en el siguiente ciclo replicativo aparecer un par GC, donde haba un
par AT.
Un mutgeno qumico, es una sustancia que reacciona con cualquiera de las
bases del ADN y la modifica, de forma que cambia su patrn de apareamiento.
Entre estos se encuentra el cido nitroso, que transforma los grupos aminos en
cetnicos convirtiendo la citosina (que forma par con la guanina), en uracilo
(que forma par con la adenina). Otro agente de este tipo es el sulfonato de

N
etilmetano que produce la alquilacin de la guanina con la labilizacin del enlace

CI
N-glicosdico, que al romperse forma un sitio apurnico que, al no ser reparado
en el prximo ciclo replicativo, puede ocurrir la incorporacin de cualquiera de

UC
las cuatro bases.
La luz ultravioleta, los rayos gamma y los rayos X son poderosos agentes
OD
mutagnicos, que pueden producir, tanto alteraciones de las bases nitrogenadas,
PR
como las rupturas de una o las dos hebras del ADN. Un efecto similar a las
radiaciones tienen las llamadas especies reactivas del oxgeno.
RE
SU

Consecuencias de las mutaciones


DA

Las consecuencias de las mutaciones sobre la estructura del ADN dependen


BI

en gran medida del agente causal. Sin embargo, los efectos de esas mutaciones
I

se miden por las alteraciones que pueden aparecer en el producto gnico prima-
OH

rio, es decir, en las protenas.


Por su extensin, las mutaciones se clasifican en cromosmicas y gnicas:
PR

Cromosmicas: afectan grandes sectores del ADN y se hacen visibles al


microscopio ptico. Entre estas mutaciones aparecen los borramientos (mal
llamados deleciones), las inserciones, las translocaciones, etc., que son estu-
diadas con ms detenimiento en el captulo 7 de citogentica.
Gnicas: afectan pequeos sectores del gen y se pueden producir por cam-
bios, adiciones o sustracciones de bases. El efecto de estas mutaciones so-
bre el producto gnico est en dependencia del tipo y de la localizacin. Por
ejemplo, si las mutaciones se producen en la zona de regulacin del gen (el
promotor), se altera la cantidad de protenas que se producen, aumentando o
disminuyendo, aunque este ltimo caso es el ms frecuente. Si se produce en
la zona de codificacin del gen, se altera la actividad de la protena, siendo la
disminucin lo ms frecuente.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 65
Los cambios de bases no siempre producen cambios en los aminocidos de
las protenas debido al carcter redundante del cdigo gentico (mutaciones
silentes) y en ocasiones se producen mutaciones neutras, pues se cambia un
aminocido por otro del mismo tipo. Cuando se cambia un aminocido por otro
diferente en polaridad o tamao se puede afectar la actividad de la protena,
como es el caso de la sicklemia, la cual surge como consecuencia del cambio de
glutmico (aminocido polar inico), por valina (aminocido apolar), en la posi-
cin 6 de la cadena de la hemoglobina.
La adicin o sustraccin de bases, provoca grandes cambios en la protena
pues, los codones del ARNm se encuentran uno a continuacin del otro y por lo
tanto la adicin (o sustraccin) de una base, modifica el marco de lectura a
partir de ese punto.
Un tipo particular de mutaciones por cambio de una base, es el que ocurre en

N
los codones de terminacin. Pueden darse dos situaciones. Si un codn de lec-
tura se transforma en un codn de terminacin la cadena polipeptdica termina

CI
abruptamente. Por el contrario, si un codn de terminacin se convierte en un

UC
codn de lectura, la protena tiene un exceso de aminocidos como ocurre con
la hemoglobina de Constant Spring.
OD
Cuando las mutaciones se producen en las zonas crticas de los intrones,
pueden dar lugar a protenas totalmente diferentes e inservibles, que la clula
PR
degrada rpidamente dando lugar a una deficiencia cuantitativa.
RE

Reordenamiento de la informacin gentica


SU
DA

Todos los sistemas informticos en algn momento deben ser reordenados,


para facilitar su funcionamiento. Esto sucede de igual forma con la informacin
BI

gentica. El fundamento molecular de este reordenamiento es el proceso de


I

recombinacin gentica, que consiste en el intercambio de grandes segmentos


OH

de ADN entre dos molculas. Los mecanismos moleculares de este proceso en


PR

las clulas eucariontes no est totalmente aclarado, pero su existencia no se


discute.
La observacin en el microscopio ptico de la recombinacin gentica se ha
realizado durante los estudios de la meiosis. Esta, es un proceso que ocurre
durante la maduracin de las clulas germinales en los organismos superiores,
que finalmente, da origen a los gametos. El proceso consta de dos divisiones
celulares sucesivas sin que medie entre estas la replicacin del ADN. Durante
la profase de la primera divisin, los cromosomas homlogos (el de origen ma-
terno y el de origen paterno), se aparean (sinapsis) y se establecen entre ellos
vnculos visibles al microscopio, que se denominan entrecruzamientos (crossing
over). Durante esta etapa se produce el intercambio de segmentos grandes de
las molculas de ADN, que forman cada una de las cromtidas de los
cromosomas homlogos. En la metafase, los cromosomas se colocan en la pla-
66 Introduccin a la Gentica Mdica

ca ecuatorial, pero en la anafase se produce la migracin hacia los polos de


cromosomas enteros y no de las cromtidas como ocurra en la mitosis. En la
telofase, las clulas son reconstruidas al igual que en la mitosis. La segunda
divisin ocurre de inmediato sin producirse la replicacin del ADN, y transcurre
de forma similar a la mitosis. Los cromosomas (que ahora son la mitad del
nmero original), se disponen en la placa ecuatorial y en la anafase las cromtidas
se separan, y una por cada cromosoma se dirige a los polos celulares, que en la
telofase sirven para la organizacin de las clulas hijas. De esta forma, la infor-
macin gentica que estaba cuadruplicada al inicio de la primera divisin ha sido
dividida en cuatro clulas, cada una de las cuales contiene solo una copia de la
informacin gentica de la especie. Cuando en la fecundacin se unen el game-
to masculino y el femenino, se restituye el carcter duplicado de la informacin
que caracteriza a todas las clulas somticas superiores (ver captulo 4).
Estos son los procesos bsicos de tratamiento de la informacin gentica en

N
los organismos. Es el nico tipo de informacin que se transmite, equitativamen-

CI
te, entre los antecesores y los sucesores. Sin embargo, en los organismos

UC
pluricelulares es necesario coordinar las acciones de billones de clulas, de
manera que el organismo funcione como un todo nico y armnico. En esos
OD
organismos se crean flujos de informacin molecular, que permiten su coordina-
cin y que, en ltima instancia, tienen su origen en la informacin gentica.
PR
RE

Comunicacin intercelular
SU

Los organismos pluricelulares estn dotados de mecanismos que les permi-


DA

ten coordinar las acciones de todas sus clulas, de forma tal que el organismo
funcione como un todo nico y armnico. El fundamento de todo este mecanis-
BI

mo es el fenmeno de la comunicacin intercelular, es decir, el flujo de informa-


I

cin que existe entre las diferentes clulas y tejidos. En ltima instancia toda
OH

esa informacin, est contenida como posibilidad en el material gentico, pero


se torna realidad al expresarse esa informacin y dirigir la sntesis de molculas
PR

especficas que funcionan en esos mecanismos. Una vez expresada la informa-


cin gentica, se establecen entre las clulas flujos de informacin molecular,
cuya tarea fundamental es la de coordinar las funciones de todas las clulas,
para conseguir el funcionamiento armnico del organismo.
Los flujos de informacin molecular, presentan un conjunto de caractersti-
cas generales que se pueden resumir en las siguientes:
Estn determinados genticamente, por lo tanto los principales componentes
moleculares implicados en estos son las protenas, entre las que se destacan,
fundamentalmente, las enzimas aun cuando pueden existir protenas no
enzimticas.
Estas enzimas provocan la modificacin covalente de sustratos protenicos,
de tal manera que muchos de los componentes del flujo existen en dos esta-
Expresin y conservacin de la informacin gentica 67
dos, uno modificado y otro no modificado. Aun cuando existen varios siste-
mas de modificacin el ms empleado es el de fosforilacin y desfosforilacin.
El trnsito de la informacin se controla por un mecanismo muy simple, pues
una de las formas (la fosforilada), permite el paso de la informacin, mientras
que la otra (la no fosforilada), lo interrumpe. Por lo tanto la fuerza que impulsa el
flujo es la diferencia de potencial qumico y eso hace que se trate de un
fenmeno de transduccin.
Los flujos de informacin suelen ser redundantes, es decir, que varios flujos
pueden tener iguales efectos. Por otra parte tambin existen mecanismos
internos para desconectarse, rpidamente, y evitar la permanencia de los efectos
por tiempos prolongados.

De manera bsica la comunicacin intercelular consta de tres componentes


esenciales: una clula que emite una seal, el medio de propagacin de la seal,

N
y otra clula que capta la seal y elabora una respuesta.

CI
Para que el ciclo de comunicacin quede, totalmente establecido la respuesta
debe modificar la seal y volver todo al estado anterior. En este campo la seal

UC
es el portador material de informacin. En la informacin molecular, las seales
son molculas, independientemente, de su naturaleza qumica. De este modo,
OD
son seales las hormonas, los neurotransmisores, las citoquinas, las
PR
prostaglandinas, etc. Como consecuencia de cambios en el entorno o debido a
su propia actividad, las clulas emiten estas seales hacia el espacio extracelular;
RE

algunas actan de forma local, mientras que otras alcanzan el torrente sangu-
neo y pueden actuar a larga distancia. Se puede intentar una clasificacin en
SU

tres grupos principales de los sistemas de seales, teniendo en cuenta su radio


de accin:
DA

Sistemas de seales generales: son aquellas que actan prcticamente, en


BI

todo el organismo y estaran representadas por las seales del sistema ner-
I

vioso, el sistema endocrino y el sistema inmunolgico.


OH

Sistemas de seales particulares: son las seales que tienen un radio de ac-
cin ms limitado y por lo general coordinan la actividad de rganos y siste-
PR

mas particulares, como las seales del sistema cardiovascular, el digestivo,


etctera.
Sistemas de seales locales: son las seales que controlan la actividad de
clulas, que por lo general estn cercanas y que para alcanzarlas no necesi-
tan llegar a la sangre, como son las prostaglandinas, los leucotrienos y los
tromboxanos. La emisin de cada una de estas seales tiene un carcter
especfico, pues cada clula tiene que emitir la seal que se corresponda con
el estmulo recibido, de manera que esas molculas sean verdaderas porta-
doras de informacin.

La captacin de esas seales tambin tiene un carcter especfico. Todas las


clulas poseen protenas que actan como receptores de seales; pero cada
68 Introduccin a la Gentica Mdica

tipo celular solo posee una dotacin de receptores, lo cual le permite responder
a unas seales, pero a otras no. Los receptores pueden estar localizados en la
membrana plasmtica, o en el interior de la clula. En este ltimo caso, se
pueden localizar en el citosol, en los organitos citoplasmticos o en el ncleo. La
localizacin del receptor se corresponde con las propiedades fsico-qumicas de
la seal. Cuando por su naturaleza qumica, la seal no puede penetrar a la
clula, el receptor se encuentra en la membrana, mientras que las que pueden
entrar libremente, encuentran su receptor en el interior.
Los receptores de la membrana constan al menos de tres dominios:
Un dominio extracelular, que es el que posee el sitio de reconocimiento para la
seal.
Un dominio transmembranal, que conecta la parte externa con la interna.
Un dominio intracelular, cuya funcin es comunicar al interior de la clula la

N
presencia de la seal.

CI
En cada tipo de receptor estos dominios tienen estructuras diferentes y fun-

UC
ciones diferentes en el dominio intracelular.
De acuerdo con el mecanismo por el cual se produce la transduccin de la
OD
seal hacia el interior de la clula, los receptores pueden clasificarse en:
PR
Receptores que son canales inicos: en la misma estructura se encuentra la
zona receptora y el canal inico, y la unin de la seal modifica el estado del
RE

canal (abierto o cerrado), y modifica el flujo de iones a travs de la membra-


na, lo cual tiene una gran importancia para el funcionamiento celular espe-
SU

cialmente, en los mecanismos de excitacin y secrecin.


Receptores que producen la endocitosis de la seal: en este caso la seal
DA

pasa hacia el interior de la clula, para realizar sus funciones, pero para esto
BI

requiere del concurso de un receptor especfico en la membrana celular.


I

Receptores acoplados a protenas G: las protenas G reciben ese nombre


OH

porque se unen a nucletidos de guanina. Cuando estn unidas al GDP


PR

(guanosin difosfato) no transmiten informacin, lo que s hacen cuando estn


unidas al GTP (guanosin trifosfato). En estado no excitado estas protenas
estn unidas al GDP. Cuando la seal se une al receptor, este acta sobre la
protena G y provoca el cambio de GDP por GTP, con lo cual produce su
activacin. La protena G activada, acta sobre protenas celulares y modifi-
ca su actividad, transmitiendo la informacin recibida por el receptor.
Receptores con actividad enzimtica en el dominio intracelular: como su nom-
bre lo indica, estos receptores tienen alguna actividad enzimtica especfica
en su dominio intracelular. Cuando la seal se une al receptor, se produce una
activacin de la parte enzimtica que cataliza determinada reaccin. Se han
descrito receptores: con actividad de tirosil protein kinasa (transfieren un
grupo fosforilo del ATP hacia residuos de tirosina, que forman parte de pro-
tenas), con actividad de seril (o treonil) protein kinasas (estas transfieren
Expresin y conservacin de la informacin gentica 69
el fosforilo hacia residuos de serina o treonina), con actividad de guanilato
ciclasa (convierten el GTP en GMPc -guanosin monofosfato- cclico), con
actividad de fosfotirosil protein fosfatasas (hidrolizan la fosfotirosina de al-
gunas protenas). En todos los casos se producen modificaciones de la activi-
dad de protenas intracelulares en consonancia con la informacin recibida
por el receptor.
Receptores asociados a enzimas: a diferencia de los anteriores, estos recep-
tores no poseen una actividad enzimtica intrnseca, sino que la unin de la
seal produce el reclutamiento de determinadas enzimas hacia el receptor.
Esta unin provoca la activacin de la enzima que a su vez modifica la acti-
vidad de otras protenas intracelulares.
Receptores intracelulares: los receptores intracelulares se pueden localizar
en distintos compartimentos. Los que se encuentran en el retculo endoplsmico

N
son por lo general canales inicos, especialmente para el calcio. Los que
estn en el citosol o en el ncleo, suelen ser factores de transcripcin

CI
genicoespecficos, que una vez unida la seal actan sobre el ADN, modifi-

UC
cando el estado de transcripcin de los genes.

OD
La unin de la seal al receptor promueve un proceso de transduccin de la
seal que puede provocar, entre otros, los efectos siguientes:
PR
Se modifica la intensidad del paso de iones y nutrientes, a travs de la mem-
RE

brana plasmtica.
Se modifica la actividad de enzimas especficas, que a su vez modifican la
SU

intensidad de las vas metablicas donde estas participan.


Se produce la remodelacin del citoesqueleto.
DA

Se modifica el estado de transcripcin de genes especficos.


BI
I

Para lograr estos efectos es necesario el concurso de numerosas protenas,


OH

muchas de estas enzimas, son capaces de propagar la informacin recibida por


el receptor hacia el efector final. Un esquema de los efectos de la unin de la
PR

seal al receptor se muestra en la figura 3.18.


Procesos tan vitales como la proliferacin y diferenciacin celulares, el con-
trol de la glucemia, el control del crecimiento y desarrollo del organismo, el
desarrollo sexual y la respuesta inmunolgica, entre otros, pueden funcionar de
forma eficiente gracias a la comunicacin intercelular que permite coordinar las
acciones de numerosas clulas, para elaborar la respuesta adecuada y oportuna
al estmulo recibido. Por otra parte, numerosas son las enfermedades que tienen
su origen en trastornos en la comunicacin intercelular, bien por la ausencia de
la seal, bien por deficiencias en el receptor, bien por alteraciones en las prote-
nas transductoras que propagan la seal hacia el efector final. La diabetes
mellitus, la hipercolesterolemia familiar y el cncer son ejemplos de cada una de
estas categoras.
70 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE

Fig. 3.18. Efectos de la unin de la seal al receptor. Varios mecanismos se ponen en


SU

marcha inmediatamente despus de la unin de la seal al receptor. Estos mecanismos


conducen a la (1) modificacin de la permeabilidad de la membrana a iones y nutrientes,
DA

(2) reestructuracin del citoesqueleto, (3) cambios en la actividad de enzimas o prote-


nas especficas y (4) alteraciones en la expresin de genes especficos.
BI
I
OH

Resumen
PR

La expresin, conservacin y reordenamiento de la informacin gentica,


son procesos indispensables para el mantenimiento de la vida. La informacin
gentica se convierte en algo inerte, si no se expresa en el momento y en el
lugar adecuado. La formacin de protenas que desarrollan numerosas e impor-
tantes funciones en el organismo, es la forma fundamental de expresin de los
genes. Pero tanto la actividad propia del material gentico, como la accin de
agentes externos, provocan daos en el ADN. Las clulas han adquirido diver-
sos mecanismos que permiten la reparacin de los daos. De no ser as se
producen mutaciones que en muchos casos pueden ser la causa de enfermeda-
des. La recombinacin permite, el reordenamiento e intercambio de informa-
cin gentica entre cromosomas y es la base fundamental de la biodiversidad.
Expresin y conservacin de la informacin gentica 71
Los mecanismos de comunicacin intercelular en los organismos pluricelulares,
garantizan generar flujos de informacin que coordinan las acciones de clulas
o grupos de clulas, en la realizacin de funciones especficas. Alteraciones de
estos mecanismos son causa de enfermedades frecuentes.

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72 Introduccin a la Gentica Mdica

Captulo 4 FENMENOS MOLECULARES


Y CELULARES DESDE MEIOSIS
HASTA LA FORMACIN
DEL BLASTOCISTO

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
La meiosis es un tipo especial de divisin celular propia de las clulas
germinales.
OD
Con esta divisin celular, se generan los gametos que son clulas altamente
PR
especializadas, a partir de cuya unin comienza el desarrollo de una nueva vida.
RE

Es incalculable el nmero de procesos moleculares que ocurren en este


fenmeno tan especial de la vida. Durante la meiosis pueden ocurrir muchos
SU

errores, algunos de los cuales se expresan por fallos en la fecundacin, abortos


espontneos, defectos congnitos incompatibles con la vida, los que se pueden
DA

identificar como fenmenos de seleccin natural, que escapan de los mecanis-


BI

mos genticos de reparacin de los mltiples errores, que en este delicado pro-
I

ceso pueden ocurrir.


OH

Pero tambin la meiosis es un proceso biolgico a partir del cual se garantiza


una gran variabilidad de cualidades, en los mltiples caracteres que son ge-
PR

nerados por el genoma de las especies de reproduccin sexual y que, junto a las
mutaciones, permiten identificar y diferenciar a los individuos interespecies en
los que, por supuesto, est incluido el ser humano.
Este captulo est dirigido a enfatizar, en los mecanismos biolgicos comunes
que ocurren en la meiosis, en el proceso de obtencin de gametos y en las
particularidades que presenta la gametognesis del hombre y de la mujer, y
cuyas caractersticas explican, un grupo de defectos de origen gentico.
Tambin se tratan los procesos biolgicos, que median entre la fecundacin y
la formacin del blastocisto, necesarios para la comprensin de fenmenos
involucrados en la causa de enfermedades o defectos congnitos, que son ex-
puestos en el presente texto.
Fenmenos moleculares y celulares desde meiosis hasta la formacin del blastocisto 73
Meiosis

En esta divisin celular, las clulas diploides de la lnea germinal producen


clulas denominadas gametos, los que se caracterizan por tener un nmero
haploide de cromosomas.
Cmo se originan esas clulas de la lnea germinal en el humano?
Durante la formacin del embrin, en la segunda semana de desarrollo y
procedentes del ectodermo primario, las clulas germinales migran hacia la pa-
red del saco vitelino y reciben el nombre de clulas germinales primordiales en
esta etapa. Esta lnea celular (lnea germinal), permanece protegida en este sitio
hasta la cuarta o sexta semana en que migran hacia la pared posterior del
embrin, donde continan multiplicndose, por mitosis sucesivas y forman las
crestas genitales que representan las gnadas primitivas. Estas gnadas primi-

N
tivas se desarrollan en ovarios o testculos en dependencia de la presencia de

CI
los cromosomas X (XX), o de un cromosoma X y un Y (XY) (ver captulo 9).
Cada clula germinal humana que dar inicio a la meiosis, presenta un nme-

UC
ro diploide de 46 cromosomas equivalentes a 23 pares. En este proceso de
OD
divisin celular, ocurren una serie de eventos macromoleculares, que garanti-
zan la separacin de cada par cromosmico y que termina dando origen a clu-
PR
las hijas que contienen en sus ncleos 23 representantes de cada par cromosmico
RE

o nmero haploide de cromosomas y que reciben el nombre de gametos, vulos


o gametos femeninos y espermatozoides o gametos masculinos.
SU

La meiosis consta entonces de dos divisiones consecutivas, denominadas


meiosis I y meiosis II, cada una de estas transcurre como un proceso continuo
DA

que, para su mejor comprensin se ha dividido como en la mitosis en: profase,


BI

metafase, anafase y telofase (Figs. 4.1 y 4.2).


I
OH

Meiosis I
PR

Comienza despus que la clula germinal ha llegado a la fase G2 de su ciclo


celular, luego de la sntesis del ADN. Esto significa que cada molcula
cromosmica de ADN est duplicada y unida por el centrmero. En este mo-
mento del inicio de la meiosis la informacin gentica en el ncleo celular es
igual a 4n. La figura 4.1, permite comprender mejor la explicacin.

Profase I

La profase de la meiosis I, es uno de los eventos ms importantes de la


meiosis como se explica en el captulo 3, en el acpite sobre reordenamiento de
la informacin gentica.
74 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I

Fig. 4.1. Esquema de los eventos que ocurren en la meiosis representados solo en dos
OH

pares de cromosomas. Profase I.


PR

Durante esta fase, los cromosomas sufren un proceso de condensacin pro-


gresiva y se describen cinco subfases denominadas: leptoteno, cigoteno,
paquiteno, diploteno y diacinesis.
Como en cada una de estas fases ocurren fenmenos de importancia gentica,
es necesaria la descripcin de los elementos ms significativos.
Leptoteno: es el inicio de la profase I, lo ms significativo que aqu ocurre es
el comienzo de la condensacin de los cromosomas que permiten la observa-
cin de zonas ms gruesas del ADN denominadas crommeros, que poseen un
patrn caracterstico para cada par cromosmico.
Cigoteno: los cromosomas homlogos comienzan a acomodarse por parejas
a lo largo de toda su extensin; a este fenmeno se le denomina sinapsis y es
Fenmenos moleculares y celulares desde meiosis hasta la formacin del blastocisto 75

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI

Fig. 4.2. De la diacinesis de la meiosis I hasta la formacin de los gametos. Telofase I


I
OH
PR

muy preciso, de modo que las secuencias de ADN contactan punto a punto a lo
largo de la extensin de las parejas de cromosomas homlogos. Al microscopio
electrnico se observa, que gran parte de esta unin est favorecida, por lo que
se ha denominado, complejo sinaptonmico, que es una estructura formada por
protenas involucradas en el entrecruzamiento del ADN, y que son esenciales
para los eventos de recombinacin que se estudian en el captulo 13.
Paquiteno: en esta subfase la sinapsis es completa, los cromosomas estn
mucho ms condensados y es posible visualizar sus cromtidas, por lo que en
este estado se les denomina ttrada, y ya ha ocurrido el entrecruzamiento y la
recombinacin de zonas del ADN como consecuencia de este.
Diploteno: el complejo sinaptonmico ha desaparecido; sin embargo, los
cromosomas homlogos se mantienen unidos por unas estructuras denomina-
76 Introduccin a la Gentica Mdica

das quiasmas, que garantizan que la pareja de cromosomas homlogos se man-


tenga unida. Estos quiasmas parecen ser la evidencia citolgica de puntos de
intercambio entre las molculas de ADN, de las cromtidas de la pareja de
cromosomas homlogos. La observacin de los quiasmas en la espermatognesis,
sugiere que hay varios quiasmas por parejas de cromosomas homlogos y este
fenmeno tiene un importante papel en la separacin precisa de ambos homlogos
(disyuncin). El fallo en la formacin de quiasmas, predispone a la no disyun-
cin. Los cromosomas X y Y hacen sinapsis en el extremo de sus brazos cortos
(regin seudoautosmica), en esa extensin se produce entrecruzamiento y se
visualizan quiasmas, (ver captulo 9).
Diacinesis: en esta etapa, la pareja de cromosomas homlogos unidas por
los quiasmas, alcanzan su mxima condensacin, y de esta forma se localizarn
en el plano ecuatorial, al iniciarse la metafase I.

N
CI
Metafase I

UC
Comienza con la desaparicin de la envoltura nuclear y la formacin del huso
OD
acromtico, en tanto que las parejas de cromosomas homlogos se sitan
alineadas en el plano ecuatorial y los microtbulos del huso alcanzan a las
PR
estructuras protenicas (cinetocoro), situadas en los centrmeros, de cada
RE

cromosoma homlogo y, de esta forma, comenzar la separacin de las parejas


de cromosomas homlogos.
SU

Anafase I
DA
BI

Se extiende desde la separacin de cada cromosoma homlogo, hasta el


I

comienzo de la telofase. Lo ms significativo de esta fase de la meiosis es que,


OH

al separarse los cromosomas homlogos, se reduce el nmero de cromosomas


a la mitad; sin embargo, an la informacin gentica se encuentra doble (2n), ya
PR

que cada cromosoma homlogo mantiene sus cromtidas hermanas.

Telofase I

Como en la mitosis, los cromosomas comienzan a descondensarse, se reor-


ganiza la membrana nuclear y el citoplasma se separa para dar lugar a dos
clulas hijas.
Cuando ha terminado la meiosis I, an las clulas resultantes no son gametos
maduros ya que la informacin gentica, se encuentra doble (2n). Es a
partir de este final de la meiosis I, y sin nueva sntesis de ADN, que co-
mienza la meiosis II.
Fenmenos moleculares y celulares desde meiosis hasta la formacin del blastocisto 77
Meiosis II

Transcurre como una mitosis comn, su diferencia est en el nmero de


cromosomas, ya que en la meiosis II aparecen, en lugar de 46 cromosomas, 23
con sus cromtidas hermanas.
Al finalizar la meiosis II iniciada en las dos clulas resultantes de la meiosis
I, se obtienen cuatro gametos. Cada uno tiene 23 cromosomas con solo una
cromtida. Una caracterstica importante de la meiosis II, es la distribucin
azarosa de cada uno de los 23 cromosomas, una vez ubicados en el plano ecua-
torial de la metafase II.
La formacin de gametos se desarrolla de manera diferente en el hombre y
en la mujer.

N
Espermatognesis

CI
La espermatognesis, nombre que recibe la meiosis en el hombre, comienza

UC
en la pubertad cuando las clulas testiculares de Leydig segregan grandes can-
tidades de testosterona (hormona esteroidea).
OD
Bajo el efecto de la testosterona, las clulas de Sertoli de los testculos
PR
desarrollan los tbulos seminferos, en cuya formacin estn comprometidas las
clulas germinales primordiales que producto de sucesivas mitosis originan las
RE

espermatogonias las cuales ocupan un sitio bajo la membrana basal de los tbulos
seminferos, y que producen el espermatocito primario, clula a partir de la cual
SU

comienza la meiosis en el hombre, y que contina sin interrupcin hasta la for-


DA

macin de los espermatozoides (Fig. 4.3).


Las clulas obtenidas al concluir la meiosis I, reciben el nombre de
BI

espermatocitos secundarios y estos al concluir la meiosis II dan lugar a cuatro


I

clulas denominadas espermtidas.


OH

Las espermtidas sufren cambios dramticos en su forma y organizacin


PR

interna, para quedar formado el espermatozoide, proceso este que recibe el


nombre de espermiognesis. El proceso completo tiene una duracin de 64 das
y de estos el ms prolongado es la espermiognesis.
El espermatozoide queda configurado por una cabeza, una porcin interme-
dia y una cola (Fig. 4.4).
La cabeza queda desposeda de citoplasma y est ocupada por el ncleo
haploide, muy condensado y por una vescula denominada acrosoma, situada
por delante de la envoltura nuclear y que est llena de enzimas hidrolticas.
La pieza o porcin intermedia, contiene grandes mitocondrias que son fuente de
energa requerida para la velocidad de traslacin de los espermatozoides.
La cola contiene microtbulos, cuya disposicin permite su rpido desplaza-
miento desde la red de tubos del testculo hasta las trompas uterinas, sitio en el
cual debe alcanzar y fecundar al vulo.
78 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
Fig. 4.3. Esquema de tbulos seminferos y espermatognesis. La mitad (50 %) de los

UC
espermatozoides haploides, presentan cromosoma X o Y, en el esquema, uno de los
espermatocitos secundarios lleva el cromosoma X con sus dos cromtidas, y el otro el
OD
cromosoma Y tambin con sus dos cromtidas, y al completar la meiosis II, las cromtidas
de ambos cromosomas (X y Y) se separan. Cada espermatozoide tiene genoma haploide
PR
(22 cromosomas autosmicos y un cromosoma X o Y).
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 4.4. Esquema de un espermatozoide.

El espermatozoide tiene una longitud total de 10 m (micrmetros). En la


vagina de la mujer son depositados unos 200 millones, que pueden sobrevivir
con capacidad de fertilizacin hasta 3 das.

Ovognesis

La ovognesis es el proceso de gametognesis en la mujer y a diferencia del


hombre esta comienza en la etapa de desarrollo fetal. Una vez que la gnada
Fenmenos moleculares y celulares desde meiosis hasta la formacin del blastocisto 79
primitiva se desarrolla como ovario, las clulas germinales se multiplican por
mitosis sucesivas y en la semana 12 del desarrollo embrionario femenino co-
mienza, la profase de la meiosis I. Varios millones de ovogonias que se convier-
ten en ovocitos primarios y casi, inmediatamente, se mantienen latentes en este
estadio de la meiosis I, rodeados de clulas foliculares, constituyen folculos
primordiales (Fig. 4.5).

N
CI
UC
OD
PR
Fig. 4. 5. Desarrollo de la meiosis en la mujer. Obsrvese que la meiosis I est presente
RE

en el cuarto mes de desarrollo embrionario y termina todos los meses desde la pubertad
hasta la menopausia.
SU

La mayora de estos folculos (al inicio unos 7 millones) degeneran y al naci-


DA

miento de la nia se mantienen entre 2 y 700 000 millones. Al arribar a la


BI

pubertad solo quedan unos 400 000 y unos 5 a 12 de estos se desarrollan cada
I

mes pero solo uno madura, el resto degeneran. Ya a este nivel de desarrollo, el
OH

ovocito primario completa la primera divisin meitica, quedando una clula


mayor en tamao (el ovocito secundario), y un cuerpo polar. El folculo ha cre-
PR

cido, el ovocito est rodeado por la zona pelcida y las clulas foliculares; se
convierte en un folculo vesicular.
La segunda divisin meitica comienza unas 3 h antes de la ovulacin, que
ocurre al entrar la divisin en la metafase II. El folculo roto forma una estruc-
tura endocrina que recibe el nombre de cuerpo lteo. Todo este proceso a partir
de la pubertad ocurre, cclicamente, como parte del periodo menstrual y, cuyo
proceso endocrino se sale de los objetivos de este captulo.
La ovognesis finaliza al contactar con el espermatozoide, quedan cuatro
clulas rodeadas por la zona pelcida y la corona radiante: el vulo y los tres
cuerpos polares. De no ocurrir la fecundacin, la meiosis II de la ovognesis
nunca llega a terminar, y desaparece esta estructura celular en el proceso de la
menstruacin.
80 Introduccin a la Gentica Mdica

vulo

Cuando finaliza la anafase II, el citoplasma del ovocito secundario se agran-


da y se divide en la telofase II, de forma asimtrica. Las dos clulas hijas del
primer cuerpo polar y el vulo, al finalizar la meiosis, dan lugar a cuatro clulas.
Una es el vulo y las otras tres, corresponden a los cuerpos polares. Se pensa-
ba que, de forma eventual, estos cuerpos polares degeneraban, sin embargo,
ahora se conoce que el segundo cuerpo polar es punto de referencia para las
primeras mitosis del cigoto (ver en fecundacin).
Todas estas clulas tienen, un nmero haploide de cromosomas. El tamao
del vulo es de 1 mm o 1000 m.
Durante toda esta etapa de formacin y al final de esta, el vulo requiere un
gran nmero de ribosomas, y recibe apoyo nutricional de las clulas foliculares
de la corona radiante, que incluyen macromolculas que pasan directamente al

N
citoplasma, a travs de puentes entre estas clulas foliculares y la membrana

CI
plasmtica del vulo.

UC
La estructura del vulo queda rodeada por la zona pelcida, compuesta de
glicoprotenas y de la corona radiante, formada por las clulas foliculares, e
OD
inmediatamente, por debajo de la membrana plasmtica, se encuentran los gr-
nulos corticales, cuyo contenido, rico en protenas enzimticas, se libera al con-
PR
tacto con el primer espermatozoide que llega a la zona pelcida, e impide con los
RE

cambios qumicos que produce en ella, que penetren ms de un espermatozoide.


El vulo contiene los componentes membranosos y no membranosos comunes
SU

a toda clula, incluyendo las mitocondrias. El vulo, queda constituido al con-


cluir la meiosis II, pero esto, como ya se ha expresado, ocurre solo cuando es
DA

alcanzado por el espermatozoide; evento este que tiene un tiempo muy breve
BI

(Fig. 4.6).
I
OH
PR

Fig. 4.6. Esquema de la estructura del vulo


Fenmenos moleculares y celulares desde meiosis hasta la formacin del blastocisto 81
Fecundacin

En condiciones normales de funcionamiento de los mecanismos que ocurren


en la fecundacin, solo un espermatozoide logra hacer contacto con la membra-
na plasmtica del vulo, donde la liberacin del contenido de las enzimas hidrolticas
de la vescula acrosmica del espermatotozoide, por un lado, y las de los grnu-
los corticales, por el lado interno del citoplasma del vulo, abren una brecha por
la cual penetran el ncleo haploide y los microtbulos del espermatozoide. Esto
significa que los componentes citoplasmticos de esta unin, corresponden solo
al vulo. La presencia de los dos ncleos haploides, del vulo y del espermato-
zoide, da inicio a una nueva estructura celular, el cigoto (Fig. 4.7).

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 4. 7. Esquema desde la ovulacin hasta la implantacin del blastocisto.

Eventos poscigticos

El cigoto entra en un ciclo celular. Ambos ncleos haploides no se fusionan


en un primer momento, sino que se replican de forma independiente, en la fase
de sntesis de su ADN.
82 Introduccin a la Gentica Mdica

El ADN del genoma haploide paterno, altamente condensado, presenta


protaminas en lugar de histonas, por lo que se requiere de una reprogramacin
de inclusin de histonas, mientras que el genoma haploide materno, est forma-
do por nucleosomas. El gameto paterno haploide solo aporta ADN, y el gameto
materno ha duplicado la mayora de sus estructuras citoplasmticas, que inclu-
yen una gran cantidad de factores de transcripcin, alrededor de 14 000 prote-
nas de familias diferentes.
Cuando desaparece la envoltura nuclear, en ambos ncleos haplodes, en los
que ya ha ocurrido, primero la sustitucin de protaminas por histonas en el
ncleo haplode de origen paterno, y la etapa de sntesis del ADN en ambos, los
cromosomas maternos y paternos entran en contacto por primera vez despus
de las primeras 24 h y comienza la primera divisin mittica del cigoto. Esta
divisin produce, dos clulas simtricas y tiene como eje de divisin la posicin
del segundo cuerpo polar, que divide el cigoto en las primeras dos clulas que

N
reciben el nombre de blastmeras, sin que ocurra cambio alguno en su tamao

CI
limitado por la zona pelcida y la corona radiante.
La segunda divisin mittica se completa 48 h despus de la fecundacin, y

UC
da lugar a cuatro blastmeras. En este estado inicial de preembriognesis las
OD
blastmeras son indiferenciadas, la ausencia de una de estas clulas, no deja
huellas en el futuro del embrin. Por este motivo, es en esta etapa, en la cual se
PR
pueden hacer diagnsticos prenatales de preimplantacin, en fertilizaciones in
vitro, sin riesgos para el futuro desarrollo embriofetal. Existen entre 6 y 12 blas-
RE

tmeras a los tres das despus de la formacin del cigoto, y a los 4 das ya hay
entre 16 y 32 clulas cada vez ms pequeas en su contenido citoplasmtico.
SU

En este momento de preembriognesis, esta estructura recibe el nombre de


mrula. En este estadio ya ha ocurrido la inactivacin de uno de los dos
DA

cromosomas X, en el cigoto femenino (ver ms detalles de la inactivacin del


BI

cromosoma X en captulos 6 y 9).


I

A partir de este momento del desarrollo, las membranas citoplsmticas de


OH

las blastmeras, entran en contacto ms estrecho, se desarrollan mecanismos


de adhesin diferencial entre estas y comienzan a identificarse diferencias
PR

entre las blastmeras que se encuentran en contacto con la zona ms externa y


las que se encuentran en el interior, y que reciben el nombre de masa externa y
masa interna, respectivamente.
En la etapa de 30 clulas, la mrula comienza a absorber fluidos que forman
una cavidad y se delimita, perfectamente, la masa de clulas externas de la
interna, a esta estructura se le denomina blastocisto, en la que se describe una
cavidad blastocstica, una masa compacta interna denominada embrioblstico, y
una capa de clulas de la masa externa que rodea a toda la estructura, y que
recibe el nombre de trofoblasto. Cuando el blastocisto se libera de la cubierta de
la zona pelcida, al quinto da (124 h), despus de la fecundacin, comienza el
proceso de la implantacin el que concluye en la segunda semana despus de la
fecundacin.
Fenmenos moleculares y celulares desde meiosis hasta la formacin del blastocisto 83
Los procesos celulares de proliferacin, diferenciacin, migracin y apoptosis,
se producen de forma, genticamente, jerarquizados a partir de clulas madres
embrionarias, que tienen capacidad para transformarse, en clulas con destinos
especficos en el desarrollo embrionario.

Resumen
La formacin de los gametos requiere de una divisin celular especial, deno-
minada meiosis, que presenta regularidades comunes, tanto para los gametos
femeninos como para los masculinos. En este proceso de la divisin meitica se
describen dos divisiones celulares consecutivas (meiosis I y meiosis II), sin que
medie, entre ambas, nueva sntesis de ADN. La primera divisin o reduccional,
separa los cromosomas homlogos en las dos clulas resultantes. Cada una de

N
estas clulas, una vez concluida la meiosis II, origina otras dos clulas, de modo

CI
que al concluir la meiosis de una clula germinal inicial, se obtienen cuatro
clulas hijas que contienen un nmero haploide de cromosomas. La profase I de

UC
la primera divisin meitica garantiza, con el contacto estrecho entre las pare-
OD
jas de cromosomas homlogos y el intercambio de ADN entre las cromtidas
de estos, y que originen cromosomas con nuevas combinaciones de genes que
PR
al final de la meiosis quedan distribuidos en los cuatro gametos resultantes de
forma aleatoria.
RE

El intercambio entre las cromtidas de los cromosomas homlogos y las com-


binaciones aleatorias de los cromosomas de origen materno y paterno en los
SU

gametos, junto con las nuevas mutaciones que constantemente ocurren, expli-
DA

can la gran variabilidad entre las especies.


Hay mecanismos meiticos comunes en la formacin de los gametos, pero
BI

tambin hay diferencias sustanciales en el cronograma de la formacin del vu-


I

lo y del espermatozoide. En ambos, las clulas germinales desde la etapa


OH

embrionaria tienen el mismo destino; sin embargo, mientras en el sexo masculi-


no la activacin de la meiosis comienza en la pubertad con el estmulo de la
PR

testosterona y una vez comenzado el proceso no se detiene en la vida adulta, en


el sexo femenino la meiosis comienza en la semana 12 del desarrollo embriona-
rio, y se mantiene en profase I, hasta que la nia alcanza la pubertad, en que la
meiosis I finaliza y comienza la meiosis II, pero con la particularidad de que se
limita a la liberacin del ovario, de un solo ovocito secundario por mes. De las
cuatro clulas solo una se desarrolla como vulo y tres quedan como cuerpos
polares. La produccin de vulos es limitada ya que de un nmero inicial de
7 millones de folculos con ovocitos primarios en divisin, al nacimiento de la
nia quedan menos de 2 millones y se reducen a 400 000 en la etapa de la
pubertad.
La unin del vulo y del espermatozoide es un fenmeno especial, en el que
intervienen un gran nmero de procesos moleculares y movimientos celulares
84 Introduccin a la Gentica Mdica

complejos, que requieren del buen funcionamiento fisiolgico, histolgico y ana-


tmico de las estructuras comprometidas.
Desde la fecundacin hasta la formacin del blastocisto, ocurren mltiples
mitosis en un proceso de segmentacin, que se caracteriza porque las clulas
resultantes se adaptan con un citoplasma cada vez menor, al mismo contenido
limitado por la zona pelcida. Las primeras blastmeras pueden ser utilizadas
con fines de diagnstico prenatal de preimplantacin, ya que son altamente
indiferenciadas en esta etapa de la vida. A partir del estadio de 30 clulas, el
contacto entre estas y genes involucrados en el desarrollo originan la formacin
del blastocisto y se inicia, de este modo el periodo de implantacin que culmina
dos semanas despus de la fecundacin, dando paso a la etapa de desarrollo del
embrin. Algunos de los defectos genticos o ambientales que ocurren, desde la
fecundacin hasta esta etapa de preembriognesis, son tambin abordados en

N
varios de los captulos de este texto.

CI
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Leyes de Mendel 85

Captulo 5 LEYES DE MENDEL

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Un seor muy avaricioso (el amo), regateaba con un pastor acerca de un
OD
negocio en el cual el pastor tendra que determinar el tipo de cordero que deba
dar al amo y con cules tendra que quedarse l. Al fin decidieron que el pastor
PR
se quedara con las ovejas berrendas y rayadas (la mayora) y que las negras (la
RE

minora) seran para el amo. Pero el amo se las dio, de astuto, y durante la noche
se llev todas las ovejas berrendas y rayadas, y le dej al pastor solamente las
SU

ovejas negras.
Cuentan que entonces el pastor, que era muy pcaro, ech ramas de castao
DA

al pozo de agua de la que beban las ovejas y para asombro del amo, las ovejas
negras parieron cras berrendas y rayadas y el pastor se hizo rico.
BI

Este pasaje tomado del primer libro de Moiss de la Biblia en el que se narra
I

la historia de cmo Jacob el Santo, burl a su avaricioso suegro, es una de las


OH

mltiples historias en las que hombres de la poca, exponan mtodos con los
PR

cuales crean explicar el misterio de la vida y en particular de la herencia.


En la actualidad, el enfoque para obtener una cra especfica es muy diferen-
te, pero sin los avances que paso a paso ha acumulado la ciencia, hubiera sido
imposible tener los asombrosos conocimientos sobre la clonacin de ovejas,
pero cuidado,que siempre hay seores muy, pero muy avariciosos que querrn
hacerse ricos clonando ovejas berrendas y rayadas.
Fueron los trabajos realizados por Gregor Mendel, la base de los conocimien-
tos actuales de la gentica. Sin embargo las demandas prcticas de los agricul-
tores y ganaderos de la poca, fueron a su vez las que movieron las
investigaciones en la direccin de los hbridos por lo que ambos hechos, llevaron
a Mendel a realizar sus experimentos.
En 1822, se presentaron trabajos acerca de la polinizacin cruzada efectuada
en insectos.
86 Introduccin a la Gentica Mdica
En 1830 en la Academia de Ciencias Holandesa, se analiz la fecundacin
artificial, de plantas ornamentales.
En 1849, se public un trabajo que demostr la posibilidad de la hibridacin y
de algunas regularidades en la transmisin de caracteres.
En 1861, en la Academia de Ciencias de Pars, se presentaron 2 trabajos
sobre los hbridos vegetales, en uno de estos hubo una aproximacin al descu-
brimiento de las leyes mendelianas, al llegar a la conclusin de: la pureza de los
gametos; la homogeneidad de la primera generacin de los hbridos y la hetero-
geneidad de la segunda generacin.
Finalmente, en 1865, en la Sociedad de Naturalistas de Brunn, el monje Gregor
Mendel expuso su trabajo Experimentos de hibridacin en plantas. La historia
cuenta que nadie hizo preguntas, pues nadie comprendi la magnitud de sus
experimentos y conclusiones.
Las obras de Johann Gregor Mendel estuvieron sin tocar en las estanteras

N
de las bibliotecas hasta marzo de 1900, ao en que Hugo De Vries, botnico

CI
holands de 52 aos y con gran prestigio cientfico en su poca, publica La Ley
de la segregacin de los hbridos en la que hace una tmida referencia al traba-

UC
jo de Mendel, ese mismo ao de 1990, Carl Correns, profesor alemn de bot-
nica de 36 aos de edad, presenta el trabajo Las reglas de Gregor Mendel, de
OD
la conducta de los descendientes de hbridos y Erick von Tscherrmak estudian-
te austraco de 29 aos presenta el trabajo titulado Sobre el cruzamiento artifi-
PR
cial del guisante en el que refiere que ley el trabajo de Mendel despus de
RE

terminar sus experimentos. Con estos trabajos, se redescubren simultneamen-


te las Leyes de la Herencia en tres regiones diferentes del mundo y a las cuales
SU

haba arribado Mendel 35 aos atrs.


La historia de los descubrimientos cientficos est llena de ancdotas intere-
DA

santes de los hombres que hicieron aportes significativos, pero todas tienen en
BI

comn, las necesidades del hombre, en forma de demandas prcticas de la


I

poca y los conocimientos cientficos que les antecedieron.


OH

La velocidad con la que la ciencia avanza es abrumadora, la red integrada de


descubrimientos es impresionante, hay que seleccionar temas que permitan com-
PR

prender, de forma slida, los conocimientos genticos actuales y uno de estos es


sin dudas, el tema que se trata en este captulo y cuyo contenido: tiene gran
valor ahora, como que el que tuvo el publicado en 1902, por la revista Science
con el ttulo Las leyes mendelianas de la herencia y la maduracin de las
clulas sexuales.

Experimentos mendelianos
La historia de los experimentos mendelianos muestra que Mendel encarg a
distintas casas especializadas en semilla, 34 variedades del guisante de jardn
Pisium sativum.
Leyes de Mendel 87
Comenz sus experimentos y no termin hasta cuando se cercior de la
pureza de las semillas; esto dur 2 aos.
Al final eligi 22 variedades de guisantes, de los cuales observ la pureza de
la transmisin de siete caracteres, relacionados con las semillas, las vainas y el
tallo.
De las semillas:
Superficie: lisa o rugosa.
Cotiledn: amarillo o verde.
Flores: blancas (cubierta blanca) o violetas (cubierta gris).

De las vainas y el tallo:


Vainas: con constricciones o lisas.
Color de las vainas: amarillas o verdes.

N
Vainas: axiales (a lo largo del tallo); o terminales en la parte superior del tallo.

CI
Altura de la planta: muy alta (6 a 7 pies); o muy pequea (3 a 4 pies).

UC
Como ya existan antecedentes de que la polinizacin se podra realizar de
OD
forma artificial, Mendel, poliniz 2 tipos de guisantes con un carcter cuya pure-
za haba demostrado; de esta forma elimin los estambres, donde se encuentra
PR
el polen de una planta y fecund sus flores con el polen de la otra, esper una
RE

estacin de cultivo en la cual obtena, una generacin de guisantes del experi-


mento. Su ingenio estuvo en que con mucha paciencia sigui el rastro de cada
SU

cruzamiento para cada uno de los siete caracteres, y cont todos los descen-
dientes de cada generacin.
DA

Los caracteres, cuyas descendencias se pudieron analizar ms rpido, esta-


BI

ban relacionados con el color y superficie de las semillas.


I

El resto de los caracteres requeran para su anlisis un tiempo mayor de


OH

espera, ya que aparecen a partir de las semillas cruzadas o hbridas.


Al cruzamiento inicial para cada uno de los caracteres le denomin, genera-
PR

cin paterna o P, y a los descendientes de este cruzamiento le denomin, prime-


ra generacin filial o F1, mientras que a las generaciones sucesivas se les
denomin F2, F3.
Hasta aqu se pueden reconocer algunos conceptos relacionados con los ex-
perimentos mendelianos: a las generaciones paternas del primer cruzamiento,
en las cuales los parentales se caracterizan por la pureza de sus caracteres se
les denomina lneas puras; a la descendencia del producto del cruzamiento entre
dos lneas puras, se les denomina F1 y estas siempre son hbridos; al cruzamien-
to en el que solo se observa la herencia de un carcter se le denomina cruce
monohbrido, si se trata de dos caracteres, cruce dihbrido, tres caracteres cru-
ce trihbrido y as sucesivamente.
88 Introduccin a la Gentica Mdica

Cruzamiento monohbrido

Se analiza un cruzamiento mendeliano entre dos lneas puras para el carc-


ter: color amarillo y verde del cotiledn.
Mendel poliniz las plantas de guisantes que daban siempre semillas de coti-
ledn amarillo, con el polen de guisantes que siempre daban semillas de cotile-
dn verde, pero tambin lo hizo a la inversa. La primera generacin o F1 de este
cruzamiento dio semillas solo de cotiledones amarillos.
Mendel, cuando lleg la siguiente primavera, sembr las semillas hbridas
pero dej que estas se autopolinizaran, las cuid de las plagas y obtuvo resulta-
dos que le permitieron interpretar, que el color amarillo se comportaba como
dominante, pues apareca siempre en la F1, y reapareca en mayor proporcin
en la F2, en tanto que al color verde le denomin recesivo, ya que desapareca
en la F1 y reapareca en la F2 en menor proporcin.

N
Los cuidados que Mendel tuvo al proteger a los guisantes de plagas estaban

CI
fundamentados en el hecho de que por primera vez, en la historia de las ciencias
de la poca, se integraban la biologa y la matemtica.

UC
Si Mendel no hubiera protegido a los guisantes, no hubiera podido llegar a la
proposicin de que la probabilidad de obtener guisantes verdes, a partir de la
OD
autofecundacin de un guisante monohbrido sera de 3 a 1, y mucho menos a
PR
proponer la regularidad que en la actualidad se conoce como la primera ley de
Mendel o ley de la segregacin de los factores que producen los caracteres
RE

estudiados.
En los primeros aos del siglo XX, un genetista dans, Wilhelm Johannsen,
SU

denomin a los factores mendelianos como genes.


Seguir la historia de la gentica desde los experimentos mendelianos lleva
DA

mucho tiempo y aunque resulta sumamente interesante y de gran motivacin, el


BI

propsito de este captulo se puede cumplir con xito en menor tiempo que el
I

que necesit el profesor Nageli, a quien Mendel solicit su ayuda a mediados


OH

del siglo XIX, para comprender el valor cientfico de los experimentos que dieron
origen a las conocidas leyes de Mendel y al valor actual de estas leyes en las
PR

investigaciones del genoma humano.


Los genetistas dan nombre a los genes, y por lo general muy en especial
para experimentos mendelianos sobre caracteres discontinuos o alternativos;
por ejemplo, amarillo o verde se le nombra a los genes que determinan el carc-
ter dominante con su primera letra en mayscula. De este modo el carcter
color amarillo dominante se representa por la letra A (mayscula), y su cualidad
alternativa color verde, con la letra a (minscula).

Cruzamiento mendeliano para el carcter color del cotiledn

Se analizan las caractersticas genticas de la lnea pura color amarillo del


cotiledn y su alternativa verde. Si el color amarillo dominante est representado
Leyes de Mendel 89
por A, y el verde por a, y ambas plantas tienen ambos genes iguales, o sea AA
los guisantes de cotiledn amarillo y aa los que tienen el cotiledn verde, los
monohbridos resultantes son, genticamente Aa. El trmino gentico que se
emplea para distinguir las caractersticas de los genes que expresan un carcter
determinado, recibe el nombre de genotipo. Se denomina genotipo homocigtico,
al que est representado por dos genes iguales que expresan el mismo carcter,
tambin son denominados genotipos homocigticos dominantes en el caso de
que estos genes expresen el carcter dominante (AA), o genotipos homocigticos
recesivos, si expresan el carcter recesivo (aa).
El carcter que se expresa debido a determinado genotipo y que se puede
estudiar en algn nivel de observacin, cualquiera que este sea, se denomina
fenotipo.
Las cualidades alternativas de un carcter son los eventos que son reconoci-
dos en este nivel de estudio, por lo que se puede decir que es el fenotipo, el que

N
realmente puede ser denominado como dominante o recesivo.

CI
Mientras ms se profundiza en el nivel de estudio del fenotipo, ms se puede
conocer al genotipo.

UC
El gen es un segmento de ADN que tiene un lugar en el cromosoma.
OD
A este sitio que ocupa un gen en el cromosoma se le denomina locus, una
palabra del latn cuyo plural es loci. Esto significa que en el experimento
PR
mendeliano se nombra locus, donde se encuentra un segmento de ADN que
codifica para una protena, cuya expresin se observa en el fenotipo por la
RE

presencia del color, amarillo o verde del cotiledn.


Los genes que producen la alternativa color son denominados alelos. Enton-
SU

ces, los alelos son formas alternativas del gen que ocupa un locus en igual
DA

posicin en dos cromosomas homlogos, y que se originan por mutaciones que


ocurren en algn sitio del segmento de la cadena de ADN, que limita a este
BI

locus.
I

Los avances alcanzados en la gentica obedecen a la observacin de fenotipos


OH

curiosos o raros y de investigar porqu no son iguales.


Cada locus puede tener muchos ms de dos alelos como se explica ms
PR

adelante en este texto.


La figura 5.1 muestra el anlisis de este experimento de Mendel.
Mendel en la F2 obtuvo 6 022 semillas de cotiledones amarillos y 2 001 semi-
llas de cotiledones verdes en una proporcin 3 a 1 (75 % amarillos y 25 %
verdes), esto se repite en los trabajos de Mendel para cada uno de los siete
caracteres que estudi y que le permiti concluir lo que ya se ha visto sobre
caracteres dominantes y recesivos, pero que tambin la autofecundacin de la
F1, produce estos caracteres en su fenotipo en una proporcin 3:1 (3/4, 1/4), y
que las proporciones en que aparecen sus factores o genes en el genotipo es de
1:2:1 (1/4, 2/4,1/4). El color verde solo se expresa, si el genotipo es homocigtico
para el carcter recesivo verde.
Se tendrn 4 combinaciones de gametos, como se observa en la figura 5.1.
90 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 5.1. Cruzamiento de las lneas puras para un solo carcter o cruce monohbrido y
autofecundacin. La descendencia de la fecundacin de dos F1 resulta una proporcin
de fenotipos 3:1 y de genotipos 1:2:1.

Esto significa que los llamados factores mendelianos, ahora genes, segregan
en los gametos, o sea, se separan durante la meiosis en los cromosomas, donde
se encuentra su locus. Esta es la primera Ley de Mendel conocida como Ley
de la segregacin.
Leyes de Mendel 91
Cruzamiento mendeliano para dos caracteres

Otro de los experimentos que Mendel realiz, fue la observacin de lo que


ocurra cuando se cruzaban lneas puras para dos caracteres (Fig. 5.2).

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 5.2. Cruzamiento de las lneas puras para dos caracteres.


92 Introduccin a la Gentica Mdica

La fecundacin de parentales, producto de una F1, puede obtener 16 posibi-


lidades de combinaciones de esos gametos.
Resultados obtenidos por Mendel al analizar dos caracteres: color del cotile-
dn amarillo o verde de las semillas y superficie lisa o rugosa de estas.
566 amarillas y lisas
108 amarillas y rugosas
101 verdes y lisas
32 verdes y rugosas

Las proporciones fenotpicas obtenidas fueron equivalentes a:


9 amarillas y lisas 9/16
3 amarillas y rugosas 3/16
3 verdes y lisas 3/16

N
1 verde y rugosa 1/16

CI
Estas proporciones se ajustan a las esperadas, cuando solo se implicaba un

UC
carcter, de modo tal que al combinar (multiplicacin), los resultados espera-
dos para ambos caracteres de forma independiente, son los siguientes:
OD
3/4 amarillas 3/4 lisas = 9/16 amarillas y lisas
1/4 verdes 3/4 lisas = 3/16 verdes y lisas
PR
3/4 amarillas 1/4 rugosas = 3/16 amarillas y rugosas
RE

1/4 verdes 1/4 rugosas = 1/4 verdes y rugosas


SU

Esto significa que la probabilidad de alternativas fenotpicas de un carcter


no interfiere o es independiente de la probabilidad de alternativas fenotpicas del
DA

otro, en este caso el color amarillo o verde del cotiledn y el carcter superficie
BI

de la semilla ya sea lisa o rugosa.


I

En esto consiste la segunda ley de Mendel, o sea en la transmisin indepen-


OH

diente de los alelos de los loci que producen estos dos tipos de caracteres, con
sus dos cualidades de color y superficie de la semilla. A esta segunda ley, se le
PR

conoce como Ley de la segregacin independiente y al azar, y se aplica al


anlisis de los alelos correspondientes a dos o ms loci.

Retrocruces

Un retrocruce, denominado tambin cruce prueba, es el cruce que se realiza


con uno de los descendientes obtenido de una F2, con el parental lnea pura para
el o los caracteres recesivos que se estn analizando.
En el caso de los fenotipos de guisantes con cotiledones amarillos, obtenidos
de una F2, pueden ser genotpicamente AA o Aa en proporciones 1:2, pero para
saberlo, se hace un cruzamiento entre F2: cotiledn amarillo y la lnea pura
color verde (genotipo aa):
Leyes de Mendel 93
Si 100 % de los guisantes resultantes del cruzamiento es de cotiledn amari-
llo, entonces el genotipo de la F1, que se investiga es AA.
Si 50 % es de cotiledn amarillo y 50 % de cotiledn verde, entonces el
genotipo de la F1 es Aa.
Y si se trata de un dihbrido de la F2, de semillas con cotiledones amarillos y
superficie lisa de la semilla?
Estos tipos de guisantes F2 pueden tener los genotipos siguientes:
AALL
2 AALl
2 AaLL
4 AaLl

Se puede resolver con un cruzamiento entre F2 (semillas amarillas y lisas) y

N
una lneas puras (semillas verdes y rugosas) (genotipo aall).

CI
Si 100 % de los guisantes resultantes del retrocruce, es de semilla amarilla

UC
y lisa, el genotipo de la F2 es AALL.
Si 50 % es amarilla y lisa y el otro 50 % amarilla y rugosa, el genotipo de la F2
es AALl. OD
Si 50 % es amarilla y lisa y el otro 50 % verde y lisa, el genotipo de la F2 es
PR
AaLL.
RE

Si 25 % es amarilla y lisa, 25 % amarilla y rugosa, 25 % verde y lisa y


25 % verde y rugosa, el genotipo de la F2 es AaLl.
SU
DA

Cruzamiento trihbrido
BI

Mendel tambin realiz cruzamientos trihbridos, teniendo en cuenta tres ca-


I
OH

racteres:
1. Color amarillo y verde del cotiledn.
PR

2. Superficie lisa y rugosa de la semilla.


3. Flores blancas y violetas.

Ya saba que el color violeta de las flores era el carcter dominante de las
alternativas de este locus.
Cruz lneas puras de guisantes de semillas amarillas y lisas, y flores violetas
(genotipos AA LL VV), con lneas puras de guisantes con semillas verdes y
rugosas, y de flores blancas (genotipos aa ll vv).
La F1 de este cruzamiento, result ser como se esperaba, guisantes de semi-
llas amarillas y lisas, y flores violetas y, genotpicamente Aa Ll Vv (Fig. 5.3).
A su vez la autofecundacin de la F1, produjo una F2 resultante de la combi-
nacin de ocho tipos de posibles gametos (Fig. 5.3).
94 Introduccin a la Gentica Mdica

Fig. 5.3. Gametos de la F1 Aa Ll Vv.

Guisantes con:

N
27 semillas amarillas y lisas, y flores violetas (8 genotipos)

CI
9 semillas amarillas y lisas, y flores blancas (4 genotipos)
9 semillas verdes y lisas, y flores violetas (4 genotipos)

UC
9 semillas amarillas y rugosas, y flores violetas (4 genotipos)
3 semillas verdes y lisas, y flores blancas (2 genotipos)
OD
3 semillas amarillas y rugosas, y flores blancas (2 genotipos)
3 semillas verdes y rugosas, y flores violetas (2 genotipos)
PR
1 semilla verde y rugosa, y flores blancas (1 genotipo)
RE

Este cruzamiento fue una prueba ms de la transmisin independiente y al


SU

azar de los genes que expresan caracteres diferentes y cualidades alternativas.


Sin embargo, como se aprecia en la figura 5.4, los genes que expresan un
DA

carcter dominante o recesivo, especifico de una lnea pura, tienen su locus


BI

indistinguible, y se puede heredar en el cromosoma paterno o materno del


I

parental, representados en la figura 5.4 con los colores azul y rosado. Para
OH

identificar el origen materno o paterno de los cromosomas con genotipos


homocigticos para los alelos de un locus especfico, es necesario identificar
PR

otras regiones o loci del ADN de ambos cromosomas homlogos. En este prin-
cipio se basan por ejemplo, los estudios moleculares de paternidad. De cmo
identificar el origen parental de los cromosomas se trata en varios de los si-
guientes captulos de este texto.

Resumen

Los experimentos mendelianos permitieron descubrir las leyes conocidas como:


Primera ley de Mendel o Ley de la segregacin y segunda ley de Mendel o
Ley de la transmisin independiente y al azar de los caracteres.
Ambas leyes se corresponden con los fenmenos biolgicos de la meiosis,
ya que los genes segregan con los cromosomas en los gametos y, a su vez, los
Leyes de Mendel 95

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA

Fig. 5.4. Cada loci se encuentra en cromosomas diferentes.


BI
I

cromosomas de origen materno y paterno se distribuyen independientes y al


OH

azar en los gametos.


La presencia de formas alternativas de genes involucrados en la determina-
PR

cin de un carcter o alelos, fue un evento decisivo para los experimentos


mendelianos.
De estos experimentos se derivan los conceptos de: lneas puras, refirindo-
se a los genotipos homocigticos de un locus para un carcter determinado, de
generacin en generacin; fenotipo dominante cuando la cualidad de un carc-
ter se expresa en 100 % de la F1 o primera generacin filial y en 75 % de la
segunda generacin filial o F2.
Los genotipos en estos casos pueden ser homocigticos para el alelo que
expresa el carcter dominante, y heterocigticos; mientras que el fenotipo
recesivo desaparece en la F1 para reaparecer en 25 % en la F2, y para que se
exprese es, absolutamente, necesario que el genotipo sea homocigtico para los
genes que expresan un carcter recesivo.
96 Introduccin a la Gentica Mdica

Bibliografa
Adrian, M., Owen, R.D., R.S. Edgar (1974): Gentica General. 3ra. ed. Barcelona: Ediciones
Omega S.A.
Jenkins, J.B. (1982): Gentica. La Habana Editorial Cientfico-Tcnica; Edicin Revolucionaria.
Motulsky, V. (1979): Human Genetics. Problems and Approaches. New York: Springer -Verlag.
Strachan, T., A.P., Read (2006): Gentica Humana 3ra. ed. Mc Graw Hill. Mexico.
Strikberger, M.W. (1968): Genetics. La Habana Instituto del Libro; Edicin Revolucionaria.
Weaver, R.F., P.W. Hedrick (1991): Basic G.E.N.E.T.I.C.S Brown Publishers.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR
Cromosomas humanos y su estudio 97

Captulo 6 CROMOSOMAS HUMANOS


Y SU ESTUDIO

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Existen varios enfoques sobre el estudio de los cromosomas humanos, que
OD
dependen del nivel de profundidad de lo que se quiere conocer, la urgencia del
resultado y de los recursos tcnicos con los que se cuenta para hacer el estudio.
PR
Las fases del ciclo celular de una clula somtica pueden ser clasificadas,
RE

desde el punto de vista citolgico, en dos grandes momentos de estadio celular:


la interfase y la mitosis.
SU

Tanto en una, como en la otra, es posible obtener informacin sobre los


cromosomas humanos. En la interfase, la cual comprende los estadios o fases
DA

G1, S y G2, la informacin se obtiene por las caractersticas de la cromatina


BI

nuclear y est relacionada, especficamente, con los cromosomas humanos X y


I

Y. Durante la mitosis es posible conocer muchos ms detalles de cada uno de


OH

los 46 cromosomas humanos.


En el captulo 1 de este texto, se tratan aspectos relacionados con la historia
PR

de la citogentica; en el presente captulo, se exponen los fundamentos biolgi-


cos y componentes de las tcnicas citogenticas, con el propsito de compren-
der sus resultados e interpretaciones.

Cromatina nuclear
La molcula de ADN (cido dexosirribonucleico) de un cromosoma existe
como un complejo formado por una familia de protenas bsicas cromosmicas
denominadas histonas (ms informacin sobre estos tipos de protenas en el
captulo 2) y de un grupo heterogneo de protenas cidas no histonas, que, a
pesar de que se encuentran menos caracterizadas, tienen un importante papel
98 Introduccin a la Gentica Mdica

en la estructura y expresin apropiada de los genes. La cromatina nuclear de-


pende del estado de condensacin y descondensacin del ADN. Hay dos for-
mas de cromatina de acuerdo con lo descrito hasta aqu:
Eucromatina, en un estado de condensacin que permite la expresin gnica.
Heterocromatina, en un estado mucho ms condensado que, atendiendo a sus
caractersticas de activacin o inactivacin, se clasifica en dos grupos:
Constitutiva, siempre inactiva y que se encuentra en sitios especficos de la
estructura de los cromosomas.
Facultativa, que puede existir en forma genticamente activa
(descondensada) o en forma inactiva y condensada, situacin esta propia
del cromosoma X.

Cromosomas

N
CI
En la divisin celular o mitosis, la informacin es ms completa y se extiende
al estudio de cada par cromosmico, por lo que es posible analizar el comple-

UC
mento cromosmico, tanto desde el punto de vista numrico, como estructural.
OD
Como la mitosis comienza al finalizar la fase G2 del ciclo celular, al que a su
vez le antecede la sntesis del ADN (ver captulo 2), los cromosomas siempre
PR
estn constituidos por dos cromtidas (expresin citolgica de la sntesis de
RE

ADN) unidas por una constriccin primaria o centrmero y por extremos deno-
minados telmeros. Desde la profase hasta el inicio de la anafase, los cro-
SU

mosomas se mantienen con sus cromtidas unidas por el centrmero o


constriccin primaria.
DA

Cada especie presenta un nmero haploide constante de cromosomas y a su


BI

vez un nmero diploide, en el que cada par cromosmico se caracteriza por una
I

estructura especfica. Esta condicin de las especies permite el estudio de los


OH

cromosomas.
En los cromosomas humanos se destacan tres tipos por la posicin que ocupa
PR

el centrmero y la longitud de las cromtidas.


La posicin del centrmero divide al cromosoma en dos regiones denomina-
das brazos y que son designados como cortos (p, del francs, petit: pequeo) y
largos (q, por ser la siguiente letra del alfabeto despus de la p) (Fig. 6.1).
Los cromosomas humanos son clasificados de acuerdo con la posicin del
centrmero en:
Metacntricos: cuando el centrmero est muy prximo al centro y ambos
brazos, cortos y largos, tienen igual longitud.
Submetacntricos: cuando el centrmero est desplazado hacia un extremo y
se identifican brazos cortos y brazos largos.
Acrocntricos: cuando el centrmero est desplazado hacia un extremo, sien-
do los brazos cortos extremadamente pequeos.
Cromosomas humanos y su estudio 99

Fig. 6.1. Tipos de cromosomas humanos, segn posicin del centrmero.


a) Metacntrico. b) Submetacntrico. c) Acrocntrico.

En el humano hay cinco pares de cromosomas autosmicos acrocntricos y


todos presentan satlites.
Los satlites son estructuras redondas unidas a los brazos cortos de estos
cromosomas por una fina constriccin secundaria denominada tallos; estas son

N
estructuras que se observan al microscopio ptico y no deben ser confundidas

CI
con la estructura molecular ADN satlite que fue tratado en el captulo 3. Los
satlites de estos cinco pares de cromosomas humanos contienen cientos de

UC
copias de genes que codifican ARN ribosomal, por lo que se dice que contienen
ADN relacionado con el organizador nucleolar (vea caractersticas del nucleolo
en captulo 2). OD
PR
El cromosoma Y por su estructura es tambin acrocntrico, pero en sus bra-
zos cortos hay genes muy importantes, que permiten la unin al cromosoma X
RE

durante la meiosis I y otros genes involucrados en la diferenciacin sexual; a


diferencia de los acrocntricos autosmicos, no tiene satlites y en sus brazos
SU

largos presenta una zona extensa de heterocromatina constitutiva (Fig. 6.1).


Hay un cuarto tipo de cromosoma denominado telocntrico, con el centrmero
DA

tan desplazado hacia un extremo que los brazos cortos no se observan. Este tipo
BI

de cromosoma no es caracterstico del humano y una estructura similar se pu-


I

diera observar en cromosomas humanos, productos de rearreglos estructurales


OH

que son estudiados ms adelante en este captulo.


PR

Cromosomas humanos en clulas en interfase: cromatina


sexual

Estudio del cromosoma Y

El cromosoma Y puede ser identificado en clulas en interfase, al tratar una


extensin de un tejido con colorantes fluorescentes. El tejido obtenido se coloca
sobre un portaobjeto para ser coloreado. La muestra puede ser obtenida por
medio de raspado de la mucosa bucal. El principio biolgico de esta tcnica
consiste en el tipo de colorante fluorescente que tie, intensamente, la regin de
heterocromatina constitutiva que caracteriza al ADN de los brazos largos del
100 Introduccin a la Gentica Mdica

cromosoma Y, que se observa con el uso de luz ultravioleta, por lo que se requie-
re un microscopio con estas caractersticas. El cuerpo Y, como se le denomina,
solo se observa cuando el cromosoma Y est presente en el genoma del indivi-
duo en estudio, de tal modo que es positivo en las muestras obtenidas de indivi-
duos del sexo masculino (varones) y negativo en individuos del sexo femenino
(hembras). Tambin se tiene en cuenta el nmero de cuerpos Y que se observa
por cada ncleo examinado.

Estudio del cromosoma X

En el texto se ha tratado sobre el fenmeno de inactivacin (heterocromatina


facultativa), de uno de los dos cromosomas X en estadios tempranos de
preimplantacin del cigoto.

N
En el ao 1949, los investigadores Barr y Bertran, observaron diferencias

CI
entre los ncleos de las clulas de tejido nervioso de los animales sobre los que
realizaban sus experimentos. A partir de esta observacin, se comienzan a rea-

UC
lizar estudios que permitieron identificar el hallazgo de estos investigadores sobre
la inactivacin de uno de los cromosomas X en el sexo femenino.
OD
Igual que se realiza para el estudio del cuerpo Y, la muestra se obtiene de
raspado de la mucosa bucal y, a diferencia del estudio del cuerpo Y, la colora-
PR
cin se puede realizar con colorantes habituales y la observacin bajo micros-
RE

copio comn, lo que facilita el uso comn de su estudio.


En el ncleo se observa una pequea masa heterocromtica, en forma con-
SU

vexa con uno de sus lados fijado a la envoltura nuclear que se tie intensamente
(Fig. 6.2). El principio biolgico de esta tcnica, se relaciona con la inactivacin
DA

facultativa de uno de los cromosomas X. Este fenmeno de inactivacin del


BI

cromosoma X garantiza que solo se exprese uno de los dos cromosomas X en


I

la mujer y, de este modo, se compensa la concentracin de la expresin de sus


OH

genes en ambos sexos. Se considera que el nmero de cuerpos de Barr que se


observan es igual al nmero de cromosomas X menos 1 (ver en el captulo 8,
PR

cuerpos de Barr en aberraciones cromosmicas del X).


En el anlisis de 100 clulas somticas del tejido en estudio, la mujer presenta
aproximadamente 40 % de clulas en las que se observa un cuerpo Barr que
corresponde con el nmero de cromosomas X-1.
El estudio de la cromatina sexual para el anlisis del cuerpo Barr es una
tcnica sencilla, econmica, rpida de realizar y til para identificar la presencia
del cromosoma X en recin nacidos con genitales externos no bien definidos y
que requieren de la identificacin rpida del nmero de cromosomas X, resulta
tambin til en otras condiciones tales como: nias con baja talla, individuos
femeninos o masculinos con historia de infertilidad o el sexo de deportistas
femeninos de alto rendimiento.
Cromosomas humanos y su estudio 101

Fig. 6.2. a) Foto de un ncleo en interfase con el cuerpo de Barr sealado por la flecha.
b) Esquema de la imagen de un cuerpo Barr en el ncleo de una clula epitelial.

Estudio del cariotipo humano

El trmino empleado para referirse al estudio de los cromosomas humanos,


es el de cariotipo.

N
A diferencia de la cromatina sexual, la cual su estudio se puede realizar en
clulas en interfase, los cromosomas humanos requieren de la obtencin de

CI
divisiones celulares.

UC
A finales de la dcada del 50 del siglo pasado, se desarrollaron tcnicas de
cultivo de tejidos in vitro, que permitieron identificar el nmero preciso de
cromosomas del humano. OD
En la actualidad, el estudio cromosmico es una tcnica muy utilizada. Se
PR
puede realizar en diferentes tipos de tejidos como: piel, cartlago, mdula sea,
RE

sangre, clulas de diversos rganos, tejidos fetales y trofoblsticos, que incluyen


el lquido amnitico.
SU

La sangre perifrica, por su fcil obtencin, se ha convertido en el tejido ms


utilizado para los estudios cromosmicos. El cariotipo se define como, la culmi-
DA

nacin del ordenamiento de los cromosomas humanos segn su forma de acuerdo


BI

con la posicin de su centrmero. A partir de microfotografas las parejas de


I

cromosomas son identificados por su tamao y morfologa y se ordenan en


OH

grupos que van de la letra A, a la letra G, y en pares del 1 al 22.


Pero tambin este trmino (cariotipo), se emplea para referirse al conjunto
PR

de cromosomas de un individuo o al conjunto de cromosomas de una especie,


por ejemplo: el cariotipo de un hombre o mujer o el cariotipo humano.
En la actualidad se cuenta con sistemas automatizados, los cuales permiten
la confeccin del cariotipo de forma automtica, una vez que por medio del
sistema de lentes del microscopio, y a partir de una lmina portaobjeto previa-
mente preparada, se capta la imagen de la metafase que se desee estudiar
(Fig. 6.3).
Existe un sistema internacional de clasificacin de los cromosomas, acorda-
do en la Conferencia de Pars, en el ao 1971. Este sistema se ha enriquecido
en la medida en que se han ido perfeccionando las tcnicas citogenticas.
De acuerdo con este sistema internacional, cada grupo y par cromosmico
tiene las caractersticas siguientes:
102 Introduccin a la Gentica Mdica

Grupo A. Est formado por los pares cromosmicos 1; 2 y 3. El 1 y el 3, son


metacntricos, y es el 1, el ms grande de los cromosomas humanos y el 2 el
mayor submetacntrico.
Grupo B. Est integrado por los pares 4 y 5. Ambos son submetacntricos,
prcticamente, de igual tamao.
Grupo C. Incluye a los pares del 6 al 12, y todos son submetacntricos. El
cromosoma X, es submetacntrico y por su tamao corresponde al grupo C.
Grupo D. Integrado por los pares 13; 14 y 15. Todos son acrocntricos, los
mayores con esta forma cromosmica del cariotipo humano. Todos presentan
satlites.
Grupo E. Est formado por los pares 16 metacntrico y 17 y 18 submeta-
cntricos.
Grupo F. Incluye a los pares 19 y 20, son los cromosomas metacntricos ms

N
pequeos del cariotipo humano.

CI
Grupo G. Est formado por los pares 21 y 22, son los cromosomas acrocntricos
ms pequeos, tienen satlites y, de estos, el 21 es el ms pequeo. El

UC
cromosoma Y es acrocntrico, y por su tamao se corresponde con este
grupo.
OD
PR
Tcnicas para la obtencin de cromosomas
RE

El momento del ciclo celular que permite la observacin de los cromosomas


SU

es la divisin celular. Es el fundamento biolgico de esta tcnica citogentica;


DA

con muy pocas excepciones, no se requiere del cultivo in vitro de tejidos que
permitan este tipo de anlisis, por crecimiento rpido. El tejido humano de ms
BI

fcil acceso con estos propsitos, es la sangre.


I

Los componentes celulares de la sangre, que se encuentran en mayor pro-


OH

porcin, son los hemates que, por su alto grado de especializacin, han perdido
PR

su ncleo y se encuentran en una fase G0 de su ciclo celular, por lo que, son los
leucocitos y, en especial, los linfocitos T, las clulas a partir de las cuales puede
ser posible, bajo la estimulacin de la fitohemaglutinina (FHA, agente mitognico,
estimulador de la mitosis), iniciar el ciclo celular in vitro de los linfocitos T.
En 24 h se obtienen nuevas clulas hijas que ya no requieren de la accin de la
FHA para continuar sus divisiones celulares en nuevos ciclos celulares.
Se describen varios protocolos de procedimientos tcnicos para la obtencin
de cromosomas humanos a partir de muestras de sangre, pero todos requieren:
Obtener una muestra de sangre perifrica, que se mezcla con heparina.
Fundamento biolgico: impedir la coagulacin y mantener libres a los linfocitos.
Medio de cultivo enriquecido con suplemento exgeno.
Cromosomas humanos y su estudio 103

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 6.3. a) Sistema automatizado para la confeccin y anlisis del cariotipo humano. b)
Cariotipo de mujer con bandas G (450 bandas) de cromosomas normales.

Fundamento biolgico: proporcionar a las clulas condiciones de nutrientes y


factores de crecimiento que permitan iniciar y mantener suficientes ciclos
celulares in vitro.
Empleo de FHA (fitohemaglutinina).
Fundamento biolgico: estimular la divisin celular de los linfocitos T e iniciar
el primer ciclo celular.
104 Introduccin a la Gentica Mdica

Incubacin a 37 C durante 72 h.
Fundamento biolgico: mantener la temperatura adecuada similar a la cor-
poral para lograr el inicio y continuidad del ciclo celular in vitro.
Empleo del uso de colchicina, producto que inhibe la formacin del huso acro-
mtico e incubar a 37 C por varios minutos.
Fundamento biolgico: como an las cromtidas no se han separado y los
cromosomas se mantienen en una sola estructura esto permite identificar a
46 cromosomas.
Cosecha de metafases, una vez detenido el cultivo en metafase por el uso
de la colchicina, realizar una primera centrifugacin.
Fundamento biolgico: permitir la sedimentacin de los elementos formes en
el cono del tubo de centrfuga.
Extraer el sobrenadante y sustituirlo por igual cantidad de una disolucin

N
hipotnica y realizar segunda centrifugacin.
Fundamento biolgico: lisis de los hemates y aumento del volumen de las

CI
clulas cosechadas al igualar las concentraciones de las soluciones entre las

UC
clulas cosechadas y el medio extracelular , de esta forma en las clulas dete-
nidas en metafase los cromosomas se separan lo suficiente para su identifica-
OD
cin, evita la sobreposicin de estos.
Fijacin con cido actico y metanol.
PR
Fundamento biolgico: permite mantener las caractersticas de las clulas o
RE

del tejido procesado.


Extensin sobre una lmina portaobjeto de las gotas deseadas y secar.
SU

Coloracin de las lminas obtenidas, para lo que existen diversos mtodos


segn los propsitos del estudio. Se explica con detalles ms adelante.
DA

Observacin bajo microscopio ptico y anlisis del nmero de metafases


BI

estimado, segn los objetivos del estudio.


Fotografiar o archivar en el ordenador varias metafases, segn sea necesa-
I
OH

rio, y la confeccin de uno o varios cariotipos.


PR

Mtodo de coloracin para anlisis cromosmico comn

Existen diversos mtodos de coloracin de los cromosomas despus de apli-


car procedimientos tcnicos que tienen como objetivo comn, la identificacin
de cada pareja cromosmica teniendo en cuenta seales que permitan recono-
cer la estructura longitudinal de cada uno de estos.
A estas tcnicas se les conoce como tcnicas de bandas, ya que dejan en
toda la longitud del cromosoma un patrn de seales en forma de bandas, que
tienen la caracterstica de ser constantes para cada par cromosmico y para
cada especie, ya que las bandas obtenidas parecen estar relacionadas con re-
giones del ADN ricas en AT(adenina-timina) y GC (guanina-citosina).
Cromosomas humanos y su estudio 105
Los protocolos tcnicos empleados con mayor frecuencia en el anlisis de
los cromosomas humanos son denominados:
Bandas G: se refieren a un patrn constante de bandas claras y oscuras,
como consecuencia del tratamiento de las lminas con disoluciones de tripsina
y posterior coloracin con Giemsa. Este tipo de bandas es el ms empleado
por los laboratorios que realizan el servicio citogentico de cariotipos.
Bandas Q: se basan en el empleo de colorantes fluorescentes como la
quinacrina y de la accin de la luz ultravioleta sobre la metafase en observa-
cin. Muestra un patrn como el de las bandas G, siendo brillantes las bandas
que son oscuras y no brillantes las bandas claras. Tienen el inconveniente
tcnico de necesitar microscopio de fluorescencia.
Bandas R: este patrn de bandas se obtiene al someter las lminas a un
proceso de calor, el cual produce un fenmeno de desnaturalizacin del com-

N
plejo ADN-protenas de los cromosomas. Al ser coloreadas las lminas con

CI
Giemsa, se obtiene un patrn de bandas que son el reverso del patrn obte-
nido en las bandas G y Q, de ah el nombre de bandas R. Esta tcnica se

UC
emplea de forma comn por laboratorios de algunos pases europeos como
Francia.
OD
Bandas C: se obtienen por otros procedimientos especiales, en los que se
PR
emplea un mtodo de coloracin que va a destacar las zonas heterocromticas
de cada cromosoma y permite identificar con mayor precisin, a los
RE

cromosomas de los pares 1, 9 y 16, los cuales presentan una regin variable
de heterocromatina pericentromrica hacia los brazos largos, y al cromosoma
SU

Y, el cual presenta una importante extensin de heterocromatina, que ocupa


DA

casi las 2/3 partes del brazo largo hacia el telmero (ver cuerpo Y). Estas
regiones de heterocromatina, cuando se encuentran presentes, son tiles para
BI

reconocer el origen materno o paterno de estos cromosomas.


I

Bandas de alta resolucin o prometafsicos: este tipo de bandas se utiliza


OH

cuando se quiere identificar algn pequeo defecto estructural de un


PR

cromosoma. Consiste en aplicar protocolos de bandeo G, Q o R a lminas


obtenidas despus de tratar los cultivos con sustancias que sincronizan la
mitosis, con el objetivo de lograr un gran nmero de clulas en prometafase
tarda o metafases muy tempranas. Los cromosomas se alargan, y el patrn
de bandas que se obtiene es lo suficientemente grande, como para identificar
pequeos defectos estructurales (Fig. 6.4). Los cromosomas con este tipo de
tcnica pueden tener un nmero de bandas tan grande como de 550 a 850 o
ms, mientras que con las tcnicas de cromosomas en metafase, se alcanzan
menos de 400 bandas (Fig. 6.5).
Es importante mencionar a la citogentica molecular, la cual se basa en el
empleo de segmentos de simples cadenas de ADN complementarias, obtenidos
106 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU

Fig. 6.4. Cariotipo de alta resolucin (bandas G) de hombre con cromosomas normales.
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 6.5. Diferencias en el nmero de bandas de cromosomas 11 y X en alta resolucin


(prometafsico) con resolucin de cromosomas en metafase de 450 bandas.
Cromosomas humanos y su estudio 107
por tcnicas de ADN recombinante. Con el uso de estas tcnicas, la distancia
entre grandes mutaciones cromosmicas y mutaciones de un solo gen se acor-
ta, y su empleo ha permitido acumular gran cantidad de informacin sobre las
caractersticas particulares, de regiones vecinas en una molcula de ADN. Una
descripcin de los fundamentos tcnicos que permiten este tipo de estudio
citogentico aparece con ms detalles en los captulos 7 y 12.
Describir el cariotipo de forma resumida, ha requerido de un acuerdo entre
todos los citogenetistas del mundo. Finalmente se han adoptado un conjunto de
abreviaturas y smbolos, con los cuales informar lo que se observa en el anlisis
del cariotipo, pero de una forma muy sinttica.
En la tabla 6.1 se muestran los trminos que de forma habitual utiliza el
citogenetista para de forma breve dar a conocer los resultados de sus observa-
ciones. Los defectos genticos expresados en las abreviaturas y smbolos se

N
estudian en detalle en el captulo 8.

CI
UC
OD
Tabla 6.1. Terminologa utilizada para la descripcin de los cromosomas y sus anormalidades
PR
Abreviatura Significado Ejemplo Condicin
RE

p Brazo corto 5p Brazo corto cromosoma 5


q Brazo largo Xq Brazo largo del cromosoma X
cen Centrmero
SU

ter Region terminal


o telmero
DA

h Regin de
heterocromatina
BI

+ Ganancia 47, XX, +21 Femenino, trisoma 21.


I

46, XY, 8p+ Masculino con porcin extra en


OH

brazos cortos del cromosoma 8


46, XX, 9qh+ Femenino con regin
heterocromtica grande de
PR

regin pericentromrica de q
- Prdida 45, X Femenino monosomia
46, XY, 5p- del X. Masculino delecin bra-
zo corto del cromosoma 5
/ Mosaicismo 45, X/46, XX Dos lneas celulares
del Delecin 46, XX, del (4p) Femenino delecin de los
brazos cortos del cromosoma 4
dup Duplicacin 46, XY, dup (3p) Masculino duplicacin
brazos cortos del cromosoma 3
inv Inversin 46, XX, inv(9) Femenino inversin del
cromosoma 9
ins Insercin Indica insercion de un segmen-
to de un cromosoma en otro
i Isocromosoma 46, X, i(Xq) Femenino isocromosoma de
brazos largos del cromosoma X
108 Introduccin a la Gentica Mdica
Continuacin Tabla 6.1

Abreviatura Significado Ejemplo Condicin

t Translocacin 45, XY, t(14 ; 21) Masculino con


translocacin balanceada entre
los cromosomas 14 y 21
Translocacin 46, XX, t(14 ; 21) Femenino con translocacin
tt entre los cromosomas 14 y 21
y trisoma del cromosoma 21
Translocacin 46, XY, t(2;11) Masculino con translocacin
(p33;p14) balanceada entre brazos cortos
de los cromosomas 2 y 11.
rcp Translocacin recproca
rob Translocacin robertsoniana o por fusin centromrica

mar Marcador 47, XY, +mar Masculino con cromosoma

N
marcador extra
pat Paterno

CI
mat Materno
r Anillo 46, XX, r(13) Femenino con cromosoma 13

UC
en anillo
fra Sitio frgil 46, Y, (X)(q27.3) Varon con cromosoma X frgil
der
OD
Cromosoma derivado 46, XX, der (2) mat Femenino con cromosoma 2
derivado de translocacin
2;11 materna
PR
46, XX Femenino normal
46, XY Masculino normal
RE

Resumen
SU
DA

El estudio microscpico de clulas en interfase, con el objetivo de identificar


BI

la presencia de ADN de los cromosomas X y Y en forma de cromatina, ofrece


I

un mtodo rpido y econmico, el cual permite identificar el sexo cromatnico


OH

del individuo en estudio y sus fundamentos biolgicos son la heterocromatina


facultativa del cromosoma X y la constitutiva del cromosoma Y.
PR

Esta tcnica se indica cuando se requiere conocer con urgencia el sexo en un


recin nacido cuyos genitales externos son ambiguos.
Es un paso tcnico que se encuentra entre la clnica y el cariotipo cuando se
estudian a nias con baja talla o parejas infrtiles.
Permite identificar hombres con sndromes de feminizacin testicular y
fenotipo de mujer en equipos deportivos de mujeres de alto rendimiento.
El cariotipo es una tcnica ms elaborada y costosa, requiere de un tiempo
mayor de anlisis, el cual depende del cultivo de tejido fundamentalmente. Para
cariotipos comunes se utiliza como tejido, sangre de la persona que se desea
estudiar. Este tipo de cultivo lleva un tiempo menor, ya que a las 72 h se detiene,
y se pueden obtener extensiones en lminas portaobjeto listas para ser someti-
Cromosomas humanos y su estudio 109
das a las coloraciones deseadas. La tcnica de bandas utilizada en cariotipos
comunes son las bandas G, y la resolucin ms efectiva es el nivel prometafsico
de estudio.
El fundamento biolgico de las tcnicas para el estudio de los cromosomas
humanos, se basa en el conocimiento que se tiene sobre el ciclo celular y la
divisin celular, que permite realizar cultivos in vitro al utilizar medios y tempe-
raturas adecuadas as como sustancias, como la FHA para el inicio del ciclo
celular y la colchicina que impide el progreso del ciclo detenindolo en metafase,
para lograr el nmero de clulas y metafases deseadas.
La tcnica de coloracin de bandas G, habitualmente utilizada trata las lmi-
nas previamente con tripsina y posterior coloracin con Giemsa. Otras tcni-
cas de coloracin para la obtencin de bandas, se realizan cuando es necesario
obtener ms detalles de algn defecto cromosmico no bien identificado o cuando

N
se proyectan investigaciones especficas.

CI
El anlisis de cromosomas de mayor resolucin se emplea cuando se desea
identificar algn defecto pequeo, no identificado en el estudio de rutina.

UC
La citogentica molecular ofrece un nivel tcnico mucho ms especializado,
OD
y algunas de sus indicaciones las realizan especialistas en gentica clnica cuan-
do se quieren identificar defectos submicroscpicos de cromosomas especfi-
PR
cos o para uso de los citogenetistas con fines de investigaciones, en las que
RE

intervienen grupos de especialistas involucrados en el estudio de las causas de


defectos genticos poco comprendidos.
SU

Bibliografa
DA
BI

Barch Raven, M.J. (1991): The act cytogenetics laboratory manual. 2nd ed. New York: Press.
I

Dubinin, N.P. (1981): Gentica General. Tomo I. Mosc: Editorial MIR.


OH

Nussboum, R. L., Mc Irmesn, R.R., H.F. Willard (2008): Thompson & Thompson: gentica en
medicina 7ma. ed. Elseivier Masson. Mexico.
PR

Rimon, D.L., Connor, J.M., Pyeritz, R.E., B.R. Korf (2007): Emory and Rimoins Principles and
Practice of Medical Genetics 6 ed. New York: Churchill Livingstone
Vol 1.
Scwanitz, G., R. Schubert (1999): Diagnostic Cytogenetics. Rolf-Dieter Wegner (ed.) Berlin:
Springer-Verlag.
Verna, R., A. Babu (1989): Human Chromosomes Especialized Techniques. New York: Pergamon
Press.
110 Introduccin a la Gentica Mdica

Captulo 7 CITOGENTICA MOLECULAR

N
CI
Jorge Quintana Aguilar

UC
El inicio de la era de la citogentica molecular se marca en el ao1977; los
avances en este campo de la citogentica son impresionantes.
OD
Con este tipo de estudio se puede lograr identificar defectos submicroscpicos
PR
del ADN (cido dexosirribonucleico) y disminuir la brecha que existe entre la
deteccin de una simple insercin o delecin de un nucletido o de varios de
RE

estos y su observacin a nivel de la citogentica convencional.


La importancia extrema de estos avances tcnicos motiv la realizacin de
SU

este captulo en el que se exponen las caractersticas y fundamentos que com-


binan instrumentos moleculares a partir del ADN recombinante y la citogentica.
DA
BI

Tcnicas de hibridacin in situ


I
OH

La tecnologa de hibridacin in situ (HIS), combina las tcnicas citogenticas


PR

convencionales con las moleculares y est basada en la deteccin de secuen-


cias especficas de cidos nucleicos, en cromosomas aislados o clulas en
interfase. Fue descrita originalmente por Pardue y Gall; John y colaboradores,
en 1969 utilizando istopos radiactivos para marcar las sondas, las cuales, com-
binadas con tcnicas de autorradiografa, posibilitaron la deteccin de las se-
cuencias hibridadas.

Mtodos de hibridacin in situ fluorescente

En 1977, Rudkin y Stollar describieron un mtodo inmunocitoqumico basado


en la utilizacin de anticuerpos anti-ADN o anti-ARN marcados con sustancias
Citogentica molecular 111
fluorescentes las cuales se detectan bajo observacin utilizando el microscopio.
Este procedimiento se conoce como tcnica de hibridacin in situ fluorescente
FISH (del ingls, fluorescent in situ hibridization), o hibridacin no isotpica.
En la actualidad existen dos mtodos de FISH, llamados directos e indirectos.
Los mtodos directos permiten realizar la visualizacin microscpica de la
seal de forma inmediata, despus de realizada la tcnica. El marcaje directo
emplea nucletidos marcados con sustancias fluorescentes.
Los mtodos indirectos se basan en la utilizacin de sondas unidas a molcu-
las, tales como la biotina o digoxigenina, marcadas con una sustancia fluores-
cente que permite su visualizacin al microscopio con luz ultravioleta. Estos
mtodos se pueden combinar con tcnicas inmunocitoqumicas basadas en re-
acciones antgeno-anticuerpo para aumentar la intensidad de las seales
fluorescentes. Para construir la sonda se emplea la biotina (o la digoxigenina)

N
con una marca fluorescente unida covalentemente al dUTP (desoxi-
uridintrifosfato) formando un nucletido modificado que puede ser incorporado

CI
al ADN en vez del dTTP (desoxitimidintrifostato).

UC
La biotina (vitamina H) tiene la ventaja de poseer una gran afinidad por las
protenas avidina y estreptoavidina, dando lugar a uniones casi irreversibles.
OD
La digoxigenina es un derivado de la digitoxina procedente de la Digitalis
purprea y Digitales lanata, que resulta altamente eficiente en reacciones
PR
antgeno-anticuerpo en las clulas.
RE

Sondas
SU

Las sondas son en general polinucletidos que se usan con el propsito de


DA

obtener alguna informacin (ver captulo 12). Su uso continuado en los diferen-
BI

tes procedimientos de la gentica molecular ha hecho posible que muchas de


I

estas se puedan obtener comercialmente en la actualidad. Sin embargo en


OH

ocasiones la sonda necesaria para un estudio determinado no est disponible en


el mercado y debe ser sintetizada en el laboratorio utilizando procedimientos
PR

moleculares tambin de gentica molecular.


Mediante la FISH se pueden detectar diferentes tipos de secuencias en el
genoma humano, de acuerdo con las sondas utilizadas. Algunas de estas se
citan a continuacin.
Sondas de secuencias nicas o copia simple: se utilizan para la deteccin de
secuencias especficas en regiones subtelomricas y otros sitios tiles para la
identificacin de alteraciones submicroscpicas, como por ejemplo, 15q11-q13.
Sondas centromricas: se basa en utilizar sondas de secuencias de ADN
satlites que permiten la deteccin de secuencias altamente repetitivas, loca-
lizadas en regiones centromricas. Especialmente las regiones de familias
de ADN alfa satlites, son muy tiles para determinar el nmero de copias de
un cromosoma determinado, como se aprecia en la figura 7.1.
112 Introduccin a la Gentica Mdica

Sondas de secuencias para regiones especficas: se basa en la deteccin de


secuencias altamente repetitivas localizadas en determinadas regiones de los
cromosomas, como por ejemplo, la regin Yq12.
Sondas para el pintado de cromosomas completos WCP (del ingls, whole
chromosome painting): detectan secuencias de eucromatina en determina-
dos brazos o cromosomas completos.

Principios y protocolos de laboratorio


EL procedimiento general utilizado para la FISH sobre ADN, descrita por
Pinkel y colaboradores, en 1986, se basa en los principios siguientes:
Preparacin de lminas y extensiones.
Pretratamiento del material extendido.

N
Desnaturalizacin del ADN.

CI
Hibridacin.
Lavados poshibridacin.

UC
Marca de la sonda.
Observacin al microscopio.
OD
A continuacin se describen los aspectos bsicos de los protocolos de labora-
PR
torio, en relacin con la hibridacin in situ ADN-ADN. Para esto se requiere
RE

de preparaciones de clulas, cromosomas, o ambos, de ptima calidad.


Preparacin de lminas y extensiones: se recomienda la limpieza de lminas
SU

portaobjetos con alcohol ter (1:1) y realizar fijacin de las extensiones.


Pretratamiento del material extendido: se utiliza la ARNasa (ribonucleasa),
DA

para eliminar el ARN endgeno ya que provocan la digestin de la cubierta


BI

protenica del ADN. El cido clorhdrico (HCl) permite la extraccin de pro-


I

tenas e hidrlisis parcial del ADN. Ambos procedimientos, mejoran la acce-


OH

sibilidad e hibridacin de la sonda a la regin del ADN cromosmico que se


pretende marcar y que recibe el nombre de ADN-blanco o diana.
PR

Desnaturalizacin del ADN: en caso de que se utilicen sondas de doble hli-


ce es necesario realizar la desnaturalizacin del ADN-sonda y el ADN-blan-
co. La desnaturalizacin se realiza mediante pH muy alcalino o por calor.
Hibridacin: mltiples factores influyen sobre la hibridacin. La velocidad de
hibridacin aumenta proporcionalmente con la concentracin del ADN. Ade-
ms, la cantidad de hbridos obtenidos, es mayor cuanto ms largo es el tiem-
po de hibridacin. Por otra parte, el sulfato de dextrana (dextran sulfato) es
importante tambin porque al hidratarse facilita obtener una mayor concen-
tracin relativa de la sonda.
Lavados poshibridacin: los lavados astringentes permiten eliminar el llama-
do ruido de fondo (HISI hibridacin in situ inespecfica o no especfica),
mediante la utilizacin de disoluciones salinas poco concentradas a altas
temperaturas.
Citogentica molecular 113
Marcaje: se pueden realizar diferentes tipos de marcas o seales fluorescentes
para la identificacin de la hibridacin en el ADN-blanco, por medio de siste-
mas que utilizan, principalmente, la biotina o digoxigenina. Las sondas de
ADN marcadas con biotina, se pueden detectar por la va de la avidina, la
cual es una glicoprotena unida a la fluorescena- isotiocianato (FITC) que es
la sustancia fluorescente. La avidina tiene 4 sitios de unin con la biotina, lo
que produce un complejo muy estable. Para aumentar la seal fluorescente
se puede realizar la amplificacin con un anticuerpo antiavidina (obtenido de
cabras), el que con posterioridad se pone en contacto nuevamente con avidina
marcada con FITC.
Observacin al microscopio: la observacin al microscopio requiere de una
fuente de luz ultravioleta y de un sistema de filtros adecuados de acuerdo con
las longitudes de onda de las seales fluorescentes. Adems, se utilizan pro-

N
gramas automatizados, los cuales permiten realizar el anlisis utilizando dife-
rentes colores simultneamente (FISH multicolor), as como tambin mediante

CI
anlisis de la intensidad de las seales fluorescentes (Figs. 7.1 y 7.2).

UC
OD
PR
Fig. 7.1. FISH (hibridacin
RE

in situ fluorescente) sobre


clulas en interfase con la
SU

utilizacin de una sonda


centromrica para cromoso-
DA

mas X (Oncor). Obsrvese


el marcaje de 2 cromosomas
BI

X.
I
OH
PR

Fig. 7.2. FISH sobre clulas


en interfase y cromosomas
con el empleo de sonda cen-
tromrica para cromosomas
18 (Oncor) en un caso de
trisoma 18.
114 Introduccin a la Gentica Mdica

Otros procedimientos, como el cariotipo espectral (SKY, spectral


karyotiping), la microdiseccin y pintado reverso de cromosomas, la hibrida-
cin genmica comparativa (CGH, del ingles, comparative genome
hybridization), se desarrollan en la actualidad, principalmente, en el campo de
las investigaciones.
Las tcnicas de citogentica molecular se han aplicado a los estudios de
cartografa gentica y de expresin gnica.
La utilidad de la citogentica molecular en el diagnstico de las enfermeda-
des genticas se muestra a continuacin:
Anlisis de clulas interfsicas. En la figura 7.1 se aprecia la seal emitida
por una sonda centromrica para la deteccin del cromosoma X, en clulas
en interfase. Este tipo de FISH, permite realizar marcas fluorescentes de
cromosomas especficos, sin necesidad de realizar cultivos para la obtencin

N
de cromosomas, lo que posibilita realizar diagnsticos prenatales rpidos de
las aneuploidas ms comunes.

CI
Diagnstico de alteraciones submicroscpicas como los sndromes por

UC
microdeleciones o por defectos de genes contiguos.
Anlisis de marcadores cromosmicos de origen desconocido. Los estudios
OD
moleculares resultan de particular utilidad para precisar el origen y composi-
cin del material gentico en estos casos.
PR
Reordenamientos complejos en casos de clulas tumorales y hemopatas
RE

malignas. Cuando se presentan translocaciones complejas que involucran a


ms de dos cromosomas, se pueden detectar con precisin, los sitios de rotu-
SU

ras e intercambios de material gentico.


DA

Resumen
BI
I

El fundamento biolgico que caracteriza a las tcnicas citogenticas de hibri-


OH

dacin in situ, es la complementariedad de bases del ADN. La separacin de


PR

las hebras de la molcula de ADN atrapada en los ncleos de las clulas en


interfase o las presentes en los cromosomas en las metafases, luego de cultivo
in vitro, son fijadas en lminas portaobjetos y tratadas con la finalidad de
lograr la desnaturalizacin del ADN contenido, tanto en los ncleos, como en los
cromosomas de las metafases que se van a estudiar. El ADN complementario
contenido en una sonda marcada, hibrida con la hebra del segmento desnatura-
lizado que le corresponde, y emite una seal fluorescente que es captada al
microscopio con luz ultravioleta.
La sonda utilizada contiene el ADN complementario, de regiones
cromosmicas especficas y permite identificar al microscopio, desde, locali-
zaciones telomricas y centromricas de cada uno de las 24 molculas huma-
nas de ADN, hasta segmentos propios de genes cuya estructura molecular se
conoce.
Citogentica molecular 115
La citogentica molecular ofrece tal espectro de posibilidades de identifica-
cin de defectos y rearreglos moleculares probables en cada una de las 24
molculas de ADN, que su empleo actual ha permitido identificar las causas y
mecanismos genticos hasta hace poco tiempo no conocidos, sobre la expre-
sin de numerosos sndromes y enfermedades genticas, que pueden o no,
presentar defectos congnitos.

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BI

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OH
PR
116 Introduccin a la Gentica Mdica

Captulo 8 MUTACIONES QUE AFECTAN


A LOS CROMOSOMAS
HUMANOS

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Una vez perfilados los detalles tcnicos para el estudio de los cromosomas
OD
humanos, los investigadores de la gentica de la poca planearon la aplicacin
de estas tcnicas a sndromes cuya similitud entre los individuos afectados su-
PR
geran un defecto gentico comn.
RE

Lejeune detect como causa gentica de un sndrome, el primer defecto


cromosmico en personas que presentaban las caractersticas clnicas delinea-
SU

das en el ao 1866, por Lamgdon Down. Esto ocurri en el ao 1959, dos aos
despus, que se haba demostrado que el nmero de cromosomas humanos era
DA

de 46 y no de 48.
BI

Una vez ms la investigacin de una desviacin del desarrollo, da paso a un


I

nuevo conocimiento y desencadena el inicio de una nueva era que marca la


OH

relacin entre la gentica mdica y el nacimiento de la gentica clnica.


En ese mismo ao 1959 se detectan los cariotipos 47, XXY y 45, X, como
PR

causa de los sndromes Klinefelter y Turner, respectivamente. Le siguen en


orden el descubrimiento de la trisoma D, hoy reconocida como 13, en el ao 1960.
El primer defecto estructural tambin fue identificado por Lejeune en el ao
1963, en nios que presentaban el sndrome del maullido del gato.
Otros defectos cromosmicos fueron descubiertos entre 1964 y 1965.
De 1968 a 1970 se introducen las tcnicas de bandas y con estas, la posibili-
dad de la clasificacin inequvoca de todos los cromosomas humanos. Comenz
una dcada que ampli el descubrimiento de nuevos defectos cromosmicos y
nuevos enfoques de mutaciones, que fueron y que continuamente son reconoci-
dos por la tecnologa de la denominada era de las bandas en la citogentica.
La tecnologa actual con la citogentica de alta resolucin, ha logrado avan-
ces sorprendentes en el estudio de los cromosomas humanos. La citogentica
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 117
por s misma o ampliada con tcnicas moleculares permite la deteccin de de-
fectos cada vez ms pequeos los cuales disminuyen la distancia del desconoci-
miento de defectos genmicos que median entre las mutaciones monognicas y
las cromosmicas, y cuyo conocimiento puede explicar las causas de otras des-
viaciones genticas del desarrollo y profundizar en las funciones an desconoci-
das del genoma humano.
En este captulo se estudian los conocimientos originados a partir de la apli-
cacin de los avances de la tecnologa citogentica en la comprensin de defec-
tos genticos cromosmicos y los mecanismos que los producen.

Anormalidades o defectos cromosmicos


A las anormalidades o defectos cromosmicos, se les denomina aberraciones

N
cromosmicas y se clasifican en dos grandes grupos: numricas y estructurales.

CI
Entre las primeras se incluyen las que tienen el componente cromosmico
normal de 46 alterado, por exceso o por defecto.

UC
Estas alteraciones numricas reciben el nombre de poliploidas y aneuploidas.
OD
En el segundo grupo se afecta, solamente, la estructura de uno o varios
cromosomas y reciben el nombre de aberraciones estructurales.
PR
RE

Aberraciones cromosmicas de nmero


SU

Este tipo de aberraciones cromosmicas se clasifica: por el nmero de


cromosomas involucrados; y porque sean o no un mltiplo exacto del nmero
DA

haploide de cromosomas. Constituyen mutaciones genmicas por su magnitud y


BI

pueden ser: poliploidas y aneuploidas.


I
OH

Poliploidas
PR

Son defectos que involucran un conjunto o juego cromosmico haploide com-


pleto en uno de los gametos y que al ser fecundado por un gameto haploide,
originan un nmero triploide del cariotipo normal. Se caracterizan por presentar
un mltiplo exacto del nmero haploide de cromosomas superior a 2, que es el
nmero diploide esperado. Se expresan como 3n, 4n, etc., y se les nombra
triploidas, tetraploidas, pentaploidas, etc.
Las poliploidas, no solo son frecuentes en especies como los vegetales, sino
que se logran artificialmente con el propsito de investigaciones o para obtener
variantes ms apetitosas y voluminosas.
En el humano son eventos poco viables, se observan de 1 a 2 % de las
fecundaciones reconocidas, pero de manera ocasional, se han observado
triploidas (3n) y tetraploidas (4n) en fetos no viables.
118 Introduccin a la Gentica Mdica

Las triploidas, probablemente, son el resultado de una anormalidad que oca-


siona una falla en la meiosis, la que podra ser, tanto en la ovognesis como en la
espermatognesis, pero por las caractersticas celulares propias del espermato-
zoide humano, es lgico pensar que cuando ocurren, sean fenmenos que afec-
tan fundamentalmente a la ovognesis.
La expresin fenotpica de las triploidas se ha descrito en fetos y depende
del origen del gameto inmaduro. Si el doble conjunto cromosmico es de origen
materno, hay poco desarrollo de la placenta y el feto con nutricin deficiente, es
abortado; si el doble conjunto cromosmico es aportado por un esperma inma-
duro o por la fecundacin de dos espermas, evento denominado dispermia, en-
tonces se observa un gran desarrollo del trofoblasto o formacin de una mola
hidatiforme parcial, y poco desarrollo o ausencia de las estructuras originadas
por el embrioblasto.
Las tetraploidas que se han reportado, han sido 92, XXXX o 92, XXYY y

N
sugieren que son el resultado de una anormalidad en el clivaje, o divisin del

CI
citoplasma en la primera divisin mittica del cigoto que debe dar lugar a las dos
primeras clulas o blastmeras del cigoto, de modo que la segunda divisin

UC
mittica del cigoto se inicia con 4n cromosomas manteniendo esa tetraploida,
OD
en las siguientes generaciones celulares.
PR
Aneuploidas
RE

A diferencia de las poliploidas, las aneuploidas afectan, generalmente, a la


SU

segregacin de solo un par cromosmico especfico en la anafase de cualquiera


de las dos divisiones meiticas, en la primera, en la segunda, en ambas o tam-
DA

bin pueden ocurrir en las primeras divisiones mitticas del cigoto. Este defecto
BI

de segregacin se conoce con el nombre de no disyuncin y da lugar a un


I

mltiplo no exacto del nmero haploide de cromosomas.


OH

Cuando se producen en alguna de las meiosis son eventos precigticos y


cuando aparecen en el cigoto se les denominan eventos poscigticos.
PR

Aneuploidias como eventos precigticos

Las aneuploidas que ocurren en la meiosis, en el proceso de reduccin del


nmero diploide al nmero haploide de cromosomas originan cigotos con 45;
47 o ms cromosomas. Este desbalance se expresa en el fenotipo con mayor o
menor severidad, segn el defecto o el exceso de ADN y dependiendo, adems,
de los cromosomas involucrados.
La no disyuncin puede involucrar a cromosomas autosmicos, (como las
trisomas 21; 13 y 18), y a cromosomas sexuales como el sndrome Klinefelter
el cual presenta dos cromosomas X y un cromosoma Y (trisoma XXY), o el
sndrome Turner que presenta una monosoma del cromosoma X.
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 119
Uno de los aspectos ms interesantes es poder conocer en qu momento de
la divisin celular ocurre la no disyuncin.
En el sndrome Down se ha podido dilucidar, utilizando estudios moleculares,
que la no disyuncin ocurre con ms frecuencia en la gametognesis de la
mujer, que en la del hombre, que este fenmeno se incrementa en los gametos
femeninos en dependencia de la edad y que ocurre preferentemente en la meiosis I.
Las figuras 8.1 y 8.2, exponen un esquema que permite identificar las dife-
rencias genticas que se producen en dependencia de que ocurra o no la no
disyuncin en la primera o en la segunda divisin meitica.

N
Fig. 8.1. Esquema de la no disyuncin en la

CI
primera divisin meitica. Obsrvese que los

UC
gametos diploides para el par cromosmico son
heterodismicos con relacin a la informacin
OD gentica contenida en la pareja cromosmica
involucrada.
PR
Cuando la no disyuncin ocurre en la meiosis I, el gameto dismico que
RE

resulta tiene informacin heterodismica (Fig 8.1) porque en esta divisin celu-
lar se separan los cromosomas homlogos que tienen una informacin gentica
SU

que procede, a su vez, de los gametos parentales.


La no disyuncin en la segunda divisin meitica (Fig. 8.2) es el resultado de
DA

la separacin de las cromtidas de un cromosoma especfico, que van juntas al


BI

mismo gameto, por lo que recibe el nombre de isodisoma; ya que la informa-


I

cin gentica contenida es muy parecida o totalmente igual, lo que depende de


OH

la magnitud o tamao de los segmentos de cromtidas intercambiados entre


los cromosomas homlogos de la profase de la meiosis I.
PR

Fig. 8.2. Esquema de la no disyuncin en la se-


gunda divisin meitica. Observe que la infor-
macin gentica del gameto dismico es igual o
isodismica.
120 Introduccin a la Gentica Mdica

La fecundacin de gametos dismicos o nulismicos por gametos haploides


normales origina las trisomas y monosomas. Las tetrasomas y pentasomas
pueden haber sido producidas por no disyuncin en primera y segunda meiosis
de la misma gametognesis, y originan gametos trismicos o tetrasmicos, que
al ser fecundados por un gameto haploide normal, producen cigotos con
tetrasomas o pentasomas (Fig. 8.3) por ser el resultado de una fecundacin de
dos gametos en los que ambos hayan sufrido el fenmeno de no disyuncin,
para el mismo par cromosmico.
La no disyuncin tambin puede ocurrir y afectar a ms de un par
cromosmico, como se demuestra en los casos reportados de trisoma 21 y
trisomia XXY simultneamente.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU

Fig. 8.3. Doble no disyuncin en la formacin de los gametos.


DA
BI

Generalmente, cuando el cigoto presenta una aneuploidia por segregaciones


I

anormales de cromosomas en cualquiera de las gametognesis, el nmero


OH

cromosmico aneuploide se mantendr en todas las clulas de las mitosis que


corresponden a la etapa de segmentacin, que darn lugar posteriormente al
PR

embrioblasto y al trofobalasto y por tanto ese nmero cromosmico se manten-


dr inalterable como lnea celular nica del individuo afectado.

Aneuploidas como eventos poscigticos

Las aneuploidas, que ocurren como causa de la no disyuncin en la primera


divisin mittica poscigtica, originan, al menos tericamente, dos lneas celula-
res (mosaicismo). En estos casos, al realizar el anlisis cromosmico, se pueden
observar dos o ms cariotipos con diferente nmero de cromosomas afectando
al mismo par (Fig. 8.4).
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 121

N
CI
UC
Fig. 8.4. No disyuncin en las mitosis del cigoto.
OD
PR
Cuando la no disyuncin ocurre en la primera divisin mittica, se obtienen
RE

dos lneas celulares: una monosmica y otra trismica. Sin embargo, las clulas
con monosomas de cromosomas autosmicos no son viables, por lo que en
SU

estos casos desaparece la lnea celular monosmica y al final queda solo la lnea
celular trismica, pero cuando la no disyuncin involucra al cromosoma X, en-
DA

tonces pueden quedar 2 lneas celulares 45, X / 47, XXX.


BI

Cuando la no disyuncin ocurre en la segunda divisin mittica y estn


I

involucrados cromosomas autosmicos quedan dos lneas celulares, por ejem-


OH

plo: 46, XX / 47, XX, + 21, ya que la clula con monosoma 21 no resulta viable
y se pierde.
PR

Si el cromosoma involucrado es el X, entonces se pueden observar tres l-


neas celulares: 46, XX /45, X / 47, XXX.

Anafase retardada

Se trata de un defecto que ocurre en la anafase, en la que queda retrasado,


en esta fase de la divisin celular, uno de los cromosomas de un par especfico,
que por ese motivo se pierde, quedando excluido de uno de los dos ncleos
concluir la telofase; de modo que de las dos clulas resultantes: una de estas
monosmica para el par cromosmico involucrado.
La anafase retardada siempre origina prdida de un cromosoma o monosoma.
Si ocurre durante las primeras divisiones mitticas de un cigoto de frmula
122 Introduccin a la Gentica Mdica

cromosmica 46, XY y el cromosoma retardado en anafase fuera el Y, este


mecanismo produce dos lneas celulares, una 45, X y la otra 46, XY.
De igual forma, si un cigoto con trisoma 21, pierde uno de los cromosomas
21 por un fenmeno de anafase retardada en la primera mitosis del cigoto,
produce un mosaico cromosmico 46, XX o XY / 47, XX o XY, + 21.
La repercusin fenotpica de los mosaicismos celulares como eventos
poscigticos depende del momento de la etapa de segmentacin donde esto
ocurra y, por tanto, del nmero de clulas afectadas que quedan formando es-
tructuras trofoblsticas o embrioblsticas y, en estas ltimas, de su destino
embrionario y de los mecanismos de proliferacin, migracin, diferenciacin y
apoptosis que le correspondan a estas.
Se puede entonces concluir que todas las aberraciones cromosmicas de
nmero ya mencionadas, como mutaciones genmicas presentan anormalida-

N
des fenotpicas especficas que se tratarn ms adelante.

CI
Aberraciones cromosmicas de estructura

UC
OD
Las aberraciones cromosmicas estructurales ocurren por la existencia de
puntos de ruptura del ADN donde se determinan rearreglos, suficientemente,
PR
extensos para ser observados por las tcnicas citogenticas. Constituyen muta-
ciones cromosmicas y se distinguen en balanceadas y no balanceadas.
RE

Son aberraciones cromosmicas balanceadas cuando el defecto no implica


prdida o exceso de ADN, sino anormalidades en la direccin o localizacin
SU

fuera de lugar de los segmentos de ADN involucrados y el individuo no presen-


DA

ta anormalidades especficas en el fenotipo aun cuando pudieran presentar anor-


malidades durante las gametognesis como se ver ms adelante.
BI

Las aberraciones cromosmicas estructurales no balanceadas se caracteri-


I

zan porque hay excesos o defectos parciales de segmentos cromosmicas y


OH

el individuo afectado expresa en su fenotipo alguna anormalidad cuya severidad


PR

depende del cromosoma involucrado y la magnitud del defecto.


Las aberraciones cromosmicas estructurales se clasifican en:
Deleciones.
Duplicaciones.
Isocromosomas.
Translocaciones.
Inversiones.

Deleciones

Las deleciones se definen como la prdida de un segmento de un cromosoma.


Por su origen, las deleciones pueden ser eventos o mutaciones de novo, debidas
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 123
a la accin de agentes mutgenos como las radiaciones ionizantes que hacen
diana en el ADN o ser el resultado de la segregacin anormal de un rearreglo
estructural balanceado en uno de los parentales, como se detallar ms adelante.
Pueden ser terminales e intersticiales, de acuerdo con el nmero de puntos
de rupturas; uno en el caso de las terminales y dos en las intersticiales, perdin-
dose el segmento intermedio a los dos puntos de ruptura.
Las deleciones tambin producen cromosomas en anillo, cuando se presenta
doble delecin terminal y el ADN se repara y se pierden los extremos rotos.
Este tipo de defecto genera en el cariotipo una monosoma parcial de los brazos
cortos o largos del cromosoma involucrado del cual se puede perder: todo el
telmero, un pequeo fragmento, o un segmento subtelomrico mayor (Fig. 8.5).

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 8.5. Tipos de deleciones. a) Delecin terminal de brazos cortos cromosoma 4 y


delecin terminal de brazos largos cromosoma 7. b) Doble delecin terminal de p y q con
reparacin formando un anillo del cromosoma 13. c) Delecin intersticial de un segmen-
to de brazos largos del cromosoma 18.
124 Introduccin a la Gentica Mdica

Duplicaciones

Como su nombre indica, es una duplicacin de segmentos cromosmicos. Un


mecanismo puede ser el entrecruzamiento desigual entre cromosomas homlogos
que ocurre en la profase de la primera divisin meitica y que tambin puede
generar deleciones intersticiales. Como en las deleciones tambin pueden ser el
resultado de gametos con segregaciones anormales en portadores de aberra-
ciones estructurales balanceadas. Este tipo de defecto genera en el cariotipo
trisomas parciales (Fig. 8.6).

N
CI
UC
OD
PR

Fig. 8.6. Mecanismo de produccin de duplicaciones y fotografa de duplicacin de


RE

brazos cortos del cromosoma 9.


SU
DA

Isocromosomas
BI
I

El trmino isocromosoma se utiliza para designar un defecto que ocurre du-


OH

rante la separacin de cromtidas hermanas en la meiosis II o en las mitosis


PR

poscigticas, generando cromosomas anormales, los cuales contienen doble in-


formacin de los brazos involucrados. Este defecto se ha observado en el
cromosoma X, y con menor frecuencia en brazos cortos de los cromosomas 12
y 18. Cuando el gameto femenino porta un isocromosoma del brazo largo del X,
al ser fecundado por un espermatozoide que porte el cromosoma X normal,
tericamente, produce un cigoto, el cual presenta trisoma parcial del brazo
largo y monosoma parcial del brazo corto (Fig. 8.7).
Otro mecanismo de formacin del isocromosoma es el intercambio que
involucra el extremo proximal al centrmero entre cromtidas hermanas de
cromosomas homlogos, generando isocromosomas isodicntricos, en los cua-
les el centrmero doble es difcil de detectar citogenticamente, por estar muy
unidos.
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 125

Fig. 8.7. Esquema de formacin de isocromosoma y fotografa de isocromosoma de


brazos largos del cromosoma X.

Translocaciones

N
CI
Este tipo de defecto ocurre cuando hay ruptura de, al menos, dos cromosomas

UC
y la reparacin se produce intercambiando los fragmentos rotos de los
cromosomas involucrados. Los cromosomas involucrados suelen ser no
OD
homlogos. Hay dos tipos de translocaciones: recprocas y no recprocas.
Las translocaciones recprocas involucran a cualquier cromosoma (Fig. 8.8)
PR
y las que ocurren por fusin centromrica, que consiste en la ruptura de los
RE

centrmeros o pericentromricas y reparacin, fusionando centrmeros o com-


partiendo uno (Fig. 8.9). Estas ltimas tambin reciben el nombre de
SU

robertsonianas y ocurren entre cromosomas acrocntricos.


Las inserciones se consideran translocaciones no recprocas, pues se produ-
DA

cen cuando existe ruptura en dos cromosomas y el segmento roto de uno se


BI

inserta en el otro, pero sin intercambio de material.


I
OH
PR

Fig. 8.8. Translocacin recproca entre brazos cortos del cromosoma 1 con punto de
ruptura en p 31 y brazos cortos del cromosoma 11 con puntos de ruptura en p 14 e
intercambio del segmento del cromosoma 1 desde p31 hasta regin terminal del telmero
(p ter) en 11 p14 y del segmento 11 p 14 hasta p ter en el cromosoma 1.
126 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 8.9. Seis posibilidades de separacin de los cromosomas involucrados en la


translocacin, de estos, por cada meiosis solo se obtendrn cuatro gametos y las alter-
nativas al ser fecundados por gametos normales, son: A) 50 % cariotipo normal y 50 %
portador balanceado de la translocacin igual que el progenitor; B) 50 % trisoma parcial
13q y monosoma parcial 4q y 50 % trisoma parcial 4q y monosoma parcial 13q; C) 50 %
trisoma casi completa del 4 y monosoma casi completa del 13 y 50 % trisoma casi
completa del 13 y monosoma casi completa del cromosoma 4.
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 127
Un individuo portador de estos tipos de translocaciones presenta tericamen-
te todos sus genes. Sus manifestaciones no pueden ser detectadas por el simple
examen fsico, a menos que en los puntos de ruptura se pierda algn segmento
o, incluso, algunos pares de bases importantes, en la estructura de algunos genes
que puedan expresarse en el fenotipo del individuo portador.
Cuando el individuo portador de este tipo de rearreglo llega a la edad
reproductiva puede presentar historia de infertilidad, abortos espontneos, muer-
tes fetales e hijos con aberraciones cromosmicas no balanceadas.
Las figuras 8.9 y 8.10, muestran un esquema de posibles segregaciones en
los gametos de los cromosomas involucrados tanto en translocaciones recprocas
como robertsonianas.

Translocaciones robertsonianas

N
CI
Se trata del intercambio de material entre cromosomas homlogos como re-
sultado de un entrecruzamiento desigual o por fusin centromrica entre una

UC
pareja de homlogos acrocntricos (translocaciones homlogas).
Las translocaciones entre acrocntricos homlogos denominadas transloca-
OD
ciones robertsonianas o por fusin centromrica ocurren muchas veces debido
PR
a inestabilidades centromricas, y se tratan de isocromosomas 13/13; 14/14 y
21/21, citados en la literatura.
RE

Cuando esto ocurre la informacin gentica de ambos cromosomas es prc-


ticamente igual y procede de un solo progenitor por lo que se pueden interpretar
SU

como disomas uniparentales, ms que verdaderas translocaciones.


Ms adelante se explica la repercusin en el fenotipo y en la historia
DA

reproductiva de individuos con estos tipos de translocaciones balanceadas.


BI
I

Inversiones
OH
PR

Consisten en rupturas y reparaciones invertidas del segmento cromosmico


involucrado. Se clasifican en dos grupos: paracntricas, si no incluyen al
centrmero, y pericntricas, si lo incluyen (Fig. 8.11).
Los individuos portadores de estos defectos, como en el caso de las
translocaciones, tampoco presentan prdida aparente de material gentico, pero
los resultados de sus gametognesis suelen ser anormales, pues en el aparea-
miento de los cromosomas homlogos, el contacto entre las secuencias de ba-
ses requiere acomodar el segmento invertido, dando lugar a lo que se denomina
bucle de inversin. Las consecuencias en la segregacin, de acuerdo con el tipo
de inversin de los cromosomas involucrados en los gametos se detallan ms
adelante.
Cules son las aberraciones cromosmicas no balanceadas?
128 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 8.10. a, b y c son los gametos probables, la fecundacin por gametos normales de
los gametos obtenidos en a, origina individuos con cariotipos normales o portadores de
translocacin balanceada, en b generan trisomas por translocacin del cromosoma 21,
y monosomias del cromosoma 21, en c se generan trisomas 14 y las monosomas 21 y 14.
Las trisomas 14, y las monosomas 14 y 21 son anormalidades de nmero no viables, por
lo que de seis posibles tipos de gametos solo tres son viables: el portador balanceado,
el normal y trisoma 21 por translocacin. Esto significa que un portador balanceado de
translocacin 14;21, tiene un tercio de probabilidad de tener un hijo sndrome de Down.
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 129

Fig. 8.11. Inversin pericntrica del cromosoma 1.

Todas las aberraciones cromosmicas de nmero y las aberraciones cromos-


micas estructurales siguientes: deleciones, duplicaciones e isocromosomas.

N
Es decir todas las aberraciones cromosmicas que afecten al genoma por
exceso o por defecto del complemento diploide cromosmico, caracterstico del

CI
genoma humano.

UC
Cules son las aberraciones cromosmicas balanceadas?
Las inversiones y las translocaciones. Los defectos que implican anormali-
OD
dades de la estructura del cromosoma, detectables a la observacin microscpi-
ca, sin que falte o sobre en apariencia ningn segmento significativo de ADN.
PR
RE

Inversiones y su repercusin en la gametognesis


SU

En las inversiones, los segmentos involucrados reparan los puntos de ruptura


DA

segn los mecanismos moleculares de reparacin del ADN, pero invirtiendo la


BI

orientacin del segmento involucrado. Cuando en este fenmeno de ruptura y


I

reparacin no se han perdido segmentos de ADN, se considera que el genoma


OH

est balanceado. En el fenotipo del individuo no se aprecian anormalidades que


se pudieran relacionar con el rearreglo cromosmico en cuestin, a menos que
PR

en el punto de ruptura y reparacin se pierda algn segmento de ADN que


afecte el funcionamiento gentico del individuo como se trata ms adelante.
Los efectos de este tipo de aberraciones cromosmicas aparentemente solo
repercuten, en la produccin de sus gametos, que presentan desbalances
genmicos segn sea la inversin, paracntrica o pericntrica.
En la historia reproductiva del individuo, se puede predecir por el anlisis
terico de la segregacin de los cromosomas involucrados, la alta probabilidad
de gametos con anormalidades en su genoma haploide, cuyo efecto se traduce
como: infertilidad y abortos espontneos, entre los defectos ms frecuentes, y la
probabilidad de lograr descendencia cromosmicamente, normal, depende del
tipo de inversin, de la extensin del segmento involucrado y del cromosoma
involucrado.
130 Introduccin a la Gentica Mdica

Las inversiones pericntricas, al configurar la sinapsis entre cromosomas


homlogos y ocurrir entrecruzamiento entre sus cromtidas incluidas en el bu-
cle de inversin, generan cromosomas recombinantes, los cuales se caracteri-
zan por duplicaciones y deleciones de segmentos cromosmicos. Se pueden
formar:
Alternativas de gameto normal o gameto portador de la inversin.
Alternativas de gametos con los cromosomas recombinantes anormales que
al ser fecundados pueden originar cigotos trismicos o monosmicos para
estos fragmentos.

De igual forma ocurre para las inversiones paracntricas. Pero en estos ca-
sos los cromosomas recombinantes son acntricos o dicntricos y los gametos
que resultan, generalmente, al ser fecundados no llegan a ser viables de manera

N
que los individuos portadores de esta inversin tienen historia de infecundidad o

CI
abortos, ms que de hijos malformados mltiples.
Se puede sospechar que las inversiones son no balanceadas cuando en el

UC
proceso de ruptura y reparacin se produce prdida de algn segmento de ADN,
que interfiere con los mecanismos moleculares de expresin de genes codificantes.
OD
En estos casos el fenotipo del individuo puede presentar numerosas anormalida-
des clnicas, como corresponde a los tipos no balanceados de defectos.
PR
RE

Translocaciones y su repercusin en la gametognesis


SU

La gametognesis en individuos portadores de translocaciones balanceadas,


DA

tiene caractersticas diferenciales, tanto para las translocaciones recprocas,


BI

como para las robertsonianas o por fusin pericntrica.


I

La insercin (que se puede considerar como una translocacin no recproca)


OH

aparece cuando se provoca un tipo de defecto entre cromosomas, por el que


ocurren tres puntos de ruptura; dos puntos de ruptura en un cromosoma y un
PR

solo punto de ruptura en el otro cromosoma, de modo que al ocurrir la repara-


cin, el segmento intersticial generado por los dos puntos de ruptura, se repara
o inserta en el cromosoma donde ocurri una sola ruptura.
Al final de la reparacin, en el cromosoma con dos puntos de ruptura, falta
un segmento que se encuentra insertado en el cromosoma donde ocurri un solo
punto de ruptura.
En resumen, un cromosoma pierde un segmento sin recibir nada del otro
cromosoma en el que este segmento se insert. Tambin es un tipo de rearreglo
balanceado, entre cromosomas generalmente no homlogos, si en el proceso de
ruptura y reparacin no se ha perdido ningn fragmento de ADN.
Durante las etapas de profase de la gametognesis, de un individuo portador
de translocacin balanceada entre cromosomas no homlogos, los cromosomas
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 131
homlogos contactan para formar la sinapsis de las cadenas de ADN de las
cromtidas homlogas, generando figuras en forma de cruz, que reciben el nom-
bre de cuatrivalentes al participar, simultneamente, en la ttrada: los no
translocados y los translocados los cuatro cromosomas.
Estas ttradas que se originan en la profase I, se mantienen en la metafase
I y al arribar a la anafase I, la separacin de los cromosomas, origina diversas
posibilidades, al concluir la meiosis I, que repercuten en la meisois II (ver
figuras 8.9 y 8.10).
Durante la anafase I, al separarse la figura cuatrivalente, puede ocurrir una
segregacin denominada alterna, en la cual los dos cromosomas no homlogos
normales migran hacia un polo celular, formando un gameto normal; mientras
que los dos cromosomas no homlogos con segmentos translocados lo hacen
hacia el otro polo celular, formando un gameto portador de translocacin balan-

N
ceada y otro cromosmicamente normal.

CI
Cuando este tipo de segregacin ocurre, la translocacin balanceada se pue-
de trasmitir de generacin en generacin.

UC
Existen otras alternativas entre las que se encuentran las denominadas:
Adyacente 1.
Adyacente 2. OD
PR
Estas siempre originan gametos con genoma haploide no balanceado debido
RE

a la presencia de uno de los cromosomas involucrados en la translocacin, pro-


duciendo duplicaciones o deleciones del cromosoma afectado y, cuando se pro-
SU

duce la fecundacin con un gameto no afectado, el genoma del cigoto resultante


DA

presenta trisomas o monosomas parciales.


Cuando esto ocurre, al cromosoma translocado, segregado al gameto en cues-
BI

tin, se le denomina derivativo (der), que puede ser materno (mat) o paterno
I

(pat), segn sea la procedencia parental del cromosoma translocado.


OH

Otras alternativas de segregacin algo ms complejas se salen de los prop-


PR

sitos de este texto.


Este esquema es comn para todas las translocaciones balanceadas. En es-
tos casos siempre hay probabilidad de segregacin alterna y por tanto estos
individuos pueden tener hijos sanos con cariotipos normales o portadores balan-
ceados como su progenitor, as como hijos con aberraciones cromosmicas no
balanceadas, o historia de infertilidad, abortos espontneos, hijos con malforma-
ciones mltiples, que pueden fallecer de manera precoz cuando el desbalance
no es viable, o vivir presentando los defectos fenotpicos, que se mencionan ms
adelante.
Hasta aqu se explica por qu, en algunas familias hay ms de una persona
afectada con igual defecto del cariotipo y antecedentes de infertilidad, de abor-
tos espontneos del primer trimestre del embarazo, muertes fetales, muertes
132 Introduccin a la Gentica Mdica

neonatales, como parte de la amplia variabilidad de expresin de los mltiples


desbalances cromosmicos, que pueden ocurrir en el cariotipo humano.

Expresin de las aberraciones cromosmicas


no balanceadas

Las aberraciones cromosmicas se presentan, con una frecuencia de 0,5 %


de nacidos vivos, pero al propio tiempo se han observado en 60 % de abortos
espontneos.
En la actualidad, debido a las posibilidades que ofrecen las tcnicas de ban-
das y el estudio de cromosomas prometafsicos y profsicos, existen como
mnimo tres aberraciones de nmero o estructurales por cada par cromosmico.

N
En algunos pares cromosmicos se reportan ms tipos de aberraciones que

CI
en otros y esto se debe, fundamentalmente, a las posibilidades de viabilidad de
los cigotos afectados.

UC
Los cromosomas, en los cuales se reporta, un mayor nmero de aberracio-
nes cromosmicas viables, son los cromosomas sexuales X y Y.
OD
Las manifestaciones clnicas y el fenotipo de las personas afectadas, tienen,
PR
para cada aberracin y para cada par cromosmico, caractersticas especficas.
Este fenotipo se ha podido caracterizar bien en las aberraciones cromosmicas
RE

ms frecuentes, como en el sndrome Down; sin embargo, aun en las aberracio-


nes cromosmicas que involucran a los cromosomas autosmicos y que se obser-
SU

van con menor frecuencia, se ha podido hacer un anlisis de sus manifestaciones


fenotpicas que, a su vez, han permitido caracterizar aspectos comunes, y cuyo
DA

conocimiento puede alertar sobre la sospecha de la causa gentica.


BI

El conocimiento de los elementos clnicos comunes constituye un instrumen-


I

to valioso para cualquier mdico especialista y, sobre todo, para el mdico gene-
OH

ral integral, en su tarea de interconsulta con el especialista en gentica clnica.


PR

Caractersticas fenotpicas de aberraciones


cromosmicas autosmicas no balanceadas

Estos criterios pueden ser resumidos como:


Anormalidades anatmicas que varan de acuerdo con el cromosoma
involucrado y la magnitud del segmento involucrado; pueden ser defectos
congnitos debido a anormalidades de los genes del desarrollo (que se men-
cionan con ms detalles en el captulo 17) y de pequeos defectos de crneo,
cara, manos, pies y genitales (regiones acrales del cuerpo) que, de forma
general, se producen por crecimientos desproporcionados de partes fetales
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 133
durante el desarrollo embriofetal, y pueden ser consecuencias de defectos
congnitos subyacentes ms severos.
Anormalidades del crecimiento y del desarrollo, que pueden estar presentes
al nacimiento o que se comienzan a observar en etapas posnatales.
Anormalidades del funcionamiento del sistema nervioso central, que originan
discapacidades mentales variables, las cuales incluyen, desde trastornos del
aprendizaje, hasta retraso mental o defectos conductuales.

La variabilidad y magnitud del fragmento o del cromosoma afectado, deter-


mina que no estn presentes todos los criterios, pero los ms consistentes lo
constituyen el efecto en el sistema nervioso y, en especial, la deficiencia mental
y las anormalidades anatmicas.

N
Anormalidades de estructuras anatmicas

CI
Las anormalidades de las estructuras anatmicas por desbalance genmico

UC
en la morfognesis se pueden presentar como elementos dismrficos visibles
desde el nacimiento. Se refieren a malformaciones de estructuras anatmicas
OD
mayores y menores, atendiendo a la severidad en su repercusin funcional,
PR
esttica o ambas, o como malformaciones.
El estudio y anlisis de los defectos congnitos entran en el campo de la
RE

dismorfologa (nombre que recibe la especializacin mdica) de la observacin


y significado de estos defectos, en el curso del desarrollo embrionario.
SU

Como efecto del desbalance genmico por aberraciones cromosmicas no


balanceadas se pueden observar desde malformaciones extremadamente seve-
DA

ras, hasta simples evidencias del desarrollo desproporcionado de una parte fetal
BI

y que, por s mismo, no llegan a ser evaluados como una verdadera malforma-
I

cin, sino como un pequeo defecto fuera de lo comn y al que se suele deno-
OH

minar signo dismrfico (ver captulo 17).


Las aberraciones cromosmicas ms comunes se caracterizan por un con-
PR

junto de signos dismrficos persistentes, que, por la frecuencia con que apare-
cen permiten sospechar el diagnstico clnico, con la simple observacin del
individuo. Tal es el caso del individuo sndrome Down en el que hay evidencia
de correlacin entre el examen fsico y la aberracin en el cromosoma 21
involucrado.
Un conjunto dismrfico (patrn de signos dismrficos) est formado por un
grupo de signos dismrficos, que en ocasiones se consideran variantes norma-
les de forma o de tamao; no existe una delimitacin entre un signo dismrfico
y lo normal.
A diferencia de la malformacin, el signo dismrfico no afecta de forma
adversa la funcin de un rgano, pero s tiene un efecto esttico. Sin embargo,
en ocasiones es difcil separar un hecho dismrfico de una malformacin; por
134 Introduccin a la Gentica Mdica

ejemplo, una vula bfida podra ser evaluado como un signo dismrfico, mien-
tras que la hendidura del paladar blando como una malformacin.
Un elemento dismrfico puede aparecer en cualquier parte del cuerpo, pero
las reas ms afectadas son: cara, genitales y extremidades distales (manos y pies).
Algunos ejemplos en la cara incluyen: tamao, forma y posicin poco comn
de las orejas; fisuras palpebrales, distancia interocular anormalmente grande
(hipertelorismo) o pequea (hipotelorismo) pliegue que cubre el canto interno o
ngulo interno del ojo (epicanto) desviaciones hacia arriba (mongoloide) o hacia
abajo (antimongoloide) de las fisuras palpebrales, tamao y forma de la nariz
(nariz pequea, ventanas nasales en anteversin, raiz nasal deprimida) ; mand-
bula pequea (micrognatia), grande (macrognatia) retrada (retrognatia) promi-
nente (prognatia), configuracin del paladar muy alto (ojival) y perfil facial
aplanado, cncavo o convexo.
Todos estos posibles signos dismrficos reflejan un crecimiento despropor-

N
cionado de una parte fetal durante la embriognesis.

CI
En cada caso pueden existir variaciones durante el crecimiento posnatal y
con frecuencia el adulto afectado no muestra el dismorfismo que tuvo de nio.

UC
La edad adecuada para la evaluacin de un patrn dismrfico es entre la
OD
tercera y cuarta semanas posteriores al nacimiento, y antes de los 2 aos de
edad, ya que en este perodo las deformidades por presiones internas y del
PR
parto, prcticamente, han desaparecido, y el dismorfismo no ha disminuido en
severidad.
RE

Constituyen hechos dismrficos en las extremidades distales: la presencia


aberrante de los pliegues de flexin palmar, la clinodactilia del quinto dedo, la
SU

forma de la mano, las caractersticas de las uas, la separacin entre primero y


segundo dedos de los pies, la presencia de surco profundo entre estos, la promi-
DA

nencia del taln, pliegues, almohadillas; es decir, caractersticas que no llegan a


BI

constituir una malformacin severa, por ejemplo, falta de falanges, ausencia de


I

uas, polidactilia, sindactilia pequeas (unin de dedos), y otras malformaciones


OH

frecuentes de extremidades.
En los genitales: un pene pequeo, bolsas escrotales hipoplsicas, testculos
PR

pequeos o muy grandes, hipoplasia de labios mayores o menores, todas las


variantes que, por s mismas, no constituyan una malformacin.
En un individuo con una aberracin cromosmica son menos frecuentes las
malformaciones congnitas aisladas y no tienen el mismo valor clnico que cuando
se encuentran asociadas a un conjunto de tres o ms signos dismrficos.
Por otra parte, una combinacin de varias malformaciones puede ser la ex-
presin caracterstica de una aberracin cromosmica, no solo la presencia de
una malformacin aislada. Por ejemplo, un paladar hendido aislado no tiene el
mismo valor para el diagnstico de una trisoma 14q proximal que cuando est
asociado con hipotelorismo, nariz prominente, labios finos y boca caracterstica.
Las combinaciones de varias malformaciones son importantes para sospe-
char aberraciones cromosmicas especficas, por ejemplo, en la trisoma 18 que
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 135
adems de un dismorfismo craneofacial con orejas faunescas, microrretrognatia,
occipucio prominente, pies en mecedora (taln prominente) y marcado retraso
del crecimiento, pueden estar presentes las malformaciones siguientes: fstula
traqueoesofgica, aplasia radial, cardiopatas y malrotacin intestinal.
Con frecuencia se observan en el fenotipo de individuos con aberraciones
cromosmicas autosmicas, malformaciones congnitas asociadas a un patrn
dismrfico, estas se relacionan a continuacin:
Defectos congnitos del corazn y de los grandes vasos.
Paladar hendido, labio leporino o ambos.
Atresia esofgica, fstula traqueoesofgica, atresia anal y fstula anal.
Malrotacin del intestino, mesentrica comn y onfalocele.
Malformaciones renales y del tracto urinario.
Malformaciones cerebrales, las ms frecuentes: la holoprosencefalia y la

N
agenesia del cuerpo calloso.
Ausencia o hipoplasia del radio y del pulgar.

CI
Polidactilia posaxial y preaxial de los pies.

UC
Microftalmia y coloboma ocular.
Espina bfida (occipital o lumbar).
OD
Genitales ambiguos e hipospadia.
PR
Otras malformaciones, poco comunes en aberraciones cromosmicas
RE

autosmicas, son:
Anencefalia.
SU

Gastroquisis.
Extrofia de vejiga o cloaca.
DA

Siringomelia.
BI

Peromelia, amelia, facomelia, ectrodactilia.


I

Atresia del yeyuno o leo.


OH

Situs inverso total.


PR

Artrogriposis congnita.
Defectos perineales o cubitales.

Como regla general, los pacientes con severo retraso mental y del crecimien-
to intrauterino presentan malformaciones severas con mayor frecuencia y mue-
ren de forma ms precoz, que pacientes con las mismas aberraciones, pero con
mejor peso y tamao al nacimiento.
Las anormalidades esquelticas que se presentan en los individuos con abe-
rraciones cromosmicas, generalmente, son disostosis o anormalidades anat-
micas selectivas a uno o varios huesos y no son tan especficas. Estas
anormalidades incluyen:
Forma y nmero anormal de vrtebras y costillas.
136 Introduccin a la Gentica Mdica

Forma anormal de la pelvis.


Epfisis cnica seudoepfisis.
Retraso en la maduracin sea.
Anormalidades menores en metacarpianos, metatarsianos y falanges.

Anormalidades en el crecimiento y desarrollo

Una caracterstica comn a muchas de las aberraciones cromosmicas


autosmicas es la baja talla; esta puede ser evidente durante la vida fetal y
apreciarse como un crecimiento intrauterino retardado.
La baja talla puede ser evidente despus del nacimiento del nio afectado, o
sea, en la vida posnatal. Al evaluar el crecimiento y desarrollo del nio puede
ocurrir que sea mucho ms lento y con frecuencia declina hasta valores de talla

N
inferiores al tercer percentil para su edad, aun cuando haya nacido con una

CI
longitud dentro de lmites normales.

UC
Anormalidades en el sistema nervioso
OD
Cada aberracin cromosmica presenta caractersticas especficas de su
PR
desarrollo neurolgico.
RE

El desarrollo mental vara dentro de ciertos lmites en los cuales hay diferen-
tes factores como:
El defecto cromosmico per se (desbalance cromosmico).
SU

Los factores genticos familiares, herencia multifactorial de la inteligencia


DA

(como se trata en el captulo 16).


Las influencias adversas intrauterinas y perinatales.
BI

Las consecuencias de malformaciones cerebrales, sordera, ceguera, limita-


I

ciones motoras y otros.


OH
PR

La mayora de los pacientes con mosaicos, por ejemplo, para la trisoma 8


presentan retraso mental de forma ligera o moderada, una minora es inteligen-
te o severamente retrasados, y en estos casos se ha observado agenesia del
cuerpo calloso.
En sentido general, el coeficiente de inteligencia (CI) vara alrededor de 50,
algunos tienen retraso profundo cuando presentan malformaciones del sistema
nervioso central,como la holoprosencefalia, otros como el sndrome 4p- presen-
tan severo retraso mental siempre y epilepsia difcil de tratar.
En general el desarrollo del lenguaje est afectado. La coordinacin motora
no est muy daada, las funciones intelectuales que requieren concentracin y
memoria son pobres y la adaptacin social, con frecuencia, es buena.
En ocasiones las causas del retraso mental no son anormalidades en el desa-
rrollo anatmico de las estructuras cerebrales, sino la sobredosis de productos
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 137
proteicos de uno o de varios genes especficos o la deficiencia de otros, las que
determinan un neurodesarrollo caracterstico.
La conducta presenta rasgos distintivos para algunas aberraciones cromos-
micas, que se pueden potenciar debido a factores ambientales familiares y so-
ciales.
Algunos pacientes con aberraciones menos conocidas pueden ser ansiosos,
hiperactivos, autoagresivos o tener rasgos de conducta autista.
En sentido general, cuando no hay malformaciones especficas que determi-
nen funcionamiento severo del sistema nervioso central (SNC), suelen respon-
der muy bien al estmulo psicopedaggico temprano, y a desarrollar lenguaje y
habilidades tcnicas importantes en su integracin familiar y social.
El mejor ejemplo de esto es el sndrome Down. En estos pacientes se obser-
va un panorama diferente en los ltimos aos.

N
CI
Caractersticas fenotpicas de las aberraciones

UC
de cromosomas sexuales
OD
Existen notables diferencias entre las aberraciones cromosmicas autosmicas
PR
y las aberraciones cromosmicas del X y del Y.
RE

Anormalidades en el crecimiento y desarrollo


SU

El retraso del crecimiento no es una caracterstica constante, aunque s espe-


DA

cfica en la monosoma X, no lo es en las aberraciones estructurales del X, ni en


BI

aberraciones que contienen el cromosoma Y, en las cuales hay un incremento


I

en la talla, como ocurre en los sndromes 47, XXY y 47, XYY.


OH

En el sndrome 45, X se aprecia una pequea longitud en el recin nacido que


se mantiene en la nia y la adolescente, y que siempre es inferior al tercer
PR

percentil, siendo el crecimiento muy lento.

Dismorfismos

No son especficos para sndromes como: XXX, XXY o el XYY; sin embar-
go un patrn de signos dismrficos es muy caracterstico para la monosoma X
y polisomas X, tales como la tetra X, pentasoma X y el sndrome tetra XY.
El patrn dismrfico del sndrome de Turner (45, X) se caracteriza por: cara
triangular, hendiduras parpebrales oblicuas hacia abajo, que pueden ser peque-
as y se observa epicanto. Las comisuras labiales se dirigen hacia abajo, el
paladar es muy alto y estrecho (ojival), y los dientes pueden estar mal implantados.
138 Introduccin a la Gentica Mdica

El mentn es pequeo y hacia atrs (retrognatia). Las orejas pueden tener


implantacin baja. El cuello es corto y ancho con pterigium colli (pliegue
membranoso que se extiende de la regin mastoidea a la acromial). El cabello
en la nuca es de implantacin baja y en tridente. El trax es ancho con separa-
cin exagerada de las mamilas (teletelia).
Las manos son cortas, con acortamiento del cuarto metacarpiano. Con anor-
malidades de las articulaciones de codos y rodillas. Uas hiperconvexas, estre-
chas e hipoplsicas.
Presentan mltiples malformaciones cardiovasculares y renales. Adems, se
caracterizan por pobre desarrollo o ausencia de ovarios, tero infantil, por lo que
son infrtiles.
Por su parte, el sndrome Klinefelter o sndrome XXY no presenta notables
elementos dismrficos al nacimiento y los defectos congnitos se relacionan

N
con anomalas genitales como hipospadia, criptorquidia (no ocurre descenso de
los testculos a las bolsas escrotales). Son altos para su edad y en la pubertad no

CI
desarrollan los caracteres sexuales secundarios debido a la disgenesia gonadal

UC
que presentan, nico aspecto comn que caracteriza a la monosoma X y la
trisoma XXY.
OD
En ambos sndromes, no es comn el retraso mental y cuando existe algn
defecto cognitivo de este tipo, se relaciona con retardo del aprendizaje y anor-
PR
malidades neuropsicolgicas, probablemente, producto de interacciones gnicas
RE

y epigenticas o secundarias a la coincidencia de factores ambientales, tanto


prenatales, como perinatales. La herencia familiar de defectos cognitivos de
SU

este tipo requiere, cuando esto ocurre, atencin mdica y psicopedaggica ade-
cuada.
DA

En cambio, cuando el nmero de cromosomas X aumenta, se incrementa el


BI

retraso mental, que puede ser profundo en las poliploidas del X, como en los
I

sndromes tetra XY y en las pentasomas del X.


OH

La tabla 8.1, resume caractersticas comunes de un grupo de aberraciones


cromosmicas autosmicas y sexuales.
PR

Tabla 8.1. Caractersticas comunes de aberraciones cromosmicas autosmicas y sexuales

Defectos comunes a las aberraciones cromosmicas de cromosomas autosmicos

Aberraciones Defectos Crecimiento y Defectos


cromosmicas anatmicos desarrollo neurolgicos

Fenotipos comunes Son frecuentes: defectos Defecto de crecimiento Epilepsia, retraso


a las aberraciones congnitos mayores, prenatal (crecimiento del desarrollo del
cromosmicas malformaciones menores intrauterino retardado). lenguaje, defectos
no balanceadas o signos dismrficos Baja talla visuales, auditivos,
de cromosomas proporcionada de autismo, retraso
autosmicos comienzo posnatal. mental.
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 139
Continuacin Tabla 8.1

Aberraciones Defectos Crecimiento y Defectos


cromosmicas anatmicos desarrollo neurolgicos

47, XX o 47, XY, Cardiopatas congnitas Nacen algo pequeos, Retraso mental de
+21.46, XY o 46, en casi el 50%, patrn de pero en general la baja severo a moderado,
XX -14, t (D; 21) signos dismrficos talla se hace ms evidente coeficiente de
46, XX o 46, XY craneofaciales, despus del nacimiento. inteligencia (CI) de
-21, t (21; G). microcefalia. Tienen tendencia a 25 a 50, hipotona
la obesidad. muscular a veces
Retraso de la severa.
maduracin sea.

47,XX o 47, XY Desarrollo incompleto Bajo peso y baja talla de Convulsiones,

N
+13 ; 46 XX o 46, del cerebro anterior comienzo prenatal. puede haber
XY+13/47 XX o (holoprosencefalia); hipertona o

CI
47, XY+13 defectos del desarrollo hipotona debido
Trisomas parciales de nervios olfatorio y a la severidad y

UC
con frecuencia por ptico, microcefalia, variaciones de
fusin centromrica microftalmia, labio y malformaciones del
con acrocntricos
del grupo D,
OD
paladar hendidos,
polidactilia de manos
SNC. Mueren
alrededor de los tres
PR
incluyendo al y pies, cardiopata das de nacidos, 80 %
cromosoma 13, congnita, patrn no sobrepasa el mes
RE

y cromosomas del dismrfico con con muy mala


grupo G. hemangiomas capilares. calidad de vida.
SU

47, XY o 47, XX, Cardiopatas congnitas, Nacen bajo peso, inferior Severa deficiencia
DA

+18; 46, XX o 47, defectos de vas biliares, a 2 340 g, al nacimiento. mental, despus
XY / 47, XX o 47, hipoplasia del timo, Tienen severa hipoplasia del periodo neonatal
BI

XY, + 18. defectos renales, aplasia posnatal y de tejido son hipertnicos,


I

Cariotipos con radial, microcefalia, celular subcutneo. Los dificultad en su


OH

trisomas parciales patrn de signos que logran sobrevivir alimentacin por


del cromosoma 18. dismrficos, entre los mantienen su crecimiento defectos de succin,
PR

defectos ms frecuentes. y desarrollo inferior los que sobreviven


a lo normal. no logran caminar
ni hablar.

46, XX 46, XY, Cardiopata congnita, Peso al nacer bajo, Severa hipotona,
del (5p) 46, XX o patrn dismrfico inferior a 2 500g. llanto especial como
46, XY, 5p- al nacer dado por cara Crecimiento posnatal el maullido de un
Monosomas redonda, epicanto, lento. gato (sndrome
parciales de 5p. hipertelorismo. del maullido del
gato). Retraso
mental severo.
140 Introduccin a la Gentica Mdica

Continuacin Tabla 8.1

Caractersticas especficas de las aberraciones cromosmicas no balanceadas de


cromosomas sexuales ( X y Y)

Aberraciones Defectos Crecimiento y Defectos


cromosmicas anatmicos desarrollo neurolgicos

45, X y sus variantes: Cardiopata congnita, Baja talla de comienzo No presentan


45, X/46, XY; 46, XX el defecto ms frecuente prenatal, con diversidad retraso mental
/ 45,X; 46, Xi (Xq es la presencia de vlvula de anomalas seas. su CI es de 90 o
o Xp). artica bicspide, Pueden tener linfedema superior.
Deleciones parciales coartacin de la aorta. congnito. Tienen trax Aproximadamente
del cromosoma X Riones en herradura. ancho (en escudo). 50 % tiene defectos
en brazos p o q. Patrn de signos de audicin.

N
dismrficos.
Disgenesia gonadal y

CI
por tanto infertilidad.

UC
47, XXY; 46, XY/ Se observan pocos Nacen de buen peso Su CI tiene una
47, XXY y sus defectos congnitos, a veces son mayores media de 85 a 90,
variantes: 48, XXYY,
48, XXXY.
ocasionalmente
OD
criptorquidia, pene
de 50 cm al nacimiento.
En el desarrollo posnatal
por lo que no
presentan retraso
PR
pequeo, hipospadia. son nios altos de mental, aunque
Presentan, como en el extremidades largas. pueden tener
RE

sndrome 45, X, historias de


disgenesia gonadal por problemas de
lo que tambin son conducta,
SU

infrtiles. dificultades para la


lectura y trastornos
DA

del control
BI

muscular fino.
46, XYY No son frecuentes los Nacen de buen peso Su CI est entre
I

defectos anatmicos ni y talla y en su 80 y 140, pueden


OH

tiene un patrn de signos desarrollo posnatal ser hiperactivos con


dismrficos que los suelen ser altos. Su dificultad en el
PR

caracterice. Ocasionalmente desarrollo puberal es control de su


se ha reportado normal y no son temperamento.
criptorquidia e infrtiles. Suelen tener una
hipospadia. conducta agresiva
que aprender a
controlar.
Mutaciones que afectan a los cromosomas humanos 141
Resumen

Las aberraciones cromosmicas pueden involucrar a todo el complemento


cromosmico, como ocurre en las poliploidas, o solo involucrar a cromosomas
de pares especficos como ocurre en las aneuploidas y en estas ltimas involu-
crar, tanto a cromosomas autosmicos como a cromosomas sexuales (X y Y), y
su defecto se debe a la no disyuncin de los cromosomas en cualquiera de las
dos divisiones meiticas, o tambin pueden aparecer cuando se produce una
anafase retardada.
Las aberraciones cromosmicas estructurales pueden ser balanceadas (in-
versiones y translocaciones) o no balanceadas (deleciones, duplicaciones e
isocromosomas).
El trmino balanceado, desde el punto de vista gentico, significa que a pesar

N
de la existencia del defecto cromosmico, el individuo se comporta fenotpi-
camente sano, la expresin de su defecto cromosmico ocurre en la etapa

CI
reproductiva, y en ellos se presentan fallos que van, desde infertilidad y abortos

UC
espontneos, hasta malformados mltiples y muerte neonatal.
Cuando la anormalidad del cariotipo es no balanceada, las manifestaciones
OD
fenotpicas dependen: del tipo de anormalidad cromosmica, de la magnitud del
defecto de la mutacin y de los genes afectados en el cromosoma involucrado.
PR
Cuando se trata de cromosomas autosmicos la manifestacin clnica ms
RE

frecuente y notable es el retraso mental, pero adems, pueden existir


discapacidades visuales, auditivas o motoras. Cuando participan los cromosomas
SU

sexuales, el fenotipo se correlaciona con el nmero de cromosomas X o Y


involucrados y con la magnitud del defecto estructural.
DA

Los mecanismos de no disyuncin y anafase retardada pueden ser fenme-


BI

nos que se producen en las mitosis, fundamentalmente en los primeros estadios


I

del cigoto, y generan mosaicismos cromosmicos somticos. Puede ocurrir la


OH

observacin de dos o ms lneas celulares cuando se realiza el cariotipo.


La expresin fenotpica de las aberraciones cromosmicas, es un fenmeno
PR

que siempre est presente:


En las aberraciones cromosmicas balanceadas al producir gametos que
pueden aparecer en la historia familiar de padres de nios con diversas
discapacidades o en parejas que no pueden tener el hijo deseado, como antece-
dentes de infertilidad, subfertilidad, abortos espontneos, muertes fetales, muer-
tes neonatales o sea historia de fallos reproductivos.
En el caso de aberraciones cromosmicas no balanceadas, de cromosomas
autosmicos, es comn la presencia de ms de tres signos dismrficos, malfor-
maciones congnitas, retraso del crecimiento y desarrollo, y retraso mental es el
ms constante y se presenta en un gran espectro de gradaciones.
Las aberraciones cromosmicas que involucran a los cromosomas X o Y no
tienen caractersticas fenotpicas comunes. Su fenotipo debe ser evaluado de
142 Introduccin a la Gentica Mdica

forma individual. Los sndromes ms frecuentes como la monosoma X (sndro-


me Turner) y la trisoma XXY (sndrome Klinefelter) tienen como caracterstica
comn la disgenesia gonadal (gnadas no funcionales o ausentes). El retraso
mental severo es mayor en los individuos que presenta un gran nmero de
cromosomas X tales como, XXXX, XXXXX, XXXXY, XXXYY, denominados
tambin poliploidas del X.

Bibliografa
De Grouchy, J., Turleau, C., R. Bagura Candela (1978): Atlas de las Enfermedades Cromosmicas.
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edicin. Elsevier Saubders.
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UC
York: Walter de Gruyter.
Stevenson, R.E., J.G. Hall (2006): Human Malformations and Related Anomalies. 2nd Oxford.
University Press.
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR
Transmisin de simples mutaciones 143

Captulo 9 TRANSMISIN DE SIMPLES


MUTACIONES

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Las enfermedades con caractersticas hereditarias, observadas en diferentes fami-
OD
lias, aparecen en la historia de la gentica mdica desde los primeros aos del
siglo XIX. En esa etapa no se conocan las leyes de Mendel y sin embargo, ya
PR
existan observaciones relacionadas con la herencia del defecto del abuelo al
RE

nieto por medio de su hija; o tambin de la transmisin vertical de un padre a un


hijo afectado y de este a los nietos; o de la existencia de igual sndrome en dos
SU

hermanos, hijos de padres no afectados.


Con los conocimientos actuales, estas regularidades se han agrupado y se
DA

han podido establecer criterios que permiten identificar las leyes de Mendel,
BI

evaluando los individuos, fenotpicamente afectados en las familias, y de este


modo, seguir la segregacin familiar de simples mutaciones.
I
OH

En el ao 1960, Victor Mckusick public, bajo el nombre Mendelian


Inheritance in Man (MIM), el primer catlogo que reuni todas las herencias
PR

de rasgos ligados al cromosoma X, en la naciente poca de la gentica mdica.


Con posterioridad el catlogo incluy rasgos con transmisiones familiares, de
acuerdo con las leyes de Mendel, involucrando a cromosomas autosmicos.
Este catlogo se ha convertido en un instrumento de referencia obligada, para el
estudio de la gentica humana, mdica y clnica.
En la actualidad, el catlogo aparece como un sitio digital, permanentemente,
actualizado bajo el nombre OMIM (Online Mendelian Inheritance in Man).
Por medio de Infomed, al acceder a este sitio, en mayo de 2010, OMIM regis-
traba 12 428 loci autosmicos, 609 en el cromosoma X y 35 en el Y, con genes
cuyas secuencias son conocidas y reportaban mutaciones, en al menos, 1 781
loci en cromosomas autosmicos, el X y el Y, que se expresan como enferme-
dades genticas, las cuales siguen regularidades de las leyes de Mendel y an
sus bases moleculares y secuencias de genes permanecen desconocidas.
144 Introduccin a la Gentica Mdica

Se conoce como herencias mendelianas a las regularidades de la transmisin


de simples mutaciones de acuerdo con las leyes de Mendel en el ser humano. A
su estudio se dedica este captulo.

Cromosomas autosmicos y sexuales


De los 23 pares de cromosomas contenidos en el ncleo celular, existen 22 a
los que se denominan autosmicos y un par que se relaciona con el sexo, y
nombrados sexuales. Los cromosomas sexuales se conocen, a su vez, como X y Y.
Desde el punto de vista del contenido de ADN y de la forma y tamao de
estos cromosomas, hay notables diferencias entre el sexo masculino y femeni-
no; aspecto este descrito en el estudio de los cromosomas humanos, en el captulo 6.
En el hombre, la pareja de cromosomas sexuales est formada por un

N
cromosoma X y uno Y, siendo el genotipo cromosmico XY, mientras que en la

CI
mujer ambos cromosomas sexuales son X, siendo el genotipo cromosmico XX.
Qu importancia tiene este conocimiento para el anlisis de la transmisin

UC
de los genes y caracteres en el humano?
El cromosoma Y est involucrado con la determinacin del sexo. Este
OD
cromosoma contiene genes especficos para la diferenciacin de la gnada
PR
primitiva, hacia la formacin de un testculo y tambin genes relacionados
con la espermatognesis.
RE

Solo una pequea porcin de genes del cromosoma Y, es homloga con el


cromosoma X. Estos segmentos de ADN homlogos entre las regiones ter-
SU

minales Xp y Yp reciben el nombre de regiones seudoautsomicas. Esta


DA

homologa les permite a ambos cromosomas mantenerse unidos durante la


profase I y la metafase I de la meiosis I (Fig. 9.1).
BI

Las diferencias en el resto de ambos cromosomas explican que el hombre


I

genotpicamente, para la informacin contenida en este par cromosmico, se


OH

comporta como hemicigtico. Con este trmino se define el genotipo que


PR

contiene un solo representante de un par de alelos, cuyo locus se encuentra


en el cromosoma X (Fig. 9.2).
La determinacin del sexo depende de la fecundacin de un espermatozoide
portador de un cromosoma X o de un cromosoma Y. La gnada primitiva
indiferenciada en presencia de dos cromosomas X, se transforma en ovario,
mientras que en presencia de un cromosoma X y uno Y, se transforma en
testculo.
El vulo siempre contiene un cromosoma X y sus diferencias genticas de-
penden del origen materno o paterno de los alelos contenidos en este
cromosoma X sin embargo, los espermatozoides tienen la probabilidad de
portar, de manera alternativa, 50 % del cromosoma X (siempre de origen
materno) o 50 % del cromosoma Y (siempre de origen paterno), al finalizar
la espermatognesis (Figs. 9.3 y 9.4).
Transmisin de simples mutaciones 145

N
CI
UC
Fig. 9.1. Esquema del cromosoma Y. TDF: factor determinante testicular; SRY: regin
determinante del sexo en el cromosoma Y; AZF: factor azoospermia.
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 9.2. Esquema del cromosoma X. XIST: inactivacin especfica de transcritos del X;
XIC: centro de inactivacin del X.

Uno de los dos cromosomas X de la mujer se inactiva y permite la compen-


sacin de dosis de protenas codificadas por los genes de la molcula de
ADN del X, por igual en hombres y mujeres. Este proceso de inactivacin, se
encuentra bajo el control del gen transcrito especfico del cromosoma X in-
activo conocido como XIST (del ingles X inactivation specific transcript)
(Fig. 9.2), que tiene caractersticas especiales, ya que se expresa en el
cromosoma X inactivo.
146 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
Fig. 9.3. Esquema de la fecundacin por espermatozoides portadores del genoma haploide,
en el que se porta el cromosoma X o el Y.

UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH

Fig. 9.4. Esquema de la fecundacin de gametos femeninos, teniendo en cuenta el


PR

origen materno y paterno de los cromosomas X.

Herencias mendelianas en el humano


La clasificacin de las herencias mendelianas en el humano depende de dos
factores:
El cromosoma donde se encuentre localizado el gen en estudio.
Las caractersticas de la expresin fenotpica de este.

Teniendo en cuenta a ambos factores, las herencias pueden ser clasificadas en:
Autosmicas: dominantes o recesivas.
Ligadas al cromosoma X: dominantes.
Transmisin de simples mutaciones 147
Ligadas al cromosoma X: recesivas.
Ligadas al cromosoma Y.

Simbologa para la confeccin del rbol genealgico


El rbol genealgico, es la herramienta fundamental, para la identificacin de
estos cuatro tipos de herencia mendeliana, en el humano.
La confeccin del rbol genealgico (conocido tambin como pedigree o
pedigr trminos, inicialmente, utilizados en gentica para referirse a la genealo-
ga de un animal de raza) requiere del conocimiento previo de smbolos interna-
cionales, por medio de los cuales los genetistas se pueden comunicar de forma
resumida, con gran cantidad de informacin sobre una familia de varias genera-
ciones utilizando un lenguaje comn (Fig. 9.5).

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 9.5. Simbologa internacional para la confeccin del rbol genealgico.

Otro aspecto de importancia, es el desarrollo de habilidades acerca de cmo


dirigir el interrogatorio, de forma tal, que permita obtener la informacin nece-
saria para la construccin del rbol genealgico y, al propio tiempo, seguir en las
generaciones familiares, la segregacin de los genes involucrados en la expre-
sin del carcter de un fenotipo determinado, como objeto de estudio.
148 Introduccin a la Gentica Mdica

El rbol genealgico permite identificar la relacin filial de cada uno de los


parientes del propositus, nombre que recibe el individuo que motiva el inicio del
estudio. Conocer las generaciones fliales es un detalle de gran valor, ya que los
familiares de primer grado tienen entre ellos una probabilidad de mayor similitud
en su genoma (Fig. 9.6).

N
CI
UC
OD
PR
Fig. 9.6. Relacin filial en las familias.
RE
SU

Herencia autosmica dominante


DA

El primer ejemplo aparece en la figura 9.7. La transmisin de la mutacin se


BI

produce de padres a hijos, sin distincin de sexo. Se puede suponer que el rasgo
I

o enfermedad en estudio se conoce como A. Se puede simbolizar al gen


OH

mutado, con la letra A(mayscula) y el tipo salvaje o no mutado con la letra a


(minscula). El genotipo de los individuos afectados A, es heterocigtico (Aa)
PR

y el de los no afectados es homocigtico recesivo (aa). Los gametos del indivi-


duo I-1, portan la mutacin A, o el gen tipo salvaje a, con 50 % de probabilidad,
en tanto que 100 % de los gametos de I-2 siempre portan el alelo a.

Fig. 9.7. rbol genealgico correspondiente a un defecto gentico, cuya mutacin se


expresa con criterios de herencia autosmica dominante.
Transmisin de simples mutaciones 149
El individuo afectado heterocigtico Aa transmite con el gameto que porte el
cromosoma con la mutacin, el defecto A, a 50 % de sus descendientes
independientemente del sexo de sus hijos.
En este tipo de herencia, la ausencia de otros familiares afectados por igual
enfermedad y la ausencia de antecedentes maternos o paternos de la enfermedad,
en un individuo afectado por la mutacin A, tiene como explicacin la aparicin
de una mutacin de novo, en la familia en cuestin, a partir del primer individuo
afectado. Estas mutaciones son responsables, en ocasiones, de enfermedades
genticas con efecto fundador, o sea enfermedades generalmente de comien-
zo en el adulto, determinadas por un gen de expresin fenotpica dominante,
que aparecen con alta frecuencia en una poblacin local, a partir de un primer
individuo afectado.
Un ejemplo ilustrativo se observa en la regin venezolana del Lago Maracaibo,

N
donde se ha detectado una alta frecuencia de la enfermedad Huntington, intro-

CI
ducida en esta localidad en los primeros aos del siglo XIX.
En Cuba, la ataxia espinocerebelosa tipo II, en la provincia de Holgun, tiene

UC
igual caracterstica para explicar el origen y su alta frecuencia en esta regin.
Ambas enfermedades exhiben herencia autosmica dominante de expresin
OD
tarda, se hace evidente cuando el individuo afectado ya ha tenido hijos. Este
PR
aspecto, relacionado con las frecuencias poblacionales de mutaciones, se trata
en el captulo 15.
RE

Se han reportado ms de 8 005 mutaciones con expresin dominante de


genes localizados en cromosomas autosmicos.
SU

Por lo general, los individuos afectados por enfermedades monognicas


DA

autosmicas dominantes presentan un genotipo heterocigtico. Esto se debe a


las mutaciones de novo, a la disminucin de la aptitud reproductiva y tambin a
BI

la baja frecuencia de estos defectos, que hacen poco probable la unin en la que
I

ambos miembros de la pareja se encuentren afectados por la misma mutacin y,


OH

probablemente tambin, a que la severidad que se puede esperar de un


PR

homocigtico para la mutacin causante de una enfermedad determine que sea


muy poco viable.
El anlisis de segregacin de los genes en los gametos de una pareja, en la
que uno de los progenitores sea heterocigtico, se ilustra en el cuadrado de
Punnet (mtodo empleado por R.C. Punnet en 1911 para el anlisis de la segre-
gacin de los genes).
Matrimonio de la I-1 / I-2, mostrado en la figura 9.6 (Tabla 9.1).
De cuatro de las probabilidades de fecundacin por los gametos maternos y
paternos, 50 % podrn ser heterocigticos. Se debe tener en cuenta que si bien
los gametos de I-2, siempre transmiten el gen a, cada gameto recibe con el alelo
a, el cromosoma autosmico que, a su vez, el progenitor recibi de su padre y
madre, respectivamente (ver captulo 5).
150 Introduccin a la Gentica Mdica

Tabla 9.1. Unin de progenitor I-1(Aa) con I-2 (aa)

Progenitores I-2 Genotipo aa

I-1Genotipo Aa Gametos a a
A Aa Aa
a aa aa

Herencia dominante ligada al cromosoma X

Un nuevo ejemplo de herencia mendeliana aparece en la figura 9.8.


Si se observa detenidamente, el rbol genealgico debe llamar la atencin
que el defecto se debe a una mutacin con expresin dominante C, ya que se
cumple el requisito de que los individuos afectados tienen a uno de sus padres

N
tambin afectado. Sin embargo, observe que en este ejemplo, los hombres en-

CI
fermos nunca transmiten la enfermedad a sus hijos varones, mientras que trans-
miten el cromosoma X a todas sus hijas y con este, la mutacin C, por lo que

UC
todas las hijas, expresan la enfermedad como su padre.
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 9.8. rbol genealgico que ejemplifica el patrn de herencia dominante ligada al
cromosoma X. Los hombres afectados son hemicigticos para la mutacin y transmiten
el cromosoma X a todas sus hijas que expresarn el defecto C.

En este caso el gen mutado C se encuentra localizado en el cromosoma X y


como los cromosomas X y Y estn involucrados en la determinacin del sexo,
los individuos con el genotipo afectado deben ser analizados atendiendo a su
sexo cromosmico, es decir, XX la mujer y XY el hombre.
Transmisin de simples mutaciones 151
Como el gen mutado C est localizado en el cromosoma X, las mujeres
pueden tener 3 genotipos: XC /XC; XC/Xc y Xc/Xc, siendo este ltimo
homocigtico recesivo, el nico que expresa el fenotipo normal para el ca-
rcter en estudio.
En el hombre solo son posibles dos genotipos: XC/Y y Xc/Y, en su carcter
de hemicigtico.
El hombre sano de este ejemplo tiene un genotipo Xc/Y. El genotipo de I-1 es
hemicigtico XC/Y y su pareja I-2 es homocigtica recesiva no afectada Xc/Xc.
Los gametos de I-1 (espermatozoides), son de dos tipos segn la presencia
de los cromosomas sexuales: XC y Y. Obsrvese que con el cromosoma X se
transmite el gen mutado C. Los gametos de I-2 son todos Xc.
Esta pareja tiene una probabilidad de tener descendientes afectados, depen-
diendo del sexo; en tanto que todas sus hijas padecern fenotpicamente la

N
enfermedad y genotpicamente sern heterocigticas; los hijos de I-1 siempre

CI
tendrn genotipo y fenotipo no afectados.
La mujer afectada II-3, al ser heterocigtica, transmitir sus cromosomas X,

UC
tanto a sus hijos varones, como a sus hijas hembras, con una probabilidad
OD
de 50 % de transmitir, junto con este, la mutacin que expresa la enfermedad
C. Esta es una herencia dominante ligada al cromosoma X
PR
RE

Tabla 9.2. Unin del progenitor I-1(XC/Y) con I-2 (Xc/Xc)

Progenitores I-2 Genotipo Xc/Xc


SU

I-1Genotipo XC /Y Gametos Xc Xc
DA

XC XC/Xc XC/Xc
Y Xc/Y Xc/Y
BI
I
OH

Matrimonio de la I-1 / I-2 de la figura 9.8 (Tabla 9.2).


Todas las hijas de este tipo de pareja sern heterocigticas, fenotpicamente,
PR

afectadas por la enfermedad C.


De los varones, 50 % tienen probabilidad de ser afectados fenotpicamente,
al igual que las hembras (Tabla 9.3).

Tabla 9.3. Unin del progenitor II-2a (XC/Y) con II-2 (XC/Xc)

Progenitores II-2 Genotipo XC /Xc

II-2a Genotipo XC /Y Gametos XC Xc


Xc XC/Xc Xc/Xc
Y XC/Y Xc/Y
152 Introduccin a la Gentica Mdica

Resumen de las herencias dominantes

Los individuos afectados presentan en su genotipo el alelo mutado.


Cada individuo afectado tiene a uno de sus progenitores tambin afectado,
con la excepcin de los casos con mutaciones de novo, ya que el progenitor
afectado transmite el alelo mutado a 50 % de sus gametos, mientras que el
progenitor no afectado solo transmite el alelo tipo salvaje o con el gen no
mutado a 100 % de sus gametos.
Cada individuo afectado tiene una probabilidad de 50 % de transmitir el alelo
mutado a su descendencia.
La descendencia del hombre afectado es decisiva para determinar la locali-
zacin autosmica o ligada al cromosoma X de la mutacin en estudio.
En las herencias en las que el alelo mutado se encuentra en un cromosoma
autosmico, el hombre afectado tiene igual probabilidad de tener hijos, varo-

N
nes o hembras afectadas.

CI
En las herencias en las que el alelo mutado se encuentra en el cromosoma X,

UC
el hombre afectado nunca tendr hijos varones afectados, ya que el sexo se
define por la fecundacin del vulo por un espermatozoide con el cromosoma Y.
OD
Sin embargo, todas sus hijas se encuentran afectadas, ya que el alelo mutado
est en el cromosoma X, y el sexo femenino es el resultado de la fecundacin
PR
del vulo por el espermatozoide portador del cromosoma X, que en este caso
RE

siempre presenta la mutacin que expresa el carcter dominante.


SU

Herencia autosmica recesiva


DA

En el rbol genealgico que aparece en la figura 9.9 se observa a dos herma-


BI

nos afectados. Los padres de los hermanos afectados son sanos o no afectados,
I

al igual que el resto de la familia. Esa informacin permite idenificar al gen


OH

mutado con la letra b (minscula) y los individuos normales son genotpicamente


PR

homocigticos (BB) o heterocigticos (Bb).


Los padres de los hijos afectados se comportan, por sus genotipos, como un
cruzamiento entre F1 de los experimentos mendelianos, expuestos en el captulo 5.
Los genotipos de la pareja II-2 / II-3 para la enfermedad, sern genotpicamente
heterocigticos (Bb), mientras sus hijos afectados por la enfermedad b son
homocigticos recesivos (bb). Al requerirse la presencia de los dos genes mutados
para que se exprese la enfermedad b, es posible identificar, en el rbol
genealgico, una herencia autosmica recesiva.
La pareja de heterocigticos, II-2 / II-3, tiene una probabilidad de 25 % de
tener otro hijo enfermo, independientemente de cul sea su sexo.
En el siguiente cuadrado de Punnet (Tabla 9.4) se expone la probabilidad que
tiene la pareja de tener hijos afectados y sus genotipos.
Transmisin de simples mutaciones 153

Fig. 9.9. rbol genealgico que ejemplifica una herencia autosmica recesiva. Los
matrimonios consanguneos entre primos hermanos, primos segundos u otros paren-

N
tescos son una caracterstica frecuente en estos tipos de herencia y los individuos
afectados b son homocigticos recesivos.

CI
UC
Tabla 9.4. Unin del progenitor II-2(Bb) con II-3(Bb)

Progenitores
ODGametos
II-3 Genotipo Bb
B b
PR
1I-2 Genotipo Bb B BB Bb
B Bb bb
RE
SU

Los hijos sanos de parejas heterocigticas o portadoras, para rasgos


autosmicos recesivos, pueden ser, tanto homocigticos para el alelo no mutado,
DA

como heterocigticos, con 25 % de probabilidad para el primer genotipo y 50 %


BI

para el segundo.
I

Un hijo sano, de una pareja en la que ambos son heterocigticos, tiene 2/3 de
OH

probabilidad de tener genotipo heterocigtico. De cada tres hijos sanos de la


pareja, dos son heterocigticos (ver cuadrado de Punnet).
PR

Para determinaciones de probalilidades con fines de asesoramiento gentico,


se hace necesario utilizar esa probabilidad para hermanos sanos de un enfermo,
a menos que exista una prueba, la cual permita detectar a los heterocigticos en
la familia en estudio, ese es el caso de la enfermedad anemia de clulas
falciformes o sicklemia.
Al realizar una electroforesis de hemoglobina de una muestra de sangre del
individuo sano, es posible conocer, si la persona presenta o no la mutacin para
la hemoglobina S.
Una mutacin para un carcter recesivo, se segrega durante varias genera-
ciones sin expresarse y solo se expresa cuando una pareja de individuos
heterocigticos o portadores tienen descendencia. En estos casos, la pareja
tiene 25 % de probabilidad de tener hijos afectados, independiente de su sexo.
154 Introduccin a la Gentica Mdica

Las enfermedades genticas poco frecuentes con este tipo de herencia, pro-
vienen (con alta probabilidad) de matrimonios entre individuos consanguneos,
como se observa en la figura 9.9, ya que la probabilidad de individuos
heterocigticos resulta mucho mayor dentro de las familias emparentadas.
Existen poblaciones aisladas con un ancestro comn, heterocigtico por una
nueva mutacin de expresin recesiva, en las que los individuos portadores para
la mutacin se van acumulando y la probabilidad de que individuos de una pareja
sean portadores en esa poblacin, se incrementa y tambin en la poblacin se
incrementa la probabilidad de individuos homocigticos de ambos tipos, al
incrementarse los matrimonios consanguneos.
Este fenmeno explica que en estos tipos de poblaciones, la frecuencia de
una enfermedad o de varias enfermedades, generalmente muy raras, con
herencia autosmica recesiva, sean mucho ms frecuentes.

N
La ocurrencia de matrimonios entre individuos consanguneos, es un indica-

CI
dor que permite medir la frecuencia de la mutacin recesiva en una poblacin,
por ejemplo, si la frecuencia de consanguinidad es muy elevada, en los padres

UC
de individuos que expresan una enfermedad autosmica recesiva especfica, la
frecuencia de la mutacin es baja, y a la inversa, si la frecuencia de matrimonios
OD
entre consanguneos para la enfermedad en cuestin es muy baja, significa que
PR
la mutacin es alta. Esto es comn en la poblacin en estudio. En Cuba, la
frecuencia de heterocigticos para la mutacin de la anemia de clulas
RE

falciformes, es superior a 8 % en regiones orientales del pais.


SU

Se han reportado 1 730 mutaciones con expresin fenotpica recesiva, de


genes localizados en cualquiera de las secuencias de ADN, de los 22 pares de
DA

cromosomas autosmicos.
BI

Gran cantidad de mutaciones en loci, cuyos genes codifican para protenas


I

con funciones de enzimas, producen errores innatos del metabolismo, los cuales
OH

presentan criterios de transmisin de herencias autosmicas recesivas. Esto se


debe a que el heterocigtico para la mutacin tiene el alelo normal, y la produc-
PR

cin de protenas enzimticas funcionales a partir de este, resulta suficiente


para la funcin adecuada de la va metablica de que se trate; sin embargo el
individuo homocigtico para la mutacin no tiene esta alternativa y expresa la
enfermedad al producirse un bloqueo de la va metablica involucrada.

Herencia recesiva ligada al cromosoma X

La figura 9.10, muestra un rbol genealgico con criterios de una herencia


recesiva ligada al cromosoma X . En este caso, la enfermedad se expresa como
defecto D y la mutacin es recesiva. Se diferencia de la herencia anterior,
porque las hijas del hombre hemicigtico afectado (genotipo Xd/Y) son
Transmisin de simples mutaciones 155

N
CI
Fig. 9.10. rbol genealgico que ejemplifica una herencia recesiva ligada al cromosoma

UC
X. Las hijas del hombre afectado son todas heterocigticas o portadoras de la mutacin.

OD
heterocigticas (XD/Xd) al recibir en el espermatozoide del padre el cromo-
PR
soma X con la mutacin. En este tipo de herencia, las mujeres no expresan
RE

la enfermedad, aunque transmiten la mutacin a 50 % de sus hijos varones. A


su vez, los varones afectados en la familia, se relacionan unos con otros por
SU

medio de mujeres heterocigticas. Las mujeres solo expresan la enfermedad si


fueran homocigticas recesivas Xd / Xd, lo que resulta infrecuente para enfer-
DA

medades severas.
BI

Denominar la enfermedad, ligada al cromomosoma x , est en corresponden-


I

cia con el compromiso de loci en el cromosoma X , cuyos genes estn, adems,


OH

comprometidos con la diferenciacin gonadal. En el captulo 13, se trata sobre


el fenmeno de ligamiento y recombinacin, o sea, la transmisin de genes
PR

vecinos en una misma molcula de ADN.


El cromosoma X tiene 696 loci, de estos, 609 tienen secuencias conocidas y
se han reportado, al menos, 495 mutaciones de genes localizados en el
cromosoma X , que muchas de estas se expresan como enfermedades recesivas
ligadas al cromosoma X .
Un ejemplo de defecto gentico con este tipo de herencia se observa en las
hemofilias A y B.
Matrimonio de la I-1 / I-2 de la figura 9.10 (Tabla 9.5).
Las hijas del individuo hemicigtico afectado son siempre heterocigticas o
portadoras de la mutacin y, como los hijos reciben el cromosoma Y de su
padre, el hombre enfermo no tiene descendencia enferma, aunque transmite la
mutacin a sus nietos por medio de sus hijas portadoras.
156 Introduccin a la Gentica Mdica

Tabla 9.5. Unin del progenitor I-1(Xd/Y) con I-2(XD/XD)

Progenitores I-2 Genotipo XD/XD

I-1Genotipo Xd/Y Gametos XD XD


Xd XD/Xd XD/Xd
Y XD/Y XD/Y

Matrimonio de la II-2 / II-3 segn la figura 9.10 (Tabla 9.6).


De la descendencia femenina, 50 % es heterocigtica y 50 % de los varones
son hemicigticos afectados. De la descendencia de una pareja de mujer
heterocigtica y hombre sano, 25 % puede ser afectada, pero siempre los
afectados son varones, a diferencia de las herencias autosmicas recesivas, en
ambos miembros de la pareja, son heterocigticos y 25 % de probabilidad de los

N
posibles hijos afectados, es independiente del sexo.
Matrimonio III-1 / III-2, figura 9.10 (Tabla 9.7).

CI
Si el genotipo de III-2 es XD/XD, los hijos siempre son sanos para esta

UC
enfermedad.

OD
Tabla 9.6. Unin del progenitor II-3 (XD/Y) con II-2 (XD/Xd)
PR
Progenitores II-2 Genotipo XD/Xd
RE

II-3Genotipo XD/Y Gametos XD Xd


XD XD/XD XD/Xd
Y XD/Y Xd/Y
SU
DA

Tabla 9.7. Unin del progenitor III-1(XD/Y) con III-2(XD/XD)


BI
I

Progenitores III-2 Genotipo XD/XD


OH

III-1Genotipo XD/Y Gametos XD XD


PR

XD XD/XD XD/XD
Y XD/Y XD/Y

La presencia de un hijo afectado en la cuarta generacin del rbol genealgico


identifica a la mujer III-2 como heterocigtica obligada y la probabilidad de otro
hijo varn afectado es igual a la de la mujer II-2, que es portadora o heterocigtica
obligada por ser hija de un hombre afectado.

Resumen de las herencias recesivas

Las herencias recesivas se caracterizan porque los padres de los individuos


afectados son, fenotpicamente, sanos.
Transmisin de simples mutaciones 157
Los padres de los individuos afectados por herencias autosmicas recesivas
son heterocigticos obligados y tienen 25 % de probabilidad de tener hijos
afectados por la misma enfermedad, cada vez que tengan nueva descendencia.
Los individuos con herencias autosmicas recesivas, lo son independientes
del sexo, y pueden existir hermanos hombres y mujeres afectados en una
misma generacin.
En las herencias autosmicas recesivas, se observa con gran frecuencia
matrimonios entre individuos consanguneos.
En las herencias autosmicas recesivas, es de gran importancia, la deteccin
de portadores (heterocigticos) no afectados, con objetivos preventivos.
En las herencias recesivas ligadas al cromosoma X, la condicin de hemi-
cigticos en los varones determina la expresin del gen recesivo, aun en una
simple dosis, por lo que, los varones expresan la enfermedad mientras que las
mujeres, al ser heterocigticas, son portadoras sanas.

N
En los rboles genealgicos de familias afectadas por herencias recesivas
ligadas al cromosoma X, los varones que padecen la enfermedad, se encuen-

CI
tran emparentados con mujeres portadoras.

UC
En las herencias recesivas ligadas al cromosoma X, las mujeres portadoras
tienen 50 % de probabilidad de dar hijos varones afectados, mientras sus
OD
hijas tienen 50 % de probabilidad de ser portadoras sanas.
PR

Herencia ligada al cromosoma Y


RE

La transmisin de los genes que se encuentran en la regin seudoautosmica


SU

ya referida (Fig. 9.1), que permite la sinapsis de los cromosomas X y Y en la


profase de la meiosis I, no se diferencia de la estudiada en las herencias
DA

autosmicas, y se le denomina herencia seudoatosmica, pero los genes locali-


BI

zados en el resto del cromosoma Y segregan solo a travs de los varones que
I

presentan la mutacin.
OH

Se conocen 45 loci en el cromosoma Y y se han reportado al menos 27 genes


mutados, con efectos en el fenotipo.
PR

Ejemplos de estos son: la retinosis pigmentaria ligada al cromosoma Y; el


factor azoospermia-1; el gonadoblastoma; antgeno de histocompatibilidad Y
(HY); el receptor de la interleuquina-3; el factor determinante testicular (TDF);
la regin del cromosoma Y (SRY), que determina el sexo y otros caracteres con
consecuencias fenotpicas menos delineadas.
La herencia de rasgos cuyos loci se encuentran en el cromosoma Y, tambin
recibe el nombre de herencia holndrica.

Herencias influidas por el sexo y limitadas al sexo

Una mutacin puede estar influida por el sexo, esto se debe a efectos del
metabolismo endocrino, que diferencian al hombre y a la mujer.
158 Introduccin a la Gentica Mdica

Por ejemplo, la calvicie se debe al efecto de un gen que se expresa como


autosmico dominante; sin embargo en una familia con la segregacin de este
gen, solo los hombres padecen de calvicie y las mujeres tendrn el cabello ms
escaso despus de la menopausia.
Otro ejemplo puede ser la deficiencia de la enzima 21- hidroxilasa que inter-
viene en la va del metabolismo de los glucocorticoides. Cuando esta enzima
est ausente, la sntesis de glucocorticoides se desplaza hacia la formacin de
testosterona y esta hormona est comprometida en la embriognesis de los
genitales externos del varn, por lo que su presencia anormal en el desarrollo
de un feto femenino produce la virilizacin de los genitales femeninos, mientras
que en el caso de un feto varn, solo incrementa el desarrollo de los genitales
externos masculinos.
Cuando no hay otras complicaciones ms severas, una anormalidad de este

N
tipo permite el diagnstico clnico al nacimiento, ms rpido en una nia, que en
un nio, basado en el examen de los genitales virilizados de la recin nacida.

CI
En las herencias limitadas al sexo, como su nombre indica, pueden estar

UC
comprometidas mutaciones de genes, con loci en cromosomas autosmicos,
cuya expresin solo ocurre en rganos del aparato reproductor masculino o
OD
femenino. Un ejemplo es el defecto congnito septum vaginal transverso, otro
la deficiencia de 5 alfa reductasa que convierte a la testosterona en
PR
dihidrotestosterona, y que acta en la diferenciacin de los genitales externos
RE

masculinos, por lo que su ausencia simula genitales femeninos cuando el nio


nace.
SU

En ambos ejemplos la herencia es autosmica recesiva. En el primer caso, el


hombre aun homocigtico recesivo, no manifiesta el fenotipo, ya que carece de
DA

vagina y, en el segundo no se expresa en mujeres homocigticas para la muta-


BI

cin, ya que el desarrollo de los genitales externos femeninos no requiere de la


dihidrotestosterona para su desarrollo, por lo que la ausencia de esta hormona,
I
OH

no le afecta.
Existen un grupo de fenmenos que dificultan el anlisis de la segregacin
PR

de simples mutaciones y que estn en relacin con la interaccin gentica y


ambiental de los genes involucrados, entre estos se encuentran la expresividad
variable, penetrancia reducida, efecto pleiotrpico, de simples mutaciones, la
heterogeneidad gentica y clnica a la luz de los conocimientos actuales, las
caractersticas de la inactivacin del cromosoma X, la presencia de mutacio-
nes de novo, el efecto de letalidad de simples mutaciones. Cada uno de estos
fenmenos, sern descritos con ms detalles a continuacin.

Expresividad de un gen o mutacin especfica

El trmino expresividad se utiliza para referirse al grado de severidad que se


puede identificar en un fenotipo por una mutacin especfica. En trminos
Transmisin de simples mutaciones 159
clnicos, la expresividad variable, es sinnimo de gravedad. En sentido general,
la expresin de un gen depende de la relacin de este con el resto del genoma,
pero tambin depende de la relacin genoma ambiente.
Para referirse a estas gradaciones fenotpicas se utiliza el trmino expresivi-
dad variable del gen o de la mutacin.
La expresividad variable, para definir o identificar una transicin dominante,
de una simple mutacin que se encuentra en estudio, es un fenmeno que se
debe tener en cuenta al confeccionar el rbol genealgico. La bsqueda de
manifestaciones fenotpicas, ms o menos severas de la enfermedad en los
miembros de la familia, permite seguir la segregacin de la mutacin y evaluar
adecuadamente los criterios para llegar a definir un tipo de herencia mendeliana,
de no tenerlos en cuenta, el anlisis de segregacin de la mutacin en el rbol
genealgico induce a errores en la evaluacin de los criterios y las conclusiones
pueden ser errneas al no identificar a individuos afectados con gradaciones

N
del fenotipo expresado por la mutacin en estudio.

CI
En el interrogatorio para la confeccin del rbol, cuando la variacin de la
expresin de la enfermedad en cuestin es muy amplia, y estn involucrados

UC
muchos sntomas y signos fenotpicos, se debe tener en cuenta, que los miem-
bros de la familia, severamente afectados, que son interrogados, generalmente
OD
no reconocen como enfermos a los familiares con expresiones ligeras o menos
graves y los consideran individuos normales o que, por ausencia an de snto-
PR
mas, no se haya reconocido como afectado en la familia, de ah la importancia
RE

de acompaar el interrogatorio por el examen fenotpico de los familiares.


SU

Penetrancia de un gen o de una mutacin especfica


DA

Penetrancia es la denominacin que se emplea para referirse a la expresin


BI

de rasgos o caracteres que se evidencian en el fenotipo. Como se define, expre-


I

sin fenotpica es un trmino del todo o nada y se expresa en porcentaje. Un


OH

gen que tiene penetrancia completa, es un gen que se expresa en 100 %, o lo


PR

que es lo mismo, cuando est presente en el genotipo, siempre se expresa en el


fenotipo. Generalmente se refiere a mutaciones de expresin dominante en
genotipos heterocigticos.
Si la mutacin se expresa en menos de 100 % de los individuos heterocigticos,
se define como una mutacin, con una penetrancia reducida y ese individuo,
aparentemente, sano para el carcter o enfermedad que se estudia en la familia,
puede transmitir la mutacin a su descendencia en 50 %, como corresponde en
herencias dominantes, y estos expresar el defecto.
La penetrancia reducida parece ser el efecto de la relacin de la mutacin
con otros genes del genoma, con los cuales se encuentra interactuando. Cuando
esto ocurre, es difcil la identificacin a partir del examen fenotpico de un indi-
viduo afectado y, al confeccionar el rbol genealgico, solo es posible reconocer
el fenmeno, si el individuo tiene hijos fenotpicamente afectados.
160 Introduccin a la Gentica Mdica

Cuando la mutacin est bien caracterizada, desde el punto de vista molecular,


es posible aplicar estudios moleculares, con alguno de los mtodos que se des-
criben en el captulo 12, a personas fenotpicamente sanas para enfermedades
de expresin dominante del defecto en estudio, que tiene probabilidad de 50 %,
de haber heredado la mutacin de uno de sus padres, en enfermedades que se
conoce que tienen penetrancia reducida.
Los estudios para llegar a conclusiones sobre la penetrancia de una muta-
cin, se realizan por la aplicacin de, al menos, dos mtodos:
Clnico, para asegurar que no exista ningn elemento de la expresin variable
del gen en el fenotipo.
Estadstico, utilizando procedimientos matemticos que permitan identificar
la regularidad de la expresin o penetrancia de la mutacin, en varias familias
con igual tipo de mutacin de expresin dominante.

N
CI
En una mutacin para una enfermedad especfica, en la que se conozca que
tiene 80 % de penetrancia hay que tener en cuenta que un individuo sano, hijo

UC
de un progenitor afectado, tiene 20 % de probabilidad de ser heterocigtico para
la mutacin.
OD
PR
Efecto pleiotrpico de un gen o mutacin especfica
RE

Con el trmino pleiotropa o efecto pleiotrpico de un gen, se hace referencia


SU

a todas las manifestaciones fenotpicas, en diferentes rganos o sistemas, que


pueden ser atribuidas a una simple mutacin, o sea, un nmero de defectos
DA

distintos y aparentemente no relacionados.


BI

Un ejemplo clsico que permite la comprensin de este fenmeno, lo consti-


tuye el sndrome Marfan, cuya mutacin afecta al gen FBN1 que codifica a la
I
OH

protena fibrilina. Esta protena se encuentra en el tejido conectivo y explica las mani-
festaciones esquelticas, oculares y cardiovasculares que caracterizan al sndrome.
PR

En la fenilcetonuria clsica no tratada, el individuo homocigtico afectado


presenta retraso mental, epilepsia, piel hipopigmentada, olor caracterstico de la
orina, excrecin de cido fenilpirvico en la orina. Todas estas manifestaciones,
aparentemente no relacionadas, se explican por el defecto metablico.
Las manifestaciones fenotpicas pleiotrpicas, tambin pueden sufrir efectos de
la penetrancia reducida y expresividad variable de la mutacin, fenmenos ya explicados.

Heterogeneidad gentica

Atencin especial merece este trmino que se aplica, tanto a mutaciones en


genes localizados en loci diferentes, en el mismo, o en distintos cromosomas y
que producen expresin similar en el fenotipo (heterogeneidad no allica, tambin
Transmisin de simples mutaciones 161
llamada heterogeneidad de locus), como a mutaciones que afectan a diferentes
sitios exones o intrones del mismo gen (heterogeneidad allica).

Heterogeneidad gentica no lelica o de locus

Un ejemplo de heterogeneidad de locus o no allica lo constituye la retinosis


pigmentaria. En esta enfermedad gentica, los individuos afectados presentan
una serie de sntomas oftalmolgicos y visuales (prdida de la visin perifrica,
con reduccin concntrica del campo visual, efectos de la visin nocturna y de
adaptacin a la oscuridad y pigmentos en la retina), todos relacionados con
defectos de los fotorreceptores, de las clulas visuales especializadas de la
retina, denominadas bastones, en cuya funcin normal estn involucrados nu-
merosos genes localizados diferentes loci. Mutaciones de esos genes se expre-

N
san con el fenotipo retinosis pigmentaria, y pueden tener diferentes tipos de

CI
herencia mendeliana.

UC
Heterogeneidad allica
OD
Un ejemplo de heterogeneidad allica, se presenta en el locus para la enfer-
PR
medad fibrosis quistica (FQ) del pncreas, de herencia autosmica recesiva,
RE

que se manifiesta, fundamentalmente, en la infancia temprana, por insuficiencia


pancretica exocrina, infecciones respiratorias recurrentes, deficiencias del cre-
SU

cimiento y nutricionales, piel salada debido a elevadas concentraciones de sodio


y cloro en el sudor.
DA

El efecto pleiotrpico de la mutacin del gen regulador de la conductancia


BI

transmembrana de la fibrosis quistica (CFTR, del ingls cyst fibrosis


I

transmembrane conduntance regulator) se debe a mutaciones de este gen, y


OH

ya se han registrado, por estudio de secuenciacin en personas afectadas, ms


PR

de 1 000 mutaciones en sus 27 exones.


Esta categora gentica complica de forma extraordinaria el estudio etiolgico
de variantes del desarrollo de origen gentico y, a su vez, constituye una amplia
y fundamental fuente de diversidad gentica del desarrollo.

Heterogeneidad clnica

Tambin se incluye el trmino heterogeneidad clnica, pero esta vez para


referirse a mutaciones allicas o de locus, que expresan fenotipos diferentes.
Algunos ejemplos:
En el gen RET el cual codifica para una protena receptora tirosina kinasa, se
ha identificado un tipo de mutacin, que se expresa por un defecto de trastor-
162 Introduccin a la Gentica Mdica

no de motilidad del colon con estreimiento crnico conocida como enferme-


dad Hirschsprung, pero otra mutacin del mismo gen expresa neoplasia
endocrina mltiple tipos 2A y 2B.
En el gen PAX3, localizado en 2q35, se reportan dos tipos diferentes de
mutaciones, una origina el sndrome Waardenburg tipo 1 (WS1) y la otra el
rabdomioma alveolar (RMS2).

Inactivacin del cromosoma X

En las clulas somticas del sexo femenino (46, XX), solo uno de los dos
cromosomas x es activo. El otro permanece inactivo y aparece en clulas en
interfase como un cuerpo denso, fuertemente coloreado en la periferia del n-
cleo, que recibe el nombre de cuerpo de Barr, y que fuera tratado en el captulo 6.

N
La inactivacin del cromosoma X ocurre en los primeros estados del perio-

CI
do embrionario de la segmentacin, incluso se sabe que en el ratn, esta
inactivacin se produce desde la primea mitosis del cigoto, e incluso que resulta

UC
preferencial para el cromosoma X de origen paterno, para luego desactivarse
en las clulas que van a ocupar la masa celular interna o embrioblasto, e
OD
inactivarse de nuevo en esas clulas del embrioblasto.
En el hombre se conoce que la inactivacin ocurre de forma aleatoria en las
PR
clulas de la masa celular interna igual que en el ratn y que, a partir de esta
RE

inactivacin, cada clon celular somtico, mantiene el cromosoma X inactivo de


la primera clula en la que se produjo la inactivacin. Es decir, al inicio, la
SU

inactivacin de uno de los cromosomas X de la clula de la masa interna o


embrioblasto (X paterno o X materno) es al azar, pero una vez ocurrida, se
DA

mantiene el mismo cromosoma X que se inactiv en la primera clula del clon,


BI

en sus clulas hijas.


I

Este es un fenmeno que permite la compensacin de dosis de protenas,


OH

codificadas por genes que se encuentran en la molcula de ADN de los


cromosomas X, entre hombres con un solo cromosoma X y mujeres con 2X. El
PR

fenmeno de compensacin de dosis, fue sugerido por primera vez por Mary
Lyon en 1961, y se le conoce como hiptesis de Lyon.
La inactivacin (desactivacin), del cromosoma X est determinada por el
gen XIST (del ingls, X inactivation specific transcript) (Fig. 9.2), que codifi-
ca la informacin para la sntesis de un ARN transcrito de 15 Kb, que opera
como inactivador de muchos genes del cromosoma X. De forma curiosa, solo
se transcribe desde el cromosoma X inactivo y constituye un ejemplo de expre-
sin monoallica de los genes que contiene el genoma nuclear humano.
Este gen funciona por un mecanismo de metilacin preferencial y se descri-
ben una serie de pasos discretos que son los siguientes:
Conteo del nmero de cromosomas X y determinar cuntos se van a inactivar.
Seleccionar el cromosoma X.
Transmisin de simples mutaciones 163
Iniciar el proceso de metilacin.
Propagar el proceso de inactivacin a todo el cromosoma.
Mantener el cromosoma inactivo en clones de clulas somticas.

No toda la molcula de ADN del cromosoma X se inactiva, se conoce que la


regin seudoautosmica escapa a la inactivacin y, al igual que otros genes que
tienen que expresarse de forma diallica, se transmiten segn las leyes de Mendel,
bajo el nombre de herencia seudoautosmica.
Al parecer, existen otras regiones gnicas que tambin escapan a la
inactivacin del cromosoma X, esto ltimo se infiere al analizar el fenotipo de
mujeres con sndrome Turner con monosoma del cromosoma X, en las que los
fenmenos de disgenesia gonadal y baja talla, se explican por la funcin
monoallica de genes que deban estar funcionando en doble dosis, es decir, el

N
fenotipo Turner parece estar determinado por la haploinsuficiencia de genes en
el cromosoma X, que requieren para su expresin normal de funcin diallica.

CI
Si no hay alteracin de estructura en uno de los dos cromosomas X del genoma

UC
femenino, la inactivacin debe ocurrir de forma aleatoria, pero, si existe alguna
alteracin con gran compromiso en la funcin de uno de los dos cromosomas X,
OD
por ejemplo una translocacin entre uno de los cromosomas X y un cromosoma
autosmico, habra una inactivacin diferencial del cromosoma x normal, no
PR
translocado y por tanto una inactivacin no aleatoria.
RE

La inactivacin del cromosoma X determina consecuencias genticas y clni-


cas como:
SU

Compensacin de dosis: iguala la dosis de productos de genes del genotipo


femenino con el hemicigtico masculino para genes localizados en el
DA

cromosoma X, asegurando concentraciones proteicas similares en ambos


BI

genotipos, para genes ligados al cromosoma X.


Variaciones en la expresin de mutaciones en mujeres heterocigticas: por
I
OH

ejemplo, presencia de sntomas ms o menos severos en mujeres portadoras


de hemofilias A o B, distrofia muscular Duchenne, distrofias retinianas todas
PR

estas, enfermedades recesivas ligadas al cromosoma X.


Los tejidos de los rganos de las mujeres se comportan como mosaicos. Este
fenmeno se observa en el albinismo ocular recesivo ligado al cromosoma X
o en el test inmunohistoqumico para la deteccin de la distrofina en mujeres
heterocigticas, para la distrofia muscular Duchenne, en los que se observan
mosaicos de zonas con alteracin y sin alteracin, en los tejidos involucrados,
que dependen de la expresin de los genes en las clulas con el cromosoma
activo de origen materno o paterno.

Si existe un fallo en la inactivacin aleatoria de los cromosomas X, la expre-


sin de mutaciones del ADN con loci en estos cromosomas, que suelen ser
ligeras o ausentes en las mujeres heterocigticas, pueden expresarse con todo
164 Introduccin a la Gentica Mdica

rigor y severidad en la enfermedad de que se trate, lo que dificulta seguir crite-


rios para identificar el tipo de herencia mendeliana y, en especial cuando se
trata de mutaciones del cromosoma X que expresan enfermedades recesivas.

Nuevas mutaciones con expresin dominante

Cuando ocurre una mutacin de novo que se expresa como dominante, o


sea, en un genotipo heterocigtico, ocurre que padres que no presentan el efec-
to de la mutacin pueden tener un hijo o hija afectados. La ausencia de antece-
dentes familiares, una vez que se excluyen fenmenos como la penetrancia
reducida del gen y variaciones mnimas de su expresividad, permite llegar al
planteamiento de una mutacin de novo, sobre todo, cuando en la literatura este
fenmeno no ha sido reportado con anterioridad para enfermedades con heren-

N
cias dominantes de alta tasa de nuevas mutaciones, como se reporta en la displasia

CI
sea del tipo acondroplasia.

UC
Efecto de letalidad en un genotipo especfico
OD
Algunas mutaciones se expresan de forma tan severa que producen letalidad
PR
en un genotipo especfico. Un ejemplo puede ser el efecto de una doble dosis de
RE

una mutacin que se expresa como dominante o el efecto en un genotipo


hemicigtico, como ocurre en la incontinencia pigmenti (Fig. 9.11) enfermedad
SU

dominante ligada al cromosoma X.


DA
BI
I
OH
PR

Fig. 9.11. Herencia de genes que causan letalidad en el varn. En estos casos no
aparecen valores afectados y la frecuencia de abortos espontneos sugiere prdida de
productos masculinos.

Resumen

Las herencias mendelianas en el humano se estudian a partir de la confec-


cin y anlisis del rbol genealgico, siguiendo la segregacin del gen mutado de
Transmisin de simples mutaciones 165
acuerdo con las probabilidades genticas y la observacin de un individuo
afectado.
Si se excluye la herencia ligada al cromosoma Y, son cuatro los tipos de
herencia mendeliana que requieren ser analizados de acuerdo con los criterios
de segregacin, estos son: herencia autosmica dominante, herencia autosmica
recesiva, herencia dominante ligada al cromosoma X y herencia recesiva ligada
al cromosoma X.
La heterogeneidad gentica allica y no lelica y clnica dificulta el anlisis
de segregacin de simples mutaciones.
Fenmenos relacionados con la penetrancia, expresividad, pleiotropa del gen
y mutaciones de novo, se deben tener en cuenta al determinar el tipo de herencias.
Mencin especial merece el fenmeno de inactivacin del cromosoma X,
que puede dificultar el anlisis del tipo de herencia mendeliana, cuando no se

N
cumple el requisito de inactivacin aleatoria de uno de los cromosoma X en

CI
mujeres heterocigticas para enfermedades debidas a simples mutaciones que
segregan como herencias ligadas al cromosoma X, en especial para aquellas

UC
de expresin recesiva.
OD
Otras dificultades en el reconocimiento de criterios que permitan la diferen-
ciacin de las herencias son: los caracteres influidos y limitados por el sexo.
PR
RE

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SU

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Fam Physician., 72: 441-448.
166 Introduccin a la Gentica Mdica

Captulo 10 TRANSMISIN DE SIMPLES


MUTACIONES E
INTERFERENCIAS
BIOLGICAS

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Los avances de la aplicacin de nuevas tecnologas para el estudio del ADN y
OD
las observaciones de las investigaciones relacionadas con el Proyecto Genoma
PR
Humano, han logrado esclarecer contradicciones biolgicas y expresiones anor-
males, que no tenan explicacin, o cuyas explicaciones, confundan.
RE

Interrogantes como las siguientes: por qu en el sndrome frgil X hay hom-


bres asintomticos y portadores?, por qu en sndromes neurolgicos como el
SU

Prader-Willi y el Angelman con fenotipos diferentes tienen el mismo tipo de


aberracin cromosmica en 15q11-q13?, por qu una mujer fenotpicamente
DA

sana tiene hijos acondroplsicos en dos matrimonios diferentes?, por qu en


BI

algunas enfermedades genticas dominantes, los sntomas aparecen ms tem-


I

prano en los hijos que en sus padres?


OH

Este captulo responde a estas interrogantes, se basa en los nuevos conoci-


mientos, explica fenmenos biolgicos que dificultan la identificacin de segre-
PR

gacin de simples mutaciones con herencias mendelianas y, que en algunos


textos, se nombran como: patrones no clsicos de herencias mendelianas.

Mutaciones dinmicas

Este trmino se aplica a genes que presentan, en alguna regin de su estruc-


tura, tripletes de bases repetidos, en un nmero de veces, que define el alelo o
gen denominado normal.
La mutacin consiste en el incremento del nmero de veces que se repite el
triplete, y su expresin est en correspondencia con este incremento. Se trata
Transmisin de simples mutaciones e interferencias biolgicas 167
de un gen que crece y su crecimiento tiene un lmite, a partir del cual su expre-
sin puede ser nula y causar un defecto del desarrollo.
El sndrome de frgil X o del cromosoma X frgil, introduce esta nueva cate-
gora gentica, y es la segunda causa gentica y primera causa hereditaria de
retraso mental o discapacidad cognitiva en el humano.
El gen detectado a partir de este sndrome se denomina FRM1. La mutacin
del gen FMR1, que da origen a este sndrome, consiste en el incremento de
repeticiones del triplete CGG, del extremo 5' de su primer exn, cuyo alelo
normal tiene un promedio de 30 repeticiones.
Este incremento se produce por etapas, de ah el trmino de gen que cre-
ce. El primer crecimiento o premutacin oscila entre 43 y hasta 200 repeticio-
nes sin que tenga un efecto fenotpico especfico. A partir de las 200 repeticiones,
se produce la mutacin completa y se expresa el sndrome.
El riesgo de transformarse en una mutacin completa depende del nmero

N
de repeticiones de la premutacin, de modo que cuando el portador de la

CI
premutacin en una familia afectada, tiene un rango de menos de 90 repeticio-
nes, la probabilidad de amplificarse hacia una mutacin completa de un rango

UC
de repeticiones mayor que 200, es menor que cuando la premutacin tiene un
rango de ms de 90 repeticiones.
OD
El gen FMR1 se encuentra en la regin q 27.3 del cromosoma X y se hereda
ligado al cromosoma X con caractersticas especiales, pues el incremento del
PR
nmero de tripletes se produce durante la gametognesis y los hombres, apa-
RE

rentemente normales, pueden ser hemicigticos para la premutacin y transmi-


tir el gen a todas sus hijas, quienes, a su vez, pueden tener hijos varones afectados
SU

por retraso mental sin existir antecedentes familiares del defecto. A diferencia
de las herencias recesivas ligadas al cromosoma X, el hombre que tiene esta
DA

premutacin no presenta las manifestaciones clnicas propias de la enfermedad


BI

y puede tener nietos con la enfermedad, ya que las hijas que reciben el cromosoma
X paterno con la premutacin, pueden amplificar el nmero de copias de esta
I
OH

premutacin en sus gametognesis y transmitir la mutacin completa a sus hijos


varones e incluso tener hijas portadoras de la mutacin completa que presenten
PR

variaciones de retraso mental o sntomas neurolgicos como epilepsia. (Fig 10.1).


Este tipo de mutacin explica el fenmeno gentico de anticipacin o sea la
observacin del comienzo ms temprano de sntomas, en individuos de las nue-
vas generaciones, independientes del sexo del individuo que trasmiti la mutacin.
La anticipacin es un fenmeno usual en enfermedades genticas progresi-
vas del sistema nervioso central y su presencia es un elemento clnico, que
obliga a la bsqueda molecular de mutaciones que se producen por un incre-
mento de secuencia de bases repetidas.
Desde el punto de vista molecular se describen dos grupos de sndromes
producidos por mutaciones dinmicas, que son:
Grupo 1. Expansiones inestables por repeticiones muy largas, fuera de se-
cuencias codificantes (Tabla 10.1).
168 Introduccin a la Gentica Mdica

Fig. 10.1. El hombre II-1 es portador de la premutacin. Las hijas que reciben la premutacin
pueden tener hijos con la mutacin completa que expresan la enfermedad. Las hijas que

N
reciben la mutacin completa expresan la enfermedad con menos severidad por su

CI
condicin de heterocigticas.

UC
OD
Tabla 10.1. Caractersticas de las repeticiones de tripletes en regiones no codificables del gen
PR
Cromo- Triplete n (alelo n (premu- n (mutacin
Enfermedad soma Gen repetido normal) tacin) completa) Defecto
RE

Frgil X Xq27.3 FMR1 5 CGG UTR n = 6 a 54 n = 50 a 200 n = de 200 a Hipermetilacion


Exn 1 1000 CpG, no funcin
SU

del promotor.
Distrofia 19q13 MD 3 GTG UTR n = 5 a 35 n = 42 a 1 000 n >1000 Afecta el procesa-
miotnica Ultimo exn miento transcrito
DA

primario.
Epilepsia 21q22.3 JME 5 CCCCGC n=2a3 n = intermedio n = 40 a 80 Afecta funcin
BI

juvenil Promotor del promotor


mioclnica
I

Frgil E Xq28 FRAXE 5 CCG n = 6 a 25 n = 50 a 200 n = de 200 a Hipermetilacin


OH

Promotor 1 000 CpG no funcin


del promotor
Ataxia 9q13-q21.1 FRDA GAA Intron 1 n = 6 a 14 n = intermedio n = 67 a 1700 Prdida de fun-
PR

Friedreich cin del gen.

Grupo 2. Expansiones CAG de repeticiones ms cortas, dentro de secuencias


codificantes (Tabla 10.2).
Transmisin de simples mutaciones e interferencias biolgicas 169
Tabla 10.2. Enfermedades con mutaciones inestables por repeticiones de tripletes en regiones
codificables del gen

Enfermedad Locus Gen Herencia Alelo N Mutacin

Huntington 4p16.3 HD AD 6 a 35 30 a ms de 1000


Kennedy Xq21 KD LXR 9 a 35 38 a 62
Ataxia espinocerebelar 1 6p23 SCA1 AD 6 a 38 32 a 83
Ataxia espinocerebelar 2 12q24 SCA2 AD 14 a 31 32 a 77
Ataxia espinocerebelar 3 14q32 SCA3 AD 12 a 39 62 a 86
Ataxia espinocerebelar 6 19p13 SCA6 AD 4 a 17 21 a 30
Ataxia espinocerebelar 7 3p12-21.1 SCA7 AD 7 a 35 36 a 200
Atrofia dentatorubral- 12p DRPLA AD 3 a 35 49 a 88
palidoluisiana

N
Caractersticas comunes al grupo 1

CI
Se caracteriza por prdida de funcin del promotor, en sentido general.

UC
En el sndrome Frgil X, debido a hipermetilaciones de zonas ricas en CpG
adyacentes o muy cercanas al promotor la metilacin, a su vez, parece estar
OD
en correspondencia con el incremento de repeticiones del triplete CGG de la
regin 5 de este primer exn, que de manera normal, no se traduce e impide
PR
la activacin del promotor y por tanto la transcripcin del gen FMR1 que
RE

corresponde, ya que en individuos afectados por la mutacin completa, no se


ha detectado la existencia de RNAm transcrito.
SU

En los casos en los que la secuencia de bases repetidas se encuentre en


regiones 3 no traducibles (UTR, del ingls, untranslate region) como ocu-
DA

rre en la distrofia miotnica, el fenmeno de la prdida de transcripcin no


BI

est muy bien definido aunque parece estar relacionado con el proceso de
I

maduracin del ARMm transcrito primario.


OH

Caractersticas comunes al grupo 2


PR

Tienen una herencia autosmica dominante, excepto la enfermedad Kennedy


que tiene una herencia recesiva ligada al cromosoma X. Esta enfermedad se
produce por una mutacin de un gen para el receptor de andrgeno.
El alelo expandido se transcribe y traduce.
El trinucletido repetido, codifica para un segmento de poliglutamina de la
protena especfica de cada enfermedad.
Hay un umbral crtico de repeticiones por debajo del cual, no es patogentico
y por encima causa la enfermedad.
El tamao de la amplificacin de la mutacin se correlaciona con la edad de
comienzo de los sntomas de cada enfermedad, aunque no se puede hacer
una prediccin en un paciente individual.
170 Introduccin a la Gentica Mdica

La patognesis de estas enfermedades parece estar relacionada con la longi-


tud de las poliglutaminas. Cuando el segmento excede el umbral normal de
repeticiones, se producen agregados de protenas que pueden matar a las clulas.
Las diferencias clnicas de cada enfermedad reflejan muerte de clulas dife-
rentes y la muerte neuronal causada por los agregados de protenas, son un
rasgo comn a estas enfermedades por repeticiones CAG, as como para las
enfermedades de Alzheimer y Parkinson y por priones.

Fenmenos epigenticos
La modificacin de la molcula de ADN en la estructura de la cromatina por
factores adicionales se identifica como fenmeno epigentico. No alteran la
secuencia de bases del ADN de genes especficos, pero modifican el control de

N
su expresin.

CI
Dentro de los fenmenos epigenticos se encuentran:
- La metilacin del ADN. Importante mecanismo epigentico involucrado en

UC
el control de la transcripcin de algunos genes. Las metilaciones de regiones
OD
ricas en secuencias CpG que estn a lo largo de regiones especficas de las
24 molculas de ADN del humano pueden inactivar a promotores de dife-
PR
rentes genes con diversidad de funciones en el organismo.
La metilacin especfica de genes durante las gametognesis o impronta
RE

genmica, fenmeno que, por sus caractersticas especiales, ser tratado en


detalles ms adelante.
SU

Modificaciones covalentes reversibles de las histonas que forman los nucleo-


DA

somas, y que modifican de forma positiva o negativa la expresin de los


genes. Entre las principales se encuentran:
BI

Metilaciones de los aminocidos lisina y arginina.


I

Acetilaciones y desacetilaciones de lisinas.


OH

Fosforilacin de residuos de serina.


PR

Impronta genmica

Investigaciones realizadas sobre la expresin gentica en diferentes espe-


cies de reproduccin sexual, que incluyen al humano, han acumulado suficien-
tes evidencias que rompen de forma definitiva con la creencia de que el genoma
haploide contenido en los gametos (maternos o paternos), no presenta
individualidades moleculares que determinen diferencias en la expresin
mendeliana de una mutacin. Una nueva categora gentica surge bajo la deno-
minacin de impronta genmica (genomic imprinting) y que se define como la
huella que deja en el genoma del nuevo individuo, la contribucin cromosmica
haploide, materna y paterna.
Transmisin de simples mutaciones e interferencias biolgicas 171
Este patrn de metilacin repercute en la expresin de algunos genes, en
dependencia de que el gen sea heredado por va materna o paterna.
El mecanismo epigentico de impronta genmica asegura que dentro de una
clula, para un grupo de loci, solo uno de los dos alelos heredados a travs de la
gametognesis materna y paterna se exprese, aun cuando la secuencia de ba-
ses de ambos genes se encuentre intacta.
La impronta genmica, es un fenmeno biolgico propio del desarrollo, que
puede explicar la competencia funcional de regiones de ADN que actan como
potencializadores o silenciadores de genes comprometidos en el proceso de la
embriognesis (Fig. 10.2).

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 10.2. Impronta genmica. Los genes especficos que regulan sus funciones
monoallicas en el desarrollo fetal mantienen su metilacin en las lneas somticas. El
patrn de metilacin es dependiente del genoma XX o XY y se borra en las clulas
embrionarias (clulas germinales) que tienen el destino de formar los gametos en las
gnadas.
172 Introduccin a la Gentica Mdica

El gen XIST, relacionado con la inactivacin de uno de los dos cromosomas


X de la mujer, es un ejemplo de un gen ligado al cromosoma X, que desarrolla
impronta genmica y tiene funcion monoallica, ya que la expresin del alelo
XIST heredado por el gameto materno, se encuentra de forma preferencial
reprimido en los tejidos de origen trofoblstico, pues solo se transcribe a partir
del cromosoma X inactivo de origen paterno, en esta estructura del desarrollo
embrionario.
En ejemplos de triploidas, en las que se encuentra una doble dosis del genoma
haploide paterno, el tejido trofoblstico se encuentra muy desarrollado; de for-
ma inversa, cuando la doble dosis es de origen materno las estructuras
trofoblsticas observadas estn muy poco desarrolladas.
La evidencia de la impronta genmica se investig en la expresin de ciertas
mutaciones del humano, que tienen una gran diversidad en su expresin.
Estos conocimientos actuales explican por qu existen enfermedades genticas

N
que pueden tener variaciones en su expresin en un rango tan variable, que

CI
puede ir desde la no expresin, hasta una severidad extrema de esta, depen-
diendo de que la mutacin por el fenmeno de impronta haya sido heredada por

UC
la va del padre o de la madre.
Evidencias de impronta genmica en el humano son los sndromes produci-
OD
dos por aberraciones cromosmicas que se caracterizan por prdida o deleciones
de segmentos, en las que la expresin es diferente si la delecin se transmite por
PR
va materna, o paterna. Se tienen evidencias claras de estudios de la aberracin
RE

que ocurre en la regin q11-q13 en el cromosoma 15. Si esta aberracin


cromosmica es heredada por va paterna o materna, se expresan los sndromes
SU

Prader Willi o Angelman, respectivamente, cuyos fenotipos son diferentes entre s.


Tambin se puede observar en la expresin de estos sndromes, el fenmeno
DA

de disoma uniparental, concepto este que se desarrollar ms adelante.


BI

Otros ejemplos se relacionan con el incremento en la severidad de la expre-


I

sin fenotpica de la mutacin, como se plantea en la distrofia miotnica, para


OH

explicar la forma neonatal que se observa en hijos de madres afectadas que, a


su vez, han heredado la mutacin por la va materna.
PR

Ahora se comprende que pueden existir mutaciones de simples genes que se


transmiten de acuerdo con las leyes de Mendel, pero que al ser modificada su
expresin en dependencia del origen materno o paterno de la mutacin y al
tener como nica evidencia el examen clnico de la expresin de la mutacin,
ser difcil descubrir criterios que permitan seguir la segregacin de una muta-
cin especfica y por tanto identificar alguna de las herencias mendelianas estu-
diadas.

Disomas uniparentales

El descubrimiento de las disomas uniparentales es el resultado de observa-


ciones en el uso de la biotecnologa en funcin de caracterizaciones moleculares
Transmisin de simples mutaciones e interferencias biolgicas 173
de diversas mutaciones. No siempre una pareja cromosmica est formada por
cromosomas transmitidos de los gametos masculino y femenino.
En los aos 1988 y 1989 se reportaron dos nios afectados por fibrosis qustica
que presentaban una baja talla inusual. Los estudios moleculares detectaron
que los dos cromosomas 7, con la mutacin para la fibrosis qustica de ambos
nios fueron heredados de un solo padre.
Despus de estos hallazgos las disomas uniparentales son un fenmeno de
relativa frecuencia.
No se conoce cuntas veces una pareja cromosmica es el resultado de una
no disyuncin en cualquiera de las dos meiosis de la ovognesis o la
espermatognesis, pero existen numerosas evidencias de que un par
cromosmico especfico lo ha transmitido el vulo o el espermatozoide de una
sola va parental, y produce una disoma uniparental materna o paterna, con

N
consecuencias en el fenotipo.
La repercusin fenotpica de este fenmeno es objeto actual de estudio.

CI
Se puede predecir que sus variaciones dependen: de los genes de los

UC
cromosomas involucrados, del origen parental de estos y del tipo de disoma
ocurrida por no disyuncin de los cromosomas homlogos de que se trate, es
OD
decir, heterodisomas (defecto generado en la primera meiosis) o isodisomas
(defecto generado en la segunda meiosis) (ver en el captulo 8, figuras 8.1 y
PR
8.2).
RE

El mecanismo ms probable para la produccin de disomas uniparentales, es


la no disyuncin (fenmeno tratado en el captulo 8) como causa de aneuploidas.
SU

La diferencia con este tipo de aberracin cromosmica de nmero, es la


existencia de un fenmeno denominado rescate trismico, mecanismo que
DA

reestablece el nmero diploide de la pareja cromosmica involucrada, al elimi-


BI

nar a uno de los tres cromosomas.


I

El cromosoma eliminado da lugar a cigotos dismicos con los dos cromosomas,


OH

procedentes de cada progenitor o cigotos en los que el mecanismo de rescate


trismico selecciona a los dos cromosomas de un solo padre originando la disoma
PR

uniparental.
Existen otras proposiciones de origen de disomas uniparentales, que se salen
de los propsitos de este texto.
Cada da aparecen nuevas evidencias de disomas uniparentales para alguno
de los 23 pares de cromosomas humanos, ya se ha demostrado la presencia de
disomas uniparentales para 15 de estos.
Los sndromes Angelman (happy puppet), Prader-Willi y Beckwith-
Wiedemann son los ejemplos ms estudiados.
El sndrome Prader Willi se produce cuando en el cromosoma paterno hay
una delecin del segmento 15q11-13 o cuando los dos cromosomas son de ori-
gen materno. En el sndrome Angelman ocurre por delecin del segmento 15q11-
13 en el cromosoma 15 materno, o por disoma del cromosma 15 paterno.
174 Introduccin a la Gentica Mdica

Las deleciones en muchas ocasiones son submicroscpicas por lo que se


requiere utilizar para su deteccin, mtodos propios de la citogentica molecular,
se muestran ms detalles en el captulo 7.

Mosaicismos germinales
Se trata de mutaciones que aparecen en las clulas germinales de los proge-
nitores, que a su vez originan gametos afectados, con un rango de probabilida-
des que depende del nmero de generaciones celulares germinales con la
mutacin.
Se sospecha este tipo de mutacin cuando ocurre la recurrencia de un defec-
to especfico que aparece como una nueva mutacin, con carcter dominante y
que sin historia familiar anterior se repite en dos o ms hijos. Cuando la

N
recurrencia tiene lugar en la misma pareja pudiera identificarse errneamente

CI
como una herencia autosmica recesiva y hasta sugerirse heterogeneidad

UC
gentica.
El ejemplo ms ilustrativo es el de la acondroplasia, baja talla desproporcionada,
OD
cuya mutacin se caracteriza por un cambio de bases en el gen receptor para el
factor de crecimineto fibroblstico 3 (FGGFR3). Un cambio de una base
PR
nitrogenada por otra (G380R o Gli380Arg) en el dominio transmembrana de la
RE

protena, se expresa por la displasia sea que caracteriza a esta mutacin.


Se han descrito casos de individuos, clnicamente, no afectados por esta
SU

displasia sea que con un hijo afectado que ha sido considerado nueva muta-
cin han tenido recurrencia de la mutacin en la descendencia. En estos casos
DA

se ha logrado identificar por estudios moleculares, la presencia de mosaicismo


BI

de la mutacin en tejido gonadal.


I
OH

Mosaicismos somticos
PR

Se trata de mutaciones que ocurren en clones celulares somticos, durante el


desarrollo prenatal y ocasionan asimetras corporales con anormalidades de los
tejidos involucrados (mosaicismo poscigtico), o pueden ser posnatales y gene-
ran tumoraciones en clulas somticas.

Herencia mitocondrial

Existen otras mutaciones de simples genes que se diferencian de las anterio-


res porque el gen afectado o mutado est en el ADN mitocondrial (ADNmt).
El ADN mitocondrial (kilobases) se encuentra empaquetado en un cromosoma
circular que tiene 16 kilobases de longitud. Cada mitocondria tiene varias copias
Transmisin de simples mutaciones e interferencias biolgicas 175
de este cromosoma y cientos por clulas. El ADNmt ha sido secuenciado,
completamente, y se conoce que codifica para dos tipos de ARN ribosomal,
para 22 ARN de transferencia y para 13 polipptidos que son subunidades de
enzimas que participan en la cadena respiratoria, ya que las otras unidades de
estas enzimas son codificadas por el ADN nuclear.
La herencia mitocondrial se trasmite por va materna y esto se debe a los
fenmenos siguientes:
En el vulo hay unas 100 000 mitocondrias con sus correspondientes ADNmt,
mientras que el espermatozoide solo tiene alrededor de 100 mitocondrias con
sus correspondientes molculas de ADNmt.
Al ocurrir la fecundacin el ADNmt del espermatozoide se elimina
selectivamente. Las protenas producidas por el ARNmt son marcadas por la
ubiquitina y son degradadas en el momento de la fecundacin.
Mientras no exista mutacin del ADNmt todas las mitocondrias del citoplas-

N
ma sern iguales y a esta condicin se le denomina homoplasmia.

CI
Si ocurre una mutacin en el ADNmt se crea una poblacin intracelular de
ADNmt mutante y no mutante, dando lugar al fenmeno de heteroplasmia.

UC
Cuando la clula se divide existe la probabilidad de que el ADNmt mutante
OD
vaya hacia una u otra clula hija y con el tiempo el nmero de ADNmt mutante
puede derivar hacia lneas celulares con ADNmt mutante o ADNmt no mutante
PR
por lo que la homoplasmia es un fenmeno que puede estar presente tanto para
uno como para otro tipo de ADNmt.
RE

Por la herencia mitocondrial se encuentran afectados, tanto hembras como


varones, los hombres afectados no transmiten la enfermedad y las mujeres que
SU

presentan homoplasmia para el ADNmt pueden entonces tener a todos sus hijos
DA

afectados tanto hembras como varones. Si son mujeres que presentan


heteroplasmia debido a la distribucin del ADNmt mutado o no mutado en sus
BI

vulos, pueden tener hijos con o sin la enfermedad. La figura 10.3 expone la
I

trasmisin de la herencia mitocondrial.


OH

Es difcil hacer un anlisis predictivo de la probabilidad de que una mujer


afectada tenga hijos sanos o enfermos, pues, esto depende del nmero de
PR

mitocondrias normales y anormales de cada vulo.


Las mutaciones del ADNmt pueden ocurrir en regiones que codifican
polipptidos, ARN de transferencia, ARN ribosomal y en regiones de ADN
con funciones controladoras.
A su vez las mutaciones del ADNmt por sus consecuencias pueden ser de
tres tipos:
Deletreas y causar enfermedad.
Neutrales y acumularse en individuos en las poblaciones.
Beneficiosas y mantenerse o incrementarse por seleccin adaptativa.

Cuando causan enfermedades sus manifestaciones pueden ser muy espec-


176 Introduccin a la Gentica Mdica

Fig. 10.3. Ejemplo de herencia mitocondrial. La hija II-4 no afectada pudiera presentar
homoplasmia para el alelo normal o heteroplasmia no afectada por ausencia de exposi-

N
cin al agente ambiental al que pudiera ser susceptible.

CI
UC
ficas y constantes como ocurre en la atrofia ptica de Leber, la encefalopata
Melas; la epilepsia mioclnica Merrf o el sndrome Leigh; o extremadamente
OD
variables con manifestaciones en la mayora de los rganos que tienen activi-
dad oxidativa como en los sistemas nervioso central, muscular, cardiaco, renal,
PR
el sistema endocrino aunque cualquier rgano puede resultar afectado.
RE

Como elementos clnicos comunes en la mayora de la expresin de mutacio-


nes deletreas del ADNmt se encuentran un inicio tardo de los sntomas y un
SU

curso progresivo y severo.


En las mutaciones del ADNmt se ha reportado heterogeneidad. Esto unido al
DA

porcentaje de mitocondrias con el ADNmt mutado explica la gran expresividad


de las enfermedades con este tipo de herencia. Se han reportado 60 mutaciones
BI

mitocondriales.
I

Otros ejemplos de este tipo de mutacin se observan en: la anemia inducida


OH

por cloranfenicol; el sndrome diabetes-sordera; la sordera inducida por


PR

aminoglucsidos; la cardiomiopata hipertrfica con miopata.

Herencia dignica

La expresin de un defecto se debe a la coincidencia de genotipo doble


heterocigtico para mutaciones que en simple dosis y aisladas no expresan el
defecto en cuestin. Un ejemplo se ilustra en casos dobles heterocigticos para
una forma de retinosis pigmentaria (RP) donde la persona solo est afectada
por este tipo de RP, si es heterocigtica, adems para una mutacin del gen
protena 1 del segmento externo (RON), que se encuentra en el cromosoma 11
y coexiste con la mutacin del gen que codifica la protena periferina y que se
encuentra en el cromosoma 6.
Transmisin de simples mutaciones e interferencias biolgicas 177
Prdida de heterocigocidad

Es un fenmeno caracterstico de la expresin de genes supresores de tu-


mor. Ocurre en diversos tipos de cncer donde existe una primera mutacin que
determina la presencia de un genotipo heterocigtico y una segunda mutacin
sobre el gen tipo salvaje o no mutado y, determina un genotipo homocigtico
recesivo o hemicigtico, si esta segunda mutacin determina la prdida del
cromosoma no afectado por la mutacin, se pierde el genotipo heterocigtico y
se desarrolla el tumor. Este mecanismo se conoce como hiptesis de los dos
golpes de Knudson.
En el retinoblastoma hereditario la primera mutacin es germinal, es decir el
individuo es heterocigtico para la primera mutacin. La segunda mutacin tie-
ne un efecto ms temprano y en mltiples clulas, lo que explica que este tipo de

N
tumor maligno se desarrolle en estos casos, en el primer ao de la vida, en
ambos ojos y de forma mltiple. Otro ejemplo en el que se observa este fen-

CI
meno es en la neurofibromatosis 1 (NF1). Los neurofibromas que caracterizan

UC
a esta enfermedad gentica, son el efecto de prdida de heterocigocidad del
gen que expresa la protena neurofibromina la cual tiene tambin funcin de
OD
regulacin del ciclo celular y resulta ser un gen supresor tumoral.
PR

Resumen
RE
SU

Las mutaciones dinmicas; anormalidades del fenmeno epigentico de im-


pronta genmica; las disomas uniparentales; los mosaicismos gonadales y
DA

somticos; y la herencia mitocondrial, son fenmenos que dificultan seguir la


BI

segregacin de una mutacin de acuerdo con los criterios clsicos para la iden-
tificacin de una herencia mendeliana.
I
OH

Conocer estos fenmenos, facilita la interpretacin de la anticipacin; la se-


veridad de la enfermedad selectiva al origen materno o paterno del gen mutado;
PR

incomprensiones de la segregacin de mutaciones en herencias autosmicas


recesivas, en las que el individuo homocigtico ha recibido la doble dosis gnica
de solo uno de los padres heterocigticos para esa mutacin; la transmisin de
una aparente mutacin de novo en un hijo afectado a un hermano de este y la
transmisin de las enfermedades de una mujer, a hijos de ambos sexos.

Bibliografa
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N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 179

Captulo 11 ENFERMEDADES CAUSADAS


POR MUTACIONES
MONOGNICAS

N
CI
Rolando Hernndez Fernndez

UC
Como se expresa en el captulo 3, las mutaciones son cambios o alteraciones
OD
permanentes del material gentico que se transmiten de generacin en genera-
PR
cin. Cuando tales mutaciones alteran el contenido informativo de un gen y, por
tanto, la estructura, la funcin o ambas caractersticas de su producto, se deno-
RE

minan mutaciones monognicas.


Las mutaciones monognicas pueden causar enfermedades cuyos sntomas
SU

y signos dependen de varios factores. Las enfermedades producidas por muta-


ciones monognicas se transmiten de acuerdo con las leyes de Mendel.
DA

Las mutaciones monognicas ms frecuentes se localizan en los genes que


BI

codifican protenas; por lo tanto, sus manifestaciones clnicas dependen de: las
I

funciones de la protena, los tejidos donde el gen se expresa, las relaciones de la


OH

funcin de esta protena con las de otras protenas, el momento del desarrollo
cuando son necesarias y sus interacciones con factores ambientales.
PR

En este captulo se estudian algunas enfermedades causadas por mutaciones


monognicas. Un estudio exhaustivo va ms all del alcance de este texto para
estudiantes. Solo se pretende ilustrar con algunos ejemplos las caractersticas
ms generales y sobresalientes de estas entidades nosolgicas.

Genes que codifican protenas

A partir de los estudios del genoma humano se estima que los seres humanos
poseen aproximadamente, 30 000 genes que codifican protenas. Todos estos
son transcritos por la enzima ARN polimerasa II (ARNPII) como se expone en
el captulo 3. En estos genes se pueden diferenciar dos regiones importantes: en
180 Introduccin a la Gentica Mdica

una regin est contenida la informacin para la sntesis de la protena que el


gen codifica y por eso se llama zona codificadora; la otra est compuesta por
pequeas secuencias de bases nitrogenadas que forman mdulos que sirven de
sitio de unin a factores de transcripcin gnico-especficos. Esta regin es la
que determina cundo, dnde y con qu intensidad se debe realizar la transcrip-
cin del gen que, como se sabe, es la primera etapa del proceso de expresin.
Por esta causa, a esta parte se le llama zona reguladora.
Esta diferenciacin es importante para comprender el alcance de las muta-
ciones. As, cuando una mutacin modifica la zona reguladora puede traer como
consecuencia:
Que se modifique la cantidad del producto gnico, es decir, que se produzca
una cantidad mayor o menor de la protena (casi siempre menor).
Que la protena se produzca en un lugar inusual (expresin ectpica) o en el
momento inadecuado (expresin extempornea).

N
CI
Las mutaciones en la zona de codificacin pueden alterar:
Propiedades o funciones de las protenas.

UC
Localizacin dentro o fuera de la clula.

Vida media.
OD
Interacciones con otras protenas o biomolculas.
PR

Las consecuencias que para el producto gnico tienen las mutaciones


RE

monognicas segn el sitio donde se produzcan se ilustran en la figura 11.1.


Por otra parte, la expresin de los genes no es igual en todas las clulas del
SU

organismo. Durante el desarrollo embrionario y en la medida que las clulas se


DA

van diferenciando hay genes que son silenciados en algunas de estas y otros en
otras. Aun cuando el genoma de todas las clulas del organismo es el mismo, el
BI

conjunto de genes que se expresa en cada tipo de estas es diferente.


I
OH
PR

Fig. 11.1. Consecuencias de las mutaciones monognicas de acuerdo con su localiza-


cin. En la figura se observa que cuando las mutaciones ocurren en la zona reguladora
se producen alteraciones en la cantidad, la localizacin y el momento de expresin del
gen. Cuando estn en la zona de codificacin originan alteraciones estructurales y
funcionales del producto gnico.
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 181
Sin embargo, existen genes que se expresan en prcticamente, todas las
clulas y durante casi toda su vida. Los productos de estos genes realizan fun-
ciones bsicas para la clula, como: transporte de sustancias a travs de la
membrana, transformaciones bsicas de los nutrientes, movimiento intracelular,
divisin celular y eliminacin de sustancias de desecho.
A los genes que codifican estas protenas se les denomina de mantenimiento
(del ingls, housekeeping: ama de casa).
Otros genes tienen una expresin ms limitada, aunque tambin durante toda
la vida de la clula. Estos genes codifican protenas especficas de los tejidos
como: el muscular, el nervioso, el seo, etc.
Por ltimo, existen genes que solo se expresan de forma temporal. Por ejem-
plo, durante la diferenciacin sexual el gen SRY se expresa solo en un corto
periodo del desarrollo del testculo. Ocurre de forma similar con otros genes
cuyos productos intervienen en etapas del desarrollo.

N
Tambin despus del nacimiento algunos genes se expresan solo como res-

CI
puesta a estmulos ambientales, como es el caso de los genes cuyos productos
intervienen en los mecanismos de destoxificacin de sustancias extraas que se

UC
expresan, fundamentalmente, en el hgado. En este grupo tambin se incluyen
los genes que codifican la mayora de las hormonas peptdicas cuya expresin
OD
depende de estmulos especficos.
En lo adelante, se presentan algunas enfermedades causadas por mutacio-
PR
nes monognicas donde se pretende evidenciar cada uno de los aspectos trata-
RE

dos en este acpite.


SU

Mutaciones en genes que codifican protenas


DA

enzimticas
BI
I

Las enzimas son protenas que poseen actividad cataltica, esto es, que aumen-
OH

tan la velocidad de las reacciones qumicas que ocurren en el organismo y no se


consumen en la reaccin, es decir, al final de la reaccin estn en el mismo estado
PR

que al inicio. La reaccin qumica ms sencilla es aquella donde una sustancia que
se llamar sustrato se transforma en otra a la que se llama producto.
Visto as, la funcin de la enzima es la de incrementar la velocidad de forma-
cin del producto a partir del sustrato. Las enzimas son las principales protenas
en las funciones metablicas de las clulas y el organismo.
Si una mutacin en un gen que codifica una enzima da como resultado un
producto no funcional, entonces la reaccin catalizada por la enzima se ve inte-
rrumpida, pues las reacciones metablicas ocurren a muy baja velocidad en
ausencia de la enzima. En la mayora de los casos esto resulta en enfermedades
que se conocen con el nombre de errores congnitos o innatos del metabolismo.
Los mecanismos moleculares, por los cuales los errores congnitos del meta-
bolismo dan origen al cuadro clnico que los caracteriza son cuatro:
La ausencia del producto de la reaccin.
182 Introduccin a la Gentica Mdica

La acumulacin del sustrato.


La intensificacin de vas metablicas secundarias, las cuales en condiciones
normales ocurren con muy poca intensidad.
La combinacin de ms de uno de los anteriores.

Cuando el producto de una reaccin es necesario para una reaccin poste-


rior, su ausencia provoca la falta del producto posterior que puede ser de gran
importancia para la actividad de la clula o el organismo. Esta ausencia se
manifiesta como signos clnicos. El sustrato de una reaccin puede tener carac-
tersticas txicas que aparecen cuando se encuentra a concentraciones eleva-
das o entorpece procesos en los cuales puede competir por el sustrato normal.
Este carcter txico tiene manifestaciones externas.
Casi todos los sustratos se transforman en ms de una va, pero siempre hay
una que es la ms importante.

N
Sin embargo, cuando la va principal no funciona el sustrato se acumula y

CI
puede causar la intensificacin de vas alternativas y origina productos que pueden
entorpecer funciones celulares especficas y provoca manifestaciones clnicas.

UC
Estos mecanismos se muestran en los ejemplos siguientes.

Fenilcetonuria
OD
PR

La enfermedad fue descrita por Flling en 1934 en Noruega y la llam oligo-


RE

frenia fenilpirvica. En 1947, Jervis determin el error metablico como la inca-


pacidad de transformar la fenilalanina en tirosina y en 1953 demostr la
SU

deficiencia de fenilalanina hidroxilasa en el hgado de un paciente. Se produce


DA

por mutaciones en el gen que codifica la enzima fenilalanina hidroxilasa (PAH),


el cual est localizado en la regin cromosmica 12q24.1, y fue aislado en 1986.
BI

Se transmite como carcter autosmico recesivo. De manera habitual se cono-


I

ce por sus siglas PKU (en ingls, phenyl keton uria).


OH

Lo ms sobresaliente de la enfermedad es que las alteraciones del sistema


PR

nervioso central se manifiestan desde la infancia temprana. Aparecen convul-


siones, conductas anormales, posturas inadecuadas al estar de pie o sentado y,
lo ms grave es el retraso mental progresivo, severo e irreversible.
Se excretan sustancias anormales por la orina que le dan a este fluido un olor
peculiar y desagradable. Pueden tener trastornos en la pigmentacin de la piel,
lo cual a veces produce lesiones drmicas y por lo general presentan un color
ms claro de la piel, los ojos, y el cabello, comparado con los miembros de su
familia.
Todos estos signos se derivan de la existencia de un bloqueo metablico en la
reaccin de conversin de la fenilalanina en tirosina que es catalizada por la
fenilalanina hidroxilasa.
La fenilalanina es un aminocido esencial y, por lo tanto, tiene que ser ingeri-
do como parte de la dieta. Tambin es un componente de las protenas como
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 183
todos los aminocidos, pero, adems puede ser precursora de otras sustancias
como las catecolaminas y la tiroxina.
La fenilalanina hidroxilasa cataliza la primera reaccin del metabolismo de la
fenilalanina.
En la figura 11.2 se muestra un esquema que ilustra la reaccin de la
fenilalanina hidroxilasa y sus derivaciones.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 11.2. Reaccin de la fenilalanina hidroxilasa. La fenilalanina es transformada en


tirosina por la fenilalanina hidroxilasa (PAH), que utiliza como cofactor la
tetrahidrobiopterina (THB). La tirosina es precursor de la melanina. Una transaminasa
(TA) convierte la fenilalanina en cido fenil-pirvico, que por una deshidrogenada (DH)
se convierte en cido fenil-lctico o por una descarboxilasa (DC) en cido fenil-actico.
Estos cidos son excretados por la orina.
184 Introduccin a la Gentica Mdica

Al faltar la funcin de la enzima se produce una deficiencia de tirosina cuyas


nicas fuentes de obtencin son la dieta y la fenilalanina.
Como la tirosina es el precursor de los pigmentos de la piel (en especial de la
melanina) estos no se producen, lo cual explica los trastornos en la pigmenta-
cin.
El bloqueo de la reaccin produce una acumulacin de la fenilalanina y esti-
mula vas secundarias. La transaminacin de la fenilalanina produce el cido
fenilpirvico que al reducirse da origen al cido fenillctico y ambos por
descarboxilacin producen el cido fenilactico. Estos cidos son excretados
por la orina y le dan el olor desagradable. Son, adems, los que dan nombre a la
enfermedad.
Las cantidades normales de fenilalanina en sangre tambin se incrementan y
producen la hiperfenilalaninemia, caracterstica de la enfermedad. Los niveles
normales de fenilalanina en sangre son: 58 15 mmol/L en adultos; 60

N
13 mmol/L en adolescentes y 62 18 mmol/L en nios.

CI
En recin nacidos normales el lmite superior es de 120 mmol/L.
El origen de los trastornos del sistema nervioso central es ms oscuro. En

UC
este tejido la fenilalanina es descarboxilada y produce la feniletilamina, que es
OD
un compuesto que puede actuar como neurotransmisor. La entrada del
aminocido a la neurona est facilitada por un transportador de aminocidos
PR
que tambin facilita el trnsito de la tirosina y el triptofano (todos con anillos
aromticos). La tirosina produce la tiramina (que acta como neurotransmisor)
RE

y el triptofano a la serotonina.
Estos aminocidos de forma normal penetran en proporciones definidas a la
SU

neurona; sin embargo, al existir una concentracin elevada de fenilalanina, este


aminocido tiene un trnsito favorecido y produce un desbalance (aumento de
DA

fenilalanina y disminucin de tirosina y triptofano) en la produccin de


BI

neurotransmisores en el sistema nervioso central que pueden estar implicados en el


I

origen de los trastornos de este sistema que se observan en la enfermedad.


OH

Se ha reportado que el cido fenilpirvico inhibe a la enzima pirvico


descarboxilasa del cerebro (pero no la del hgado), lo cual pudiera contribuir a la
PR

aparicin del retraso mental.


Se han detectado ms de 400 mutaciones en el locus que codifica la fenilalanina
hidroxilasa (PHA). Entre estas aparecen alteraciones en el sitio de empalme
que producen ARNm (cido ribonucleico-mensajero) inestables y cambios de
aminocidos fuera del sitio cataltico que alteran el plegamiento de la protena y
estimulan su degradacin.
El nmero tan elevado de mutaciones hace que algunas personas puedan ser
heterocigticas para diferentes alelos mutados (heterocigticos compuestos),
en lugar de ser homocigticos para el mismo tipo de mutacin.
En la tabla 11.1 se exponen los tipos de mutaciones ms frecuentes (se utiliza
el cdigo de una letra para los aminocidos) que se han detectado en los indivi-
duos enfermos de fenilcetonuria en la poblacin cubana.
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 185
Tabla 11.1. Mutaciones ms frecuentes en pacientes con fenilcetonuria
en Cuba

Mutacin Total Frecuencia

E280K 11 19,62
R261Q 9 16,00
R68S 5 7,12
V388M 4 7,12
R408W 4 7,12
IVS-10-11G>A 4 7,12
R252W 3 5,30

Adaptado de: Gutirrez, G.E.A; Gutirrez, G.R.


(2007): Distribucin de las frecuencias de mutaciones del gen

N
fenilalanina hidroxilasa (PAH) en diferentes provincias de Cuba. Rev

CI
Cubana Genet Comunit; 1(2):42-47.

UC
El conocimiento de las bases de la enfermedad ha servido para disear el
OD
tratamiento adecuado. Este consiste en proporcionar a los nios afectados una
dieta muy pobre en fenilalanina (que solo sirva para sintetizar protenas), con lo
PR
cual se evita la peor manifestacin, esto es, el retraso mental.
RE

Sin embargo, la dieta debe contener cantidades adecuadas de tirosina, pues


en el organismo este aminocido se forma a partir de la fenilalanina. Existen
SU

preparados comerciales con estas caractersticas y con buenos resultados.


En Cuba existe un programa especial para el diagnstico precoz y el trata-
DA

miento temprano de pacientes con fenilcetonuria. En el captulo 19 se brindan


BI

detalles de este programa de pesquisa neonatal.


I
OH

Otras hiperfenilalaninemias
PR

Para algunos investigadores fue interesante comprobar que la enzima


fenilalanina hidroxilasa purificada a partir de muestras de tejidos de nios diag-
nosticados con fenilcetonuria, no presentaban alteraciones en su actividad al ser
estudiada en el laboratorio. Esto llev a un estudio ms detallado de la reaccin
de la fenilalanina hidroxilasa, el cual mostr que la enzima requera como cofactor
la tetrahidrobiopterina. Mutaciones en los genes cuyos productos intervienen en
la sntesis o regeneracin del cofactor pueden originar hiperfenilalaninemias.
De estos genes han sido localizados tres en las regiones cromosmicas 10q22;
4p15.31 y 11q22.3. Este es un ejemplo de heterogeneidad gentica no lelica
(tambin conocida como heterogeneidad de locus) pues mutaciones en diferen-
tes genes, pueden producir el mismo fenotipo. De este tema se da ms informa-
cin en el captulo 9.
186 Introduccin a la Gentica Mdica

Deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenada (G6PD)

La enfermedad se caracteriza por una anemia hemoltica que evoluciona por


crisis y un ctero de moderada intensidad.
La glucosa-6-fosfato deshidrogenasa cataliza la primera reaccin del ciclo
de las pentosas o va de oxidacin directa de la glucosa y es la nica fuente de
NADPH (nicotin-adenin dinucletido fosfatado) de las clulas rojas que care-
cen de mitocondrias y, por lo tanto, del metabolismo oxidativo.
El ciclo de las pentosas ocurre en muchos tejidos, pero es especialmente
importante en los eritrocitos. Estas clulas estn expuestas de manera constan-
te a la accin oxidante del oxgeno molecular, pues su funcin es, precisamente,
el transporte de oxgeno desde los pulmones hacia todos los tejidos.
Los lpidos de la membrana del eritrocito, as como las protenas, ya sean de

N
las membranas o del citosplasma, estn expuestos al dao oxidativo que el ox-

CI
geno puede generar.
En los eritrocitos el principal sistema de defensa antioxidante es el sistema

UC
del glutatin. Este es un tripptido formado por cido glutmico unido mediante
un enlace isopeptdico a la cistena, que a su vez se une por enlace peptdico a la
glicina. OD
PR
Los grupos sulfihidrilos de la cistena pueden estar reducidos (-SH) o estar
oxidados (-S-S-) y unir dos molculas de glutatin. Cuando se produce el dao
RE

oxidativo a una biomolcula, el glutatin (en estado -SH) reduce al producto


formado y la biomolcula, vuelve a su estado original, pero al hacerlo, el glutatin
SU

se oxida y pasa al estado (-S-S-). Es necesario que exista un mecanismo capaz


DA

de reducir al glutatin de manera que pueda actuar en varios ciclos de repara-


cin. Este mecanismo ocurre por la reaccin catalizada por la G6PD.
BI

En la reaccin de oxidacin de la glucosa se produce la reduccin del NADP+


I

a NADPH, y este es utilizado por la enzima glutatin reductasa para la reduc-


OH

cin del glutatin.


PR

Esto significa que para que el eritrocito pueda reparar, eficientemente, los
daos oxidativos provocados por el oxgeno, es necesario el buen funcionamien-
to del ciclo de las pentosas. En la figura 11.3 se resume este mecanismo.
El gen que codifica la G6PD est localizado en el cromosoma X (en la regin
Xq28) y por esto la enfermedad es ms frecuente en varones que en hembras.
El gen tiene una longitud de 18 Kb y presenta 13 exones. La enzima est forma-
da por subunidades de 58 kDa con 531 aminocidos cada una. La mutacin
monognica ms frecuente forma una enzima inestable, la cual acorta de forma
considerable su tiempo de vida media. Aun as, en condiciones normales es
suficiente para un adecuado funcionamiento de los eritrocitos.
Sin embargo, cuando la persona portadora de la mutacin se expone a la
accin de frmacos como los usados en el tratamiento de la malaria o a la
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 187

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA

Fig. 11.3. Reparacin de la membrana del eritrocito. La glucosa-6-fosfato (G6P) es trans-


BI

formada en cido 6-fosfo-glucnico (A6PG) por la glucosa-6-fosfato deshidrogenada


I

(G6PDH), al mismo tiempo que produce NADPH. La glutatin reductasa (Glu-R) utiliza el
OH

NADPH para la transformacin del glutatin oxidado (Glu-Glu) en glutatin reducido


(Glu-SH). Este ltimo es utilizado en el mecanismo de reparacin de los daos oxidativos
PR

a la membrana.

ingestin de frijoles blancos (la enfermedad a veces se llama favismo por su


relacin con las havas que en el espaol antiguo eran favas), estas incrementan
el dao oxidativo y la clula demanda de una gran cantidad del NADPH para
hacer la reparacin.
Es bueno recordar que durante el proceso de formacin de los eritrocitos el
ncleo celular es expulsado y estas clulas se ven privadas de sintetizar prote-
nas. Al poseer una protena inestable, esta se inactiva con mayor velocidad que
el resto. Los eritrocitos de pacientes con esta enfermedad, que llevan algn
tiempo en la circulacin, prcticamente carecen de la actividad de la G6PD.
188 Introduccin a la Gentica Mdica

Cuando la demanda es alta no puede ser satisfecha y los daos no pueden


ser reparados, lo que lleva a la ruptura del eritrocito (hemlisis) y, por consi-
guiente, a la anemia. El incremento del metabolismo del grupo hemo de la he-
moglobina produce un ctero poco intenso. Por la misma razn puede aparecer
hemoglobina en orina (hemoglobinuria).
Si los portadores del gen mutado no se exponen a condiciones como las
descritas pueden vivir toda su vida sin tener conocimiento de su deficiencia
gentica.
Cuando en un paciente con una crisis hemoltica se sospecha que es portador
de una mutacin en el gen de la G6PD no se debe indicar la determinacin de la
actividad enzimtica en el momento de la crisis, pues los eritrocitos viejos se
han lisado y solo persisten los jvenes en los cuales la actividad de la enzima
debe ser normal.
La deficiencia de G6PD, es un ejemplo de las enfermedades denominadas

N
farmacogenticas, rea de la gentica bioqumica que trata la variabilidad en la

CI
respuesta a frmacos en individuos con variaciones genticas.
Esta enfermedad es un ejemplo ms de la indisoluble relacin entre el genoma

UC
y el ambiente. Otras enfermedades con estas caractersticas son:
Hipertermia maligna.
Sensibilidad a la succinilcolina. OD
Polimorfismo de acetilacin.
PR
Porfiria aguda intermitente.
RE

Mutaciones en genes que codifican receptores


SU

de membrana
DA
BI

Los receptores de membrana son protenas cuya funcin es recibir informa-


I

cin desde el entorno celular y transmitirla hacia el interior de la clula por


OH

medio de un mecanismo de transduccin de seales. Esta funcin es una etapa


crucial dentro del proceso general de la comunicacin intercelular como se
PR

expone en el captulo 3. No es de sorprender que mutaciones en los genes que


codifican estas protenas y que eliminan su funcin acarreen graves perjuicios
para la clula y el organismo.

Hipercolesterolemia familiar

Esta es una enfermedad de expresin autosmica dominante. Tanto en los


individuos homocigticos, como en los heterocigticos, la enfermedad es grave;
solo que en los primeros la enfermedad se presenta desde la infancia con alta
frecuencia de letalidad, mientras que en los heterocigticos aparece en el adulto
joven. El conocimiento actual sobre la bioqumica de la enfermedad ha permiti-
do la aplicacin de teraputicas alentadoras.
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 189
Lo ms sobresaliente de esta enfermedad es la elevada concentracin de
colesterol en sangre. Las cantidades pueden ser diez veces superiores a las
normales. Una hipercolesterolemia mantenida incrementa notablemente el pro-
ceso de aterosclerosis y sus complicaciones. Pacientes con esta enfermedad
suelen tener infartos agudos del miocardio desde la infancia y sin tratamiento,
difcilmente sobreviven hasta la adolescencia. Se detectan xantomas por la acu-
mulacin de colesterol en la piel.
El colesterol que se ingiere como parte de la dieta y el que es sintetizado en
el hgado (su mayor productor en el organismo), salen de este rgano junto con
triacilgliceroles y protenas en forma de lipoprotenas de muy baja densidad,
VLDL (del ingls, very low density lipoproteins). Al circular por la sangre las
VLDL van liberando los triacilgliceroles en el tejido adiposo e intercambiando
protenas hasta quedar formadas casi, exclusivamente, por colesterol y

N
apoprotena B-100, constituyendo as las lipoprotenas de baja densidad, LDL

CI
(del ingls, low density lipoproteins).
Las clulas de los tejidos perifricos tienen en su membrana una protena que

UC
acta como receptor de las LDL (LDLR). Al producirse la unin de las LDL a
sus receptores, se produce la internalizacin del complejo LDL-LDLR en for-
OD
ma de vesculas en las cuales el complejo LDL-LDLR se disocia despus. El
PR
receptor es llevado de nuevo a la membrana y las LDL son degradadas por los
lisosomas. La entrada de colesterol a la clula, por esta va, inhibe la sntesis de
RE

colesterol a esas clulas por un mecanismo en el cual interviene el aparato


gentico celular. Este proceso se ilustra en la figura 11.4.
SU

El receptor de LDL es una protena de 839 aminocidos, que es sintetizada


DA

como una glicoprotena precursora de 120 kDa, la cual se une de forma covalente
con otra protena de 40 kDa para dar una masa total de 160 kDa. Presenta un
BI

dominio extracelular rico en residuos de cistena y con repeticiones del precur-


I

sor del factor de crecimiento epidrmico que es el sitio de reconocimiento


OH

molecular de las LDL. Un dominio transmembranal corto y un dominio


PR

citoplasmtico son necesarios para la internalizacin del receptor.


El gen del receptor de LDL se ha localizado en la regin cromosmica 19p13.2
y est formado por 18 exones de los cuales 13 codifican secuencias peptdicas
que son homlogas a las de otras protenas. As, cinco de ellos codifican se-
cuencias similares al componente C9 del complemento, tres a secuencias simi-
lares al precursor del factor de crecimiento epidrmico y tres protenas del
sistema de coagulacin de la sangre (factor IX, factor X y protena C) y otros
cinco exones codifican secuencias no repetidas comunes con el precursor del
factor de crecimiento epidrmico. Como el receptor resulta ser un mosaico de
protenas construido a partir de exones compartidos, esto lo hace miembro de
varias superfamilias gnicas. Este es un ejemplo elocuente de la importancia
evolutiva de los genes que presentan la zona codificadora dividida en exones.
190 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH

Fig. 11.4. Actividad del receptor de las LDL. El receptor que se encuentra en la membra-
na se une a las LDL (1). Se produce la invaginacin de la membrana (2) seguida de la
PR

endocitosis del complejo LDLR-LDL (3). La vescula endoctica se alarga (4) separndo-
se el LDLR de las LDL, dando lugar a una vescula que contiene al receptor (5) que es
transportado hacia la membrana (6) y otra vescula con las LDL (5) que se unen a los
lisosomas (7) que degrada su contenido (8), esto permite la entrada del colesterol al
citosol.

La hipercolesterolemia familiar se debe a mutaciones en el gen que codifica


al receptor de LDL. Dos grupos de mutaciones han sido descritos, las que
modifican el sitio de reconocimiento de las LDL y las que alteran el dominio
citoplasmtico e impiden la internalizacin del complejo LDL-LDLR. La mayo-
ra de estas son deleciones (borramientos) que eliminan uno o varios exones del
gen.
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 191
Cuando las LDL no son captadas por el receptor se acumulan en la sangre y
su tiempo de vida media en este fluido se incrementa. Esto aumenta el proceso
de oxidacin de las LDL y su trnsito a travs del endotelio vascular hacia la
ntima de las arterias. Las LDL oxidadas son captadas por receptores especia-
les de macrfagos y los lpidos se van almacenando en el citoplasma de manera
que al ser observados con el microscopio dan la imagen de clulas espumo-
sas. A partir de este momento se desencadena el proceso de aterognesis. La
exposicin de los mecanismos de aterognesis supera el alcance de este texto.
El conocimiento de los mecanismos moleculares de la enfermedad ha permi-
tido elaborar teraputicas que mejoran de manera considerable el estado de los
enfermos, como se describe en el cuadro 11.1.

Cuadro 11.1. Tratamiento de la hipercolesterolemia familiar

N
Un grupo de sustancias conocidas como estatinas constituyen inhibidores de la enzima

CI
hidroximetilglutaril-CoA reductasa que cataliza la reaccin clave de la sntesis del colesterol.
La inhibicin de esta enzima reduce la sntesis del colesterol en el organismo y con esto la

UC
concentracin de colesterol en sangre.
Estos medicamentos pueden disminuir casi hasta la mitad los niveles de colesterolemia. En
OD
la figura se muestra la estructura de la lovastatina destacando la parte de su estructura
similar al cido mevalnico.
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

El otro procedimiento tambin se basa en conocimientos del metabolismo del colesterol. Se


sabe que aproximadamente 80 % del colesterol producido en el hgado es utilizado en la
formacin de las sales biliares que son necesarias en la digestin de los lpidos. Las sales
biliares son segregadas hacia el duodeno como parte de la bilis. En las ltimas porcio-
nes del yeyuno, aproximadamente 80 % de estas son reabsorbidas y vuelven al hgado.
Esto es un mecanismo de ahorro de colesterol. Se han elaborado resinas que se administran
por la boca, que no son absorbidas por el intestino y que tienen la propiedad de adsorber
las sales biliares. Con este procedimiento se impide el retorno de las sales biliares y se
obliga al hgado a desviar colesterol hacia su formacin, por lo cual el colesterol no puede
integrarse a las VLDL y salir a la sangre. La accin combinada de estos dos medicamentos
disminuye, considerablemente, la concentracin de las LDL en sangre evitando el infarto
agudo de miocardio que es su complicacin ms grave pues puede terminar con la vida del
enfermo.
192 Introduccin a la Gentica Mdica

Retinosis pigmentaria

La retinosis pigmentaria es una enfermedad caracterizada por la degenera-


cin progresiva de la retina y la concomitante prdida de la visin. Se debe a un
trastorno en las clulas fotorreceptoras conocidas como bastones. La molcula
cuyas alteraciones produce la enfermedad, es la rodopsina. Como los bastones
son ms abundantes hacia la periferia que hacia el centro de la retina, los enfer-
mos comienzan por perder la visin perifrica con una reduccin progresiva del
campo visual hacia el centro. Es comn escuchar que ven como si miraran por
el can de una escopeta.
La rodopsina es la molcula fotorreceptora de los bastones. Se localiza en los
discos del segmento externo, que son estructuras membranosas que en forma
de sacos superpuestos se apilan en esta zona de la clula. Se trata de un miem-
bro de la superfamilia de receptores acoplados a protenas G.

N
La molcula de la rodopsina est constituida por una sola cadena polipeptdica

CI
que forma siete hlices transmembranales con el extremo aminoterminal hacia

UC
el exterior y el carboxiloterminal hacia el interior del disco. La disposicin de las
hlices forma en el lado externo una especie de cavidad donde se aloja el
OD
cromforo que es el 11-cis-retinal. El cromforo se une a residuos de aminocidos
especficos del receptor. Del lado interno el receptor esta unido por interacciones
PR
dbiles con una protena G trimrica que recibe el nombre de transducina. En
RE

ausencia de luz la subunidad alfa de la transducina est unida al GDP


(guanosindifosfato). Al llegar la luz, el cromforo se isomeriza a trans-retinal y
SU

esto provoca un movimiento de las hlices que cambian la interaccin con la


transducina y su subunidad alfa intercambia GDP por GTP (guanosintrifosfato).
DA

La subunidad alfa-GTP activa a la fosfodiestearasa de GMP (guanosinmo-


BI

nofosfato) cclico (GMPc), el cual hidroliza a este compuesto, disminuyendo su


I

concentracin. El GMPc mantiene abierto un canal de sodio en la membrana


OH

plasmtica y al disminuir su concentracin este canal se cierra y produce la


hiperpolarizacin de la membrana, lo cual es el estmulo que desencadena la
PR

transmisin del impulso nervioso hacia los centros visuales del sistema nervioso
central. Este mecanismo se ilustra en la figura 11.5.
Lo ms sobresaliente, al examen fsico, es el aumento de pigmentos de color
oscuro que se observan en la retina, al realizar el examen del fondo de ojo,
localizados, fundamentalmente, hacia la periferia; esto da nombre a la enferme-
dad. La falta de funcin de la clula hace que se desencadenen mecanismos de
muerte celular que van disminuyendo el nmero de clulas fotorreceptoras.
El gen que codifica la rodopsina se localiza en la regin cromosmica 3p21-
q24. Numerosas mutaciones se han descrito en este gen; entre estas algunas
producen un fallo en los mecanismos que transportan el receptor hacia la mem-
brana del disco. La ausencia del receptor en el disco u otras alteraciones que
impidan su correcto funcionamiento explican las caractersticas fenotpicas de
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 193
la enfermedad, y la gran heterogeneidad allica y no allica o de locus de esta
enfermedad gentica. Se han descrito herencias mendelianas autosmicas
recesivas y dominantes, y formas con herencia recesiva ligada al cromosoma
X, que son difciles de diferenciar por su expresin fenotpica al realizar un
simple examen oftalmoscpico.
En Cuba existe un programa nacional con establecimientos mdicos en todas
las provincias para la atencin a pacientes con esta enfermedad.

N
CI
UC
OD
PR
RE

Fig. 11.5. Mecanismo de la visin. En la figura se muestra la membrana plasmtica (MP)


de los bastones donde se encuentra el canal de cationes y la membrana del disco (MD)
SU

donde est ubicada la rodopsina (Rd), la transducina (Td) y la fosfodiestearasa del


GMPc (PDE). En la oscuridad el canal de cationes se encuentra abierto (CCa) debido a la
DA

accin del GMPc. Al llegar la luz y activarse la PDE, la concentracin de GMPc disminu-
BI

ye y el canal adquiere la conformacin cerrada (CCc). El sodio se acumula en el exterior


y ocurre la hiperpolarizacin de la membrana.
I
OH

Mutaciones en genes que codifican protenas


PR

de transporte
Los organismos pluricelulares requieren de mecanismos capaces de trans-
portar sustancias de un lado al otro del organismo, lo cual realizan mediante la
sangre. Tanto en el eritrocito como en el plasma, existen protenas cuya funcin
es la de transportar sustancias, algunas de estas especficas, otras como una
funcin adicional.
El oxgeno que es imprescindible para la respiracin es transportado por la
hemoglobina, la principal protena de los eritrocitos. Protenas plasmticas trans-
portan cidos grasos, cortisol, hierro, cobre, etc. Mutaciones en genes que codi-
fican estas protenas pueden alterar de forma considerable el transporte de
estas sustancias, y producir enfermedades.
194 Introduccin a la Gentica Mdica

Por otra parte la membrana plasmtica de las clulas constituye una barrera
para el paso de sustancias con caractersticas polares, como monosacridos,
aminocidos, iones, etc. De ah que la membrana posea protenas que facilitan
el paso de estas sustancias desde el exterior hacia el interior de la clula. Tam-
bin se han descrito mutaciones en genes que codifican este tipo de protenas y
que ocasionan enfermedades que pueden ser, extremadamente, graves.

Anemia por hemates falciformes (sicklemia)

Esta es la enfermedad hereditaria ms frecuente en Cuba, presenta herencia


autosmica recesiva. Se caracteriza por un estado de anemia crnica la cual
evoluciona por crisis hemolticas, cuando las personas se encuentran en atms-
feras con un contenido de oxgeno inferior al normal, como por ejemplo, a gran-

N
des alturas, en medio de un incendio, etc.
Los exmenes de sangre muestran un conteo anormal bajo de eritrocitos, y

CI
estos tienen forma de medialuna (de ah el nombre de falciforme). Durante las

UC
crisis existe un ctero ligero y se pueden presentar dolores abdominales. Los
pacientes presentan anomalas esquelticas, como turricefalia y tibias en sable.
OD
Son frecuentes los infartos del bazo. Sin atencin mdica, los individuos
homocigticos recesivos pueden morir antes de llegar a la edad reproductiva,
PR
por lo que tienen eficacia biolgica reducida; concepto este que se trata con
RE

mayor amplitud en el captulo 15.


La causa de la enfermedad radica en una anormalidad de la hemoglobina
SU

como consecuencia de una mutacin. Fue por esta enfermedad que se introdujo
en la literatura cientfica el trmino de enfermedad molecular.
DA

La hemoglobina es la protena ms abundante en el eritrocito y una de las


ms abundantes en el organismo. Su concentracin normal es de 150 g/L . La
BI

hemoglobina est formada por dos tipos de cadenas polipeptdicas: cada una
I

representada dos veces en la molcula y a cada una se encuentra asociado un


OH

grupo hemo. En el adulto estas cadenas reciben los nombres de alfa () y beta
(), de manera que la frmula subunitaria de la hemoglobina es 2 2.
PR

Los genes que codifican estas protenas se agrupan formando dos familias
cuyos miembros se expresan en diferentes momentos del desarrollo, como se
estudia en el captulo 3.
El gen que codifica la cadena alfa (HBA) est localizado en el cromosoma
16pter-p13.3, mientras que el de la beta (HBB) est en el 11p15.5. En ambos, la
zona de codificacin est interrumpida por dos intrones.
La mutacin que origina la sicklemia est en el gen de la cadena , que
hace que en la posicin 6 de esta protena en lugar de cido glutmico (que es
normal en esa posicin) aparece la valina. Se debe observar que se ha produci-
do el cambio de un aminocido polar inico (cido glutmico) por uno apolar.
Como la posicin 6 se encuentra hacia el extremo aminoterminal, que no pre-
senta una estructura secundaria regular, la presencia de la valina crea lo que se
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 195
ha llamado un extremo pegajoso, pues puede interactuar con otra molcula de
hemoglobina. A esta cadena se le llama S y a la hemoglobina que la contiene,
HbS.
Cuando las concentraciones de oxgeno en la sangre son normales la HbS
(hemoglobina S) se comporta igual que la HbA, pero cuando la presin parcial
de oxgeno disminuye, su solubilidad disminuye, se establecen interacciones por
medio de los extremos pegajosos, y la molcula se polimeriza formando estruc-
turas helicoidales que crecen rpidamente, deforman el eritrocito y pueden lle-
gar a romperlo produciendo la hemlisis y, con esta, la anemia. Los eritrocitos
deformados disminuyen su elasticidad, y esto hace difcil su paso por los capila-
res, provocando su obstruccin, lo cual explica los dolores abdominales durante
las crisis y los infartos del bazo. Los infartos continuados en el periostio van
provocando las alteraciones esquelticas.

N
Los eritrocitos deformados son reconocidos como extraos por el sistema
fagocitario, en especial, en el bazo. Se produce un catabolismo exacerbado de

CI
la hemoglobina y del grupo hemo como parte de esta. El catabolismo del hemo

UC
produce la bilirrubina que al acumularse en la sangre, pasa a los tejidos y se
hace visible a travs de la piel, dndole a esta el tinte caracterstico de la icteri-
OD
cia. Un esquema de la patogenia de esta enfermedad se muestra en la figura 11.6.
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 11.6. Patogenia de la anemia por hemates falciformes. Cuando existe una presin
parcial de oxgeno inferior a la normal en la sangre, el eritrocito se deforma adquiriendo
la forma de drepanocito (1). El drepanocito es ms rgido y puede obstruir vasos de
pequeo calibre (2), se puede romper y dar lugar a la hemlisis (3), que se puede acom-
paar de liberacin de hemoglobina al plasma (4) que se elimina por el rin
(hemoglobinuria). Los drepanocitos son fagocitados (5) y como consecuencia de la
degradacin del hemo se produce un exceso de bilirrubina que da lugar a la ictericia.
196 Introduccin a la Gentica Mdica

En el captulo 15, se explica ms sobre el origen y frecuencia de esta muta-


cin en la poblacin cubana que ha motivado, desde hace ms de 20 aos, un
programa nacional para la prevencin y el tratamiento de la sicklemia, cuyo
objetivo final es la prevencin de la enfermedad en sus tres niveles al proporcio-
nar informacin a las parejas heterocigticas sobre sus riesgos y ofrecer diag-
nstico del genotipo fetal. Sobre el asesoramiento gentico y fundamentos de
este programa se ofrece mayor informacin en los captulos 18 y 19.

Fibrosis qustica

La primera descripcin completa de la enfermedad fue realizada por Anderson


en 1936, quien la llam fibrosis qustica del pncreas. Estudios posteriores de-

N
mostraron una eliminacin incrementada de electrlitos por el sudor, con defi-

CI
ciencias en el transporte de cloruros, tanto en las glndulas sudorparas, como
en el epitelio respiratorio.

UC
La enfermedad se transmite como un carcter mendeliano autosmico
recesivo.
OD
Los sntomas principales aparecen como mal funcionamiento del aparato res-
piratorio debido a la formacin de un moco espeso y pegajoso que obstruye las
PR
vas aeras y propicia las infecciones, especialmente, por Pseudomonas.
RE

Tarde o temprano se presenta una insuficiencia pancretica por la obstruc-


cin de los conductos excretores, con cicatrizaciones posteriores, y la elimina-
SU

cin de la funcin pancretica en 85 % de los casos. En algn momento de la


evolucin de la enfermedad se presentan trastornos hepticos en 2 a 5 % de los
DA

casos. Los recin nacidos pueden presentar un tipo de obstruccin intestinal


BI

denominado leo meconial.


I

La infertilidad se presenta en casi 100 % de los hombres adultos y algo


OH

menos frecuente entre las mujeres.


El gen cuyas mutaciones da origen a la fibrosis qustica fue identificado en
PR

1989. Su locus en la regin cromosmica 7q31 tiene una longitud de 250 Kb,
cuya zona de codificacin est dividida en 27 exones. Se transcribe como un
ARNm de 6 500 nucletidos que al traducirse origina una protena de 1 480
aminocidos (170 kDa). Debido a las anormalidades en el transporte de iones,
provocadas por su mal funcionamiento, la protena fue denominada regulador
de la conductancia transmembranal de la fibrosis qustica, CFTR (del ingls,
cystic fibrosis transmembrane conductance regulador).
El CFTR, es miembro de la superfamilia de transportadores de membrana
ABC (del ingls, ATP-binding cassette) que se unen al ATP (adenosintrifosfato)
y utilizan su energa en el transporte de varias sustancias a travs de la mem-
brana. El CFTR es un canal de cloruros de la membrana plasmtica activado
por el AMP (adenosinmonofosfato), cuyo gen se expresa en tejidos con funcio-
nes diferentes como rin, pncreas, intestino, corazn, conductos deferentes,
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 197
pulmones y conductos de las glndulas sudorparas.
La protena est formada por dos motivos repetidos cada uno de los cuales
presenta seis hlices transmembranales adyacentes a un plegamiento de unin
al ATP. Los dos motivos estn separados por una regin citoplasmtica que
tiene una funcin reguladora, por lo cual se le llam dominio R. En la membrana
se forma un complejo multiprotenico que incluye, adems, protenas del
citoesqueleto y enzimas que intervienen en la regulacin del transportador. Un

N
CI
UC
OD
PR
RE

Fig. 11.7. Estructura del CFTR. El transportador de cloruro presenta dos dominios
transmembranales separados por una porcin globular orientada hacia el citoplasma.
SU

Contiene dos dominios de unin a nucletidos (DUN1 y DUN2) y un dominio regulador


(R). Est asociado con protenas del citoesqueleto como la erzina y la actina y a la enzima
DA

que lo regula que es la protena kinasa dependiente de AMPc (PKA). Otras protenas
BI

que forman parte del complejo no han sido representadas.


I
OH

esquema de este complejo aparece en la figura 11.7.


La prueba final de que el gen identificado es el causante de la fibrosis qustica,
PR

fue el descubrimiento de una mutacin en enfermos que no apareca en perso-


nas normales. Se trataba de un borramiento (delecin) de tres pares de bases
en el exn 10 que ocasionaba la ausencia de la fenilalanina en la posicin 508 de
la protena, y que fue denominada F508. Esta mutacin aparece, aproximada-
mente, en 70 % de los enfermos.
Con posterioridad se han identificado 1 400 mutaciones en el gen que causan
fibrosis qustica. La gran heterogeneidad allica de este gen explica que mu-
chos nios afectados sean heterocigticos compuestos, y se requiera de estu-
dios de ligamiento para la identificacin del cromosoma 7 que porta la mutacin.
Los detalles tcnicos y fundamentos biolgicos del empleo de marcadores
moleculares se explican en los captulos 12 y 13. Un resumen de los tipos de
mutaciones y de su repercusin sobre la protena se muestra en la tabla 11.2.
198 Introduccin a la Gentica Mdica
Tabla 11.2. Tipos de mutaciones descritas en el gen CFTR y sus efectos sobre el producto gnico

Clase Defecto molecular Alteracin del producto

I Aparecen codones de terminacin Una terminacin prematura de la transcri-


prematuros cin y generan una protena truncada o la
falta total de expresin del gen
II Prdida de aminocidos (incluye la Produce un mal plegamiento de la prote
mutacin F508) na que la retiene en el retculo endoplas-
mtico y es degradada prematuramente
III Cambio de aminocidos Capacidad reducida para el transporte
de cloruros por activacin anormal por el
ATP
IV Cambio de aminocidos Capacidad reducida para el transporte de
cloruros a travs de la membrana
V Defectos de empalme Reduccin en la cantidad de protena fun

N
cional

CI
Durante el procesamiento de las protenas en el retculo endoplasmtico, el

UC
CFTR interacta con chaperonas moleculares, entre las que se incluyen la
calnexina en la luz del retculo y las protenas del shock trmico HSP70 y HSP90
OD
del citosol. Normalmente esta interaccin es de corta duracin, pero cuando
aparece el F508-CFTR la interaccin se prolonga y esto conduce a la identifi-
PR
cacin de que la protena est mal plegada, y por lo tanto, se convierte en blanco
RE

de los mecanismos de degradacin de protenas asociado al retculo


endoplasmtico, ERAD (del ingls, endoplasmic reticulum associated protein
SU

degradation). Esto hace que el gen CFTR con la mutacin, no sea transporta-
do hacia la membrana plasmtica donde debe realizar su funcin.
DA

El transporte celular de electrlitos es un proceso, extremadamente, comple-


BI

jo, pues en l intervienen numerosos canales y transportadores, cuyas acciones


I

e interacciones son necesarias para el funcionamiento normal de las clulas. El


OH

movimiento de los electrlitos se acompaa siempre de movimiento de agua y al


existir un defecto en el movimiento del cloruro, se produce un trastorno de otros
PR

iones como el Na+ y el agua. Esto pudiera explicar la gran viscosidad que ad-
quieren las secreciones de los rganos donde el defecto es ms pronunciado,
provocando la obstruccin de los conductos y creando serios problemas para el
funcionamiento normal de estas glndulas y tejidos. El estasis y la obstruccin
favorecen la aparicin de infecciones que provocan lesiones que al cicatrizar
contribuyen an ms a la obstruccin. Con el tiempo se produce la disfuncin y
prdida celular de estos tejidos, lo cual explica las manifestaciones pulmonares,
sudorparas, pancreticas y genitales de estos enfermos.
En Cuba existe un programa de atencin integral a los nios enfermos y a sus
padres, como parte de la prevencin de enfermedades genticas, que cubre los
tres niveles de atencin y en especial la deteccin de parejas con riesgo gentico
en el nivel de la atencin primaria de salud (ver captulo 19).
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 199
Mutaciones en genes que codifican protenas estructurales

A los efectos de este captulo se entiende por protenas estructurales aque-


llas con estructura fibrilar (al menos en parte de la molcula), que forman la
armazn de estructuras intracelulares, como la distrofina del tejido muscular o
de la sustancia intercelular, especialmente, del tejido conectivo. En este ltimo
caso, de acuerdo con su abundancia, se acostumbra a dividirlas en componen-
tes mayores (colgeno, elastina, etc.) y menores (fibrilina, vitronectina, etc.).
Adems de las protenas fibrilares la sustancia intercelular est formada por
proteoglicanas que son protenas conjugadas con polisacridos de alto peso
molecular, cuyo grado de hidratacin permite la humectacin de los tejidos y
actan como una especie de tamiz molecular para el paso de molculas, iones y
agua desde la sangre hacia las clulas y desde estas hacia la sangre.

N
La funcin del tejido conectivo, como su nombre indica, es la de servir de
elemento de unin y sostn a diferentes tejidos y dar forma y consistencia a las

CI
diferentes partes del organismo. Si por efecto de mutaciones, algunos de los

UC
componentes fibrilares estn anormales o ausentes, esto puede repercutir sobre
varios sistemas, especialmente, aquellos donde la protena defectuosa o ausente
OD
desempea una funcin fundamental. Estas consideraciones sern ilustradas
con dos ejemplos importantes, los cuales se explican a continuacin.
PR
RE

Osteognesis imperfecta
SU

Esta enfermedad se presenta con cuadros clnicos diferentes, lo cual ha per-


DA

mitido clasificarla en cuatro tipos, siendo el tipo II el ms grave (letal en el


periodo perinatal), el tipo II moderadamente grave y los tipos I y IV con mani-
BI

festaciones ms o menos ligeras.


I

La caracterstica ms sobresaliente de la osteognesis imperfecta es la fra-


OH

gilidad sea que en ocasiones produce un acortamiento de la duracin de la vida


PR

de los pacientes. Las fracturas pueden ser frecuentes y estar acompaadas de


baja estatura, deformidades seas, dentinognesis imperfecta, prdida de la
audicin, alteraciones de la esclertica (muy comn las esclerticas azules) y
otras evidencias de anormalidades del tejido conectivo.
En casi todos los individuos la osteognesis imperfecta es el resultado de
mutaciones en uno de los dos genes que codifican las cadenas polipeptdicas
que forman el colgeno de tipo I. En la figura 11.8 se muestran las esclerticas
azules como parte del efecto pleiotrpico de algunos tipos de esta enfermedad.
200 Introduccin a la Gentica Mdica

Fig. 11.8. Osteognesis imperfecta. Se muestra la foto de un nio donde se puede


observar el color azul de las esclerticas.

El colgeno del tipo I es el ms distribuido en la protena fibrosa principal de


la matriz extracelular del tejido conectivo, aunque existen aproximadamente
veinte tipos. Cualquiera que sea el tipo el colgeno est formado por dos

N
polipptidos, denominados 1 y por otro llamado 2. El tipo de colgeno se

CI
indica por un nmero romano entre parntesis despus del polipptido corres-
pondiente. As, la frmula del colgeno tipo I se escribe [ 1(I)]2[ 2(I)].

UC
En la osteognesis imperfecta se puede presentar heterogeneidad gentica,
tanto intraallica, como interallica.
OD
Como en el caso de todas las protenas, la sntesis del colgeno comienza con
PR
la traduccin del ARNm por el ribosoma; una vez que el pptido seal ha salido
del ribosoma, es transportado hacia la membrana del retculo endoplsmico ru-
RE

goso, donde la protena es descargada hacia la luz del organelo. La peptidasa,


que sirve de seal, elimina el pptido seal y la cadena polipeptdica contina
SU

creciendo. A un tiempo son modificados residuos de prolina (por hidroxilacin


en la posicin 4 o 3) y de lisina (por hidroxilacin en la posicin 5) se aaden
DA

oligosacridos (por oligosacariltransferasas especficas) se forman los puentes


BI

disulfuro (por la protena disulfuro isomerasa) y se modifica la configuracin de


I

algunos enlaces peptdicos en los cuales interviene la prolina (por la


OH

peptidilprolilisomerasa).
En la medida en que los polipptidos se sintetizan se produce su asociacin.
PR

Es importante conocer que la nucleacin de las cadenas comienza por el


extremo carboxilo-terminal y crece hacia el amino-terminal mientras que se
forma la caracterstica de triple hlice del colgeno.
Por otra parte, las enzimas mencionadas que modifican al polipptido, solo lo
pueden hacer mientras este no se ha asociado a la triple hlice.
Una vez formada la triple hlice (procolgeno), la molcula es segregada a la
matriz extracelular donde peptidasas especficas eliminan las zonas no
helicoidales, tanto del extremo aminoterminal, como del carboxiloterminal. Por
ltimo ocurre el ensamblaje de las fibras con la formacin de los enlaces
entrecruzados entre diferentes fibrillas. Los fallos en cualquiera de estas etapas
pueden producir un colgeno alterado y con esto la aparicin de la enfermedad.
El proceso de biosntesis del colgeno se resume en la figura 11.9
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 201

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I

Fig. 11.9. Sntesis del colgeno. Los ribosomas asociados al retculo endoplasmtico
OH

liberan la cadena polipeptdica hacia su luz donde es hidroxilado por la 3-prolina hidroxilasa
(3PH), 4-prolina hidroxilasa (4PH) y la 5-lisina hidroxilasa (5LH). Los pasos siguientes se
PR

indican en la figura. NP: proteasa del extremo amino; CP: proteasa del extremo carboxilo.

A continuacin solo se hace referencia a la heterogeneidad intraallica por


ser la mejor conocida. El gen que codifica la cadena a1(I) (COL1A1) est
localizado en la regin cromosmica 17q21-q22, se extiende 18 Kb y est divi-
dido en 51 exones mientras que el de a2(I) (COL1A2) est en 7q21-q22, ocupa
38 Kb y est formado por 52 exones.
Se han descrito ms de 200 mutaciones diferentes que afectan la sntesis o la
estructura del colgeno en la osteognesis imperfecta que se pueden agrupar
en dos tipos:
Las que producen una reduccin en la produccin del colgeno, aunque con
estructura normal y originan un fenotipo leve (tipo I).
202 Introduccin a la Gentica Mdica

Las que producen alteraciones en la estructura de la protena que origina


tipos ms severos (II, III y IV).

La presencia de un alelo nulo de la cadena 1 (que no origina producto) hace


que se produzca una cantidad reducida del colgeno, pero como este tiene una
estructura normal permite cierto grado de mineralizacin del hueso y de funcio-
namiento de otros tipos de tejido conectivo.
La mayora de las mutaciones en este tipo dan lugar a la aparicin de codones de
terminacin prematuros o cambios de aminocidos muy cercanos al extremo amino-
terminal (el ensamblaje de la triple hlice comienza por el extremo amino-terminal).
Esto explica que este tipo I sea clnicamente leve y muestre huesos frgiles,
pero sin deformaciones, esclerticas azules y sordera en algunos casos.
Las mutaciones que producen cambios de aminocidos tienen efectos dife-
rentes dependiendo: del gen donde se produce la mutacin (COL1A1 o

N
COL1A2); del sitio que ocupa la mutacin en el gen y del aminocido sustituto.
As, el cambio G94C produce un tipo I, G904C produce el tipo II con carac-

CI
tersticas letales; G596C da lugar al tipo III (severo, pero no letal) y G382C da

UC
lugar al tipo IV menos grave que el III.
Las mutaciones dan fenotipos ms graves cuando estn ms cercanas al
OD
extremo carboxilo-terminal. Esto se explica teniendo en cuenta que la forma-
cin de la triple hlice comienza por ese extremo, lo cual se dificulta por la
PR
presencia de mutaciones.
RE

Como las enzimas que modifican los aminocidos prolina y lisina actan so-
bre los aminocidos que an no forman parte de la triple hlice y esta formacin
es ms lenta por efecto de las mutaciones, se produce una cadena
SU

hipermodificada que dificulta su secrecin y la asociacin con otras cadenas,


alterando la estructura de las fibras de colgeno, lo cual produce una
DA

mineralizacion pobre y un funcionamiento anormal de los otros tejidos conectivos.


BI

Por ejemplo, en el tipo II (mutaciones con predominio hacia el extremo


I

carboxilo-terminal) se manifiestan fracturas frecuentes, deformidades seas,


OH

esclerticas oscuras y muerte en el primer mes de vida.


Sin embargo el tipo III (predominan las mutaciones algo alejadas del extremo
PR

carboxilo-terminal) presenta fracturas que pueden ser al nacimiento, deformi-


dades seas progresivas, crecimiento limitado, esclerticas azules, dentinognesis
imperfecta y sordera.
Aunque la osteognesis imperfecta no es una enfermedad frecuente, se ha
credo conveniente hacer un estudio algo ms detallado de esta, pues es un buen
modelo, el cual evidencia algunos aspectos importantes de la relacin entre los
defectos moleculares y el cuadro clnico de una enfermedad de origen gentico.

Sndrome Marfan

Esta entidad fue descrita por el mdico francs Antoine Marfan en 1896.
Los enfermos presentan un trastorno generalizado del tejido conectivo que afecta,
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 203
principalmente, los sistemas esqueltico, cardiovascular y ocular. Las extremi-
dades se caracterizan por ser largas y delgadas de modo que la brazada es ms
larga que la talla. A esto se suman deformidades esquelticas como dolicocefalia,
aracnodactilia, escoliosis, pectum excavatum y carinatum, etc. A veces se
acompaa de subluxacin del cristalino, posiblemente, por debilidad del liga-
mento suspensorio del lente que puede evolucionar hacia la ceguera. Aparecen
aneurismas, especialmente de la aorta, por debilidad de las paredes arteriales y
cuya ruptura puede ser la causa de la muerte en muchos pacientes. El hallazgo
de laboratorio ms importante es la excrecin urinaria incrementada de
hidroxiprolina.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 11.10. Sndrome Marfan. Se muestran caractersticas fenotpicas de este sndrome.


a) Visin general de las deformidades esquelticas. b) Subluxacin del cristalino. c)
Deformacin y dilatacin del arco artico. d) La aracnodactilia.
204 Introduccin a la Gentica Mdica

La figura 11.10 muestra algunas de las caractersticas fenotpicas del sndro-


me Marfan de carcter esqueltico y cardiovascular.
Se presenta con una frecuencia de 1 por cada 10 000 habitantes y, aproxima-
damente, 15% de los casos se deben a mutaciones nuevas. Se transmite como
un carcter mendeliano autosmico dominante pero con expresividad variable,
es decir, todos los pacientes no presentan el mismo estado de gravedad.
La protena cuyas alteraciones dan origen al sndrome Marfan es la fibrilina,
la cual es un componente fibrilar menor del tejido conectivo. El gen de la fibrilina
(FBN) ha sido localizado en la regin cromosmica 15q21.1, se extiende 110 Kb
y consta de 65 exones, de los cuales 60 comienzan y terminan en fase.
Es interesante destacar que de los 57 motivos estructurales similares a los
del factor de crecimiento epidrmico (EGF), 50 estn codificados en el mismo
exn. La primera mutacin identificada fue R239P dentro de uno de los motivos

N
del EGF a lo cual sigui el descubrimiento de otras que tambin alteran la es-
tructura secundaria de los motivos del EGF y algunas que producen codones de

CI
terminacin prematuros, produciendo protenas truncadas. La distribucin de la

UC
fibrilina en el organismo coincide con los sitios afectados por sus mutaciones,
esto es; sistema seo, ligamento suspensorio del cristalino y paredes de los
grandes vasos. OD
Como se puede deducir de los ejemplos estudiados, las mutaciones en genes
PR
que codifican protenas estructurales pueden producir una cantidad disminuida
RE

del producto o tambin un producto anormal.


En ninguno de los dos casos los productos de los alelos normales pueden
SU

suprimir el efecto de la mutacin y por eso las enfermedades de este tipo se


expresan en el genotipo heterocigtico.
DA
BI

Mutaciones en genes que codifican protenas


I

que intervienen en el desarrollo embrionario


OH
PR

El desarrollo embrionario est sujeto a un estricto programa gentico donde


parte de los genes se expresan en un intervalo de tiempo, relativamente, corto y
adems en las etapas intermedias y finales del proceso su expresin es espec-
fica de los tejidos particulares.
Cuando por alguna causa, uno de estos genes no se expresa en el momento
y lugar adecuados se producen anormalidades que casi siempre se manifiestan
por la ausencia de un rgano, un tejido o parte de estos.
Los primeros estudios exitosos sobre gentica del desarrollo se realizaron en
la mosca del vinagre (Drosophyla melanogaster) que en la actualidad es el
organismo pluricelular mejor estudiado desde el punto de vista gentico.
A principios del siglo XX cuando no se conoca la estructura del ADN, Thomas
Hunt Morgan realiz numerosos experimentos con la mosca. El procedimiento
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 205
consista en exponerla a la accin de agentes mutagnicos y despus estudiar
los efectos en la descendencia.
As comenzaron a identificarse mutaciones que producan alteraciones del
desarrollo. Por ejemplo, moscas sometidas a mutgenos originaban en su des-
cendencia animales que carecan de ojos; al gen cuyas mutaciones originaba
ese fenotipo se le denomin eyeless (del ingls, sin ojos) o carecan de alas,
wingless (del ingls, sin alas), o no desarrollaban el segmento ceflico y dupli-
caban el caudal (bicaudal).
Lo ms interesante y sorprendente result el hallazgo de que genes homlogos
a los de la Drosophyla existan en todos los animales incluyendo al hombre. En
muchas ocasiones existen varios genes derivados del gen de la Drosophyla
mostrando las familias gnicas.
La mayora de los genes (si no todos) que intervienen en el desarrollo codifi-

N
can factores de transcripcin gnico especficos (ver captulo 3) y con una
expresin limitada a algunos tejidos.

CI
Un factor de transcripcin requiere de dos dominios, uno de estos para la

UC
unin al ADN y el otro para estimular la transcripcin (transactivacin). Las
secuencias de ADN que codifican esos dominios son denominadas, en ingls,
OD
box. Por esa causa casi todas las abreviaturas empleadas en la denominacin
de estos genes terminan en x.
PR
Una familia de genes se caracteriza porque todos sus miembros tienen una
RE

secuencia de bases en comn y codifican protenas con dominios similares. As,


los genes que tienen en comn la secuencia de bases caracterstica del gen
SU

SRY, pertenecen a la familia SOX (del ingls, Sry box).


DA

Sndrome Waardenburg
BI
I

Esta entidad fue descrita por Waardenburg en 1951 y se caracteriza por un


OH

desplazamiento hacia fuera de los cantos internos con fisuras palpebrales cor-
tas, puente nasal ancho, con alas nasales hipoplsicas, albinismo parcial mani-
PR

festado por unos fondos de ojo hipopigmentados, pestaas, cejas y mechn


anterior de color blanco, lesiones cutneas hipopigmentadas, iris hipocrmico y
sordera, aunque pueden aparecer otras manifestaciones con menor frecuencia.

Fig. 11.11. Sndrome Waardenburg. En la foto se puede observar la diferencia de color


en el iris de cada ojo. Este signo se conoce como anisocroma del iris.
206 Introduccin a la Gentica Mdica

La figura 11.11 muestra un nio con heterocromia del iris y desplazamiento


hacia fuera.
El sndrome Waardenburg se origina debido a una mutacin inactivante de
uno de los genes de la familia PAX. El miembro fundador de esta familia es el
gen paired (llamado as porque sus mutaciones producan alteraciones en seg-
mentos pareados) de Drosophyla melanogaster.
En los humanos esta familia consta de, al menos, nueve miembros nombra-
dos de PAX 1 al 9. Las protenas codificadas por estos genes son factores de
transcripcin que tienen en comn el dominio de unin al ADN que se encuen-
tra hacia el extremo amino-terminal (dominio Pax). El gen relacionado con el
origen del sndrome Waardenburg es el PAX 3 que est localizado en la regin
cromosmica 2q35.
El gen PAX 3 se expresa en la cresta neural en desarrollo y sus mutaciones

N
producen una disminucin o deficiencia de esa estructura como los melanocitos

CI
del pelo, los ojos, el odo interno con albinismo parcial, heterocroma del iris y
sordera neurosensorial.

UC
Es interesante que las anormalidades de la pigmentacin se deban a la au-
sencia funcional del gen MITF que se expresa en las clulas pigmentarias, pero
OD
su expresin est controlada por PAX 3. De esta manera al faltar PAX 3 tam-
PR
bin se produce una deficiencia de la accin de MITF.
RE

Mutaciones en genes que codifican proteinas


SU

que intervienen en el ciclo celular


DA

El ciclo celular se estudi en el captulo 2. Aqu solo es conveniente recordar


BI

que existen numerosos genes cuyos productos intervienen en los mecanismos


I

de progresin y regulacin del ciclo celular. Gran nmero de estos tienen un


OH

efecto positivo, es decir, estimulan la progresin del ciclo, mientras que otro
PR

grupo, tambin numeroso, tiene un efecto negativo, esto es, inhiben los mecanis-
mos de proliferacin del ciclo que conducen a la divisin celular.
En condiciones normales existe un balance entre las acciones de esos dos
grupos de protenas de manera que la proliferacin celular solo ocurra con algu-
na intensidad en el momento y el lugar adecuados.
Las protenas que ejercen el control positivo, generalmente, se sintetizan en
forma inactiva y deben alcanzar su estado funcional por alguna modificacin
postraduccional (fosforilacin, acetilacin, etc). Las que ejercen el control ne-
gativo por lo general son sintetizadas en forma activa y para que el ciclo progre-
se deben ser inactivadas tambin por modificaciones postraduccionales.
Por lo tanto, mutaciones que producen protenas de control positivo activa-
das, permanentemente, o de control negativo inactivas, conducirn a un descontrol
Enfermedades causadas por mutaciones monognicas 207
del ciclo celular con un aumento en la proliferacin celular. En la mayora de los
casos esta proliferacin incontrolada conduce al cncer.

Retinoblastoma

El retinoblastoma es un tumor maligno de las clulas precursoras de la retina


(retinoblastos). Se presenta en dos modalidades:
Una forma familiar con la presencia de tumores desde el nacimiento o muy
temprano, son bilaterales (en los dos ojos) y multifocales (ms de uno en el
mismo ojo). En estos casos existen antecedentes familiares con la enferme-
dad.
La otra modalidad es la espordica, en la cual el tumor se presenta ms
tarde, por lo general es uno solo y no existen antecedentes familiares.

N
Un estudio epidemiolgico profundo de esta entidad llev a Alfred Knudson a

CI
postular la hiptesis de los dos eventos mutacionales. Segn esta hiptesis

UC
ambos tipos de retinoblastoma se deben a mutaciones del mismo gen, pero en el
caso familiar el nio heredaba uno de los alelos mutados de sus progenitores,
OD
mientras que en el espordico no exista esta transmisin.
En la modalidad familiar todas las clulas precursoras de la retina (y todas las
PR
del organismo) presentan uno de los alelos mutado; por lo tanto, en cualquier
RE

clula que se produce una mutacin inactivante del otro alelo la funcin de la
protena estar ausente. En el caso espordico es necesaria una primera muta-
SU

cin que inactive a uno de los alelos y que la segunda mutacin se produzca en
la misma clula.
DA

Como las mutaciones no son eventos muy frecuentes, esto explica porqu en
BI

la modalidad espordica el cncer aparece ms tarde y es un solo tumor.


I

El gen cuyas mutaciones dan origen al retinoblastoma fue identificado y nom-


OH

brado, por razones obvias, RB. Est localizado en la regin cromosmica 13q14
y codifica una protena de 110 kDa (pRb). La protena presenta hacia la zona
PR

central una especie de bolsn por donde se une al factor de transcripcin E2F,
e inhibe la progresin del ciclo celular.
Durante la etapa G1 del ciclo celular, pRb es fosforilada por el complejo
Cdk4/ciclina D, lo que la disocia del E2F y permite el trnsito de la clula hacia
la etapa S del ciclo celular. Es interesante que la mayor parte de las mutaciones
identificadas en pRb se encuentren en la zona del bolsn, la que impide la aso-
ciacin con E2F y elimina su funcin inhibitoria sobre el ciclo celular.

Resumen

Los genes y entre estos aquellos que codifican protenas son el blanco de
208 Introduccin a la Gentica Mdica

agentes internos y externos que pueden daarlos. Si esos daos no son repara-
dos se originan las mutaciones que se transmiten de generacin en generacin.
Cuando esas mutaciones modifican el contenido informativo de un solo gen
se les denomina monognicas, denominacin que tambin se emplea para las
enfermedades producidas por esas mutaciones. Los efectos de las mutaciones
monognicas dependen de dos factores principales: la zona del gen donde se
producen y la funcin del producto gnico.
Como las protenas realizan variadas funciones en el organismo, las manifes-
taciones clnicas dependen de la funcin ausente, exacerbada o disminuida de la
protena, de los tejidos donde el gen se expresa y del momento del desarrollo
cuando se debe expresar.
El conocimiento de las bases moleculares de las enfermedades monognicas
y de sus mecanismos patognicos moleculares ha permitido disear teraputi-

N
cas efectivas en algunos casos y es de esperar que en los prximos aos el

CI
nmero de enfermedades monognicas con tratamiento efectivo vaya crecien-
do consistentemente.

UC
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OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR
210 Introduccin a la Gentica Mdica

Captulo 12
MTODOS Y APLICACIONES
DEL ADN RECOMBINANTE

N
CI
UC
Estela Morales Peralta

OD
PR
La aplicacin de las tcnicas citogenticas permite identificar las alteracio-
RE

nes cromosmicas, tanto numricas como estructurales, as como interesantes


mecanismos biolgicos que explican la patogenia de muchas enfermedades.
SU

Para conocer la localizacin y la caracterizacin de los genes que se expre-


san como caracteres diversos del organismo humano (normales o no) se requie-
DA

re de la aplicacin de las tcnicas de biologa molecular. Estos procedimientos


BI

han revolucionado la gentica mdica, ampliando las posibilidades diagnsticas


I

y, sin lugar a dudas, son la esperanza de una nueva teraputica.


OH

En este captulo se analizan las herramientas en las cuales se basa esta nue-
va tecnologa, las principales tcnicas que se aplican, su interpretacin y su
PR

utilidad en gentica mdica.


Las tcnicas de biologa molecular se pueden agrupar en dos reas principa-
les:
Clonacin del ADN.
Anlisis molecular del ADN.

Clonacin del ADN

Se nombra clonacin a todos los procedimientos que tienen como objetivo


obtener mltiples copias idnticas (o casi idnticas) de molculas, clulas, etc.
Estos son indispensables cuando se necesita utilizar un nmero grande de mol-
culas o clulas para estudios posteriores.
Mtodos y aplicaciones del ADN recombinante 211
As, la clonacin del ADN se refiere a las tcnicas encaminadas a obtener
numerosas copias idnticas (o casi idnticas) de un fragmento especfico de
ADN.
En general se distinguen dos tipos de procedimientos de acuerdo a que se
realicen in vivo o in vitro.
La clonacin in vivo es la que se efecta en organismos vivos (casi siempre
microorganismos) para la reproduccin del ADN. Por su parte, la clonacin in
vitro emplea componentes celulares aislados para realizar este propsito. El
procedimiento por excelencia de la clonacin in vitro es la reaccin en cadena
de la polimerasa o PCR (del ingls, polymerase chain reaction). Como la
PCR se utiliza tambin como tcnica de anlisis del ADN, se incluye en este
acpite.

N
Clonacin in vivo

CI
Para la clonacin in vivo, tambin llamada clonacin molecular, el ADN que

UC
se desea clonar se transfiere a una clula con la ayuda de un vector el cual es
otra molcula de ADN que tiene la propiedad de poder replicarse de forma
OD
autnoma. Cuando se utiliza solo con este propsito recibe el nombre de vector
PR
de clonacin. Para la formacin del vector de clonacin, adems de las molcu-
las de ADN, se requiere el empleo de enzimas de restriccin y de enzimas ADN
RE

ligasas.
SU

Enzimas de restriccin y ligasas. Su papel en la clonacin


DA

Las enzimas de restriccin son endonucleasas de origen bacteriano, que cons-


BI

tituyen en estos organismos un mecanismo de defensa contra los ADN extra-


I

os. Reconocen una secuencia especfica de nucletidos y cortan la molcula


OH

de ADN en un punto especfico, llamado sitio o diana de restriccin. Estas


PR

secuencias suelen ser palindrmicas, es decir, idnticas en ambos sentidos de


las dos hebras del ADN. Las enzimas de restriccin que reconocen la misma
secuencia son isoesquizmeros. En la actualidad se conocen ms de 1 000 en-
zimas de restriccin. La tabla 12.1 ilustra los sitios de corte de algunas de estas.
Las enzimas de restriccin se nombran de acuerdo con el microorganismo de
donde provienen. La primera letra (en mayscula) es la inicial de la especie; las
dos siguientes (en minscula) el gnero, seguidas por un nmero romano, aten-
diendo al orden de su descubrimiento.
Segn la forma en que las enzimas cortan al ADN dentro del sitio de recono-
cimiento se originan dos tipos de extremos. Si el corte se produce en el mismo
lugar en las dos hebras, se forman extremos romos, pero si se produce en
lugares diferentes, genera pequeos sectores monofibrilares conocidos como
extremos cohesivos o escalonados (Fig. 12.1).
212 Introduccin a la Gentica Mdica
Tabla 12.1. Enzimas de restriccin

Nombre de Secuencia reconocida


la enzima Bacteria de origen y puntos de corte Tipo de extremos

Bal I Brevibacterium albidum -T-G-G / C-C-AA-C-C \ G-G-T- Romos


Bam HI Bacillus amylo- -G / G-A-T-C-CC-C-T-A-G \ G- Cohesivos, cola
licuefaciens H 5'
Eco RI Escherichia coli EY13 -G /A-A-T-T-CC-T-T-A-A \ G- Cohesivos, cola 5'
Hae III Haemophylus aegyptus -G-G / C-CC-C \ G-G- Romos
Hind III Haemophylus -A / A-G-C-T-TT-T-C-G-A \ A- Cohesivos, cola 5'
influenciae Rd
Not I Norcadia otiditis caviarum -G-C / G-G-C-C-G-C
C-G-C-C-G-G \ C-G- Cohesivos, cola 5'
Pst I Providencia stuartii -C-T-G-C-A / GG \ A-C-G-T-C- Cohesivos, cola 3'
Pvu II Proteus vulgaris -C-A-G / C-T-GG-T-C \ G-A-C- Romos

N
Sma I Serratia marcescens Sb -C-C-C / G-G-GG-G-G \ C-C-C- Romos
Xho I Xantomonas holcicola -C / T-C-G-A-GG-A-G-C-T \ C- Cohesivos, cola 5'

CI
UC
Estos segmentos monofibrilares pueden contener, bien el extremo 3 o
bien el 5.
OD
Cuando se exponen molculas de ADN de distintos orgenes, a una misma
PR
enzima de restriccin que genere extremos cohesivos, se producen fragmentos
de ADN que son complementarios. Si estos se ponen en contacto, sus sectores
RE

complementarios tienden a aparearse y las dos molculas se pueden unir. Para


esto ltimo se requiere de enzimas ADN ligasas que catalizan la unin de frag-
SU

mentos de ADN donde solo falta un enlace fosfodister, en caso de que estas
hebras formen parte de una molcula bifibrilar. La unin de estos fragmentos de
DA

ADN de distinto origen produce lo que se conoce como, ADN recombinante.


BI
I

Vectores
OH
PR

Un vector es una molcula de ADN que se logra replicar, autnomamente,


dentro de una clula hospedera (que puede ser una bacteria o una levadura) de
la cual se puede aislar en forma pura para su anlisis.
Los vectores se utilizan en la clonacin in vivo. La clonacin de un fragmen-
to de ADN humano insertado en un vector, permite la multiplicacin de este en
millones de copias, ya que, por un lado, el vector que se replica puede producir
un alto nmero de copias por cada clula y, por el otro, la bacteria o levadura
hospedera puede crecer indefinidamente en el laboratorio.
Entre los principales vectores se encuentran:
Plsmidos.
Bacterifagos.
Cromosomas artificiales de levadura o YAC (del ingls, yeast artificial
chromosome).
Mtodos y aplicaciones del ADN recombinante 213

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 12.1. Tipos de cortes de las enzimas


de restriccin. Observe que la secuencia
de bases de ambas hebras del ADN son
idnticas en relacin con el eje de corte,
por esto se dice que las secuencias son
palindrmicas.

Estos vectores difieren, entre otras caractersticas, en el tamao del ADN de


inters que permiten insertar para obtener las copias deseadas.
214 Introduccin a la Gentica Mdica

Plsmidos

Los plsmidos son molculas circulares de ADN las cuales se replican de


forma independiente al ADN cromosmico en bacterias y levaduras. Son porta-
dores de genes no cromosmicos, entre estos: los que confieren resistencia a
antibiticos, caracterstica muy aprovechada para identificarlos.
Los plsmidos pueden incorporar fragmentos de ADN hasta de 10 Kb de
longitud.

Bacterifagos

Los bacterifagos son virus compuestos por un ADN de doble hebra, relati-
vamente, largo y cubierto por protenas. Infectan las bacterias al inyectar su

N
ADN y dejan fuera sus protenas. Aprovechan el aparato metablico de la
bacteria para la replicacin de su ADN.

CI
Los bacterifagos admiten ADN extrao hasta de 50 Kb de longitud.

UC
Cromosomas artificiales de levadura
OD
PR
Los cromosomas artificiales de levadura o YAC, constan de todos los ele-
mentos necesarios para su replicacin, como son: las secuencias de replicacin
RE

autnomas, los centrmeros y los telmeros. En estos se han logrado insertar


molculas de ADN de varios centenares de Kb.
SU
DA

Transformacin del organismo husped y obtencin


BI

del ADN especfico


I
OH

Cuando un vector ha sido bien construido, su introduccin en una clula de-


PR

terminada provoca cambios en el fenotipo de esta, fenmeno conocido como


transformacin.
El fenotipo transformado es el que permite identificar clulas que han capta-
do el vector.
Por ejemplo, si una clula es sensible a la tetraciclina y el vector contiene un
gen de resistencia a este antibitico, se produce la transformacin de una clula
sensible en una resistente.
Las clulas resistentes a la tetraciclina son las que incorporan el vector de
clonacin que fue diseado. Una vez dentro de la clula, el vector se replica y
su resultado es la obtencin de mltiples copias del ADN de inters.
Como la membrana de estos organismos, generalmente, no es permeable a
grandes molculas se requiere de su modificacin mediante la exposicin a
ciertas sales de calcio o voltajes elevados para lograr la penetracin del vector.
Mtodos y aplicaciones del ADN recombinante 215
Este ADN recombinante se replica en las clulas hospederas, colocadas en
medio de un cultivo adecuado, hasta lograr el nmero deseado de copias idnti-
cas (Fig. 12.2).

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA

Fig. 12.2. Si se expone el ADN de inters y el vector a las mismas enzimas de restriccin
BI

que generen extremos monofibrilares, se pueden unir a sus secuencias complementarias


I

mediante la accin de enzimas ligasas lo que crea una molcula de ADN recombinante,
OH

es decir, de dos orgenes distintos: del vector y de la secuencia de inters, que puede ser
humana.
PR

Para poder seleccionar las clulas que han incorporado el vector, este de
forma habitual se construye de modo que su ADN contenga genes de resisten-
cia a determinados antibiticos.
Por ejemplo, se puede construir el vector con un plsmido que porta los genes
que confieren resistencia a la tetraciclina y a la ampicilina, con posterioridad se
selecciona la enzima de restriccin que corte el ADN precisamente en el inte-
rior de uno de estos genes (por ejemplo, el de la tetraciclina). Si se toma como
hospedera una bacteria sensible a ambos antibiticos, se logra la transforma-
cin deseada, pues las que incorporan el plsmido, son transformadas en resis-
tentes a la ampicilina. Si las bacterias se cultivan en un medio al cual se ha
216 Introduccin a la Gentica Mdica

aadido la ampicilina, solo podrn crecer, adecuadamente, las clulas que incor-
poraron el plsmido.
Las bacterias con el plsmido donde no se produjo la recombinacin, son
resistentes a ambos antibiticos.
Para identificarlas se hace una rplica de la placa de cultivo, se coloca un
material absorbente (puede ser papel de filtro) sobre la placa para que algunas
bacterias se adhieran a este y despus, cuidadosamente, se colocan sobre otra
placa de cultivo que contiene la tetraciclina.
Las colonias que aparecen en la placa original y no aparecen en la rplica
son las sensibles a la tetraciclina y, por lo tanto, las que incorporaron el vector.
Estas colonias se siembran de nuevo en un medio enriquecido para lograr su
rpido crecimiento. Las colonias de bacterias que poseen una secuencia espe-
cfica pueden ser seleccionadas, tambin, al transferir su ADN a filtros de nitro-

N
celulosa y desnaturalizarlo para obtener ADN de una sola hebra, que se pueden

CI
hibridar con oligonucletidos marcados radiactivamente (sondas moleculares) y
as detectar las colonias que contienen la secuencia especfica y se cultivan

UC
aparte.
Las sondas moleculares son molculas de ADN de una sola hebra, que se
OD
obtienen por sntesis artificial a partir de sus nucletidos componentes. Las
PR
sondas se utilizan para localizar una secuencia especfica de ADN.
Al desnaturalizarse el ADN, sus dos hebras se separan, si se aade una
RE

sonda cuya secuencia sea complementaria a un sector de ese ADN, la sonda se


une por complementariedad de bases. Como la sonda est marcada con istopos
SU

radiactivos o reactivos fluorescentes, se puede localizar con relativa facilidad.


DA
BI

Anlisis molecular
I
OH

Las tcnicas de anlisis molecular difieren de acuerdo con el tipo de molcu-


la al cual se aplican: ADN, ARN o protenas. Entre estas se encuentran:
PR

1. Para el anlisis del ADN:


Tcnica de Southern (southern blotting).
Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Secuenciacin.
2. Para el anlisis de ARNm:
Northern blotting.
3. Para el estudio de las protenas:
Western blotting.

Para los anlisis de ADN, es importante el conocimiento que se tenga del gen
o genes implicados en la enfermedad que se sospecha. Tienen como objetivo la
deteccin de una secuencia de nucletidos.
Mtodos y aplicaciones del ADN recombinante 217
Las tcnicas que se aplican pueden ser:
Mtodos directos.
Mtodos indirectos.

Mtodos directos

Se utilizan cuando el propsito es la identificacin de secuencias especficas


de nucletidos que constituyen mutaciones causales de una enfermedad. Se
deben aplicar siempre que sea posible. No precisan del estudio de otros miem-
bros de la familia.

Tcnica de Southern

N
Esta tcnica (southern blotting), fue descrita por Edward Southern en 1975,

CI
de ah su nombre. Se basa en la transferencia por capilaridad de fragmentos de
ADN digeridos con enzimas de restriccin y separados por electroforesis en gel

UC
de agarosa. La corrida electrofortica permite separar los mltiples fragmentos
OD
obtenidos de acuerdo con su peso molecular. Los ms ligeros migran o se sepa-
ran ms del punto de aplicacin de la muestra, mientras que los ms pesados
PR
quedan ms cercanos al origen. Luego se procede a la separacin de la doble
hlice mediante la desnaturalizacin alcalina y neutralizacin posterior.
RE

Estas cadenas simples de ADN se transfieren por capilaridad, tal como ocu-
SU

rre con la tinta en un papel secante (de ah la palabra blotting o mancha) a un


soporte slido que puede ser un filtro de nylon o de nitrocelulosa. Con posterio-
DA

ridad, el filtro se pone en contacto con una sonda marcada radiactivamente,


especfica para el fragmento de ADN que se quiere analizar.
BI

Se somete a lavados para eliminar el exceso de sonda que no ha hibridado


I

con los fragmentos de inters (o que lo hizo inespecficamente), se exponen a


OH

una placa fotogrfica en un casete con pantalla amplificadora y se someten


PR

a 70 oC durante 48 a 72 h, lo cual permite visualizar estos fragmentos al revelar


la placa (Fig. 12.3).

Tcnica de reaccin en cadena de la polimerasa

En 1985, Saiki Mullis y sus colaboradores describieron una tcnica conocida


como PCR (reaccin en cadena de la polimerasa), que consiste en la amplifica-
cin in vitro de secuencias especficas de ADN.
Mediante este procedimiento se pueden generar grandes cantidades de un
fragmento de ADN, a partir de una cantidad mnima de este.
Por lo tanto, la PCR es una forma de clonacin in vitro de un segmento de
ADN (Fig. 12.4).
218 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
Fig. 12.3. Esquema que representa el procedimiento de transferencia de ADN (Southern
OD
blotting). Los detalles se explican en el texto.
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 12.4. Reaccin en cadena de la polimerasa. Observe que, de acuerdo con el nmero
de ciclos efectuados, el nmero de copias de ADN aumenta en progresin geomtrica.

Esta tcnica se basa en la propiedad que tienen las dos cadenas de ADN, de
disociarse y reasociarse por calentamiento y enfriamiento, respectivamente.
En la prctica consiste, en ciclos que constan de las etapas siguientes:
Mtodos y aplicaciones del ADN recombinante 219
1. Desnaturalizacin: es la primera fase del ciclo, se separan las dos hebras
de una molcula de ADN por calor (aproximadamente, a 94 C).
2. Alineamiento o hibridacin: es la unin de los dos cebadores a sus secuen-
cias complementarias. Los cebadores o primers hibridan de forma espec-
fica, o sea, se unen a las dos hebras complementarias del segmento de
ADN que se desea amplificar, de forma que flanquean sus extremos, es
decir, sirven para definir los extremos del segmento de ADN.
La mayora de los cebadores contienen entre 18 y 30 bases. Si bien pueden
ser diseados de forma manual, en la mayora de los casos se utilizan para
estos fines programas informticos.
3. Sntesis o extensin de ADN: una enzima ADN polimerasa en presencia de
exceso de trifosfatos de desoxirribonucletidos alarga los cebadores, in-
corporando los desoxinucletidos cuyas bases son complementarias a las
de la hebra que le sirve de molde. La enzima ADN polimerasa ms utiliza-

N
da en la PCR es la obtenida del microorganismo Thermus aquaticus (lla-

CI
mada Taq polimerasa). Esta enzima es termoestable, lo que le permite la
sntesis del ADN a temperaturas por encima de los 70 C y resiste los 94 a

UC
95 C, necesarios para la fase de separacin de las dos hebras de ADN.
OD
Las etapas de hibridacin y sntesis requieren una temperatura ms baja,
que puede estar entre 50 y 60 C y 72 C, para una y otra, respectivamente.
PR

El nmero de ciclos de una PCR no debe ser mayor que 50. Con solo 20 a
RE

30 ciclos del proceso descrito, se pueden obtener varios millones de copias de la


secuencia de inters, flanqueada por los cebadores utilizados en la amplifica-
SU

cin.
Si bien la PCR se puede realizar de forma manual, se ha generalizado el uso
DA

de termocicladores programados por medio de los cuales se logra la


BI

automatizacin de este proceso en menos de 3 h.


I

Una vez obtenida la secuencia de ADN amplificada por PCR, se procede a


OH

la identificacin de las mutaciones, y se somete el ADN amplificado a enzimas


de restriccin.
PR

En este caso la presencia de la mutacin en el ADN problema se visualiza


por la prdida o ganancia de un fragmento de restriccin, segn, si la mutacin
destruya o cree una diana para la enzima utilizada. Los productos que se obtie-
nen se pueden separar para ser visualizados, por medio de electroforesis en gel
de agarosa o poliacrilamida. La seleccin de uno u otro soporte depende del
tamao de los segmentos que se han de separar, los que se visualizan, general-
mente, con bromuro de etidio o tincin con plata.
Tambin se puede disear una PCR donde se utilicen cebadores especficos
para cada alelo, no requiriendo esta tcnica del empleo de enzimas de restric-
cin (PCR alelo especfico).
Existen otros tipos de PCR entre los que se encuentran: PCR mltiplex (anlisis
simultneo) y PCR tiempo real.
220 Introduccin a la Gentica Mdica

Una de las principales desventajas de la PCR es la posibilidad de contamina-


cin. Esto debe ser de conocimiento del tcnico o especialista que desarrolle
esta tcnica.

Aplicaciones de la tcnica de reaccin en cadena de la polimerasa

Tiene una utilidad extraordinaria para el diagnstico preciso de los trastornos


hereditarios cuyos defectos moleculares hayan sido definidos. Tambin se ha
aplicado en la deteccin de agentes infecciosos y en la identificacin de hetero-
geneidad gentica asociada a enfermedades. Con la reaccin en cadena de la
polimerasa, se pueden realizar estudios con escaso material gentico, como
pueden ser: gotas de sangre seca, pelos, semen, as como muestras de archivo,
como: bloques de tejidos en parafina y fijados en formol, lo cual permite la

N
realizacin de importantes trabajos retrospectivos y una amplia aplicacin en
tcnicas forenses.

CI
UC
Mtodos indirectos
OD
Los mtodos indirectos o anlisis de ligamiento son pruebas que detectan
PR
una secuencia de ADN variante normal o polimrfica (ver captulo 14), la cual
est cercana al gen de inters (o dentro de este). Estas secuencias, llamadas
RE

tambin marcadores moleculares, sirven para seguir el rastro a una mutacin


causante de una enfermedad en una familia. Los estudios indirectos demandan
SU

del anlisis de varios miembros de una familia.


DA
BI

Estudios de marcadores moleculares por ligamiento


I
OH

Los mtodos por ligamiento (o indirectos) se realizan, si no se conoce el gen


relacionado con la enfermedad, o si la mutacin causal de la afeccin resulta
PR

difcil de detectar como ocurre cuando existe heterogeneidad gentica allica.


En los mtodos indirectos con la aplicacin de las tcnicas de anlisis de
ADN no se identifica la secuencia de ADN donde se encuentra la mutacin
causal de la enfermedad (que es lo que se hace en los directos) sino, la secuen-
cia del marcador molecular.
Un marcador molecular es un segmento de ADN tcnicamente identificable,
que se encuentra contiguo al gen donde yace la mutacin causal de una enfer-
medad o dentro de este.
Los mtodos permiten identificar estas secuencias de ADN de forma indi-
recta, para rastrear la mutacin.Hacer un anlisis lgico es de la forma siguien-
te: si en una familia el gen mutado est, generalmente, acompaado de una
secuencia de ADN (marcador molecular) la presencia del marcador es un indi-
cador indirecto de la presencia del gen mutado.
Mtodos y aplicaciones del ADN recombinante 221
En los mtodos indirectos o por ligamiento es imprescindible estudiar a varios
miembros de la familia (sanos y afectados) para comparar su estado de salud
con la constitucin gentica del marcador y as este ltimo pueda ser utilizado
en el diagnstico.
Entre los marcadores para estudios moleculares por ligamiento se encuen-
tran:
Polimorfismos relacionados con la longitud de los fragmentos de restriccin
(RFLP, del ingls, restriction fragment length polymorphism).
Polimorfismos relativos a la longitud de las regiones de ADN hipervariables
repetidas en tandem (VNTR, del ingls, variable number tandem repeat).
El uso de estos procedimientos es estudiado en el captulo 13. En este captu-
lo solo se hace una breve referencia a los RFLP.

N
Polimorfismos de longitud de fragmentos de restriccin

CI
Los polimorfismos de longitud de fragmentos de restriccin (RFLP) son va-

UC
riaciones en la secuencia nucleotdica que se heredan de forma codominante y
no tienen efectos fenotpicos, ya que, generalmente, ocurren en las regiones no
OD
codificantes. Si tales variaciones modifican la secuencia de corte de una enzima
de restriccin especfica, se crean frente a la enzima fragmentos de diferente
PR
longitud que despus de ser separados por electroforesis, realizada en un sopor-
RE

te adecuado (agarosa, poliacrilamida), se pueden observar al teirse.


Si un alelo causal de una enfermedad en una familia se acompaa con uno de
SU

estos fragmentos (est ligado a uno de estos fragmentos, ver captulo 13) enton-
ces se puede inferir la presencia del alelo al identificar el fragmento en la familia.
DA

Por lo tanto, se trata de un mtodo indirecto pues lo que se identifica no es el


BI

alelo de inters (causal de la enfermedad), sino el fragmento que de manera


I

habitual est asociado a este (Fig. 12.5).


OH
PR

Fig. 12.5. Familia donde II-1 est afectado con fibrosis qustica. El gen para la fibrosis
qustica segrega junto con el alelo 2 del RFLP. Como II-1 es homocigtico para el alelo 2
tambin lo ser para el gen de la fibrosis qustica y, por lo tanto, ser enfermo.
222 Introduccin a la Gentica Mdica

Los RFLP son muy tiles en los estudios moleculares de diferentes enferme-
dades. El diagnstico se realiza por medio del anlisis de comparacin de estos
fragmentos junto al rbol genealgico o pedigr de la familia en cuestin. Por lo
tanto, se requiere correlacionar el estudio molecular de varios miembros de una
familia con la condicin clnica de cada individuo, esto es, si es sano o enfermo.

Secuenciacin de ADN

El proceso de secuenciacin consiste en determinar el orden de los


desoxinucletidos en la molcula del ADN. El que se va a secuenciar (ADN
molde) puede estar introducido en un vector, o bien, procede de una amplifica-
cin por la PCR y debe estar desnaturalizado. La tcnica consiste en lo siguien-
te: el ADN desnaturalizado se incuba con una ADN polimerasa, los cuatro

N
desoxinucletidos y un didesoxinucletido que carece de OH- en la posicin 3.

CI
A esta mezcla se aade un oligonucletido que es complementario al extre-
mo 5 del ADN molde, que es el cebador.

UC
El cebador se une al extremo 5 por complementariedad de bases y propor-
ciona el iniciador necesario para la accin de la ADN polimerasa. Cuando la
OD
enzima incorpora un didesoxinucletido la polimerizacin se interrumpe pues
como este nucletido carece del OH- de la posicin 3 no puede unirse con el
PR
siguiente.
RE

En las tcnicas clsicas no automatizadas se utilizan cuatro mezclas de re-


accin, en cada una de estas se coloca un desoxirribonucletido marcado
SU

radiactivamente.
Con este procedimiento se obtiene un grupo de cadenas de distintos tamaos,
DA

cada una de las cuales finaliza en el didesoxinucletido marcado, aadido a la


BI

mezcla.
I

Los fragmentos obtenidos se separan segn su tamao por electroforesis en


OH

gel de poliacrilamida, capaz de separar segmentos que difieran en un solo


nucletido, y se visualizan mediante autorradiografa. La lectura de los tamaos
PR

de los fragmentos obtenidos con cada didesoxirribonucletido se corresponde


con la secuencia complementaria del ADN molde.
En la actualidad existen equipos (secuenciadores o autoanalizadores de ADN)
que realizan la lectura de los geles de forma automtica. En la tcnica refinada
se emplean marcadores fluorescentes de cuatro tipos de fluorescencias distin-
tos, y se obtiene la secuencia mucho ms rpida, a la vez que se analizan de
forma simultnea varias secuencias.
El perfeccionamiento de la tcnica de secuenciacin automtica del ADN ha
permitido un avance considerable en el estudio del genoma humano.
Mtodos y aplicaciones del ADN recombinante 223
Otras tcnicas de estudios moleculares

Despus de la tcnica de southern blotting se describieron las tcnicas


para el estudio molecular del ARN y de las protenas. Como analoga en su
denominacin con la primera (southern, en ingls, significa en el sur) se prefiri
denominarlas northern blotting (para ARN) y western blotting (para prote-
nas) (en ingls, significan en el norte y en el oeste, respectivamente).

Tcnica de northern blotting

Se utiliza para el estudio de ARNm mediante electroforesis en geles de agarosa


desnaturalizante. La transferencia del ARN a un filtro de nylon se realiza del
mismo modo que en la tcnica de southern, aunque en este caso no es necesario

N
realizar el tratamiento de desnaturalizacin con hidrxido sdico, pues el ARN
es un cido nucleico de hebra simple. El ARN transferido al filtro de nylon, se

CI
hibrida del mismo modo que el ADN. Este procedimiento tcnico, denominado

UC
northern blotting, permite confirmar la presencia de un ARN determinado en un
tejido, conocer el tamao del transcrito y apreciar el nivel de expresin de un
OD
gen, a la vez, que se pueden observar fragmentos de ARN inmaduros.
En algunas ocasiones se puede obtener la presencia de varios ARNm para
PR
un mismo gen, los cuales aparecen debido a: el empleo de lugares de empalme
RE

alternativo, la existencia de lugares de poliadenilacin distintos, empleo de va-


rios promotores u otros mecanismos.
SU

Tcnica de western blotting


DA
BI

Por medio de esta tcnica se puede obtener informacin sobre el tamao de


I

la molcula protenica, as como la cantidad de la protena sintetizada. Esto se


OH

logra por el aislamiento de la protena extrada de las clulas separada segn la


masa molecular mediante electroforesis en gel de poliacrilamida y despus se
PR

transfiere a una membrana que se incuba con anticuerpos que reconocen,


especficamente, la protena de inters, la cual puede ser el producto de un gen
mutado. La reaccin antgeno-anticuerpo se detecta por un segundo anticuerpo
dirigido contra el primero y que presenta una marca que permite localizarlo, con
el empleo de mtodos: histoqumicos, fluorescentes o por radiaciones.
Un ejemplo del uso de esta tcnica es su aplicacin para detectar la distrofina
en los pacientes con distrofias musculares ligadas al cromosoma X.

Resumen
Las herramientas que se utilizan en gentica molecular incluyen: enzimas de
restriccin y ligasas; sondas; vectores y hospederos.
224 Introduccin a la Gentica Mdica

Para obtener copias suficientes de ADN se utilizan las tcnicas de clonacin


in vitro (reaccin en cadena de la polimerasa) o in vivo.
La clonacin in vivo incluye la produccin de copias de un fragmento de
ADN con el uso de endonucleasas de restriccin, la incorporacin de este a un
vector adecuado (plsmido, fago o YAC), la introduccin de dicho vector en un
hospedero y la posterior seleccin de clones que contengan la secuencia espe-
cfica.
Las tcnicas de estudio del ADN incluyen: PCR, southern blotting y
secuenciacin.
Los mtodos de estudio del ADN pueden ser directos o indirectos. En los
directos las tcnicas de estudio del ADN permiten identificar la presencia o no
de la mutacin causal de una enfermedad; en los indirectos, se identifica el alelo
de un marcador molecular asociado a la mutacin, que permite seguir su pista

N
en una familia.

CI
Bibliografa

UC
Nussboum R. L., Mc Irmesn R.R., H.F. Willard (2008): Thompson & Thompson: gentica en
OD
medicina 7ma. Ed. Elseivier Masson. Mexico.
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PR
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Practice of Medical Genetics 6 Ed. New York: Churchill Livingstone Vol 1.
SU

Strachan, T., A.P. Read (2006): Gentica Humana 3ra. Ed Mc Graw Hill. Mexico.
DA
BI
I
OH
PR
Ligamiento y recombinacin 225

Captulo 13 LIGAMIENTO
Y RECOMBINACIN

N
CI
UC
Brbara Barrios Garca
OD
PR

En el ao 1902, despus del redescubrimiento de las leyes de Mendel, la


RE

herencia mendeliana se comenz a analizar de forma sistemtica en organis-


mos vegetales y animales que incluyen al propio hombre.
SU

En el ao 1888, ya se haban descubierto los cromosomas, pero no fue hasta


DA

1915 que el cientfico Thomas Morgan postul la teora cromosmica de la


herencia. En esta teora se enunci, por primera vez, que los genes se encontra-
BI

ban en los cromosomas y esto fue el comienzo que permiti identificar el origen
I

parental de dos cromosomas homlogos que presentan en un locus determina-


OH

do, dos alelos iguales, como se expresa al final del captulo 5.


PR

De acuerdo con la segunda Ley de Mendel dos caracteres diferentes deter-


minados por los alelos de sus respectivos loci, se segregan independientes y al
azar, pero qu ocurre cuando esos loci se encuentran muy cercanos en el
mismo cromosoma?
Para el anlisis de la segregacin de loci con estas caractersticas se dedica
este interesante y complejo captulo, en el que se tratan los fundamentos sobre
los cuales se construye la cartografa de los genes de cada cromosoma humano,
as como, aspectos relacionados con la importancia de estos conocimientos en
la prevencin de enfermedades de origen gentico.
226 Introduccin a la Gentica Mdica

Ligamiento. Concepto y clasificacin

Es conocido que el genoma nuclear de la especie humana est constituido


por 23 pares de cromosomas para un total de 46, de los cuales 23 provienen de
la madre y 23 del padre.
En el captulo 4, donde se analiza la meiosis, se describe que en la profase de
la meiosis I, ocurre una estrecha sinapsis entre las cromtidas de los cromosomas
homlogos, en la que tiene lugar el fenmeno conocido por entrecruzamiento,
que permite el intercambio de material gentico entre las cromtidas de los
cromosomas homlogos, y constituye uno de los principales fenmenos biolgi-
cos involucrado en la variabilidad de las especies vivas con reproduccin sexual.
En la actualidad los estudios del genoma humano han descubierto que el
hombre tiene alrededor de 25 000 a 30 000 genes que estn ubicados en 23

N
cromosomas, esto lleva a pensar que en un cromosoma se sitan fsicamente
cientos o miles de genes, lo que implica que entre los genes que se localizan en

CI
un mismo cromosoma deben existir diferentes distancias; unos genes estn muy

UC
cercanos entre s, otros estn ms alejados y otros muy distantes.
Por tanto, en un mismo cromosoma se ubican muchos genes y entre estos
OD
existen diferentes probabilidades de segregacin a los gametos que depende de
la distancia fsica entre estos.
PR
Cuando entre dos genes ubicados en un mismo cromosoma existe una dis-
RE

tancia que no permite que ocurra el entrecruzamiento de forma libre o al azar,


se dice que estos genes estn ligados (Fig.13.1).
SU

Los loci A y B, de la figura 13.1 estn muy cercanos, mientras que los loci C
y D estn algo separados, a su vez los loci A y B estn muy separados de los
DA

loci C y D, a pesar de encontrarse en el mismo cromosoma.


BI

El genotipo heterocigtico para los cuatro loci sera DCBA/dcba (Fig.13.1b ).


I

En la profase de la primera meiosis, en los cromosomas homlogos que for-


OH

man el complejo sinaptonmico ocurre un fenmeno de entrecruzamiento entre


las molculas de ADN que forman las cromtidas de la estructura de los
PR

cromosomas homlogos en esta fase de la divisin celular. Los loci de ambos


cromosomas se pueden intercambiar, dando lugar a un recombinante, lo que
ocurre con mayor probabilidad, mientras ms distantes estn los loci que se
estudian.
Segn se ilustra en la figura 13.1, en un retrocruce entre un dihbrido de la F1,
el genotipo para los caracteres D y A, ser doble heterocigtico, y el retrocruce
(ver captulo 5) se efecta entre parentales con los genotipos: AaDd X aadd.
En este caso, se espera que se cumpla la segunda Ley de Mendel y que
ambos caracteres segreguen independientes y al azar con una probabilidad de
25 % para las cuatro combinaciones de fenotipos posibles. Como la distancia
entre los loci D y A resulta muy grande, a pesar de encontrarse ambos loci en
el mismo cromosoma, se pueden segregar independientes y al azar. Los resulta-
Ligamiento y recombinacin 227

N
CI
Fig. 13.1. a) Descripcin de los loci, alelos para cada uno y fenotipos de expresin

UC
dominante y recesiva. Esquema de un cromosoma con cuatro loci denominados D, C, B
y A: en el brazo corto del cromosoma; D y C: en el extremo del telmero de brazos largos
OD
B y A. b) Esquema de cromosomas homlogos, con alelos para los caracteres dominan-
tes (D, C, B y A) en uno de estos y los alelos de caracteres recesivos (d, c, b y a) en el
PR
cromosoma homlogo. c) Puntos de entrecruzamiento entre los cuatro loci, marcados
RE

con las lneas de punto y las flechas. Observe que entre C y B pueden ocurrir varios
entrecruzamientos, mientras que entre D y C hay menos oportunidades y entre B y A no
SU

existe posibilidad de entrecruzamiento.


DA

dos de los genotipos que se logran por el entrecruzamiento y recombinacin


BI

independientes en la descendencia de este tipo de cruzamiento, se ilustran en la


I

figura 13.2.
OH

El anlisis fenotpico es el siguiente: un cruce prueba o retrocruce entre plan-


tas de la F1 (obtenidas de un cruce entre lneas puras), de semillas lisas y tallo
PR

alto (AaDd) con plantas de semillas rugosas y tallo enano (aadd). Los resulta-
dos que se esperan de acuerdo con las leyes de Mendel son una descendencia
con 25 % de cada uno de los cuatro fenotipos posibles, que son:
Semillas lisas y tallo alto.
Semillas rugosas y tallo enano.
Semillas lisas y tallo enano.
Semillas rugosas y tallo alto.

Sin embargo, si los genes que determinan estos caracteres se encuentran en


el mismo cromosoma, se deben segregar juntos hacia el mismo gameto y los
descendientes solo muestran los fenotipos parentales. Estos resultados se expli-
can, si se supone que estos dos genes se encuentran muy separados en el
228 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 13.2. Los loci D y A con sus alelos, estn muy separados en el mismo cromosoma.
La distancia entre los genes permite un entrecruzamiento muy frecuente, de manera que
origina gametos recombinantes en la misma proporcin que los no recombinantes. Los
descendientes mostrarn fenotipos parentales y recombinantes en 25 % de cada uno,
como ocurre segn la segunda Ley de Mendel.
Ligamiento y recombinacin 229
cromosoma y por el entrecruzamiento que se produce durante la meiosis I, han
intercambiado material de un cromosoma a su homlogo en diversas ocasiones
(intercambio entre sus cromtidas).

Fenotipos recombinantes

Se denomina fenotipos recombinantes a los fenotipos que aparecen en los


descendientes y que no se corresponden con los paternos, pues son el resultado
de la recombinacin gentica entre las cromtidas de los cromosomas homlogos.
La distancia entre los genes D y A es tan grande que el entrecruzamiento
entre estos ocurre al azar y aparecen cuatro tipos de descendientes (Fig. 13.2):
dos no recombinantes, pues las cromtidas de ambos cromosomas homlogos
se separaron sin que ocurriera recombinacin entre los dos loci y dos

N
recombinantes, pues los gametos reciben una combinacin nueva de genes de-

CI
bido al entrecruzamiento y recombinacion entre las cromtidas homlogas.
En este cruce se cumple la ley de segregacin independiente, pues aparecen

UC
cuatro tipos de descendientes, dos no recombinantes (fenotpicamente iguales
OD
a los padres) y dos recombinantes (con combinaciones fenotpicas nuevas, dife-
rentes a los padres) en una frecuencia de 25 % para cada uno de ellos.
PR
Para una F1 producto de un cruce entre lneas puras para los caracteres
RE

dominantes y recesivos de los loci A y B, en la descendencia del retrocruce, se


espera que en ambos loci con sus respectivos alelos, ocurra intercambio segn
SU

la segunda ley de Mendel, ley de segregacin independiente y que se obtengan


cuatro combinaciones fenotpicas, pero como los loci A y B estn tan unidos,
DA

ambos segregan a los gametos juntos por la baja probabilidad de entrecruza-


BI

miento y recombinacin entre estos. En este caso los loci estn en ligamiento
I

completo y segregan como una unidad. Para estudios especficos de ligamiento,


OH

se utilizan grupos de marcadores genticos (ver captulo 14) con esta condicin
de ligamiento completo y para referirse a estos se utiliza el trmino haplotipo
PR

(Fig.13.3).
En un cruzamiento F1 entre los loci D y C, y el doble homocigtico recesivo
(retrocruce) como los loci D y C no estn, ni tan separados ni tan unidos, se
pueden observar combinaciones entre los alelos del heterocigtico F1, pero las
proporciones esperadas de 25 % no se cumplen, y aparecen nuevas proporcio-
nes que se encuentran en relacin con la distancia entre ambos loci. Las com-
binaciones entre los alelos de ambos loci sern entonces denominados
recombinantes y se encuentran en menor proporcin, en tanto que las cromtidas
que no denotan el evento de entrecruzamiento se denominan no recombinantes.
Cuando esto ocurre se denomina ligamiento imcompleto al ligamiento que exis-
te entre ambos loci.
230 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 13.3. Los loci estn ubicados muy cercanos en el mismo cromosoma. La distancia
entre los genes es tan corta que no es posible el fenmeno de entrecruzamiento y los
genes segregan juntos hacia los gametos. Los descendientes reproducen los fenotipos
paternos en 50 % de cada uno. No hay fenotipos recombinantes.
Ligamiento y recombinacin 231
Se puede concluir que:
Los loci B y A estn tan unidos que tienen poca probabilidad de entrecruza-
miento y recombinacin, y segregan juntos a los gametos.
Los loci D y C estn unidos, pero es posible que los alelos de ambos loci se
intercambien en el proceso de entrecruzamiento y recombinacin y pueden
segregar como recombinantes con baja frecuencia, en los gametos.
Los loci D y A; D y B; C y A; C y B, estn tan distantes en el mismo
cromosoma que tienen muchas probabilidades de entrecruzamiento y
recombinacin y segregan independientes en los gametos, por lo que se con-
cluye que aun en el mismo cromosoma estos loci no segregan ligados, sino
independientes y al azar.
Cuando se trata del estudio entre genes que se encuentran en algn tipo de
ligamiento se utiliza la nomenclatura siguiente:

N
CI
UC
La lnea marca a los dos cromosomas homlogos de forma tal que las letras
OD
que simbolizan a los alelos de cada loci sobre la lnea indican localizacin en un
cromosoma homlogo y las que estn en igual posicin, pero debajo, en el otro
PR
cromosoma homlogo.
RE

Frecuencia de recombinacin
SU
DA

Cuando los genes situados en un cromosoma estn ligados, se puede calcu-


lar la distancia aproximada entre estos genes por medio de la frecuencia de
BI

recombinacion (FR).
I

Esta se calcula:
OH
PR

En el caso del cruce entre D y A (Fig. 13.2) la frecuencia de recombinacin es:

En el segundo cruce entre los loci B y A (Fig. 13.3):


232 Introduccin a la Gentica Mdica

En el tercer cruce en el que solo se tuvo en cuenta los loci D y C, se supone


que de 100 descendientes, 40 tuvieron el fenotipo correspondiente al parental de
la F1 (tallo alto y hoja redonda) otros 40 con fenotipos correspondientes al doble
homocigtico recesivo (hoja alargada y tallo enano) 10 con fenotipo: tallo alto y
hoja alargada y 10 con fenotipo: tallo enano y hoja redonda .

As, la frecuencia de recombinacin es un dato numrico terico de la distan-


cia fsica entre los genes, que tiene un valor predictivo cuando entre los genes
analizados exista una distancia tal, que no se cumple lo esperado segn la se-
gunda ley de Mendel o ley de segregacin independiente.
No obstante, la FR no ofrece un valor real de la distancia entre los genes

N
porque en el caso del ligamiento completo como no aparecen hijos recombinantes

CI
la FR = 0, pero entre dos loci existen secuencias de ADN que lo limitan aun
cuando no existan recombinaciones entre estos.

UC
Cuando entre los genes se cumple la ley de segregacin independiente, la
FR es 50 %, pues la mitad de los hijos son recombinantes pero todos los genes
OD
que se ubican en un cromosoma no pueden tener una distancia de 50 unidades
de recombinacin, ya que existirn genes ms alejados.
PR
Esto indica que la distancia que brinda la FR es una medida terica de aproxi-
RE

macin y no un valor real de longitud, pero s define que exista ligamiento com-
pleto o incompleto entre los genes de los loci estudiados.
SU

En resumen, la FR permite llegar a las conclusiones siguientes:


Si la FR es igual a 0, entre estos genes existe ligamiento completo.
DA

Si la FR es igual a 50, se cumple la ley de segregacin independiente y, por lo


BI

tanto, no existe ligamiento entre los genes.


Si la FR es mayor que 0, pero menor que 50, entonces entre los genes existe
I
OH

un ligamiento incompleto.
PR

Las unidades de recombinacin se expresan como centi Morgan (cM) en


reconocimiento al cientfico Thomas Hunt Morgan quien dedic gran parte de
su vida cientfica, al estudio del fenmeno de ligamiento entre los genes.
Al referirse a dos loci que estn a 1 cM, se indica que el nmero de gametos
recombinantes es de 10 cada 100 gametos y que entre ambos loci hay una
recombinacin de 1 %.

Alelos de loci ligados en acoplamiento y en repulsin

Otro aspecto que hay que tener en cuenta cuando se estudian genes ligados
es la ubicacin de estos en los cromosomas homlogos lo que se designa con el
nombre de fase.
Ligamiento y recombinacin 233
Se retoma el ejemplo del tercer cruce prueba. En este caso uno de los padres
es doble heterocigtico.
Pueden existir entonces dos situaciones en relacin con la ubicacin de los
genes:
Que los dos genes que determinan los caracteres dominantes estn en el
mismo cromosoma.
Que los dos genes que determinan los caracteres dominantes se encuentren
en cromosomas homlogos.

En el primer caso ambos genes fueron heredados del mismo progenitor y en


el segundo caso fueron heredados de progenitores diferentes, cada uno de estos
con uno de los dos caracteres marcadores, los dominantes, en los ejemplos
referidos (Figs. 13.4 y 13.5).

N
En un genotipo doble heterocigtico para alelos de dos loci ligados, pueden
ocurrir dos fenmenos en relacin con la ubicacin de los alelos marcadores

CI
(generalmente alelos que expresan caracteres dominantes en los fenotipos) en

UC
los cromosomas homlogos:
Se pueden encontrar en acoplamiento o en cis cuando ambos estn en el
mismo cromosoma homlogo. OD
Se pueden encontrar en repulsin o en trans cuando cada uno de los marca-
PR
dores se encuentra en cada uno de los homlogos.
RE
SU
DA
BI
I
OH

Para diferenciar estas dos situaciones desde los fenotipos, se debe realizar
un retrocruce. Si en los resultados de este se observa que los individuos no
PR

recombinantes reproducen los fenotipos paternos, entonces los genes bajo estu-
dio se encontraban en acoplamiento. Si, por el contrario, son los descendientes
recombinantes los que reproducen los fenotipos paternos, los genes bajo estu-
dio estn en repulsin (Fig. 13.5).
Si el ligamiento entre dos loci es completo y el parental tiene los marcadores
dominantes en repulsin, entonces la descendencia expresa los alelos dominan-
tes separados o ningn descendiente de un cruce entre genes en ligamiento
completo y con genotipo en repulsin expresa ambos genes dominantes como el
parental.
Este fenmeno se ilustra en la figura 13.6.
234 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 13.4. Los loci D y C con sus alelos estn medianamente separados en el mismo
cromosoma. El evento de entrecruzamiento es menos frecuente y, por tanto, los gametos
que portan los genes recombinados estn en menor proporcin y originan un menor
nmero de descendientes con fenotipos recombinantes. Observe adems que los alelos
marcadores que, en este caso expresan los caracteres dominantes, se encuentran en
acoplamiento (ver descripcin del trmino en el texto) y los descendientes no
recombinantes reproducen los fenotipos de los parentales en mayor frecuencia.
Ligamiento y recombinacin 235

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 13.5. Genes marcadores, en este caso los alelos que expresan el carcter dominante,
se encuentran en repulsin y en ligamiento incompleto. Cuando los genes del parental,
con los fenotipos dominantes bajo estudio, estn en repulsin, los descendientes
recombinantes reproducen los fenotipos paternos en menor proporcin.
236 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
Fig. 13.6. Segregacin de ligamiento completo, cuando los genes marcadores se en-
cuentran en repulsin. En los fenotipos de la descendencia del retrocruce 50 % tendrn
PR
los fenotipos dominantes separados, de modo tal, que ninguno tendr fenotipos como
RE

los parentales del retrocruce, ya que no se produce entrecruzamiento y recombinacin.


SU

Localizacin de genes ligados


DA

Existe un tipo de estudio que permite establecer la posicin relativa de varios


BI

genes en un cromosoma, este mtodo se llama test de tres puntos.


I

En el ejemplo siguiente se demuestra cmo calcular la posicin de varios


OH

genes diferentes ubicados en el cromosoma X de la mosca Drosophila


PR

melanogaster.
Existen 3 genes diferentes ubicados en el cromosoma X de esta especie de
mosca, la tabla 13.1, describe el carcter observado en el fenotipo para cada
locus y las alternativas de las cualidades de cada fenotipo segn sus respecti-
vos alelos mutados y no mutados.

Tabla 13.1. Caracteres, alelos y fenotipos de la mosca Drosophila melanogaster

Loci (carcter) Alelos Fenotipos

Forma del cuerpo sc+ Cuerpo alargado. Cuerpo ovoide normal


Venas en las alas v+ Alas sin venas. Patrn venoso normal
Pelos (quetas) en el cuerpo eq+ Falta de pelos en el cuerpo. Pelos norma-
les en el cuerpo
Ligamiento y recombinacin 237
Con el signo + se representa el alelo no mutado o tipo silvestre, los alelos
silvestres no mutados expresan el fenotipo dominante.
Si se efecta un cruce entre una mosca hembra (XX) con fenotipo silvestre
pero heterocigtica para los tres alelos mutados de los tres loci, con una mosca
macho (XY) que presenta el fenotipo mutado por ser hemicigtico para los tres
genes mutados, se observa la descendencia solo de los machos de este cruce,
que sern los que expresan en su fenotipo la combinacin de genes producidos
por entrecruzamiento o no entre los cromosomas X de la madre (Tabla 13.2).

N
Tabla 13.2. Descendencia de machos (genotipos hemicigticos)

CI
Nmero de moscas

UC
Fenotipos Genotipos hemicigticos machos observadas

cuerpo sin pelos


OD
1. Cuerpo alargado, alas sin venas y
sc v eq 8 576
PR
2. Silvestre + + + 8 808
3. Cuerpo alargado sc + + 681
RE

4. Alas sin venas y cuerpo sin pelos + v eq 716


5. Cuerpo alargado y alas sin venas sc v + 1 002
SU

6. Cuerpo sin pelos + + eq 997


7. Cuerpo alargado y sin pelos sc + eq 4
8. Alas sin venas + v + 1
DA
BI

Total de descendientes machos 20 785


I
OH
PR

Los fenotipos 1 y 2 son no recombinantes, pues cada uno de estos expresan


los caracteres que aparecen en cada uno de los cromosomas X de la madre sin
entrecruzamiento. En total se obtuvieron (8 576 + 8 808) 17 384 no recombinantes.
Los fenotipos 3 y 4 son el resultado de recombinaciones entre sc y v, lo que
mostr 2 combinaciones diferentes a la de los padres en 1 397 = (681 + 716)
descendientes.
Tambin 5 y 6 son recombinantes entre los genes v y eq, y producen 1 999
hijos (1 002 + 997) con combinaciones nuevas, diferentes a las de los padres.
Por su parte, los grupos 7 y 8 se producen por doble entrecruzamiento entre
sc-v-eq; tambin son recombinantes pues presentan otras combinaciones gnicas
nuevas diferentes de las observadas en los padres, en un total de (4 + 1) = 5
descendientes.
238 Introduccin a la Gentica Mdica

Al calcular la frecuencia de recombinacin (FR) entre los genes:

N
Con estas cifras se puede dibujar el mapa de ligamiento entre estos 3 genes:

CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH

La distancia entre sc - v da la suma entre la FR entre los genes sc y v (6,72)


y la FR de los dobles recombinantes que es 0,02. La distancia entre los genes v
PR

- eq da la FR entre los genes v-eq (9,72) ms la FR de los dobles recombinantes


que es 0,02.
La distancia en sc - eq es la suma de las distancias entre sc - v = 6,74 +
distancia entre v - eq = 9,74 que es de 16,38 unidades de recombinacin.
El nmero de hijos dobles recombinantes observados, no es la cantidad exac-
ta de dobles entrecruzamientos que pueden ocurrir tericamente. Para definir el
nmero de dobles entrecruzamientos esperados sobre la base de las distancias
que existen entre los tres genes, se calcula:
Ligamiento y recombinacin 239

Si se conoce el nmero de dobles entrecruzamientos esperados se puede


calcular la coincidencia que existe entre el nmero de los dobles entrecruzamientos
observados y los esperados.

Esto significa que se observ 3,22 % de dobles entrecruzamientos espera-

N
dos, o sea, los esperados y los observados coinciden solo en 3,22 %; por tanto,

CI
96,78 % de los dobles entrecruzamientos fueron interferidos.
Se debe esperar que ocurra 100 % de los dobles entrecruzamientos. Como

UC
solo se observ 3,22 % de lo esperado la interferencia fue de 96,78 %.
Existen factores que pueden afectar el entrecruzamiento en animales y plan-
tas como son: OD
Edad materna: disminuye el entrecruzamiento.
PR
Temperatura: por encima o por debajo de 22 C aumentan el entrecruza-
RE

miento.
Factores citoplasmticos: regulan el entrecruzamiento.
SU

Desnutricin: disminuye el entrecruzamiento.


Iones de calcio: disminuyen el entrecruzamiento.
DA

Agentes qumicos: agentes quelantes aumentan el entrecruzamiento.


BI

Algunos antibiticos: aumentan entrecruzamiento.


I

Rayos X: aumentan el entrecruzamiento.


OH
PR

Anlisis de ligamiento en el hombre

Con los conocimientos bsicos sobre ligamiento y recombinacin hasta aqu


mencionados, se puede comprender lo complejo que resulta el anlisis de
ligamiento en el humano.
El primer grupo de genes ligados en el humano lo formaron mutaciones cu-
yos loci se encuentran en el cromosoma X.
El primer rasgo distintivo al que se le design un cromosoma especfico, fue
el de la ceguera para los colores, estudiado en una extensa familia. Este defecto
gentico se expresa de forma recesiva por la observacin de la transmisin, por
medio de mujeres a los hombres afectados que se encuentran relacionados
unos con otros. Las mujeres fueron declaradas portadoras, esto defini la lo-
240 Introduccin a la Gentica Mdica

calizacin de la mutacin causante de la enfermedad, en el cromosoma X. Dos


condiciones aparecen juntas en la determinacin del sexo y la enfermedad ex-
presada por la mutacin.
Al observar en el rbol genealgico, la segregacin de dos rasgos en estudio
en la misma familia, se permite excluir ligamiento entre los loci en estudio, por
ejemplo cuando se trata de dos loci situados, uno en un cromosoma autosmico
y el otro en un cromosoma X.
Uno de los primeros mtodos empleados para anlisis de ligamiento en hu-
manos fue la observacin de la segregacin simultnea de dos rasgos, en rbo-
les genealgicos de muchas generaciones.
A esta observacin se aadi el anlisis matemtico para el clculo de la
posible distancia entre dos loci, con evidencia de ligamiento y se dise enton-
ces el instrumento matemtico denominado lod score, basado en el empleo del

N
logaritmo de probabilidad de ligamiento o lod g odds o log probability

CI
ratio que se trata ms adelante en este captulo.
Con la aplicacin de estos mtodos fue posible reportar el primer mapa entre

UC
dos loci en el humano en el ao 1937. Se realiz por el anlisis de familias
inglesas registradas del siglo XIX, que presentaban herencia de hemofilia y
ceguera a los colores. OD
PR
La aplicacin del anlisis matemtico permiti identificar una distancia entre
los loci con mutaciones para la hemofilia y ceguera a los colores, de 10 cM.
RE

Otros ligamientos entre diferentes loci humanos se establecieron entre los


grupos sanguneos Lutheran y ABO; el locus ABO y el sndrome gentico ua
SU

rtula, de herencia autosmica dominante; entre el locus Rh y un defecto de la


DA

forma del glbulo rojo nombrada eliptiocitosis.


BI
I

Marcadores cromosmicos y aberraciones


OH

cromosmicas para el mapa de genes humanos


PR

La informacin sobre la morfologa de los cromosomas con regiones


polimrficas y su relacin con un marcador, rasgo o enfermedad gentica espe-
cfica fue clave para la identificacin de estrecho ligamiento y localizacin en el
cromosoma 1 del locus de grupo sanguneo Duffy al observar en varias familias
la coincidencia de segregacin entre la presencia en el cariotipo, del cromosoma
1qh+, con uno de los alelos del grupo sanguneo Duffy y, a su vez la relacin de
ligamiento del locus Duffy con un tipo de catarata congnita zonular de heren-
cia autosmica dominante.
El gen del retinoblastoma bilateral (RB) de herencia autosmica dominante
se localiz en el brazo largo del cromosoma 15. Esta enfermedad apareci en
un nmero de individuos que, adems, tenan una delecin de esa regin
Ligamiento y recombinacin 241
cromosmica. En la actualidad se le denomina a este locus como RB, y se
encuentra en 13q14.1- q14.2.
Otras oportunidades para identificar regiones cromosmicas, con un rasgo
de herencia monognica, han sido propiciadas a partir del anlisis de puntos de
ruptura en rearreglos cromosmicos, principalmente, del tipo de translocaciones.
Un ejemplo que permiti la identificacin de la mutacin causante de la dis-
trofia muscular Duchenne, fue el estudio de mujeres que expresaban la enfer-
medad y que en sus cariotipos tenan translocaciones con puntos de ruptura
entre brazos cortos del cromosoma X y un cromosoma autosmico.
En la actualidad se conoce que el gen para la protena distrofina, tiene 79
exones expandidos en una longitud de unas 2 300 Kb (2.3 Mb) y con su locus en
Xp21.13
Otro fenmeno que contribuy al empeo de lograr un mapa fisico de los

N
genes contenidos en sus 24 molculas de ADN, fue la posibilidad de obtener
clulas hbridas a partir de la unin de clulas humanas y de ratn o hmster y

CI
utilizar las propiedades de fusin de ambas clulas ofrecida por el virus Sendai

UC
y que aparece en detalles en el cuadro 13.1.
Los descubrimientos que abrieron nuevos enfoques al empeo de conocer el
mapa gentico humano fueron: OD
En el ao 1970 las enzimas de restriccin por W. Arber y H. O. Smith y en
PR
ese mismo ao, el uso de las enzimas de restriccin en el mapeo de genes
RE

(mapas de restriccin).
En el ao 1980, Botstein y colaboradores, mostraron que era posible cons-
SU

truir un mapa gentico mediante un grupo de marcadores de ADN aleatorios


(RFLP).
DA
BI

Los RFLP, son polimorfismos de longitud de fragmentos de ADN obtenidos


I

por enzimas de restriccin.


OH

En la actualidad con el desarrollo de tcnicas de biologa molecular basadas


en los descubrimientos citados y que se tratan en detalles en el captulo 12, se
PR

han desarrollado mtodos ms sensibles y con mayor resolucin para construir


mapas fsicos de los cromosomas en el hombre, entre estos:
Mapas de restriccin: ubica la posicin relativa de una secuencia de ADN
mediante el uso de endonucleasas de restriccin.
Hibridacin in situ fluorescente (FISH): mediante esta tcnica se locali-
zan marcadores en un segmento de ADN con una sonda la cual es construida
artificialmente en el laboratorio con una secuencia nucleotdica conocida que
sirve para hibridar con el segmento de ADN complementario a su secuencia en
el cromosoma (captulo 7).
Mapas por restriccin: utiliza marcadores genticos que pueden ser locali-
zados por la posicin de sitios polimrficos (muy variables en cuanto a su se-
cuencia nucleotdica), que son cortados por enzimas de restriccin especficas.
242 Introduccin a la Gentica Mdica
Cuadro 13.1. Obtencin de clulas hbridas

En la dcada de los aos 60 del siglo XX se desarroll una metodologa que permite obtener
clulas somticas hbridas entre 2 especies diferentes.
Los primeros estudios con resultados favorables se realizaron en clulas somticas de
hombre y ratn. Se observ que con la introduccin en el medio de cultivo del virus Sendai
se favorece la fusin del ncleo de la clula del ratn y el de la clula humana, formando lo
que se denomina un heterocarionte (Fig.13.7).

N
CI
UC
OD
PR
RE

Fig. 13.7. Se representa la formacin de hbridos somticos usados para el mapeo fsico de
genes. Se muestra el uso del virus Sendai para producir clulas con dos dotaciones
SU

cromosmicas de diferentes especies o de dos individuos de una especie.

Cuando los ncleos de ambas especies se fusionan en un mismo ncleo, los cromosomas de
DA

las 2 especies coexisten. Una caracterstica de este hbrido somtico es que los cromosomas
BI

del hombre se van perdiendo uno a uno en cada divisin celular, mientras que los cromosomas
del ratn permanecen en el ncleo. Por estudios de los cromosomas del hbrido somtico se
I

pueden definir los cromosomas humanos que se han ido perdiendo en el hbrido. Si se toma
OH

una clula de ratn incapaz de sintetizar la enzima hexosaminidasa A y se hibrida con una
clula humana capaz de sintetizarla, se sigue la presencia de actividad de esta enzima en el
PR

hbrido somtico y los cromosomas que van quedando en el hbrido, cuando se pierda el
cromosoma donde est ubicado el gen que codifica la sntesis de hexosaminidasa A, la clula
hbrida morir por la deficiencia de la enzima, pues la clula de ratn usada para el hbrido
no sintetiza esta enzima.
Con este mtodo se localiz el gen de la hexosaminidasa A en el cromosoma 15; el gen de la
hipoxantina fosforibosil transferasa en el cromosoma X.
En la actualidad los estudios de hbridos somticos para la construccin de mapas fsicos de
genes en el hombre han introducido tcnicas ms modernas de estudios cromosmicos,
como tincin de cromosomas con colorantes fluorescentes que hacen ms fcil el reconoci-
miento de cada cromosoma especfico.
Existen otros estudios con hbridos de clulas somticas, en los cuales los cromosomas
humanos pueden presentar aberraciones en su estructura, que permiten ubicar a genes a
partir de su producto de expresin, no solo en un cromosoma especfico sino en zonas
Ligamiento y recombinacin 243
Continuacin cuadro 13.1

especficas del cromosoma como en el brazo corto, en el brazo largo e incluso en bandas
especficas de un cromosoma.
Tambin se estn estudiando hbridos de clulas somticas que son mantenidas en cultivo
que pertenecen a personas que presentan hasta tres rasgos genticos diferentes y as se
ubican estos genes en un cromosoma especfico y en zonas especficas del cromosoma.
La construccin de mapas fsicos que usan hbridos de clulas somticas son mtodos
indirectos que requieren la seleccin de clulas humanas con diferentes caractersticas como
aberraciones cromosmicas, pacientes con dos o ms enfermedades genticas y marcadores
bioqumicos que puedan ser detectados, por lo cual resultan estudios complejos.

Otros mtodos empleados en mapas de clulas hbridas se ofrecen con los


hbridos por radiaciones que se basan en la posibilidad de cartografiar a un gen

N
o grupos de genes al lograr un hbrido entre cromosomas de roedor y fragmen-
tos de cromosomas humanos obtenidos al ser irradiados.

CI
El nmero de fragmentos obtenidos depende de la intensidad de la radiacin,

UC
una vez logrado el hbrido se seleccionan para su estudio, las clulas que capta-
ron el ADN humano.
OD
La complejidad del anlisis del mtodo se sale de los objetivos docentes del
texto, pero su fundamento bsico es anlogo a la frecuencia de recombinacin
PR
ya referida.
RE

En resumen, se describen 2 tipos de mapas obtenidos por diferentes mtodos


de estudio que son:
SU

Mapa fsico. Se refiere a un mapa que proporciona informacin sobre la


estructura lineal de molculas de ADN, el mapa fsico ms detallado es la
DA

secuenciacin de nucletidos que muestra el orden de posiciones de los


BI

genes a lo largo del cromosoma y su distancia en kilobases (Kb) y en


I

megabases (Mb).
Mapa gentico. Es un mapa que se realiza mediante el rastreo de la herencia
OH

de fenotipos, marcadores genticos polimrficos o por ambos, por generacio-


PR

nes. La unidad de distancia es de 1 centimorgan (cM) que indica una posibi-


lidad de recombinacin de 1 %. Los mapas genticos muestran el orden y la
probabilidad de que 2 loci cercanos se separen mediante recombinacin.

Las caractersticas del mapa gentico estn en correspondencia con el enfo-


que docente de este captulo ya que aunque el mapa fsico se ha logrado por el
desarrollo de tcnicas de alta resolucin, el mapa gentico ofrece la posibilidad
de una visin ms exacta de la segregacin de 2 genes, en las generaciones de
una familia o de un grupo de familias con caractersticas genticas especficas
y ofrece la posibilidad de localizar de manera ms exacta un gen causante de
una enfermedad heredable, que sin estos mtodos solo pueden ser estudiados
por su expresin fenotpica.
244 Introduccin a la Gentica Mdica

La secuenciacin del genoma humano ha revelado la utilidad de nuevos tipos


de marcadores genticos, con localizaciones en cromosomas especficos, un
ejemplo de estos son los ya citados RFLP. Las caractersticas genticas de
estos tipos de marcadores, se ofrecen en el captulo 15.
El estudio con fines de identificar ligamiento, debe partir de una familia que
sea informativa para el marcador gentico seleccionado, la cual permita detec-
tar la forma de transmisin del gen de inters mdico.
Pero existen limitantes, se debe recordar que en ocasiones resulta difcil iden-
tificar la expresin del defecto por diferentes razones como son:
Penetrancia reducida.
Expresividad variable.
Expresin fenotpica tarda.
Heterogeneidad clnica y gentica.

N
Los marcadores genticos que son tratados con amplitud en el captulo 15,

CI
han sido extremadamente tiles y permiten un acercamiento a las investigacio-
nes de cruces pruebas, las cuales se realizan en especies con reproduccin

UC
sexual.
Dentro de los marcadores genticos estn aquellos que se caracterizan por
OD
su deteccin genotpica en el ADN, por ejemplo los ya referidos RFLP, son ms
eficaces aunque no sean genes expresables.
PR
Una secuencia de ADN con 2 alelos distinguibles y que se encuentren en la
RE

poblacin con una frecuencia lo suficientemente alta, como para que se puedan
distinguir en las familias que se estudien. Suelen tener alto valor en anlisis de
SU

ligamiento por el mtodo de recombinacin.


Se considera la siguiente familia (Fig.13.8) en la que se representa la segre-
DA

gacin de la enfermedad gentica neurofibromatosis y segregacin de los alelos


BI

de 2 loci RFLP.
I

Para su mejor comprensin se definen los alelos de los 3 loci en estudio:


OH

Locus 1= Tiene 2 alelos nombrados A y a.


Locus 2 = Tiene 2 alelos B y b.
PR

Locus neurofibromatosis = 2 alelos; D (NF1), es el alelo mutado que expresa


la neurofibromatosis tipo I y su alternativa d, el alelo no mutado.
La mujer I-2 presenta la enfermedad gentica neurofibromatosis 1 (NF1)
que se hereda con un patrn de herencia autosmica dominante y la enferme-
dad tiene expresividad variable. El gen de la NF1 se representa por la letra D y
su alelo no mutado por d.
Este gen se encuentra en el cromosoma 17 y se conoce que los marcadores
genticos representados por los loci 1 y 2 tambin se encuentran en este
cromosoma.
La mujer I-2 adems de la NF1 tiene los alelos A, a y B, b correspondientes
a los loci 1 y 2, respectivamente.
Se trata de analizar la relacin de vecindad entre los loci D relacionados con
la enfermedad y los loci marcadores 1 y 2.
Ligamiento y recombinacin 245

N
CI
Fig. 13.8. Familia que presenta NF1 en las dos generaciones. La madre afectada recibi

UC
la mutacin D junto a los alelos B y A, y a partir de este conocimiento se puede realizar
el anlisis de segregacin de ese cromosoma en sus hijos. Observe que siempre que est
OD
presente la enfermedad, los hijos han heredado el alelo A del locus 1 lo que sugiere
ligamiento entre los loci D y A, mientras que los hijos no afectados han recibido siempre
PR
el alelo a homocigtico y cualquiera de los alelos del locus 2. Sugiere ligamiento estre-
cho entre los loci D y 1 y no ligamiento o ligamiento incompleto entre los loci D y 2 al
RE

observarse recombinante entre los alelos B del locus 2 y el locus D, como se observa en
los hijos 2, 3 y 5. La variacin en la expresividad de esta enfermedad gentica resulta una
SU

limitante para definir ligamiento entre estos dos loci. Ver explicacin detallada en el
texto.
DA
BI
I

En esta familia se puede observar la tendencia de segregacin entre el gen D


OH

(NF1) y los otros 2 loci y se observa que todos los hijos enfermos de esta mujer
los cuales tambin expresan la enfermedad, siempre que segregan el cromosoma
PR

17 con la mutacin de la enfermedad segregan el alelo A del locus marcador 1,


mientras que para el locus 2, los hijos enfermos pueden llevar al alelo B o el b
indistintamente, esto puede hacer pensar que exista un ligamiento entre el gen
de la NF1 y el alelo A del locus 1 y que no existe ligamiento entre el gen de la
NF1 y los alelos B o b, del locus 2.
De esta forma en esta familia se puede predecir por la presencia del alelo A
del locus 1, que el gen de la NF1 estar presente en el individuo.
Pero como el alelo a del locus 1 no segrega con el locus de la enfermedad
NF1, la prediccin de si estos genes estn ligados podra ser explicada por un
evento de entrecruzamiento.
La probabilidad de hacer una prediccin errnea a partir del anlisis de
segregacin de la enfermedad con el alelo A, est dada por la probabilidad de
246 Introduccin a la Gentica Mdica

que ocurra entrecruzamiento entre el locus de la NF1 y el locus 1 que es equi-


valente a la distancia en unidades de recombinacin entre ambos loci.
Esto se complica ms por la expresividad variable de la enfermedad ya que
por una simple inspeccin de la expresin fenotpica, puede que, un miembro
de esta familia que exprese la enfermedad de forma tan ligera, escape al diag-
nstico clnico y que aunque haya heredado el gen mutado no sea detectada la
expresin de la mutacin por el estudio fenotpico.
En estos tipos de enfermedades genticas con variacin en la expresin se
requiere de la profundizacin del estudio clnico y adems el uso de todas las
alternativas posibles que permitan identificar al individuo que presenta la muta-
cin.

Familias con fases genotpicas informativas

N
CI
Para el estudio de ligamiento se necesita que la familia sea informativa y esto
est dado por la relacin entre el locus que produce la enfermedad a estudiar y

UC
el locus que se use como marcador gentico y adems de la fase en que se
encuentren ambos loci, esto significa conocer si los genes estn en acoplamien-
to o en repulsin. OD
PR
Para el anlisis de ligamiento en humanos por estudio de familias, son ms
tiles las familias grandes que las pequeas. Familias que muestran 3 genera-
RE

ciones se consideran ms tiles que las que presentan solo 2 generaciones.


Por ejemplo, al examinar cmo se detecta y mide el ligamiento entre 2 loci
SU

gnicos A y B en una serie de familias se debe valorar que si en los hijos de


estas familias, por informacin de la segregacin meitica de estos loci, apare-
DA

ce que 80 % de hijos son no recombinantes y 20 % de hijos recombinantes,


BI

estos valores indican una frecuencia de recombinacin, que la distancia entre


I

ambos loci debe ser de unos 20 cM.


OH

El estimado, sin embargo, es vlido solo si el nmero de hijos observados en


esta relacin 80:20 es realmente diferente a la proporcin 50:50 que aparece
PR

cuando no existe ligamiento entre 2 loci.


Para evaluar esto se debe calcular la probabilidad relativa de obtener los
datos observados cuando los 2 loci estn ligados en alguna fraccin de
recombinacin que se llamar q(sita), en comparacin con la probabilidad de
que estos no estn ligados.
Por ejemplo si de 5 hijos, 4 son no recombinantes y 1 es recombinante la
relacin debe ser considerada, significativamente, diferente de los valores espe-
rados para segregacin independiente entre estos loci.
Si se observa que la proporcin 80:20 se mantiene cuando se estudian doce-
nas de familias para estos loci gnicos esto avala el ligamiento entre estos loci.
La certeza de esta observacin debe ser calculada matemticamente para
obtener una mayor confiabilidad a los valores observados.
Ligamiento y recombinacin 247
Es por esto que existe un indicador que se calcula como relacin de probabi-
lidad en varios valores. Se puede dar valores de = 0 (ligamiento) y = 0,5 ( no
ligamiento) y as al considerar estos valores se calcula el valor de Z como:

Z = probabilidad de que los datos coincidan con loci ligados en


Probabilidad de los datos si no hay ligamiento

Cuadro 13.2. Frmula para el clculo de lod score

Lod score = Z= log 10 =

P1( )
P2(1/2)

N
CI
P 1 = Probabilidad de ligamiento
P 2 = Probabilidad de segregacin para loci no ligados

UC
= 0.0 e inferior a 0.5 (ligamiento)
OD
= 0.5 segregacin al azar (1/2)
PR
RE

Las probabilidades calculadas se expresan en logaritmo de base 10 llamado


lod score (Z) como logaritmos de probabilidades. El uso de logaritmos permite
SU

la suma simple de los datos obtenidos en las diferentes familias.


As lod score (Z) constituye un mtodo estadstico que se utiliza para deter-
DA

minar en familias si los loci estudiados se encuentran en ligamiento.


BI

Los valores positivos de Z sugieren que ambos loci estn ligados, mientras
I

que valores negativos sugieren ausencia de ligamiento. Por convencin un lod


OH

score (Z) combinado de + 3 o mayor (equivale a ms de 1 000:1 probabilidades


a favor del ligamiento) y se puede considerar una evidencia de que ambos loci
PR

estn ligados.
Los valores en los cuales Z es mayor se aceptan como el mejor estimado de
la fraccin de recombinacin y se le conoce como estimado de probabilidad
mxima.
Se ilustra este anlisis con un ejemplo que demuestra la importancia de este
clculo y el valor de conocer la fase (acoplamiento o repulsin) en que se en-
cuentran los genes a estudiar.
Partiendo de los rboles genealgicos A y B de la figura 13.9, se analiza el
ligamiento entre la NF1 y un locus marcador RFLP con 2 alelos (1 y 2).
En el rbol genealgico A, la madre padece la enfermedad y es heterocigtica
para el locus marcador (1/2) as que no se puede saber si el gen de la NF1
segrega junto al alelo 1 o al 2.
248 Introduccin a la Gentica Mdica

Fig. 13.9. Familia A con marcadores RFLP 1 y 2 no informativos. Familia B, el estudio

N
molecular del abuelo afectado permite reconocer fase de acoplamiento entre el gen D de
la NF1 y el alelo 1 del RFLP estudiado.

CI
UC
El estudio del padre no es informativo tampoco pues el trasmite a sus hijos el
OD
gen sano de la NF1 y el alelo 1 del marcador porque es homocigtico para este.
Partiendo de estos datos se puede inferir que cada hijo hered de la madre el
PR
gen de la NF1 y tambin el alelo 2 marcador, y la hija sana recibe de la madre
RE

el gen recesivo y el alelo 1.


En dependencia de la fase en que se encuentra el gen de la NF1 y los alelos
SU

del locus marcador, los 3 hijos pueden ser recombinantes o no recombinantes.


Qu es lo correcto?
DA

Como no se puede llegar a una conclusin por los datos que se observan, se
BI

deben calcular las probabilidades de los 2 resultados posibles.


I

Se puede asumir que = 0, para esta familia en ausencia de conocimiento


OH

de los genotipos de la generacin de los abuelos, si esto es correcto, el genotipo


fase es D2 y d1, es decir, solo 2 tipos de gametos se deben esperar. Cada hijo
PR

tiene solo una probabilidad de 0,5 () de recibir cada combinacin ya que el


ligamiento que se propone es completo. Como fueron 3 hijos los descendientes
de esta familia, la probabilidad de que todos tengan esta combinacin
es (1/2)3 = 1/8.
Pero de igual forma, podra ser que la fase en que se encuentren ambos loci,
con respecto a la mutacin de la NF1, sea D1 y d2, lo que podra indicar que los
hijos son recombinantes y si = 0, la probabilidad combinada para entrecruza-
miento es 0,5 (1/2) (probabilidad de recibir cualquiera de las combinaciones y 1/
8 nmero de hijos recombinantes); 1/2 x 1/8 = 1/16.
Por otro lado se puede analizar que no hay ligamiento entre el locus de la
NF1 y locus 1/2 de forma tal, que las combinaciones meiticas puedan ser 4
(D1, D2, d1 y d2). La probabilidad de que los 3 hijos observados es (1/4)3 = 1/64
Ligamiento y recombinacin 249
entonces la probabilidad relativa de este rbol genealgico es 1/16:1/64 = 4:1 a
favor del ligamiento, la Z es el logaritmo base 10 de 4 o 0,602, se requieren al
menos 5 familias, con resultados equivalentes para llegar a una conclusin defi-
nitiva considerando = 0, pero mediante programas de computacin desarrolla-
dos se puede establecer el lod score para diferentes valores de .
La familia B (Fig.13.9), es similar a la anterior solo que se conoce el genotipo
del abuelo materno y esto permite establecer la fase en que se ubican los loci
en el cromosoma.
En esta familia queda claro que el gen de la NF1 est en acoplamiento con el
alelo 1 del locus marcador (si se asume que en la meiosis del abuelo materno no
haya existido entrecruzamiento, aunque esto es una inferencia sin certeza).
Si la fase de la madre es D1 y la del padre d1, los 3 hijos observados son no
recombinantes, y al comparar las probabilidades de que exista o no ligamiento,

N
se simplifica pues no se tiene que calcular la fase opuesta. As, la probabilidad

CI
de que los genotipos de los hijos sean D1 o d1 es de 1/2 y si son 3 hijos es (1/2)
3 =1/8 y no 1/16 como cuando se tena en cuenta ambas fases de ubicacin de

UC
los genes por no saber la fase en que se encontraban los genes.
Al igual que con el rbol genealgico A, si no hay ligamiento la probabilidad
OD
de que los hijos tengan cualquier combinacin de ambos loci es (1/4)3 = 1/64 y
PR
la probabilidad relativa es (Z) 1/8:1/64 que da 8:1 (en lugar de 4:1) por lo que la
probabilidad del ligamiento entre ambos loci es mayor, pues el logaritmo de 8 es
RE

0,903, este valor es ms informativo a favor de que exista ligamiento entre


ambos loci, lo que demuestra que para el clculo de la probabilidad de ligamiento
SU

entre 2 loci gnicos, es muy importante conocer la fase (acoplamiento o repul-


DA

sin) en que se encuentren los 2 genes pues permite que el resultado del clculo
a favor o no de ligamiento, sea ms seguro.
BI

La fase debe ser establecida en cada familia por separado y la sumatoria de


I

todas las Z encontradas en cada familia, permite establecer el estimado de


OH

probabilidad de ligamiento.
PR

Utilidad mdica de las tcnicas de biologia molecular


para deteccin prenatal de una mutacin por anlisis
de ligamiento
En los estudios de ligamiento con el uso de marcadores de ADN, la frecuen-
cia de recombinacin entre el gen que causa la enfermedad y el marcador
polimrfico es muy importante, ms aun, que la informatividad de la familia a
estudiar y la fase en que se encuentren el gen y el marcador, porque si se tiene
una frecuencia de recombinacin entre ambos de 5 %, significa un 5 % de error
en la prediccin de si el futuro hijo ser o no afectado en un diagnstico prenatal.
250 Introduccin a la Gentica Mdica

Por ejemplo en el caso de la distrofia muscular ubicada en el cromosoma X,


se pueden hacer estudios de ligamiento con un marcador polimrfico que se
encuentra a 5 unidades de recombinacin del gen que causa la enfermedad. Si
el gen que produce la distrofia muscular se encuentra ligado a un marcador
polimrfico de 4,0 Kb en acoplamiento, este conocimiento permite realizar el
estudio prenatal para una mujer portadora de la enfermedad y as conocer si el
feto ser o no afectado.
En el rbol genealgico de la figura 13.10, el marcador polimrfico de 4,0 kb
esta ligado en acoplamiento al gen de distrofia muscular con una frecuencia de
recombinacin de 5 %. La abuela materna (I-1) del feto estudiado tiene un
genotipo de 3,2 kb/4,0 kb, tiene 2 hijos un varn (II-1) afectado que tiene el
marcador polimrfico de 4,0 kb, lo que indica que la abuela materna (I-1) tiene
ligado el gen de distrofia muscular al marcador polimrfico de 4 kb, la hija

N
(II-2) de esta mujer (I-1) es portadora como su madre 3,2/4,0 y en el diagnsti-
co prenatal, el feto tiene el marcador 4,0 kb. Esto indica que tiene un 95 % de

CI
probabilidad de ser afectado y un 5 % de no ser pues puede existir probabilidad

UC
de entrecruzamiento entre los cromosomas homlogos de la madre.

OD
PR
RE
SU
DA
BI

Fig. 13.10. Fase de acoplamiento entre el marcador de ADN de 4,0 Kb y el gen de la


I

distrofia muscular Duchenne.


OH

La talasemia, enfermedad autosmica recesiva muy frecuente en diferen-


PR

tes pases del mundo se puede diagnosticar por el estado de ligamiento entre el
gen y un locus polimrfico marcador pero para eso se requiere que las familias
indicadas sean informativas y se conozca la fase de posicin del gen y el marca-
dor polimrfico; en las 4 familias que aparecen en la figura 13.11 se muestra la
importancia de estas 2 condiciones para poder realizar un diagnstico de certeza.
La familia No.1 es informativa pues segn el genotipo del hijo afectado el
gen de la talasemia segrega junto a la variante A del marcador gentico. En
esta familia se conoce la fase de ligamiento entre el gen afectado y la variante
del marcador, se puede decir que el feto no ser afectado pues presenta las
variantes recesivas que son el marcador aa.
La familia No. 2 no es informativa pues el gen de la talasemia podra estar
unido al marcador A o al marcador a, en cualquiera de los padres, por lo que el
feto puede ser afectado o portador.
Ligamiento y recombinacin 251

Fig. 13.11. Segregacin de los alelos A y a y la condicin de talasemia, representadas


por los smbolos en negro.

La familia No. 3, tiene el gen talasemia ligado en un padre a la variante


polimrfica A y en el otro a la variante a, o viceversa. El caso es que aunque no
se conoce la fase en s, es informativa pues el feto estudiado AA puede ser sano

N
o portador, pero no enfermo.

CI
La familia No. 4, no es informativa pues su padre tiene el gen afectado ligado
a la variante A del marcador y el otro a la variante a; la hija enferma recibi de

UC
los padres la variante A y la variante a, que tenan ligado al gen afectado pero en
el feto como es heterocigtico como su hermana, no se puede definir si ser
afectado o portador. OD
En la figura 13.12 se presenta otra situacin, pero esta vez utilizando un
PR
marcador que ofrece ms oportunidades de diferenciar genotpicamente a los
RE

miembros de la familia.
Considere una enfermedad autosmica dominante de comienzo en la infan-
SU

cia tarda y que es lentamente progresiva en el adulto joven, adems se carac-


teriza por causar discapacidad motora en el individuo adulto. La mutacin que
DA

expresa la enfermedad se encuentra en ligamiento con un locus polimrfico


BI

denominado A que tiene 4 alelos.


I

En las familias de la figura 13.12 se sealan a los afectados con los smbolos
OH

en negro y los genotipos con los nmeros de los alelos. Solo las familias 3 y
4 resultan informativas (ver leyenda de la figura 13.12 lo que sugiere que se
PR

puede utilizar la informacin para un posible diagnstico fetal en caso de que


esas 2 parejas decidan un nuevo descendiente).
Estos tipos de estudios de ligamiento con un marcador molecular son un
mtodo indirecto que se utiliza en el humano, en general, con propsitos de
estudios prenatales sobre todo cuando no existe posibilidad de aplicar un mto-
do molecular directo ( se dan detalles en el captulo 12). Tambin se utiliza
cuando se quiere conocer si un individuo, con 50 % de probabilidad de haber
recibido la mutacin de uno de sus padres afectado por una enfermedad
mendeliana de inicio tardo, ha heredado la mutacin aun en ausencia de snto-
mas de la enfermedad en el momento del estudio, o cuando se quiere identificar
la condicin de heterocigtico para una mutacin recesiva.
252 Introduccin a la Gentica Mdica

Fig. 13.12. 1) Meiosis no informativa no pueden distinguirse los cromosomas marcado-


res del padre que tiene la mutacin. 2) Meiosis no informativa el nio pudo heredar
cualquiera de los cromosomas de ambos padres. 3) Meiosis informativa y no recombinante,
el nio hered el A1 con el gen mutante del padre. 4) Esta meiosis es informativa y
recombinante ya que el nio hered el alelo A2 por recombinacin en la meiosis paterna

N
y se distingue porque los alelos maternos son A3 y A4.

CI
UC
Resumen
OD
A medida que se avanz en la investigacin sobre el anlisis de la segrega-
PR
cin independiente de la segunda Ley de Mendel, se fue descubriendo que no
siempre esto se cumpla, ya que la vecindad entre los loci localizados en un
RE

mismo cromosoma, constituye un fenmeno a tener en cuenta.


El concepto de ligamiento define la relacin que existe entre loci ubicados
SU

en el mismo cromosoma, esta relacin est basada en la distancia fsica entre


los genes que se ubican en un mismo cromosoma y por el anlisis gentico del
DA

fenmeno de recombinacin que ocurre en la profase de la meiosis I.


BI

Partiendo de estos conceptos generales en esta seccin se analizan diferen-


I

tes conceptos como:


OH

Ligamiento completo: cuando 2 loci se encuentran ubicados en un mismo


cromosoma a una distancia tan pequea que se anula el entrecruzamiento entre
PR

estos, segregando por regla general, en bloque hacia el mismo gameto


Ligamiento incompleto: cuando 2 loci se encuentran ubicados en el mismo
cromosoma a una distancia intermedia que permite entrecruzamiento, pero limi-
tado, entre estos por lo que no se cumplirn las proporciones mendelianas de los
cruces prueba.
Loci o genes no ligados: aquellos que pueden o no ubicarse en el mismo
cromosoma pero la distancia entre ambos es tan grande que el entrecruzamien-
to ocurre de forma libre y cumplen las proporciones mendelianas en los cruces
prueba.
Cruce prueba: cruzamiento que se realiza entre un padre heterocigtico
para todos los genes involucrados en el cruce y otro padre homocigtico para
los genes estudiados.
Ligamiento y recombinacin 253
Frecuencia de recombinacin: clculo de la proporcin de hijos con combi-
nacin recombinantes respecto al total de hijos del cruce, se expresa en propor-
cin o porcentaje y define la distancia aproximada entre los genes ligados. Su
valor va desde 0 (cuando entre los genes existe ligamiento completo) hasta 0,5
(cuando entre los genes no existe ligamiento y segregan cumpliendo la segunda
Ley de Mendel); cuando los valores de la frecuencia de recombinacin son
mayores de 0 y menores de 50 % entre los genes, existe ligamiento incompleto.
Lod score: medida aproximada de ligamiento entre 2 genes ubicados en
cromosomas del hombre, este parmetro indica la probabilidad mxima de que
exista ligamiento entre 2 genes en el hombre.
Marcadores de ADN: secuencias de nucletidos con diferentes caracters-
ticas que por su variabilidad en el genoma humano y entre las diferentes perso-
nas permite que se usen como marcadores para establecer relaciones de

N
ligamiento entre estas secuencias y genes humanos de inters mdico, sobre
todo para potenciar y limitar los riesgos en la aplicacin del asesoramiento gentico

CI
y diagnstico prenatal que se tratan en detalles en el captulo 18.

UC
Bibliografa
OD
PR
Adrian, M., Owen, R.D., R.S. Edgar (1974): Gentica General. 3ra. Ed. Barcelona: Ediciones
Omega S.A., 1974.
RE

Motulsky, V. (1979): Human Genetics. Problems and Approaches. New York: Springer -Verlag.
Nussboum, R. L., Mc Irmesn, R.R., H.F. Willard (2008): Thompson & Thompson: gentica en
SU

medicina 7ma. ed. Elseivier Masson. Mexico.


Strachan, T., A.P. Read (2006): Gentica Humana 3ra. ed. Mc Graw Hill. Mexico.
Strikberger, M.W. (1968): Genetics. La Habana Instituto del Libro., Edicin Revolucionaria.
DA

Weaver, R.F., P.W. Hedrick (1991): Basic G.E.N.E.T.I.C.S Brown Publishers.


BI
I
OH
PR
254 Introduccin a la Gentica Mdica

Captulo 14 MARCADORES
GENTICOS

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Los marcadores genticos se utilizan como instrumentos de investigacin,
OD
tanto para anlisis de ligamiento, como para el estudio de los genes en las pobla-
PR
ciones humanas y al propio tiempo sus caractersticas genticas se amplan con
los conocimientos que aportan estas investigaciones.
RE

Conocer la frecuencia de marcadores genticos especficos en las poblacio-


nes permite por una parte, el incremento de su uso con fines investigativos de
SU

diferentes tipos entre los que se encuentran intereses antropolgicos, forenses y


mdicos y, por otra parte, conocer su ubicacin cromosmica especfica poten-
DA

cia su uso con objetivos de cartografa o mapeo de otros genes que pudieran
BI

ser vecinos, muy cercanos o muy lejanos.


I

Por esta razn, determinar el orden en secuencia de este captulo ha sido


OH

difcil y se pide al lector que se remita a los captulos anteriores y posteriores


para comprender mejor el significado de conceptos de uso obligatorio en el
PR

abordaje del tema, como haplotipos y polimorfismos genticos o sobre algunas


tcnicas moleculares que se explican en el captulo 12.
La gentica y la herencia de los principales marcadores genticos ser el
objeto de este captulo.

Definicin

En la actualidad existen mtodos de estudios citogenticos, moleculares,


bioqumicos e inmunolgicos, que ofrecen la oportunidad de reconocer la diver-
sidad gentica, tanto en el patrn de tincin de los cromosomas, como ya se
describi en el captulo 6, en las protenas, como en la propia estructura del
Marcadores genticos 255
ADN. A esto hay que aadir que cada nuevo cigoto puede contener ms de 100
cambios en pares de bases que no estaban en los genomas haploides recibidos
por el vulo ni por el espermatozoide de sus progenitores y que no se produce en
secuencias codificantes sino en secuencias extragnicas o en regiones no
codificantes del ADN de sus cromosomas. Los marcadores genticos a nivel
de protenas o del ADN, son variaciones, rasgos que diferencian a las personas
y son el resultado de mutaciones que se expresan como fenotipos de fcil iden-
tificacin los cuales no cambian ni con la edad ni con el sexo. Presentan un
patrn simple de herencia y son de relativa frecuencia en las poblaciones.

Sistemas de grupos sanguneos como marcadores


genticos

N
Los sistemas de grupos sanguneos se han considerado marcadores genticos

CI
por excelencia. Existe una gran variabilidad y heterogeneidad en los ms de
30 sistemas de grupos sanguneos que se han ido incorporando a lo largo de la

UC
historia de la gentica humana, con la finalidad de conocer la relacin de vecin-
dad entre el marcador en cuestin y una enfermedad gentica u otro marcador
conocido. OD
PR
Entre estos se encuentra el sistema de grupos sanguneos ABO, descubierto
por Landsteiner en 1900 y que abri nuevos conocimientos en el uso de las
RE

transfusiones de sangre. En el ao 1924 se descubri la herencia mendeliana


del sistema ABO, y desde entonces la fcil identificacin de sus fenotipos por
SU

tcnicas inmunolgicas y la fcil interpretacin de sus genotipos a partir de sus


fenotipos y progenitores, le han conferido la preferencia histrica como marca-
DA

dores genticos.
BI

Por medio del estudio gentico de este sistema se desarrollaron los concep-
I

tos de alelos mltiples y de codominancia entre dos alelos.


OH

En la actualidad el concepto de alelos mltiples se extiende a la heterogenei-


dad gentica allica y el concepto de codominancia se refiere a la relacin que
PR

existe entre dos alelos en cuanto a su expresin cuando ambos forman parte del
genotipo, ya que se expresan simultneamente en el fenotipo, como lo hacen,
cuando estn separados. Depende en gran medida de la profundidad del estudio
del fenotipo.
El fenotipo del sistema de grupos sanguneos ABO se determina por una
simple reaccin antgeno-anticuerpo.
Los antgenos ABO se encuentran en la membrana de los hemates y los
anticuerpos en el plasma sanguneo, de modo que los anticuerpos del tipo de las
inmunoglobulinas M (IgM) que se generan por el sistema inmunolgico y, que
en este caso ocurre de forma natural, no atacan (reaccin antgeno-anticuerpo)
a sus propios antgenos sino a los que el organismo no posee como respuesta de
defensa que caracteriza al sistema inmunolgico del organismo.
256 Introduccin a la Gentica Mdica

Por esto, al clasificar en una gota de sangre los fenotipos ABO con los
anticuerpos anti A y anti B se identifican segn se puede observar en la figura 14.1.

N
CI
UC
OD
Fig. 14.1. Deteccin de los fenotipos del sistema de grupos sanguneos ABO, genotipos
posibles, alelos y locus.
PR
RE

Se reconocen cuatro fenotipos y tres alelos A, B y O. Los alelos A y B tienen


SU

relacin de dominancia completa sobre el alelo O, pero cuando los alelos A y B


estn juntos en el genotipo su relacin de expresin es de codominancia. Ade-
DA

ms, el grupo sanguneo O solo se expresa en los individuos homocigticos para


BI

este alelo como un carcter recesivo.


I

Es importante sealar que el fenotipo A por sus caractersticas inmunolgicas


OH

se clasifica en dos subgrupos denominados A1 y A2, los cuales a su vez tienen


dos alelos denominados A1 y A2 y que incrementan el nmero de alelos para el
PR

locus ABO a cuatro, el fenotipo a 5 y los genotipos a 8, como se observa en la


tabla 14.1.

Tabla 14.1. Fenotipos, genotipos y relaciones de dominancia entre los alelos A1, A2, B y O

Fenotipos Genotipos Relacin de dominancia

A1 A1A1, A1A2, A1O El alelo A1 es dominante sobre los alelos A2 y O


A2 A2A2, A2O El alelo A2 es dominante sobre el alelo O
B BB, BO El alelo B es dominante sobre el alelo O
A1B A1B Ambos alelos se expresan en el fenotipo
A2B A2B Ambos alelos se expresan en el fenotipo
O OO Solo se expresa como homocigtico recesivo
Marcadores genticos 257
La presencia de cuatro alelos ampla las posibilidades del sistema ABO como
marcador gentico, sin embargo, generalmente se utiliza la informacin relativa
a los alelos A, B y O, para anlisis poblacionales (ver captulo 15) y para la
explicacin de la va de sntesis de estos antgenos, aspecto este de gran impor-
tancia en la comprensin de la interrelacin entre genes y que se expone a
continuacin.

Va de sntesis del sistema ABO


El descubrimiento de las bases bioqumicas de los antgenos del sistema ABO
se produjo en el ao 1968 y a partir de entonces se emplea la denominacin
ABH para referirse a ellos, ver ms adelante detalles. Estos antgenos son
complejos de glicoesfingolpidos que se encuentran formando parte de la mem-

N
brana del glbulo rojo. Esta estructura molecular tiene un ncleo inicial, al cual

CI
se aaden molculas de distintos azcares y, finalmente, los antgenos que ca-
racterizan a este sistema la confiere el azcar terminal. Las enzimas que enla-

UC
zan estos azcares terminales son glicosiltransferasas. Para la formacin de los
OD
antgenos del sistema ABO existe otro locus al que se le denomina H.
Este locus H tiene dos alelos conocidos como H y h por su relacin de
PR
dominancia completa de uno respecto al otro.
El alelo H produce la transferasa H que aade al glicoesfingolpido, precur-
RE

sor de la membrana del hemate, una molcula de L-fucosa, y le confiriere al


glbulo rojo especificidad antignica H. La figura 14.2 muestra esquemas
SU

moleculares de la va de sntesis que se resume a continuacin.


DA
BI
I
OH
PR

Fig. 14. 2. La delecin de la guanina en el tercer triplete, provoca un corrimiento del


marco de lectura y la protena codificada no tiene funciones como transferasa.

Este antgeno H resulta ser un precursor para las glicosiltransferasas A y B


que son codificadas por los alelos A y B y que producen los antgenos A y B,
respectivamente.
258 Introduccin a la Gentica Mdica

El locus ABO tiene 7 exones codificantes, los alelos que codifican las
transferasas A y B difieren mnimamente en su secuencia de aminocidos. El
alelo A codifica la protena alfa 1-3-N-acetilgalactosamina transferasa y el alelo

N
B la protena alfa 1-3-galactosil transferasa. Sin embargo el alelo O, aunque
tambin es idntico en su secuencia a los alelos A y B, presenta una delecin de

CI
guanina cerca del extremo terminal del ltimo exn que corresponde con la

UC
regin aminoterminal. Esta delecin se expresa por un corrimiento del marco de
lectura determinando una protena completamente diferente y no funcional como
OD
transferasa, por lo que una simple delecin de una base nitrogenada provoca la
presencia del alelo O en el locus ABO, como se ilustra en la figura 14.3.
PR
La ausencia de transferasa funcional por el homocigtico OO se muestra en
RE

la va de sntesis por la no modificacin del antgeno H que queda en la membra-


na de los hemates de las personas con este genotipo. Por este motivo, el siste-
SU

ma tambin es nombrado ABH. Las personas con fenotipo O presentan en el


plasma de su sangre anticuerpos anti A y anti B pero no anti H. Se puede ver
DA

ms adelante la importancia del uso de anti H en la hemoaglutinacin con el


BI

propsito de conocer los fenotipos del sistema ABO.


I
OH
PR

Fenotipo Bombay

Las personas que tengan el genotipo hh no producen antgeno H, ya que no


codifican transferasa H (fucosil transferasa 1) que une una molcula de L-
fucosa al azcar terminal del glicoesfingolpido precursor (Ver Fig. 14. 3) y, por
tanto, aunque tengan en su fenotipo cualquiera de las combinaciones genotpicas
que contengan a los alelos A y B, estos no se logran expresar aunque tienen la
peculiaridad de que si la pareja de una persona con genotipo hh tuviera genotipo
HH, sus hijos seran todos heterocigticos Hh y entonces podran expresar los
alelos A o B segn fuera su genotipo para el sistema de ABO.
Marcadores genticos 259

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH

Fig. 14.3. Esquema de la va de sntesis de los antgenos ABH que expresan los grupos A,
B y O. Siempre que se expresen los genotipos HH y Hh que codifican la enzima transferasa
PR

H, que une una molcula de L-fucosa al glicoesfingolpido precursor transformndolo en


antgeno H. El genotipo hh no permite la formacin del anfgeno H y los genotipos del locus
ABO no se expresan al no poder formarse los antgenos A, B en el caso de los genotipos
AA, AO, BB, BO y AB y no estar presente el antgeno H para el genotipo OO.
260 Introduccin a la Gentica Mdica

El fenotipo resultante de individuos con genotipo hh se conoce como fenotipo


Bombay ya que fue en ese puerto del estado de Maharashtra, donde se descri-
bi por primera vez por Bhende y cols, en el ao 1952, en una familia que se
caracterizaba por no aglutinar sus eritrocitos. En la actualidad se conoce que en
esa regin de la India, la frecuencia del fenotipo Bombay y, por tanto, de indivi-
duos con genotiopo hh es de 1 en 13 000 habitantes.
El genotipo hh impide la expresin de los alelos A y B del sistema de grupo
sanguneo ABO. Adems, las personas con el genotipo hh no presentan los
antgenos A, B o H por lo que si para la tipificacin fenotpica, no se usa el
anticuerpo anti H, los individuos con este raro fenotipo pueden quedar mal cla-
sificados como falsos fenotipos O.

Sistema Rh

N
Desde el punto de vista gentico el locus Rh, es bastante complejo y su

CI
anlisis no se incluye en los objetivos de este captulo, sin embargo, hay un

UC
anticuerpo anti Rh que es capaz de detectar solo la presencia o ausencia del
antgeno de la membrana del hemate, y no las variaciones bioqumicas del
OD
antgeno. Por lo tanto, a los efectos de este ejemplo, para el locus Rh solo se
tienen dos alelos definidos por las letras D y d. El alelo D, dominante sobre el
PR
alelo d. En la figura 14.4 se resume la herencia de este sistema.
RE

La reaccin antgeno-anticuerpo del sistema Rh ha permitido identificar dos


subgrupos poblacionales: los individuos que presentan el antgeno Rh y que se
SU

clasifican como Rh +, y aquellos que no presentan el antgeno y que se clasifi-


can como Rh-.
DA

A diferencia del sistema ABO, los anticuerpos Rh, que son inmunoglobulinas
del tipo G (IgG) solamente se producen cuando el individuo con genotipo dd y
BI

Rh- se pone en contacto con sangre que presenta el antgeno Rh o sea fenotipo
I

Rh positivo.
OH

En el cuadro 14.1 se ofrece explicacin adicional sobre el fenmeno de in-


compatibilidad materno-fetal y el sistema Rh.
PR

Sistema MN

Este es un sistema de grupos sanguneos de herencia muy sencilla con dos


alelos y tres fenotipos.
El fenotipo MN se presenta porque los alelos M y N son codominantes, o sea
para su deteccin se utilizan los anticuerpos M y N.
Una generalizacin de las caractersticas genticas del sistema de grupos
sanguneos MN se aprecia en la figura 14.5.
La tabla 14.2 resume las caractersticas genticas de 16 sistemas de grupos
sanguneos de herencia mendeliana que tienen una localizacin fsica en
cromosomas especficos.
Marcadores genticos 261
Cuadro 14.1 Enfermedad hemoltica del recin nacido (EHRN)

La enfermedad hemoltica del recin nacido (EHRN), es un fenmeno que se produce en recin
nacidos hijos de mujeres que presentan Rh -. Las mujeres con fenotipo Rh - tienen un genotipo
homocigtico para el alelo d, y no presentan el antgeno Rh en la membrana de sus hemates.
Si su organismo no se ha puesto en contacto con sangre Rh + por vas como: transfusiones de
donantes Rh+, interrupciones de embarazos, su sistema inmune produce anticuerpos anti Rh.
En ese caso la mujer llega al primer embarazo sin anticuerpos anti Rh. Si su pareja presenta
fenotipo Rh+, con genotipo homocigtico para el alelo D (D/D), el feto habr heredado el alelo
d de la madre y siempre uno de los alelos D del padre y por tanto el fenotipo fetal ser Rh+.
Al torrente sanguneo de la madre pasarn eritrocitos fetales y entonces el sistema inmunolgico
materno, el cual hasta ese momento no se haba puesto en contacto con antgenos Rh, comien-
za a formar rpidamente anticuerpos anti Rh. Estos anticuerpos son inmunoglobulinas del
tipo IgG y pueden, a su vez, pasar por la va de la placenta a la circulacin fetal y hemolizar
a los eritrocitos fetales que se encuentran en formacin y causar la enfermedad hemoltica del
recin nacido, de graves consecuencias, si no se trata.

N
Si la pareja Rh+, tiene genotipo heterocigtico D/d, entonces, para cada gestacin el feto
podra tener 50 % de probabilidad de heredar ambos alelos d de madre y padre y expresar

CI
fenotipo Rh - como el de la madre, y en ese caso la madre no queda inmunizada para producir
anti Rh y para cada embarazo tiene igual probabilidad de tener hijos Rh -, por lo que podra

UC
tener varios hijos sin desarrollar la EHRN, todo depende del azar.
Este grave conflicto inmunolgico se puede minimizar administrando a la mujer Rh -, no
OD
expuesta previamente al antgeno Rh, una dosis de inmunoglobulina anti Rh entre las semanas
28 y 32 de la gestacin y otra despus del parto, de modo que al pasar al torrente de la
PR
circulacin materna, clulas fetales Rh+, estas sern atrapadas y eliminadas, por los anticuerpos
anti Rh, previamente suministrados a la madre y sin sensibilizar al sistema inmunolgico
RE

materno, lo que constituye una medida preventiva que puede eliminar las consecuencias de la
EHRN.
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 14.4. Deteccin de los fenotipos Rh, genotipos posibles, alelos y locus.
262 Introduccin a la Gentica Mdica
Tabla 14.2. Loci y localizacin cromosmica de 16 sistemas de grupos sanguneos

Nombre Locus Localizacin cromosmica

ABO ABO 9q34.2


MN MN 4q28.2-q31.1
Ss Ss 4q28-q31
P P1 22q11.2-qter
Rh RH 1p36.11
Lutheran LU 19q13.2
Kell KEL 7q34
Lewis LE 19p13.3
Duffy FY 1q23.2
Kidd JK 18q12.3
Diego DI 17q21.31
Yt YT 7q22

N
Xg XG Xp22.33
Scianna SC 1p34.2

CI
Dombrock DO 12p12.3
Colton CO 7p14

UC
OD
Cuadro 14.1 Enfermedad hemoltica del recin nacido
PR

(EHRN)Gentica del sistema de histocompatibilidad ma-


RE

yor
SU

El complejo de histocompatibilidad mayor MHC (del ingls, major


DA

histocompatibility complex) est compuesto por un gran grupo de loci o genes


BI

muy ligados, localizados en el brazo largo del cromosoma 6p. Este sistema est
I

muy relacionado con el rechazo que el organismo hace a injertos de tejidos.


OH

El sistema HLA est formado por antgenos genticamente determinados,


presentes en las membranas de los leucocitos de la sangre y en la mayora de
PR

las clulas nucleadas del cuerpo.


Fue descubierto en investigaciones relacionadas con la aceptacin del orga-
nismo al transplante de rganos, particularmente, transplantes renales. Tiene en
cuenta como antecedentes la historia de las transfusiones y el sistema de gru-
pos sanguneos ABO.
En estas investigaciones se encontr una gran variedad de tipos de antgenos
al usar los anticuerpos que producen mujeres multparas contra sus fetos duran-
te la gestacin. La identificacin de su diversidad allica se basa en el estudio
srico inmunolgico, pero actualmente, el sistema HLA est casi completamen-
te caracterizado a nivel molecular, lo que facilita la caracterizacin del genotipo
y de sus haplotipos.
Sobre las bases de sus caractersticas estructurales y funcionales, estos genes
se agrupan en tres clases denominadas: clase I; clase II; clase III.
Marcadores genticos 263
Las clases I y II corresponden al sistema HLA. Los alelos se designan por
sistema numrico (HLA-A1; HLA-A2; HLA-B5; HLA-DR3; HLA-DR4; etc).
La clase II se encuentra ms cerca del centrmero y en la clase I, sus loci
estn hacia el telmero y en el centro de ambas clases I y II se encuentran los
loci de la clase III. Tanto los antgenos de la clase I como de la clase II son
constitutivos de la membrana celular de linfocitos B, macrfagos y linfocitos T
y tienen un papel muy importante en el desencadenamiento de la respuesta
inmunolgica.
Entre los loci DP y DQ de la clase II se han ubicado otros tres loci: LMP
que codifica componentes de una proteasa multifuncional (DMA y DMB) los
cuales codifican la molcula procesadora de antgenos y otra que codifica para
una protena transportadora asociada (TAP) al procesamiento de antgenos.
De forma continua se descubren nuevos antgenos MHC que aumentan

N
Tabla 14. 3. Incremento de alelos de las clases I y II del

CI
sistema HLA de 1996 a 1997

UC
Loci 1996 1997

HLA-A
HLA-B OD 60
125
83
186
PR
HLA-C 36 42
HLA-DRB1 132 184
RE

HLA-DRB3 5 11
HLA-DRB5 6 12
HLA-DQA1 16 18
SU

HLA-DQB1 25 31
DA
BI

el nmero de loci y de los alelos de cada uno de estos, como se aprecia en la


I

tabla 14.3.
OH

Los loci ubicados en el complejo MHC de la clase III se encuentran entre


las clases I y II y tienen una expansin de ADN de 1 Mb. En ese segmento de
PR

ADN hay una coleccin de loci heterogneos que codifican componentes del
sistema de complemento como las protenas C2 y C4, el locus del gen que
codifica la protena 21 hidroxilasa, locus de gen que codifica para la protena
HSP70 (HSP, del ingls, heat shock protein) que tiene funciones en el trfico
intracelular de protenas, locus del gen para protenas TNF (del ingls, tumor
necrosis factor) que se encuentran involucradas en el control de diversas reac-
ciones inmunolgicas, y otros loci que forman un grupo unido (clster) que
codifican para protenas cuyas funciones no se encuentran aun bien deter-
minadas.
El sistema HLA tiene la peculiaridad de formar un haplotipo, en la figura 14.5
se esquematizan las caractersticas de este.
En la clase I se encuentran los loci HLA-A; HALA-B; HLA-C; HLA-E y
264 Introduccin a la Gentica Mdica

N
Fig. 14.5. Deteccin de los fenotipos MN, genotipos, alelos y locus.

CI
HLA-G. Los dos ltimos (HLA-E y HLA-G) son menos conocidos y en la clase

UC
II los loci HLA-DR, HLA- DQ y HLA-DP.
OD
Cada uno de estos loci presentan una gran heterogeneidad allica, por ejem-
plo, en el locus A se describen ms de 83 alelos y se les nombra A1; A2; A23;
PR
Aw19; Aw74; etc. En el locus B hay 186 alelos descritos y en el locus C, hay
por lo menos, 42 alelos conocidos, lo mismo ocurre en la clase II, en cada uno de
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 14.6. Esquema de ubicacin de las clases I, II y III del sistema MHC. Los nmeros
indicados con las flechas se refieren al nmero de alelos de estos loci, al ser detectados
por estudios moleculares del ADN.

sus loci se describe un gran nmero de alelos, como se aprecia en la tabla 14.3
y se esquematiza en la figura 14.6.
Una persona puede tener para el sistema MHC, un genotipo A1 Bw57 Cw1
DR1 DQw1 DPw6 en un cromosoma y en el cromosoma homlogo A2 B7
Marcadores genticos 265
Tabla 14.4. Diferentes alelos en uno de los loci del locus B

Genotipo Gametos

A1 Bw57 Cw1 DR1 DQw1 DPw6


A1 Bw57 Cw1 DR1 DQw1 DPw6
50 %

A2 B7 Cw2 DR7 DQw9 DPw5


A2 B7 Cw2 DR7 DQw9 DPw5

50 %

Cw2 DR7 DQw9 DPw5, pero sus hijos heredarn uno u otro haplotipo, ntegros
(Tabla 14.4).

N
CI
La posibilidad de que dos personas compartan un genotipo igual es extrema-
damente baja, solo dos hermanos tienen la posibilidad del 25 %, de haber here-

UC
dado el mismo genotipo o los mismos cromosomas de ambos padres, y tambin
los gemelos monocigticos.
OD
PR
Marcadores moleculares del ADN humano
RE

Adems de los grupos sanguneos y el sistema de histocompatibilidad mayor


SU

HLA como marcadores genticos, existen los denominados polimorfismos de


ADN; el trmino polimorfismo se trata con ms detalles en el captulo 15 de
DA

este texto y se refiere a que la frecuencia de los alelos de un locus se encuentra


BI

distribuida en las poblaciones, de forma tal, que resulta muy probable que dos
I

personas seleccionadas al azar tengan alta posibilidad de ser heterocigticos.


OH

Los avances proporcionados por resultados del Proyecto Genoma Humano


han contribuido con nuevas consideraciones sobre los marcadores genticos
PR

identificados por cambios en la estructura secuencial del ADN humano. Este


tipo de marcador gentico ha sido muy efectivo para el estudio de la cartografa
de genes, ya que se presentan en cada una de las 24 molculas del ADN humano.
En la prctica de la gentica mdica los marcadores moleculares de ADN
son de gran valor para el anlisis por mtodos moleculares indirectos de muta-
ciones que producen enfermedades especficas, con la finalidad de identificar
genotipos fetales con riesgos certeros de haber heredado la mutacin en estudio
y poder realizar el diagnstico prenatal de estas. Los marcadores moleculares
tienen, adems, la ventaja de que estudian directamente el genotipo.
Dos tipos de polimorfismos de ADN se destacan:
RFLP (RFL, del ingls, restriction fragment length): son los proporciona-
dos por mutaciones que cambian la secuencia de reconocimiento de un sitio
266 Introduccin a la Gentica Mdica

de restriccin (polimorfismos de sitio de restriccin). Los polimorfismos de


sitios de restriccin producen los RFLP.
VNTR (del ingls, variable number of tandem repeats): son polimorfismos
de repeticiones de secuencias cortas de ADN, en tandem, que se identifican
utilizando cebadores, los cuales flanquean el locus en estudio y permiten la
amplificacin y obtencin de segmentos de ADN cuyos tamaos varan en
unidades integrales especficas repetidas, y que despus se identifican por
procedimientos tcnicos de electroforesis en gel de poliacrilamida.

Marcadores de sitios de restriccin del ADN (RFLP)

Despus de la aplicacin del southern blot se descubri que todas las perso-
nas no tenan los sitios de corte localizados siempre en el mismo lugar en una

N
secuencia de ADN al utilizar la misma enzima de restriccin y que las secuen-
cias de cambio se deban a la herencia de mutaciones por creacin de un nuevo

CI
sitio reconocido por la enzima, o por la desaparicin del que ya exista. Teniendo

UC
en cuenta los cientos de enzimas de restriccin que se pueden utilizar, es senci-
llo comprender la gran cantidad de secuencias de ADN que se pueden obtener.
OD
Basado en la posibilidad que brinda este anlisis, se le nombr RFL y como se
generan alelos para cada segmento de ADN que se analiza, lo suficientemente
PR
frecuentes o polimrficos, se ha aadido la P, y se nombran RFLP. En la actua-
RE

lidad esta condicin y el hecho de conocer su posicin genmica los declara


como los mejores marcadores genticos. Tienen un patrn simple de herencia
SU

codominante.
Los RFLP se nombran de la forma siguiente: por ejemplo, en la figura 14.7, el
DA

RFLP estudiado, D14S1 significa: la D del DNA (siglas en ingls del ADN), el
nmero que sigue indica el cromosoma, en este caso el cromosoma 14, la letra
BI

S se refiere al estudio de una simple cadena de ADN y el ltimo nmero identi-


I

fica el locus, en este ejemplo el 1.


OH

Los RFLP tienen baja informatividad, pues solo tienen dos alelos y las meiosis
PR

en los individuos del rbol genealgico que se estudie, a menudo, no son infor-
mativas.

Marcadores de repeticiones en tndem de ADN

Estos marcadores de repeticiones en tndem son el resultado de inserciones


o deleciones (indels) que originan un elevado nmero de alelos (multiallicos) a
diferencia de las deleciones o inserciones que solo originan dos alelos a los
cuales se les denomina simples porque la diversidad de genotipos resulta reducida.
Los indels multiallicos de repeticiones en tndem se encuentran en el ADN
no codificante. Hay tres subclases de estas repeticiones en tandem:
ADN satlite de las regiones pericentromricas y centromricas (ver captulo 3).
Marcadores genticos 267

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU

Fig. 14.7. Corrida electrofortica de RFLP del locus D14S1. Observe que resulta fcil
DA

identificar los genotipos de los padres y hacer el anlisis de segregacin de los alelos
BI

paternos en los hijos.


ADN minisatlite.
I
OH

ADN microsatlite.
PR

Los minisatlites son segmentos de ADN denominados VNRT (del ingls,


variable number of tandem repeats) que se agrupan en las regiones telomricas
de los cromosomas, son muy informativos por la cantidad de alelos que presen-
tan, tienen fcil localizacin fsica, requieren de tcnica de southern blot, ya
superada por tcnicas de PCR y electroforesis en gel de poliacrilamida para la
identificacin de las repeticiones en tndem. Su gran polimorfismo proporciona
alta probabilidad de diversidad de heterocigticos con fines de estudios indirec-
tos de enfermedades monognicas, como se puede apreciar en la figura 14.8.
Los ADN microsatlites tambin llamados polimorfismos de repeticiones en
tndem cortas, o polimorfismo de repeticin de secuencias simples, o sea un
tipo de VNTR en el que tanto el arreglo (por lo general 100 pb) como la unidad
repetida (dinucletidos y trinucletidos) son pequeos. Los microsatlites estn
268 Introduccin a la Gentica Mdica

N
CI
UC
OD
Fig. 14. 8. ADN minisatlite del locus B. Observe que el uso de una sonda nica que
PR
identifica la regin de ADN del locus, permite detectar 4 alelos que se diferencian por el
nmero de repeticiones en tandem que median entre la hibridacin de la sonda y el sitio
RE

de restriccin identificado por la enzima de restriccin especifica. En el rbol genealgico


se ofrecen los resultados de un estudio molecular indirecto utilizando el locus B que se
SU

conoce que se encuentra estrechamente ligado al locus con una mutacin para una
enfermedad monognica autosmica dominante. Ambos padres son heterocigticos
DA

para los alelos; 1/3 la madre, que se encuentra afectada y 2/4 el padre. El cromosoma
BI

materno con el alelo 1 es en el que se encuentra el locus con la mutacin para la enferme-
I

dad. Los hijos que reciban el cromosoma con el alelo 1 tienen alta probabilidad de
OH

heredar la enfermedad.
PR

dispersos o diseminados en la totalidad del genoma, son muy informativos y se


identifican por PCR multiplex automatizado.
Adems de las ventajas que ofrecen los microsatlites, estn los SNP (del
ingls, single nucleotide polymorphism) o polimorfismo de simple nucletido.
Los SNP se encuentran distribuidos a lo largo de las 24 molculas de ADN.
Este tipo de marcador es muy utilizado en las actuales investigaciones
genmicas, ocurre con gran frecuencia en el ADN y se puede tipificar con
facilidad por secuenciacin mediante mtodos automatizados sin electroforesis,
lo que hace posible analizar al mismo tiempo, enormes cantidades de muestras.
El polimorfismo se origina por el cambio de un simple nucletido aislado.
La tabla 14.5 ofrece un resumen de lo expuesto hasta aqu sobre las caracte-
rsticas de los marcadores de ADN.
Marcadores genticos 269
Al comparar los marcadores moleculares con otros marcadores como los de
grupos sanguneos se observan diferencias notables en su utilidad, por ejemplo,
para estudios de ligamiento utilizando el sistema de grupos sanguneos se nece-
sita sangre fresca, y antisueros, para el anlisis de identificacin del fenotipo, no
siempre es posible deducir el genotipo por el fenotipo y se requiere de informa-
cin de varias generaciones con la finalidad de identificar los genotipos para los
casos de relacin de dominancia completa entre los alelos. No siempre resultan
suficientemente informativos y sus loci se encuentran ubicados en regiones
cromosmicas especficas como se aprecia en la tabla 14.6.

Tabla 14.5. Tipos de marcadores moleculares y sus caractersticas genticas y tcnicas

N
Tipo de marcador Caractersticas

CI
RFLP de ADN Ofrece dos tipos de alelos y se estudia tanto por southern

UC
blot como por PCR
ADN minisatlite VNTR Ofrece muchos alelos, es muy informativo. De fcil localiza-
(variable number of tandem cin fsica. Tiende a agruparse en los extremos de los
repeats) repeticiones de 10 a ODcromosomas. Se estudia por Southern blot y PCR
100 pb
PR
ADN microsatlites STRP Ofrece muchos alelos, es muy informativo. De fcil localiza-
RE

(short tandem repeat cin fsica. Distribuido en la totalidad del genoma. Se estudia
polymorphisms) repeticiones por PCR y multiplex automatizado
di- tri-y tetranucletidos
SU

SNP (polimorfismo de simple Es menos informativo que los microsatlites. Solo tiene dos
nucletido) de ADN alelos. Puede identificarse a gran escala mediante equipo au-
DA

tomatizado y no requiere electroforesis en gel


BI
I

Tabla 14. 6. Loci de sistemas de grupos sanguneos y regiones cromosmicas involucradas (ver
OH

tambin la tabla 14. 2)


PR

Cromosomas p q

1 p34.2 locus SC q23.2 FY


p36.11 locus RH
4 q28.2-q31.1 locus MN
q28-q31 locus Ss
7 P14 locus CO q22 locus YTq34 locus KEL
9 q34.2 locus ABO
12 P12.3 locus DO
17 q21.31 locus DI
18 q12.3 locus JK
19 P13.3 locus LE q13.2 locus LU
22 q11.2-ter locus PI
X P22.33 locus XG
270 Introduccin a la Gentica Mdica

En el caso del sistema HLA, aunque constituyen haplotipos de alta


informatividad, solo son tiles para ubicar loci ligados en 6p21.3.
Sin embargo, cada uno de los marcadores estudiados en este captulo tiene
utilidades mdicas, forenses y genticas.

Resumen

Los marcadores genticos tienen que cumplir requisitos que permiten deno-
minarlos entre ellos, encontrar su distribucin en las poblaciones de herencia
mendeliana simple y tener fcil determinacin. Los sistemas de grupos sangu-
neos y el sistema de histocompatibilidad mayor (MHC) tienen estas caracters-
ticas, aunque tienen limitantes ya que para su estudio se requiere de sangre
fresca y antisueros y los genotipos no siempre se pueden deducir por el fenotipo.

N
La va de sntesis de los antgenos ABH es una verdadera demostracin que

CI
ilustra la accin de los genes en la expresin de un carcter. Mediante las
transferasas, que son protenas determinadas por genes, se producen los antgenos

UC
que son glicoesfingolpidos. Esta va es tambin una demostracin de interaccin
OD
entre los genes y permite comprender de mejor manera fenmenos como la
penetrancia reducida de un gen.
PR
Los marcadores de excelencia en el momento actual con fines forenses y de
estudios indirectos de ligamiento son los obtenidos del ADN, en especial los
RE

minisatlites y microsatlites por su carcter polimrfico, su amplia localizacin


SU

cromosmica y fcil determinacin genotpica directa.


DA

Bibliografa
BI
I

Bencomo Hernndez, A., Alfonso Valds, M.E., Gonzlez Sampedro, R., Fernndez Estrada, J.
OH

y A. Ballester Santovenia (1997): Frecuencia de los grupos sanguneos A1, A2, Aint, Ael, B y
O en donantes de sangre. Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter., 13:122-31.
PR

Nussboum, R. L., Mc Irmesn R.R., H.F. Willard (2008): Thompson & Thompson: gentica en
medicina 7ma. ed. Elseivier Masson. Mexico.
Rimon, D.L., Connor, J.M., Pyeritz, R.E., B.R. Korf (2007): Emory and Rimoins Principles and
Practice of Medical Genetics 6 ed. New York: Churchill Livingstone Vol 1.
Strachan, T., A.P. Read (2006): Gentica Humana 3ra. ed Mc Graw Hill. Mexico.
Vogel, F., V. Motulsky (1979): Human Genetics. Problems and Approaches. New York: Springer
-Verlag.
Los genes en las poblaciones humanas 271

Captulo 15
LOS GENES EN LAS
POBLACIONES HUMANAS

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Aunque la divulgacin de la secuenciacin de las bases que componen al
OD
genoma humano no permite identificar diferencias biolgicas entre individuos
de la especie humana que justifiquen diferencias y marginaciones sociales, s
PR
existen diferencias relacionadas con las frecuencias de alelos, que explican
RE

variaciones genticas del desarrollo entre los individuos, de modo que loci que
expresan el mismo carcter, pueden tener un amplio rango de diversidad en sus
SU

cualidades fenotpicas.
As se definen las razas o grupos raciales mayores en caucsicos, negros y
DA

asiticos, cada uno de los cuales tienen a su vez subgrupos.


BI

Como ya se ha explicado en captulos anteriores, las bases de las diferencias


I

entre los alelos de un locus surgen de las mutaciones.


OH

La seleccin de mutaciones favorables, en respuesta a condiciones ambien-


PR

tales o a la probabilidad de sobrevivir de mutaciones neutrales o beneficiosas


junto con un grado de aislamiento reproductivo entre los grupos, marcan las
diferencias genticas entre las poblaciones.
A esto se aade el paso de los periodos vividos como el glacial de hace
100 000 aos, que impuso grandes barreras naturales entre los grupos humanos
existentes sobre la Tierra.
Con el tiempo cada grupo se subdividi en numerosas subpoblaciones a las
que se les denomina grupos tnicos, con sus propias peculiaridades genticas y
ambientales.
De ah que existan tantas diferencias entre las frecuencias de los alelos de un
locus, al comparar, desde este punto de vista las caractersticas genticas
de las poblaciones.
272 Introduccin a la Gentica Mdica

Por ejemplo, el alelo que expresa el grupo sanguneo B es comn en asiti-


cos, pero est ausente en la poblacin aborigen americana; la enzima alcohol
deshidrogenasa que tiene tres loci: ADH1; ADH2; ADH3. La variante de la
ADH2 es mucho ms frecuente entre los japoneses (90 %) que entre los euro-
peos (15 %).
Este captulo est dirigido al anlisis de cmo estudiar los genes en las pobla-
ciones humanas.

Gentica poblacional
La gentica poblacional se dedica al estudio matemtico de la distribucin de
los genes y de los factores que comprometen las variaciones y fluctuaciones de
sus frecuencias en las poblaciones humanas.

N
En gentica mdica tiene mucho en comn con la epidemiologa del estudio

CI
de factores genticos y ambientales que determinan la frecuencia y distribucin
de enfermedades en las comunidades humanas.

UC
Estas dos especialidades, la gentica poblacional y la epidemiologa, se fusio-
nan en la gentica epidemiolgica que aunque estudia, principalmente, aquellas
OD
enfermedades en las que predomina la combinacin de factores genticos y
ambientales y que generalmente presentan patrones complejos de herencia,
PR
entre los que se incluyen las enfermedades comunes del adulto. Tambin enfo-
RE

ca la distribucin poblacional de mutaciones simples que se expresan como


enfermedades severas y raras en el hombre, contribuyendo a una mejor defini-
SU

cin de los riesgos utilizados en el asesoramiento gentico como se explica en el


captulo 18.
DA

La gentica poblacional, como la segregacin en los gametos de simples


BI

mutaciones que siguen las leyes de la herencia mendeliana, se rige por una ley
I

(Ley de Hardy-Weinberg) que se basa en la distribucin de los gametos con su


OH

dotacin gentica en las poblaciones.


PR

Ley de Hardy- Weinberg

En 1908 un matemtico ingls, nombrado George Hardy y el mdico alemn


Wilhm Weinberg formulan de forma independiente la teora que en la actualidad
se conoce como Ley de Hardy-Weinberg. Esta ley enuncia que los genotipos
generados por dos o ms alelos de un locus se distribuyen en las poblaciones en
correspondencia con sus frecuencias y que, tanto las frecuencias de los alelos
como las frecuencias de los genotipos generados por estos, se mantienen cons-
tantes de generacin en generacin. Esta constancia en dichas frecuencias, de
generacin en generacin, se conoce como Ley de Hardy-Weinberg.
El equilibrio enunciado en la Ley de Hardy-Weinberg se mantiene siempre
que las poblaciones sean lo suficientemente grandes, en las cuales los matrimo-
Los genes en las poblaciones humanas 273
nios sean al azar, la tasa de mutaciones sea constante y no existan factores de
seleccin ni de migracin.
Esta ley tiene dos componentes:
El primero postula que la frecuencia de los tres genotipos generados por las
combinaciones gamticas de dos alelos A y a de un locus, se comportar en
trminos del binomio: (p + q)2 = p2 + 2pq + q2
Asumiendo que p = A y que q = a y p + q = 1
Entonces (A + a)2 = AA + 2Aa + aa
El segundo componente plantea que si las frecuencias de los alelos no cam-
bian de generacin en generacin tampoco cambiarn las frecuencias de sus
genotipos en la poblacin.
El primero de estos dos componentes se expresa de forma matemtica en la
tabla 15.1.

N
Tabla 15.1.Fundamento matemtico del equilibrio postulado en la Ley de Hardy-Weinberg

CI
Genotipos de Genotipos de la descendencia Genotipos posibles

UC
parejas en trminos de p y q de la descendencia
AA Aa aa

AA x AA
OD
p 2 x p2 = p 4 (p 4 )
PR
AA x Aa p2 x 2pq = 2 p3q ( 2 p3q) ( 2 p3q)
Aa x AA 2pq x p2 = 2 p3q ( 2 p3q) ( 2 p3q)
RE

AA x aa p2 x q2 = p2q2 (p2q2 )
aa x AA q2 xp2 = p2q2 (p2q2 )
SU

Aa x Aa 2pq x 2pq = 4p2p2 (4p2q2) (4p2q2) (4p2p2)


Aa x aa 2pq x q2 = 2pq3 (2pq3) (2pq3)
DA

Aa x Aa q2 x 2pq = 2pq3 (2pq3) (2pq3)


Aa x aa q2 x p2 = q4 (q4)
BI
I
OH

La suma de los posibles genotipos, en trminos algebraicos por columnas de


las descendencias, correspondientes a los genotipos AA, Aa y aa de la tabla
PR

15.1 ser la siguiente:


AA = p4 + p3q + p3q + p2q2 = p2 (p2 + 2pq + q2 ) = p2 (p + q )2, pero como p
+ q = 1 la columna de genotipos AA = p2
Aa = p3q + p3q + p2q2 + p2q2 + 2p2q2 + pq3 + pq3 = 2pq (p2 + 2pq + q2) = 2pq
(p + q )2 pero como p + q = 1 la columna de genotipos Aa = 2pq
aa = + p2q2 + pq3 + pq3 + q4 = q2 (p2 + 2pq + q2 ) = q2 (p + q )2 pero como p
+ q = 1 la columna de genotipos aa = q2

Esto demuestra que cualquiera que sea la combinacin genotpica de la pare-


ja, la segregacin de dos alelos de un locus, en los gametos ser igual a:

(p + q)2 = p2 + 2pq + q2, siempre que se cumplan los requisitos ya mencionados.


274 Introduccin a la Gentica Mdica

Para conocer las frecuencias de los alelos de un locus especfico, as como


las frecuencias de los genotipos que estos generan, es necesario realizar estu-
dios que permitan llegar a este anlisis y que se fundamentan en la interpreta-
cin matemtica de la Ley de Hardy-Weinberg. El primer paso es conocer la
frecuencia con la que estos alelos se expresan, por medio de la identificacin
del fenotipo en cuestin, el tipo de herencia y la relacin de expresin que existe
entre estos alelos.

Frecuencia fenotpica

Determina el nmero de individuos que expresan una cualidad del fenotipo


en estudio, en relacin con el total de individuos de la poblacin problema recibe
el nombre de frecuencia fenotpica. Este dato se expresa, generalmente, en

N
porcentaje.

CI
Frecuencia genotpica

UC
OD
A su vez, las veces en que aparecen cada uno de los genotipos generados por
las combinaciones, dos a dos de los alelos involucrados en el locus que se
PR
estudia relacionado con el total de genotipos (que ser igual al total de individuos
RE

contemplados en el estudio) recibe la denominacin de frecuencia genotpica.


Los resultados de este anlisis se dan tanto en porcentaje como en proporcin.
SU

Frecuencia gnica
DA
BI

El trmino frecuencia gnica se refiere al nmero de veces que un alelo se


I

encuentra presente en relacin con el nmero total de alelos de la poblacin en


OH

estudio, para ese locus. Los resultados del anlisis de la frecuencia gnica, a
diferencia de las anteriores, siempre se expresa en proporciones y la suma de la
PR

frecuencia de cada alelo estudiado para ese locus ser igual a uno.
La gentica poblacional tiene varios enfoques para su estudio, uno de estos
es de inters mdico cuando, al menos, uno de los alelos corresponde con una
mutacin que produce una enfermedad gentica y el conocimiento, tanto de la
incidencia fenotpica del defecto, como de la frecuencia gnica del alelo mutado,
as como de la frecuencia genotpica 2pq, proporciona datos de gran importan-
cia que tanto las autoridades del sistema de Salud, como los mdicos de asisten-
cia y en especial los genetistas clnicos, deben tener presentes para la atencin
preventiva del defecto.
Otro de los enfoques es de inters gentico, antropolgico, biolgico y tam-
bin mdico legal. Este tipo de enfoque est relacionado con los datos que
Los genes en las poblaciones humanas 275
proporcionan las frecuencias de alelos producidos por mutaciones, los cuales
no generan en su expresin consecuencias mdicas, sino, ms bien, variaciones
genticas representadas por las cualidades alternativas de los caracteres en
estudio y que contribuyen a la diferenciacin fenotpica de los individuos. Los
marcadores genticos estudiados en el captulo 14 son ejemplos de estos.

Frecuencias fenotpicas, genotpicas y gnicas entre


dos alelos con dominancia completa

Para los clculos de las frecuencias fenotpicas, genotpicas y gnicas entre


alelos con relacin de dominancia completa se ha seleccionado como marcador
gentico, al sistema de grupo sanguneo Rh. Para su mejor comprensin se
analiza el protocolo de estudio siguiente

N
Poblacin hipottica: Ciego de vila.

CI
Muestra: 600 individuos de la poblacin de la ciudad.
Marcador gentico: Sistema de grupos sanguneos Rh.

UC
Objetivos: Calcular las frecuencias fenotpicas, genotpicas y gnicas del sis-
tema de grupos sanguneos Rh.
OD
Mtodo de estudio: Pesquisa de los fenotipos Rh positivo o negativo, utilizan-
PR
do anti Rh en sangre fresca obtenida de los 600 individuos.
RE

La hemoclasificacin del sistema Rh permite identificar dos subgrupos


poblacionales bien definidos: los individuos que presentan el antgeno Rh y que
SU

se clasifican como Rh +, y aquellos que no presentan el antgeno y que se


clasifican como Rh-.
DA
BI

Clculo de la frecuencia fenotpica


I
OH

Frecuencia fenotpica para los individuos Rh + de este estudio:


450 / 600 x 100 = 75,0 %
PR

Frecuencia fenotpica para los individuos Rh - de este estudio:


150 / 600 x 100 = 25,0 %

Clculo de la frecuencia genotpica

Los fenotipos homocigticos dominantes DD y los genotipos heterocigticos


Dd estn todos contemplados entre los 450 individuos Rh+. Sin embargo, la
frecuencia genotpica de los homocigticos recesivos dd coincide con la fre-
cuencia fenotpica de Rh negativos (Rh-). Para conocer la frecuencia de los
genotipos DD y Dd, como hay relacin de dominancia completa entre estos
alelos, se necesita conocer las frecuencias gnicas de los alelos D y d.
276 Introduccin a la Gentica Mdica

Clculo de las frecuencias gnicas

Los alelos D y d, en la poblacin que se estudia deben combinarse segn el


binomio cuadrado perfecto (p + q)2 = p2 + 2pq + q2.
En este estudio p = D y q = d y a su vez las frecuencias de los genotipos DD
y Dd, sern equivalentes a: p2 + 2pq, segn la distribucin de los gametos D y d
en la poblacin.
Entonces q2 ser igual a la frecuencia fenotpica y genotpica de los indivi-
duos Rh-, que representan 25 %, por lo tanto la frecuencia del alelo d puede ser
determinada hallando la raz cuadrada de la frecuencia fenotpica pero utilizan-
do su valor en proporcin (0.25).

N
CI
esta ser la frecuencia gnica del alelo d, entonces si las frecuencias de p + q = 1, la

UC
frecuencia de p = 1 q ; y finalmente la frecuencia gnica del alelo D ser igual
a 0,5.
OD
Las frecuencias de los genotipos DD y Dd se pueden calcular sustituyendo
los valores de p=D= 0,5 y los de q=d = 0,5 en: p2 + 2pq siendo el valor de los
PR
homocigticos dominantes (DD) igual a (0,5) 2 = 0,25 o 25 % y los heterocigticos
RE

(Dd) igual a 2(pq) = 2 (0,5 0,5) = 0,5 o 50 %.


SU

Frecuencias fenotpicas, genotpicas y gnicas entre


dos alelos codominantes
DA
BI

Para este caso se utiliza otro grupo sanguneo. Se trata del grupo MN, del
I

locus con igual denominacin. Los antgenos presentes son tambin denomina-
OH

dos M y N, y sus correspondientes anticuerpos, anti M y anti N.


Los fenotipos que se identifican por simple hemoclasificacin, en este caso
PR

son tres:
M, MN y N.
Un ejemplo de esto aparece cuando se estudian en una poblacin de 1 419
personas:
El fenotipo MN coincide con el genotipo MN ya que ambos alelos son
codominantes, concepto que se trata en detalles en el captulo 14.
La frecuencia fenotpica y genotpica coincide cuando los alelos que se estu-
dian son codominantes (Tabla 15.2).
Los genes en las poblaciones humanas 277
Tabla 15.2. Fenotipos M, MN y N en la poblacin de 1 419 individuos

Fenotipos Genotipos No. de individuos Frecuencias fenotpicas y genotpicas

M MM 392 392 / 1419 x 100 = 27,6 %


MN MN 707 707 / 1419 x 100 = 49,8 %
N NN 320 320 / 1419 x 100 = 22,6 %

Total 1 419 100 %

Las frecuencias gnicas se muestran como sigue:


Todos los genes M = (392 x 2 + 707) / 1419 x 2 = 0,53
Todos los genes N = (320 x 2 + 707) / 1419 x 2 = 0,47
(Se tiene en cuenta que cada individuo posee dos alelos)

N
Se cumple que la frecuencia gnica de dos alelos en la poblacin es igual a 1.

CI
UC
Frecuencias fenotpicas, genotpicas y gnicas entre alelos
mltiples
OD
El mejor ejemplo para la determinacin de las frecuencias fenotpicas,
PR
genotpicas y gnicas de alelos mltiples es el sistema de grupos sanguneos
RE

ABO.
Al existir tres alelos para el locus ABO, las posibilidades de combinaciones
SU

para estos alelos en la poblacin se extienden al trinomio:


(p + q + r) 2 = p2 + 2pq + q2 + r2 + 2 pr +2qr
DA
BI

Si se determinan las frecuencias fenotpicas, genotpicas y gnicas en una


I

poblacin de 180 personas y se aplica la hemoclasificacin puede encontrarse


OH

una distribucin como aparece en la tabla 15.3.


PR

Tabla 15.3. Fenotipos y frecuencias fenotpicas para el sistema ABO

A B AB O Total

Fenotipos 74 17 7 82 180
Frecuencias fenotpicas 41,11 % 9,44 % 3,89 % 44,89 %
Genotipos AA+AO BB+BO AB OO
Frecuencias genotpicas p2 ; 2pr q2 ; 2qr 2pq r2

En este caso para obtener las frecuencias genotpicas se requiere calcular


las frecuencias gnicas de los alelos p, q y r.
El anlisis se inicia por el clculo de la frecuencia gnica de O:
278 Introduccin a la Gentica Mdica

Los individuos que tienen los grupos A y O en la poblacin estn representa-


dos por las combinaciones de los alelos p y r en el binomio.

N
CI
UC
Las frecuencias gnicas de los alelos A, B y O en la poblacin estudiada de
180 individuos sern: OD
O = r = 0, 67 A = p = 0, 25 B = q = 0, 08
PR
RE

Las frecuencias genotpicas se exponen en la tabla 15.4.


SU

Tabla 15. 4. Una vez conocida la frecuencia gnica de los alelos A, B y O es posible calcular las
frecuencias genotpicas
DA
BI

Genotipos AA AO BB BO AB OO
I

Frecuencias p2 2pr q2 2qr 2pq r2


OH

genotpicas 6,25 % 33,50 % 0,64 % 10,72 % 4,00 % 44,89 %


PR

Cmo se sabe si una poblacin mantiene sus genes para un locus especfico
en equilibrio Hardy- Weinberg?
Si se supone que mediante una investigacin previa de 20 aos, se ha cono-
cido que la frecuencia de los alelos para el sistema de grupos sanguneos M, N
fue de 0, 53 para el alelo M y de 0, 47 para el alelo N, y se desea conocer si en
esa poblacin se mantienen las frecuencias gnicas y genotpicas en equilibrio
Hardy-Weinberg (Tabla 15.5).
Si se determinan los grupos sanguneos M y N en una poblacin de 2 000
sujetos, utilizando la prueba estadstica chi-cuadrado (X2) que permita estable-
cer si existen o no diferencias significativas entre lo esperado y lo observado, se
puede conocer si realmente se mantiene el equilibrio.
Los genes en las poblaciones humanas 279
Tabla 15.5. Nmero de individuos con los tres fenotipos M, MN y N esperados, calculado a
partir de las frecuencias gnicas de los alelos M y N y el nmero de fenotipos observados al
aplicar la hemoclasificacin para los antgenos M y N

Fenotipos Nmero de individuos siendo Nmero observado segn nueva


M = p = 0,53 y N = q = 0,47 hemoclasificacin

M P2 x 2 000 = 562 567


MN 2pq x 2 000 = 996 998
N q2 x 2 000 = 442 435

Total 2 000 2 000

X2 =S [ (O - E) 2 / E ] = 0,158 (no significativo para un grado de libertad).


Entonces la poblacin se mantiene en equilibrio Hardy- Weinberg para este

N
marcador gentico.

CI
Frecuencias y genotipos de genes ligados al cromosoma X

UC
OD
El clculo en estos casos es relativamente sencillo, debido al carcter
hemicigtico del sexo masculino para mutaciones no afectadas por fenmenos
PR
de seleccin.
Basta entonces conocer la incidencia del fenotipo en varones en los que hay
RE

solamente dos alternativas que corresponden a las frecuencias gnicas de p y q.


En las mujeres, como pueden ser homocigticas dominantes o recesivas y
SU

heterocigticas, la estimacin de las frecuencias genotpicas se har como co-


rresponde a la distribucin de estos dos alelos segn (p + q)2 = p2 + 2pq + q2,
DA

sustituyendo en p y q los valores de frecuencias gnicas estimadas a partir de


BI

los fenotipos de los varones.


I

Un buen ejemplo es la frecuencia de la ceguera para el color (mutacin que


OH

se expresa como daltonismo y que individualiza muy bien el carcter en hom-


bres) en una poblacin. Si se supone que cada 1 000 hombres, 80 sean daltnicos,
PR

la frecuencia gnica de q ser igual a 80 entre mil, o sea 0,08 y la de p de 0,92.


Ya con las frecuencias gnicas se pueden estimar las frecuencias genotpicas
en las mujeres haciendo la sustitucin pertinente segn p2 + 2pq + q2.

Factores que alteran el equilibrio de Hardy-Weinberg


en una poblacin

Matrimonios no al azar

Cuando en una poblacin grande los matrimonios son al azar los alelos pue-
den combinarse por la segregacin de estos en los gametos con igual probabilidad.
280 Introduccin a la Gentica Mdica

De esta forma se permite una contribucin de sus frecuencias en la pobla-


cin de forma aleatoria. Sin embargo, aun cuando las poblaciones sean suficien-
temente grandes, en ocasiones existen fenmenos sociales de estratificacin,
segn grupos raciales, que interfieren con la seleccin azarosa de las parejas,
por ejemplo, la divisin entre negros y blancos.
Por otra parte, en ocasiones la seleccin clasificada de las parejas por su
inteligencia, forma y color del cabello, la estatura, algunas caractersticas
conductuales, habilidades para la msica o para el deporte o buscar pareja con
caractersticas de defectos similares como ceguera, sordera o bajas tallas, tam-
bin interfieren en que los matrimonios no sean totalmente al azar y la distribu-
cin de los alelos en la poblacin tampoco sea aleatoria, lo cual no contribuye a
mantener el equilibrio de Hardy-Weinberg en una poblacin.
La consanguinidad es otro fenmeno que interfiere con la formacin de pa-

N
rejas al azar, aun cuando se pueda suponer que toda pareja tiene al menos un
ancestro comn. La probabilidad de que un nio sea homocigtico para una

CI
enfermedad gentica autosmica recesiva rara, es menor cuanto ms alejada

UC
sea la relacin de parentesco entre sus padres.

Consanguinidad OD
PR
Es un fenmeno presente en todas las poblaciones humanas. Las leyes de
RE

cada pas prohben los matrimonios entre familiares de primer y segundo grados
y algunas religiones incluyen la prohibicin de matrimonios entre familiares de
SU

tercer grado.
Existen poblaciones que mantienen esta costumbre por razones socioculturales
DA

y religiosas, aun en pleno siglo XXI. Un ejemplo se describe ms adelante.


BI

Hay una tendencia a la disminucin de estos tipos de matrimonios, sobre todo


I

en pases desarrollados y en vas de desarrollo. Los matrimonios consanguneos


OH

ms frecuentes se producen entre primos hermanos, dobles primos hermanos,


medios primos hermanos.
PR

La probabilidad de compartir genes similares, de expresin deletrea, es ma-


yor en la medida en que la relacin entre consanguneos sea ms cercana o
sean los matrimonios consanguneos favorecen la homocigocidad de alelos de
un locus, aun de aquellos poco comunes. Cuando la frecuencia de matrimo-
nios consanguneos caracteriza a una poblacin, desde el enfoque poblacional
se reconoce a la poblacin como aislamiento gentico. El trmino endogamia
se utiliza para referirse al apareamiento de individuos que presentan entre s
una estrecha relacin gentica. Tambin se utiliza el trmino personas
endogmicas para referirse a la progenie de matrimonios consanguneos.
Los judos asquenazies que viven en los EE.UU. forman una poblacin con
caractersticas de aislamiento gentico y padecen con frecuencia de una rara
enfermedad autosmica recesiva que es la enfermedad Tay-Sachs. La mayora
Los genes en las poblaciones humanas 281
de las poblaciones no asquenazies reportan la prevalencia de esta enfermedad
en el orden de 1 en 360 000 personas y la frecuencia genotpica de portadores
de 1 en 300 (2pq= 0,3 %), mientras que entre los pobladores de los judos
asquenazes la frecuencia de la enfermedad es de 1 en 3 600 y segn la distri-
bucin de genotipos p2 + 2pq + q2 la frecuencia gnica de q = 0,02 y si p+q=1
entonces p= 0,98, por lo que la frecuencia de portadores 2pq ser de 3,9 %
en la poblacin de los judos asquenazes.
Otro enfoque de anlisis de esta situacin poblacional: la probabilidad de que
cada miembro de una pareja de judos asquenazes sean portadores de esta
terrible enfermedad gentica, ser de 3,9 %.
La probabilidad de que siendo ambos miembros de la pareja portadores
tengan hijos afectados, ser tratado con mayor profundidad en el captulo 18.
El ejemplo expuesto explica por qu la frecuencia con la que se detecta

N
consanguinidad en un paciente con sndrome gentico raro, indica que la muta-
cin en una poblacin entre individuos no emparentados sea realmente rara.

CI
Muchas personas homocigticas para mutaciones recesivas raras han here-

UC
dado estas mutaciones de sus padres quienes tienen un ancestro comn, sin
embargo, solo cuando es muy alta la consanguinidad en una poblacin, se afecta
el equilibrio gentico. OD
En la investigacin clnico-gentica finalizada en Cuba en 2003, se observ
PR
que la frecuencia de consanguinidad entre los padres de personas con retraso
RE

mental fue ms alta en las regiones geogrficas extremas de la nacin, donde


todava existen grupos poblacionales ms aislados, en los que hay muy pocas
SU

variaciones de apellidos.
DA

Mutaciones
BI
I

La presencia de nuevas mutaciones puede afectar el equilibrio de Hardy-


OH

Weinberg cuando la tasa de estas aumenta por razones especficas.


La tasa de mutaciones de un locus se expresa como el nmero de nuevas
PR

mutaciones por locus por generacin. Una va directa de estimar la tasa de


mutaciones en una poblacin es por medio de la deteccin de la prevalencia al
nacimiento de enfermedades genticas autosmicas dominantes o ligadas al
cromosoma X, ya que en estos casos el efecto de la mutacin se detecta
directamente por el fenotipo. Un ejemplo de estimacin de la tasa de mutacin
con efecto dominante ser la de observar defectos como la acondroplasia en
parejas que no presentan el fenotipo de esta forma de osteocondrodisplasia.
En el equilibrio gentico de las poblaciones, estas mutaciones tienen diferen-
tes posibilidades de repercusin, estas son:
Que se pierdan inmediatamente por ser letales para las personas que las
reciben, bien porque sean incompatibles con la vida o porque nunca puedan
transmitirse a la siguiente generacin.
282 Introduccin a la Gentica Mdica

Que sobrevivan con pocas probabilidades de mantenerse de generacin en


generacin.
Que no solo sobrevivan, sino que se transmitan de generacin en generacin,
pudiendo incluso convertirse en un alelo predominante.

Todo depende de la eficacia biolgica (fitness) trmino utilizado para descri-


bir la probabilidad de un individuo para transmitir los propios genes a la siguiente
generacin, referido tambin como la aptitud o competencia biolgica de repro-
ducirse de la persona afectada en trminos de sobrevivir, de posibilidades de
encontrar pareja y tener relaciones y de las posibilidades de fertilidad.
Factores como morir antes de la pubertad disminuyen la eficacia biolgica o
aptitud reproductiva para un genotipo especfico; a la inversa un tratamiento
mdico puede incrementar la aptitud reproductiva de un genotipo particular. De

N
igual forma el diagnstico prenatal y la terminacin selectiva de un embarazo
disminuye la aptitud reproductiva de un genotipo particular.

CI
UC
Seleccin contra mutaciones dominantes

OD
La seleccin de un genotipo especfico distorsiona el equilibrio de Hardy-
Weinberg.
PR
En el caso de mutaciones autosmicas dominantes, la seleccin acta contra
RE

los genotipos en los cuales la mutacin es severa eliminndolas en una simple


generacin. En estos casos la presencia de la enfermedad es siempre el resul-
SU

tado de una nueva mutacin.


Hay muchos ejemplos de enfermedades genticas dominantes con estas ca-
DA

ractersticas en las que la severidad del defecto produce la muerte antes de la


BI

etapa reproductiva o incluso si llegan a esta etapa de la vida estos individuos no


I

son aptos para la reproduccin.


OH

Por el contrario, si una nueva mutacin no invalida la posibilidad de reproduc-


cin, puede ser que la aptitud reproductiva sea reducida o igual que la del alelo
PR

no mutado.
El equilibrio de la frecuencia de genes especficos es el resultado del balance
entre dos fuerzas, la seleccin que elimina las mutaciones de la bolsa de genes
o pool de genes de la poblacin y la produccin de nuevas mutaciones que las
aade de nuevo a la bolsa.
La aptitud reproductiva mejorada de forma sorprendente por tratamientos a
personas afectadas, puede dar lugar a un incremento de la contribucin de ese
genotipo y producirse un cambio en el equilibrio gentico de la poblacin. De
igual forma, si las personas afectadas disminuyeran su aptitud reproductiva al
renunciar a su descendencia, la frecuencia del alelo mutado podra caer a casi
cero y mantenerse solo en la bolsa de genes de cada generacin, a expensas de
la produccin de nuevas mutaciones.
Los genes en las poblaciones humanas 283
Seleccin contra mutaciones recesivas

Para estos tipos de mutaciones, las fuerzas selectivas son menos efectivas
ya que solo una pequea proporcin de genes estn presentes en el homocigtico
recesivo que son los que se exponen a fuerzas selectivas; pero, adems, su
repercusin sobre el equilibrio, aun mejorando sus posibilidades de aptitud
reproductiva, puede ser muy lenta y se necesitaran muchas generaciones para
incrementar su frecuencia gnica.

Seleccin contra mutaciones recesivas ligadas al cromosoma X

En estos casos el masculino hemicigtico resulta ser el afectado, mientras


que la mujer suele tener un genotipo heterocigtico sin repercusin fenotpica o

N
clnicamente asintomtica, como regla.
La aptitud reproductiva depende de la gravedad de la afeccin. Si la muta-

CI
cin es muy severa, la baja eficacia biolgica en el varn no le permite reprodu-

UC
cirse. Tales enfermedades se conocen como letales genticas ligadas al X, y la
contribucin de la mutacin se produce por la segregacin de la mutacin en los
OD
gametos de la mujer portadora y por la tasa de nuevas mutaciones. Sin embargo
cuando la mutacin no afecta la eficacia biolgica y la aptitud reproductiva del
PR
varn, la distribucin de genotipos se comporta con una relacin de varones
afectados a mujeres portadoras de 1:2.
RE

La posibilidad de mujeres homocigticas recesivas de mutaciones severas, o


de heterocigticas que padecen la enfermedad por defectos de lionizacin (la
SU

inactivacin no azarosa de un cromosoma X en la mujer) contribuye poco con


su baja eficacia biolgica a la inestabilidad del equilibrio gentico. Sin embargo,
DA

enfermedades como la hemofilia A, cuyo tratamiento mejora considerablemen-


BI

te la aptitud reproductiva del varn afectado, se puede esperar que eleve la


I

frecuencia del gen mutado y se establezca un nuevo equilibrio gentico para


OH

esta mutacin.
PR

Ventajas selectivas de heterocigticos


Ya se ha analizado la frecuencia de raros mutantes como un balance entre la
prdida por seleccin y la ganancia por nuevas mutaciones. Se analizar ahora
el caso de heterocigticos para algunas enfermedades que tienen una ventaja
selectiva en comparacin con ambos genotipos homocigticos, el dominante y
el recesivo.
Estos tipos de ventajas selectivas para un genotipo heterocigtico cuyo
homocigtico recesivo produce enfermedades genticas muy severas, pueden
incrementar la frecuencia de la mutacin especfica en una poblacin. Un ejem-
plo de esto es la ventaja selectiva del heterocigtico para la anemia falciforme o
sicklemia sickle cell anemia para la malaria.
284 Introduccin a la Gentica Mdica

En regiones del oeste de frica existe una alta frecuencia de esta anormali-
dad de la hemoglobina, donde los heterocigticos tienen mayor eficacia biol-
gica que los homocigticos. Los heterocigticos son resistentes a la malaria
producida por el protozoo Plasmodium vivax, que a su vez es transmitido por el
mosquito Anopheles. Este protozoo pasa parte de su ciclo de vida alojado en el
eritrocito de los vertebrados, sin embargo, los eritrocitos de los heterocigticos
para la hemoglobina S resultan inhspitos para este protozoo e impiden que
culmine su ciclo de vida exitoso. Las personas parasitadas que tienen esta con-
dicin gentica resisten mejor la malaria que los homocigticos para el alelo A
(AA) o que los homocigticos para el alelo S (SS). Por este motivo a lo largo de
generaciones los individuos heterocigticos AS han incrementado su frecuencia
en estas regiones. Este es el resultado de una desviacin explicable por fuerzas
de seleccin sobre un genotipo en particular.
Cuando las fuerzas selectivas operan en ambas direcciones manteniendo o

N
eliminando a un alelo mutado, la situacin se describe como un polimorfismo

CI
balanceado.
Otro fenmeno que puede repercutir en afectaciones del equilibrio gentico

UC
en las poblaciones es el de las migraciones.En la historia de las migraciones se
OD
produce un fenmeno denominado deriva gentica. Como ya se ha analizado
cuando ocurre una mutacin, su presencia inicial se debe a una simple copia
PR
entre todos los alelos de ese locus en la poblacin en estudio. La probabilidad
de que esta mutacin eleve su frecuencia por generaciones depende de su
RE

eficacia biolgica y aptitud reproductiva y de las fuerzas de seleccin natural


que operan sobre esta. Si un individuo que presenta esta mutacin migra hacia
SU

una regin de una pequea poblacin, la frecuencia de esa mutacin en esa


DA

regin, al paso de varias generaciones, puede ser mayor que la existente en el


pas de origen, fenmeno al que se le denomina deriva gentica, ya que, mien-
BI

tras la poblacin se mantenga pequea, puede haber una considerable fluctua-


I

cin en la frecuencia gnica. La deriva gentica tambin puede ser originada


OH

por nuevas mutaciones dentro de la misma poblacin.


Si ocurre que uno de los fundadores originales de un nuevo grupo fuera por-
PR

tador de un alelo relativamente raro en la regin poblacional de origen, como


producto de una nueva mutacin con buena eficacia biolgica y este queda fijo
en el nuevo grupo y a partir de su aporte de gametos con la mutacin a las
siguientes generaciones se detecta una alta frecuencia gnica relativa de esa
mutacin, se est en presencia de lo que se conoce como efecto fundador. En
la literatura gentica hay mltiples ejemplos de este fenmeno. En Cuba la
ataxia espinocerebelosa tipo 2 (SCA 2) autosmica dominante, la cual tiene una
alta frecuencia en la provincia de Holgun, es el resultado de un efecto fundador
debido al asentamiento de un espaol que portaba esta enfermedad en esa
regin de Cuba.
Otro fenmeno dentro de las migraciones es el denominado flujo gentico,
que a diferencia de la deriva gentica involucra a un grupo poblacional que
Los genes en las poblaciones humanas 285
migra hacia otra poblacin con su propia frecuencia gnica incorporndola gra-
dualmente a la bolsa de genes de la poblacin donde estos se instalan. Las
frecuencias de los alelos del sistema de grupos sanguneos ABO estudiados en
numerosas poblaciones presentan evidencias de este fenmeno.

Tabla 15.6. Efecto del flujo gentico para los alelos A, B y O en la poblacin cubana. La
clasificacin fenotpica de negro y blanco se realiz por caractersticas del pelo, nariz, labios y el
color de la piel. Los cambios de las frecuencias gnicas de los alelos A, B y O en los mestizos son
evidencia del flujo gentico

Frecuencias fenotpicas %

Blancos Negros Mestizos Todos


Grupos N % N % N % N %

N
A 520 41,3 78 28,2 175 41,1 773 36,68

CI
B 126 10,0 48 17,3 62 10,9 236 11,20
O 578 45,8 141 50,9 314 55,2 1 033 49,03

UC
AB 37 2,9 10 3,6 18 3,2 65 3,09
1 261 100 277 100 569 100 2 107 100

Frecuencias gnicas p + q + r = 1 OD
PR
Genes Blancos Negros Mestizos Poblacin
RE

A 0,254 0,175 0,184 0,224


B 0,070 0,113 0,070 0,074
SU

O 0,676 0,712 0,746 0,700


DA

1,000 1,000 1,000 1,000


BI

Datos tomados de Bencomo Hernndez, A. y colaboradores en Rev Cubana Hematol. Inmunol.


I

Hemoter. 1997;13 (2):122-31. Las frecuencias fenotpicas y genotpicas fueron adaptadas para el
OH

alelo A segn los propsitos del texto.


PR

La tabla 15. 6 expone las frecuencias fenotpicas del sistema ABO en donan-
tes cubanos clasificados atendiendo al color de la piel en blancos, negros y
mestizos y en la poblacin general como ejemplo de la contribucin del flujo
gentico en la poblacin para este marcador y es un ejemplo de transferencia
de genes entre grupos raciales.
Otro ejemplo de transferencia de genes lo constituye en la historia de Cuba la
trata de esclavos por los espaoles desde la regiones africanas endmicas de
malaria y los propios asentamientos de los espaoles en el pas, que han origina-
do la propia bolsa gentica en la que por ejemplo la frecuencia genotpica de
heterocigticos AS para la enfermedad por clulas falciformes o sicklemia,
alcanza en la poblacin general valores de 3,5 % y de 6, 4 y 5,3 % en la
286 Introduccin a la Gentica Mdica

poblacin de las provincias de Santiago de Cuba y Guantnamo en las cuales la


poblacin es, en su mayora, negra y mestiza mientras que en las provincias
centrales con una poblacin en la que predominan personas de piel blanca, la
frecuencia de portadores se encuentra en valores de 1,3 y 2,0 por 100 habitantes.

Resumen
El propsito de este captulo ha sido identificar la importancia para la gentica
mdica, del estudio de los genes en las poblaciones humanas, no solo para el
conocimiento del origen de la mezcla racial sino para tomar medidas preventi-
vas especficas y comprender el origen y las frecuencias genotpicas y gnicas
de mutaciones raras una vez que se hayan realizado estudios epidemiolgicos
de sus frecuencias fenotpicas.

N
Conocer las caractersticas del equilibrio gentico de una poblacin, adems,

CI
ofrece la posibilidad de analizar las causas de sus desviaciones y de elaborar
pronsticos de sus cambios en la medida en que se introduzcan nuevos trata-

UC
mientos que mejoren la aptitud reproductiva de las personas afectadas o que
OD
por medio del diagnstico prenatal y el aborto selectivo se disminuya la eficacia
biolgica y aptitud reproductiva de un genotipo especfico. La gentica poblacional
PR
humana, adems, pone en manos de genetistas dedicados a la epidemiologa
instrumentos que permitan caracterizar las frecuencias gnicas y de esta forma
RE

identificar polimorfismos de marcadores genticos y analizar sus relaciones como


posibles genes susceptibles o incluso candidatos para enfermedades comunes o
SU

caractersticas conductuales o funcionales complejas como se expresan en el


DA

captulo 16.
BI
I

Bibliografa
OH

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PR

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Vogel, F., V. Motulsky (1979): Human Genetics. Problems and Approaches. New York: Springer
-Verlag.
Herencia multifactorial 287

Captulo 16
HERENCIA MULTIFACTORIAL

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Existen en el genoma humano grupos de genes que participan simultnea-
OD
mente en la expresin de caracteres cuantitativos y que, por lo tanto, son ms
PR
susceptibles a modificaciones determinadas por factores ambientales. Expre-
san rasgos continuos o cuantitativos, pero sus anormalidades se presentan de
RE

forma abrupta en defectos congnitos aislados o como enfermedades comple-


jas sin aparentes defectos clnicos neonatales.
SU

La herencia multifactorial se considera an poco comprendida. Como su


nombre indica, se encuentran includos tanto factores genticos como ambien-
DA

tales; es un reto inmediato de las investigaciones que enfoca el Proyecto Genoma


BI

Humano, ya que considera un nmero de enfermedades del adulto que causan


I

baja calidad de vida o mortalidad precoz.


OH

Con el conocimiento de la funcin de los genes que tienen participacin en


estas enfermedades genticas, o al menos la posibilidad de encontrar genes
PR

candidatos de susceptibilidad gentica por encontrarse asociados a estas, se


investiga la posibilidad de su prevencin, tanto preconcepcional como posnatal y
hacia la comprensin e indagacin de su patognesis y alternativas en
farmacoterapias ms individuales y efectivas.
En este captulo se aborda el anlisis de la interaccin de poligenes, cuyo
efecto aditivo en la expresin de un carcter, explica la aparicin de rasgos
cuantitativos y al propio tiempo, la participacin que el ambiente tiene en la
modificacin fenotpica de la expresin de estos tipos de rasgos.
288 Introduccin a la Gentica Mdica

Frecuencias de genotipos y fenotipos para rasgos


discontinuos
Para comprender la herencia multifactorial es necesario analizar la distribu-
cin de genotipos de acuerdo con el nmero de loci involucrados y la expresin
de sus correspondientes fenotipos.
Cuando se analiza un carcter monognico determinado por un solo locus
con sus respectivos alelos A y a, de los tres genotipos que se presentan los ms
frecuentes son los heterocigticos. Sin embargo, el fenotipo determinado por
rasgos discontinuos solo distingue dos posibilidades de expresin fenotpica:
dominante o recesivo como se observa en la figura 16.1.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 16.1. Distribucin en la poblacin de genotipos y fenotipos para dos alelos A y a,


con relacin de dominancia completa.

Por otra parte, al analizar cmo se comportan en la poblacin las 16 combi-


naciones entre gametos que segregan dos caracteres independientes, estos se
agrupan, de modo que las combinaciones de doble heterocigoto son los genotipos
ms frecuentes y el resto se organizan a ambos lados de la frecuencia mayor y
Herencia multifactorial 289
se logra una distribucin estadstica normal; no sucede as con la distribucin de
fenotipos que, como se observa en el grfico de la figura 16.2, las barras son
mayores para los fenotipos dominantes.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 16.2. 1) Cruzamiento entre dos heterocigticos. 2) Distribucin en la poblacin de


los fenotipos de dos loci independientes y con relacin de dominancia completa entre
sus alelos. 3) Distribucin de los 16 genotipos.
290 Introduccin a la Gentica Mdica

Frecuencias de genotipos y fenotipos para rasgos


continuos

Pero si para una planta el carcter talla est determinado por tres loci, cada
uno con dos alelos que presentan interaccin aditiva entre estos; por ejemplo, el
locus X (alelos X, x), locus Y (alelos Y, y), locus Z (alelos Z, z) de modo
tal que el genotipo xx yy zz tiene una talla base de 60 pulgadas; mientras que
cada alelo en mayscula adiciona a esta talla base, 3 pulgadas y proporciona al
genotipo XX YY ZZ una talla de 78 pulgadas.
Si como aparece en la figura 16.3, se produce un cruce entre dos lneas puras
para estos genotipos, se tiene que la F1 est formada genotpicamente por un
trihbrido, pero fenotpicamente por un fenotipo que resulta de la interaccin
entre los tres loci, para expresar una talla intermedia de 69 pulgadas, entre sus

N
dos parentales que expresan tallas de 78 y 60 pulgadas respectivamente.

CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA

Fig. 16.3. Cruzamiento entre lneas puras para tres loci con efecto aditivo en la talla de
la planta.
BI
I
OH

Si se analiza entonces la descendencia de un cruce entre dos F1, y como se


observa en la tabla de la figura 16.4, la cantidad de genotipos proporciona una
PR

distribucin estadstica normal en la descendencia obtenida, donde la talla ms


frecuente se corresponde con 69 pulgadas. Cualquiera de estos genotipos tiene
gran predisposicin para cambiar su fenotipo con la accin de factores ambien-
tales como el acceso al agua y nutrientes orgnicos y minerales de diferentes
tipos y que pueden incrementar o disminuir la talla de cualquiera de los genotipos,
sin embargo algunos de estos podran ser ms vulnerables a estos factores.
En este ejemplo, el carcter talla determinado por la accin aditiva de los loci
X, Y y Z es el resultado de la accin de los alelos correspondientes a estos loci
y que forman poligenes cuya segregacin determina una herencia polignica. A
este tipo de herencia tambin se le conoce como herencia cuantitativa porque
estudia la expresin de rasgos que se miden y que tienen una expresin continua.
Herencia multifactorial 291

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU
DA
BI
I
OH
PR

Fig. 16.4. Distribucin de fenotipos y genotipos para tres loci con dos alelos cada uno,
con efecto aditivo en su expresin.

Herencia multifactorial
Las mutaciones que ocurren en alguno de los genes involucrados en un rasgo
especfico, dan lugar a genotipos ms predispuestos a modificaciones condicio-
nadas por situaciones ambientales. De ah que tambin se conoce este fenme-
no como herencia multifactorial.
292 Introduccin a la Gentica Mdica

Entre los caracteres genticos con herencia multifactorial se encuentran:


Rasgos cuantitativos como el coeficiente de inteligencia, la talla, la circunfe-
rencia ceflica, el conteo de crestas digitales de los dermatoglifos, el ndice
de refraccin de los medios transparentes del ojo, los valores de tensin arterial,
el peso, entre los ms conocidos. En el histograma de la figura 16.5 las barras
representan el nmero de individuos con un coeficiente de inteligencia deter-
minado y en su interior aparecen los genotipos que expresan coeficiente de
inteligencia especfico.
Defectos congnitos con un umbral relacionado con un genotipo subyacente.
A la jerarqua de los fenmenos genticos que tienen lugar en el desarrollo
embrionario (tema que se trata con ms detalles en el captulo 17) se aade
como efecto aditivo que repercute en la predisposicin gentica, el efecto
ambiental desfavorable en un momento diana del desarrollo que precipita el

N
nacimiento de un nio con alguna de las malformaciones genticas de este
tipo de herencia como: defectos de cierre del tubo neural, labio leporino y

CI
paladar hendido, defectos congnitos del corazn, por citar algunos, etc.

UC
Estos tipos de defectos, a diferencia de los caracteres cuantitativos que ofre-
OD
cen continuidad, son discontinuos ya que estn presentes o ausentes, sin embar-
go hay en estos una gradacin cualitativa de severidad del defecto con este tipo
PR
de herencia, que se corresponde con la predisposicin gentica del genotipo
RE

para los genes del desarrollo involucrados en el proceso de cierre de la lnea


media facial por ejemplo el labio leporino que aparece de forma unilateral o
SU

bilateral, con o sin paladar hendido tambin unilateral o bilateral. Se ha mostrado


que el labio leporino unilateral es mucho menos severo que cuando se presenta
DA

bilateral con paladar hendido o solo bilateral.


Un tercer grupo de defectos con este tipo de herencia se encuentra formado
BI
I

por las denominadas enfermedades comunes del adulto como son: hipertensin
OH

arterial, enfermedades coronarias, diabetes mellitus, asma bronquial, depre-


siones o enfermedades bipolares, esquizofrenia, cncer.
PR

El fenotipo expresado por la accin aditiva de los genes involucrados en la


herencia multifactorial, presenta una distribucin normal. Los extremos de esta
curva representan a la poblacin cuyos genotipos son ms resistentes o ms
predispuestos a la accin desfavorable del ambiente.

Heredabilidad

Con el objetivo de separar los roles relativos a los genes y al ambiente, se ha


desarrollado el concepto de heredabilidad y al propio tiempo se han diseado
mtodos matemticos para su estimacin.
Herencia multifactorial 293

N
Fig. 16.5. Distribucin del coeficiente de inteligencia y de los genotipos posibles. Ob-
serve que en los extremos de la curva estn los muy inteligentes con coeficientes de 120

CI
y 130 y los menos inteligentes con coeficientes entre 80 y 70.

UC
El trmino heredabilidad se refiere en sentido general, a conocer si el papel
OD
gentico en determinado fenotipo es mayor o menor y se expresa como h2. A
diferencia del anlisis de segregacin de uno de sus alelos, el cual se puede
PR
realizar a partir del fenotipo expresado por una simple mutacin en una familia,
RE

en el caso de la herencia multifactorial el componente gentico se investiga por


la expresin del defecto en poblaciones especficas y cada poblacin tendr su
SU

propia heredabilidad. Por esta razn se trabaja con desviacin estndar y


varianzas.
DA

El fenotipo (F) de un rasgo multifactorial est dado por la suma de tres valo-
BI

res:
I

1. Contribucin de un factor gentico aditivo representado por la letra g. Este


OH

valor se caracteriza por una varianza G.


2. Contribucin del ambiente dentro de la familia en estudio representado por
PR

la letra b. Su varianza es B.
3. Contribucin azarosa de los factores ambientales representado por la letra
e. Su varianza es E.

Entonces:
F= G+B+E
Y la heredabilidad:
h2= G / G+B+E = G / V

O sea, la relacin entre la varianza gentica (G) y la varianza (V) represen-


tada por la varianza fenotpica (F) que incluye (F= G + B + E) la varianza de
factores genticos aditivos (G), fenotpica (F) que se encuentra sometida a la
294 Introduccin a la Gentica Mdica

accin gentica y ambiental familar (B) y contribucin azarosa de factores


ambientales (E).
Otro mtodo para el clculo de la heredabilidad es el que se realiza al utilizar
parejas gemelares, comparando los datos relacionados con la concordancia que
existe entre los gemelos en relacin con un rasgo o defecto especfico y que se
estima que se deba a variaciones en poligenes.
Los gemelos monocigticos (Mz) comparten 100 % de sus genes por tanto
se espera que ambos gemelos presenten el rasgo o enfermedad, mientras en el
caso de los dicigticos (Dz) desde el punto de vista gentico se comportan
como dos hermanos que comparten la mitad de sus genes.
El clculo de la heredabilidad en gemelos permite conocer los efectos
genticos, ambientales intrauterinos y ambientales externos que ocurren por los
fenmenos nutricionales o conductuales de una familia o comunidad donde vi-

N
van.

CI
Tambin se tiene en cuenta la posibilidad de determinar el efecto cuantitativo
o cualitativo del rasgo que se estudia.

UC
El clculo, entonces, se realiza teniendo en cuenta la tasa de concordancia
entre gemelos Mz y gemelos Dz de la condicin que se estudia (porciento de
OD
gemelos concondartes para el defecto entre el total de parejas de gemelares
PR
incluidas en el estudio, por presentar uno de los dos afectado). As, h2 ser igual
a 2 x (CMz CDz).
RE

Si el rasgo est determinado por el ambiente, esta razn se aproxima a cero,


por otro lado, si la determinacin tiene como causa principal la gentica, la
SU

varianza de concordancia debe ser muy alta en Mz y la razn se aproxima a 1 o


DA

pudiera ser superior a 1.


Por ejemplo, si la concordancia para la enfermedad bipolar en gemelos Mz
BI

fuera de 0,79 y la concordancia en gemelos Dz fue de 0,24, la heredabilidad


I

segn 2 (CMz CDz) sera igual a 1.1, valor elevado que indica una causa gentica
OH

mayor.
PR

Otro ejemplo sera el sarampin. Se supone que la tasa en gemelos Mz (CMz)


fuera de 0,95 y CDz de 0,87, entonces, la heredabilidad ser solo de 0,16. Esto
indica que hay un componente ambiental mayor que el gentico para esta enfer-
medad infectocontagiosa.
En la diabetes mellitus tipo II, si la tasa de concondarcia fuera para CMz =
0,40 y para CDz de 0,04 entonces la heredabilidad ser de 0,72 lo que indica un
mayor componente gentico para esta enfermedad.
Los estudios entre gemelos tienen una gran importancia para determinar
heredabilidad, porque los gemelos monocigticos tienen igual genoma y com-
parten igual ambiente intrauterino y los dicigticos con genomas diferentes, tam-
bin comparten el mismo ambiente intrauterino.
Herencia multifactorial 295
Modelo de predisposicin gentica

La incidencia poblacional de un defecto indica un umbral determinado por la


carga gentica de la poblacin en el extremo de la curva donde se encuentran
los individuos con mayor predisposicin genotpica para el rasgo o defecto en
estudio y que se expresa con el color azul en la figura 16.6.

N
CI
UC
OD
PR
RE
SU

Fig. 16.6. Modelo de carga gentica y de umbral. Observe que los individuos
emparentados con los individuos afectados comparten genotipos similares.
DA
BI

Al realizar la investigacin de la incidencia del defecto entre los familiares de


I

primer grado de los individuos afectados en la poblacin, la predisposicin gentica


OH

aumenta cuando hay mayor agregacin familiar y, por tanto, la incidencia ser
mucho mayor en este grupo de familiares que la observada en la poblacin
PR

general. O sea, la carga gentica es mayor y el umbral de incidencia tambin


como se aprecia en la curva en rojo de la figura 16.6.
Si la incidencia poblacional y familiar es parecida, la agregacin familiar es
de baja frecuencia y entonces la heredabilidad es baja y el papel preponderante
lo tiene el ambiente.
Si ocurre lo contrario significa que debe haber un componente gentico im-
portante y se puede suponer que el genotipo determinado por poligenes tiene
mayor similitud con el genotipo del afectado en sus familiares de primer grado.
Es decir, hay una elevada predisposicin gentica a factores ambientales espe-
cficos.
El estudio de la heredabilidad en gemelos es el mejor mtodo para conocer
con mayor precisin la participacin gentica del carcter en estudio.
296 Introduccin a la Gentica Mdica

Se basa, como ya se ha referido, en determinar el grado de concordancia


entre gemelos monocigticos y dicigticos. La concordancia entre gemelos
monocigticos debe ser alta si la participacin gentica es alta y baja si la parti-
cipacin en la ocurrencia del defecto es de manera predominante, ambiental.

Defectos congnitos de herencia multifactorial

Existen poligenes que actan en la morfognesis por efecto de los fenme-


nos epigenticos, tanto de forma monoallica como diallica y en casos de mu-
taciones de algunos de estos genes, el genotipo puede tener determinada
predisposicin gentica lo cual lo hace ms susceptible a efectos ambientales
maternos prenatales que pueden ser de tipo nutricional, como se conoce en los
defectos de cierre del tubo neural y las deficiencias de cido flico antes y

N
durante la gestacin.

CI
En estos casos la expresin consiste en defectos congnitos aislados con

UC
gradaciones variables en cuanto a gravedades estticas, funcionales o ambas
para el individuo, como se refiere en el captulo 17 y, en otros defectos como el
OD
ya referido ejemplo de las malformaciones de las hendiduras labiales y del
paladar.
PR
Otro de estos ejemplos de defectos con estas caractersticas son las malfor-
RE

maciones que ocurren por anormalidades o interferencias de los procesos


embrionarios involucrados en el cierre del tubo neural que pueden presentar una
SU

amplia gradacin en su expresin (desde encefaloceles y meningoceles hasta


acrneos).
DA

La probabilidad de recurrencia se basa en anlisis emprico y especfico para


BI

cada defecto y para cada poblacin, a diferencia del anlisis que se puede hacer
I

cuando se trata de la segregacin de mutaciones simples como ocurre en las


OH

herencias mendelianas.
En ocasiones aparecen en una familia varios individuos con similares defec-
PR

tos sin que se puedan determinar criterios para definir una herencia mendeliana.
Esto se debe a que en familias especficas cuando la heredabilidad es eleva-
da, hay mayor probabilidad de que varios miembros tengan genotipos parecidos
y sean ms susceptibles a las variaciones del ambiente.
La generalidad de los defectos congnitos con este tipo de herencia
multifactorial, presenta gradaciones de severidad en cada uno de estos que se
supone estn en correspondencia con el genotipo, de modo que los ms severos,
por ejemplo labio leporino doble con paladar hendido, tienen un genotipo ms
comprometido que los que presentan labio leporino unilateral.
Los padres de personas con estos defectos, en consecuencia, tienen mayor
probabilidad de tener otros hijos afectados, mientras ms severo es el defecto
en estudio, como se expone en el captulo 18.
Herencia multifactorial 297
Herencia multifactorial de enfermedades comunes

Las enfermedades comunes resultan difciles de estudiar, desde el punto de


vista de comprender cmo participan genes especficos en estas, la posible
heterogeneidad gentica que desarrollan, as como, las dificultades para preci-
sar el punto de partida desde el cual un fenotipo correspondiente a un genotipo
determinado puede ser reconocido como una enfermedad.
Se les denomina, dentro de esta etiologa gentica, enfermedades comple-
jas a aquellas como la epilepsia, la esquizofrenia, el asma bronquial, el cncer,
los defectos de atencin, por nombrar solo algunas, cuya alteracin gentica no
obedece a un defecto bsico simple y en las que estn implicados diversos
mecanismos determinados por varios genes.
Los avances en la fisiopatologa compleja de estas enfermedades y los me-

N
canismos involucrados son elementos que justifican esta denominacin. Los
avances en la gentica del cncer son un ejemplo de esto.

CI
La esperanza de vida ha ido variando en el humano a partir de los cuidados

UC
mdicos y cambios en el panorama de las enfermedades infectocontagiosas as
como en los factores nutricionales con apoyo, adems, de las medidas educati-
OD
vas y el incremento del nivel de instruccin, los medios de divulgacin masiva y
el acceso a estos.
PR
El crecimiento de la esperanza de vida es mayor en los pases desarrollados
RE

y ms lentamente, pero en ascenso, en pases en vas de desarrollo.


Nuevas enfermedades con compromiso gentico se pueden delinear a partir
SU

del adulto mayor de ms de 65 aos. Se espera que en el ao 2030, una de cada


cinco personas tenga ms de 65 aos. Tambin aumenta el nmero de personas
DA

mayores de 85 aos.
BI

En este tipo de poblacin hay un incremento de enfermedades comunes que


I

se caracterizan por su cronicidad. Alrededor de dos tercios de la mortalidad de


OH

la poblacin adulta es causada por enfermedades cardiovasculares, cncer o


padecen algn tipo de demencia o enfermedad bipolar.
PR

Ahora bien, el comienzo de la mayora de las enfermedades crnicas tiene


sus procesos patolgicos subyacentes en el nio, adolescente y el adulto joven.
Casi todos tienen un significativo componente familiar, el cual sugiere que la
distribucin de estas enfermedades no es al azar y que hay individuos con dife-
rentes niveles de riesgo de padecerlas.
No hay una definicin apropiada ni aceptada para esta denominacin. El
trmino comn se refiere a frecuencia y de forma arbitraria se tienen en cuenta
valores de un afectado por 1 000 individuos de la poblacin.
En algunos pases enfermedades determinadas por defectos genticos de la
hemoglobina podran ser catalogadas como tal.
Ejemplos de enfermedades comunes son:
Cardiovasculares.
298 Introduccin a la Gentica Mdica

Cncer.
Embolismo.
Enfermedades obstructivas crnicas.
Asma bronquial.
Enfisema pulmonar.
Diabetes.
Epilepsia.
Enfermedades bipolares.
Demencias.

Susceptibilidad gentica
La base gentica subyacente y poner a prueba constante el genoma frente a

N
las condiciones ambientales adversas desencadena la expresin del defecto

CI
gentico ya sea monognico o polignico, cuando exista un genotipo con predis-
posicin.

UC
El trmino empleado para referirse a este fenmeno es el de susceptibilidad
gentica.
OD
As existe susceptibilidad gentica incrementada para enfermedades
monognicas especficas, mutaciones del ADN mitocondrial y para defectos
PR
que involucran a poligenes.
RE

El componente gentico de una enfermedad comn del adulto est determi-


nado por la predisposicin genotpica y la susceptibilidad gentica individual. El
SU

desarrollo o no de la enfermedad depende de la interaccin del genoma en


cuestin, con factores ambientales como:
DA

Dieta.
Actividad que se realiza.
BI

Exposicin ambiental posnatal.


I

Exposicin a variaciones biolgicas azarosas, en algn grado, como ocurre


OH

en el sistema inmunolgico.
PR

Factores ambientales que pueden operar durante el desarrollo.

Entre enfermedad comn y enfermedad monognica no existe distincin ab-


soluta para estos fenmenos, pues estas ltimas tambin se pueden manifestar
solo al exponerse a un agente ambiental especfico, como se menciona en el
captulo 11 en relacin con la farmacogentica.
Los estudios gentico y molecular de estas enfermedades complejas mues-
tran, en muchas ocasiones, hallazgos de genotipos que a su vez definen el com-
portamiento de estos a las farmacoterapias especficas, que explican por qu
unos individuos con el mismo defecto fenotpico para algunas de estas enferme-
dades responden con diferentes grados de tolerancia a los efectos secundarios
de las drogas empleadas. A este campo actual de investigaciones en el Proyec-
to Genoma Humano se le conoce como farmacogenmica.
Herencia multifactorial 299
Riesgos de susceptibilidad gentica
Existen indicadores que se pueden considerar de riesgo de susceptibilidad
gentica para ciertas exposiciones ambientales como:
Personas heterocigticas. Por ejemplo, para alelos deficientes de la alfa 1
antitripsina y la enfermedad pulmonar obstructiva crnica que pueden desa-
rrollar heterocigticos para el alelo deficiente en condiciones de contamina-
cin ambiental por polvo, como ocurre en trabajos de extraccin de minerales
en minas.
Sntomas predictivos de susceptibilidad gentica basados en el anlisis de la
historia natural de la enfermedad. Por ejemplo, un sntoma aislado puede ser
indicador de susceptibilidad a una determinada situacin ambiental para un
individuo an sano y que forma parte de una familia especfica, en la que se

N
encuentran otras personas afectadas por la enfermedad en cuestin.
Susceptibilidad gentica en respuesta a determinada farmacoterapia.

CI
Susceptibilidad gentica por presentar un marcador polimrfico fuertemente

UC
asociado con la enfermedad.
Existen mecanismos de reduccin a la susceptibilidad, por ejemplo el
OD
heterocigtico para la hemoglobina S. Los heterocigticos presentan mani-
festaciones clnicas ms ligeras a la malaria, fenmeno descrito en el captulo
PR
15.
Polimorfismos para una mutacin simple (frecuencia mayor que 1 a 2 % de
RE

heterocigticos). Por ejemplo, la deficiencia de alcohol deshidrogenasa y su


SU

relacin con la resistencia al alcoholismo en los asiticos.


DA

Hay grupos de enfermedades comunes cuyas manifestaciones clnicas se


encuentran en enfermedades ocasionadas por simples mutaciones (monognicas).
BI

Por ejemplo, la arterioesclerosis asociada a hipercolesterolemia en individuos


I

con defectos del receptor a lipoprotenas de baja densidad (LDL) o el enfisema


OH

pulmonar en individuos deficientes para alelos de la alfa 1 antitripsina.


PR

La susceptibilidad para la mayora de las enfermedades comunes es mucho


ms compleja porque involucra a un nmero mayor de genes.
Anque los genotipos polignicos involucrados para un carcter determinado
sean deficientes en alguno de sus genes, crean respuestas en correspondencia
con su susceptibilidad diferencial y las enfermedades comunes suelen ser muy
heterogneas.
Se puede concluir que varios mecanismos diferentes llevan al mismo final
clnico.
Adems, no todo individuo susceptible desarrolla la enfermedad, lo que hasta
cierto punto demuestra y alienta sobre la eficiencia esperada de medidas pre-
ventivas especficas.
Al propio tiempo existen fenocopias causadas por agentes ambientales espe-
cficos, sin que se encuentren involucrados defectos genticos subyacentes.
300 Introduccin a la Gentica Mdica

Por lo expresado, se puede esperar que en una poblacin existan individuos: con
una susceptibilidad gentica aumentada o con una reduccin de la susceptibili-
dad gentica.
Tambin se puede esperar resistencia gentica, pero esta es ms difcil de
identificar, ya que no es posible por simple observacin, encontrar diferencias
genotpicas entre los individuos resistentes a una enfermedad especfica y un
individuo susceptible no enfermo.
Los ejemplos ms conocidos de resistencia son los heterocigticos para la
anemia a hemates falciformes, las talasemias alfa y beta y para la deficiencia
de G6PD (glucosa 6 fosfato deshidrogenasa) en relacin con la malaria.

Existencia de componente gentico en la expresin


de enfermedad comn

N
CI
El componente gentico de una enfermedad comn se puede sospechar por:
Agregacin familiar.

UC
Variacin de la frecuencia de la enfermedad en varios grupos tnicos.
OD
La frecuencia de lcera duodenal en familiares de individuos afectados es el
PR
doble que en controles no afectados, mucho ms alta en Escocia que en Am-
RE

rica del Sur.


Lo mismo ocurre para enfermedades como la diabetes, la arterioesclerosis,
SU

artritis reumatoide y cncer del colon.


Pero esto an no prueba el componente gentico de una enfermedad comn.
DA

La agregacin familiar puede resultar frecuente en miembros de una familia


BI

por probabilidad, cuando la frecuencia de la enfermedad es alta en una pobla-


I

cin con sus caractersticas socioculturales especficas.


OH

La frecuencia de una historia familiar positiva es una pregunta insegura.


Una historia familiar positiva muchas veces es ambigua cuntos afecta-
PR

dos?, qu por ciento representa?, adems, por qu el grado de parentesco no


se incluye?
A esto se agrega el sesgo que constituye el hecho de que el afectado conoce
su enfermedad pero no identifica sntomas en los familiares que reporta como
supuestamente sanos.
La agregacin familiar en parientes de primer grado del individuo afectado
se puede comparar con un grupo control o con la incidencia poblacional.
Por ejemplo, los familiares de primer grado de individuos diabticos
insulinodependientes tienen una frecuencia de 5 a 10 %, muy elevada al compa-
rarla con la frecuencia poblacional de 1 en 500.
Los patrones de migracin de grupos tnicos pueden sugerir que existe un
factor gentico involucrado.
Herencia multifactorial 301
Por ejemplo, la frecuencia de diabetes no insulino dependiente en judos
yemenitas es de 5 a 10 % en una generacin y disminuye en las generaciones
que migran a Israel. Por qu solo una fraccin de la poblacin manifiesta la
enfermedad?
Las diferencias clnicas de la enfermedad entre grupos tnicos son importan-
tes tambin, porque sugieren heterogeneidad gentica, mientras que las diferen-
cias en frecuencias y la semejanza en las manifestaciones clnicas, sugieren
participacin gentica, ambiental o ambas.
El conocimiento del componente gentico de una enfermedad comn se apo-
ya en:
El estudio de modelos en animales. Si existe una enfermedad anloga a la del
humano en animales se puede experimentar haciendo cruzamientos. Si el
componente gentico es inequvoco, se har la pregunta de si ser equivalen-

N
te en el humano y se plantean nuevas exploraciones.
La ocurrencia de sndromes genticos con implicaciones de la enfermedad

CI
en estudio, pueden reflejar la existencia de factores genticos para la enfer-

UC
medad, por ejemplo, la poliposis del colon, el sndrome caracterizado por dia-
betes inspida, diabetes insulino dependiente y atrofia ptica. El gen de la
OD
poliposis del colon se ha localizado en el cromosoma 5 y esta informacin se
puede utilizar para investigar el papel gentico del cncer comn del colon.
PR
Estudios en gemelos permiten conocer la tasa de concordancia de enferme-
RE

dades en uno o en ambos miembros de gemelos mono o dicigticos. Una alta


concordancia entre gemelos Mz en relacin con gemelos Dz indica factor
SU

gentico; igual tasa de concordancia indica mayor efecto ambiental. Algunas


veces es difcil distinguir herencia o ambiente entre Mz, ya que su genotipo
DA

idntico hace que seleccionen idnticos ambientes, un ejemplo de esto se


BI

relaciona con enfermedades como la cardiopata isqumica, la lcera pptica,


I

enfermedad celiaca, diabetes y esquizofrenia. En estas enfermedades, la tasa


OH

de concordancia es ms alta en gemelos Mz que en Dz. Raramente la tasa


de concordancia entre Mz es de 100 % y esto evidencia que existe compo-
PR

nente ambiental de la enfermedad. En estos casos el anlisis de incidencia


entre diversos grupos tnicos sirve para inferir el componente gentico y
ambiental.
El control entre esposos permite investigar el componente ambiental en el
adulto pero no en la infancia. Es importante la comparacin entre los esposos
y los familiares de primer grado de estos.
Estudios de adopcin. En este caso el adoptado no comparte el genoma de la
familia pero s el ambiente. Hay que tener en cuenta que las adopciones
muchas veces se realizan por similitud fenotpica no solo entre nios de la
familia, sino tambin entre sus padres adoptivos.
Genes marcadores. Un estudio de la enfermedad en relacin con genes mar-
cadores conocidos como ocurre con los haplotipos de HLA, grupos sangu-
302 Introduccin a la Gentica Mdica

neos, polimorfismos de ADN, pueden demostrar: asociacin en estudios


poblacionales o ligamiento en estudios familiares. En el primer caso la com-
paracin entre poblacin afectada y poblacin sana, en el segundo caso, se
requiere la presencia de dos o ms individuos afectados en la familia. Ejem-
plos de asociaciones son el grupo sanguneo A y la lcera gstrica, el grupo
sanguneo O y la lcera pptica; la asociacin de HLA-B27 con la espondilitis
anquilosante, con un riesgo relativo de 100 %, la asociacin entre bases
genticas y mecanismos inmunolgicos.

Mtodos para demostrar heterogeneidad gentica


en la herencia multifactorial

N
Las observaciones en estudios epidemiolgicos en relacin con las diferen-
cias en los sntomas de la misma enfermedad comn en diferentes grupos tnicos,

CI
diferencias fisiolgicas, marcadores subclnicos familiares indican gran hetero-

UC
geneidad gentica que se puede explicar por tratarse de varios genes con simi-
lar efecto aditivo o por el efecto de diversos tipos de mutaciones que involucran
OD
a uno o varios genes mayores en un grupo de poligenes especficos.
Lo hasta aqu expuesto justifica que para el anlisis de una herencia
PR
multifactorial de un defecto especfico de los relacionados en este captulo, es
RE

necesario tener en cuenta en el diseo experimental los aspectos comunes a


todo rasgo multifactorial que aparecen en el cuadro 16.1, definiciones acerca de
SU

las caractersticas clnicas que deben tener los individuos afectados. Por ejem-
plo si se quiere estudiar la heredabilidad de la hipertensin arterial hay que
DA

hacer un examen clnico familiar e individual que permita identificar solo a los
BI

casos que presenten hipertensin arterial esencial y excluir del estudio a los
I

individuos y familias que presenten hipertensin arterial, por una


OH

hipercolesterolemia familiar, la cual es propia de deficiencia gentica de recep-


tores LDL (LDLR) (ver captulo 11).
PR

Se debe conocer el espectro de sntomas que se observan en la enfermedad


y cules de estos se tendrn en cuenta para definir si un familiar de primer
grado est afectado o no.

Caractersticas comunes en los que se sospecha


herencia multifactorial

Es preciso resumir los aspectos que se deben tener en cuenta en el anlisis


de la herencia multifactorial y que se relacionan a continuacin:
Anque la enfermedad o el defecto congnito tienen evidencia de herencia
familiar no es posible distinguir un patrn mendeliano de esta.
Herencia multifactorial 303
La presencia de familiares de primer grado afectados se debe a la predispo-
sicin gentica, o sea, a la probabilidad de que sus genotipos sean ms pare-
cidos.
La probabilidad de afectados entre familiares de segundo y tercer grados es
menor porque ya sus genotipos no son tan parecidos.
La probabilidad de nuevos individuos afectados en la familia es mayor mien-
tras ms personas afectadas hay en esta, lo cual se explica por el parecido de
sus genotipos o predisposicin gentica.
La consanguinidad es un fenmeno que conduce a una mayor probabilidad
de hermanos con genotipos polignicos similares y, por tanto, con mayor pre-
disposicin a presentar el mismo defecto congnito o enfermedad compleja
del adulto. Por ejemplo, retraso mental, esquizofrenia, enfermedad coronaria,
labio leporino, cardiopatas congnitas.

N
Entre gemelos monocigticos y dicigticos no hay la misma concordancia
para los defectos congnitos, siendo esta mayor en los Mz, ya que tienen

CI
igual genotipo y comparten iguales factores ambientales en el claustro ma-

UC
terno.

OD
De igual forma ocurre cuando ambos comparten el mismo ambiente posnatal.
Para proponer un modelo multifactorial a una enfermedad que sugiere un
PR
componente gentico subyacente se debe tener en cuenta:
Que hay un nmero variable pero no ilimitado de loci involucrados en la
RE

expresin del rasgo.


SU

Los alelos de los loci involucrados actan de forma aditiva por lo que cada
uno adiciona o sustrae una pequea cantidad al fenotipo.
DA

La interaccin ambiental con el genotipo es responsable del fenotipo final.


BI
I

Se debe recordar que la determinacin del componente gentico de un rasgo


OH

multifactorial se basa en:


Agregacin familiar.
PR

Anlisis de segregacin.
Anlisis de ligamiento.
Anlisis de asociacin.
304 Introduccin a la Gentica Mdica
Cuadro 16.1. Aspectos que se deben tener en cuenta para investigaciones sobre el compo-
nente gentico de una enfermedad que por su frecuencia se considere enfermedad comn

Para proponer un modelo multifactorial a una enfermedad que sugiere un componente gentico
subyacente se debe tener en cuenta:
- Que hay un nmero variable pero no ilimitado de loci involucrados en la expresin del
rasgo.
- Los alelos de los loci involucrados actan de forma aditiva por lo que cada uno adiciona o
sustrae una pequea cantidad al fenotipo.
- La interaccin ambiental con el genotipo es responsable del fenotipo final.

Recordar que la determinacin del componente gentico de un rasgo multifactorial se basa en:
- Agregacin familiar.
- Anlisis de segregacin.
- Anlisis de ligamiento.
- Anlisis de asociacin.

N
CI
Resumen

UC
Los rasgos cuantitativos corresponden en general con la accin aditiva de
OD
varios loci pero no de un nmero ilimitado de estos en el efecto final del fenotipo.
PR
Cuando se pueden medir es posible crear una hiptesis acerca de sus posibles
genotipos.
RE

Para su estudio es imprescindible la realizacin de investigaciones poblacionales


donde se midan uno a uno estos caracteres de los individuos como: la talla, la
SU

circunferencia ceflica o el coeficiente de inteligencia por solo mencionar algu-


nos de estos.
DA

Los defectos congnitos de etiologa gentica son el resultado de un efecto


BI

umbral y se presentan abruptamente como los rasgos discontinuos.Sin embar-


I

go, cada da hay ms evidencias de la relacin aditiva que existe entre los genes
OH

que actan durante el desarrollo y el efecto que factores ambientales, preferen-


temente, de tipo nutricional ejercen sobre la expresin de estos genes. Un indi-
PR

viduo por su genotipo puede tener una mayor o menor predisposicin gentica
para una malformacin especfica, pero si el efecto ambiental no incide en el
proceso de desarrollo en el cual estn involucrados esos genes, no aparecer el
defecto.
Una evidencia de que las malformaciones son rasgos continuos lo constitu-
yen las gradaciones de severidad que se observan en estos y que de forma
emprica se utilizan para determinar el rango de probabilidad de repeticin en la
familia.
Una pareja que ha tenido un hijo con labio leporino unilateral aislado solo en
las estructuras labiales tiene menor probabilidad de tener otro hijo afectado en
comparacin con una pareja con un hijo que presenta como defecto malformativo
nico labio leporino doble y que adems tiene paladar hendido.
Herencia multifactorial 305
Otras enfermedades genticas estudiadas en este captulo se relacionan con
las enfermedades comunes por su frecuencia: unas son caractersticas del adul-
to y cuyas frecuencias se han incrementado con la prolongacin de la vida y
otras son enfermedades tambin comunes en nios y adolescentes como: autismo,
epilepsia y otros trastornos cognitivos del sistema nervioso central.
El clculo de la heredabilidad es un instrumento de utilidad para los genetistas
e investigadores del tema, ya que permite identificar la magnitud del papel gentico
o ambiental en la expresin del carcter que se estudia y puede ser una gua
valiosa para identificar no solo la accin de genes especficos sino tambin para
lograr la prevencin y cambiar los factores ambientales como fenmenos de
riesgo de aparicin de la enfermedad en cuestin.
Si la tasa en gemelos Mz (CMz) fuera de 0,95 y CDz de 0,87 entonces la
heredabilidad sera solo de 0,16.

N
Poder esclarecer la gentica de la herencia multifactorial por medio del estu-
dio poblacional de enfermedades de este tipo es uno de los objetivos actuales

CI
del Proyecto Genoma Humano.

UC
Bibliografa
OD
PR
Adrian, M., R.D. Owen (1974): Gentica General. Edgar R.S., 3ra. ed. Barcelona: Ediciones
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RE

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Strachan, T., A.P. Read (2006): Gentica Humana 3ra. ed Mc Graw Hill. Mexico.
I
OH
PR
306 Introduccin a la Gentica Mdica

Captulo 17
DEFECTOS CONGNITOS
DE ORIGEN GENTICO
Y AMBIENTAL

N
CI
Araceli Lantigua Cruz

UC
Se describe como un defecto congnito toda aquella anormalidad de estruc-
OD
tura anatmica visible al examen clnico del recin nacido o posterior al naci-
PR
miento, cuando se hace patente el defecto funcional de un rgano interno
afectado anatmicamente, por ejemplo, cardiopatas, defectos renales o del sis-
RE

tema excretor, defectos de las vas biliares, de las vas digestivas, etc.
Estos defectos pueden ocurrir de forma aislada o como defectos congnitos
SU

mltiples y la mayora de las veces sus factores causales son interpretados


DA

como enfermedades genticas o taras familiares.


Los padres de un beb que nace con algn defecto congnito, generalmente,
BI

se preguntan: por qu a mi, si en la familia no hay estos antecedentes?


I

O cuando el defecto realmente es de origen hereditario y el neonatlogo los


OH

enva a la consulta de gentica, afirman casi con alegra ...es la marca de la


PR

familia, sobre todo si el defecto procede de la va paterna y en estos casos le


restan importancia al asunto, ya que se conoce en la familia la historia natural
del defecto y tienen experiencia de cmo asumir por su cuenta el defecto, o si
tienen mayor severidad exigen la atencin temprana, que ya conocen, resulta
ms efectiva para tratar el problema de su hijo lo ms adecuadamente posible.
Por otra parte, como se analiz en el captulo 1, los defectos congnitos
tambin aparecen por la accin de agentes ambientales a los que se expone la
embarazada y que interfieren en el desarrollo normal del embrin.
En esta introduccin se pueden mencionar dos conclusiones que son:
No todos los defectos congnitos tienen una causa gentica.
No todas las enfermedades genticas presentan defectos congnitos.
Defectos congnitos de origen gentico y ambiental 307
En este captulo se abordan los factores etiolgicos que determinan la pre-
sencia de los defectos congnitos y se espera que el lector aclare sus dudas en
relacin con este tema.

Tipos de defectos congnitos


Teniendo en cuenta que las anomalas congnitas pueden ocurrir por un fac-
tor causal que puede ser gentico o ambiental, es preciso utilizar el trmino
defecto al referirse a estas mientras no se tenga conocimiento de la causa que
las pudo originar.
Los defectos congnitos por su magnitud se distinguen como mayores y
menores. Los primeros, relativos a los defectos que tienen un compromiso fun-
cional importante para la vida del individuo tienen consecuencias mdicas, est-

N
ticas, requieren de atencin temprana, algunas veces de urgencia y por tanto

CI
tienen tambin repercusin social. Tienen una frecuencia de 2 a 3 % de los
recin nacidos (Fig. 17.1).

UC
OD
PR
RE
SU
DA

Fig. 17. 1. a) Defecto congnito mayor, malformacin del tubo neural. b) Defecto cong-
BI

nito menor, polidactilia posaxial tipo B. c) Signo dismrfico, orejas de implantacin baja
I

y con rotacin posterior.


OH
PR

Los denominados defectos menores son defectos estructurales de relativa


frecuencia que denotan un crecimiento desproporcionado de una parte anat-
mica que, generalmente, no tienen un significado relevante en la atencin mdi-
ca y que tampoco tienen un significado social especial, aunque en ocasiones
sugieren un defecto mayor subyacente que debe alertar al especialista. Son
defectos que tienen un significado predictivo sobre el origen prenatal de un
estado patolgico especfico, como por ejemplo el retraso mental.
Estas anomalas menores se superponen con pequeas anormalidades des-
critas como signos dismrficos y se presentan con una frecuencia aproximada
de 15 %.
Tambin se ha observado que en recin nacidos con ausencia de signos
dismrficos, la frecuencia de defectos congnitos mayores es menor que 1 %,
308 Introduccin a la Gentica Mdica

mientras que cuando hay un solo signo dismrfico, la probabilidad de un defecto


mayor es de 3 %.
Cuando hay dos defectos menores el riesgo de que se presente un defecto
mayor es 10 % y cuando hay tres defectos menores o ms la frecuencia de un
defecto mayor se eleva a 20 %, por lo cual el examen y la deteccin de defectos
menores o signos dismrficos es importante para el diagnstico o deteccin de
defectos mayores estructurales o funcionales, sobre todo, de rganos internos
que no pueden ser detectados fcilmente por la simple observacin.

Defectos congnitos y morfognesis


Los defectos congnitos, en sentido general, ocurren durante la morfognesis
en el periodo embrionario, desde la tercera hasta la octava semana, con prolon-

N
gacin hasta la semana doce del desarrollo, ya que hay estructuras como el

CI
cerebro, los